ES2317457T3 - Placa receptora con multiples secciones transversales. - Google Patents
Placa receptora con multiples secciones transversales. Download PDFInfo
- Publication number
- ES2317457T3 ES2317457T3 ES06252562T ES06252562T ES2317457T3 ES 2317457 T3 ES2317457 T3 ES 2317457T3 ES 06252562 T ES06252562 T ES 06252562T ES 06252562 T ES06252562 T ES 06252562T ES 2317457 T3 ES2317457 T3 ES 2317457T3
- Authority
- ES
- Spain
- Prior art keywords
- well
- plate
- wells
- region
- filter
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N1/00—Sampling; Preparing specimens for investigation
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
- B01L3/00—Containers or dishes for laboratory use, e.g. laboratory glassware; Droppers
- B01L3/50—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes
- B01L3/502—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes with fluid transport, e.g. in multi-compartment structures
- B01L3/5025—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes with fluid transport, e.g. in multi-compartment structures for parallel transport of multiple samples
- B01L3/50255—Multi-well filtration
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
- B01L3/00—Containers or dishes for laboratory use, e.g. laboratory glassware; Droppers
- B01L3/50—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes
- B01L3/508—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes rigid containers not provided for above
- B01L3/5085—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes rigid containers not provided for above for multiple samples, e.g. microtitration plates
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
- B01L2200/00—Solutions for specific problems relating to chemical or physical laboratory apparatus
- B01L2200/02—Adapting objects or devices to another
- B01L2200/025—Align devices or objects to ensure defined positions relative to each other
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
- B01L2200/00—Solutions for specific problems relating to chemical or physical laboratory apparatus
- B01L2200/06—Fluid handling related problems
- B01L2200/0678—Facilitating or initiating evaporation
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
- B01L2200/00—Solutions for specific problems relating to chemical or physical laboratory apparatus
- B01L2200/06—Fluid handling related problems
- B01L2200/0684—Venting, avoiding backpressure, avoid gas bubbles
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
- B01L2200/00—Solutions for specific problems relating to chemical or physical laboratory apparatus
- B01L2200/14—Process control and prevention of errors
- B01L2200/141—Preventing contamination, tampering
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
- B01L2300/00—Additional constructional details
- B01L2300/06—Auxiliary integrated devices, integrated components
- B01L2300/0681—Filter
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
- B01L2300/00—Additional constructional details
- B01L2300/08—Geometry, shape and general structure
- B01L2300/0809—Geometry, shape and general structure rectangular shaped
- B01L2300/0829—Multi-well plates; Microtitration plates
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
- B01L2300/00—Additional constructional details
- B01L2300/08—Geometry, shape and general structure
- B01L2300/0848—Specific forms of parts of containers
- B01L2300/0858—Side walls
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Hematology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Clinical Laboratory Science (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
- Sampling And Sample Adjustment (AREA)
- Separation Using Semi-Permeable Membranes (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Road Paving Structures (AREA)
- Biological Treatment Of Waste Water (AREA)
- Cultivation Of Seaweed (AREA)
- Extraction Or Liquid Replacement (AREA)
- Polishing Bodies And Polishing Tools (AREA)
Abstract
Un dispositivo de pocillos múltiples que comprende una placa filtrante que tiene una pluralidad de pocillos filtrantes (20), cada uno de los cuales incluye una membrana (30) situada en el fondo del pocillo, y una placa receptora que tiene una pluralidad de pocillos receptores (21) que tienen cada uno un fondo, estando dicha placa receptora adaptada para recibir a dicha placa de filtrado con una relación encajada mediante la cual cada uno de dichos pocillos filtrantes (20) se extiende hacia el interior de un respectivo pocillo receptor (21) hasta una posición espaciada del fondo de dicho pocillo receptor, definiendo así en cada uno de dichos pocillos receptores una primera región que es una región ocupada del pocillo filtrante y una segunda región que es una región no ocupada por un pocillo filtrante, teniendo dicha primera región una sección transversal más grande que dicha segunda región, caracterizado porque cada uno de dichos pocillos receptores tiene una región (32) de sección transversal no uniforme que proporciona una transición entre la sección transversal de dicha primera región de cada pocillo receptor (21) y la sección transversal de dicha segunda región de dicho pocillo receptor (21), dicho pocillo receptor (21) tiene la transición desde dicha primera región hasta dicha segunda región en un punto situado en o por debajo de la ubicación de cada dicha membrana (30) del pocillo de la placa filtrante cuando cada uno de dichos pocillos (20) de la placa filtrante está en relación encajada con un correspondiente pocillo (21) de la placa receptora, y dicha primera región tiene una sección transversal sustancialmente cuadrada y dicha segunda región tiene una sección transversal sustancialmente circular.
Description
Placa receptora con múltiples secciones
transversales.
