ES2235302T3 - Composiciones fertilizantes basadas en derivados naturales o sinteticos de aminopurina o de extractos de algas ricas en tales derivados en asociacion con una fuente de calcio. - Google Patents
Composiciones fertilizantes basadas en derivados naturales o sinteticos de aminopurina o de extractos de algas ricas en tales derivados en asociacion con una fuente de calcio.Info
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Abstract
LA INVENCION SE REFIERE A NUEVAS COMPOSICIONES FERTILIZANTES CONSTITUIDAS POR UNA ASOCIACION DE AL MENOS UN DERIVADO NATURAL O SINTETICO DE AMINOPURINA O DE UN EXTRACTO DE ALGAS RICAS EN TALES DERIVADOS, Y UNA FUENTE DE CALCIO. APLICACION: TRATAMIENTO DE PLANTAS VARIADAS EN EL AMBITO AGRICOLA.
Description
Composiciones fertilizantes basadas en derivados
naturales o sintéticos de aminopurina o de extractos de algas ricas
en tales derivados en asociación con una fuente de calcio.
La presente invención que encuentra aplicación en
el campo agrícola tiene esencialmente por objeto una novedosa
utilización de composiciones basadas en derivados naturales o
sintéticos de aminopurina o de extractos de algas ricas en tales
derivados en asociación con una fuente de calcio.
En el marco de la presente invención, con la
expresión "composición fertilizante" se pretende designar
cualquier producto cuyo empleo esté destinado a garantizar o a
mejorar las propiedades físicas, químicas y biológicas de los
suelos, así como la nutrición de los vegetales.
Una composición de este tipo puede ser, por
ejemplo, una enmienda o un abono.
Se sabe que las enmiendas cálcicas contienen
calcio generalmente en forma de óxidos, hidróxidos o carbonatos,
cuyo papel es mantener o elevar el pH del suelo con el fin de
mejorar las propiedades. En este campo, las algas coralíferas del
género Lithothamnium se utilizan tradicionalmente en
agricultura debido, especialmente, a su riqueza en carbonatos de
calcio.
Por otra parte, se sabe que los abonos se definen
como materias fertilizantes cuya función principal es proporcionar a
las plantas elementos directamente útiles para su nutrición
(elementos fertilizantes principales, elementos fertilizantes
secundarios y oligoelementos).
Para ello, los abonos foliares utilizan
generalmente fuentes de nitrógeno, fósforo y potasio, así como
oligoelementos y aminoácidos.
También se sabe que debido a sus propiedades
variadas, se han propuesto las algas para numerosas aplicaciones en
el ámbito agrícola. En particular, se han propuesto para la
aplicación foliar extractos líquidos de algas pardas, debido a su
acción bioestimulante.
Finalmente, se sabe que las citocininas son
sustancias naturales o sintéticas que estimulan la citocinesis, es
decir, la división celular. Estas sustancias están presentes en
todos los tejidos vegetales. Actualmente, se conoce una centena de
compuestos de citocinina de síntesis, derivados de aminopurina,
piridina, pirimidina e imidazol. Se han recomendado sustancias de
este tipo en el ámbito agrícola, pero generalmente para cultivos
especializados, como por ejemplo, los viñedos y en la aplicación
foliar.
La utilización de materias fertilizantes en el
suelo sigue siendo en la actualidad muy restrictiva, limitándose su
acción al hecho de mejorar la calidad de los suelos o de la
nutrición de la planta.
En este contexto es en el que se ha descubierto y
esto constituye el fundamento de la presente invención, que la
utilización de composiciones que asocian al menos un derivado
natural o sintético de aminopurina o un extracto de algas rico en
derivados de este tipo y una fuente de calcio, aportadas de manera
exógena, preferiblemente a nivel del suelo, permite de manera
completamente inesperada y sorprendente, estimular el proceso de
germinación y preparar las estructuras vegetales de producción.
Sin que esto constituya una interpretación
teórica, parece que esta estimulación pasa en primer lugar por la
fijación de los derivados de aminopurina actuando como señal sobre
los receptores de la planta y que, en un segundo tiempo, el calcio
actúa como mensajero activando y regulando especialmente los
diferentes sistemas enzimáticos y proteicos que son el origen de la
respuesta fisiológica.
Se ha demostrado especialmente de manera
sorprendente que las composiciones cuyo uso se reivindica según la
invención, permiten favorecer, en el momento de la germinación, la
implantación del cultivo mejorando la tasa de germinación, la
precocidad, la homogeneidad de las poblaciones y la fuerza de las
plántulas.
Estas composiciones permiten además luchar contra
las condiciones subóptimas de germinación (falta de luz,
temperaturas demasiado bajas,...) o los problemas de adversidad del
mismo entorno de germinación. Así, las composiciones cuyo uso se
reivindica según la invención, permiten garantizar el éxito de la
implantación que constituye un requisito indispensable para el
crecimiento equilibrado del cultivo y ara la obtención de plantas
fértiles que expresan mejor sus potenciales agronómicos.
Asimismo, se ha demostrado, de una manera
completamente inesperada, que las composiciones cuyo uso se
reivindica según la invención, favorecen la preparación de las
estructuras vegetales de producción mediante la estimulación de los
procesos de regulación o de diferenciación.
Así, estas composiciones permiten acompañar a los
cultivos en el transcurso de su desarrollo y desempeñan un papel
determinante en la elaboración del rendimiento.
En particular, estas composiciones permiten a
determinados cultivos, como por ejemplo los cereales o los pastos,
expresar su capacidad natural para compensar los efectos
desfavorables del medio ambiente (condiciones climáticas o estado
desfavorable del suelo); siendo el ahijamiento y el número de
espigas otros tantos factores de ajuste a las condiciones medio
ambientales.
