ES2327262T3 - Extractos vegetales contra la halitosis, la gingivitis o la parodontitis. - Google Patents
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Abstract
Empleo de un extracto vegetal en un medio cosmético para impedir o para el tratamiento de la halitosis, caracterizado porque el extracto vegetal se elige entre los extractos de Arctostaphylos sp., de Tilia sp., de Olea sp., de Trifolium sp. o de Ilex sp. o entre las mezclas de los mismos.
Description
Extractos vegetales contra la halitosis, la
gingivitis o la parodontitis.
La presente invención se refiere a extractos
vegetales destinados a la inhibición de los enzimas, especialmente
para la inhibición de la
metionina-gama-liasa (METasa), y
destinados a impedir o a tratar el olor bucal o bien la halitosis,
la gingivitis o la parodontitis así como a preparaciones
farmacéuticas, que contienen estos extractos vegetales.
El olor bucal, denominado también halitosis o
"Foetor ex ore", puede tener diversos orígenes. En el caso de
los seres humanos sanos sin embargo el olor bucal es provocado en la
mayoría de los casos por bacterias en la cavidad bucal o bien en la
cavidad faríngea, que metabolizan las células corporales o los
restos de los alimentos, formándose productos de degradación de
proteínas y de otros compuestos volátiles del azufre ("volatile
sulfur compounds", VSC), a los que se ha responsables del mal
olor.
Estos compuestos del azufre son, de manera
especial: el H_{2}S = sulfuro de hidrógeno (aproximadamente en un
30%), el CH_{3-}S-H = metilmercaptano
(aproximadamente en un 60%) y el
CH_{3}-S-CH_{3} = sulfuro de
dimetilo (aproximadamente en un 10%).
Los compuestos volátiles del azufre son en parte
muy agresivos y pueden dañar la gingiva y las mucosas orales. De
este modo, se conoce, por ejemplo, por la publicación de los autores
Ng W, Tonzetich J.; "Efecto del sulfuro de hidrógeno y del
metilmercaptan sobre la permeabilidad de la mucosa oral -Effect of
hydrogen sulfide and methyl mercaptan on the permeability of oral
mucosa-"; J Dent Res. 1984 Jul;
63(7):994-7; que el sulfuro de hidrógeno y
el metilmercaptano aumentan la permeabilidad de la mucosa oral y, de
este modo, pueden favorecer el avance de las enfermedades de la
gingiva.
Las enfermedades de la gingiva representan un
elevado factor de riesgo para la salud. De conformidad con
investigaciones de la Organización Mundial de la Salud (WHO) más
del 50% de los habitantes de la república federal adultos sufren de
paradontopatía que requiere urgente tratamiento.
Las enfermedades de la gingiva se denominan
popularmente muchas veces "paradontosis". Esta expresión no es
correcta puesto que la terminación "-osis" describe una
regresión normal de un órgano, dependiente de la edad. Lo correcto
son las expresiones de "parodontitis" o incluso de
"paradontopatía inflamatoria". Ésta constituye, además de la
caries, la enfermedad más extendida de la cavidad bucal y se
presenta fundamentalmente en los adultos.
Se entiende por parodontitis una modificación
inflamatoria del tejido que rodea a los dientes, especialmente de
la mandíbula, provocada por bacterias. Una parodontitis (= con
participación de bolsas gingivales y del hueso) se desarrolla
siempre a partir de una inflamación de la gingiva (gingivitis) y
ataca en primer lugar a las cavidades interdentales que son
difícilmente accesibles a la limpieza. Las bacterias, que se
encuentran en las bolsas gingivales, tienen una acción destructiva
sobre la gingiva, sobre la dentina y sobre los huesos por medio de
sus productos de metabolismo, especialmente por medio de los VSC
producidos por los mismos y de este modo refuerzan permanentemente
la parodontitis ya existente.
Este problema de salud está muy extendido:
investigaciones muestran que aproximadamente a partir de una edad
de 35 años se pierden más dientes como consecuencia de las
parodontopatías (enfermedades de la gingiva) que como consecuencia
de las caries.
Las
metionina-\gamma-liasas (METasas)
pertenecen a una familia de enzimas, que se presentan en procariotas
y en eucariotas (sin embargo no en los mamíferos) y que catalizan
la conversión de la metionina en amoníaco, en
2-oxobutirato y en metilmercaptano. Como cofactor es
necesario el fosfato de piridoxal, que se enlaza en una región
conservada con la secuencia canónica
[DQ]-[LIMVF]-X(3)-[STAGC]-[STAGCI]-T-K-[FYWQ]-[LIVMF]-X-G-[HQ]-[SGNH],
actuando K como punto de enlace para el fosfato de piridoxal. En
este caso X designa aminoácidos arbitrarios, mientras que los
aminoácidos colocados entre corchetes describen, respectivamente,
las posibles alternativas para esta posición, es decir [DQ]
significa que en esta posición puede encontrarse bien de D o Q en la
secuencia canónica. Las METasas procedentes del protozoo
Trichomonas vaginalis y de las bacterias Pseudomonas
putida y Porphyromonas gingivalis han sido ya descritas
y caracterizadas. Para el Fusobacterium nucleatum se ha
identificado el gen METasa por medio de la anotación del
genoma.
Los autores Yoshimura M, Nakano Y, Yamashita Y,
Oho T, Saito T y Koga T. describen en la publicación "Formación
de metilmercaptan a partir de la L-metionina por
Porphyromonas gingivalis -Formation of methyl mercaptan from
L-methionine by Porphyromonas
gingivalis-"; Infect Immun. 2000 Dic;
68(12):6912-6; una
L-metionina-alfa-deamino-gama-mercaptometano-liasa
(METasa) a partir de P. gingivalis, que produce grandes
cantidades de metilmercaptano.
Desde luego, hasta el presente no ha sido
descrita la METasa, procedente de bacterias de la cavidad bucal, en
relación con la halitosis, como puede deducirse de la publicación de
los autores Yoshimura M, Nakano Y y Koga T;
"L-metionina-gamma-liasa, como una diana para inhibir el crecimiento de bacterias de mal olor por la triflúormetionina -L-Methioninegamma-lyase, as a target to inhibit malodorous bacterial growth by trifluoromethionine-"; Biochem Biophys Res Commun. 2002 Abr 12; 292(4):964-8; página 964, columna de la derecha, primer párrafo.
"L-metionina-gamma-liasa, como una diana para inhibir el crecimiento de bacterias de mal olor por la triflúormetionina -L-Methioninegamma-lyase, as a target to inhibit malodorous bacterial growth by trifluoromethionine-"; Biochem Biophys Res Commun. 2002 Abr 12; 292(4):964-8; página 964, columna de la derecha, primer párrafo.