La biodisponibilidad de un fármaco está afectada
por diversos factores, incluyendo su capacidad para ser absorbido
por la corriente sanguínea a través de las células que recubren los
intestinos. Existen diversas opciones de diferentes ensayos in
vitro para predecir la propiedad de absorción gastrointestinal
de los fármacos, incluyendo un ensayo de permeabilidad y un
procedimiento conocido como PAMPA (Ensayo de Permeabilidad con
Membrana Artificial Paralela), que utiliza una membrana rellena de
lípido para simular la bicapa de lípido de diversos tipos de
células, incluyendo el epitelio intestinal. Estos ensayos de
permeabilidad no basados en células son compatibles con la
automatización, relativamente rápidos (4-24 horas),
económicos y directos. Están siendo utilizados con creciente
frecuencia para determinar las propiedades de permeabilidad
transcelular pasiva de potenciales componentes de los fármacos. La
mayoría de los fármacos penetran en la corriente sanguínea por
difusión pasiva a través del epitelio intestinal. Consecuentemente,
los ensayos de permeabilidad que miden el transporte pasivo a través
de barreras lipofílicas se correlacionan con los valores de
absorción humana de los fármacos que indican los procedimientos
publicados.
Los ensayos que predicen la absorción pasiva de
fármacos administrados oralmente están resultando cada vez más
importantes en el proceso de descubrimiento de fármacos. La
capacidad de una molécula para ser absorbida oralmente es uno de
los aspectos más importantes para decidir si una molécula es un
potencial candidato principal para un desarrollo. Los ensayos
basados en células, como los que utilizan células
Caco-2, se usan normalmente como modelo para la
absorción de fármacos; sin embargo, la técnica es laboriosa y
frecuentemente se sitúa tarde dentro del proceso de descubrimiento
del fármaco. Los ensayos descritos por Kansy y Faller se han
enfrentado a estas cuestiones proporcionando unos procedimientos
rápidos, económicos y fácilmente automatizables para medir la
permeabilidad pasiva de un compuesto. Tanto los ensayos PAMPA como
los de permeabilidad utilizan membranas artificiales para modelar
las propiedades de transporte pasivo de la membrana celular. Otros
investigadores han presentado variaciones sobre el procedimiento de
Kansy, en algunos casos mejorando la correlación con una diana
particular (por ejemplo, una barrera cerebro-sangre)
o con una clase de moléculas. En general, el ensayo original sigue
siendo el mismo.
Los dispositivos utilizados para efectuar
ensayos de permeabilidad incluyen una placa filtrante, que contiene
uno o más pocillos con una barrera de membrana fijada al fondo de
cada pocillo, y una placa receptora configurada para alojar la
placa filtrante con una relación encajada. Con los pocillos
filtrantes y los pocillos receptores se colocan reactivos y
tampones según unas especificas relaciones en volumen para poder
analizar datos precisos del transporte de los fármacos. Es deseable
tener los pocillos con membrana de la placa filtrante insertados en
los pocillos de la placa receptora con objeto de que los medios
contenidos en los pocillos de la placa receptora estén a un nivel
igual o cercano al de los medios contenidos en los pocillos
filtrantes. Esto crea un equilibrio hidrostático y minimiza los
diferenciales de presión, que pueden provocar una difusión forzada
o incontrolada a través de la membrana. Como mínimo, no obstante, la
membrana debe permanecer en contacto con el liquido de la placa
receptora durante el experimento, incluyendo durante la incubación,
la agitación y la mezcla. Los ensayos de cultivo de células (por
ejemplo, Caco-2) y los ensayos de cribado no basados
en células (por ejemplo, PAMPA) están descritos de esta manera.
Estos dispositivos tienen también aplicaciones no basadas en células
que presentan un rendimiento superior en comparación con los ensayos
Caco, y que requieren membranas de mayor área para poder
lograrlo.
El análisis se efectúa leyendo con lectores UV o
visuales directamente en un conjunto de transporte. Por lo tanto es
deseable disponer de una placa receptora que permita la transmisión
de luz UV y visual. El protocolo puede requerir también una
agitación u otros modos de mezclar los medios, así como una
prolongada incubación a temperatura ambiente. La manipulación del
dispositivo puede hacerse manualmente o con manipuladores
automáticos de placas. En este ultimo caso, el dispositivo tiene
que se compatible con las Normas de Microplacas ANSI/SBS
(incorporadas aquí por referencia) que aplican principalmente al
tamaño, forma y perfil de las paredes externas de la placa. Estas
normas restringen también el conjunto de pocillos al normalizar la
distancia entre los centros de los pocillos y la situación del
conjunto con respecto al exterior de la placa.
El documento
US-A-5.650.323 describe una
herramienta de investigación en laboratorio para efectuar una
variedad de procedimientos, incluyendo técnicas de cultivo de
células y tejidos, que incluye una placa de pocillos múltiples, una
placa filtrante que tiene uno o más pocillos filtrantes que se
extienden al interior de los pocillos de la placa múltiple, una
tapa y un deposito que puede usarse con el equipo auxiliar diseñado
para utilizar con placas múltiples en formato estándar de 96
pocillos. El sistema permite criar y manipular simultáneamente
múltiples muestras de tejido.
