ES2305744T3

ES2305744T3 - Derivados de quinazolina como inhibidores e tgf-beta.

Info

Publication number: ES2305744T3
Application number: ES04718542T
Authority: ES
Inventors: Robert M. Scarborough; Anjali Pandey; Meenakshi S. Venkatraman
Original assignee: Millennium Pharmaceuticals Inc
Current assignee: Millennium Pharmaceuticals Inc
Priority date: 2003-03-12
Filing date: 2004-03-08
Publication date: 2008-11-01
Anticipated expiration: 2024-03-08
Also published as: US20070142408A1; US7189733B2; EP1603908B1; ATE398125T1; DE602004014347D1; US20040204431A1; WO2004081009A1; EP1603908A1; US8268857B2

Abstract

Un compuesto de fórmula I: (Ver fórmula) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde: a-b es CH2CH2, CH2CH2CH2, CH=CH, CH=N ó N=CH, en donde cada hidrógeno está opcionalmente reemplazado por un grupo alifático C1 - 4; Z es N ó C-F; G es un C1 - 6 alifático o un fenilo, naftilo, o un anillo heteroarilo de 5-6 miembros que tiene 1-3 heteroátomos en el anillo seleccionados entre nitrógeno, azufre u oxígeno, en donde G está sustituido opcionalmente con 1-3 R 5 ; El anillo A está sustituido opcionalmente con 1-3 R 1 ; El anillo B está sustituido opcionalmente con 1-2 R 6 en una posición orto respecto al nitrógeno del anillo y está sustituido opcionalmente con R 7 en la posición meta respecto al nitrógeno del anillo; cada R 1 se selecciona independientemente entre -R 2 , -T-R 2 ó -V-T-R 2 ; cada R 2 se selecciona independientemente entre C1 - 3 alifático, hidroxi, -N(R 3 )2, halo, ciano, -OR 4 , -C(O)R 4 , -CO2R 4 , -SR 4 , -S(O)R 4 , -S(O)2R 4 , -N(R 3 )C(O)R 4 , -N(R 3 )CO2R 4 , -N(R 3 )SO 2 R 4 , -C(O)N(R 3 )2, -SO2N(R 3 )2, -N(R 3 )C(O) N(R 3 )2, -OC(O)R 4 , fenilo sustituido opcionalmente con uno o más halógenos, heterociclilo de 5-6 miembros o heteroarilo de 5-6 miembros sustituido opcionalmente con uno o más halógenos; cada T es de forma independiente un alquilideno C1 - 5 que es una cadena carbonada lineal o ramificada, que puede estar completamente saturada o tener una o más unidades de insaturación, que está opcionalmente interrumpido con -O-, -C(O)-, -S-, -S(O)-, -S(O)2- ó -N(R 3 )-; cada V se selecciona independientemente entre -O-, -S-, -S(O)-, -S(O)2-, -C(O)-, -N(R 3 )-, -N(R 3 )C(O)- ó -N(R 3 ) C(O)2-, -N(R 3 )S(O)2 - , -C(O)N(R 3 )-, -S(O)2N(R 3 )-, -N(R 3 )C(O)N(R 3 )- ó -OC(O)-; cada R 3 se selecciona independientemente entre hidrógeno, C1 - 6 alifático, -(O)R 4 , -C(O)2R 4 , -SO2R 4 , o dos R 3 del mismo nitrógeno, junto con dicho átomo de nitrógeno, forman un heterociclilo o heteroarilo de 5-6 miembros que tiene 1-3 heteroátomos en el anillo seleccionados entre nitrógeno, oxígeno o azufre; cada R 4 se selecciona independientemente entre un grupo alifático C1 - 6, fenilo o un heteroarilo o heterociclilo de 5-6 miembros que tiene 1-3 heteroátomos en el anillo seleccionados entre nitrógeno, oxígeno o azufre; cada R 5 se selecciona independientemente entre C1 - 6 alifático, halo, -OH, -N(R 3 )2, ciano, -OR 4 , -C(O)R 4 , -CO2R 4 , -SR 4 , -S(O)R 4 , -S(O)2R 4 , -N(R 3 )C(O)R 4 , -N(R 3 )CO2R 4 , -N(R 3 )SO2R 4 , -C(O)N(R 3 )2, -SO2N(R 3 )2, -N(R 3 )C(O) N(R 3 )2, -OC(O)R 4 , -OC(O)N(R 3 )2, fenilo, heterociclilo de 5-6 miembros o heteroarilo de 5-6 miembros, o dos R 5 adyacentes en un anillo fenilo, naftilo o heteroarilo son considerados conjuntamente con los átomos a los que están unidos para formar un anillo condensado de 5-6 miembros que tiene 0-2 heteroátomos seleccionados entre nitrógeno, oxígeno o azufre; cada R 6 se selecciona independientemente entre alquilo C1 - 4, alcoxi-C1 - 4, amino, o C1 - 4 mono- o dialquilamino en donde el alquilo del mono- o dialquilamino está opcionalmente sustituido con un fenilo; y R 7 se selecciona entre halo, -OH, -N(R 3 )2, ciano, -OR 4 , -C(O)R 4 , -CO2R 4 , -SR 4 , -S(O)R 4 , -S(O)2R 4 , -N(R)C(O) R 4 , -N(R 3 )CO2R 4 , -N(R 3 )SO2R 4 , -C(O)N(R 3 )2, -SO2N(R 3 )2, -N(R 3 )C(O)N(R 3 )2 ó -OC(O)R 4 ; en donde un grupo alifático es un hidrocarburo no aromático de cadena lineal, ramificada o cíclica que está completamente saturado o que contiene una o más unidades de insaturación.

Description

Derivados de quinazolina como inhibidores de TGF-\beta.

Campo de la invención

Esta invención se refiere a nuevos compuestos que pueden usarse en métodos para inhibir el mecanismo de señalización del factor de crecimiento transformante (TGF)-\beta. Los compuestos son particularmente útiles para tratar enfermedades cardiovasculares.

Antecedentes de la invención

El TGF-\beta1 pertenece a una gran superfamilia de factores polipeptídicos multifuncionales. La familia de TGF-\beta incluye tres genes, TGF\beta1, TGF\beta2 y TGF\beta3, que son moduladores pleiotrópicos del crecimiento y la diferenciación celular, del desarrollo embriónico y óseo, de la formación de matriz extracelular, de la hematopoiesis, y de las respuestas inmunes e inflamatorias. Estos genes pueden presentar una elevada homología unos respecto a los otros. En los mamíferos, la superfamilia TGF\beta incluye varios genes TGF\beta, así como los morfogenes embrionarios, tal como la familia de activinas, inhibinas, "Sustancia de Inhibición Muleriana", y proteína morfogénica ósea (BMP, del inglés "bone morphogenic protein". Roberts y Sporn, The Transforming Growth Factor-\betas in Peptide Growth Factors and Their Receptors. I. Handbook of Experimental Pharmacology, vol. 95/I, Springer-Verlag, Berlín, 419-472 (1990). Cada miembro de la familia TGF-\beta ejerce un amplio abanico de efectos biológicos sobre una gran variedad de tipos de células, por ejemplo, regulan el crecimiento celular, la morfogénesis, la diferenciación, la producción de matriz y la apoptosis. Lagna y col., Nature, 383: 832-836 (1996). El TGF-\beta actúa como inhibidor del crecimiento para muchos tipos de células y parece desempeñar un papel principal en la regulación del desarrollo embrionario, de la regeneración de tejidos, de la inmuno-regulación, así como en la fibrosis y en la carcinogénesis. El TGF\beta1 inhibe el crecimiento de muchos tipos de células, que incluyen las células epiteliales, pero estimula la proliferación de varios tipos de células mesenquimales.

Además, los TGF\betas inducen la síntesis de proteínas de matriz extracelular (ECM), modulan la expresión de proteinasas de matriz e inhibidores de proteinasa y cambian la expresión de integrinas. La ECM es una superestructura dinámica de macromoléculas autoagregadas que incluyen la fibronectina, el colágeno y el proteoglicano. La ECM es el rasgo patológico principal de las enfermedades fibróticas. Se ha propuesto que el trastorno de ECM desempeña un papel principal en los trastornos de patogénesis tales como la enfermedad vascular hipertensiva y la enfermedad renal diabética. Sato y col., Am. J. Hypertens., 8: 160-166 (1995); Schulick y col., Proc. Natl. Acad. Sci., 95: 6983-6988 (1988). Además, los TGF\betas se expresan en grandes cantidades en muchos tumores. Derynck, Trends Biochem. Sci., 19: 548-553, (1994). Esta fuerte presencia en tejidos neoplásticos podría indicar que los TGF\betas son factores estratégicos de crecimiento/morfogénesis que influyen en las propiedades malignas asociadas a las diversas etapas de la cascada metástica. Los TGF\betas inhiben el crecimiento de células epiteliales normales y de células carcinoma relativamente diferenciadas, mientras que las células tumorales no diferenciadas que carecen de muchas propiedades epiteliales generalmente son resistentes a la inhibición del crecimiento generada por TGF\betas (Hoosein y col., Exp. Cell. Res. 181: 442-453 (1989); Murthy y col., Int. J. Cancer, 44: 110-115 (1989). Además, el TGF\beta1 puede potenciar el potencial invasivo y metastático de una línea de células de adenoma de pecho (Welch y col., Proc. Natl. Acad. Sci., 87: 7678-7682 (1990)), lo que indica un papel activo del TGF\beta1 en la progresión tumoral. Sin embargo, los mecanismos moleculares que subyacen bajo el efecto de TGF\betas durante la invasión y la metastacización requieren una explicación más profunda.

Los efectos celulares del TGF-\beta se ejercen mediante hetero-oligomerización inducida por ligandos de dos receptores de quinasa serina/treonina de tipo I y tipo II relacionados distantemente, el TGF-\betaR-I y el TGF-\beta R-II, respectivamente. Lin y Lodish, Trends Cell Biol., 11: 972-978. (1993); Massague y Weis-Garcia, Cancer Surv., 27: 41-64 (1996); ten Dijke y col., Curr. Opin. Cell Biol., 8: 139-145 (1996). Los dos receptores, requeridos ambos para la señalización, actúan en secuencia; el TGF-\betaR-I es un sustrato para la TGF-\betaR-II quinasa constitutivamente activa. Wrana y col., Nature, 370: 341-347 (1994); Wieser y col., EMBO J., 14: 2199-2208 (1995). En la unión de TGF-\beta1, el receptor de tipo II fosforila los residuos de treonina del dominio GS de receptor de tipo I o de quinasa de tipo activina (ALK5) ocupados por ligando, lo que resulta en la activación de los receptores de tipo I. El receptor de tipo I de TGF-\beta1 a su vez fosforila proteínas Smad2 y Smad3 que se trasladan al núcleo y median en la señalización intracelular. La inhibición de fosforilación de ALK5 de Smad3 reducirá la producción de matriz extracelular inducida por el TGF-\beta1. Krettzchmar y col., Genes Dev., 11: 984-995 (1997); Wu y col., Mol. Cell. Biol., 17: 2521-2528 (1997); Patente de EE.UU. Nº 6.465.493.

El TGF-\beta es un potente y esencial regulador inmune del sistema vascular capaz de modular episodios inflamatorios tanto en células endoteliales leuco como en células endoteliales vasculares. Shull y col., Nature, 359: 693-699 (1992). También está implicado en la patogénesis de enfermedades vasculares crónicas tales como la aterosclerosis y la hipertensión. Grainger & Metcalfe y col., Bio. Rev. Cambridge Phil. Soc., 70: 571-596 (1995); Metcalfe y col., J. Human Hypertens., 9: 679 (1995).

