ES2314309T3 - Colector de vacio multifuncional. - Google Patents
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Abstract
Un montaje de colector que comprende: una base (12) que soporta al menos un primer dispositivo (20) de tratamiento de muestras tal como la base (12) y el al menos un primer dispositivo (20) de tratamiento de muestras que completa un montaje apilado sólido; y un collar (14) en aplicación de obturación con dicha base (12) y con dicho al menos un primer dispositivo (20) de tratamiento de muestras, teniendo dicho collar (14) paredes laterales sustancialmente verticales (14B-E); en el que dicha base (12) y dicho collar (14) están dimensionados y configurados juntos para que contengan dicho al menos un primer dispositivo (20) de tratamiento de muestras; en el que se crea una primera obturación con una empaquetadura (5; 5'') posicionada en una ranura (6) en dicha base (12) y proporcionada entre dicho collar (14) y dicha base (12); en el que se proporciona una segunda obturación (75; 55; 55'') entre dicho al menos un primer dispositivo (20) de tratamiento de muestras y dicho collar (14); y en el que dicha base (12) o dicho collar (14) comprende un orificio (13) para la comunicación con una fuente de vacío; caracterizado porque dicha empaquetadura (5; 5'') incluye una porción limpiadora (51) que se extiende por encima de la ranura (6) y dentro de un rebaje (6'') formado en una falda (15) de dicho collar (14) y obtura a lo largo de las paredes laterales verticales (14B-E) de dicho collar (14), en donde la altura de la porción limpiadora (51) permite alguna variabilidad en el posicionamiento del collar (14) y la base (12) sin sacrificar la integridad de la obturación.
Description
Colector de vacío multifuncional.
Las placas de ensayo para análisis químicos o
bioquímicos, que contienen una pluralidad de pozos o cámaras de
reacción individuales, son herramientas de laboratorio bien
conocidas. Tales dispositivos han sido empleados para una extensa
diversidad de propósitos y ensayos, y se ilustran en las Patentes de
EE.UU. Núms. 4.734.192 y 5.009.780, por ejemplo. Filtros de
membranas microporosas y dispositivos de filtración que contienen
estas han sido particularmente útiles en muchas de las técnicas y
ensayos de cultivo de tejidos y células desarrollados
recientemente, especialmente en los campos de bacteriología e
inmunología. Las placas multipozo, usadas en los ensayos, utilizan
a menudo un vacío aplicado a la cara inferior de la membrana pues la
fuerza de accionamiento genera una circulación de fluido a través
de la membrana.
La microplaca ha sido usada como un formato
adecuado para tratamientos de la placa tales como mediante pipetado,
lavado, agitación, detección, almacenamiento, etc. Una diversidad
de ensayos ha sido formateada satisfactoriamente usando placas de
filtro multipozo con el vacío activado a través de estas. Las
aplicaciones se extienden desde ensayos Basados en Células, hasta
la preparación de muestras genómicas y proteómicas para ensayos de
inmunidad.
Un ejemplo de un procedimiento de muestra de la
digestión de proteínas puede incluir las operaciones siguientes:
1. Depositar la muestra de proteína en los pozos
con las enzimas de la digestión.
2. Enlazar o capturar la proteína digerida en o
sobre la estructura de filtro.
3. Una serie de lavados de las muestras en los
que las soluciones son transferidas para desecho mediante vacío.
4. Eluir el disolvente para recuperar la muestra
concentrada.
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Otra aplicación de la placa de filtro usada para
un Lavado de Reacción de Secuenciación Genómica puede incluir las
siguientes operaciones:
1. Depositar la muestra dentro de los pozos y
concentrar el producto sobre la superficie de la membrana mediante
filtración en vacío para obtener un residuo.
2. Una serie de lavados de la muestra en la que
las soluciones son transferidas al residuo mediante vacío. Repetida
y luego filtradas hasta que se sequen.
3. Resuspende la muestra sobre la membrana y
aspira fuera de la mezcla resuspendida desde la superficie de la
membrana.
\vskip1.000000\baselineskip
El lavado del residuo se efectúa fácilmente con
virtualmente cualquiera de los colectores convencionales
disponibles. Durante una operación de lavado, un volumen
relativamente grande (mayor que 50 \mul) de solución acuosa es
añadido a los pozos y arrastrado el residuo. La orientación de la
placa no es crítica cuando se añade un gran volumen de líquido,
siempre que la pipeta o el dispositivo de transferencia que se use
sea capaz de acceder a la abertura del pozo. No obstante, con el
ejemplo de Digestión de la Proteína, los volúmenes de elución son
relativamente pequeños (menos de 15 \mul) y pueden ser tan
pequeños como de alrededor de 1 \mul. Este pequeño volumen
necesita ser depositado directamente sobre la estructura de filtro
en el pozo para garantizar que el disolvente es arrastrado a través
de la estructura para terminar la elución de la muestra. Con el otro
ejemplo, al final de la Limpieza de la Reacción de Secuenciación,
la muestra concentrada está comprendida entre 10 y 20 \mul y debe
ser aspirada fuera de la membrana sin dañar la superficie de la
membrana.
