ES2211191T3 - Producto de transformacion microbiana. - Google Patents
Producto de transformacion microbiana.Info
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- ES2211191T3 ES2211191T3 ES99955148T ES99955148T ES2211191T3 ES 2211191 T3 ES2211191 T3 ES 2211191T3 ES 99955148 T ES99955148 T ES 99955148T ES 99955148 T ES99955148 T ES 99955148T ES 2211191 T3 ES2211191 T3 ES 2211191T3
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- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
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- C07D309/08—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom, not condensed with other rings having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
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- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/10—Antimycotics
Abstract
Un compuesto de la fórmula **FORMULA**
Description
Producto de transformación microbiana.
La presente invención se dirige a la síntesis de
un nuevo agente antifúngico preparado mediante biotransformación
del compuesto conocido sordarina.
Sordarina es un antibiótico antifúngico aislado a
partir del ascomiceto Sordaria araneosa (ver la Patente
Británica GB 1.162.027, y Helvetica Chimica Acta, 1971,
51:119-20). Se ha informado de otros compuestos
teniendo el esqueleto de sordarina siendo también agentes
antifúngicos. El documento kokai japonés J62040292 describe el
compuesto zofimarín aislado a partir de Zopfiela marina sp;
el documento kokai japonés J06157582 describe el compuesto
BE-31405 aislado a partir de Penicillium sp.;
y SCH57404 que se informa en J. Antibiotics, 1995, 48:
1171-1172. Se informa de derivados semisintéticos
de sordarina en las Solicitudes PCT WO96/14326 y WO/9614327. Los
compuestos presentan actividad antifúngica frente a hongos
incluyendo Sacharomyces cerevisiae, Candida albicans, C.
glabrata y C. tropicalis.
La presente invención se dirige a la síntesis del
nuevo compuesto antifúngico de la fórmula
Este compuesto se prepara mediante
biotransformación de sordarina. El compuesto tiene actividad
antifúngica frente a numerosos hongos patógenos incluyendo
Candida ssp., pero es significativo porque da lugar a una
serie de derivados de sordarina que son inaccesibles de forma
química.
Esta invención también se refiere a un proceso
para la preparación del compuesto mediante fermentación de
Actinomyces ssp. MA7235, nº ATCC 202103 en la presencia del
compuesto sustrato sordarina.
La invención también se refiere a composiciones
farmacéuticas conteniendo una cantidad terapéuticamente efectiva de
compuesto I en combinación con un vehículo farmacéuticamente
aceptable.
De forma adicional, la invención se refiere a un
procedimiento para tratamiento de infecciones fúngicas agrícolas, y
a la fabricación de medicamentos para tratar infecciones fúngicas
en un mamífero.
Se describe el compuesto I de la fórmula
o una sal farmacéuticamente aceptable o
hidrato adecuado para lo mismo que puedan producirse mediante un
proceso de biotransformación. El compuesto de la presente invención
se prepara mediante fermentación de l microorganismo Actinomyces
ssp. MA7235, nº ATCC 202103 en la presencia del compuesto
sustrato sordarina, de la
fórmula:
bajo condiciones
apropiadas.
Se ha depositado una muestra del microorganismo
Actinomyces sp. bajo el Budapest Treaty en la colección de
cultivos de la American Type Culture Collection el 1 de abril de
1998 en 12301 Parklawn Drive, Rockville Md. 20852, y se le asignó
el número de acceso ATCC 202103.
MA7235 puede describirse de forma general como
sigue. Las observaciones acerca del crecimiento y de las
características generales de cultivo se realizaron de acuerdo con
los métodos de Shirling y Gottleib (International J. System.
