ES2348723T3

ES2348723T3 - Adyuvante en forma de particulas para una terapia por hifu y su uso.

Info

Publication number: ES2348723T3
Application number: ES05781870T
Authority: ES
Inventors: Zhibiao Wang; Yanbing Xiao; Ziwen Xiao; Zhilong Wang; Liping Liu; Faqi Li
Original assignee: Chongqing Haifu Hifu Technology Co Ltd
Current assignee: Chongqing Haifu Hifu Technology Co Ltd
Priority date: 2005-01-10
Filing date: 2005-09-02
Publication date: 2010-12-13
Anticipated expiration: 2025-09-02
Also published as: AU2005324274A1; BRPI0518497A2; JP2008526787A; EP1842559B1; RU2007127666A; EP1842559A1; EP1842559A4; CA2593658A1; WO2006072201A1; KR20070094620A; US20080139973A1; DE602005023217D1; CA2593658C; CN100574811C; ATE478683T1; CN1803198A; RU2360700C2; AU2005324274B2

Abstract

Un agente de intensificación para su uso en un tratamiento por ultrasonidos enfocados de alta intensidad (HIFU), comprendiendo el agente de intensificación una fase discontinua que se compone de un material de núcleo encapsulado por un material que forma membranas y una fase continua que se compone de un medio acuoso, en que la fase discontinua está dispersada uniformemente en la fase continua y el tamaño de partículas de la fase discontinua fluctúa entre 0,1 y 8 µm; la cantidad del material que forma membranas en el agente de intensificación es de 0,1-100 g/l; el material de núcleo se compone de un líquido que no experimenta una transición desde la fase líquida a la gaseosa a 38-100ºC y se selecciona entre un grupo que se compone de un ácido graso saturado, un ácido graso insaturado y un aceite yodado, y la cantidad del material de núcleo en el agente de intensificación es de 5-200 g/l.

Description

CAMPO DEL PRESENTE INVENTO

El presente invento se refiere a los campos de la medicina y del tratamiento médico, específicamente al campo del tratamiento por ultrasonidos y más 5 particularmente a un agente de intensificación en forma de partículas para el tratamiento por HIFU, que puede aumentar la deposición de energía acústica en el sitio diana durante el tratamiento por HIFU, y a su uso.

ANTECEDENTES DEL PRESENTE INVENTO 10

El tratamiento por ultrasonidos enfocados con alta intensidad (HIFU, acrónimo de High-Intensity focused ultrasound) como una nueva técnica para tratar tumores y otras enfermedades ya ha sido reconocido en aplicaciones clínicas. El HIFU emplea unos ultrasonidos enfocados, que proporcionan en el foco una energía continua de ultrasonidos de alta intensidad, dando como resultado efectos térmicos instantáneos 15 (65-100 ºC), efectos de cavitación, efectos mecánicos y efectos sonoquímicos, para causar selectivamente una necrosis coagulativa en el foco, e impedir que la proliferación, la invasión y la metastatización de los tumores.

Chen Shu-Qun y colaboradores describieron el uso de un aceite yodado en un tratamiento por HIFU de un cáncer de hígado (Journal of Cancer Research and Clinical 20 Oncology, editorial Springer, BE, volumen 123, 1997, páginas 639-644, XP007903958, ISSN: 1432-1335).

Se demostró que la energía acústica era atenuada exponencialmente según aumentaba la distancia de transmisión durante una transmisión de ultrasonidos dentro del cuerpo (Baoqin Liu y colaboradores, Chinese Journal of Ultrasound in Medicine, 25 2002, 18(8): 565-568. Además, la energía durante la transmisión de ultrasonidos en tejidos blandos era atenuada debido a una absorción, una diseminación, una refracción, una difracción y procesos similares en tejidos, entre los cuales la absorción y la diseminación en tejidos son responsables principalmente de la pérdida de energía, (Ruo Feng y Zhibiao Wang como jefes de coordinación de edición, Practical 30 Ultrasound Therapeutics, Science and Technology Reference Publisher of China, Beijing, 2002.14). Por lo tanto, cuando se usa el tratamiento por HIFU para tratar tumores profundamente asentados y de gran tamaño, la energía acústica transmitida a la diana resultaría relativamente baja. Por lo tanto, la eficiencia terapéutica disminuiría

y el período de tiempo de tratamiento sería prolongado debido a la atenuación de la energía acústica.

Desde luego, aunque la potencia de transmisión del transductor terapéutico puede ser aumentada con el fin de mejorar la eficiencia terapéutica, es más probable que el tejido normal se queme a lo largo de la trayectoria de la transmisión de 5 ultrasonidos en un entorno de ultrasonidos de alta intensidad.