Los estudios genéticos de mecanismos de señalización tipo TGF-\beta en Drosophila y Caenorhabditis elegans han conducido a la identificación de madres contra genes dpp (Mad), Sekelsky y col., Genetics, 139: 1347-1358 (1995), y sma, respectivamente. Savage y col., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 93: 790-794, (1996). Los productos de estos genes relacionados llevan a cabo funciones esenciales por debajo de los ligandos tipo TGF-\beta actuando vía receptores serina/treonina quinasa en dichos organismos. Wiersdorf y col., Development, 122: 2153-2163 (1996); Newfeld y col., Development, 122: 2099-2108 (1996); Hoodless y col., Cell, 85: 489-500 (1996). Los homólogos vertebrados de Mad y sma se han denominado genes Smads, Derynck y col., Cell, 87: 173 (1996), o MADR. Wrana y Attisano, Trends Genet., 12: 493-496 (1996). Las proteínas SMAD han sido identificadas como mediadores de señalización de la superfamilia TGF-\beta. Hahn y col., Science, 271: 350-353 (1996). Se han descubierto alteraciones genéticas en Smad2 y Smad4/DPC4 en subsistemas tumorales específicos, y por tanto las Smads pueden actuar como genes supresores de tumores. Hahn y col., Science, 271: 350-353 (1996); Riggins y col., Nature Genet., 13: 347-349 (1996); Eppert y col., Cell, 86: 543-552 (1996). Las proteínas Smad comparten dos regiones de alta similitud, denominadas dominios MH1 y MH2, conectadas con una secuencia variable rica en prolinas. Massague, Cell , 85: 947-950 (1996); Derynck y Zhang, Curr. Biol., 6: 1226-1229 (1996). Se descubrió que la parte C-terminal de Smad2, cuando se encuentra fusionada a un dominio de unión de ADN heterólogo, presenta actividad transcripcional. Liu y col., Nature, 381: 620-623 (1996); Meersseman y col., Mech. Dev., 61: 127-140 (1997). La proteína Smad2 intacta, cuando se encuentra fusionada a un dominio de unión de ADN, fue latente, pero la actividad transcripcional fue desenmascarada tras estimulación con ligando. Liu y col., ver anterior.

Los documentos US 6.277.989, US 2002/161010 y US 6.476.031 describen derivados de quinazolina y su uso como inhibidores de quinasa p38-\alpha y TGF-\beta y en el tratamiento de trastornos asociados a un aumento de la actividad de quinasa p38-\alpha y TGF-\beta. El documento US 6.184.226 describe derivados de quinazolina como los inhibidores de quinasa p38-\alpha.

El TGF-\beta inicia un mecanismo de señalización intracelular que finalmente conduce a la expresión de genes que regulan el ciclo celular, respuestas proliferativas de control, o que están relacionados con proteínas de matriz extracelular que median en la señalización celular de fuera-a-dentro, la adhesión celular, la migración y la comunicación intercelular.

Existe una necesidad de agentes terapéuticos eficaces en la inhibición de la actividad de TGF-\beta, así como en la inhibición de la fosforilación de smad2 o smad3 por medio de TGF-\beta de tipo I o de receptor de quinasa de tipo activina (ALK5), y en la prevención y el tratamiento de estados de enfermedad mediados por el mecanismo de señalización de TGF-\beta en mamíferos. En particular, sigue existiendo una necesidad de compuestos que inhiban selectivamente TGF-\beta, especialmente el receptor ALK5.

Descripción de la invención

La presente invención proporciona compuestos que son útiles para tratar pacientes que tienen una enfermedad mediada por TGF-\beta, particularmente una enfermedad mediada por ALK5. Los compuestos se representan mediante la fórmula I:

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o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde:

a-b: es CH_{2}CH_{2}, CH_{2}CH_{2}CH_{2}, CH=CH, CH=N ó N=CH, en donde cada hidrógeno está opcionalmente reemplazado por un grupo alifático C_{1-4};

Z: es N ó C-F;

G: es un C_{1-6} alifático o un fenilo, naftilo, o un anillo heteroarilo de 5-6 miembros que tiene 1-3 heteroátomos en el anillo seleccionados entre nitrógeno, azufre u oxígeno, en donde G está sustituido opcionalmente con 1-3 R^{5};

El anillo A está sustituido opcionalmente con 1-3 R^{1};

El anillo B está sustituido opcionalmente con 1-2 R^{6} en una posición orto respecto al nitrógeno del anillo y está sustituido opcionalmente con R^{7} en la posición meta respecto al nitrógeno del anillo;

cada R^{1} se selecciona independientemente entre -R^{2}, -T-R^{2} ó -V-T-R^{2};

cada R^{2} se selecciona independientemente entre C_{1-3} alifático, hidroxi, -N(R^{3})_{2}, halo, ciano, -OR^{4}, -C(O)R^{4}, -CO_{2}R^{4}, -SR^{4}, -S(O)R^{4}, -S(O)_{2}R^{4}, -N(R^{3})C(O)R^{4}, -N(R^{3})CO_{2}R^{4}, -N(R^{3})SO_{2}R^{4}, -C(O)N(R^{3})_{2}, -SO_{2}N(R^{3})_{2}, -N(R^{3})C(O)N(R^{3})_{2}, -OC(O)R^{4}, fenilo sustituido opcionalmente con uno o más halos, heterociclilo de 5-6 miembros o heteroarilo de 5-6 miembros sustituido opcionalmente con uno o más halos;

cada T es, independientemente, un alquilideno C_{1-5} que está interrumpido opcionalmente con -O-, -C(O)-, -S-, -S(O)-, -S(O)_{2}- ó -N(R^{3})-;

cada V se selecciona independientemente entre -O-, -S-, -S(O)-, -S(O)_{2}-, -C(O)-, -N(R^{3})-, -N(R^{3})C(O)- ó -N(R^{3})
C(O)_{2}-, -N(R^{3})S(O)_{2-}, -C(O)N(R^{3})-, -S(O)_{2}N(R^{3})-, -N(R^{3})C(O)N(R^{3})- ó -OC(O)-;

cada R^{3} se selecciona independientemente entre hidrógeno, C_{1-6} alifático, -C(O)R^{4}, -C(O)_{2}R^{4}, -SO_{2}R^{4}, o dos R^{3} del mismo nitrógeno, junto con dicho átomo de nitrógeno, forman un heterociclilo o heteroarilo de 5-6 miembros que tiene 1-3 heteroátomos en el anillo seleccionados entre nitrógeno, oxígeno o azufre;

cada R^{4} se selecciona independientemente entre un grupo alifático C_{1-6}, fenilo o un heteroarilo o heterociclilo de 5-6 miembros que tiene 1-3 heteroátomos en el anillo seleccionados entre nitrógeno, oxígeno o azufre;

cada R^{5} se selecciona independientemente entre C_{1-6} alifático, halo, -OH, -N(R^{3})_{2}, ciano, -OR^{4}, -C(O)R^{4}, -CO_{2}R^{4}, -SR^{4}, -S(O)R^{4}, -S(O)_{2}R^{4}, -N(R^{3})C(O)R^{4}, -N(R^{3})CO_{2}R^{4}, -N(R^{3})SO_{2}R^{4}, -C(O)N(R^{3})_{2}, -SO_{2}N(R^{3})_{2}, -N(R^{3})C(O)N(R^{3})_{2}, -OC(O)R^{4}, -OC(O)N(R^{3})_{2}, fenilo, heterociclilo de 5-6 miembros o heteroarilo de 5-6 miembros, o dos R^{5} adyacentes en un anillo fenilo, naftilo o heteroarilo son considerados conjuntamente con los átomos a los que están unidos para formar un anillo condensado de 5-6 miembros que tiene 0-2 heteroátomos seleccionados entre nitrógeno, oxígeno o azufre;

cada R^{6} se selecciona independientemente entre alquilo C_{1-4}, alcoxi-C_{1-4}-amino, o C_{1-4} mono- o dialquilamino en donde el alquilo del mono- o dialquilamino puede ser sustituido con un fenilo; y

R^{7}: se selecciona entre halo, -OH, -N(R^{3})_{2}, ciano, -OR^{4}, -C(O)R^{4}, -CO_{2}R^{4}, -SR^{4}, -S(O)R^{4}, -S(O)_{2}R^{4}, -N(R^{3})C(O)R^{4}, -N(R^{3})CO_{2}R^{4}, -N(R^{3})SO_{2}R^{4}, -C(O)N(R^{3})_{2}, -SO_{2}N(R^{3})_{2}, -N(R^{3})C(O)N(R^{3})_{2} ó -OC(O)R^{4}.

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Los términos usados en la presente memoria se definen más adelante. Únicamente a título informativo, cuando los grupos químicos definidos a continuación son sustituibles, se proporciona una discusión de la sustitución. La sustitución de los grupos químicos definidos a continuación sólo entra dentro del alcance de la invención si los sustituyentes se mencionan en las reivindicaciones.

El término "alifático" tal como se usa en la presente memoria significa hidrocarburos C_{1}-C_{12} de cadena lineal, ramificada o cíclica que están completamente saturados o que contienen una o más unidades de insaturación pero que no son aromáticos. Por ejemplo, los grupos alifáticos adecuados incluyen grupos alquilo, alquenilo y alquinilo, lineales, ramificados o cíclicos, e híbridos de los mismos tales como (cicloalquil)alquilo, (cicloalquenil)alquilo o (cicloalquil)alquenilo. Los términos "alquilo", "alcoxi", "hidroalquilo", "alcoxialquilo" y "alcoxicarbonilo", usados solos o como parte de un resto de mayor tamaño, incluyen tanto cadenas lineales como ramificadas que contienen de uno a doce átomos de carbono. Los términos "alquenilo" y "alquinilo", usados solos o como parte de un resto de mayor tamaño, incluye tanto cadenas lineales como ramificadas que contienen de dos a doce átomos de carbono. El término "cicloalquilo", usado solo o como parte de un resto de mayor tamaño, incluye hidrocarburos C_{3}-C_{12} cíclicos que están completamente saturados.

Los términos "haloalquilo", "haloalquenilo" y "haloalcoxi", significan alquilo, alquenilo o alcoxi, según sea el caso, sustituidos con uno o más átomos de halógenos. El término "halógeno" significa F, Cl, Br ó I.

El término "heteroátomo" significa nitrógeno, oxígeno o azufre, e incluye cualquier forma oxidada de nitrógeno o azufre, y la forma cuaternaria de cualquier nitrógeno básico. El término "nitrógeno" también incluye un nitrógeno sustituible de un anillo heterocíclico. A modo de ejemplo, en un anillo saturado o parcialmente saturado que tiene 0-3 heteroátomos seleccionados entre oxígeno, azufre o nitrógeno, el nitrógeno puede ser N (como en 3,4-dihidro-2-pirrolilo), NH (como en pirrolidinilo) o NR^{+} (como en pirrolidinilo N-sustituido).

El término "arilo" usado sólo o como parte de un resto de mayor tamaño tal como en "aralquilo", o "ariloxialquilo", o "ariloxialquilo", se refiere a grupos de anillo aromático que tienen de cinco a catorce miembros, tal como fenilo, bencilo, fenetilo, 1-naftilo, 2-naftilo, 1-antracilo y 2-antracilo. El término "arilo" puede usarse indistintamente con el término "anillo arilo". "Arilo" también incluye sistemas de anillos aromáticos policíclicos condensados en los que un anillo aromático está condensado con uno o más anillos. Los ejemplos incluyen 1-naftilo, 2-naftilo, 1-antracilo y 2-antracilo. Un anillo "arilo" también puede estar condensado con uno o más anillos no aromáticos, tal como en un indanilo, fenantridinilo o tetrahidronaftilo, en donde el radical o punto de unión está en el anillo aromático.

