ES2362917A1 - "procedimiento para la producción de biomasa de algas con un elevado contenido en lípidos". - Google Patents
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Abstract
La presente invención se refiere a un procedimiento para la producción de biomasa de algas con un elevado contenido de lípidos, que comprende: (a) la producción de inóculos con fin de efectuar la fase (b) en fotorreactores; (b) el cultivo masivo de la biomasa de algas en estanques abiertos inoculados con la fase (a); (c) una fase de espesamiento de la biomasa de algas efectuada en condiciones templadas; (d) una fase de inducción de la producción de lípidos, en la que se utilizan módulos que comprenden fotorreactores o estanques abiertos; (e) una fase de separación de la biomasa con un alto contenido de lípidos.
Description
Procedimiento para la producción de biomasa de
algas con un elevado contenido de lípidos.
La presente invención se refiere a un
procedimiento para la producción de biomasa de algas con un elevado
contenido de lípidos.
Más en particular, la invención se refiere a un
procedimiento para la producción de biomasa de algas con un elevado
contenido de lípidos, basado en una combinación de sistemas de
cultivo tales como estanques abiertos y fotorreactores adecuadamente
integrados con sistemas de espesamiento de la biomasa.
Actualmente, se cultivan microalgas para la
producción de moléculas de alto valor, tales como ácidos grasos
poliinsaturados, vitaminas y agentes gelificantes, que se introducen
en el mercado nutricional, farmacéutico y cosmético.
Los mejores productos de biomasa de algas
utilizan diversos tipos de sistemas de cultivo que dependen
principalmente de la cepa de alga y de las condiciones climáticas.
En condiciones extremadamente favorables de temperatura y luz, tal
como en Israel y California, por ejemplo, pueden utilizarse con
éxito estanques abiertos. Por el contrario, en Alemania, se
utilizan reactores tubulares instalados en invernaderos. En Portugal
se utilizan tanto estanques abiertos como fotorreactores.
Es preferido además el uso de sistemas abiertos,
tales como estanques abiertos, cuando se cultivan especies de algas
que tienen característica extremofílicas, tales como Dulaniella
salina, capaces de crecer en entornos con concentraciones de sal
del 10-15% y, por tanto, de resistir numeras formas
externas de contaminación. Esto no ocurre para especies capaces de
crecer en agua dulce que, para evitar problemas de contaminación,
pueden cultivarse en sistemas cerrados, tales como
fotorreactores.
El cultivo de algas para los campos nutricional,
farmacéutico y cosmético se caracteriza por capacidades productivas
bastante limitadas con un alto valor de los productos. Por esta
razón, pueden tolerarse sistemas de producción relativamente caros,
tales como los fotorreactores, mientras que el método más
ampliamente utilizado para la producción de microalgas que se deben
usar en campos comerciales menos valiosos, tales como el de la
acuicultura, se basa en sistemas de cultivo económicos, tales como
estanques abiertos.
El paso de los campos mencionados anteriormente,
en los que se utilizan tradicionalmente microalgas, a campos
medioambientales/campos de energía, requiere el desarrollo de
tecnologías que sean tales que lleven a un fuerte incremento en la
capacidad de producción (del orden de cientos/miles de toneladas por
año a millones de toneladas por año) y a una fuerte reducción en los
costes de producción (de cientos de dólares/kilogramo a cientos de
dólares/
tonelada).
tonelada).
Los objetivos de productividad de los sistemas
de cultivo pueden alcanzarse por medio de fuertes mejoras dirigidas
a optimizar la adsorción de radiación biológicamente activa y una
reducción en fenómenos de fotoinhibición con el fin de incrementar
fuertemente la eficiencia del procedimiento de fotosíntesis de
clorofila.
Hay numerosas actividades de investigación en
marcha con el objetivo de optimizar la productividad de biomasa de
los diferentes sistemas de cultivo y de incrementar su contenido de
lípidos.
