ES2344738T3 - Derivados de isoxazol y su uso como inhibidores de la ciclooxigenasa. - Google Patents
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Abstract
Compuestos que tienen la siguiente fórmula general: **(Ver fórmula)** en la que: R es un alquilo C1-C5 lineal, ramificado, no sustituido; R1 es 5-cloro-2-furilo, R2 es fenilo.
Description
Derivados de isoxazol y su uso como inhibidores
de la ciclooxigenasa.
La expresión "fármacos antiinflamatorios no
esteroideos" (AINE) se refiere a una clase de fármacos que se ha
conocido durante mucho tiempo y que puede reducir la inflamación, el
dolor y la fiebre. La expresión "no esteroideo" distingue
estos fármacos de los corticosteroides con una actividad
antiinflamatoria, que son agentes con una actividad
antiinflamatoria más marcada, pero que presentan efectos secundarios
importantes y significativos. Los fármacos más conocidos y usados
que pertenecen a la clase de fármacos antiinflamatorios no
esteroideos (AINE), por ejemplo, son ácido acetilsalicílico
(Aspirina®) y los salicilatos correspondientes, ibuprofeno
(disponible actualmente en el mercado como Advil® y
Motrin®), naproxeno (disponible actualmente en el mercado
como Naprelan® y Aleve®) e indometacina (disponible
actualmente en el mercado como Indocin®).
Se ha determinado que estos fármacos actúan por
medio de un mecanismo de acción que bloquea la síntesis de
prostaglandina a través de la inhibición de la enzima ciclooxigenasa
(COX), también conocida como prostaglandina G/H sintasa (PGHS). A
través de este mecanismo de acción, los fármacos que pertenecen a la
clase de fármacos antiinflamatorios no esteroideos (AINE) muestran,
junto a la acción antiinflamatoria, efectos secundarios negativos
sobre el aparato gastrointestinal, puesto que la síntesis de
prostaglandinas está implicada en ambos procesos. Por tanto,
durante muchos años se creyó que era imposible obtener fármacos
antiinflamatorios no esteroideos (AINE) que no se caracterizaran
por efectos secundarios significativos sobre el sistema
gastrointestinal. Posteriormente, tras haber demostrado que la
enzima ciclooxigenasa (COX), que cataliza la conversión de ácido
araquidónico en prostaglandina y tromboxano, existe en dos
isoformas, conocidas como COX-1 y
COX-2, que se demostró que están codificadas por
dos genes diferentes, también se determinó que la forma indicada
como ciclooxigenasa-1 (COX-1) se
expresa prácticamente de manera constitutiva en todos los tejidos y
por tanto se indica como "constitutiva", mientras que la forma
ciclooxigenasa-2 (COX-2) se expresa
en respuesta a estímulos, por ejemplo de naturaleza inflamatoria, y
se indica como "inducida", aunque se conocen muchas excepciones
a la generalización proporcionada anteriormente.
En particular, la COX-1 de forma
"constitutiva" está implicada en la actividad del tubo
digestivo, mientras que la isoforma COX-2
"inducida" está implicada en el proceso inflamatorio.
Por tanto aparece claramente la necesidad de
desarrollar nuevos fármacos que inhiban selectivamente la
COX-2 de forma "inducida", implicada en el
proceso inflamatorio y cuyos fármacos no sean inhibidores, o al
menos no inhibidores selectivos, de sólo la COX-1
de forma "constitutiva", evitando así incluso efectos
secundarios adversos graves sobre el sistema gastrointestinal. Por
tanto, los inhibidores selectivos de la COX-2 tienen
una actividad farmacológica significativa como fármacos
antiinflamatorios no esteroideos para el tratamiento de síndromes
de dolor agudo y trastornos crónicos de naturaleza inflamatoria. Por
ejemplo, un inhibidor selectivo de la COX-2 tal
como rofecoxib, celecoxib (disponible actualmente en el mercado con
el nombre de Celebrex®) y valdecoxib (disponible actualmente en el
mercado con el nombre de Bextra®) se usan ventajosamente para el
tratamiento de artritis reumatoide, artrosis y para el tratamiento
de dolor agudo asociado, por ejemplo, con cirugía dental y con
dismenorrea primaria. Recientemente, rofecoxib, nombre comercial
Vioxx®, se retiró del mercado debido a datos que se derivaban de un
estudio llevado a cabo en pacientes que se trataron quienes
mostraron una incidencia de infarto de miocardio en comparación con
el grupo que no se trató. De hecho, este producto, aunque se
demostró una buena actividad antiinflamatoria y la ausencia de
efectos secundarios sobre el sistema gastrointestinal, mostró, en
base de estos estudios iniciales, efectos secundarios significativos
y graves sobre el sistema cardiovascular. Por este motivo se han
llevado a cabo varios estudios para evaluar cualquier efecto
secundario sobre el sistema cardiovascular de inhibidores selectivos
de la COX-2 como producto antiinflamatorio.
Por tanto parece claro que el uso de derivados
conocidos como inhibidores de la COX-2 implica una
serie de efectos secundarios peligrosos y constantes en el campo
cardiovascular, con respecto a los qué se han demostrado para los
fármacos antiinflamatorios no esteroideos que se han usado desde
hace mucho tiempo.
Por otro lado, estos compuestos siguen siendo
fármacos altamente eficaces para el tratamiento de estados
inflamatorios, especialmente de grado medio y grave y por tanto es
importante interpretar correctamente los efectos secundarios más
significativos sobre el sistema cardiovascular que se han revelado
recientemente.
Además, durante los estudios de los inhibidores
de la ciclooxigenasa, se demostró un papel significativo de la
COX-1 de forma constitutiva en el desarrollo de
patologías carcinogénicas, en particular en el desarrollo de
poliposis intestinal y en la aparición de carcinomas cutáneo y de
ovario. Paralelamente, también se observó que la
COX-1 desempeña un papel importante en la aparición,
por ejemplo tras una cirugía, de dolor medio y fuerte. Además, se
observó que la administración de inhibidores de la
COX-1 puede ser útil en la prevención y/o el
tratamiento de aterosclerosis. Por tanto es importante seleccionar e
identificar inhibidores de la ciclooxigenasa específicos incluso de
la forma COX-1 "constitutiva".
El documento WO2004/017968 da a conocer
derivados de isoxazol sustituido que tienen una acción
inmunomoduladora y/o que inhiben la liberación de citocinas,
adecuados para tratar enfermedades asociadas con el sistema
inmunitario.
El documento WO03/087062 da a conocer derivados
de 4-(heterociclil)-bencenosulfoximina, en los que
el anillo heterociclo puede ser entre otros un isoxazol, útiles en
el tratamiento de enfermedades inflamatorias, especialmente en las
que las prostaglandinas desempeñan un papel fisiopatológico.