Por otra parte, al favorecer la implantación del
cultivo, la preparación de las estructuras vegetales de producción y
la diferenciación floral, estas composiciones desempeñan un papel
determinante en la elaboración del rendimiento frente a otros
cultivos como el maíz que no tienen esta capacidad de compensación y
cuyo cultivo en condiciones límites reduce su potencial de
desarrollo.
En estas condiciones, la presente invención tiene
por objeto el uso por vía exógena de una asociación constituida por
al menos un derivado natural o sintético de aminopurina o de un
extracto de algas rico en derivados de este tipo y de una fuente de
calcio, como agente destinado a estimular el proceso de la
germinación y de la preparación de las estructuras vegetales de
producción.
Los derivados de aminopurina susceptibles de ser
utilizados en el marco de la presente invención pueden ser naturales
o sintéticos o estar presentes en el seno de extractos de algas
enriquecidos con derivados de este tipo.
A modo de ejemplo de derivados naturales de
aminopurina susceptibles de ser utilizados en el marco de la
presente invención, se citará especialmente la
6-(4-hidroxi-3-metilbutil-2-enil)aminopurina,
la
6-(4-hidroxi-3-metilbutil)-aminopurina
y la 6-(dimetilalil)aminopurina.
A modo de ejemplo de derivados sintéticos de
aminopurina susceptibles de ser utilizados en el marco de la
presente invención, se citará especialmente la
6-(dimetilalil)-aminopurina de síntesis, la cinetina
y la 6-bencilaminopurina.
Extractos de algas enriquecidos con derivados de
aminopurina útiles en el marco de la presente invención pueden
obtenerse a partir de determinadas especies de algas mediante un
procedimiento que incluye generalmente las siguientes etapas:
lavado, molienda, extracción (separación
sólido-líquido) y posiblemente concentración.
Las condiciones de extracción y la naturaleza de
las algas se elegirán de modo que el extracto obtenido presente la
actividad deseada, en comparación con sustancias puras de
referencia.
Por tanto, el experto podrá realizar fácilmente
estas elecciones, teniendo en cuenta en particular las siguientes
indicaciones generales.
Las algas que presentan una actividad
significativa, en comparación con sustancias puras, son
preferiblemente algas pardas seleccionadas entre Halydris
siliquosa, Ascophyllum nodosum, Fucus vesiculosus, Fucus
serratus.
Los mejores resultados se han obtenido a partir
de Halydris siliquosa.
Asimismo, se ha determinado que para enriquecer
al máximo el extracto de alga con derivado de aminopurina activo, es
conveniente realizar la extracción en medio acuoso ácido. Los
mejores resultados se han obtenido llevando a cabo una extracción a
una temperatura de aproximadamente 90 a 110ºC durante de 30 minutos
a 1 hora con agitación, continuada a temperatura ambiente durante un
periodo de aproximadamente 24 a 48 horas.
El extracto obtenido puede ser más o menos
concentrado según el uso previsto. Puede obtenerse, por ejemplo,
mediante atomización, una deshidratación total de este extracto lo
que permite una presentación en forma pulverulenta.
Según una característica particular de la
invención, los derivados de aminopurina citados anteriormente o los
extractos de algas enriquecidos con derivados de este tipo se
utilizan en una cantidad que permite la obtención de una actividad
comprendida entre 500 y 5.000, expresada en microgramos equivalentes
de BAP (6-bencilaminopurina) medida mediante la
prueba de amaranto.
Esta prueba que fue descrita por Biddington y
Thomas (Biddington N. I. y Thomas T.H. 1973 Planta: 111
183-186) se basa en la capacidad de los derivados de
aminopurina para inducir la síntesis de amarantina (pigmento rojo)
en la planta Amaranthus candatus.
La actividad de los productos probados se mide de
esta forma mediante la cantidad de amarantina sintetizada, expresada
mediante la diferencia de densidad óptica entre la muestra de planta
no tratada y la muestra de planta tratada.
La actividad se expresa en comparación con la
actividad de un derivado de síntesis conocido, la
6-bencilaminopurina (denominada a continuación
BAP).
Las fuentes de calcio susceptibles de ser
utilizadas en el marco de la presente invención pueden ser de origen
mineral, sintético, animal o procedente de alga.
A modo de ejemplos preferidos de fuente de calcio
susceptibles de ser utilizadas en el marco de la presente invención,
se citará especialmente el alga coralífera del género
Lithothamnium, las cretas, el "trez" (arena marina
calcárea), la marga, la dolomita, las cales, las espumas de
azucareras, los lodos de calcificación de las aguas de perforación,
las escorias Thomas, los fosfatos naturales, la cianamida cálcica,
el cloruro de calcio y las sales de calcio de aminoácidos.
Los mejores resultados se han obtenido con el
alga Lithothamnium (en forma pulverulenta) debido a sus
características particulares y notables relacionadas con su riqueza
en oligoelementos, con su alta porosidad y con su gran superficie
específica que permiten una fijación y una asociación íntima con los
derivados de aminopurina.
El uso según la presente invención encuentra
aplicación en el cultivo de una gran variedad de plantas.
Entre éstas, se citará en particular:
- -
- las plantas de gran cultivo, tales como los cereales (trigo, maíz);
- -
- las proteaginosas (guisantes);
- -
- las oleaginosas (soja, girasol);
- -
- las plantas de prados, tales como en particular "ray-grass" (Lolium perenne), útiles para la alimentación animal;
- -
- los cultivos especializados, tales como en particular los huertos (lechuga, tomate, melón) o la arboricultura (pera, manzana, nectarina).
Ahora se ilustrará la presente invención mediante
los siguientes ejemplos no limitantes. En estos ejemplos, y salvo
indicación contraria, los porcentajes se expresan en peso y la
temperatura es la temperatura ambiente.
Se realizó un estudio previo con el fin de
optimizar los parámetros de extracción de los derivados de
aminopurina utilizables en el marco de la presente invención.
