ES2208934T3 - Uso de bronopol para el tratamiento de enfermedades. - Google Patents
Uso de bronopol para el tratamiento de enfermedades.Info
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Abstract
LA INVENCION SE REFIERE AL USO DEL BRONOPOL (BROMO-2NITROPROPANO-1,3-DIOL), EN EL TRATAMIENTO DE DIFERENTES ENFERMEDADES DE ORGANISMOS ACUATICOS, PARTICULARMENTE PECES SALMONIDOS Y SUS HUEVOS. LAS ENFERMEDADES QUE PUEDEN TRATARSE INCLUYEN AQUELLAS PROVOCADAS POR INFECCIONES FUNGALES (TALES COMO LA SAPROLEGNIA PARASITICA); INFECCIONES PROTOZOOARIAS, BIEN FLAGELATOS (TALES COMO EL ICHTHYOBODO NECATRIX) O CILIATOS (TALES COMO EL ICTHYOPHTHRIUS MULTIFILIIS); BACTERIAS (TALES COMO EL FLAVOBACTERIUM BRANCHIOPOHILUM); Y MIXOBACTERIAS (TALES COMO LA CYTOPHAGA PSYCROPHILA). TAMBIEN SE DESCRIBE UN PROCEDIMIENTO PARA DESINFECTAR TANQUES PARA PECES Y/O EQUIPOS PARA PECES UTILIZANDO UNA SOLUCION DE BRONOPOL.
Description
Uso de bronopol para el tratamiento de
enfermedades en peces.
Esta invención se refiere al tratamiento de
infecciones fúngicas (especialmente producidas por Saprolegnia
parasitica) de peces, particularmente, pero no exclusivamente,
de trucha, salmón y salmónidos en general. La invención también
proporciona tratamientos de otras enfermedades de peces tales como
infecciones bacterianas (por ejemplo, enfermedad bacteriana de las
branquias - Flavobacterium branchiophilum y
Cytophaga psychrophila), infecciones por protozoos
tales como ciliados (por ejemplo, Ichthyophthirius
multifiliis) y flagelados (por ejemplo Ichthyobodo
necatrix).
Saprolegnia parasitica es un parásito
fúngico que se extiende rápidamente y que es fatal, que afecta
tanto a los peces como a los huevos de los peces. Convencionalmente
se trata con verde malaquita (diaminotrifenilmetano), pero aunque
este tratamiento es muy eficaz, el uso de verde malaquita lleva
consigo varios problemas potenciales: se ha sugerido que el
compuesto es un posible carcinógeno y teratógeno, aunque estos
efectos aún no se han demostrado; al ser un colorante fuerte,
tiende a colorear el agua y en ciertas condiciones ocasiona la
tinción de los peces que se han tratado; tiene un período de
mantenimiento relativamente largo, de forma que pueden estar
presentes residuos significativos en los peces tratados cuando se
recogen y se venden para el consumo; y el compuesto no está
autorizado como un medicamento veterinario, y actualmente está
prohibido su uso en los criaderos federales de los Estados Unidos.
El artículo de D.J. Alderman en Journal of Fish Diseases 8
(1985) 289-298 proporciona una revisión del uso de
verde malaquita en el tratamiento de enfermedades de peces, y
describe algunos de los problemas asociados con dicho agente.
Una alternativa disponible actualmente al verde
malaquita es la formalina, que es la substancia que se usa
actualmente en los criaderos federales de los Estados Unidos. Sin
embargo, debido a la irritación de esta substancia, sólo puede
usarse en condiciones estrictamente controladas. Por lo tanto,
existe la necesidad de un tratamiento mejorado para enfermedades
fúngicas y otras enfermedades de peces, particularmente uno que
combine una alta eficacia con una baja toxicidad. En el pasado se
han hecho muchos intentos de identificar nuevos tratamientos y los
resultados de la selección de 40 substancias alternativas
potenciales indican en el artículo de D.J. Alderman que aparece en
Journal of Fish Diseases 5 (1982) 113-123,
que también indica protocolos convencionales para el ensayo de
tratamientos candidatos. Sin embargo, a pesar de éste y de otros
trabajos (tales como los descritos en el artículo de T.A. Bailey que
aparece en Aquaculture 38 (1984) 97-104),
los solicitantes no son conscientes de ningún tratamiento
alternativo adecuado al verde malaquita y a la formalina que haya
alcanzado su sitio en el mercado.