El documento WO02/083655 da a conocer, entre
otros, derivados de isoxazol sustituido con aminosulfonilbenceno,
útiles para el tratamiento de la inflamación y de otros trastornos
mediados por la ciclooxigenasa-2.
Los documentos WO01/81332 y EP1251126 dan a
conocer compuestos de 2-fluorobencenosulfonilo en
los que el anillo de benceno puede estar sustituido con, entre
otros, un isoxazol, útiles para tratar trastornos mediados por la
ciclooxigenasa-2 tales como inflamación.
El documento WO 03/029230 da a conocer un método
para preparar compuestos de bencenosulfonilo, en particular un
método para la preparación de
4-[5-metil-3-fenilisoxazol-4-il]bencenosulfonamida
(valdecoxib), que es útil para tratar trastornos relacionados con
la COX-2. Los compuestos citados específicamente son
los siguientes: valdecoxib, parecoxib y parecoxib sódico.
El documento WO 96/25405 da a conocer isoxazol
sustituido para el tratamiento de la inflamación. Todos los
compuestos de fórmula (III) se preparan mediante métodos sintéticos
que son diferentes del proceso según se reivindica en la presente
invención, también incluido valdecoxib.
3,4-difenil-5-metilisoxazol
según D10 es sólo un producto intermedio de reacción y no se
aísla.
El documento EP 0 633 254 A1 da a conocer
derivados de isoxazol representados por la fórmula general (1) que
se notifican como inhibidores de la lipoxigenasa y
ciclooxigenasa.
J. Med. Chem. 2000, 43, 775-7
notifica la síntesis de valdecoxib,
3,4-difenil-5-hidroxi-5-metilisoxazolina.
En J. Med. Chem. 2004, 47,
4881-4889 se notifica la síntesis y la evaluación
farmacológica de varios diarilisoxazoles. En particular, da a
conocer la preparación de
3,4-difenil-5-metilisoxazol,
3,4-difenil-5-etilisoxazol,
3-(5-cloro-2-furil)-4-fenil-5-metilisoxazol
y valdecoxib mediante una metodología sintética novedosa.
El objeto de la presente invención es
proporcionar una clase de compuestos inhibidores de la
ciclooxigenasa (COX-1 y/o COX-2),
que muestran una actividad farmacológica y que por tanto se usan en
el tratamiento de la inflamación, en la prevención y el tratamiento
de carcinomas, en particular intestinal, de ovario y cutáneo, y en
el tratamiento de síndromes de dolor, en particular que resultan de
una cirugía. Otro objeto de la presente invención es proporcionar
un procedimiento para la preparación de una clase de compuestos
inhibidores de la ciclooxigenasa (COX-1 y/o
COX-2), que es simple, que consiste en varias etapas
limitadas y que puede aplicarse industrialmente.
Todavía otro objeto de la presente invención es
proporcionar una composición farmacéutica que comprende al menos un
inhibidor de la ciclooxigenasa (COX-1 y/o
COX-2), que se usa eficazmente en el tratamiento de
la inflamación, en la prevención y el tratamiento de carcinomas, en
particular intestinal, de ovario y cutáneo, y en el tratamiento del
dolor, en particular que resulta de una cirugía.
Estos y todavía otros objetos y ventajas
respectivas que se explicarán mejor mediante la siguiente
descripción, se logran mediante compuestos inhibidores de la
ciclooxigenasa (COX-1 y/o COX-2),
que tienen la siguiente fórmula general:
en la
que:
R es un alquilo C_{1}-C_{5}
lineal; ramificado, no sustituido;
R_{1} es
5-cloro-2-furilo;
R_{2} es fenilo.
Particularmente, R se elige como metilo
(CH_{3}) o etilo (CH_{3}CH_{2}). Los derivados con una fórmula
general (2) según la presente invención, se preparan generalmente
mediante reacción entre óxidos de arilnitrilos e iones enolatos
libres (a su vez obtenidos mediante reacción de metalación de
diversas alquilmetilcetonas con LDA en condiciones adecuadas),
seguida por una reacción de deshidratación/aromatización y si es
necesario por reacciones adicionales de derivatización/modificación
de los derivados así obtenidos.
La presente invención presenta varias ventajas.
Tal como se especifica mejor a continuación, los nuevos compuestos
según la invención demostraron que son altamente selectivos; la
síntesis de esta clase de compuestos según la invención permite que
se obtengan excelentes rendimientos; el procedimiento de
determinación del polimorfismo de TLR4 en sujetos que van a
tratarse con fármacos antiinflamatorios hace posible evaluar si los
inhibidores de la COX-2 pueden o no dar lugar a
fenómenos de toxicidad significativa que afecten a su aparato
cardiovascular. Además, esa determinación permite la evaluación de
la actividad real de los compuestos inhibidores de la
COX-1 y COX-2.
El procedimiento sintético para la preparación
de derivados de 3,4-diaril-isoxazol,
de fórmula general (2), se indica en el Esquema 1 mostrado a
continuación:
Esquema
1
Con referencia al esquema mostrado
anteriormente, el paso clave se refiere a la preparación del enolato
(21) deseado a partir de la cetona (20) correspondiente.
Teóricamente, la cetona puede conducir a la formación de dos
enolatos diferentes en presencia de una base. Según la presente
invención, en la etapa sintética indicada se usan condiciones de
control termodinámico preciso, en particular la reacción con LDA se
lleva a cabo a la temperatura de 0ºC, de manera que se genera
selectivamente el enolato deseado. Posteriormente se hace reaccionar
el enolato con diversos óxidos de arilnitrilos (22) para dar los
compuestos de
5-hidroxi-2-isoxazolina
(1). Estos compuestos se obtienen con buenos rendimientos y con
buenas razones diastereoisoméricas, tal como se muestran en la
tabla 1.
Las razones diastereoisoméricas se determinaron
mediante análisis espectroscópico de ^{1}H-RMN de
los productos brutos de la reacción, en el que el isómero 1 de
isoxazolina principal (cis) tiene un \delta_{CH3} más
apantallado que el del isómero minoritario (trans), tal como
se determinó en sistemas análogos. De hecho, el desplazamiento
químico \delta_{CH3} del isómero principal, por ejemplo el
cis 1a, está más próximo (1,27 ppm) al del de un compuesto
ya conocido,
cis-3,5-dimetil-4-fenil-5-hidroxi-2-isoxazolina
(C), de lo que lo está (del mismo compuesto ya conocido) del del
isómero minoritario trans. Por el contrario, el
\delta_{CH3} del isómero minoritario (trans 1a) está más
próximo al del de un compuesto ya conocido
trans-3-metil-4-fenil-5-hidroxi-2-isoxazolina
(D). El efecto del grupo fenilo es más evidente si se examina (B)
en donde no está presente, y el desplazamiento químico de metilo es
1,71 ppm, aproximadamente el mismo que (D) en el que metilo y
fenilo están en trans.