La solicitante ha conseguido aclarar la
secuencia del bacterium oral Treponema denticola, que codifica la
proteína METasa y, por lo tanto, ha mostrado por primera vez que las
METasas se presentan también en Spirochaeten (WO 04/055202).
La secuencia de bases del gen mgl1 procedente de
T. denticola es idéntica en un 64,5% con la secuencia
procedente de P. gingivalis y contiene la región de enlace
de fosfato de piridoxal, que desde luego, a diferencia de lo que
ocurre con otras proteínas Mgl en la posición 209, presenta un Leu
en lugar de un Val (alineamiento CLUSTALW):
En este contexto es especialmente interesante el
intercambio de Glu por Thr en la posición 320, que podría indicar
un punto adicional de fosforilación en la proteína Mgl procedente de
T. denticola, que posiblemente podría servir como diana para
un inhibidor específico.
La diagnosis del olor bucal se lleva a cabo de
manera usual por medio de cultivos de bacterias, por medio de
métodos para detectar los sulfuros y por medio de métodos
organolépticos (olor), o por medio de dispositivos de medición como
el dispositivo "Halimeter®", que ha sido descrito en internet
bajo http://www.hatithose.de/halimtr.htm (estado a fecha de
16.12.2002).
Hasta el presente se ha intentado, en la mayoría
de las ocasiones, combatir la halitosis, la gingivitis o la
parodontitis por medio de productos activos bactericidas, que, sin
embargo, tienen en parte fuertes efectos secundarios. Otro
planteamiento prevé eliminar los VSCs con ayuda de compuestos que
contengan cinc. desde luego, este último procedimiento tiene como
consecuencia en todo caso una disminución momentánea de la formación
de olor y no previene contra la gingivitis ni contra la
parodontitis.
Por lo tanto, existe una considerable necesidad
de poner a disposición nuevos productos activos contra la
halitosis, la gingivitis o la parodontitis.
De manera sorprendente, se ha encontrado ahora
en un procedimiento de cribado por medio del empleo de
metionina-gama-liasas y de
extractos vegetales, que determinados extractos vegetales pueden
inhibir a las metionina-gama-liasas,
de tal manera que pueda ser empleado un procedimiento de cribado de
este tipo para encontrar productos activos contra la halitosis, la
gingivitis o la parodontitis.
El procedimiento de cribado para la
identificación de extractos vegetales activos contra la halitosis,
la gingivitis o la parodontitis, se caracteriza porque
- a)
- se aísla o se sintetiza in vitro un ácido nucleico, que codifica una metionina-gama-liasa, a partir de un organismo procariota o eucariota,
- b)
- se clona el ácido nucleico que codifica una metionina-gama-liasa y se expresa en células huésped adecuadas o se sintetiza en vitro la metionina-gama-liasa,
- c)
- se cultivan las células huésped, que expresan la metionina-gama-liasa, en cargas separadas entre sí en el espacio, en presencia de una fuente de azufre y de un gen detectable adecuado para los productos de la reacción por medio de reacciones catalizadas con metionina-gama-liasa; o se inserta en un sistema de ensayo in vitro la metionina-gama-liasa en cargas separadas entre sí en el espacio, en presencia de metionina, de cisteína o de glutationa,
- d)
- las cargas se combinan con diversos extractos vegetales,
- e)
- se determina para cada una de las cargas separadas entre sí en el espacio, la formación de productos de reacción por medio de reacciones catalizadas con metionina-gama-liasa y se identifican los extractos vegetales que son activos de este modo contra la halitosis, la gingivitis o la parodontitis.
De manera ventajosa, el procedimiento de cribado
posibilita, cuando se lleva a cabo con células huésped bacterianas
productoras de metionina-gama-liasa,
la identificación de extractos vegetales que impiden la formación de
VSC, sin destruir todos los microorganismos que están presentes en
la cavidad bucal. Con esta finalidad se eliminan todos los
extractos vegetales que ciertamente inhiben la formación de VSC,
pero que, al mismo tiempo, destruyen las células bacterianas.
De este modo, pueden ser encontrados productos
activos exentos de efectos secundarios o, al menos, pobres en
efectos secundarios, que no dañen la población bacteriana natural y
útil de la cavidad bucal.
De manera preferente, en la etapa a) se aísla o
se sintetiza un ácido nucleico que codifica una
metionina-gama-liasa, que se elige
entre los genes METasa procedentes del protozoo Trichomonas
vaginalis y de las bacterias Treponema denticola, Pseudomonas
putida, Clostridium sporogenes y Fusobacterium nucleatum,
de manera especialmente preferente la bacteria Treponema
denticola.
Un técnico en la materia tiene la posibilidad, a
través de los métodos conocidos en general en la actualidad, tales
como, por ejemplo, la síntesis química o la reacción en cadena de
polimerasa (RCP), en combinación con métodos estándar de la
biología molecular y/o de la química de proteínas, por medio de
secuencias conocidas de ADN y/o de aminoácidos, de preparar los
ácidos nucleicos correspondientes hasta incluso los genes completos.
Tales métodos son conocidos, por ejemplo, por la publicación
"Léxico de la Bioquímica -Lexikon der Biochemie-", Spektrum
Akademischer Verlag, Berlín, 1999, tomo 1, páginas
267-271 y tomo 2; páginas
227-229.
Se ha descrito una METasa procedente de
Clostridium sporogenes, por ejemplo, en la publicación de los
autores Kreis W y Hession C; "Aislamiento y purificación de la
L-metionina-alfa-deamino-gamma-mercaptometano-liasa
(L-metioninasa) a partir de Clostridium
sporogenes -Isolation and purification of
L-methionine-alpha-deamino-gammamercaptomethane-lyase
(L-methioninase) from Clostridium
sporogenes-"; Cancer Res. 1973 Agos;
33(8):1862-5.
De igual modo es preferente aislar o sintetizar
en la etapa a) un ácido nucleico que codifique una
metionina-gama-liasa, cuya
secuencia de nucleótidos coincida, al menos, en un 50%, al menos en
un 75%, al menos en un 80%, de manera preferente al menos en un
85%, de manera especial al menos en un 90%, de manera especialmente
preferente al menos en un 95% y, de una manera muy especialmente
preferente, en un 100% con la secuencia de nucleótidos indicada en
SEQ ID NO: 6 (gen de METasa procedente de Pseudomonas
putida), SEQ ID NO: 5 (gen de METasa procedente de
Fusobacterium nucleatum) o, de forma especialmente
preferente, con la secuencia de nucleótidos indicada en SEQ ID NO:
4 (gen de METasa procedente de Treponema denticola) de la
publicación WO 04/055202.
