ES2318000T3

ES2318000T3 - Combinaciones de inhibidores de la farnesil-protein-transferasa con agentes antiestrogenos.

Info

Publication number: ES2318000T3
Application number: ES02719776T
Authority: ES
Inventors: David William End
Original assignee: Janssen Pharmaceutica NV
Current assignee: Janssen Pharmaceutica NV
Priority date: 2001-02-15
Filing date: 2002-02-06
Publication date: 2009-05-01
Anticipated expiration: 2022-02-06
Also published as: JP4865027B2; US20120108634A1; JP2004517960A; JP2010047589A; JP4969016B2; US20040110769A1; EP1365763A1; EP1365763B1; US20090023776A1; WO2002064142A1; ATE415161T1; DE60230017D1; US20110105557A1

Abstract

Una combinación de un agente antiestrógenos y un inhibidor de la farnesil-transferasa, a saber (+)-6-[amino(4clorofenil) (1-metil-1H-imidazol-5-il)metil]-4-(3-clorofenil)-1-metil-2(1H)-quinolinona; o una sal de adición de ácido farmacéuticamente aceptable del mismo.

Description

Combinaciones de inhibidores de la farnesil-protein-transferasa con agentes antiestrógenos.

La presente invención se refiere a combinaciones de un inhibidor de la farnesil-transferasa y un agente antiestrógenos para inhibir el crecimiento de células tumorales, y útiles en el tratamiento del cáncer.

Los oncogenes codifican frecuentemente componentes proteínicos de caminos de transducción de señales que conducen a la estimulación del crecimiento celular y la mitogénesis. La expresión de los oncogenes en las células cultivadas conduce a transformación celular, caracterizada por la capacidad de las células para crecer en agar blando y el crecimiento de las células como focos densos que carecen de la inhibición de contacto exhibida por las células no transformadas. La mutación y/o sobreexpresión de ciertos oncogenes está asociada frecuentemente con el cáncer humano. Se conocen un grupo particular de oncogenes como ras que han sido identificados en mamíferos, aves, insectos, moluscos, plantas, hongos y levaduras. La familia de oncogenes ras de los mamíferos está constituida por tres miembros principales ("isoformas"): los oncogenes H-ras, K-ras y N-ras. Estos oncogenes ras codifican proteínas muy afines conocidas genéricamente como p21^{ras}. Una vez fijadas a las membranas plasmáticas, las formas mutantes u oncogénicas de p21^{ras} proporcionarán una señal para la transformación y crecimiento incontrolado de células tumorales malignas. Para adquirir este potencial de transformación, el precursor de la oncoproteína p21^{ras} debe sufrir una farnesilación catalizada enzimáticamente del residuo cisteína localizado en un tetrapéptido carboxi-terminal. Por consiguiente, los inhibidores de la enzima que catalizan esta modificación, la farnesil-protein-transferasa, evitarán la fijación de p21^{ras} a la membrana y bloquearán el crecimiento aberrante de los tumores transformados por ras. Por tanto, está aceptado generalmente en la técnica que los inhibidores de la farnesil-transferasa pueden ser muy útiles como agentes anticáncer para tumores en los cuales contribuye ras a la transformación.

Dado que las formas mutadas oncogénicas de ras se encuentran frecuentemente en muchos cánceres humanos, muy particularmente en más del 50% de los carcinomas de colon y páncreas (Kohl et al., Science, vol 260, 1834-1837, 1993), se ha sugerido que los inhibidores de la farnesil-transferasa pueden ser muy útiles contra estos tipos de cáncer. Después de investigaciones ulteriores, se ha encontrado que un inhibidor de la farnesil-transferasa es capaz de demostrar efectos antiproliferativos in vitro y efectos antitumorales in vivo en una diversidad de líneas de células tumorales humanas con y sin mutaciones del gen ras.

WO-97/21701 describe la preparación, formulación y propiedades farmacéuticas de derivados de (imidazol-5-il)metil-2-quinolinona inhibidores de la farnesil-protein-transferasa de fórmulas (I), (II) y (III), así como compuestos intermedios de fórmula (II) y (III) que se metabolizan in vivo para dar los compuestos de fórmula (I). Los compuestos de fórmulas (I), (II) u (III) se representan por

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las sales de adición de ácido o base farmacéuticamente aceptables y las formas estereoquímicamente isómeras de los mismos, en donde la línea de puntos representa un enlace opcional;

X: es oxígeno o azufre;

