ES2298724T3

ES2298724T3 - Suministro de un ains a partir de agentes embolicos.

Info

Publication number: ES2298724T3
Application number: ES04713577T
Authority: ES
Inventors: Andrew Lennard Biocompatibles UK Limited LEWIS; Peter William Biocompatibles UK Ltd. STRATFORD; Simon W. Biocompatibles UK Limited LEPPARD
Original assignee: Biocompatibles UK Ltd
Current assignee: Biocompatibles UK Ltd
Priority date: 2003-02-21
Filing date: 2004-02-23
Publication date: 2008-05-16
Anticipated expiration: 2024-02-23
Also published as: DE602004010492D1; US20060057198A1; DE602004010492T2; EP1594472A1; EP1594472B1; ATE380019T1; WO2004073688A1; CA2516736A1

Abstract

Uso de polímero hinchable en agua, insoluble en agua, en forma de partículas que tienen tamaños de partículas, cuando se equilibran en agua a 37ºC, en el intervalo de 100 a 1200 mim, y, asociado con el polímero en una forma liberable, un agente farmacéuticamente activo que es un agente antiinflamatorio no esteroideo seleccionado de entre celecoxib, rofecoxib, diclofenaco, diflunisal, etodolaco, flurbiprofeno, ibuprofeno, indometacina, quetoprofeno, quetorolaco, nabumetona, naproxeno, oxaprozina, piroxicam, ácido salicílico, salicilato de acetilo, sulindaco, tolmetina, y sus sales farmacéuticamente aceptables, en la preparación de una composición para la formación de embolias en el fibroide uterino, en el que el ingrediente farmacéuticamente activo se libera del polímero en el sitio de la formación de la embolia.

Description

Suministro de un AINS a partir de agentes embólicos.

La presente invención se refiere a composiciones que producen la embolia de fibroides uterinos, y suministran fármacos en el sitio de la embolia. Los fármacos son fármacos antiinflamatorios no esteroideos (AINS), y tienen propiedades inhibidoras de ciclooxigenasa (COX), que reducirán la inflamación provocada por la embolia.

La terapia de formación de embolias implica la introducción de un agente en la vasculatura a fin de provocar el bloqueo deliberado de un vaso particular. Este tipo de terapia es particularmente útil para bloquear conexiones anormales entre arterias y venas (tales como malformaciones arteriovenosas, o MAV), y también para ocluir vasos que alimentan a ciertos tumores intervascularizados, a fin de privar de alimento al tejido anormal, y provocar su necrosis y contracción. Una aplicación de la emboloterapia que está recibiendo una atención cada vez mayor es el tratamiento de fibroides uterinos. Los fibroides uterinos o leiomiomata son el tumor más habitual encontrado en las mujeres. Los fibroides son tumores clonales benignos que surgen de las células del músculo liso del útero. Aproximadamente el 25% de las mujeres premenopáusicas sufren fibroides, mientras que la prevalencia global de estos tumores podría ser tan elevada como 77%. La incidencia de fibroides en mujeres afroamericanas es tres veces la de las mujeres caucásicas. Los fibroides pueden aparecer en cualquier edad, pero son muy habituales en mujeres de la edad de aproximadamente 40 años. Tras la menopausia, los fibroides habitualmente sufren una regresión de tamaño debido a la falta de estimulación hormonal, lo que puede dar como resultado el infarto.

La razón fundamental para utilizar la formación de embolias para tratar fibroides uterinos se puede rastrear hasta varias indicaciones conocidas para la emboloterapia. En primer lugar, la formación de embolias se ha usado con éxito como un tratamiento paliativo en pacientes con cáncer terminal, para el alivio sintomático. Ejemplos de esto incluyen pacientes con metástasis óseas que surgen de carcinoma de células renales, y pacientes con tumores hepáticos inoperables (hepatoma y metástasis de colon). La razón del por qué este procedimiento funciona en este escenario es debida a que, al privar a un tumor de su suministro sanguíneo, disminuye finalmente el tamaño del tumor, dando como resultado el alivio de los síntomas relacionados con la masa. En segundo lugar, se ha demostrado que la formación de embolias reduce la vascularidad de los tumores antes de la escisión quirúrgica, reduciendo de ese modo la pérdida sanguínea intraoperativa; esta indicación se ha utilizado para carcinomas de células renales y tumores de la médula espinal antes de la resección. En tercer lugar, la formación de embolias se ha usado con éxito para controlar la hemorragia relacionada con tumores en sitios distribuidos por todo el cuerpo. Los ejemplos de este éxito incluyen la hemorragia derivada de carcinoma de células renales, tumores de la vejiga, angiomiolipoma, y adenomas hepáticos. Finalmente, la formación de embolias se ha usado con éxito para controlar la hemorragia uterina anormal debido a cánceres ginecológicos (endometrial, de cuello uterino y ovárico), hemorragia después del parto, hemorragia tras la cirugía, hemorragia debida a un embarazo ectópico, y hemorragia debido a malformaciones arteriovenosas (AV) congénitas. Un artículo reciente de Vedantham, et al. Appl. Radiol., 31(10):9-17, 2002, repasa las indicaciones para la formación de embolias en la arteria uterina en la población de pacientes de obstetricia y ginecológicas.

En los estudios principales de la formación de embolias para el fibroide uterino, hasta la fecha, el material embólico usado más frecuentemente es alcohol polivinílico en partículas, que se ha clasificado según su tamaño de partículas. El gel se suministra en forma de suspensión en un vehículo acuoso, usando un microcatéter, suministrado a una o a ambas arterias uterinas.

Un inconveniente del procedimiento de formación de embolias en fibroide uterina (UFE) es el dolor asociado que puede experimentar la paciente. Por esta razón, la sedación consciente y la analgesia son críticas para el resultado con éxito de un procedimiento de UFE. Esto no sólo ayuda a reducir la ansiedad, sino que resuelve más específicamente el dolor pélvico agudo, los cólicos y las náuseas, que se denomina síndrome postembolización. Inmediatamente tras el procedimiento de UFE, la paciente puede usar una bomba de analgesia para autoadministrarse una sustancia narcótica que la alivie el dolor. La complementación con analgésicos sistémicos ayuda a reducir la cantidad de narcótico usado, combatiendo el dolor y la formación de cólicos. A partir de cuatro de los ensayos enumerados por Vedantham et al., a pesar del elevado éxito del procedimiento, se encuentra dolor como resultado principal.

Por lo tanto, el control del dolor periprocedimental es de suma importancia, puesto que puede representar la principal morbidez del procedimiento. El dolor generalmente comienza de forma temprana tras la formación de la embolia, y alcanza su mayor intensidad 24 a 48 horas después de la formación de la embolia. La mayoría de los protocolos contra el dolor usan una combinación de opioides, tales como un derivado de oxicodona, y un antiinflamatorio no esteroideo (AINS), tal como ibuprofeno o quetorolaco. El control exitoso del dolor permite potencialmente que este procedimiento se realice sobre pacientes externos. Los primeros estudios que intentaron llevar a cabo un UFE como un procedimiento para pacientes externos dieron a conocer que el 15% de las pacientes volvían al hospital para el control del dolor. No se debería de usar lidocaína intraarterial en un intento por reducir el dolor, puesto que provoca una gran cantidad de espasmo (Keyoung JA, Levy EB, Roth AR, et al., Intraarterial lidocaine for pain control after uterine artery embolization for leiomyomata. J Vasc Intervent Radiol. 2001; 12:1065-1069). El síndrome de postembolización, con dolor intenso, fiebre, y elevación del recuento de glóbulos blancos, se produce en 34% de las pacientes. (Goodwin SC, McLucas B, Lee M, et al., Uterine artery embolization for the treatment of uterine leiomyomata midterm results. J Vasc Intervent Radiol. 1999; 10:1159-1165).

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Siskin et al., (Siskin GP, Stainken BF, Dowling K, et al. Outpatient uterine artery embolization for symptomatic uterine fibroids: Experience in 49 patients: J Vasc Intervent Radiol. 2000; 11:305-311) dieron a conocer un alta hospitalaria exitosa del 95,9% después de 8 horas de observación tras el procedimiento. Sin embargo, se ha admitido que esto es un régimen del manejo del dolor muy complejo, que comprende administraciones tanto intravenosas IV como orales (Burbak F, et al., J Am Soc Gyn Laparoscopists 7(4), S1-49, 2000). Además, los autores trabajaron sobre esta observación atípica en (Siskin et al., Techniques in Vascular and Interventional Radiology, 5(1), 35-43, 2002), documento en el que exponen que el manejo del dolor varía tan ampliamente entre hospitales de manera que existe la necesidad médica de mantener a las pacientes en el hospital para observación durante las primeras 24-48 h del tratamiento del dolor. La capacidad para dar de alta de forma hospitalaria a pacientes dentro del mismo día es a menudo imposible, y sólo se puede realizar si el procedimiento comienza temprano en la mañana y acaba tarde en la tarde del mismo día. La observación por el personal hospitalario es necesaria durante el suministro de la bomba de PCA del opiáceo, y excluye cualquier alta hospitalaria temprana. Las observaciones de los procedimientos dentro de un hospital en el Reino Unido indicaron que la baja incidencia del tratamiento de UFE fue debida a la disponibilidad de camas para permanecer en el hospital, en lugar de la realización del procedimiento por las pacientes y por el
radiólogo.

Aunque el procedimiento de UFE se considera muy seguro, cualquier procedimiento médico tiene algunos riesgos asociados. La mayoría de las pacientes padecen cólicos después de UFE. La intensidad del dolor varía de una paciente a otra. El dolor está relacionado con la muerte del fibroide y, en cierto grado, con el suministro reducido de sangre (isquemia) a la porción normal del útero. El dolor es bifásico, con las primeras 2-6 horas de dolor intenso, seguidas de una segunda fase de dolor suave a moderado, que puede ser corta o que puede durar hasta varios días. Sin embargo, no todas las pacientes sienten dolor tras la formación de embolias, pero se da a conocer que se produce en el 95% de las pacientes.

El dolor es tratado activamente comenzando con fármacos antiinflamatorios orales 2 horas antes del procedimiento, y con morfina después del procedimiento. La morfina se administra a través de una bomba de PCA (analgesia controlada por el paciente). La paciente puede empujar un botón para administrar la medicación en caso de dolor. Cuando el dolor se hace tolerable, y después de por lo menos 4-6 horas de descanso en la cama, la paciente puede abandonar el hospital. La mayoría del tiempo, las pacientes permanecen una noche en el hospital.