El documento
US-A-2003/0215956 describe placas de
pocillos múltiples y conjuntos de columnas en los cuales pueden
analizarse y/o tratarse muestras (por ejemplo, lisatos de células
conteniendo ácidos nucleicos de interés, tales como RNA). En una
realización, la disposición de microfiltrado es una estructura
multicapa que incluye: (i) una placa de columnas que tiene un
conjunto de minicolumnas en las cuales pueden colocarse las
muestras, (ii) un elemento filtrante independiente dispuesto en
cada minicolumna, (iii) una placa de colectores de goteos que tiene
un correspondiente conjunto de colectores de goteos a través de los
cuales puede escapar el nitrato, y (iv) una placa de pocillos
receptores que tiene un correspondiente conjunto de pocillos
receptores en cuyo interior puede depositarse el filtrado. La
invención proporciona disposiciones de microfiltrado por pocillos
múltiples que son relativamente simples de fabricar y que solucionan
muchos de los problemas asociados a las disposiciones de la técnica
anterior relativos a (i) la contaminación cruzada debida a la acción
capilar a través de una hoja filtrante común o (ii) los elementos
filtrantes individuales que atrapan constituyentes de la muestra en
sustanciales volúmenes perdidos. Adicionalmente, la invención
proporciona disposiciones de microfiltración en pocillos múltiples
que soportan adecuadamente unos elementos filtrantes individuales
dispuestos en los pocillos sin crear un sustancial flujo
preferencial. Además, la invención proporciona disposiciones de
microfiltración en pocillos múltiples que evitan la contaminación
cruzada debida a la formación de aerosoles, gotas colgantes y/o
salpicaduras. Otras características descritas de la invención
proporcionan el tapado automático o sellado térmico de las muestras
filtradas recogidas por separado en un conjunto de pocillos.
Las Figuras 1 y 2 de la presente solicitud
muestran una placa de filtros conocida anteriormente que tiene las
características del preámbulo de la reivindicación 1. La presente
invención está caracterizada por las características de la porción
caracterizadora de la reivindicación 1. Las características
opcionales están relacionadas en las reivindicaciones
dependientes.
Las placas receptoras convencionales utilizadas
en los ensayos de tipo PAMPA no basados en células incluyen unas
placas aceptoras opacas y unas placas receptoras transparentes de
poliestireno. La acción capilar, la contaminación cruzada, el
control del volumen, la evaporación, la compatibilidad con la
automatización, y la recuperación del liquido son, sin embargo,
problemáticos en estos dispositivos. La causa principal de la
contaminación cruzada es la acción capilar del liquido por la
pequeña separación entre cada pocillo filtrante y pocillo receptor
cuando las dos placas están encajadas entre sí, especialmente
durante la incubación y la agitación del dispositivo. En los
dispositivos convencionales, cada pocillo de la placa receptora
tiene una sección transversal circular y forma por lo tanto una
separación capilarmente uniforme con un correspondiente pocillo de
la placa filtrante encajada concéntricamente, permitiendo que se
produzca la acción capilar y la contaminación cruzada. Con estos
dispositivos convencionales, la sección transversal también es
uniforme desde la parte superior hasta la parte inferior del
pocillo, lo cual aumenta el volumen de la sección inferior del
pocillo situada por debajo de la membrana. Además, con estos
dispositivos convencionales la separación capilarmente uniforme en
la sección superior del pocillo solo puede contener un volumen
mínimo del medio y, por lo tanto, al ensamblar el dispositivo, hay
grandes probabilidades de que salga líquido del pocillo, lo cual
conduce a la contaminación cruzada. En los dispositivos
convencionales no existe ninguna característica que ayude al montaje
y desmontaje automatizados de la placa filtrante con la placa
receptora. En los dispositivos convencionales, la placa filtrante se
encaja en la placa receptora de tal modo que existe una separación
entre las dos, creándose así unos caminos abiertos para la
evaporación hacia la atmósfera de los medios contenidos en los
pocillos.
Sería por tanto deseable proporcionar una placa
receptora que redujera o eliminara la acción capilar y la
contaminación cruzada.
Sería adicionalmente deseable proporcionar una
placa receptora que alojase fácilmente lectores visuales.
Sería adicionalmente deseable proporcionar una
placa receptora que minimizara las necesidades de volumen de los
medios en la placa receptora.
Sería adicionalmente deseable proporcionar una
placa receptora que pudiese manejar una gama mayor de volúmenes de
recepción, de manera que la membrana permaneciese en contacto
liquido y los medios no se salieran de los pocillos al ensamblar el
dispositivo.
Sería adicionalmente deseable proporcionar una
placa receptora que tuviese unas características que ayudasen al
montaje y desmontaje automatizados de la placa filtrante.
Sería adicionalmente deseable proporcionar una
placa receptora que se encajara de tal modo que cada pocillo
filtrante quedara centrado dentro de cada pocillo receptor con una
variación mínima durante el curso del experimento.
También sería adicionalmente deseable
proporcionar una placa receptora que minimizara los efectos de la
evaporación de los medios de los pocillos durante la incubación no
humidificada.
