ES2285460T3 - Composicion probiotica que comprende al menos dos cepas bacterianas de acido lactico capaces colonizar tractos gastrointestinales junto con posesion de propiedades de supervivencia intestinal, de union intestinal, de proteccion frente a infecciones y de fermentacion de fibras. - Google Patents

Composicion probiotica que comprende al menos dos cepas bacterianas de acido lactico capaces colonizar tractos gastrointestinales junto con posesion de propiedades de supervivencia intestinal, de union intestinal, de proteccion frente a infecciones y de fermentacion de fibras. Download PDF

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Abstract

Una composición probiótica que comprende al menos dos cepas bacterianas de ácido láctico, caracterizada porque dichas al menos dos cepas bacterianas de ácido láctico son capaces de colonizar el tracto gastrointestinal de seres humanos y animales y en combinación tienen al menos dos propiedades beneficiosas, que son una propiedad de supervivencia intestinal, una propiedad de unión intestinal, una propiedad de protección frente a infecciones y una propiedad de fermentación de fibras, seleccionándose dichas al menos dos cepas bacterianas de ácido láctico del grupo que comprende Lactobacillus plantarum F5 (LMG P-20604), Lactobacillus plantarum F26 (LMG P-20605), Lactobacillus plantarum 2592 (LMG P-20606), Pediococcus penosaceus 16:1 (LMG P-20608) y Leuconostoc mesentorides 77:1 (LMG P-20607), Lactobacillus plantarum 50:1 (P-20609) y Lactobacillus paracasei (paracasei) F19 (LMG P-17806).

Description

Una composición probiótica que comprende al menos dos cepas bacterianas de ácido láctico que son capaces de colonizar los tractos gastrointestinales en combinación con la posesión de una propiedad de supervivencia intestinal, una propiedad de unión intestinal, una propiedad de protección frente a infecciones y una propiedad de fermentación de fibras.
La presente invención se refiere a una nueva composición probiótica. Más precisamente, la invención se refiere a una composición probiótica que comprende al menos dos cepas bacterianas de ácido láctico que tienen al menos dos propiedades significativas para el mantenimiento del ecosistema microbiano intestinal, para la prevención y el tratamiento de perturbaciones gastrointestinales y para colonizar tractos gastrointestinales.
La flora entérica comprende aproximadamente 95% del número total de células del cuerpo humano. La importancia de la microflora intestinal y, más específicamente, su composición, en procesos fisiológicos así como patológicos del tracto gastrointestinal de seres humanos adultos se ha hecho cada vez más evidente.
Efectos sanitarios relacionados con cambios en la microflora intestinal son atribuidos a microorganismos viables (bacterias o levaduras) que tienen un efecto beneficioso sobre la salud del huésped. Se ha encontrado que la presencia de bacterias de ácido láctico es significativa para el mantenimiento del ecosistema microbiano intestinal. Estos microorganismos, desde hace mucho tiempo llamados probióticos, se definen comúnmente como microorganismos viables que exhiben un efecto beneficioso sobre la salud del huésped cuando se ingieren. Así, un probiótico puede definirse como un monocultivo viable o un cultivo mixto de microorganismos que afecta al huésped mejorando las propiedades de la microflora indígena en el tracto gastrointestinal. Actualmente, está disponible un número de productos comerciales para la prevención y el tratamiento de múltiples perturbaciones gastrointestinales.
En EP 1 020 123 A1 se describen bebidas en combinación con una mezcla de bacterias lácticas vivas liofilizadas en una matriz no láctea. La mezcla de bacterias lácticas vivas liofilizadas comprende al menos tres de Brevibacterium breve, B. infantis, B. longum, B. bifidum, Lactobacillus acidophilus, L. bulgaricus, L. casei, L. plantarum, Streptococcus thermophilus y Streptococcus faecium. Las bebidas están destinadas a complementar y equilibrar la flora intestinal así como a suministrar otros suplementos beneficiosos, tales como vitaminas y antioxidantes, al consumidor.
Sin embargo, la bibliografía contiene muchas observaciones conflictivas para sus beneficios propuestos y el mecanismo de acción correspondiente muchas veces no está definido.
