ES2270597T3

ES2270597T3 - 17-beta-nitro-11-beeta-arilesteroides y sus derivados con propiedades hormonales agonista y antagonistas.

Info

Publication number: ES2270597T3
Application number: ES99924208T
Authority: ES
Inventors: C. Edgar Cook; John A. Kepler; Rupa S. Shetty; Gary S. Bartley; David Yue-Wei Lee
Original assignee: Research Triangle Institute
Current assignee: Research Triangle Institute
Priority date: 1998-05-29
Filing date: 1999-05-28
Publication date: 2007-04-01
Anticipated expiration: 2019-05-28
Also published as: CA2333668A1; WO1999062929A1; CA2333668C; DE69932515D1; JP2002517405A; US6093707A; US6015805A; DE69932515T2; AU753355B2; US5962444A; EP1082338A1; EP1082338A4; JP4545930B2; PT1082338E; DK1082338T3; ATE334139T1; EP1082338B1; AU4076299A; CY1106444T1

Abstract

Un compuesto esteroide hormonal o antihormonal con la estructura I, en la que R1 es (R2R3N(O)r)-, en la que r es 0 ó 1 y R2 y R3 son cada uno independientemente H, alquilo C1-6, cicloalquilo C3-8, alquenilo C2-6 o alquinilo C2-6, cualquiera de los cuales puede estar opcionalmente sustituido; o R1 es en la que q es 0 ó 1, Y es -(CH2)m- en la que m es un número entero de 0 a 5, o Y es -(CH2)n-Z-(CH2)p-, en la que n es un número entero de 0 a 2, p es un número entero de 0 a 2, y Z es un heteroátomo (opcionalmente sustituido); y en la que los grupos CH2 pueden estar opcionalmente sustituidos; o R1 es N-imidazolil-, N-pirrolil-, halo, HO-, CF3SO2O-, alquilo C1-6-O-, alquilo C1-6-S-, alquilo C1-6-S(O)-, alquilo C1-6-S(O)2-, alquilo C1-6-CO-, alquilo C1-6-CH(OH)-, NC-, HCC-, C6H5CC-, 2''-furilo, 3''-furil-, 2''-tiofenilo, 3''- tiofenil-, 2''-piridilo, 3''-piridilo, 4''-piridil-, 2''- tiazolil-, 2''-N-metilimidazolil-, 5''-pirimidinil-, C6H5-, H2C=CH-, alquilo C1-6 o MeC(=CH2)-; y R12 es H o halo; o R1 y R12se combinan para formar un anillo en la que W es CH2, CH, NH, N, O, o S, y R4 es H o alquilo C1-6; y X es O o NOR5, en la que R5 es H o alquilo C1-6, cicloalquilo C3-8, alquenilo C2-6, alquinilo C2-6, arilo C6- 12, o heteroarilo, cualquiera de los cuales puede estar opcionalmente sustituido.

Description

17-\beta-nitro-11-\beta-arilesteroides y sus derivados con propiedades hormonales agonistas y antagonistas.

Antecedentes de la invención Ámbito de la invención

Esta invención se refiere a una nueva clase de esteroides que se cree que se unen al receptor de progestina y que presentan una potente actividad antiprogestacional. Tales compuestos son útiles para el tratamiento de fibroides, endometriosis, y ciertos tumores, en la provocación de la maduración cervical antes del parto, en terapia de sustitución hormonal y en el control de la fertilidad y la reproducción.

Descripción de los antecedentes

La progesterona desempeña un papel importante en la salud y en el funcionamiento reproductivo. Sus efectos sobre, por ejemplo, el útero, las mamas, el cérvix y la unidad hipotalámico-pituitaria están bien establecidos. También tiene actividades extra-reproductivas que no han sido tan bien estudiadas, tales como efectos sobre el cerebro, el sistema inmunitario, el sistema endotelial vascular y sobre el metabolismo lipídico. Dado este amplio abanico de efectos, es evidente que los compuestos que mimetizan alguno de los efectos de la progesterona (agonista), antagonizan estos efectos (antagonistas) o presentan efectos mixtos (agonistas parciales o agonistas/antagonistas mixtos) pueden ser útiles en el tratamiento de una variedad de dolencias y enfermedades.

Las hormonas esteroides ejercen sus efectos, en parte, uniéndose a receptores intracelulares. Los compuestos que se unen a los receptores apropiados y son antagonistas o agonistas parciales de las hormonas estrogénicas y androgénicas se conocen desde hace tiempo, pero hasta 1982 aproximadamente no se anunció el descubrimiento de compuestos que se unen al receptor de progesterona y antagonizan los efectos de la progesterona. Desde entonces, se han presentado una serie de tales compuestos en la bibliografía científica y de patentes y se han estudiado sus efectos in vitro, en animales y en humanos. Aunque compuestos tales como los estrógenos y ciertos inhibidores enzimáticos pueden prevenir los efectos fisiológicos de la progesterona endógena, en esta descripción "antiprogestina" está limitada a aquellos compuestos que se unen al receptor de progestina.

Ahora está disponible la información que indica que las antiprogestinas serían eficaces en una serie de dolencias médicas. Esta información se ha resumido en un informe del Instituto de Medicina (Donaldson, Molly S.; Dorflinger, L.; Brown, Sarah S.; Benet, Leslie Z., Editors, Clinical Applications of Mifepristone (RU 486) and Other Antiprogestins, Committee on Antiprogestins: Assessing the Science, Institute of Medicine, National Academy Press, 1993). En vista del papel fundamental que desempeña la progesterona en la reproducción, no es sorprendente que las antiprogestinas puedan desempeñar una parte en el control de la fertilidad, incluyendo la anticoncepción (a largo plazo y de emergencia o post-coital), inducción de la menstruación e interrupción médica del embarazo, pero hay muchos otros usos potenciales que han sido respaldados por estudios clínicos o preclínicos menores. Entre estos están los
siguientes:

1. Parto - las antiprogestinas se pueden usar para la maduración cervical antes de la inducción del parto, tal como al término del embarazo o cuando se debe inducir el parto debido a la muerte del feto. También se pueden usar para ayudar a la inducción del parto al término del embarazo o en embarazos fuera de plazo.

2. Tratamiento de leiomiomas uterinos (fibroides) - estos tumores no malignos pueden afectar hasta al 20% de las mujeres mayores de 30 años y son una de las causas más comunes de cirugía en mujeres durante sus años reproductivos. La histerectomía, el tratamiento habitual para los síntomas persistentes, naturalmente da como resultado la
esterilidad.

3. Tratamiento de endometriosis - esta dolencia común (del 5 al 15% de incidencia, mucho mayor en mujeres infértiles) y a menudo dolorosa ahora se trata con fármacos tales como danazol o análogos hormonales para la liberación de gonadotrofinas que presentan importantes efectos secundarios, o se debe tratar quirúrgicamente.

4. Terapia de sustitución hormonal, que se puede dar para interrumpir o reducir la actividad de las progestinas.

5. Cánceres, particularmente cánceres de mama - la presencia de receptores de progestina en muchos cánceres de mama ha sugerido el uso de antiprogestinas en el tratamiento de cánceres metastáticos o en la prevención de la recurrencia o el desarrollo inicial del cáncer.

6. Otros tumores tales como meningiomas - estos tumores de la membrana cerebral, aunque no malignos, dan como resultado la muerte del paciente y se carece de tratamientos no quirúrgicos.

7. Anticoncepción masculina - las antiprogestinas pueden interferir con la viabilidad del esperma, aunque es controvertido si éste es un efecto antiprogestacional o no, ya que puede estar relacionado con la actividad antiglucocorticoide de tales compuestos.

8. Efectos antiestrogénicos - al menos algunas antiprogestinas se oponen a la acción de los estrógenos en ciertas pruebas, pero aparentemente a través de un mecanismo que no involucra a los receptores hormonales clásicos. Esto abre una variedad de posibilidades para su uso médico.

9. Efectos antiglucocorticoides - éste es un efecto secundario habitual de las antiprogestinas, que puede ser útil en algunos casos, tal como en el tratamiento del síndrome de Cushing, y, por ejemplo, podrían desempeñar un papel en trastornos inmunitarios. En otros casos es deseable minimizar tales efectos.

Los efectos y usos de los agonistas de la progesterona están bien documentados. Además, recientemente se ha demostrado que ciertos compuestos estructuralmente relacionados con las antiprogestinas conocidas presentan una potente actividad agonista en ciertos sistemas biológicos (por ejemplo, los clásicos efectos de la progestina en el útero de conejo inmaduro tratado con estrógeno; cf. C. E. Cook y col., Life Sciences, 52, 155-162 (1993)). Tales compuestos son agonistas parciales en sistemas receptores procedentes de células humanas, en los que se unen a un sitio distinto tanto del sitio de la progestina como de la antiprogestina (Wagner y col., Proc. Natl. Acad. Sci., 93, 8739-8744 (1996)). Así la clase general de antiprogestinas puede tener subclases, cuyos perfiles clínicos pueden variar.

Las antiprogestinas más tempranas, además de tener un sustituyente 11\beta-arilo, están sustituidas con un grupo 17\beta-hidroxilo y diversos sustituyentes 17\alpha. (Véase por ejemplo, Teutsch, Jean G.; Costerousse, Germain; Philibert, Daniel, y Deraedt, Roger. Novel steroids. Patente de EE.UU. Nº 4.386.085, 1983; Philibert, Daniel; Teutsch, Jean G.; Costerousse, Germain, y Deraedt, Roger. 3-Keto-19-nor-\Delta-4,9-steroids. Patente de EE.UU. Nº 4.477.445, 1983; Teutsch, Jean G.; Pantin, Germain; Costerousse, Saint-Maurice; Daniel Philibert; La Varenne Saint Hilaire; Roger Deraedt, inventors. Steroid derivatives Roussel Uclaf, assignee. Patente de EE.UU. Nº 4.447.424, 1984; Cook, C. Edgar; Tallent, C. Ray; Reel, Jerry R., y Wani, Mansukh C. 17\alpha-(Substituted-methyl)-17\beta-hydroxy/esterified hydroxy steroids and pharmaceutical compositions containing them. Patentes de EE.UU. Nº 4.774.236 (1988) y 4.861.763 (1989)). Entonces se descubrió que un grupo 17\beta-acetilo, 17\alpha-aciloxi en presencia de un 11\beta-arilo también podría generar compuestos con efectos antiprogestacionales (Cook, C. Edgar; Lee, Y.-W.; Reel, Jerry R.; Wani, Mansukh C., Rector, Douglas. 11\beta-Substituted Progesterone Analogs. Patentes de EE.UU. Nº 4.954.490 (1990) y 5.073.548 (1991)), y también se han realizado diversas permutaciones de estos hallazgos. No obstante, se ha informado de que la introducción de un grupo 16\alpha-etilo o un sustituyente hidrógeno en la posición 17\alpha en la serie de compuestos 17\beta-acilo produce actividad agonista o agonista parcial (C. E. Cook y col., Life Sciences, 52, 155-162 (1993)).

El documento US-A-4 634 695 describe derivados de 17-oxima 11\beta-aril estrano con actividad antiprogestina.

Generalmente la actividad antiprogestacional se ha asociado a la presencia de un sustituyente 11\beta-arilo sobre el núcleo esteroide, junto con un resto \Delta^{4,9}-3-cetona o \Delta^{4}-3-cetona. No obstante, se ha demostrado que sustituyentes sobre el anillo D del esteroide pueden tener una marcada influencia sobre el perfil biológico de estos compuestos (véase anteriormente). Así, los cambios en el anillo D del esteroide producen una amplia variedad de efectos sobre la actividad biológica.

Se puede observar que la posición 17\beta de las antiprogestinas actuales se ha caracterizado por una sustitución con un átomo de carbono o un átomo de oxígeno. No se han presentado informes sobre el efecto de un sustituyente nitro o relacionado con nitro, tal como una espironitrona, en posición 17\beta en esteroides que tienen un sustituyente 11\beta-arilo. Esta invención proporciona un grupo de nuevos 17\beta-nitroesteroides, que se caracterizan por una sustitución en 11\beta, particularmente una sustitución 11\beta-arilo. Se han presentado muy pocos 17\beta-nitroesteroides, y ninguno con una sustitución en 11\beta en la bibliografía química general o en patentes. Cf. por ejemplo, Patchett, Arthur A.; Metuchen, Glen E.; Arth, Cranford, y Hoffman, Frances G. Alkanoylthio and pyrazolo androstane derivatives. Patente de EE.UU. Nº 3.094.521, 1963. Esta patente describe una síntesis de 17-nitroesteroides y su reacción de Michael con acrilato de metilo, pero no se ha informado de actividad biológica asociada a los nitrocompuestos.

Además, esta invención proporciona un grupo de nuevos nitrona esteroides 17,17-espirocíclicos. Aunque se conocen unos pocos nitrona esteroides 17,17-espirocíclicos (cf. Keana, John F. W.; Tamura, Toshinari; McMillen, Debra A., y Jost, Patricia C. Synthesis and characterization of a novel cholesterol nitroxide spin label. Application to the molecular oganization of human high-density lipoprotein. J. Am. Chem. Soc. 103: 4904-4912 (1981)), estos se han usado para desarrollar marcadores de espín y no por sus propiedades biológicas. No se ha informado de compuestos con sustituyentes 11\beta-arilo.

A pesar de las promesas clínicas de las antiprogestinas, a partir del 1 de mayo de 1998, no se han comercializado fármacos de antiprogestina en los Estados Unidos ni en muchos otros países. Sólo se ha aprobado un fármaco de antiprogestina y está disponible para usos clínicos en cualquier parte del mundo y este fármaco, la mifepristona, se usa principalmente para la interrupción médica del embarazo. Hay una serie de factores que son la causa de esta situación, pero ciertamente existe la necesidad de nuevos fármacos antiprogestacionales que se puedan usar para las dolencias descritas anteriormente. Por consiguiente también existe la necesidad de compuestos de antiprogestina que presenten una mayor especificidad.

Por tanto es el propósito de la presente invención proporcionar nuevos y potentes antagonistas de la progestina (antiprogestinas) y agonistas de la progestina mixtos o parciales, y proporcionar procedimientos para su uso médico en mamíferos, incluyendo humanos.

Resumen de la invención

Esta invención proporciona un grupo de nuevos 17\beta-nitroesteroides, que se caracterizan por una sustitución en 11\beta, particularmente una sustitución 11\beta-arilo. Además, esta invención proporciona un grupo de nuevos nitrona esteroides 17,17-espirocíclicos. Por tanto la presente invención se refiere a compuestos que tienen potencial para reducir los efectos secundarios y, además, presentan una fuerte unión al receptor de progestina y tienen una potente actividad progestacional o antiprogestacional.

Breve descripción de los dibujos

Se obtendrá fácilmente una apreciación más completa de la invención y muchas de sus ventajas relacionadas a medida que se entienda mejor en referencia a la siguiente descripción detallada cuando se considere en conexión con los dibujos anexos, en los que:

La Figura 1 ilustra la preparación de compuestos 17\beta-nitrosustituidos;

La Figura 2 ilustra la preparación de compuestos nitrona C_{17} espirocíclicos; y

La Figura 3 ilustra la preparación de compuestos nitroalquinilo.

Descripción detallada de las formas de realización preferidas

Los compuestos esteroides según la presente invención pueden tener la estructura I,

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1

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en la que

R^{1} es (R^{2}R^{3}N(O)_{r})-, en la que r es 0 ó 1 y R^{2} y R^{3} son cada uno independientemente H, alquilo C_{1-6}, cicloalquilo C_{3-8}, alquenilo C_{2-6} o alquinilo C_{2-6}, cualquiera de los cuales puede estar opcionalmente sustituido; o

R^{1} es

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2

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en la que q es 0 ó 1, Y es -(CH_{2})_{m}- en la que m es un número entero de 0 a 5,

o Y es -(CH_{2})_{n}-Z-(CH_{2})_{p}-, en la que n es un número entero de 0 a 2, p es un número entero de 0 a 2, y Z es un heteroátomo (opcionalmente sustituido); y en la que los grupos CH_{2} pueden estar opcionalmente sustituidos; o

R^{1} es N-imidazolil-, N-pirrolil-, halo, HO-, CF_{3}SO_{2}O-, alquilo C_{1-6}-O-, alquilo C_{1-6}-S-, alquilo C_{1-6}-S(O)-, alquilo C_{1-6}-S(O)_{2}-, alquilo C_{1-6}-CO-, alquilo C_{1-6}-CH(OH)-, NC-, HCC-, C_{6}H_{5}CC-, 2'-furilo, 3'-furil-, 2'-tiofenilo, 3'-tiofenil-, 2'-piridilo, 3'-piridilo, 4'-piridil-, 2'-tiazolil-, 2'-N-metilimidazolil-, 5'-pirimidinil-, C_{6}H_{5}-, H_{2}C=CH-, alquilo C_{1-6} o MeC(=CH_{2})-; y

R^{12} es H o halo; o

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R^{1} y R^{12} se combinan para formar un anillo

3

en la que W es CH_{2}, CH, NH, N, O, o S, y R^{4} es H o alquilo C_{1-6}; y

X es O o NOR^{5}, en la que R^{5} es H o alquilo C_{1-6}, cicloalquilo C_{3-8}, alquenilo C_{2-6}, alquinilo C_{2-6}, arilo C_{6-12}, o heteroarilo, cualquiera de los cuales puede estar opcionalmente sustituido; o

X es (H, H), (H, OH), (H, OSi(alquilo C_{1-6})_{3}), o (H, OCOR^{5}), en la que R^{5} es alquilo C_{1-6}, cicloalquilo C_{3-8}, alquenilo C_{2-6}, alquinilo C_{2-6}, arilo C_{6-12}, aralquilo, aralquenilo, aralquinilo, heteroarilo, heteroaralquilo, heteroaralquenilo o heteroaralquinilo, cualquiera de los cuales puede estar opcionalmente sustituido; o

X es

4

en la que Y es -(CH_{2})_{m}- en la que m es un número entero de 0 a 3, o Y es -(CH_{2})_{n}-Z-(CH_{2})_{p}- en la que n es un número entero de 0 a 2, p es un número entero de 0 a 2 y Z es un heteroátomo (opcionalmente sustituido) o Z es un átomo de carbono sustituido con uno o dos grupos alquilo C_{1-6};

R^{6} es H, alquilo C_{1-6}, o halógeno;

R^{7} es H, alquilo C_{1-6}, alquenilo C_{2-6}, o alquinilo C_{2-6}, cicloalquilo C_{3-8}, arilo C_{6-12}, aralquilo, aralquenilo, aralquinilo, heteroarilo, heteroaralquilo, heteroaralquenilo o heteroaralquinilo, cualquiera de los cuales puede estar opcionalmente sustituido, y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos.

Los compuestos esteroides según la presente invención pueden comprender una unidad nitrona cíclica, con la estructura II,

5

en la que

R^{1} es

6

en la que q es 0 ó 1, Y es -(CH_{2})_{m}- en la que m es un número entero de 0 a 5, o Y es -(CH_{2})_{n}-Z-(CH_{2})_{p}- en la que n es un número entero de 0 a 2, p es un número entero de 0 a 2, y Z es un heteroátomo (opcionalmente sustituido) y en la que los grupos CH_{2} pueden estar opcionalmente sustituidos; o

R^{1} es N-imidazolil-, N-pirrolil-, halo-, HO-, CF_{3}SO_{2}O-, alquilo C_{1-6}-O-, alquilo C_{1-6}-S-, alquilo C_{1-6}-S(O)-, alquilo C_{1-6}-S(O_{2})-, alquilo C_{1-6}-CO-, alquilo C_{1-6}-CH(OH)-, NC-, HCC-, C_{6}H_{5}CC-, 2'-furilo, 3'-furil-, 2'-tiofenilo, 3'-tiofenil-, 2'-piridilo, 3'-piridilo, 4'-piridil-, 2'-tiazolil-, 2'-N-metilimidazolil-, 5'-pirimidinil-, C_{6}H_{5}-, H_{2}C=CH-, alquilo C_{1-6} o MeC(=CH_{2})-; y

R^{12} es H o halo; o

R^{1} y R^{12} se combinan para formar un anillo

7

en la que W es CH_{2}, CH, NH, N, O, o S, y R^{4} es H o alquilo C_{1-6}; y

X es

8

R^{6} es H, alquilo C_{1-6}, o halógeno; y

R^{8} es H, alquilo C_{1-6}, alquenilo C_{2-6}, o alquinilo C_{2-6}, cicloalquilo C_{3-8}, arilo C_{6-12}, aralquilo, aralquenilo, aralquinilo, heteroarilo, heteroaralquilo, heteroaralquenilo o heteroaralquinilo, cualquiera de los cuales puede estar opcionalmente sustituido, y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos.

Los compuestos identificados anteriormente con la fórmula I y II incluyen específicamente compuestos que están sustituidos sobre el anillo A en posición 3 con dos átomos de hidrógeno. Se cree que estos compuestos experimentan la oxidación in vivo al compuesto carbonilo correspondiente.

Dentro del alcance de la presente invención, el término heteroátomo significa oxígeno, nitrógeno, azufre, silicio o boro. Halógeno significa flúor, cloro, bromo o yodo y halo significa flúor, cloro, bromo o yodo. Aralquilo, aralquenilo, o aralquinilo significa un grupo alquilo C_{1}-C_{4}, alquenilo C_{2}-C_{4} o alquinilo C_{2}-C_{4} que lleva un sustituyente arilo. Aralquilo inferior significa un grupo alquilo C_{1}-C_{4}. Heteroarilo significa una unidad de 5 a 12 átomos que no son hidrógeno constituida por una o más estructuras cíclicas que pueden estar fusionadas o unidas, que contienen de 1 a 5 heteroátomos y que aquellos expertos en la materia aceptan de manera general que tienen un carácter electrónico aromático.

Heteroaralquilo, heteroaralquenilo, o heteroaralquinilo significa un grupo alquilo C_{1}-C_{4}, alquenilo C_{2}-C_{4} o alquinilo C_{2}-C_{4} que lleva un sustituyente heteroarilo.

"Opcionalmente sustituido" significa sustituido o no sustituido con uno o más heteroátomos y/o halógenos y/o grupos alquilo de 1 a 4 átomos de carbono y/o grupos alquenilo y/o alquinilo de 2 a 4 átomos de carbono y/o grupos cicloalquilo de 3 a 7 átomos de carbono y/o grupos arilo de 6 a 12 átomos de carbono y/o grupos heteroarilo, y en los que el grupo alquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo, arilo o heteroarilo pueden estar adicionalmente sustituidos con uno o más heteroátomos y/o halógenos. La sustitución se puede producir directamente sobre los grupos CH_{2} de los heterociclos amina cíclica. Cuando su valencia lo permita, los heteroátomos pueden estar sustituidos en la cadena carbonada o uniéndose a ella mediante enlaces simples o dobles. Por ejemplo, -CH_{2}CH_{2}C(=O)H, -CH_{2}C(=O)CH_{3}, -CH_{2}CH_{2}OCH_{3}, -CH_{2}CH_{2}CH_{2}OH, CH_{3}CH_{2}CH_{2}O-, -CH_{2}CH_{2}C(=O)NH_{2}, CH_{3}CH_{2}C(=O)NH-, -CH_{2}COOCH_{3}, CH_{3}CH_{2}COO- y CF_{3}CC- entran todos en esta definición.

En todos los casos en los que la valencia y las consideraciones estéricas lo permitan, los grupos alquilo, alquenilo, alquinilo o cicloalquilo pueden contener dobles o triples enlaces y/o cadenas ramificadas adicionales.

El grupo R^{6} en C_{6} como aparece en las estructuras I y II puede estar en cualquiera de las dos posiciones \alpha o \beta. En una forma de realización preferida, el grupo R^{6} está localizado en posición \alpha.