Además, en el momento actual, cuando la técnica de HIFU es aplicada clínicamente a un tumor hepático, que está bloqueado por las costillas en la trayectoria de la transmisión de ultrasonidos, las costillas son retiradas usualmente con el fin de aumentar la deposición de energía en el sitio diana, acortar el período de tiempo de 10 tratamiento y mejorar los efectos terapéuticos. Por lo tanto, no se puede asegurar la falta de invasividad de un tratamiento por HIFU, lo cual es indeseable para los pacientes y los doctores en medicina.

Los anteriores problemas han limitado de manera desventajosa el uso del tratamiento por HIFU como una técnica para la práctica clínica. Por lo tanto, se 15 necesitan resolver urgentemente los problemas técnicos con respecto al aumento de la deposición de energía en el sitio diana, al tratamiento efectivo de los tumores asentados profundamente sin deteriorar al tejido normal circundante en la trayectoria acústica, y al tratamiento de un tumor hepático que está bloqueado por las costillas sin retirada de las costillas. 20

SUMARIO DEL INVENTO

Un objetivo del presente invento es proporcionar un agente de intensificación en forma de partículas para un tratamiento por HIFU, que puede intensificar la deposición de energía acústica en un tejido diana durante un tratamiento por HIFU. 25

Otro objetivo del presente invento es el de proporcionar un método para intensificar la deposición de energía acústica en el sitio diana durante un tratamiento por HIFU usando el agente de intensificación en forma de partículas para el tratamiento por HIFU del presente invento.

Un objetivo adicional del presente invento es el de proporcionar el uso de un 30 agente de intensificación en forma de partículas para un tratamiento por HIFU con el fin de intensificar la efectividad de un tratamiento por HIFU.

Con el fin de conseguir los objetivos anteriores, en una forma de realización, el presente invento proporciona un agente de intensificación destinado a usarse en un tratamiento por HIFU de acuerdo con las reivindicaciones. El agente de intensificación 35

del presente invento es una sustancia que puede intensificar la absorción de energía acústica en un sitio diana que ha de ser tratado por HIFU después de su administración a un cuerpo biológico, es decir una sustancia que se puede usar para reducir la energía acústica que se necesita para causar lesiones de un tejido diana (tejido tumoral y no tumoral) por unidad de volumen del tejido durante un tratamiento 5 por HIFU.

Como se usa en el presente contexto, el concepto de “lesión” se refiere al cambio sustancial en el estado fisiológico de un tejido tumoral o normal, se refiere generalmente a la necrosis coagulativa de un tejido tumoral o normal. El factor de eficiencia de energía (EEF, acrónimo de Energy Efficiency Factor) se puede usar para 10 cuantificar la energía acústica que se necesita para causar lesiones de un tejido diana por unidad de volumen del tejido. El EEF es presentado por la expresión EEF = Pt/V (unidad: J/mm3), y se refiere a la energía acústica que se necesita para causar lesiones de un tejido tumoral o normal por unidad de volumen del tejido, en que  se refiere al coeficiente de enfoque de un transductor de HIFU, que refleja la capacidad 15 enfocadora de energía de ultrasonidos del transductor, aquí  = 0,7; P se refiere a la potencia acústica total de una fuente de HIFU (unidad: W = vatios), t se refiere al período de tiempo total de un tratamiento por HIFU (unidad: s = segundos); y V se refiere al volumen de las lesiones inducidas por HIFU (unidad: mm3). Una sustancia que disminuye en gran manera el EEF del tejido diana después de su administración 20 es más apropiada para usarse como el agente de intensificación para un tratamiento por HIFU de acuerdo con el presente invento.

El agente de intensificación para un tratamiento por HIFU, de acuerdo con las reivindicaciones, disminuye en gran manera el EEF del tejido diana después de su administración. Como resultado, la relación entre el EEF del tejido diana, medido antes 25 de la administración del agente de intensificación, (es decir EEF(base)), y el EEF del tejido diana, medido después de la administración del agente de intensificación, (es decir EEF(medición)) es mayor que 1, de manera preferible mayor que 2, y de manera más preferible superior a 4. El límite superior de la relación no está limitado particularmente y se prefiere una relación más alta. 30

Específicamente, el agente de intensificación para un tratamiento por HIFU del presente invento comprende una fase discontinua, que se compone de un núcleo encapsulado por un material que forma membranas y una fase continua, que se compone de un medio acuoso. La fase discontinua es dispersada de manera uniforme en la fase continua y el tamaño de partículas de la fase discontinua fluctúa entre 0,1 y 35

8 µm, de manera preferible entre 0,5 y 5 µm y de manera más preferible entre 2,5 y 5 µm; la cantidad del material que forma membranas en el agente de intensificación es de 0,1-100 g/l, de manera preferible de 5-50 g/l y de manera más preferible de 5-20 g/l; el núcleo se compone de un líquido que no experimenta una transición de la fase líquida a la fase gaseosa a 38-100ºC, y se selecciona entre un grupo que se compone 5 de ácidos grasos saturados, ácidos grasos insaturados y un aceite yodado, y la cantidad del material de núcleo en el agente de intensificación es de 5-200 g/l, de manera preferible de 10-100 g/l, y de manera más preferible de 20-80 g/l.