De igual modo, en la etapa a) se aísla o se
sintetiza un ácido nucleico, que codifica una
metionina-gama-liasa, cuya
secuencia de aminoácidos es idéntica al menos en un 70%, de manera
preferente al menos en un 80%, de manera especial al menos en un
90%, de manera especialmente preferente al menos en un 95% y, de una
manera muy especialmente preferente, en un 100% con una secuencia
de aminoácidos indicada en SEQ ID NO: 1 hasta 3 de la publicación
WO 04/055202, de manera especialmente preferente con la secuencia de
aminoácidos indicada en SEQ ID NO: 3, o cuya secuencia de
aminoácidos contenga una parte que sea idéntica al menos en un 70%,
de manera preferente al menos en un 80%, de manera especial al menos
en un 90%, de manera especialmente preferente al menos en un 95% y,
de una manera muy especialmente preferente, en un 100% con una de
las secuencias de aminoácidos indicadas en las SEQ ID NO: 1 hasta 3
de la publicación WO 04/055202.
De manera especialmente preferente, en la etapa
a) se aísla o se sintetiza un ácido nucleico, que codifica una
metionina-gama-liasa, cuya secuencia
de aminoácidos contiene una parte que es idéntica con la secuencia
canónica
[DQ]-[LIMVF]-X(3)-[STAGC]-[STAGCI]-T-K-[FYWQ]-[LIVMF]-X-G-[HQ]-[SGNH]
al menos en un 96%, de manera especial al menos en un 97%, de
manera preferente al menos en un 98%, de manera más preferente al
menos en un 99%, de manera especialmente preferente en un 100%.
De manera preferente, en la etapa c) del
procedimiento se expresa o se emplea una
metionina-gama-liasa, cuya
secuencia de aminoácidos coincida en al menos un 50%, de manera
preferente al menos en un 70%, de manera especial al menos en un
80%, de manera especialmente preferente al menos en un 90% y, de una
manera muy especialmente preferente, en un 100% con la secuencia de
aminoácidos indicada en la SEQ ID NO: 3 (METasa procedente de
Pseudomonas putida), SEQ ID NO: 2 (METasa procedente de
Fusobacterium nucleatum), o, de manera especialmente
preferente, con la secuencia de aminoácidos indicada en la SEQ ID
NO: 1 (METasa procedente de Treponema denticola) de la publicación
WO 04/055202.
Las células huésped, que son adecuadas para la
expresión en la etapa b), son microorganismos, especialmente
bacterias, de manera especialmente preferente son células de E.
coli.
Los agentes adecuados para la detección de los
productos de la reacción por medio de reacciones catalizadas con
metionina-gama-liasa son, por
ejemplo, sales de metales, que formen sales difícilmente solubles
con los iones sulfuro con un producto de solubilidad < 10 - 20,
preferentemente una sal de metal pesado, que precipite en forma de
compuesto difícilmente soluble con los iones sulfuro. Es adecuado,
por ejemplo, el acetato de plomo (concentración preferente:
aproximadamente 4 mg/l, concentración más amplia: aproximadamente
0,1 hasta aproximadamente 10 mg/l). Por otra parte son posibles
sales de Hg, Ni, Sb, Sn, Zn, Ag, Cu, Co, Cd, siendo preferentes la
Ag y el Cu además del Pb. Puesto que la solubilidad de los iones
sulfuro en ácidos es especialmente baja, es preferente un medio
ligeramente ácido (pH menor o igual que 7). Como fuente de azufre
pueden servir, además de la metionina, también otros aminoácidos
azufrados (especialmente la cisteína) y compuestos orgánicos del
azufre (la glutationa) (concentración preferente: aproximadamente
500 mg/l, concentración más amplia: aproximadamente 50 hasta
aproximadamente 1.000 mg/l). Los sulfuros, formados por las células
como consecuencia de la actividad METasa a partir de la metionina
como fuente de azufre, son precipitados en forma de sulfuro de plomo
y conducen a una coloración negra de la colonia.
La determinación de los productos de la reacción
por medio de reacciones catalizadas con
metionina-gama-liasa puede llevarse
a cabo por medio de uno de los agentes de detección que han sido
citados precedentemente o, por ejemplo, por medio de la detección
de los productos formados durante la reacción siguiente:
Metionina \rightarrow metilmercaptano +
\alpha-cetobutirato + amoníaco (catalizada con
METasa).
La actividad enzimática de la METasa se mide,
por ejemplo, indirectamente a través de la conversión del
\alpha-cetobutirato y del NADH_{2} para dar
2-hidroxibutirato y NAD^{+} en el fotómetro a 340
nm (máximo de absorción del NADH_{2}) por medio de la disminución
de la extinción.
Con el fin de preparar la proteína METasa para
el empleo en preparados industriales, cosméticos o farmacéuticos,
entran en consideración todos los procedimientos destinados a la
obtención de proteínas recombinantes.
De conformidad con la invención, se ha
encontrado que los extractos vegetales procedentes de aguarilla, de
aceitunas, de trébol rojo, de flores de tilo y de mate son adecuados
de una manera especialmente buena para las finalidades de
conformidad con la invención, siendo especialmente preferentes los
extractos procedentes de aguarilla.
En este caso, las investigaciones de inhibición
con otros enzimas fundamentan la suposición de que el efecto
inhibidor del enzima no está limitado únicamente a las METasas.
En la publicación WO 02/094300 se han descrito
ya composiciones para el tratamiento de lesiones mucosales que
pueden contener extractos vegetales procedentes de Salix alba,
Camellia sinensis o Melissa officinalis.
Por otra parte, el autor R.A. Locock (Canadian
Pharmaceutical Journal (2000), 133(5), 38-40)
describe el empleo de aguarilla para el tratamiento de
inflamaciones del tracto urinario. Los autores Gloeckl et al.
(Journal of Chromatography B (2001), 761(2),
261-266 así como los autores Paper et al.
(Planta Medica (1993), 59(7), A589) han informado sobre el
empleo de extractos de hoja de aguarilla como antiséptico para el
tracto urinario. Por otra parte se divulga en la publicación
JP62148426 el empleo de extracto de aguarilla para el tratamiento
de la paradontosis, estando basado el efecto en una inhibición de la
actividad del colágeno.
