ES2541309T3

ES2541309T3 - Productos farmacéuticos peptídicos orales de acción rápida

Info

Publication number: ES2541309T3
Application number: ES06839273.7T
Authority: ES
Inventors: William Stern
Original assignee: Enteris Biopharma Inc
Current assignee: Enteris Biopharma Inc
Priority date: 2005-12-09
Filing date: 2006-12-08
Publication date: 2015-07-17
Anticipated expiration: 2026-12-08
Also published as: CA2631841C; US20070134279A1; CA2631841A1; CN101394841B; DK1957054T3; EP1957054A2; JP2009518437A; US8093207B2; AU2006326580B2; WO2007070450A2; EP1957054A4; WO2007070450A3; AU2006326580A1; CN101394841A; EP1957054B1

Abstract

Un producto farmacéutico acabado adaptado para liberación oral de un agente peptídico fisiológicamente activo, comprendiendo dicho producto: (a) una cantidad terapéuticamente eficaz de dicho péptido activo seleccionado del grupo que consiste en calcitoninas, hormonas paratiroideas, H-tirosina-D-Arginina-fenilalanina-lisina-NH2 y sus derivados, insulina y vasopresina; (b) al menos un agente reductor del pH farmacéuticamente aceptable seleccionado del grupo que consiste en ácido cítrico, ácido tartárico y una sal ácida de un aminoácido; y (c) al menos un potenciador de la absorción seleccionado del grupo que consiste en acilcarnitinas, en el que el agente reductor del pH está presente en dicho producto farmacéutico acabado en una cantidad que, si dicho producto se añadiera a 10 mililitros de una solución de bicarbonato sódico acuoso 0,1M, sería suficiente para disminuir el pH de dicha solución a no más de 5,5, y en el que una superficie externa de dicho producto carece de un vehículo protector resistente a ácido, a condición de que dicho producto no comprenda una mezcla que consiste en ácido cítrico, lauroilcarnitina, talco, calcitonina de salmón y H-2,6-dimetiltirosina-D-arginina-fenilalanina-lisina-NH2 ("Dmt-DALDA").

Description

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El agente reductor del pH que alcanza el nivel de pH requerido no superior a 5,5 en la prueba de bicarbonato sódico tratada anteriormente es un ácido seleccionado del grupo que consiste en ácido cítrico, ácido tartárico y una sal de ácido de un aminoácido.

Cuando el agente peptídico activo es calcitonina de salmón, determinadas proporciones entre el agente reductor del pH y la calcitonina de salmón han demostrado ser especialmente eficaces. Se prefiere que la proporción en peso del agente reductor del pH y la calcitonina de salmón supere 200:1, preferentemente 800:1 y lo más preferentemente 2000:1.

El potenciador de la absorción

Los potenciadores de la absorción están preferentes, preferentemente, en una cantidad que constituye de 0,1 a 20,0 por ciento en peso, respecto al peso global de la composición farmacéutica. Los potenciadores de la absorción preferidos son agentes de superficie activa que actúan tanto como potenciadores de la solubilidad como potenciadores de la captación. En términos generales, los "potenciadores de la solubilidad" mejoran la capacidad de los componentes de la invención para solubilizarse en el ambiente acuoso en el que se liberan inicialmente o en, por ejemplo, el ambiente lipofílico de la capa mucosa que reviste las paredes intestinales, o en ambos. Los "potenciadores del transporte (captación)" (que con frecuencia son los mismos agentes de superficie activa usados como potenciadores de la solubilidad) son aquellos que facilitan la facilidad con la cual los agentes peptídicos atraviesan la pared intestinal.

Uno o más potenciadores de la absorción pueden realizar una función solo (por ejemplo, solubilidad) o uno o más potenciadores de la absorción pueden realizar la otra función solo (por ejemplo, captación), dentro del alcance de la invención. También es posible tener una mezccla de varios compuestos, algunos de los cuales proporcionan una solubilidad mejorada, algunos de los cuales proporcionan una captación mejorada y/o algunos de los cuales hacen ambas cosas. Sin desear quedar ligado a teoría alguna, se cree que los potenciadores de la captación pueden actuar (1) aumentando el trastorno de la región hidrofóbica del exterior de la membrana de las células, lo que permite un aumento del transporte transcelular o (2) extrayendo las proteínas de la membrana, lo que produce un incremento del transporte transcelular; o (3) ampliando el radio del poro entre las células para un incremento del transporte paracelular.