En la anterior forma de realización del presente invento el material que forma membrana incluye: lípidos, tales como 10

3-sn-fosfatidilcolina, una sal de sodio de 1,2-dipalmitoil-sn-glicero-3-fosfatidilglicerol,

1,2-diestearoíl-sn-glicero-3-fosfatidilcolina,

1,2-dipalmitoíl-sn-glicero-3-fosfatidato de sodio,

1,2-dipalmitoíl-sn-glicero-3-fosfatidilcolina,

fosfatidilserina y fosfatidilserina hidrogenada, colesterol y glicolípidos; 15

sacáridos, que incluyen, por ejemplo, glucosa, fructosa, sacarosa, un almidón y sus productos de degradación, proteínas, tales como albúmina, globulina, fibrinógeno, fibrina, hemoglobina y los productos de degradación de proteínas vegetales y similares.

El material que forma membranas del agente de intensificación en forma de 20 partículas para un tratamiento por HIFU de acuerdo con el presente invento, es preferiblemente un biomaterial biocompatible y degradable, tal como un lípido, de manera tal que el agente de intensificación puede ser inyectado por vía intravenosa, transportado suavemente a través de la circulación sanguínea. y luego fagocitado rápidamente por los tejidos del cuerpo humano, que están llenos de células 25 reticuloendoteliales. Por lo tanto, una masa de agente de intensificación puede ser depositada en los tejidos del cuerpo humano en un cierto momento, cambiando en una manera significativa el entorno acústico del tejido diana. Por lo tanto, la capacidad de absorción de ultrasonidos del tejido puede ser aumentada de una manera significativa, la deposición de energía acústica en el tejido diana durante un tratamiento por HIFU 30 puede ser aumentada, y eventualmente se puede mejorar en gran manera la capacidad de un tratamiento clínico por HIFU para ablacionar células tumorales.

En la anterior forma de realización del presente invento, el medio acuoso es agua destilada, una solución salina fisiológica o una solución de glucosa. La concentración de la solución de glucosa puede ser hasta de 50 % (p/v = en 35

peso/volumen). Sin embargo, la solución de glucosa no se puede usar como el medio acuoso para el agente de intensificación en forma de partículas para un tratamiento por HIFU en pacientes diabéticos.

Cuando se usa un aceite como el material de núcleo, el agente de intensificación puede contener un agente emulsionante. El agente emulsionante se 5 selecciona típicamente entre un grupo que consiste en mono-ésteres con ácidos grasos de C16-18 de etilen glicol, monoésteres con ácidos grasos de C16-18 de di(etilen glicol) diésteres de ácidos grasos de C16-18 de di(etilen glicol), monoésteres con ácidos grasos de C16-18 de tri(etilen glicol), agentes emulsionantes a base de ésteres con ácidos grasos de sorbitán (del tipo Span), agentes emulsionantes a base de 10 polisorbatos (del tipo Tween), agentes emulsionantes a base de monolauratos de poli(etilen glicol), agentes emulsionantes a base de lauratos de poli(oxietileno), 3-sn-fosfatidilcholina (lecitina) y ácido cólico. La cantidad de agente emulsionante en el agente de intensificación es de 5-150 g/l. Además, el agente de intensificación puede contener también un agente estabilizador, tal como una carboximetil-celulosa sódica 15 (CMC-Na), una carboximetil-celulosa potásica, una carboxietil-celulosa sódica, una carboxietil-celulosa potásica, una carboxipropil-celulosa sódica, una carboxipropil-celulosa potásica y glicerol. La cantidad de la CMC-Na que está contenida en el agente de intensificación es de 0,01-10 g/l, de manera preferible de 0,05-0,6 g/l, y de manera más preferible de 0,1-0,3 g/l. La cantidad del glicerol que está contenido en el 20 agente de intensificación es de 5-100 g/l.

En una forma de realización más preferida, con el fin de aumentar la estabilidad del agente de intensificación, el agente de intensificación es ajustado a un pH de 7,0-9,0, de manera preferible de 7,5-8,5. Se pueden usar ácidos o bases inorgánicos/as u orgánicos/as para ajustar el valor del pH del agente de intensificación. 25

Adicionalmente, con el fin de hacer que el agente de intensificación en forma de partículas para un tratamiento por HIFU de acuerdo con el presente invento sea dirigido hacia un tejido o foco tumoral como diana, se pueden añadir al agente de intensificación unas sustancias que tienen una afinidad especifica para el tejido o foco tumoral, tal como un anticuerpo específico para tumores. 30

En otra forma de realización, el presente invento proporciona un método para preparar el agente de intensificación en forma de partículas para un tratamiento por HIFU. El método comprende:

(1) pesar y mezclar un material que forma membranas y un material de núcleo para que se obtengan 0,1-100 g/l de un material que forma membranas y 5-200 g/l de un material de núcleo, con el fin de formar una fase oleosa;

(2) añadir un medio acuoso a la fase oleosa preparada en la operación (1) hasta llegar a un volumen previamente determinado, y agitar la mezcla con el fin de 5 formar una emulsión gruesa;

(3) emulsionar la emulsión gruesa preparada en la operación (2) mediante sonicación (tratamiento por ultrasonidos) con una potencia de 300 W a 500 W durante 30 segundos hasta 3 minutos.

