ES2331448B1 - Complejos de albumina con acidos grasos monoinsaturados omega-9 para el tratamiento de lesiones medulares. - Google Patents
Complejos de albumina con acidos grasos monoinsaturados omega-9 para el tratamiento de lesiones medulares.Info
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Abstract
Complejos de albúmina con ácidos grasos
monoinsaturados omega-9 para el tratamiento de
lesiones medulares.
La invención está relacionada con la utilización
de un complejo de albúmina con un ácido graso insaturado
omega-9 para el tratamiento de lesiones medulares y
dolencias o trastornos derivados de las mismas y la promoción de la
recuperación motora tras una lesión medular.
Description
Complejos de albúmina con ácidos grasos
monoinsaturados omega-9 para el tratamiento de
lesiones medulares.
La invención está relacionada con la utilización
de un complejo de albúmina y al menos un ácido graso insaturado
omega-9 para el tratamiento de lesiones
medulares.
Aproximadamente 300.000 personas en Europa
padecen lesión medular [Finnerup, N.B. y Jensen, T.S. (2004)
Spinal cord injury pain-mechanisms and treatment.
Eur. J. Neurol. 11:73-82], la mayoría de ellos
con síntomas devastadores, no sólo por la disminución de la
capacidad motora voluntaria, sino también por el desarrollo del
dolor neuropático y la espasticidad, que son dos trastornos
fisiopatológicos que impactan directamente en la calidad de vida
del paciente. La dificultad en el tratamiento de las
fisiopatologías después de una LESIÓN MEDULAR se debe en parte, a
los múltiples mecanismos iniciados después del daño en el sistema
nervioso central, incluyendo la excitotoxicidad, la oxidación, la
neuroinflamación [Schwab, M.E. and Bartholdi, D. (1996)
Degeneration and regeneration of axons in the lesioned spinal
cord; Physiol. Rev. 76:319-370; Hagg, T. and
Oudega, M. (2006) Degenerative and spontaneous regenerative
processes after spinal cord injury; J. Neurotrauma
23:264-280] y sobre todo a la importancia de
aplicar un tratamiento durante las primeras horas después de la
lesión [King et al., (2006) Omega-3 fatty
acids improve recovery, whereas omega-6 fatty acids
worsen outcome, after spinal cord injury in the adult rat; J.
Neurosci. 26:4672-4680]. En muchos casos la
única esperanza del paciente es una recuperación motora
rudimentaria mediante un entrenamiento después de la lesión medular
parcial.
Uno de los síntomas más importantes que se
producen después de la lesión medular es la pérdida, parcial o
completa (dependiendo del grado y nivel del trauma), del movimiento
voluntario. A esta pérdida le sigue una fase de "shock" inicial
y después existe una fase sub-aguda en la que se da
una recuperación limitada llamada "espontánea" [Hiersemenzel,
L.P. et al. (2000) From spinal shock to spasticity:
neuronal adaptations to a spinal cord injury; Neurology
54:1574-1582; Dietz, V. y Colombo, G. (2004)
Recovery from spinal cord injury-underlying
mechanisms and efficacy of rehabilitation; Acta Neurochir.
Suppl. 89:95-100]. La pérdida de la función
motora se refleja en la disrupción de las vías descendentes motoras
y en una fase de "shock" de los circuitos medulares por debajo
de la lesión medular, caracterizada por la neuroinflamación y
formación de edema.
También el dolor neuropático y la espasticidad
son síntomas molestos e incapacitantes asociados con la lesión
medular, que interfieren directamente sobre la rehabilitación del
paciente y su reincorporación a la comunidad, debido a un
empeoramiento progresivo en su calidad de vida [Adams, M.M. y
Hicks, A.L. (2005) Spasticity after spinal cord injury; Spinal
Cord 43:577-586; Finnerup, N.B. y Jensen, T.S.
(2004) Spinal cord injury pain-mechanisms and
treatment; Eur. J. Neurol. 11:73-82]. En Europa
se calcula que 200.000 personas con lesión medular padecen de dolor
neuropático y espasticidad [Finnerup y Jensen (2004); Skold, C.
et al. (1999) Spasticity after traumatic spinal cord
injury: nature, severity, and location; Arch. Phys. Med.
Rehabil. 80:1548-1557]. Además algunos
pacientes con dolor neuropático también padecen de espasmos
dolorosos [Finnerup et al. (2003)], sugiriendo el desarrollo
en paralelo de mecanismos fisiopatológicos comunes. Debido a la
heterogeneidad de los síntomas y signos que caracterizan tanto el
dolor neuropático como la espasticidad, su diagnóstico es
complicado, siendo necesario el desarrollo de protocolos basados en
mecanismos específicos, [(Adams y Hicks (2005); Finnerup y Jensen,
(2004)] como el análisis de la hiperexcitabilidad por debajo del
nivel medular y la disfunción de vías descendentes
inhibitorias.
Un análisis electrofisiológico de la
sensibilización central a nivel medular y la disfunción de las vías
descendentes inhibitorias es clave para la medición de los
mecanismos fisiopatológicos implicados en el desarrollo del dolor
neuropático y la espasticidad después de una lesión medular. Un
aumento en la sensibilización central se ha identificado en
pacientes con dolor neuropático o espasticidad [Eide, P.K. et
al. (1995) Central dysesthesia pain after traumatic spinal
cord injury is dependent on
N-methyl-D-aspartate
receptor activation; Neurosurgery 37:1080-1087;
Eide, P.K. et al. (1996) Somatosensory findings in
patients with spinal cord injury and central dysaesthesia pain; J.
Neurol. Neurosurg. Psychiatry 60:411-415;
Defrin, R. et al. (2001) Characterization of chronic pain
and somatosensory function in spinal cord injury subjects; Pain
89:253-263; Finnerup et al.; Hornby, T.G.
et al. (2006) Temporal facilitation of spastic stretch
reflexes following human spinal cord injury; J. Physiol.
571:593-604] y en modelos experimentales
[Gonzalez-Valdizan, E. et al. (2007)
Unilateral haemotoxic spinal cord injury in the rat leads to
chronic bilateral reflex plasticity and central sensitization, en:
Ab. Cam. Pain Meeting; Bennett et al. (2004) Spastic
long-lasting reflexes in the awake rat after sacral
spinal cord injury; J. Neurophysiol.
91:2247-2258.] utilizando la técnica
traslacional de la sumación temporal de reflejos cutáneos. Además,
se ha observado que la capacidad de las vías descendentes
neuronales de inhibir estímulos nocivos por debajo de una lesión
medular está mermada en pacientes con lesiones medulares
[Roby-Brami, A. et al. (1987) An
electrophysiological investigation into the
pain-relieving effects of heterotopic nociceptive
stimuli. Probable involvement of a supraspinal loop. Brain 110
(Pt 6):1497-1508].