La reacción entre (22) cuando R_{1} se elige
como (c)
5-cloro-2-furilo e
iones enolatos de cetonas (21) también conduce a la formación de
cantidades apreciables del correspondiente isoxazol de fórmula (2),
gracias a las condiciones básicas usadas durante la reacción. Todo
lo anterior se simplifica en la tabla 2.
\vskip1.000000\baselineskip
Los compuestos de
5-hidroxi-isoxazolina (1) según la
invención se convierten entonces en los correspondientes compuestos
de isoxazol (2) en condiciones básicas. Los rendimientos y las
condiciones de reacción se muestran a continuación en la tabla
3.
\vskip1.000000\baselineskip
Los productos a los que se refiere la presente
invención y en particular los compuestos P6 demostraron ser
excelentes inhibidores de la COX-1.
A continuación se proporcionan los análisis
químicos de los compuestos mencionados anteriormente, obtenidos
según el método general descrito anteriormente.
Se añadió una disolución de Na_{2}CO_{3}
(2,24 mmoles) en agua (10 ml) a
3-aril-4-fenil-5-hidroxi-6-metil-2-isoxazolina
(1,12 mmoles) en THF (10 ml). Entonces se calentó a reflujo la
mezcla de reacción durante el tiempo indicado en la tabla 3. Se
separaron las dos fases y se extrajo la fase acuosa tres veces con
acetato de etilo. Se secaron las fases orgánicas combinadas sobre
Na_{2}SO_{4} anhidro y se evaporó a presión reducida el
disolvente dando los isoxazoles con un rendimiento del
50-80%.
Datos analíticos del producto P6 (2c)
3-(5-cloro-2-furil)-4-fenil-5-metilisoxazol
(2c).
Rendimiento del 60%, p.f.
71-73ºC, cristales amarillos. IR-TF
(KBr): 3147, 3051, 2927, 2848, 1633, 1520, 1435, 1412, 1236, 1204,
1134, 1020, 985, 940, 926, 897, 796, 775, 704 cm^{-1}.
^{1}H-RMN (CDCl_{3}, \delta): 2,36 (s, 3H);
6,11-6,12 (d, 1H, J = 3,57 Hz);
6,25-6,27 (d, 1H, J = 3,57 Hz);
7,25-7,30 (m, 2H, protones aromáticos);
7,40-7,47 (m, 3H, protones aromáticos),
^{13}C-RMN (75 MHz, CDCl_{3}, \delta): 11,41,
108,14, 113,87, 114,99, 128,58, 129,01, 129,63, 130,20, 138,59,
143,76, 152,42, 167,10, CG-EM (70 eV) m/z
(rel.int.): 261 [M(^{37}Cl)^{+}, 5], 259
[M(^{35}Cl)^{+}, 15], 219 (11), 217 (36), 154
(17), 127 (10), 115 (5), 102 (5), 89 (14), 77 (9), 63 (10), 51
(12), 43 (100), Anal. calculado para C_{14}H_{10}NO_{2}Cl: C,
64,75; H, 3,88; N, 5,39, hallado: C, 64,73; H, 3,85; N, 5,38.
Se sometieron a prueba los productos obtenidos
según la presente invención con una prueba in vitro en
sangre humana completa aislada tal como se describe en Patrignani P.
et al., J Pharmacol Exp Ther 1994;
271:1705-12, Patrignani P. et al., J Clin
Invest 1982;69:1366-1372; Patrono C. et al.,
Low dose aspirin and inhibition of thromboxane B2 production in
healthy subjects. Thromb. Res. 1980; 17: 317-27. Se
llevaron a cabo los ensayos para evaluar los efectos de los
sustituyentes y la actividad de los compuestos según la presente
invención como inhibidores de la actividad de
COX-1/COX-2, tomando valdecoxib
(nombre comercial actual Bextra®) como referencia.
Se reclutaron 11 voluntarios sanos (6 mujeres
con edades entre 25 y 29 años) para participar en el estudio tras
haber dado cada uno su aprobación por escrito. Los mismos
voluntarios habían participado previamente en otros estudios.
Se incubaron alícuotas de 1 ml de una muestra de
muestras de sangre venosa periférica aislada que contenían 10 UI de
heparina sódica en el laboratorio en presencia de LPS
(lipopolisacárido) (10 microg/ml) o solución salina durante 24
horas a 37ºC tal como se describe. Se suprimió la contribución de la
actividad de COX-1 plaquetaria tratando previamente
los sujetos con 300 mg de aspirina 48 horas antes de tomar muestras
de sangre. Se separó el plasma mediante centrifugación (10 minutos
a 2.000 r.p.m.) y se mantuvo a -70ºC hasta que se sometió a ensayo
para determinar la prostaglandina (PG) E_{2}, como índice de la
actividad de COX-2 monocítica inducida por LPS.
Se usaron in vitro muestras de sangre
venosa periférica aislada (extraídas de los mismos donantes cuando
no habían tomado ningún fármaco antiinflamatorio no esteroideo
durante las dos semanas anteriores al estudio). Se transfirieron
inmediatamente alícuotas de 1 ml de sangre completa aislada en tubos
de ensayo de vidrio y se mantuvieron a una temperatura de 37ºC
durante 1 hora. Se separó el suero mediante centrifugación (10 min.
a 3000 rpm) y se mantuvo a -70ºC hasta que se sometió a ensayo para
determinar el tromboxano (TX) B_{2}. Se midió la producción en
sangre completa de (TX) B_{2} como reflejo de la actividad de
COX-1 plaquetaria estimulada al máximo en respuesta
a la trombina formada de manera endógena.
Se disolvieron los compuestos
(0,005-150 mM) en DMSO y se pipetearon alícuotas de
2 microlitros de las disoluciones directamente en tubos de ensayo
dando concentraciones finales de 0,01-300 microM en
la sangre. Se incubaron desde 4 hasta 9 concentraciones diferentes
de cada compuesto con muestras de sangre completa aislada
heparinizada en presencia de LPS (10 microgramos/ml) durante 24
horas o con muestras de sangre completa aislada que se dejaron
coagular a 37ºC durante 1 hora, con el fin de examinar la
dependencia de concentración de la inhibición de
COX-2 frente a COX-1,
respectivamente.