R^{1}: es hidrógeno, alquilo C_{1-12}, Ar^{1}, Ar^{2}alquilo C_{1-6}, quinolinilalquilo C_{1-6}, piridilalquilo C_{1-6}, hidroxialquilo C_{1-6}, alquiloxi C_{1-6}-alquilo C_{1-6}, mono- o di(alquilo C_{1-6})aminoalquilo C_{1-6}, aminoalquilo C_{1-6},

\quad: o un radical de fórmula -Alk^{1}-C(=O)-R^{9}, -Alk^{1}-S(O)-R^{9} o -Alk^{1}-S(O)_{2}-R^{9}, en donde Alk^{1} es alcanodiílo C_{1-6},

\quad: R^{9} es hidroxi, alquilo C_{1-6}, alquiloxi C_{1-6}, amino, alquilamino C_{1-8} o alquilamino C_{1-8} sustituido con alquiloxicarbonilo C_{1-6};

R^{2}, R^{3} y R^{16},cada uno independientemente, sonhidrógeno, hidroxi, halo, ciano, alquilo C_{1-6}, alquiloxi C_{1-6}, hidroxialquiloxi C_{1-6}, alquiloxi C_{1-6}-alquiloxi C_{1-6}, aminoalquiloxi C_{1-6}, mono- o di(alquilo C_{1-6})aminoalquiloxi C_{1-6}, Ar^{1},

\quad: Ar^{2}-alquilo C_{1-6}, Ar^{2} oxi, Ar^{2} alquiloxi C_{1-6}, hidroxicarbonilo, alquiloxicarbonilo C_{1-6}, trihalometilo, trihalometoxi, alquenilo C_{2}-6, 4,4-dimetiloxazolilo; o

\quad: cuando se encuentran en posiciones adyacentes R^{2} y R^{3}, considerados juntos, pueden formar un radical bivalente de fórmula

-O-CH_{2}-O-: (a-1),

-O-CH_{2}-CH_{2}-O-: (a-2),

-O-CH=CH-: (a-3),

-O-CH_{2}-CH_{2}-: (a-4),

-O-CH_{2}-CH_{2}-CH_{2}-: (a-5),

\quad: o

-CH=CH-CH=CH-: (a-6);

\vocalinvisible: \textoinvisible

R^{4} y R^{5}, cada uno independientemente, son hidrógeno, halo, cada uno independientemente son hidrógeno, halo, Ar^{1}, alquilo C_{1-6}, hidroxialquilo C_{1-6}, alquiloxi C_{1-6} alquilo C_{1-6}, alquiloxi C_{1-6}, alquiltio C_{1-6}, amino, hidroxicarbonilo, alquiloxicarbonilo C_{1-6}, alquil C_{1-6}S(O)alquilo C_{1-6} o alquil C_{1-6}S(O)_{2}-alquilo C_{1-6};

R^{6} y R^{7}, cada uno independientemente, son hidrógeno, halo, ciano, alquilo C_{1-6}, alquiloxi C_{1-6}, Ar^{2}oxi, trihalometilo, alquiltio C_{1-6}, di(alquil C_{1-6})amino, o

\quad: cuando se encuentran en posiciones adyacentes, R^{6} y R^{7}, considerados juntos, pueden formar un radical bivalente de fórmula

-O-CH_{2}-O-: (c-1),

\quad: o

-CH=CH-CH=CH-: (c-2);

R^{8}: es hidrógeno, alquilo C_{1-6}, ciano, hidroxicarbonilo, alquiloxicarbonilo C_{1-6}, alquil C_{1-6}-carbonilalquilo C_{1-6}, cianoalquilo C_{1-6}, alquiloxi C_{1-6}-carbonilalquilo C_{1-6}, carboxialquilo C_{1-6}, hidroxialquilo C_{1-6}, aminoalquilo C_{1-6}, mono- o di(alquilo C_{1-6})-aminoalquilo C_{1-6}, imidazolilo, haloalquilo C_{1-6}, alquil- oxi C_{1-6}-alquilo C_{1-6}, aminocarbonilalquilo C_{1-6}, o un radical de fórmula

-O-R^{10}: (b-1),

-S-R^{10}: (b-2),

-N-R^{11}R^{12}: (b-3),

\vocalinvisible: \textoinvisible

\quad: en donde R^{10} es hidrógeno, alquilo C_{1-6}, alquilcarbonilo C_{1-6}, Ar^{1}, Ar^{2}-alquilo C_{1-6}, alquiloxi C_{1-6}-carbonilalquilo C_{1-6}, o un radical o fórmula -Alk^{2}-OR^{13} o Alk^{2}-NR^{14}R^{15};

\quad: R^{11} es hidrógeno, alquilo C_{1-12,} Ar^{1} o Ar^{2}-alquilo C_{1-6};