En otra forma de realización, el grupo \beta-arilo en C_{11} puede ser remplazado por un grupo piridina sustituido con grupos R^{1} y R^{12} como se ha descrito previamente.

En una forma de realización preferida, el compuesto con la estructura I está sustituido, en la que

R^{1}-Ph es 4-aminofenilo, 4-(N-metilamino)fenilo, 4-(N,N-dimetilamino)fenilo, 4(N-piperidino)fenilo, 4-(N-pirrolidino)fenilo, 4-(N-morfolino)fenilo, 1-metilindol-5-ilo o 1-metil-2,3-dihidroindol-5-ilo;

X es O, NOH, o NOCH_{3};

R^{6} es H, CH_{3}, F o Cl;

R^{7} es H, metilo, etinilo, 1-propinilo, 3-propinilo, 3-hidroxipropilo, 3-hidroxi-1-propenilo (E- o Z-), 3,3,3-trifluoropropin-1-ilo, 3-hidroxipropin-1-ilo, (CH_{2})_{2}COOCH_{3}, (CH_{2})_{2}COOC_{2}H_{5}, (CH_{2})_{2}COCH_{3}, CC-C_{6}H_{5}, o CH_{2}C_{6}H_{5}.

En otra forma de realización preferida, el esteroide con la estructura II está sustituido como sigue:

R^{1}-Ph es 4-aminofenilo, 4-(N-metilamino)fenilo, 4-(N,N-dimetilamino)fenilo, 4-(N-piperidino)fenilo, 4-(N-pirrolidino)fenilo, 4-(N-morfolino)fenilo, 1-metilindol-5-ilo o 1-metil-2,3-dihidroindol-5-ilo;

X es O, NOH, o NOCH_{3};

R^{6} es H, CH_{3}, F o Cl; y

R^{8} es H, CH_{3} o CH_{2}C_{6}H_{5}.

Dentro del contexto de la presente invención, los grupos -CH_{2}- individuales que comprenden R^{1} y más específicamente, los grupos -CH_{2}- de los grupos

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(CH_{2})_{m}, (CH_{2})_{n}, (CH_{2})_{p} pueden estar sustituidos como se ha descrito previamente.

Ejemplos no limitantes específicos incluyen los compuestos:

11\beta-(4-acetilfenil)-17\alpha-(1-propinil)-17\beta-nitroestra-4,9-dien-3-ona; 11\beta-(4-(N,N-dimetilamino)fenil)-17\alpha-(1-propinil)-17\beta-nitroestra-4,9-dien-3-ona; 3',4'-dihidro-11\beta-(4-(N,N-dimetilamino)fenil)-5'-metil-1'-oxo-espiro[estra-4,9-dien-17\beta,2'(2'H)-pirrol]-3-ona; 3',4'-dihidro-11\beta-(4-(N,N-dimetilamino)fenil)-1'-oxo-espiro[estra-4,9-dien-17\beta,2'
(2'H)-pirrol]-3-ona; 11\beta-(4-acetilfenil)-17\alpha-(E-3-hidroxi-1-propenil)-17\beta-nitroestra-4,9-dien-3-ona; 11\beta-(4-acetilfenil)-17\alpha-(3-hidroxipropil)-17\beta-nitroestra-4,9-dien-3-ona; 11\beta-(4-(N,N-dimetilamino)fenil)-17\alpha-(E-3-hidroxi-1-pro-
penil)-17\beta-nitroestra-4,9-dien-3-ona; 17\beta-nitro-11\beta-(4-(N-piperidino)fenil)-17\alpha-propinil-estra-4,9-dien-3-ona; 3',4'-dihidro-11\beta-(4-(N-piperidino)fenil)-5'-metil-1'-oxo-espiro[estra-4,9-dieno-17\beta,2'(2'-H)-pirrol]-3-ona; y 11\beta-(4-
(N,N-dimetilamino)fenil)-17\alpha-(3-hidroxipropil)-17\beta-nitroestra-4,9-dien-3-ona.

Aquellos compuestos de la presente invención que lleven un grupo amino sobre el grupo fenilo en C_{11} por consiguiente también pueden comprender una sal formada con la amina. Las sales farmacéuticamente adecuadas son conocidas por aquellos con conocimientos ordinarios en la materia y comprenden carboxilatos, sulfatos, fosfatos y haluros.

Los esteroides que tienen una actividad progestacional, antiprogestacional y/o antiglucocorticoide se han usado para el control de la fertilidad en humanos y mamíferos no humanos tales como primates, animales domésticos y de granja, y en el tratamiento de dolencias médicas en animales o humanos en los que estas actividades son beneficiosas. Así pueden ser útiles en el tratamiento de dolencias tales como fibroides, síndrome de Cushing, glaucoma, endometriosis, maduración cervical antes del parto, terapia de sustitución hormonal, síndrome premenstrual y cáncer, además de su uso en el control de la fertilidad y de la reproducción.

Los compuestos de la presente invención se pueden administrar mediante una variedad de procedimientos. Así, aquellos productos de la invención que sean activos por vía oral se pueden administrar en disoluciones, suspensiones, emulsiones, comprimidos, incluyendo comprimidos sublinguales e intrabucales, cápsulas de gelatina blanda, incluyendo disoluciones usadas en cápsulas de gelatina blanda, suspensiones acuosas u oleosas, emulsiones, píldoras, caramelos, trociscos, comprimidos, jarabes o elixires y similares. Los productos de la invención activos en la administración por vía parenteral se pueden administrar mediante inyección de depósito, implantes, incluyendo Silastic™, e implantes biodegradables, inyecciones intramusculares e intravenosas.

Las composiciones se pueden preparar según cualquier procedimiento conocido en la técnica para la fabricación de composiciones farmacéuticas y tales composiciones pueden contener uno o más agentes seleccionados del grupo constituido por agentes edulcorantes, agentes aromatizantes, agentes colorantes y agentes conservantes. Son aceptables los comprimidos que contienen el ingrediente activo en mezcla con excipientes no tóxicos farmacéuticamente aceptables que son adecuados para la fabricación de comprimidos. Estos excipientes pueden ser, por ejemplo, diluyentes inertes, tales como carbonato de calcio, carbonato de sodio, lactosa, fosfato de calcio o fosfato de sodio, agentes granulantes y desagregantes, tales como almidón de maíz, o ácido algínico; agentes aglutinantes, tales como almidón, gelatina o goma arábiga; y agentes lubricantes, tales como estearato de magnesio, ácido esteárico o talco. Los comprimidos pueden ser no recubiertos o se pueden recubrir mediante técnicas conocidas para retardar la desintegración y la absorción en el tracto gastrointestinal y proporcionar así una acción sostenida durante un período de tiempo más prolongado. Por ejemplo, se puede emplear un material retardante temporal tal como monoestearato de glicerilo o diestearato de glicerilo, solo o con una cera.

Las formulaciones para uso oral también se pueden presentar como cápsulas de gelatina dura en las que el ingrediente activo se mezcla con un diluyente sólido inerte, por ejemplo, carbonato de calcio, fosfato de calcio o caolín, o en forma de cápsulas de gelatina blanda en las que el ingrediente activo se mezcla con agua o un medio oleoso, tal como aceite de cacahuete, parafina líquida o aceite de oliva.

Las suspensiones acuosas de la invención contienen los materiales activos mezclados con excipientes adecuados para la fabricación de suspensiones acuosas. Tales excipientes incluyen un agente suspensor, tal como carboximetilcelulosa de sodio, metilcelulosa, hidroxipropiletilcelulosa, alginato de sodio, polivinilpirrolidona, goma de tragacanto y goma arábiga, y agentes dispersantes o humectantes tales como un glicerofosfolípido de origen natural (por ejemplo, lecitina), un producto de condensación de un óxido de alquileno con un ácido graso (por ejemplo, estearato de polioxietileno), un producto de condensación de óxido de etileno con un alcohol alifático de cadena larga (por ejemplo, heptadecaetilenoxicetanol), un producto de condensación de óxido de etileno con un éster parcial procedente de un ácido graso y un hexitol (por ejemplo, monooleato de polioxietilensorbitol), o un producto de condensación de óxido de etileno con un éster parcial procedente de un ácido graso y un anhídrido de hexitol (por ejemplo, monooleato de polioxietilensorbitán). La suspensión acuosa también puede contener uno o más agentes conservantes tales como p-hidroxibenzoato de etilo o n-propilo, uno o más agentes colorantes, uno o más agentes aromatizantes y uno o más agentes edulcorantes, tal como sacarosa, aspartamo o sacarina. En las formulaciones oftálmicas, como es sabido en la materia, se ajustará su presión osmótica.

Las suspensiones oleosas se pueden formular suspendiendo el ingrediente activo en un aceite vegetal, tal como aceite de cacahuete, aceite de oliva, aceite de sésamo o aceite de coco, o en un aceite mineral tal como parafina líquida. Las suspensiones oleosas pueden contener un agente espesante, tal como cera de abeja, parafina dura o alcohol cetílico. Se pueden añadir agentes edulcorantes para proporcionar una preparación oral comestible. Estas composiciones se pueden conservar mediante la adición de un agente antioxidante tal como ácido ascórbico.

Los polvos o gránulos dispersables de la invención adecuados para la preparación de una suspensión acuosa mediante la adición de agua se pueden formular a partir de los ingredientes activos mezclados con un agente dispersante, suspensor y/o humectante, y uno o más agentes conservantes. Los agentes dispersantes o humectantes y los agentes suspensores adecuados están ejemplificados por aquellos descritos anteriormente. También pueden estar presentes excipientes adicionales, por ejemplo, agentes edulcorantes, aromatizantes y colorantes.

La composición farmacéutica de la invención también puede estar en forma de emulsiones de aceite en agua. La fase oleosa puede ser un aceite vegetal, tal como aceite de oliva o aceite de cacahuete, un aceite mineral, tal como parafina líquida, o una mezcla de estos. Los agentes emulsionantes adecuados incluyen gomas de origen natural, tal como goma arábiga y goma de tragacanto, glicerofosfolípidos de origen natural, tal como lecitina de soja, ésteres o ésteres parciales procedentes de ácidos grasos y anhídridos de hexitol, tales como monooleato de sorbitán, y productos de condensación de estos ésteres parciales con óxido de etileno, tales como monooleato de polioxietilensorbitán. La emulsión también puede contener agentes edulcorantes y aromatizantes.

Los jarabes y elixires se pueden formular con agentes edulcorantes, tales como glicerol, sorbitol o sacarosa. Tales formulaciones también pueden contener un agente emoliente, un agente conservante, un agente aromatizante o un agente colorante.

Las composiciones farmacéuticas de la invención pueden estar en forma de preparación inyectable estéril, tal como una suspensión inyectable estéril acuosa u oleaginosa. Esta suspensión se puede formular según la técnica conocida usando aquellos agentes dispersantes o humectantes y agentes suspensores adecuados que se han mencionado anteriormente. La preparación inyectable estéril también puede ser una disolución o suspensión inyectable estéril en un diluyente o disolvente no tóxico parenteralmente aceptable, tal como una disolución de 1,3-butanodiol. Entre los vehículos y disolventes aceptables que se pueden emplear están en agua y la disolución de Ringer, una solución de cloruro de sodio isotónica. Además, se pueden emplear aceites no volátiles estériles de manera convencional como medio disolvente o de suspensión. Para este propósito se puede emplear cualquier mezcla de aceite no volátil, incluyendo mono- o diglicéridos sintéticos. Además, en la preparación de inyectables asimismo se pueden usar ácidos grasos tales como ácido oleico. La esterilización se puede realizar mediante procedimientos convencionales conocidos por aquellos con conocimientos ordinarios en la materia tales como filtración aséptica, irradiación o esterilización terminal (por ejemplo, esterilización en autoclave).

Las formulaciones acuosas (es decir, emulsiones de aceite en agua, jarabes, elixires y preparaciones inyectables) se pueden formular para conseguir el pH de estabilidad óptima. La determinación del pH óptimo se puede realizar mediante procedimientos convencionales conocidos por aquellos con conocimientos ordinarios en la materia. También se pueden usar tampones adecuados para mantener el pH de la formulación.

Los compuestos de esta invención también se pueden administrar en forma de supositorios para la administración rectal del fármaco. Estas composiciones se pueden preparar mezclando el fármaco con un excipiente no irritante adecuado que sea sólido a temperaturas ordinarias, pero líquido a la temperatura del recto, y por tanto se fundirá en el recto para liberar el fármaco. Los ejemplos no limitantes de tales materiales son manteca de cacao y polietilenglicol.

También se pueden administrar por vía intranasal, intraocular, intravaginal, e intrarectal incluyendo formulaciones en supositorios, de insuflación, en polvos y en aerosol.

Los productos de la invención que preferentemente se administran por vía tópica se pueden administrar en forma de aplicadores en barra, disoluciones, suspensiones, emulsiones, geles, cremas, ungüentos, pastas, gelatinas, pinturas, polvos, y aerosoles.

Los productos que presentan actividad anti-glucocorticoide tienen un valor particular en dolencias patológicas caracterizadas por un exceso de glucocorticoide endógeno, tales como el síndrome de Cushing, el hirsutismo y, en particular, cuando está asociado al síndrome adrenogenital, dolencias oculares asociadas a un exceso de glucocorticoide, tal como glaucoma, síntomas de estrés asociados a un exceso en la secreción de glucocorticoides y similares.

Los productos que presentan actividad progestacional tienen un valor particular como agentes progestacionales, inhibidores de la ovulación, reguladores de la menstruación, agentes anticonceptivos, agentes para la sincronización de los períodos fértiles en el ganado, endometriosis, y similares. Cuando se usan con fines anticonceptivos, se pueden mezclar de manera conveniente con agentes estrogénicos, tales como por ejemplo, en forma de ésteres de etilenestradiol o de estradiol.

Los productos que tienen actividad antiprogestacional se caracterizan por antagonizar los efectos de la progesterona. Como tal, tienen un valor particular en el control de irregularidades hormonales en el ciclo menstrual y para la sincronización de los períodos fértiles en el ganado.

Los compuestos de la invención se pueden usar para el control de la fertilidad durante todo el ciclo reproductivo. Tienen un valor particular como contraconceptivos postcoitales, para producir que el útero se muestre desfavorable a la implantación, y como agentes anticonceptivos de "una vez al mes". Se pueden usar junto con prostaglandinas, oxitócicos, estrógenos y similares.

Una utilidad importante adicional de los productos de la invención radica en su capacidad para reducir el crecimiento de cánceres dependientes de hormonas. Tales cánceres incluyen cánceres de riñón, mama, endometrio, ovario, y cáncer de próstata, que se caracterizan por poseer receptores de progesterona y se puede esperar que respondan a los productos de esta invención. Otras utilidades de los agentes antiprogestacionales incluyen el tratamiento de la enfermedad fibrocística de la mama. Ciertos cánceres, y en particular los melanomas, pueden responder favorablemente a la terapia con corticoides/anticorticoides.

Los compuestos según la presente invención se pueden administrar a cualquier mamífero de sangre caliente, tal como humanos, animales domésticos, y animales de granja. Los animales domésticos incluyen perros, gatos, etc. Los animales de granja incluyen vacas, caballos, cerdos, ovejas, cabras, etc.

La cantidad de ingrediente activo que se puede combinar con un material portador para producir una única forma de dosificación variará dependiendo de la enfermedad tratada, la especie de mamífero, y el modo particular de administración. Se puede determinar la cantidad terapéuticamente eficaz mediante experimentación rutinaria, y por analogía con las cantidades usadas para tratar las mismas enfermedades con compuestos esteroides análogos. Por ejemplo, una dosis unidad del esteroide puede contener preferentemente entre 0,1 mg y 1 gramo del ingrediente activo. Una dosis unidad más preferida está entre 0,001 y 0,5 gramos. Para el tratamiento específico de endometriosis o fibroides se puede administrar una cantidad de 0,011 a 10 mg/kg de peso corporal, preferentemente entre 0,1 y 3 mg/kg. Se pueden usar dosificaciones similares de estos compuestos con otros fines terapéuticos. Por lo general los compuestos se pueden administrar diariamente de 1 a 4 veces al día, preferentemente 1 ó 2 veces al día, pero para usos tales como, por ejemplo, terapia de sustitución hormonal, se pueden administrar en un régimen ciclofásico. En cualquier caso la frecuencia y el régimen de dosificación dependerán de factores tales como la semivida del compuesto específico en el cuerpo, la formulación y la vía de administración de la dosificación. Se entiende, no obstante, que el nivel de dosificación específico para cualquier paciente particular dependerá de una variedad de factores que incluyen la actividad del compuesto específico empleado; la edad, el peso corporal, la salud general, el sexo y la dieta del individuo tratado, el régimen y la vía de administración; la velocidad de excreción, otros fármacos que se hayan administrado previamente; y la gravedad de la enfermedad particular sometida a terapia, como entenderán perfectamente aquellos expertos en la materia.

Tales compuestos son útiles en el tratamiento de endometriosis, leiomiomas uterinos (fibroides) y ciertos cánceres y tumores, en terapia de sustitución hormonal así como en el control de diversas etapas en la reproducción y la fertilidad, tal como la anticoncepción. Una descripción más detallada de los usos potenciales de tales compuestos se da en Donaldson, Molly S.; Dorflinger, L.; Brown, Sarah S.; Benet, Leslie Z., Editors, Clinical Applications of Mifepristone (RU 486) and Other Antiprogestins, Committee on Antiprogestins: Assessing the Science, Institute of Medicine, National Academy Press, 1993.

Los compuestos de la presente invención se pueden preparar mediante procedimientos convencionales conocidos por aquellos con conocimientos ordinarios en la materia. A modo de ejemplo se proporciona el siguiente procedimiento sintético general.

Los compuestos de esta invención se pueden preparar según los procedimientos esquematizados en los Gráficos A-C (Figuras 1-3), partiendo de 3,3-[1,2-etanodiilbis(oxi)]-estra-5(10),9(11)-dien-17-ona (A-1). Este compuesto se convierte al 5(10)\alpha-epóxido A-2 mediante una variedad de procedimientos, incluyendo preferentemente el tratamiento de A-1 con H_{2}O_{2}, hexafluoroacetona y Na_{2}HPO_{4} en CH_{2}Cl_{2} y por tanto al compuesto 11\beta-arilo A-3 por tratamiento con un reactivo de Grignard arilo mezclado con una sal de cobre (1), preferentemente CuCl (véase Teutsch, G., y col., Steroids 59:22-26 (1994). La formación de la oxima con clorhidrato de hidroxilamina en piridina da el compuesto A-4 con un rendimiento excelente. El tratamiento de A-4 con N-bromosuccinimida (NBS) da un intermedio 17-bromo-17-nitrocompuesto, que se reduce fácilmente por tratamiento con NaBH_{4} al 17-nitrocompuesto A-5.

La adición de Michael (1,4) del nitrocompuesto en presencia de una base a ésteres \alpha,\beta-insaturados (procedimiento de Patchett, y col., J. Org. Chem., 27, 3822 (1962)) da los productos de adición A-6 correspondientes. Cuando se usa, por ejemplo, acrilato de metilo o propiolato de metilo como éster insaturado, el producto de adición A-6 se forma con R^{7} bien como CH_{2}CH_{2}COOMe o como CH=CHCOOMe, respectivamente. El producto de adición con propiolato de metilo es principalmente el isómero E. Los compuestos del tipo A-5 o A-6 se pueden tratar con un ácido suave (preferentemente ácido trifluoroacético y agua en CH_{2}Cl_{2}) para formar las dienonas A-8. El grupo R^{7} en los compuestos del tipo A-6 se puede someter a otras reacciones. Así, los grupos éster se pueden reducir a alcoholes primarios con hidruro de diisobutilaluminio (DIBAL-H) para dar, por ejemplo, A-7 (R^{7} = CH_{2}CH_{2}CH_{2}OH) y A-7 (R^{7} = CH=CHCH_{2}OH), respectivamente. El tratamiento ácido, preferentemente con ácido trifluoroacético y agua en CH_{2}Cl_{2}, produce la descetalización y la deshidratación a las dienonas A-8 correspondientes.

Cuando el anillo aromático de A-4 contiene sustituyentes que hacen que el anillo arilo sea particularmente susceptible al ataque electrófilo, tal como por ejemplo N-dialquilamino o N-heterocicloalquilo, el tratamiento con NBS produce la bromación en posición orto al sustituyente donador de electrones así como la conversión al 17-bromo-17-nitrocompuesto. El bromuro de arilo resultante se puede utilizar en el resto de los procedimientos o el bromuro de arilo se puede sustituir por un átomo de hidrógeno en cualquier momento antes de que se obtenga el producto final A-8 tratando el compuesto apropiado con t-butil-litio, seguido de una fuente de iones hidrógeno (véase por ejemplo Kobrich y Buck, J. Amer. Chem. Soc., 103, 1412 (1970)). Si se usan compuestos de tritio o deuterio como fuente de iones hidrógeno, se obtiene un compuesto isotópicamente marcado, que es útil en estudios con marcadores, tales como por ejemplo, estudios metabólicos, farmacocinéticos o de unión al receptor.

Si no se desea tener un grupo arilo halogenado, entonces la necesidad de sustituir el bromo con hidrógeno reduce el rendimiento global del proceso. Uno de los hallazgos de esta invención es que si R^{1} es un grupo amino de forma que R^{1}-Ar es una amina terciaria, el anillo Ar se puede desactivar para la sustitución oxidando primero el nitrógeno a un N-óxido de amina terciaria.

Por lo tanto, alternativa y preferentemente, cuando está presente un sustituyente amino terciario sobre el núcleo aromático, el anillo se puede desactivar para la bromación por conversión de la amina terciaria a un óxido de amina (A-4, R^{1} = R_{2}N(O)-). Se pueden usar una serie de agentes oxidantes conocidos en la materia. Por ejemplo, el dimetildioxirano da excelentes resultados. Se obtienen rendimientos ligeramente inferiores mediante el tratamiento con H_{2}O_{2} y hexafluoroacetona, pero las ventajas de este último procedimiento generalmente lo hacen preferible. El óxido de amina se vuelve a reducir a la amina después de la reacción con NBS simplemente agitando la mezcla de reacción con sulfato ferroso acuoso, que normalmente se usa en el tratamiento final de la reacción con NBS. El 17-bromo-17-nitrocompuesto resultante se reduce a continuación al 17-nitrocompuesto A-5 mediante NaBH_{4}, tal y como se ha indicado previamente. En el caso de A-5, el sustituyente 17-nitro esta principalmente en posición 17\beta, pero se puede usar cualquiera de los dos compuestos \alpha- o \beta- en la siguiente etapa, puesto que el anión generado en la reacción de Michael se equilibra fácilmente y la adición del éster insaturado se produce por la cara \alpha de la molécula.

Cuando A-5 experimenta una adición de Michael a un compuesto carbonilo \alpha,\beta-insaturado, tal como por ejemplo metilvinilcetona, como se muestra en la Figura 2, el producto carbonilo B-1 resultante se puede reducir y ciclar, por ejemplo por tratamiento con cinc y NH_{4}Cl, para formar la nitrona B-2 (véase procedimiento de Bonnett, y col., J. Chem. Soc., 2094-2102 (1959)). Si R^{12} en B-2 es bromo, el producto se puede reducir a B-2 (R^{12} = H) mediante el tratamiento con t-butil-litio descrito previamente. El tratamiento con ácido de los cetales B-2 conduce a las dienonas B-3. Por ejemplo, si la cetona \alpha,\beta-insaturada es metilvinilcetona, el producto final resultante es la metilnitrona B-3 (R^{8} = CH_{3}). Las aldonitronas (B-2, R^{8} = H) se preparan preferentemente por reducción del éster A-6 (R^{7} = CH_{2}CH_{2}COOR) al aldehído (A-6 R^{7} = CH_{2}CH_{2}CHO) con DIBAL-H limitado (véase procedimiento de Miller, y col., J. Org. Chem., 24, 627 (1959)), seguido de la reducción con cinc/NH_{4}Cl y la ciclación a la nitrona B-2 (R = H) y la descetalización/deshidratación a la dienona B-3 (R^{8} = H).