En la publicación JP2002104983 se describe el
empleo de extractos de Tilia sp. para impedir la adherencia
de las bacterias Streptococcus mutans y S. sobrinus y,
por lo tanto, para impedir la caries. En la publicación BG107649 se
describe un agente farmacéutico espumante para la aplicación oral,
que puede contener, entre otros, un extracto de Tilia
grandifolia.
En la publicación WO 04/062639 se han descrito
composiciones para goma de mascar que pueden contener extractos
procedentes de Olea europensis o de Trifolium
pratense. Puede deducirse de la publicación WO 05/063195, que
las composiciones, que contienen, entre otros, un extracto
procedente de Olea europea, pueden ser empleadas para el
tratamiento de las lesiones de la membrana mucosa.
Puede deducirse por la publicación JP2003073287,
que puede ser empleado un extracto procedente de Ilex
latifolia en pasta dental, en agua para hacer gárgaras o en
agentes refrescantes orales.
Un objeto de la presente invención está
constituido, por lo tanto, por el empleo de un extracto vegetal en
un agente cosmético para impedir o para el tratamiento del olor
bucal o bien de la halitosis, caracterizado porque el extracto
vegetal se elige entre los extractos de Arctostaphylos sp.,
de Tilia sp., de Olea sp., de Trifolium sp. o
de Ilex sp. o entre las mezclas de los mismos.
El extracto procedente de Arctostaphylos
sp. está constituido, de manera preferente, por un extracto
procedente de Arctostaphylos uva-ursi
(aguarilla). Con los extractos procedentes de las hojas de aguarilla
pudo conseguirse un valor de inhibición muy bueno con una
inhibición del 80%. De manera especial se emplearon extractos de
glicerina así como extractos sobre soportes de
maltodextrina/sílice.
El extracto procedente de Tilia sp. está
constituido, de manera preferente, por un extracto procedente de
Tilia cordata. Pudo conseguirse un valor aún bueno con una
inhibición del 34% de la METasa con un extracto de
agua/propilenglicol procedente de las hojas de tilo.
El extracto procedente de Olea spec. está
constituido, de manera preferente, por un extracto procedente de
Olea europea (aceituna). De este modo pudo conseguirse una
inhibición del 50% de la METasa. De manera especial se empleó un
extracto de agua/etanol procedente de hojas sobre soportes de
maltodextrina/sílice.
El extracto procedente de Trifolium spec.
(trébol) está constituido, de manera preferente, por un extracto
procedente de trébol rojo (Trifolium pratense). De este modo
pudo conseguirse una inhibición del 47% de la METasa. De manera
especial se empleó un extracto procedente de flores sobre soportes
de sílice.
El extracto procedente de Ilex spec. está
constituido, de manera preferente, por un extracto procedente de
Ilex paraguariensis (mate). De este modo pudo conseguirse una
inhibición del 57% de la METasa. De manera especial se empleó un
extracto de propilenglicol/agua procedente de hojas.
La obtención de los extractos puede llevarse a
cabo básicamente en la forma conocida por cualquier técnico en la
materia por medio del empleo de cualquier tejido vegetal arbitrario
y con empleo de cualquier medio de extracción arbitrario. De este
modo, el extracto vegetal puede llevarse a cabo, por ejemplo, por
medio de la extracción de toda la planta, por medio de la
extracción de las flores, de las hojas, de los frutos, de las
semillas, de las raíces y/o por medio de la extracción a partir del
meristema de la planta.
Como agentes de extracción para la obtención de
los extractos vegetales citados pueden ser empleados, por ejemplo,
el agua, los alcoholes así como sus mezclas. Como alcoholes entran
en consideración, por ejemplo, los alcoholes inferiores tales como
el etanol y el isopropanol, de manera especial sin embargo también
entran en consideración los alcoholes polivalentes tales como el
etilenglicol, el propilenglicol, el butilenglicol y la glicerina y,
concretamente, tanto como agente de extracción único así como,
también, en mezcla con agua. De este modo se han revelado como
especialmente adecuados, por ejemplo, los extractos vegetales a base
de agua/polietilenglicol en la relación comprendida entre 1 : 10 y
10 : 1. La extracción puede llevarse a cabo, por ejemplo, en forma
de destilación con vapor de agua. En caso dado puede llevarse a cabo
también una extracción en seco y/o una extracción con dióxido de
carbono.
Los extractos vegetales pueden ser empleados, de
conformidad con la invención, tanto en forma pura así como,
también, en forma diluida. En tanto en cuanto sean empleados en
forma diluida, éstos contienen, de manera usual, desde
aproximadamente un 2 hasta un 80% en peso de substancia activa y
como disolvente el agente de extracción o la mezcla de los agentes
de extracción empleados para su obtención. De conformidad con la
elección del agente de extracción, puede ser preferente estabilizar
el extracto vegetal por medio de la adición de un solubilizante.
Como solubilizantes son adecuados, por ejemplo, los productos de
etoxilación de los aceites vegetales y animales, en caso dado
endurecidos. Los solubilizantes preferentes son los monoglicéridos,
los diglicéridos y los triglicéridos etoxilados de los ácidos
grasos con 8 hasta 22 átomos de carbono con 4 hasta 50 unidades de
óxido de etileno, por ejemplo el aceite de castor etoxilado
hidrogenado, el etoxilato de aceite de oliva, el etoxilato de
aceite de almendras, el etoxilato de aceite de visón, los glicéridos
del ácido polioxietilenglicolcaprílico/caprínico, el monolaurato de
polioxietilenglicerina y los glicéridos de polioxietilenglicol de
los ácidos grasos de coco.
Los extractos vegetales pueden ser aplicados,
así mismo, sobre soportes en una forma de realización preferente,
de conformidad con la invención, de manera especial para poderlos
incorporar mejor en productos. Los soportes adecuados de
conformidad con la invención son, por ejemplo, la maltodextrina, el
talco y la sílice.
Los extractos vegetales pueden ser adquiridos en
el comercio, por ejemplo, en las firmas Cosmetochem (Alemania) o
Cognis (Alemania).
Otro objeto de la presente invención está
constituido por composiciones farmacéuticas, que contienen un
extracto vegetal elegido entre los extractos de Tilia sp.,
de Trifolium sp. o de Ilex sp. o entre las mezclas de
los mismos, en caso dado en forma enlazada en soportes, estando
constituidas las preparaciones farmacéuticas por aquellas que están
destinadas al empleo en el tratamiento de la halitosis, de la
gingivitis o de la parodontitis. El objeto de la presente invención
está constituido, así mismo, por el empleo de los extractos
vegetales citados para la obtención de una preparación farmacéutica
destinada al tratamiento o para impedir la halitosis, la gingivitis
o la parodontitis.
