ES2198010T3 - Radiofarmacos para la toma de imagenes de infecciones e inflamaciones. - Google Patents

Radiofarmacos para la toma de imagenes de infecciones e inflamaciones.

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ES2198010T3 ES97947259T ES97947259T ES2198010T3 ES 2198010 T3 ES2198010 T3 ES 2198010T3 ES 97947259 T ES97947259 T ES 97947259T ES 97947259 T ES97947259 T ES 97947259T ES 2198010 T3 ES2198010 T3 ES 2198010T3
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Thomas David Harris
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Abstract

La invención proporciona nuevos compuestos radiofarmacéuticos útiles para diagnosticar infecciones e inflamaciones, reactivos y kits útiles para preparar los compuestos radiofarmacéuticos, procedimientos de representación de lugares de infección y/o inflamación en pacientes, y procedimientos de diagnóstico de enfermedades asociadas con la infección o inflamación en pacientes que necesiten este diagnóstico. Los compuestos radiofarmacéuticos se fijan en vivo al receptor de lucotrieno B4 (LTB4) en la superficie de los leucocitos que se acumulan en el lugar de la infección o inflamación. Los reactivos suministrados con esta infección son también útiles para tratamiento de enfermedades asociadas con la infección o inflamación.

Description

Radiofármacos para la toma de imágenes de infecciones e inflamaciones.
La presente invención proporciona nuevos radiofármacos útiles para la diagnosis de la infección e inflamación, reactivos y equipos útiles para la preparación de dichos radiofármacos. Los nuevos radiofármacos son útiles para ser utilizados en métodos para la toma de imágenes de los sitios de infección y/o inflamación en un paciente, y para métodos de diagnóstico de enfermedades asociadas con la infección o la inflamación en pacientes con necesidad de dicho diagnóstico. Los radiofármacos se unen in vivo al receptor de leucotrieno B4 (LTB4) en la superficie de los leucocitos que se acumulan en el sitio de infección e inflamación. Los reactivos proporcionados por esta invención son también útiles para el tratamiento de enfermedades asociadas con la infección e inflamación.
Antecedentes de la invención
El rápido diagnóstico de enfermedades asociadas con la infección y la inflamación local es una necesidad clínica actualmente no satisfecha. La inflamación es el resultado de la detección, por parte de los leucocitos, de una anormalidad en el cuerpo tal como la infección. Los leucocitos se activan y gravitan hacia el sitio de la anormalidad. Cuando los leucocitos se encuentran completamente activados se desgranulan y liberan enzimas proteolíticas así como quimioatrayentes dando lugar a un gradiente quimiotáctico y como consecuencia al reclutamiento de leucocitos adicionales. El resultado es una concentración de leucocitos activados en el sitio. Esta localización proporciona un medio para la diagnosis de enfermedades asociadas con la infección e inflamación mediante el uso de leucocitos marcados con un radioisótopo detectable externamente y escintigrafía gamma.
Se han realizado dos aproximaciones para utilizar este mecanismo para la representación por imágenes de la infección e inflamación. La primera supone el aislamiento de leucocitos de un paciente, el marcaje de los leucocitos con un radioisótopo y a continuación la reinyección de los leucocitos autólogos radiomarcados en el paciente. Esta aproximación tiene varios inconvenientes incluyendo el efecto de la metodología de marcaje en la actividad biológica de los leucocitos manifestada como un número disminuido de leucocitos competentes, y los peligros e inconvenientes de manipular la sangre del paciente. La segunda aproximación supone la inyección en el paciente de un radiofármaco que se une a los leucocitos activados in vivo.
Un ejemplo de la aproximación del marcaje in vivo es el uso de anticuerpos monoclonales radiomarcados o fragmentos de los mismos que son dirigidos contra un marcador activado de leucocitos, tal como está descrito por Morgan, Jr., patente U.S. 5.376.356. Un marcador de activación de leucocitos es un antígeno en la superficie del leucocito que está escasamente expresado o que no está expresado de ningún modo hasta la activación del leucocito. Esta aproximación tiene las desventajas asociadas con el uso de muchos radiofármacos proteinaceos como los de diagnóstico, ya que, principalmente, disminuye de forma general la clarificación de la sangre lo cual da lugar a una alta actividad subordinada a no ser que se deje pasar un periodo de tiempo inconvenientemente largo entre la inyección y la obtención de la imagen, y la posibilidad de una reacción alérgica del paciente a la proteína extraña.