Los fármacos antiinflamatorios no esteroideos (AINS) son medicaciones que, además de tener efectos que alivian el dolor (analgésicos), tienen el efecto de reducir la inflamación cuando se usan a lo largo de un período de tiempo. Una nueva clase de AINS, los inhibidores de ciclooxigenasa-2 (COX-2), inhiben selectivamente las prostaglandinas inflamatorias (PG). Estos nuevos fármacos tienen una menor tasa de complicación, y no tienden a producir úlceras. Hay muchos tipos diferentes de AINS, incluyendo aspirina y otros salicilatos. Los ejemplos incluyen: ibuprofeno (Motrin, Advil), naproxeno (Naprosyn), diclofenaco (Voltarén), quetoprofeno (Orudis), indometacina (Indocin), y algunos más nuevos tales como celecoxib (Celebrex), el primer inhibidor de COX-2 en el mercado, y rofecoxib (Vioxx), que se ha puesto recientemente a la venta:

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(Esquema pasa a página siguiente)

1

El mecanismo principal de acción de los AINS se realiza interfiriendo con la ruta de las ciclooxigenasas (enzimas que fabrican prostaglandinas), dando como resultado una disminución en la síntesis de prostaglandinas.

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En el aparato reproductor femenino, se da a conocer que los AINS no sólo inhiben las prostaglandinas endometriales, sino también mejoran la agregación plaquetaria y la desgranulación, e incrementan la vasoconstricción uterina en mujeres con menorragia (van Eijkeren JJ, 1992). Las prostaglandinas son mediadores activos de la cascada inflamatoria, que también sirven para sensibilizar nocirreceptores periféricos (terminaciones nerviosas). Una investigación reciente (Tannenbaum H 1996, Vane JR 1996, Emery P 1996) ha demostrado que hay dos tipos de ciclooxigenasa, representadas COX-1 y COX-2. Cada tipo de ciclooxigenasa conduce ella misma a la producción de diferentes tipos de prostaglandinas.

Existen dos tipos de prostaglandinas.

El primer tipo comprende las prostaglandinas de mantenimiento. Estas se producen regularmente por el cuerpo, son producidas por la enzima COX-1, y desempeñan un papel en el mantenimiento de la función normal en varios sistemas orgánicos. Los ejemplos del efecto de mantenimiento en algunos órganos son la capa protectora del estómago, la función plaquetaria normal, y el flujo sanguíneo del riñón.

La segunda clase de prostaglandinas son "inflamatorias". Son producidas por el cuerpo en respuesta a un estímulo inflamatorio, y están producidas por la enzima COX-2. Desempeñan un papel provocando la inflamación y el dolor.

Como se ha mencionado anteriormente, hay dos tipos de enzima de ciclooxigenasa. COX-1 es estimulada continuamente por la fisiología normal del cuerpo. La enzima COX-1 es constitutiva, queriendo decir esto que su concentración en el cuerpo permanece estable. Está presente en la mayoría de los tejidos, y convierte el ácido araquidónico en prostaglandinas. La localización de la enzima COX-1 dicta la función de las prostaglandinas que libera (Vane JR 1996). Por ejemplo, COX-1 en la pared del estómago produce prostaglandinas que estimulan la producción mucosa. La COX-1 realiza una función de mantenimiento para sintetizar PG que regulan la actividad normal de las células.

COX-2, contrariamente a COX-1, es inducida en la mayor parte del cuerpo. No está normalmente presente en las células, pero su expresión se puede incrementar drásticamente por la acción de macrófagos, las células depuradoras del sistema inmunitario (Tannenbaum H, 1996). El papel más importante de la COX-2 se encuentra en la inflamación. COX-2 está implicada en la producción de prostaglandinas para una respuesta inflamatoria. La ciclooxigenasa-2 (COX-2), que se sabe que es elevada en varios cánceres humanos, regula la angiogénesis, induciendo la producción de factores angiogénicos (Fujiwaki R, 2002). COX-2 es constitutiva en el riñón, ovario, útero y cerebro. Se cree que existe una relación entre el cáncer de útero y la enzima COX-2. COX-2 y su producto, las prostaglandinas, desencadenan una cascada de sucesos moleculares, incluyendo un incremento anormal de estrógeno, que conduce al crecimiento de tumores. Se ha dado a conocer la localización diferencial de COX y la liberación de PG en el aparato reproductor femenino humano Thy-1 (+) y Thy-1 (-). COX-2, que generalmente se considera una forma inducible, en el aparato reproductor femenino es expresada constitutivamente en el subconjunto de fibroblastos Thy-1 (-), que produce mínimamente PEG (2). Y los fibroblastos Thy-1 (+) expresan altamente COX-1, que es responsable del elevado nivel de producción de PGE (2), una característica atribuida habitualmente a COX-2 (Koumas L, 2002).

Los inhibidores de COX tienen actividades frente a ambas enzimas, pero muchos son selectivos por una u otra de las enzimas.

Se encuentra que los inhibidores con una selectividad elevada por COX-1 tienen efectos secundarios indeseables sobre el aparato digestivo (GI); se manifiestan cuando se suministran oralmente. Los inhibidores selectivos de COX-2 recientemente lanzados al mercado reducen tales efectos secundarios cuando se administran oralmente.

Los fibroides se encuentran habitualmente en mujeres con menorragia (una hemorragia uterina anormal excesiva), y los fibroides de tipo submucosal en particular se han asociado con menorragia. La menorragia se caracteriza por bastante hemorragia menstrual, o por una hemorragia menstrual prolongada. Las mujeres con fibroides pueden descargar tales grandes volúmenes de sangre durante su período que tienen que cambiar constantemente la protección sanitaria. Al mismo tiempo, mientras que la mayoría de las mujeres tienen períodos que duran 4 a 5 días, una mujer con fibroides puede sangrar durante alrededor de una semana.

La dismenorrea se divide en dos tipos: primaria (afecta a adolescentes jóvenes), y la dismenorrea secundaria (mujeres más mayores). Ambos tipos incluyen los siguientes síntomas: dolor de espalda, diarrea, mareo, dolor de cabeza, náusea, vómitos, y tensión. Los fibroides son una de las afecciones que a menudo provocan o desatan el desarrollo de dismenorrea secundaria (Gynecological Health Center (B), 1).

Ciclos cortos de ibuprofeno tuvieron éxito reduciendo el dolor en mujeres embarazadas con leiomiomas uterinos dolorosos (Katz VL, 1989). Se dio a conocer que suprime la liberación de PGF2á menstrual mucho más que PGE2 en comparación con naproxeno, que suprimió por igual ambos tipos de PG. Se sugiere que la selectividad por PGF2á reduce los riesgos de cierre del ductus arterioso fetal relacionado con el parto prematuro (Chan WY, 1983, Powell AM, 1984, Chan WY, 1981). Se ha dado a conocer la reducción de la presión intrauterina y de la intensidad del dolor mediante el uso de ibuprofeno en una paciente dismenorreica (Milsom J, 1985, Milsom J, 1984, Chan WY, 1983). El ibuprofeno, el ácido mefenámico y el naproxeno redujeron significativamente la hemorragia en mujeres con menorragia, en un 30-50% (Anderson ABM, 1976 y Makarainen L, 1986). El alivio clínico de los síntomas dismenorreicos por el ibuprofeno acompaña la reducción de la prostaglandina del fluido menstrual (Dawood My, 1981). El ibuprofeno 1200 mg/día redujo (P menor que 0,01) la pérdida media de sangre en menorragia primaria, pero no tuvo ningún efecto sobre la pérdida de sangre en mujeres con fibroides uterinos y con deficiencia del factor VIII (Makarainen L, Ylikorkala O, 1986). Existe una tasa de fracaso de \sim20-25% en el uso de AINS en el tratamiento de la dismenorrea (Wilson ML, 2001). Se piensa que su modo de acción es mediante la inhibición de la síntesis endometrial de prostaglandinas (Sanfilippo Js, 1983).

El documento WO 0023054 describe microesferas para uso en la formación de embolias, que comprenden poli(alcohol vinílico) reticulado mediante la reacción con un aldehído. Los diámetros de las microesferas están en el intervalo de 10-2000 \mum. La suspensión de microesferas se usa en la formación de embolias para un intervalo de indicaciones, que incluye los fibroides uterinos. Las microesferas pueden comprender un agente antiangiogénico. Los ejemplos de agentes antiangiogénicos incluyen diclofenaco/hialuronano, ibuprofeno e indometacina.

El documento WO 0168720 describe agentes embólicos formados polimerizando un macrómero de poli(alcohol vinílico) ya sea in situ o antes de la administración como microesfera. Se afirma que los agentes embólicos son de uso para inducir atrofia de fibroides uterinos. Se pueden incorporar, en los agentes embólicos, agentes quimioterapéuticos u otros compuestos activos.

Según la presente invención, se proporciona un nuevo uso de polímero y, asociado con el polímero en una forma liberable, un agente farmacéuticamente activo que es un agente antiinflamatorio no esteroideo según se define en la reivindicación 1, en la preparación de una composición para uso en la formación de embolias para fibroides uterinos, en la que el ingrediente activo farmacéutico se libera del polímero en el sitio de la formación de la embolia.

El ingrediente activo se puede definir alternativamente como un inhibidor de COX.

La invención permite el suministro local de agentes farmacéuticos apropiados para el alivio del dolor y/o el tratamiento antiinflamatorio de fibroides uterinos vía un agente embólico a base de polímeros. El polímero es un material insoluble en agua. Aunque puede ser biodegradable, de forma que el fármaco se puede liberar sustancialmente por erosión de la matriz polimérica para liberar el fármaco desde la superficie, preferentemente el polímero es sustancialmente bioestable. Se prefiere que el polímero sea hinchable en agua.

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El polímero hinchable en agua, útil en la invención, tiene preferentemente un contenido de agua en el equilibrio, cuando se hincha en agua a 37ºC, medido mediante análisis gravimétrico, en el intervalo de 40 a 99% en peso, preferentemente 75 a 95%.

En la invención, la composición que se administra a un paciente que necesite una terapia de formación de embolias, está en forma de una suspensión de partículas de polímero hinchado en agua e insoluble en agua. Preferentemente, las partículas se gradúan en intervalos calibrados de tamaños, para la formación exacta de embolias de los vasos. Las partículas tienen preferentemente tamaños, cuando se equilibran en agua a 37ºC, en el intervalo de 100 a 1200 \mum. Los intervalos calibrados pueden comprender partículas que tienen diámetros con una anchura de alrededor de 100 a 300 \mum. Los intervalos de tamaños pueden ser, por ejemplo, 100 a 300 \mum, 300 a 500 \mum, 500 a 700 \mum, 700 a
900 \mum y 900 a 1200 \mum. Preferentemente, las partículas tienen una forma sustancialmente esférica. Tales partículas se denominan aquí como microesferas.