El documento GB 22263063 describe una composición
contra las úlceras de peces basada en una mezcla de formaldehído,
una sal de amonio cuaternario que tiene actividad bactericida y un
alcanodiol bromado que por sí mismo tiene actividad
antibacteriana.
El resumen del documento HU38833 se refiere a un
antifungicida y a un producto antimicrobiológico que comprende un
0,5% de bradofen, un 0,05% de bronopol y un 5% de silicio
hidrófilo, para usos que incluyen aplicaciones veterinarias.
Ahora se ha descubierto que el bronopol
(2-bromo-2-nitropropano-1,3-diol)
tiene buena actividad a una concentración relativamente baja contra
Saprolegnia parasitica, y que es seguro en el uso. El
bronopol es un compuesto conocido y se usa en concentraciones
comprendidas entre el 0,01 y el 0,2% como un conservante
antimicrobiano y antiséptico en formulaciones farmacéuticas
tópicas, cosméticos y artículos de tocador. Sin embargo, en el
"Handbook of Pharmaceutical Excipients" publicado por The
Pharmaceutical Press (1994) se indica que uno de los inconvenientes
principales del bronopol es su actividad relativamente deficiente
contra levaduras y mohos. Por lo tanto, es sorprendente que el
bronopol sea eficaz a concentraciones relativamente bajas contra
Saprolegnia.
Como se describirá con más detalle a
continuación, se ha demostrado que el bronopol es eficaz contra la
infección por Saprolegnia parasitica en salmón, trucha y
huevos de trucha. Sin embargo, se prevé que el tratamiento sea
eficaz contra la misma infección en otras especies de salmónidos, y
de hecho en otros peces (por ejemplo, peces ornamentales o
mascotas), huevos de peces y otras criaturas acuáticas (tales como
camarones o gambas) en general. Es de esperar que también sea eficaz
contra otras infecciones fúngicas. Además, como en los ensayos
descritos más adelante se ha demostrado que el bronopol previene o
ralentiza la propagación de la infección, también puede usarse como
profiláctico.
El bronopol es un producto comercial disponible a
partir de varias fuentes. Puede fabricarse por la reacción de
nitrometano con paraformaldehído en un medio alcalino, seguido de
bromación. También se sabe que algunos compuestos (tales como
5-bromo-5-nitro-1,3-dioxano)
se rompen para liberar bronopol, y por lo tanto la invención
también se extiende al uso de tales compuestos en lugar de
bronopol.
Preferiblemente, la concentración de bronopol en
el baño de tratamiento está en el intervalo de 5 mg.l^{-1} a 200
mg.l^{-1}, e idealmente de 10 mg.l^{-1} a 100 mg.l^{-1}. El
bronopol es una substancia sólida cristalina y convenientemente
puede prepararse como una solución en un disolvente polar, tal como
agua o Dowanol (monoetiléter de dipropilenglicol).
El ensayo 1 (presentado más adelante) se realizó
en condiciones suavemente alcalinas (a un valor de pH de
aproximadamente 7,4 a 7,5) y es posible que estas condiciones sean
favorables para la actividad antifúngica demostrada por el
bronopol.
De esta manera, la invención proporciona, en un
aspecto, el uso de bronopol
(2-bromo-2-nitropropano-1,3-diol)
en la fabricación de un medicamento para el tratamiento o
profilaxis de cualquiera de las siguientes enfermedades en peces:
infecciones fúngicas, infecciones por protozoos flagelados,
infecciones por protozoos ciliados, enfermedad bacteriana de las
branquias, e infecciones por mixobacterias, donde dicho medicamento
contiene bronopol como ingrediente activo único o principal contra
las enfermedades mencionadas anteriormente. Las enfermedades pueden
producirse por cualquiera de los siguientes organismos causantes:
Saprolegnia parasitica, Icthyobodo necatrix, Icthyophthirius
multifiis, Flavobacterium branchiophilum y Cytophaga
Psychrophila. Las enfermedades pueden ser enfermedades de peces
salmónidos, en particular enfermedades de la trucha o del
salmón.