Cepas probióticas posiblemente satisfactorias se han incorporado tradicionalmente en productos lácteos fermentados. En el caso de nuevos microorganismos y organismos modificados la relación beneficiosa entre la cuestión de su seguridad y el riesgo de ingestión ha de determinarse. Las bacterias de ácido láctico en alimentos tienen una larga historia de uso seguro.
Durante los pocos últimos años estos organismos se han incluido en alimentos funcionales y productos relacionados con la salud. La definición para los probióticos ha cambiado gradualmente con la comprensión creciente de los mecanismos por los que influyen en la salud humana. Aunque las demandas sanitarias son generalmente aceptadas tanto por científicos como por consumidores, los mecanismos moleculares subyacentes de muchas de las propiedades de los probióticos demandadas todavía son controvertidos.
Se han aislado e identificado satisfactoriamente bacterias de ácido láctico que exhiben rasgos probióticos beneficiosos. Estas características incluyen la demostración de tolerancia a la bilis, resistencia a los ácidos, adherencia al tejido epitelial del huésped y antagonismo in vitro de microorganismos potencialmente patógenos o los que se han relacionado con promover la inflamación.
Existen en el mercado varios productos basados en leche y fruta que contienen bacterias de ácido láctico. Las interacciones específicas con el tracto gastrointestinal a menudo se describen escasamente y las dosis están pobremente definidas.
Los microorganismos probióticos deben poder fabricarse bajo condiciones industriales. Por otra parte, tienen que sobrevivir y retener su funcionalidad durante el almacenamiento así como en los alimentos en los que han de incorporarse sin producir efectos negativos. Los estudios han mostrado baja viabilidad de los probióticos en preparaciones comerciales.
Para la administración de bacterias de ácido láctico como probióticos en seres humanos o animales, deben adaptarse a las condiciones específicas del tracto gastrointestinal de los adultos, que es significativamente diferente del de los recién nacidos. Sin embargo, hasta ahora existe una pobre evidencia de una implantación satisfactoria de una cepa dada en la flora dominante de un individuo adulto sano. Tal implantación puede tener éxito solo en el momento del nacimiento o cuando el organismo probiótico se administra a un paciente que tiene una microflora intestinal extremadamente desequilibrada, por ejemplo después de un tratamiento prolongado con antibióticos.
Diversos productores de diversos probióticos a menudo reivindican beneficios sanitarios del suministro de diferentes probióticos. En la mayoría de los casos esto no está substanciado y no es cierto. La realidad es que solo una pequeña minoría de las bacterias de ácido láctico tienen los potenciales sanitarios requeridos. La mayoría de los probióticos del mercado no sobreviven a la acidez del estómago o el contenido de ácidos biliares del intestino delgado, ni se adhieren a la mucosa colónica ni colonizan incluso temporalmente el estómago.
El propósito de la invención es evitar las desventajas mencionadas anteriormente de acuerdo con el estado de la técnica proporcionado una composición probiótica que tiene una capacidad óptima para sobrevivir y colonizar los tractos gastrointestinales no solo de seres humanos sino también de los animales que tienen un tracto digestivo similar y así una microflora intestinal correspondiente.
Para alcanzar este propósito el método de acuerdo con la invención ha obtenido los rasgos característicos de la reivindicación 1.
La composición de acuerdo con la invención se basa en que dos o más cepas de bacterias de ácido láctico (LAB) de diferentes especies conjuntamente deben tener propiedades que deben ser beneficiosas para la toma por seres humanos mientras que estimulan el efecto de una flora implantada. Teniendo al menos dos propiedades conjuntas, que definen criterios bien establecidos para la supervivencia y/o la colonización gastrointestinal, se incrementan los beneficios sanitarios potenciales y la influencia sobre la flora intestinal. De acuerdo con la invención, se proporcionan nuevas cepas de LAB probióticas de organismos beneficiosos activos, que tienen características funcionales favorables específicas.