Se cree que los agentes de superficie activa son útiles tanto como potenciadores de la solubilidad como como potenciadores de la captación. Por ejemplo, los detergentes son útiles en (1) la solubilización de todos los componentes activos rápidamente en el ambiente acuoso en el que se liberan inicialmente (2) la potenciación de la lipofilicidad, especialmente el agente peptídico activo, que ayuda a su paso al interior y a través del moco intestinal,

(3) la potenciación de la capacidad del agente peptídico activo normalmente polar para atravesar la barrera epitelial de la membrana del borde en cepillo; y (4) el aumento del transporte transcelular o paracelular como se ha descrito anteriormente.

Cuando los agentes de superficie activa se usan como potenciadores de la absorción, se prefiere que sean polvos de flujo libre para facilitar la mezcla y la carga de cápsulas durante el proceso de fabricación. Debido a las características inherentes de la calcitonina de salmón y otros péptidos (por ejemplo, su punto isoeléctrico, peso molecular, composición de aminoácidos etc.), determinados agentes de superficie activa interaccionan mejor con determinados péptidos. De hecho, algunos pueden interaccionar de forma indeseable con las porciones cargadas de la calcitonina de salmón y prevenir su absorción, de modo que se produce una disminución de la biodisponibilidad. Al intentar aumentar la biodisponibilidad de la calcitonina de salmón u otros péptidos que el agente de superficie activa usado como potenciador de la absorción se selecciona del grupo que consiste en carnitinas.

Una combinación especialmente preferida que ha funcionado bien con la calcitonina de salmón mezcla agentes de superficie activa catiónicos con agentes de superficie activa aniónicos que son derivados de colesterol, ambos solubles a pH ácido.

Una combinación particularmente preferida es un ácido biliar soluble en ácido junto con un agentes de superficie activa catiónico. Una acilcarnitina y éster de sacarosa es una buena combinación. Cuando un potenciador de la absorción concreto se usa solo, se prefiere que sea un agentes de superficie activa catiónico. Las acilcarnitinas (por ejemplo, lauroilcarnitina), fosfolípidos y ácidos biliares son potenciadores de la absorción particularmente buenos, especialmente la acilcarnitina. Los tensioactivos aniónicos que son derivados de colesterol también se usan en algunas realizaciones. Es intención de estas preferencias evitar las interacciones con el agente peptídico que interfieran con la absorción del agente peptídico en la sangre.

Para reducir la probabilidad de efectos secundarios, los detergentes preferidos, cuando se usan como potenciadores de la absorción de la invención, son biodegradables o reabsorbibles (por ejemplo, compuestos biológicamente reciclables, tales como ácidos biliares, fosfolípidos y/o acilcarnitinas), preferentemente biodegradables. Se cree que las acilcarnitinas son particularmente útiles en la potenciación del transporte paracelular. Cuando un ácido biliar (u otro detergente aniónico que carece de hidrocarburos lineales) se usa en combinación con un detergente catiónico, la calcitonina de salmón se transporta mejor a y a través de la pared intestinal.

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opcionalmente, se dimensiona en un molino de cualquier forma bien conocida para los expertos en la materia. Adicionalmente, la granulación se puede combinar con deslizantes y lubricantes tales como talco y estearato de magnesio, tal como se ha descrito anteriormente, para mejorar más la compresibilidad y la fluidez de la granulación, de modo que se forma el material de la primera capa.