En el método para la preparación del agente de intensificación en forma de 10 partículas para un tratamiento por HIFU del presente invento, es preferible que el material que forma membranas y el material de núcleo se disuelvan plenamente por calentamiento para formar la fase oleosa en la operación (1). Y es más preferible que un agente de estabilización se pueda añadir a la mezcla antes de que el material que forma membranas y el material de núcleo se disuelvan completamente. El medio 15 acuoso en la operación (2) puede contener un agente emulsionante.

El presente invento está dirigido además a un método para aumentar la deposición de energía en el sitio diana durante el tratamiento por HIFU, realizándose que el método comprende administrar una dosificación efectiva del agente de intensificación en forma de partículas del presente invento por vía intravenosa (= IV) a 20 través de una instilación IV continua y rápida o una inyección de bolos a un paciente a las 0-24 h antes de aplicar un tratamiento por HIFU a un paciente. La dosificación efectiva antes mencionada varía con el tipo del tumor, el peso del paciente, el lugar del tumor, el volumen del tumor y similares. Sin embargo, un doctor en medicina o un farmacéutico puede determinar con facilidad la dosificación que sea apropiada para 25 diferentes pacientes. Por ejemplo, la dosificación puede ser seleccionada entre el intervalo de 0,01-5 ml/kg, de manera preferible 0,01-2,5 ml/kg.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DEL INVENTO

30

Ejemplo 1

Se mezclaron los siguientes materiales: 4 g de un aceite yodado para inyección (adquirido de Shanghai Chemical Reagent Company), 0,6 g de lecitina de yema de huevo para inyección (adquirida de Shanghai Chemical Reagent Company) y 1,25 g de glicerol para inyección (adquirido de Shanghai Chemical Reagent Company), y esta 35

mezcla se disolvió y formó una fase oleosa después de haber calentado a 70ºC. Un agua destilada que contenía 1 % (p/v = peso/volumen) del agente emulsionante F-68 (adquirido de Sigma Company) se añadió a la fase oleosa hasta llegar a un volumen final de 17,5 ml. La mezcla se agitó para obtener una emulsión gruesa. La emulsión gruesa, que había sido vertida dentro de un tubo en ebullición, se emulsionó por 5 sonicación con una potencia de 350 W durante 2 minutos. El resultante aceite yodado, emulsionado de manera uniforme, fue esterilizado a través de un vapor de agua circulante a 100ºC durante 30 minutos. El producto final tenía un pH de 7,5-8,5, un contenido de yodo de 0,13 g/ml, un tamaño de partículas de menos que 1 µm, y una presión osmótica de 350 mosm/kg de H2O. 10

Ejemplos 2 hasta 4

Los Ejemplos 2 a 4 se prepararon de acuerdo con el mismo método y los mismos procesos que se han descrito en el Ejemplo 1, excepto que el aceite yodado para inyección fue reemplazado por un aceite de soja para inyección como el material 15 de núcleo, y la lecitina de yema de huevo para inyección fue reemplazada por una lecitina como el material que forma membranas. El agente de intensificación en forma de partículas para un tratamiento por HIFU del presente invento se obtuvo de acuerdo con la formulación que se expone seguidamente en la Tabla 1. Los agentes de intensificación se obtuvieron como líquidos en emulsión de color blanco, que se 20 pueden administrar a animales y seres humanos por medio de una inyección intravenosa. Los parámetros de los productos se mostraron también en la Tabla 1.

Tabla 1

: Ejemplo 2 Ejemplo 3 Ejemplo 4

Concentración de aceite de soja para inyección en el agente de intensificación (p/v): 10 % 20 % 10 %

Cantidad de aceite de soja para inyección: 100 g 200 g 100 g

Cantidad de lecitina para inyección: 12 g 12 g 12 g

Cantidad de glicerol para inyección: 22 g 22 g 16,7 g

Volumen final después de que se hubo añadido el agua para inyección: 1.000 ml 1.000 ml 1.000 ml

pH (c a.): 8 8 8

Tamaño de partículas de la fase discontinua: 0,1-2 µm 1-5 µm 0,5-2 µm

Presión osmótica (mosm/kg de H2O): 300 350 310

Energía MJ (kcal): 4,6 8,4 12,6

(1.100): (2.000) (3.000)

Los ensayos con animales se presentan seguidamente para mostrar los efectos del agente de intensificación para un tratamiento por HIFU del presente invento en combinación con el uso de Dispositivos Terapéuticos para Tumores por HIFU.