Los sustituyentes 17\alpha-carbono también se pueden introducir en los nitrocompuestos A-5 por medio de residuos alquinilo. Por ejemplo, cuando el anión de A-5 se trata en dimetilsulfóxido (DMSO) con un compuesto de triacetato de alquinilplomo (IV) (procedimiento de Pinhey J. T., y col., J. Chem. Cos. Perkin Trans., 1, 333 (1989)), se obtiene el compuesto 17\alpha-alquinil-17\beta-nitro C-1 correspondiente (Gráfica C, Figura 3). El tratamiento con ácido como se ha descrito previamente conduce a las dienonas C-2.

Habiendo descrito esta invención de manera general, se puede obtener una comprensión más profunda en referencia a ciertos ejemplos específicos que se proporcionan en el presente documento sólo con fines ilustrativos y que no pretenden ser limitantes, a menos que se especifique lo contrario.

Procedimientos generales. A menos que se indique otra cosa, los productos químicos clasificados como reactivos se obtuvieron de fuentes comerciales y se usaron sin purificación adicional. El éter y el tetrahidrofurano (THF) se destilaron in situ a partir del par benzofenona de sodio-cetilo en atmósfera de nitrógeno. Todas las reacciones y las transferencias de reactivos sensibles a la humedad y al aire se llevaron a cabo en atmósfera seca de nitrógeno o de argón. La cromatografía de capa fina (TLC) se realizó en placas de gel de sílice previamente cubiertas 60 F-254 de EM Science. Los compuestos normalmente se visualizaron mediante luz UV (254 nm) o pulverización con p-anisaldehído. La cromatografía en columna preparativa empleada fue de gel de sílice EM Science, 60 \ring{A} (red 230-400). Las disoluciones se concentraron mediante el uso de un evaporador rotatorio a presión por aspiración con agua a temperatura ambiente. Los puntos de fusión se obtuvieron en un Mel-Temp II y están sin corregir. A menos que se indique lo contrario, el espectro de RMN ^{1}H se obtuvo a 250 MHz en un espectrómetro Bruker AC 250 en CDCl_{3} como disolvente, con tetrametilsilano (TMS) como patrón interno. Los desplazamientos químicos se dan en unidades de ppm campo abajo del TMS. El espectro de masas normalmente se obtuvo por impacto electrónico a 70 eV en un instrumento Hewlett Packard 5989A. Los análisis elementales fueron realizados por Atlantic Microlab Inc., Atlanta, GA.

Ejemplo 1 Síntesis de 11\beta-[4-(N,N-Dimetilamino)fenil]-17\beta-nitroestra-4,9-dien-3-ona [A-8 (R^{1} = 4-Me_{2}N, R^{7} = R^{12} = H)]

3,3-[1,2-Etanodiilbis(oxi)]-5\alpha,10\alpha-(oxido)estr-9(11)-en-17-ona (A-2). A una disolución de 32,0 g (102 mmol) de 3,3-[1,2-etanodiilbis(oxi)]estra-5(10),9(11)-dien-17-ona en 192 ml de CH_{2}Cl_{2} a 0ºC se le añadió 7,04 ml (50,9 mmol) de hexafluoroacetona trihidratada (Lancaster Synthesis, Inc.), seguido de 2,46 g (17,3 mmol) de Na_{2}HPO_{4}, y a continuación se le añadió gota a gota 8,64 ml (153 mmol) de H_{2}O_{2} del 50% a la mezcla agitada eficazmente (agitación mecánica suspendida). Se prosiguió con la agitación eficaz durante 18 h, durante las cuales la temperatura se dejó subir gradualmente hasta temperatura ambiente, y a continuación se añadieron 192 ml de Na_{2}S_{2}O_{3} acuoso saturado. Después de agitar durante 20 min, la mezcla se combinó con otro lote (32,0 g) preparado en paralelo de manera idéntica hasta este punto. La fase acuosa (inferior) se separó y se extrajo tres veces con 80 ml de EtOAc. La disolución orgánica combinada se diluyó con 240 ml de EtOAc y se lavó dos veces con 80 ml de NaHCO_{3} acuoso saturado, dos veces con 80 ml de salmuera, se secó sobre MgSO_{4}, se filtró, y el disolvente se retiró a presión reducida. El sólido amarillo (76,1 g) se trituró con 320 ml de éter dietílico con agitación magnética durante 12 h en un matraz cerrado. La suspensión blanca resultante se combinó con otros tres lotes (3 x 32,0 g) preparados de manera idéntica (y proporcionalmente) hasta este punto, en paralelo, a continuación se filtró por succión a través de un embudo de cristal sinterizado de porosidad gruesa, se enjuagó tres veces con 40 ml de éter dietílico, y a continuación se dejó secar por succión durante 1,5 h. La pasta blanca del filtro resultante se raspó con cuidado para formar un polvo blanco fino y se secó sobre vacío para dar el epóxido A-2 (89,5 g, 53% de rendimiento). RMN ^{1}H (250 MHz, CDCl_{3}) \delta 6,06 (sa, 1), 3,98-3,88 (m, 4), 2,52-2,44 (m, 2), 1,32-1,12 (m, 1), 0,88 (s, 3).

11\beta-[4-(N,N-Dimetilamino)fenil]-3,3-[1,2-etanodiilbis(oxi)]-5\alpha-hidroxiestr-9-en-17-ona [A-3 (R^{1} = 4-Me_{2}N-, R^{12} = H)]. Un matraz equipado con un agitador mecánico suspendido y cargado con 11,6 g (475 mmol) de virutas de magnesio se secó a la llama en una corriente de nitrógeno seco. Después de enfriar a temperatura ambiente, se añadieron 400 ml de THF, seguido de unos pocos cristales de yodo, confiriendo así una coloración parda clara. A la mezcla agitada eficazmente se le añadió 35 ml de una disolución de 91,4 g (457 mmol) de 4-bromo-N,N-dimetilanilina en 400 ml de THF. Después de calentar la mezcla a temperatura de reflujo durante 5 min aproximadamente, el color del yodo se disipó rápidamente hasta una disolución incolora, momento en el que la mezcla se dejó enfriar a temperatura ambiente. El resto de la disolución de bromuro se añadió gota a gota durante un periodo de 2 h. La mezcla se enfrió en un baño de agua helada durante 1,8 h, y a continuación se añadieron 18,1 g (183 mmol) de CuCl finamente dividido en polvo en una fracción. Después de que la mezcla se agitase eficazmente durante 60 segundos, se añadió una disolución de 60,4 g (183 mmol) de A-2 en 453 ml de THF durante 25 segundos, provocando la formación de un precipitado amarillo claro voluminoso. Después de 15 min, se añadió lentamente 300 ml de NH_{4}Cl acuoso saturado, seguido de 755 ml de EtOAc. Después de agitar durante 10 min, la fase acuosa se separó y se extrajo tres veces con 300 ml de EtOAc. La disolución orgánica combinada se lavó ocho veces con 300 ml de salmuera (hasta que los lavados de salmuera tuvieron una opacidad relativamente baja), se secó sobre MgSO_{4}, se filtró, y el disolvente se retiró a presión reducida. El aceite negro viscoso se recogió en 30 ml de CH_{2}Cl_{2} y se sometió a cromatografía en gel de sílice (elución del subproducto reactivo de anilina con CH_{2}Cl_{2}, y a continuación elución del producto con EtOAc) para dar el producto de adición A-3 (R^{1} = 4-Me_{2}N-, R^{12} = H) (75,4 g, 91% de rendimiento). RMN ^{1}H (250 MHz, CDCl_{3}) \delta 7,06 (d, 2, J = 8,3 Hz), 6,64 (d, 2, J = 8,8 Hz), 4,37 (s, 1), 4,24 (d, 1, J = 7,3 Hz), 4,02-3,90 (m, 4), 2,91 (s, 6), 0,52 (s, 3).

11\beta-[4-(N,N-Dimetilamino)fenil]-3,3-[1,2-etanodiilbis(oxi)]-5\alpha-hidroxiestr-9-en-17-oxima [A-4 (R^{1} = 4-Me_{2}N-, R^{12} = H)]. A una disolución de 44,3 g (98,1 mmol) de la cetona A-3 (R^{1} = 4-Me_{2}N-, R^{12} = H) en 333 ml de piridina anhidra a temperatura ambiente en atmósfera de nitrógeno se le añadió 11,3 g (162 mmol) de clorhidrato de hidroxilamina. Después de agitar durante 17 h, se añadió 1,10 L de agua y 333 ml de EtOAc. Después de agitar durante 10 min, la fase acuosa se separó y se extrajo tres veces con 160 ml de EtOAc. La disolución orgánica combinada se lavó dos veces con salmuera, se secó sobre Na_{2}SO_{4}, se filtró, y el disolvente se retiró a presión reducida. La espuma resultante se sometió reiteradamente a evaporación rotatoria a presión reducida tres veces con 160 ml de tolueno a 40ºC. Se retiró más disolvente sobre vacío, dando así una espuma parda (48,4 g) exenta de piridina por análisis de RMN ^{1}H. Se pudo continuar con el material sin purificación adicional. RMN ^{1}H (250 MHz, CDCl_{3}) \delta 8,62 (sa, 1), 7,07 (d, 2, J = 9,4 Hz), 6,63 (d, 2, J = 9,0 Hz), 4,38 (s, 1), 4,22 (d, 1, J = 6,6 Hz), 4,03-3,88 (m, 4), 2,89 (s, 6), 0,56 (s, 3).

11\beta-[4-(N,N-Dimetil-N-(oxi)amino)fenil]-3,3-[1,2-etanodiilbis(oxi)]-5\alpha-hidroxiestr-9-en-17-oxima [A-4 (R^{1} = 4-Me_{2}N(O)-, R^{12} = H). A una disolución de 6,16 g (13,2 mmol) de A-4 (R^{1} = 4-Me_{2}N-, R^{12} = H) en 26 ml de CH_{2}Cl_{2} a 0ºC se le añadió 0,92 ml (6,60 mmol) de hexafluoroacetona trihidratada. Con agitación vigorosa, se le añadió gota a gota 1,60 ml (27,7 mmol) de H_{2}O_{2} del 50%. Después de 5 h de agitar vigorosamente a 0ºC, la mezcla roja resultante se diluyó con EtOAc y agua. La fase acuosa se separó y se extrajo tres veces con EtOAc. La fase acuosa se concentró a presión reducida para dar el óxido de amina A-4 (R^{1} = 4-Me_{2}N(O)-, R^{12} = H) como un sólido blanco (5,31 g, 83% de rendimiento). RMN ^{1}H (250 MHz, CDCl_{3}) \delta 11,01 (sa, 1), 7,89, 7,35 (ABc, 4, J = 8,7 Hz), 4,42 (sa, 1), 4,33 (d, 1, J = 6,9 Hz), 4,05-3,89 (m, 4), 3,65 (s, 3), 3,64 (s, 3), 2,61-1,01 (m, 18), 0,483 (s, 3).

17-Bromo-11\beta-[4-(N,N-dimetilamino)fenil]-3,3-[1,2-etanodiilbis(oxi)]-5\alpha-hidroxi-17-nitroestr-9-eno. A una disolución de 4,39 g (24,7 mmol) de NBS en 20 ml de 1,4-dioxano y 20 ml de agua a temperatura ambiente se le añadió una disolución de 2,47 g (24,7 mmol) de KHCO_{3} en 20 ml de agua. Después de 5 min, se le añadió 4,60 g (9,86 mmol) de la oxima A-4 (R^{1} = 4-Me_{2}N(O)-, R^{12} = H) en 35 ml de 1,4-dioxano y 20 ml de agua en 5 min, provocando una coloración verde lima/amarilla que gradualmente se volvió amarilla. Después de 16 h, se añadió FeSO_{4} acuoso saturado (120 ml) recién preparado, formando un precipitado pardo. Después de agitar vigorosamente durante 15 min, la mezcla se extrajo tres veces con EtOAc. Las disoluciones orgánicas combinadas se lavaron tres veces con FeSO_{4} acuoso saturado recién preparado, dos veces con salmuera, se secaron sobre Na_{2}SO_{4}, se filtraron, y el disolvente se retiró a presión reducida para dar 17-bromo-11\beta-[4-(N,N-dimetilamino)fenil]-3,3-[1,2-etanodiilbis(oxi)]-5\alpha-hidroxi-17-nitroestr-9-eno como un espuma amarilla parda (5,57 g), que se usó directamente en la siguiente etapa sin purificación adicional.

11\beta-[4-(N,N-Dimetilamino)fenil]-3,3-[1,2-etanodiilbis(oxi)]-5\alpha-hidroxi-17-nitroestr-9-eno [A-5 (R^{1} = 4-Me_{2}N-, R^{12} = H)]. A una disolución de 5,57 g (9,61 mmol) del 17-bromo-17-nitro alcohol anterior en 102 ml de THF y 20 ml de agua a temperatura ambiente se le añadió 1,21 g (31,8 mmol) de NaBH_{4} en varias fracciones, cada vez con el consiguiente desprendimiento vigoroso de gases. Después de 2 h, se añadió cuidadosamente una disolución de 7,01 g (101 mmol) de clorhidrato de hidroxilamina en 175 ml de agua, seguido de la adición de EtOAc. Después de agitar durante 20 min, la mezcla se extrajo tres veces con EtOAc. Las disoluciones orgánicas combinadas se lavaron tres veces con agua, una vez con NaHCO_{3} acuoso saturado, y una vez con salmuera, se secó sobre Na_{2}SO_{4}, se filtró, y el disolvente se retiró a presión reducida. La espuma resultante se recogió en la mínima cantidad de CH_{2}Cl_{2} y se sometió a cromatografía en gel de sílice (50% de EtOAc en hexanos) para dar el nitrocompuesto intermedio A-5 (R^{1} = 4-Me_{2}N-, R^{12} = H) (2,39 g, 50% de rendimiento para las 3 etapas) como un sólido amarillo. RMN ^{1}H (250 MHz, CDCl_{3}) \delta 7,03, 6,63 (ABc, 4, J = 8,8 Hz), 4,39 (s, 1), 4,39-4,30 (m, 1), 4,23 (d, 1, J = 7,0 Hz), 4,02-3,93 (m, 4), 2,90 (s, 6), 0,372 (s, 3).

11\beta-[4-(N,N-Dimetilamino)fenil]-17\beta-nitroestra-4,9-dien-3-ona [A-8 (R^{1} = 4-Me_{2}N, R^{7} = R^{12} = H)]. A una mezcla agitada rápidamente de 300 mg (0,622 mmol) del nitrocompuesto intermedio A-6 (R^{1} = 4-Me_{2}N-, R^{7} = R^{12} = H), 10 ml de CH_{2}Cl_{2}, y 0,56 ml de agua a 0ºC se le añadió gota a gota 0,84 ml (10,9 mmol) de ácido trifluoroacético (TFA). Después de agitar vigorosamente durante 45 min, la mezcla se agitó con NaHCO_{3} acuoso saturado durante 1,5 h. La fase acuosa se separó y se extrajo tres veces con EtOAc. La disolución orgánica combinada se lavó tres veces con NaHCO_{3} acuoso saturado, dos veces con salmuera, se secó sobre Na_{2}SO_{4}, se filtró, y el disolvente se retiró a presión reducida. La cromatografía en gel de sílice (45% de EtOAc en hexanos) dio A-8 (R^{1} = 4-Me_{2}N-, R^{7} = R^{12} = H) (235 mg, 90% de rendimiento) como una espuma blanquecina. Dos trituraciones con metanol de una muestra de este material y la concentración de las disoluciones de metanol resultantes dieron una muestra del >97% de pureza (por análisis HPLC). RMN ^{1}H (250 MHz, CDCl_{3}) \delta 7,00, 6,64 (ABc, 4, J = 8,6 Hz), 5,77 (s, 1), 4,42-4,33 (m, 2), 2,91 (s, 6), 0,446 (s, 3). MS m/z (intensidad relativa) 420 (M^{+}, 27), 121 (100). Anal. calcd. para C_{26}H_{32}N_{2}O_{3}\cdot0,25 H_{2}O: C, 73,47; H, 7,71; N, 6,59. Hallado: C, 73,11; H, 7,61; N, 6,55.

Ejemplo 2 Síntesis de 11\beta-[4-(N,N-Dimetilamino)fenil]-17\alpha-(3-hidroxipropil)-17\beta-nitroestra-4,9-dien-3-ona [A-8 (R^{1} = 4-Me_{2}N, R^{7} = -(CH_{2})_{3}OH, R^{12} = H)]

11\beta-[3-Bromo-4-(N,N-dimetilamino)fenil]-3,3-[1,2-etanodiilbis(oxi)]-5\alpha-hidroxi-17-nitroestr-9-eno [A-5 (R^{1} = 4-Me_{2}N-, R^{12} = 3-Br). A una suspensión vigorosamente agitada de 1,28 g de N-bromosuccinimida finamente pulverizada en 5 ml de agua y 5 ml de dioxano se le añadió una disolución de 1,07 g de bicarbonato de sodio en 5 ml de agua. A la suspensión resultante se le añadió 1,28 g de la oxima A-4 (R^{1} = 4-Me_{2}N-, R^{12} = H) en 10 ml de dioxano. La suspensión resultante se agitó durante dos días, tras los cuales se separó un aceite. Se añadió agua a la mezcla de reacción, seguido de LA extracción con éter. La fase etérea se lavó con agua, seguido de una disolución de sulfato ferroso diluido, y se concentró a presión reducida. El producto en bruto se disolvió en 18 ml de THF y 3,5 ml de agua. Se le añadió borohidruro de sodio (350 mg) durante un periodo de 15 min. Después de agitar durante una hora a temperatura ambiente se añadieron 150 mg adicionales de borohidruro. La reacción se agitó durante 1,5 h más y a continuación se llevó hasta pH 7 con clorhidrato de hidroxilamina en agua. La mezcla se extrajo con éter, la fase etérea se lavó, se secó, se filtró y se concentró para dar 1,3 g del producto en bruto. Este material se sometió a cromatografía en gel de sílice usando hexano-acetato de etilo 2:1 para dar 325 mg de A-5 (R^{1} = 4-Me_{2}N-, R^{12} = 3-Br) como un sólido blanco (47% de rendimiento). IR 3680, 3005, 2860, 1595, 1535, 1412, 1379, 1345, 1109, 836 cm^{-1}; RMN ^{1}H (250 MHz, CDCl_{3}) \delta 0,38 (s, 3, C_{18}H), 2,91 (s, 6, N(CH_{3})_{2}), 3,99 (m, 4, O(CH_{2})O_{2}), 4,12 (d, 1, C_{11 \alpha}H), 4,31 (t, 1, C_{17}\alphaH), 4,42 (s, 1, C_{5}OH), 6,88-7,37 (m, 3, ArH).

11\beta-[3-Bromo-17\alpha-(2-carbometoxietil)-4-(N,N-dimetilamino)fenil]-3,3-[1,2-etanodiilbis(oxi)]-5\alpha-hidroxi-17\beta-nitroestr-9-eno [A-6 (R^{1} = 4-Me_{2}N-, R^{7} = -(CH_{2})_{2}COOMe, R^{12} = 3-Br). A una suspensión de 1,5 g del nitrocompuesto A-5 (R^{1} = 4-Me_{2}N-, R^{12} = 3-Br) en 8,0 ml de t-butanol y 15 ml de acrilato de metilo se le añadió 1,5 ml de Triton B. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante toda la noche y a continuación se inactivó vertiendo agua helada. Esto se extrajo dos veces con éter, se lavó con cloruro amónico saturado y se secó sobre sulfato de magnesio anhidro para dar 1,2 g (88% de rendimiento) de A-6 (R^{1} = 4-Me_{2}N-, R^{7} = -(CH_{2})_{2}COOMe, R^{12} = 3-Br). RMN ^{1}H (250 MHz, CDCl_{3}); \delta 7,36 (s, 1, ArH), 6,95 (d, 1, J = 8,4 Hz, ArH), 7,09 (d, 1, J = 8,4 Hz, C_{5}ArH), 4,36 (s, 1, C_{5}OH), 4,29 (d, 1, J = 6,5 Hz, C_{11 \alpha}H), 3,95 (m, 4, (OCH_{2})_{2}), 3,68 (s, 3, CO_{2}CH_{3}), 2,90 (s, 6, N(CH_{3})_{2}), 0,39 (s, 3, C_{18}H).

11\beta-[3-Bromo-4-(N,N-dimetilamino)fenil]-3,3-[1,2-etanodiilbis(oxi)]-5\alpha-hidroxi-17\alpha-(3-hidroxipropil)-17\beta-ni-troestr-9-eno [A-7 (R^{1} = Me_{2}N-, R^{7} = -(CH_{2})_{3}OH, R^{12} = 3-Br)]. A una disolución de 1,14 mg (1,75 mmol) de A-6 (R^{1} = 4-Me_{2}N-, R^{7} = -(CH_{2})_{2}COOMe, R^{12} = 3-Br) en 6,3 ml de tolueno se le añadió gota a gota 5,23 ml de una disolución 1 M de hidruro de diisobutilaluminio (DIBAL-H) en hexano a temperatura ambiente. Durante el transcurso de la adición la temperatura subió hasta 45ºC y se mantuvo a esta temperatura durante 2 h más después de la adición. La reacción se inactivó añadiendo 0,63 ml de metanol en 0,93 ml de tolueno, seguido de 0,26 ml de agua y 0,27 ml de metanol. La mezcla se agitó durante 30 min y a continuación se filtró a través de Celite y se concentró a presión reducida. El producto en bruto se purificó por cromatografía en gel de sílice usando acetona al 5% en diclorometano como eluyente para dar 945 mg (87% de rendimiento) de A-7 (R^{1} = 4-Me_{2}N-, R^{7} = -(CH_{2})_{3}OH, R^{12} = 3-Br). RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 0,39 (s, 3, C_{18}H), 2,76 (s, 6, N(CH_{3})_{2}), 3,61-3,68 (m, 2, CH_{2}OH), 3,95 (m, 4, O(CH_{2})_{2}O), 4,28 (d, 1, 11_{\alpha}H), 4,42 (s, 1, C_{5}OH), 6,88-7,37 (m, 3, ArH).

11\beta-[4-(N,N-Dimetilamino)fenil]-3,3-[1,2-etanodiilbis(oxi)]-5\alpha-hidroxi-17\alpha-(3-hidroxipropil)-17\beta-nitroestr-9-eno [A-7 (R^{1} = Me_{2}N-, R^{7} = -(CH_{2})_{3}OH, R^{12} = H)]. A una disolución de 615 mg (1,09 mmol) de A-7 (R^{1} = Me_{2}N-, R^{7} = -(CH_{2})_{3}OH, R^{12} = 3-Br) disuelta en 50 ml de THF a -78ºC en atmósfera inerte se le añadió 3,0 ml de t-butil-litio 1,7 M a -78ºC durante un periodo de 30 min. Esto dio como resultado una disolución amarilla brillante que se agitó a -78ºC durante 10-15 min. La mezcla de reacción se inactivó con cloruro amónico saturado, se extrajo con acetato de etilo, se lavó con agua, seguido de salmuera y se secó sobre sulfato de magnesio anhidro. La disolución seca se filtró, se concentró sobre vacío y el producto en bruto se sometió a cromatografía en gel de sílice con hexano-EtOAc-Et_{2}O 10:3:2 para dar 270 mg (49% de rendimiento) de A-7 puro (R^{1} = Me_{2}N-, R^{7} = -(CH_{2})_{3}OH, R^{12} = H). RMN ^{1}H (250 MHz, CDCl_{3}); \delta 7,00 (d, 2, J = 8,6 Hz, ArH), 6,59 (d, 2, J = 8,8 Hz, ArH), 4,37 (s, 1, C_{5}OH), 4,25 (d, 1, J = 6,3 Hz, C_{11 \alpha}H), 3,88-3,98 (m, 4, (OCH_{2})_{2}), 3,49-3,70 (m, 2, CH_{2}OH), 2,88 (s, 6, N(CH_{3})_{2}), 0,34 (s, 3, C_{18}H).