Muchos de estos y otros protocolos requieren la
adición de pequeños volúmenes de líquido exactos. Cuando se usan
placas de fondo de filtro el beneficio del comportamiento se
consigue a causa de la naturaleza acumulativa del filtro. Para
conseguir la circulación a través del filtro se aplica una presión
diferencial. Cuando se usa un equipo automático, la filtración al
vacío es el método preferido debido a su conveniencia y seguridad.
Para filtrar mediante el vacío, muchos fabricantes proporcionan un
colector de vacío para sus productos y equipo. Todavía, la
transferencia de líquido segura no es posible sobre el puente de un
manipulador de líquidos convencional, porque la posición de la
placa en le dirección Z puede variar durante la utilización.
Ciertamente, la totalidad de los colectores estándar disponibles
hoy día usan un material de relleno compresible para obturar la
placa de filtro, y durante la evacuación de la cámara de vacío en el
colector, la placa se mueve a medida que el material de obturación
se comprime La cantidad de movimiento de la placa varía, dependiendo
en parte de la durometría del material de relleno usado y de la
presión de vacío que es aplicada. La cantidad de movimiento es
demasiado grande o variable para permitir la programación de un
robot de manipulación del líquido que tenga en cuenta el
movimiento, haciendo la transferencia automatizada reproducible
satisfactoria, difícil o imposible. Problemas similares surgen con
la limpieza de la Secuencia en la que el pequeño volumen es aspirado
de la superficie de la membrana. Si la posición de la membrana
varía entonces no es posible programar el equipo automatizado para
que aspire de la superficie de la membrana sin dañar potencialmente
la superficie de la membrana.
Adicionalmente, para garantizar una
transferencia cuantitativa de filtrado desde una placa de filtro del
pozo 384 dentro de una placa de recogida, las bocas deben estar tan
cerca de las aberturas de placa de recogida como sea posible. Los
colectores disponibles tienen una empaquetadura de material de
obturación en la cara inferior de la placa de filtro, y por tanto
el único modo de usar estos colectores para conseguir una
transferencia de calidad es hacer que las bocas de descarga se
extiendan debajo de la brida de placa y dentro de los pozos de la
placa de recogida. No obstante, en ese tipo de diseño, las bocas de
descarga están expuestas a ser dañadas y/o contaminadas.
WO 01/06003 A2 describe un montaje de colector
de vacío con una placa de base plana y una cubierta colocada sobre
la placa de base con una disposición de material de obturación
periférico dispuesto entre superficies enfrentadas de la placa de
base y la cubierta. La placa de base tiene un puerto para evacuar el
volumen interno del montaje. Una placa multipozo está colocada en
el volumen interno del montaje cobre la placa de base y obturada
contra la superficie interior de la cubierta por medio de una
empaquetadura periférica más.
US-B-6451261
describe un aparato de microfiltración multipozo con una estructura
similar. Para obturar una base con un collar dimensionado y
configurado para que contenga dispositivos de tratamiento de muestra
apilados plurales se coloca una empaquetadura de obturación
periférica entre superficies enfrentadas de la base y el collar.
Un objeto de la presente invención es
proporcionar un montaje de colector de vacío que se adapta
fácilmente a los protocolos de automatización.
Otro objeto de la presente invención es
proporcionar un montaje de colector de vacío que fija la posición
de un dispositivo de tratamiento de muestras, tal como una placa
multipozo.
Un objeto más de la presente invención es
proporcionar un montaje de colector de vacío con características
que permiten la transferencia de filtrado cuantitativa a un pozo de
recogida cuando se usa con placas multipozo con densas ordenaciones
de pozos.
Otro objeto de la presente invención es
proporcionar un montaje de colector de vacío que permite la
transferencia directa sobre un dispositivo analítico tal como un
objetivo de MALDI.
Otro objeto de la presente invención es todavía
proporcionar un montaje de colector de vacío que es modular y
adaptable a una diversidad de aplicaciones.
Según la presente invención se proporciona un
montaje de colector como se define en la reivindicación 1. Las
realizaciones preferidas se definen en las reivindicaciones
subordinadas.