La producción de microalgas con el objetivo de
reciclar el CO_{2} liberado por plantas industriales y producir
biomasa que puede explotarse para fines de energía, tal como, por
ejemplo, aceites vegetales a utilizar para su conversión a
biodiesel, está en una etapa experimental en este momento.
Los esfuerzos que se están realizando para el
desarrollo de fotorreactores no parecen ser resolutivos, puesto que
hay muchas dudas en cuanto a los incrementos de productividad
reivindicados, que, por otro lado, no parecen ser suficientes para
obtener la necesaria reducción de costes. (Ref: Solicitud de patente
WO 03/094598 "Photobioreactor and Process for Biomass Production
and Mitigation of Pollutants in Flue Gases. Company Green
Fuel Technology").
Además, no existe evidencia en la literatura
relativa al procedimiento completo para la producción de aceites a
partir de biomasas de algas y su transesterificación, excepto las
descritas en el Congreso Anual AICHE 2006, 12-17 de
noviembre, "Microalgal Oil Extraction and in situ
Transesterificatión", Justin M. Ferrentino e Ihab H. Farag.
Chemical Engineering, Universidad de New Hampshire, Kingsbury Hall,
33 College Road, Durham, NH 03824, en marcha en la Universidad de
New Hampshire, que están tratando de evitar recurrir a disolventes
orgánicos normalmente utilizados para la extracción de aceites,
explotando métodos de rotura de las paredes celulares y
centrifugación posterior o transesterificación in situ.
Se ha encontrado ahora un sistema de cultivo de
microalgas basado en una combinación de sistemas de cultivo, tales
como estanques abiertos y fotorreactores, adecuadamente integrados
con sistemas de espesamiento de la biomasa, capaz de garantizar una
alta productividad, proporcionando una biomasa con un alto contenido
de lípidos, impidiendo la contaminación microbiológica, manteniendo
una producción continua y estable en el tiempo.
\newpage
\global\parskip0.920000\baselineskip
En particular, un objetivo de la presente
invención se refiere a un procedimiento para la producción de
biomasa de algas con un elevado contenido de lípidos, que
comprende, de acuerdo con el esquema mostrado en la figura 1:
- (a)
- la producción de inóculos con fin de efectuar la fase (b) en fotorreactores;
- (b)
- el cultivo masivo de la biomasa de algas en estanques abiertos inoculados con la fase (a);
- (c)
- una fase de espesamiento de la biomasa de algas efectuada en condiciones templadas;
- (d)
- una fase de inducción de la producción de lípidos, en la que se utilizan módulos que comprenden fotorreactores o estanques abiertos;
- (e)
- una fase de separación de la biomasa con un alto contenido de lípidos.
Al funcionar según el procedimiento de la
presente invención, es posible:
- i)
- cultivar especies que tengan un alto grado de pureza, gestionando adecuadamente la posible contaminación externa (vaciado de los estanques de cultivo y reinoculación de los mismos);
- ii)
- cultivar microalgas limitando el uso de fotorreactores a la producción de inóculos de especies puras solamente, con una consiguiente reducción de costes;
- iii)
- minimizar los volúmenes del proceso necesarios para alcanzar las condiciones de inducción de la producción de lípidos introduciendo la fase (c);
- iv)
- hacer que el procedimiento sea continuo por el uso combinado de diversos módulos de fotorreactores y estanques abiertos.