11\beta-[4-(N,N-Dimetilamino)fenil]-17\alpha-(3-hidroxipropil)-17\beta-nitroestra-4,9-dien-3-ona [A-8 (R^{1} = 4-Me_{2}N-, R^{7} = -(CH_{2})_{3}OH, R^{12} = H)]. Una disolución de 270 mg (0,5 mmol) de A-7 (R^{1} = 4-Me_{2}N-, R^{7} = -(CH_{2})_{3}OH, R^{12} = H) en 25 ml de CH_{2}Cl_{2} se enfrió a 0ºC. A esto se le añadió gota a gota 0,5 ml de agua, seguido de 1,5 ml de TFA. La mezcla de reacción se volvió de color amarillo brillante. Después de agitar durante 1 h a 0ºC la reacción se inactivó con NaHCO_{3} sat. y se extrajo con 200 ml de CH_{2}Cl_{2}. La fase orgánica se lavó con agua, seguido de salmuera y se secó sobre MgSO_{4} anhidro. La fase con CH_{2}Cl_{2} se filtró, se concentró y el residuo se sometió a cromatografía en gel de sílice usando acetona al 10% en CH_{2}Cl_{2} para dar 167 mg (70% de rendimiento) de la dienona deseada A-8 (R^{1} = 4-Me_{2}N-, R^{7} = -(CH_{2})_{3}OH, R^{12} = H). Se empleó purificación en HPLC preparativa en una columna de fase inversa YMC C-18 usando metanol al 80% en agua para conseguir más del 97% de material puro: RMN ^{1}H (250 MHz, CDCl_{3}) \delta 6,99 (d, 2, J = 8,6 Hz, ArH), 6,63 (d, 2, J = 8,9 Hz, ArH), 5,77 (s, 1, C_{4}H), 4,40 (d, 1, J = 6,5 Hz, C_{11 \alpha}H), 3,63-3,74 (m, 2, CH_{2}OH), 2,90 (s, 6, N(CH_{3})_{2}), 0,45 (s, 3, C_{18}H); espectro de masas, m/z (intensidad relativa) 478 (14), 428 (27), 147 (8), 121 (100), 91 (10); masa exacta; calculada para C_{29}H_{38}N_{2}O_{4}: 478,2831. Hallado: 478,2837; Anal. calculado para C_{29}H_{38}N_{2}O_{4}\cdotH_{2}O: C, 70,13; H, 8,12; N, 5,64. Hallado: C, 69,72; H, 8,01; N, 5,00.

Ejemplo 3 Síntesis alternativa de 11\beta-[4-(N,N-Dimetilamino)fenil]-17\alpha-(3-hidroxipropil)-17\beta-nitroestra-4,9-dien-3-ona [A-8 (R^{1} = 4-Me_{2}N-, R^{7} = -(CH_{2})_{3}OH, R^{12} = H)]

17\alpha-(2-Carbometoxietil)-11\beta-[4-(N,N-dimetilamino)fenil]-3,3-[1,2-etanodiilbis(oxi)]-5\alpha-hidroxi-17\beta-nitroestra-9-eno [A-6 (R^{1} = 4-Me_{2}N-, R^{7} = -(CH_{2})_{2}COOMe, R^{12} = H)]. A una disolución de 1,5 g (0,047 mmol) de A-5 (R^{1} = 4-Me_{2}N-, R^{12} = H) en 8,3 ml de t-butanol se le añadió 16,5 ml de acrilato de metilo. A esto a continuación se le añadió 1,5 ml de una disolución de Triton B en metanol. La mezcla de reacción se agitó durante 2 h y a continuación se vertió en agua helada y se extrajo con acetato de etilo. La fase orgánica se lavó con agua, seguido de salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró sobre vacío. El producto en bruto se sometió a cromatografía en gel de sílice con hexano-acetato de etilo 2:1 como eluyente para dar 1,56 g (88% de rendimiento) de A-6 (R^{1} = 4-Me_{2}N-, R^{7} = -(CH_{2})_{2}COOMe, R^{12} = H). RMN ^{1}H (250 MHz, CDCl_{3}); \delta 0,39 (s, 3, C_{18}H), 2,90 (s, 6, N(CH_{3})_{2}), 3,68 (s, 3, CO_{2}CH_{3}), 3,95 (m, 4, O(CH_{2})_{2}O), 4,29 (d, 1, C_{11 \alpha}H), 4,36 (s, 1, C_{5}OH), 6,63 (d, 2, ArH), 7,03 (d, 2, ArH).

11\beta-[4-(N,N-Dimetilamino)fenil]-3,3-[1,2-etanodiilbis(oxi)]-5\alpha-hidroxi-17\alpha-(3-hidroxipropil)-17\beta-nitroestr-9-eno [A-7 (R^{1} = 4-Me_{2}N-, R^{7} = -(CH_{2})_{3}OH, R^{12} = H)]. A 83 mg (0,147 mmol) de A-6 (R^{1} = 4-Me_{2}N-, R^{7} = -(CH_{2})_{2}
COOMe, R^{12} = H) disuelto en 3 ml de tolueno y mantenido en atmósfera de nitrógeno se le añadió gota a gota 0,44 ml de una disolución 1 M de DIBAL-H en hexano. Durante la adición, la temperatura subió hasta 45ºC aproximadamente. La mezcla de reacción se mantuvo a 45ºC durante 2 h. La reacción se inactivó añadiendo 0,2 ml de metanol en 0,5 ml de tolueno, seguido de la adición de 0,1 ml de agua en 0,3 ml de metanol. A continuación esto se filtró a través de Celite y se concentró. El producto en bruto se sometió a cromatografía en gel de sílice usando acetona al 5% en diclorometano para dar 70 mg de un sólido blanco. RMN ^{1}H (250 MHz, CDCl_{3}) \delta 0,39 (s, 3, C_{18}H), 2,86 (s, 6, N(CH_{3})_{2}),
3,61-3,64 (m, 2, CH_{2}OH), 3,95 (m, 4, O(CH_{2})_{2}), 4,28 (d, 1, C_{11 \alpha}H), 4,42 (s, 1, C_{5}OH), 6,63 (d, 2, ArH), 7,03 (d, 2, ArH).

11\beta-[4-(N,N-Dimetilamino)fenil]-17\alpha-(3-hidroxipropil)-17\beta-nitroestra-4,9-dien-3-ona [A-8 (R^{1} = 4-Me_{2}N-, R^{7} = -(CH_{2})_{3}OH, R^{12} = H)]. A una disolución de 70 mg (0,12 mol) de A-7 (R^{1} = 4-Me_{2}N-, R^{7} = -(CH_{2})_{3}OH, R^{12} = H) en 1 ml de acetona se le añadió una cantidad catalítica de ácido p-toluensulfónico a -10ºC. La reacción se calentó lentamente a temperatura ambiente y se agitó durante 3 h más. La reacción se inactivó con bicarbonato de sodio saturado, se extrajo con cloruro de metileno y la fase orgánica se lavó con agua, seguido de salmuera. La fase con cloruro de metileno a continuación se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró. El producto en bruto se sometió a cromatografía en gel de sílice con acetona al 5% en diclorometano como eluyente para dar 35 mg de A-8 (R^{1} = 4-Me_{2}N-, R^{7} = -(CH_{2})_{3}OH, R^{12} = H) con un rendimiento del 50% aproximadamente. RMN ^{1}H (250 MHz, CDCl_{3}); igual a como se ha mostrado para el ejemplo 2.

Ejemplo 4 Síntesis de 11\beta-[4-(N,N-Dimetilamino)fenil]-17\alpha-[1-(3-hidroxi)propenil]-17\beta-nitroestra-4,9-dien-3-ona [A-8 (R^{1} = 4-Me_{2}N-, R^{7} = HOCH_{2}CH=CH-, R^{12} = H)]

11\beta-[3-Bromo-17\alpha-(2-(E)-carbometoxietenil)-3,3-4-(N,N-dimetilamino)fenil]-[1,2-etanodiilbis(oxi)]-5\alpha-hidroxi-17\beta-nitroestra-9-eno [A-6 (R^{1} = 4-Me_{2}N-, R^{7} = (E)-CH=CHCOOMe, R^{12} = 3-Br)]. Una disolución de 3,14 g (5,6 mmol) de A-5 (R^{1} = 4-Me_{2}N-, R^{12} = 3-Br), 1,632 g (28,0 mmol) de KF y 1,821 g (5,6 mmol) de n-Bu_{4}NBr en 12,5 ml de DMSO se agitó durante 30 min a temperatura ambiente. A continuación se le añadió gota a gota 1,0 ml (11,2 mmol) de propiolato de metilo y la disolución se agitó durante 1 h. La mezcla de reacción se diluyó con agua y se extrajo con acetato de etilo. La fase orgánica se lavó con agua, seguido de salmuera y se secó sobre MgSO_{4} anhidro. La fase orgánica se filtró, se concentró, y el producto en bruto se sometió a cromatografía en gel de sílice usando hexano-acetato de etilo 1:1 para dar 2,02 g del isómero E puro, 0,6 g del isómero Z puro y 0,40 g de una mezcla de isómeros con un rendimiento global del 85% de A-6 (R^{1} = 4-Me_{2}N-, R^{7} = -CH=CHCOOMe, R^{12} = H). El isómero E presenta los siguientes datos espectrales: RMN ^{1}H (250 MHz, CDCl_{3}) \delta 7,36 (d, 1, J = 15,9 Hz, CH=CHCO_{2}Me), 7,35 (s, 1, ArH), 7,08 (d, 1, J = 8,6 Hz, ArH), 6,96 (d, 1, J = 8,6 Hz, ArH), 5,87 (d, 1, J = 15,9 Hz, CH=CHCO_{2}Me), 4,46 (s, 1, C_{5}OH), 4,21 (d, 1, J = 7,0 Hz, C_{11 \alpha}H), 3,93-4,02 (m, 4, (OCH_{2})_{2}), 3,80 (s, 3, CO_{2}CH_{3}), 2,76 (s, 6, N(CH_{3})_{2}), 0,49 (s, 3, C_{18}H). El isómero Z presenta los siguientes datos espectrales: RMN ^{1}H (250 MHz, CDCl_{3}) \delta 7,32 (s, 1, ArH), 7,05 (d, 1, J = 8,6 Hz, ArH), 6,94 (d, 1, J = 8,2 Hz, ArH), 6,58 (d, 1, J = 12,7 Hz, CH=CHCO_{2}Me), 6,05 (d, 1, J = 12,3 Hz, CH=CHCO_{2}Me), 4,46 (s, 1, C_{5}OH), 4,31 (d, 1, J = 7,0 Hz, C_{11 \alpha}H), 3,96-4,02 (m, 4, (OCH_{2})_{2}), 3,68 (s, 3, CO_{2}CH_{3}), 2,75 (s, 6, N(CH_{3})_{2}), 0,44 (s, 3, C_{18}H).

11\beta-[3-Bromo-4-(N,N-dimetilamino)fenil]-3,3-[1,2-etanodiilbis(oxi)]-5\alpha-hidroxi-17\alpha-[(E)-1-(3-hidroxi)prope-nil]-17\beta-nitroestr-9-eno [A-7 (R^{1} = 4-Me_{2}N-, R^{7} = (E)-CH=CHCH_{2}OH, R^{12} = 3-Br)]. A una disolución de 2,025 g (3,14 mmol) de A-6 (R^{1} = 4-Me_{2}N-, R^{7} = (E)-CH=CHCOOMe, R^{12} = 3-Br) disuelta en 25 ml de CH_{2}Cl_{2} mantenida en atmósfera de nitrógeno a -78ºC se le añadió gota a gota 12,96 ml de una disolución 1 M de DIBAL-H en hexano. La mezcla de reacción se calentó lentamente a temperatura ambiente y se agitó durante 1 h. La reacción se inactivó añadiendo 5 ml de metanol, seguido de una disolución saturada de sal de Rochelle y acetato de etilo. Esta mezcla se agitó hasta que no se observó más precipitado. La fase orgánica se lavó con agua, seguido de salmuera, se secó sobre MgSO_{4} anhidro y a continuación se filtró. El filtrado se concentró y el producto en bruto se sometió a cromatografía en gel de sílice usando acetona al 5% en diclorometano para dar 1,40 g (72% de rendimiento) del alcohol A-7 (R^{1} = 4-Me_{2}N-, R^{7} = (E)-CH=CHCH_{2}OH, R^{12} = 3-Br). RMN ^{1}H (250 MHz, CDCl_{3}) \delta 7,36 (s, 1, ArH), 7,08 (d, 1, J = 8,4 Hz, ArH), 6,95 (d, 1, J = 8,2 Hz, ArH), 6,58 (d, 1, J = 15,9 Hz, CH=CHCH_{2}OH), 5,80 (dt, 1, J_{1} = 4,37 Hz, J_{2} = 15,5 Hz, CH=CHCH_{2}OH), 4,49 (s, 1, C_{5}OH), 4,20-4,26 (da, 3, CH_{2}OH, C_{11 \alpha}H), 3,92-4,02 (m, 4, (OCH_{2})_{2}), 3,68 (s, 3, CO_{2}CH_{3}), 2,75 (s, 6, N(CH_{3})_{2}), 0,46 (s, 3, C_{18}H).

11\beta-[4(N,N-Dimetilamino)fenil]-3,3-[1,2-etanodiilbis(oxi)]-5\alpha-hidroxi-17\alpha-[(E)-1-(3-hidroxi)propenil]-17\beta-ni-troestr-9-eno [A-7 (R^{1} = 4-Me_{2}N-, R^{7} = (E)-CH=CHCH_{2}OH, R^{12} = H)]. A una disolución de 1,40 g (2,27 mmol) de A-7 (R^{1} = 4-Me_{2}N-, R^{7} = (E)-CH=CHCH_{2}OH, R^{12} = 3-Br), disuelta en 100 ml de THF a -78ºC en atmósfera de argón se le añadió 5,5 ml de una disolución 1,7 M de t-butil-litio a -78ºC en 10 min. La mezcla de reacción se inactivó con cloruro amónico saturado, se extrajo con acetato de etilo, se lavó con agua, seguido de salmuera y se secó sobre sulfato de magnesio anhidro. La disolución seca a continuación se filtró, se concentró sobre vacío y el producto en bruto se usó sin purificación adicional en la siguiente etapa. RMN ^{1}H (250 MHz, CDCl_{3}) \delta 7,04 (d, 2, J = 8,8 Hz, ArH), 6,64 (d, 2, J = 8,8 Hz, ArH), 6,58 (d, 1, J = 15,9 Hz, CH=CHCH_{2}OH), 5,80 (dt, 1, J_{1} = 4,7 Hz, J_{2} = 15,5 Hz, CH=CHCH_{2}OH), 4,45 (s, 1, C_{5}OH), 4,27 (d, 2, J = 4,0 Hz, CH_{2}OH), 4,27 (d, 1, J = 7,4 Hz, C_{11 \alpha}H), 3,90-4,02 (m, 4, (OCH_{2})_{2}), 2,90 (s, 6, N(CH_{3})_{2}), 0,46 (s, 3, C_{18}H).

11\beta-[4-(N,N-Dimetilamino)fenil]-17\alpha-[(E)-1-(3-hidroxi)propenil]-17\beta-nitroestra-4,9-dien-3-ona, [A-8 (R^{1} = 4-Me_{2}N-, R^{7} = (E)-CH=CHCH_{2}OH, R^{12} = H)]. Una disolución de 1,08 g (0,5 mmol) de A-7 en bruto (R^{1} = 4-Me_{2}N-, R^{7} = (E)-CH=CHCH_{2}OH, R^{12} = H), en 25 ml de CH_{2}Cl_{2} se enfrió a 0ºC. A esto se le añadió gota a gota 1,0 ml de agua, seguido de 5,0 ml de TFA. La mezcla de reacción se volvió amarillo brillante. Después de agitar durante 1 h a 0ºC la reacción se inactivó con NaHCO_{3} sat. y se extrajo con 250 ml de CH_{2}Cl_{2}. La fase orgánica se lavó con agua, seguido de salmuera y se secó sobre MgSO_{4} anhidro. La disolución seca se filtró, se concentró y el producto en bruto se sometió a cromatografía en gel de sílice usando acetona al 10% en CH_{2}Cl_{2} para dar 515 mg de la dienona deseada A-8 (R^{1} = 4-Me_{2}N-, R^{7} = (E)-CH=CHCH_{2}OH, R^{12} = H) con 50% de rendimiento. Se empleó purificación en HPLC preparativa en una columna de fase inversa YMC C-18 usando metanol al 80% en agua para conseguir más del 97% de material puro: RMN ^{1}H (250 MHz, CDCl_{3}) \delta 6,99 (d, 2, J = 8,6 Hz, ArH), 6,64 (d, 2, J = 8,8 Hz, ArH), 6,30 (d, 1, J = 16,0 Hz, CH=CHCH_{2}OH), 5,83 (dt, 1, J_{1} = 4,7 Hz, J_{2} = 15,5 Hz, CH=CHCH_{2}OH), 5,76 (s, 1, C_{4}H), 4,34-4,28 (da, 3, CH_{2}OH, C_{11 \alpha}H), 2,90 (s, 6, N(CH_{3})_{2}), 0,53 (s, 3, C_{18}H); espectro de masas, m/z (intensidad relativa) 476(9), 429(16), 415(18), 143(17), 121(100); masa exacta: Calcd. para C_{29}H_{38}N_{2}O_{4}: 478,2831. Hallado: 478,2837; Anal. calcd. para C_{29}H_{36}N_{2}O_{4}\cdot0,25H_{2}O: C, 73,54; H, 7,99; N, 5,62. Hallado: C, 73,31; H, 8,31; N, 4,96.

Ejemplo 5 Síntesis de 11\beta-(4-Acetilfenil)-17\alpha-(3-hidroxipropil)-17\beta-nitroestra-4,9-dien-3-ona [A-8 (R^{1} = 4-CH_{3}C(O)-, R^{7} = -(CH_{2})_{3}OH, R^{12} = H)]

4-Bromoacetofenonaetilencetal. Una mezcla bien agitada de 25,0 g (126 mmol) de p-bromoacetofenona, 70,0 ml (1,26 mol) de etilenglicol, y 2,38 g (12,5 mmol) de p-TsOH en 350 ml de tolueno se calentó a reflujo en un aparato Dean-Stark. Después de 22 h, la mezcla se dejó enfriar a temperatura ambiente, se añadió cuidadosamente NaHCO_{3} acuoso saturado, y la mezcla se extrajo con éter. Las disoluciones orgánicas combinadas se lavaron con agua y salmuera, se secaron sobre MgSO_{4}, se filtraron, y el disolvente se retiró a presión reducida. El sólido resultante se secó sobre vacío a temperatura ambiente para dar 4-bromoacetofenonaetilencetal (30,2 g, 99% de rendimiento) como un sólido blanquecino, que se usó sin purificación adicional. RMN ^{1}H (250 MHz, CDCl_{3}) \delta 7,46 (m, 2), 7,36 (m, 2), 4,03 (m, 2), 3,77 (m, 2), 1,63 (s, 3).

3,3-[1,2-Etanodiilbis(oxi)]-11\beta-{4-{1,1-[1,2-etanodiilbis(oxi)]etil}fenil}-5\alpha-hidroxiestr-9-en-17-ona [A-3 (R^{1} = 4-CH_{3}C(OCH_{2})_{2}-, R^{12} = H]. A una mezcla de 1,09 g (44,7 mmol) de virutas de magnesio y 50 ml de THF en atmósfera de nitrógeno a temperatura ambiente se le añadió 15 ml de una disolución de 9,44 g (38,8 mmol) de 4-bromoacetofenonaetilencetal en 100 ml de THF. La mezcla resultante se calentó suavemente hasta que se observó una coloración verde/amarilla (15 min aproximadamente), momento en el que se le añadió gota a gota el resto de la disolución de bromuro de arilo durante un periodo de 10 min sin calentamiento externo adicional. Después de 2 h, la suspensión verde oliva resultante se enfrió entre -10ºC y -13ºC, y a continuación se le añadió 851 mg (8,60 mmol) de CuCl en una fracción, seguido, 15 segundos más tarde, de una disolución de 2,85 g (8,60 mmol) de 3,3-[1,2-etanodiilbis(oxi)]-5\alpha,10\alpha-(oxido)estr-9(11)-en-17-ona (A-2) en 25 ml de THF, seguido del enjuagado con 5 ml de THF. Después de 20 min, la mezcla amarilla clara resultante se inactivó con NH_{4}Cl acuoso saturado y se dejó calentar a temperatura ambiente. Se añadieron éter y agua, y la mezcla se extrajo con éter. Las disoluciones orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO_{4}, se filtraron, y el disolvente se retiró a presión reducida. El sólido resultante se recogió en la mínima cantidad de CH_{2}Cl_{2} y se sometió a cromatografía en gel de sílice (hexanos-éter, 1:22 hasta el 100% de éter) para dar el producto de adición 1,4 A-3 (R^{1} = 4-CH_{3}C(OCH_{2})_{2}-, R^{12} = H) (3,45 g, 81% de rendimiento) como un sólido espumoso blanco. RMN ^{1}H (250 MHz, CDCl_{3}) \delta 7,35, 7,19 (ABc, 4, J = 8,3 Hz), 4,39 (s, 1), 4,32 (d, 1, J = 7,4 Hz), 4,03-3,77 (m, 8), 1,64 (s, 3), 0,47 (s, 3).

3,3-[1,2-Etanodiilbis(oxi)]-11\beta-{4-{1,1-[1,2-etanodiilbis(oxi)]etil}fenil}-5\alpha-hidroxiestr-9-en-17-oxima [A-4 (R^{1} = 4-CH_{3}C(OCH_{2})_{2}-, R^{12} = H)]. A una mezcla de 3,45 g (6,97 mmol) de la cetona A-3 (R^{1} = 4-CH_{3}C(OCH_{2})_{2}-, R^{12} = H) y 557 mg (8,02 mmol) de clorhidrato de hidroxilamina en atmósfera de nitrógeno a temperatura ambiente se le añadió 25 ml de piridina anhidra, a continuación 2,5 h más tarde, se le añadió 242 mg (3,49 mmol) de clorhidrato de hidroxilamina adicionales. Después de 12 h, la mezcla de reacción se vertió en 250 ml de agua y se extrajo con éter. La disolución orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre MgSO_{4}, se filtró, y el disolvente se retiró a presión reducida. El sólido blanco resultante se recogió en la mínima cantidad de CH_{2}Cl_{2} y se sometió a cromatografía en gel de sílice (14% de Me_{2}CO en CH_{2}Cl_{2}) para dar la oxima A-4 (R^{1} = 4-CH_{3}C(OCH_{2})_{2}-, R^{12} = H) (2,97 g, 84% de rendimiento) como una espuma sólida blanca. RMN ^{1}H (250 MHz, CDCl_{3}) \delta 7,34, 7,19 (ABc, 4, J = 8,4 Hz), 6,95 (sa, 1), 4,38 (s, 1), 4,30 (d, 1, J = 6,8 Hz), 4,05-3,77 (m, 4), 1,64 (s, 3), 0,51 (s, 3).