Se midieron las concentraciones de PGE_{2} y
TXB_{2} mediante ensayos radioinmunológicos (Patrono C. et
al., Low dose aspirin and inhibition of thromboxane B2
production in healthy subjects. Thromb. Res. 1980; 17:
317-27; Ciabattoni G. et al. J Endocrinol
Invest 1979; 2:173-182). Se diluyeron muestras de
suero y plasma aislados en el diluyente convencional del ensayo
(tampón fosfato 0,02 M, pH 7,4) y se sometieron a ensayo en un
volumen de 1,5 ml a una dilución final de
1:50-1:30.000. Se usaron 4000 d.p.m. de
[^{3}H]-PGE_{2} o
[^{3}H]-TXB_{2} y anticuerpo
anti-PGE_{2} y anti-TXB_{2}
específico diluido 1:100.000 y 1:120.000, respectivamente. La
concentración detectable más baja era de 1-2 pg/ml
para ambos prostanoides.
Las muestras de sangre completa aislada
estimuladas por LPS, extraídas de sujetos sanos tratados con
aspirina 300 mg 48 h antes de tomar las muestras, produjeron 33
\pm 5,8 ng de PGE_{2} por ml de plasma (media \pm E.E.M., n =
13). La producción de TXB_{2} en la coagulación de muestras de
sangre completa aislada, obtenidas a partir de los mismos sujetos
en periodos sin consumo de aspirina, tuvo un promedio de 466 \pm
53 ng/ml (media \pm E.E.M., n = 13).
Tal como se muestra en las figuras 1 y 2, los
compuestos P6 y el valdecoxib de referencia inhibieron las
actividades de COX-1 plaquetaria estimulada por
trombina y COX-2 monocítica inducida por LPS de modo
dependiente de la concentración. Los valores de CI_{50} para la
inhibición de las actividades de COX-2 monocítica y
COX-1 plaquetaria se facilitan en la tabla 6.
Valdecoxib inhibe las actividades de
COX-1 plaquetaria y COX-2 monocítica
con los siguientes valores de CI_{50}: 27
(16,22-44,63) y 0,57 (0,4619-0,7056)
microM (intervalo del 95%).
El análisis de las curvas de
concentración-respuesta sigmoideas para la
inhibición de la COX-2 monocítica y la COX
plaquetaria por el compuesto P6, mostró que se produce la supresión
prácticamente completa (>90%) de la actividad de
COX-1 plaquetaria a concentraciones que no afectan a
la actividad de COX-2 monocítica (figura 2).
\vskip1.000000\baselineskip
Los inventores encontraron sorprendentemente un
papel significativo del receptor TLR4 (receptor tipo Toll 4) en la
aparición y evolución de la toxicidad que afecta al sistema
cardiovascular de sujetos tratados con inhibidores de la
COX-2.
Recientemente, estudios experimentales y
epidemiológicos han revelado un papel importante de TLR4 en la
evolución y desarrollo de aterosclerosis (Cook et al. Nature
Immunology 2004; 5:975-9). En particular, se ha
notificado una asociación entre la presencia de los polimorfismos
de TLR4 y una aterosclerosis reducida y también un riesgo más bajo
de acontecimientos coronarios agudos para los portadores de dicho
polimorfismo (Kiechl et al. New Engl J Med. 2002;
347:185-9; Edfelt et al. Eur Heart J 2004;
25: 1447-53; Ameziane et al 2003; 23:
61-4).
Tromboxano A_{2} y prostaciclina, que tal como
ya se ha dicho, representan los productos principales del
metabolismo del ácido araquidónico en las plaquetas y en las células
endoteliales, realizan un papel fundamental en la homeostasis
cardiovascular. En particular, el tromboxano A_{2} provoca
agregación plaquetaria, vasoconstricción y proliferación vascular,
mientras que la prostaciclina inhibe la agregación plaquetaria
inducida por muchos agonistas, la proliferación vascular de las
células de músculo liso y el tono vascular. Por tanto, mientras el
tromboxano A_{2} promueve el inicio y la evolución de la
aterogénesis, la prostaciclina la previene. Por tanto, los efectos
secundarios sobre el sistema cardiovascular provocados por la
administración de los inhibidores de la
ciclooxigenasa-2 (COX-2) se deberían
a la reducción de prostaciclina (que realiza un papel
ateroprotector), provocada por la inhibición de la
COX-2 que participa en y contribuye a la biosíntesis
de prostaciclina en el ser humano. La enzima COX-1,
la isoforma principal de la COX responsable de la biosíntesis del
tromboxano A_{2} (que tiene un efecto negativo sobre el sistema
vascular), que no se inhibe por los compuestos antiinflamatorios
que inhiben selectivamente la COX-2, no sufre
ninguna variación y mantiene los niveles habituales de tromboxano
A_{2}. Por tanto, el equilibrio entre el efecto ateroprotector y
antitrombótico de la prostaciclina (cuya biosíntesis depende
principalmente de la COX-2) y el efecto
"negativo" del tromboxano A_{2} (cuya biosíntesis depende
principalmente de la COX-1) se altera por los
inhibidores selectivos de la COX-2 en favor del
tromboxano A_{2}, con la consiguiente reducción del efecto
"protector" de la prostaciclina y el aumento del daño al
sistema cardiovascular.
Los inventores evaluaron la biosíntesis de
prostaciclina y de tromboxano en sujetos portadores de polimorfismo
de TLR4 (Asp299Gly y Thr399Ile) en comparación con sujetos de
"tipo natural" (WT, wild type) que no presentan dicho
polimorfismo, agrupados por edad, sexo y factores de riesgo
cardiovascular, en ausencia de tratamiento con Aspirina®.
De los resultados experimentales proporcionados
a continuación en detalle, se encontró sorprendentemente lo
siguiente.
En comparación con los sujetos de tipo natural,
en los sujetos que eran portadores de polimorfismos de TLR4, se
redujeron significativamente los niveles urinarios de
11-deshidro-TXB_{2} y de
2,3-dinor-6-ceto-PGF_{1\alpha},
índices sistémicos de la biosíntesis de tromboxano A_{2} y de
prostaciclina, respectivamente. Además, la razón entre la
biosíntesis de prostaciclina y de tromboxano A_{2} (razón de
prostaciclina/tromboxano) era significativamente superior en los
portadores de polimorfismo de TLR4 que en los sujetos de tipo
natural. Por tanto, en sujetos que son portadores de polimorfismo
de TLR4, la biosíntesis reducida de tromboxano plaquetario parece
contribuir a una mayor protección cardiovascular y a aterosclerosis
reducida, en comparación con los sujetos de tipo natural.
Se usó esta consideración como el punto de
partida para llevar a cabo un estudio que evaluaba el grado de
toxicidad potencial de inhibidores selectivos de la
COX-2 que afectan al sistema cardiovascular.