La fase (a) para la producción de inóculos puede
efectuarse en fotorreactores que tengan diversas formas y
dimensiones: reactores tubulares lineales que tengan una forma
cilíndrica o elíptica, reactores planares paralelepipédicos o
cilíndricos, tales como los descritos en "Tredici M.R. (2004) Mass
production of microalgae: photobioreactors. En el Handbook of
Microalgal Culture de Richmond A (ed.). Blackwell Publishing, Oxford
(UK), páginas 178-214". Se prefieren estos
últimos, ya que son producidos por medio de películas hechas de
material plástico soportado por una simple estructura de metal
exterior y, por tanto, son baratos. Funcionan normalmente con un
tiempo de retención hidráulica del orden de 1-2 días
y llevan a concentraciones de biomasa de alrededor de 2 g de
sustancia seca/litro. La relación entre el volumen del proceso de
los sistemas de cultivo de la fase (a) y los de la fase (b) depende
de las condiciones climáticas locales y de la cepa de alga
cultivada. Está normalmente dentro del intervalo comprendido entre
0,05 y 0,15 y es preferentemente igual a 0,1.
El caldo de cultivo obtenido se utiliza para
inocular sistemas de cultivo sobre una base discontinua (diaria o
multidiaria).
Alternativamente, puede utilizarse sobre una
base continua para incrementar la concentración de la biomasa de
algas en los estanques abiertos de la base (b) y, por tanto,
impedir el comienzo de fenómenos de contaminación externa. Los
medios de reciclado acuosos que proceden de la fase (c),
reintegrados con los nutrientes necesarios (esencialmente nitrógeno
y sales de fósforo), se utilizan como agentes de crecimiento. La
corriente de relleno acuosa puede consistir en agua residual
industrial que se debe someter a un tratamiento terciario. En este
caso, el cultivo de algas metaboliza las sustancias que contienen
nitrógeno y fósforo incluidos en ellas, contribuyendo así a su
purificación. Como CO_{2} necesario para el crecimiento de las
algas, puede utilizarse el contenido en gases de escape industriales
(plantas termoeléctricas, plantas de generación de hidrógeno,
etc.).
La fase (b) para el crecimiento de las algas
puede tener lugar en estanques abiertos, tanto circulares como
longitudinales. Se prefieren estanques de circulación típicos que
tienen una forma longitudinal. Asimismo, en este caso, los tiempos
de retención hidráulica son de 1 a 2 días. Su funcionamiento puede
ser semicontinuo tomando una muestra del caldo de cultivo y
alimentando los agentes de crecimiento (agua y nutrientes) por la
mañana, o bien continuo con interrupción durante la noche. Se
prefiere esta última opción, integrada adecuadamente con sistemas de
control de la altura del nivel de líquido del sistema de cultivo
controlado por los indicadores del crecimiento de las algas
(medición de la densidad óptica, clorofila y relación posible entre
ellas).
En el caso del comienzo de fenómenos de
contaminación, los sistemas utilizados para efectuar la fase (a) y
la fase (b) pueden descontaminarse periódicamente (lavados con agua
o lavado con soluciones acuosas de desinfectantes).
La fase (c) para el espesamiento de la biomasa
reduce ampliamente el volumen del proceso (al menos diez veces)
haciendo ventajoso el uso de fotorreactores o reduciendo
drásticamente el volumen de los estanques.
Esta fase se efectúa por medio de separación
gravitacional en equipos de sedimentación utilizados típicamente en
plantas de tratamiento de agua. Se ha encontrado que la
sedimentación de cepas de algas de agua dulce, tal como, por
ejemplo, Scenedesmus sp., se facilita ampliamente por el uso
de polielectrolitos catiónicos (es decir, poliacriloamidas)
utilizados en una cantidad de 2-5 ppm (paso de la
concentración de algas de 0,4 a 0,5 g/litro hasta
40-50 g/litro en aproximadamente 1,5 horas).
\newpage
\global\parskip1.000000\baselineskip
La fase (d) para la maduración celular se
efectúa con el objetivo de obtener condiciones de cultivo que
conduzcan a un incremento en el contenido de la fracción de lípidos
de la biomasa. A este respecto, el medio de crecimiento será
mantenido con nitrógeno limitado, con lo que la corriente que
procede de la fase (c) se integrará principalmente, si fuera
necesario, con fuentes de fósforo y, posiblemente, con
micronutrientes. Los sistemas de cultivo que pueden utilizarse en
esta fase pueden comprender estanques abiertos y fotorreactores. La
concentración de biomasa en la corriente que procede de la fase (c)
se establece dependiendo del sistema de maduración seleccionado (del
orden de un g/litro para estanques abiertos y decenas de g/litro
para fotorreactores).