Generalmente, el polímero está reticulado covalentemente, aunque puede ser apropiado que el polímero esté reticulado iónicamente, por lo menos en parte. El polímero se puede formar polimerizando monómeros etilénicamente insaturados, en presencia de monómeros de reticulación difuncionales o con una funcionalidad superior, incluyendo los monómeros etilénicamente insaturados preferentemente un monómero iónico (incluyendo uno bipolar). Se pueden usar copolímeros de metacrilato de hidroxietilo, ácido acrílico y monómero de reticulación, tal como dimetacrilato de etilenglicol o metilenbisacrilamida, como se usa para las lentes de contacto a base de etafilcón A.

Otro tipo de polímero que se puede usar para formar la matriz hinchable en agua e insoluble en agua es alcohol polivinílico reticulado usando agentes de reticulación de tipo aldehídico, tales como glutaraldehído. Para tales productos, el alcohol polivinílico (PVA) se puede hacer iónico. Por ejemplo, el PVA se puede hacer iónico proporcionando grupos iónicos colgantes, haciendo reaccionar un compuesto que contiene grupos iónicos funcionales con los grupos hidroxilo. Los ejemplos de grupos funcionales adecuados para la reacción con los grupos hidroxilo son agentes acilantes, tales como ácidos carboxílicos o sus derivados, u otros grupos ácidos que pueden formar ésteres.

La invención es particularmente valiosa cuando la matriz polimérica está formada por un macrómero de alcohol polivinílico, que tiene más de un grupo colgante etilénicamente insaturado por molécula, mediante polimerización radicálica de los grupos etilénicos. Preferentemente, el macrómero de PVA se copolimeriza con monómeros etilénicamente insaturados, por ejemplo, incluyendo un monómero no iónico y/o iónico.

El macrómero de PVA se puede formar, por ejemplo, proporcionando al polímero de PVA, de un tamaño molecular adecuado tal como en el intervalo de 1000 a 500.000 D, preferentemente 10.000 a 100.000 D, grupos vinílicos o acrílicos colgantes. Los grupos acrílicos colgantes se pueden proporcionar, por ejemplo, haciendo reaccionar ácido acrílico o metacrílico con PVA para formar enlaces de tipo éster a través de algunos de los grupos hidroxilo. En los documentos US 4.978.713 y, preferentemente, US 5.508.317 y 5.583.163, se describen, por ejemplo, otros métodos para unir grupos vinílicos, capaces de polimerizarse sobre el alcohol vinílico. De este modo, el macrómero preferido comprende una cadena principal de alcohol polivinílico a la que está unido, vía un enlace de acetal cíclico, un resto (alc)acrilaminoalquílico. El Ejemplo 1 describe la síntesis de un ejemplo de tal macrómero, conocido con el nombre aceptado Nelfilcon B. Preferentemente, los macrómeros de PVA tienen alrededor de 2 a 20 grupos etilénicos colgantes por molécula, por ejemplo 5 a 10.

Cuando los macrómeros de PVA se copolimerizan con monómeros etilénicamente insaturados, incluyendo un monómero iónico, el monómero iónico tiene preferentemente la fórmula general I

Y^{1}BQ

en la que Y^{1} se selecciona de

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en las que:

R es hidrógeno o un grupo alquilo C_{1}-C_{4};

R^{1} es hidrógeno o un grupo alquilo C_{1}-C_{4};

R^{2} es hidrógeno o un grupo alquilo C_{1-4}, o BQ, en el que B y Q son como se definen más abajo,

A es -O- o -NR^{1}-;

K^{1} es un grupo -(CH_{2})_{r}OC(O)-, -(CH_{2})_{r}C(O)O-, -(CH_{2})_{r}OC(O)O-, -(CH_{2})_{r}NR^{3}-, -(CH_{2})_{r}NR^{3}C(O)-, -(CH_{2})_{r}C(O)NR^{3}-, -(CH_{2})_{r}NR^{3}C(O)O-, -(CH_{2})_{r}OC(O)NR^{3}-, -(CH_{2})_{r}NR^{3}C(O)NR^{3}- (en los que los grupos R^{3} son iguales o diferentes), -(CH_{2})_{r}O-, -(CH_{2})_{r}SO_{3}-, u, opcionalmente en combinación con B^{1}, un enlace de valencia, y r es de 1 a 12, y R^{3} es hidrógeno o un grupo alquilo C_{1}-C_{4};

B es una cadena alcanodiílica, oxaalquilénica, alcanodiiloxaalcanodiílica, o alcanodiiloligo(oxaalcanodiílica), lineal o ramificada, que contiene opcionalmente uno o más átomos de flúor hasta e incluyendo cadenas perfluoradas, o, si Q o Y^{1} contiene un átomo de carbono terminal enlazado a B, un enlace de valencia; y

Q es un grupo iónico.

Un grupo iónico Q puede ser, por ejemplo, un grupo carboxilato, carbonato, sulfonato, sulfato, nitrato, fosfonato o fosfato. El monómero puede estar polimerizado como el ácido libre, o en forma de sal. Preferentemente, el pK_{a} del ácido conjugado es menor que 5.

Un grupo catiónico Q adecuado es preferentemente un grupo N^{+}R^{4}_{3}, P^{+}R^{5}_{3} o S^{+}R^{5}_{2}, en los que los grupos R^{4} son iguales o diferentes y son cada uno hidrógeno, alquilo C_{1-4} o arilo (preferentemente fenilo), o dos de los grupos R^{4}, junto con el heteroátomo al que están unidos, forman un anillo heterocíclico saturado o insaturado que contiene 5 a 7 átomos, y los grupos R^{5} son cada uno OR^{4} o R^{4}. Preferentemente, el grupo catiónico es permanentemente catiónico, esto es, cada uno de R^{4} es distinto de hidrógeno. Preferentemente, un grupo catiónico Q es N^{+}R^{4}_{3}, en el que cada R^{4} es alquilo C_{1-4}, preferentemente metilo.

Un grupo bipolar Q puede tener una carga global, por ejemplo al tener un centro divalente de carga aniónica y un centro monovalente de carga catiónica, o viceversa, o puede tener dos centros de carga catiónica y un centro de carga aniónica, o viceversa. Sin embargo, preferentemente, el ion bipolar no tiene carga global, y lo más preferible tiene un centro de carga catiónica monovalente y un centro de carga aniónica monovalente.

Los ejemplos de grupos bipolares que se pueden usar como Q en la presente invención se describen en el documento WO-A-0029481.

Cuando el monómero etilénicamente insaturado incluye un monómero bipolar, por ejemplo, éste puede aumentar la hidrofilia, lubricidad, biocompatibilidad y/o hemocompatibilidad de las partículas. En los documentos WO-A-9207885, WO-A-9416748, WO-A-9416749 y WO-A-9520407 de publicaciones previas se describen monómeros bipolares adecuados. Preferentemente, un monómero bipolar es la sal interna del fosfato de etilo y 2-metacriloiloxi-2'-trimetilamonio (MPC).

En el monómero de fórmula general I, preferentemente Y^{1} es un grupo CH_{2}=CRCOA- en el que R es H o metilo, preferentemente metilo, y en el que A es NH. B es preferentemente un grupo alcanodiílico de 1 a 12, preferentemente 2 a 16 átomos de carbono. Tales monómeros son monómeros acrílicos.

Se puede incluir, en el monómero diluyente del monómero etilénicamente insaturado, por ejemplo, un monómero no iónico. Tal monómero puede ser útil para controlar el pK_{a} de los grupos ácidos, para controlar la hidrofilia o hidrofobia del producto, para proporcionar regiones hidrófobas en el polímero, o simplemente para actuar como un diluyente inerte. Los ejemplos de monómero diluyente no iónico son, por ejemplo, (alc)acrilatos de alquilo y
(alc)acrilamidas, especialmente compuestos tales que tienen grupos alquilo con 1 a 12 átomos de carbono, hidroxi, (alc)acrilatos de alquilo y (alc)acrilamidas dihidroxisustituidos, vinil-lactamas, estireno y otros monómeros aromáticos.

En la matriz polimérica, cuando hay un grupo iónico presente, la cantidad de ion está preferentemente en el intervalo de 0,1 a 10 meq g^{-1}, preferentemente por lo menos 1,0 meq g^{-1}.

Cuando el macrómero de PVA se copolimeriza con otros monómeros etilénicamente insaturados, la relación en peso de macrómero de PVA a otro monómero está preferentemente en el intervalo de 50:1 a 1:5, más preferentemente en el intervalo de 20:1 a 1:2. En el monómero etilénicamente insaturado, el monómero iónico está presente preferentemente en una cantidad en el intervalo de 10 a 100% en moles, preferentemente por lo menos 25% en moles.

El polímero se puede formar en partículas de diversas maneras. Por ejemplo, el polímero reticulado se puede obtener como un material voluminoso, por ejemplo en forma de una lámina o de un bloque, y después se puede pulverizar hasta el tamaño deseado. Como alternativa, el polímero reticulado se puede formar en tal forma de partículas, por ejemplo polimerizando en gotitas de monómero en una fase dispersa en un portador inmiscible continuo. Se conocen ejemplos de polimerizaciones de agua en aceite adecuadas para producir partículas que tienen el tamaño deseado, cuando se hinchan. Por ejemplo, el documento US 4.224.427 describe procedimientos para formar perlas esféricas uniformes (microesferas) de hasta 5 mm de diámetro, dispersando monómeros solubles en agua en una fase de disolvente continua, en presencia de agentes de suspensión. Puede haber agentes estabilizantes y tensioactivos para proporcionar control sobre el tamaño de las partículas de la fase dispersa. Tras la polimerización, las microesferas reticuladas se recubren por medios conocidos, y se lavan y se esterilizan opcionalmente. Preferentemente, las partículas, por ejemplo microesferas, se hinchan en un líquido acuoso, y se clasifican según su tamaño.

En la invención, el agente farmacéuticamente activo es un fármaco antiinflamatorio no esteroideo (AINS). Alternativamente se puede definir como un inhibidor de COX. Las razones del dolor intenso tras UFE no se comprenden bien actualmente, pero las células en la región de los tejidos isquémicos y necrosantes pueden liberar un hospedante de marcadores inflamatorios que puede dar lugar a la síntesis de prostaglandinas y a la consiguiente señalización del dolor. Estos agentes activos son útiles tanto como analgésicos como antiinflamatorios, y de este modo pueden tener un papel sinérgico reduciendo tanto la causa como el efecto del dolor tras la formación de embolias.