Los términos "heterociclo", "heterociclilo" o "heterocíclico", tal como se usan en la presente memoria, incluyen sistemas de anillos no aromáticos que tienen de cinco a catorce miembros, preferiblemente de cinco a diez, en los que uno o más carbonos del anillo, preferiblemente de uno a cuatro, están sustituidos por un heteroátomo tal como N, O ó S. Los ejemplos de anillos heterocíclicos incluyen 3-1H-bencimidazol-2-ona, (1-sustituido)-2-oxo-bencimidazol-3-ilo, 2-tetrahidrofuranilo, 3-tetrahidrofuranilo, 2-tetrahidropiranilo, 3-tetrahidropiranilo, 4-tetrahidropiranilo, [1,3]-dioxalanilo, [1,3]-ditiolanilo, [1,3]-dioxanilo, 2-tetrahidrotiofenilo, 3-tetrahidrotiofenilo, 2-morfolinilo, 3- morfolinilo, 4-morfolinilo, 2-tiomorfolinilo, 3-tiomorfolinilo, 4-tiomorfolinilo, 1-pirrolidinilo, 2-pirrolidinilo, 3-pirrolidinilo, 1-piperacinilo, 2-piperacinilo, 1-piperidinilo, 2-piperidinilo, 3-piperidinilo, 4-piperidinilo, 4-tiazolidinilo, diazolonilo, diazolonilo N-sustituido, 1-ftalimidinilo, benzoxanilo, benzopirrolidinilo, benzopiperidinilo, benzoxolanilo, benzotiolanilo y benzotianilo. Un anillo "heterociclilo" o "heterocíclico" puede estar condensado a uno o más anillos aromáticos o no aromáticos, tal como en un indolinilo, cromanilo, fenantridinilo o tetrahidroquinolinilo, en donde el radical o punto de unión es sobre el anillo no aromático que contiene el heteroátomo. Los anillos de "heterociclo", "heterociclilo" o "heterocíclicos" pueden estar saturados o parcialmente insaturados.

El término "heteroarilo", usado solo o como parte de un resto de mayor tamaño tal como en "heteroaralquilo" o "heteroarilalcoxi", se refiere a grupos de anillo heteroaromáticos que tienen de cinco a catorce miembros. Los ejemplos de anillos heteroarilo incluyen 2-furanilo, 3-furanilo, 3-furazanilo, N-imidazolilo, 2-imidazolilo, 4-imidazolilo, 5-imidazolilo, 3-isoxazolilo, 4-isoxazolilo, 5-isoxazolilo, 2-oxadiazolilo, 5-oxadiazolilo, 2-oxazolilo, 4-oxazolilo, 5-oxazolilo, 1-pirrolilo, 2-pirrolilo, 3-pirrolilo, 1-pirazolilo, 2-pirazolilo, 3-pirazolilo, 2-piridilo, 3-piridilo, 4-piridilo, 2-pirimidilo, 4-pirimidilo, 5-pirimidilo, 3-piridacinilo, 2-tiazolilo, 4-tiazolilo, 5-tiazolilo, 5-tetrazolilo, 2-triazolilo, 5-triazolilo, 2-tienilo, 3-tienilo, carbazolilo, bencimidazolilo, benzotienilo, benzofuranilo, indolilo, quinolinilo, benzotriazolilo, benzotiazolilo, benzooxazolilo, bencimidazolilo, isoquinolinilo, indazolilo, isoindolilo, acridinilo o benzoisoxazolilo. Un anillo "heteroarilo" puede estar condensado a uno o más anillos aromáticos o no aromáticos en los que el radical o punto de unión se encuentra sobre el anillo heteroaromático. Los ejemplos incluyen tetrahidroquinolinilo, tetrahidroisoquinolinilo y pirido[3,4-d]pirimidinilo. El término "heteroarilo" puede usarse indistintamente con el término "anillo heteroarilo" o con el término "heteroaromático".

En determinadas realizaciones de la invención, como se define en las reivindicaciones, un grupo arilo (que incluye aralquilo, aralcoxi, ariloxialquilo y otros similares) o heteroarilo (que incluye heteroaralquilo y heteroaralcoxi, y otros similares) puede contener uno o más sustituyentes. Cuando la sustitución de un grupo arilo o heteroarilo entre dentro del alcance de la invención, los posibles sustituyentes se definen en las reivindicaciones. A modo de aclaración, los sustituyentes que pueden residir en el átomo de carbono insaturado de un grupo arilo, heteroarilo, aralquilo o heteroaralquilo incluyen un halógeno, -Rº, -ORº, -SRº, 1,2-metilen-dioxi, 1,2-etilendioxi, OH protegido (tal como aciloxi), fenilo (Ph), Ph sustituido, -O(Ph), -O(Ph) sustituido, -CH_{2}(Ph), -CH_{2}(Ph) sustituido, -CH_{2}CH_{2}(Ph), -CH_{2}CH_{2}(Ph) sustituido, -NO_{2}, -CN, -N(Rº)_{2}, -NRºC(O)Rº, -NRºC(O)N(Rº)_{2}, -NRºCO_{2}Rº, -NRºNRºC(O)Rº, -NRºNRºC(O)N(Rº)_{2}, -NRºNRºCO_{2}Rº, -C(O)C(O)Rº, -C(O)CH_{2}C(O)Rº, -CO_{2}Rº, -C(O)Rº, -C(O)N(Rº)_{2,} -OC(O)N(Rº)_{2}, -S(O)_{2}Rº,
-SO_{2}N(Rº)_{2}, -S(O)Rº, -NRºSO_{2}N(Rº)_{2}, -NRºSO_{2}Rº, -C(=S)N(Rº)_{2}, -C(=NH)-N(Rº)_{2}, -(CH_{2})_{y}NHC(O)Rº, -(CH_{2})_{y}NHC(O) CH(V-Rº)(Rº); en donde cada Rº se selecciona de forma independiente entre hidrógeno, un grupo alifático sustituido o no sustituido, un anillo heteroarilo o heterocíclico no sustituido, fenilo (Ph), Ph sustituido, -O(Ph), -O(Ph) sustituido, -CH_{2}(Ph) o -CH_{2}(Ph) sustituido; y es 0-6; y V es un grupo ligando. Los ejemplos de sustituyentes sobre el grupo alifático o el anillo fenilo de Rº incluyen amino, alquilamino, dialquilamino, aminocarbonilo, halógeno, alquil, alquilaminocarbonilo, dialquilaminocarbonilo, alquilaminocarboniloxi, dialquilaminocarboniloxi, alcoxi, nitro, ciano, carboxi, alcoxicarbonilo, alquilcarbonilo, hidroxi, haloalcoxi o haloalquilo.

En determinadas realizaciones de la invención, tal como se define en las reivindicaciones, un grupo alifático o un anillo heterocíclico no aromático puede contener uno o más sustituyentes. Cuando la sustitución entre dentro del alcance de la invención, los posibles sustituyentes se definen en las reivindicaciones. A modo de aclaración, los sustituyentes que pueden residir sobre el carbono saturado de un grupo alifático o de un anillo heterocíclico no aromático incluyen aquellos enumerados anteriormente para el carbono insaturado de un grupo arilo o heteroarilo y los siguientes: =O, =S, =NNHR*, =NN(R*)_{2}, =N-, =NNHC(O)R*, =NNHCO_{2}(alquilo), =NNHSO_{2}(alquilo) ó =NR*, en donde cada R* se selecciona de forma independiente entre hidrógeno, un grupo alifático no sustituido o un grupo alifático sustituido. Los ejemplos de sustituyentes sobre el grupo alifático incluyen amino, alquilamino, dialquilamino; aminocarbonilo, halógeno, alquilo, alquilaminocarbonilo, dialquilaminocarbonilo, alquilaminocarboniloxi, dialquilaminocarboniloxi, alcoxi, nitro, ciano, carboxi, alcoxicarbonilo, alquilcarbonilo, hidroxi, haloalcoxi o haloalquilo.

A modo de aclaración, los sustituyentes que pueden residir sobre el nitrógeno de un anillo heterocíclico no aromático incluyen -R^{+}, -N(R^{+})_{2}, -C(O)R^{+}, -CO_{2}R^{+}, -C(O)C(O)R^{+}, -C(O)CH_{2}C(O)R^{+}, -SO_{2}R^{+}, -SO_{2}N(R^{+})_{2}, -C(=S)N(R^{+})_{2}, -C(=NH)-N(R^{+})_{2} y -NR^{+}SO_{2}R^{+}; en donde cada R^{+} se selecciona de forma independiente entre hidrógeno, un grupo alifático, un grupo alifático sustituido, fenilo (Ph), Ph sustituido, -O(Ph), -O(Ph) sustituido, CH_{2}(Ph), CH_{2}(Ph) sustituido, o un anillo heteroarilo o heterocíclico no sustituido. Los ejemplos de sustituyentes sobre el grupo alifático o el anillo fenilo incluyen amino, alquilamino, dialquilamino, aminocarbonilo, halógeno, alquil, alquilaminocarbonilo, dialquilaminocarbonilo, alquilaminocarboniloxi, dialquilaminocarboniloxi, alcoxi, nitro, ciano, carboxi, alcoxicarbonilo, alquilcarbonilo, hidroxi, haloalcoxi o haloalquilo.

El término "grupo ligando" o "ligando" significa un resto orgánico que conecta dos partes de un compuesto. Los ligandos están compuestos normalmente por un átomo tal como oxígeno o azufre, una unidad tal como -NH-, -CH_{2}-, -C(O)-, -C(O)NH-, o una cadena de átomos, tal como una cadena de alquilideno. La masa molecular de un ligando normalmente se encuentra en el intervalo de aproximadamente 14 a 200, preferiblemente en el intervalo de 14 a 96, con una longitud de hasta aproximadamente seis átomos. Los ejemplos de ligandos incluyen una cadena de alquilideno C_{1-6} saturada o no saturada, en la que uno o dos carbonos saturados de la cadena son sustituidos opcionalmente por -C(O)-, -C(O)C(O)-, -CONH-, -CONHNH-, -CO_{2}-, -OC(O)-, -NHCO_{2}-, -O-, -NHCONH-, -OC(O)NH-, -NHNH-, -NHCO-, -S-, -SO-, -SO_{2}-, -NH-, -SO_{2}NH- ó -NHSO_{2}-.

El término "cadena de alquilideno" se refiere a una cadena carbonada lineal o ramificada que puede estar completamente saturada o que puede tener una o más unidades de insaturación.

Una combinación de sustituyentes o variables sólo es permisible si dicha combinación da como resultado un compuesto químicamente viable. Un compuesto estable o compuesto químicamente viable es aquel en el que la estructura química no se ve alterada sustancialmente cuando se mantiene a una temperatura de 40ºC o menos, en ausencia de humedad o de otras condiciones químicamente reactivas, durante al menos una semana.

A menos que se indique lo contrario, las estructuras mostradas en la presente memoria también pretenden incluir todas las formas estereoquímicas de la estructura; es decir, las configuraciones R y S correspondientes a cada centro asimétrico. Por tanto, los isómeros estereoquímicos individuales, así como las mezclas enantioméricas y diastereoméricas de los presentes compuestos se encuentran dentro del alcance de la invención. A menos que se indique lo contrario, las estructuras mostradas en la presente memoria también pretenden incluir compuestos que difieren únicamente por la presencia de uno o más átomos enriquecidos isotópicamente. Por ejemplo, los compuestos que tienen las presentes estructuras excepto por la sustitución de un átomo de hidrógeno por un deuterio o un tritio, o por la sustitución de un carbono por un carbono enriquecido en ^{13}C o ^{14}C, se hayan dentro del alcance de esta
invención.

El anillo B de la formula I preferiblemente no está sustituido o lo está con uno o dos R^{6} (orto respecto al nitrógeno), en donde R^{6} es metilo, metoxi, amino o alquilamino.