La eficacia de los tratamientos farmacológicos
convencionales para el tratamiento del dolor neuropático [Finnerup
y Jensen (2004); Hulsebosch, C.E. (2005) From discovery to
clinical trials: treatment strategies for central neuropathic pain
after spinal cord injury; Curr. Pharm. Des.
11:1411-1420] y la espasticidad [Adams y Hicks
(2005)] es limitada, paliativo y, frecuentemente, dichos
tratamientos están asociados con efectos secundarios significativos
[Taricco, M. et al. (2006) Pharmacological interventions
for spasticity following spinal cord injury: results of a Cochrane
systematic review; Eura. Medicophys. 42:5-15],
como por ejemplo, somnolencia, fatiga muscular y efectos
psicológicos/cognitivos adversos.
Se han empleado distintas estrategias
farmacológicas para inhibir el desarrollo de la sensibilización
central, como por ejemplo la aplicación de antagonistas de los
receptores de glutamato [Eide, P.K. et al. (1995) Central
dysesthesia pain after traumatic spinal cord injury is dependent on
N-methyl-D-aspartate
receptor activation. Neurosurgery 37:1080-1087]
o re-establecer la acción de las vías inhibitorias
dañadas con la administración de agonistas serotoninérgicos
[Colpaert, F.C. (2004) High-efficacy
5-HT1A receptor activation causes a
curative-like action on allodynia in rats with
spinal cord injury. Eur. J. Pharmacol.
497:29-33], aunque ambos tratamientos conllevan
efectos secundarios importantes. Por lo tanto, un tratamiento del
dolor neuropático o espasticidad eficaz se debe basar en el
re-establecimiento de la función de los sistemas
inhibitorios descendentes, con terapias nuevas enfocadas a la
neuroprotección o neuroregeneración después de la lesión medular, y
sin efectos secundarios importantes.
En los últimos años varios estudios en animales
han demostrado efectos esperanzadores con la administración de
tratamientos experimentales sobre la neuroprotección y la
neuroregeneración, y la protección y potenciación funcional de las
vías neuronales ilesas después de lesión medular [Bradbury, E.J. y
McMahon, S.B. (2006) Spinal cord repair strategies: why do they
work?, Nat. Rev. Neurosci. 7:644-653]. Aunque
muy pocos tratamientos neuro-restaurativos han
entrado en la fase II de ensayos clínicos, la mayoría de ellos
están basados en la neuro-rehabilitación. Además,
existen iniciativas internacionales para avanzar la investigación
en este campo [Ramer, M.S. et al. (2000) Progress in
spinal cord research - a refined strategy for the International
Spinal Research Trust; Spinal Cord 38:449-472;
Kakulas, B.A. (2004) Neuropathology: the foundation for new
treatments in spinal cord injury; Spinal Cord
42:549-563 y Dietz, V. y Curt, A. (2006)
Neurological aspects of spinal-cord repair:
promises and challenges; Lancet Neurol.
5:688-694]. Una de las dianas prioritarias es la
neuroprotección o neuroregeneración de las vías descendentes
después de una lesión medular incompleta. La recuperación funcional
de los sistemas descendentes puede tener un efecto directo
potenciando la recuperación espontánea del movimiento voluntario
[Deumens, R. et al. (2005) Regeneration of descending
axon tracts after spinal cord injury; Prog. Neurobiol.
77:57-89 y Raineteau, O. y Schwab, M.E. (2001)
Plasticity of motor systems after incomplete spinal cord injury;
Nat. Rev. Neurosci. 2:263-273] y, más importante
aún, un efecto terapéutico sobre el dolor neuropático y la
espasticidad después de la lesión medular.
La solicitud de patente internacional WO96/04001
describe complejos de moléculas biológicamente activas como la
albúmina y ácidos grasos omega-3 para transportar
agentes biológicos a los tejidos del sistema nervioso para tratar
dolencias del sistema nervioso central.
En Tabernero et al, J. Neurochem.,
2004, 88, 1041 se describen ensayos in vitro
sobre el papel del ácido oléico en la diferenciación dentrítica. En
J. Neurochem., 2001, 79, 606, se describen
ensayos in vitro en donde se demuestra que la albúmina es
capaz de potenciar la síntesis de ácido oléico por parte de los
astrocitos.
Más importantes son los trabajos recientes de
Cain et al (Cain et al, J. Neurosci.
Research., 2007, 85:1558-1567) en donde
se muestra mediante experimentos in vivo como la BSA mejora
la recuperación de lesiones medulares. Sin embargo el papel de los
ácidos grasos monoinsaturados omega-9 en el
tratamiento de lesiones medulares ha quedado descartado por los
trabajos in vivo de King et al. (The Journal of
Neuroscience 2006, \nc{26}:4672-4680),
en donde los autores observaron que los ácidos grasos
poli-insaturados omega-3 ejercieron
un efecto de mejora en la supervivencia neuronal y regeneración de
los tejidos adyacentes a la lesión medular, acompañados de
recuperación de movilidad locomotora de los sujetos. Los ácidos
grasos poli-insaturados omega-6
ejercieron un efecto perjudicial. Sin embargo, la administración de
ácido oléico (perteneciente al grupo de los ácidos grasos
monoinsaturados omega-9) no resultó efectiva, ya
que los resultados obtenidos fueron comparables a los observados
con solución salina, utilizada como control.
Como puede verse, el reciente descubrimiento de
que la regeneración neuronal es posible ha abierto un amplio campo
de investigación; aunque en los últimos años se han realizado
algunos avances, la investigación está en sus inicios. Existe la
necesidad de proporcionar un tratamiento de las lesiones medulares
mejorado, que potencie la recuperación espontánea motora, reduzca
el desarrollo de síntomas perjudiciales, como el dolor neuropático
y la espasticidad, y no tenga efectos secundarios, siendo viable su
traslado a la clínica.
En contra de lo que podría esperarse, los
inventores han descubierto ahora que la administración de complejos
de la albúmina con ácidos grasos monoinsaturados
omega-9 (de ahora en adelante, "complejo
A-AG") tiene un efecto mejorado para el
tratamiento de lesiones medulares. Sorprendentemente, la
administración de dicho complejo en un modelo de ratas, muestra una
recuperación muy superior comparada con la administración
únicamente de albúmina. Estos resultados han sido aún más
sorprendentes a la vista de King et al. (The Journal of
Neuroscience 2006, 26, 4672-4680)
en donde los experimentos in vivo sugieren que el ácido
oléico no seria apropiado para el tratamiento de lesiones
medulares.