La fase (e) puede llevarse a cabo con sistemas
análogos a los adoptados en la fase (c). La fase acuosa que se
separa puede enviarse directamente al tratamiento final antes de que
sea descargada o reciclada, después de la purga, para evitar la
acumulación de metabolitos en todo el sistema.
La primera opción se adopta cuando el cultivo de
algas se utiliza no sólo para la producción de biomasa, sino también
para la purificación de agua residual (tratamiento terciario). Por
el contrario, la segunda opción se utiliza cuando no está disponible
agua residual y es necesario limitar las demandas de agua. La
corriente de purga está comprendida generalmente entre el 1 y el 20%
y preferentemente es igual al 10% de la corriente acuosa total
generada por la separación.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo
1
Especie monoalgácea Chlorella
sorokiniana.
Se utilizó la cepa de colección Chlorella
sorokiniana, que crece normalmente en agua dulce.
El inóculo que se debe introducir en los
sistemas de cultivo descritos a continuación se preparó como
sigue:
- -
- Se descongeló una muestra de cultivo monoalgáceo previamente preservada a -85ºC en una solución al 10% de glicerina dejándola a temperatura ambiente y se centrifugó a continuación para eliminar el sobrenadante.
- -
- Se inoculó la pasta celular así obtenida en tres frascos de 250 ml que contenían 50 ml de solución con nutrientes.
- -
- Se dejó crecer el cultivo en una cámara climática iluminada a una temperatura constante de 30ºC en presencia de CO_{2} en 0,5% de aire.
- -
- Aproximadamente una semana después, el frasco alcanzó una concentración de 0,2 g/l, y se utilizó este cultivo como inóculo para tres frascos de 1 litro que contenían 500 ml de solución con nutrientes y se le colocó en una cámara climática.
- -
- Después de dos días, el cultivo tenía una concentración de 0,4 g/l y formó el inóculo de las botellas Roux de 5 litros utilizadas en la experimentación de laboratorio para la preparación del inóculo necesario para la experimentación subsiguiente.
Se preparó un total de 60 litros de inóculo
utilizando 12 botellas Roux (para los ensayos subsiguientes, el
inóculo se redujo proporcionalmente al volumen de los reactores) que
se iluminaron por medio de lámparas de tungsteno de 17.500 Lux. El
CO_{2} necesario para el crecimiento se suministró desde bombonas
y se alimentó a un flujo medio de 25 litros/hora por botella Roux.
Se midió de vez en cuando el pH de las botellas Roux individuales y,
cuando se observaron desplazamientos de \pm 0,2 unidades con
respecto a la neutralidad, se modificó manualmente el flujo
de
CO_{2}.
CO_{2}.
Medio de cultivo: todos los sistemas de
cultivo (frascos, botellas Roux, fotorreactores, estanques
abiertos) se probaron utilizando el siguiente medio de
crecimiento:
Microelementos: 1 ml/l de la siguiente solución:
H_{3}BO_{3} 2,86 g, MnCl_{2}\cdot4H_{2}O 1,81 g,
CuSO_{4}\cdot5H_{2}O 80 mg, ZnSO_{4}\cdot
7H_{2}O 220 mg, Na_{2}MoO_{4} 210 mg, FeSO_{4}\cdot7H_{2}O 25 g, EDTA 33,5 g y 1 gota de H_{2}SO_{4} concentrado por litro. Ph de operación: 7,0.
7H_{2}O 220 mg, Na_{2}MoO_{4} 210 mg, FeSO_{4}\cdot7H_{2}O 25 g, EDTA 33,5 g y 1 gota de H_{2}SO_{4} concentrado por litro. Ph de operación: 7,0.