Cuando Z es C-F, el anillo A forma parte de un sistema de anillo de quinolina, y cuando Z es nitrógeno, el anillo A forma parte de un sistema de anillo de quinazolina. Cuando el anillo A está sustituido, preferiblemente está sustituido en las posiciones 6 y/o 7 del sistema de anillo de quinolina o de quinazolina.

El resto G de la fórmula I preferiblemente es un fenilo, naftilo, alquilo o cicloalquilo C_{3-6}, piridilo, tienilo o furanilo, sustituidos o sin sustituir. Los sustituyentes de R^{5} preferidos sobre G incluyen halo, amino, ciano, hidroxi, alcoxi C_{1-6}, alquilo C_{1-6}, cicloalquilo C_{3-6}, haloalquilo, alquiltio C_{1-6}, mono- o dialquilamino, aminocarbonilo, mono- o dialquilaminocarbonilo, alquilcarbonilo C_{1-6}, alquilsulfonilo C_{1-6}, alcoxicarbonilo C_{1-6}, alcoxicarbonilamino C_{1-6}, alquilcarboniloxi C_{1-6}, alquilsulfonilamino C_{1-6}, mono- o di-alquilaminosulfonilo, mono- o dialquilaminocarbonilamino, o dos R^{5} adyacentes son considerados junto con sus átomos respectivos para formar un anillo de 5-6 miembros que tiene 0-2 heteroátomos de anillo. Cuando Z es nitrógeno y G es un anillo arilo o heteroarilo sustituido, es ventajoso tener un sustituyente R^{5} en la posición 2 del anillo G respecto a su unión a la porción de quinazolina del compuesto. Cuando Z es C-F y G es un anillo arilo o heteroarilo sustituido, el sustituyente R^{5} se encuentra preferiblemente en la posición 3 del anillo G respecto de la porción de quinolina del compuesto.

En el anillo A, R^{1} se selecciona entre -R^{2}, -T-R^{2} ó -V-T-R^{2}. Un R^{2} preferido es halo, C_{1-3} alifático, -N(R^{3})_{2} ó -OR^{4}. Un T preferido es un alquilideno C_{1-4}, más preferiblemente un alquilideno C_{2-3}. Un V preferido es -O- ó -N(R^{3})-.

Una realización de esta invención se refiere a un compuesto de fórmula I en el que a-b es CH=CH, representado por la fórmula II:

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en donde Z es nitrógeno (fórmula II-a) o C-F (fórmula II-b) y G es tal como se ha descrito antes.

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Otra realización de esta invención se refiere a un compuesto de fórmula I en el que a-b es CH=N, representado por la fórmula III:

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en donde Z es nitrógeno (fórmula III-a) o C-F (fórmula III-b) y G es tal como se ha descrito antes.

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Otra realización de esta invención se refiere a un compuesto de fórmula I en el que a-b es N=CH, representado por la fórmula IV:

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en donde Z es nitrógeno (fórmula IV-a) o C-F (fórmula IV-b) y G es tal como se ha descrito antes.

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Otra realización de esta invención se refiere a un compuesto de fórmula I en el que a-b es CH_{2}-CH_{2}, representado por la fórmula V:

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en donde Z es nitrógeno (fórmula V-a) o C-F (fórmula V-b) y G es tal como se ha descrito antes.

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Otra realización de esta invención se refiere a un compuesto de fórmula I en el que a-b es CH_{2}-CH_{2}-CH_{2}, representado por la fórmula VI:

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en donde Z es nitrógeno (fórmula VI-a) o C-F (fórmula VI-b) y G es tal como se ha descrito antes.

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Una realización proporciona compuestos de fórmula I que tienen al menos una característica, y más preferiblemente todas, seleccionada del grupo que consiste en:

(a): G es un anillo fenilo, naftilo o heteroarilo que sin sustituir o sustituido con 1-2 grupos R^{5};

(b): el anillo A está sin sustituir o sustituido con 1-2 grupos R^{1} en las posiciones 6 y/o 7 del sistema de anillos de quinolina o de quinazolina;

(c): el anillo B está sin sustituir o sustituido con un grupo R^{6} en el que R^{6} es metilo, amino o metilamino;

(d): R^{1} es R^{2}, T-R^{2} ó V-T-R^{3} en donde R^{2} es halo, C_{1-3} alifático, C_{1-3} alcoxi, amino, mono- o di-alquil-C_{1-6} amino, T es un alquilideno C_{1-4} que está interrumpido opcionalmente por -C(=O)-, V es -O- ó -N(R^{3})-, y R^{3} es hidrógeno o metilo; y

(e): R^{5} es halo, alcoxi C_{1-6}, alquilo C_{1-6}, cicloalquilo C_{3-6}, haloalquilo, alquiltio C_{1-6}, mono- o dialquilamino, aminocarbonilo, mono- o dialquilaminocarbonilo, alquilcarbonilo C_{1-6}, alquilsulfonilo C_{1-6}, alcoxicarbonilo C_{1-6}, alcoxicarbonilamino C_{1-6}, alquilcarboniloxi C_{1-6}, alquilsulfonilamino C_{1-6}, mono- o dialquilaminosulfonilo, mono- o dialquilaminocarbonilamino, o dos R^{5} adyacentes son considerados junto con sus átomos respectivos para formar un anillo condensado de 5-6 miembros que tiene 0-2 heteroátomos de anillo.

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Los aspectos particulares de esta realización se refieren a compuestos de cada una de las fórmulas II-VI que presentan al menos una de las características, y más preferiblemente todas, seleccionadas del grupo que consiste en los apartados (a)-(e) anteriores.

Otra realización proporciona compuestos de fórmula I que tienen al menos una característica, y más preferiblemente todas, seleccionada del grupo que consiste en:

(a): G es un anillo fenilo que está sin sustituir o sustituido con 1-2 grupos R^{5};

(d): R^{1} es R^{2}, T-R^{2} ó V-T-R^{3} en donde R^{2} es halo, C_{1-3} alifático, -N(R^{3})_{2} ó -OR^{4}, T es un alquilideno C_{1-3}, V es -O- ó -N(R^{3})-, y R^{3} es hidrógeno o metilo; y

(e): R^{5} es halo, amino, ciano, hidroxi, alcoxi C_{1-6}, alquilo C_{1-6}, cicloalquilo C_{3-6}, haloalquilo, alquiltio C_{1-6}, mono- o dialquilamino, aminocarbonilo, mono- o dialquilaminocarbonilo, alquilcarbonilo C_{1-6}, alquilsulfonilo C_{1-6}.

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Los aspectos particulares de la anterior realización se refieren a compuestos de cada una de las fórmulas II-VI que presentan al menos una de las características, y más preferiblemente todas, seleccionadas del grupo que consiste en los apartados (a)-(e) anteriores.

Los ejemplos de compuestos específicos de esta invención se muestran en la Tabla I siguiente.

TABLA 1

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Los compuestos de esta invención pueden prepararse empleando métodos conocidos por el especialista en la técnica correspondientes a compuestos análogos, tal como se ilustra en los siguientes Esquemas generales, y en referencia a los Ejemplos preparativos mostrados más adelante.

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Esquema I

14

Reactivos y condiciones: a) Piridina, G-COCl, CH_{2}Cl_{2}; b) NaOH, etanol; c) SOCl_{2}, DMF (cat), CHCl_{3}; d) Cs_{2}CO_{3}, DMF.

El anterior Esquema I muestra una ruta de síntesis para preparar compuestos de fórmula I-a.

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Esquema II

15

Reactivos y condiciones: a) G-B(OH)_{2}, THF, H_{2}O, Na_{2}CO_{3}, Pd(PPh_{3})_{4}; b) LDA, THF, I_{2}; c) Pd_{2}(dba)_{3}, Xantphos, Cs_{2}CO_{3}, THF

El anterior Esquema II muestra una ruta de síntesis para preparar compuestos de fórmula I-b. La 3-fluoro-2-yodoquinolina de partida (vi) es conocida (Arzel y col., Tetrahedron Letters (1998), 39(36), 6465-6466). El acoplamiento con ácido borónico de la etapa (a) introduce el grupo G en la posición 2 de la quinolina para proporcionar el intermedio vii. La yodación de vii proporciona la 3-fluoro-4-yodoquinolina viii, que se ve sometida a un acoplamiento mediado por paladio con el intermedio v para dar lugar a los compuestos de fórmula I-b.

Esquema III

16

Reactivos y condiciones: (a) NaOMe/MeOH; (b) (i) Pt (S), H_{2}; (ii) Pd(0), base (c) SOCl_{2}; (d) nBuLi, luego I_{2}, -30ºC; (e) Cs_{2}CO_{3}, DMF.

El anterior Esquema III muestra una ruta alternativa para preparar compuestos de fórmula I-b.

Esquema IV

17

Reactivos y condiciones: a) Pd_{2}(dba)_{3}, Xantphos, Cs_{2}CO_{3}, THF; b) LDA, THF, I_{2}; c) GB(OH)_{2}, THF, H_{2}O, Na_{2}CO_{3}, Pd(PPh_{3})_{4}.

Otra estrategia para preparar compuestos de fórmula I-b se muestra en el anterior Esquema IV. La 3-fluoro-4-yodoquinolina de partida (xvi) es conocida (Arzel y col., Tetrahedron Letters (1998), 39(36), 6465-6466). El acoplamiento mediado por paladio con el intermedio v proporciona el compuesto xvii, que puede verse sometido a yodación para proporcionar el compuesto 2-yodo xviii. El acoplamiento de ácido borónico de la etapa (c) introduce el grupo G en la posición 2 de la quinolina conduciendo a compuestos de fórmula I-b.

Los compuestos de la presente invención son útiles para tratar una enfermedad mediada por TGF-\beta, especialmente una enfermedad mediada por ALK5. La expresión "afección de TGF-\beta" o "enfermedad mediada por TGF-\beta" incluye aquellos estados, trastornos o enfermedades que se caracterizan por actividad aberrante o indeseable o por expresión de TGF-\beta. Los ejemplos de afecciones asociadas a TGF-\beta incluyen, aunque sin limitación, trastornos que implican o que están asociadas a enfermedades cardiovasculares tales como el infarto de miocardio, apoplejía, trombosis, fallo congestivo del corazón, cardiomiopatía dilatada, miocarditis, o estenosis vascular asociada a aterosclerosis, tratamiento de angioplastia, o incisiones quirúrgicas o trauma mecánico; enfermedades de riñón asociadas a fibrosis y/o esclerosis, que incluyen glomerulonefritis de todas las etiologías, nefropatía diabética, y todas las causas de fibrosis intersticial renal, que incluye hipertensión, complicaciones por exposición de fármacos, tales como ciclosporina, nefropatía asociada a VIH, nefropatía de transplante, obstrucción ureteral crónica; enfermedades hepáticas asociadas a un cicatrizado excesivo y esclerosis progresiva, que incluye cirrosis debido a todas la etiologías, trastornos del árbol biliar, y disfunción hepática atribuible a infecciones tales como el virus de la hepatitis o parásitos; síndromes asociados a fibrosis pulmonar con la consiguiente pérdida de intercambio de gas o de la capacidad para movilizar de forma eficiente aire hacia el interior o el exterior de los pulmones, que incluyen síndrome de insuficiencia respiratoria adulta, fibrosis pulmonar idiopática, o fibrosis pulmonar debido a agentes infecciosos o tóxicos tales como humo, productos químicos, alérgenos o enfermedad autoinmune; todos los trastornos vasculares de colágeno de naturaleza crónica o persistente, que incluyen esclerosis sistémica progresiva, polimiositis, escleroma, dermatomiositis, síndrome de Raynaud, o afecciones artríticas tales como la artritis reumatoide; enfermedades oculares asociadas a estados fibroproliferativos, que incluyen vitreorretinopatía proliferativa de cualquier etiología o fibrosis asociada a cirugía ocular tal como religadura de retina, extracción de cataratas, o procedimientos de drenaje de cualquier tipo; formación excesiva o hipertrófica de cicatrices en la dermis que se produce durante la curación de lesiones que proceden de traumas o heridas quirúrgicas; trastornos del tracto gastrointestinal asociadas a inflamación crónica, tal como enfermedad de Crohn o colitis ulcerante o formación de adhesión como resultado de traumas o lesiones quirúrgicas, poliposis o estados postquirúrgicos de pólipos; cicatrizado crónico del peritoneo asociada a endometriosis, enfermedad de ovarios, diálisis peritoneal, o lesiones quirúrgicas; afecciones neurológicas que se caracterizan por la producción de TGF-\beta o aumento de sensibilidad a TGF-\beta, que incluyen estados post-traumáticos o lesiones hipóxicas, enfermedad de Alzheimer y enfermedad de Parkinson; y enfermedades de las articulaciones que implican un cicatrizado suficiente como para impedir la movilidad o producir dolor, que incluyen traumas post-mecánicos o quirúrgicos, osteoartritis y artritis
reumatoide.