El material de la segunda capa se forma combinando un péptido y al menos un potenciador de la absorción (es decir un tensioactivo). La segunda capa también se puede fabricar en un lecho fluido. Dado que el péptido exhibe una actividad biológica relativamente alta en cantidades pequeñas, la segunda capa se produce pulverizando el péptido y un agente de unión, tal como povidona, sobre un tensioactivo o una mezcla de al menos un excipiente y el tensioactivo. Como se ha descrito anteriormente, el tensioactivo normalmente es una acilcarnitina, prefiriéndose en la presente invención la lauroil-1-carnitina. El excipiente opcional normalmente comprende una cantidad de una carga, tal como celulosa microcristalina, suficiente para proporcionar una adherencia adecuada entre las capas, como entiende un experto en la técnica. A continuación, la granulación resultante se seca y, opcionalmente, se dimensiona en un molino de cualquier forma bien conocida para los expertos en la materia. Por último, la granulación se transfiere opcionalmente a un mezclador en el que la granulación se mezcla opcionalmente con un disgregante tal como croscarmelosa sódica o uno o más de otros disgregantes adecuados en cantidades de hasta aproximadamente 10,0 % del peso de la granulación, prefiriéndose aproximadamente 2,0 % en peso. Aunque opcionales, se prefieren los disgregantes porque se cree que potencian la biodisponibilidad del péptido facilitando una liberación más completa del péptido casi al mismo tiempo que la liberación del agente reductor del pH.

También se pueden añadir otros lubricantes y aditivos, tales como estearato de magnesio y ácido esteárico, así como otros excipientes tales como dióxido de silicio coloidal y povidona para mejorar las propiedades del material de la segunda capa de un modo conocido en la materia.

Después, en una prensa de compresión de dos capas estándar se introduce una porción del material de la primera capa y se carga en un troquel o un molde. Después, el material de la primera capa se comprime parcialmente para crear una primera capa. La compresión parcial normalmente es necesaria para prevenir la mezcla sustancial entre el material de la primera capa y el material de la segunda capa cuando el material de la segunda capa se añade al troquel. Después de la compresión parcial del material de la primera capa, el material de la segunda capa se añade después al troquel que contiene la primera capa. Los materiales de la primera y la segunda capa se comprimen después juntos para formar un comprimido que tiene dos capas.

Normalmente, el material de la primera capa constituye aproximadamente del 50 % al 90 % del peso total del comprimido final. Preferentemente, el material de la primera capa constituye aproximadamente el 70 % del peso total del comprimido. Normalmente, el material de la segunda capa constituye aproximadamente del 50 % al 10 % del peso total del comprimido final. Preferentemente, el material de la segunda capa constituye aproximadamente el 30 % del peso total del comprimido final.

Dado que el material de la primera capa se había comprimido parcialmente antes en una capa, se evita el mezclado sustancial del material de la segunda capa con el material de la primera capa. La estructura de dos capas de la presente invención impide sustancialmente el contacto entre el agente reductor del pH y el péptido y el tensioactivo. Específicamente, en la interfaz entre las dos capas, normalmente menos del 0,1 % del péptido contacta con el agente reductor del pH.

En una realización alternativa, el producto farmacéutico acabado de la invención (por ejemplo, calcitonina de salmón) puede incluir una cápsula de gelatina de tamaño 00 cargada con 0,25 mg de péptido, 400 mg de ácido cítrico granular (disponible, por ejemplo en Archer Daniels Midland Corp.); 50 mg de ácido taurodesoxicólico (disponible, por ejemplo, en SIGMA) y 50 mg de lauroilcarnitina (SIGMA). Todos los ingredientes se adaptan, preferentemente, para la inserción eventual en la cápsula de gelatina y son, preferentemente, polvos que se pueden añadir a un mezclador en cualquier orden. Después, el mezclador se acciona durante aproximadamente 5 minutos hasta que los polvos se mezclan completamente. Después, los polvos mezclados se cargan en un extremo grande de las cápsulas de gelatina. El otro extremo de la cápsula se añade después y las cápsulas se cierran instantáneamente.