Se ha propuesto que estos problemas pueden ser superados mediante la utilización de péptidos marcados isotópicamente que se unen in vivo a los receptores de la superficie en los leucocitos activados (Fischman y col., Semin. Nucl. Med., 1994, 24, págs.154-168). Se ha demostrado que el péptido quemotáctico, fMLF, marcado con In-111 o Tc-99m se acumula en los lugares de infección en modelos animales experimentales. Sin embargo, el péptido fMLF es un agonista potente para los leucocitos y de este modo tiene una aplicabilidad clínica limitada en un diagnóstico radiofarmacéutico. Las limitaciones incluyen el potencial para los efectos nocivos al paciente, tales como una caída severa en el contaje de glóbulos blancos, dando lugar a la activación de los leucocitos con la inyección de incluso pequeñas cantidades del potente péptido agonista.
Otra aproximación alternativa ha sido descrita por Rubin y col. en la patente U.S. 4.926.869 que supone el uso de una immunoglobulina marcada isotópicamente o un fragmento de la misma. La immunoglobulina se acumula en el lugar de la infección o inflamación por un mecanismo no específico atribuido a la pérdida de immunoglobulina marcada de la circulación en el espacio de la proteína altamente expandida en el sitio. Sin embargo, esta aproximación adolece de las mismas desventajas asociadas con el uso de una sustancia proteinacea tal como se ha descrito anteriormente.
Por consiguiente, continua existiendo una necesidad de nuevos radiofármacos para tener imágenes de la infección e inflamación que tengan farmacocinéticas mejoradas, especialmente depuración de la sangre más rápida, y que no cause serios efectos secundarios en los pacientes.
El leucotrieno B4 (LTB4) es sintetizado a partir del ácido araquidónico por la acción de la 5-lipoxígenoasa y de la hidrolasa del leucotrieno A4. El LTB4 es liberado por leucocitos polimorfonucleares (PMN), macrófagos, mastocitos, basófilos y monocitos teniendo cada tipo de célula un receptor de superficie de LTB4. Las células endoteliales, eosinófilos y plaquetas no generan el LTB4. La unión del LTB4 a su receptor de superficie favorece la quemotaxis en PMN's, macrófagos y eosinófilos. También induce agregación de PMN, adherencia de los PMNs al endotelio vascular y diapedesis del PMN.
El LTB4 junto con el PMN, los macrófagos, los mastocitos, los basófilos y los monocitos han estado implicados en una variedad de enfermedades que suponen respuestas inflamatorias indeseadas en diversos tejidos, incluyendo infección, daño de tejidos e isquemia transitoria. En el caso de daño de reperfusión y de rechazo de trasplante, el LTB4 junto con el PMN, los macrófagos y los mastocitos han demostrado causalmente jugar un papel principal en los procesos de inflamación asociados con estos fenómenos. Además, el LTB4 junto con el PMN, los macrófagos, los mastocitos, y los basófilos, juega un papel pivotal en el desarrollo de la enfermedad de inflamación de intestinos. Las erosiones de la mucosa colónica en los pacientes con enfermedad de inflamación de intestinos genera 6 veces más LTB4 que en los correspondientes sujetos normales. Así un radiofármaco que se une al receptor del LTB4 a niveles sub-terapéuticos debe ser capaz de detectar rápidamente los procedimientos de enfermedad inflamatoria a través del cuerpo.
En la presente invención se ha encontrado que los radiofármacos capaces de unirse al receptor de LTB4 receptor son útiles para obtener imágenes de los lugares de infección e inflamación.
Resumen de la invención
La presente invención proporciona nuevos radiofármacos útiles para el diagnóstico de la infección e inflamación, reactivos y equipos útiles para la preparación de radiofármacos, métodos de tomar imágenes de los lugares de infección y/o inflamación en un paciente, y métodos de diagnosticar enfermedades asociadas con infección o inflamación en pacientes que necesiten de dichos diagnósticos. Los radiofármacos se unen in vivo al receptor del leucotrieno B4 (LTB4) en la superficie de los leucocitos que se acumulan en el lugar de la infección e inflamación. Los reactivos de esta invención también son útiles en el tratamiento de enfermedades asociadas con la infección y la inflamación.