Cepas de LAB de diferentes especies para la composición de acuerdo con la invención se aislaron de la mucosa del intestino grueso humano de personas fallecidas que murieron de otras causas diferentes a enfermedades del tracto GI y que no habían sido tratadas con antibióticos durante al menos dos meses antes de la muerte (cepas F y 2362). Las otras cepas se aislaron de centeno fermentado.
Las cepas de LAB de diferentes especies se tipificaron para el nivel de la especie mediante API 50CH así como ribotipificación (the Swedish Institute for Food and Biotechnology).
Las cepas específicas que han de usarse en la composición probiótica de acuerdo con la invención son Lactobacillus plantarum 2592, Lactobacillus paracasei (paracasei) F19, Pediococcus penosaceus 16:1, Lactobacillus plantarum 50:1 y Leuconostoc mesenteroides 77:1.
Las cepas bacterianas se depositaron el 9 de junio de 2001 de acuerdo con, y satisfaciendo, los requisitos del Tratado de Budapest en the International Recognition of the Deposit of Microorganisms for the Purposes of Patent Procedure with the Belgian Coordinated Collection of Microorganisms (BCCM), Gent, Bélgica, bajo el Nº de Registro LMG P-2060,4 para Lactobacillus plantarum F5, el Nº de Registro LMG P-20605 para Lactobacillus plantarum F26, el Nº de Registro LMG P-20606 para Lactobacillus plantarum 2592, el Nº de Registro LMG P-20607 para Leuconostoc mesentorides 77:1 y el Nº de Registro LMG P-20608 para Pediococcus penosaceus 16:1.
Lactobacillus plantarum 50:1 se depositó en the Belgian Coordinated Collection of Microorganisms el 21 de junio de 2001, donde obtuvo el Nº de Registro P-20609.
Lactobacillus paracasei (paracasei) F19 se había depositado previamente en the Belgian Coordinated Collection of Microorganisms, donde obtuvo el Nº de Registro LMG P-17806.
Todas las cepas de LAB de diferentes especies se hicieron crecer aeróbicamente sobre agar MRS a 37ºC durante 24 h. En un experimento adicional, se determinó el crecimiento a diferentes temperaturas. Todas las cepas podían multiplicarse a temperaturas de +4ºC a 40ºC o 45ºC. Todas las cepas producían proteasa o proteasas, según se determinaba por el ensayo de agar de leche desnatada (24 h, aeróbicamente, 37ºC). Ninguna cepa producía nitrito o nitrato.
Todas las cepas de LAB de diferentes especies podrían utilizar prebióticos, tales como inulina y aminopeptina, pero no \beta-glucano según se determina por el crecimiento sobre medio YNB con tales fibras como la única fuente de carbono. Puesto que las cepas fermentan estas fibras, deben ejercer un efecto beneficioso sobre la flora colónica. Una degradación de fibras aumentada también incrementa la digestibilidad de las fibras crudas.
En una composición de acuerdo con la invención una mezcla de cocos y bacilos debe ser óptima ya que los cocos y los bacilos tienen diferentes tiempos de generación, proliferando los bacilos mucho más rápidamente que los cocos. Un crecimiento óptimo se logra preferiblemente incluyendo en la composición al menos una cepa de bacilo de ácido láctico y al menos una cepa de coco de ácido láctico.
Para promover el crecimiento de las cepas bacterianas de ácido láctico y tener éxito en la colonización del epitelio del tracto gastrointestinal de un huésped así como ejercer una resistencia a enfermedades infecciosas, una composición de acuerdo con la invención debe tener una propiedad de supervivencia intestinal, una propiedad de unión intestinal, una propiedad protectora frente a infecciones y una propiedad de fermentación de fibras.
Una propiedad de supervivencia intestinal significativa es la capacidad para crecer en presencia de bilis. Todas las cepas de LAB reivindicadas son capaces de crecer en presencia de bilis (humana y porcina) al 20% y a continuación retener su tolerancia a la bilis después de que la presión selectiva se haya retirado y reaplicado.
Todas las cepas de LAB de diferentes especies también sobreviven cuando se someten a una acidez de pH 2,0-3,0. Por otra parte, esta resistencia a los ácidos permanece con la adición de pepsina al 0,3% (24 h a 37ºC) en tres de ellas (L. plantarum F5, L. plantarum F26 y L. plantarum 50:1), según se representa en la Tabla 1 posterior.