La actividad de inhibición de TGF-\beta es útil para tratar enfermedades fibroproliferativas, para tratar trastornos vasculares de colágeno, para tratar enfermedades oculares con una afección fibroproliferativa, para ventear un cicatrizado excesivo, para tratar afecciones neurológicas y otras afecciones que constituyan dianas para inhibidores de TGF-\beta y para prevenir un cicatrizado excesivo que provoque y acompañe la restenosis después de una angioplastia coronaria, fibrosis cardiaca que se produce tras un infarto y un fallo cardiaco progresivo, y en vasculopatía hipertensiva, y la formación de queloides o cicatrices hipertróficas que se producen durante la curación de lesiones que incluyen lesiones quirúrgicas y laceraciones traumáticas. Las afecciones neurológicas que se caracterizan por la producción de TGF-\beta incluyen lesiones del SNC tras eventos traumáticos e hipóxicos, enfermedad de Alzheimer y enfermedad de
Parkinson.

Otras afecciones que son dianas clínicas potenciales para los inhibidores de TGF-\beta incluyen mielofibrosis, espesamiento de tejidos como consecuencia de tratamiento con radiación, poliposis nasal, cirugía de pólipos, cirrosis de hígado y osteoporosis. La modulación de los sistemas inmune e inflamatorio mediante TGF-\beta incluye la estimulación del reclutamiento de leucocitos, la producción de citoquinas y la función efectora de linfocitos, y la inhibición de proliferación de subconjunto de células T, la proliferación de células B, la formación de anticuerpos y el estallido respiratorio monocítico. Wahl y col., Immunol Today 10: 258-61 (1989). El TGF-\beta desempeña un papel importante en la patogénesis de fibrosis de pulmón que es una causa principal de sufrimiento y muerte observada en la medicina pulmonar, en base a su fuerte efecto inductor de matriz extracelular. La asociación de TGF-\beta con trastornos fibróticos de pulmón en humanos ha sido demostrada en la fibrosis pulmonar idiopática, en enfermedades pulmonares autoinmunes y en la fibrosis pulmonar inducida por bleomicina. Nakao y col., J. Clin. Inv., 104(1): 5-11 (1999).

El TGF-\beta es un estimulador para el exceso de producción de proteínas de matriz extracelular, que incluyen fibronectina y colágeno. También inhibe la producción de enzimas que degradan dichas proteínas de matriz. El efecto neto es la acumulación de tejido fibroso que es la marca distintiva de las enfermedades fibroproliferativas. Por consiguiente, una realización de esta invención se refiere a un método para inhibir la formación de matriz en un paciente, que comprende administrar al paciente una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de fórmula I.

El TGF-\beta también es un mediador importante de la nefropatía diabética, una complicación común en pacientes con diabetes mellitus de tipo 1 o de tipo 2. Ziyadeh y col., Proc. Natl. Acad. Sci., 97(14): 8015-8020 (2000) evaluaron el papel del TGF-\beta renal en el desarrollo de cambios estructurales crónicos y funcionales de la nefropatía diabética determinando la respuesta de ratones db/db a un tratamiento crónico con anti-TGF-\beta1 neutralizante y regulación al alza generalizada (tubular y glomerular) de receptor de tipo II de TGF-\beta. El anticuerpo previno eficazmente los aumentos de la expresión renal de genes de matriz que incluyen el colágeno de tipo IV y la fibronectina, y también puede haber estimulado mecanismos degradativos de matriz debido a que el TGF-\beta suprime la actividad de metaloproteinasas y aumenta la expresión de inhibidores de proteasa tales como activador inhibidor-1 de plasminógeno (PAI-1).

Otros estados de enfermedad de TGF-\beta incluyen la inhibición del mecanismo de señalización intracelular tal como en las enfermedades fibroproliferativas, que incluyen trastornos renales asociados a una actividad de TGF-\beta no regulada y fibrosis excesiva, que incluye glomerulonefritis (GN), tal como GN proliferativa mesangial, GN inmune y GN crescéntica. Otras afecciones renales que pueden tratarse mediante inhibidores del mecanismo de señalización intracelular de TGF-\beta incluyen la nefropatía diabética, la fibrosis intersticial renal, la fibrosis renal en pacientes de transplantes que reciben ciclosporina, y la nefropatía asociada al VIH. Los trastornos vasculares de colágeno que pueden tratarse mediante inhibidores del mecanismo de señalización intracelular de TGF-\beta incluyen la esclerosis sistémica progresiva, la polimiositis, el escleroma, la dermatomiositis, la fascitis eosinófila, la morfea, o aquellos relacionados con la presencia de síndrome de Raynaud. Las fibrosis pulmonares que se originan por una actividad excesiva de TGF-\beta incluyen el síndrome de insuficiencia respiratoria en adultos, la fibrosis pulmonar idiopática y la fibrosis pulmonar intersticial, asociada a menudo a trastornos autoinmunes, tales como lupus sistémico y escleroderma, contacto químico, o alergias. Otro trastorno autoinmune asociado a características fibroproliferativas es la artritis reumatoide. Las enfermedades oculares asociadas a una afección fibroproliferativa incluyen la cirugía de religadura retinal que acompaña a la vitreorretinopatía proliferativa, la extracción de cataratas con implantación de lentes intraoculares, y la cirugía de drenaje post-glaucoma.

Una realización de esta invención se refiere a un compuesto como el definido aquí para su uso en el tratamiento o prevención de una enfermedad renal crónica, enfermedad renal aguda, curación de lesiones, artritis, osteoporosis, enfermedad del riñón, fallo cardiaco congestivo, úlceras, trastornos oculares, lesiones corneales, nefropatía diabética, función neurológica afectada, enfermedad de Alzheimer, afecciones tróficas, aterosclerosis, adhesión peritoneal y sub-dermal.

Los compuestos de la invención son útiles para el tratamiento de formación de trombos coronarios oclusivos que resultan de terapia trombolítica o de angioplastia coronaria transluminal percutánea, formación de trombos en la vasculatura venosa, coagulopatía intravascular diseminada, una afección en la que existe un rápido consumo de factores de coagulación y coagulación sistémica que da como resultado la formación de trombos que amenazan la vida que se producen a lo largo de la microvasculatura, lo que conduce a un fallo orgánico generalizado, apoplejía hemorrágica, diálisis renal, oxigenación sanguínea y caterización cardiaca.

Los presentes compuestos son particularmente útiles para el tratamiento de enfermedades o afecciones mediadas por ALK5. Los estados de enfermedad mediados por ALK5 incluyen, aunque sin limitación, enfermedad renal crónica, enfermedad renal aguda, curación de lesiones, artritis, osteoporosis, enfermedad de riñón, fallo cardiaco congestivo, úlceras, trastornos oculares, lesiones corneales, nefropatía diabética, función neurológica afectada, enfermedad de Alzheimer, afecciones tróficas, aterosclerosis, cualquier enfermedad en la que la fibrosis sea un componente principal, que incluye, pero sin limitación, adhesión peritoneal y sub-dermal, fibrosis pulmonar y fibrosis hepática, y restenosis. Los compuestos de esta invención son particularmente útiles para tratar la fibrosis hepática y la fibrosis renal.

Los compuestos de esta invención también son útiles para recubrir dispositivos stent (cánulas intraluminales). Se ha demostrado que los stents reducen la restenosis, pero son trombogénicos. Una estrategia para reducir la trombogenecidad de los stents es recubrir, embeber, adsorber o ligar covalentemente un agente inhibidor de trombina sobre la superficie del stent. Los compuestos de la presente invención pueden usarse para este propósito. Los compuestos de la invención pueden ligarse, o pueden quedar embebidos dentro de polímeros solubles y/o biodegradables que son adecuados para recubrir un stent. Los ejemplos de dichos polímeros incluyen polivinilpirrolidona, polihidroxi-propilmetacrilamida-fenol, polihidroxietil-aspartamida-fenol, u óxido de polietileno-polilisina sustituida con residuos de palmitoilo, ácido poliláctico, ácido poliglicólico, copolímeros de ácido poliláctico y poliglicólico, caprolactona poliepsilon, ácido polihidroxibutírico, poliortoésteres, polihidropiranos, policianoacrilatos y copolímeros de bloque reticulados o anfipáticos de hidrogeles. Véase la Solicitud de Patente Europea 761 251, la Solicitud de Patente Europea 604 022, la Patente Canadiense 2.164.684 y las Solicitudes PCT Publicadas WO 96/11668, WO 96/32143 y WO 96/38136.

Los compuestos y las composiciones farmacéuticas adecuadas para su uso en la presente invención incluyen aquellas en las que el ingrediente activo se administra en una cantidad eficaz para lograr el propósito pretendido. Más específicamente, una "cantidad terapéuticamente eficaz" significa una cantidad eficaz para inhibir el desarrollo de síntomas, o para aliviarlos, en el sujeto que esté siendo tratado. La determinación de la cantidad eficaz se encuentra entre las habilidades de los especialistas en la técnica, especialmente a la luz de la descripción detallada proporcionada en la presente memoria. Una "dosis terapéuticamente eficaz" se refiere a aquella cantidad del compuesto que proporciona el efecto deseado. La toxicidad y la eficacia terapéutica de dichos compuestos pueden determinarse mediante procedimientos farmacéuticos estándares en el cultivo de células o en experimentación con animales, por ejemplo para determinar la LD_{50} (la dosis letal para el 50% de la población) y la ED_{50} (la dosis terapéuticamente eficaz en el 50% de la población). La relación de dosis entre los efectos tóxico y terapéutico es el índice terapéutico, que se expresa como la relación de LD_{50} a ED_{50}. Se prefieren los compuestos que presentan índices terapéuticos elevados (es decir, una dosis tóxica que es sustancialmente mayor que la dosis eficaz). Los datos obtenidos pueden usarse para la formulación de un intervalo de dosificación para uso en humanos. La dosificación de dichos compuestos preferiblemente se encuentra en el intervalo de concentraciones en circulación que incluyen la ED_{50} con poca o ninguna toxicidad. La dosis puede variar dentro de dicho intervalo dependiendo de la forma de dosificación empleada, y de la ruta de administración utilizada. La formulación exacta, la ruta de administración, y la dosis son elegidas por el médico correspondiente a la vista de la condición del paciente. La cantidad de dosis y el intervalo de dosis pueden ajustarse individualmente para proporcionar niveles en plasma del compuesto activo que sean suficientes para mantener los efectos terapéuticos deseados.

