ES2318927A1

ES2318927A1 - Nuevos dimeros de acidos biliares funcionalizados en la posicion 24 de la cadena alquilica de la sal biliar. procedimientos para su obtencion y aplicaciones.

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Publication number: ES2318927A1
Application number: ES200502693A
Authority: ES
Inventors: Jose Vazquez Tato; Victor Hugo Soto Tellini; Juan Ventura Trillo Novo; Francisco Meijide Del Rio; Mercedes Alvarez Alcalde; Alvaro Antelo Queijo; Jorge Carrazana Garcia; Aida Jover Ramos
Original assignee: Universidade de Santiago de Compostela
Current assignee: Universidade de Santiago de Compostela
Priority date: 2005-08-25
Filing date: 2005-08-25
Publication date: 2009-05-01
Anticipated expiration: 2025-08-25
Also published as: ES2318927B1

Abstract

Nuevos dímeros de ácidos biliares funcionalizados en la posición 24 de la cadena alquílica de la sal biliar. Procedimientos para su obtención y aplicaciones. Los nuevos compuestos resultan de la conjugación de 24-aminoderivados de ácidos biliares naturales, cólico, desoxicólico, ursodesoxicólico, quenodesoxicólico y litocólico con compuestos de carácter ácido activados que actúan como puente de unión entre los dos esteroides. Los puentes utilizados son los derivados de los compuestos: N,N''-1,2-etanodiilbis[N (carboximetil), 1,1''-dimetil éster]glicina; ácido, 1,4-dimetil éster-1,2,4,5- bencenotetracarboxílico; ácido 1,5-dimetil éster-1,2,4,5-bencenetetracarboxílico; y N,N-bis[2-(2,6-dioxo-4-morfolinil)etil]glicina. Los procedimientos empleados para la preparación de los derivados anteriores, consisten en reacciones; (1) del grupo amino del ácido biliar con un cloruro de ácido; (2) del grupo amino del ácido biliar con un ácido activado con especies como DEPC o HOBt/DCC o DIC; y (3)del grupo amino del ácido biliar con un anhídrido. A partir de los ácidos sintetizados, se obtienen las sales sódicas y potásicas.

Description

Nuevos dímeros de ácidos biliares funcionalizados en la posición 24 de la cadena alquílica de la sal biliar. Procedimientos para su obtención y aplicaciones.

Sector de la técnica

La presente invención describe nuevos compuestos tensioactivos, obtenidos a partir del acoplamiento de los 24-aminoderivados de ácidos biliares naturales con cloruros de ácido, anhídridos y ácidos carboxílicos. Esta modificación permite incrementar las superficies hidrófoba e hidrófila presentes por molécula y mejorar sus propiedades tensioactivas. De modo general, se conservan en cada sal biliar, el número original de funciones hidrófilas de tipo hidroxilo y ácido. En algún caso, por la naturaleza del puente empleado, se ha aumentado en uno el número de funciones de carácter ácido. Los nuevos tensoactivos son susceptibles de ser utilizados como tales de un modo aislado o en combinación con otros tensioactivos; como solubilizadores de sustancias con baja solubilidad en agua, como por ejemplo, colesterol; como fármacos, como excipientes o vectores de fármacos; o bien para otros usos típicos de este tipo de productos como, por ejemplo, antibacterianos, antifúngicos o precursores de fármacos, fármacos, productos de limpieza, cosmética, etc.

En particular, la presente invención describe nuevos dímeros de ácidos biliares resultantes de la conjugación de 24-amino-derivados de los ácidos biliares naturales con ácidos, cloruros de ácido y anhídridos, lo que permite incrementar las superficies hidrófoba e hidrófila presentes por molécula y mejorar sus propiedades tensioactivas. Por ácido biliar o sal de ácido biliar se entiende aquí cualquiera de los ácidos resultantes de la bioconversión o modificación química del colesterol, particularmente, los ácidos cólico, desoxicólico, quenodesoxicólico, ursodesoxicólico y litocólico (Figura 1).

Estado de la técnica

Los ácidos y sales biliares naturales son compuestos anfipáticos resultado final del metabolismo del colesterol. Por este motivo, y también por el hecho de que algunos de ellos (encontrados, por ejemplo, en algunos ciprínidos) son tóxicos, se ha prestado una gran atención a la determinación de sus propiedades fisicoquímicas (estructura, reactividad química, agregación en disolución acuosa, resolución de su estructura cristalina, etc.) y a su papel biológico (Nair, P.P. et al.: The Bile Acids. Chemistry, Physiology, and Metabolism. Volume I: Chemistry. New York, Plenum Press, 1971). Los ácidos cólico y desoxicólico son ejemplos representativos de esta familia de compuestos y están presentes en muchas especies de mamíferos (Hofmann A. F.: Bile Acids. In The Liver. Biology and Pathobiology. Third Edition. New York, Raven Press Ltd. I. M. Arias, et al., eds., 1994). También pueden estar conjugados con glicina o taurina, siendo entonces más solubles en las condiciones de pH del intestino delgado, resisten la precipitación en presencia de iones Ca^{2+} y no traspasan las membranas. Estas propiedades permiten que los ácidos biliares estén presentes en altas concentraciones en los tractos biliar e intestinal. La intervención de las sales biliares en la circulación enterohepática permite la intervención terapéutica de muchos fármacos (como por ejemplo, colestiramina) para reducir, por ejemplo, el nivel de colesterol en sangre. En algunos casos se producen efectos laterales no deseados como avitaminosis o bien varios desórdenes gastrointestinales. Por este motivo es necesario encontrar nuevos fármacos que sean capaces de reducir el contenido de colesterol aterogénico en sangre o mejorar la circulación enterohepática con respecto a incrementar la excreción de ácidos biliares y la consecuente reducción del nivel colesterol pero sin las desventajas que algunos fármacos presentan hasta el momento.

Los ácidos biliares naturales pueden ser modificados químicamente, ya que poseen funciones hidroxílicas que pueden estar en las posiciones 3, 7 y 12. Además poseen un grupo ácido en la posición 24 susceptible también de modificación. Entre los trabajos que han centrado su atención en la modificación en esta función carboxílica y que, por lo tanto, pueden considerarse los precedentes más inmediatos de la presente invención, cabe destacar el llevado a cabo en 1992 por Fini et al. (Basic Cholane Derivatives. XI: Comparison between Acid and Basic Derivatives. J. Pharm. Sci. 1992, 81, 726). Estos autores sintetizaron una serie de hidroxicolan-24-aminas a partir de ácidos biliares. Al igual que los ácidos biliares de partida, los aminoderivados se autoagregan en disolución acuosa formando micelas catiónicas. Los valores medidos de las concentraciones micelares críticas resultaron ser del mismo orden de magnitud que las de los correspondientes ácidos biliares. Sin embargo, la introducción de la función básica en la cadena lateral del residuo colánico aumentó su actividad antimicrobiana hacia cepas gram-positivas.

Más recientemente, se han sintetizado una serie de amidas en la posición 24 de los ácidos biliares que tienen la particularidad de formar geles termorreversibles en disolventes orgánicos y que también poseen actividad antimicrobiana (Willemen, H. M. et al. N-Cholyl amino acid alkyl esters-a novel class of organogelators. Eur. J. Org. Chem. 2001, 2329; Micelle formation and antimicrobial activity of cholic acid derivatives with three permanent ionic head groups. Angew. Chem. Mt. Ed. 2002, 41, 4275; Aggregation of different amino acid conjugates of cholic acid in aqueous solution. Colloids and Surfaces A 2003, 218, 59; A Small-Angle Neutron Scattering Study of Cholic Acid-Based Organogel Systems. Langmuir 2004, 20, 2075). Otros derivados han sido propuestos como formadores de poros en liposomas y podrian ser utilizados para la dosificación de agentes terapéuticos (Chen, W.-H., Regen, S. L. Thermally gated liposomes. J Am. Chem. Soc. 2005, 127, 6538).