5

Ensayo con animales 1. Uso combinado del agente de intensificación en forma de partículas para un tratamiento por HIFU que se ha preparado en el Ejemplo 3 y un Sistema Terapéutico por HIFU modelo JC.

Cincuenta conejos blancos de Nueva Zelanda (con una edad de aproximadamente 3 semanas) sin ninguna limitación en cuanto al sexo, que fueron 10 proporcionados por el Centro de Animales de Laboratorio de la Universidad de Chongqing de Ciencias Médicas, se dividieron por partes iguales en un Grupo A y un Grupo B. Los conejos en el Grupo A y en Grupo B pesaban 2,22 ± 0,21 kg y 2,24 ± 0,19 kg (P > 0,05) respectivamente.

Los conejos blancos de Nueva Zelanda fueron anestesiados por medio de una 15 inyección intramuscular, sujetados al lecho de tratamiento de un Sistema Terapéutico de Tumores por Ultrasonidos Enfocados de Alta Intensidad modelo JC fabricado por Chongqing Haifu (HIFU) Technology Co. Ltd., y luego se trataron con este Sistema. El Sistema Terapéutico de Tumores por Ultrasonidos Enfocados de Alta Intensidad modelo JC se compone de un generador de energía ajustable, un sistema de vigilancia 20 de ultrasonidos por el modo B, un transductor terapéutico, un sistema de control del movimiento mecánico, un lecho de tratamiento y un dispositivo de acoplamiento acústico. El transductor terapéutico del Sistema, con una frecuencia de trabajo de 1 MHz, un diámetro de 150 mm y una distancia focal de 150 mm, usando un agua desgasificada circulante patrón con un contenido de gas de no más que 3 ppm, puede 25 producir una región focal de 2,3 x 2,4 x 26 mm y suministrar una intensidad acústica media de 5.500 W/cm2.

Los hígados de los conejos fueron previamente escaneados mediante el escáner por el modo B del sistema terapéutico por HIFU. Se midieron dos rodajas con un intervalo de por lo menos 2 cm con una profundidad de exposición de 2,0 cm. Para 30 cada conejo del Grupo A, el lado izquierdo del hígado del conejo (el lóbulo izquierdo/central) fue considerado como el lóbulo testigo (al que se administró una solución salina fisiológica) y el lado derecho del hígado del conejo (el lóbulo derecho) fue considerado como el lóbulo experimental (al que se administró el agente de

intensificación para un tratamiento por HIFU que se había preparado en el Ejemplo 3, y también se denomina el lado del agente de intensificación). El lóbulo testigo y el lóbulo experimental fueron colocados inversamente en el Grupo B. La profundidad de exposición del tratamiento por HIFU (es decir, la distancia desde la superficie de la piel hasta el punto focal) era también de 2,0 cm. Después de que se escogieron las 5 rodajas de hígado, la solución salina fisiológica se suministró a través de la vena del borde de oreja de un conejo a razón de 50-60 gotas/min. Después de 20 minutos, el lado izquierdo del hígado de un conejo (Grupo A) o el lado derecho del hígado de un conejo (Grupo B) se expuso a HIFU mediando exposición a un único impulso o exposición a impulsos múltiples (longitud de línea: 1 cm, velocidad de escaneo 3 10 mm/s), y se registraron los cambios en la escala de grises y el período de tiempo de exposición en el sitio diana. Luego el punto focal del sistema terapéutico por HIFU fue movido hasta el lado opuesto. En vez de la solución salina fisiológica, el agente de intensificación para un tratamiento por HIFU, que se había preparado en el Ejemplo 3, se administró por vía intravenosa, siendo la velocidad de inyección y el período de 15 tiempo los mismos que en el caso del lóbulo testigo del hígado. Luego, el lado derecho del hígado de un conejo (Grupo A) o el lado izquierdo del hígado de un conejo (Grupo B) se expuso al HIFU. Los modos de tratamiento usados para ambos lados del hígado del mismo conejo fueron los mismos.

Los conejos fueron sacrificados y disecados a las 24 horas después de un 20 tratamiento por HIFU. Se midieron las dimensiones (longitud, anchura y espesor) de la zona de necrosis con coagulación de las lesiones de hígados de los conejos. El volumen de la necrosis con coagulación se calculó de acuerdo con la siguiente fórmula: V = 4/3 x ½ longitud x ½ anchura x ½ espesor. El EEF se calculó de acuerdo con la expresión EEF=Pt/V (J/mm3). Los EEFs fueron comparados entre y dentro del 25 Grupo A y del Grupo B. Una sustancia que hace disminuir grandemente el EEF del tejido diana después de su administración es más apropiada para ser usada como el agente de intensificación para un tratamiento por HIFU de acuerdo con el presente invento. Los resultados se muestran en la Tabla 2.