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Los ejemplos de agentes activos específicos, útiles en la presente invención, son:

celecoxib (Celebrex)

rofecoxib (Vioxx)

diclofenaco (Voltarén, Cataflam)

diflunisal (Dolobid)

etodolaco (Lodine)

flurbiprofeno (Ansaid)

ibuprofeno (Motrin, Advil)

indometacina (Indocin)

quetoprofeno (Orudis, Oruvail)

quetorolaco (Toradol)

nabumetona (Relafen)

naproxeno (Naproxyn, Alleve)

oxaprozina (Daypro)

piroxicam (Feldene)

sulindaco (Clinoril)

tolmetina (Tolectin).

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El agente activo es preferentemente un inhibidor de COX. Puede ser selectivo para COX-1. La invención permite el suministro local del agente activo al sitio de la formación de embolias, y a los fibroides diana. Esto evita el suministro sistémico y los efectos secundarios asociados descritos anteriormente con tales agentes activos, que se presentan especialmente cuando el agente activo se administra oralmente.

El agente activo puede ser selectivo para COX-2. Puesto que se espera que los inhibidores de COX-2 inhiban la inflamación, y la inflamación se puede inducir por la formación de embolias y por tanto pueden ser la causa del dolor, se espera que tales inhibidores sean eficaces cuando se suministran localmente en la invención al émbolo, en la vecindad de los fibroides uterinos.

En la siguiente tabla se muestran inhibidores selectivos de COX adecuados:

6

La tabla se refiere al Log [relación de IC_{80} de COX-2/COX-1 de WHMA)] para los agentes que se han ensayado mediante el ensayo modificado de William Harvey de sangre completa humana. Aquellos fármacos con un valor de "0" indican igual potencia, es decir una relación de IC_{80} de 1. Los valores por encima de "0" indican que el fármaco es más selectivo para COX-1, y los valores por debajo de "0" indican que el fármaco es más selectivo para COX-2.

DFP es fosfofluoridato de diisopropilo.

L-745337 es 5-metanosulfonamida-6-(2,4-difluorotiofenil)-1-indanona.

Valores obtenidos de Warner T.D. et al., Proc. Natl. Acad. Sci. (1999) 96, 7563.

En un aspecto adicional de la invención, se proporciona una nueva composición farmacéutica que comprende microesferas de polímero insoluble en agua e hinchable en agua, formado mediante la polimerización radicálica de macrómero de poli(alcohol vinílico) que tiene grupos etilénicamente insaturados colgantes, y, asociado con el polímero en forma liberable, un agente farmacéuticamente activo que es un agente antiinflamatorio no esteroideo y/o que es un inhibidor de COX, como se define en la reivindicación 14.

El agente activo, en este aspecto, es preferentemente un inhibidor de COX, como se describe anteriormente en relación con el primer aspecto de la invención. El polímero es preferentemente como se describe anteriormente con relación a la realización preferida de la invención.

El agente farmacéutico está asociado con el polímero preferentemente de forma que permita la liberación controlada del agente durante un período. Cuando el agente se utiliza para reducir la inflamación y aliviar el dolor, este período puede ser de hasta unos pocos días, preferentemente hasta 72 horas cuando se experimenta la mayor parte del dolor postoperatorio. El agente puede estar enlazado electrostática o covalentemente al polímero, o puede estar retenido mediante interacciones de Van der Waals.

El agente activo farmacéutico se puede incorporar en la matriz polimérica mediante una variedad de técnicas. En un método, el agente activo se puede mezclar con un precursor del polímero, por ejemplo un monómero o mezcla de macrómeros o un polímero reticulable o una mezcla de reticuladores, antes de la polimerización o de la reticulación. Como alternativa, el agente activo se puede cargar en el polímero después de que se haya reticulado. Por ejemplo, el polímero seco en partículas se puede hinchar en una disolución del agente activo, preferentemente en agua o en un alcohol tal como etanol, opcionalmente con la eliminación subsiguiente del agente no absorbido y/o la evaporación del disolvente. Una disolución del agente activo, en un disolvente orgánico tal como un alcohol, o, más preferentemente, en agua, se puede pulverizar sobre un lecho en movimiento de partículas, con lo que el fármaco se absorbe en el cuerpo de las partículas con la eliminación simultánea del disolvente. De forma más conveniente, se ha encontrado que es posible simplemente poner en contacto las partículas hinchadas suspendidas en un vehículo líquido continuo, tal como agua, con una disolución alcohólica acuosa del fármaco durante un período, con lo que el fármaco se absorbe en el cuerpo de las partículas. Las técnicas para fijar el fármaco en las partículas pueden aumentar los niveles de carga, por ejemplo precipitación mediante desplazamiento del pH de la suspensión de carga hasta un valor en el que el agente activo está en una forma relativamente insoluble. Después, el vehículo de hinchamiento se puede eliminar o, de forma conveniente, se puede retener con las partículas como parte del producto, para uso subsiguiente como un agente embólico, o las partículas hinchadas se pueden usar en forma hinchada en la forma de una suspensión, es decir sin nada del líquido, o sin gran parte de él, fuera de las partículas hinchadas.

Como alternativa, la suspensión de partículas se puede eliminar de cualquier disolución de carga de fármaco que quede, y las partículas se pueden secar mediante cualquiera de las técnicas clásicas empleadas para secar productos a base de ingredientes farmacéuticos. Esto podría incluir, pero sin limitarse a, el secado por aire a temperatura ambiente o elevada, o a presión reducida o a vacío; la liofilización clásica; la liofilización a presión atmosférica; dispersión de fluidos supercríticos potenciada por disolución (SEDS). Como alternativa, las microesferas cargadas con el fármaco se pueden deshidratar usando un disolvente orgánico para sustituir al agua en una serie de etapas, seguido de la evaporación del disolvente orgánico más volátil. Se debería de seleccionar un disolvente que fuese un no disolvente del fármaco.

De forma breve, un procedimiento de liofilización clásico típico puede transcurrir según lo siguiente: la muestra se divide en alícuotas entre viales de vidrio parcialmente tapados, que se colocan en una estantería enfriada, de temperatura controlada, dentro del liofilizador. La temperatura de la estantería se reduce, y la muestra se congela hasta una temperatura definida, uniforme. Después de que la congelación está terminada, se reduce la presión en el secador, hasta una presión definida para iniciar el secado primario. Durante el secado primario, el vapor de agua se elimina progresivamente de la masa congelada, mediante sublimación, mientras que la temperatura de la estantería se controla a temperatura baja, constante. El secado secundario se inicia aumentando la temperatura de la estantería y reduciendo la presión de la cámara adicionalmente, de forma que se puede eliminar el agua absorbida en la masa semiseca, hasta que el contenido de agua residual disminuye hasta el nivel deseado. Si se requiere, los viales se pueden cerrar herméticamente, in situ, en una atmósfera protectora.

La liofilización a presión atmosférica se logra haciendo circular rápidamente aire muy seco sobre un producto congelado. En comparación con el procedimiento de liofilización clásico, la liofilización sin vacío tiene un número de ventajas. El gas seco circulante mejora la transferencia de calor y de masa desde la muestra congelada, de la misma manera que la colada de la lavadora se seca de forma más rápida en un día con viento. La mayor parte del trabajo en esta área está relacionado con la producción de alimentos, y se ha observado que hay un aumento de retención de compuestos aromáticos volátiles, aunque está por determinar los beneficios potenciales de esto para el secado de productos biológicos. Es de particular interés el hecho de que, usando un procedimiento de secado por pulverización atmosférico, en lugar de una torta, se obtiene un polvo fino, que fluye libremente. Se pueden obtener partículas que tienen diámetros submicrométricos, esto es, diez veces más pequeñas que las que se pueden obtener generalmente por molienda. La naturaleza de las partículas, con su superficie específica elevada dando como resultado un producto fácilmente rehidratable, actualmente no permite controlar de forma fina el tamaño de partículas requerido para las aplicaciones inhalables y transdérmicas; sin embargo, existe un potencial en esta área.

En un aspecto adicional de la invención, se proporciona un nuevo método para cargar un agente antiinflamatorio no esteroideo que tiene un grupo ácido como se define en la reivindicación 22 en un vehículo polimérico insoluble en agua e hinchable en agua, que incluye las etapas siguientes:

a): poner en contacto el polímero de poli(alcohol vinílico) reticulado, hinchable en agua, en forma de partículas que están suspendidas en la disolución acuosa, que tienen tamaños de partículas, cuando se equilibran en agua a 37ºC, en el intervalo de 100 a 1200 \mum, con una disolución acuosa del agente a un pH por encima del pKa del grupo ácido,

b): añadir ácido al producto de la etapa a), para reducir el pH del líquido acuoso en contacto con el polímero para reducir el pKa del grupo ácido; y

c): recuperar el polímero con el agente cargado en forma de ácido libre.

Aunque el producto de este método se puede usar para suministrar el agente activo mediante métodos distintos de la formación de embolias y para indicaciones distintas del tratamiento de fibroides uterinos, estos son los usos preferidos.

El nuevo método de este aspecto de la invención es valioso para los inhibidores de COX mencionados anteriormente, cuya forma de ácido libre, que es la forma del compuesto administrado, es relativamente insoluble en agua. Los compuestos son naproxeno, sulindaco, diclofenaco, indometacina, ibuprofeno, salicilato de acetilo, quetorolaco, quetoprofeno, flurbiprofeno y suprofeno, preferentemente ibuprofeno.

Preferentemente, el pH de la disolución acuosa en la etapa a) es por lo menos 5, y el pH del líquido después de la etapa b) es menor que 3, ya que el grupo ácido es un ácido carboxílico en todos estos compuestos.

Las composiciones embólicas de la invención se pueden administrar de manera normal para UFE. De este modo, la composición se puede mezclar inmediatamente antes de la administración mediante el radiólogo de la intervención, con agentes formadores de imágenes, tales como agentes radioopacos. Como alternativa o adicionalmente, las partículas se pueden cargar previamente con un material radioopaco, además de con el agente farmacéutica activo. De este modo, el polímero y el agente farmacéutica activo, proporcionados en mezcla preformada, se pueden mezclar con un agente radioopaco formador de imágenes, en una jeringuilla, usada como el depósito para el dispositivo de suministro. La composición se puede administrar, por ejemplo, a partir de un dispositivo de microcatéter, en las arterias uterinas. La selección del intervalo adecuado de tamaños de partículas, dependiendo del sitio deseado de la formación de la embolia, se puede hacer de manera normal por los radiólogos de la intervención.