Una realización de esta invención se refiere a una composición que comprende un compuesto de fórmula I o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un vehículo farmacéuticamente aceptable.

Si se utilizan sales farmacéuticamente aceptables de los compuestos de esta invención en estas composiciones, dichas sales derivan preferiblemente de ácidos y bases inorgánicos u orgánicos. Entre dichas sales ácidas se incluyen las siguientes: acetato, adipato, alginato, aspartato, benzoato, bencenosulfonato, bisulfato, butirato, citrato, camforato, sulfonato de cánfor, ciclopentanopropionato, digluconato, dodecilsulfato, etanosulfonato, fumarato, lucoheptanoato, glicerofosfato, hemisulfato, heptanoato, hexanoato, hidrocloruro, hidrobromuro, hidroyoduro, 2-hidroxietanosulfonato, lactato, maleato, metanosulfonato, 2-naftalenosulfonato, nicotinato, oxalato, pamoato, pectinato, persulfato, 3-fenil-propionato, picrato, pivalato, propionato, succinato, tartrato, tiocianato, tosilato y undecanoato. Las sales básicas incluyen sales de amonio, sales de metales alcalinos, tales como sales sódicas y potásicas, sales de metales alcalinotérreos, tales como sales de calcio y de magnesio, sales con bases orgánicas, tales como sales de diciclohexilamina, N-metil-D-glucamina, y sales con aminoácidos tales como arginina, lisina, y otros similares.

Asimismo, los grupos básicos que contienen nitrógeno pueden transformarse en cuaternarios mediante agentes tales como haluros de alquilo inferior, tal como cloruro de metilo, etilo, propilo y butilo, bromuros y ioduros; sulfatos de dialquilo, tales como sulfatos de dimetilo, dietilo, dibutilo y diamilo, haluros de cadena larga tales como cloruro de decilo, laurilo, miristilo y estearilo, haluros de aralquilo, tales como bromuros de bencilo y fenetilo, y otros. De este modo se obtienen productos solubles en agua o en aceite, o dispersables.

Los compuestos utilizados en las composiciones de esta invención también pueden modificarse añadiendo las funcionalidades apropiadas para potenciar propiedades biológicas selectivas. Dichas modificaciones son conocidas en la técnica e incluyen aquellas que aumentan la penetración biológica en un sistema biológico dado (por ejemplo, sangre, sistema linfático, sistema nervioso central), que aumentan la disponibilidad oral, aumentan la solubilidad para permitir la administración mediante inyección, alteran el metabolismo y alteran la tasa de excreción.

Los vehículos farmacéuticamente aceptables que pueden usarse en estas composiciones incluyen, aunque sin limitación, intercambiadores iónicos, alúmina, estearato de aluminio, lecitina, proteínas de suero, tales como albúmina de suero humano, sustancias tampón tales como fosfatos, glicina, ácido sórbico, sorbato potásico, mezclas parciales de glicéridos de ácidos grasos vegetales saturados, agua, sales o electrolitos, tales como sulfato de protamina, hidrogenofosfato disódico, hidrogenofosfato potásico, cloruro sódico, sales de zinc, sílice coloidal, trisilicato de magnesio, polivinil pirrolidona, sustancias basadas en celulosa, polietilenglicol, carboximetilcelulosa sódica, poliacrilatos, ceras, polímeros bloque de polietileno y polióxido de propileno, polietilenglicol y grasa de lana.

De acuerdo con una realización preferida, las composiciones de esta invención se formulan para administración farmacéutica a un mamífero, preferiblemente un ser humano. Dichas composiciones farmacéuticas de la presente invención pueden administrarse oralmente, parenteralmente, mediante inhalación de una pulverización, tópicamente, rectalmente, nasalmente, bucalmente, vaginalmente o a través de un reservorio implantado. El término "parenteral", tal como se usa en la presente memoria incluye técnicas de inyección o de infusión subcutánea, intravenosa, intramuscular, intra-articular, intra-sinovial, intra-esternal, intra-tecal, intra-hepático, intra-lesional e intra-craneal. Preferiblemente, las composiciones se administran oral o intravenosamente.

Las formas inyectables estériles de las composiciones de esta invención pueden ser suspensiones acuosas u oleaginosas. Estas suspensiones pueden formularse empleando procedimientos conocidos en la técnica mediante agentes dispersantes o humectantes adecuados y agentes de suspensión. La preparación inyectable estéril también puede ser una disolución o suspensión inyectable estéril en un diluyente o disolvente parenteralmente aceptable no tóxico, por ejemplo como una disolución en 1,3-butanodiol. Entre los vehículos y disolventes aceptables que pueden emplearse se encuentran el agua, la disolución de Ringer y la disolución de cloruro sódico isotónica. Además, convencionalmente se emplean aceites fijos estériles como disolvente o medio de suspensión. Para este propósito, puede emplearse cualquier aceite fijo que incluya mono- o di-glicéridos sintéticos. Los ácidos grasos, tales como el ácido oleico y sus glicéridos derivados, son útiles en la preparación de productos inyectables, ya que se trata de aceites naturales farmacéuticamente aceptables, tal como el aceite de oliva o de ricino, especialmente en sus versiones polioxietiladas. Estas disoluciones o suspensiones de aceite también pueden contener un diluyente o dispersante de alcohol de cadena larga, tal como carboximetil celulosa u otros agentes dispersantes similares que se usan habitualmente en la formulación de formas de dosis farmacéuticamente aceptables que incluyen emulsiones y suspensiones. Para los propósitos de formulación también pueden usarse otros tensioactivos usados comúnmente, tales como los Tweens, Spans, y otros agentes emulsificantes o potenciadores de la biodisponibilidad que se usan habitualmente en la fabricación de formas de dosis sólidas o líquidas farmacéuticamente aceptables.

Las composiciones farmacéuticas de esta invención también pueden administrarse oralmente en cualquier forma de dosis aceptable oralmente que incluye, aunque sin limitación, cápsulas, comprimidos, suspensiones o disoluciones acuosas. En el caso de comprimidos para uso oral, los vehículos que se usan habitualmente incluyen lactosa y almidón de maíz. También se añaden típicamente agentes lubricantes, tales como el estearato de magnesio. Para administración oral en forma de cápsula, los diluyentes útiles incluyen lactosa y almidón de maíz seco. Cuando se requieren suspensiones acuosas para uso oral, el ingrediente activo se combina con agentes emulsificantes y de suspensión. Si se desea, también se pueden añadir determinados agentes edulcorantes, aromatizantes o colorantes.

Alternativamente, las composiciones farmacéuticas de esta invención pueden administrarse en forma de supositorios para administración rectal. Éstos pueden prepararse mezclando el agente con un excipiente no irritante adecuado que sea sólido a temperatura ambiente pero líquido a la temperatura rectal y que, por tanto, se funda en el recto para liberar el fármaco. Dichos materiales incluyen manteca de cacao, cera de abeja y polietilenglicoles.

Las composiciones farmacéuticas de esta invención también pueden administrarse tópicamente, especialmente cuando el objetivo del tratamiento incluye áreas u órganos fácilmente accesibles mediante aplicación tópica, lo que incluye enfermedades oculares, de la piel o del tracto intestinal inferior. Para cada una de dichas áreas u órganos se pueden preparar fácilmente formulaciones tópicas adecuadas.

La aplicación tópica para el tracto intestinal inferior puede efectuarse en una formulación de supositorio rectal (ver más arriba) o en una formulación de enema adecuada. También pueden usarse parches transdermales tópicos. Para las aplicaciones tópicas, las composiciones farmacéuticas pueden formularse en una pomada adecuada que contenga el componente activo suspendido o disuelto en uno o más vehículos. Los vehículos para la administración tópica de los compuestos de esta invención incluyen, aunque sin limitación, aceite mineral, vaselina líquida, vaselina blanca, propilenglicol, polioxietileno, compuesto de polioxipropileno, cera emulsificante y agua. Alternativamente, las composiciones farmacéuticas pueden formularse en una loción o crema adecuadas que contengan los componentes activos suspendidos o disueltos en uno o más vehículos farmacéuticamente aceptables. Los vehículos adecuados incluyen, aunque sin limitación, aceite mineral, monoestearato de sorbitán, polisorbato 60, cera de ésteres de cetilo, alcohol cetearílico, 2-octildodecanol, alcohol bencílico y agua.

Para uso oftálmico, las composiciones farmacéuticas pueden formularse como suspensiones micronizadas en disolución salina estéril isotónica de pH ajustado, o, preferiblemente, como disoluciones en disolución salina estéril isotónica de pH ajustado, con o sin un conservante tal como el cloruro de bencilalconio. Alternativamente, para usos oftalmológicos, las composiciones farmacéuticas pueden formularse en una pomada tal como vaselina.

Las composiciones farmacéuticas de esta invención también pueden administrarse mediante aerosol nasal o inhalación. Dichas composiciones se preparar de acuerdo a técnicas bien conocidas en la técnica de la formulación farmacéutica y pueden prepararse como disoluciones en disolución salina, empleando alcohol bencílico u otros conservantes adecuados, promotores de absorción para potenciar la biodisponibilidad, fluorocarbonos, y/u otros agentes de solubilización o dispersión convencionales.

A fin de que esta invención sea comprendida más completamente, se presentan los siguientes Ejemplos preparativos y de evaluación. Dichos Ejemplos tienen propósitos ilustrativos únicamente y no pretenden limitar en modo alguno el alcance de la invención.

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Ejemplos sintéticos Ejemplo 1 Preparación de 2-(2-fluorofenil)-4-pirrolo[3,2-c]piridin-1-ilquinazolina

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39

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Etapa A

Preparación de 2-(2-fluorobenzoil)aminobenzamida

40

Se disolvió 2-aminobenzamida (1 g, 7,3 mmol) en cloroformo (25 mL) en un matraz de fondo redondo de 50 mL y se enfrió hasta 0ºC. Se añadió piridina (0,6 mL, 7,3 mmol) seguida de cloruro de 2-fluorobenzoilo (1 mL, 8 mmol) y la mezcla se agitó magnéticamente durante 1 h a esa temperatura. Se añadió ácido clorhídrico al 10% (50 mL) y el sólido precipitado se filtró, se lavó y se secó para proporcionar el compuesto del título puro (1,56 g, 82%).

Etapa B

Preparación de 2-(2-fluorofenil)-3H-quinazolin-4-ona

41

La 2-(2-fluorobenzoil)aminobenzamida de la Etapa A (1,56 g, 6 mmol) se suspendió en etanol (10 mL) en un matraz de fondo redondo de 50 mL y se le añadió hidróxido sódico (0,92 g, 23 mmol) en 1 mL de agua, y la mezcla se calentó hasta 80ºC durante 1 h. Se eliminó el etanol mediante evaporación y el residuo se llevó a pH 2 mediante adición gota a gota de ácido clorhídrico concentrado. El sólido se filtró y se secó para proporcionar el compuesto del título (0,86 g, 61%). MS (ES) 241,1 (M+H)^{+}.

Etapa C

Preparación de 4-cloro-2-(2-fluorofenil)quinazolina

42

La 2-(2-fluorofenil)-3H-quinazolin-4-ona de la Etapa B (0,86 g, 3,5 mmol) se suspendió en cloroformo en un matraz de fondo redondo de 50 mL equipado con un agitador magnético. El matraz se enfrió hasta 0ºC y se le añadió cloruro de tionilo (1,2 mL) gota a gota seguido de N,N-dimetilformamida (0,01 mL) y la mezcla se calentó hasta 80ºC durante 4 horas. Se eliminó el disolvente mediante evaporación en un rotavapor para dejar el compuesto del título en forma de un sólido (0,68 g, 73%). MS (ES) 259,1 (M+H)^{+}.