Dada la biodisponibilidad potenciada proporcionada por la presente invención, la concentración del agente peptídico activo relativamente caro (por ejemplo, "calcitonina de salmón, PTH, vasopresina, DALDA, DMT-DALDA, insulina, etc.) en la preparación farmacéutica de la invención se puede mantener relativamente baja. Ejemplos de formulación específicos se exponen en los ejemplos que se proporcionan a continuación.

Tratamiento de pacientes

Cuando se elige calcitonina de salmón como ingrediente activo para el tratamiento de la osteoporosis, se recomienda la administración periódica. La calcitonina de salmón se metaboliza rápidamente con una semivida de únicamente 20-40 minutos tras la administración subcutánea en un hombre. No obstante, su efecto beneficioso sobre los osteoclastos es mucho más duradero y puede durar hasta más de 24 horas, a pesar de la rápida disminución en los niveles sanguíneos. Normalmente no hay niveles detectables en sangre más de dos horas después de la inyección de la calcitonina de salmón a dosis convencionales. De acuerdo con lo anterior, se prefiere

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la administración periódica de una dosis aproximadamente 5 días a la semana. La administración subcutánea de calcitonina de salmón (100 unidades internacionales) con frecuencia ha dado lugar a una concentración máxima en suero de aproximadamente 250 picogramos por mililitro. Se ha demostrado que la calcitonina de salmón administrada por vía nasal (200 unidades internacionales) es eficaz contra la osteoporosis a niveles máximos tan bajos como de 10 picogramos por mililitro. Algunos pacientes han notificado algunas molestias gastrointestinales a niveles máximos altos (por ejemplo, a o por encima de 200 picogramos por mililitro). De acuerdo con lo anterior, se prefiere que la calcitonina de salmón alcance un pico sérico entre 10 y 150 picogramos por mililitro, más preferentemente entre 10 y 50 picogramos por mililitro. Los niveles en suero pueden medirse mediante técnicas de radioinmunoensayo conocidas en la materia. El médico responsable puede vigilar la respuesta del paciente, los niveles en sangre de calcitonina de salmón o los marcadores sustitutos de enfermedad ósea (tales como piridinolina

o desoxipiridinolina), especialmente durante la fase inicial del tratamiento (1-6 meses). Después, podrá alterar la dosis algo para contar con el metabolismo individual de cada paciente y la respuesta.

La biodisponibilidad que se puede conseguir de acuerdo con la presente invención permite la liberación oral de calcitonina de salmón en la sangre a la concentración preferida identificada anteriormente, usando solo 300-3.000 microgramos de calcitonina de salmón por cápsula, preferentemente 300-1.200 microgramos, especialmente entre 300 y 600 microgramos.

Se prefiere usar un solo comprimido o cápsula en cada administración porque una sola dosis del producto proporciona mejor la liberación simultánea del polipéptido, el agente reductor del pH y los potenciador de la absorción. Esto es altamente deseable porque el ácido es mejor capaz de reducir el ataque proteolítico indeseable sobre el polipéptido cuando el ácido se libera en una proximidad estrecha de tiempo para liberar el polipéptido. Por tanto, la liberación casi simultánea se consigue mejor administrando todos los componentes de la invención como un solo comprimido o cápsula. No obstante, la invención también incluye, por ejemplo, dividir la cantidad requerida de ácido y potenciadores entre dos o más comprimidos o cápsulas que se pueden administrar juntos de forma que proporcionan juntos la cantidad necesaria de todos los ingredientes. La expresión "composición farmacéutica", como se usa en el presente documento, incluye una dosificación completa adecuada para una administración concreta a un paciente humano, con independencia de cómo se subdivide siempre que sea para la administración sustancialmente simultánea.

A continuación, se expone una serie de tablas que muestran el efecto sobre la biodisponibilidad causado variando determinados parámetros. Excepto en lo que respecta a los estudios humanos notificados en el presente documento, las cantidades de los ingredientes se pueden modificar con respecto a las reivindicadas en el presente documento para justificar las diferencias entre seres humanos y los animales usados en los modelos animales.