30

Tabla 2 EEF del lóbulo testigo y del lóbulo experimental

: Grupo A Grupo B Total Valor de P

Lóbulo testigo: 7,09 ± 4,11 6,67 ± 3,13 6,87 ± 3,60 > 0,5*

Lóbulo experimental: 2,73 ± 1,64 3,43 ± 2,07 3,10 ± 1,89 > 0,5*

Valor de P: < 0,001 < 0,001 < 0,001

Los resultados presentados en la Tabla 2 indican que no había diferencias notables entre los conejos en el Grupo A y los conejos en el Grupo B a los que se les había administrado una solución salina fisiológica, y también que no había diferencias notables entre los conejos en el Grupo A y los conejos en el Grupo B a los que se les había administrado el agente de intensificación en forma de partículas para un 5 tratamiento por HIFU que se había preparado en el Ejemplo 3. Sin embargo, cuando se compararon los resultados experimentales del lóbulo testigo con los del lóbulo experimental, no había diferencias significativas entre los lóbulos testigos y los lóbulos experimentales en el Grupo A o en el Grupo B. Cuando se combinan los resultados del Grupo y del Grupo B, podría observarse que el EEF del lóbulo experimental 10 disminuía en gran manera. De hecho, el EEF del lóbulo testigo que se administró juntamente con una solución salina fisiológica es mayor en un múltiplo de aproximadamente 2,22 que el EEF del lóbulo experimental.

Ensayo con animales 2 Uso combinado del aceite yodado emulsionado, que se había 15 preparado en el Ejemplo 1 y del Sistema Terapéutico por HIFU modelo JC.

Treinta conejos blancos de Nueva Zelanda, cada uno de los cuales pesaba aproximadamente 2 kg, que fueron proporcionados por el Centro de Animales de Laboratorio de la Universidad de Chongqing de Ciencias Médicas, se dividieron aleatoriamente en un grupo experimental y en un grupo testigo con 15 conejos para 20 cada grupo. Dos motas de exposición fueron introducidas por cada conejo. A los conejos en el grupo testigo se les administró una solución salina fisiológica (dosificación 2,5 ml/kg) mediante una inyección rápida a través de la vena del borde de oreja de un conejo. A los conejos en el grupo experimental se les administró el aceite yodado emulsionado que se había preparado en el Ejemplo 1 (dosificación 2,5 ml/kg) 25 por rápida inyección a través de la vena de borde de oreja de un conejo, seguido por anegamiento con 1 ml de una solución salina fisiológica, con el fin de asegurar que el aceite yodado emulsionado había entrado completamente dentro del cuerpo. Una hora más tarde, se usó un Sistema Terapéutico de Tumores por Ultrasonidos Enfocados de Alta intensidad modelo JC producido por Chongqing Haifu (HIFU) Technology Co. Ltd., 30 para irradiar los hígados de los conejos blancos en el grupo experimental y en el grupo testigo mediando exposición a un único impulso. La potencia para la exposición fue de 220 W; la frecuencia fue de 1,0 MHZ; la profundidad de exposición fue de 20 mm y la exposición fue detenida cuando se produjo una necrosis coagulativa. Los datos medidos fueron expresados por el valor medio ± SD (desviación típica), procesados 35

por el programa lógico estadístico software SPSS 10,0 para Windows usando ensayos con muestras independientes y emparejadas. Los datos enumerados fueron determinados usando el ensayo de chi al cuadrado (2). Las comparaciones entre el EEF del grupo testigo y el EEF del grupo experimental se mostraron en la Tabla 3.

5

Tabla 3 Comparaciones entre los EEF’s del grupo testigo y del grupo experimental

Grupo: N EEF (±s) (J/mm3)

Grupo testigo: 30 31,05 ± 2,68

Grupo experimental: 30 7,16 ± 1,38*

N se refiere a los números de las motas de exposición

* P < 0,001 cuando se compara con el grupo testigo.

Los resultados presentados en la Tabla 3 muestran que el aceite yodado 10 emulsionado que se había preparado en el Ejemplo 1 podría reducir en gran manera el nivel de EEF para causar lesiones del tejido hepático con un tratamiento por HIFU.

Ensayo con animales 3. Un estudio in vitro del agente de intensificación que se había preparado en el Ejemplo 3 15

Diez conejos blancos de Nueva Zelanda (con una edad de aproximadamente 3 meses) sin ninguna limitación en cuanto al sexo, que fueron proporcionados por el Centro de Animales de Laboratorio de la Universidad de Chongqing de Ciencias Médicas, se dividieron aleatoriamente en un grupo experimental (al que se le administró el agente de intensificación para un tratamiento por HIFU que se había 20 preparado en el Ejemplo 3) y un grupo testigo (al que se le administró una solución salina fisiológica). Los conejos en los dos grupos pesaban 2,40 ± 0,45 kg y 2,32 ± 0,08 kg (P > 0,5), respectivamente. Estos conejos se dejaron en ayunas durante 24 horas antes de los experimentos. Se usó el aparato terapéutico ginecológico por HIFU CZF-1 fabricado por Chongqing Haifu (HIFU) Technology Co. Ltd., para irradiar los hígados 25 de los conejos. El aparato terapéutico ginecológico HIFU CZF-1 se componía de una fuente de energía, un aplicador y agua circulante tal como se describe en la Patente China nº 01144259.X. Los parámetros de este ensayo fueron ajustados de la siguiente manera: potencia: 4,05 W; frecuencia: 11 MHz; e impulsos: 1.000 Hz.