La composición anterior se obtuvo modificando el
medio de cultivo típico M4N indicado en la literatura para el
cultivo de microalgas. En particular, se redujo el contenido de
KNO_{3} (desde 5,0 hasta 1,75 g/l; en la composición clásica, se
contempla un fuerte exceso del componente nitrogenado, evitando así
una adición diaria), se añadió K_{2}HPO_{4} en una cantidad de
0,1 g/l y se redujo el contenido de MgSO_{4}\cdot7H_{2}O
(desde 2,5 hasta 1,5 g/l).
La microalga Chlorella sorokiniana se
probó utilizando un sistema tipo banco que comprenda estanques
abiertos y un fotorreactor instalado a la intemperie.
La planta incluía cuatro unidades de cultivo:
tres estanques abiertos de 375 litros con una superficie de 2,5
m^{2} y un fotorreactor de 39 litros con una superficie iluminada
de 0,98 m^{2}. Los estanques abiertos, siguiendo el diseño de los
que forman los sistemas a gran escala (estanques de circulación
mixtos con rueda de paletas), se equiparon con una rueda de paletas
para mantener el cultivo de microalgas en agitación constante
(variedad de 30 cm/s) y tenían una división longitudinal para crear
un flujo continuo y circular por medio del movimiento de las
paletas.
El fotorreactor comprendía un conjunto de 10
tubos, cada uno con un diámetro de 45 mm y 2 m de largo. El removido
del cultivo se garantizó en este caso por gas (CO_{2} y aire,
alternativamente), que se envió al interior de los tubos, los
cuales, además, estaban equipados con un sistema de refrigeración
para impedir que la temperatura fuera superior a 32ºC. Los
estanques abiertos no estaban equipados con un sistema de control de
temperatura. Cada unidad estaba equipada con sensores para vigilar
la temperatura, el pH y la concentración del oxígeno disuelto.
La fuente de carbono consistía en CO_{2}
gaseoso, enviado directamente al interior del reactor y regulado por
medio de medición del pH.
La figura 2 muestra un esquema de la planta
banco descrita anteriormente, indicándose en el esquema que la
fuente de CO_{2} utilizada comprendía gases de escape procedentes
de una caldera alimentada con metano del sistema de suministro.
La experimentación llevada a cabo con la
configuración experimental descrita anteriormente se ilustra a
continuación.
El fotorreactor F-1 y los tres
estanques abiertos P-1, P-2,
P-3 se inocularon en una cantidad de 5% de su
volumen con los cultivos de algas efectuados en botellas Roux de
laboratorio como se ha especificado previamente. El fotorreactor se
inoculó tres días después de los estanques. Después de
aproximadamente una semana de cultivo, se alcanzaron las condiciones
de meseta con concentraciones de biomasa de 0,3-0,5
g/l en los estanques y 1-2 g/l en el fotorreactor.
Los sistemas se hicieron funcionar de manera discontinua a las
siguientes tasas de dilución: estanque P-1 30%,
estanque P-2 45%, estanque P-3 60% y
fotorreactor F-1 30%. La toma de muestras del caldo
de cultivo y la alimentación en el medio de crecimiento en las
cantidades necesarias para efectuar las diluciones requeridas se
efectuaron en las primeras horas de la mañana (de 7 a 8).
Durante el ensayo, se vigiló diariamente el peso
en seco del cultivo junto con la radiación solar, la temperatura, la
concentración del oxígeno disuelto y el pH.
La figura 3 muestra las tendencias de la
concentración de la biomasa de algas en los estanques abiertos y los
fotorreactores. Puede observarse, como es bien conocido en la
literatura, que los valores de concentración de los cultivos en
sistemas cerrados (fotorreactor) son más altos con respecto a los de
sistemas abiertos.