Los problemas de la técnica anterior han sido
superados por la presente invención, que proporciona un diseño de
dispositivo de laboratorio particularmente para un formato de placa
multipozo que incluye un colector en el que la posición de la placa
no es una función de la compresión de la empaquetadura o del régimen
de vacío aplicado. El diseño puede ser usado también con un
dispositivo de pozo único, particularmente cuando se aplica al
tratamiento de un líquido de pequeño volumen. En una realización de
la presente invención, el dispositivo tiene un diseño modular, en
el que pueden ser posicionadas inserciones desmontables con
diferentes funcionalidades entre un componente de base y un
componente de collar. Las inserciones particulares escogidas
dependen de la preparación de la muestra deseada o del ensayo que
se ha de efectuar. Las inserciones están apiladas y están
posicionadas entre la base y el collar como una unidad, por tanto la
variación en altura de la pila dentro del colector es como una
unidad y es constante; es decir, no hay movimiento relativo de una
inserción con respecto a otra inserción, incluso tras la evacuación
de la cámara de vacío. Por lo tanto, los manipuladores de líquido
automatizados pueden ser programados para posicionar la punta de la
pipeta en estrecha proximidad con el fondo de pozo o la superficie
de filtro para la aspiración o dispensación del pequeño volumen.
La Figura 1 es una vista en despiece ordenado de
un montaje de colector de acuerdo con una realización de la
presente invención;
la Figura 2 es una vista en perspectiva del
montaje de colector mostrado en una condición ensamblada;
la Figura 3 es una vista en despiece ordenado de
un montaje de colector de acuerdo con una realización alternativa
de la presente invención;
las Figuras 4A y 4B son vistas en despiece
ordenado de un montaje de colector de acuerdo con otra realización
de la presente invención;
la Figura 5 es una vista en despiece ordenado de
una placa multipozo obturada con la parte superior del montaje de
colector de acuerdo con una realización de la presente invención que
no está cubierta por las reivindicaciones pero describe un aspecto
de una realización de la invención;
la Figura 6 es una vista en perspectiva del
montaje de la Figura 5 que no está cubierta por las reivindicaciones
pero describe un aspecto de una realización de la invención;
la Figura 7 es una vista en sección transversal
del montaje de colector con una empaquetadura inferior de acuerdo
con una realización de la presente invención;
la Figura 8 es una vista en sección transversal
del detalle A de la Figura 7;
la Figura 9 es una vista en sección transversal
del montaje de colector con una empaquetadura común unitaria usada
para obturación que no está cubierta por las reivindicaciones pero
describe un aspecto de una realización de la invención;
la Figura 10 es una vista en sección transversal
del montaje de colector con una empaquetadura flexible unitaria
usada para obturación que no está cubierta por las reivindicaciones
pero describe un aspecto de una realización de la invención;
la Figura 11 es una vista en sección transversal
del montaje de colector para tres placas;
la Figura 12 es una vista en sección transversal
del montaje de colector que utiliza una placa de filtro de pozo
profunda y una placa de recogida regular; y
la Figura 13 es una vista en sección transversal
del montaje de colector que utiliza una placa de filtro de pozo
profunda y una placa de recogida;
la Figura 14 es una vista en despiece ordenado
de un montaje de colector de acuerdo con otra realización de la
presente invención.
Hay dos componentes comunes en el montaje de
colector de vacío de acuerdo con la presente invención,
independientemente de la aplicación. Con referencia a la Figura 1,
los componentes comunes son una base 12 y un collar 14,
dimensionados y configurados juntos para que contengan los
componentes de tratamiento de la muestra. La base 12 incluye
opcionalmente un orificio 13 para la comunicación con una fuerza de
accionamiento, tal como una fuente de vacío, preferiblemente una
bomba de vacío. Alternativamente, el orificio 13 puede estar situado
en una pared del collar como se muestra en la Figura 14. La base 12
incluye también un fondo 12A y una o más paredes laterales que se
extienden erectas desde este. En la realización rectangular
mostrada, hay cuatro paredes verticales de conexión, es decir, las
paredes laterales opuestas 12B y 12C, y las paredes laterales
opuestas 12D y 12E. La base incluye un brida periférica exterior 4
que en combinación con una porción periférica interior de las
paredes laterales forma una ranura periférica 6 (Figura 8) que
recibe la empaquetadura 5. Preferiblemente la empaquetadura 5 tiene
una porción periférica inferior 5A que asienta en la ranura 6 y una
porción 5B periférica superior que se extiende por encima de la
ranura 6. La porción superior 5B está inclinada hacia fuera de modo
que cuando la porción inferior 5A de la empaquetadura está en su
lugar en la ranura 6, la porción superior 5B está alineada o
sustancialmente alineada con la superficie exterior de las paredes
laterales 12B, 12C, 12D y 12E. La empaquetadura 5 crea por tanto
una obturación entre la base 12 y el componente en contacto con la
empaquetadura 5, tal como el collar 14, como se expone con mayor
detalle más adelante. Opcionalmente, y como se muestra en la Figura
1, una puede tener uno o más salientes 17 de alineación que se
extienden erectos desde la base, preferiblemente en una o más de
las intersecciones de las paredes laterales adyacentes. El uno o
más salientes 17 se usan para ayudar a posicionar las unidades de
tratamiento de muestras (placas de filtro, soportes de blancos de
MALDI, placas de recogida, espaciadores y/o inserciones, que se
describen más adelante con mayor detalle) dentro de la base 12 y
para alinear el collar 14 con la base 12. Otras configuraciones
están dentro del alcance de la invención, siempre que sea cree una
obturación.