Se investigó en particular la influencia del pH,
de la duración y de la temperatura de extracción para obtener, para
una especie de algas dada, la actividad máxima, expresada en
microgramos equivalentes de B.A.P. por gramo de materia seca.
Este estudio previo permitió demostrar que las
algas pardas convienen más particularmente en el marco de la
presente invención y especialmente las algas Halydris siliquosa,
Ascophyllum nodosum, Fucus vesiculosus y Fucus
serratus.
En el caso de la variedad Halydris
siliquosa que ha conducido a los mejores resultados en términos
de actividad, la extracción se realiza de manera óptima mediante
hidrólisis ácida a aproximadamente 100ºC, durante 60 minutos,
seguido de una extracción durante 24 horas a 15ºC.
Se ha obtenido un extracto de Halydris
siliquosa enriquecido con
6-(4-hidroxi-3-metilbutil-2-enil)aminopurina
siguiendo el siguiente protocolo experimental.
Se someten algas frescas de tipo Halydris
siliquosa a dos lavados sucesivos en un recipiente con agua con
el fin de eliminar la arena y la gravilla.
Después, se depositan las algas en cestas con
rejillas de acero inoxidable antes de introducirlas en los
recipientes en los que se recubren con agua.
Una agitación mediante toberas de aeración
permite mantener las algas en suspensión, favoreciendo de esta forma
la decantación de las impurezas.
Se escurren las algas así lavadas, después se
muelen en trozos de 1 a 10 mm.
Se dispersan 200 kg de algas en 800 kg de agua
llevada a ebullición en un reactor calentador.
Se ajusta el pH al valor de 3 añadiendo al medio
acuoso aproximadamente 1 litro de ácido sulfúrico.
Se añade después agua en tal cantidad que el
volumen total sea de 1.000 litros.
Tras la introducción de las algas, la temperatura
se lleva de nuevo a 90-100ºC.
Se mantiene el conjunto a esta temperatura
durante una duración aproximada de 1 hora (incluyendo la subida de
temperatura).
Durante los 30 primeros minutos, se someten a
microexplosión las células de las algas mediante un homogeneizador
de tipo ULTRA-TURAX® con el fin de favorecer la
extracción de las moléculas ricas en derivados de aminopurina.
Tras finalizar este periodo, se para el
calentamiento y se prosigue entonces con la extracción con agitación
durante aproximadamente 24 horas a 15ºC.
Se separa la fracción rica en derivados de
aminopurina de los restos de algas mediante centrifugación
(separación sólido-líquido).
Después, se filtra el extracto centrifugado sobre
un filtro con tierra de diatomeas o sobre un filtro con bandejas,
después se filtra de nuevo sobre una membrana hasta 1 \mum.
El filtrado así obtenido comprende entre el 1 y
el 5% en peso de extracto seco, que presenta las siguientes
características generales:
- -
- actividad de citocinina (según la prueba biológica de amaranto) \mum eq. BAP/100 g de extracto seco: 500-5.000
- -
- densidad: 1,00-1,02
- -
- pH: 6-7
- -
- materia seca: 10-50 g/l
El extracto así preparado puede utilizarse en una
forma más o menos concentrada, estando determinada la concentración
final en función del contenido buscado en derivados activos en la
aplicación considerada.
Así, el filtrado mencionado anteriormente puede
concentrarse, por ejemplo, mediante un evaporador en capa fina, de
manera que el extracto seco represente del 10 al 20% del peso de
éste.
Así, puede igualmente obtenerse una
deshidratación total, por ejemplo, mediante atomización, cuando se
busca una presentación en forma pulverulenta.
Para las presentaciones líquidas, en forma de
extractos brutos o concentrados, puede introducirse un concentrador
tal como, por ejemplo, el
cloro-4-metil-3-fenolato
de sodio en una dosis del 0,1 al 0,3%.
Asimismo, puede ajustarse el pH a un valor de
6-7 mediante adición de hidróxido de potasio.
La identificación del extracto se ha realizado
mediante el método inmunoenzimático (ELISA) utilizando el sistema
avidina-biotina.
Este ensayo se basa en la utilización de
anticuerpos anti-hormonas en un sistema ELISA
mediante competición.
La muestra que debe analizarse se pone en
competición con cantidades conocidas de hormonas, absorbidas en las
paredes de placas de microtitulación, para una cantidad limitante de
anticuerpos. En el equilibrio de la reacción, se lavan las placas y
se revelan los anticuerpos fijados mediante un segundo anticuerpo
acoplado a una enzima (peroxidasa).
Se mide la actividad enzimática asociada a los
anticuerpos fijados mediante colorimetría.
El sistema se calibra en cada placa de
microtitulación mediante intervalos de dilución de muestras
estándar.
El ensayo se ha realizado utilizando un suero
dirigido contra la
6-(4-hidroxi-3-metilbutil-2-enil)aminopurina,
sobre muestras no purificadas de un extracto de algas preparado
según el ejemplo 1, que presenta una actividad de tipo aminopurina
(466 \mug eq. BAP/l según la prueba de amaranto), así como sobre
muestras purificadas mediante extracción metanólica de este mismo
extracto.
En estas condiciones, el extracto del ejemplo 1
(no purificado) manifiesta una inmunorreactividad aparente muy
fuerte frente al anticuerpo, permitiendo de esta forma identificar
la
6-(4-hidroxi-3-metil-butil-2-enil)aminopurina.
Este mismo extracto después de tratamiento
mediante una disolución metanólica seguido de una filtración, de un
paso sobre Seppak C18 (Millipore), después de un fraccionamiento
mediante HPLC, presenta una inmunorreactividad medida en las
fracciones obtenidas de la HPLC muy débil. Sin embargo, las
mediciones de rendimiento de purificación efectuadas paralelamente,
gracias a los marcadores radiactivos añadidos a las muestras al
principio de la extracción, han revelado una enorme pérdida de
hormonas en el transcurso de la purificación. Los esencial de la
radiactividad se encuentra en los filtros, en asociación con
precipitados que no pueden pasar a través de los poros de 0,22
\mum.