17-Bromo-3,3-[1,2-etanodiilbis(oxi)]-11\beta-{4-{1,1-[1,2-etanodiilbis(oxi)]-etil}fenil}-5\alpha-hidroxi-17-nitroestr-9-eno. A una mezcla agitada rápidamente de 523 mg (2,94 mmol) de NBS en 1,7 ml de agua y 1,7 ml de dioxano a temperatura ambiente se le añadió una disolución de 295 mg (2,94 mmol) de KHCO_{3} en 1,7 ml de agua. A la mezcla resultante se le añadió gota a gota una disolución de 500 mg (0,981 mmol) de la oxima A-4 (R^{1} = 4-CH_{3}C(OCH_{2})_{2}-,
R^{12} = H) en 3,4 ml de dioxano, seguido del enjuagado con 0,4 ml de dioxano, provocando una coloración verde lima clara. Después de agitar vigorosamente durante 17 h, la mezcla blanquecina resultante se diluyó con éter y agua, y a continuación se extrajo con éter. Las disoluciones orgánicas combinadas se lavaron una vez con agua, tres veces con una disolución acuosa saturada de FeSO_{4} al 50%, dos veces con salmuera, se secó sobre MgSO_{4}, se filtró, y el disolvente se retiró a presión reducida. Sin un retraso excesivo, la espuma amarilla vidriosa resultante se recogió en la mínima cantidad de CH_{2}Cl_{2} y se sometió a cromatografía en gel de sílice (50% de EtOAc en hexanos) para dar el 17-bromo-17-nitrocompuesto deseado, pero muy lábil (437 mg, 74% de rendimiento) como una espuma sólida blanca. IR (CCl_{4}) n 3500, 1548 cm^{-1}; RMN ^{1}H (250 MHz, CDCl_{3}) \delta 7,35, 7,17 (ABc, 4, J = 8,3 Hz), 4,43 (s, 1), 4,39 (d, 1, J = 7,2 Hz), 4,08-3,75 (m, 8), 3,32 (m, 1), 1,63 (s, 3), 0,45 (s, 3).

3,3-[1,2-Etanodiilbis(oxi)]-11\beta-{4-{1,1-[1,2-etanodiilbis(oxi)]etil}fenil}-5\alpha-hidroxi-17-nitroestr-9-eno [A-5 (R^{1} = 4-CH_{3}C(OCH_{2})_{2}-, R^{12} = H)]. A una disolución de 200 mg (0,331 mmol) del 17-nitrocompuesto-17-bromo alcohol descrito anteriormente en 3,4 ml de THF y 0,6 ml de agua se le añadió 39,0 mg (1,03 mmol) de NaBH_{4} a temperatura ambiente en una fracción, con la consiguiente una reacción exotérmica vigorosa. Después de 1,4 h, se añadieron 11,0 mg adicionales (0,30 mmol) de NaBH_{4}. Después de 2,6 h, el volumen de la mezcla de reacción se dobló con la adición de éter, y se añadió gota a gota una disolución de 228 mg (3,28 mol) de clorhidrato de hidroxilamina en 6 ml de agua durante 4 min a la mezcla de reacción vigorosamente agitada. Después de agitar durante 5 min, la mezcla se extrajo con éter. Las disoluciones orgánicas combinadas se lavaron con agua, una disolución acuosa saturada de NaHCO_{3}, y salmuera, se secaron sobre MgSO_{4}, se filtraron, y el disolvente se retiró a presión reducida. La espuma resultante se recogió en la mínima cantidad de CH_{2}Cl_{2} y se sometió a cromatografía en gel de sílice (50% de EtOAc en hexanos) para dar el nitroalcohol desbromado A-5 (R^{1} = 4-CH_{3}C(OCH_{2})_{2}-, R^{12} = H) (152 mg, 87% de rendimiento) como un sólido mullido blanco. RMN ^{1}H (250 MHz, CDCl_{3}) \delta 7,34, 7,16 (ABc, 4, J = 8,3 Hz), 4,41 (s, 1), 4,38-4,31 (m, 2), 4,02-3,72 (m, 4), 2,74 (d, 1, J = 13 Hz), 1,63 (s, 3), 0,32 (s, 3).

17\alpha-(2-Carbometoxietil)-3,3-[1,2-etanodiilbis(oxi)]-11\beta-{4-{1,1-[1,2-etano-diilbis(oxi)]etil}fenil}-5\alpha-hidroxi-17\beta-nitroestr-9-eno [A-6 (R^{1} = 4-CH_{3}C(OCH_{2})_{2}-, R^{7} = -(CH_{2})_{2}COOMe, R^{12} = H)]. A una mezcla de 146 mg (0,278 mmol) del nitroalcohol A-5 (R^{1} = 4-CH_{3}C(OCH_{2})_{2}-, R^{12} = H) en 0,80 ml de t-BuOH y 1,51 ml (16,7 mmol) de acrilato de metilo a temperatura ambiente se le añadió gota a gota 0,16 ml (0,35 mmol) de Triton B en metanol al 40% en p/p, provocando una disolución de reacción homogénea ligeramente amarilla. Después de 1 h, se añadieron éter y una disolución acuosa saturada de NH_{4}Cl, y la mezcla se extrajo con éter. La disolución orgánica combinada se lavó con agua y a continuación con salmuera, se secó sobre MgSO_{4}, se filtró, y el disolvente se retiró a presión reducida. El sólido blanquecino resultante se recogió en la mínima cantidad de CH_{2}Cl_{2} y se sometió a cromatografía en gel de sílice (70% de EtOAc en hexanos) para dar el éster metílico A-6 (R^{1} = 4-CH_{3}C(OCH_{2})_{2}-, R^{7} = -(CH_{2})_{2}COOMe, R^{12} = H) (142 mg, 84% de rendimiento) como un sólido espumoso blanco. RMN ^{1}H (250 MHz, CDCl_{3}) \delta 7,34, 7,16 (ABc, 4, J = 8,1 Hz), 4,37 (sa, 2), 4,01-3,74 (m, 4), 3,69 (s, 3), 1,62 (s, 3), 0,33 (s, 3).

3,3-[1,2-Etanodiilbis(oxi)]-11\beta-{4-{1,1-[1,2-etanodiilbis(oxi)]etil}fenil}-5\alpha-hidroxi-17\alpha(3-hidroxipropil)-17\beta-nitroestr-9-eno [A-7 (R^{1} = CH_{3}C(OCH_{2})_{2}-, R^{7} = -(CH_{2})_{3}OH, R^{12} = H]. A una disolución de 142 mg (0,232 mmol) del éster A-6 (R^{1} = 4-CH_{3}C(OCH_{2})_{2}-, R^{7} = -(CH_{2})_{2}COOMe, R^{12} = H) en 2,3 ml de THF a -78ºC en atmósfera de nitrógeno se le añadió gota a gota 0,80 ml (0,80 mmol) de DIBAL-H 1,0 M en hexanos. Después de 1,25 h, se añadió una disolución acuosa saturada de la sal de Rochelle y la mezcla se dejó calentar a temperatura ambiente y se agitó hasta que la emulsión resultante se hubo clarificado (1,5 h aproximadamente). Se añadieron éter y agua, y la mezcla resultante se extrajo con éter. La disolución orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre MgSO_{4}, se filtró, y el disolvente se retiró a presión reducida para dar una mezcla del éster de partida A-6 (R^{1} = 4-CH_{3}C(OCH_{2})_{2}-, R^{7} = -(CH_{2})_{2}COOMe, R^{12} = H) y el aldehído intermedio por análisis de RMN ^{1}H, como un sólido oleoso blanco (141 mg).

A la mezcla del producto en bruto anterior (141 mg) en 2,3 ml de THF a -78ºC en atmósfera de nitrógeno se le añadió gota a gota 1,20 ml (1,20 mmol) de DIBAL-H 1,0 M en hexanos. Después de 45 min, la mezcla de reacción se calentó a 0ºC durante 15 min, a continuación se volvió a enfriar a -78ºC y se inactivó con una disolución acuosa saturada de la sal de Rochelle, a continuación se dejó calentar a temperatura ambiente y se agitó. La mezcla blanca resultante se extrajo con éter. Las disoluciones orgánicas blancas combinadas se lavaron con salmuera, una disolución acuosa saturada de la sal de Rochelle, agua, dos veces con salmuera, se secaron sobre MgSO_{4}, se filtraron, y el disolvente se retiró a presión reducida para dar un sólido blanco (74 mg). Después de permanecer en reposo durante 2 h aproximadamente, las fases acuosas combinadas se clarificaron, y se volvieron a extraer con EtOAc. Los extractos con EtOAc se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO_{4}, se filtraron, y el disolvente se retiró a presión reducida para dar un sólido blanco (54 mg). Los dos productos en bruto se combinaron en la mínima cantidad de CH_{2}Cl_{2} y se sometieron a cromatografía en gel de sílice (90% de EtOAc en hexanos) para dar el diol A-7 (R^{1} = 4-CH_{3}C(OCH_{2})_{2}-, R^{7} = -(CH_{2})_{3}OH, R^{12} = H) (98 mg, 73% de rendimiento) como un sólido blanco. RMN ^{1}H (250 MHz, CDCl_{3}) \delta 7,34, 7,16 (ABc, 4, J = 8,2 Hz), 4,37 (m, 2), 4,02-3,66 (m, 10), 2,83 (m, 1), 2,60 (d, 1, J = 13 Hz), 1,63 (s, 3), 0,33 (s, 3).

11\beta-(4-Acetilfenil)-17\alpha-(3-hidroxipropil)-17\beta-nitroestra-4,9-dien-3-ona [A-8 (R^{1} = 4-CH_{3}CO-, R^{7} = -(CH_{2})_{3}OH, R^{12} = H). A una mezcla bien agitada de 67,0 mg (0,115 mmol) del diol A-7 (R^{1} = 4-CH_{3}C(OCH_{2})_{2}-, R^{7} = -(CH_{2})_{3}
OH, R^{12} = H), 3,0 ml de CH_{2}Cl_{2}, y 0,05 ml de H_{2}O a 0ºC se le añadió gota a gota 0,50 ml de TFA, provocando una coloración amarilla. Después de 15 min, se añadió NaHCO_{3} acuoso saturado, las fases se separaron, y la fase acuosa se extrajo tres veces con CH_{2}Cl_{2}. La disolución orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na_{2}SO_{4}, se filtró, y el disolvente se retiró a presión reducida. El producto en bruto se recogió en la mínima cantidad de CH_{2}Cl_{2} y se sometió a cromatografía en gel de sílice (85% de EtOAc en hexanos) para dar A-8 (R^{1} = 4-CH_{3}CO-, R^{7} = -(CH_{2})_{3}
OH, R^{12} = H) (47,2 mg, 86% de rendimiento). RMN ^{1}H (500 MHz, CDCl_{3}) \delta 7,87, 7,28 (ABc, 4, J = 8,3 Hz), 5,80 (s, 1), 4,51 (d, 1, J = 7,1 Hz), 3,72 (m, 1), 3,62 (m, 1), 2,86 (t, 1, J = 13,4 Hz), 2,72 (m, 2), 2,60 (m, 2), 2,56 (s, 3), 2,55-2,51 (m, 1), 2,46-2,26 (m, 5), 2,09-2,04 (m, 1), 1,96-1,90 (m, 1), 1,84-1,74 (m, 2), 1,70-1,61 (m, 3), 1,53-1,42 (m, 2), 1,21-1,14 (m, 1), 0,39 (s, 3).

Ejemplo 6 Síntesis de E- y Z-11\beta-(4-Acetilfenil)-17\alpha-[1-(3-hidroxi)propenil]-17\beta-nitroestra-4,9-dien-3-ona [A-8 (R^{1} = 4-CH_{3}CO-, R^{7} = HOCH_{2}CH=CH-, R^{12} = H)]

17\alpha-[(E)-2-Carbometoxietenil]-3,3-[1,2-etanodiilbis(oxi)]-11\beta-{4-{1,1-[1,2-etanodiilbis(oxi)]etil}fenil}-5\alpha-hi-droxi-17\beta-nitroestr-9-eno [A-6 (R^{1} = 4-CH_{3}C(OCH_{2})_{2}, R^{7} = (E) MeOOCCH=CH-, R^{12} = H)] y 17\alpha-[(Z)-2-Carbometoxi-etenil]-3,3-[1,2-etanodiilbis(oxi)]-11\beta-{4-{1,1-[1,2-etanodiilbis(oxi)]etil}fenil}-5\alpha-hidroxi-17\beta-nitroestr-9-eno [A-6 (R^{1} = 4-CH_{3}C(OCH_{2})_{2}, R^{7} = (Z) MeOOCCH=CH-, R^{12} = H)]. A una mezcla de 2000 mg (3,80 mmol) del nitrocompuesto A-5 (R^{1} = 4-CH_{3}C(OCH_{2})_{2}-, R^{12} = H), 2,45 g (7,61 mmol) de Bu_{4}NBr, 1,10 g (19,0 mmol) de KF, y 10 ml de DMSO en un matraz secado a la llama en atmósfera de nitrógeno a temperatura ambiente se le añadió 0,68 ml (7,61 mmol) de propiolato de metilo. Después de 1,5 h, los bordes del matraz se enjuagaron con 3 ml más de DMSO. Después de 2,5 h, se añadieron EtOAc y H_{2}O y la fase acuosa se separó y se extrajo con EtOAc. La disolución orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre MgSO_{4}, se filtró, y el disolvente se retiró a presión reducida. El sólido espumoso pardo resultante se recogió en la mínima cantidad de CH_{2}Cl_{2} y se sometió a cromatografía en gel de sílice (60% de EtOAc en hexanos) para dar una mezcla 3:1 de A-6 (R^{1} = 4-CH_{3}C(OCH_{2})_{2}-, R^{7} = (E) MeOOCCH=CH-, R^{12} = H) y A-6 (R^{1} = 4-CH_{3}C(OCH_{2})_{2}-, R^{7} = (Z) MeOOCCH=CH-, R^{12} = H) (2,13 g, 92%). La cromatografía a presión media (MPLC) en gel de sílice (aplicación con la mínima cantidad de CH_{2}Cl_{2}, elución con THF-hexanos-MeOH 32:67:1) dio A-6 puro (R^{1} = 4-CH_{3}C(OCH_{2})_{2}, R^{7} = (E) MeOOCCH=CH-, R^{12} = H) (1,104 g) y dos mezclas de A-6 (R^{1} = 4-CH_{3}C(OCH_{2})_{2}, R^{7} = (E) MeOOCCH=CH-, R^{12} = H) y A-6 (R^{1} = -4CH_{3}C(OCH_{2})_{2}, R^{7} = (Z) MeOOCCH=CH-, R^{12} = H) (142 mg de 1:1 aproximadamente y 304 mg de 13:87, respectivamente). Dos recristalizaciones de los 304 mg de la mezcla 13:87 en THF-hexanos-MeOH 32:67:1, dio A-6 puro (R^{1} = 4-CH_{3}C(OCH_{2})_{2}, R^{7} = (Z) MeOOCCH=CH-, R^{12} = H) (200 mg). RMN ^{1}H (250 MHz, CDCl_{3}) A-6 (R^{1} = 4-CH_{3}C(OCH_{2})_{2}, R^{7} = (E) MeOOCCH=CH-, R^{12} = H) \delta 7,35, 7,16 (ABc, 4, J = 8,2 Hz), 7,36 (d, 1, J = 16 Hz), 5,86 (d, 1, J = 16 Hz), 4,44 (s, 1), 4,30 (d, 1, J = 7,5 Hz), 4,05-3,72 (m, 8), 3,81 (s, 3), 2,95 (m, 1), 2,67 (d, 1, J = 13 Hz), 1,63 (s, 3), 0,43 (s, 3); A-6 (R^{1} = 4-CH_{3}C(OCH_{2})_{2}, R^{7} = (Z) MeOOCCH=CH-, R^{12} = H) \delta7,33, 7,13 (ABc, 4, J = 8,2 Hz), 6,60 (d, 1, J = 13 Hz), 5,99 (d, 1, J = 13 Hz), 4,44 (s, 1), 4,39 (sa, 1), 4,06-3,68 (m, 8), 3,68 (s, 3), 3,34 (m, 1), 1,62 (s, 3), 0,38 (s, 3).

3,3-[1,2-Etanodiilbis(oxi)]-11\beta-{4-{1,1-[1,2-etanodiilbis(oxi)]etil}fenil}-5\alpha-hidroxi-17\alpha-[(E)-1-(3-hidroxi)propenil]-17\beta-nitroestr-9-eno [A-7 (R^{1} = 4-CH_{3}C(OCH_{2})_{2}-, R^{7} = (E) HOCH_{2}CH=CH-, R^{12} = H)]. A una disolución de 557 mg (0,914 mmol) del éster A-6 (R^{1} = 4-CH_{3}C(OCH_{2})_{2}, R^{7} = (E) MeOOCCH=CH-, R^{12} = H) en 9,2 ml de THF a -78ºC en atmósfera de nitrógeno se le añadió gota a gota 4,6 ml (4,57 mmol) de DIBAL-H 1,0 M en hexanos. Después de 35 min, la disolución se calentó a 0ºC durante 30 min, a continuación se volvió a enfriar a -78ºC y se inactivó con una disolución saturada de la sal de Rochelle y se dejó calentar a temperatura ambiente y se agitó durante 12 h. La mezcla clara resultante se diluyó con EtOAc y la fase acuosa se separó y se extrajo tres veces con EtOAc. La disolución orgánica combinada se lavó dos veces con salmuera, se secó sobre Na_{2}SO_{4}, se filtró, y el disolvente se retiró a presión reducida. El sólido blanco resultante se recogió en la mínima cantidad de CH_{2}Cl_{2} y se sometió a cromatografía en gel de sílice (EtOAc) para dar el alcohol alílico A-7 (R^{1} = 4-CH_{3}C(OCH_{2})_{2}, R^{7} = (E) HOCH_{2}CH=CH-, R^{12} = H) (464 mg, 87%). RMN ^{1}H (250 MHz, CDCl_{3}) \delta 7,33, 7,16 (ABc, 4, J = 8,1 Hz), 6,26 (d, 1, J = 16 Hz), 5,80 (dt, 1, J = 16, 4,7 Hz), 5,02 (s, 1), 4,47 (m, 2), 4,13-3,75 (8H, m), 2,85 (m, 1), 2,65 (d, 1, J = 13 Hz), 1,63 (s, 3), 0,40 (s, 3).

11\beta-(4-Acetilfenil)-17\alpha-[(Z)-1-(3-hidroxi)propenil]-17\beta-nitroestra-4,9-dien-3-ona [A-8 (R^{1} = 4-CH_{3}CO-, R^{7} = (Z) HOCH_{2}CH=CH-, R^{12} = H)]. A una disolución de 200 mg (0,328 mmol) del éster A-6 (R^{1} = 4-CH_{3}C(OCH_{2})_{2}, R^{7} = (E) MeOOCCH=CH-, R^{12} = H) en 6,6 ml de THF a -78ºC en atmósfera de nitrógeno se le añadió gota a gota 1,7 ml (1,64 mmol) de DIBAL-H 1,0 M en hexanos. A continuación la disolución se calentó a 0ºC durante 30 min, se volvió a enfriar a -78ºC y se inactivó con una disolución acuosa saturada de la sal de Rochelle. La mezcla resultante se dejó calentar a temperatura ambiente y se agitó durante 12 h. La mezcla clara resultante se extrajo con EtOAc. La disolución orgánica combinada se lavó dos veces con salmuera, se secó sobre Na_{2}SO_{4}, se filtró, y el disolvente se retiró a presión reducida. La cromatografía del residuo en gel de sílice (EtOAc) dio el alcohol alílico A-7 (R^{1} = 4-CH_{3}C(OCH_{2})_{2}-, R^{7} = (Z) HOCH_{2}CH=CH-, R^{12} = H). El producto se suspendió en 7,8 ml de CH_{2}Cl_{2} y 0,14 ml de H_{2}O, se enfrió a 0ºC, y a la mezcla agitada rápidamente se le añadió gota a gota 1,3 ml de TFA. Después de 20 min, se le añadió una disolución acuosa saturada de NaHCO_{3} y la mezcla se agitó vigorosamente durante 20 min. La fase acuosa se separó y se extrajo tres veces con EtOAc. La disolución orgánica combinada se lavó dos veces con salmuera, se secó sobre Na_{2}SO_{4}, se filtró, y el disolvente se retiró a presión reducida. Dos veces, el producto se recogió en la mínima cantidad de CH_{2}Cl_{2} y se sometió a cromatografía en gel de sílice (80% de EtOAc en hexanos) para dar el dienona alquenol A-8 (R^{1} = 4-CH_{3}CO-, R^{7} = (Z) HOCH_{2}CH=CH-, R^{12} = H) (78 mg, 50% de rendimiento, dos etapas). RMN ^{1}H (250 MHz, CDCl_{3}) \delta 7,88, 7,28 (ABc, 4, J = 7,5 Hz), 6,00 (d, 1, J = 13 Hz), 5,88-5,78 (m, 2), 4,51 (d, 1, J = 7,5 Hz), 4,15-4,08 (m, 2), 3,14 (m, 1), 2,58 (s, 3), 0,41 (s, 3).

11\beta-(4-Acetilfenil)-17\alpha-[(E)-1-(3-hidroxi)propenil]-17\beta-nitroestra-4,9-dien-3-ona [A-8 (R^{1} = 4-CH_{3}CO-, R^{7} = (E) HOCH_{2}CH=CH, R^{12} = H)]. A una mezcla agitada rápidamente de 464 mg (0,798 mmol) del diol A-7 (R^{1} = 4-CH_{3}C(OCH_{2})_{2}, R^{7} = (E) HOCH_{2}CH=CH-, R^{12} = H), 19 ml de CH_{2}Cl_{2}, y 0,35 ml de H_{2}O a 0ºC se le añadió gota a gota 3,25 ml de TFA, provocando una coloración amarilla. Después de 15 min, se añadió lentamente una disolución acuosa saturada de NaHCO_{3}, y la mezcla resultante se agitó vigorosamente durante 20 min a 0ºC, momento en el que la fase acuosa se separó y se extrajo tres veces con EtOAc. El extracto orgánico combinado se lavó dos veces con salmuera, se secó sobre Na_{2}SO_{4}, se filtró, y el disolvente se retiró a presión reducida. El sólido amarillo resultante se recogió en la mínima cantidad de CH_{2}Cl_{2} y se sometió a cromatografía en gel de sílice (80% de EtOAc en hexanos) para dar el compuesto objetivo A-8 (R^{1} = 4-CH_{3}CO-, R^{7} = (E) HOCH_{2}CH=CH-, R^{12} = H) (313 mg, 82%). RMN ^{1}H (250 MHz, CDCl_{3}) \delta 7,88, 7,28 (ABc, 4, J = 8,4 Hz), 6,29 (d, 1, J = 16 Hz), 5,91-5,80 (m, 2), 4,44 (d, 1, J = 7,5 Hz), 4,30 (d, 2, J = 3,1 Hz), 2,90 (m, 1), 2,57 (s, 3), 0,47 (s, 3).