En la realización mostrada, el collar 14 tiene
también cuatro paredes laterales, es decir, las paredes opuestas
14B, 14C y las paredes opuestas 14D, 14E. Las paredes laterales
deben extenderse hacia abajo (y/o las paredes laterales de la base
12 deben extenderse hacia arriba) una distancia suficiente para
acomodar los componentes que están posicionados entre el collar 14
y la base 12. La longitud vertical de estas paredes laterales (y/o
de las paredes laterales) por tanto puede variar dependiendo de la
aplicación. Una falda 15 está formada preferiblemente a lo largo de
la periferia del fondo de las paredes laterales de modo que la falda
15 está posicionada sobre la porción periférica 4 de la base 12 en
relación de obturación cuando está en la condición ensamblada, como
se ve en la Figura 2. Una empaquetadura 75 está fijada a la
superficie superior interior del collar 14 alrededor de la abertura
superior y está destinada a obturar contra la superficie superior de
un componente dispuesto contra el collar, como se examinará con
mayor detalle más adelante. La empaquetadura 75 incluye
preferiblemente, una ranura 77 periférica que hace juego con un
nervio periférico 79 en el colar 14, mostrado en la Figura 7. Una
pluralidad de escalones rectangulares 74 pueden proporcionarse
también en la empaquetadura 75, mostrados en la Figura 2, para que
casen con las inserciones 37 de soporte mostradas en la Figura
5.
En vez de empaquetaduras separadas que obturen
el collar y la base, podría ser usada una empaquetadura única
unitaria 55 o la empaquetadura unitaria flexible 55', las cuales no
están cubiertas por las reivindicaciones y solamente representan el
concepto de una empaquetadura similar. Se muestran realizaciones de
estas en las Figuras 9 y 10.
Los expertos en la técnica entenderán también
que la invención no está limitada a cualquier dispositivo de
tratamiento de muestras particular; los dispositivos que permiten la
filtración, recogida, digestión de proteínas mediante enzimas,
operaciones de lavado, dilución de disolventes, MALDI TOF,
secuenciación, limpieza PCR, crecimiento de células, lisis de
células, captura de DNA o RNA, ensayo, etc., pueden ser usados en la
presente invención.
Los expertos en la técnica comprenderán que el
orificio para la fuerza de accionamiento tal como un orificio de
vacío podría estar en la base 12 como en la Figura 1 o en el collar
14 como en la Figura 14. Cuando se usa el vacío en el collar 14,
una base distinta y separada llega a ser un elemento opcional,
aunque preferido, de la invención.
La presente invención puede ser usada con una
diversidad de placas y otros componentes que se usan generalmente
en tales sistemas de placas. Estos incluyen pero no se limitan a
placas de filtro microporosas, placas de filtro de ultrafiltración,
placas cromatográficas (ya sea conteniendo una cromatografía media o
teniendo una estructura monolítica que contiene ese medio fundido
en el lugar en una porción de la placa), placas cosechadas de
células, placas de crecimiento de células tales como placas de
crecimiento de células Caco 2, placas de lisis de células, placas
de captura de DNA o RNA o plásmidos, placas de recogida con pozos
único o múltiples, bandejas de objetivos MALDI y/o blancos MALDI y
similares.
Si se desea puede ser usada una placa única con
el presente colector, ya sea dentro del collar o sobre el collar
(como se explica con mayor detalle más adelante). Generalmente,
pueden usarse dos o más placas juntas apilándolas en la disposición
correcta de modo que una placa de filtro microporosa esté encima de
una placa de filtración de ultrafiltro que está encima de la placa
de recogida, una placa filtro microporosa esté encima de una placa
de recogida, una placa de filtración de ultrafiltro esté encima de
una placa de recogida, una placa de filtro esté encima de una placa
cromatográfica o de una placa de captura de plásmidos o de DNA o
RNA, o similares.
Adicionalmente, los espaciadores pueden estar
colocados entre las placas o bajo la placa o placas si se desea o
se requiere por la aplicación en particular. Asimismo, las placas
directoras de la circulación, placas bajo drenaje separadas o
placas de descarga entre placas adyacentes o mechas tales como se
muestran en nuestra solicitud copendiente USSN09/565,963,
presentada el 20 de Mayo de 2.000, pueden ser usadas también en la
presente invención para dirigir la circulación de fluido de una
manera particular. Una diversidad de placas adaptadoras, placas
mitad o placas cuarta parte con diferentes configuraciones y/o
características pueden ser usadas también en la presente
invención.