Bacteriol. 16:313-340). Se determinó la composición
química de las células los métodos de Lechevalier y Lechevalier (en
Actinomycete Taxonomy, A. Dietz y D. W. Thayer, Ed. Society for
Industrial Microbiology, 1980). Los ácidos grasos celulares totales
se derivatizaron y analizaron como ésteres metílicos (Fames)
mediante cromatografía de gases según el procedimiento de Miller y
Verger usando un sistema MIDI Microbial Identification (Microbial
Identification Systems, Newark, Delaware). La coloración del
cultivo se determinó por comparación con los patrones de color en
los gráficos de color Munsell (Macbeth Division of Kollmorgen
Instruments Corp. P.O. Box 230 Newburgh, NY
12551-0230).
El péptidoglicano contiene ácido
mesodiaminopimélico, y el extracto celular total contiene
arabinosa, galactosa y ramnosa.
Buen crecimiento sobre agar de extracto de
levadura de malta (YME) y agar Czapeks (CZ). Crecimiento moderado
sobre agar de harina de avena y agar de glicerol asparagina (Gas).
Crecimiento pobre sobre agar de almidón de sal inorgánica (ISS) y
agar de agua complementado con NZ-Amina A (tabla
1).
Sin micelios aéreos. El micelio sustrato es de
color naranja (7,5 YR/7/8) y tiene textura de cuero.
Hifas vegetativas muy ramificadas. No se
observaron hifas aéreas y no se observaron estructuras de
esporas.
El análisis FAME reveló que el extracto celular
total contenía cantidades importantes de los ácidos grasos 16:0
ISO, 16:0 ISO 2 OH, y 17:1 Cis 9 (tabla 2).
El análisis celular total reveló que MA7235 tiene
una pared celular de tipo IV. Las observaciones microscópicas
revelaron que MA7235 es filamentoso pero que no produce
características diferenciantes. Se informa de que aquellas cepas que
tienen pared celular tipo IV pertenecen a bacterias
Nocardiaceae y Nocardioforma (7). MA7235 no contiene
ácido tuberculastérico y por tanto no puede considerarse como un
miembro de las Nocardiaceae. MA7235 no comparte ninguna
propiedad fenotípica con las Nocardiformes y no se agrupa con ellas
por análisis de los ácidos grasos. Por tanto, se asignará a MA7235
una identificación de Actinomycetes sp.
- ND-sin colores que informar.
La presente invención puede llevarse a cabo
mediante cualquier cepa de Actinomycetes sp. capaz de
producir el compuesto I y la cepa con nº ATCC 202103 es
particularmente preferida.
En general, el compuesto I puede producirse
cultivando el microorganismo anteriormente descrito en la presencia
de una concentración apropiada del compuesto sustrato sordarina en
un medio nutriente acuoso conteniendo fuentes de carbono y
nitrógeno asimilables.
El compuesto sustrato sordarina puede obtenerse
como se ha descrito previamente o mediante procedimientos orgánicos
sintéticos.
El compuesto tiene propiedades antimicrobianas, y
puede ser útil para controlar infecciones fúngicas sistémicas y
superficiales en seres humanos. De forma adicional el compuesto
presenta actividad frente a ciertos patógenos fúngicos de plantas y
puede ser útil como un agente antifúngico de amplio espectro para
cosechas.
El compuesto de esta invención tiene propiedades
antimicrobianas y es especialmente útil como una nueva plataforma
para agentes antifúngiccos y organismos causantes de infecciones
micóticas patógenas humanas sistémicas, tales como Candida
sp.y Cryptococcus neoformans. Estas propiedades pueden
utilizarse de forma efectiva administrando composiciones conteniendo
una cantidad antifúngica del compuesto a un área, objeto, o sujeto
en o sobre el cual deben controlarse los hongos. Así, son aspectos
de la presente invención las composiciones conteniendo una cantidad
efectiva antifúngica del compuesto y su uso para el control de
hongos. Un aspecto especialmente preferido de la presente invención
son composiciones en un vehículo farmacéuticamente aceptable y su
uso para el control de infecciones micóticas administrando una
cantidad terapéuticamente efectiva del compuesto.
El compuesto I puede ser útil como agente
antifúngico, especialmente como un agente antimicótico, lo que puede
demostrarse con el compuesto en un ensayo de microdilución con caldo
para la determinación de la concentración inhibitoria mínima (MIC).