El ejemplo se ilustra en los siguientes ejemplos y figuras, en las que

La figura 1 muestra los resultados de la carga descrita en el ejemplo 2 de ibuprofeno a partir de PBS;

La figura 2 muestra los resultados de la carga del ejemplo 2 usando ibuprofeno en etanol;

La figura 3 muestra el perfil de liberación de ibuprofeno (cargado en etanol) en PBS a partir de un producto con bajo contenido de amps, en el ejemplo 2;

La figura 4 muestra la carga de perfil de flurbiprofeno en perlas con bajo y alto contenido de amps del ejemplo 3;

La figura 5 muestra la liberación de flurbiprofeno a partir de perlas con bajo y alto contenido de amps del ejem-
plo 3;

La figura 6 muestra la carga de diclofenaco en perlas con alto y bajo contenido de amps del ejemplo 4;

La figura 7 muestra la liberación de diclofenaco a partir de perlas de la presente invención del ejemplo 4;

La figura 8 muestra la carga de quetorolaco en microesferas con bajo contenido de amps del ejemplo 5;

La figura 9 muestra la liberación de quetorolaco a partir de microesferas con bajo contenido de AMPS del ejem-
plo 5;

La figura 10 muestra la carga de la sal sódica de ibuprofeno a partir de microesferas del ejemplo 7;

La figura 11 muestra la liberación de la sal sódica de ibuprofeno a partir de microesferas del ejemplo 7;

La figura 12 muestra la carga del ácido libre de ibuprofeno en microesferas del ejemplo 8;

La figura 13 muestra la liberación del ácido libre de ibuprofeno a partir de microesferas del ejemplo 8;

La figura 14 muestra la liberación de ibuprofeno en PBS a partir de microesferas cargadas en diferentes condiciones del ejemplo 9;

La figura 15 muestra la liberación de quetoprofeno a partir de perlas de la presente invención del ejemplo 10;

La figura 16 muestra la captación de naproxeno por microesferas del ejemplo 11;

La figura 17 muestra la liberación de naproxeno a partir de microesferas del ejemplo 11; y

La figura 18 muestra la liberación de ácido salicílico a partir de microesferas del ejemplo 12.

Ejemplo 1 Método general para la preparación de microesferas Síntesis de macrómero de Nelfilcon B

La primera etapa de la síntesis de microesferas implica la preparación de Nelfilcon B - un macrómero polimerizable procedente del PVA polimérico soluble en agua ampliamente usado. Se añadió polvo de poli(alcohol vinílico) (PVA) Mowiol 8-88 (88% hidrolizado, 12% de contenido de acetato, peso molecular medio de alrededor de 67.000 D) (150 g) (Clariant, Charlotte, NC USA) a una vasija de reacción de vidrio de 2 l. Se añadieron 1000 ml de agua con agitación suave, y la agitación se incrementó hasta 400 rpm. Para asegurar la disolución completa del PVA, la temperatura se elevó hasta 99 \pm 9ºC durante 2-3 horas. Al enfriar hasta la temperatura ambiente, se mezcló N-acriloilaminoacetaldehído (NAAADA) (Ciba Vision, Alemania) (2,49 g o 0,104 mmoles/g de PVA) en la disolución de PVA, seguido de la adición de ácido clorhídrico concentrado (100 ml), que cataliza la adición del NAAADA al PVA mediante transesterificación. La reacción transcurre a temperatura ambiente durante 6-7 horas, después se detiene mediante neutralización hasta pH 7,4 usando disolución de hidróxido sódico 2,5 M. El cloruro de sodio resultante, más cualquier NAAADA sin reaccionar, se elimina mediante diafiltración (etapa 2).

Diafiltración del macrómero

La diafiltración (filtración mediante flujo tangencial) funciona haciendo circular continuamente una disolución de alimentación a purificar (en este caso la disolución de Nelfilcon B) a través de la superficie de una membrana, permitiendo la permeación de material indeseado (NaCl, NAAADA), que va al desecho, mientras que tiene un tamaño de poros suficientemente pequeño para evitar el paso del retenido, el cual permanece en circulación.

La diafiltración de Nelfilcon B se realiza usando un soporte Pellicon 2 Mini de acero inoxidable, con membranas de celulosa de 0,1 m^{2} que tienen un tamaño de poros con un corte de peso molecular de 3000 (Millipore Corporation, Bedford, MA, USA). Mowiol 8-88 tiene un peso molecular medio ponderal de 67000, y por lo tanto tiene una capacidad limitada para permear a través de las membranas.

El matraz que contiene el macrómero se dota con una barra agitadora magnética, y se coloca sobre una placa agitadora. La disolución se alimenta en el montaje de diafiltración vía una bomba peristáltica Masterflex LS equipada con una cabeza de bomba Easy Load II y que usa tubería LS24 de clase VI. El Nelfilcon se hace circular sobre las membranas a aproximadamente 50 psi para acelerar la permeación. Cuando la disolución se ha concentrado hasta alrededor de 1000 ml, el volumen se mantiene constante mediante adición de agua a la misma velocidad a la que se recoge el filtrado al desecho, hasta que se han añadido 6000 ml extra. Una vez logrado, la disolución se concentra hasta 20-23% de sólidos con una viscosidad de 1700-3400 cP a 25ºC. El Nelfilcon se caracteriza mediante GFC, RMN y viscosidad.

Síntesis de las microesferas

Las esferas se sintetizan mediante un método de polimerización en suspensión, en el que se añade una fase acuosa (Nelfilcon B) a una fase orgánica (acetato de butilo), en el que las fases son inmiscibles. Empleando un mezclamiento rápido, la fase acuosa se puede dispersar para formar gotitas, cuyo tamaño y estabilidad se pueden controlar mediante factores tales como las velocidades de agitación, la viscosidad, la relación de fase acuosa/fase orgánica y el uso de agentes estabilizantes y tensioactivos que influyen en la energía interfacial entre las fases. Se fabrican dos series de microesferas, una serie con bajo contenido de AMPS, y una serie con un contenido más elevado de AMPS, cuyas formulaciones se muestran a continuación.

A \hskip0,2cm Alto contenido de AMPS:

Acuoso:: disolución de Nelfilcon B de aprox. 21% p/p (400 \pm 50 g aprox.)

\quad: sal Na de 2-acrilamido-2-metilpropanosulfonato aprox. 50% p/p (140 \pm 10 g)

\quad: agua pura (137 \pm 30 g)

\quad: persulfato de potasio (5,22 \pm 0,1 g)

\quad: tetrametiletilendiamina TMEDA (6,4 \pm 0,1 ml)

Orgánico:: acetato de n-butilo (2,7 \pm 0,3 l)

\quad: acetato-butirato de celulosa al 10% p/p en acetato de etilo (46 \pm 0,5 g)

\quad: agua pura (19,0 \pm 0,5 ml)

\newpage

B \hskip0,2cm Bajo contenido de AMPS:

Acuoso:: disolución de Nelfilcon B de aprox. 21% p/p (900 \pm 100 g aprox.)

\quad: sal Na de 2-acrilamido-2-metilpropanosulfonato de aprox. 50% p/p (30,6 \pm 6 g)

\quad: agua pura (426 \pm 80 g)

\quad: persulfato de potasio (20,88 \pm 0,2 g)

\quad: TMEDA (25,6 \pm 0,5 ml)

Orgánico:: acetato de n-butilo (2,2 \pm 0,3 l)

\quad: acetato-butirato de celulosa al 10% p/p (CAB) en acetato de etilo (92 \pm 1,0 g)

\quad: agua pura (16,7 \pm 0,5 ml)

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Se calentó una vasija de reacción de 4000 ml, encamisada, usando un baño controlado por ordenador (Julabo PN 9-300-650), con sensores de realimentación que monitorizan continuamente la temperatura de la reacción.

El acetato de butilo se añade al reactor a 25ºC, seguido de la disolución de CAB y agua. El sistema se purga con nitrógeno durante 15 minutos, antes de que se añada el macrómero de PVA. La reticulación de la disolución de PVA dispersada se inicia mediante adición de TMEDA y elevando la temperatura hasta 55ºC durante tres horas en nitrógeno. La reticulación se produce vía una polimerización iniciada mediante redox, con lo que los grupos amino de la TMEDA reaccionan con el grupo peróxido del persulfato de potasio para generar especies radicálicas. Estos radicales inician entonces la polimerización y la reticulación de los dobles enlaces en el PVA y AMPS, transformando las gotitas dispersadas de PVA-AMPS en microesferas de polímero insolubles. Después de enfriar hasta 25ºC, el producto se transfiere a un reactor de filtro para la purificación, en el que el acetato de butilo se elimina mediante filtración, seguido de:

- un lavado con 2 x 300 ml de acetato de etilo para eliminar el acetato de butilo y CAB

- el equilibrado en acetato de etilo durante 30 minutos y filtración posterior

- el lavado con 2 x 300 ml de acetato de etilo en filtración a vacío

- el equilibrado en acetona durante 30 minutos y la filtración para eliminar el acetato de etilo, CAB y agua

- el lavado con 2 x 300 ml de acetona en filtración a vacío

- el equilibrado en acetona toda la noche

- el lavado con 2 x 300 ml de acetona a vacío

- el secado a vacío, 2 h, 55ºC, para eliminar los disolventes residuales.

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Coloración

Esta etapa es opcional pero generalmente es innecesaria cuando el fármaco se carga con un ingrediente activo coloreado (puesto que éste proporciona el color). Cuando se hidrata, la microesfera contiene alrededor de 90% (p/p) de agua, y puede ser difícil de visualizar. Para ayudar a la visualización en el montaje clínico, las esferas se tiñen de azul usando el reactivo Colorante Azul #4 (RB4). El RB4 es un colorante de clorotriazina soluble en agua que, en condiciones alcalinas, reaccionará con los grupos hidroxilo colgantes en la cadena principal de PVA, generando un enlace covalente de tipo éter. La reacción se lleva a cabo a pH 12 (NaOH), con lo que el HCl generado se neutralizará dando como resultado NaCl.

Antes de la coloración, las esferas se vuelven a hidratar completamente y se dividen en alícuotas de 35 g (tratadas individualmente). La disolución colorante se prepara disolviendo 0,8 g de RB4 en una disolución de NaOH 2,5 M
(25 ml) y agua (15 ml), añadiéndola después a las esferas en 2 l de disolución salina 80 g/l^{-1}. Después de mezclar durante 20 minutos, el producto se recoge en un tamiz de 32 \mum y se enjuaga para eliminar la mayor parte del colorante sin reaccionar.

\newpage

Extracción

Se usa un proceso de extracción intenso para eliminar cualquier RB4 no unido o no adsorbido específicamente. El protocolo seguido es el que se muestra:

- Equilibrar en 2 l de agua durante 5 minutos. Recoger sobre un tamiz y enjuagar. Repetir 5 veces

- Equilibrar en 2 l de disolución de hidrogenofosfato disódico 80 mM en disolución salina al 0,29% (p/p). Calentar hasta ebullición durante 30 minutos. Enfriar, recoger sobre un tamiz y lavar con 1 l de disolución salina. Repetir dos veces más.

- Recoger, lavar sobre tamiz el equilibrado en 2 l de agua durante 10 minutos.