TABLA 1
1
Así, las cepas tolerantes a ácidos y bilis poseen ventajas de crecimiento sobre las de cepas parentales bajo condiciones de estrés.
Ratones BalbC se alimentaron intragástricamente con las bacterias de ácido láctico de la invención. Las cepas de LAB usadas eran L. paracasei (paracasei) F19, L. plantarum 2592, P. pentosaceus 16:1 y L. mesenteroides 77:1. La excreción de las cuatro cepas dadas se obtuvo mediante cultivo. La excreción de estas podía detectarse durante 6 semanas después de la administración, lo que indica la colonización del tracto gastrointestinal del huésped.
Se encontró que la respuesta a los ácidos de estas cepas de LAB, cuando se exponían a condiciones ácidas adaptativas subletales (pH 5,0 durante 60 min), confería un nivel significativo de protección contra la exposición subsiguiente a pH letal (pH 3,0) así como a diferentes estreses ambientales (estrés oxidativo, exposición a etanol y conge-
lación).
Una respuesta tolerante a los ácidos desarrollada durante la adaptación a pH 5,0 afectaba a la supervivencia celular contra estreses ambientales. Los cultivos adaptados desarrollaban tolerancia a etanol (20%), congelación (-20ºC) y estimulación oxidativa (H_{2}O_{2} 10 mM), pero no al calentamiento (60ºC) ni al choque osmótico (NaCl 3 M). La presencia de cloranfenicol durante la etapa de adaptación inhibía parcialmente la resistencia celular. Se encontró que esta adaptación dependía de la síntesis de proteínas de novo.
Una exposición a estrés ácido a pH 5,0 durante 1 h provocaba la inducción de nueve nuevas proteínas con pesos moleculares (PM) de 10,1 a 68,1 kDa según se determinaba mediante electroforesis en gel de poliacrilamida en presencia de dodecilsulfato sódico, con lo que también podía establecerse la sobreexpresión de las proteínas. Todas las otras proteínas, que exhibían características básicas o neutras, se reprimían.
Lactobacillus plantarum 2592 produce grandes cantidades de una proteína característica que tiene un peso molecular de 19 kDa.
Las proteínas inducidas durante la respuesta de tolerancia a los ácidos tienen que ser activas ya que la incorporación de análogos de aminoácidos inhibía la respuesta.
También se encontró que varias de las proteínas inducidas y sobreexpresadas reaccionan cruzadamente con proteínas de choque térmico descritas previamente. Las proteínas de peso molecular 10, 24 y 43 kDa reaccionaban cruzadamente con cochaperonas GroES, GrpE y DnaJ, respectivamente. Las proteínas menos sobreexpresadas de peso molecular 70 y 55 kDa reaccionaban cruzadamente con GrpE y GroES, respectivamente.
Así, se encontró que la supervivencia bajo condiciones de estrés ácido estaba conectada con la expresión de una respuesta de estrés adaptativo. Tal respuesta, caracterizada por la inducción transitoria de proteínas específicas y cambios fisiológicos, potencia la capacidad de las cepas de LAB de diferentes especies para soportar condiciones ambientales duras. La síntesis proteínica continua de las proteínas específicas inducidas por las cepas de LAB reivindicadas en un ambiente ácido, como en el estómago gástrico, incrementarían entonces la estabilidad de proteínas preexistentes.
Una propiedad protectora frente a la infección adicional de las cepas de LAB de diferentes especies es la de sus propiedades antioxidantes, por las que se contrarresta la acción de radicales libres por productos de inflamación.
Las cepas de LAB producían antioxidantes según se medía mediante un ensayo espectrofotométrico (Total Antioxidant kit, producto Nº NX 2332 de Randox, San Diego, CA, EE.UU. de A.) en lisados de cepas bacterianas de ácido láctico. Se observó que se producen antioxidantes que son eficaces contra radicales libres y terminan reacciones oxidativas en cadena. Todas las cepas de LAB producían antioxidantes en cantidades de 2,7 a 8,9 mg de proteína por litro. Las cepas P. pentosaceus 16:1 y L. plantarum F26 producían las mayores cantidades de antioxidantes seguidas inmediatamente por L. paracasei (paracasei) F19.