La figura 4 muestra los respectivos valores de
productividad areal de los diferentes sistemas de crecimiento
calculados por medio de la relación:
en la
que:
C = concentración de biomasa g/l
V = volumen del cultivo tomado diariamente
(litros)
S = superficie de los sistemas de cultivo
(huella, m^{2})
T = tiempo (1 día).
Se analizaron muestras de biomasa de algas en
los días primero, tercero y sexto de la experimentación en tomas
semicontinuas de los estanques abiertos y del fotorreactor para
determinar el contenido de lípidos, proteínas, carbohidratos,
carotenoides y clorofila. Los métodos utilizados y los resultados
obtenidos se muestran en la tabla 1.
Puede observarse que el contenido de las
sustancias analizadas demostró ser relativamente estable, en
particular en lo que concierne al contenido de lípidos.
Tal como puede observarse en las figuras
previas, los estanques abiertos demostraron tener una pobre
estabilidad a lo largo de un periodo de tiempo con esta
configuración experimental. De hecho, después de aproximadamente
diez días de experimentación, las células de las algas sufrieron una
contaminación repentina por parte de bacterias y protozoos con la
consiguiente desaparición casi total de la proliferación de algas en
alrededor de dos días. Por el contrario, el fotorreactor mostró una
actividad constante con el tiempo.
Las figuras 5 y 6 muestran fotografías de
microscopio de los cultivos, antes y después de la contaminación. En
la figura 6, puede observarse la presencia de varios protozoos que
proliferan en el medio de cultivo. Esto puede atribuirse
principalmente al tipo de sistema de cultivo que, debido a su amplia
exposición al ambiente exterior, hace que pueda exponerse fácilmente
a la colonización por parte de las otras especies vivas que crecen
en competición con la que se está cultivando. Deberá observarse que
estos fenómenos pueden verse favorecidos por la concentración
relativamente baja de la especie de alga que tiende a producirse con
el tiempo.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo
2
Con el fin de intentar resolver problemas de
contaminación de los estanques observados durante el ensayo previo,
se adoptó un método de cultivo basado en la inoculación continua de
los estanques con la biomasa en monocultivo procedente del
fotorreactor y dilución constante de los propios estanques. Esto fue
para favorecer la proliferación de la biomasa de algas y reducir la
de las especies contaminantes.
El esquema del proceso se muestra en la figura
7.
Se utilizó una dilución igual al 30%, que, sobre
la base de los ensayos previos, proporcionaba las concentraciones
más altas de la biomasa, y se mantuvo la productividad en un nivel
sustancialmente análogo al observado con las diluciones más
altas.
Se probaron el fotorreactor F-1
solo y el estanque P-1, conectados en serie.
El procedimiento para la producción del inóculo
para las dos unidades de crecimiento fue el descrito en el ejemplo
1.
El fotorreactor se alimentó con el medio de
cultivo, de forma continua, durante 12 horas al día, a un caudal de
1,0 litros/hora. La corriente que salía del fotorreactor se alimentó
al estanque P-1. Este último se alimentó también con
el cultivo a un caudal de 8,4 litros/hora. Por tanto, el caudal en
la salida de este sistema demostró ser igual a 9,4 litros/hora. De
esta manera, una tasa de dilución se mantiene igual a la utilizada
en el ensayo 1 con una dilución de alrededor del 30% (9,4 l/h * 12
horas/día: 375 l = 0,30).
Análogamente, la tasa de dilución del
fotorreactor demostró ser igual al 30% (1,0 l/hr * 12 horas/día: 40
l =
0,30).
0,30).
Teniendo en cuenta que el estanque se alimentó
durante 12 horas al día, el tiempo total de retención hidráulica
demostró ser igual a 3,3 días (375 l 112,8 l/día = 3,3 días),
análogamente al del fotorreactor (40 1: 12 l/día = 3,3
días).
días).