Sorprendentemente, los inventores han encontrado
que los complejos A-AG tienen una acción
pleiotrópica sin producir efectos secundarios importantes. Por un
lado, la administración del complejo A-AG tiene un
efecto positivo sobre la recuperación funcional motora,
especialmente la recuperación temprana de la función motora
voluntaria (primeros 14 días de tratamiento). Adicionalmente, la
administración del complejo A-AG viene acompañada
de una mejora de los potenciales motores corticoespinales, la
inhibición tónica de la sensibilidad central por debajo de la lesión
medular y una fuerte potenciación del sistema inhibitorio fásico.
Además, la administración del complejo A-AG
potencia la acción de los sistemas descendentes inhibitorios que
actúan sobre la sensibilidad central a través de la médula dañada,
lo que evidencia una clara aplicación terapéutica efectiva sobre la
neuromodulación del dolor neuropático y la espasticidad que se
desarrollan después de una lesión medular.
Por tanto, la presente invención se dirige al
uso de un complejo de albúmina con al menos un ácido graso
insaturado omega-9, preferiblemente el ácido oléico,
para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de
lesiones medulares.
\vskip1.000000\baselineskip
La Figura 1 muestra esquemáticamente el
dispositivo de lavado de una membrana de diálisis para albúmina,
utilizada como paso previo en la preparación de los complejos
A-AG en la presente invención.
La Figura 2 muestra esquemáticamente el
dispositivo utilizado para la diálisis.
La Figura 3 muestra esquemáticamente el
protocolo de electrofisiología para la medición de la
sensibilización central a estímulos nocivos y activación de las vías
descendentes.
La Figura 4 muestra el aumento en el peso
corporal 28 días después de la lesión medular por contusión (Cont)
representado como el porcentaje de aumento respecto al peso inicial
en todos los grupos de animales tratados con Salino (Sal), Albúmina
(Alb), Ácido Oléico (OA), Albúmina - Ácido Elaídico
(Alb-EA) y Albúmina-Ácido Oléico
(Alb-OA).
La Figura 5 muestra la evolución de recuperación
en el tiempo del movimiento voluntario sobre el Rotarod entre
4-14 días y 21-28 días después de la
lesión medular por contusión (Cont), expresado como porcentaje de
tiempo de permanencia en el aparato respecto al tiempo control de
cada grupo obtenido antes de la contusión (100%).
La Figura 6 muestra la evolución de la
recuperación desde 4 hasta 28 días después la lesión medular en el
movimiento voluntario sobre el Rotarod después de la lesión medular
por contusión (Cont), expresado como porcentaje del tiempo de
permanencia en el aparato respecto al tiempo de control de cada
grupo obtenido antes de la contusión (100%).
La Figura 7 muestra la evolución de la
recuperación 28 días después de la lesión medular de los
potenciales motores corticoespinales (Tibialis Anterior) expresado
como una integral (mV.ms).
La Figura 8 muestra el efecto de los
tratamientos sobre la sumación temporal del reflejo
plantar-Tibialis Anterior (TA), presente por debajo
de la contusión moderada a nivel T8, expresado como un porcentaje
de la primera respuesta.
La Figura 9 muestra el efecto de los diferentes
tratamientos administrados después de la lesión medular sobre la
primera (respuesta 2-7) y segunda fase (respuesta
8-16) de la sumación temporal del reflejo
plantar-Tibialis Anterior.
La Figura 10 muestra la modulación de la
sumación temporal del reflejo plantar-TA por debajo
de la contusión moderada al nivel T8, después de un estímulo
condicionante eléctrico por encima de la lesión medular y el efecto
de los tratamientos administrados por vía intratecal.
La Figura 11 muestra el efecto inhibitorio del
tratamiento Albúmina sola, Ácido Oléico solo, Albumina -Ácido
Elaídico y el complejo Albúmina - Ácido Oléico sobre la sumación
temporal, medida por debajo de la lesión medular, después de la
activación de las vías descendentes a través de la contusión
moderada al nivel T8. Los datos están normalizados, representados
como el porcentaje de inhibición respecto a la primera fase de la
sumación temporal antes del condicionamiento.
\vskip1.000000\baselineskip
Para los propósitos de la presente invención,
los términos utilizados tienen el significado indicado a
continuación:
"Albúmina" se refiere de forma
general a albúmina de tipo nativo o recombinante de mamífero. Más
preferiblemente, la albúmina es de origen humano, bovino (BSA),
murino, o de conejo; otras albúminas de posible utilización son la
ovoalbúmina y la lactoalbúmina. Aún más preferiblemente, la
albúmina utilizada es albúmina sérica humana, recombinante,
cationizado (estrategia de péptidos chiméricos), microburbujas, o
albúmina sérica bovina (es decir, la facción conocida habitualmente
como la fracción V de Cohn, comercialmente accesible a través de
distintos proveedores).
"Ácido graso monoinsaturado
omega-9" es un ácido carboxílico de cadena
larga, con un doble enlace C=C en la posición
\omega-9. Ácidos grasos insaturados
omega-9 apropiados según la invención son ácidos
tales como el ácido oléico (ácido 9-octadecenoico),
el ácido eicosenoico (ácido 11-eicosenoico), el
ácido eicosatrienoico (ácido
5,8,11-eicosatrienoico), el ácido erúcico (ácido
13-docosenoico) y el ácido nervónico (ácido
15-tetracosenoico).
"Administración intratecal" se
refiere a la administración a través de la duramadre de la médula
espinal dentro del espacio subaracnoideo.
"Sujeto", tal como aquí se utiliza,
se refiere a cualquier miembro de una especie animal de mamíferos e
incluye, pero no se limita, a animales domésticos, primates y
humanos; el sujeto es preferiblemente un ser humano masculino o
femenino de cualquier edad o raza.
"Neuroprotector" o "agente
neuroprotector" se refiere a sustancias que previenen daños en
el cerebro o la médula debidos a isquemia, infarto cerebral,
convulsiones o trauma. Algunos deben ser administrados antes del
evento, aunque también es posible que ejerzan su efecto
neuroprotector después. En la presente solicitud se consideran
sinónimos los términos "efecto neuroprotector" y
"neuroprotección".
"Neuroregeneración" se considera sinónimo
de "reparación de los nervios", y se refiere a la renovación o
reparación fisiológica de tejido nervioso dañado.
Se entiende por "neurorestauración" o
"recuperación funcional" la mejora o recuperación de las
capacidades sensitivomotoras, especialmente del movimiento
voluntario y la sensibilidad del sujeto.
Se entiende por "neuromodulación"
concretamente como la capacidad de cambiar la función
sensitivomotora de la médula.
Se entiende por "espasticidad" o
"espasticidad muscular" o "hiperreflexia" o "reflejo
anormal" o "espasmo" un síntoma asociado a un trastorno
motor del sistema nervioso en el que algunos músculos se mantienen
permanentemente contraídos, provocando la rigidez y acortamiento de
los músculos, o con una contracción involuntaria que interfieren
sus distintos movimientos y funciones.