Se les administraron a ratones diabéticos estas cepas de LAB en la misma dosis diaria durante 12 días. Los ratones fueron alimentados con 10^{10} células de cuatro cepas (L. paracasei (paracasei) F19, L. plantarum 2592, P. pentosaceus 16:1 y L. mesenteroides 77:1) dos veces al día de estas cepas intragástricamente durante 12 días. Los niveles de colesterol de los animales no se disminuían. La seguridad de las cepas se confirmó tomando cultivos sanguíneos de los ratones al final del estudio, que no mostraban crecimiento.
Asimismo, 52 personas sanas (14-87 años de edad) consumían 10^{10} bacterias de cuatro de las cepas de LAB de diferentes especies diariamente durante 3 meses sin efectos adversos.
Preferiblemente, la propiedad protectora frente a infecciones de la composición de la invención es un efecto inmunopotenciador, por lo que se obtiene una respuesta inmune positiva. Se encontró que las cepas tenían diferentes capacidades para transcribir NF-kappa B al núcleo celular según se describe mediante transferencia por gotas (Wilson L. y otros, Gastroenterol 1999; 117:106-114; y Splecker M. y otros, J Immunol 2000;15 (marzo):3316-22). La inducción de NF-kappa B daba como resultado una respuesta de citoquina, que era bien proinflamatoria o bien antiinflamatoria.
Las cepas de Lactobacillus, particularmente L. paracasei (paracasei) F19, pero no los cocos, transcribían NF-kappa B a la línea celular de macrófagos U973, dando como resultado la síntesis de las interleuquinas IL-1\beta e IL-8. Las citoquinas inducidas eran del tipo proinflamatorio.
Un aspecto importante adicional de la composición de acuerdo con la invención es que las cepas de LAB probióticas de acuerdo con la invención deben tener aquí una propiedad de unión intestinal para poder desarrollar sus propiedades funcionales. Una de tales propiedades de unión es que exhibirán alta adhesión a tractos gastrointesinales. Para actuar como un probiótico, una cepa bacteriana de ácido láctico debe poder colonizar la capa de moco intestinal.
Las cepas reivindicadas también se obtuvieron rastreando con respecto a la unión de mucina porcina (tipo II, Sigma Chem Co, St Louis, CO, EE.UU. de A.) en un método de ELISA (Tuomola EM y otros, FEMS Immunology and Med Microbiol 26(1999) 137-142). Los resultados se muestran en la Tabla 2 posteriormente. Los resultados se compararon con los de una cepa comercial, Lactobacillus rahmnosus GG (Valio).
TABLA 2
2
Aparte de exhibir unión a mucina, las cepas de LAB probióticas en la composición de la invención deben poder expresar hidrofobia superficial celular en el tracto gastrointestinal humano. La hidrofobia superficial celular se midió mediante la Prueba de Agregación de Sal (SAT) (Rozgoynyi F. y otros, FEMS Microbiol Lett 20(1985) 131-138). En la Tabla 3 posterior, se muestra una comparación para la adherencia de vibronectina (Vn), vibronectina a pH 3,5, fetuina (Ft), asialofetuina y asialofetuina a pH 3,5.
TABLA 3
3
Se encontró que los microorganismos adheridos estaban estrechamente unidos al moco inmovilizado. Cinco cepas expresaban hidrofobia superficial celular pronunciada y las otras tres cepas expresaban hidrofobia superficial celular moderada. No se observó correlación entre la hidrofobia superficial celular y la capacidad adhesiva de las cepas de LAB.
Las cepas de LAB de diferentes especies también se probaron con respecto a la unión a glándulas submaxilares bovinas y mucina porcina tipo II (Sigma) en un ensayo de aglutinación de partículas (PAA) (Paulsson M. y otros, J Clin Microbiol 30(1992) 2006-20012). Generalmente, se encontró que la expresión de la unión a moco bovino era más fuerte.