Dependiendo de la aplicación, generalmente los
componentes de tratamiento de la muestra son partes moldeadas y son
compatibles con el disolvente. Los dispositivos de tratamiento de la
muestra incluyen dispositivos de pozo único y multipozo. Metales,
poliolefinas y nailon de relleno son materiales adecuados de
construcción. Componentes usados raramente pueden ser maquinados.
En la realización mostrada en las Figuras 1 y 7, los dispositivos
de tratamiento de la muestra posicionados entre la base 12 y el
collar 14 son una placa 20 de filtro y una placa 22 de recogida,
siendo fabricadas preferiblemente ambas de polietileno, y por tanto
la longitud de las paredes laterales del collar 14 (y/o las paredes
laterales de la base 12) es suficiente para acomodar estos
componentes cuando son ensamblados en la base 12. La placa 20 de
filtro y la placa 22 de recogida están configuradas para la
alineación y el apilamiento correctos como se sabe en la
técnica.
La placa 20 de filtro incluye una pluralidad de
pozos 21, dispuestos preferiblemente en una ordenación
bidimensional. Aunque se ilustra una ordenación de la placa de 96
pozos, los expertos en la técnica apreciarán que el número de pozos
no está limitado a 96; formatos estándar con 384, o más o menos,
pozos están dentro del alcance de la presente invención. Los pozos
son preferiblemente cilíndricos con paredes impermeables al fluido,
y tienen una anchura y una profundidad según el uso al que se
destinen y la cantidad de contenido que ha de ser muestreada. Los
pozos están preferiblemente interconectados y dispuestos en una
ordenación uniforme, con profundidades uniformes de modo que las
partes superiores y los fondos de los pozos son planos o
sustancialmente planos. Preferiblemente la ordenación de pozos
comprende filas paralelas de pozos y columnas paralelas de pozos, de
modo que cada pozo no situado sobre el perímetro exterior de la
placa está rodeado por otros ocho pozos. Preferiblemente la placa
20 es generalmente rectangular y está apilada encima de la placa 22
de recogida. La placa 20 de filtro puede ser de un diseño
convencional.
convencional.
Cada uno de los pozos 21 de la placa 20 de
filtros incluye una estructura de membrana o porosa (no mostrada)
obturada a, o posicionada en, el pozo. La obturación puede ser
efectuada mediante cualquier medio adecuado, incluyendo la
obturación por calor, la obturación con ultrasonidos, disolventes,
adhesivos, mediante enlace de difusión, compresión tal como
mediante un anillo o ahusado, etc. El tipo de membrana adecuada no
es particularmente limitado, y a modo de ejemplo puede incluir
nitrocelulosa, celulosa, acetato, policarbonato, polipropileno y
membranas microporosas de PVDF, o membranas de ultrafiltración tales
como las fabricadas de polisulfona, PVDF, celulosa o similares.
Adicionalmente, los materiales incluyen también, fibras de vidrio,
placas de vidrio, telas de vidrio, filtros profundos, no tejidos,
mezclas tejidas y similares o combinaciones de los mismos,
dependiendo de la aplicación, o de que la membrana pueda ser fundida
en el lugar como se describe en las Patentes de EE.UU. Núms.
6.048.457 y 6.200.474, cuyas descripciones se incorporan aquí
mediante su referencia. Una membrana única que cubra la totalidad
de los pozos podría ser usada, o cada pozo podría contener o estar
asociado con su propia membrana que podría ser la misma o diferente
de la membrana asociada con uno o más de los otros pozos. Cada uno
de tales soportes de membrana es preferiblemente coextensivo con el
fondo de su respectivo pozo.
Cada uno de los pozos 21 de la placa 20 de
filtro incluye también una salida, preferiblemente con la forma de
una boca que está situada centrada con respecto a dicho pozo 21 y
preferiblemente no se extiende debajo de la falda de placa.
La placa 22 de recogida preferiblemente es
también generalmente rectangular, e incluye una pluralidad de
aberturas 23. Cada abertura 23 corresponde a un pozo 21 de la placa
de filtración, de modo que cuando está en la condición ensamblada,
cada pozo 21 de la placa 20 de filtro está alineado con, y por tanto
en comunicación fluida con, una respectiva abertura 23 de la placa
22 de recogida. Cada abertura 23 termina en un fondo 25, que está
preferiblemente cerrado a menos que esté en una placa intermedia
con una placa de recogida debajo de esta o el propio colector actúa
como un sumidero o placa de recogida donde opcionalmente un
espaciador, tal como se muestra en la Figura 3, y se examina más
adelante, puede ser usado. La placa 22 de recogida puede ser de un
diseño convencional.