El tratamiento con rofecoxib provoca una
inhibición similar de la prostaciclina (aproximadamente del 60%) en
los dos grupos de pacientes y está asociado con una excreción
urinaria aumentada de
11-deshidro-TXB_{2} en portadores
de polimorfismos de TLR4, pero no en sujetos de tipo natural. Cuando
se tratan con inhibidores selectivos de la COX-2,
los sujetos de tipo natural sufren una reducción de la biosíntesis
de prostaciclina (dependiente de la COX-2) con una
consiguiente reducción de la actividad "protectora" con
respecto al sistema cardiovascular, normalmente llevada a cabo por
la prostaciclina tal como ya se dijo. Dado que son inhibidores
selectivos de la COX-2, la actividad de
COX-1 plaquetaria permanece más o menos sin cambios
y por tanto el nivel de tromboxano A_{2} in vivo permanece
sin cambios y el consiguiente efecto "negativo" sobre el
sistema cardiovascular. El resultado es una aparición moderada de
factores de riesgo para el sistema cardiovascular, facilitados por
la disminución de prostaciclina, sin una reducción significativa de
los niveles de tromboxano A_{2}.
Cuando se tratan con inhibidores selectivos de
la COX-2, los portadores de polimorfismos de TLR4
también experimentan una reducción de la biosíntesis de
prostaciclina (dependiente de la COX-2), pero
muestran un aumento sorprendente y contemporáneo de la producción
de tromboxano A_{2}. Este aumento es tan significativo que los
valores de tromboxano A_{2} pueden alcanzar, e incluso superar,
los niveles presentes normalmente en la población de tipo natural y
por tanto son tales que retornan a al menos las condiciones
habituales a los portadores de polimorfismos de TLR4 (quienes, tal
como ya se ha dicho, en ausencia de tratamiento, tienen niveles
inferiores de tromboxano A_{2} y por tanto representan un
fenotipo "cardioprotegido" con respecto a los sujetos WT).
Por tanto, la presencia de polimorfismo de TLR4
parece amplificar drásticamente las consecuencias de la inhibición
de prostaciclina vascular por los inhibidores selectivos de la
COX-2 sobre la función plaquetaria.
En la práctica, en sujetos que son portadores de
polimorfismo de TLR4 tratados con inhibidores selectivos de la
COX-2, el efecto moderado de toxicidad
cardiovascular potencial, que puede encontrarse en los sujetos WT
por los motivos indicados anteriormente, se amplifica enormemente,
gracias al aumento en el nivel de tromboxano A_{2} con respecto a
lo qué se observa en ausencia del tratamiento con inhibidores de la
COX-2 en los mismos portadores de polimorfismo de
TLR4, y por tanto da como resultado una toxicidad cardiovascular
potencial. Por tanto, mientras que los inhibidores selectivos de la
COX-2 pueden administrarse a sujetos WT con un
riesgo de complicaciones moderado y a cualquiera tasa aceptable
para el sistema cardiovascular, la administración de los mismos
compuestos a sujetos con polimorfismo de TLR4 implicaría un riesgo
extremadamente alto y probablemente inaceptable de daños para el
aparato cardiovascular. Por tanto, para estos sujetos
caracterizados, en ausencia de tratamiento con inhibidores de la
COX-2, por una excreción urinaria reducida de
11-deshidro-TXB2, la administración
de inhibidores selectivos de la COX-2 sería
desaconsejable, pero éste no sería el caso en sujetos WT, para
quienes los efectos beneficiosos de la actividad antiinflamatoria
podría ser superior a la toxicidad cardiovascular potencial.
Los resultados mostrados anteriormente se
obtuvieron en base de las siguientes evaluaciones.
El protocolo de estudio estuvo aprobado por el
Comité Ético de la Universidad de Chieti "G.d'Annunzio",
Facultad de Medicina.
Se obtuvo el consentimiento por escrito de todos
los sujetos sometidos a estudio.
Se examinaron 408 pacientes externos quienes
participaban en un programa para evaluar el riesgo cardiovascular
en el Departamento de Medicina Interna.
Se evalúo el genotipo de todos para determinar
el polimorfismo de TLR4 de Asp299Gly y Thr399Ile, según el método
de Lorenz et al. (Biotechniques 2001;
31:22-4). Se demostró que 26 sujetos eran portadores
de polimorfismo de TLR4.
En resumen, se amplificó con PCR el ADN extraído
de la sangre periférica usando dos pares específicos de cebador
para las regiones que contenían polimorfismos de Asp299Gly y
Thr399Ile:
Asp299Gly, directo
5'-gattagcatacttagactactacctccatg-3';
inverso
5'-gatcaacttctgaaaaagcattcccac-3';
Thr399Ile, directo
5'ggttgctgttctcaaagtgattttgggagaa-3'; inverso
5'acctgaagactggagagtgagttaaatgct-
Se digirieron los dos productos de PCR usando
las enzimas de restricción Nco I y Hinf I, respectivamente. Tras la
digestión, se colocaron las muestras en portaobjetos con gel de agar
al 3%. Para determinar el polimorfismo de Asp299Gly, una banda de
249 pb representó el alelo de tipo natural, mientras que una banda
de 226 pb mostró el alelo mutante. Para determinar el polimorfismo
de Thr399Ile, una banda de 406 pb representó el alelo de tipo
natural, mientras que una banda de 377 pb mostró el alelo
mutante.
Se calculó una frecuencia de alelo del 2,8% y
una tasa de porte del 6,3%. Se excluyeron siete sujetos del estudio
debido a que estaban en tratamiento con aspirina para
cadioprotección. Se subdividieron los 19 sujetos seleccionados tal
como sigue: 9 heterocigotos para Asp299Gly y Thr399Ile, 5
heterocigotos para Asp299Gly y "tipo natural" para Thr399Ile,
3 "tipo natural" para Asp299Gly y heterocigotos para Thr399Ile,
1 heterocigoto para Thr399Ile y homocigoto para Asp299Gly y 1
"tipo natural" para Asp299Gly y homocigoto para Thr399Ile. Se
compararon estos 19 sujetos con 19 sujetos que no eran portadores de
polimorfismo de TLR4, agrupados por edad, sexo y factores de riesgo
cardiovascular. Las características de los sujetos sometidos a
estudio se enumeran a continuación en la tabla 7.
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
Se estudiaron todos los sujetos por medio de
entrevistas habituales, examen clínico y análisis bioquímicos.
Se llevaron a cabo las evaluaciones bioquímicas
generales con métodos de laboratorio tradicionales. Se calculó el
colesterol LDL usando la fórmula de Friedewald. En el momento de las
evaluaciones, los sujetos no presentaron ninguna infección en
evolución o cualquier estado inflamatorio.
Para los 19 portadores de polimorfismo de TLR4 y
para los 19 portadores control de TLR4 de "tipo natural", se
extrajeron muestras durante la noche (desde las 8 p.m. hasta las 8
a.m.) para determinar, en muestras aisladas, los niveles de
11-deshidro-tromboxano B_{2}, uno
de los principales metabolitos enzimáticos del tromboxano A_{2}.