Puesto que muchas de las células en tejidos de organismos multicelulares están embebidas en una matriz extracelular que consiste en proteínas y polisacáridos secretados, las cepas de LAB de diferentes especies de acuerdo con la invención se examinaron con referencia a su interacción con proteína de la matriz extracelular gastrointestinal. La unión de proteínas de la matriz extracelular y glucosaminoglicanos se estudió en la forma inmovilizada mencionada anteriormente (ensayo PAA). Todas las cepas de LAB expresaban unión a colágeno tipo I y III, fibronectina, fibrinógeno y heparina, también a pH 3,5. Las cepas L. paracasei (paracasei) F19, L. plantarum F26 y L. plantarum 2592 expresaban unión de fetuina, también a pH 3,5.
Por otra parte, todas las cepas de LAB de diferentes especies, excepto L. plantarum 2592 y L. mesenteroides 77:1, expresaban unión a vitronectina. Sin embargo, a pH 3,5, estas cepas expresaban una unión débil.
Una propiedad de supervivencia intestinal significativa adicional de las cepas de LAB en la composición probiótica de acuerdo con la invención es poseer una propiedad protectora frente a la infección.
Heliobacter pylori es el agente causal de la gastritis aguda y crónica, una de las infecciones más relevantes en todo el mundo que puede avanzar hasta gastritis atrófica, adenocarcinoma y linfoma de MALT.
Los lactobacilos de la presente invención inhiben el crecimiento de 10 cepas de H. pylori debido a la concentración de ácido láctico y el pH in vitro. El efecto inhibidor se perdía cuando el pH se ajustaba hasta 6,0. Análisis adicionales mostraban que el ácido L-láctico, pero no el ácido D-láctico o el ácido acético, inhibía el crecimiento a concentraciones de 60 a 100 mM. No se observó relación entre el fenotipo CagA de H. pylori y la tolerancia a ácido láctico. Se encontró que la inhibición era específica de la cepa.
Una propiedad protectora frente a la infección adicional es manifestada por las interacciones mediadas por bacteriocinas. Todas las cepas de LAB de diferentes especies, excepto L. plantarum F5, secretan en un sobrenadante libre de células un producto que tiene actividad antimicrobiana. Los productos producidos eran compuestos antimicrobianos termoestables, que se observó que eran de naturaleza proteínica y, por lo tanto, se denominaron bacteriocinas. Las bacteriocinas exhibían actividades contra organismos gram positivos. Algunas eran activas contra organismos gram negativos (cepas H. pylori) y algunas contra levaduras (cepas de Candida). Los efectos antimicrobianos no estaban correlacionados directamente con la producción de ácido.
Por otra parte, las células de H. pylori eran bacilares en su conformación y no cocoidales, indicando que la inhibición observada estaba relacionada con un efecto bactericida en vez de una inducción de formas cocoidales viables pero no cultivables. Se encontró que el efecto bactericida se debe a una proteína intracelular de 28 kDa, que se liberaba después de la lisis. El tratamiento proteolítico de esta proteína intracelular daba como resultado pérdida de actividad antibacteriana. Esta pérdida podía suprimirse renaturalizando por medio de electroforesis en gel de poliacrilamida en presencia de dodecilsulfato sódico.
En un modelo establecido de gastritis por H. pylori en ratones, la administración de las cepas de LAB de diferentes especies de acuerdo con la invención daba como resultado una infección inhibida con inflamación disminuida adjunta. Este efecto inhibidor parecía ser específico de la cepa en vez de específico de la especie. La actividad in vitro de las cepas de LAB se correlacionaba bien con la actividad contra H. pylori.
Preparaciones de la composición probiótica de la invención comprenden bacterias vivas refrigeradas, congeladas o liofilizadas de al menos 10^{10} CFU/g como un aditivo probiótico en alimentos o piensos.