"Movimiento voluntario" se refiere al
movimiento del sistema músculoesqueléticocontrolado por el sistema
nervioso somático a través de la activación del sistema
corticoespinal.
"Neuroinflamación" se refiere a la
inflamación de la médula.
De acuerdo con la IASP (International
Association for the Study of Pain, en español, la asociación
internacional para el estudio del dolor), el "dolor
neuropático" es un dolor iniciado o causado por una lesión o
disfunción primaria del sistema nervioso.
"Edema" toma en la presente solicitud su
significado habitual e indica una hinchazón del cuerpo producida
por acumulación de líquido. Por ejemplo, en el caso de "edema
cerebral o medular" se entiende una inflamación del tejido del
sistema nervioso central producida por acumulación de líquido.
Tal y como se puede comprobar a la vista de los
resultados obtenidos, el complejo A- AG permite prevenir los
síntomas funcionales, como por ejemplo la pérdida de función
motora, dolor neuropático o espasticidad, inducidos por una lesión
medular.
Tal y como se muestra en los resultados II y
III, el complejo A-AG potencia la recuperación de
la función motora voluntaria. Se ha comprobado que,
sorprendentemente, la recuperación es especialmente efectiva en una
etapa temprana del tratamiento, es decir, durante los primeros 30
días, preferiblemente primeros 20 días, más preferiblemente las
primeras dos semanas de tratamiento. Las ratas sometidas a la
prueba del rotarod mostraron un nivel de recuperación especialmente
superior en las primeras dos semanas de tratamiento, especialmente
entre los días 4 y 14 (ver ejemplo II más abajo). La comparación
con los efectos de la albúmina sola y el ácido oléico solo muestran
un efecto sinérgico del complejo A-AG.
Adicionalmente, no se observaron efectos secundarios en los
sujetos. Concretamente, no se observó pérdida de peso en ninguno de
los sujetos de estudio (ver resultado I más abajo).
Adicionalmente, los ensayos in vivo
realizados demuestran que la administración del complejo
A-AG puede inhibir los cambios en la sensibilidad y
función sensitivomotora inducidos por una lesión medular.
Concretamente, en los resultados IV y V descritos más abajo se
muestra que la administración de un complejo de albúmina-ácido
oléico produce un efecto en el descenso en la sensibilización
central a estímulos nocivos, medida en el modelo utilizado como
sumación temporal del reflejo de retirada
plantar-Tibialis Anterior y recuperación de los
potenciales motores corticoespinales. Adicionalmente, este
tratamiento presenta efectos beneficiosos adicionales tales como la
neuromodulación y, a la vez, la inhibición tónica y fásica de la
sensibilidad central asociada a la presencia del dolor neuropático
y la espasticidad después de una lesión medular (ver resultados
VI-VII más abajo).
El aumento de la sensibilización central a
estímulos nocivos se debe generalmente a un incremento de la
excitabilidad neuronal caracterizado por la presencia de dolor
espontáneo o evocado.
Por tanto, los ensayos realizados permiten la
prevención de la aparición de la parálisis motora y el tratamiento
del dolor neuropático y la espasticidad derivada de una lesión
medular.
En vista de lo anterior, medicamentos basados en
el complejo A-AG permitirían el tratamiento de
lesiones medulares, especialmente lesiones modulares
traumáticas.
En una realización particular, la albúmina se
selecciona de albúmina nativa o recombinante de origen humano,
bovino, murino, o de conejo, o de la ovoalbúmina y la
lactoalbúmina, más preferiblemente, la albúmina utilizada es
albúmina sérica humana o albúmina sérica bovina, tal y como se
utiliza en los ejemplos del presente documento. En otra realización
particular, el ácido graso monoinsaturado omega-9 es
el ácido oléico. Sin embargo, se contemplan otros ácidos grasos
insaturados omega-9 que forman parte del ámbito de
protección de la invención. Ácidos grasos insaturados
omega-9 apropiados adicionales según la invención
son ácidos tales como el ácido eicosenoico (ácido
11-eicosenoico), el ácido eicosatrienoico (ácido
5,8,11-eicosatrienoico), el ácido erúcico (ácido
13-docosenoico) y el ácido nervónico (ácido
15-tetracosenoico.
\vskip1.000000\baselineskip
El complejo administrado según la presente
invención contiene preferiblemente albúmina-ácido graso insaturado
omega-9, en una proporción entre 4:1 y 1:4
albúmina:ácido graso, preferiblemente entre 1:1 y 1:2, más
preferiblemente 1:1. Puede además contener excipientes
farmacéuticamente aceptables. Los excipientes farmacéuticamente
aceptables pueden ser líquidos estériles, tales como agua, solución
salina y aceites, incluidos aquellos de origen animal, vegetal, o
sintético; sustancias farmacéuticas adicionales comprenden
co-disolventes; aditivos para estabilizar
suspensiones; conservantes farmacéuticamente aceptables (Vitamina
C/E o Citosano); ácidos, bases o tampones farmacéuticamente
aceptables para ajustar el pH; tensioactivos, etc. Estas sustancias
farmacéuticamente aceptables que pueden ser utilizadas son
conocidas, en general por los expertos en la materia y se utilizan
habitualmente en la elaboración de formulaciones para composiciones
farmacéuticas y medicamentos. Estas sustancias farmacéuticamente
aceptables se describen en "Remington's Pharmaceutical
Sciences" de E.W. Martin. Los excipientes necesarios para la
fabricación del medicamento adecuado dependerán de la composición
farmacéutica y tipo de administración deseada. Dichos medicamentos
pueden ser fabricados de acuerdo con métodos convencionales
conocidos por el experto en la materia. Se puede encontrar una
revisión de los diferentes métodos de administración, excipientes y
procedimientos para producir medicamentos en "Tratado de Farmacia
Galénica", C. Faulí i Trillo, Luzán 5, S. A. de Ediciones,
1993.
El medicamento o composición farmacéutica que
comprende el complejo A-AG puede ser conservada
hasta su utilización mediante métodos convencionales conocidos por
los técnicos en la materia; en una realización particular, la
composición farmacéutica de la invención puede ser conservada hasta
su utilización mediante congelación.
El complejo A-AG utilizado según
la invención puede ser administrado con otros fármacos para
proporcionar una terapia de combinación; los otros fármacos pueden
formar parte de la misma composición o se pueden suministrar en
forma de composición separada para la administración al mismo
tiempo o en un momento diferente. El uso del complejo de la
invención, puede también administrarse acompañado de una terapia
complementaria tal como rehabilitación.
El complejo utilizado según la presente
invención puede ser administrado mediante cualquier vía apropiada,
preferiblemente por vía intratecal o vía intravenosa/intraarterial;
en este caso puede ser suministrado en forma de preparación
farmacéutica concentrada (bolus), en disolución o suspensión acuosa
salina o en suspensión alcohólica. En cualquiera de los casos el
complejo se administrará utilizando los equipos, aparatos y
dispositivos apropiados, los cuales son conocidos por los técnicos
en la materia, por ejemplo, catéteres, cánulas, etc.