Después de diálisis durante 1 noche a 4ºC, queda
una inmunorreactividad fuerte. Por tanto, la inmunorreactividad se
asocia a estructuras de un peso molecular superior al poder de corte
de la membrana, es decir, del orden de 10.000. Se puede entonces
pensar que los precipitados obtenidos durante la extracción
metanólica correspondían a derivados de aminopurina ligados a
proteínas, susceptibles de precipitar con el metanol y capaces de
interferir con los anticuerpos en el sistema ELISA.
De esta forma, este método ha permitido
identificar la
6-(4-hidroxi-3-metilbutil-2-enil)aminopurina
en forma libre o ligada, en el extracto del ejemplo 1.
Como fuente de calcio preferida en el marco de la
invención, se utilizará Lithothamnium pulverulento.
El Lithothamnium pulverulento puede
prepararse, por ejemplo, de la siguiente manera:
Se pesca el alga con la ayuda de un barco
equipado de una draga de succión.
Antes de la transformación, el alga se presenta
bajo un aspecto parecido a corales de tamaño variado (0,1 a 10
cm).
Las algas se criban previamente para eliminar las
piedras antes de conducirlas hacia un horno rotativo que permite
deshidratarlas (materia seca comprendida entre el
85-99%).
Al final del secado, se muele el alga en un
molino de bolas con el fin de obtener un polvo pulverulento (1 a 200
\mum).
En el marco de la presente invención, los mejores
se han obtenido asociando extractos de algas enriquecidos con
derivados de aminopurina tales como se prepararon en el ejemplo 1 y
el Lithothamnium pulverulento tal como se preparó en el
ejemplo 2 como fuente de calcio.
Preferiblemente, la fabricación de esta
composición puede realizarse en el transcurso de la transformación
del alga Lithothamnium.
Así, se ha obtenido un polvo de
Lithothamnium enriquecido con
6-(4-hidroxi-3-metilbutil-2-enil)aminopurina
siguiendo el siguiente protocolo.
Se pulveriza una disolución de derivado de
aminopurina preparada en el ejemplo 1 a razón del 0,1 al 10% sobre
Lithothamnium. Esta pulverización puede realizarse durante el
secado en el horno rotativo o la molienda (molino de bolas)
mencionada en el ejemplo 2.
El producto así obtenido presenta la composición
y las propiedades siguientes:
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo
4.1
Se reciben los lotes de semillas (PMG = 10,8 g)
recubiertos por una mezcla de fungicidas (tiramo, iprodiona,
himexazol) y un insecticida (N-metilcarbamato de
dimetil-2,2-dihidro-2,3-benzofuranilo-7).
Se ponen a germinar por lotes de 30 en placas de Petri sobre papel
embebido con agua destilada, a 19ºC (las semillas de remolacha
germinan a una temperatura inferior a 2ºC), en la oscuridad. Tras 5
días, se miden la tasa de germinación y la longitud de la radícula.
Las semillas se tratan con el producto del ejemplo 3.
Se estudian diferentes actividades de citocinina
del producto del ejemplo 3 que varían entre 8,2.10^{-6} a
8,2.10^{-8} \mug eq. BAP/semilla de manera comparativa con el
control de agua.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo
4.2
Se lleva a cabo el estudio a partir de semillas
tratadas con el producto del ejemplo 3 a las dosis de 6,5.10^{-6}
a 6,5.10^{-8} \mug eq. BAP/semilla. Se recubren las semillas en
una mezcla para protegerlas frente a las enfermedades (Quinolate Pro
+ Apron® que contenía como principios activos carbendazina,
oxiquinoleato de cobre y metalaxilo).
El producto del ejemplo 3 se sustituye por agua
destilada para los lotes control.
Se ponen a germinar lotes de 30 individuos en
placas de Petri sobre papel filtro embebido en agua destilada, a
25ºC, en la oscuridad, durante 96 horas.
Se evalúa la acción del producto del ejemplo 3
mediante la medición del alargamiento de la radícula.
Tras 96 horas de cultivo, el producto del ejemplo
3 a la dosis de 6,5.10^{-7} \mug eq. BAP produce un aumento
significativo de casi el 29% de la longitud de la radícula.
Ejemplo
4.3
Se realizó la siembra del maíz (Limagrain LG02)
fuera de temporada en el mes de octubre en macetas de 4 litros
rellenas de vermiculita y colocadas en invernadero no calentado. Se
seleccionan dos lotes de plántulas homogéneas (12 controles y 15
tratadas) con vistas a un estudio de la velocidad de crecimiento del
maíz tratado o no con el producto del ejemplo 3. Las condiciones
climáticas fueron muy desfavorables durante el ensayo: temperaturas
bajas (el maíz es una planta que no crece por debajo de 6ºC) y
humedad alta. Rápidamente aparecieron ataques fúngicos. No obstante,
el ensayo pudo proseguirse durante 8 semanas.
Cada planta recibió cada dos días una disolución
nutritiva (de Mazé modificada). Además, para uno de los dos lotes de
maíz, esta disolución nutritiva se enriquece con el producto del
ejemplo 3; siendo la actividad en el medio nutritivo de 150 \mug
eq. BAP/l.
Al principio del desarrollo, la velocidad de
aparición de las hojas en el maíz tratado con el producto del
ejemplo 3 tiene tendencia a ser más rápida que la del maíz
control.
Después de la semana 6, se observa además que el
maíz tratado ha resistido mucho mejor a los ataques fúngicos (que
aparecen en la base del pie) que el control. El 86,7% de los maíces
tratados todavía son viables en la semana 8 frente a sólo el 50% de
los controles.
La tabla III menciona la tasa de supervivencia de
plántulas de maíz var. Limagrain LG02 cultivadas durante 8 semanas
en condiciones subóptimas de temperatura y de intensidad
luminosa.