Otro tipo de compuestos muy importantes que dependen de la formación de amidas en la posición 24, son los llamados "colafanos" que son oligómeros cíclicos sintetizados a partir de dímeros de ácidos biliares con la posición 24 transformada en un grupo amida. Algunas de estas especies forman complejos con metales o bien pueden actuar como emuladores enzimáticos (Virtanen E. et al. Multinuclear magnetic resonance, electrospray ionization time-of-flight mass spectral and molecular modelling characterization of lithocholic acid amide esters with various nitrogen heterocycles. Magn. Reson. Chem. 2003, 41, 567; ^{1}H-, ^{13}C-, and ^{15}N-NMR and ESI-TOF-MS studies of a supramolecular complex of silver(I) and a cholaphane. J. Organometallic Chem. 2003, 668, 43; Ghosh, S. et al. Selective and Unusual Fluoride Ion Complexation by A Steroidal Receptor Using OH^{...} F- and CH^{...} F- Interactions: A New Motif for Anion Coordination? Org. Lett. 2005, 7, 1441; Pramod S. et al. Synthesis of cholic acid-based molecular receptors: head-to-head cholaphanes. J Chem. Soc., Perkin Trans. 1, 2002, 918; Li, Y., Dias J. Dimeric and Oligomeric Steroids. Chem. Rev. 1997, 97, 283; Khadga M. et al. A New Generation of "Cholaphanes": Steroid-Derived Macrocyclic Hosts with Enhanced Solubility and Controlled Flexibility. J. Org. Chem. 1997, 62, 8463). Actualmente se están investigando sus posibles aplicaciones en el campo médico.

También se han descrito diversos oligómeros (fundamentalmente dímeros) de sales biliares por la posición 24. Así, Janout et al. han sintetizado diversos compuestos, recogidos bajo la denominación genérica de "paraguas", en las que las ácidos biliares se unen por su grupo ácido de la cadena lateral a un puente adecuado mediante un enlace amida (Molecular Umbrellas. J. Am. Chem. Soc. 1996, 118, 1573; Design and Synthesis of Molecular Umbrellas. J. Am. Chem. Soc. 1997, 119, 640; Molecular Umbrella-Assisted Transport of Glutathione Across a Phospholipid Membrane. J Am. Chem. Soc. 2001, 123, 5401; Ion Conductors Derived from Cholic Acid and Spermine: Importance of Facial Hydrophilicity on Na+ Transport and Membrane Selectivity. J. Am. Chem. Soc. 2001, 123, 7691; Evidence for an Umbrella Mechanism of Bilayer Transport. J. Am. Chem. Soc. 2001, 123, 9926). Recientemente se han utilizado tetrámeros de tipo "paraguas" derivados del ácido cólico para aumentar la solubilidad del clorambucil. Los productos conjugados de este tipo se obtienen al generar una base de putrescina y espermidina a la cual se unen las sales biliares por la posición 24 y el clorambucil. Algunos de estos derivados poseen actividad contra la leucemia linfoblástica y las células de cancer de colon. (Vijayaraghavan, S. et al. Nitrogen Mustard by Conjugation with Molecular Umbrellas. Bioconjugate Chem. 2003, 14, 667). Por la facilidad de penetración del residuo biliar en las membranas celulares, se estudian actualmente otras moléculas "paraguas" como potenciales liberadores de aminoácidos y oligonucleótidos en células. Ello permite la penetración de especies polares a la célula que se incorporan en su metabolismo, con las consecuentes implicaciones en diversas terapias. (Jing, B. et al. Fully Detachable Molecular Umbrellas as Peptide Delivery Agents. Bioconjugate Chem., 2003, 14, 1191), así como de especies persulfatadas con actividad anti-HSV y anti-HIV (Jing, B. et al. Persulfated Molecular Umbrellas as Anti-HIV and Anti-HSV Agents. J. Am. Chem. Soc. 2004, 126, 15930). En todos estos compuestos se ha perdido la función ácida original de los ácidos biliares.

En la bibliografía se pueden encontrar numerosas patentes y aplicaciones relacionadas con sales biliares en distintos ámbitos. Así, por ejemplo, se han utilizado los ácidos biliares como residuos portadores de agentes quelatantes para ser utilizados como agentes de contraste en resonancia magnética de imagen (De Haen et al., Bile acids conjugates with metal ion chelates and the use thereof Nº de Patente WO 01/64708; Anelli, P. L. et al., Use of bile acid conjugates derivatives thereof with metal complexes as blood pool agentes for nuclear magnetic resonance diagnostics. US 6,461,588 (2002)). También han sido preparados diversos derivados como agentes antibacterianos (Shibagami M. Preparation of steroid derivatives as antibacterial agents, Application Nº JP 2002-236988, Número de patente: JP 2004075599); antifúngicos (Salunke, D. B. et al., New Steroidal Dimers with Antifungal and Antiproliferative Activity. J Med. Chem. 2004, 47, 6); o precursores de fármacos (Tolle-Sander, S. et al., Increased Acyclovir Oral Bioavailability via a Bile Acid Conjugate. Molecular Pharm. 2004, 1, 40-48).

Descripción de la invención

Como material de partida se utilizan ácidos biliares de origen natural (Figura 1). En lo que sigue CA identificará los residuos derivados del ácido cólico, DCA los del ácido desoxicólico, CDCA los del ácido quenodesoxicólico, UDCA los del ácido ursodesoxicólico y LCA los del ácido litocólico.

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Figura 1. Estructura de los ácidos biliares de origen natural, nombres triviales, abreviaturas usadas y nombres IUPAC.

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Los productos que se describen en la presente invención son nuevos dímeros derivados de los ácidos biliares anteriores cuya característica principal es la de ser dímeros en los que los ácidos biliares se unen a un puente (un dianhídrido, un diácido, un dicloruro) mediante grupos amina previamente introducidos en la posición 24. El esquema general de síntesis se muestra en la Figura 2. Como se puede ver, el proceso consta de tres etapas: la primera consiste en la sustitución del grupo carboxilo de la posición 24 del ácido biliar por un grupo amino, obteniéndose un 24-amino derivado. Posteriormente el 24-amino derivado se hace reaccionar con puentes alifáticos y aromáticos difuncionalizados con grupos ácido, anhidrídos o dicloruro. Es en esta etapa en la que se produce el dímero. Para obtener el producto final se hidrolizan, de ser necesario, los dos grupos éster del puente. En el esquema descrito, y con respecto a los ácidos biliares naturales, las modificaciones objeto de la presente invención implican únicamente uno de los grupos sustituyentes (el grupo ácido de la posición 24), manteniendo los grupos remanentes sin modificar. Se reivindican los dímeros en su forma ácida y los procedimientos de su síntesis.

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Figura 2. Esquema general de síntesis de los nuevos dímeros derivados de ácidos biliares naturales modificados en su posición 24 mediante un grupo amino y posterior reacción con una molécula puente mediante enlaces amida. R_{2} y R_{3} son los grupos sustituyentes indicados en la Figura 1.