11-deshidro-tromboxano B_{2}
representa un índice de la biosíntesis sistémica "in
vivo" de tromboxano A_{2}. También se determinaron los
niveles urinarios de
2,3-dinor-6-ceto-prostaglandina
F_{1\alpha}, que es uno de los principales metabolitos
enzimáticos de la prostaciclina y representa un índice de su
biosíntesis sistémica "in vivo", y los valores de
8-iso-prostaglandina F_{2\alpha},
índice del estrés oxidativo "in vivo". También se
extrajeron muestras de sangre completa y se aislaron para evaluar
"in vitro" la actividad de COX-1
plaquetaria, según se determinó mediante la medición de tromboxano
B_{2} en suero, y de la actividad de COX-2
monocítica, determinada mediante la producción de PGE_{2} en
sangre completa estimulada con lipopolisacárido (Escherichia
coli) (10 \mug/ml) durante 24 horas, tal como se notifica en
Patrignani et al., J Pharmacol Exp ther
1994;271:1705-12.
Se trataron seis sujetos que eran portadores de
polimorfismo de TLR4 y 6 sujetos control de TLR4 de "tipo
natural" con rofecoxib (un inhibidor selectivo de la
COX-2) (nombre comercial VIOXX®) (25 mg al día, a
las 8 a.m.) durante 5 días consecutivos. Se excluyeron del estudio
sujetos con molestias de naturaleza hemorrágica, alergia a aspirina
o a otros fármacos antiinflamatorios no esteroideos (AINE) o con una
historia de trastornos gastrointestinales. Los sujetos se
abstuvieron de usar aspirina u otros fármacos antiinflamatorios no
esteroideos (AINE) durante al menos dos semanas antes del estudio.
Se tomaron las muestras de sangre para determinar la actividad de
COX-1 plaquetaria y la actividad de
COX-2 monocítica antes del tratamiento con el
fármaco y 12 horas tras la última administración (a las 8 a.m. en
el sexto día del estudio).
Se recogieron muestras de orina durante la noche
para evaluar la excreción urinaria de
11-deshidro-tromboxano B_{2} y de
2,3-dinor-6-ceto-PGF_{1\alpha}
antes del tratamiento con el fármaco y tras la última dosis de
rofecoxib.
Se completó el estudio antes de que Merck
retirara voluntariamente rofecoxib del mercado debido al aumento
significativo de la incidencia de efectos secundarios significativos
y graves a nivel cardiovascular (Fitzgerald GA. N Engl J Med
2004;351:1709-11).
\vskip1.000000\baselineskip
Se midieron los niveles de TXB_{2}, PGE_{2},
11-deshidro-TXB_{2},
2,3-dinor-6-ceto-PGF_{1\alpha}
y 8-iso-PGF_{2\alpha} con
técnicas radioinmunológicas validadas previamente (Patrono C,
Ciabattoni G, Pinca E, et al. Low dose aspirin and
inhibition of thromboxane B2 production in healthy subjects. Thromb
Res 1980;17:317-27. Patrignani P, Panara MR, Greco
A, et al. Biochemical and pharmacological characterization
of the cyclooxygenase activity of human blood prostaglandin
endoperoxide synthases. J Pharmacol Exp Ther
1994;271:1705-12. Ciabattoni G, Maclouf J, Catella
F, et al., Radioimmunoassay of
11-dehydrothromboxane B2 in human plasma and urine.
Biochim Biophys Acta 1987;918:293-7. Wang Z,
Ciabattoni G, Creminon C, et al. Immunological
characterization of urinary 8-epiprostaglandin F2
alpha excretion in man. J Pharmacol Exp Ther
1995;275:94-100).
Se determinaron los niveles de CD40L soluble, de
la quimiocina MCP-1 y de la molécula de adhesión
celular vascular (VCAM-1) en plasma tratado con
citrato mediante determinación por ELISA - ensayo por
inmunoabsorción ligado a enzimas (R & D System) según las
instrucciones del fabricante. Se determinó la concentración de
fibrinógeno en el plasma analizando su conversión enzimática en
fibrina. Se determinó la proteína C reactiva en el suero (CRP) con
el método nefelométrico (Behring).
\vskip1.000000\baselineskip
Todos los valores se facilitan como mediana e
intervalo, a menos que se indique lo contrario.
Se realizaron las comparaciones entre los grupos
con la prueba \chi^{2} y la prueba de
Mann-Whitney. Se determinaron las correlaciones con
la prueba de Spearman para rangos. Se indicó la significancia
estadística con P < 0,05. En el estudio farmacológico, la
hipótesis primaria era que rofecoxib (25 mg/día) provocaría una
reducción del 60% en la excreción urinaria de
2,3-dinor-6-ceto-PGF_{1\alpha}.
Si se asume un coeficiente de variación entre sujetos del 30% para
la excreción urinaria de
2,3-dinor-6-ceto-PGF_{1\alpha},
el criterio de valoración primario, en portadores de polimorfismos
de TLR4, 6 voluntarios deberían haber permitido que se encontrara
una diferencia del 62% en su medición con una potencia del 90%
basándose en una prueba de dos colas con valores de P inferiores a
un factor de error de 0,05 del primer tipo. Por tanto, se reclutaron
6 sujetos portadores de polimorfismo de TLR4 y 6 no portadores. Se
usó el software SPSS Inc (versión 11.5 para Windows) para todos los
análisis estadísticos.
Ahora se comentarán los resultados con
referencia a las figuras adjuntas, en las que:
- la figura 3 muestra los niveles de marcadores
biológicos de la inflamación en portadores de polimorfismo de
TLR4 y en portadores de TLR4 de "tipo natural".
Se evaluaron los niveles de VCAM-1 (A), fibrinógeno
(B), CD40L (C), quimiocina MCP-1 (D) y PCR sérica
(E). Se evalúo la excreción urinaria de
8-iso-prostaglandina F_{2\alpha},
un índice del estrés oxidativo "in vivo", en la recogida
de orina nocturna (desde las 8 p.m. hasta las 8 a.m.) (F). Se
notifican los datos como una media y un intervalo de confianza.
[*P = 0,008 para la comparación entre los portadores de
polimorfismo de TLR4 y de TLR4 de "tipo
natural"].
- la figura 4 se refiere a la biosíntesis de
prostaciclina y tromboxano A_{2} en portadores de polimorfismo de
TLR4 y en portadores de TLR4 de "tipo natural".