\quad: R^{12} es hidrógeno, alquilo C_{1-6}, alquilcarbonilo C_{1-16}, alquiloxicarbonilo C_{1-6}, alquilaminocarbonilo C_{1-6}, Ar^{1}, Ar^{2}-alquilo C_{1-6}, alquil C_{1-6}-carbonilalquilo C_{1-6}, un amino-ácido natural, Ar^{1}-carbonilo, Ar^{2}-alquilcarbonilo C_{1-6}, aminocarbonilcarbonilo, alquiloxi C_{1-6}-alquilcarbonilo C_{1-6}, hidroxi, alquiloxi C_{1-6}, aminocarbonilo, di(alquilo C_{1-6})aminoalquilcarbonilo C_{1-6}, amino, alquilamino C_{1-6}, alquilcarbonilamino C_{1-6}, o un radical o fórmula -Alk^{2}-OR^{13} o -Alk^{2}-NR^{14}R^{15};

\quad: en donde Alk^{2} es alcanodiílo C_{1-6};

\quad: R^{13} es hidrógeno, alquilo C_{1-6}, alquilcarbonilo C_{1-6}, hidroxialquilo C_{1-6}, Ar^{1} o Ar^{2}-alquilo C_{1-6};

\quad: R^{14} es hidrógeno, alquilo C_{1-6}, Ar^{1} o Ar^{2}-alquilo C_{1-6};

\quad: R^{15} es hidrógeno, alquilo C_{1-6}, alquilcarbonilo C_{1-6}, Ar^{1} o Ar^{2}-alquilo C_{1-6};

\quad: R^{17} es hidrógeno, halo, ciano, alquilo C_{1-6}, alquiloxicarbonilo C_{1-6}, Ar^{1};

\quad: R^{18} es hidrógeno, alquilo C_{1-6}, alquiloxi C_{1-6} o halo;

\quad: R^{19} es hidrógeno o alquilo C_{1-6};

\quad: Ar^{1} es fenilo o fenilo sustituido con alquilo C_{1-6}, hidroxi, amino, alquiloxi C_{1-6} o halo;y

\quad: Ar^{2} es fenilo o fenilo sustituido con alquilo C_{1-6}, hidroxi, amino, alquiloxi C_{1-6} o halo.

\vskip1.000000\baselineskip

Muchos cánceres de mama tienen receptores de estrógenos y el crecimiento de estos tumores puede ser estimulado por estrógeno. Los agentes antiestrógenos han sido por esta razón propuestos y utilizados para el tratamiento de cánceres, especialmente el cáncer de mama. Uno de los agentes de este tipo más utilizados actualmente es el tamoxifeno, que es un inhibidor competitivo del estradiol que se fija al receptor de estrógenos (ER). Cuando está unido al ER, el tamoxifeno induce un cambio en la forma tridimensional del receptor, inhibiendo su fijación al elemento de respuesta a los estrógenos (ERE) en el DNA. En condiciones fisiológicas normales, la estimulación de los estrógenos aumenta la producción de células tumorales de la célula de crecimiento transformante b (TGF-b), un inhibidor autocrino del crecimiento de células tumorales. Por bloqueo de estos caminos, el efecto neto del tratamiento con tamoxifeno consiste en reducir la estimulación autocrina del crecimiento del cáncer de mama. Adicionalmente, el tamoxifeno reduce la producción local del factor de crecimiento afín a la insulina (IGF-1) por los tejidos circundantes: IGF-1 es un factor de crecimiento paracrino para la célula del cáncer de mama (Jordan y Murphy, Endocr. Rev., 1990, 11; 578-610). Tamoxifeno es el tratamiento endocrino de elección para las mujeres post-menopáusicas con cáncer de mama metastásico o que presentan un riesgo elevado de recurrencias de la enfermedad. El tamoxifeno se utiliza también en las mujeres pre-menopáusicas con tumores ER-positivos. Existen diversos efectos secundarios potenciales del tratamiento con tamoxifeno de larga duración, por ejemplo la posibilidad de cáncer endometrial y la aparición de sucesos trombo-embólicos. Así pues, aunque el tamoxifeno ha sido utilizado extensamente como agente antiterapéutico en humanos, el mismo no es terapéuticamente eficaz en todos los pacientes o contra todos los tipos de tumores. Otros antagonistas de receptores de estrógenos
o moduladores selectivos de los receptores de estrógenos incluyen toremifeno, droloxifeno, faslodex y raloxifeno.