En otro aspecto, la invención proporciona un baño
de tratamiento para el tratamiento o profilaxis de cualquiera de las
siguientes enfermedades en peces: infecciones fúngicas, infecciones
por protozoos flagelados, infecciones por protozoos ciliados,
enfermedad bacteriana de las branquias e infecciones por
mixobacterias, conteniendo el baño de tratamiento bronopol a una
concentración en el intervalo de 1 a 1000 mg.l^{-1} (ppm) como
ingrediente activo único o principal contra tales enfermedades.
Durante los ensayos, el bronopol también se
ensayó contra otras diversas enfermedades de peces, y se descubrió
que era eficaz contra Ichthyobodo necatrix, que es un
protozoo flagelado ectoparásito, Flavobacterium
branchiophilum (el organismo causante de la enfermedad
bacteriana de las branquias) y Cytophaga Psychrophila, que
es una mixobacteria y el organismo causante del síndrome de la
trucha arco iris, la enfermedad de agua fría, enfermedad en la zona
caudal o dorsal (Saddleback disease) y la enfermedad del pedúnculo
en peces salmónidos. La actividad contra Cytophaga indica
una posible eficacia contra las mixobacterias en general, y la
actividad contra Ichthyobodo sugiere la eficacia contra flagelados
en general, así como protozoos ciliados tales como
Ichthyophthirius multifiliis.
El principal uso práctico de la actividad contra
Cytophaga probablemente es en la desinfección de depósitos y
de equipos y la invención, por lo tanto, incluye un método para
desinfectar depósitos de peces y/o instrumentos para uso en la cría
de peces, comprendiendo el método la etapa de exponer el
depósito/equipo a una solución que contiene bronopol como
ingrediente activo único o principal, estando el bronopol presente
en una concentración comprendida entre aproximadamente 1 y 2000
mg.l^{-1}, más preferiblemente de 5 a 1000 mg.l^{-1}. El tiempo
de exposición preferiblemente está comprendido entre 2 y 40
minutos.
La invención se describe en lo sucesivo con más
detalle sólo a modo de ejemplo, haciendo referencia a los siguientes
ensayos experimentales:
Este ensayo se realizó usando los procedimientos
descritos en Journal of Fish Diseases (1982) 5,
113-123, citado anteriormente.
Un cultivo de Saprolegnia parasitica se
mantuvo a 16ºC en agua de río, glucosa, agar con extracto de
levadura (RGY), que constaba de extracto de levadura (1 g),
D(+)glucosa (5 g) y agar (12 g) en 1 l de agua de río. Se sembraron
placas de RGY con el organismo de ensayo y se incubaron a 25ºC
hasta que el crecimiento cubrió el diámetro entero de la placa
(aproximadamente 72 horas). Se cortaron discos de los 10 mm
exteriores del cultivo, usando un punzón de 4 mm de diámetro
(adaptado de un punzón de pocillos de cromatografía en gel por
soldadura de un asa) y después se usaron como inóculos estándar
para el ensayo).
Ensayo
1A
Se ensayó la actividad del bronopol contra los
cultivos de Saprolegnia parasitica a diferentes
concentraciones que variaban de 50 mg.l^{-1} a 100 mg.l^{-1},
usando el protocolo II del artículo de J. Fish Diseases mencionado
anteriormente, como se indica a continuación. Se esterilizaron
membranas de filtro de policarbonato con una porosidad de 0,2
\mum y un diámetro de 25 mm (Nuclepore; Sterlin) por tratamiento
en autoclave y después se pusieron en la superficie de placas RGY
(7 por placa petri de 90 mm). Después se puso un inoculo de disco
de 4 mm estándar, invertido, en el centro del filtro. Las placas que
contenían los filtros después se incubaron hasta que la red
miceliana resultante casi había alcanzado el borde de los filtros.