Ejemplo 7 Síntesis de 17\alpha-(3-Hidroxipropil)-11\beta-[4-(metilsulfinil)fenil]-17\beta-nitroestra-4,9-dien-3-ona [A-8 (R^{1} = 4-CH_{3}S(O)-, R^{7} = -(CH_{2})_{3}OH, R^{12} = H)] y 17\alpha-(3-Hidroxipropil)-11\beta-[4-(metiltio)fenil]-17\beta-nitroestra-4,9-dien-3-ona [A-8 (R^{1} = 4-CH_{3}S-, R^{7} = -(CH_{2})_{3}OH, R^{12} = H)]

3,3-[1,2-Etanodiilbis(oxi)]-5\alpha-hidroxi-11\beta-[4-(metiltio)fenil)]estr-9-en-17-ona [A-3 (R^{1} = 4-CH_{3}S-, R^{12} = H)]. Un matraz equipado con un agitador magnético, un condensador de reflujo, un embudo de adición, y una entrada y salida de nitrógeno seco se cargó con 2,27 g (93,1 mmol) de virutas de Mg, y a continuación el aparato se secó a la llama en una corriente de nitrógeno seco. Después de enfriar a temperatura ambiente en una corriente de nitrógeno seco, el resto del protocolo se realizó a presión estática de nitrógeno seco y a temperatura ambiente. A las virutas de magnesio se le añadió 100 ml de THF, y a continuación se le añadió rápidamente 10 ml aproximadamente de una disolución de 18,2 g (89,5 mmol) de 4-bromotioanisol en 100 ml de THF, provocando así la iniciación del reactivo de Grignard después de unos pocos minutos. A continuación se le añadió gota a gota el resto de la disolución de 4-bromotioanisol durante un periodo de 1,5 h. Después de 30 min se añadieron 3,54 g (35,8 mmol) de CuCl en polvo con agitación eficiente, y a continuación 45 segundos más tarde, se le añadió rápidamente una disolución de 11,8 g (35,8 mmol) del epóxido A-2 en 100 ml de THF. Después de 10 min, la mezcla de reacción se inactivó cuidadosamente con una disolución acuosa saturada en exceso de NH_{4}Cl a temperatura ambiente. La mezcla se diluyó con agua y se extrajo tres veces con EtOAc. Las disoluciones orgánicas combinadas se lavaron tres veces con salmuera, se secaron sobre Na_{2}SO_{4}, se filtraron, y el disolvente se retiró a presión reducida. El sólido oleoso pardo resultante (22,6 g) se sometió a cromatografía en gel de sílice (60% de EtOAc en hexanos) para dar el tioéter A-3 (R^{1} = 4-CH_{3}S-, R^{12} = H) como un sólido blanco (14,0 g, 86% de rendimiento). RMN ^{1}H (250 MHz, CDCl_{3}) \delta 7,14 (s, 4), 4,38 (s, 1), 4,28 (d, 1, J = 7,2 Hz), 4,02-3,90 (m, 4), 2,46 (s, 3), 0,498 (s, 3).

3,3-[1,2-Etanodiilbis(oxi)]-5\alpha-hidroxi-11\beta-[4-(metiltio)fenil]estr-9-en-17-oxima [A-4 (R^{1} = 4-CH_{3}S-, R^{12} = H)]. A una disolución de 15,2 g (33,4 mmol) de la cetona A-3 (R^{1} = 4-CH_{3}S-, R^{12} = H) en 120 ml de piridina anhidra a temperatura ambiente en atmósfera de nitrógeno se le añadió 3,83 g (55,2 mmol) de H_{2}NOH\cdotHCl. Después de 25 h, la disolución se vertió en 500 ml de agua. La mezcla se extrajo tres veces con EtOAc. Las disoluciones orgánicas combinadas se lavaron tres veces con salmuera, se secaron sobre Na_{2}SO_{4}, se filtraron, y el disolvente se retiró a presión reducida. Tres veces seguidas, el residuo se diluyó con tolueno y a continuación se evaporó a presión reducida (para retirar la piridina). La cromatografía en gel de sílice (70% de EtOAc en hexanos) dio la oxima A-4 (R^{1} = 4-CH_{3}S-, R^{12} = H) (15,3 g, 98% de rendimiento) como una espuma blanca. RMN ^{1}H (250 MHz, CDCl_{3}) \delta 8,18 (sa, 1), 7,14 (s, 4), 4,38 (s, 1), 4,26 (d, 1, J = 6,9 Hz), 4,08-3,89 (m, 4), 2,46 (s, 3), 0,539 (s, 3).

3,3-[1,2-Etanodiilbis(oxi)]-5\alpha-hidroxi-11\beta-[4-(metilsulfinil)fenil]-17-nitroestr-9-eno [A-5 (R^{1} = 4-CH_{3}S(O)-, R^{12} = H). A una disolución de 21,0 g (118 mmol) de NBS en 80 ml de 1,4-dioxano y 80 ml de agua a temperatura ambiente se le añadió una disolución de 11,8 g (118 mmol) de KHCO_{3} en 80 ml de agua. Después de 5 min, se le añadió una disolución de 15,8 g (33,7 mmol) de la oxima A-4 (R^{1} = 4-CH_{3}S-, R^{12} = H) en 120 ml de 1,4-dioxano y 80 ml de agua durante un periodo de 5 min, provocando una coloración verde lima brillante, que viró gradualmente a amarillo. Después de 20 h, se añadieron FeSO_{4} acuoso saturado (1000 ml) y EtOAc recién preparados. La mezcla se filtró a través de un lecho de Celite 545, que se enjuagó con EtOAc. La fase verde acuosa resultante se separó y se extrajo dos veces con EtOAc. La disolución orgánica combinada se lavó con una disolución acuosa saturada de FeSO_{4} recién preparada, dos veces con salmuera, se secó sobre Na_{2}SO_{4}, se filtró, y el disolvente se retiró a presión reducida para dar el compuesto intermedio 17-nitro-17-bromo en bruto (21,6 g) como una espuma amarilla, que se usó sin purificación adicional. RMN ^{1}H (250 MHz, CDCl_{3}) \delta 7,56, 7,40 (ABc, 4, J = 8,1 Hz), 4,44 (sa, 2), 4,30-3,93 (m, 4), 3,32 (m, 1), 2,72 (s, 3), 0,454 (s, 3). MS m/z (intensidad relativa) 563 (M^{+}, 3), 561 (M^{+}, 2), 483 (17), 467 (20), 334 (31) 99 (100).

A este producto en bruto en 300 ml de THF y 60 ml de agua a temperatura ambiente se le añadió cuidadosamente 4,33 g (144 mmol) de NaBH_{4} de forma fraccionada durante 30 min aproximadamente. Después de 1,5 h a temperatura ambiente, se añadió cuidadosamente una disolución de 24,6 g (353 mmol) de H_{2}NOH\cdotHCl en 500 ml de agua. Después de 10 min de agitación vigorosa, la mezcla se extrajo tres veces con EtOAc. Las disoluciones orgánicas combinadas se lavaron dos veces con salmuera, se secaron sobre Na_{2}SO_{4}, se filtraron, y el disolvente se retiró a presión reducida para dar el nitrocompuesto intermedio A-5 (R^{1} = 4-CH_{3}S(O)-, R^{12} = H) [15,8 g, 94% de rendimiento (altamente puro por análisis TLC)]. En un procedimiento previo a menor escala (75 mg), la cromatografía en gel de sílice (4% de MeOH en EtOAc) dio 49,2 mg (76% de rendimiento) del nitrocompuesto intermedio A-5 (R^{1} = 4-CH_{3}S(O)-, R^{12} = H). RMN ^{1}H (250 MHz, CDCl_{3})\delta 7,50 (dd, 2, J = 3,0, 8,4 Hz), 7,33 (d, 2, J = 8,3 Hz), 4,36-4,31 (m, 3), 3,97-3,87 (m, 4), 2,66 (s, 3), 0,271 (s, 3). MS m/z (intensidad relativa) 501 (M^{+}, 18), 483 (50), 466 (32), 380 (39), 99 (100).

17\alpha-(2-Carbometoxietil)-3,3-[1,2-etanodiilbis(oxi)]-5\alpha-hydroxi-11\beta-[4-(metilsulfinil)fenil]-17\beta-nitroestr-9-eno [A-6 (R^{1} = 4-CH_{3}S(O)-, R^{7} = -(CH_{2})_{2}COOMe, R^{12} = H)]

A una mezcla de 1,00 g (1,99 mmol) del nitrosulfóxido A-5 (R^{1} = 4-CH_{3}S(O)-, R^{12} = H) en 5,80 ml de t-BuOH y 11,0 ml (122 mmol) de acrilato de metilo a temperatura ambiente se le añadió gota a gota 1,15 ml (2,51 mmol) de Triton B en metanol al 40% en p/p, provocando una disolución de reacción homogénea ligeramente amarilla. Después de 3 h, se añadió una disolución acuosa saturada de NH_{4}Cl y EtOAc, y la mezcla se extrajo tres veces con EtOAc. Las disoluciones orgánicas combinadas se lavaron dos veces con salmuera, se secaron sobre Na_{2}SO_{4}, se filtraron, y el disolvente se retiró a presión reducida. El líquido resultante ligeramente amarillo se separó azeotrópicamente tres veces con tolueno de manera sucesiva para dar un aceite viscoso amarillo (1,29 g). El aceite se usó en la siguiente reacción sin purificación adicional. RMN ^{1}H \delta 7,55 (dd, 2, J = 3,0, 8,4 Hz), 7,38 (d, 2, J = 8,3 Hz), 4,43 (d, 1, J = 7,2 Hz), 4,39 (s, 1), 4,03-3,96 (m, 4), 2,69 (s, 3), 2,71 (d, 3, J = 1,2 Hz), 0,336 (s, 3, C_{18}H).

3,3-[1,2-Etanodiilbis(oxi)]-5\alpha-hidroxi-17\alpha-(3-hidroxipropil)-11\beta-[4-(metiltio)fenil)]-17\beta-nitroestr-9-eno [A-7 (R^{1} = 4-CH_{3}S-, R^{7} = -(CH_{2})_{3}OH, R^{12} = H)] y 3,3-[1,2-Etanodiilbis(oxi)]-5\alpha-hidroxi-17\alpha-(3-hidroxipropil)-11\beta-[4-(metil-sulfinil)fenil)-17\beta-nitroestr-9-eno [A-7 (R^{1} = 4-CH_{3}S(O)-, R^{7} = -(CH_{2})_{3}OH, R^{12} = H). A una disolución de 1,29 g (1,99 mmol supuestos) del éster metílico A-6 (R^{1} = 4-CH_{3}S(O)-, R^{7} = -(CH_{2})_{2}COOMe, R^{12} = H) en 25,0 ml de THF a -78ºC se le añadió gota a gota 12,0 ml (12,0 mmol) de 1,0 M DIBAL-H en hexanos. Después de 10 min, se calentó a 0ºC durante 1 h, momento en el que el análisis por TLC mostró el consumo total del material de partida y la presencia de dos nuevos compuestos. Se añadió una disolución acuosa saturada de la sal de Rochelle y EtOAc, y la mezcla nebulosa resultante se agitó a temperatura ambiente durante 8 h, dando así una mezcla clara. La fase acuosa se separó y se extrajo tres veces con EtOAc. La disolución orgánica combinada se lavó dos veces con salmuera, se secó sobre Na_{2}SO_{4}, se filtró, y el disolvente se retiró a presión reducida. La cromatografía (2,5% de MeOH en EtOAc al 5,0% de MeOH en EtOAc) dio el sulfuro diol A-7 (R^{1} = 4-CH_{3}S-, R^{7} = -(CH_{2})_{3}OH, R^{12} = H) (397 mg, 37% de rendimiento para dos etapas) como una espuma blanca y el sulfóxido diol A-7 (R^{1} = 4-CH_{3}S(O)-, R^{7} = -(CH_{2})_{3}OH, R^{12} = H) (310 mg, 28% de rendimiento para dos etapas) como una espuma blanca. RMN ^{1}H: Datos para el sulfuro A-7 (R^{1} = 4-CH_{3}S-, R^{7} = -(CH_{2})_{3}OH, R^{12} = H) \delta 7,13 (s, 4, ArH), 4,40 (s, 1, C_{5}OH), 4,32 (d, 1, J = 5,0 Hz, C_{11} H), 4,02-3,90 (m, 4, [OCH_{2}]_{2}), 3,58 (m, 2, CH_{2}OH), 2,83 (m, 1), 2,44 (s, 3, SCH_{3}), 0,362 (s, 3, C_{18}H). Datos para el sulfóxido A-7 (R^{1} = 4-CH_{3}S(O)-, R^{7} = -(CH_{2})_{3}OH, R^{12} = H) \delta 7,57 (dd, 2, J = 2,2, 8,5 Hz), 7,36 (d, 2, J = 8,3 Hz), 5,81 (s, 1), 4,52 (d, 1, J = 6,7 Hz), 3,71-3,62 (m, 4), 2,72 (s, 3), 0,395 (s, 3, C_{18}H).

17\alpha-(3-Hidroxipropil)-11\beta-[4-(metiltio)fenil]-17\beta-nitroestra-4,9-dien-3-ona [A-8 (R^{1} = 4-CH_{3}S-, R^{7} = -(CH_{2})_{3}OH, R^{12} = H)]. A una mezcla agitada vigorosamente de 397 mg (0,727 mmol) del sulfuro diol A-7 (R^{1} = 4-CH_{3}S-, R^{7} = -(CH_{2})_{3}OH, R^{12} = H), 32,0 ml de CH_{2}Cl_{2}, y 0,67 ml de agua a 0ºC se le añadió 0,89 ml de ácido trifluoroacético. Después de 3 h, se añadió una disolución acuosa saturada de NaHCO_{3}, y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 8 h. La mezcla se extrajo tres veces con EtOAc. Las disoluciones orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na_{2}SO_{4}, se filtraron, y el disolvente se retiró a presión reducida. El residuo se sometió a cromatografía (75% de EtOAc en hexanos). La recolección de las fracciones, determinadas por HPLC analítica con una pureza de >97%, dio el compuesto A-8 (R^{1} = 4-CH_{3}S-, R^{7} = -(CH_{2})_{3}OH, R^{12} = H) (186 mg, 53% de rendimiento) como una espuma blanca. RMN ^{1}H \delta 7,16 (d, 2, J = 8,5 Hz, ArH), 7,08 (d, 2, J = 8,5 Hz, ArH), 5,78 (s, 1, H vinílico), 4,43 (d, 1, J = 6,5 Hz, C_{11} H), 3,69-3,59 (m, 2, CH_{2}OH), 2,44 (s, 3, SCH_{3}), 0,427 (s, 3, C_{18}H).

17\alpha-(3-Hidroxipropil)-11\beta-[4-(metilsulfinil)fenil]-17\beta-nitroestra-4,9-dien-3-ona [A-8 (R^{1} = 4-CH_{3}S(O)-, R^{7} = -(CH_{2})_{3}OH, R^{12} = H)]. A una mezcla agitada vigorosamente de 310 mg (0,552 mmol) del sulfóxido diol A-7 (R^{1} = 4-CH_{3}S(O)-, R^{7} = -(CH_{2})_{3}OH, R^{12} = H), 25,0 ml de CH_{2}Cl_{2}, y 0,51 ml de agua a 0ºC se le añadió 0,67 ml de ácido trifluoroacético. Después de 3 h, se añadió una disolución acuosa saturada de NaHCO_{3}, y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 8 h. La mezcla se extrajo tres veces con EtOAc. La disolución orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na_{2}SO_{4}, se filtró, y el disolvente se retiró a presión reducida. El residuo se sometió a cromatografía (6% de MeOH en EtOAc). La recolección de las fracciones, determinadas por HPLC analítica con una pureza de >97%, dio el compuesto A-8 (R^{1} = 4-CH_{3}S(O)-, R^{7} = -(CH_{2})_{3}OH, R^{12} = H) (175 mg, 63% de rendimiento) como una espuma blanca. RMN ^{1}H \delta 7,57, 7,35 (ABc, 4, J = 7,7 Hz), 5,81 (s, 1), 4,56 (d, 1, J = 6,7 Hz), 3,75-3,55 (m, 2), 2,72 (s, 3), 0,393 (s, 3, C_{18}H).

Ejemplo 8 Síntesis de 11\beta-(4-Acetilfenil)-3',4'-dihidro-5'-metil-1'-oxo-espiro[estra-4,9-dien-17\beta,2'(2'H)-pirrol]-3-ona [B-3 (R^{1} = 4-CH_{3}CO-, R^{8} = CH_{3}, R^{12} = H)]

3,3-[1,2-Etanodiilbis(oxi)]-11\beta-{4-{1,1-[1,2-etanodiilbis(oxi)]etil}fenil}-5\alpha-hidroxi-17\beta-nitro-17\alpha-(3-oxobutil)estr-9-eno [B-1 (R^{1} = 4-CH_{3}C(OCH_{2})_{2}-, R^{8} = CH_{3}, R^{12} = H)]. A una disolución de 2,4 g (4,5 mmol) de A-5 (R^{1} = 4-CH_{3}C(OCH_{2})_{2}), R^{12} = H) en 10 ml de DMSO se le añadió 1,3 g (22,5 mmol) de KF y 1,45 g (4,5 mmol) de n-Bu_{4}NBr, y la mezcla se agitó durante 30 min a temperatura ambiente. A esta mezcla se le añadió gota a gota 0,5 ml (9,0 mmol) de metilvinilcetona y se prosiguió con la agitación durante otra hora. La mezcla de reacción se diluyó con agua y se extrajo con acetato de etilo. La fase orgánica se lavó con agua, seguido de salmuera, y se secó sobre MgSO_{4} anhidro. A continuación la fase orgánica se filtró, se concentró y el producto en bruto se sometió a cromatografía en gel de sílice usando cloruro de metileno-hexano-acetona 5:5:1 para dar 2,45 g (88% de rendimiento) de B-1 (R^{1} = 4-CH_{3}C(OCH_{2})_{2}-, R^{8} = CH_{3}, R^{12} = H). RMN ^{1}H (250 MHz CDCl_{3}) \delta 0,33 (s, 3, C_{18}H), 1,64 (s, 3, PhC(OCH_{2}CH_{2}O)CH_{3}), 2,18 (s, 3, COCH_{3}), 3,74-4,01 (m, 8, (OCH_{2})_{2}), 4,37 (d, 1, C_{11 \alpha}H), 4,34 (s, 1, C_{5}OH), 7,15 (d, 2, J = 8,1 Hz, ArH), 7,34 (d, 2, J = 8,3 Hz, ArH).

3',4'-Dihidro-3,3-[1,2-etanodiilbis(oxi)]-11\beta-{4-{1,1-[1,2-etanodiilbis(oxi)]-etil}fenil}-5\alpha-hidroxi-5'-metil-1'-oxo-espiro[estr-17\beta,2'(2'H)-pirrol]-9-eno [B-2 (R^{1} = 4-CH_{3}C(OCH_{2})_{2}-, R^{8} = CH_{3}, R^{12} = H)]. A una disolución de 1,5 g (2,52 mmol) de B-1 (R^{1} = 4-CH_{3}C(OCH_{2})_{2}-, R^{8} = CH_{3}, R^{12} = H) en 10 ml de etanol acuoso al 50% y 5,0 ml de THF se le añadió 263 mg de cloruro amónico y 1,3 g de polvo de cinc. La mezcla de reacción se agitó durante 24 h, y a continuación se filtró a través de Celite. El producto en bruto se sometió a cromatografía en gel de sílice, eluyendo primero con hexano-cloruro de metileno-acetona 5:5:1 y a continuación con hexano-cloruro de metileno-metanol 5:5:1 para dar 1,13 g (80% de rendimiento) de B-2 (R^{1} = 4-CH_{3}C(OCH_{2})_{2}-, R^{8} = CH_{3}, R^{12} = H). RMN ^{1}H (250 MHz CDCl_{3}) \delta 0,56 (s, 3, C_{18}H), 1,64 (s, 3, PhC(OCH_{2}CH_{2}O)CH_{3}), 2,21 (s, 3, ON=C-CH_{3}), 3,68-4,02 (m, 8, (OCH_{2})_{2}), 4,35 (d, 1, C_{11 \alpha}H), 5,01 (s, 1, OH), 7,10 (d, 2, J = 8,3 Hz, ArH), 7,31 (d, 2, J = 8,3 Hz, ArH).

11\beta-(4-Acetilfenil)-3',4'-dihidro-5'-metil-1'-oxo-espiro[estra-4,9-dien-17\beta,2'(2'H)-pirrol]-3-ona [B-3 (R^{1} = 4-CH_{3}CO-, R^{8} = CH_{3}, R^{12} = H)]. A una disolución de 300 mg de B-2 (R^{1} = 4-CH_{3}C(OCH_{2})_{2}-, R^{8} = CH_{3}, R^{12} = H) en 5 ml de CH_{2}Cl_{2} se le añadió 1,0 ml de ácido trifluoroacético (TFA) a 0ºC y la mezcla se calentó a temperatura ambiente. La reacción se inactivó con una disolución saturada de NaHCO_{3} y se extrajo con acetato de etilo. La fase con acetato de etilo se lavó con agua, seguido de salmuera, y se secó sobre MgSO_{4} anhidro. La disolución seca se filtró y se concentró sobre vacío para dar 255 mg de producto en bruto que se sometió a cromatografía en gel de sílice usando hexano-cloruro de metileno-metanol 5:5:1 para dar 177 mg de compuesto puro que tenía los siguientes datos espectrales: RMN ^{1}H (250 MHz CDCl_{3}) \delta 0,64 (s, 3, C_{18}H), 2,17 (s, 3, ON=C-CH_{3}), 2,59 (s, 3, PhCOCH_{3}), 4,44 (d, 1, C_{11 \alpha}H), 5,81 (s, 1, C_{4}H), 7,23 (d, 2, J = 8,3 Hz, ArH), 7,87 (d, 2, J = 8,4 Hz, ArH). MS m/z 457 (M^{+}), 441, 371, 324, 204, 96, 83.

Ejemplo 9 Síntesis de 3',4'-Dihidro-11\beta-[4-(N,N-dimetilamino)fenil]-5'-metil-1'-oxo-espiro[estra-4,9-dien-17\beta,2'(2'H)-pirrol]-3-ona [B-3 (R^{1} = 4-Me_{2}N-, R^{8} = CH_{3}, R^{12} = H)]

11\beta-[3-Bromo-4-(N,N-dimetilamino)fenil]-17\alpha-(3-oxobutil)-3,3-[1,2-etanodiilbis(oxi)]-5\alpha-hidroxi-17\beta-nitroestr-9-eno [B-1 (R^{1} = 4-Me_{2}N-, R^{8} = CH_{3}, R^{12} = 3-Br)]. A una disolución de 1,51 g (2,69 mmol) de A-5 (R^{1} = 4-Me_{2}N-, R^{12} = 3-Br) en 5 ml de DMSO se le añadió 785 mg (13,45 mmol) de KF y 876 mg (2,69 mmol) de n-Bu_{4}NBr, y la mezcla se agitó durante 30 min. A esta mezcla se le añadió gota a gota 0,27 ml (5,38 mmol) de metilvinilcetona, y la disolución se agitó durante una hora. La mezcla de reacción se diluyó con agua y se extrajo con acetato de etilo. La fase orgánica se lavó con agua, seguido de salmuera, y se secó sobre MgSO_{4} anhidro. La fase orgánica se filtró, se concentró y el producto en bruto se sometió a cromatografía en gel de sílice usando cloruro de metileno-hexano-acetona 5:5:1 para dar 1,49 g (88% de rendimiento) de B-1 (R^{1} = 4-Me_{2}N-, R^{8} = CH_{3}, R^{12} = 3-Br). I.R. (disolución, CDCl_{3}) 3485, 2935, 2775, 1707, 1528, 1481, 1437, 1349, 1131, 965, 935, 826 cm^{-1}; RMN ^{1}H (250 MHz CDCl_{3}) \delta 0,39 (s, 3, C_{18}H), 2,14 (s, 3, COCH_{3}), 2,75 (s, 6, N(CH_{3})_{2}), 3,91-4,06 (m, 4, (OCH_{2})_{2}), 4,33 (d, 1, C_{11 \alpha}H), 4,39 (s, 1, C_{5}OH), 6,95 (d, 1, J = 8,4 Hz, ArH), 7,09 (d, 1, J = 8,5 Hz, ArH), 7,36 (s, 1, ArH).