Se encontró que el compuesto es efectivo frente a hongos
seleccionados por su resisten-
cia / susceptibilidad a compuestos conocidos, virulencia animal, fuente e importancia clínica, a concentraciones comparables a las de un agente antifúngico establecido, anfotericina B.
cia / susceptibilidad a compuestos conocidos, virulencia animal, fuente e importancia clínica, a concentraciones comparables a las de un agente antifúngico establecido, anfotericina B.
En el ensayo de dilución de microcaldo, se
seleccionaron los microorganismos inoculando 5 ml de caldo YNBD
(levadura base nitrógeno con dextrosa al 2%; Difco) con 50
microlitros de cultivo de levadura guardado en forma de almacenaje
en glicerol al 20% a -76ºC o mediante veteado de un cultivo de
levadura sobre agar dextrosa Sabouraud (SDA) e incubando durante
24-48 horas a 35 - 37ºC. Se seleccionaron entre tres
y cinco colonias características y se transfirieron a una placa
fresca y se incubaron en similares condiciones. Se seleccionaron de
3 a 5 colonias a partir del recrecimiento y se suspendieron en 5 ml
de caldo YNBD. Los cultivos líquidos se incubaron durante 16 horas
a 35 - 37ºC en un tambor cilíndrico girando a 56 rpm. Los cultivo
en caldo a 16 horas se ajustaron ópticamente a una OD_{600} de
0,01 por dilución en YNBD y se incubaron durante 5 horas a 35 -37ºC
en un tambor cilíndrico girando a 56 rpm. Los cultivos se diluyeron
aún más en YNBD hasta una OD_{600} de 0,0014, resultando en una
concentración de 1 - 5 x 10^{4} ufc/ml, lo que se usó como
inóculo.
El compuesto de ensayo se disolvió a 128
\mug/ml en metanol al 20% y se diluyó dos veces en YNBD para
conseguir una concentración de 64 \mug/ml en metanol al 10% en el
primer pocillo de una placa de 96 pocillos con fondo en U. Los
compuestos de la columna 1 se diluyeron secuencialmente en serie dos
veces, y se añadió 75 ml de la suspensión celular en cada pocillo
resultante en una dilución dos veces más del compuesto para
producir concentraciones de 32 mg/ml a 0,0075 mg/ml.
Sordarina, el compuesto control, se preparó como
se ha descrito anteriormente para el Compuesto 1.
Las placas conteniendo los componentes diluidos y
el inoculo celular se incubaron durante 48 h a
35-37ºC con determinaciones de MIC (concentración
inhibitoria mínima) realizadas tras 24 horas y 48 horas de
incubación. Los controles de crecimiento y esterilidad para cada
organismo y chequeos de esterilidad para los compuestos también se
llevaron a cabo.
\newpage
| Compuesto I | MIC 24 |
| C. albicans | 100 mg/ml |
En vista de la actividad, el compuesto de la
presente invención, bien en forma singular o como una mezcla, es
adaptable a utilizarse en diferentes aplicaciones para
composiciones antifungicas. En tal caso, los compuestos pueden
mezclarse con un vehículo biológicamente inerte, generalmente con la
ayuda de un agente dispersante tensioactivo, la naturaleza de la
cual variaría dependiendo de si el uso es para el control de
patógenos infectando humanos o animales, o para el control de
hongos en agricultura tales como en el suelo o en partes de la
planta, o para el control de hongos en objetos inanimados.
En composiciones para aplicaciones medicas, el
compuesto puede mezclarse con un vehículo farmacéuticamente
aceptable, la naturaleza del cual variara dependiendo de si la
composición va a ser tópica, parenteral u oral.
Si la mencionada aplicación va a ser tópica, el
fármaco puede formularse en cremas convencionales y ungüentos tales
como vaselina blanca, lanolina anhidra, alcohol cetílico, crema
hidratante, monoestearato de glicerilo agua de rosas y
similares.