Preferiblemente, el complejo
A-AG se suministra en forma de preparación
concentrada (bolus) o en suspensión acuosa acuosa. Tanto la
albúmina como el ácido graso monoinsaturado omega-9
pueden ser directamente utilizados en su forma comercialmente
disponible o utilizados previo tratamiento o purificación. Cuando la
albúmina comercialmente disponible es un preparado liofilizado, es
necesario dializarla; en el ejemplo 3 (ver también la Figura 2) que
acompaña al presente documento, se describe a continuación un
procedimiento de diálisis de albúmina apropiado, aunque otros
comúnmente aceptados en la técnica pueden ser utilizados por el
experto en la materia. La diálisis se lleva a cabo mediante
disolución del preparado liofilizado de albúmina en una disolución
tampón Elliot dentro de una membrana de diálisis previamente
tratada y se somete bajo agitación en una cámara fría y se lava. La
albúmina es obtenida mediante filtrado a través de una jeringa
dotada de filtro.
La administración del complejo se efectúa
preferiblemente inmediatamente después de la lesión modular y
posteriormente de forma diaria.
Las dosis de administración dependerán de varios
factores, como el peso del sujeto, y pueden ser determinadas por el
experto en la materia. De acuerdo con una realización preferida, la
dosis intratecal puede ser de entre 0.001 y 100 \mug/día,
preferiblemente entre 0.01 y 10 \mug/día, más preferiblemente
entre 0.1 y 1 \mug/día. De acuerdo con otra realización referida,
la dosis intravenosa/arterial puede ser de entre 0.001 y 100
mg/Kg/día, preferiblemente entre 0.01 y 10 mg/Kg/día, más
preferiblemente entre 0.1 y 1 mg/Kg/día.
La invención se ilustra adicionalmente mediante
los siguientes ejemplos, que no deben ser interpretados como
limitativos del alcance de las reivindicaciones.
\vskip1.000000\baselineskip
Para este estudio se utilizaron 48 ratas Wistar
macho, de 10 semanas, con un peso aproximado de 250 - 300 gr. Las
ratas fueron mantenidas con agua y comida "ad libitum".
Todos los animales fueron sometidos a una lesión medular por
contusión moderada a nivel de T8. Tras la lesión se formaron 6
grupos al azar a los que se les administró: suero salino (SAL),
albúmina [100 \muM] (ALB), ácido oléico [100 \muM] (OA),
albúmina-ácido oléico [100W\4] (A-AO) o
albúmina-ácido elaídico [10011M] (A-AE). También un
grupo de 8 animales sin cirugía no tratado, como grupo de control.
Los compuestos se administraron en un volumen de 10 \mul, por vía
intratecal [Jasmin, L. y Ohara, P.T. (2001)
Long-term intrathecal catheterization in the rat.
J. Neurosci. Methods 110:81-89], inmediatamente
después de la lesión y cada 3 días durante un total de 28 días.
La albúmina, así como los ácidos oléico y
elaídico son comercialmente disponibles y fueron adquiridos de
Sigma-Aldrich (Números de referencia D0655, 01008, y
E4637, respectivamente). El resto de materiales, salvo que se
indique lo contrario, fueron utilizados directamente tal y como
fueron adquiridos.
\vskip1.000000\baselineskip
1. Diálisis de Albúmina [Elliot, K.A.C.
(1969) The use of slices. In: Handbook ofNeurochemistry
(Lajtha A, ed), pp 103-114. New York: Plenum
Press]
La albúmina comercializada consiste en un
preparado liofilizado que se puede dializar posteriormente,
llevando a cabo el siguiente protocolo:
\vskip1.000000\baselineskip
Tampón fosfato sódico (11 mM/pH 7,6). Se
prepararon 6 litros del tampón disódico (Na_{2}HPO_{4}. 2
H_{2}O (Pm 177,99/11 mM/1,96 g/1)) y 2 litros del monosódico
(NaH_{2}PO_{4} (Pm 156/11 mM/0,424 g/250 ml). Se añadió
monosódico para ajustar el pH a 7,6 y se tomaron 6 litros de la
mezcla.
Medio para Elliot-Calcio:
ClNa (7,17 g/1 - 122 mM); KCl (0,3597 g/l - 4,8 mM);
KH_{2}PO_{4} (0,055 g/l - 0,4); MgSO_{4} (0,2973 g/l - 1,2
mM). Se ajustó pH 7,37-7,4 (con NaCl 1N o con HCl
1N). Se filtró: Filtros estériles (Catálogo Millipore/0,22
\mum/Ref. SCGPT05RE). Antes de la incubación se añadió:
CaCl\mu2 . 2 H_{2}O (1,3 mM/0,0197 g/100 ml sol.
Elliot-Ca).
\vskip1.000000\baselineskip
La membrana utilizada para dializar la albúmina
fue adquirida de Sigma (SIGMA Ref. D0655-100FT). El
procedimiento fue el siguiente: se lavó durante 3-4
h con agua corriente y se controló el caudal con la pinza
dosificadora (ver Figura 1). Se lavó con solución de
sodio-sulfito al 0,3% a 80ºC durante 2 minutos.
Después se lavó con agua previamente calentada a 60ºC durante 2
minutos (Agua Destilada Mili Q - bidestilada y desionizada) y se
acidificó con una solución de ácido sulfúrico, durante 2 minutos, a
temperatura ambiente. Por último, se lavó con agua ultrapura (Mili Q
- bidestilada y desionizada) y se dejó en un recipiente con agua
ultrapura.
\vskip1.000000\baselineskip
Para la preparación de la albúmina al 10%, se
disolvieron 5 g de albúmina en 50 ml de solución Elliot+Ca en
agitación. Posteriormente se incluyó en la membrana que ya había
sido tratada. Se anudaron ambos extremos de la membrana y se añadió
la albúmina (ver Figura 2). Después se dejó en agitación en la
cámara fría a 4ºC. Posteriormente se realizaron 3 lavados de
aproximadamente 12, 6 y 6 horas de duración respectivamente. Tras
estos lavados, se filtró la albúmina (SERUM Acrodisc® 37 mm Syringe
Filter, PALL Gelman Laboratory. Prod nº 4525. Pore size GF/0,2
\mum) con una jeringa y se realizaron alícuotas de 1 ml que se
conservaron a -20ºC.
\newpage
2. Preparación del complejo ácido
oléico/ácido elaídico [Rodriguez-Rodriguez
et al. (2004)]
El complejo albúmina-ácido oléico se preparó en
una solución de albúmina al 2% (p/v) y se añadió ácido oléico hasta
alcanzar un concentración final de 100 \muM. Se preparó una
solución de 50% de albúmina - ácido oléico (1:1), a concentración de
100 \muM, disuelto en suero salino. La preparación del complejo
albúmina - ácido elaídico se realizó de la misma forma y en la
misma concentración, 100 \muM.