Tabla 1

Efecto del pH tampón sobre la absorción de calcitonina de salmón en el duodeno de rata

Formulación: pH* Calcitonina máxima en plasma ng/ml Biodisponibilidad absoluta en porcentaje

I. Citrato/ácido cítrico (77 mg) Calcitonina (0,1 mg): 5 0,4 0,02

II. Citrato/ácido cítrico (77 mg) Calcitonina (0,1 mg): 4 1,9 0,10

III. Citrato/ácido cítrico (77 mg) Calcitonina (0,1 mg): 3 4,1 0,64

IV. Citrato/ácido cítrico (77 mg) Calcitonina (0,1 mg): 2 4,8 0,69

*pH tampón

Procedimiento:

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Se anestesió a ratas Wistar hembra (250-275 g) (n=3 para cada formulación) con ketamina y xilazina antes de la inserción de una cánula en la arteria carótida. La cánula estaba provista de una válvula de tres vías a través de la cual se obtuvieron las muestras de sangre y se sustituyó por solución salina fisiológica. Se realizó una incisión central en la cavidad abdominal y se inyectaron 0,5 ml de la formulación directamente en el duodeno expuesto. El pH 5 de la formulación se ajustó mezclando cantidades variables de concentraciones molares iguales de ácido cítrico y citrato sódico. Se obtuvo sangre (0,5 ml) antes y a 5, 15, 30, 60 y 120 minutos después de la administración de la formulación. Las muestras de sangre se centrifugaron durante 10 minutos a 2.600 g y el sobrenadante de plasma resultante se almacenó a -20 ºC. La concentración de calcitonina en plasma se determinó mediante un radioinmunoensayo competitivo. La biodisponibilidad absoluta (es decir, respecto a una dosis intravenosa de

10 calcitonina) se calculó a partir de las áreas bajo la curva obtenidas de los gráficos de la concentración plasmática de calcitonina en función del tiempo.

Resultados y discusión:

Cuando el pH del tampón se redujo de 5 (formulación I) a 4 (formulación II), la biodisponibilidad absoluta aumentó 5 veces de 0,02 % a 0,1 %. Cuando el pH se redujo a 3 (formulación III), la biodisponibilidad absoluta aumentó 6,4 15 veces más. Se produjo muy poco incremento en la biodisponibilidad de calcitonina cuando el pH se redujo a 2. La biodisponibilidad global de la calcitonina aumentó 32 veces cuando el pH del tampón se redujo de 5 a 3.

Tabla 2

Efecto de la concentración de ácido cítrico sobre la biodisponibilidad de la calcitonina de salmón en el duodeno de rata

Formulación: Calcitonina máxima en plasma ng/ml Biodisponibilidad absoluta en porcentaje

I. Ácido cítrico (9,6 mg) Ácido taurodesoxicólico (5 mg) Manitol (22 mg) Calcitonina (0,1 mg): 3,65 0,25

II. I. Ácido cítrico (48 mg) Ácido taurodesoxicólico (5 mg) Manitol (22mg) Calcitonina (0,1mg): 17,44 2,43

Procedimiento:

Formulaciones que consisten en una cantidad constante de ácido taurodesoxicólico y 2 cantidades diferentes de

20 ácido cítrico en un volumen total de 0,5 ml se administraron en los duodenos de ratas anestesiadas como se describe en la leyenda de la Tabla 1. En las formulaciones se incluyó manitol como marcador para medir el transporte paracelular. Se extrajeron muestras de sangre a varios tiempos y se analizaron para determinar la calcitonina como se ha descrito anteriormente.

Resultados y discusión:

25 La biodisponibilidad de la calcitonina de salmón administrada en presencia de 9,6 mg de ácido cítrico (I) fue del 0,25 %, mientras que en presencia de 48 mg de ácido cítrico (II) la biodisponibilidad fue de 2,43 %. En presencia de una cantidad fija de ácido taurodesoxicólico, la biodisponibilidad de la calcitonina de salmón aumentó casi 19 veces cuando la cantidad de ácido cítrico en la formulación solo se incrementó 5 veces.