El sistema demostró ser estable en estas
condiciones y no se observaron los fenómenos de contaminación
encontrados durante el ensayo previo. Se consideró concluido el
experimento después de aproximadamente 30 días.
Las figuras 8 y 9 muestran las tendencias de la
concentración de biomasa y la productividad areal encontradas en los
dos sistemas de cultivo.
Una comparación de la figura 3 con la figura 8
muestra que la concentración de biomasa en el fotorreactor demostró
estar en línea con las observadas en el ejemplo 1 (aproximadamente 2
g/l), mientras que la del estanque demostró ser más alta (alrededor
de 0,7 frente a 0,5 g/l). El incremento de concentración en el
estanque es debido probablemente a la contribución de la biomasa de
algas alimentada de forma continua al fotorreactor (alrededor de 2
g/hora). Por tanto, el caudal másico, en condiciones de régimen,
que salía del estanque abierto era igual a 6,6 g de biomasa/hora
aproximadamente.
\newpage
Asimismo, en este caso, se tomaron muestras de
biomasa de algas cada tres días durante la experimentación
continua, tanto de los estanques abiertos como del fotorreactor. En
la tabla 2, se indican los valores de análisis de los lípidos,
proteínas carbohidratos, carotenoides y clorofila.
Puede observarse que la composición celular es
muy similar a la especificada en el ensayo del Ejemplo 1.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo
3
Con el fin de incrementar el contenido de
lípidos, la biomasa se sometió a tensión por deficiencia de
nitrógeno. Para esta finalidad, se produjo una nueva configuración
experimental añadiendo, aguas abajo del sistema descrito en el
ensayo previo, un estanque adicional (P-1M) indicado
como estanque de maduración. Éste tenía un volumen útil de 112,8
litros (dimensiones: base de 0,75 metros cuadrados por 15,0 cm de
altura de cultivo) gestionado también de manera continua. Las
corrientes que entraban y salían del estanque de maduración eran
iguales a 9,4 l/hora. Se seleccionó su volumen útil para obtener un
tiempo de retención hidráulico igual a 1 día (con respecto a 3,3
días de los otros dos reactores).
La condición de tensión por limitación de
nitrógeno se efectuó eliminando la alimentación del medio de cultivo
y CO_{2}.
El esquema de la planta para este ensayo se
muestra en la figura 10.
Con el fin de impedir que el estanque de
maduración se alimentara con nitrógeno procedente de un exceso de
KNO_{3} alimentado al estanque P-1 (una condición
que se adopta normalmente en sistemas de crecimiento tradicionales),
a pesar de la falta de administración del medio de cultivo, se
redujo la concentración de KNO_{3} en el medio de cultivo (desde
1,75 g/l hasta 0,45 g/l) que entraba en el estanque anterior para
suministrar una cantidad que era estrictamente necesaria para el
crecimiento de microalgas.
En consecuencia, la concentración de nitrógeno
en la corriente que salía de este estanque y que se alimentó al
estanque de maduración era extremadamente baja con valores de
aproximadamente 0,006 g/litro.
Deberá observarse que, para alcanzar este
resultado, no fue necesario variar la concentración de KNO_{3} en
el medio de cultivo que se alimentaba al fotorreactor
F-1 (de nuevo 1,75 g/l), dejando en consecuencia
inalteradas sus condiciones de crecimiento.
En estas condiciones experimentales, la
productividad del estanque de maduración fue casi nula, pero los
valores de peso en seco permanecieron muy similares a los del
estanque P-1. La figura 11 muestra los valores de
peso en seco de los estanques P-1 y
P-1M, mientras que la figura 12 indica la
productividad areal diaria de la biomasa de algas de todo el
sistema que comprende el fotorreactor, el estanque de crecimiento
P-1 y el estanque de maduración
P-1M.
P-1M.
Observando los valores de la composición
celular, es evidente que, durante la fase de maduración, las células
reaccionan a la condición de tensión produciendo más lípidos en
detrimento principalmente de las proteínas (tabla
3).