Los radiofármacos de la presente invención son moléculas pequeñas y como tales no sufren las desventajas asociadas con las proteínas o anticuerpos marcados isotópicamente. Como antagonistas, los radiofármacos tienen un riesgo significativamente disminuido de producir efecto secundarios. Los radiofármacos de la presente invención tienen utilidad en la detección rápida de las enfermedades inflamatorias o infecciosas tales como el intestino inflamado, fiebre de origen desconocido, daño de reperfusión y rechazo de trasplante. Los reactivos de esta invención son útiles en el tratamiento de enfermedades asociadas con la infección y la inflamación.
Descripción detallada de la invención
[1] Así, en un primer alcance, la presente invención proporciona un compuesto que comprende a) un grupo que se une al receptor de leucotrieno B4 (LTB4), y b) una unidad de unión metálica, en la que el compuesto tiene una afinidad de unión para el receptor LTB4 de menos de 1000 nM, y el grupo de unión al receptor no es un anticuerpo o una proteína.
[2] En un alcance preferido, el reactivo es de la fórmula: W_{e}-X-L_{n}-Y-L_{n'}-C_{h}, 
\quad
W_{e}-X-L_{n}(L_{n'}-C_{h})-Y,
\quad
o
\quad
Z-L_{n'}-C_{h}, en la que,
W_{e} está seleccionado entre el grupo:
1
en el que,
A^{1} es N, C-OH, o CH;
A^{2} y A^{3} son independientemente N o CH;
A^{4} es N o CR^{3};
A^{5} es O o S;
A^{6} es O, CH_{2} o S;
A^{7} es C-OH, N, NH, O o S;
A^{8} es NH, CH_{2}, O, S, N, o CH;
A^{9} es N o CH;
a y b indican las posiciones alternativas de un doble enlace;
R^{1} está seleccionado entre el grupo: H, -C(=NH)NH_{2}, alquilo de C_{1}-C_{6} sustituido con 0-3 R^{4}, alcoxi de C_{1}-C_{6} sustituido con 0-3 R^{4}, arilo sustituido con 0-3 R^{5}, y heterociclo sustituido con 0-3 R^{5};
R^{2} está seleccionado entre el grupo: H, alquilo de C_{1}-C_{3}, alquenilo de C_{2}-C_{3}, ciclopropilo, ciclopropilmetilo, y arilo sustituido con 0-3 R^{5};
R^{3} es -H, -OH o alcoxi de C_{1}-C_{3};
o alternativamente, R^{1} y R^{3} pueden ser tomados juntos con los átomos a los que están unidos para formar un anillo fenilo fusionado sustituido con 0-3 R^{5};
R^{4} está independientemente seleccionado entre el grupo: -F, -Cl, -Br, -I, =O, -N(R^{6})(R^{7}), y -CF_{3};
R^{5} está independientemente seleccionado entre el grupo: -F, -Cl, -Br, -I, -N(R^{6})(R^{7}), -CF_{3}, alquilo de C_{1}-C_{3}, alcoxi de C_{1}-C_{3}, y metilendioxi;
R^{6} y R^{7} son independientemente H o alquilo de C_{1}-C_{3};
siempre que cuando A^{1} y A^{2} son CH, A^{3} es C-X, y A^{4} es CR^{3}, R^{1} esté seleccionado entre el grupo: alquilo de C_{1}-C_{5} sustituido con 1-3 R^{4}, alcoxi de C_{1}-C_{5} sustituido con 0-3 R^{4}, y arilo sustituido con 0-3 R^{5};
X es O, S, CH_{2} o CH=CH;
L_{n} es un grupo de unión que tiene la fórmula (CR^{8}R^{9})_{g}-(W^{1})_{h}-(M^{1})_{k}-(CR^{10}R^{11})_{g'} en la que,
R^{8}, R^{9}, R^{10} y R^{11} están independientemente seleccionados cada vez que están presentes entre el grupo: un enlace a L_{n'}, H, alquilo de C_{1}-C_{5}, y alcoxi de C_{1}-C_{5}, o alternativamente, R^{8} y R^{9} o R^{10} y R^{11} pueden ser tomados juntos para formar un cicloalquilo o un heterociclo de 3-6 miembros;