Claims (19)

1. Una composición probiótica que comprende al menos dos cepas bacterianas de ácido láctico, caracterizada porque dichas al menos dos cepas bacterianas de ácido láctico son capaces de colonizar el tracto gastrointestinal de seres humanos y animales y en combinación tienen al menos dos propiedades beneficiosas, que son una propiedad de supervivencia intestinal, una propiedad de unión intestinal, una propiedad de protección frente a infecciones y una propiedad de fermentación de fibras, seleccionándose dichas al menos dos cepas bacterianas de ácido láctico del grupo que comprende Lactobacillus plantarum F5 (LMG P-20604), Lactobacillus plantarum F26 (LMG P-20605), Lactobacillus plantarum 2592 (LMG P-20606), Pediococcus penosaceus 16:1 (LMG P-20608) y Leuconostoc mesentorides 77:1
(LMG P-20607), Lactobacillus plantarum 50:1 (P-20609) y Lactobacillus paracasei (paracasei) F19 (LMG P-17806).
2. Una composición probiótica de acuerdo con la reivindicación 1, caracterizada porque dichas cepas bacterianas de ácido láctico son bacterias viables de al menos 10^{10} CFU/g.
3. Una composición probiótica de acuerdo con la reivindicación 1, caracterizada porque dicha propiedad de supervivencia intestinal es la capacidad para crecer en presencia de bilis.
4. Una composición probiótica de acuerdo con la reivindicación 1, caracterizada porque dicha propiedad de supervivencia intestinal es la capacidad para sobrevivir a un pH bajo.
5. Una composición probiótica de acuerdo con la reivindicación 4, caracterizada porque dicha capacidad para sobrevivir a pH bajo es la supervivencia a pH bajo en presencia de pepsina.
6. Una composición probiótica de acuerdo con la reivindicación 1 y 4, caracterizada porque dicha propiedad de supervivencia intestinal es la capacidad para producir proteínas de estrés.
7. Una composición probiótica de acuerdo con la reivindicación 6, caracterizada porque dichas proteínas de estrés reaccionan cruzadamente con proteínas de choque térmico.
8. Una composición probiótica de acuerdo con la reivindicación 1, caracterizada porque dicha propiedad de unión intestinal es la capacidad para unirse a mucina.
9. Una composición probiótica de acuerdo con la reivindicación 1, caracterizada porque dicha propiedad de unión intestinal es la capacidad para unirse a proteínas de la matriz extracelular.
10. Una composición probiótica de acuerdo con la reivindicación 1, caracterizada porque dicha propiedad de unión intestinal es la capacidad para unirse a glucosaminoglicanos.
11. Una composición probiótica de acuerdo con la reivindicación 1, caracterizada porque dicha propiedad de unión intestinal es la capacidad para expresar hidrofobia superficial celular.
12. Una composición probiótica de acuerdo con la reivindicación 1, caracterizada porque dicha propiedad de protección frente a infecciones es la capacidad para producir bacteriocinas.
13. Una composición probiótica de acuerdo con la reivindicación 12, caracterizada porque dichas bacteriocinas tienen actividad contra bacterias Gram positivas.
14. Una composición probiótica de acuerdo con la reivindicación 12, caracterizada porque dichas bacteriocinas tienen actividad contra bacterias Gram negativas.
15. Una composición probiótica de acuerdo con la reivindicación 12, caracterizada porque dichas bacteriocinas tienen actividad contra levadura.
16. Una composición probiótica de acuerdo con la reivindicación 1, caracterizada porque dicha propiedad de protección frente a infecciones es la capacidad para producir antioxidantes.
17. Una composición probiótica de acuerdo con la reivindicación 1, caracterizada porque dicha propiedad de protección frente a infecciones es la capacidad para inducir una respuesta de citoquinas proinflamatorias.
18. Una composición probiótica de acuerdo con la reivindicación 1, caracterizada porque dicha propiedad de fermentación de fibras es la capacidad para fermentar amilopectina e inulina.
19. Uso de una cepa bacteriana de ácido láctico, seleccionada del grupo que comprende Lactobacillus plantarum F5 (LMG P-20604), Lactobacillus plantarum F26 (LMG P-20605), Lactobacillus plantarum 2592 (LMG P-20606), Pediococcus penosaceus 16:1 (LMG P-20608) y Leuconostoc mesentorides 77:1 (LMG P-20607), y Lactobacillus plantarum 50:1 (P-20609), solas o en combinación, como un aditivo probiótico en la preparación de un alimento o pienso.
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