Tabla 3

Efecto de los potenciadores en presencia de ácido cítrico sobre la absorción de calcitonina de salmón en el duodeno de rata

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I. Ácido cítrico (77 mg) Calcitonina (0,1 mg): 4,8 0,69

II. I. Ácido cítrico (48 mg) Ácido taurodesoxicólico (5 mg) Calcitonina (0,1 mg): 26,59 3,03

III. I. Ácido cítrico (48 mg) Ácido taurodesoxicólico (5 mg) Cloruro de cetilpiridinio (5 mg) Calcitonina (0,1 mg): 36,48 4,54

IV. I. Ácido cítrico (48 mg) Tween-20 (5 mg) Calcitonina (0,1 mg): 15,50 3,10

V. Ácido cítrico (48 mg) Éster de sacarosa-15 (5 mg) Manitol (22 mg) Calcitonina (0,1 mg): 38,93 5,83

VI. Ácido cítrico (48 mg) Cloruro de lauroilcarnitina (5 mg) Calcitonina (0,1 mg): 38,89 4,53

VII. Ácido cítrico (48 mg) Diheptanoilfosfatidilcolina (5 mg) Calcitonina (0,1 mg): 20,93 2,97

Procedimiento:

Formulaciones que consisten en ácido cítrico, calcitonina y varias clases de potenciadores en un volumen total de 0,5 ml se administraron en los duodenos de ratas anestesiadas como se describe en la leyenda de la Tabla 1. En la 5 formulación V se incluyó manitol como marcador para medir el transporte paracelular. Se extrajeron muestras de sangre a varios tiempos y se analizaron para determinar la calcitonina como se ha descrito anteriormente.

Resultados y discusión:

En ausencia de un potenciador, la biodisponibilidad absoluta de la calcitonina fue del 0,69 %. La inclusión de un fosfolípido hidrosoluble (formulación VII) aumentó la biodisponibilidad 4,3 veces a 2,97 %. El potenciador más eficaz 10 fue la clase de éster de azúcar (formulación V) en la que la biodisponibilidad de la calcitonina fue 5,83 %. El uso de una mezcla de ácido biliar y un detergente catiónico (formulación III), un detergente no iónico (formulación IV) y una acilcarnitina (formulación VI) tuvo como resultado biodisponibilidades intermedias que varían de 3,03 % a 4,53 %. Las diferencias en las biodisponibilidades de la calcitonina en presencia de varias clases de potenciadores son menores en comparación con las observadas cuando solo hay ácido cítrico y ningún potenciador presente en la

15 formulación.

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Tabla 4

Efecto de la lauroilcarnitina en presencia de varios aditivos sobre la absorción de calcitonina de salmón en el duodeno de rata

I. Calcitonina (1 mg): 9,44 0,096

II. Cloruro de lauroilcarnitina (5 mg) Calcitonina (0,1 mg): 2,27 0,17

III. Cloruro de lauroilcarnitina (5 mg) Ácido cítrico (48 mg) Calcitonina (0,1 mg): 38,89 4,53

IV. Cloruro de lauroilcarnitina (1mg) Ácido cítrico (48 mg) Calcitonina (0,1mg): 27,72 4,81

V. Cloruro de lauroilcarnitina (5 mg) Diheptanoilfosfatidilcolina (5 mg) Ácido cítrico (48 mg) Calcitonina (0,1mg): 44,89 6,45

VI. Cloruro de lauroilcarnitina (5 mg) Seroalbúmina bovina (25 mg) Calcitonina (0,1 mg): 4,58 0,42

Procedimiento:

Formulaciones que consisten en lauorilcarnitina, calcitonina y varios otros compuestos en un volumen total de 0,5 ml se administraron en los duodenos de ratas anestesiadas como se describe en la leyenda de la Tabla 1. Se extrajeron 5 muestras de sangre a varios tiempos y se analizaron para determinar la calcitonina como se ha descrito anteriormente.