Se realizan las siembras de maíz variedad Sabrina
(lotes de 15) en maceta (8 macetas/tratamiento) con superficie de
25,4.10^{-3} cm^{2}, lo que se corresponde con una densidad de
siembra de 590 granos/m^{2}. Las macetas contienen una mezcla de
turba enriquecida, tierra, arena en proporciones equivalentes.
Las plantas se cultivan en invernadero. Se mezcla
el producto del ejemplo 3 con el suelo a razón de 100 kg/ha
equivalente a una actividad de citocina de 45.10^{-2} mg eq.
BAP/ha. Se compara la acción del producto del ejemplo 3 a la de un
control de agua y a la de un control de Lithothamne.
La fuerza de las plántulas de maíz se aprecia
después de 6 semanas de cultivo según la evolución del peso seco del
aparato vegetativo.
Al final del periodo, la producción media por
planta en el caso del control de agua es de 2,8 g. La incorporación
del Lithothamne solo no aporta ninguna modificación sobre el
crecimiento. En cambio, la incorporación del producto del ejemplo 3
conlleva un aumento de casi el 21% del peso seco.
Los resultados obtenidos se reagrupan en la tabla
IV a continuación.
Ejemplo
5.1
Se realiza un ensayo en campo abierto sobre
Ray-grass de Italia, variedad Billion, en la región
de Arras (Norte). Este ensayo comprende 5 modalidades con 4
repeticiones.
De esta forma, se incorpora el producto del
ejemplo 3 al suelo con tasas diferentes de 200 kg/ha, 500 kg/ha y
1.000 kg/ha que se corresponden respectivamente con actividades de
0,36 mg/ha, 0,90 mg/ha y 2,70 mg/ha. La fertilización nitrogenada
suministrada en el transcurso del cultivo es de 160 kg/ha. La
cosecha se realiza manualmente en el estadio de hinchamiento /
preespigación.
Todas las modalidades de tratamiento con el
producto del ejemplo 3 dan resultados muy positivos. La respuesta
agronómica del ensayo es excelente.
Aunque no se recoge ninguna diferencia entre
parcelas una vez ha brotado, en cambio las observaciones en
vegetación indican una mayor fuerza de las parcelas tratadas en el
estadio final del ahijamiento y una coloración más fuerte con
respecto al control.
En la cosecha, se confirman estas observaciones
con una regularidad sorprendente en la pesada de cada una de las
repeticiones y rendimientos muy mejorados.
El tratamiento a la dosis de 500 kg/ha permite
una ganancia de rendimiento de más del 16,5 (es decir, 28,9
toneladas/ha frente a 24,8 para el control). En el caso de un aporte
de 1 tonelada/ha, la ganancia de rendimiento alcanza el 24,4% (es
decir, 30,9 quintales/ha frente a 24,8 para el control).
Los resultados obtenidos se reagrupan en la tabla
V a continuación.
Ejemplo
5.2
Se realiza un ensayo en campo abierto sobre
guisantes proteaginosos variedad Solara. Este ensayo comprende 3
modalidades.
Se incorpora el producto del ejemplo 3 al suelo a
razón de 200 kg/ha (es decir, 0,36 mg eq. BAP/ha) y de 500 kg/ha
(0,90 mg eq. BAP/ha). Se efectúa la siembra el 9 de abril. No se
realiza ningún aporte de nitrógeno en el transcurso del cultivo.
La superficie de cada parcela elemental es de 54
m^{2}. Cada modalidad se somete a 4 repeticiones:
Los tratamientos con el producto del ejemplo 3
suministrado al suelo muestran resultados positivos. Permiten
aumentar los rendimientos de 1,5 a 2,1 quintales/ha, es decir del
3,4 al 4,8%.
En la tabla VI se registran los resultados
obtenidos.
Se realizan las siembras de guisante forrajero
variedad Solara (lotes de 15) en maceta (8 macetas/tratamiento), con
superficie de 25,4.10^{-3} cm^{2}, lo que se corresponde con una
densidad de siembra de 590 granos/m^{2}. Las macetas contienen una
mezcla de turba enriquecida, tierra, arena en proporciones
equivalentes.
Las plantas se cultivan en invernadero. Se mezcla
el producto del ejemplo 3 con el suelo a razón de 100 kg/ha para
diferentes actividades biológicas (45, 4,5 y 0,45 \mug eq.
BAP/ha).
Para los lotes control, el producto del ejemplo 3
se sustituye por agua destilada (control H_{2}O) o por Lithothamne
(control M).
Los experimentos se realizan sobre los guisantes
de la variedad Solara cultivados en invernadero durante 5
semanas.
Se compara la acción del producto del ejemplo 3
con la de una citocinina de síntesis, la BAP, cuyas concentraciones
probadas se aproximan a las concentraciones óptimas equivalente BAP
del extracto (0,5; 0,05 y 0,005 mg de BAP/ha).
La aplicación de Lithothamne sola no modifica el
crecimiento del sistema radicular y del aparato vegetativo.
El aporte del producto del ejemplo 4 induce un
aumento significativo de la materia seca del aparato radicular y
vegetativo en el guisante.
El crecimiento radicular o del aparato vegetativo
mejora del 10 al 22% para las plantas jóvenes según las actividades
biológicas.
En la tabla VII se registran los resultados
obtenidos tras 5 semanas de cultivo.
Ejemplo
5.3
Se pusieron en cultivo semillas de alfalfa
(variedad Milfeuil, sociedad RAGT), en octubre, sobre vermiculita.
Después de una semana, se seleccionaron 32 plántulas homogéneas y se
repartieron en dos lotes de 16 individuos (16 controles y 16
tratados).