Etapa D

Preparación del compuesto del título

La 4-cloro-2-(2-fluorofenil)quinazolina de la Etapa C (0,1 g, 0,38 mmol) se disolvió en N,N-dimetilformamida (1 mL) y se le añadió 1H-pirrolo[3,2-c]piridina (0,046 g, 0,38 mmol) seguida de carbonato de cesio (0,134 g, 0,41 mmol). La mezcla se agitó magnéticamente y se calentó hasta 100ºC durante 0,5 h. Se eliminó el disolvente y se obtuvo el compuesto del título puro después de purificación en columna en un HPLC de columna de fase inversa, usando un gradiente de agua y acetonitrilo que contiene un 0,1% de ácido trifluoroacético para generar 0,072 g (56%). MS (ES) 340,1 (M+H)^{+}.

Ejemplo 2 Preparación de 4-(2,3-dihidro-pirrolo[3,2-c]piridin-1-il)-2-(2-fluorofenil)quinazolina

43

La 4-cloro-2-(2-fluorofenil)quinazolina de la Etapa C del Ejemplo 1 (0,04 g, 0,15 mmol) se disolvió en N,N-dimetilformamida (0,5 mL) y se le añadió 2,3-dihidro-1H-pirrolo[3,2-c]piridina (0,02 g, 0,16 mmol) seguida de carbonato de cesio (0,12 g, 0,36 mmol). La mezcla se agitó magnéticamente a temperatura ambiente durante 0,5 h. Se eliminó el disolvente y se obtuvo el compuesto del título puro después de purificación en columna en un HPLC de columna de fase inversa, usando un gradiente de agua y acetonitrilo que contiene un 0,1% de ácido trifluoroacético para generar 0,01 g (19%). MS (ES) 343,0 (M+H)^{+}.

Ejemplo 3 Preparación de [2-(2-fluorofenil)-4-pirrolo[3,2-c]piridin-1-ilquinazolin-6-il]metilamina

44

Etapa A

Preparación de 2-amino-5-bromobenzamida

45

Se suspendió 6-bromo-1H-benzo[d][1,3]oxacina-2,4-diona (5 g, 20 mmol) en 30 mL de tetrahidrofurano y se burbujeó a través suyo NH_{3} gas durante 1,5 h. Se eliminó el disolvente en un rotavapor y el residuo se particionó entre cloruro de metileno y agua. El sólido se filtró y se secó para proporcionar el compuesto del título (3,8 g, 85%).

Etapa B

Preparación de 2-(2-fluorobenzoil)amino-5-bromobenzamida

46

Se disolvió 2-amino-5-bromobenzamida (2 g, 9,3 mmol) en cloroformo (40 mL) en un matraz de fondo redondo de 50 mL y se enfrió hasta 0ºC. Se añadió piridina (0,8 mL, 9,3 mmol) seguida de cloruro de 2-fluorobenzoilo (1.3 mL, 10 mmol) y la mezcla se agitó magnéticamente durante 1 h a esa temperatura. Se añadió ácido clorhídrico al 10% (50 mL) y el sólido precipitado se filtró, se lavó y se secó para proporcionar el compuesto del título puro (1,8 g, 57%).

Etapa C

Preparación de 6-bromo-2-(2-fluorofenil)-3H-quinazolin-4-ona

47

La 2-(2-fluorobenzoil)amino-5-bromobenzamida de la Etapa B (1,7 g, 5 mmol) se suspendió en etanol (10 mL) en un matraz de fondo redondo de 50 mL y se le añadió hidróxido sódico (0,4 g, 10 mmol) en 1 mL de agua, y la mezcla se calentó hasta 80ºC durante 1 h. Se eliminó el etanol mediante evaporación y el residuo se llevó a pH 2 mediante adición gota a gota de ácido clorhídrico concentrado. El sólido se filtró y se secó para proporcionar el compuesto del título (1,56 g, 96%). MS (ES) 320,9 (M+H)^{+}.

Etapa D

Preparación de 6-bromo-4-cloro-2-(2-fluorofenil)quinazolina

48

La 6-bromo-2-(2-fluorofenil)-3H-quinazolin-4-ona de la Etapa C (1,5 g, 4,6 mmol) se suspendió en cloroformo en un matraz de fondo redondo de 50 mL equipado con un agitador magnético. El matraz se enfrió hasta 0ºC y se le añadió cloruro de tionilo (1,6 mL) gota a gota seguido de N,N-dimetilformamida (0,01 mL) y la mezcla se calentó hasta 80ºC durante 4 horas. Se eliminó el disolvente mediante evaporación en un rotavapor para dejar el compuesto del título en forma de un sólido (1,43 g, 90%). MS (ES) 338 (M+H)^{+}.

Etapa E

Preparación de 6-bromo-2-(2-fluorofenil)-4-pirrolo[3,2-c]piridin-1-ilquinazolina

49

La 6-bromo-4-cloro-2-(2-fluorofenil)quinazolina de la Etapa D (1 g, 2,9 mmol) se disolvió en N,N-dimetilformamida (3 mL) y se le añadió 1H-pirrolo[3,2-c]piridina (0,346 g, 2,9 mmol) seguida de carbonato de cesio (0,961 g, 2,9 mmol). La mezcla se agitó magnéticamente a temperatura ambiente durante 1 h. Se añadió agua y el producto se filtró para proporcionar el compuesto del título (1,236 g, 98%). MS (ES) 420 (M+H)^{+}.

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Etapa F

Preparación de éster terc-butílico de ácido [2-(2-fluorofenil)-4-pirrolo[3,2-c]piridin-1-ilquinazolin-6-il]metilcarbámico

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50

La 6-bromo-2-(2-fluorofenil)-4-pirrolo[3,2-c]piridin-1-ilquinazolina de la Etapa E (0,1 g, 0,23 mmol) se disolvió en tetrahidrofurano (5 mL) en un matraz de fondo redondo de 50 mL. A continuación se añadieron carbonato de cesio (0,11 g, 0,35 mmol), Xanphos (0,007 g, 0,002 mmol) y éster terc-butílico de ácido metilcarbámico (0,045 g, 0,35 mmol). La mezcla se desgasificó durante 5 minutos y se añadió tris (dibencilidinacetona)dipaladio(0) (0,005 g, 0,005 mmol). A continuación se agitó magnéticamente la disolución resultante y se calentó a 80ºC durante 3 h. Se añadió agua y se extrajo el compuesto en acetato de etilo, se secó sobre sulfato sódico y se concentró en un rotavapor para proporcionar el compuesto del título deseado (0,066 g, 58%). MS (ES) 470,1 (M+H)^{+}.

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Etapa G

Preparación del compuesto del título

Se llevó el éster terc-butílico de ácido [2-(2-fluorofenil)-4-pirrolo[3,2-c]piridin-1-ilquinatolin-6-il]metilcarbámico de la Etapa F (0,066 g, 0,14 mmol) a un matraz de fondo redondo de 25 mL y se le añadió ácido clorhídrico 4 N en dioxano (0,5 mL) y se agitó magnéticamente la mezcla a temperatura ambiente durante 0,5 h. Se eliminó el disolvente y se obtuvo el compuesto del título puro después de purificación en columna en un HPLC de columna de fase inversa, usando un gradiente de agua y acetonitrilo que contiene un 0,1% de ácido trifluoroacético para generar 0,016 g (30%). MS (ES) 370,1 (M+H)^{+}.

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Ejemplo 4 Preparación de 3-[2-(2-fluorofenil)-4-pirrolo[3,2-c]piridin-1-ilquinazolin-6-il]benzamida

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51

La 6-bromo-2-(2-fluorofenil)-4-pirrolo[3,2-c]piridin-1-ilquinazolina de la Etapa E del Ejemplo 3 (0,1 g, 0,23 mmol) se disolvió en tetrahidrofurano (5 mL). Se añadieron carbonato sódico (0,075 g, 0,7 mmol) y ácido benzamida-3-borónico (0,040 g, 0,24 mmol) seguidos de tetraquis(trifenilfosfina)paladio(0) (0,005 g, 0,004 mmol) tras desgasificar durante 5 minutos. Se añadió agua (0,5 mL) gota a gota y la mezcla se agitó magnéticamente y se calentó a 80ºC durante 4 h. Se añadió agua y el producto se extrajo con acetato de etilo. La capa de acetato de etilo se secó y se evaporó en un rotavapor y el residuo se purificó usando un HPCL de columna de fase inversa empleando un gradiente de acetonitrilo y agua que contiene 0,1% de ácido trifluoroacético para proporcionar el compuesto del título (0,028 g, 25%). MS (ES) 460,0 (M+H)^{+}.

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Ejemplo 5 Preparación de 2-(5-clorotiofen-2-il)-4-(2,3-dihidro-pirrolo[3,2-c]piridin-1-il)-3-fluoroquinolina

Etapa A

Preparación de 4-(2, 3-dihidro-pirrolo [3,2-c]piridin-1-il)-3-fluoroquinolina

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52

Se llevó 3-fluoro-4-yodoquinolina (0,2 g, 0,73 mmol) en un matraz de fondo redondo de 25 mL y se le añadió tetrahidrofurano (15 mL), xantphos (0,015 g, 0,02 mmol), carbonato de cesio (0,476 g, 1,4 mmol), 5-azaindolina (0,087 g, 0,73 mmol). La mezcla se desgasificó durante 5 minutos. Se añadió tris(dibencilidinacetona)dipaladio(0) (0,0025 g, 0,0025 mmol) y la mezcla se calentó a 80ºC durante 48 horas. Se añadió agua y se extrajo el compuesto en acetato de etilo, se secó sobre sulfato sódico y se concentró en un rotavapor para proporcionar el compuesto deseado (0,132 g, 67%). MS (ES) 266,1 (M+H)^{+}.

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Etapa B

Preparación de 4-(2,3-dihidro-pirrolo[3,2-c]piridin-1-il)-3-fluoro-2-yodoquinolina

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53

Se añadió diisopropilamina (0,052 mL, 0,5 mmol) a un matraz de fondo redondo de 50 mL que contenía tetrahidrofurano (5 mL) y se agitó magnéticamente. Se enfrió el matraz hasta 0ºC y se añadió gota a gota butil-litio (0,146 mL, disolución 2,5 M en hexano, 0,5 mmol). Después de 10 minutos se enfrió el contenido hasta -78ºC y se añadió a lo largo de 15 minutos la 4-(2,3-dihidro-pirrolo[3,2-c]piridin-1-il)-3-fluoroquinolina de la Etapa A (0,100 g, 0,37 mmol) en 20 mL de tetrahidrofurano. Se continuó con la agitación durante otras 2 horas, tras lo cual se añadió yodo (0,086 g, 0,38 mmol) en 10 mL de tetrahidrofurano. La mezcla de reacción se mantuvo a -78ºC durante 2 h. Se añadió agua y tetrahidrofurano (5 mL, 1:9). La mezcla de reacción se diluyó con acetato de etilo, se lavó con agua y salmuera. La purificación mediante columna de gel de sílice proporcionó el compuesto del título puro (0,97 g, 65%). MS (ES) 393,1 (M+H)^{+}.

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Etapa C

Síntesis del compuesto del título

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54

La 4-(2,3-dihidro-pirrolo[3,2-c]piridin-1-il)-3-fluoro-2-yodoquinolina de la Etapa B (0,025 g, 0,063 mmol) se disolvió en tetrahidrofurano (5 mL) en un matraz de fondo redondo de 25 mL equipado con un agitador magnético. Se añadió carbonato sódico (0,06 g, 0,1 mmol) seguido de ácido 5-clorotiofeno-2-borónico (0,019 g, 0,08 mmol) y la mezcla se desgasificó durante 5 minutos. Se añadió tetraquis(trifenilfosfina)-paladio(0) (5 mg, 5 mol%) seguido de 0,5 mL de agua y la reacción se calentó a 80ºC durante 4 h. El compuesto fue extraído con acetato de etilo, secado y concentrado a vacío. El compuesto del título se purificó mediante HPLC sobre una columna de fase inversa usando un gradiente de acetonitrilo y agua que contiene 0,1% de ácido trifluoroacético para producir el compuesto deseado (0,012 g, 52%). MS (ES) 482,4 (M+H)^{+}.