11\beta-[3-Bromo-4-(N,N-dimetilamino)fenil]-3',4'-dihidro-3,3-[1,2-etanodiilbis(oxi)]-5\alpha-hidroxi-5'-metil-1'-oxo-espiro[estr-9-en-17\beta,2'(2'H)-pirrol] [B-2 (R^{1} = 4-Me_{2}N-, R^{8} = CH_{3}, R^{12} = 3-Br)]. Se preparó una disolución de la cetona B-1 (R^{1} = Me_{2}N-, R^{8} = CH_{3}, R^{12} = 3-Br) (1,1 g, 1,599 mmol) en 5,0 ml de etanol acuoso al 50% y 2,5 ml de THF. A esta disolución se le añadió 65 mg (1,2 mmol) de NH_{4}Cl y 325 mg (4,9 mmol) de polvo de cinc. La mezcla de reacción se agitó durante toda la noche y se le añadió otros 325 mg de Zn y 65 mg de cloruro amónico y se prosiguió con la agitación durante 8 h. La mezcla de reacción se filtró a través de Celite y el filtrado se concentró. El producto en bruto se sometió a cromatografía en gel de sílice eluyendo con cloruro de metileno-hexano-metanol 7:3:0,3 para dar 600 mg (61% de rendimiento) de B-2 puro (R^{1} = Me_{2}N-, R^{8} = CH_{3}, R^{12} = 3-Br). I.R. (disolución, CDCl_{3}); 3490, 2936, 2775, 1588, 1481, 1447, 1382, 1214, 966, 887 cm^{-1}; RMN ^{1}H (250 MHz CDCl_{3}) \delta 7,34 (s, 1, ArH), 7,00 (d, 1, J = 8,0 Hz), 6,95 (d, 1, J = 8,5 Hz, ArH), 4,39 (s, 1, C_{5}OH), 4,21 (da, 1, C_{11 \alpha}H), 3,93-4,02 (m, 4, (OCH_{2})_{2}), 2,74 (s, 6, N(CH_{3})_{2}), 2,14 (s, 3, ON=C-CH_{3}), 0,61 (s, 3, C_{18}H).

3',4'-Dihidro-11\beta-[4-(N,N-dimetilamino)fenil]-3,3-[1,2-etanodiilbis(oxi)]-5\alpha-hidroxi-5'-metil-1'-oxo-espiro[estr-9-en-17\beta,2'(2'H)-pirrol] [B-2 (R^{1} = 4-Me_{2}N-, R^{8} = CH_{3}, R^{12} = H)]. El bromuro de arilo B-2 (R^{1} = Me_{2}N-, R^{8} = CH_{3}, R^{12} = 3-Br) (466 mg, 0,77 mmol) se disolvió en 50 ml de THF y se mantuvo a -78ºC en atmósfera de argón. A esto se le añadió gota a gota 1,9 ml de t-BuLi (1,7 M en pentano). Después de completar la adición, la reacción se agitó durante 10 min y se inactivó a -78ºC con metanol (5 ml), seguido de una disolución saturada de NH_{4}Cl. La mezcla de reacción se extrajo con acetato de etilo, y la fase orgánica se lavó con salmuera y se secó sobre MgSO_{4} anhidro. La disolución seca se filtró y se concentró para dar 398 mg de B-2 (R^{1} = Me_{2}N-, R^{8} = CH_{3}, R^{12} = H) que se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional. I.R. (disolución, CDCl_{3}) 3490, 2950, 2800, 1608, 1516, 1436, 1345, 1216, 943, 840 cm^{-1}; RMN ^{1}H (250 MHz CDCl_{3}) \delta 7,00 (d, 2, J = 8,7 Hz, ArH), 6,62 (d, 2, J = 8,7 Hz, ArH), 4,39 (s, 1, C_{5}OH), 4,21 (d, 1, J = 5,9 Hz, C_{11 \alpha}H), 3,90-4,02 (m, 4, (OCH_{2})_{2}), 2,89 (s, 6, N(CH_{3})_{2}), 2,13 (s, 3, ON=C-CH_{3}), 0,61 (s, 3, C_{18}H).

3',4'-Dihidro-11\beta-[4-(N,N-dimetilamino)fenil]-5'-metil-1'-oxo-espiro[estra-4,9-dien-17\beta,2'(2'H)-pirrol])-3-ona [B-3 (R^{1} = 4-Me_{2}N-, R^{8} = CH_{3}, R^{12} = H). A una disolución de 398 mg (0,76 mmol) de B-2 (R^{1} = Me_{2}N-, R^{8} = CH_{3}, R^{12} = H) en 40 ml de CH_{2}Cl_{2} se le añadió 2 ml de agua. La disolución se enfrió a 0ºC. A la disolución enfriada se le añadió gota a gota 4 ml aproximadamente de TFA. La reacción se agitó a 0ºC durante 1 h. La reacción se inactivó con una disolución saturada de bicarbonato de sodio, y se extrajo con CH_{2}Cl_{2}. La fase con CH_{2}Cl_{2} se lavó con agua, seguido de salmuera y se secó sobre MgSO_{4} anhidro. La disolución seca se filtró y se concentró sobre vacío. El producto en bruto se sometió a cromatografía en gel de sílice usando cloruro de metileno-hexano-metanol 7:3:0,3 como eluyente para dar 251 mg de B-3 puro (R^{1} = Me_{2}N-, R^{8} = CH_{3}, R^{12} = H). Se llevó a cabo una purificación en profundidad en HPLC preparativa en una columna de fase inversa C-18 usando acetonitrilo al 50% y agua: RMN ^{1}H (250 MHz CDCl_{3}) \delta 7,03 (d, 2, J = 8,7 Hz, ArH), 6,81 (d, 2, J = 8,7 Hz, ArH), 5,78 (s, 1, C_{4}H), 4,33 (d, 1, J = 6,4 Hz, C_{11 \alpha}H), 2,94 (s, 5, N(CH_{3})_{2}), 2,13 (s, 3, ON=C-CH_{3}), 0,66 (s, 3, C_{18}H); espectro de masas, m/z (intensidad relativa) 458 (19), 442 (28), 134 (100), 121 (40), 96 (11); Anal. calculado para C_{30}H_{38}N_{2}O_{2}\cdot0,25H_{2}O: C, 77,80; H, 3,38; N, 6,05. Hallado: C, 77,90; H, 8,89; N, 5,51.

Ejemplo 10 Síntesis de 11\beta-[4-(N,N-Dimetilamino)fenil]-17\beta-nitro-17\alpha-(1-propinil)estra-4,9-dien-3-ona [(C-2 (R^{1} = 4-Me_{2}N-, R^{9} = CH_{3}, R^{12} = H)]

11\beta-[4-(N,N-Dimetilamino)fenil]-3,3-[1,2-etanodiilbis(oxi)]-5\alpha-hidroxi-17\beta-nitro-17\alpha-(1-propinil)estr-9-eno [C-1 (R^{1} = 4-Me_{2}N-, R^{9} = CH_{3}, R^{12} = H)] y 3,3-[1,2-Etanodiilbis(oxi)]-5\alpha-hidroxi-11\beta-[4-(N-metilamino)fenil]-17\beta-nitro-17\alpha-(1-propinil)estr-9-eno [C-1 (R^{1} = 4-MeHN-, R^{9} = CH_{3}, R^{12} = H)]. A una disolución de 2,39 g (4,94 mmol) del nitrocompuesto A-5 (R^{1} = 4-Me_{2}N-, R^{12} = H) en 50 ml de DMSO en atmósfera de nitrógeno a temperatura ambiente se le añadió 312 mg (12,4 mmol) de NaH. Después de 3,5 h, se añadió rápidamente una disolución de 4,89 g (14,8 mmol) de tributil(1-propinil)estaño (preparado por analogía a Pinhey, J. T.; Maloney, M. G.; Roche, E. G. "The \alpha-Alk-1-ynylation of \beta-Dicarbonyl Compounds and Nitronate Salts by Alk-1-ynyl-lead Triacetates," J. Chem. Soc. Perkin Trans. 1, 333 (1989)) en 7,0 ml de DMSO a una disolución de 6,59 g (14,8 mmol) de Pb(OAc)_{4} del 99,99% [ProChem Chemical Co.; antes de su uso se agitó sobre vacío a temperatura ambiente durante 3 h y se manipuló estrictamente en atmósfera de nitrógeno (para retirar cualquier traza de ácido acético)] en 35 ml de DMSO a temperatura ambiente. Después de 30 segundos, la disolución oscura del nitronato anterior se añadió rápidamente a la mezcla de Sn-Pb resultante, provocando un calentamiento suave. Después de 40 min, se añadió EtOAc y 400 ml de una disolución 1:1 de NH_{4}Cl acuoso saturado. Después de agitar vigorosamente, la fase acuosa se separó y se extrajo tres veces con EtOAc. Las disoluciones orgánicas combinadas se agitaron con KF acuoso, se filtraron, se separaron, se lavaron dos veces con salmuera, se secaron sobre Na_{2}SO_{4}, se filtraron, y el disolvente se retiró mayoritariamente a presión reducida, dando un aceite viscoso ligeramente pardo. La cromatografía del aceite sin un retraso excesivo (50% de EtOAc en hexanos) dio la propina C-1 (R^{1} = 4-Me_{2}N-, R^{9} = CH_{3}, R^{12} = H) (646 mg, 25% de rendimiento) como una espuma amarilla. RMN ^{1}H (250 MHz, CDCl_{3}) \delta 7,03, 6,62 (ABc, 4, J = 8,8 Hz), 4,49 (s, 1), 4,29 (sa, 1), 4,03-3,93 (m, 4), 2,90 (s, 6), 2,89 (m, 1), 1,93 (s, 3), 0,369 (s, 3). La elución posterior de la columna dio el derivado mono-N-metilado [C-1 (R^{1} = 4-MeHN-, R^{9} = CH_{3}, R^{12} = H)] (497 mg, 20% de rendimiento). RMN ^{1}H (250 MHz, CDCl_{3}) \delta 6,99, 6,50 (ABc, 4, J = 8,6 Hz), 4,49 (sa, 1), 4,28 (sa, 1), 4,02 (m, 4), 3,65 (sa, 1), 2,89 (m, 1), 2,78 (s, 3), 1,92 (s, 3), 0,377 (s, 3).

11\beta-[4-(N,N-Dimetilamino)fenil]-17\beta-nitro-17\alpha-(1-propinil)estra-4,9-dien-3-ona [(C-2 (R^{1} = 4-Me_{2}N-, R^{9} = CH_{3}, R^{12} = H)]. A una mezcla agitada vigorosamente de 300 mg (0,576 mmol) de C-1 (R^{1} = 4-Me_{2}N-, R^{9} = CH_{3}, R^{12} = H), 9,3 ml de CH_{2}Cl_{2} y 0,52 ml de agua a 0ºC se le añadió gota a gota 0,78 ml (10,1 mmol) de ácido trifluoroacético. Después de 45 min de agitación vigorosa a 0ºC, se añadió cuidadosamente una disolución acuosa saturada de NaHCO_{3}, y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. La fase acuosa se separó y se extrajo tres veces con EtOAc. Las disoluciones orgánicas combinadas se lavaron dos veces con salmuera, se secaron sobre Na_{2}SO_{4}, se filtraron y el disolvente se retiró a presión reducida. La cromatografía del residuo en gel de sílice (45% de EtOAc en hexanos) dio una pureza del >97% (análisis HPLC) para el compuesto C-2 (R^{1} = 4-Me_{2}N-, R^{9} = CH_{3}, R^{12} = H) (178,5 mg, 68% de rendimiento). El compuesto C-2 (R^{1} = 4-Me_{2}N-, R^{9} = CH_{3}, R^{12} = H) de una pureza ligeramente inferior al 97% se obtuvo en las últimas fracciones de la columna (26,4 mg, 10% de rendimiento). RMN ^{1}H (250 MHz, CDCl_{3}) \delta 7,00, 6,64 (ABc, 4, J = 8,6 Hz), 5,77 (s, 1), 4,40 (d, 1, J = 6,0 Hz), 2,90 (s, 6), 1,94 (s,3), 0,442 (s, 3). MS m/z (intensidad relativa) 458 (M^{+}, 53), 413 (14), 263 (25), 134 (55), 121 (100). Anal. calcd. para C_{29}H_{34}N_{2}O_{3}\cdot0,25H_{2}O: C, 75,21; H, 7,51; N, 6,05. Hallado: C, 75,17; H, 7,49; N, 5,98.

Ejemplo 11 Síntesis de 11\beta-(4-Acetilfenil)-17\alpha-etinil)-17\beta-nitroestra-4,9-dien-3-ona [(C-2 (R^{1} = 4-CH_{3}CO-, R^{9} = R^{12} = H)]

3,3-[1,2-Etanodiilbis(oxi)]-11\beta-{4-{1,1-[1,2-etanodiilbis(oxi)]etil}fenil}-5\alpha-hidroxi-17\alpha-etinil)-17\beta-nitroestr-9-eno [C-1 (R^{1} = 4-CH_{3}C(OCH_{2})_{2}-, R^{9} = R^{12} = H)]. A una disolución de 1000 mg (1,90 mmol) del nitrocompuesto A-5 (R^{1} = 4-CH_{3}C(OCH_{2})_{2}-, R^{12} = H) en 20 ml de DMSO a temperatura ambiente en atmósfera de nitrógeno se le añadió 101 mg (4,00 mmol) de NaH en una fracción, provocando el desprendimiento de gases y una coloración parda opaca. Después de 1,2 h, se añadió rápidamente una disolución de 1,68 ml (5,70 mmol) de tributil(etinil)estaño (Aldrich Chemical Co.) en 8 ml de DMSO a una disolución de 2,53 g (5,70 mmol) de Pb(Ac)_{4} del 99,99% [ProChem Chemical Co.; antes de su uso se mezcló tres veces con tolueno seco de manera sucesiva, se evaporó a presión reducida, y se rellenó con nitrógeno (para retirar cualquier traza de ácido acético)] en 10 ml de DMSO en atmósfera de nitrógeno a temperatura ambiente. Después de 30 segundos, la disolución oscura del nitronato anterior se añadió rápidamente a la mezcla de Sn-Pb resultante, provocando un calentamiento suave. Después de 22 h, se añadió 200 ml de una disolución 1:1 de NH_{4}Cl acuoso saturado, seguido de la adición de EtOAc. Después de agitar vigorosamente, la fase acuosa se separó y se extrajo tres veces con EtOAc. La disolución orgánica parda combinada se lavó dos veces con salmuera, se secó sobre MgSO_{4}, se filtró, y el disolvente se retiró a presión reducida para dar un aceite pardo. El producto en bruto se sometió a cromatografía sin retraso en gel de sílice (55% de EtOAc en hexanos) para dar el producto etinilo C-1 (R^{1} = 4-CH_{3}C(OCH_{2})_{2}-, R^{9} = R^{12} = H) (586 mg, 56% de rendimiento). RMN ^{1}H (250 MHz, CDCl_{3}) \delta 7,34, 7,16 (ABc, 4, J = 8,1 Hz), 4,45 (s, 1), 4,38 (d, 1, J = 4,4 Hz), 4,11-3,77 (m, 8), 3,05 (m, 1), 2,79 (s, 1), 1,62 (s, 3), 0,34 (s, 3).

11\beta-(4-Acetilfenil)-17\alpha-etinil)-17\beta-nitroestra-4,9-dien-3-ona [C-2 (R^{1} = 4-CH_{3}CO-, R^{9} = R^{12} = H)]. A una mezcla agitada rápidamente de 75,0 mg (0,136 mmol) del alcohol C-1 (R^{1} = 4-CH_{3}C(OCH_{2})_{2}-, R^{9} = R^{12} = H), 3,6 ml de CH_{2}Cl_{2}, y 0,06 ml de H_{2}O a 0ºC se le añadió gota a gota 0,58 ml de TFA, provocando una coloración amarilla brillante. Después de 20 min, se añadió una disolución acuosa saturada de NaHCO_{3} y la fase acuosa se separó y se extrajo tres veces con EtOAc. La disolución orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre MgSO_{4}, se filtró, y el disolvente se retiró a presión reducida. El residuo se sometió a cromatografía en gel de sílice (50% de EtOAc en hexanos) para dar C-2 (R^{1} = 4-CH_{3}CO-, R^{9} = R^{12} = H) (38,3 mg, 64% de rendimiento). RMN ^{1}H (500 MHz, CDCl_{3}) \delta 7,88, 7,28 (ABc, 4, J = 8,4 Hz), 5,82 (s, 1), 4,53 (s, 1), 3,06 (dt, 1, J = 3,0, 12 Hz), 2,84 (s, 1), 2,57 (s, 3), 0,41 (s, 3).

Ejemplo 12 Síntesis de 11\beta-(4-Acetilfenil)-17\beta-nitro-17\alpha-(1-propinil)-estra-4,9-dien-3-ona [C-2 (R^{1} = 4-CH_{3}CO-, R^{8} = CH_{3}, R^{12} = H)]

3,3-[1,2-Etanodiilbis(oxi)]-11\beta-{4-{1,1-[1,2-etanodiilbis(oxi)]etil}fenil}-5\alpha-hidroxi-17\beta-nitro-17\alpha-(1-propinil)-estr-9-eno [C-1 (R^{1} = 4-CH_{3}C(OCH_{2})_{2}-, R^{9} = CH_{3}, R^{12} = H). A una disolución de 1000 mg (1,90 mmol supuestos) del nitrocompuesto A-5 impuro (R^{1} = 4-CH_{3}C(OCH_{2})_{2}-, R^{12} = H) en 20 ml de DMSO a temperatura ambiente en atmósfera de nitrógeno se le añadió 101 mg (4,00 mmol) de NaH en una fracción, provocando el desprendimiento de gases y una coloración negra/verde oscura. Después de 1,6 h, se añadió rápidamente una disolución de 1,88 ml (5,70 mmol) de tributil(1-propinil)estaño (preparado por analogía a Pinhey, y col., 1989) en 6 ml de DMSO a una disolución de 2,53 g (5,70 mmol) de Pb(OAc)_{4} del 99,99% [ProChem Chemical Co.; antes de su uso se mezcló tres veces con tolueno seco de manera sucesiva, se evaporó a presión reducida, y se rellenó con nitrógeno (para retirar cualquier traza de ácido acético)] en 14 ml de DMSO en atmósfera de nitrógeno a temperatura ambiente. Después de 35 segundos, la disolución oscura del nitronato anterior se añadió rápidamente a la mezcla de Sn-Pb resultante, provocando un calentamiento suave. Después de 24 h, se añadió 200 ml de una disolución 1:1 de NH_{4}Cl acuoso saturado, seguido de la adición de EtOAc. Después de agitar vigorosamente, la fase acuosa se separó y se extrajo tres veces con EtOAc. La disolución orgánica parda combinada se lavó dos veces con salmuera, se secó sobre MgSO_{4}, se filtró, y el disolvente se retiró a presión reducida para dar un aceite pardo. El producto en bruto se sometió a cromatografía sin retraso en gel de sílice (55% de EtOAc en hexanos), y a continuación se sometió una segunda vez a cromatografía en gel de sílice (55% de EtOAc en hexanos) para dar el producto 1-propinilo C-1 (R^{1} = 4-CH_{3}C(OCH_{2})_{2}-, R^{9} = CH_{3}, R^{12} = H) (161 mg, 15% de rendimiento). RMN ^{1}H (250 MHz, CDCl_{3}) \delta 7,33, 7,16 (ABc, 4, J = 8,2 Hz), 4,50 (s, 1), 4,38 (sa, 1), 4,10-3,74 (m, 8), 2,98 (m, 1), 1,93 (s, 3), 0,32 (s, 3).

11\beta-(4-Acetilfenil)-17\beta-nitro-17\alpha-(1-propinil)estra-4,9-dien-3-ona [C-2 (R^{1} = 4-CH_{3}CO-, R^{9} = CH_{3}, R^{12} = H)]. A una mezcla bien agitada de 161 mg (0,286 mmol) de C-1 (R^{1} = 4-CH_{3}C(OCH_{2})_{2}-, R^{9} = CH_{3}, R^{12} = H), 7,6 ml de CH_{2}Cl_{2}, y 0,13 ml de H_{2}O a 0ºC se le añadió gota a gota 0,5 ml de TFA provocando un ligero oscurecimiento de la mezcla de reacción. Después de 1 h, se añadió una disolución acuosa saturada de NaHCO_{3} con agitación vigorosa. Se añadieron agua y EtOAc y la fase acuosa se separó y se extrajo tres veces con EtOAc. La disolución orgánica combinada se lavó tres veces con una disolución acuosa saturada de NaHCO_{3}, dos veces con salmuera, se secó sobre MgSO_{4}, se filtró, y el disolvente se retiró a presión reducida. La cromatografía del residuo en gel de sílice (53% de EtOAc en hexanos) dio el compuesto objetivo C-2 (R^{1} = 4-CH_{3}CO-, R^{9} = CH_{3}, R^{12} = H) (104 mg, 79% de rendimiento). RMN ^{1}H (250 MHz, CDCl_{3}) \delta 7,88, 7,29 (ABc, 4, J = 8,4 Hz), 5,82 (s, 1), 4,52 (sa, 1), 2,97 (m, 1), 2,57 (s, 3), 1,95 (s, 3), 0,38 (s, 3).

Ejemplo 13 Síntesis de 11\beta-[4-(N,N-Dimetilamino)fenil]-3',4'-dihidro-1'-oxo-espiro[estra-4,9-dien-17\beta,2'(2'H)-pirrol]-3-ona [B-3 (R^{1} = 4-Me_{2}N-, R^{8} = R^{12} = H)]

11\beta-[4-(N,N-Dimetilamino)fenil]-3,3-[1,2-etanodiilbis(oxi)]-5\alpha-hidroxi-17\alpha-(propan-3-al)-17\beta-nitroestr-9-eno [B-1 (R^{1} = Me_{2}N-, R^{8} = R^{12} = H)]. A 0,500 g (0,883 mmol) del éster A-5 (R^{1} = 4-Me_{2}N-, R^{7} = (CH_{2})_{2}COOMe, R^{12} = H) disuelto en 2,0 ml de tolueno y mantenido en atmósfera de nitrógeno a -78ºC se le añadió gota a gota 0,97 ml de una disolución 1 M de DIBAL-H en hexano. Después de 1 h se añadió otros 1,7 ml de DIBAL-H y la mezcla se agitó a -78ºC durante 30 min. La reacción se inactivó añadiendo 0,24 ml de metanol en 0,4 ml de tolueno, seguido de la adición de 0,13 ml de agua en 0,22 ml de metanol. La mezcla de reacción se agitó durante 30 min y a continuación se filtró a través de Celite. El filtrado se concentró y el aldehído en bruto se sometió a cromatografía en gel de sílice usando EtOAc-hexano 1,5:1 para dar 456 mg de B-1 puro (R^{1} = Me_{2}N-, R^{8} = R^{12} = H) con el 96% de rendimiento. RMN ^{1}H (250 MHz, CDCl_{3}) \delta 8,76 (s, 1, CHO), 7,04 (d, 2, J = 8,7 Hz), 6,63 (d, 2, J = 8,7 Hz, ArH), 4,35 (s, 1, C_{5}OH), 4,28 (d, 1, J = 6,6 Hz, C_{11 \alpha}H), 3,95 (m, 4, O(CH_{2})_{2}), 3,93-4,02 (m, 2, CH_{2}OH), 2,90 (s, 6, N(CH_{3})_{2}), 0,40 (s, 3, C_{18}H, ArH).