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Los dímeros así resultantes pueden transformarse en sus sales sódica o potásica por simple neutralización con la base correspondiente. Asimismo, se reivindican las sales sódica y potásica de los dímeros, y los procedimientos de su obtención, los cuales obedecen al esquema general de la Figura 3.

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Figura 3. Esquema general de síntesis de las nuevas sales derivadas de los dímeros de los ácidos biliares naturales, sintetizados según el esquema general de la Figura 2. R_{2} y R_{3} son los grupos sustituyentes indicados en la Figura 1.

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En la Tabla 1 se recogen los puentes de unión y los correspondientes productos químicos que, al reaccionar con los 24-aminoesteroides, darán como resultado los compuestos que, una vez hidrolizados, son objeto de reivindicación (Figuras 4-7).

TABLA 1 Estructura del puente y especies reactivas (portadoras del puente) utilizadas en las reacciones con los 24-aminoesteroides para la formación de los dímeros. El sustituyente X puede ser OH o bien Cl

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Las Figuras 4-7 recogen todos los ácidos y sales sódicas y potásicas objeto de reivindicación. Los compuestos son identificados mediante una nomenclatura que hace referencia al puente según el número de la tabla 1 y al radical esteroide según la abreviatura indicada en la figura 1, seguido con una o dos letras que indica si trata de ácidos (letra H), de sales de sodio (letras Na) o de sales de potasio (letra K). Los ácidos y las sales sódicas y potásicas derivadas de los compuestos de las Figuras 4-7 se nombran en las Tablas 2-5. Por ejemplo, 1-DCA_{2}-H se refiere al dímero formado por dos residuos del ácidodesoxicólico unidos mediante el puente 1 de la tabla 1 en su forma ácida.

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Figura 4. Nuevos dímeros derivados de los ácidos biliares naturales formados por dos residuos de los ácidos biliares de la figura 1 y el puente 1 de la tabla 1 en sus formas de ácido (R_{1}=H) sales sódicas (R_{1}=Na) o potásicas (R_{1}=K).

TABLA 2 Relación de compuestos que pertenecen a la fórmula general de la figura 4

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Figura 5. Nuevos dímeros derivados de los ácidos biliares naturales formados por dos residuos de los ácidos biliares de la figura 1 y el puente 2 de la tabla 1 en sus formas de ácido (R_{1}=H), sales sódicas (R_{1}=Na) o potásicas (R_{1}=K).

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TABLA 3 Relación de compuestos que pertenecen a la fórmula general de la figura 5

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Figura 6. Nuevos dímeros derivados de los ácidos biliares naturales formados por dos residuos de los ácidos biliares de la figura 1 y el puente 3 de la tabla 1 en sus formas de ácido (R_{1}=H), sales sódicas (R_{1}=Na) o potásicas (R_{1}=K).

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TABLA 4 Relación de compuestos que pertenecen a la fórmula general de la figura 6

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Figura 7. Nuevos dímeros derivados de los ácidos biliares naturales formados por dos residuos de los ácidos biliares de la figura 1 y el puente 4 de la tabla 1 en sus formas de ácido (R_{1}=H), sales sódicas (R_{1}=Na) o potásicas (R_{1}=K).

TABLA 5 Relación de compuestos que pertenecen a la fórmula general de la figura 7

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Asimismo, se reivindican las aplicaciones como agentes tensioactivos de todos los compuestos sintetizados, tanto en sus formas ácidas como de sales, dado que se ha comprobado que estos compuestos presentan una mayor actividad superficial que los ácidos y sales biliares de partida. Entre estas aplicaciones típicas cabe mencionar: modificadores de las características reológicas, estabilización o rotura de interfases, producción de nanomateriales por autoensamblado vía estructuras micelares, vesiculares, cristales líquidos, emulsiones y microemulsiones o cualquier otro tipo de micro o nanonestructuras; como excipientes, solubilizantes, estabilizadores para formulaciones farmacológicas como pomadas, ungüentos, geles, cremas, comprimidos, grageas, emulsiones, pellets, granulados, jarabes, suspensiones, soluciones, cápsulas, supositorios, parches, inyectables, aerosoles, como vectores de fármacos y para la dosificación controlada de fármacos; productos de cosmética, acondicionadores de pelo, champús, jabones, geles, productos de limpieza facial, cremas hidratantes, nutritivas, antiarrugas, regeneradoras, maquillajes, lociones, sprays, lacas de uñas, pinturas y lápices de ojos, barras y perfiladores de labios, coloretes, polvos faciales; pastas dentífricas; como sondas bioquímicas, purificación de receptores, separación de proteínas, agentes desnaturalizantes, identificación de proteínas, solubilización de proteínas, cristalización de proteínas, disociación de proteínas de ácidos nucleicos o su extracción de materiales biológicos, solubilización de enzimas y su aislamiento de proteínas hidrófobas; formulación de pesticidas y fertilizantes líquidos, aplicaciones en fermentaciones; tratamientos de aguas como agentes antievaporación y dispersantes, humectantes para facilitar la entrada de los biocidas en los microorganismos, permeabilización de precipitados porosos o no; productos de limpieza doméstica o industrial, lavado de vidrio óptico, doméstico o de laboratorio, desengrasado de productos, limpieza de superficies incluyendo las metálicas, suelos, cementos, limpieza de textiles, a mano o en máquina; pinturas y recubrimientos, artes gráficas, ceras, y adhesivos; como lubricantes para minimizar la fricción entre superficies en rozamiento; humectación de sustancias; solubilización de compuestos químicos, incluyendo disolventes, no solubles o inmiscibles con el agua o disoluciones de la misma; emulsificadores y dispersantes en los que la fase continua es agua, una disolución salina o una disolución reguladora a cualquier valor del pH; solubilización de grasas, en particular de colesterol; tecnología de polímeros incluyendo los procesos de polimerización, emulsiones, espumas; catalizadores químicos; técnicas analíticas como las cromatografia preparativa o analítica de HPLC y electroforesis; como fármacos, en particular para todos los tratamientos relacionados con el metabolismo del colesterol, ya que se ha comprobado que algunos de ellos son coleréticos e inhiben el transporte de ácidos biliares; aditivos alimentarios. Esta utilización puede ser como producto puro o en combinación con otros tensioactivos que pudieran originar un efecto multiplicativo (sinérgico) de su actividad.

Modo de realización

La obtención de los compuestos de las Figuras 4-7, a partir de los ácidos biliares cólico, desoxicólico, quenodesoxicólico, ursodesoxicólico y litocólico, comprende métodos sintéticos implicando reacciones como:

1.- Protección y desprotección de grupos funcionales.

2.- Funcionalización de grupos sustituyentes.

3.- Funcionalización de los ácidos biliares.

4.- Síntesis convergente de los compuestos funcionalizados para generar la estructura final.

En esta síntesis convergente final, tiene lugar la formación de enlaces amida, utilizando alguno de los siguientes métodos:

1.- Como material de partida se utilizan los ácidos biliares de la Figura 1. En un primer paso, el grupo ácido se convierte en una 24-amida y, posteriormente, se convierte en su 24-aminoderivado por reducción con LiAlH_{4} (Bellini, A. M. et al. Cholic and deoxycholic acids derivatives (Part I). Antimicrobial activity of cholane compounds. Eur. J. Med. Chem. -Chim. Ther. 1983, 18, 185). Una vez obtenido el grupo amino se hace reaccionar el mismo con un dicloruro de ácido.