Los inóculos originales después se cortaron (en la medida de lo
práctico) usando puntas de pinzas calientes para evitar alterar la
red miceliana que no estaba adherida fuertemente. Las redes
micelianas junto con sus filtros de soporte se despegaron de la
superficie de agar presente sobre los filtros, se transfirieron a
placas petri vacías y estériles y se sumergieron completamente en
la solución de bronopol a concentraciones seleccionadas. Al final
del período de exposición de 1 hora, la solución de bronopol se
retiró por aspiración y se reemplazó por dos lavados con agua de río
estéril (durante 5 y 30 minutos, respectivamente) antes de
transferir la red miceliana y el filtro, el filtro en la parte más
superior, a la superficie de la placa RGY recién preparada. Después
de una incubación a 16ºC durante 24 h, se midió cualquier nuevo
crecimiento más allá del borde del filtro en cuatro puntos
alrededor del filtro, a intervalos de 90º.
El experimento se realizó usando seis muestras de
cultivo distintas a cada concentración de bronopol, y se repitió
usando verde malaquita en lugar de bronopol. También se realizó un
ensayo de control negativo sin agente activo. Los resultados se
indican en la siguiente tabla:
En este ensayo, se exponen hifas fúngicas
desnudas a bronopol que, como se ha demostrado, tiene un efecto
inhibidor tan pequeño como de 50 ppm durante 5 minutos contra el
crecimiento vegetativo posterior. Una exposición de 10 minutos a 500
ppm previene todo el crecimiento vegetativo posterior con este
método de ensayo.
Ensayo
1B
En este ensayo, se ensayó la eficacia del
bronopol contra Saprolegnia parasitica usando el protocolo
III más exigente del artículo de J. Fish Diseases mencionado
anteriormente, siendo el método como se indica a continuación:
Se pusieron cuatro inóculos de disco en cada
compartimento de un "Replidish" estéril (25 compartimentos en
cinco filas; Sterilin). De esta manera, pudieron procesarse cinco
concentraciones de ensayo diferentes aplicadas durante cinco tiempos
de exposición diferentes por cuadruplicado en una placa. Las
concentraciones de ensayo se añadieron asépticamente en volúmenes
de 2,5 ml a cada compartimento durante los tiempos de exposición
estándar, que fueron de 5, 10, 20, 40 y 80 minutos. Al final de los
tiempos de exposición individuales, las soluciones de ensayo se
retiraron de los compartimentos por aspiración. Cada serie de
discos después se lavó in situ en dos cambios de agua de río
estéril (5 y 30 minutos, respectivamente) y después se incubó en 2,5
ml más de agua de río estéril, in situ, durante 72 horas a
16ºC. Posteriormente, los discos se examinaron con un
estereomiscroscopio, usando iluminación de fondo oscuro transmitida,
y se evaluó la presencia o ausencia de nuevo crecimiento en la
superficie del disco de agar. En todos los casos de duda,
particularmente en el límite entre crecimiento y no crecimiento,
los discos después se transfirieron a RGY durante un período
adicional de 72 h a 16ºC para determinar de forma precisa la
viabilidad del micelio dentro del disco. El ensayo se repitió
substituyendo bronopol por oxalato de verde malaquita.
Los resultados se expresaron tanto en términos
del efecto sobre la zoosporulación como en términos del efecto
sobre el crecimiento vegetativo, y se indican en las tablas
mostradas a continuación:
El bronopol tiene un efecto notable sobre la
zoosporulación inmediata con exposiciones tan pequeñas como 5
minutos a concentraciones de 100 ppm o (posiblemente) menores. Este
ensayo usa un método en lecho corto de agar, en el que el agar que
contiene el micelio evidentemente ofrece protección a la hifas, pero
el bronopol sigue penetrando y una exposición de 20 minutos a 1.000
ppm previene todo el crecimiento posterior, y esta concentración
también tiene un efecto significativo en un período tan corto como
de 5 minutos. Además, la menor exposición a 100 ppm durante 80
minutos también parece tener algún efecto inhibidor.