W^{1} está independientemente seleccionado entre el grupo: O, S, C(=O)O, OC(=O), CH=CH, (OCH_{2}CH_{2})_{p} y (CH_{2} CH_{2}O)_{p'}, en el que p y p' son independientemente 1-3;
M^{1} está seleccionado entre el grupo:
fenilo sustituido con 0-3 R^{12}, heterociclo sustituido con 0-3 R^{12}, benzofenona sustituida con 0-3 R^{12}, y difeniléter sustituido con 0-3 R^{12};
R^{12} está independientemente seleccionado entre el grupo: un enlace a L_{n'}, -COOR^{13}, alquilo de C_{1}-C_{5} sustituido con 0-3 R^{14}, y alcoxi de C_{1}-C_{5} sustituido con 0-3 R^{14};
R^{13} es H o alquilo de C_{1}-C_{5}:
R^{14} está independientemente seleccionado entre el grupo: un enlace a L_{n'}, y -COOH;
g es 0-10;
h es 0-3;
k es 0-1;
g' es 0-5;
siempre que cuando h es 0 y k es 0, g es > 1;
y siempre que cuando W^{1} es O o S y k es 0, g + g' es = 1;
Y está seleccionado entre C(=O)NH, NHC(=O), C=O, C(=O)O, OC(=O), NHS(=O)_{2}, C(=O)NHS(=O)_{2}, COOH, C(=O)NH_{2}, NH(C=O)NH, o tetrazol;
siempre que entre 0-1 de R^{9}, R^{10}, R^{11}, R^{12}, y R^{14} es un enlace a L_{n'} y cuando una de estas variables es un enlace a L_{n'}, entonces Y es COOH, C(=O)NH_{2}, o tetrazol;
L_{n'} es un grupo de unión que tiene la fórmula: (W^{2})_{h'}-(CR^{15}R^{16})_{g''}-(M^{2})_{k'}-(W^{2})_{h''}- (CR^{17}R^{18})_{g'''}-(W^{2})_{h'''} en la que,
W^{2} está independientemente seleccionado cada vez que está presente entre el grupo: O, S, NH, NHC(=O), C(=O)NH, C(=O), C(=O)O, OC(=O), NHC(=O)NH, SO_{2}, (OCH_{2}CH_{2})_{s}, (CH_{2}CH_{2}O)_{s'}, (OCH_{2}CH_{2}CH_{2})_{s''}, 
\hbox{(CH _{2} CH _{2} CH _{2} O) _{t} }
, y (aa)_{t'}, en la que aa es independientemente cada vez que está presente un amino ácido, y s, s', s'', t, y t' son independientemente 1-10;
M^{2} está seleccionado entre el grupo: arilo sustituido con 0-3 R^{19}, cicloalquilo sustituido con 0-3 R^{19}, y heterociclo sustituido con 0-3 R^{19};
R^{15}, R^{16}, R^{17} y R^{18} están independientemente seleccionados cada vez que están presentes entre el grupo: =O, COOH, SO_{3}H, PO_{3}H, alquilo de C_{1}-C_{5} sustituido con 0-3 R^{19}, arilo sustituido con 0-3 R^{19}, bencilo sustituido con 0-3 R^{19}, y alcoxi de C_{1}-C_{5} sustituido con 0-3 R^{19}, NHC(=O)R^{20}, C(=O)NHR^{20}, NHC(=O)NHR^{20}, NHR^{20}, R^{20}, y un enlace a C_{h};
R^{19} está independientemente seleccionado cada vez que está presente entre el grupo: COOR^{20}, OH, NHR^{20}, SO_{3}H, PO_{3}H, arilo sustituido con 0-3 R^{20}, heterociclo sustituido con 0-3 R^{20}, alquilo de C_{1}-C_{5} sustituido con 0-1 R^{21}, alcoxi de C_{1}-C_{5} sustituido con 0-1 R^{21}, y un enlace a C_{h};
R^{20} está independientemente seleccionado cada vez que está presente entre el grupo: H, arilo sustituido con 
\hbox{0-1}
R^{21}, heterociclo sustituido con 0-1 R^{21}, cicloalquilo sustituido con 0-1 R^{21}, polialquilen glicol sustituido con 0-1 R^{21}, carbohidrato sustituido con 0-1 R^{21}, ciclodextrinaa sustituida con 0-1 R^{21}, amino ácido sustituido con 0-1 R^{21}, policarboxialquilo sustituido con 0-1 R^{21}, poliazaalquilo sustituido con 0-1 R^{21}, péptido sustituido con 0-1 R^{21}, en la que dicho péptido está comprendido de 2-10 amino ácidos, y un enlace a C_{h};