Después, las 32 plantas recibieron dos veces por
semana una disolución nutritiva adaptada. Se añadió el producto del
ejemplo 3 a la disolución nutritiva de las 16 plantas tratadas para
dar una actividad de 150.10^{-3} \mug eq. BAP/l. Además, se
realizó un riego con agua del grifo en función de las necesidades de
las plantas, y esto cada 48 horas.
Se realizó un seguimiento de la velocidad de
desarrollo de la alfalfa.
Los resultados observados (véase tabla VIII)
muestran que la implantación de la alfalfa en condiciones de cultivo
difíciles (temperatura e iluminación débiles) tiene tendencia a
verse favorecida con el aporte del producto del ejemplo 3.
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Después de 15 semanas, el recuento del número de
hojas por planta resulta demasiado difícil (si se quiere conservar
las plantas en cultivo).
Se definen dos nuevos criterios de expresión de
la velocidad de desarrollo y de crecimiento de las plantas:
- -
- el número de nudos en el tallo principal (N/TP)
- -
- la longitud del tallo principal (Lg TP)
Las observaciones realizadas la semana 17 se
presentan a continuación en la tabla IX:
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Según estos criterios, las alfalfas tratadas
conservan una progresión de su desarrollo.
Así, en el caso de la alfalfa, el producto del
ejemplo 3 aplicado en periodo de estrés climático sobre plantas en
principio de desarrollo ha favorecido la implantación del cultivo.
El efecto mejorador se ha manifestado especialmente en la velocidad
de crecimiento (longitud del tallo principal en la semana 17).
\newpage
Ejemplo
5.4
Para este ensayo se han utilizado 16 plantas de
la variedad Ariana: 8 controles y 8 tratadas con el producto del
ejemplo 3. La siembra de una centena de granos se realizó en
noviembre sobre vermiculita. Se obtuvo la germinación en cámara de
cultivo a la temperatura de 26ºC y en la oscuridad.
Al cabo de una semana, se realizó una selección
de las plántulas así obtenidas. Se seleccionaron los 16 individuos
necesarios para la experimentación por su homogeneidad y se
plantaron en macetas de 4 litros rellenas de vermiculita. Las
macetas se colocan bajo la tierra.
El tratamiento consiste en añadir el producto del
ejemplo 3 diluido 1.000 veces al medio nutritivo de las colzas
"tratadas". La concentración en el medio nutritivo final se
corresponde con una actividad de 150.10^{-3} \mug BAP/l. La
composición de este medio nutritivo es la de una disolución de Mazé
modificada (Mazé, 1995). Dos veces por semana, las plantas se
alimentaron de esta forma con 100 ml de esta disolución, enriquecida
o no con el producto del ejemplo 3. Por otra parte, cada dos días,
el conjunto de las plantas se riega de manera homogénea, esto en
función de sus necesidades. Este riego cesó al principio de la
maduración de los granos.
Se realizó un seguimiento durante el periodo de 1
a 16 semanas tras la plantación.
Se midió entonces el número de hojas
funcionales.
Finalmente, se escalonó la cosecha sobre seis
semanas y se realizó en el periodo de julio-agosto.
Los diferentes parámetros medidos o calculados fueron:
- -
- el peso en granos de cada planta (PDS) o rendimiento.
- -
- el número de silicuas por planta (NS/P).
- -
- el número de granos por silicua (NG/S).
- -
- el número de granos por planta (NG/P).
Los resultados recapitulados en la tabla X
muestran que el número de hojas funcionales es idéntico entre el
control y el producto del ejemplo 3.
Por otra parte, las observaciones visuales han
mostrado que las hojas de las colzas tratadas eran por lo general
más extendidas que las de los controles (superficie foliar más
grande).
Además de los análisis químicos, las
observaciones visuales realizadas durante los meses de abril a junio
(periodo durante el cual las temperaturas fueron altas en el
invernadero) han mostrado que las colzas "tratadas" parecían
resistir mejor a los déficit hídricos producidos por los golpes de
calor. Especialmente en mayo, las hojas de las plantas control se
combaron rápidamente aunque la humedad relativa del aire en el
invernadero era baja, lo que no ocurrió en el caso de las colzas que
recibieron el producto del ejemplo 3.
La cosecha de los granos y silicuas se escalona a
lo largo de seis semanas. En efecto, los granos se recogieron
manualmente con su silicua, únicamente cuando estaban maduros y
secos.
De manera general, tal como lo muestra la tabla
XI, todos los parámetros que componen el rendimiento de las colzas
"tratadas" fueron superiores a los de los controles, con la
excepción del número de granos por silicua.
Con el fin de precisar estos resultados, se
realizó un análisis de los datos recogidos semana tras semana
durante el periodo de cosecha, y los resultados se reagruparon en la
tabla XII.
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En la semana 1 y la semana 6, parece que el
rendimiento relativo en grano (PDS) de la colza "control" es
superior de manera significativa (\alpha = 0,05) al de la colza
"tratada". Por el contrario, entre la segunda y la quinta
semana, se registra el resultado inverso, ya que el 74,8% de la
producción total se ha cosechado en este intervalo de tiempo para la
colza "tratada", frente a solamente el 54,8% para el
"control".
Este resultado es particularmente importante para
el agricultor. En efecto, la cosecha en el campo se realiza de una
sola vez. Sin embargo, en ese momento, una parte de las silicuas ya
se han abierto, mientras que otras todavía no están maduras. El
agricultor debe elegir la fecha de la cosecha de manera que limite
al máximo el estas pérdidas de rendimiento. Su elección será mucho
más fácil si se acorta el periodo durante el cual se realiza la
maduración de los granos. El tratamiento del cultivo con el producto
del ejemplo 3 permite la obtención de un resultado de este
tipo.
tipo.