Se dividieron en tres grupos de tratamiento 105
salmones Atlantic (Salmon salar) de ambos sexos con edades
de aproximadamente 8 meses y que pesaban aproximadamente 30 g en
promedio, conteniendo cada grupo de tratamiento 35 peces. Cada grupo
se mantuvo en agua dulce a 12,5ºC en un depósito de fibra de vidrio
de 210 litros. Los peces se alimentaron diariamente con un 2% de
peso corporal de alimento de producción "Biomar". Después de
una aclimatación de dos semanas, los tres grupos se infectaron
artificialmente con Saprolegnia parasitica, denominándose la
fecha de infección "día 0" del ensayo. Los grupos después se
trataron en los días 1, 3 y 5 como se indica a continuación:
En el día 8 del ensayo, se cogieron todos los
peces y se evaluó el grado de infección de cada pez de acuerdo con
el siguiente sistema de puntuación:
| Grado de infección fúngica | Puntuación |
| Ninguna | 1 |
| Leve (hongo visible en <25% de la superficie del pez). | 2 |
| Moderada (hongo visible en el 50% de la superficie del pez). | 3 |
| Severa (lesiones en el pez) | 4 |
| Mortalidad* | 5 |
| (* Los peces muertos se retiraron cuando se producía mortalidad para evitar la contaminación | |
| del agua.) |
El número de peces de cada categoría del sistema
de puntuación anterior y la puntuación total para cada grupo fueron
los siguientes:
Los números acumulativos de mortalidades para
cada día del ensayo se ilustran gráficamente en la fig. 1.
El bronopol resultó se eficaz contra la infección
por Saprolegnia y también redujo la mortalidad en un 50% en
comparación tanto con el grupo de tratamiento con verde malaquita
como con el grupo sin tratamiento.
En este ensayo se usaron truchas arco iris
(Oncorhyncus mykiss) que tenían un peso medio de 15 g y,
antes del tratamiento, se encerraron en un solo estanque con 6
individuos muy infectados con Ichthyobodo. La infección de
los individuos sanos se confirmó después de 5 días por microscopía
de muestras de branquias montadas. El tratamiento con bronopol se
administró a un grupo de 20 peces usando el mismo método que en el
ensayo 2. El ensayo se repitió usando un grupo de 19 peces
infectados tratados con formalina (un tratamiento convencional para
Ichthyobodo), con un grupo adicional de 20 peces infectados
que no recibían tratamiento y que actuaban como control. A los 7
días después del tratamiento se evaluó el número medio de
parásitos por filamento de branquia en cada grupo (contando el
número de parásitos en 10 filamentos de cada uno de 5 peces) y a
los 14 días se realizó un recuento adicional, clasificándose los
peces individuales como peces sin infección, o poniéndose en una de
cuatro categorías de infección, de acuerdo con el grado de
infección.
Se demostró que el bronopol tenía una buena
actividad contra la infección por Ichthyobodo en trucha arco
iris. Aunque es menos eficaz que la formalina, su uso conlleva
menos riesgos. Puede deducirse que el bronopol tendrá una eficacia
similar contra la infección por Ichthyobodo en otros
salmónidos, y en peces y organismos acuáticos en general, y también
será útil en la profilaxis de la enfermedad.
En primer lugar, se estableció la concentración
bactericida mínima (MBC) para bronopol contra Cytophaga
Psychrophila desarrollando el organismo en caldo, y después
añadiendo diferentes diluciones de bronopol para establecer la
concentración que destruiría Cytophaga.
Después, basándose en los resultados de MBC, se
investigaron los tiempos de contacto requeridos para destruir
Cytophaga. Se añadió un número conocido de bacterias viables
a agua destilada y se expusieron a diversas concentraciones de
bronopol durante 2-40 minutos. Después, las
bacterias se extrajeron por filtración y las bacterias extraídas se
ensayaron con respecto a la viabilidad investigando su crecimiento
en medio de cultivo midiendo la densidad óptica a 520 nm.
Los resultados se indican gráficamente en la fig.
2. La concentración mínima de ensayo que demostró ser eficaz fue de
5 mg.l^{-1} (ppm), pero es probable que la concentración mínima
eficaz real esté entre 1 mg.l^{-1} y 5 mg.l ^{-1}. También se
descubrió que se necesitaba un tiempo de exposición de hasta 40
minutos para prevenir el crecimiento bacteriano después de la
reinoculación en medio nuevo cuando se usaron concentraciones
comprendidas entre 5 mg.l^{-1} y 400 mg.l^{-1}, reduciéndose el
tiempo de exposición necesario a aproximadamente 4 minutos a una
concentración de 1000 mg.l^{-1} y a aproximadamente 2 minutos a
2000 mg.l^{-1}.