2.- Por reacción entre dos sintones: (i) el puente, consistente en una molécula que es simultáneamente un diéster y un diácido, y que se obtiene por metanolisis de los anhídridos del AEDT (compuesto 1, Tabla 1), del ácido piromielítico (compuestos 2 y 3 Tabla 1); y (ii) el esteroide con un grupo amino primario en la posición 24. En el proceso se utilizan catalizadores, como DEPC (dietilcianofosfonato), ó HOBt/DIC (1-hidroxibenzotriazol/1,3-diisopropilcarbodiimida), para acelerar la formación del enlace amida.

3.- Por reacción de dos sintones (puente y esteroide), siendo el puente un dianhídrido que reacciona con 2 equivalentes del 24-amino derivado del ácido biliar. Este método es útil solamente para el anhídrido del AEDT y el del ácido dietilenaminopentaacético.

En todos los casos:

(i): los ácidos se obtienen por la posterior hidrólisis básica de los grupos éster y neutralización con ácido clorhídrico.

(ii): las sales derivadas de los ácidos, se obtienen por neutralización con hidróxido de sodio o hidróxido potásico de estos ácidos y posterior precipitación en una mezcla de agua y acetona.

Puede observarse que el puente utilizado puede tener naturaleza aromática o alifática, y puede portar otros grupos funcionales no utilizados en el proceso sintético. En algún caso, el puente es un producto comercial, pero en otros casos es necesario sintetizarlo. Por lo tanto, se describen en primer lugar los métodos de su síntesis.

El dianhídrido de AEDT se obtiene siguiendo métodos descritos en la bibliografía (Wieder, I.; Wollenberg, R. H. Species-linked diamine triacetic acids and their chelates. Species-linked diamine triacetic acids and their chelates. US Patent Nº 4,352,751; Lennon, W. J. Stabilization of fats and oils with esters of EDTA and related compounds. US Patent Nº 3,497,535): En un balón se depositan 3,64 g (0,0125 mol) de AEDT, 5,19 g (4,8 mL; 0,051 mol) de anhídrido acético y 6 g de piridina (6,13 mL; 0,076 mol) y se calientan a 65ºC durante 24 horas. Se filtra a temperatura ambiente y el residuo se lava primero con anhídrido acético 2x50 mL y con éter etílico 3\times50 mL. Se seca a 60ºC a vacío y se obtiene un producto con un rendimiento casi cuantitativo.

El ácido N,N'-1,2-etanodiilbis[N-(carboximetil)-1,1'-dimetiléster] glicina (puente 1 tabla 1), al igual que los ácidos 1,4-dimetiléster-1,2,4,5-bencenotetracarboxílico, (puente 2, Tabla 1) 1,5-dimetiléster-1,2,4,5-bencenotetracarboxílico (puente 3, Tabla 1) se obtuvieron siguiendo la síntesis propuesta por Houlihan (Houlihan, F. M. et al. Synthesis and characterization of the tert-butyl ester of the oxydianiline/pyromellitic dianhydride polyamic acid. Macromolecules 1989, 22, 4477) y Mythili et al. (Preparation and evaluation of [r66Ho]holmium-dimethyldiethylenetriaminepentaacetic acid (DMDTPA) as potential radiopharmaceutical for endovascular radiation therapy (EVRT). Appl. Rad. Isotopes 2002, 56, 863). El producto de partida para la obtención de los puentes 2 y 3 de la Tabla 1 es el anhídrido piromielítico. Este anhídrido refluye en metanol durante 2 horas, se evapora parcialmente el disolvente hasta la aparición de una turbidez y se deja precipitar a baja temperatura. De ser necesario se agrega agua para producir la precipitación. Los dicloruros de ácido se obtienen por reacción de los correspondientes diácidos con cloruro de tionilo siguiendo el método clásico descrito en la bibliografía general.

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Los métodos sintéticos se agrupan como sigue:

1) Procedimiento General 1: implica la reacción de los 24-aminoderivados de los ácidos biliares con dicloruros de ácido

Una vez obtenidos los dicloruros de ácido de las moléculas puente, se les hace reaccionar con los 24-aminoderivados de los esteroides en cloroformo con catálisis de trietilamina con el fin de generar una serie de amidas diméricas. Finalmente, se hidrolizan para eliminar el grupo éster terminal de forma convencional (metanol, KOH), obteniéndose, previa neutralización (con HCl) y cristalización (de metanol, etanol), los dímeros de ácidos biliares modificados en la posición 24 objeto de la reivindicación.

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Ejemplo 1 Obtención del compuesto 2-DCA_{2}-H de acuerdo con el Procedimiento General 1 (Figura 8)

Una disolución de 24-aminoderivado del DCA (Figura 8) (0,58 g, 1,53 mmol) y trietilamina (3 mL, 21 mmol) en 15 mL de CHCl_{3} se agita vigorosamente y se le agrega, gota gota en baño de hielo, una disolución del dicloruro (0,20 g, 0,63 mmol) en 5 mL de CHCl_{3}. Se agita en atmósfera inerte durante 12 horas. Se evapora el CHCl_{3} y se purifica en columna cromatográfica con 9:1 acetato de etilo:metanol como eluyente. Una vez obtenido el producto se hidrolizan los grupos éster como sigue: 1 g del producto protegido se añade en 50 mL de una disolución de KOH en metanol 1 mol\cdotdm^{-3}, refluyendo durante 1 hora. Evaporado el disolvente, el concentrado se añade a 150 mL de agua, neutralizándolo con HC1 concentrado hasta su completa precipitación. Filtrado el producto se lava 5\times20 mL de agua, se seca y se recristaliza de etanol.

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Figura 8. Esquema del ejemplo 1: Síntesis del compuesto 2-DCA_{2}-H.

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El ejemplo 1 ha sido aplicado con éxito, con las lógicas y obvias modificaciones de las cantidades implicadas de los cloruros de ácido o derivados aminados de los ácidos biliares, en la obtención de los compuestos i-CA_{2}-H, i-DCA_{2}-H, i-CDCA-H_{2}, i-UDCA_{2}-H e i-LCA_{2}-H siendo i=1-3 según tabla 1.

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2) Procedimiento General 2 con DEPC ó HOBt/(DIC ó DCC): implica la reacción de los 24-aminoderivados de los ácidos biliares con ácidos carboxílicos activados

Otra ruta sintética, probada con éxito para los puentes 1 a 3 (X=OH) de la Tabla 1, consiste en utilizar diácidos como puente de unión entre los dos 24-aminoderivados en cuyo caso, se emplearán las estrategias de acoplamiento con los sistemas DEPC (dietilcianofosfonato) y HOBt/(DIC ó DCC) (1-hidroxibenzotriazol/1,3-diisopropil carbodiimida o diciclohexilcarbodiimida) (Anelli, P. L. et al. L-Glutamic acid and L-lysine as useful building blocks for the preparation of bifunctional DTPA-like ligands. Bioconjugate Chem. 1999, 10, 137; Auzely-Velty, R. et al., Micellization of Hydrophobically Modified Cyclodextrins. 1. Micellar Structure. Langmuir 2000, 16, 3727; Auzely-Velty, R. et al. Cholesteryl-cyclodextrins: synthesis and insertion into phospholipid membranes. Carbohydr. Res. 1999, 318, 82; Finke, P. E. et al. Inhibition of human leukocyte elastase. 4. Selection of a substituted cephalosporin (L-658, 758) as a topical aerosol. J. Med. Chem. 1992, 35, 3731; Kim, D. C. et al. Evaluation of the bile acid transporter in enhancing intestinal permeability to renin-inhibitory peptides. J. Drug Targeting 1993, 1, 347). Estos activantes son de uso común en la síntesis de péptidos, siendo de los pocos reactivos que se han empleado con éxito para generar enlaces amida con derivados esteroideos.