La placa 20 de filtros tiene una falda 27
periférica inferior que le permite estar apilada sobre la placa 22
de recogida. Cuando la placa 20 de filtros está apilada sobre la
placa 22 de recogida como en la Figura 1, la alineación correcta
está garantizada, de modo que cada una de las bocas de vertido está
posicionada directamente sobre, y en estrecha proximidad con, una
respectiva abertura 23 en la placa 22 de recogida. La proximidad y
la alineación de cada boca de vertido con una respectiva abertura
impide el enlace cruzado entre pozos vecinos. Las placas apiladas
están posicionadas dentro de la base 12 como una unidad integral. El
collar 14 está posicionado sobre las dos placas y asentado contra
la empaquetadura 5 de la brida de base, que obtura la base 12 con
el collar 14. Esto posiciona también la empaquetadura 75 de collar
sobre el borde perimetral superior de la placa 20 de filtro. Cuando
se aplica vacío al colector, el collar 14 es el solo componente que
se mueve. A medida que se aplica un vacío adicional, el vacío
origina que el collar 14 comprima ambas empaquetaduras. No
obstante, la placa 20 de filtro y la placa 21 de recogida permanecen
fijas en la posición cargada porque ellas constituyen un montaje
apilado sólido que incluye la base 12, la placa 21 de recogida y la
placa 20 de filtros que es independiente de y no está influenciada
por el movimiento relativo del collar 14. Por tanto, la altura de
la pila de la placa de filtro y la placa de recogida permanece
constante. Una rutina manipuladora puede ser programada para
dispensar sobre la membrana en la placa 20 de filtro,
independientemente de si el montaje está sometido al vacío, puesto
que la altura de la pila no es modificada mediante la aplicación
del vacío. El montaje, por lo tanto, puede ser fácilmente adaptado a
los protocolos de automatización y permite la transferencia de
filtrado cuantitativa.
De modo similar, cuando se usa una realización
alternativa de una obturación tal como la mostrada en las Figura 9
y 10 se produce una acción de obturación similar en la que el collar
14 mueve para comprimir la empaquetadura. La altura de la placa o
placas permanece la misma con, o sin, la aplicación del vacío.
Puesto que el diseño de colector de la presente
invención es modular, diferentes componentes pueden ser posicionados
entre la base y el collar (como se ha mencionado anteriormente),
permitiendo la ejecución de una diversidad de aplicaciones. En una
realización, (Figura 3) en la que la aplicación requiere una placa
20 de filtro, pero no requiere una placa 22 de recogida, un
espaciador o soporte desmontable 80 puede sustituir a la placa de
recogida manteniendo de ese modo la altura (Figura 3) de la pila de
unidades. El espaciador o soporte desmontable 80 posicionan la
placa 20 de filtros con la orientación de los ejes x e y correcta de
modo que las rutinas robóticas pueden suministrar muestras de los
pozos 21 de la placa 20 de filtros. Estos posicionan también la
placa 20 de filtros a la altura de la pila correcta de modo que el
collar 14 puede obturar a la base 12 y la placa 20 simultáneamente
tras la aplicación de vacío. En consecuencia, preferiblemente el
espaciador o soporte 80 está dimensionado de modo similar a la
placa 20 de recogida, como se muestra. En la realización mostrada,
el espaciador o soporte 80 incluye un refuerzo central 81
(posicionado de modo que no interfiere el funcionamiento de la
placa de filtro) para facilitar el soporte de la placa 20 de
filtro.
La empaquetadura 75 de obturación superior sobre
el collar 14 puede ser usada para crear una obturación cuando se
desee para ejecutar un procedimiento de lavado rápido colocando la
placa de filtro encima del collar 14 en vez de dentro del montaje
de colector. Ciertamente, esta empaquetadura puede aceptar una
diversidad de estructuras de soporte para ser usada con
aplicaciones únicas, tales como una rejilla de soporte de "Drenaje
Inferior" "MULTISCREEN®" disponible comercialmente de la
"Milipore Corporation".
Las Figuras 7 y 8 ilustran una realización de
una empaquetadura 5' de fondo. En esta realización, En esta
realización la empaquetadura 5' está posicionada en la ranura 6 en
la base 12 como se ve mejor en la Figura 8. Esta incluye una
porción limpiadora 51 que se extiende por encima de la ranura 6 y
dentro del rebaje 6' formado en la falda 15 del collar 14 como se
muestra. La altura de la porción limpiadora 51 y su posición en el
rebaje 6' permite alguna variabilidad en el posicionamiento del
collar 14 y la base 12 (y por tanto variabilidad en la altura de la
pila de los componentes contenidos entre el collar y la base) sin
sacrificar la integridad de la obturación.