- Recoger y deshidratar en 1 l de acetona durante 30 minutos.

- Combinar todas las alícuotas y equilibrar toda la noche en 2 l de acetona.

Tamizado

El producto de microesferas manufacturado tiene un tamaño que oscila desde 100 hasta 1200 micrómetros, y debe sufrir un fraccionamiento a través de un proceso de tamizado usando un intervalo de tamices de mallas, para obtener las distribuciones nominales enumeradas a continuación.

1.: 100-300 \mum

2.: 300-500 \mum

3.: 500-700 \mum

4.: 700-900 \mum

5.: 900-1200 \mum

Antes de tamizar, las esferas se secan a vacío para eliminar cualquier disolvente, después se equilibran a 60ºC en agua para rehidratar completamente. Las esferas se tamizan usando una unidad Vortisieve de acero inoxidable 316L (MM Industries, Salem Ohio), con bandejas de tamizado de acero inoxidable de 15'' (38,1 cm) con tamices de mallas que oscilan desde 32 hasta 1000 \mum. La disolución salina filtrada se hace recircular a través de la unidad, para ayudar al fraccionamiento. Las esferas recogidas en el tamiz de 32 micrómetros se descartan.

Ejemplo 2 Captación y elusión de ibuprofeno en microesferas con bajo contenido de AMPS y con alto contenido de AMPS

Se prepararon dos disoluciones, una de 2,5 mg por ml de ibuprofeno (en disolución de tampón de fosfato), la segunda de 2,5 mg por ml en etanol. Las curvas estándar de ambas disoluciones se midieron mediante absorción de UV a 250 nm.

En PBS dio una absorbancia = 1,2689 x concentración - 0,0096

En etanol dio una absorbancia = 0,6875 x concentración + 0,0329

Estas curvas estándar se usaron para monitorizar la captación de fármaco mediante las microesferas.

Para cada una de las microesferas con bajo contenido de AMPS y con alto contenido de AMPS, se llenaron cuatro jeringuillas de 1 ml con 0,25 ml de microesferas. Se cargaron dos viales de vidrio con 5 ml del fármaco 2,5 mg/ml en PBS, y otros dos viales con 5 ml de PBS para que actuasen como controles. Esto se repitió para el fármaco en etanol y dos viales de control de 5 ml de etanol, nuevamente para controles. Tomando dos de las jeringuillas rellenas con microesferas con bajo contenido de AMPS, se añadieron los contenidos de una al vial que contiene disolución de fármaco en PBS, y la segunda jeringuilla se añadió a su vial de control equivalente. Esto se repitió para dos de las jeringuillas rellenas con microesferas con alto contenido de AMPS. Después, el proceso completo se repitió con las disoluciones de etanol.

La captación de ibuprofeno se monitorizó usando 1 ml de disolución, sustituyendo cada vez para mantener constante la concentración, mediante espectrometría de UV a 250 nm. Las absorbancias resultantes se usaron para calcular la cantidad de fármaco cargado en mg por ml de microesferas.

Absorbancia (disolución) - absorbancia de control = absorbancia real del fármaco cargado.

La concentración se calculó usando la curva estándar pertinente, y se convirtió para dar la concentración de fármaco que se podría cargar en 1 ml de microesferas.

En la Figura 1 se muestran los resultados de la captación a partir de PBS, durante un período de un día. En la Figura 2 se muestran los resultados de la captación a partir de etanol.

La liberación de ibuprofeno a partir de las microesferas con bajo contenido de AMPS cargadas con etanol se realizó en 5 ml de PBS, y se monitorizó durante 7 días. Las concentraciones se calcularon usando la curva estándar de PBS. Los resultados se muestran en la Figura 3, que muestra el porcentaje del total liberado durante el período de 7 días.

Ejemplo 3 Carga y liberación de flurbiprofeno a partir de las microesferas

Se preparó una disolución de 100 mg/ml de flurbiprofeno (Sigma) en etanol. Se añadieron 5 ml de la disolución a 0,5 ml de microesferas/perlas de la presente invención, obtenidas como se resume en el ejemplo 1. Se usaron microesferas con bajo contenido de AMPS y con alto contenido de AMPS que tienen un tamaño de 500-710 \mum, y la captación de fármaco se monitorizó mediante UV. Las muestras se agitaron en un mezclador giratorio. Se tomaron alícuotas del sobrenadante a 10, 20, 30, 60 minutos, y después a 2 h hasta 24 h. La captación se calculó a partir del flurbiprofeno que queda en la disolución. Ambos tipos de microesferas se cargaron con dosis similares de 195 mg (bajo contenido de AMPS) y 197 (perla con alto contenido de AMPS) por ml de microesferas hidratadas (Fig. 4), y en menos de 30 minutos el 99% de la disolución del fármaco está localizado en las microesferas. Las microesferas de la presente invención de cada tamaño, cargadas con 200 mg/ml de flurbiprofeno, se colocaron en 250 ml de agua a 37ºC. La liberación del 30% se logró en los primeros 10 minutos, con otro 5% en 2 días. Si las microesferas se transferían a 100 ml de eluyente, la liberación era lenta hasta que se alcanzaba eventualmente el equilibrio (Fig. 5).

Ejemplo 4 Carga y liberación de diclofenaco a partir de las microesferas

Se preparó una disolución de 100 mg/ml de diclofenaco (Sigma) en etanol. Se añadieron 5 ml de disolución a 0,5 ml de microesferas de la presente invención con bajo contenido de AMPS y con alto contenido de AMPS, producidas como se resume en el ejemplo 1; ambas muestras usaron microesferas que tienen un intervalo de tamaños de 500-710 \mum, y la captación se monitorizó mediante UV. Las muestras se agitaron en un mezclador giratorio. Se tomaron alícuotas de sobrenadante a 5, 15, 30 y 240 minutos, y después a 24 h. La captación se calculó a partir del diclofenaco que queda en la disolución. Ambos tipos de microesferas se cargaron con dosis similares de 26 mg (perlas con bajo contenido de AMPS) y 30 mg (perlas con alto contenido de AMPS) por ml de microesferas hidratadas (Fig. 6), y en menos de 30 minutos el 99% de la disolución de fármaco estaba localizado en las microesferas. Las microesferas de la presente invención de cada tamaño, cargadas con 26 y 30 mg/ml de diclofenaco, se colocaron en 250 ml de agua a 37ºC. Se produjo una liberación de 18-26% en los primeros 5 minutos, con un 35% adicional en las 48 h (Fig. 7).

Ejemplo 4 Carga y liberación de quetorolaco a partir de las microesferas

Se prepararon dos disoluciones de 50 mg/ml y 10 mg/ml de quetorolaco (Sigma) en agua. Se añadieron 5 ml de la disolución a 0,5 ml de microesferas con bajo contenido de AMPS, de tamaño 500-710 \mul, y la captación se monitorizó mediante HPLC. Las muestras se agitaron en un mezclador giratorio. Se tomaron alícuotas de sobrenadante a 5, 10, 20, 40 y 60 minutos, y después a 24 h. La captación se calculó a partir del quetorolaco que queda en la disolución. Las microesferas se cargaron con dosis aproximadamente similares, la mitad de las concentraciones de las disoluciones de carga originales por ml de microesferas hidratadas (Fig. 8), y en menos de 10 minutos el 99% de la disolución de fármaco se localizó en las microesferas. Las microesferas de cada tipo, cargadas con 13 mg y 27 mg/ml de quetorolaco, se colocaron en 250 ml de agua a 37ºC. De las microesferas cargadas con un alto contenido de AMPS, el 43% se liberó en los primeros 5 minutos, con un 90% en 1 h; a esto le siguió una liberación lenta de un 4% adicional en las siguientes 24 h (Fig. 9). Las microesferas cargadas con un bajo contenido mostraron un perfil similar, con una cantidad mayor, del 75% de quetorolaco liberada en los primeros 5 minutos, un 90% en 1 h, y un 5% adicional en las siguientes 24 h.

Ejemplo 5 Carga y liberación de ibuprofeno en forma de ácido libre a partir de las microesferas

Se llevó a cabo una serie de experimentos usando una disolución de carga que contiene 250 mg/ml de disolución de ibuprofeno en forma de ácido libre (Sigma) en etanol (Romil). Se añadieron 2 ml de esta disolución a 1 ml de microesferas hidratadas con bajo contenido de AMPS, obtenidas como se describe en el ejemplo 1, y la captación se monitorizó mediante UV del sobrenadante a 263 nm. Las muestras se agitaron en un mezclador giratorio. Se tomaron muestras del sobrenadante a 10, 20, 40, 60 minutos, y 24 h. La captación se calculó a partir del ibuprofeno que queda en la disolución. Las microesferas se pudieron cargar con dosis diferentes que oscilan desde 142-335 mg por ml de microesferas hidratadas. Se llevaron a cabo experimentos de elución sobre estas microesferas (Tabla 1). Las microesferas se lavaron para determinar la explosión rápida en diversos medios según la tabla 1. Después, las muestras se colocaron en 10 ml de disolvente y se leyó la absorbancia después de 10 minutos. Se añadieron otros 20 ml y se leyó la absorbancia después de 10 minutos, esto se repitió hasta 90 ml, y la elución se monitorizó hasta 24 h (tabla 1). La tasa de elución osciló entre 20%-43%, con una media de 25% en la mayoría de los experimentos, y aproximadamente el 15% tuvo una explosión rápida.

TABLA 1 Experimentos de elución de ibuprofeno en forma de ácido libre

7

Ejemplo 7 Carga y liberación de sal sódica de ibuprofeno a partir de microesferas

Se usaron dos muestras de 1 ml de perlas hidratadas con bajo contenido de AMPS (700-1100 \mum, ejemplo 1). Para la preparación de las disoluciones de carga: a) se disolvió 1 g de sal sódica de ibuprofeno (SIGMA) en 4 ml de agua (ROMIL), y b) se disolvió 1 g de sal sódica de ibuprofeno (SIGMA) en 4 ml de etanol (ROMIL), para dar una concentración final de 250 mg/ml. Una vez preparadas, las absorbancias de las disoluciones se leyeron mediante UV a 263 nm, y se realizaron diluciones para producir una curva estándar. Se añadieron 2 ml de la disolución de ibuprofeno a un vial que contiene 1 ml de perlas, y se comenzó a contar el tiempo. Los viales se colocaron en un mezclador giratorio a temperatura ambiente durante todo el experimento. En puntos de tiempo predeterminados (0, 10, 20, 30 y 60 min.), se retiraron 100 \mul, se diluyeron según fuese necesario (1/200) y se leyeron a 263 nm. A partir de las lecturas y de la curva estándar, se calculó la concentración de la disolución en cada punto de tiempo. La cantidad de fármaco cargada en las perlas se midió mediante el agotamiento del fármaco en la disolución cuando se extrajo con las perlas. A partir de los datos, se calcularon los mg de fármaco cargado por 1 ml de perlas hidratadas, y se representó la gráfica. A partir de los datos mostrados en la figura 10, se puede observar que cuando el ibuprofeno se carga en etanol, se alcanza una carga máxima en alrededor de 20 minutos antes de que los niveles de carga comiencen nuevamente a disminuir. Esto es una consecuencia de una competición entre la penetración del fármaco/disolvente en las microesferas, y un deshinchamiento concomitante de las perlas a medida que el etanol las deshidrata. Después de 20 minutos, el deshinchamiento es predominante, y algo de la disolución de fármaco es empujada desde los intersticios de la perla a medida que su estructura se colapsa.