Los problemas de la técnica anterior descritos
más arriba han sido resueltos por la presente invención, que
proporciona un conjunto de múltiples pocillos que incluye una placa
filtrante y una placa receptora. Cada placa incluye una pluralidad
de pocillos que, cuando la placa filtrante está colocada según una
relación encajada con la placa receptora, cada pocillo de la placa
filtrante tiene un correspondiente pocillo de la placa receptora en
el cual penetra con una relación encajada. Los pocillos de la placa
receptora tienen una sección transversal no uniforme a lo largo de
la altura del pocillo. La sección transversal de la porción superior
del pocillo de la placa receptora está seleccionada para aumentar
la separación entre las paredes exteriores de los pocillos de la
placa filtrante y las paredes interiores de los correspondientes
pocillos de la placa receptora cuando la placa receptora y la placa
filtrante se encuentran en una relación encajada. Esta sección
transversal crea una separación no uniforme, de tal modo que el
mayor tamaño de la separación reduce la acción capilar y la
contaminación cruzada y aumenta el volumen alrededor del pocillo
filtrante para aceptar mayores variaciones del volumen de los
medios. La porción inferior de la placa receptora tiene una sección
transversal reducida con respecto a la porción superior, formando
así una sección transversal no uniforme a lo largo de la altura del
pocillo. Esta sección inferior de volumen reducido reduce el medio
necesario para el experimento. La sección transversal de los
pocillos de la placa receptora efectúa una transición desde una
sección transversal sustancialmente cuadrada a una sección
transversal sustancialmente redonda en o por debajo del punto donde
estaría situada la membrana de la placa filtrante cuando la placa
filtrante se encuentra en relación encajada con la placa receptora.
La sección transversal cuadrada proporciona además unos pasos
mayores para que escape el aire durante el montaje del dispositivo.
Una sección transversal cuadrada maximiza el espacio utilizable
entre pocillos vecinos, dado un pocillo filtrante circular, y las
limitaciones de las restricciones ANSI/SBS sobre la separación de
los pocillos. Se proporciona pues un pocillo multisección con la
máxima sección transversal en una región superior y una sección
transversal minimizada en una región inferior, con una transición
gradual entre las regiones.
El conjunto de pocillos múltiples de la presente
invención mejora además la repetibilidad de la colocación de la
placa filtrante y la placa receptora en la adecuada relación
encajada para que los pocillos filtrantes no queden excéntricos con
los pocillos receptores. La presente invención proporciona también
un medio para mejorar el montaje y desmontaje automatizados por
medio de una característica de guiado. Además, se reduce la
evaporación de los medios de los pocillos receptores proporcionando
un contacto plano de superficie a superficie entre la placa
filtrante y la placa receptora.
La Figura 1 es una vista superior en sección
transversal mostrando los pocillos de una placa filtrante
convencional encajada en una placa receptora;
la Figura 2 es una vista lateral en sección
transversal mostrando los pocillos de una placa filtrante
convencional encajada en una placa receptora;
la Figura 3 es una vista lateral en sección
transversal mostrando una porción de una placa filtrante en relación
encajada con una placa receptora según la presente invención;
la Figura 4 es una vista en perspectiva
mostrando una porción de una placa filtrante en relación encajada
con una placa receptora según la presente invención;
la Figura 5 es una vista en perspectiva de una
placa receptora según la presente invención;
la Figura 6 es una vista en perspectiva de una
porción de una placa filtrante en relación encajada con una placa
receptora mostrando los nervios soporte de la placa filtrante y un
nervio de posicionamiento según la presente invención; y
la Figura 7 es una vista en perspectiva de una
porción de una placa filtrante encajada en una placa receptora y
mostrando un nervio de posicionamiento según la presente
invención.
Observando en primer lugar las Figuras 1 y 2, se
muestra en las mismas unos pocillos 20' de una placa filtrante
convencional encajados en unos pocillos 21' de una placa receptora
convencional. Los pocillos 20' de la placa filtrante tienen una
sección transversal circular uniforme, y los pocillos 21' de la
placa receptora también tienen una sección transversal circular
uniforme. El diámetro exterior de los pocillos 20' de la placa
filtrante es ligeramente menor que el diámetro interior de los
pocillos 21' de la placa receptora, permitiendo que los pocillos
20' de la placa filtrante encajen dentro de los pocillos de la placa
receptora según se aprecia en la Figura 2. Se forma una pequeña
separación capilar 24 entre las paredes externas de los pocillos 20'
de la placa filtrante y las paredes internas de los pocillos 21' de
la placa receptora, así como entre las paredes internas de los
pocillos 20' de la placa filtrante y la pared 22' que separa los
pocillos 21' de la placa receptora. Esta separación permite el
desplazamiento y la acción capilar del fluido y resulta en una
contaminación cruzada, ya que el fluido de un pocillo de la placa
receptora puede pasar por la separación y contaminar el fluido de
otro pocillo, según se muestra por el camino de capilaridad 26 en la
Figura 2.