Después de que los conejos blancos hubieron sido anestesiados por medio de 30 una inyección intramuscular, el agente de intensificación para el tratamiento por HIFU, que se había preparado en el Ejemplo 3, se suministró a través de la vena del borde

de oreja de un conejo, a los conejos en el grupo experimental a razón de 50-60 gotas/minuto durante 20 minutos y la solución salina fisiológica se suministró a los animales del grupo testigo a razón de 50-60 gotas/minuto durante 20 minutos.

Una hora después de la transfusión, el conejo se dejó en ayunas en un banco de laboratorio en posición supina. Para cada conejo se llevó a cabo la laparotomía con 5 una incisión de 4-5 cm en la sección central, y el hígado del conejo se dejó expuesto en la cavidad abdominal y se empujó ligeramente hacia fuera después de que la pared del abdomen hubo sido abierta capa por capa. Una o dos motas de exposición en cada lóbulo de hígado se introdujeron para cada duración de la exposición de 3 s, 6 s y 9 s. Los experimentos se llevaron a cabo usando los parámetros que antes se 10 mencionan después de que se hubieron introducido las motas de exposición. Después de que se hubieron generado las lesiones, el hígado del conejo fue colocado de retorno en la cavidad abdominal y la pared del abdomen fue suturada capa por capa.

Al día siguiente, los conejos fueron sacrificados con una anestesia en exceso. Los hígados se retiraron y fotografiaron. Las dimensiones de las lesiones fueron 15 medidas y se calculó el EEF. Todos los datos fueron expresados con el valor medio ± SD, procesados por el software estadístico SPSS 10,0 para Windows y por el ensayo de muestras independientes. La estadística era significativa cuando P era menor que 0,05. En este ensayo, 21 motas de exposición para cada duración de la exposición de 3 s, 6 s y 9 s y 63 (21 x 3) motas de exposición en total se obtuvieron en el grupo 20 testigo; 30 motas de exposición para cada duración de la exposición de 3 s, 6 s y 9 s y 90 (30 x 3) motas de exposición en total se obtuvieron en el grupo experimental. El EEF se calculó con la expresión antes mencionada y los resultados se muestran en la Tabla 4.

Tabla 4 El EEF del grupo testigo y del grupo experimental 25

: Duración de la exposición

n: 3 s 6 s 9 s

Grupo testigo: 21 0,2749 ± 0,2409 0,1783 ± 0,0733 0,1846 ± 0,0896

Grupo experimental: 30 0,1177 ± 0,0609 0,1367 ± 0,0613 0,1463 ± 0,069

Valor de P: <0,01 <0,05 >0,05

Los resultados presentados en la Tabla 4 muestran que los EEF para cada duración de la exposición de 3 s, 6 s y 9 s del grupo testigo fueron unos múltiplos de 2,34, 1,30 y 1,26 del valor de los EEF para cada duración de exposición de 3 s, 6 s y 9 s en el grupo experimental, respectivamente. De hecho, la media de los EEF de los 30 grupos testigos (3 s, 6 s y 9 s) es un múltiplo de 1,59 de la media de los EEF en los

grupos experimentales (3 s, 6 s y 9 s). Si no se consideraron los datos obtenidos en la duración de exposición de 9 s, en que la diferencia de los EEF entre el grupo testigo y el grupo experimental no era estadísticamente significativa, la media de los EEF en los grupos testigos (3 s y 6 s) es un múltiplo de 1,78 de la media de los EEF en los grupos experimentales (3 s y 6 s). 5

APLICABILIDAD INDUSTRIAL

El agente de intensificación en forma de partículas para un tratamiento por HIFU del presente invento puede cambiar en gran manera el entorno acústico del sitio diana y puede reducir la energía acústica necesaria para causar lesiones de un tejido 10 diana (tejido tumoral/no tumoral) por unidad de volumen del tejido durante un tratamiento por HIFU. Correspondientemente, unos tumores asentados profundamente y de gran tamaño pueden ser tratados con un tratamiento por HIFU de una manera más efectiva bajo una cierta potencia acústica sin dañar a los tejidos normales a lo largo de la trayectoria acústica. Resulta posible usar el agente de intensificación para 15 el tratamiento por HIFU del presente invento con el fin de tratar a un paciente con un tumor hepático que está bloqueado por las costillas, sin tener que retirar las costillas.