En las mujeres post-menopáusicas, la fuente principal de estrógeno circulante procede de la conversión de andrógenos suprarrenales y ováricos (androstenodiona y testosterona) en estrógenos (estrona y estradiol) por la enzima aromatasa en los tejidos periféricos. La privación de estrógenos por la inhibición o desactivación de la aromatasa es un tratamiento eficaz y selectivo para algunas pacientes post-menopáusicas con cáncer de mama dependiente de hormonas. Ejemplos de inhibidores o desactivadotes de la aromatasa incluyen exemestano, anastrozol, letrozol y vorozol.

El término "agente antiestrógenos" se utiliza en esta memoria para incluir no sólo antagonistas de los receptores de estrógenos y moduladores selectivos de los receptores de estrógenos, sino también inhibidores de la aromatasa como se ha expuesto anteriormente.

WO-01/45740 describe composiciones y métodos para tratar y/o prevenir el cáncer de mama que incluyen composiciones que comprenden al menos un modulador selectivo de los receptores de estrógenos, por ejemplo tamoxifeno y al menos un inhibidor de la farnesil-transferasa, por ejemplo FTI-277.

Existe necesidad de aumentar la eficacia inhibidora de los agentes antiestrógenos contra el crecimiento de los tumores y proporcionar también un medio para la utilización de dosis menores de tales agentes a fin de reducir el potencial de efectos secundarios tóxicos adversos para el paciente.

Es un objeto de la invención proporcionar una combinación terapéutica y un agente antiestrógenos y un cierto inhibidor de la farnesil-transferasa que tiene un efecto inhibidor ventajoso contra el crecimiento de las células tumorales, en comparación con los efectos respectivos exhibidos por los componentes individuales de la combinación.

De acuerdo con la invención, se proporciona por tanto una combinación de un agente antiestrógenos y un inhibidor de la farnesil-transferasa, a saber (+)-6-[amino(4-clorofenil)(1-metil-1H-imidazol-5-il)metil]-4-(3-clorofenil)-1-metil-2(1H)-quinolinona (Compuesto 75 en la Tabla 1 de la parte experimental de WO-97/21701); o una sal de adición de ácido de la misma farmacéuticamente aceptable.

El inhibidor anterior de la farnesil-transferasa puede convertirse en sus sales de adición de ácido farmacéuticamente aceptables por tratamiento con un ácido apropiado. Acidos apropiados comprenden, por ejemplo, ácidos inorgánicos tales como hidrácidos halogenados, v.g. ácido clorhídrico o bromhídrico; los ácidos sulfúrico; nítrico; fosfórico y análogos; o ácidos orgánicos tales como, por ejemplo, los ácidos acético, propanoico, hidroxiacético, láctico, pirúvico, oxálico, malónico, succínico (es decir el ácido butanodioico), maleico, fumárico, málico, tartárico, cítrico, metanosulfónico, etanosulfónico, bencenosulfónico, p-toluenosulfónico, ciclámico, salicílico, p-aminosalicíclico, pamoico y los ácidos análogos.

Un agente antiestrógenos particularmente preferido para uso de acuerdo con la invención es el tamoxifeno. El tamoxifeno está disponible comercialmente por ejemplo de AstraZeneca plc bajo el nombre comercial Nolvadex y puede prepararse por ejemplo como se describe en las Memorias Descriptivas de Patente de Gran Bretaña 1064629 y 1354939, o por procesos análogos a los mismos. Otros agentes antiestrógenos incluyen faslodex disponible comercialmente por ejemplo de AstraZeneca plc bajo el nombre comercial Fulvestrant, raloxifeno disponible comercialmente por ejemplo de Eli Lilly bajo el nombre comercial Evista, toremifeno disponible comercialmente por ejemplo de Schering Corporation bajo el nombre comercial Fareston, y el análogo de tamoxifeno droloxifeno. Inhibidores de aromatasa incluyen letrozol, anastrozol, disponible comercialmente por ejemplo de AstraZeneca plc bajo el nombre comercial Arimidex, exemestano disponible comercialmente por ejemplo de Pharmacia & Upjohn bajo el nombre comercial Aromasin, y vorozol.

La presente invención se refiere también a combinaciones de acuerdo con la invención para uso en terapia médica por ejemplo para inhibición del crecimiento de células tumorales.

La presente invención se refiere también al uso de combinaciones de acuerdo con la invención para la preparación de una composición farmacéutica para inhibición del crecimiento de células tumorales.