Las Figuras 3 y 4 ilustran una realización
preferida de la presente invención que aumenta la separación entre
las paredes externas de los pocillos de la placa filtrante y las
paredes internas de los pocillos de la placa receptora, con el fin
de reducir o eliminar la acción capilar y la contaminación cruzada
entre los pocillos y reducir la probabilidad de que el liquido se
salga del pocillo. En la realización representada, se ha aumentado
el diámetro de la porción de cada pocillo 21 de la placa receptora
que aloja un pocillo 20 de la placa filtrante, por lo que aumenta
la separación 122 entre las paredes internas de cada pocillo 21 de
la placa receptora y las paredes externas de un correspondiente
pocillo 20 de la placa filtrante, inhibiendo así la acción capilar
y reduciendo o eliminando el paso de fluido por esta separación.
Esta porción de cada pocillo de la placa receptora tiene una
sección transversal sustancialmente cuadrada, según se aprecia en la
Figura 5. Esta región de pocillo con mayor diámetro proporciona
además un camino de paso para que escape el aire cuando la placa
filtrante está situada en relación encajada con la placa receptora.
Cualquier burbuja de aire, que en cualquier otro caso quedaría
atrapada debajo de la membrana durante el montaje de las placas,
puede ahora escapar por la separación entre el pocillo de la placa
filtrante y el pocillo de la placa receptora.
La región superior de la placa receptora tiene
una sección transversal cuadrada y existe una separación adecuada
entre la pared externa de un pocillo 20 de la placa filtrante
encajada y la pared interna de un pocillo 21 de la placa receptora,
en las cuatro esquinas del cuadrado, con un máximo de 0,099 cm
(0,039 pulgadas), dependiendo del radio elegido para la esquina, con
una separación mínima de unos 0,0254 cm (0,010 pulgadas) en las
cuatro paredes laterales. La separación mínima está dictada por la
norma de separación de conjuntos ANSI/SBS y el diámetro exterior
del pocillo 21' de la placa filtrante.
Puesto que la acción capilar del fluido no tiene
entidad en la región de cada pocillo receptor situada por debajo
del punto por donde se encaja cada pocillo filtrante cuando está en
condición ensamblada (por ejemplo, en la región de cada pocillo de
la placa receptora que está por debajo del área efectiva de la
membrana 30 de cada pocillo de la placa filtrante), el diámetro y
por tanto el volumen de esta región pueden ser más pequeños que en
la región que recibe y acomoda cada pocillo de la placa filtrante.
Según la presente invención, cada pocillo 21 de la placa receptora
tiene una transición entre una región de mayor diámetro en el área
que recibe un pocillo 20 de la placa filtrante y una región de
menor diámetro en el área que está por debajo de donde se encaja
cada pocillo 20 de la placa filtrante. Esta región de cada pocillo
21 de la placa receptora es de sección transversal circular, lo
cual mejora la recuperación de liquido y controla la magnitud del
volumen del medio para el experimento. Más particularmente, si la
sección transversal cuadrada continuase desde la región que recibe
al pocillo de la placa filtrante hasta la región situada por debajo
de donde se encaja el pocillo de la placa filtrante, los medios no
recuperados quedarían atrapados en las esquinas del pocillo,
especialmente durante la extracción automática de liquido en la cual
una pipeta extrae líquido de una sola ubicación y no es posible
inclinar la placa. Puesto que sólo es necesario tener el medio
directamente debajo del área eficaz de la membrana, el diámetro de
la región inferior del pocillo de la placa receptora puede ser
sustancialmente igual que la dimensión exterior del pocillo
filtrante 20, y preferiblemente igual al diámetro eficaz de la
membrana, de manera que el fluido pueda transferirse sin obstrucción
entre cada pocillo filtrante y el correspondiente pocillo receptor,
a través de la membrana, hasta esta región del pocillo receptor.
Preferiblemente ninguna región del pocillo de la placa receptora
será menor que el área eficaz de la membrana, de manera que la
totalidad de la superficie de la membrana permanezca visible a los
lectores de la placa al mirar desde la parte inferior de la
placa.
La transición desde la región de mayor diámetro
hasta la región de menor diámetro es preferiblemente uniforme, con
el fin de reducir la retención o falta de recuperación de los
medios. En la realización que se muestra, la transición consiste en
unas secciones de pared 32 en ángulo cuando las secciones
transversales están tomadas por las esquinas del pocillo cuadrado,
según se muestra en la Figura 3. Esta sección en ángulo variará
desde cero grados (medidos desde un eje vertical) para las
secciones tomadas a través de las paredes laterales (según se
muestra en la Figura 2) hasta un ángulo máximo que viene dictado por
el radio de la esquina y la altura de la transición. La forma de las
secciones superior e inferior y la altura de la transición
determinarán los máximos ángulos que se producen. Para obtener un
drenaje adecuado, es deseable que los ángulos tengan menos de 70
grados medidos desde la vertical.