Para aplicaciones parenterales, los compuestos
pueden formularse en soluciones parenterales convencionales tales
como cloruro de sodio al 5% o dextrosa al 5% en agua, u otras
composiciones farmacéuticamente aceptables.
Las composiciones para administración oral pueden
prepararse mezclando los fármacos componentes con cualquier medio
farmacéutico usual, entre los que se incluyen aquellos para
preparaciones líquidas vehículos líquidos tales como agua,
glicoles, aceites, alcoholes y similares; y para preparaciones
sólidas tales como cápsulas y comprimidos, vehículos sólidos como
almidones, azucares, caolín, etil celulosa, agentes dispersantes
tensioactivos, generalmente con lubricantes tales como estearato de
calcio, junto con ligantes, agentes desintegrantes y similares.
Agua es el vehículo líquido preferido para el compuesto de la
invención.
Estas composiciones se administran posteriormente
en cantidades suficientes para obtener el efecto antifúngico
deseado. Para aplicaciones médicas, el procedimiento comprende
administrar a un sujeto necesitado de tratamiento una cantidad
terapéuticamente efectiva de los compuestos. La dosis apropiada
variará dependiendo de la edad, severidad, peso corporal y otras
condiciones. Para aplicaciones tópicas, las composiciones se
aplican directamente al área cuyo control se desea. Para
administraciones internas, la composición puede aplicarse mediante
inyección o puede administrarse oralmente.
En aplicaciones no médicas, el producto de la
presente invención, bien solo o como una mezcla, puede emplearse en
composiciones en un vehículo inerte que incluye diluyentes líquidos
o sólidos finamente divididos, extensores, rellenos,
acondicionantes y excipientes, incluyendo diferentes arcillas,
tierra de diatomeas, talco y similares o agua y diferentes líquidos
orgánicos tales como alcanoles inferiores tales como etanol e
isopropanol.
Las composiciones para inyección, una ruta
preferida de suministro, pueden prepararse en forma de dosificación
unitaria en ampollas, o en contenedores multidosis. Las
composiciones inyectables pueden tomar la forma de suspensiones,
soluciones, o emulsiones en vehículos acuosos u oleosos, y puede
contener diferentes agentes formulantes. De forma alternativa, el
ingrediente activo puede estar en forma de polvo (liofilizado o no
liofilizado) para su reconstitución en el momento de la aplicación
con un vehículo adecuado, tal como agua estéril, suero salino u
otro líquido inyectable, por ejemplo, aceite de cacahuete para
inyecciones intramusculares. Igualmente, pueden incluirse varios
agentes tamponantes, conservantes y similares.
Las aplicaciones tópicas pueden formularse en
vehículos tales como bases hidrófobas o hidrófilas para formar
ungüentos, cremas, lociones en líquidos acuosos, oleaginosos o
alcohólicos para formar pinturas o en diluyentes secos para
conformar polvos.
Las composiciones orales pueden tomar la forma de
comprimidos, cápsulas, suspensiones orales y soluciones orales. Las
composiciones orales pueden utilizar vehículos tales como agentes
formulantes convencionales, y pueden incluir propiedades de
liberación continua así como formas de liberación rápida.
La dosificación a administrar depende en una gran
parte del estado y tamaño del sujeto siendo tratado, la ruta y
frecuencia de administración, la sensibilidad del patógeno al
compuesto particular seleccionado, la virulencia de la infección y
otros factores. Tales materias, sin embargo, se dejan a la
discreción rutinaria del médico de acuerdo con los principios de
tratamiento bien conocidos en las técnicas antibacterianas. Otro
factor influyendo el régimen preciso de dosificación, a parte de la
naturaleza de la infección y de la identidad particular del
individuo siendo tratado, es el peso molecular del compuesto.