\vskip1.000000\baselineskip
II. Rotarod
[Arevalo-Martin, A. et al. (2003)
Therapeutic action of cannabinoids in a murine model of multiple
sclerosis. J. Neurosci.
23:2511-2516]
Todos los animales fueron sometidos a una prueba
locomotora (Rotarod) con el fin de determinar el impacto de la
lesión medular sobre la movilidad de los miembros inferiores y si
el tratamiento producía un efecto beneficioso sobre dicha actividad.
Para la realización del test Rotarod, se utilizó un aparato Ugo
Basile modelo 4600, disponible en el Hospital Nacional de
Parapléjicos. Cada animal fue entrenado durante tres días, antes de
la lesión medular, para permanecer, durante al menos 5 minutos,
sobre una superficie cilíndrica que rota a 5 rpm. Un día antes de la
lesión (día - 1), se obtuvieron los valores control sometiendo a
las ratas al test del Rotarod pero, esta vez, la superficie rotó a
una velocidad que aumenta de forma constante desde 5 a 15 rpm
durante los 5 minutos de duración del test.
Todas las ratas se sometieron a dicho test el
día 4 después de la lesión y una vez por semana, durante al menos 4
semanas (días 4 y 7, 14, 21 y 28 después de lesión medular) para la
valoración motora general y los posibles efectos de los tratamientos
administrados sobre la recuperación en el tiempo.
\vskip1.000000\baselineskip
1. Implantación del catéter intratecal y
Contusión medular experimental [Jasmin, L. y Ohara, P.T.
(2001a) Long-term intrathecal catheterization in
the rat. J. Neurosci. Methods 110:81-89 y
Young, W. (2002) Spinal cord contusion models. Prog. Brain
Res. 137:231-255]
Se administró Pentobarbital (Doletal, 65 mg/kg)
y Xilacina (Xilagesic o Rompun, 2%) por vía intraperitoneal para
conseguir 1 hora y media de efecto de anestesia para cirugía
invasiva (si se excede ese tiempo se administró una dosis de
refuerzo del 30% de la dosis original). Se administró 0,1 ml de
antibiótico (Baitril, Enrofloxacina 2.5%). Se añadió 1 vez al día
durante 3 días tras la lesión.
\vskip1.000000\baselineskip
El catéter se esterilizó (Charles River
Laboratorios, España S.A. rat intrathecal catéter 7740. Ref.
ALZT7740Z) y se introdujo en suero salino 0,9% antes de comenzar la
implantación. Se limpió la zona de la laminectomía al nivel de TIO
vertebral y se realizó una pequeña durectomía con tijeras tipo
iris. Se cortó el catéter a medida y se introdujo por debajo de la
duramadre desde T10 hasta que el extremo se ubicó justamente por
debajo de la lesión en T8. Se limpió la zona y se fijó el catéter al
nivel de T11. Se fijó el catéter al exterior con un pequeño corte en
la piel de la base del cráneo, por donde se sacó el otro extremo
del catéter.
\vskip1.000000\baselineskip
Como modelo de lesión medular de referencia se
utilizó el modelo por contusión descrito por Kuhn (Young, 2002).
Para el desarrollo del modelo, a las ratas, una vez anestesiadas,
se les realizó una laminectomía que se llevó a cabo a nivel torácico
(T8), y la contusión se realizó dejando caer un peso de 11 gramos
desde una distancia de 12 mm, sobre un contusor de superficie
redonda colocado sobre la médula al descubierto (dura intacta). Una
vez desarrollada la lesión, el músculo se cerró en capas con sutura
continua, con hilo re-absorbible de 4/0, y
posteriormente la piel, con sutura subdérmica, con hilo 4/0
reabsorbible.
Cada grupo estuvo formado por un total de
8-10 individuos.
\vskip1.000000\baselineskip
Después de un periodo de cuatro semanas desde la
lesión medular, se anestesió a las ratas para un ensayo
electrofisiológico in vivo de los reflejos medulares. La
anestesia se indujo introduciéndolas en una atmósfera de
isofluorano (2%) y oxígeno. Después, se situó al animal en una
manta térmica a 37ºC (Cibertec S.A., RTC1 Termal Regulador) en una
posición supino y con ambos miembros traseros sujetos con una cinta
adhesiva. Las fosas nasales se introdujeron en un adaptador de
metacrilato para que la rata siguiese anestesiada. Las respuestas
electromiográficas bipolares se grabaron utilizando unos electrodos
de acero recubiertos de teflón, situados subcutáneamente a 0.5 cm de
la superficie dentro del músculo tibial anterior (TA) del miembro
izquierdo. Además se insertaron dos electrodos de platino
subdérmicos (E2, Grass Instruments) en el cuarto dedo de la pata
sujetos con cinta adhesiva. Por último, se insertó un electrodo de
tierra entre el electrodo de estimulación y el electrodo de
recogida de estímulos a nivel del tobillo izquierdo
[Gonzalez-Valdizan, E. et al. (2007)].
Antes de comenzar el experimento, el nivel de
anestesia se bajó al 1,2% de isofluorano en oxígeno sólo. Las
respuestas electromiográficas del músculo del tibial anterior
fueron grabadas a 2000x con un amplificador AC (Cibertec S.A., AE3).
Se filtraron las respuestas entre 30 Hz y 10 Khz. El estímulo
eléctrico se aplicó utilizando una unidad de estimulación (ISU 165,
Cibertec S.A.) y el estimulador (CS20BP, Cibertec S.A.) con un
ancho de pulso de 2 ms. El umbral de reflejo se estableció
identificando la intensidad (mA) requerida para evocar una clara
respuesta de reflejo de electromiograma en el músculo tibial
anterior entre 0,2 y 1 segundo después de la estimulación, y en más
de la mitad de las respuestas. El análisis de la sumación temporal
de los reflejos nocivos del músculo tibialis anterior, seguidas de
la estimulación de 1 Hz, fue realizado hasta un total de 16
estímulos.
\vskip1.000000\baselineskip
Se introdujeron dos electrodos de aguja de
platino subdérmicos (Ref: E2, Astro-Med INC. Grass)
a cada lado del tronco, al nivel vertebral T7 (medular
T6-7), con el objetivo de estimular justamente
encima del nivel de la contusión experimental (T8). El protocolo de
condicionamiento estuvo basado en el protocolo descrito por Liu (Liu
et al., 1998) en el que un tren de pulsos de 100 Hz dado
durante 1 s, cada 10 s, con una duración de pulso de 0.1 ms,
durante un tiempo total de 15 minutos. Un minuto después del
condicionamiento, el protocolo utilizado para el análisis de la
sumación temporal del reflejo nociceptivo plantar - tibialis fue el
anteriormente descrito (ver arriba).