Esta invención se refiere adicionalmente al uso de combinaciones de acuerdo con la invención para inhibición del crecimiento anormal de las células, con inclusión de células transformadas, por administración de una cantidad eficaz de un compuesto de acuerdo con la invención. El crecimiento anormal de las células hace referencia al crecimiento celular independiente de los mecanismos normales de regulación (v.g. pérdida de inhibición de contacto). Esto incluye el crecimiento anormal de: (1) células tumorales (tumores) que expresan un oncogén ras activado; (2) células tumorales en las cuales la proteína ras está activada como resultado de la mutación oncogénica de otro gen; (3) células benignas y malignas de otras enfermedades proliferativas en las cuales se produce la activación aberrante de ras. Adicionalmente, se ha sugerido en la bibliografía que los oncogenes ras no sólo contribuyen al crecimiento de los tumores in vivo por un efecto directo sobre el crecimiento de células tumorales sino también indirectamente, a saber por facilitar la angiogénesis inducida por el tumor (Rak, J. et al., Cancer Research, 55, 4575-4580, 1995). Por tanto, los oncogenes ras mutantes farmacológicamente direccionantes podrían suprimir admisiblemente el crecimiento de tumores sólidos in vivo, en parte, por inhibición de la angiogénesis inducida por el tumor.

En particular, esta invención se refiere al uso de combinaciones de acuerdo con la invención para inhibición del crecimiento de tumores que expresan un oncogén ras activado por la administración de una cantidad eficaz de una combinación de acuerdo con la presente invención. La presente invención es particularmente aplicable al tratamiento del cáncer de mama con inclusión de la enfermedad avanzada. Ejemplos de otros tumores que pueden ser inhibidos incluyen, pero sin carácter limitante, cáncer de pulmón (v.g. adenocarcinoma y con inclusión del cáncer de pulmón de células no pequeñas), cánceres de páncreas (v.g. carcinoma pancreático tal como, por ejemplo, carcinoma pancreático exocrino), cánceres de colon (v.g. carcinomas colorrectales, tales como, por ejemplo, adenocarcinoma de colon y adenoma de colon), tumores hematopoyéticos de linaje linfoide (v.g. leucemia linfocítica aguda, linfoma de células B, linfoma de Burkitt), leucemias mieloides (por ejemplo, leucemia mieloide aguda (AML)), cáncer folicular de tiroides, síndrome mielodisplásticos (MDS), tumores de origen mesenquimático (v.g. fibrosarcomas y rabdomiosarcomas), melanomas, teratocarcinomas, neuroblastomas, gliomas, tumor benigno de la piel (v.g. queratoacantomas), carcinoma de riñón, carcinoma de ovario, carcinoma de vejiga y carcinoma epidérmico.

Esta invención se refiere también al uso de combinaciones de acuerdo con la invención para inhibir enfermedades proliferativas, tanto benignas como malignas, en donde las proteínas ras están activadas de modo aberrante como resultado de la mutación oncogénica en genes, es decir, que el gen ras no se activa por sí mismo por mutación a una mutación oncogénica para dar una forma oncogénica, realizándose dicha inhibición por la administración de una cantidad eficaz de una combinación de acuerdo con la invención, a un individuo que se encuentra en necesidad de dicho tratamiento. Por ejemplo, el trastorno proliferativo benigno neurofibromatosis, o tumores en los cuales se activa ras debido a mutación o sobreexpresión de oncogenes de tirosina-quinasa pueden ser inhibidos por las combinaciones de acuerdo con la invención.

El agente antiestrógenos y el inhibidor de la farnesil-transferasa pueden administrarse simultáneamente (v.g. en composiciones separadas o unitarias) o secuencialmente en cualquier orden. En el último caso, los dos compuestos se administrarán dentro de un periodo y en una cantidad y de un modo que sea suficiente para asegurar que se consigue un efecto ventajoso o sinérgico. Se apreciará que el método y el orden de administración preferidos, así como las cantidades de dosificación respectivas y regímenes para cada componente de la combinación dependerán del agente antiestrógenos particular y el inhibidor de la farnesil-transferasa particular que se administre, la ruta de administración de la combinación, el tumor particular que se esté tratando y el hospedador particular que se esté tratando. El método y orden de administración óptimos, así como las cantidades y el régimen de dosificación pueden ser determinados fácilmente por los expertos en la técnica utilizando métodos convencionales y teniendo en cuenta la información expuesta en esta memoria.

El inhibidor de la farnesil-transferasa se administra ventajosamente en una cantidad eficaz de 0,0001 mg/kg a 100 mg/kg de peso corporal, y en particular desde 0,001 mg/kg a 10 mg/kg de peso corporal. Más particularmente, para un paciente adulto, la dosificación está comprendida convenientemente en el intervalo de 50 a 500 mg dos veces al día (bid), ventajosamente 100 a 400 mg bid y particularmente 300 mg bid.