Además, el análisis de los componentes permite
constatar que el criterio NS/P (número de silicuas por planta) en el
caso de la colza "tratada" se correlaciona con fuerza con el
rendimiento (PDS). El coeficiente de correlación es de
r = 0,9435. El PMG (peso de 1.000 granos) tiene una influencia mínima sobre el rendimiento (coeficiente de correlación r = 0,4857).
r = 0,9435. El PMG (peso de 1.000 granos) tiene una influencia mínima sobre el rendimiento (coeficiente de correlación r = 0,4857).
Pueden realizarse las mismas observaciones en
cuanto a las plantas control. No obstante, los coeficientes de
correlación obtenidos son claramente más débiles (r = 0,0791
solamente entre PMG y PDS).
Por tanto, el número de silicuas por planta es un
criterio esencial para la determinación del rendimiento en el caso
de la colza "tratada". No obstante, conviene determinar si las
silicuas más eficaces, en términos de producción de granos, son
aquellas que tienen las mayores posibilidades de ser cosechadas en
el campo. La razón PDS/NS permite expresar esta eficacia. Se
corresponde con el porcentaje del número de silicuas cosechadas
durante el mismo
periodo.
periodo.
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En el caso de la colza control, las silicuas
menos "eficaces" (que contribuyen en la menor medida al
rendimiento) son aquellas cosechadas en las semanas 4, 5 y 6. Sin
embargo, en ese momento es cuando el mayor número de éstas llega a
la madurez (57,5%).
Por el contrario, en el caso de la colza
"tratada", la "eficacia" de las silicuas entre la segunda
y la quinta semanas es estable alrededor de la razón 1,00. En ese
momento es cuando el mayor número de silicuas llega a la madurez
(72,3%).
De esta forma, el tratamiento con el producto del
ejemplo 3 permite reducir la duración del periodo de maduración de
los granos, sin disminuir, por otro lado, la eficacia de las
silicuas en el momento en el que la producción es ópti-
ma.
ma.
Ejemplo
5.5
El ensayo se realiza en la región del Suroeste,
en el paraje de Bergerac.
En estos ensayos, se implanta con alta densidad y
la irrigación se lleva a cabo a su óptimo. Se aplica el producto del
ejemplo 3 en ausencia de fertilización nitrogenada, en tratamiento
de las semillas o de manera localizada en el suelo, a la dosis de
100 kg/ha.
El dispositivo experimental comprende bloques con
4 repeticiones. Cada parcela elemental está constituida por 6 filas
de 20 m o por 6 filas de 12 m, con cosecha de las 2 filas centrales.
Los controles realizados sobre los lotes control y tratados se
llevan a cabo sobre los elementos de rendimiento (15%), de peso de
mil granos (15%), rendimiento de granos / espiga.
El suelo es de tipo arena
arcillo-limosa, con un contenido en materia orgánica
de 1,44 y un pH de 6,9.
En este lugar y en estas condiciones
experimentales, el producto del ejemplo 3 permite ganar más de 8 a
19 quintales (15% MS) cuando se aplica de manera localizada en el
suelo, en función de las cantidades aportadas. En el caso del
tratamiento de las semillas, la ganancia se aproxima a los 14
quintales /ha; así, el producto del ejemplo 3 favorece el
rendimiento con independencia del modo de aporte. Esta variación no
se explica por el PMG ni por los otros componentes medidos, ya que
el producto del ejemplo 3 actúa de hecho sobre el componente número
de espigas por m^{2}.
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\newpage
Se ha realizado un ensayo sobre maíz variedad
Apache con un agricultor de la zona del Norte de Bretaña (Plöezal
22). La superficie de la parcela es de 2,5 Ha. Se aporta el producto
del ejemplo 3 de manera comparativa a una zona control de
Lithothamne a la dosis de 1,6 toneladas/ha. Este aporte de producto
del ejemplo 2 se corresponde con una actividad de citocinina de 0,02
mg/ha. La superficie de las parcelas elementales es de 20 m^{2}.
Cada una de las modalidades se somete a 3 repeticiones. Las siembras
se realizan el 26 de abril con una densidad de 114.000
granos/
ha.
ha.
La cosecha se realiza el 25 de octubre. Las tomas
se realizan sobre 2 metros lineales en el centro de cada parcela
elemental. Después se desgranan las espigas con una desgranadora
manual.
Se aplica el producto del ejemplo 3 sobre un
suelo bastante limoso que se caracteriza por un déficit de calcio y
magnesio.
Este déficit cálcico requiere un aporte de 2,45 T
de CaO, que se reparte durante 3 años, Así, el aporte de producto
del ejemplo 3 cubre, el primer año, el tercio de las necesidades de
calcio.
La producción de granos recogida en 2 metros
lineales y obtenida para cada una de las modalidades, así como para
cada una de las repeticiones correspondientes se presenta en la taba
XVI:
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En las condiciones de la experimentación, el
aporte del producto del ejemplo 3 mejora, con respecto a una
enmienda tradicional de Lithothamne, el rendimiento en granos en más
del 10%. El rendimiento (15% de MS) por hectárea pasa de esta forma
de 94,9 quintales para el Lithothamne a 105,2 quintales para el
producto del ejemplo 3, es decir, un aumento de 10,3 quintales por
hectárea.
Ejemplo
5.6
Este ensayo se realizó en la región de St Gilles
(FRANCIA). Se divide un túnel de plástico en superficies iguales de
360 m^{2} aproximadamente.
El aporte de producto del ejemplo 3 antes de
plantar las plantas se compara con la técnica del agricultor que
utiliza un carbonato de calcio (40% de CaO) y de magnesio (10% de
MgO) en el suelo ácido, a razón de 1,5 toneladas por hectárea. La
dosis de producto aportado se ajusta a la cantidad de CaO propuesta
por el agricultor.
La variedad de melón Luna, injertado sobre RS841,
se dispone el 2 de febrero.
El análisis del suelo se llevó a cabo sobre las
mitades del túnel, llamadas "Norte" (carbonato de Ca y Mg) y
"Sur" (producto del ejemplo 3). Los resultados subrayan la
homogeneidad relativa de las 2 partes del túnel: acidez fuerte (pH
del agua = 5,3), tendencia marcada a la acidificación (pH de KCl =
4,6).