Para estudios de elución, se transfirió 1 ml de las perlas cargadas, de concentración 250 mg/ml, a un recipiente de vidrio marrón lleno de 100 ml de PBS, y se comenzó a contar el tiempo. Los recipientes se colocaron en un mezclador giratorio a temperatura ambiente durante todo el experimento. Se retiró 1 ml de la disolución a tiempos predeterminados (15, 30, 60 y 120 minutos), se leyó y después se colocó nuevamente en el recipiente, de forma que el volumen permaneció constante durante todo el experimento. Las muestras se leyeron a 263 nm, y las concentraciones se calcularon a partir de la ecuación de la curva estándar de ibuprofeno. A partir de los datos, se calcularon los mg de fármaco eluido por ml de perlas hidratadas, y se representaron gráficamente (Figura 11).

Ejemplo 8 Carga y elución de ibuprofeno en forma de ácido libre a partir de microesferas

Se usaron cinco muestras de 1 ml de perlas hidratadas con bajo contenido de AMPS, de 700 a 1100 \mum. Para cada muestra, se transfirió a un recipiente de vidrio 1 ml de perlas en disolución salina tamponada con fosfato (PBS), medido con un cilindro de vidrio de 10 ml, y todo el PBS se eliminó cuidadosamente con una pipeta Pasteur de vidrio. Para preparar las disoluciones de carga: se disolvieron 2 g de ibuprofeno en forma de ácido libre (SIGMA) en 8 ml de etanol (ROMIL) para dar una concentración final de 250 mg/ml. Una vez preparadas, las absorbancias de la disolución y de las diluciones se leyeron mediante UV a 263 nm, para producir una curva estándar. Se añadieron 2 ml de la disolución de ibuprofeno a un vial que contiene 1 ml de perlas (previamente preparadas, según detalles anteriormente), y se comenzó a contar el tiempo. Esto se realizó por duplicado; en el segundo experimento, se añadió 1 ml de disolución de ibuprofeno a 1 ml de etanol (de forma que la concentración final de la disolución fue 125 mg/ml).

Como controles, se añadieron 2 ml de etanol a un vial, y se añadieron 2 ml de PBS a otro vial, conteniendo cada vial 1 ml de perlas. Los viales se colocaron en un mezclador giratorio a temperatura ambiente durante todo el experimento. Se retiraron 100 \mul en puntos de tiempo predeterminados (0, 20, 40, 60 y 120 min.), se diluyeron según fuese necesario (1/200), y se leyeron a 263 nm. A partir de las lecturas y de la curva estándar, se calculó la concentración de la disolución en cada punto de tiempo. La cantidad de fármaco cargado en las perlas se midió mediante el agotamiento del fármaco en la disolución. A partir de los datos, se calcularon los mg de fármaco cargado por 1 ml de perlas, y se representó la gráfica (figura 12). Nuevamente, como en el ejemplo 7, la concentración de las perlas, cuando se expone a etanol, provoca una carga óptima que se obtiene a alrededor de 20 minutos antes de que la contracción provoque la expulsión de la disolución de fármaco desde las perlas.

Para los experimentos de elución, se usaron perlas cargadas procedentes del experimento anterior. Se transfirió 1 ml de las perlas cargadas, de concentración 250 mg/ml, a un recipiente de vidrio marrón lleno con 20 ml de PBS, y se comenzó a contar el tiempo. Los recipientes se colocaron en un mezclador giratorio a temperatura ambiente durante todo el experimento. A los 10 minutos, se añadieron en el recipiente 30 ml de PBS reciente, y a 2 h se añadieron en el recipiente otros 50 ml de PBS para dar un volumen final de 100 ml. Se retiró 1 ml de la disolución en puntos de tiempo predeterminados (0, 5, 10, 20, 30, 45, 60, 90 minutos, y 2, 3 y 24 horas), se leyó y después se colocó nuevamente en el recipiente. Las muestras se leyeron a 263 nm, y las concentraciones se calcularon a partir de la ecuación de la curva estándar de ibuprofeno. A partir de los datos, se calcularon los mg de fármaco eluido por 1 ml de perlas hidratadas, y se representó la gráfica (figura 13). Los controles procedentes del experimento anterior se eluyeron en las mismas condiciones.

Ejemplo 9 Carga y elución de ibuprofeno en microesferas usando desencadenantes tales como pH y disolvente

Se usaron seis muestras de 1 ml de perlas (700-1100 \mum). Para cada muestra, se transfirió a un recipiente de vidrio 1 ml de perlas en disolución salina tamponada con fosfato (PBS), medido con un cilindro de vidrio de 10 ml, y todo el PBS se eliminó con cuidado con una pipeta Pasteur de vidrio. Para preparar las disoluciones de carga: a) se disolvieron 4 g de sal sódica de ibuprofeno (SIGMA) en 16 ml de agua (ROMIL) para dar una concentración final de 250 mg/ml, y b) se disolvió 1 de ibuprofeno en forma de ácido libre (SIGMA) en 4 ml de etanol (ROMIL) para dar una concentración final de 250 mg/ml. Una vez preparadas, las absorbancias de la disolución y de las diluciones de las disoluciones acuosa y alcohólica se leyeron mediante UV a 263 nm, para producir curvas estándar. La disolución de carga acuosa de la sal sódica de ibuprofeno se usó entonces para cargar 3 muestras (A, B y C) de perlas. La muestra A se cargó añadiendo 2 ml de la disolución de la sal de ibuprofeno a un vial que contiene 1 ml de perlas hidratadas, durante 20 minutos (preparadas previamente, según los detalles anteriores). El vial se colocó en un mezclador giratorio a temperatura ambiente durante todo el experimento. Una vez cargada, se eliminó la disolución que queda, se midió en un cilindro de medida graduado, y se leyó a 263 nm. A partir de las lecturas y de la curva estándar, se calculó la concentración de la disolución. La cantidad de fármaco cargado en las perlas se calculó restando la cantidad de fármaco en disolución de la cantidad en la disolución de carga de partida. A partir de los datos, los mg de fármaco cargados para 1 ml de perlas, para la muestra A, fue 101 mg/ml. Como control, se "cargaron" en las perlas 2 ml de agua sin fármaco.

Para la muestra B, la carga fue la misma que para la muestra A, pero, en lugar de eliminar inmediatamente el líquido residual, se añadieron al vial 2 ml de agua a pH 1 (obtenido añadiendo HCl al agua). Esto se mantuvo en el mezclador giratorio durante 20 minutos. Después de eso, la disolución se eliminó, y se determinó la concentración de ibuprofeno que queda, y de este modo la cantidad cargada en las perlas. Se encontró que la carga para la muestra B fue de 129,5 mg/ml de carga. Como control, se añadieron 2 ml de agua a pH 1 a un vial que contiene 1 ml de perlas.

Para la muestra C, se usaron 2 ml de etanol durante 20 minutos; después de eso, se eliminó la disolución, y se determinó la concentración de ibuprofeno en forma de ácido libre que queda, permitiendo de ese modo el cálculo de la cantidad cargada en la perla. Se encontró que la cantidad cargada era 47 mg/ml de perla. Como control, para la muestra C, se añadieron 2 ml de etanol a un vial que contiene 1 ml de perlas.

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En la muestra D, se añadieron 2 ml de disolución etanólica que contiene 250 mg/ml de ibuprofeno en forma de ácido libre, y se mantuvieron en el mezclador giratorio durante 20 minutos. Después de eso, la disolución se eliminó, y se determinó la concentración de ibuprofeno. Se encontró que la carga de ibuprofeno en forma de ácido libre, en la perla, era 110,8 mg/ml.

La elución se llevó a cabo con 1 ml de las perlas cargadas transferidas a un recipiente de vidrio marrón lleno con 100 ml de PBS, y se comenzó a contar el tiempo. Los recipientes se colocaron en un mezclador giratorio a temperatura ambiente durante todo el experimento. Se retiró 1 ml de la disolución a tiempos predeterminados (15, 30, 60, y 3 y 5 horas), se leyó y después se colocó nuevamente en el recipiente, de forma que el volumen permaneció constante durante todo el experimento. Las muestras se leyeron a 263 nm, y las concentraciones se calcularon a partir de la ecuación de la curva estándar de ibuprofeno. A partir de los datos, se calculó la cantidad de fármaco eluido por 1 ml de perlas hidratadas, y se representó la gráfica (figura 14). Los controles del experimento anterior se eluyeron en las mismas condiciones. Los controles no están presentes en las gráficas debido a que las concentraciones eluidas permanecieron por debajo de los límites de detección durante todo el experimento.

Se puede ver que cuando se ha ajustado el pH, la liberación del ibuprofeno se ralentiza significativamente. Esto es debido a la generación in situ del ibuprofeno en forma de ácido libre en las perlas, y por tanto la solubilidad del fármaco disminuye drásticamente. De forma similar, si las perlas se exponen a etanol después de la carga, la estructura se colapsa debido a la expulsión de agua (como en el Ejemplo 7). Con la rehidratación en el tampón, el perfil de liberación del ácido libre se guarda incluso más, sugiriendo que el proceso de colapso ayuda a impedir la disolución del fármaco desde la matriz polimérica.

Ejemplo 10 Carga y liberación de quetoprofeno a partir de microesferas

Se preparó una disolución de quetoprofeno de 30 mg/ml en etanol (Sigma Aldrich). Se añadieron 0,5 ml de microesferas de tipo con bajo contenido de AMPS o con alto contenido de AMPS, de 500-710 \mum (ejemplo 1), a 5 ml de disolución de quetoprofeno, por duplicado (a y b), y se monitorizó la captación mediante UV durante 72 horas. Después de una captación inicialmente más elevada, que no se mantuvo, la carga máxima se produjo a 24 horas, mostrando las microesferas con bajo contenido de AMPS aproximadamente 12 mg de quetoprofeno cargado/ml de esferas, y mostrando las microesferas con alto contenido de AMPS aproximadamente 10 mg de quetoprofeno cargado/ml de esferas.