R^{21} es un enlace a C_{h};
k' es 0-2;
h' es 0-2;
h'' es 0-5;
h''' es 0-2;
g'' es 0-10;
g''' es 0-10;
C_{h} es una unidad de unión metálica que tiene una fórmula seleccionada entre el grupo:
2
3
300
4
400
en la que:
Q^{1}, Q^{2}, Q^{3}, Q^{4}, Q^{5}, Q^{6}, Q^{7}, y Q^{8} están independientemente seleccionados cada vez que están presentes entre el grupo: NR^{22}, NR^{22}R^{23}, S, SH, S(Pg), O, OH, PR^{22}, PR^{22}R^{23}, P(NR^{24})R^{25}R^{26}, P(O)R^{25}R^{26}, y P(S)R^{25}R^{26};
E es un enlace, CH, o un grupo espaciador seleccionado entre el grupo: alquilo de C_{1}-C_{10} sustituido con 0-3 R^{27}, arilo sustituido con 0-3 R^{27}, cicloalquilo sustituido con 0-3 R^{27}, heterocicloalquilo sustituido con 0-3 R^{27}, aralquilo sustituido con 0-3 R^{27}, y alcarilo sustituido con 0-3 R^{27};
E^{a} es un grupo alquilo de C_{1}-C_{10} o un carbociclo de C_{3}-C_{14};
R^{22}, R^{23}, y R^{24} están cada uno de ellos independientemente seleccionados entre el grupo: un enlace a L_{n'}, hidrógeno, alquilo de C_{1}-C_{10} sustituido con 0-3 R^{27}, arilo sustituido con 0-3 R^{27}, cicloalquilo sustituido con 0-3 R^{27}, heterocicloalquilo sustituido con 0-3 R^{27}, aralquilo sustituido con 0-3 R^{27}, alcarilo sustituido con 0-3 R^{27}, heterociclo sustituido con 0-3 R^{27}, y un electrón, siempre que cuando uno de los R^{22} o R^{23} sea un electrón, entonces el otro sea también un electrón;
adicionalmente, R^{22} y R^{23} pueden combinarse para formar =C(R^{30})(R^{31});
R^{25} y R^{26} están cada uno de ellos independientemente seleccionados entre el grupo: un enlace a L_{n'}, -OH, alquilo de C_{1}-C_{10} sustituido con 0-3 R^{27}, alquilo de C_{1}-C_{10} sustituido con 0-3 R^{27}, arilo sustituido con 0-3 R^{27}, cicloalquilo sustituido con 0-3 R^{27}, heterocicloalquilo sustituido con 0-3 R^{27}, aralquilo sustituido con 0-3 R^{27}, alcarilo sustituido con 0-3 R^{27}, y heterociclo sustituido con 0-3 R^{27};
R^{27} está independientemente seleccionado cada vez que está presente entre el grupo: un enlace a L_{n'}, =O, F, Cl, Br, I, -CF_{3}, -CN, -CO_{2}R^{28}, -C(=O)R^{28}, -C(=O)N(R^{28})_{2}, -CHO, -CH_{2}OR^{28}, -OC(=O)R^{28}, -OC(=O)OR^{28a}, -OR^{28}, 
\hbox{-OC(=O)N(R ^{28} ) _{2} }
, -NR^{29}C(=O)R^{28}, -NR^{29}C(=O)OR^{28a}, -NR^{29}C(=O)N(R^{28})_{2}, -NR^{29}SO_{2}N(R^{28})_{2}, -NR^{29}SO_{2}R^{28a}, -SO_{3}H, -SO_{2}R^{28a}, -SR^{28}, -S(=O)R^{28a}, -SO_{2}N(R^{28})_{2}, -N(R^{28})_{2}, -NHC(=NH)NHR^{28}, -C(=NH)NHR^{28}, =NOR^{28}, NO_{2}, -C(=O)NHOR^{28}, -C(=O)NHNR^{28}R^{28a}, -OCH_{2}CO_{2}H, 2-(1-morfolino)etoxi, alquilo de C_{1}-C_{5}, alquenilo de C_{2}-C_{4}, cicloalquilo de C_{3}-C_{6}, cicloalquilmetilo de C_{3}-C_{6}, alcoxialquilo de C_{2}-C_{6}, arilo sustituido con 0-2 R^{28}, y un sistema de anillo heterocíclico de 5-10-miembros conteniendo 1-4 heteroátomos independientemente seleccionados entre N, S, y O;