Al igual que en el procedimiento anterior, la hidrólisis de los grupos protectores de tipo éster se realiza en condiciones básicas. Los ácidos finales deseados se obtienen después de neutralizar con HC1 y cristalizar con metanol o etanol.

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Ejemplo 2 Obtención del compuesto 2-DCA_{2}-H de acuerdo con el Procedimiento General 2 mediante el uso de DEPC (Figura 9)

En un balón de 50 mL y bajo atmósfera de argón, se dispersan 0,35 g (1,25 mmol) del ácido 1,4-dimetiléster-1,2,4,5-bencenotetracarboxílico (ácido p-dimetoxipiromielítico) en 10 mL de DMF seca. Posteriormente se adicionan 0,4 mL (2,29 mmol) de DEPC. Una vez disuelto el sólido en suspensión, se adiciona, en porciones, 1 g (2,65 mmol) del 24-amino derivado del ácido desoxicólico (Figura 9). Se agita durante 10 minutos, se enfría a 0ºC y se adicionan 2 mL (3,58 mmol) de trietilamina gota a gota. El baño se deja durante 30 minutos y se retira para dejar agitando la reacción a temperatura ambiente durante 24 horas. Una vez acabada la reacción, se evapora la DMF a presión reducida y el crudo de reacción se disuelve en 200 mL de acetato de etilo. A continuación se lava con 3\times40 mL de agua. La fase orgánica se seca con sulfato de sodio anhidro y se concentra para concluir la purificación del producto mediante cromatografia de columna en gel de sílice con una mezcla de elución 9:1 en acetato de etilo:metanol,
respectivamente.

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El ejemplo 2 ha sido aplicado con éxito, con las lógicas y obvias modificaciones de las cantidades implicadas, en la obtención de los compuestos i-CA_{2}-H, i-DCA_{2}-H, i-CDCA-H_{2}, i-UDCA_{2}-H e i-LCA_{2}-H siendo i=1-3 según tabla 1.

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Figura 9. Esquema del ejemplo 2: Síntesis del compuesto 2-DCA_{2}-H según el Procedimiento General 2 mediante el uso de DEPC.

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Ejemplo 3 Obtención del compuesto 1-CA_{2}-H de acuerdo con el Procedimiento General 2 mediante el uso de HOBt/DCC ó DIC (Figura 10)

A una disolución de 0,66 g (2,05 mmol) de N,N'-1,2-etanodiilbis[N-(carboximetil)-1,1'-dimetiléster]glicina (dimetiléster derivado del AEDT) (puente 1, X=OH, Tabla 1) en 10 mL de DMF se agregan 2,22 g (16,42 mmol) de hidroxibenzotriazol (HOBt) y 2,6 mL (16,42 mmol) de DIC ó 3,39 g de DCC en 15 mL de DMF. La disolución se agita durante 30 minutos a temperatura ambiente y bajo argon. Posteriormente se añaden 2,02 g (5,13 mmol) del 24-amino derivado del ácido cólico (Figura 10) en 15 mL de DMF y se agita durante 48 horas. Se filtra el precipitado formado, se concentra y el residuo se disuelve en cloroformo. La disolución se lava sucesivamente con agua (3 x25 mL). Se seca, se concentra y se purifica mediante cromatografia de columna. Una vez obtenido el producto se hidrolizan los grupos éster como sigue: 1 g del producto protegido se añade en 100 mL de una disolución de KOH en metanol 1 mol\cdotdm^{-3}, refluyendo durante 1 hora.

Evaporado el disolvente, el concentrado se añade a 150 mL de agua, neutralizándolo con HC1 concentrado hasta su completa precipitación. Filtrado el producto se lava con agua, se seca y se recristaliza de etanol.

El ejemplo 3 ha sido aplicado con éxito, con las lógicas y obvias modificaciones de las cantidades implicadas, en la obtención de los compuestos i-CA_{2}-H, i-DCA_{2}-H, i- CDCA-H_{2}, i-UDCA_{2}-H e i-LCA_{2}-H siendo i=1-3 según tabla 1.

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Figura 10. Esquema del ejemplo 3: Síntesis del compuesto 1-CA_{2}-H según el Procedimiento General 2 mediante el uso de HOBt/DCC ó DIC.

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3) Procedimiento General 3: implica la reacción de los 24-aminoderivados de los ácidos biliares con anhídridos

Los 24-aminoderivados se acoplan al N,N-bis[2-(2,6-dioxo-4-morfolinil)etil]glicina (dianhídrido 4 de la Tabla 1; abreviadamente DTPA) de forma directa en DMF y con la catálisis de trietilamina. (Liu, Y.-C. et al. Syntheses, crystal structures and properties of two Mn(II) complexes of DTPA-bisamide derivative. Inorg. Chem. Commun. 2005, 8, 574).

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Ejemplo 4 Obtención del compuesto 1-UDCA_{2}-H de acuerdo con el Procedimiento General tipo 3 (Figura 11)

En un balón seco de 100 mL se agregan 0,93 g (2,37 mmol) del 24-amino derivado del ácido cólico (Figura 11), 30 mL (28,3 g; 430 mmol) de DMF seca y 15 mL (10,9 g; 0,11 mol) de trietilamina seca. La mezcla se agita hasta apreciar completa disolución. Se agregan ahora 1,02 g (2,86 mol) del DTPA disueltos en 15 mL (14,15 g; 215 mmol) de DMF seca gota a gota y se calienta la mezcla a 70ºC durante 12 horas. Se evapora la DMF en rotavapor y se lava con agua 3x25 mL previa disolución en CHCl_{3} (100 mL). Se seca con Na_{2}SO_{4}, se evapora y se purifica por cromatografia en columna.

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Figura 11. Esquema del ejemplo 4: Síntesis del compuesto 1-UDCA_{2}-H según el Procedimiento General 3.

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El ejemplo 4 ha sido aplicado con éxito, con las lógicas y obvias modificaciones de las cantidades implicadas, en la obtención de los compuestos 4-CA_{2}-H, 4-DCA_{2}-H, 4-CDCA-H_{2}, 4-UDCA_{2}-H y 4-LCA_{2}-H según tabla 1.

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4) Procedimiento General de obtención de las sales sódicas y potásicas

Todas las sales de potasio y sodio que se reivindican se obtienen a partir de los ácidos correspondientes por neutralización con NaOH ó KOH en medio acuoso y posterior precipitación en acetona y secado.

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Ejemplo 5 Obtención de las sales 1-CDCA_{2}-Na y 1-CDCA_{2}-K por el Procedimiento General 4 (Figura 12)

1 g (1 mmol) de 1-CDCA_{2}-H se disuelve con dos equivalentes (0,088 g, 2,2 mmol) de NaOH o con dos equivalentes de KOH (0,36 g, 2,2 mmol) en la mínima cantidad de agua (aproximadamente 10 mL). Una vez disuelto el ácido se le añaden 300 mL de acetona y se deja reposar a temperatura ambiente hasta la aparición de un precipitado. Se filtra y se seca en estufa a vacío a 80ºC durante el tiempo necesario para garantizar la ausencia de disolvente orgánico ocluido en el sólido.