Otro objeto de la presente invención está
constituido por una composición farmacéutica destinada a ser
empleada en el tratamiento de la halitosis, caracterizada porque
contiene un extracto vegetal elegido entre los extractos de
Arctostaphylos sp. o de Olea sp. o entre las mezclas
de los mismos.
Las composiciones farmacéuticas, de conformidad
con la invención, pueden estar constituidas por cualquier forma de
administración arbitraria.
Las composiciones farmacéuticas, de conformidad
con la invención, están constituidas, de manera preferente, por un
agente para el cuidado oral, especialmente por un baño bucal, un
gel, una loción líquida para la limpieza de los dientes, una pasta
rígida dental, una goma de mascar, un limpiador para la dentadura o
una crema para la sujeción de las prótesis. De igual manera, el
empleo cosmético, de conformidad con la invención, se lleva a cabo
preferentemente en una forma de realización de este tipo.
\vskip1.000000\baselineskip
Los extractos a ser empleados de conformidad con
la invención están contenidos en los agentes para el cuidado de la
boca o de los dientes en cantidades comprendidas entre un 0,001 y un
10% en peso, de manera especialmente preferente en cantidades
comprendidas entre un 0,01 y un 2,0% en peso, ante todo en
cantidades comprendidas entre un 0,05 y un 1,0% en peso.
Con esta finalidad, es necesario incorporar en
un soporte adecuado las substancias y/o los extractos de conformidad
con la invención.
Como soportes pueden servir también, por
ejemplo, preparaciones en forma de polvo o soluciones
acuosas-alcohólicas que pueden contener como baño
bucal desde 0 hasta un 15% en peso de etanol, desde un 1 hasta un
1,5% en peso de esencias aromatizantes y desde un 0,01 hasta un
0,5% en peso de edulcorantes o como concentrado para baño bucal
desde un 15 hasta un 60% en peso de etanol, desde un 0,05 hasta un
5% en peso de esencias aromatizantes, desde un 0,1 hasta un 3% en
peso de edulcorantes así como, en caso dado, otros productos
auxiliares y que son diluidos con agua como paso previo a su
utilización. La concentración de los componentes debe elegirse en
este caso de una manera tan elevada, que no se descienda, tras la
dilución, por debajo de los límites de concentración citados en el
momento de la aplicación.
Como soportes pueden servir también geles así
como pastas más o menos esparcibles, que son expulsadas a presión a
partir de recipientes flexibles de material sintético o de tubos y
que son aplicadas sobre los dientes con ayuda de un cepillo dental.
Tales productos contienen elevadas cantidades de agentes humectantes
y de agentes aglutinantes o de reguladores de la consistencia y de
componentes de pulimento. Por otra parte están contenidos así mismo
en estas preparaciones esencias aromatizantes, edulcorantes y
agua.
Como agentes humectantes pueden estar contenidos
en este caso, por ejemplo, la glicerina, la sorbita, la xilita, los
propilenglicoles, los polietilenglicoles o mezclas de estos
polioles, de manera especial aquellos polietilenglicoles con pesos
moleculares comprendidos entre 200 y 800 (desde 400 hasta 2.000).
Como agente humectante preferente está contenida la sorbita en una
cantidad comprendida entre un 25 y un 40% en peso.
Como productos activos antisarro y como
inhibidores de la desmineralización pueden estar contenidos fosfatos
condensados en forma de sus sales alcalinas, de manera preferente
en forma de sus sales de sodio o de potasio. Las soluciones acuosas
de estos fosfatos tienen una reacción alcalina como consecuencia de
su efecto hidrolizante. El valor del pH de los agentes para el
cuidado de la boca, de los dientes y/o de las prótesis dentales, de
conformidad con la invención, se regula por medio de la adición de
ácidos a valores comprendidos, de manera preferente, entre 7,5 y
9.
De la misma manera, pueden ser empleadas mezclas
de diversos fosfatos condensados o incluso sales hidratadas de los
fosfatos condensados. Las cantidades especificadas comprendidas
entre un 2 y un 12% en peso se refieren sin embargo a las sales
anhidras. Como fosfato condensado está contenido, de manera
preferente, un tripolifosfato de sodio o de potasio en una cantidad
comprendida entre un 5 y un 10% en peso de la composición.
Un producto activo, que está contenido de manera
preferente, es un compuesto de flúor inhibidor de la caries,
preferentemente del grupo formado por los fluoruros o por los
monoflúorfosfatos en una cantidad comprendida entre un 0,1 y un
0,5% en peso de flúor. Los compuestos de flúor adecuados son, por
ejemplo, el monoflúorfosfato de sodio (Na_{2}PO_{3}F), el
monoflúorfosfato de potasio, el fluoruro de sodio o el fluoruro de
potasio, el fluoruro de estaño o el fluoruro de un aminocompuesto
orgánico.
Como agentes aglutinantes y reguladores de la
consistencia sirven, por ejemplo, los polímeros naturales y
sintéticos, solubles en agua, tales como el Carragheen, el
tragacanto, el guar, los almidones y sus derivados no ionógenos
tales como, por ejemplo, el hidroxipropilguar, los
hidroxietilalmidones, los éteres de celulosa tales como, por
ejemplo, la hidroxietilcelulosa o la metilhidroxipropilcelulosa. Así
mismo el agar-agar, la goma de xantano, la pectina,
los polímeros carboxivinílicos solubles en agua (por ejemplo tipos
de Carbopol®), el alcohol polivinílico, el polivinilpirrolidona,
los polietilenglicoles de elevado peso molecular (peso molecular
comprendido entre 10^{3} y 10^{6} D). Otros productos, que son
adecuados para el control de la viscosidad son los silicatos
estratificados tales como, por ejemplo, las arcillas de
montmorillonita, los ácidos silícicos espesantes coloidales, por
ejemplo, el ácido silícico en aerogel o los ácidos silícicos
pirógenos.
Como componentes de pulimento pueden ser
empleados todos los agentes de pulimentación conocidos con esta
finalidad, de manera preferente, sin embargo, los ácidos silícicos
de precipitación y gelificados, el hidróxido de aluminio, el
silicato de aluminio, el óxido de aluminio, el trihidrato de óxido
de aluminio, el metafosfato de sodio insoluble, el pirofosfato de
calcio, el hidrógenofosfato de calcio, el fosfato dicálcico, la
creta, la hidroxilapatita, la hidrotalcita, el talco, el silicato
de magnesio y de aluminio (Veegum®), el sulfato de calcio, el
carbonato de magnesio, el óxido de magnesio, los silicatos de sodio
y de aluminio, por ejemplo la zeolita A o los polímeros orgánicos,
por ejemplo el polimetacrilato. Los agentes de pulimentación son
empleados de manera preferente en cantidades bajas por ejemplo
comprendidas entre un 1 y un 10% en peso.