Las Figuras 4A y 4B ilustran una realización más
del colector de la presente invención. Esta realización es útil
para la transferencia directa del eluyente desde la placa 20 de
filtro a uno o más objetivos MALDI. Concretamente, la preparación
de muestras anterior al análisis mediante la Espectrometría de Masas
MALDI-TOF implica a menudo la desalación y
concentración de muestras (por ejemplo péptidos). La preparación
simultánea y el análisis de múltiples muestras son convenientes a
menudo, y pueden ser realizados usando el montaje de colector de la
presente invención. Consecuentemente, en vez de la placa 21 de
recogida de la realización de la Figura 1, o la bandeja de soporte
de la realización de la Figura 3, se usa una bandeja objetivo 40. El
diseño de la bandeja objetivo 40 no está particularmente limitado,
y dependerá de la configuración del objetivo u objetivos escogidos.
La bandeja 40 puede mantener uno o más objetivos. Por ejemplo, en la
realización de la Figura 4A, se usan cuatro objetivos MALDI 41
disponibles de la "Applera Corporation". Alternativamente, como
se muestra en la Figura 4B, puede ser usado un objetivo único 41'
tal como un objetivo MALDI comercialmente disponible de Bruker
Daltonics. La bandeja objetivo 40 está posicionada bajo las bocas de
cada pozo en la placa 20 de relleno, con la altura de pila correcta
permitiendo que el collar 14 asiente contra la base 12 como
anteriormente. Como en las realizaciones de las Figuras 1 y 3, la
aplicación de vacío (por ejemplo, la transición de la presión
atmosférica a una presión diferente) no origina movimiento alguno
del eje z del componente operativo, que en este caso es la placa de
filtro apilada encima de los objetivo(s) MALDI.
En cada una de estas realizaciones, la altura de
la pila es crítica para la obturación del conjunto. Si fuera usada
una placa de filtro de pozo profundo, por ejemplo, un collar 14 y/o
una base 12 más altos, sobre una extensión con empaquetaduras de
obturación adicionales situadas apropiadamente, podrían ser usados,
para asegurar la obturación entre la parte superior de la placa y
la brida sobre la base 12. La Figura 12 muestra el uso de una placa
20B de filtro de pozo profundo con una placa 22 de recogida de
profundidad regular en la cual la placa está destinada a encajar
dentro de la abertura del collar 14 de modo que no se necesitan un
collar y/o una base más largos. La Figura 13 muestra un sistema que
usa una placa 20B de filtros de pozo profundos y una placa 22B de
recogida de pozo profundo. En esta realización, el collar 14B ha
sido hecho más alto para proporcionar la altura exacta exigida por
las placas deseadas usadas.
Los componentes de la unidad apilada (por
ejemplo, la placa 20 de filtros y la placa 22 de recogida, o la
placa 20 de filtros, 41 de objetivos y la bandeja 40 de objetivos)
no se mueven independientemente unos de otros, puesto que están en
relación de apilamiento sobre la base 12 y cualquier movimiento está
limitado por el collar 14. Como un resultado, sus posiciones
relativas permanecen constantes independientemente de si el montaje
está sometido al vacío, permitiendo de ese modo que un manipulador
de líquidos sea programado para dispensar a la unidad, por
ejemplo.
Las Figuras 5 y 6 ilustran la versatilidad del
montaje de colector de la presente invención. En esta realización,
el collar 14 está colocado en relación de obturación con la base 12,
y un dispositivo de preparación de muestras tal como una placa 20
multipozo está colocado sobre la superficie superior del collar 14.
Una rejilla 37 opcional puede estar posicionada bajo la placa 20
para ayudar a soportar la placa 20. La placa 20 obtura contra la
empaquetadura superior posicionada en el collar 14.
Consecuentemente, puede ser usado el vacío como la fuerza de
accionamiento para filtrar muestras a través de la placa 20. Esto
proporciona un procedimiento de lavado rápido sin tener que colocar
la placa de filtros dentro del colector. La empaquetadura superior
puede aceptar una amplia variedad de estructuras de soporte para
ser usada con aplicaciones únicas, tales como una estructura de
nervios de placa 384 SEQ para la eliminación de caídas y una rejilla
de soporte bajo drenaje Multiscreen®, ambas disponibles
comercialmente de la "Millipore Corporation".
Puesto que el diseño modular del montaje de
colector permite diversas aplicaciones, los componentes de la
presente invención pueden ser vendidos como un juego de piezas. Por
ejemplo, se pueden proporcionar diversos collares de diferentes
tamaños en el juego de piezas para adaptarse a dispositivos de
tratamiento de muestras que tengan diferentes alturas de
apilamiento, como ocurre donde se usan placas de filtración de pozo
profundas. De modo similar, se pueden proporcionar numerosos
dispositivos de tratamiento de muestras diferentes en el juego de
piezas, incluyendo placas de filtración con membranas de diferente
funcionalidad, placas de recogida, objetivos de MALDI TOF, rejillas
de soporte, drenajes inferiores, inserciones de lavado, etc.