El ejemplo 5 ha sido aplicado con éxito, con las lógicas y obvias modificaciones de las cantidades implicadas, a todos los compuestos i-CA_{2}-H, i-DCA_{2}-H, i-CDCA-112, i-UDCA_{2}-H e i-LCA_{2}-H siendo i=1-4, para obtener las sales correspondientes nombradas en las Tablas 2-5

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Figura 12. Esquema del ejemplo 5 correspondiente a la preparación de la sal sódica 1-CDCA_{2}-Na y la sal potásica 1-CDCA_{2}-K de acuerdo con el Procedimiento General 4.

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Las estructuras de los compuestos de esta invención fueron determinadas mediante las técnicas siguientes: Resonancia Magnética Nuclear mono- (^{1}H, ^{13}C) y bidimensional (COSY ^{1}H-^{1}H; HMQC ^{1}H-^{13}C; HMBC; ROESY) y Espectrometría de masas (Maldi-tof; impacto electrónico).

La medición de las características tensioactivas de los compuestos obtenidos se ha llevado a cabo mediante medidas de tensión superficial, lo que permite la determinación de la concentración micelar crítica (cmc) de las sales de estos compuestos. De un modo general, puede afirmarse que las propiedades tensioactivas de los nuevos compuestos son mejores que las de los ácidos biliares naturales de partida dado que sus valores de cmc son menores. Así, por ejemplo, se ha determinado para el compuesto 1-CDCA_{2}-Na un valor de cmc igual a 2 \muM que es cuatro órdenes de magnitud inferior a la de la sal biliar de partida (colato sódico) cuyo valor es 15-20 mM. Esto es debido a la gran superficie por molécula que ocupan los derivados objeto de la presente invención y que en algunos casos superan los 600 \ring{A}^{2}/molécula.

Claims

1. Nuevos dímeros derivados de 24-aminoesteroides de los ácidos biliares naturales (cólico, desoxicólico, ursodesoxicólico, quenodesoxicólico, litocólico) de fórmula general

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caracterizados porque:

R_{1} es un átomo de hidrógeno, sodio o potasio; R_{2} es un átomo de hidrógeno o un grupo hidroxilo (con orientación \alpha o \beta); R_{3} es un átomo de hidrógeno o un grupo hidroxilo con orientación a unidas por un grupo que actúa como puente de unión entre los dos esteroides.

2. Nuevos dímeros derivados de 24-aminoesteroides de los ácidos biliares naturales (cólico, desoxicólico, ursodesoxicólico, quenodesoxicólico, litocólico) según reivindicación 1, en las que el puente tiene como fórmula general

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dando origen a dímeros de fórmula general

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en sus formas de ácido (R_{1}=H), sales sódicas (R_{1}=Na) y potásicas (R_{1}=K).

3. Nuevos dímeros derivados de 24-aminoesteroides de los ácidos biliares naturales (cólico, desoxicólico, ursodesoxicólico, quenodesoxicólico, litocólico) según reivindicación 2, en las que R_{1} es un átomo de hidrógeno, sodio o potasio; R_{2} es un átomo de hidrógeno o un grupo hidroxiló (con orientación \alpha o \beta) y R_{3} es un átomo de hidrógeno o un grupo hidroxilo con orientación \alpha, que son nominalmente:

N,N'-1,2-etanodiilbis [N-[2-((3\alpha,5\beta,7\alpha,12\alpha)-3,7,12-trihidroxicolan-24-il)amino]-2-oxoetilglicina];

N,N'-1,2-etanodiilbis[N-[2-((3\alpha,5\beta,12\alpha)-3,12-diihidroxicolan-24-il)amino]-2-oxoetilglicina];

N,N'-1,2-etanodiilbis[N-[2-((3\alpha,5\beta,7\beta)-3,7-dihidroxicolan-24-il)amino]-2-oxoetilglicina];

N,N'-1,2-etanodiilbis[N-[2-((3\alpha,5\beta,7\alpha)-3,7-dihidroxicolan-24-il)amino]-2-oxoetilglicina];

N,N'-1,2-etanodiilbis[N-[2-((3\alpha,5\beta-)3-hidroxicolan-24-il)amino]-2-oxoetilglicina];

N,N'-1,2-etanodiilbis[N-[2-((3\alpha,5\beta,7\alpha,12\alpha)-3,7,12-trihidroxicolan-24-il)amino]-2-oxoetilglicinato] de disodio;

N,N'-1,2-etanodiilbis[N-[2-((3\alpha,5\beta,7\alpha,12\alpha)-3,7,12-trihidroxicolan-24-il)amino]-2-oxoetilglicinato] de dipotasio;

N,N'-1,2-etanodiilbis[N-[2-((3\alpha,5\beta,12\alpha)-3,12-dihidroxicolan-24-il)amino]-2-oxoetilglicinato] de disodio;

N,N'-1,2-etanodiilbis[N-[2-((3\alpha,5\beta,12\alpha)-3,12-dihidroxicolan-24-il)amino]-2-oxoetilglicinato] de dipotasio;

N,N'-1,2-etanodiilbis[N-[2-((3\alpha,5\beta,7\beta)-3,7-dihidroxicolan-24-il)amino]-2-oxoetilglicinato] de disodio;

N,N'-1,2-etanodiilbis [N-[2-((3\alpha,5\beta,7\beta)-3,7-dihidroxicolan-24-il)amino]-2-oxoetilglicinato] de dipotasio;

N,N'-1,2-etanodiilbis[N-[2-((3\alpha,5\beta,7\alpha)-3,7-dihidroxicolan-24-il)amino]-2-oxoetilglicinato] de disodio;

N,N'-1,2-etanodiilbis[N-[2-((3\alpha,5\beta,7\alpha)-3,7-dihidroxicolan-24-il)amino]-2-oxoetilglicinato] de dipotasio;

N,N'-1,2-etanodiiibis[N-[2-((3\alpha,5\beta)-3-hidroxicolan-24-il)amino]-2-oxoetilglicinato] de disodio;

N,N'-1,2-etanodiilbis[N-[2-((3\alpha,5\beta)-3-hidroxicolan-24-il)amino]-2-oxoetilglicinato] de dipotasio.

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4. Nuevos dímeros derivados de 24-aminoesteroides de los ácidos biliares naturales (cólico, desoxicólico, ursodesoxicólico, quenodesoxicólico, litocólico) según reivindicación 1, en las que el puente tiene como fórmula general

25

dando origen a dímeros de fórmula general

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5. Nuevos dímeros derivados de 24-aminoesteroides de los ácidos biliares naturales (cólico, desoxicólico, ursodesoxicólico, quenodesoxicólico, litocólico) según reivindicación 4, en las que R_{1} es un átomo de hidrógeno, sodio o potasio; R_{2} es un átomo de hidrógeno o un grupo hidroxilo (con orientación \alpha o \beta) y R_{3} es un átomo de hidrógeno o un grupo hidroxilo con orientación \alpha, que son nominalmente:

Ácido 2,5-bis[(((3\alpha,5\beta,7\alpha,12\alpha)-3,7,12-trihidroxicolan-24-il)amino)carbonil]-1,4-bencenodicarboxílico;

Ácido 2,5-bis[(((3\alpha,5\beta,12\alpha)-3,12-dihidroxicolan-24-il)amino)carbonil]-1,4-bencenodicarboxilico;

Ácido 2,5-bis[(((3\alpha,5\beta,7\beta)-3,7-dihidroxicolan-24-il)amino)carbonil]-1,4-bencenodicarboxílico;

Ácido 2,5-bis[(((3\alpha,5\beta,7\alpha)-3,7-dihidroxicolan-24-il)amino)carbonil]-1,4-bencenodicarboxílico;