\vskip1.000000\baselineskip
Se introdujeron dos electrodos de aguja de
platino subdérmicos (Ref: E2, Astro-Med INC. Grass)
con el cátodo insertado en la piel de la nariz y el ánodo insertado
en la piel de detrás del cráneo y en posición contralateral a la
lesión medular. El protocolo de estímulo estuvo basado en el
protocolo descrito por Nashmi (Nashmi et al., 1997) en el
que se aplica un tren de 5 pulsos con una duración de 0.1 ms a 300
Hz cada 5s. El potencial evocado se registró en el músculo Tibialis
Anterior con electrodos de electromiografia según lo anteriormente
descrito (ver arriba).
\vskip1.000000\baselineskip
Todos los grupos de animales de experimentación
se pesaron antes y 28 días después de la lesión medular por
contusión moderada (Cont) a nivel T8 para tener una indicación del
estado de salud general, e identificar los efectos secundarios de
los tratamientos administrados durante el mes de experimentación.
El peso corporal no se redujo en ningún grupo experimental (Ver
Figura 4). Al contrario, un aumento en el peso corporal fue
identificado después de la lesión medular en animales tratados con
salino (23 \pm 6%). Además, el peso aumentó también durante todos
los tratamientos utilizados, incluyendo Albúmina sola (49.9 \pm
4.8%), Ácido Oléico solo (48.6 \pm 2.5%) y Albúmina - Ácido
Oléico (42 \pm 8%).
Los animales tratados sólo con Salino mostraron
una reducción en el tiempo de movimiento voluntario sobre el
Rotarod con respecto a ratas control, de hasta aproximadamente un
2.4 \pm 0.6%, entre 4-14 días después de la lesión
medular (ver Figura 5), en cambio, el grupo tratado con Albúmina -
Ácido Oléico fue el único en mostrar una recuperación de hasta 34
\pm 7% entre 4-14 días después de la lesión
medular, comparado con el grupo tratado con Salino
(t-test no-pareado de dos vías,
t=4.63; d.f.=4; p<0.01).
Una reducción en el tiempo sobre el Rotarod
hasta 1.0 \pm 0.1% a 4 días después de la lesión medular fue
observado en el grupo tratado con salino solo, comparado con el
grupo control. Sin embargo, el grupo tratado con Albúmina - Ácido
Oléico mostró una mayor recuperación del movimiento voluntario
desde 4 a 28 días después la lesión medular (Ver Figura 6). El
análisis estadístico (ANOVA de dos vías de medidas repetidas) entre
todos los grupos con lesión medular evidenció una diferencia en la
recuperación motora entre grupos en general (F=17.7; d.f.=4,3;
p<0.001) y entre el grupo tratado con Albúmina-Ácido Oléico (vs.
salino, F=8.96, d.f.=1, p<=0.01) y el grupo tratado con Albúmina
sola (vs. salino, F=5.6, d.f=l, p<0.05).
Entre los días 21-28 días
(Figura 5) los animales tratados con Albúmina - Ácido Oléico se
recuperaron hasta 50\pm10% (t=25.8; d.f.=2; p<0.01), mientras
que en los animales tratados con Albúmina solo mejoró la
recuperación motora hasta 32\pm7% (t=6.5; d.f.=2; p<0.05)
comparado con el grupo tratado con Salino.
Los animales tratados sólo con Salino después de
la lesión medular mostraron una reducción en la integral de los
potenciales motores medida en el músculo Tibialis Anterior después
de la estimulación de la corteza sensorimotora contralateral, hasta
0.04 \pm 0.1 mV.ms comparado con una respuesta de 4.4 \pm 2.1
mV.ms en animales normales sin lesión medular (controles)(Ver
Figura 7). Sin embargo, los grupos tratados con Ácido Oléico solo,
Albúmina - Ácido Elaídico, Albúmina - Ácido Oléico mostraron una
recuperación hasta 0.35 \pm 0.1 (t=3.539, d.f.=11, p<0.01),
0.20 \pm 0.06 (t=2.852, d.f.=11, p<0.05), 0.27 \pm 0.07
(t=3.129, d.f.=13, p<0.01) respectivamente, comparados con el
grupo tratado con Salino sólo.
Después de la lesión medular, la sensibilización
central a estímulos nocivos aumentó hasta 1136 \pm 326% (promedio
de 921 \pm 85% desde la respuesta 1-16) después
del tratamiento con Salino (Cont-Salino, ver Figura
8), medida como la sumación temporal del reflejo de retirada
plantar-Tibialis Anterior. Aunque en estos
resultados la sumación temporal en animales controles (963 \pm
82%) fue similar al grupo con lesión medular por contusión, los
estudios previos indican que otros tipos de lesión medular
(hemotoxicidad) pueden aumentar la sumación temporal a estímulos
nocivos hasta llegar a 1928 \pm 570%, y que el aumento de la
sensibilización central es una característica clave en cambios en
la nocicepción después de la lesión medular
[Gonzalez-Valdizan, E. et al. (2007)
Unilateral haemotoxic spinal cord injury in the rat leads to
chronic bilateral reflex plasticity and central sensitization.
In: AbCam Pain Meeting]. Como puede apreciarse en la Figura 8, la
sensibilización central a estímulos nocivos estuvo modulada por los
diferentes tratamientos utilizados (F=42.69; d.f.=4,5;
p<0.001).
Específicamente, la sensibilización central en
el grupo al que se le administró sólo con Albúmina (195 \pm 13%;
Tukey post-hoc test, p<0.001, q=14.36), Ácido
Oléico solo (521 \pm 44%; Tukey post-hoc test,
p<0.001, q=7.91) o con Albúmina - Ácido Oléico (434 \pm 46%;
Tukey post-hoc test, p<0.001, q=9.62) fue menor
que el grupo de control tratado con Salino sólo (920 \pm 85%).
Además los animales tratados con Albúmina sola mostraron una mayor
inhibición de la sensibilización central que el grupo tratado con
Alb-AO (Tukey p<0.05, q=4.7).
La administración intratecal del complejo
Albúmina-Ácido Oléico
(Cont-Alb-Oléico) fue eficaz
inhibiendo la primera y la segunda fase de la sensibilización
central, comparado con el grupo control (Cont-Sal,
ver Figura 9).