3',4'-Dihidro-11\beta-[4-(N,N-dimetilamino)fenil]-3,3-[1,2-etanobis(oxi)]-5\alpha-hdyroxi-1'-oxo-espiro[estr-9-en-17\beta,2'(2'H)-pirrol] [B-2 (R^{1} = 4-Me_{2}N-, R^{8} = R^{12} = H)]. Se preparó una disolución del aldehído B-1 (R^{1} = Me_{2}N-, R^{8} = R^{12} = H) (0,400 g, 0,74 mmol) en 4,0 ml de etanol acuoso al 50% y 2,0 ml de THF. A esto se le añadió 64 mg (1,19 mmol) de cloruro amónico y 304 mg (4,65 mmol) de polvo de cinc. La mezcla de reacción se agitó durante toda la noche y se añadió otros 304 mg de Zn y 64 mg de cloruro amónico y se prosiguió con la agitación durante 24 h. La mezcla de reacción se filtró a través de Celite y el filtrado se concentró. El producto en bruto se sometió a cromatografía en gel de sílice eluyendo con cloruro de metileno-hexano-metanol 5:5:1 para dar 293 mg (78% de rendimiento) de B-2 puro (R^{1} = 4-Me_{2}N-, R^{8} = R^{12} = H); RMN ^{1}H (250 MHz CDCl_{3}) \delta 7,00 (d, 1, J = 8,4 Hz, ArH), 6,98 (s, 1, OH=CH), 6,62 (d, 2, J = 8,8 Hz, ArH), 4,40 (s, 1, C_{5}OH), 4,21 (d, 1, J = 6,4 Hz, C_{11 \alpha}H), 3,93-4,02 (m, 4, (OCH_{2})_{2}), 2,88 (s, 6, N(CH_{3})_{2}), 0,62 (s, 3, C_{18}H).

3',4'-Dihidro-11\beta-([4-(N,N-dimetilamino)fenil]-1'-oxo-espiro[estr-4,9-dien-17\beta,2'(2'H)-pirrol]-3-ona [B-3 (R^{1} = 4-Me_{2}N-, R^{8} = R^{12} = H)]. A una disolución de 120 mg (0,23 mmol) de B-2 (R^{1} = 4-Me_{2}N-, R^{8} = R^{12} = H) en 2,5 ml de CH_{2}Cl_{2} se le añadió 0,1 ml de agua y la mezcla se enfrió a 0ºC A la disolución enfriada se le añadió gota a gota 0,5 ml aproximadamente de TFA. La reacción se agitó a 0ºC durante 1 h. A continuación la reacción se inactivó con una disolución saturada de bicarbonato de sodio, y se extrajo con CH_{2}Cl_{2}. La fase con CH_{2}Cl_{2} se lavó con agua, seguido de salmuera y se secó sobre MgSO_{4} anhidro. La disolución seca se filtró y se concentró sobre vacío. El producto en bruto se sometió a cromatografía en gel de sílice usando cloruro de metileno-hexano-metanol 5:5:1 como eluyente para dar 79 mg (76% de rendimiento) de B-3 puro (R^{1} = 4-Me_{2}N-, R^{8} = R^{12} = H). RMN ^{1}H (250 MHz CDCl_{3}), \delta 7,00 (s, 1, ON=CH), 6,96 (d, 2, J = 8,4 Hz, ArH), 6,63 (d, 2, J = 8,9 Hz, ArH), 5,77 (s, 1, C_{4}H), 4,34 (d, 1, J = 6,8 Hz, C_{11 \alpha}H), 2,90 (s, 6, N(CH_{3})_{2}), 0,70 (s, 3, C_{18}H); espectro de masas, m/z (intensidad relativa) 444 (43), 428 (62), 278 (12), 134 (86), 121 (100), 91 (12); Anal. calculado para C_{29}H_{36}N_{2}O_{2}·1,25H_{2}O: C, 74,40; H, 8,50; N, 5,98. Hallado: C, 74,56; H, 8,50; N, 5,43.

Ejemplo 14 Síntesis de 3',4'-Dihidro-5'-metil-1'-oxo-11\beta-[4-(N,N-piperidino)fenil-espiro[estra-4,9-dien-17\beta,2'(2'H)-pirrol]-3-ona [B-3 (R^{1} = 4-(N-piperidino), R^{8} = R^{12} = H)]

11\beta-[4-(N-piperidino)fenil]-3,3-[1,2-etanodiilbis(oxi)]-5\alpha-hidroxi-17\beta-nitro-17\alpha-(3-oxobutil)-estr-9-eno [B-1 (R^{1} = 4-(N-piperidino)-, R^{8} = CH_{3}, R^{12} = H)]. Una disolución de 0,750 g (1,44 mmol) de A-5 (R^{1} = 4-(N-piperidino)-, R^{12} = H), 416 mg (7,175 mmol) de KF y 462 mg (1,43 mmol) de n-Bu_{4}NBr en 3,5 ml de DMSO se agitó durante 30 min a temperatura ambiente. A continuación se añadió gota a gota 0,14 ml (2,87 mmol) de metilvinilcetona y la mezcla se agitó durante 1 h. La mezcla de reacción se diluyó con agua y se extrajo con acetato de etilo. La fase orgánica se lavó con agua, seguido de salmuera y se secó sobre MgSO_{4} anhidro. A continuación la fase orgánica se filtró, se concentró y el producto en bruto se sometió a cromatografía en gel de sílice usando hexano-acetato de etilo 1:1 para dar 0,74 g (87% de rendimiento) de B-1 (R^{1} = 4-(N-piperidino)-, R^{8} = CH_{3}, R^{12} = H), RMN ^{1}H (250 MHz CDCl_{3}) \delta 7,04 (d, 2, J = 8,5 Hz, ArH), 6,81 (d, 2, J = 8,7 Hz, ArH), 4,32 (s, 1, C_{5}OH), 4,32 (da, 1, C_{11 \alpha}H), 3,93-4,00 (m, 4, (OCH_{2})_{2}), 3,09 (t, 4, N(CH_{2})_{2}), 2,17 (s, 3, COCH_{3}), 0,37 (s, 3, C_{18}H).

3',4'-Dihidro-3,3-[1,2-etanodiilbis(oxi)]-5\alpha-hidroxi-5'-metil-1'-oxo-11\beta-[4-(N-piperidino)fenil]-espiro[estr-9-en-17\beta,2'(2'H)-pirrol] [B-2 (R^{1} = 4-(N-piperidino)-, R^{8} = CH_{3}, R^{12} = H)]. Se preparó una disolución de la cetona B-1 (R^{1} = 4-(N-piperidino)-, R^{8} = CH_{3}, R^{12} = H) (0,740 g, 1,25 mmol) en 5,0 ml de etanol acuoso al 50% y 2,5 ml de THF. A esta disolución se le añadió 56 mg (1,04 mmol) de cloruro amónico y 283 mg (4,42 mmol) de polvo de cinc. La mezcla de reacción se agitó durante toda la noche y se añadió otros 283 mg de Zn y 56 mg de cloruro amónico y se prosiguió con la agitación durante 8 h. La mezcla de reacción se filtró a través de Celite y el filtrado se concentró. El producto en bruto se sometió a cromatografía en gel de sílice eluyendo con EtOAc-MeOH 5:1 para dar 670 mg (96% de rendimiento) de B-2 puro (R^{1} = 4-(N-piperidino)-, R^{8} = CH_{3}, R^{12} = H). RMN ^{1}H (250 MHz CDCl_{3}) \delta 6,99 (d, 2, J = 8,6 Hz, ArH), 6,81 (d, 2, J = 8,6 Hz, ArH), 4,39 (s, 1, C_{5}OH), 4,18 (d, 1, J = 7,8 Hz, C_{11 \alpha}H), 3,93-4,02 (m, 4, (OCH_{2})_{2}),
3,08 (ta, 4, N(CH_{2})_{2}), 2,05 (s, 3, ON=C-CH_{3}), 0,60 (s, 3, C_{18}H).

3',4'-Dihidro-5'-metil-1'-oxo-11\beta-[4-(N-piperidino)fenil)]-espiro[estr-4,9-dien-17\beta,2'(2'H)-pirrol]-3-ona [B-3 (R^{1} = 4-(N-piperidino)-, R^{8} = CH_{3}, R^{12} = H)]. El cetal B-2 (R^{1} = 4-(N-piperidino)-, R^{8} = CH_{3}, R^{12} = H) (3,87 g, 6,9 mmol) se disolvió en 25 ml de CH_{2}Cl_{2}. A esto se le añadió 1,0 ml de agua y la mezcla se enfrió a 0ºC A la disolución se le añadió gota a gota 5,0 ml aproximadamente de TFA. La reacción se agitó a 0ºC durante 1 h, en la cual viró de rosa parduzco a amarillo pálido. La reacción se inactivó después de agitar durante otros 30 min con una disolución saturada de bicarbonato de sodio, y se extrajo con CH_{2}Cl_{2}. La fase orgánica se lavó con agua, seguido de salmuera y se secó sobre Na_{2}SO_{4} anhidro. La disolución seca se filtró y se concentró sobre vacío. El producto en bruto se sometió a cromatografía en gel de sílice usando EtOAc-MeOH 5:1 como eluyente para dar 1,67 g de B-3 puro (R^{1} = 4-(N-piperidino)-, R^{8} = CH_{3}, R^{12} = H) y otros 1,04 g de material ligeramente impuro con un rendimiento global del 78%. RMN ^{1}H (250 MHz CDCl_{3}) \delta 6,96 (d, 2, J = 8,5 Hz, ArH), 6,80 (d, 2, J = 8,6 Hz, ArH), 5,77 (s, 1, C_{4}H), 4,32 (d, 1, J = 6,1 Hz, C_{11 \alpha}H), 3,08 (ta, 4, N(CH_{2})_{2}), 2,09 (s, 3, ON=C-CH_{3}), 0,68 (s, 3, C_{18} CH_{3}); espectro de masas, m/z (intensidad relativa) 498 (49), 481 (54), 320 (22), 174 (100), 161 (40); Anal. calculado para C_{30}H_{38}N_{2}O_{2}\cdot1,75H_{2}O: C, 74,75; H, 8,65; N, 5,28. Hallado C, 74,76; H, 8,56; N, 5,26.

La actividad biológica de los compuestos de esta invención se examinó por medio de pruebas in vitro e in vivo.

Unión al receptor

La afinidad de los compuestos por los receptores hormonales para progestinas y glucocorticoides en conejos se determinó mediante procedimientos convencionales similares a aquellos descritos en C. E. Cook, y col., Human Reproduction, Volumen 9, suplemento 1, págs. 32-39 (1994). No obstante, la fuente del receptor de glucocorticoides fue el timo de conejos hembra inmaduros tratados con estrógenos. La afinidad de los compuestos por el receptor hormonal para progesterona humana se determinó mediante procedimientos convencionales similares a aquellos descritos en Horwitz, y col., Cell, 28: 633-42 (1982) y Mockus, y col., Endocrinology, 110: 1564-71 (1982). El receptor se obtuvo en el citosol de células de mama T-47D humanas y se usó [^{3}H]-R5020 como radioligando. Las células T-47D (10^{9}/ml) se homogeneizaron en tampón TEDG (Tris 10 mM, EDTA 1,5 mM, ditiotreitol 1 mM, molibdato de sodio 1 mM, y glicerol al 10%) usando un mortero Dounce A, y el homogeneizado se centrifugó a 34.000 x g durante 1 hora. El sobrenadante se almacenó a -80ºC. Una alícuota de la preparación del receptor se combinó con el compuesto de prueba, [^{3}H]-R5020 0,4 nM, y tampón TEDG hasta un volumen final de 150 \mul y se incubó durante 4 horas a 4ºC en placas de microtitulación. Al final de la incubación se añadió al incubado 40 \mul de polietilenglicol al 40% y 15 \mul de gamma globulina humana al 1% y el contenido de cada uno de los pocillos se recogió sobre papeles de filtro B de grosor doble (Wallac LKB) usando un recolector TomTec. Se aplicó una película de cera de centelleo Meltilux sobre los papeles de filtro secos y los papeles se contaron en un contador de centelleo para determinar la inhibición de la unión de [^{3}H]-R5020. Los datos se expresan como valores de CI_{50}, es decir, la concentración de compuesto que inhibe la unión del radioligando en un 50%.

La Tabla 1 muestra que los compuestos de la presente invención se unen fuertemente al receptor de progestina, pero con grados de afinidad variables. De mención particular es la sorprendentemente elevada relación de afinidad por el receptor de progestina comparada con el receptor de glucocorticoide. Tales compuestos resultan ventajosos para disminuir o eliminar los efectos antiglucocorticoides asociados a antiprogestinas conocidas tales como la mifepristona. La Tabla 2 muestra que la elevada afinidad por el receptor de progestina de conejos también se extiende al receptor humano.

También se realizaron pruebas celulares y animales para caracterizar en profundidad la actividad biológica de los compuestos de la invención.

Determinación de la actividad progestacional y antiprogestacional en células humanas

Las células de mama T-47D humanas cultivadas en medio con nutrientes se incubaron con la progestina R5020 patrón sola o con R5020 más el compuesto de prueba y se valoró para la proliferación mediante procedimientos habituales usando como medida la incorporación de [^{3}H]-timidina. La Tabla 3 muestra los resultados de estos ensayos. Los datos para la actividad antiprogestina se expresan como CE_{50}, es decir, la concentración de compuesto que inhibe la proliferación mediada por R5020 0,15 nM en un 50%. También se da el % de inhibición máxima (una medida de la eficacia de los compuestos). En el formato agonista de este ensayo los compuestos se probaron a concentraciones que abarcan entre 0,01 y 10 nM y en la Tabla 3 se lista el % de estimulación máxima a cualquier dosis. Se puede observar que en este ensayo algunos de los compuestos presentan una potente actividad antiprogestacional, pero que también hay algo de actividad agonista asociada a ellos.

Determinación de la actividad progestacional y antiprogestacional in vivo

La actividad progestacional y la actividad antiprogestacional se determinaron en conejos por medio de la prueba de McGinty (compuesto de prueba solo, procedimiento de McGinty y col., Endocrinology, 24: 829-832 (1939)) o prueba anti-McGinty (compuesto de prueba más progesterona, procedimiento de Tamara y col., Jpn. J. Fertil Steril 24: 48-81 (1979)). Los resultados se puntuaron según McPhail (McPhail, J. Physiol. 83: 146 (1934)). Estos son procedimientos convencionales conocidos por aquellos expertos en la materia. Los resultados de estos ensayos se muestran en las Tablas 4 (actividad agonista) y 5 (actividad antagonista). Se puede observar que uno de los compuestos nitrona (II, R^{1} = 4-Me_{2}N-, X = O, R^{6} = R^{12} = H, R^{8} = CH_{3}), que presenta una separación excelente de la afinidad por el receptor de progestina y de glucocorticoides, era una antiprogestina potente en el ensayo anti-McGinty. Otros compuestos, tales como I (R^{1} = 4-CH_{3}CO-, X = O, R^{6} =R^{12} = H, R^{7} = CC-CH_{3}), presentan un perfil mixto (agonista/antagonista). El compuesto I (R^{1} = 4-Me_{2}N-, X = O, R^{6} = R^{12} = H, R^{7} = CC-CH_{3}) era una antiprogestina potente cuando se daba oralmente a conejos hembra inmaduros tratados con estrógenos junto con progesterona subcutánea en el ensayo anti-Clauberg y se puntuaron mediante el Índice McPhail ((McPhail, J. Physiol., 83: 146 (1934)).

Los 11\beta-aril)-17\beta-nitrocompuestos de la presente invención se unen con una buena afinidad al receptor de progestina (Tablas 1 y 2) y presentan actividad antiprogestacional in vitro (Tabla 3) o in vivo (Tabla 5). Los compuestos 17,17-espironitrona de la invención no sólo se unen fuertemente al receptor de progestina (Tabla 1) y demuestran actividad antiprogestacional (Tabla 5), sino que también se unen débilmente al receptor de glucocorticoides (Tabla 1), disminuyendo así notablemente la probabilidad de que tengan una actividad glucocorticoide o antiglucocorticoide importante. Esto último es un efecto secundario importante con antiprogestinas actuales tales como la mifepristona.

TABLA 1 Unión al receptor (Conejo)

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TABLA 2 Unión al receptor (Humano)

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TABLA 3 Actividad de las células T47D

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TABLA 4 Actividad progestacional

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TABLA 5 Actividad antiprogestacional

14

Claims

1. Un compuesto esteroide hormonal o antihormonal con la estructura I

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en la que

R^{1} es

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en la que q es 0 ó 1, Y es -(CH_{2})_{m}- en la que m es un número entero de 0 a 5, o Y es -(CH_{2})_{n}-Z-(CH_{2})_{p}-, en la que n es un número entero de 0 a 2, p es un número entero de 0 a 2, y Z es un heteroátomo (opcionalmente sustituido); y en la que los grupos CH_{2} pueden estar opcionalmente sustituidos; o

R^{12} es H o halo; o

R^{1} y R^{12} se combinan para formar un anillo

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17

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en la que W es CH_{2}, CH, NH, N, O, o S, y R^{4} es H o alquilo C_{1-6}; y

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X es

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R^{6} es H, alquilo C_{1-6}, o halógeno;

R^{7} es H, alquilo C_{1-6}, alquenilo C_{2-6}, o alquinilo C_{2-6}, cicloalquilo C_{3-8}, arilo C_{6-12}, aralquilo, aralquenilo, aralquinilo, heteroarilo, heteroaralquilo, heteroaralquenilo o heteroaralquinilo, cualquiera de los cuales puede estar opcionalmente sustituido, y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos en las que el término heteroátomo significa oxígeno, nitrógeno, azufre, silicio o boro, halógeno significa flúor, cloro, bromo o yodo y halo significa flúor, cloro, bromo o yodo, aralquilo, aralquenilo, o aralquinilo significa un grupo alquilo C_{1}-C_{4}, alquenilo C_{2}-C_{4} o alquinilo C_{2}-C_{4} que lleva un sustituyente arilo, heteroarilo significa una unidad de 5 a 12 átomos distintos de hidrógeno constituida por una o más estructuras cíclicas que pueden estar fusionadas o unidas, que contienen de 1 a 5 heteroátomos y que aquellos expertos en la materia aceptan de manera general que tienen un carácter electrónico aromático,

heteroaralquilo, heteroaralquenilo, o heteroaralquinilo significa un grupo alquilo C_{1}-C_{4}, alquenilo C_{2}-C_{4} o alquinilo C_{2}-C_{4} que lleva un sustituyente heteroarilo,

"opcionalmente sustituido" significa sustituido o no sustituido con uno o más heteroátomos y/o halógenos y/o grupos alquilo de 1 a 4 átomos de carbono y/o grupos alquenilo y/o alquinilo de 2 a 4 átomos de carbono y/o grupos cicloalquilo de 3 a 7 átomos de carbono y/o grupos arilo de 6 a 12 átomos de carbono y/o grupos heteroarilo, y en los que el grupo alquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo, arilo o heteroarilo pueden estar adicionalmente sustituidos con uno o más heteroátomos y/o halógenos en los que la sustitución se puede producir directamente sobre los grupos CH_{2} de los heterociclos amina cíclica, cuando su valencia lo permita, los heteroátomos pueden estar sustituidos en la cadena carbonada o uniéndose a ella mediante enlaces sencillos o dobles,

en todos los casos en los que la valencia y las consideraciones estéricas lo permitan, los grupos alquilo, alquenilo, alquinilo o cicloalquilo pueden contener dobles o triples enlaces y/o cadenas ramificadas adicionales,

el grupo R^{6} en C_{6} como aparece en las estructura puede estar en cualquiera de las dos posiciones \alpha o \beta y el grupo \beta-arilo en C_{11} puede ser remplazado por un grupo piridina sustituido con grupos R^{1} y R^{12} como se ha descrito previamente.

2. Un compuesto esteroide hormonal o antihormonal con la estructura II

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en la que

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R^{1} es

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R^{12} es H o halo; o

R^{1} y R^{12} se combinan para formar un anillo

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21

en la que W es CH_{2}, CH, NH, N, O, o S, y R^{4} es H o alquilo C_{1-6}; y

X es

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R^{6} es H, alquilo C_{1-6}, o halógeno; y

R^{8} es H, alquilo C_{1-6}, alquenilo C_{2-6}, o alquinilo C_{2-6}, cicloalquilo C_{3-8}, arilo C_{6-12}, aralquilo, aralquenilo, aralquinilo, heteroarilo, heteroaralquilo, heteroaralquenilo o heteroaralquinilo, cualquiera de los cuales puede estar opcionalmente sustituido, y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos en las que el término heteroátomo significa oxígeno, nitrógeno, azufre, silicio o boro, halógeno significa flúor, cloro, bromo o yodo y halo significa flúor, cloro, bromo o yodo, aralquilo, aralquenilo, o aralquinilo significa un grupo alquilo C_{1}-C_{4}, alquenilo C_{2}-C_{4} o alquinilo C_{2}-C_{4} que lleva un sustituyente arilo, heteroarilo significa una unidad de 5 a 12 átomos distintos de hidrógeno constituida por una o más estructuras cíclicas que pueden estar fusionadas o unidas, que contienen de 1 a 5 heteroátomos y que aquellos expertos en la materia aceptan de manera general que tienen un carácter electrónico aromático,

3. El esteroide con la estructura I de la reivindicación 1 en la que

X es O, NOH, o NOCH_{3};

R^{6} es H, CH_{3}, F o Cl;

4. El esteroide de la reivindicación 2 en la que

X es O, NOH, o NOCH_{3};

R^{6} es H, CH_{3}, F o Cl; y

R^{8} es H, CH_{3}, o CH_{2}C_{6}H_{5}.

5. El esteroide de la reivindicación 1 seleccionado del grupo constituido por:

11\beta-(4-acetilfenil)-17\alpha-(1-propinil)-17\beta-nitroestra-4,9-dien-3-ona; 11\beta-(4-(N,N-dimetilamino)fenil)-17\alpha-(1-propinil)-17\beta-nitroestra-4,9-dien-3-ona; 11\beta-(4-acetilfenil)-17\alpha-(E-3-hidroxi-1-propenil)-17\beta-nitroestra-4,9-dien-3-ona; 11\beta-(4-acetilfenil)-17\alpha-(3-hidroxipropil)-17\beta-nitroestra-4,9-dien-3-ona; 11\beta-(4-(N,N-dimetilamino)fenil)-17\alpha-(E-3-hidroxi-1-propenil)-17\beta-nitroestra-4,9-dien-3-ona; 11\beta-(4-(N,N-dimetilamino)fenil)-17\alpha-(3-hidroxipropil)-17\beta-nitro-
estra-4,9-dien-3-ona; y 17\beta-nitro-11\beta-(4-(N-piperidino)fenil)-17\alpha-propinil-estra-4,9-dien-3-ona.

6. El esteroide de la reivindicación 2 seleccionado del grupo constituido por:

3',4'-dihidro-11\beta-(4-(N,N-dimetilamino)fenil)-5'-metil-1'-oxo-espiro[estra-4,9-dien-17\beta,2'(2'H)-pirrol]-3-ona;
3',4'-dihidro-11\beta-(4-(N,N-dimetilamino)fenil)-1'-oxo-espiro[estra-4,9-dien-17\beta,2'(2'H)-pirrol]-3-ona; y 3',4'-dihidro-11\beta-(4-(N-piperidino)fenil)-5'-metil-1'-oxo-espiro[estra-4,9-dieno-17\beta,2'(2'-H)-pirrol]-3-ona;

7. Una composición para tratar terapéuticamente la actividad de la progesterona que comprende una cantidad terapéuticamente eficaz del compuesto de la reivindicación 1 con un fin terapéutico.

8. La composición de la reivindicación 7, en la que dicho fin terapéutico es el tratamiento de la endometriosis o fibroides uterinos.

9. La composición de la reivindicación 7, en la que dicho fin terapéutico es la maduración cervical preparatoria para el parto de la descendencia.

10. La composición de la reivindicación 7, en la que dicho fin terapéutico es el control o la regulación de la fertilidad.

11. La composición de la reivindicación 7, en la que dicho fin terapéutico es el tratamiento de tumores o cánceres.

12. La composición de la reivindicación 7, en la que dicho fin terapéutico es la terapia de sustitución hormonal.

13. La composición de la reivindicación 10, que comprende adicionalmente un compuesto seleccionado del grupo constituido por una prostaglandina, un oxitócico, un estrógeno y una mezcla de los mismos.

14. Una composición para tratar terapéuticamente la actividad de la progesterona que comprende una cantidad terapéuticamente eficaz del compuesto de la reivindicación 2, con un fin terapéutico.