Se calcularon los porcentajes de saturación de
los cationes (Ca, Mg, K) con respecto a la capacidad de
intercam-
bio.
bio.
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\vskip1.000000\baselineskip
Se llevó a cabo el control sobre el número de
melones producidos diferenciando tres clases de calibre
correspondientes a cada fecha de cosecha. Para cada una de las
clases, se midió el peso medio de un fruto.
La cosecha de los melones comenzó el 15 de julio
y prosiguió hasta el 25 de julio. Se realizó durante un periodo de
10 días en 6 momentos diferentes.
Los resultados obtenidos se mencionan en la tabla
XVIII.
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(Tabla pasa a página
siguiente)
\newpage
Al final de la cosecha, las zonas tratadas con el
producto del ejemplo 3 producen del orden de 173,3 melones/100
m^{2} frente a 110,8 melones/100 m^{2} para el control, lo que
corresponde a un aumento de la producción del 43,8%.
Este aumento no se realiza en detrimento del
calibre de la producción. Al contrario, esta mejor productividad se
acompañó de un aumento de los calibres grandes (+ 43,9%) y de los
calibres medios (+ 42,6%), tal como lo muestran los resultados
mencionados en la tabla XIX.
Las zonas tratadas presentan igualmente una mejor
precocidad, que se corresponde con los periodos en los que las
cotizaciones del melón son las más elevadas.
En resumen, durante el periodo del 15/07 al
25/07, la comparación de dos fórmulas de enmienda aportadas al
suelo, ofrece una clara preferencia en cuanto al número total de
melones, a la composición, cuyo uso se reivindica según la
invención, con un suplemento del 43,5%.
De manera general, la cantidad de materia
fertilizante que debe utilizarse en el marco de la invención será de
100 kg a 3 toneladas por hectárea para actividades biológicas
comprendidas entre 0,05 y 100.000 mg/ha.
Preferiblemente, esta cantidad será de 100 a
1.000 kg para actividades biológicas comprendidas entre 0,5 a 500
mg/ha equivalentes de BAP y más preferiblemente de 1 mg a 10 mg
equivalentes de BAP/ha.
A continuación se dará a modo de ejemplos
diversas formulaciones utilizables según la invención con
condiciones de uso de estas formulaciones.
Las enmiendas se utilizarán entre 1 y 3 T/ha. Los
abonos binarios y terciarios se aplicarán entre
400-800 kg/ha.
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Claims (10)
1. Uso por vía exógena de una asociación
constituida por al menos un derivado natural o sintético de
aminopurina o de un extracto de algas rico en tales derivados, y de
una fuente de calcio, como agente destinado para estimular el
proceso de la germinación y de la organización de las estructuras
vegetales de producción.
2. Uso según la reivindicación 1,
caracterizado porque el derivado de aminopurina citado
anteriormente es un derivado natural seleccionado del grupo que
comprende la
6-(4-hidroxi-3-metilbutil-2-enil)aminopurina,
la
6-(4-hidroxi-3-metilbutil)-aminopurina
y la 6-(dimetilalil)aminopurina.
3. Uso según la reivindicación 1,
caracterizado porque el derivado de aminopurina citado
anteriormente es un derivado sintético seleccionado del grupo que
comprende la 6-(dimetilalil)-aminopurina de
síntesis, la cinetina y la 6-bencilaminopurina.
4. Uso según la reivindicación 1,
caracterizado porque el extracto de algas enriquecido con
derivados de aminopurina se obtiene mediante un procedimiento que
comprende las siguientes etapas: lavado, molienda, extracción y
posiblemente, concentración.
5. Uso según la reivindicación 4,
caracterizado porque las algas que permiten obtener los
extractos citados anteriormente enriquecidos con derivados de
adenina se seleccionan del grupo que comprende Halydris
siliquosa, Ascophyllum nodosum, Fucus vesiculosus, Fucus
serratus y preferiblemente Halydris siliquosa.
6. Uso según una de las reivindicaciones 1 a 5,
caracterizado porque la asociación citada anteriormente
contiene una cantidad de derivados de aminopurina o de extractos de
algas enriquecidos con tales derivados que permiten la obtención de
una actividad comprendida entre 500 y 5.000, expresada en
microgramos equivalentes de BAP
(6-bencilaminopurina) para 100 g de extracto seco
medida mediante la prueba de amaranto.
7. Uso según una de las reivindicaciones 1 a 6,
caracterizado porque la fuente de calcio citada anteriormente
se selecciona del grupo que comprende el alga coralífera del género
Lithothamnium, las cretas, el "trez" (arena marina
calcárea), la marga, la dolomita, las cales, las espumas de
azucareras, los lodos de calcificación de las aguas de perforación,
las escorias Thomas, los fosfatos naturales, la cianamida cálcica,
el cloruro de calcio y las sales de calcio de aminoácidos.
8. Uso según la reivindicación 7,
caracterizado porque la fuente de calcio citada anteriormente
está constituida por Lithothamnium pulverulento obtenido
especialmente mediante secado y molienda.
9. Uso según una cualquiera de las
reivindicaciones anteriores para el tratamiento de plantas,
caracterizado porque la cantidad de derivados de aminopurina
o de extractos de algas ricas en tales derivados aplicada a dichas
plantas es preferiblemente de 0,5 a 500 mg equivalentes de BAP por
hectárea y preferiblemente de 1 mg a 10 mg equivalentes por
hectárea.
10. Uso por vía exógena de una asociación
constituida por al menos un derivado natural o sintético de
aminopurina o de un extracto de algas ricas en tales derivados, y de
una fuente de calcio, como agente destinado para estimular el
proceso de la germinación y de la organización de las estructuras
vegetales de producción.
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