Ácido 2,5-bis [(((3\alpha,5\beta)-3-hidroxicolan-24-il)amino)carbonil]-1,4-bencenodicarboxílico;

2,5-bis[(((3\alpha,5\beta,7\alpha,12\alpha)-3,7,12-trihidroxicolan-24-il)amino)carbonil]-1,4-bencenodicarboxilato de disodio;

2,5-bis[(((3\alpha,5\beta,7\alpha,12\alpha)-3,7,12-trihidroxicolan-24-il)amino)carbonil]-1,4-bencenodicarboxilato de dipotasio;

2,5-bis [(((3\alpha,5\beta,12\alpha)-3,12-dihidroxicolan-24-il)amino)carbonil]-1,4-bencenodicarboxilato de disodio;

2,5-bis[(((3\alpha,5\beta,12\alpha)-3,12-dihidroxicolan-24-il)amino)carbonil]-1,4-bencenodicarboxilato de dipotasio;

2,5-bis[(((3\alpha,5\beta,7\beta)-3,7-dihidroxicolan-24-il)amino)carbonil]-1,4-bencenodicarboxilato de disodio;

2,5-bis[(((3\alpha,5\beta,7\beta)-3 ,7-dihidroxicolan-24-il)amino)carbonil]-1,4-bencenodicarboxilato de dipotasio;

2,5-bis[(((3\alpha,5\beta,7\alpha)-3,7-dihidroxicolan-24-il)amino)carbonil]-1,4-bencenodicarboxilato de disodio;

2,5-bis[(((3\alpha,5\beta,7\alpha)-3,7-dihidroxicolan-24-il)amino)carbonil]-1,4-bencenodicarboxilato de dipotasio;

2,5-bis[(((3\alpha,5\beta)-3-hidroxicolan-24-il)amino)carbonil]-1,4-bencenodicarboxilato de disodio;

2,5-bis[(((3\alpha,5\beta)-3-hidroxicolan-24-il)amino)carbonil]-1,4-bencenodicarboxilato de dipotasio.

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6. Nuevos dímeros derivados de 24-aminoesteroides de los ácidos biliares naturales (cólico, desoxicólico, ursodesoxicólico, quenodesoxicólico, litocólico) según reivindicación 1, en las que el puente tiene como fórmula general

27

dando origen a dímeros de fórmula general

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7. Nuevos dímeros derivados de 24-aminoesteroides de los ácidos biliares naturales (cólico, desoxicólico, ursodesoxicólico, quenodesoxicólico, litocólico) según reivindicación 6, en las que R_{1} es un átomo de hidrógeno, sodio o potasio; R_{2} es un átomo de hidrógeno o un grupo hidroxilo (con orientación \alpha o \beta) y R_{3} es un átomo de hidrógeno o un grupo hidroxilo con orientación \alpha, que son nominalmente:

Ácido 2,5-bis[(((3\alpha,5\beta,7\alpha,12\alpha)-3,7,12-trihidroxicolan-24-il)amino)carbonil]-1,3-bencenodicarboxílico;

Ácido 2,5-bis [(((3\alpha,5\beta,12\alpha)-3,12-dihidroxicolan-24-il)amino)carbonil]-1,3-bencenodicarboxílico;

Ácido 2,5-bis[(((3\alpha,5\beta,7\beta)-3,7-dihidroxicolan-24-il)amino)carbonil]-1,3-bencenodicarboxílico;

Ácido 2,5-bis[(((3\alpha,5\beta,7\alpha)-3,7-dihidroxicolan-24-il)amino)carbonil]-1,3-bencenodicarboxílico;

Ácido 2,5-bis[(((3\alpha,5\beta)-3-hidroxicolan-24-il)amino)carbonil]-1,3-bencenodicarboxílico;

2,5-bis [(((3\alpha,5\beta,7\alpha,12\alpha)-3,7,12-trihidroxicolan-24-il)amino)carbonil]-1,3-bencenodicarboxilato de disodio;

2,5-bis[(((3\alpha,5\beta,7\alpha,12\alpha)-3,7,12-trihidroxicolan-24-il)amino)carbonil]-1,3-bencenodicarboxilato de dipotasio;

2,5-bis[(((3\alpha,5\beta,12\alpha)-3,12-dihidroxicolan-24-il)amino)carbonil]-1,3-bencenodicarboxilato de disodio;

2,5-bis[(((3\alpha,5\beta,12\alpha)-3,12-dihidroxicolan-24-il)amino)carbonil]-1,3-bencenodicarboxilato de dipotasio;

2,5-bis[(((3\alpha,5\beta,7\beta)-3,7-dihidroxicolan-24-il)amino)carbonil]-1,3-bencenodicarboxilato de disodio;

2,5-bis[(((3\alpha,5\beta,7\beta)-3,7-dihidroxicolan-24-il)amino)carbonil]-1,3-bencenodicarboxilato de dipotasio;

2,5-bis[(((3\alpha,5\beta,7\alpha)-3,7-dihidroxicolan-24-il)amino)carbonil]-1,3-bencenodicarboxilato de disodio;

2,5-bis[(((3\alpha,5\beta,7\alpha)-3,7-dihidroxicolan-24-il)amino)carbonil]-1,3-bencenodicarboxilato de dipotasio;

2,5-bi s [(((3\alpha,5\beta)-3 -hidroxicolan-24-il)amino)carbonil]-1,3-bencenodicarboxilato de disodio;

2,5-bis[(((3\alpha,5\beta)-3-hidroxicolan-24-il)amino)carbonil]-1,3-bencenodicarboxilato de dipotasio.

8. Nuevos dímeros derivados de 24-aminoesteroides de los ácidos biliares naturales (cólico, desoxicólico, ursodesoxicólico, quenodesoxicólico, litocólico) según reivindicación 1, en las que el puente tiene como fórmula general

29

dando origen a dímeros de fórmula general

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9. Nuevos dímeros derivados de 24-aminoesteroides de los ácidos biliares naturales (cólico, desoxicólico, ursodesoxicólico, quenodesoxicólico, litocólico) según reivindicación 8, en las que R_{1} es un átomo de hidrógeno, sodio o potasio; R_{2} es un átomo de hidrógeno o un grupo hidroxilo (con orientación \alpha o \beta) y R_{3} es un átomo de hidrógeno o un grupo hidroxilo con orientación \alpha, que son nominalmente:

N,N-bis[2-[(carboximetil)[2-oxo-2-[((3\alpha,5\beta,7\alpha,12\alpha)-3,7,12-trihidroxicolan-24-il)]etil]amino]etil]glicina;

N,N-bis[2-[(carboximetil)[2-oxo-2-[((3\alpha,5\beta,12\alpha)-3,12-dihidroxicolan-24-il)]etil]amino]etil]glicina;

N,N-bis[2-[(carboximetil)[2-oxo-2-[((3\alpha,5\beta,7\alpha)-3,7-dihidroxicolan-24-il)]etil]amino]etil]glicina;

N,N-bis[2-[(carboximetil)[2-oxo-2-[((3\alpha,5\beta,7\beta)-3,7-dihidroxicolan-24-il)]etil]amino]etil]glicina;

N,N-bis[2-[(carboximetil)[2-oxo-2-[((3\alpha,5\beta)-3-hidroxicolan-24-il)]etil]amino]etil]glicina;

N,N-bis[2-[(carboximetil)[2-oxo-2-[((3\alpha,5\beta,7\alpha,12\alpha)-3,7,12-trihidroxicolan-24-il)]etil]amino]etil]glicinato de disodio;