El agente antiestrógenos se administra ventajosamente en una dosis de aproximadamente 1 a 100 mg diariamente dependiendo del agente particular y la condición de que se trate. El tamoxifeno se administra ventajosamente por vía oral en una dosis de 5 a 50 mg, preferiblemente 10 a 20 mg dos veces al día, continuando la terapia durante tiempo suficiente para alcanzar y mantener un efecto terapéutico. El toremifeno se administra ventajosamente por vía oral en una dosis de aproximadamente 60 mg una vez al día, continuando la terapia durante el tiempo suficiente para alcanzar y mantener un efecto terapéutico. El anastrozol se administra ventajosamente por vía oral en una dosis de aproximadamente 1 mg una vez al día. El droloxifeno se administra ventajosamente en una dosificación de aproximadamente 20-100 mg una vez al día. El raloxifeno se administra ventajosamente por vía oral en una dosis de aproximadamente 60 mg una vez al día. El exemestano se administra ventajosamente por vía oral en una dosis de aproximadamente 25 mg una vez al día.

Se prefiere especialmente administrar el inhibidor de la farnesil-transferasa a una dosis de 100 ó 200 mg bid durante 7, 14, 21 ó 28 días con una dosis del agente antiestrógenos en los intervalos arriba indicados.

Teniendo en cuenta sus útiles propiedades farmacológicas, los componentes de las combinaciones de acuerdo con la invención, es decir el agente antiestrógenos y el inhibidor de la farnesil-transferasa pueden formularse en diversas fórmulas farmacéuticas para propósitos de administración. Los componentes pueden formularse por separado en composiciones farmacéuticas individuales o en una composición farmacéutica unitaria que contiene ambos componentes. El inhibidor de la farnesil-protein-transferasa puede prepararse y formularse en composiciones farmacéuticas por métodos conocidos en la técnica y en particular de acuerdo con los métodos descritos en WO-97/21701.

La presente invención se refiere también por tanto a una composición farmacéutica que comprende un agente antiestrógenos y un inhibidor de la farnesil-transferasa, a saber (+)-6-[amino(4-clorofenil)(1-metil-1H-imidazol-5-il)metil]-4-(3-clorofenil)-1-metil-2(1H)-quinolinona junto con uno o más vehículos farmacéuticos. Para preparar composiciones farmacéuticas para uso de acuerdo con la invención, una cantidad eficaz de un compuesto particular como el ingrediente activo se combina en mezcla íntima con un vehículo farmacéuticamente aceptable, vehículo que puede tomar una gran diversidad de formas dependiendo de la forma de preparación deseada para administración. Estas composiciones farmacéuticas se encuentran deseablemente en forma de dosificación unitaria adecuada, preferiblemente, para administración por vía oral, rectal, percutánea, o por inyección parenteral. Por ejemplo, en la preparación de las composiciones en forma de dosificación oral, puede emplearse cualquiera de los medios farmacéuticos usuales, tales como, por ejemplo, agua, glicoles, aceites, alcoholes y análogos en el caso de preparaciones orales líquidas tales como suspensiones, jarabes, elixires y soluciones; o vehículos sólidos tales como almidones, azúcares, caolín, lubricantes, aglomerantes, agentes desintegrantes y análogos en el caso de polvos, píldoras, cápsulas y tabletas. Debido a su facilidad de administración, tabletas y cápsulas representan la forma unitaria de dosificación oral más ventajosa, en cuyo caso se emplean obviamente vehículos farmacéuticos sólidos. Para composiciones parenterales, el vehículo comprenderá usualmente agua estéril, al menos en gran parte, aunque pueden incluirse otros ingredientes, por ejemplo para facilitar la solubilidad. Pueden prepararse por ejemplo soluciones inyectables, en las cuales el vehículo comprende solución salina, solución de glucosa o una mezcla de solución salina y glucosa. Pueden prepararse también suspensiones inyectables, en cuyo caso se pueden emplear vehículos líquidos apropiados, agentes de suspensión o análogos. En las composiciones adecuadas para administración percutánea, el vehículo comprende opcionalmente un agente mejorador de la penetración y/o un agente humectante adecuado, combinados opcionalmente con aditivos adecuados de cualquier naturaleza en menores proporciones, aditivos que no causen un efecto deletéreo significativo a la piel. Dichos aditivos pueden facilitar la administración a la piel y/o pueden ser útiles para preparar las composiciones deseadas. Estas composiciones pueden administrarse de diversas maneras, v.g., como un parche transdérmico, como una aplicación local o tópica o como un ungüento.