Los productos para el cuidado de los dientes y/o
para el cuidado de la boca, de conformidad con la invención, pueden
ser mejorados, en lo que respecta a sus propiedades organolépticas,
por medio de la adición de esencias aromatizantes y de agentes
edulcorantes. Como esencias aromatizantes entran en consideración
todos los aromas naturales y sintéticos que pueden ser empleados
para los agentes destinados al cuidado de la boca, de los dientes
y/o de las prótesis dentales. Los aromas naturales pueden ser
empleados tanto en forma de los aceites etéricos aislados a partir
de las drogas así como, también, en forma de los componentes
individuales aislados a partir de los mismos. De manera preferente,
debería estar presente, al menos, una esencia aromatizante elegida
del grupo formado por la esencia de menta piperita, la esencia de
hierbabuena rizada, la esencia de anís, la esencia de comino, la
esencia de eucalipto, la esencia de hinojo, la esencia de canela, la
esencia de geranio, la esencia de salvia, la esencia de tomillo, la
esencia de mejorana, la esencia de albahaca, la esencia de
cítricos, la esencia de gaulteria u uno o varios componentes de
estas esencias, aislados a partir de los mismos, preparados por
síntesis. Los componentes más importantes de las esencias citadas
son, por ejemplo, el mentol, el carvon, el anetol, el cineol, el
eugenol, el cinamoaldehído, el geraniol, el citronelol, el linalool,
el salveno, el timol, el terpineno, el terpinol, el metilcavicol y
el salicilato de metilo. Otros aromas adecuados son, por ejemplo,
el acetato de mentilo, la vainilla, la yonona, el acetato de
linalilo, el rodinol y la piperitona. Como agentes edulcorantes son
adecuados bien los azúcares naturales, tales como la sucrosa, la
maltosa, la lactosa y la fructosa, o bien los edulcorantes
sintéticos tales como, por ejemplo, la sal sódica de la sacarina, el
ciclamato de sodio o el aspartamo.
En este caso pueden ser empleados como
tensioactivos de manera especial los
alquil-(oligo)-glicósidos y/o los
alquenil-(oligo)-glicósidos. Su obtención y su
empleo como productos tensioactivos son conocidos, por ejemplo, por
las publicaciones US-A-3 839 318,
US-A-3 707 535,
US-A-3 547 828 DE-A-
19 43 689, DE-A-20 36 472 y
DE-A-30 01 064 así como por la
publicación EP-A-77 167. En lo que
se refiere al resto glicósido se cumple que son adecuados tanto los
monoglicósidos (x = 1), en los cuales un resto de pentosa o un resto
de hexosa está enlazado de manera glicosídica sobre un alcohol
primario con 4 hasta 16 átomos de carbono, así como, también, los
glicósidos oligómeros con un grado de oligomerización x de hasta 10.
El grado de oligomerización es, en este caso, un valor medio
estadístico en el que está basada usualmente la distribución de los
homólogos para los productos industriales de este tipo.
Como alquil-(oligo)-glicósido
y/o como alquenil-(oligo)-glicósido especialmente
adecuado es un alquil-(oligo)glucósido y/o un
alquenil-(oligo)-glucósido de la fórmula
RO(C_{6}H_{10}O)_{x}-H, en la
que R es un grupo alquilo y/o un grupo alquenilo con 8 hasta 14
átomos de carbono y x tiene un valor medio comprendido entre 1 y 4.
Son especialmente preferentes aquellos alquiloligoglucósidos a base
de alcoholes de coco endurecidos con 12/14 átomos de carbono con un
DP comprendido entre 1 y 3. El tensioactivo constituido por el
alquil-glicósido y/o por el
alquenil-glicósido puede ser empleado de una manera
muy austera, siendo suficientes ya cantidades comprendidas entre un
0,005 y un 1% en peso.
Además de los tensioactivos de alquilglucósido,
que han sido citados, pueden estar contenidos también otros
tensioactivos no iónicos, anfolíticos y catiónicos, siendo éstos,
por ejemplo: los poliglicolétersulfatos de los alcoholes grasos,
los monoglicéridosulfatos, los monoglicéridoetersulfatos, los
sulfosuccinatos de monoalquilo y/o de dialquilo, los isetionatos de
los ácidos grasos, los sarcosinatos de los ácidos grasos, los
tauridos de los ácidos grasos, los glutamatos de los ácidos grasos,
los ácidos etercarboxílicos, las glucamidas de los ácidos grasos,
las alquilamido-betaínas y/o los condensados de
ácidos grasos con proteínas, siendo éstos últimos preferentemente a
base de proteínas de trigo. Para la solubilización de las esencias
aromatizantes, que son insolubles en agua en la mayoría de los
casos, puede ser necesario, de manera especial, un solubilizante no
ionógeno del grupo de los compuestos tensioactivos. Con esta
finalidad, son especialmente adecuados, por ejemplo, los glicéridos
oxetilados de los ácidos grasos, los ésteres parciales de sorbitán
de los ácidos grasos oxetilados o los ésteres parciales de los
ácidos grasos de oxetilatos de glicerina o de sorbitán. Los
solubilizantes del grupo de los glicéridos oxetilados de los ácidos
grasos abarcan, ante todo, los productos de adición de 20 hasta 60
moles de óxido de etileno sobre monoglicéridos y sobre diglicéridos
de los ácidos grasos lineales con 12 hasta 18 átomos de carbono o
sobre los triglicéridos de los ácidos hidroxigrasos tales como el
ácido oxiesteárico o el ácido ricinoleico. Otros solubilizantes
adecuados son los ésteres parciales de sorbitán, oxetilados, de los
ácidos grasos; siendo éstos, de manera preferente, los productos de
adición de 20 hasta 60 moles de óxido de etileno sobre los
monoésteres de sorbitán y sobre los diésteres de sorbitán de los
ácidos grasos con 12 hasta 18 átomos de carbono. De igual modo, los
solubilizantes adecuados son los ésteres parciales de los ácidos
grasos de oxetilatos de glicerina o de sorbitán; siendo éstos
preferentemente los monoésteres y los diésteres de los ácidos
grasos con 12 hasta 18 átomos de carbono y los productos de adición
de 20 hasta 60 moles de óxido de etileno sobre 1 mol de glicerina o
sobre 1 mol de sorbita.