Se demostró que el bronopol era activo contra
Cytophaga Psychrophila a concentraciones tan bajas como de 5
mg.l^{-1}. Cytophaga es un ejemplo del grupo de bacterias
conocidas como mixobacterias, que se caracterizan por una capa de
mucopolisacárido protectora, y que generalmente son resistentes a
los desinfectantes (por ejemplo, la dosis de desinfectante yodóforo
requerida para destruir Cytophaga es de aproximadamente 2000
mg.l^{-1}). Por lo tanto, basándose en los usos conocidos de
bronopol, esta actividad es sorprendente y puede indicar actividad
contra las mixobacterias en general. Es probable que el bronopol
resulte ser un tratamiento desinfectante adecuado para depósitos de
peces y equipos, y que también pueda ser de utilidad en el
tratamiento y/o profilaxis de las diversas enfermedades producidas
por este organismo en truchas y en otros salmónidos, y también
(cuando sea el caso) en otros peces y organismos acuáticos.
En este experimento se incluyeron siete depósitos
de 150 truchas arco iris cada uno, a una densidad de
aprovisionamiento de 100 g.l^{-1}. Los peces tenía un tamaño
medio de 15 g. La temperatura del agua era de 11ºC y se renovaba a
una velocidad de una vez por hora.
Un depósito de peces se mantuvo como control
negativo y ni se expuso ni se trató. Otro depósito se expuso pero
no se trató, para actuar como control positivo. Dos depósitos se
trataron con cloramina-T (un tratamiento
convencional) a una concentración de 10 mg.l^{-1}. Tres depósitos
se trataron con bronopol, uno a cada una de las siguientes
concentraciones: 5, 25 y 50 mg.l ^{-1}.
Los peces se expusieron en día 0, y los depósitos
se trataron con cloramina-T o bronopol en los días 2
y 4 del experimento. Los seis depósitos que se infectaron
experimentalmente con F. branchiophilum se trataron con los
agentes terapéuticos respectivos simultáneamente durante una hora
en un baño estático con aireación.
La eficacia de cada tratamiento se evaluó por
signos clínicos, niveles de antígenos bacterianos en las branquias
medidos por inmunoensayo enzimático (EIA), tasas de mortalidad y
mortalidad acumulativa y finalmente por examen histológico.
Se recogieron muestras de branquias para EIA de
cinco peces en cada depósito antes de la infección experimental, y
antes del tratamiento. Se recogieron más muestras de branquias 6 y
36 horas después del tratamiento inicial, después de lo cual los
grupos se volvieron a tratar con concentraciones idénticas del mismo
agente terapéutico, de una manera idéntica. De nuevo se recogieron
muestras de cinco peces de cada depósito 6 y 36 horas después del
segundo tratamiento. Cada día se registró la mortalidad en cada
depósito. Los resultados se presentan gráficamente en las fig. 3 a
5.
Basándose en la mortalidad y en los datos del
EIA, se descubrió que la concentración mínima de bronopol (5
mg.l^{-1}, fig. 5) era ineficaz. La mortalidad estaba
inversamente relacionada con la dosis de bronopol (fig. 3).
Es evidente que la mortalidad está muy
relacionada con los niveles de antígeno bacteriano detectados en las
branquias y que el EIA es un herramienta útil para controlar la
eficacia de la capacidad de un agente terapéutico para eliminar
bacterias de la superficie de las branquias. Como ocurre con la
mortalidad, la concentración de antígeno bacteriano en las
branquias en la mayoría de los tiempos de muestra es inversamente
proporcional a la dosis de agente terapéutico (fig. 5). Las dos
máximas concentraciones de bronopol eliminaron eficazmente las
bacterias de la superficie de las branquias después del segundo
tratamiento (fig. 5). Es evidente que el bronopol es eficaz contra
Flavobacterium branchophilum y que, en el ensayo, el bronopol
a 25 mg.l^{-1} y a 50 mg.l^{-1} redujo las mortalidades entre
los peces infectados, tanto en comparación con los peces no
tratados como en los peces tratados con
cloramina-T.