Claims (11)
1. Un montaje de colector que comprende:
una base (12) que soporta al menos un primer
dispositivo (20) de tratamiento de muestras tal como la base (12) y
el al menos un primer dispositivo (20) de tratamiento de muestras
que completa un montaje apilado sólido; y
un collar (14) en aplicación de obturación con
dicha base (12) y con dicho al menos un primer dispositivo (20) de
tratamiento de muestras, teniendo dicho collar (14) paredes
laterales sustancialmente verticales (14B-E);
en el que dicha base (12) y dicho collar (14)
están dimensionados y configurados juntos para que contengan dicho
al menos un primer dispositivo (20) de tratamiento de muestras;
en el que se crea una primera obturación con una
empaquetadura (5; 5') posicionada en una ranura (6) en dicha base
(12) y proporcionada entre dicho collar (14) y dicha base (12);
en el que se proporciona una segunda obturación
(75; 55; 55') entre dicho al menos un primer dispositivo (20) de
tratamiento de muestras y dicho collar (14); y
en el que dicha base (12) o dicho collar (14)
comprende un orificio (13) para la comunicación con una fuente de
vacío;
caracterizado porque
dicha empaquetadura (5; 5') incluye una porción
limpiadora (51) que se extiende por encima de la ranura (6) y
dentro de un rebaje (6') formado en una falda (15) de dicho collar
(14) y obtura a lo largo de las paredes laterales verticales
(14B-E) de dicho collar (14), en donde la altura de
la porción limpiadora (51) permite alguna variabilidad en el
posicionamiento del collar (14) y la base (12) sin sacrificar la
integridad de la obturación.
2. El montaje de colector de la reivindicación
1, que comprende además:
al menos un segundo ejemplo de dispositivo de
tratamiento (20; 22; 40; 41; 41'; 80) apilado debajo de dicho
primer dispositivo o dispositivos (20) de tratamiento de muestras
para completar dicho montaje apilado integral sólido.
3. El montaje de colector de la reivindicación
2, en el que el movimiento relativo de dicho primer y segundo
dispositivos de tratamiento de muestras no es afectado por la
aplicación de vacío a dicho montaje de colector.
4. El montaje de colector de las
reivindicaciones 2 ó 3, en el que el primer y el segundo
dispositivos de tratamiento de muestras son seleccionados de un
grupo que comprende placas de filtro, dispositivos de filtración
multipozo, placas de cromatografía, placas de captura de DNA, placas
de captura de RNA, placas de captura de plásmidos, espaciadores,
placas de soporte, directores de la circulación, bandejas de
objetivos MALDI, objetivos MALDI, placas de recogida y
combinaciones de los mismos.
5. El montaje de colector de una cualquiera de
las reivindicaciones 1 a 4, en el que el primer dispositivo de
tratamiento de muestras es una placa (20) de filtración
multipozo.
6. El montaje de colector de la reivindicación 5
cuando está combinado con la reivindicación 2, en el que el segundo
dispositivo de tratamiento de muestras es una placa (22) de recogida
o un soporte (37; 80) desmontable.
7. El montaje de colector de una cualquiera de
las reivindicaciones 1 a 4, en el que el primer dispositivo de
tratamiento de muestras es una placa de filtro y el filtro es
seleccionado de un grupo que comprende fibras de vidrio, rejillas
de vidrio, tejidos de vidrio, filtros de profundidad, géneros no
tejidos, mallas tejidas, y membranas microporosas y de
ultrafiltración.
8. El montaje de colector de la reivindicación 4
o de la reivindicación 7 cuando están combinadas con la
reivindicación 2, en el que el segundo dispositivo de tratamiento
de la muestra es un filtro y el filtro es seleccionado del grupo
compuesto de membranas microporosas y de ultrafiltración.
9. El montaje de colector de una cualquiera de
las reivindicaciones 1 a 8, en el que dicha segunda obturación es
una empaquetadura (75).
10. El montaje de colector de una cualquiera de
las reivindicaciones 1 a 9, en el que dicha primera obturación
permite la variabilidad en la altura de dicho dispositivo o
dispositivos de tratamiento de muestras apiladas.
11. Un método de aplicación de vacío a un
montaje de colector como se define en una cualquiera de las
reivindicaciones 1 a 10, que comprende:
proporcionar una fuente de vacío;
conectar dicha fuente de vacío al orificio (13)
de dicho montaje de colector;
posicionar dicho dispositivo o dispositivos de
tratamiento de muestras entre dicha base (12) y dicho collar
(14)
posicionar dicho collar (14) sobre dicha base
(12); y
aplicar un vacío a dicho montaje de colector con
dicha fuente de vacío, de modo que dicho collar (14) es forzado a
la aplicación de obturación con dicha base (12) y dicho dispositivo
o dispositivos de tratamiento de muestras sin originar el
movimiento de dicho dispositivo o dispositivos de tratamiento de
muestras.
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