Los agentes para el cuidado de la boca, de los
dientes y/o de las prótesis dentales, de conformidad con la
invención, contienen, de manera preferente, a título de
solubilizantes para las esencias aromatizantes, que están
contenidos en caso dado, los productos de adición de 20 hasta 60
moles de óxido de etileno sobre aceite de ricino endurecido o no
endurecido (es decir sobre el triglicérido del ácido oxiesteárico o
del ácido ricinoleico), sobre monoestearato y/o diestearato de
glicerina o sobre monoestearato y/o diestearato de sorbitán.
Otros aditivos usuales para los agentes para el
cuidado de la boca, de los dientes y/o de las prótesis dentales son,
por ejemplo
- \bullet
- los pigmentos, por ejemplo el dióxido de titanio y/o los colorantes,
- \bullet
- los agentes para el ajuste del pH y las substancias tampón tales como, por ejemplo, el bicarbonato de sodio, el citrato de sodio, el benzoato de sodio, el ácido cítrico, el ácido fosfórico o las sales ácidas, por ejemplo el NaH_{2}PO_{4},
- \bullet
- los productos para la curación de las heridas e inhibidores de la inflamación tales como, por ejemplo, la alantoína, la urea, el pantenol, el azuleno o bien el extracto de manzanilla,
- \bullet
- otros productos activos contra el sarro tales como, por ejemplo, los órganofosfatos, por ejemplo el difosfonato de hidroxietano o el difosfonato de azacicloheptano,
- \bullet
- los productos para la conservación tales como, por ejemplo, las sales del ácido sórbico, los ésteres del ácido p-hidroxibenzoico,
- \bullet
- los inhibidores de la placa tales como, por ejemplo, el hexaclorofeno, la clorhexidina, la hexetidina, el triclosano, el bromoclorofeno, los ésteres del ácido fenilsalicílico. En una forma preferente de realización, la composición es un enjuague bucal, un baño bucal, un limpiador para prótesis o es un agente para la fijación de las prótesis.
- De igual modo, son adecuados para los limpiadores de prótesis preferentes, de conformidad con la invención, especialmente para tabletas y polvos para la limpieza de las prótesis, además de los componentes que ya han sido citados para el cuidado de la boca, de los dientes y/o de las prótesis dentales, así mismo, también, los percompuestos tales como, por ejemplo, el peroxoborato, el peroxomonosulfato o el percarbonato. Estos percompuestos tienen la ventaja de que, además del efecto blanqueante, actúan al mismo tiempo también como desodorantes y/o desinfectantes. El empleo de tales percompuestos en los limpiadores para prótesis está comprendido entre un 0,01 y un 10% en peso, de manera especial está comprendido entre un 0,5 y un 5% en peso.
Así mismo, son adecuados a título de otros
componentes los enzimas, tales como, por ejemplo, las proteasas y
las carbohidrasas, para la degradación de proteínas y de hidratos de
carbono. El valor del pH puede estar comprendido entre pH 4 y pH
12, de manera especial puede estar comprendido entre pH 5 y pH
11.
Para las tabletas, que están destinadas a la
limpieza de las prótesis, son necesarios además también otros
productos auxiliares tales como, por ejemplo, agentes que provoquen
un efecto efervescente, tales como, por ejemplo, productos que
liberen CO_{2} como el hidrógenocarbonato de sodio, cargas, por
ejemplo el sulfato de sodio o la dextrosa, agentes lubrificantes,
por ejemplo el estearato de magnesio, agentes para la regulación de
la fluencia, tal como, por ejemplo, el dióxido de silicio coloidal y
agentes de granulación tales como los polietilenglicoles de elevado
peso molecular o la polivinilpirrolidona que ya han sido
citados.
Los agentes para la fijación de las prótesis
pueden ser comercializados en forma de polvo, de cremas, de láminas
o de líquidos y favorecen la fijación de las prótesis.
Como productos activos son adecuados agentes de
hinchamiento naturales y sintéticos. Como agentes de hinchamiento
naturales quedan comprendidos, además de los alginatos, también las
gomas vegetales tales como, por ejemplo, la goma arábiga, el
tragacanto y la goma de Karaya así como el caucho natural. De manera
especial se han acreditado los alginatos y los agentes de
hinchamiento sintéticos tales como, por ejemplo, la
carboximetilcelulosa de sodio, los copolímeros de óxido de etileno
de elevado peso molecular, las sales del ácido
poli(vinil-éter-co-maleico) y
las poliacrilamidas.
A título de productos auxiliares para los
productos pastosos y líquidos son adecuadas, de manera especial,
las bases hidrófobas, especialmente los hidrocarburos, tales como,
por ejemplo, la vaselina blanca (DAB) o el aceite de parafina.
Los ejemplos siguientes explican la invención
sin que ésta quede limitada en modo alguno:
Se amplificó la secuencia codificante del gen
mgl1 (gen METasa) procedente de T. denticola con ayuda
de comparaciones con el banco de datos por medio de la reacción en
cadena de polimerasa RCP y se clonó en un vector comercialmente
disponible (pGEM-TEasy, Promega). La expresión en
E. coli puede ser aprovechada de la manera siguiente para el
cribado de los extractos vegetales activos de conformidad con la
invención.
Se cultivan las células de E. coli,
transformadas con el vector que contiene el gen mgl1, sobre
medios nutrientes sólidos (por ejemplo medio LB, 1% de triptona, 5%
de extracto de levadura, 0,5% de NaCl, 1 - 2% de agar). Para la
detección de la formación de compuestos azufrados se aporta al medio
una fuente de azufre (metionina; concentración preferente: 350
mg/l, concentración más amplia: 50 - 1.000 mg/l) y una sal de metal
pesado, que precipite con los iones sulfuro en forma de compuesto
difícilmente soluble. En el ejemplo se aportó acetato de plomo al
medio (concentración preferente: 4 mg/l, concentración más amplia:
0,1 - 10 mg/l).
El cultivo de las bacterias se lleva a cabo a
37ºC durante 2 - 7 días (preferentemente durante 3 días) bajo
condiciones anaerobias en cápsulas de Petri o en placas
multipocillos. Así mismo es posible la incubación aerobia, sin
embargo requiere una duración de la incubación comprendida entre 5 y
10 días.
El efecto inhibidor del extracto vegetal, a ser
ensayado, se pone de manifiesto por medio de la ausencia de
coloración negra de las colonias. En este caso es ventajoso el que
puede verificarse al mismo tiempo una propiedad inhibidora del
crecimiento del extracto vegetal puesto que la expresión del gen
mgl1 por sí solo no tiene ningún efecto sobre el
crecimiento.