La colocación apropiada y reproducible de los
pocillos de la placa filtrante dentro de los pocillos de la placa
receptora es importante para evitar la contaminación cruzada, ya que
un encaje excéntrico de los pocillos de la placa filtrante dentro
de los pocillos de la placa receptora puede hacer que varíe la
separación entre los pocillos y aparezca la acción capilar. Además,
la ubicación de los pocillos tiene que mantenerse adecuadamente a
lo largo del experimento durante la manipulación manual y
automática, el mezclado y la agitación para evitar el bailoteo del
liquido, su derrame y su fuga por capilaridad. La colocación
adecuada, particularmente durante la automatización, puede
mejorarse según una realización de la presente invención
proporcionando un chaflán 35 a lo largo del perímetro externo del
conjunto de pocillos de la placa receptora 10. El chaflán sirve para
guiar los bordes externos de los pocillos 20 de la placa filtrante
hasta una adecuada relación encajada con los pocillos 21 de la
placa receptora. Situando el chaflán alrededor del perímetro del
conjunto de pocillos, pueden guiarse hasta su lugar placas con
diversas configuraciones, incluso cuando la placa filtrante tenga
una faldilla que interferiría con tal guía si estuviera colocada
alrededor del borde externo de la placa receptora en lugar de en la
periferia del conjunto de pocillos. Preferiblemente el chaflán está
formado con un ángulo de 45º, con la caída hacia los pocillos según
se aprecia en la Figura 5.
Para guiar adicionalmente el conjunto de placa
filtrante y placa receptora, pueden proporcionarse unos nervios o
postes de posicionamiento 40 en uno o más, preferiblemente al menos
dos, pocillos de la placa receptora que coincidan con unos
correspondientes nervios o postes de soporte 41 en unos
correspondientes pocillos de la placa filtrante. Los nervios de
posicionamiento proporcionan además un medio para impedir que la
placa filtrante se mueva o se desplace durante su manipulación,
mezclado y agitación. Según se aprecia en la Figura 7, se provee un
nervio de posicionamiento 40 entre un pocillo A de esquina y un
pocillo adyacente 21B de la placa receptora 10. Preferiblemente el
nervio 40 tiene una parte superior plana que se extiende hacia el
conjunto de pocillos y está ligeramente más baja que la cara
superior de la placa receptora. El nervio 40 termina en una pared
lateral que incluye una región achaflanada 40A, preferiblemente
inclinada con un ángulo de unos 45º, y una porción recta o
perpendicular 40B perpendicular a la parte superior de la pared del
pocillo. La entrada achaflanada y la cara coincidente inclinada del
nervio 40 guían a un correspondiente nervio soporte 41 (Figura 6)
de un correspondiente pocillo de la placa filtrante. Preferiblemente
los nervios soporte 41 están ahusados, estrechándose hacia su
extremo libre. Los nervios de posicionamiento 40 sólo son necesarios
en dos puntos de la placa para controlar la traslación en dos
direcciones y la rotación sobre el eje vertical. Aunque los nervios
de posicionamiento 40 están preferiblemente situados en pocillos de
esquina opuestos, está dentro del alcance de la invención
proveerlos en cualquier punto dentro de la placa, incluyendo las
paredes externas de los pocillos o la separación entre las paredes
de los pocillos (en cuyo caso el nervio iría entre los pocillos de
la placa filtrante con una entrada achaflanada y una pared inclinada
a cada lado). Los elementos de nervio o clavija también podrían usar
la pared exterior de la placa filtrante 20' para proporcionar los
medios de colocación.
Con objeto de reducir la evaporación de los
medios en los pocillos receptores, particularmente en los pocillos
receptores periféricos, las placas filtrantes y receptoras están
preferiblemente configuradas de manera que exista entre las placas
un área de contacto plano superficie a superficie para sellar los
pocillos. Así pues, el área 50 periférica a la entrada achaflanada
35 de la placa receptora es llana o plana (Figura 5), como lo es la
correspondiente área 51 de la placa filtrante que se asienta sobre
el área 50 (Figura 5), creando eficazmente un sellado entre caras
cuando la placa filtrante está en relación encajada con la placa
receptora. Esto permite que los pocillos filtrantes cuelguen en los
pocillos receptores, y elimina la comunicación con el ambiente
exterior. Existen otros medios para asegurar una región de íntimo
contacto entre la placa filtrante y la placa receptora sin
separación de aire y con un contacto mínimo con el ambiente. Uno de
tales procedimientos es un cordón recrecido alrededor de la
periferia de la placa receptora. Este cordón recrecido podría ser un
material elastomérico sobremoldeado, que actuase como un sello de
tipo junta.
Claims (4)
1. Un dispositivo de pocillos múltiples que
comprende una placa filtrante que tiene una pluralidad de pocillos
filtrantes (20), cada uno de los cuales incluye una membrana (30)
situada en el fondo del pocillo, y una placa receptora que tiene una
pluralidad de pocillos receptores (21) que tienen cada uno un fondo,
estando dicha placa receptora adaptada para recibir a dicha placa de
filtrado con una relación encajada mediante la cual cada uno de
dichos pocillos filtrantes (20) se extiende hacia el interior de un
respectivo pocillo receptor (21) hasta una posición espaciada del
fondo de dicho pocillo receptor, definiendo así en cada uno de
dichos pocillos receptores una primera región que es una región
ocupada del pocillo filtrante y una segunda región que es una región
no ocupada por un pocillo filtrante, teniendo dicha primera región
una sección transversal más grande que dicha segunda región,
caracterizado porque cada uno de dichos pocillos receptores
tiene una región (32) de sección transversal no uniforme que
proporciona una transición entre la sección transversal de dicha
primera región de cada pocillo receptor (21) y la sección
transversal de dicha segunda región de dicho pocillo receptor (21),
dicho pocillo receptor (21) tiene la transición desde dicha primera
región hasta dicha segunda región en un punto situado en o por
debajo de la ubicación de cada dicha membrana (30) del pocillo de la
placa filtrante cuando cada uno de dichos pocillos (20) de la placa
filtrante está en relación encajada con un correspondiente pocillo
(21) de la placa receptora, y dicha primera región tiene una sección
transversal sustancialmente cuadrada y dicha segunda región tiene
una sección transversal sustancialmente circular.