Un análisis de la primera (respuesta
2-7) y segunda fase (respuesta 8-16)
de la sumación temporal del reflejo nocivo por los diferentes
tratamientos mostró una inhibición significativa después de la
administración de Albúmina sola (2-7: 232 \pm 24%,
t=6.56, d.f.=94, p<0.001; 8-16: 181 + 14%,
t=6.56, d.f.=94, p<0.001), Ácido Oléico (2-7: 501
\pm 40%, t=4.03, d.f.=88, p<0.001; 8-16: 581
\pm 70%, t=6.56, d.f.=133, p<0.05) y con Albúmina - Ácido
Oléico (2-7: 534 \pm 79%, t=3.61, d.f.=112,
p<0.001; 8-16: 403 \pm 62%, t=4.18, d.f.=169,
p<0.001) comparado con animales tratados con Salino solo
(2-7: 1026 \pm 117%; 8-16: 941
\pm 125%).
Se utilizó la aplicación de un estímulo
eléctrico condicionante por encima de la contusión moderada al
nivel T8 [Liu et al. (1998); Taylor, J.S. et al.
(1991) Prolonged inhibition of a spinal reflex after intense
stimulation of distant peripheral nerves in the decerebrated
rabbit. J. Physiol. 437:71-83] para analizar las
posibles propiedades pro-regenerativas de todos los
tratamientos administrados al nivel de la lesión medular, con la
modulación de la sensibilidad central por debajo de la lesión
medular. En el presente estudio, la aplicación del estímulo
condicionante eléctrico por encima de la lesión medular potenció la
sumación temporal del reflejo nocivo desde 963 \pm 82 hasta
1341 \pm 130% (ver Figura 10, t=2.46, d.f.=254, p<0.05) mientras que el único tratamiento capaz de inhibir la sensibilidad central fue con el complejo Albúmina-Ácido Oléico (Contusión-Alb-Oléico, ver Figura 10), disminuyendo los valores desde 434 \pm 46% hasta 242 \pm 19% (t=3.85, d.f.=350, p<0.001), con una clara acción sinérgica.
1341 \pm 130% (ver Figura 10, t=2.46, d.f.=254, p<0.05) mientras que el único tratamiento capaz de inhibir la sensibilidad central fue con el complejo Albúmina-Ácido Oléico (Contusión-Alb-Oléico, ver Figura 10), disminuyendo los valores desde 434 \pm 46% hasta 242 \pm 19% (t=3.85, d.f.=350, p<0.001), con una clara acción sinérgica.
El estímulo condicionante solo inhibió la
sumación temporal en el grupo de animales tratados con el complejo
Albúmina-Ácido Oléico.
Sólo el grupo tratado con Albúmina - Ácido
Oléico (ver Figura 11) indicó una inhibición tanto de la primera
fase de la sumación temporal del reflejo nociceptivo (desde 100
\pm 15% hasta 47 \pm 5%; t=3.43; d.f.=20; p<0.01) como una
menor inhibición de la segunda fase (desde 75 \pm 12% hasta 47
\pm 5%; t=2.2; d.f.=20; p<0.05) después de su administración
por vía intratecal.
Claims (18)
1. Uso de un complejo de albúmina con al menos
un ácido graso insaturado omega-9 para la
fabricación de un medicamento para el tratamiento de lesiones
medulares.
2. Uso según la reivindicación 1 para la
prevención de síntomas funcionales inducidos por una lesión
medular.
3. Uso según cualquiera de las reivindicaciones
anteriores para la potenciación de la recuperación de la función
motora voluntaria.
4. Uso según la reivindicación 3 para la
potenciación de la recuperación de la función motora voluntaria en
una fase temprana del tratamiento.
5. Uso según cualquiera de las reivindicaciones
anteriores, para la prevención de la aparición de la parálisis
motora.
6. Uso según cualquiera de las reivindicaciones
anteriores para el tratamiento del dolor neuropático derivado de
una lesión medular.
7. Uso según la reivindicación 6 para la
neuromodulación del dolor neuropático derivado de una lesión
medular.
8. Uso según cualquiera de las reivindicaciones
6 y 7 en donde el dolor neuropático está acompañado de un
componente de sensibilización central.
9. Uso según cualquiera de las reivindicaciones
anteriores para el tratamiento de la espasticidad derivada de una
lesión medular.
10. Uso según la reivindicación 9, en donde la
espasticidad está acompañada de un componente de sensibilización
central.
11. Uso según cualquiera de las reivindicaciones
anteriores para la recuperación de los potenciales evocados motores
del tracto corticoespinal.
12. Uso según cualquiera de las reivindicaciones
anteriores para la inhibición tónica de la sensibilización
central.
13. Uso según la reivindicación 12 para la
inhibición tónica de la sensibilidad central por debajo de la
lesión medular.
14. Uso según la reivindicación 12 para la
potenciación de la acción de los sistemas descendentes inhibitorios
que actúan sobre la sensibilidad central a través de la médula
dañada.
15. Uso según la reivindicación 12 para la
potenciación del sistema inhibitorio fásico.
16. Uso según cualquiera de las reivindicaciones
anteriores, en donde la lesión medular es una lesión medular
traumática.
17. Uso según cualquiera de las reivindicaciones
anteriores, en donde el ácido graso insaturado
omega-9 es ácido oléico.
18. Uso según cualquiera de las reivindicaciones
anteriores, en el que la albúmina es albúmina seleccionada del
grupo que consiste en ovoalbúmina, lactoalbúmina, albúmina nativa o
recombinante de origen humano, bovino, murino, o de conejo, más
preferiblemente, albúmina sérica humana o albúmina sérica
bovina.
Priority Applications (2)
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|---|---|---|---|
| ES200801904A ES2331448B1 (es) | 2008-06-25 | 2008-06-25 | Complejos de albumina con acidos grasos monoinsaturados omega-9 para el tratamiento de lesiones medulares. |
| PCT/ES2009/070252 WO2009156544A1 (es) | 2008-06-25 | 2009-06-25 | Complejos de albúmina con ácidos grasos monoinsaturados omega-9 para el tratamiento de lesiones medulares |
Applications Claiming Priority (1)
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| ES200801904A ES2331448B1 (es) | 2008-06-25 | 2008-06-25 | Complejos de albumina con acidos grasos monoinsaturados omega-9 para el tratamiento de lesiones medulares. |
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2009
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| GIOVANNI, S., FADEN, A., YAKOVLEV, A., DUKE-COHAN, J., FINN T., THOUIN, M., KNOBLACH, S., BIASE, A., BREGMAN, B., HOFFMAN, E. "{}Neuronal plasticity after spinal cord injury: identification of a gene cluster neurite outgrowth"{}. The FASEB Journal, 2004. Páginas 1,2,10-13. * |
| RODRÍGUEZ-RODRÍGUEZ R.A., TABERNERO A., VELASCO A., LAVADO E. y MEDINA J. M. "{}The neurotrophic effect of oleic acid includes dendritic differentiation and the expression of the neuronal basic helix-loop-helix transcription factor NeuroD2"{}. Journal of Neurochemistry, 2004, Vol. 88, páginas 1041-1051. Páginas 1041,1044-1049. * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
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