3).
Para la finalidad de la productividad de lípidos
por unidad de superficie, el incremento en porcentaje de lípidos en
las células compensa ampliamente la productividad areal inferior de
la biomasa de todo el sistema como se muestra en el siguiente
cálculo, que confirma la eficacia de la solución adoptada.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo
2
22,56 g de biomasa/m^{2}/día (productividad
areal total) x 0,16 (% de lípidos en la biomasa) = 3,6 g de
lípidos/m^{2}/día (productividad areal diaria de lípidos).
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo
3
17 g de biomasa/m^{2}/día (productividad areal
total) x 0,37 (% de lípidos en la biomasa) = 6,29 g de
lípidos/m^{2}/día (productividad areal diaria de lípidos).
\newpage
Tal como puede observarse, se registró un
incremento en la producción de lípido de más del 40%.
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
Claims (11)
1. Procedimiento para la producción de biomasa
de algas con un elevado contenido de lípidos, caracterizado
porque comprende:
- (a)
- la producción de inóculos con el fin de llevar a cabo la fase (b), en fotorreactores;
- (b)
- el cultivo masivo de la biomasa de algas en estanques abiertos inoculados con la fase (a);
- (c)
- una fase de espesamiento de la biomasa de algas, llevada a cabo en condiciones templadas;
- (d)
- una fase de inducción de la producción de lípidos, en la que se utilizan módulo que comprenden fotorreactores o estanques abiertos;
- (e)
- una fase de separación de la biomasa con un elevado contenido de lípidos.
\vskip1.000000\baselineskip
2. Procedimiento según la reivindicación 1,
caracterizado porque la fase (a) para la preparación de los
inóculos se lleva a cabo en fotorreactores planares que tienen una
forma cilíndrica producida por medio de una película de material
plástico soportada por una simple estructura metálica externa.
3. Procedimiento según la reivindicación 1,
caracterizado porque los inóculos preparados durante la fase
(a) se utilizan para inocular estanques abiertos sobre una base
discontinua o una base continua.
4. Procedimiento según la reivindicación 1,
caracterizado porque el medio acuoso reciclado que procede de
la fase (c) se reintegra con los nutrientes necesarios y se utiliza
como agente de crecimiento de la fase (a) y la fase (b).
5. Procedimiento según la reivindicación 4,
caracterizado porque el medio acuoso reciclado procedente de
la fase (c) se reintegra con una corriente acuosa que comprende agua
residual industrial que se debe someter a tratamiento terciario.
6. Procedimiento según la reivindicación 1,
caracterizado porque el CO_{2} necesario para el cultivo de
algas es proporcionado por gases de escape industriales.
7. Procedimiento según la reivindicación 1,
caracterizado porque la fase (b) para el cultivo de la
biomasa de algas tiene lugar en estanques abiertos que presentan una
forma longitudinal, del tipo "estanques de circulación mixtos con
rueda de paletas", equipados con una rueda de paletas para
mantener el cultivo de microalgas en agitación constante.
8. Procedimiento según la reivindicación 1,
caracterizado porque los estanques abiertos se hacen
funcionar de manera semicontinua, con la toma de muestras del caldo
de cultivo y la alimentación de los agentes de crecimiento por la
mañana, o de forma continua con interrupción durante la noche.
9. Procedimiento según la reivindicación 1,
caracterizado porque la fase de espesamiento (c) de la
biomasa de algas se lleva a cabo por medio de separación
gravitacional en balsas de sedimentación típicamente utilizadas en
plantas de tratamiento de agua.
10. Procedimiento según la reivindicación 9,
caracterizado porque el espesamiento de la biomasa se obtiene
utilizando polielectrolitos catiónicos.
11. Procedimiento según la reivindicación 1, en
el que la fase de inducción de la producción de lípidos tiene lugar
en el medio de crecimiento mantenido con limitación de
nitrógeno.
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