Claims

REIVINDICACIONES
1. Un agente de intensificación para su uso en un tratamiento por ultrasonidos enfocados de alta intensidad (HIFU), comprendiendo el agente de intensificación una fase discontinua que se compone de un material de núcleo 5 encapsulado por un material que forma membranas y una fase continua que se compone de un medio acuoso, en que la fase discontinua está dispersada uniformemente en la fase continua y el tamaño de partículas de la fase discontinua fluctúa entre 0,1 y 8 µm; la cantidad del material que forma membranas en el agente de intensificación es de 0,1-100 g/l; el material de núcleo se compone de un líquido 10 que no experimenta una transición desde la fase líquida a la gaseosa a 38-100ºC y se selecciona entre un grupo que se compone de un ácido graso saturado, un ácido graso insaturado y un aceite yodado, y la cantidad del material de núcleo en el agente de intensificación es de 5-200 g/l.
2. El agente de intensificación de acuerdo con la reivindicación 1, en el 15 que la fase discontinua tiene un tamaño de partículas que fluctúa entre 0,5 y 5 µm.
3. El agente de intensificación de acuerdo con la reivindicación 2, en el que la fase discontinua tiene un tamaño de partículas que fluctúa entre 2,5 y 5 µm.
4. El agente de intensificación de acuerdo con la reivindicación 1, en que el material que forma membranas consiste en una o más sustancias que se 20 seleccionan entre un grupo que se compone de lípidos, colesterol y glicolípidos.
5. El agente de intensificación de acuerdo con la reivindicación 4, en el que el material que forma membranas comprende un fosfolípido seleccionado entre un grupo que se compone de 3-sn-fosfatidilcolina,

una sal de sodio de 1,2-dipalmitoil-sn-glicero-3-fosfatidilglicerol, 25

1,2-diestearoíl-sn-glicero-3-fosfatidilcolina,

1,2-dipalmitoíl-sn-glicero-3-fofatidato de sodio,

1,2-dipalmitoíl-sn-glicero-3-fosfatidilcolina,

fosfatidilserina y fosfatidilserina hidrogenada.
6. El agente de intensificación de acuerdo con la reivindicación 1, en el 30 que la cantidad del material que forma membranas en el agente de intensificación es de 5-50 g/l.
7. El agente de intensificación de acuerdo con la reivindicación 6, en el que la cantidad del material que forma membranas en el agente de intensificación es de 5-20 g/l. 35
8. El agente de intensificación de acuerdo con la reivindicación 1, en el que el material de núcleo comprende aceite de soja.
9. El agente de intensificación de acuerdo con la reivindicación 1, en el que el material de núcleo comprende un aceite yodado.
10. El agente de intensificación de acuerdo con la reivindicación 1, 5 conteniendo el agente de intensificación un agente emulsionante en una cantidad de 5-50 g/l, en que el agente emulsionante se selecciona entre un grupo que consiste en monoésteres con ácidos grasos de C16-18 de etilen glicol, monoésteres con ácidos grasos de C16-18 de di(etilen glicol), diésteres con ácidos grasos de C16-18 de di(etilen glicol), monoésteres con ácidos grasos de C16-18 de tri(etilen glicol), ésteres con ácidos 10 grasos de sorbitán, polisorbatos, monolauratos de poli(etilen glicol), lauratos de poli(oxietileno), 3-sn-fosfatidilcolina, y ácido cólico.
11. El agente de intensificación de acuerdo con la reivindicación 1, en el que el medio acuoso comprende agua destilada, una solución salina fisiológica o una solución de glucosa. 15
12. El agente de intensificación de acuerdo con la reivindicación 1, en el que la cantidad del material de núcleo en el agente de intensificación es de 10-100 g/l.
13. El agente de intensificación de acuerdo con la reivindicación 12, en el que la cantidad del material de núcleo en el agente de intensificación es de 20-80 g/l.
14. El agente de intensificación de acuerdo con una cualquiera de las 20 reivindicaciones 1-13, comprendiendo el agente de intensificación un agente estabilizador que comprende una carboximetil-celulosa sódica, siendo de 0,01-10 g/l la cantidad de la carboximetil-celulosa sódica en el agente de intensificación.
15. El agente de intensificación de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-13, en que el agente de intensificación contiene un agente 25 estabilizador que comprende glicerol; y la cantidad del glicerol en el agente de intensificación es de 5-100 g/l.
16. Uso de una emulsión de lípidos, que se usa para preparar el agente de intensificación para un tratamiento por HIFU.
17. El uso de la emulsión de lípidos de acuerdo con la reivindicación 16, en 30 el que la emulsión de lípidos es una emulsión grasa.
18. El uso de la emulsión de lípidos de acuerdo con la reivindicación 16, en el que la emulsión de lípidos es un aceite yodado emulsionado.