Las composiciones para administración oral por
dosificación unitaria, ya sean líquidas o sólidas, pueden contener
desde aproximadamente 0,01 hasta tanto como 99,0% de material
activo, estando el intervalo preferido entre aproximadamente
10-60%. La composición contendrá generalmente entre
15 mg hasta aproximadamente 2,5 g del ingrediente activo; sin
embargo, en general, es preferible emplear cantidades de
dosificación en el intervalo entre aproximadamente 250 mg hasta
1.000 mg. En administración parenteral, la dosificación unitaria
incluirá típicamente el compuesto puro en una solución estéril de
agua o en la forma de un polvo soluble preparado para solución, que
puede ajustarse al pH neutro e isotonicidad.
Los procedimientos preferidos de administración
de los compuestos antifúngicos incluyen las vías oral y parenteral,
por ejemplo, infusión intravenosa, bolo intravenoso e inyección
intramuscular.
Se proporcionan los siguientes ejemplos con el
objetivo de ilustrar la presente invención.
Se inoculó una suspensión helada en glicerol de
Actinomyces ssp. MA7235 en 25 ml del medio de producción
preferido (BASA glucosa 10 g/l, extracto de levadura 20 g/l, Hycase
20 g/l, KNO_{3} 2,0 g/l, NaCl 0,5 g/l, MgSO_{4} 0,5 g/l, CuCl
0,02 g/l, FeSO_{4} 0,025 g/l, ZnSO_{4} 0,01 g/l, MnSO_{4}
0,005 g/l, pH hasta 7 mediante HCl) en un frasco de 250 ml,
incubado de manera aerobia durante tres días a 20ºC en un agitador
rotatorio funcionando a 200 rpm. Un mililitro del cultivo sembrado
de tres días se pasó a 25 ml de medio de producción fresco, y el
cultivo creció en las mismas condiciones
durantev20-28 horas a un pH de cultivo entre 7,2 y
8,0. Se añadió sordarina disuelta al 80% hasta una concentración
final de 0,5 g/l. El caldo cargado se extrajo con metanol 1:1 y se
centrífugo para eliminar los restos celulares antes del análisis
mediante HPLC. Se detecto la presencia del pico del Compuesto 1,
11-hidroxisordarina postcargando 24 horas el caldo
mediante separación del caldo por HOLC de fase reversa. Se uso una
columna Phenomenex Primesphere para conseguir la separación en un
sistema Spectraphysics HPLC utilizando un gradiente de acetonitrilo
y agua acidificada (H3PO4 al 0,1%). El gradiente empleado fue
acetonitrilo de 10% al 60%, y se ajustó el detector a 220 nm.
Compuesto
1
RMN ^{13}C (CD3OD): 14,2; 18,4; 21,5; 23,0;
28,9, 30,1; 30,2; 38,02; 40,1; 41,9; 43,6; 47,5; 57,1; 59,8; 68,1;
69,9; 72,2; 73,6; 75,9; 81,1; 81,2; 100,1; 132,1; 149,9, 175,3;
205,9.
RMN ^{1}H (CD3OD): 0,853 (d, 6,5,
H-20), 0,979 (d, 6,5, H-15), 1,044
(d, 7,0, H-16), 1,248 (d, 6,0,
H-6'), \sim1,25 (mult, H-4a),
\sim1,75 (mult, H-8a), 1,848 (mult,
H-10), 2,000 (dd, 4,5, 12,5, H-4b),
2,05-2,113 (3H mult, H-8b, 9, 13),
2,330 (mult, H-14), 2,384 (mult,
H-12), 2,835 (dd, 4,0 4,0 H-3),
3,132 (dd, 3,0 9,5 H-4'), 3,376 (s,
H-7'), 3,69-3,75 (3H mult,
H-2', 5', 19a), 3,838 (ddd, <1, 5,5 5,5,
H-11), 3,914 (d, 9,5, H-19b), 4,115
(dd, 4,0 4,0 H-3'), 4,587 (d, 1,0
H-1'), 6,127 (dd, 1,0 3,0 H-2),
9,636 (s, H-17).