Diagrama de caja y bigotes de la excreción urinaria de
2,3-dinor-6-ceto-prostaglandina
F_{1\alpha} (A), uno de los principales metabolitos enzimáticos de
la prostaciclina que es un índice de su biosíntesis sistémica in
vivo, y 11-deshidro-tromboxano
B_{2} (B), uno de los principales metabolitos enzimáticos del
tromboxano A_{2} que es un índice de su biosíntesis sistémica
in vivo, y la razón de prostaciclina/tromboxano A_{2} (C),
en la recogida de orina durante la noche (desde las 8 p.m. hasta
las 8 a.m.) de 19 sujetos que eran portadores de polimorfismo de
TLR4 y 19 controles de "tipo natural". Se notifican los
datos como una media y un intervalo de confianza. (*P =
0,041, **P < 0,0001, P = 0,0061 para la comparación
entre los portadores de polimorfismo de TLR4 y de TLR4 de
"tipo natural"). Correlación entre
2,3-dinor-ceto-prostaglandina
F_{1\alpha} y
11-deshidro-tromboxano B_{2} en
portadores y no portadores de polimorfismo de TLR4 (D).
- la figura 5 muestra los efectos de rofecoxib
(25 mg al día durante 5 días consecutivos) sobre la biosíntesis
in vivo de prostaciclina y tromboxano en portadores de
polimorfismo de TLR4 (A) y en portadores de TLR4 de
"tipo natural" (B). Se notifican los datos como medias y
errores estándares. [*P = 0,0087, \NAKP = 0,041,
#P = 0,043 con respecto a los valores antes de tomar el
fármaco (previo al fármaco)].
Tal como se muestra en la figura
5A-E, los niveles circulantes de
VCAM-1 soluble en plasma, pero no de fibrinógeno,
de MCP-1, CD40L y CRP, eran significativamente
inferiores en portadores de polimorfismos de TLR4 que en el tipo
natural [473 (324-681) frente a 624
(260-1301) ng/ml, mediana (intervalo),
respectivamente, P = 0,008]. Además, se estudió la formación
de isoprostanos de F2 (determinada midiendo la excreción urinaria de
8-iso-PGF_{2\alpha}, un índice no
invasivo del estrés oxidativo in vivo) en los dos grupos de
sujetos. Tal como se muestra en la figura 5F, se encontraron
niveles comparables de la excreción urinaria de isoprostano de F2 en
portadores de polimorfismos de TLR4 y en el tipo natural.
Se determinó si los leucocitos de los portadores
de polimorfismos de TLR4 muestran un déficit de reconocimiento del
lipopolisacárido de Escherichia coli, evaluando la producción
de PGE_{2} en sangre completa estimulada con lipopolisacárido
(cf. Patrignani P, Panara MR, Greco A, et al. Biochemical and
pharmacological characterization of the cyclooxygenase activity of
human blood prostaglandin endoperoxide sinthases. J Pharmacol Exp
Ther 1994;271: 1705-12). La producción de PGE_{2}
no era significativamente diferente en los portadores de
polimorfismos de TLR4 y en el tipo natural [22
(6-78) frente a 33 (12-174) ng/ml,
respectivamente, P = 0,328] (no mostrado).
Se determinó la biosíntesis de prostaciclina y
de tromboxano in vivo midiendo los niveles urinarios de
2,3-dinor-6-ceto-PGF_{1\alpha}
y de 11-deshidro-TXB_{2},
respectivamente. La excreción urinaria de
2,3-dinor-6-ceto-PGF_{1\alpha}
y 11-deshidro-TXB_{2} era
significativamente inferior en portadores de polimorfismos de TLR4
que en sujetos de tipo natural [122 (50-577) frente
a 188 (86-436) pg/mg de creatinina, respectivamente,
P = 0,041] (figura 6A).
Igualmente, la excreción urinaria de
11-deshidro-TXB_{2} era
significativamente inferior en portadores de polimorfismos de
TLR4 que en sujetos de tipo natural [174
(63-462) frente a 540 (211-836)
pg/mg de creatinina, respectivamente, P < 0,0001] (figura
6B).
Con el fin de excluir un defecto de la
COX-1 plaquetaria en portadores de polimorfismos de
TLR4, lo que podía haber dado como resultado una biosíntesis
reducida de tromboxano A_{2} in vivo, se determinó
la producción de TXB_{2} en sangre completa que se dejó coagular.
Los niveles de TXB_{2} en suero no presentaron una diferencia
estadísticamente significativa en los dos grupos [1,5
(0,6-2,1) frente a 1,6 (0,8-2,9)
ng/10^{8} plaquetas, respectivamente, P = 0,157] (no
mostrado).
La razón de biosíntesis de
prostaciclina/tromboxano A_{2} era significativamente superior en
los portadores de polimorfismos de TLR4 que en los sujetos
de tipo natural [0,8 (0,3-2,2) frente a 0,5
(0,11-1,1), respectivamente, P = 0,006]
(figura 6C). Además, se encontró una correlación estadísticamente
significativa entre la excreción urinaria de
2,3-dinor-6-ceto-PGF_{1\alpha}
y 11-deshidro-TXB_{2} en
portadores de polimorfismos de TLR4 pero no en sujetos de
tipo natural [r_{s} = 0,665, n = 38, P = 0,002 frente a r_{s} =
-0,07547, n = 38, P = 0,7588, respectivamente] (figura 6D).
Se administró rofecoxib (VIOXX®), un inhibidor
selectivo de la COX-2, en una dosis de 25 mg al día,
durante 5 días consecutivos a 6 portadores y no portadores del
polimorfismo genético de TLR4. Se evaluaron los efectos de
rofecoxib sobre la actividad de COX-1 plaquetaria
(evaluando la producción de TXB_{2} en suero tal como se describe
en Patrono et al., Thromb Res 1980;17:317-27)
y sobre la actividad de COX-2 monocítica (midiendo
la producción de PGE_{2} en sangre completa estimulada con LPS,
tal como se describe en Patrignani et al., J Pharmacol Exp
Ther 1994;271:1705-12). En portadores y no
portadores de polimorfismo de TLR4, la administración de rofecoxib
no influye significativamente en la actividad de
COX-1 plaquetaria [-11 (desde 0 hasta -57) frente
al -10 (desde 0 hasta -10) % de variación frente a valores de
tratamiento previo, respectivamente, P = 0,489], mientras
que provoca una profunda inhibición de la actividad de
COX-2 monocítica ex vivo [-94 (desde -77
hasta -98) frente al -85 (desde -69 hasta -97) % de inhibición,
respectivamente, P = 0,589] (tabla 8). Rofecoxib provoca una
inhibición selectiva de la actividad de la
ciclooxigenasa-2 en los dos grupos de sujetos.
Se evaluaron los efectos de rofecoxib sobre la
biosíntesis de prostaciclina sistémica y de tromboxano A_{2}, tal
como se muestra en la figura 7 y en la tabla 8, rofecoxib provoca
una inhibición similar de la excreción urinaria de
2,3-dinor-6-ceto
PGF_{1\alpha} [-64 (desde -42 hasta -72) frente al -61 (desde -35
hasta -83) %, respectivamente, P = 0,818] en los dos grupos,
que estaba asociada con una excreción urinaria aumentada de
11-deshidro-TXB_{2} en portadores
de polimorfismos de TLR4 pero no en los sujetos de "tipo
natural" [174 (136-354) frente al 71
(67-84) % de valores previos al fármaco,
respectivamente, P = 0,002] (tabla 8).