Es especialmente ventajoso formular las composiciones farmacéuticas arriba mencionadas en forma unitaria de dosificación para facilidad de administración y uniformidad de dosificación. La forma de dosificación unitaria, tal como se utiliza en la memoria descriptiva y las reivindicaciones de esta memoria, hace referencia a unidades físicamente discretas adecuadas como dosis unitarias, conteniendo cada unidad una cantidad predeterminada de ingrediente activo calculada para producir el efecto terapéutico deseado en asociación con el vehículo farmacéutico requerido. Ejemplos de tales formas de dosificación unitaria son tabletas (con inclusión de tabletas recubiertas), cápsulas, píldoras, paquetes de polvos, obleas, soluciones o suspensiones inyectables, cucharaditas de té, cucharadas de mesa y análogos, así como múltiplos segregados de las mismas.

Puede ser apropiado administrar la dosis requerida de cada componente de la combinación como dos, tres, cuatro o más subdosis a intervalos apropiados a lo largo del curso del tratamiento. Las subdosis pueden formularse como formas de dosificación unitarias, por ejemplo, conteniendo en cada caso independientemente 0,01 a 500 mg, por ejemplo 0,1 a 200 mg y en particular 1 a 100 mg de cada ingrediente activo por forma de dosificación unitaria.

Actividad Anti-Tumor de una Combinación de un Inhibidor de Farnesil-Transferasa y un Agente Anti-estrógenos

Una combinación de un inhibidor de farnesil-transferasa, a saber el compuesto identificado anteriormente como Compuesto 75 (R115777), y un agente anti-estrógenos, a saber tamoxifeno (TMX), se testó respecto a actividad antitumoral en comparación con la actividad de los componentes individuales de la combinación, como se describe a continuación.

Ratones/Cría

Ratones hembra Nude-Homo NCRNU, no-ovariectomizados, de 8 semanas de edad se alimentaron ad libitum con agua y una dieta estándar para roedores irradiada. Los ratones se alojaron en microaisladores estables conforme a un ciclo de 12 horas de luz a 21-22ºC y 40-60% de humedad.

Tumores

Los ratones fueron inoculados subcutáneamente con 1 x 10^{7} células de carcinoma de mama humano MCF7 en la ijada. Los tumores se monitorizaron inicialmente dos veces por semana y posteriormente una vez al día a medida que los neoplasmas alcanzaban el tamaño deseado, aproximadamente 100 mg. Cuando los carcinomas alcanzaron un tamaño comprendido entre 62 y 144 mg de peso de tumor calculado, se distribuyeron los animales por pares coincidentes en los diversos grupos de tratamiento (pesos de tumor medio por grupo comprendidos entre 83 y 85 mg).

Se calculó el peso estimado del tumor utilizando la fórmula:

2

w = anchura y l = longitud en mm de un tumor MCF7.

Se implantaron pelets de estrógenos (0,36 mg: \alpha-estradiol, liberación durante 60 días) por vía subcutánea en la región dorsal de cada ratón dos días antes de la inoculación de las células MCF7. Se implantaron pelets recientes de estrógenos 64 días después del implante original. El día 1, se retiraron los pelets de estrógenos de los dos grupos a los que se administró tamoxifeno (Grupos 3 y 5). Los pelets se dejaron en su lugar en los Grupos 1, 2 y 4, y se implantaron nuevos pelets de estrógenos en los ratones en los Grupos 1, 2 y 4 el día 62 del experimento. Los pelets viejos no se retiraron de estos grupos en el momento de la reposición. El aloinjerto de tumor de mama MCF7 requiere el suministro exógeno de estrógenos a los ratones hospedadores para soportar el crecimiento progresivo de este carcinoma.

Fármacos

El vehículo era 20% de beta-ciclodextrina en HCl 0,1 N. Se añadió lentamente la beta-ciclodextrina hasta un volumen aproximado agitado constantemente de HCl 0,1 N para producir una solución al 40% de beta-ciclodextrina. La mezcla se cubrió con papel metalizado y se agitó hasta que se disolvió por completo (varias horas). La solución se llevó luego hasta el volumen final y se filtró (0,2 \mum).

Se disolvió R115777 en lotes suficientes durante 7 días de dosificación al mismo tiempo. R115777 se trató por ultrasonidos a impulsos durante 10 minutos a 4ºC, se filtró (0,2 \mum) y se transfirió a viales estériles de 15 ó 20 ml. Esta solución se diluyó ulteriormente utilizando beta-dextrina al 20% en HCl 0,1 N para los grupos de dosis de menor concentración. Los viales se envolvieron en papel metalizado y se guardaron a 4ºC. El volumen de dosificación (0,2 ml/20 g de ratón) se ajustó por peso.