R^{28}, R^{28a}, y R^{29} están independientemente seleccionados cada vez que están presentes entre el grupo: un enlace a L_{n'}, H, alquilo de C_{1}-C_{6}, fenilo, bencilo, alcoxi de C_{1}-C_{6}, haluro, nitro, ciano, y trifluorometilo;
Pg es un grupo protector de tiol;
R^{30} y R^{31} están independientemente seleccionados entre el grupo:
H, alquilo de C_{1}-C_{10}, -CN, -CO_{2}R^{34}, -C(=O)R^{34}, - C(=O)N(R^{34})_{2},
1-alqueno de C_{2}-C_{10} sustituido con 0-3 R^{33},
1-alquino de C_{2}-C_{10} sustituido con 0-3 R^{33},
arilo sustituido con 0-3 R^{33},
heterociclo insaturado sustituido con 0-3 R^{33}, y
carbociclo insaturado sustituido con 0-3 R^{33};
o, alternativamente, R^{30} y R^{31}, pueden ser tomados juntos con el radical carbono divalente al que están unidos para formar:
5
en la que:
R^{32} y R^{33} pueden estar independientemente seleccionados entre el grupo: H, R^{34}, alquilo de C_{1}-C_{10} sustituido con 0-3 R^{34}, alquenilo de C_{2}-C_{10} sustituido con 0-3 R^{34}, alquinilo de C_{2}-C_{10} sustituido con 0-3 R^{34}, arilo sustituido con 
\hbox{0-3}
R^{34}, heterociclo sustituido con 0-3 R^{34}, y carbociclo sustituido con 0-3 R^{34};
o, alternativamente, R^{32}, R^{33} pueden ser tomados juntos para formar un anillo aromático o hetrocíclico fusionado;
c y d indican las posiciones de los dobles enlaces opcionales y n es 0 ó 1,
R^{34} está independientemente seleccionado cada vez que está presente entre el grupo: =O, F, Cl, Br, I, -CF_{3}, 
\hbox{-CN}
, -CO_{2}R^{35}, -C(=O)R^{35}, -C(=O)N(R^{35})_{2}, -N(R^{35})_{3}^{+} -CH_{2}OR^{35}, -OC(=O)R^{35}, -OC(=O)OR^{35a}, -OR^{35}, -OC(=O)N(R^{35})_{2}, -NR^{36}C(=O)R^{35}, -NR^{36}C(=O)OR^{35a}, -NR^{36}C(=O)N(R^{35})_{2}, -NR^{36}SO_{2}N(R^{35})_{2}, -NR^{36}SO_{2}R^{35a}, -SO_{3}H, -SO_{2}R^{35a}, -SR^{35}, -S(=O)R^{35a}, -SO_{2}N(R^{35})_{2}, -N(R^{35})_{2}, -NHC(=NH)NHR^{35}, -C(=NH)NHR^{35}, =NOR^{35}, -C(=O)NHOR^{35}, -OCH_{2}CO_{2}H, 
\hbox{2-(1-morfolino)etoxi}
;
R^{35}, R^{35a}, y R^{36} están cada uno de ellos independientemente seleccionado cada vez que están presentes entre el grupo: hidrógeno, alquilo de C_{1}-C_{6};
Z está seleccionado entre el grupo:
6
en el que,
A^{10} es NR^{41} o -C(R^{41})=CH-;
R^{37} está seleccionado entre el grupo: C(=O)-R^{42}, CH=CR^{43}C(=O)-R^{42}, CH_{2}C(=O)-R^{42}, y CH_{2}CH_{2}C(=O)-R^{42};
R^{38} está seleccionado entre el grupo: SR^{44}, SCH_{2}R^{44}, y S(=O)R^{44};
R^{39} está seleccionado entre el grupo: alquilo de C_{1}-C_{10} sustituido con 0-3 R^{44}, y alcoxi de C_{1}-C_{10} sustituido con 
\hbox{0-3}
R^{44};
R^{40} es C(=O)-R^{42};
R^{41} es CH_{2}C(=O)N(CH_{3})CH_{2}CH_{2}C_{6}H_{5};
R^{42} es un enlace a L_{n'};
R^{43} está seleccionado entre el grupo: H y alquilo de C_{1}-C_{3}
R^{44} es fenilo sustituido con 0-4 R^{45};
R^{45} está independientemente seleccionado cada vez que está presente entre el grupo: OR^{46}, C(=O)OR^{46}, -Cl, -Br, -F, y N(R^{46})_{2};
R^{46} está independientemente seleccionado cada vez que está presente entre el grupo: H, y alquilo de C_{1}-C_{10}; y
e indica la posición de un doble enlace opcional;
y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos.