Se registró el espectro de masas en los
espectrómetros de masas SX-102A (impacto de
electrones, EI, 90 eV) y TSQ700
(LC-MS-ESI, cromatografía líquida -
ionización por electrospray). Se realizaron determinaciones exactas
de masa a alta resolución (HR-EI) usando
perfluoroqueroseno (PFK) como patrón interno. Se observó el ion
molecular del Compuesto I a m/z 380. Las medidas de masa EI
mediante escáner de alta resolución sugirió una formula molecular de
C_{21}H_{32}O_{6}; encontrado 380,2187, calculado
380,2199.
Los espectros de ^{1}H y ^{13}C se
registraron a 500 MHz o 125 MHz respectivamente en un espectrómetro
Varian Unity 500 equipado con una sonsa de detección microinversa
Nalorac. Los desplazamientos químicos se detallan en ppm contando
desde el TMS (tetrametil lilano), y los espectros se referenciaron
al pico del solvente (3,30 / 49,0 ppm, ^{1}H/^{13}C).
Se inoculó una suspensión helada en glicerol de
Actinomyces ssp. MA7235 en 25 ml del medio de producción
preferido (BASA, pH 7) en un frasco de 250 ml, incubado de forma
aerobia durante tres días a 29ºC en un agitador rotatorio
funcionando a 200 rpm. Los 25 ml del cultivo sembrado primario de
tres días se pasó a 600 ml de medio de producción fresco, y se hizo
crecer un día más para generar una siembra de segunda etapa. El
cultivo siembra de segunda etapa se inoculó en un fermentador
Chemap de 23 l relleno con un lote de 15 litros de medio de
producción (BASA) al cual se había añadido 1 g/L de polietilén
glicol P''000 como agente antiespumante. La temperatura del
fermentador se controló a 29ºC, y el cultivo se agitó a 400 rpm. Se
disolvió sordarina al 80% en etanol, y se añadió al fermentador en
concentraciones bien de 0,25 g/l o bien de 0,5 g/l. El lote de 0,25
g/L se cargó con sustrato a las 22 horas tras el inóculo, y el lote
de 0,50 g/L se cargó a las 20 horas tras el inóculo. Los lotes se
mezclaron con un volumen igual de metanol y se almacenaron a 4ºC.
El pH del cultivo en el momento de la adición estuvo entre 7,2 y
8,0, y se produjo Compuesto I durante el periodo de 12 horas
posterior a la carga, determinado mediante los mismos criterios de
HPLC detallados en Ejemplo 1.
Caldo procedente de dos fermentadores de 23
litros preparados según describe el Ejemplo 2 se extrajo con un
volumen igual de metanol. El extracto se diluyó con H_{2}O y se
ajustó a pH 3 con H3PO3 concentrado. La solución se adsorbió sobre
una columna de dos litros Mitsubishi en modo flujo ascendente a un
caudal de 400 ml / min. Tras la adsorción, la columna se lavó con
20 litros de una solución de metanol / H_{2}O (4 : 1). Las
fracciones 2 - 5, de un litro cada una, contenían Compuesto I. Las
fracciones 2 - 5 se combinaron y concentraron a vacío hasta 1
litro. La solución se diluyó con 1 litro de H_{2}O y se ajustó
hasta un pH aproximado de 11 añadiendo 40 ml de NaOH 5,0 N. Esta
solución se extrajo dos veces con un volumen igual de EtOAc. El pH
de la capa acuosa se ajustó hasta pH 2,5 con H_{2}SO_{4}
concentrado, y se extrajo dos veces con un volumen igual de EtOAc.
Las capas de EtOAc se combinaron y lavaron una vez con H2O, una vez
con salmuera, y se secaron con Na_{2}SO_{4} anhidro. El
Na_{2}SO_{4} se eliminó mediante filtración, y la solución se
concentró a vacío.