Se reconstituyó el tamoxifeno en aceite de maíz a 10 mg/ml. La dosificación no se ajustó por peso corporal; cada ratón recibió 100 \mul de la solución (1 mg/ratón).

Plan de Tratamiento

Ratones lampiños portadores de MCF se hicieron coincidir por pares el día 1 en 5 grupos de 12 animales cada uno. Se administró por vía subcutánea tamoxifeno a una dosis de 1 mg/ratón una vez al día hasta el final. Se administró R115777 por vía oral a 100 mg/kg una vez al día hasta el final. El grupo de terapia de combinación utilizó los mismos regímenes que se emplearon en los grupos de monoterapia con tamoxifeno y R115777. Se incluyeron en el estudio un grupo de control de crecimiento (grupo sin tratamiento) y un grupo de control de vehículo. Se retiraron los pelets de estrógeno de los grupos de monoterapia con tamoxifeno y los grupos de terapia de combinación el día 1, para evitar el antagonismo del efecto antiestrógeno del tamoxifeno.

Punto final

El punto final de inhibición del crecimiento del tumor (TGI) se utilizó en este estudio para evaluar la eficacia de los diversos tratamientos. El punto final de carga de tumor se ajustó a 1,0 g como se midió por medio de un calibre. Los valores TGI se determinaron el último día del estudio (día 5), cuando todos los ratones estaban sometidos al test, excepto aquellos que habían expirado por causas relacionadas con el tratamiento o con el procedimiento. Los ratones se sacrificaron por eutanasia a la terminación, se extirparon y pesaron sus tumores MCF7, y se calcularon los valores TGI a partir de los pesos actuales medios del carcinoma del grupo final (con inclusión de los que sufrieron disminución del tumor; CRs o PRs).

En la extirpación, los tumores menores que su tamaño el día 1 se designaron PRs (regresiones parciales), y un ratón con ausencia de carcinoma visible se designó CR (regresión completa).

Los animales registrados como CRs o PRs no se incluyeron en los cálculos del TGI. Se utilizó la fórmula siguiente para calcular los valores TGI:

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Recogida de las Muestras

En el punto final, se extirparon y pesaron los tumores. En el punto final, después del día 27, se cortó por la mitad cada tumor con un bisturí y se puso la mitad en 15 a 20 volúmenes de formalina tamponada neutra al 10%. La otra mitad se congeló bruscamente en nitrógeno líquido y se guardó a -80ºC. En su punto final, después del día 30, se recogió sangre de los ratones restantes de los Grupos 3, 4 y 5 por punción cardiaca bajo anestesia con CO_{2}. Se recuperó el suero, y se guardó a -80ºC hasta el final del estudio.

Resultados Sumario de la regresión observada en los aloinjertos establecidos de tumores de mama humanos MCF-7

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Estos datos demuestran que la combinación testada aumenta inesperadamente la regresión citotóxica del tumor en comparación con el efecto citostático de los componentes individuales de la composición.

TABLA 1

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Claims

1. Una combinación de un agente antiestrógenos y un inhibidor de la farnesil-transferasa, a saber (+)-6-[amino(4-clorofenil) (1-metil-1H-imidazol-5-il)metil]-4-(3-clorofenil)-1-metil-2(1H)-quinolinona; o una sal de adición de ácido farmacéuticamente aceptable del mismo.

2. Una combinación de acuerdo con la reivindicación 1, en la cual el agente antiestrógenos es un antagonista de los receptores de estrógenos o un modulador selectivo de los receptores de estrógenos.

3. Una combinación de acuerdo con la reivindicación 2, en la cual el agente antiestrógenos es tamoxifeno.

4. Una combinación de acuerdo con la reivindicación 2, en la cual el agente antiestrógenos es faxlodex, raloxifeno, toremifeno o droloxifeno.

5. Una combinación de acuerdo con la reivindicación 1, en la cual el agente antiestrógenos es un inhibidor de las aromatasas.

6. Una combinación de acuerdo con la reivindicación 5, en la cual el agente antiestrógenos es letrozol, anastrozol, exemestano o vorozol.

7. Una combinación de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores en la forma de una composición farmacéutica que comprende un agente antiestrógenos y dicho inhibidor de la farnesil-transferasa junto con uno o más vehículos farmacéuticos.

8. Una combinación de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores para uso en terapia médica.

9. Una combinación de acuerdo con la reivindicación 8 para inhibición del crecimiento de células tumorales.

10. Uso de una combinación de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7 en la fabricación de una composición farmacéutica para inhibición del crecimiento de las células tumorales.