2. Un dispositivo de pocillos múltiples según se
reivindica en la reivindicación 1, teniendo dicha placa receptora un
chaflán (35) formado a lo largo de la periferia de dicho conjunto de
pocillos receptores (21).
3. El dispositivo de pocillos múltiples de la
reivindicación 1, en el cual cada una de dichas membranas (30) tiene
un área eficaz para efectuar el filtrado y en el cual la segunda
región de cada uno de dichos pocillos receptores (21) está
configurada de manera que el fluido pueda ser transferido sin
obstrucciones desde dicho área de cada una de dichas membranas (30)
hasta cada una de dichas segundas regiones.
4. El dispositivo de pocillos múltiples de la
reivindicación 1, en el cual dicho diámetro de dicha primera región
es suficiente para crear una separación entre la pared de un pocillo
filtrante (20) encajado y la pared de un correspondiente pocillo
receptor (21).
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US132996 | 2002-04-25 | ||
| US11/132,996 US8968679B2 (en) | 2005-05-19 | 2005-05-19 | Receiver plate with multiple cross-sections |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| ES2317457T3 true ES2317457T3 (es) | 2009-04-16 |
Family
ID=36778093
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| ES06252562T Active ES2317457T3 (es) | 2005-05-19 | 2006-05-17 | Placa receptora con multiples secciones transversales. |
Country Status (9)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US8968679B2 (es) |
| EP (1) | EP1724019B1 (es) |
| JP (2) | JP4642694B2 (es) |
| KR (1) | KR100778325B1 (es) |
| CN (1) | CN1932513B (es) |
| AT (1) | ATE415201T1 (es) |
| DE (1) | DE602006003805D1 (es) |
| ES (1) | ES2317457T3 (es) |
| SG (1) | SG127798A1 (es) |
Families Citing this family (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US8968679B2 (en) | 2005-05-19 | 2015-03-03 | Emd Millipore Corporation | Receiver plate with multiple cross-sections |
| US20060286003A1 (en) * | 2005-06-16 | 2006-12-21 | Desilets Kenneth G | Multi-well filter plate with shifted wells and U-bottom receiver plate |
| US20110218124A1 (en) * | 2010-03-05 | 2011-09-08 | Indermuhle Pierre F | Assemblies for multiplex binding assays |
| KR101081475B1 (ko) | 2010-03-18 | 2011-11-08 | 주식회사 새한마이크로텍 | 체외 조직배양 생장장치 |
| USD735881S1 (en) | 2012-10-22 | 2015-08-04 | Qiagen Gaithersburg, Inc. | Tube strip holder for automated processing systems |
| US9180461B2 (en) | 2012-10-22 | 2015-11-10 | Qiagen Gaithersburg, Inc. | Condensation-reducing incubation cover |
| EP2933327A4 (en) * | 2012-12-12 | 2016-08-03 | Hitachi Chemical Co Ltd | CANCER CELL ISOLATION DEVICE AND METHOD FOR CANCER CELL INSULATION |
| JP5768174B1 (ja) | 2014-06-24 | 2015-08-26 | 日本写真印刷株式会社 | 培養容器 |
| JP2017085899A (ja) * | 2015-11-02 | 2017-05-25 | シンフォニアテクノロジー株式会社 | 培養容器搬送装置 |
| WO2017082195A1 (ja) * | 2015-11-13 | 2017-05-18 | コニカミノルタ株式会社 | カートリッジ |
| US10192144B2 (en) * | 2016-04-14 | 2019-01-29 | Research International, Inc. | Coupon reader |
| GB2560161A (en) * | 2017-02-24 | 2018-09-05 | Stratec Biomedical Ag | Multi-well plate accessory |
Family Cites Families (15)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4902481A (en) * | 1987-12-11 | 1990-02-20 | Millipore Corporation | Multi-well filtration test apparatus |
| FI87278C (fi) * | 1989-08-28 | 1992-12-10 | Labsystems Oy | Kyvettmatris och staellning foer denna |
| US5141718A (en) | 1990-10-30 | 1992-08-25 | Millipore Corporation | Test plate apparatus |
| US5650323A (en) * | 1991-06-26 | 1997-07-22 | Costar Corporation | System for growing and manipulating tissue cultures using 96-well format equipment |
| US5205989A (en) | 1991-09-18 | 1993-04-27 | Minnesota Mining And Manufacturing Company | Multi-well filtration apparatus |
| US5342581A (en) * | 1993-04-19 | 1994-08-30 | Sanadi Ashok R | Apparatus for preventing cross-contamination of multi-well test plates |