[3] En un alcance más preferido, la presente invención proporciona un reactivo, en el que:
W_{e} está seleccionado entre el grupo:
7
en el que,
A^{1} es N, C-OH, o CH;
A^{2} y A^{3} son CH;
A^{4} es CR^{3};
A^{5} es O;
A^{6} es O o CH_{2};
R^{4} está independientemente seleccionado entre el grupo:
-F, -Cl, =O, -N(R^{6})(R^{7}), y -CF_{3};
R^{5} está independientemente seleccionado entre el grupo:
-F, -Cl, -CF_{3}, alquilo de C_{1}-C_{3}, alcoxi de C_{1}-C_{3}, y metilendioxi;
X es O, CH_{2} o CH=CH;
R^{8}, R^{9}, R^{10} y R^{11} están independientemente seleccionados cada vez que están presentes entre el grupo: un enlace a L_{n'}, H, alquilo de C_{1}-C_{5}, y alcoxi de C_{1}-C_{5};
o alternativamente, R^{8} y R^{9} o R^{10} y R^{11} pueden ser tomados juntos para formar un cicloalquilo de 3-6 miembros;
C_{h} está seleccionado entre el grupo:
8
9
en el que:
Q^{1}, Q^{2}, Q^{3}, Q^{4}, Q^{5}, Q^{6}, Q^{7}, y Q^{8} están independientemente seleccionados cada vez que están presentes entre el grupo: NR^{22}, NR^{22}R^{23}, S, SH, S(Pg), OH;
E es un enlace, CH, o un grupo espaciador seleccionado entre el grupo: alquilo de C_{1}-C_{10} sustituido con 0-3 R^{27}, arilo sustituido con 0-3 R^{27}, cicloalquilo sustituido con 0-3 R^{27}, y heterociclo sustituido con 0-3 R^{27};
E^{a} es CH o un carbociclo de C_{3}-C_{6};
R^{22} y R^{23} están cada uno de ellos independientemente seleccionados entre el grupo: un enlace a L_{n'}, hidrógeno, alquilo de C_{1}-C_{10} sustituido con 0-3 R^{27}, arilo sustituido con 0-3 R^{27}, heterociclo sustituido con 0-3 R^{27}, y un electrón, siempre que cuando uno de los R^{22} o R^{23} sea un electrón;
adicionalmente, R^{22} y R^{23} puedan combinarse para formar =C(R^{30})(R^{31});
R^{27} está independientemente seleccionado cada vez que está presente entre el grupo: un enlace a L_{n'}, =O, F, Cl, Br, I, -CF_{3}, -CN, -CO_{2}R^{28}, -C(=O)R^{28}, -C(=O)N(R^{28})_{2}, -CH_{2}OR^{28}, -OC(=O)R^{28}, -OC(=O)OR^{28a}, -OR^{28}, -OC(=O)N(R^{28})_{2}, -NR^{29}C(=O)R^{28}, -NR^{29}C(=O)OR^{28a}, - NR^{29}C(=O)N(R^{28})_{2}, -NR^{29}SO_{2}N(R^{28})_{2}, -NR^{29}SO_{2}R^{28a}, -SO_{3}H, -SO_{2}R^{28a}, -SR^{28}, -S(=O)R^{28a}, -SO_{2}N(R^{28})_{2}, -N(R^{28})_{2}, - NHC(=NH)NHR^{28}, -C(=NH)NHR^{28}, =NOR^{28}, NO_{2}, -C(=O)NHOR^{28}, -C(=O)NHNR^{28}R^{28a}, -OCH_{2}CO_{2}H, y 2-(1-morfolino)etoxi;
R^{28}, R^{28a}, y R^{29} están independientemente seleccionados cada vez que están presentes entre el grupo: un enlace a L_{n'}, H, y alquilo de C_{1}-C_{6};
R^{30} y R^{31} están independientemente seleccionados entre el grupo:
-CO_{2}R^{34},