Este ensayo evalúa la eficacia del bronopol en el
tratamiento de la trucha marrón infectada de forma natural con
Saprolegnia parasitica. En el ensayo se usaron 40 peces y
éstos se dividieron en dos grupos iguales mantenidos en depósitos
separados. En cada depósito se puso un pez moribundo muy infectado
con Saprolegnia parasitica, con la intención de infectar a
los otros peces de forma natural. En los días 1, 3 y 5 del ensayo,
el pez de un grupo se trató con un baño de 50 mg.l^{-1} de
bronopol durante 15 minutos, mientras que el pez del segundo grupo
se dejó sin tratar y actuó como control. El grado de infección del
pez en los dos grupos se evaluó en el día 7 del ensayo.
En los dos grupos, el pez moribundo murió en el
día 1 del ensayo, pero en ambos casos se dejó en el depósito para
asegurar una buena exposición de los demás peces. En el día 7 del
ensayo, se detectó que todos los demás peces del grupo de control
estaban gravemente afectados por Saprolegnia, y se
sacrificaron por razones humanitarias. Por el contrario, todos los
peces del grupo de tratamiento de bronopol estaban sanos y no
tenían signos visuales de infección por Saprolegnia.
El tratamiento repetido con bronopol a una
concentración de 50 mg.l^{-1} parece ser muy eficaz como
tratamiento para la infección por Saprolegnia en la trucha
marrón, y/o como agente profiláctico para prevenir la infección.
Claims (11)
1. El uso de bronopol
(2-bromo-2-nitropropano-1,3-diol)
en la fabricación de un medicamento para el tratamiento o profilaxis
de cualquiera de las siguientes enfermedades en peces: infecciones
fúngicas, infecciones por protozoos flagelados, infecciones por
protozoos ciliados, enfermedad bacteriana de las branquias, e
infecciones por mixobacterias, donde dicho medicamento contienen
bronopol como ingrediente activo único o principal contra las
enfermedades mencionadas anteriormente.
2. El uso de acuerdo con la reivindicación 1,
para el tratamiento o profilaxis de enfermedades producidas por
cualquiera de los siguientes organismos causantes: Saprolegnia
parasitica, Icthyobodo necatrix, Icthyophthirius multifiliis,
Flavobacterium branchiophilum y Cytophaga
Psychrophila.
3. El uso de acuerdo con la reivindicación 1 o la
reivindicación 2, para el tratamiento o profilaxis de enfermedades
de peces salmónidos.
4. El uso de acuerdo con la reivindicación 3,
para el tratamiento o profilaxis de enfermedades de la trucha o el
salmón.
5. Un baño de tratamiento para el tratamiento o
profilaxis de cualquiera de las siguientes enfermedades en peces:
infecciones fúngicas, infecciones por protozoos flagelados,
infecciones por protozoos ciliados, enfermedad bacteriana de las
branquias, e infecciones por mixobacterias, conteniendo el baño de
tratamiento bronopol a una concentración en el intervalo de 1 a 1000
mg.l^{-1} (ppm) como ingrediente activo único o principal contra
tal enfermedad.
6. Un baño de tratamiento de acuerdo con la
reivindicación 5, donde la concentración de bronopol está en el
intervalo de 5 a 200 mg.l^{-1} (ppm).
7. Un baño de tratamiento de acuerdo con la
reivindicación 6, donde la concentración de bronopol está en el
intervalo de 10 a 100 mg.l^{-1} (ppm).
8. Un método para desinfectar depósitos de peces
y/o equipos para uso en la cría de peces, comprendiendo el método la
etapa de exponer el depósito o el equipo a una solución que
contiene bronopol
(2-bromo-2-nitropropano-1,3-diol)
como ingrediente desinfectante activo único o principal.
9. El método de la reivindicación 8, donde la
concentración de bronopol está en el intervalo de 1 a 2000
mg.l^{-1} (ppm).
10. El método de la reivindicación 9, donde la
concentración de bronopol está en el intervalo de 5 a 1000
mg.l^{-1} (ppm).
11. El método de cualquiera de las
reivindicaciones 8 a 10, donde el depósito o el equipo se expone a
la solución durante un período de tiempo en el intervalo de 2 a 40
minutos.
Applications Claiming Priority (2)
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