| US6083761A (en) * | 1996-12-02 | 2000-07-04 | Glaxo Wellcome Inc. | Method and apparatus for transferring and combining reagents |
| US5972694A (en) | 1997-02-11 | 1999-10-26 | Mathus; Gregory | Multi-well plate |
| US6159368A (en) | 1998-10-29 | 2000-12-12 | The Perkin-Elmer Corporation | Multi-well microfiltration apparatus |
| DE10041825A1 (de) * | 2000-08-25 | 2002-03-07 | Invitek Gmbh | Multiwell Filtrationsplatte und Verfahren zu ihrer Herstellung |
| US6939709B2 (en) | 2002-08-30 | 2005-09-06 | Becton, Dickinson And Company | Multi-well device |
| WO2004078352A2 (en) | 2003-03-05 | 2004-09-16 | Amersham Biosciences (Sv) Corp | Microtiter plate for holding small volumes of liquids |
| US8753588B2 (en) | 2003-10-15 | 2014-06-17 | Emd Millipore Corporation | Support and stand-off ribs for underdrain for multi-well device |
| JP2006231166A (ja) | 2005-02-23 | 2006-09-07 | Fukae Kasei Kk | 液体試料の処理用器具及びその使用方法 |
| US8968679B2 (en) * | 2005-05-19 | 2015-03-03 | Emd Millipore Corporation | Receiver plate with multiple cross-sections |
-
2005
- 2005-05-19 US US11/132,996 patent/US8968679B2/en active Active
-
2006
- 2006-05-03 SG SG200602946A patent/SG127798A1/en unknown
- 2006-05-11 KR KR1020060042444A patent/KR100778325B1/ko active IP Right Grant
- 2006-05-16 JP JP2006136441A patent/JP4642694B2/ja active Active
- 2006-05-17 DE DE602006003805T patent/DE602006003805D1/de active Active
- 2006-05-17 AT AT06252562T patent/ATE415201T1/de not_active IP Right Cessation
- 2006-05-17 ES ES06252562T patent/ES2317457T3/es active Active
- 2006-05-17 EP EP06252562A patent/EP1724019B1/en active Active
- 2006-05-18 CN CN2006100847649A patent/CN1932513B/zh active Active
-
2009
- 2009-08-28 JP JP2009198093A patent/JP5222252B2/ja active Active
-
2014
- 2014-10-15 US US14/514,853 patent/US9138742B2/en active Active
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP1724019A1 (en) | 2006-11-22 |
| JP2006320323A (ja) | 2006-11-30 |
| CN1932513B (zh) | 2012-05-16 |
| EP1724019B1 (en) | 2008-11-26 |
| DE602006003805D1 (de) | 2009-01-08 |
| US20150064081A1 (en) | 2015-03-05 |
| KR20060120421A (ko) | 2006-11-27 |
| US20060263875A1 (en) | 2006-11-23 |
| JP5222252B2 (ja) | 2013-06-26 |
| KR100778325B1 (ko) | 2007-11-22 |
| US8968679B2 (en) | 2015-03-03 |
| JP2010002424A (ja) | 2010-01-07 |
| CN1932513A (zh) | 2007-03-21 |
| JP4642694B2 (ja) | 2011-03-02 |
| ATE415201T1 (de) | 2008-12-15 |
| US9138742B2 (en) | 2015-09-22 |
| SG127798A1 (en) | 2006-12-29 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| ES2317457T3 (es) | Placa receptora con multiples secciones transversales. | |
| ES2314309T3 (es) | Colector de vacio multifuncional. | |
| ES2837748T3 (es) | Sistema de múltiples cámaras de contención de tejido para diagnóstico molecular e histológico | |
| US10118177B2 (en) | Single column microplate system and carrier for analysis of biological samples | |
| ES2416060T3 (es) | Carga automática de tubos de ensayo para analizadores clínicos | |
| EP0800571B1 (en) | Biological analysis device having improved contamination prevention | |
| ES2259085T3 (es) | Aparato de ensayo multipocillo. | |
| US5972694A (en) | Multi-well plate | |
| ES2409655T3 (es) | Orificios de acceso para alimentar una placa de filtración de múltiples pocillos | |
| US20030215940A1 (en) | Multi-well assembly for growing cultures in-vitro | |
| JP4467271B2 (ja) | マルチウェル装置 | |
| US20180104687A1 (en) | Fluid loading into a microfluidic device | |
| ES2370165T3 (es) | Bandeja con protuberancias. | |
| US7704325B2 (en) | Crystal forming apparatus and method for using same | |
| JP4794582B2 (ja) | 多機能真空マニフォールド | |
| CN213779667U (zh) | 一种胃部疾病组织芯片、染色组织芯片及蜡块 | |
| WO2023086372A9 (en) | Wellplate apparatus and method for filling same | |
| ES2354965T3 (es) | Eje de posicionamiento para aparato de ensayo multipocillo. |