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Métodos de ensayo

Los siguientes métodos de ensayo fueron usados para evaluar los compuestos de la presente invención:

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Ensayo de autofosforilación de GST-ALK5

El dominio citoplasmático de ALK5 se fusionó a glutationa S-transferasa (GST) y la proteína de fusión GST-ALK5 fue expresada en un sistema de expresión de baculovirus. Se aíslo la GST-ALK5 con partículas de glutationa Sepharose 4B (Pharmacia Biotech, Suecia) y se almacenó a -80ºC hasta su uso.

Para la detección de autofosforilación de GST-ALK5 y el escrutinio de compuestos inhibidores, se añadió una alícuota de GST-ALK5 en 1x tampón de quinasa que incluye [^{33}P]-\gamma-ATP a placas de 96 pocillos en presencia o en ausencia de los compuestos. A continuación se incubó la mezcla a temperatura ambiente durante 30 minutos y se transfirió a cada pocillo en un placa filtrante y a vacío. Entonces la placa filtrante fue lavada 3 veces y se contabilizó la radioactividad de cada pocillo en un Packard TopCount.

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Quinasa in vitro de HA-ALK5

Se transfectó una construcción de expresión que contiene ALK5 de longitud completa marcado en el C terminal con HA en células COS7, y se aisló HA-ALK5 mediante inmunoprecipitación con anticuerpos anti-HA. Se añadieron alícuotas de HA-ALK5 inmunoprecipitado en 1x tampón de quinasa más [^{33}P]-\gamma-ATP a placas de 96 pocillos en presencia y en ausencia de las diferentes concentraciones de compuestos ensayados, y se incubaron a temperatura ambiente durante 60 minutos. A continuación la mezcla de reacción se transfirió a una placa filtrante. La placa se lavó tres veces y se contabilizó la radioactividad de cada pocillo. Se determinó el valor IC_{50} correspondiente a cada compuesto usando el programa Prism3.

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Ensayo ELISA para fosforilación de Smad2 estimulada por TGF-\beta

Se trataron fibroblastos de pulmón humano normales (NHLF) agotados en suero en placas de 24 pocillos con o sin diferentes concentraciones de compuesto ensayado durante 30 minutos. A continuación las células fueron estimuladas con TGF-\beta durante una hora. Tras ser fijadas, permeabilizadas y bloqueadas, las células fueron incubadas con anticuerpos específicos fosfo-Smad2 seguido de anticuerpos secundario conjugado con HRP. La extensión de la fosforilación Smad2 fue detectada a continuación usando sustrato HRP y leyendo con un lector de placas ELISA. Se determinó la IC_{50} correspondiente a cada compuesto evaluado usando el programa PRISM3.

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Ensayo ELISA correspondiente a secreción de PAl-1 estimulada por TGF-\beta

Se trataron NHLF agotadas en suero en placas de 24 pocillos con o sin concentraciones diferentes de compuestos ensayados durante 30 minutos. A continuación las células fueron estimuladas con TGF-\beta e incubadas en una incubadora a 37ºC durante 24 horas. Se recogieron los medios y añadieron a placas de 96 pocillos con anticuerpos anti-PAl-1. El PAl-1 segregado se detectó a continuación con otro anticuerpo específico de PAl-1 seguido de anticuerpo secundario conjugado a HRP. La secreción de PAl-1 fue detectada usando sustrato HRP y leyendo con un lector de placas ELISA. Se determinó la IC_{50} correspondiente a cada compuesto evaluado usando el programa PRISM3.

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Ensayo de colágeno SIRCOL para células estimuladas por TGF-\beta

Se trataron NHLF agotadas en suero en placas de 24 pocillos con o sin concentraciones diferentes de compuestos ensayados durante 30 minutos. A continuación las células fueron estimuladas con TGF-\beta e incubadas durante 24 horas. Los medios fueron recogidos y se añadió reactivo colorante SIRCOL. Tras girar y lavar, las partículas fueron resuspendidas en reactivo alcalino y leídas con un lector de placas ELISA. Se determinó el valor IC_{50} correspondiente a cada compuesto ensayado usando el programa PRISM3.

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Detección de expresión de fibronectina estimulada por TGF-\beta

Se trataron NHLF agotadas en suero en placas de 24 pocillos con o sin concentraciones diferentes de compuestos ensayados durante 30 minutos. A continuación las células fueron estimuladas con TGF-\beta e incubadas durante 24 horas. Tras lavar y fijar, la fibronectina segregada fue incubada con anticuerpos específicos de fibronectina, seguido de incubación con anticuerpo secundario marcado con biotina, estreptavidina-peroxidasa y sustrato HRP. A continuación se detectó la señal usando un lector ELISA. Se determinó el valor IC_{50} correspondiente a cada compuesto ensayado usando el programa PRISM3.

La autofosforilación de GST-ALK5 se desarrolló para el escrutinio primario de los compuestos que inhiben la señalización de TGF-\beta mediante la interacción con ALK5. El ensayo HA-ALK5 es un ensayo de escrutinio secundario para confirmar los compuestos inhibidores que fueron seleccionados en el escrutinio primario, y también para la determinación del valor IC_{50} correspondiente a cada compuesto.

Los ensayos de P-Smad2, PAI-1 y colágeno son ensayos basados en células que se usan para la determinación de actividades funcionales de los compuestos del escrutinio secundario. Puesto que las moléculas son dianas de la señalización TGF-\beta, los datos demostraron que los compuestos inhiben específicamente la transducción de señal mediada por TGF-\beta.

Los compuestos seleccionados fueron evaluados en ensayos con otras quinasas para determinar la selectividad correspondiente a la quinasa ALK5. Otras quinasas evaluadas incluyen ALK6, p38, FYN, así como el receptor PDGF. Los compuestos preferidos proporcionan un valor IC_{50} en el ensayo ALK5 por debajo de 200 nM y se ha descubierto que son más potentes contra el ALK5 respecto a las otras quinasas evaluadas. Los más preferidos son los compuestos que son al menos diez veces más activos contra ALK5 que p38, determinado mediante el valor IC_{50} obtenido en un ensayo de inhibición in vitro estándar.

Aunque hemos presentado una serie de realizaciones de esta invención, es evidente que nuestra construcción básica puede ser alterada para proporcionar otras realizaciones que utilizan los compuestos y métodos de esta invención. Por lo tanto, debe apreciarse que el alcance de esta invención queda definido por las reivindicaciones anexas más que por las realizaciones específicas que han sido presentadas a modo de ejemplo.

Claims

1. Un compuesto de fórmula I:

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o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde:

Z: es N ó C-F;

El anillo A está sustituido opcionalmente con 1-3 R^{1};

cada R^{2} se selecciona independientemente entre C_{1-3} alifático, hidroxi, -N(R^{3})_{2}, halo, ciano, -OR^{4}, -C(O)R^{4}, -CO_{2}R^{4}, -SR^{4}, -S(O)R^{4}, -S(O)_{2}R^{4}, -N(R^{3})C(O)R^{4}, -N(R^{3})CO_{2}R^{4}, -N(R^{3})SO^{2}R^{4}, -C(O)N(R^{3})_{2}, -SO_{2}N(R^{3})_{2}, -N(R^{3})C(O)N(R^{3})_{2}, -OC(O)R^{4}, fenilo sustituido opcionalmente con uno o más halógenos, heterociclilo de 5-6 miembros o heteroarilo de 5-6 miembros sustituido opcionalmente con uno o más halógenos;

cada T es de forma independiente un alquilideno C_{1-5} que es una cadena carbonada lineal o ramificada, que puede estar completamente saturada o tener una o más unidades de insaturación, que está opcionalmente interrumpido con -O-, -C(O)-, -S-, -S(O)-, -S(O)_{2}- ó -N(R^{3})-;

cada R^{3} se selecciona independientemente entre hidrógeno, C_{1-6} alifático, -(O)R^{4}, -C(O)_{2}R^{4}, -SO_{2}R^{4}, o dos R^{3} del mismo nitrógeno, junto con dicho átomo de nitrógeno, forman un heterociclilo o heteroarilo de 5-6 miembros que tiene 1-3 heteroátomos en el anillo seleccionados entre nitrógeno, oxígeno o azufre;

cada R^{6} se selecciona independientemente entre alquilo C_{1-4}, alcoxi-C_{1-4}, amino, o C_{1-4} mono- o dialquilamino en donde el alquilo del mono- o dialquilamino está opcionalmente sustituido con un fenilo; y

R^{7}: se selecciona entre halo, -OH, -N(R^{3})_{2}, ciano, -OR^{4}, -C(O)R^{4}, -CO_{2}R^{4}, -SR^{4}, -S(O)R^{4}, -S(O)_{2}R^{4}, -N(R)C(O)R^{4}, -N(R^{3})CO_{2}R^{4}, -N(R^{3})SO_{2}R^{4}, -C(O)N(R^{3})_{2}, -SO_{2}N(R^{3})_{2}, -N(R^{3})C(O)N(R^{3})_{2} ó -OC(O)R^{4};

en donde un grupo alifático es un hidrocarburo no aromático de cadena lineal, ramificada o cíclica que está completamente saturado o que contiene una o más unidades de insaturación.

2. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, que tiene una o más características seleccionadas del grupo que consiste en:

(d): R^{1} es R^{2}, T-R^{2} ó V-T-R^{3} en donde R^{2} es halo, alifático C_{1-3}, alcoxi C_{1-3}, amino, mono- o di-alquil-C_{1-6} amino, T es una cadena de alquilideno C_{1-4}, que es una cadena carbonada lineal o ramificada que puede estar completamente saturada o que puede tener una o más unidades de insaturación, que está opcionalmente interrumpido con -C(=O)-, V es -O- ó -N(R^{3})-, y R^{3} es hidrógeno o metilo; y

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3. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 2, que tiene las características (a) a (e).

4. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en el que a-b es CH=CH.

5. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en el que a-b es CH=N.

6. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en el que a-b es N=CH.

7. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en el que a-b es CH_{2}CH_{2}.

8. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en el que a-b es CH_{2}CH_{2}CH_{2}.

9. Un compuesto seleccionado del grupo que consiste en:

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10. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 ó 9 y un vehículo farmacéuticamente aceptable.

11. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 11, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para su uso como medicamento.

12. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 ó con la reivindicación 9, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para uso en el tratamiento de una enfermedad seleccionada del grupo que consiste en enfermedad renal crónica, enfermedad renal aguda, curación de lesiones, artritis, osteoartritis, enfermedad del riñón, fallo cardiaco congestivo, úlceras, trastornos oculares, lesiones de córnea, nefropatía diabética, función neurológica afectada, enfermedad de Alzheimer, afecciones tróficas y aterosclerosis.

13. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 ó con la reivindicación 9, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para uso en el tratamiento de fibrosis hepática o de fibrosis de riñón.

14. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 ó con la reivindicación 9, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para uso en inhibición de formación de matriz.

15. Uso de un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 ó con la reivindicación 9, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de enfermedad renal crónica, enfermedad renal aguda, curación de lesiones, artritis, osteoartritis, enfermedad del riñón, fallo cardiaco congestivo, úlceras, trastornos oculares, lesiones de córnea, nefropatía diabética, función neurológica afectada, enfermedad de Alzheimer, afecciones tróficas, aterosclerosis, fibrosis hepática o fibrosis de riñón.