N,N-bis[2-[(carboximetil)[2-oxo-2-[((3\alpha,5\beta,7\alpha,12\alpha)-3,7,12-trihidroxicolan-24-il)]etil]amino]etil]glicinato de dipotasio;

N,N-bis[2-[(carboximetil)[2-oxo-2-[((3\alpha,5\beta,12\alpha)-3,12-dihidroxicolan-24- il)]etil]amino]etil]glicinato de disodio;

N,N-bis[2-[(carboximetil)[2-oxo-2-[((3\alpha,5\beta,12\alpha)-3,12-dihidroxicolan-24-il)]etil]amino]etil]glicinato de dipotasio;

N,N-bis[2-[(carboximetil)[2-oxo-2-[((3\alpha,5\beta,7\beta)-3,7-dihidroxicolan-24-il)]etil]amino]etil]glicinato de disodio;

N,N-bis[2-[(carboximetil)[2-oxo-2-[((3\alpha,5\beta,7\beta)-3,7-dihidroxicolan-24-il)]etil]amino]etil]glicinato de dipotasio;

N,N-bis [2- [(carboximetil)[2-oxo-2-[((3\alpha,5\beta,7\alpha)-3,7-dihidroxicolan-24-il)]etil]amino]etil]glicinato de disodio;

N,N-bis[2-[(carboximetil)[2-oxo-2-[((3\alpha,5\beta,7\alpha)-3,7-dihidroxicolan-24-il)]etil]amino]etil]glicinato de dipotasio;

N,N-bis[2-[(carboximetil)[2-oxo-2-[((3\alpha,5\beta)-3-hidroxicolan-24-il)]etil]amino]etil]glicinato de disodio;

N,N-bis[2-[(carboximetil)[2-oxo-2-[((3\alpha,5\beta)-3-hidroxicolan-24-il)]etil]amino]etil]glicinato de dipotasio.

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10. Procedimiento para la síntesis de nuevos dímeros derivados de 24-aminoesteroides de ácidos biliares naturales según cualquiera de las reivindicaciones 2-7, caracterizado porque comprende el acoplamiento del grupo amino del 24-aminoderivado del ácido biliar correspondiente (cólico, desoxicólico, ursodesoxicólico, quenodesoxicólico, litocólico) con los cloruros derivados de los siguientes ácidos: N,N'-1,2-etanodiilbis[N-(carboximetil)-1,1'-dimetiléster]glicina; 1,4-dimetiléster-1,2,4,5-bencenotetra carboxílico; y 1,5-dimetil éster-1,2,4,5-bencenotetracarboxílico.

11. Procedimiento para la síntesis de nuevos dímeros derivados de 24-aminoesteroides de ácidos biliares naturales según reivindicaciónes 2-7, caracterizado porque comprende el acoplamiento del grupo amino del 24-aminoderivado del ácido biliar correspondiente, mediante el uso DEPC (dietilcianofosfonato), con los ácidos: N,N'-1,2-etanodiilbis[N-(carboximetil)-1,1'-dimetiléster] glicina; 1,4-dimetiléster-1,2,4,5-benceno tetracarboxílico; y 1,5-dimetiléster-1,2,4,5-bencenotetracarboxílico.

12. Procedimiento para la síntesis de nuevos dímeros derivados de 24-aminoesteroides de los ácidos biliares naturales según las reivindicaciones 2-7, caracterizado porque comprende el acoplamiento del grupo amino del 24-aminoderivado, mediante el uso de HOBt/DCC ó DCI (1-hidroxibenzotriazol/1,3-diciclohexilcarbodiimida o disopropil carbodiimida), con los ácidos: N,N'-1,2-etanodiilbis[N-(carboximetil)-1,1'-dimetil éster]glicina; 1,4-dimetiléster-1,2,4,5-bencenotetracarboxílico; y 1,5-dimetiléster-1,2,4,5-bencenotetracarboxílico.

13. Procedimiento para la síntesis de nuevos dímeros derivados de 24-aminoesteroides de los ácidos biliares naturales según reivindicaciones 8 y 9 mediante acoplamiento del grupo amino del 24-aminoderivado con el dianhídrido N,N-bis[2-(2,6-dioxo-4-morfolinil)etil]glicina (portador del grupo puente).

14. Procedimiento para la síntesis de las sales sódicas y potásicas derivadas de los nuevos dímeros nombrados en las reivindicaciones 2-9, obtenidas por neutralización con NaOH ó KOH de esos dímeros, y posterior precipitación en una mezcla de agua y acetona, resultando las sales correspondientes.

15. Aplicación de los compuestos de las reivindicaciones 1-9, de forma aislada o en combinación con otros tensioactivos que pudieran originar un efecto multiplicativo (sinérgico) de su actividad, en cualquiera de las aplicaciones asociadas a este tipo de compuestos, los tensioactivos, entre las que cabe mencionar: modificadores de las características reológicas, estabilización o rotura de interfases, producción de nanomateriales por autoensamblado vía estructuras micelares, vesiculares, cristales líquidos, emulsiones y microemulsiones o cualquier otro tipo de micro o nanonestructuras; como excipientes, solubililizantes, estabilizadores para formulaciones farmacológicas como pomadas, ungüentos, geles, cremas, comprimidos, grageas, emulsiones, pellets, granulados, jarabes, suspensiones, soluciones, cápsulas, supositorios, parches, inyectables, como vectores de fármacos y para la dosificación controlada de fármacos; productos de cosmética, acondicionadores de pelo, champús, jabones, geles, productos de limpieza facial, cremas hidratantes, nutritivas, antiarrugas, regeneradoras, maquillajes, lacas de uñas, pinturas y lápices de ojos, barras y perfiladores de labios, coloretes, polvos faciales; como sondas bioquímicas, purificación de receptores, separación de proteínas del resto de membranas, agentes desnaturalizantes, identificación de proteínas, solubilización de proteínas, cristalización de proteínas de membrana, disociación de proteínas de ácidos nucleicos o su extracción de materiales biológicos, solubilización de enzimas y su aislamiento de proteínas hidrófobas; formulación de pesticidas y fertilizantes líquidos, aplicaciones en fermentaciones; tratamientos de aguas como agentes antievaporación y dispersantes, humectantes para facilitar la entrada de los biocidas en los microorganismos, permeabilización de precipitados porosos o no; productos de limpieza doméstica o industrial, lavado de vidrio óptico, doméstico o de laboratorio, desengrasado de productos, limpieza de superficies incluyendo las metálicas, suelos, cementos, limpieza de textiles, a mano o en máquina; pinturas y recubrimientos, artes gráficas, ceras, y adhesivos; como lubricantes para minimizar la fricción entre superficies en rozamiento; humectación de sustancias; solubilización de compuestos químicos, incluyendo disolventes, no solubles o inmiscibles con el agua o disoluciones de la misma; emulsificadores y dispersantes en los que la fase continua es agua, una disolución salina o una disolución reguladora a cualquier valor del pH; solubilización de grasas, en particular de colesterol, ya que se ha comprobado que algunos de ellos son coleréticos e inhiben el transporte de ácidos biliares; tecnología de polímeros incluyendo los procesos de polimerización, emulsiones, espumas; catalizadores químicos; técnicas analíticas como las cromatografía preparativa o analítica de HPLC y electroforesis; como agentes quelatantes de metales; como agentes de contraste en aplicaciones médicas o veterinarias; como fármacos, en particular para todos los tratamientos relacionados con el metabolismo del colesterol; aditivos alimentarios.