Resultados y discusión:

En ausencia de ácido cítrico o cualquier potenciador (formulación I), la biodisponibilidad absoluta de la calcitonina fue del 0,096 %. En presencia de 5 mg de cloruro de lauroilcarnitina (formulación II), la biodisponibilidad aumentó 1,8 10 veces a 0,17 %. Cuando se incluyó ácido cítrico con lauroilcarnitina (formulación III), la biodisponibilidad aumentó 27 veces más a 4,53 %. Una reducción de 5 veces en la cantidad de lauroilcarnitina pero no de ácido cítrico (formulación IV) no redujo significativamente la biodisponibilidad de la calcitonina de salmón. La inclusión de 5 mg de diheptanoilfosfatidilcolina en la formulación III para producir la formulación V aumentó la biodisponibilidad ligeramente (1,4 veces). La sustitución de 25 mg de seroalbúmina bovina por ácido cítrico (formulación VI) redujo la

15 biodisponibilidad de 4,53 % (formulación III) a 0,42 %. Estos resultados, en conjunto, muestran el efecto sinérgico entre una sustancia reductora del pH como el ácido cítrico y un potenciador como la lauroilcarnitina.

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Tabla 5

Efecto de la formulación sobre la absorción de calcitonina de salmón en el duodeno de perro

I. Calcitonina (25mg): 1,15 0,015

II. Ácido cítrico (192 mg) Calcitonina (10 mg): 10,65 0,37

III. Ácido cítrico (192mg) Ácido taurodesoxicólico (20 mg) Calcitonina (5 mg): 14,99 0,81

Procedimiento:

Se implantaron quirúrgicamente puertos de acceso vascular modificados en el duodeno, íleon y colon de perros beagle macho. El septo/cuerpos reservorio de los puertos se implantaron bajo la piel y se usaron como sitios de 5 administración de las formulaciones de calcitonina. Antes y después de la administración de formulaciones de calcitonina en perros conscientes, los puertos se lavaron con 2 ml de la formulación sin calcitonina. Se extrajo sangre (2 ml) a través de tubos de angiocatéter en la vena de la para a t= 30,15 y 0 antes de la administración de calcitonina y a 5, 10, 20, 30, 40, 50, 60 y cada 15 minutos después de 2 horas. Las muestras de sangre se centrifugaron durante 10 minutos a 2.600 g y el sobrenadante de plasma resultante se almacenó a -20 ºC. La

10 concentración de calcitonina en plasma se determinó mediante un radioinmunoensayo competitivo. La biodisponibilidad absoluta (es decir, respecto a una dosis intravenosa de calcitonina) se calculó a partir de las áreas bajo la curva obtenidas de los gráficos de la concentración plasmática en función del tiempo obtenida.

Resultados y discusión:

La biodisponibilidad absoluta de la calcitonina administrada en agua (I) fue 0,015 %. En presencia de 192 mg de

15 ácido cítrico (II), la biodisponibilidad de la calcitonina aumentó 25 veces. La inclusión de 20 mg de ácido taurodesoxicólico en la formulación (III) produjo un incremento adicional por 2,2 veces de la biodisponibilidad absoluta a 0,81 %. La combinación de un compuesto reductor del pH, ácido cítrico y un potenciador, ácido taurodesoxicólico, tuvo como resultado un incremento global de 54 veces de la biodisponibilidad absoluta de la calcitonina de salmón.

Tabla 6

Efecto del ácido cítrico y lauroilcarnitina sobre la biodisponibilidad de la vasopresina, la calcitonina y la insulina en ratas

Péptido: Formulación Péptido máximo en plasma ng/ml Biodisponibilidad absoluta en porcentaje

[Arg8]-Vasopresina: Vasopresina (1 mg) 0,62 0,38

Vasopresina (0,1 mg) Ácido cítrico (48 mg) Lauroilcarnitina (5 mg): 24,3 8,10

Calcitonina de salmón: Calcitonina (1 mg) 9,44 0,096

Calcitonina (0,1 mg) Ácido cítrico (48 mg) Lauroilcarnitina (5 mg): 27,72 4,81

Insulina humana: Insulina (1 mg) 0,56 0,07

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Claims

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