Tal como ya se ha dicho, en ausencia de
tratamiento con inhibidores de la COX-2, los sujetos
con polimorfismos de TLR4 de Asp299Gly y Thr399Ile muestran una
disminución de la aparición de aterosclerosis y un riesgo reducido
de acontecimientos coronarios agudos. A partir de los estudios
llevados a cabo, se observó que la inhibición por rofecoxib de la
biosíntesis de prostaciclina dependiente de COX-2
(aproximadamente del 60%) está asociada con una excreción urinaria
aumentada de 11-deshidro-TXB_{2}
en portadores de polimorfismos de TLR4 genéticos pero no sujetos de
"tipo natural", es decir en no portadores de polimorfismo. Los
resultados anteriores permiten concluir que el polimorfismo de TLR4
aumenta las consecuencias de la inhibición de prostaciclina vascular
sobre la función plaquetaria por los inhibidores de la
ciclooxigenasa-2. La administración de inhibidores
de la ciclooxigenasa-2 en estos sujetos, portadores
de polimorfismos de TLR4, transforma el fenotipo de protección
cardiovascular en un fenotipo apreciablemente expuesto que puede
conducir a la aceleración de la aterogénesis y a una respuesta
trombótica exagerada tras la ruptura de la placa
aterosclerótica.
Por tanto, los resultados anteriores indican la
posibilidad de identificar y seleccionar los sujetos (es decir
portadores de polimorfismos de TLR4) que pueden sufrir un daño grave
a partir del tratamiento con inhibidores selectivos de la
COX-2, con las mismas condiciones iniciales de los
sujetos y condiciones de tratamiento. Por tanto, en estos sujetos
que son portadores de polimorfismo de TLR4, el tratamiento con
fármacos inhibidores de la ciclooxigenasa-2
antiinflamatorios puede provocar efectos secundarios graves en el
campo cardiovascular y por tanto ocasionar graves problemas de
toxicidad.
Por tanto, en consideración de lo anterior, la
presente invención proporciona un procedimiento para determinar el
grado de toxicidad potencial de compuestos que son al menos
inhibidores de la ciclooxigenasa-2
(COX-2), y posiblemente de compuestos que inhiben
tanto la ciclooxigenasa-2 como la
ciclooxigenasa-1, que comprende una etapa de
determinación de la posible presencia de polimorfismo de TLR4
genético en los sujetos que van a tratarse con fármacos basándose
en los compuestos inhibidores de la COX-2
mencionados anteriormente.
Más en particular dicho polimorfismo es un
polimorfismo de TLR4 genético (Asp299Gly y/o Thr399Ile) que se
determina "in vitro" por medio de la amplificación por
PCR usando dos pares de cebadores para las regiones que contienen
los polimorfismos de Asp299Gly y Thr399Ile.
Los portadores del polimorfismo son los sujetos
para quienes la toxicidad de dichos compuestos inhibidores de la
COX-2 es mayor. Esto da como resultado el uso de
compuestos que inhiben al menos la ciclooxigenasa-2
(COX-2) como fármacos antiinflamatorios sólo para
sujetos sin polimorfismo de TLR4 genético (Asp299Gly y/o
Thr399Ile). Dichos compuestos se eligen por ejemplo entre: rofecoxib
(VIOXX®), celecoxib (Celebrex®), valdecoxib (Bextra®) y lumiracoxib
(Prexige®).
Claims (10)
1. Compuestos que tienen la siguiente fórmula
general:
en la
que:
R es un alquilo C_{1}-C_{5}
lineal, ramificado, no sustituido;
R_{1} es
5-cloro-2-furilo,
R_{2} es fenilo.
\vskip1.000000\baselineskip
2. Compuestos según la reivindicación 1,
caracterizados porque
R es un alquilo C_{1}-C_{5}
lineal.
\vskip1.000000\baselineskip
3. Compuestos según la reivindicación 2,
caracterizados porque R se elige como metilo (CH_{3}) o
etilo (CH_{3}CH_{2}).
4. Compuestos según la reivindicación 3,
caracterizados porque R se elige como metilo (CH_{3}).
5. Uso de los compuestos según las
reivindicaciones 1 a 4, para la fabricación de un medicamento como
inhibidor de la COX-1/COX-2 para el
tratamiento de síndromes inflamatorios, en la prevención y el
tratamiento de carcinomas, en particular intestinal, de ovario y
cutáneo, y en el tratamiento del dolor, en particular que se deriva
de una cirugía.
6. Uso del compuesto
3-(5-clorofuran-2-il)-4-fenil-5-metilisoxazol
(P6), según la reivindicación 5, para la fabricación de un
medicamento como inhibidor de la COX-1 para el
tratamiento de síndromes inflamatorios, en la prevención y el
tratamiento de carcinomas, en particular intestinal, de ovario y
cutáneo, y en el tratamiento del dolor, en particular que se deriva
de una cirugía.
7. Uso de los compuestos según las
reivindicaciones 5 ó 6, para la preparación de un medicamento para
el tratamiento de síndromes inflamatorios, en la prevención y el
tratamiento de carcinomas, en particular intestinal, de ovario y
cutáneo, y en el tratamiento de dolores, en particular que se
derivan de una cirugía.
8. Compuesto
3-(5-clorofuran-2-il)-4-fenil-5-metilisoxazol
(P6), para el uso como medicamento como inhibidor de la
COX-1 para el tratamiento de síndromes
inflamatorios, en la prevención y el tratamiento de carcinomas, en
particular intestinal, de ovario y cutáneo, y en el tratamiento del
dolor, en particular que se deriva de una cirugía.
9. Composición farmacéutica que comprende al
menos un compuesto según las reivindicaciones 1 a 4, en combinación
con al menos un portador farmacéuticamente aceptable, para el
tratamiento de síndromes inflamatorios, en la prevención y el
tratamiento de carcinomas, en particular intestinal, de ovario y
cutáneo, y en el tratamiento del dolor, en particular que se deriva
de una cirugía.
10. Uso de los compuestos según las
reivindicaciones 5 ó 6, para la preparación de un medicamento para
la prevención y/o el tratamiento de aterosclerosis.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| ITMI04A0019 | 2004-01-12 | ||
| IT000019A ITMI20040019A1 (it) | 2004-01-12 | 2004-01-12 | Derivati isossazolici e loro impiego come inibitori della ciclossigenasi |
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| ES2344738T3 true ES2344738T3 (es) | 2010-09-06 |
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Family Applications (1)
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