La liberación de quetoprofeno a partir de las esferas cargadas durante 24 horas se determinó según lo siguiente: el exceso de disolución de carga se eliminó mediante una pipeta Pasteur de vidrio a partir de las microesferas cargadas descritas anteriormente. Cada muestra de microesferas cargadas se colocó en un tarro de vidrio que contiene 100 ml de agua, y los tarros se colocaron en un baño de agua en agitación a 37ºC. La liberación se midió mediante UV durante 24 horas, en cuyo momento se añadieron a cada tarro otros 100 ml de agua. La medida de UV se continuó durante 6 horas después de esto. Aproximadamente el 20-25% del fármaco cargado se liberó de las microesferas, siendo esto equivalente a aproximadamente 2,5 mg/ml de microesferas (% calculado a partir de la carga máxima obtenida después de 24 horas). Esto se liberó en los primeros 15 minutos de la elución. La adición de agua adicional, después de 24 horas, no provocó ninguna liberación adicional del fármaco (figura 15). Pareció que hay poco efecto sobre la velocidad de liberación entre el bajo contenido de AMPS y el alto contenido de AMPS en la formulación de las microesferas.

Ejemplo 11 Carga y liberación de naproxeno a partir de las microesferas

Se preparó una disolución de naproxeno de 30 mg/ml en etanol a partir de naproxeno obtenido de Sigma Aldrich. Se añadieron 0,5 ml de microesferas con alto contenido de AMPS o con bajo contenido de AMPS, de 500-710 \mum, a 5 ml de disolución de naproxeno, por duplicado, y la captación se monitorizó mediante UV durante 168 horas (7 días). Las microesferas tomaron aproximadamente 35-40 mg de naproxeno/ml de esferas durante 168 horas. La rápida captación inicial fue seguida de una liberación parcial aparente, y después de más captación gradual (figura 16).

El exceso de disolución de carga se eliminó mediante una pipeta Pasteur de vidrio a partir de las microesferas cargadas descritas en el Ejemplo 8. Cada muestra de microesferas cargadas se colocó en un vial de vidrio que contiene 10 ml de agua, y los viales se colocaron en un baño de agua en agitación a 37ºC. La liberación se midió mediante UV durante 17 horas, en cuyo momento las microesferas se colocaron en 10 ml de agua reciente. La medición de UV se continuó durante 7 horas después de esto. Aproximadamente el 17-25% del fármaco cargado se liberó de las microesferas, siendo esto equivalente a aproximadamente 6-9 mg/ml de microesferas. Esto se liberó en los primeros 5 minutos de la elución (figura 17). La transferencia de las microesferas a agua reciente, después de 17 horas, no provocó ninguna liberación adicional del fármaco.

Ejemplo 12 Carga y liberación de ácido salicílico a partir de las microesferas

Se preparó una disolución de ácido salicílico de 5 mg/ml en etanol a partir de ácido salicílico obtenido de Sigma Aldrich. Se añadieron 0,5 ml de microesferas con bajo contenido de AMPS o con alto contenido de AMPS, de 500-710 \mum, a 5 ml de disolución de ácido salicílico, por duplicado, y la captación se monitorizó mediante UV durante 24 horas. Las microesferas tomaron un máximo de aproximadamente 3-4 mg de ácido salicílico/ml de microesferas después de 3-4 horas, pero esto disminuyó hasta 2-3 mg/ml de microesferas después de 24 horas.

La elución del fármaco se evaluó según lo siguiente: el exceso de disolución de carga se eliminó mediante pipeta Pasteur de vidrio a partir de las microesferas cargadas. Cada muestra de microesferas cargadas se colocó en un tarro de vidrio que contiene 100 ml de agua, y los viales se colocaron en un baño de agua en agitación a 37ºC. La liberación se midió mediante UV durante 60 horas, en cuyo momento las microesferas se colocaron en 10 ml de agua reciente. La medición de UV se continuó durante 60 horas después de esto. Las microesferas con bajo contenido de AMPS liberaron aproximadamente 25% del ácido salicílico cargado, mientras que las microesferas con alto contenido de AMPS liberaron aproximadamente 30% del ácido salicílico cargado. Para ambos tipos de microesferas, la mayoría del fármaco se liberó dentro de los primeros 15 minutos (figura 18). La transferencia de las esferas a agua reciente no provocó ninguna liberación adicional del fármaco.

Referencias

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Claims

1. Uso de polímero hinchable en agua, insoluble en agua, en forma de partículas que tienen tamaños de partículas, cuando se equilibran en agua a 37ºC, en el intervalo de 100 a 1200 \mum, y, asociado con el polímero en una forma liberable, un agente farmacéuticamente activo que es un agente antiinflamatorio no esteroideo seleccionado de entre celecoxib, rofecoxib, diclofenaco, diflunisal, etodolaco, flurbiprofeno, ibuprofeno, indometacina, quetoprofeno, quetorolaco, nabumetona, naproxeno, oxaprozina, piroxicam, ácido salicílico, salicilato de acetilo, sulindaco, tolmetina, y sus sales farmacéuticamente aceptables, en la preparación de una composición para la formación de embolias en el fibroide uterino, en el que el ingrediente farmacéuticamente activo se libera del polímero en el sitio de la formación de la embolia.

2. Uso según la reivindicación 1, en el que las partículas tienen una forma sustancialmente esférica.

3. Uso según la reivindicación 1, en el que el agente activo es un inhibidor de COX, selectivo para COX-1.

4. Uso según la reivindicación 1, en el que el agente activo es un inhibidor de COX, selectivo para COX-2.

5. Uso según la reivindicación 1, en el que el agente farmacéuticamente activo se selecciona de entre ibuprofeno, flurbiprofeno, diclofenaco, quetorolaco, naproxeno, quetoprofeno y ácido salicílico, y sus sales farmacéuticamente aceptables.

6. Uso según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que el polímero es sintético y bioestable.

7. Uso según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que el polímero está reticulado.

8. Uso según la reivindicación 7, en el que el polímero está reticulado covalentemente.

9. Uso según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que el polímero se forma mediante polimerización radicálica de un macrómero de poli(alcohol vinílico) que tiene grupos etilénicamente insaturados colgantes.

10. Uso según la reivindicación 9, en el que los grupos colgantes son grupos (alc)acrílicos.

11. Uso según la reivindicación 9 ó 10, en el que el macrómero se copolimeriza con comonómero etilénicamente insaturado.

12. Uso según la reivindicación 11, en el que el comonómero es un comonómero iónico.

13. Uso según la reivindicación 11 ó 12, en el que el comonómero es un compuesto acrílico.

14. Composición farmacéutica que comprende microesferas de polímero hinchable en agua, insoluble en agua, formado mediante la polimerización radicálica de un macrómero de poli(alcohol vinílico) que tiene grupos etilénicamente insaturados colgantes, y, asociado con el polímero en forma liberable, un agente farmacéuticamente activo que es un agente antiinflamatorio no esteroideo seleccionado de entre celecoxib, rofecoxib, diclofenaco, diflunisal, etodolaco, flurbiprofeno, ibuprofeno, indometacina, quetoprofeno, quetorolaco, nabumetona, naproxeno, oxaprozina, piroxicam, ácido salicílico, salicilato de acetilo, sulindaco, tolmetina, y de los mismos.

15. Composición según la reivindicación 14, en la que el agente activo es un inhibidor de COX, selectivo para COX-1.

16. Composición según la reivindicación 14, en la que el agente activo es un inhibidor de COX, selectivo para COX-2.

17. Composición según la reivindicación 14, en la que el agente farmacéuticamente activo se selecciona de entre ibuprofeno, flurbiprofeno, diclofenaco, quetorolaco, naproxeno, quetoprofeno y ácido salicílico, y sus sales farmacéuticamente aceptables.

18. Composición según cualquiera de las reivindicaciones 14 a 17, en la que el macrómero se forma mediante la reacción de poli(alcohol vinílico) con N-acriloilaminoacetaldehído.

19. Composición según cualquiera de las reivindicaciones 14 a 18, en la que el macrómero se copolimeriza con comonómero etilénicamente insaturado.

20. Composición según la reivindicación 19, en la que el comonómero es iónico.

21. Composición según la reivindicación 18 y la reivindicación 20, en la que el comonómero es un compuesto acrílico.

22. Método para cargar un agente antiinflamatorio no esteroideo, que tiene un grupo ácido y que se selecciona de entre naproxeno, sulindaco, diclofenaco, indometacina, ibuprofeno, salicilato de acetilo, quetorolaco, quetoprofeno, flurbiprofeno y suprofeno, en un vehículo polimérico insoluble en agua e hinchable en agua, que incluye las etapas siguientes:

a): poner en contacto un polímero de poli(alcohol vinílico) reticulado, hinchable en agua, en forma de partículas que se suspenden en la disolución acuosa, que tienen tamaños de partículas, cuando se equilibran en agua a 37ºC, en el intervalo de 100 a 1200 \mum, con una disolución acuosa del agente a un pH por encima del pKa del grupo ácido,

b): añadir ácido al producto de la etapa a) para reducir el pH del líquido acuoso en contacto con el polímero, para reducir el pKa del grupo ácido, y

c): recuperar el polímero con el agente cargado en forma de ácido libre.

23. Método según la reivindicación 22, en el que el agente activo es un inhibidor de ciclooxigenasa.

24. Método según la reivindicación 23, en el que el agente activo es selectivo para COX-1.

25. Método según la reivindicación 23, en el que el agente activo es selectivo para COX-2.

26. Método según la reivindicación 22, en el que el agente activo es ibuprofeno.

27. Método según cualquiera de las reivindicaciones 22 a 26, en el que el pH de la disolución acuosa en la etapa a) es por lo menos 5, y el pH del líquido después de la etapa b) es menor que 3.

28. Método según la reivindicación 22, en el que las partículas son sustancialmente esféricas.

29. Método según cualquiera de las reivindicaciones 22 a 28, en el que el poli(alcohol vinílico) está reticulado por aldehído.

30. Método según cualquiera de las reivindicaciones 22 a 28, en el que el polímero se forma mediante la polimerización radicálica de un macrómero de poli(alcohol vinílico) que tiene grupos etilénicamente insaturados colgantes.

31. Método según la reivindicación 30, en el que el macrómero se forma mediante la reacción de poli(alcohol vinílico) con N-acriloilaminoacetaldehído.

32. Método según la reivindicación 30 ó 31, en el que el macrómero está copolimerizado con comonómero etilénicamente insaturado.

33. Método según la reivindicación 32, en el que el comonómero es iónico.

34. Método según la reivindicación 32 ó 33, en el que el comonómero es un compuesto acrílico.