Se dota al gen mgl1, procedente de T.
denticola, sobre el extremo 5' con una secuencia, que codifica
seis restos de histidina y se clona en un vector de expresión con
promotor expresado constituyente (pGEM). Las células, transformadas
con este plásmido, se cultivan durante la noche en medio LB, a
continuación se inoculan otros 50 ml de cultivo con una densidad
óptica OD_{600} = 0,05 procedente del cultivo previo y se
cultivan a 37ºC hasta una OD_{600} = 0,2. El cultivo se separa por
centrifugación, se vuelve a suspender en 1 ml de tampón para lisis
(NaH_{2}PO_{4} 50 mM; NaCl 300 mM; imidazol 10 mM; pH 8) y se
congela al menos durante la noche a -70ºC. La digestión se lleva a
cabo tras adición de lisozima (concentración final 1 mg/ml) y tras
una etapa de incubación de 30 minutos sobre hielo bajo condiciones
naturales por medio de ultrasonidos (en total 2 minutos
respectivamente con 5 segundos de pulsación y 5 segundos de pausa).
El lisado se centrifuga durante 20 a 30 minutos a 13.000
revoluciones por minuto y se purifican 600 \mul del sobrenadante
a través de una columna Ni-NTA (Qiagen) según las
indicaciones del fabricante.
El ensayo enzimático, propiamente dicho, para el
cribado de las substancias activas, de conformidad con la
invención, se lleva a cabo de la manera siguiente:
Se incuban entre 10 y 100 \mug (1 - 1.000
\mug) del enzima purificado en 50 mM de tampón
tris-HCl (pH 7 (6 - 8)) junto con 100 mM de
metionina (10 - 1.000 mM), 2 mM (1 - 10 mM) de NADH, 100 \muM de
fosfato de piridoxal y 10 U de lactatodehidrogenasa (Roche,
preferentemente procedente de células del músculo cardíaco,
isoenzima LDH-1) o hidroxibutiratodehidrogenasa
(TEso Diagnostics) a 25ºC (en recipientes de reacción de Eppendorf o
en placas para microtitulación).
La actividad enzimática de la METasa puede
medirse indirectamente a través de la reacción del
2-oxobutirato y del NADH_{2} para dar
2-hidroxibutirato y NAD^{+} en el fotómetro a 340
nm (máximo de absorción del NADH_{2}) a través de la disminución
de la extinción. De manera alternativa, puede medirse la conversión
en cubetas también por medio de la observación directa en el
fotómetro. La duración de la incubación está comprendida entre 10 y
30 minutos a 25ºC.
Otro método para la determinación de la
actividad enzimática consiste en la reacción del metilmercaptano
formado con el ácido
5,5'-ditio-bis-2-nitrobenzoico
(DTNB; Sigma Aldrich). Con esta finalidad se combina la carga del
ensayo enzimático, que ha sido descrito precedentemente, en la
cubeta con DTNB (concentración final 0,1 mM) y se sigue la
conversión en un arilmercaptano a 412 nm por vía fotométrica.
Con ayuda de este ensayo pueden ser ensayados
los extractos vegetales en cuanto a su efecto inhibidor frente a
la METasa, siendo importante un control en el que sea ensayado el
extracto vegetal en cuanto a su efecto inhibidor sobre la LDH. Con
esta finalidad se lleva a cabo el ensayo precedente sin metionina ni
METasa, sin embargo en presencia de 2 mM de piruvato. Los posibles
efectos inhibidores pueden eliminarse por medio de la adición de
Na_{2}SO_{3}.
La detección de la actividad enzimática de Mgl1
puede llevarse a cabo a través de una reacción de coloración, en la
que se detecta el metilmercaptano, liberado a partir de la
metionina, por medio del ácido
5,5'-ditiobis(2-nitrobenzoico)
(DTNB). El DTNB se convierte en este caso por medio del
metilmercaptano en la substancia amarilla constituida por el ácido
mercaptonitrobenzoico MNB, cuya formación puede seguirse en el
fotómetro a 412 nm (figura 1).
De manera correspondiente se ensayaron los
productos inhibidores del Mgl1 con ayuda de este ensayo,
combinándose 10 \mul de extracto de proteína procedente de cepas,
que expresan el Mgl1 de E. coli con 5 \mul de DTNB 2 mM,
10 \mul de metionina 100 mM, 10 \mul de tris 1 M, pH 8, 45
\mul de agua, 10 \mul de fosfato de piridoxal 100 \muM y el
producto activo (extracto acuoso al 1%; extracto seco 0,1%). Al cabo
de 120 minutos se midió la extinción a 412 nm y se comparó con un
control sin producto activo.
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(Tabla pasa a página
siguiente)
En lo que se refiere a las secuencias de las
METasas, que pueden ser empleadas de manera preferente, y de los
ácidos nucleicos que codifican este enzima, se hace referencia a la
solicitud de patente publicada, no examinada, WO 04/055202.
Claims (6)
1. Empleo de un extracto vegetal en un medio
cosmético para impedir o para el tratamiento de la halitosis,
caracterizado porque el extracto vegetal se elige entre los
extractos de Arctostaphylos sp., de Tilia sp., de
Olea sp., de Trifolium sp. o de Ilex sp. o
entre las mezclas de los mismos.
2. Empleo según la reivindicación 1,
caracterizado porque el agente está constituido por un agente
para el cuidado oral.
3. Composición farmacéutica para ser empleada en
el tratamiento de la halitosis, de la gingivitis o de la
parodontitis, que contiene un extracto vegetal elegido entre los
extractos de Tilia sp., de Trifolium sp. o de Ilex
sp. o entre las mezclas de los mismos.
4. Composición farmacéutica para ser empleada en
el tratamiento de la halitosis, que contiene un extracto vegetal
elegido entre los extractos de Arctostaphylos sp. o de
Olea sp. o entre las mezclas de los mismos.
5. Composición farmacéutica según la
reivindicación 3 o 4, caracterizada porque está constituida
por un baño bucal, un gel, una loción líquida para la limpieza de
los dientes, una pasta rígida dental, una goma de mascar, un
limpiador para la dentadura o una crema para la sujeción de las
prótesis.
6. Empleo de un extracto vegetal elegido entre
los extractos de Tilia sp., de Trifolium sp. o de
Ilex sp. o entre las mezclas de los mismos, para la
obtención de una composición farmacéutica destinada al tratamiento o
para impedir la halitosis, la gingivitis o la parodontitis.
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