El Compuesto I crudo obtenido anteriormente se
purificó aún mas mediante cromatografía en columna de sílica gel 60
(E. Merk, malla 230 - 400, 750 ml). La columna se equilibró con una
solución de EtOAc conteniendo ácido acético glacial al 1% y se
eluyó a 25 ml /min. Se recogieron las fracciones, de 25 ml cada una,
y el compuesto I se recuperó en las 87 - 133. La purificación final
del Compuesto I se puedo realizar mediante HPLC RP preparativa
sobre Phenomenex Primesphere C8 usando una fase móvil consistiendo
en metanol / H_{2}O (1 : 1) conteniendo H_{3}PO_{4} al 0,1%.
La purificación final del Compuesto I como la sal de potasio se
realizó por conversión a la sal de potasio y cristalización a
partir de una mezcla de isopropanol : acetonitrilo (1:2).
Los siguientes ejemplos ilustran composiciones
representativas conteniendo Compuesto I
Se preparan 1.000 comprimidos cada uno
conteniendo 500 miligramos de Compuesto 1 a partir de la siguiente
formulación:
| gramos | |
| Compuesto I | 500 |
| Almidón | 750 |
| Hidrógeno fosfato dicálcico | 5.000 |
| Estearato cálcico | 2,5 |
Los ingredientes finamente pulverizados se
mezclan bien y se granulan con una pasta de almidón al 10 por
ciento. La granulación se seca y se comprime en forma de
comprimidos.
Se preparan 1.000 cápsulas de gelatina, cada una
conteniendo 500 miligramos de Compuesto 1 a partir de la siguiente
formulación:
| gramos | |
| Compuesto I | 500 |
| Almidón | 250 |
| Lactosa | 750 |
| Talco | 250 |
| Estearato cálcico | 10 |
Se prepara una mezcla uniforme de los
ingredientes combinándolos u usándolos para rellenar cápsulas de
gelatina dura en dos piezas.
Se preparan 250 ml de una solución inyectable
mediante procedimientos convencionales a partir de la siguiente
formulación:
\newpage
| Dextrosa | 12,5 gramos |
| Agua | 400 miligramos |
| Compuesto I | 250 mililitros |
| Los ingredientes se combinan y esterilizan para uso. |
Puede prepararse un ungüento adecuado para
aplicación tópica dispersando íntimamente 13 mg de compuesto I en 1
g de gel comercialmente disponible de polietileno /
hidrocarburo.
Puede prepararse una composición para aerosol
teniendo la siguiente formulación (por cánister):
| Compuesto I | 24 mg |
| Lecitina NF, concentrado líquido | 1,2 mg |
| Triclorofluorometano | 4,075 g |
| Diclorodifluorometano | 12,15 g |
Aunque la descripción anterior muestra los
principios de la presente invención, debe entenderse que la
práctica de la invención engloba todas las variaciones casuales,
adaptaciones, modificaciones, supresiones o adiciones a los
procedimientos y protocolos descritos en la presente memoria, así
como están comprendidas en el alcance de las siguientes
reivindicaciones y sus equivalentes.
Claims (7)
1. Un compuesto de la fórmula
2. Un procedimiento para la preparación del
compuesto de la Reivindicación 1 que comprende
a. poner en contacto un compuesto de la
fórmula
con Actinomyces spp. MA7235, ATCC nº
202103 o un mutante adecuado del mismo;
y
b. aislar el compuesto de la Reivindicación 1
3. Una composición antifúngica comprendiendo una
cantidad antifúngica del compuesto de la Reivindicación 1 y un
vehículo biológicamente inerte, o diluyente adecuado del mismo.
4. La composición de acuerdo con la
Reivindicación 3 en la que el vehículo es un vehículo
farmacéuticamente aceptable.
5. El uso de un compuesto como el que se
reivindica en la Reivindicación 1 para la fabricación de un
medicamento para tratar infecciones fúngicas en un mamífero.
6. Un procedimiento para tratar infecciones
fúngicas en la agricultura que comprende administrar al campo donde
está el cultivo a tratar una cantidad defectiva del compuesto de la
Reivindicación 1.
7. Un cultivo biológicamente puro de bacterias
(ATCC 202103) capaz de producir el compuesto de la Reivindicación
1.
Applications Claiming Priority (2)
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