1-alqueno de C_{2}-C_{5} sustituido con 0-3 R^{33},
1-alquino de C_{2}-C_{5} sustituido con 0-3 R^{33},
arilo sustituido con 0-3 R^{33}, y
heterociclo insaturado sustituido con 0-3 R^{33};
R^{32} y R^{33} pueden estar independientemente seleccionados entre el grupo:
H, R^{34};
o, alternativamente, R^{32}, R^{33} pueden ser tomados juntos para formar un anillo aromático o hetrocíclico fusionado;
R^{34} está independientemente seleccionado cada vez que está presente entre el grupo: -CO_{2}R^{35}, -C(=O)N(R^{35})_{2}, -CH_{2}OR^{35}, -OC(=O)R^{35}, -OR^{35}, -SO_{3}H, -N(R^{35})_{2}, y -OCH_{2}CO_{2}H;
R^{35}, R^{35a}, y R^{36} están cada uno de ellos independientemente seleccionado cada vez que están presentes entre el grupo: hidrógeno, alquilo de C_{1}-C_{3};
R^{39} está seleccionado entre el grupo: alquilo de C_{1}-C_{10} sustituido con 0-1 R^{44}, y alcoxi de C_{1}-C_{10} sustituido con 
\hbox{0-1}
R^{44};
R^{43} es H; y
R^{46} está independientemente seleccionado cada vez que está presente entre el grupo: H, y alquilo de C_{1}-C_{5}.
[4] En un alcance incluso más preferido, la presente invención proporciona un reactivo, en el que:
R^{1} está seleccionado entre el grupo:
H, -C(=NH)NH_{2}, alquilo de C_{1}-C_{6} sustituido con 0-2 R^{4}, alcoxi de C_{1}-C_{6} sustituido con 0-2 R^{4}, arilo sustituido con 0-2 R^{5}, y heterociclo sustituido con 0-2 R^{5};
R^{3} es-H, -OH o alcoxi de C_{1}-C_{3};
o alternativamente, R^{1} y R^{3} pueden ser tomados juntos con los átomos a los que están unidos para formar un anillo fenilo fusionado sustituido con 0-2 R^{5};
R^{4} está independientemente seleccionado entre el grupo:
=O, y-N(R^{6})(R^{7});
R^{5} está independientemente seleccionado entre el grupo:
-F, alquilo de C_{1}-C_{3}, alcoxi de C_{1}-C_{3}, y metilendioxi;
X es O, CH_{2} o CH=CH;
R^{8}, R^{9}, R^{10} y R^{11} están independientemente seleccionados cada vez que están presentes entre el grupo: un enlace a L_{n'}, H, y alquilo de C_{1}-C_{3};
o alternativamente, R^{8} y R^{9} o R^{10} y R^{11} pueden ser tomados juntos para formar un cicloalquilo de 3-6 miembros;
W^{1} es O;
M^{1} está seleccionado entre el grupo:
fenilo sustituido con 0-1 R^{12}, heterociclo sustituido con 0-1 R^{12}, benzofenona sustituida con 0-1 R^{12}, y difeniléter sustituido con 0-1 R^{12};
R^{12} está independientemente seleccionado entre el grupo: un enlace a L_{n'}, -COOR^{13}, alquilo de C_{1}-C_{5} sustituido con 0-1 R^{14}, y alcoxi C_{1}-C_{5} sustituido con 0-1 R^{14};
M^{2} está seleccionado entre el grupo: arilo sustituido con 0-1 R^{19}, cicloalquilo sustituido con 0-3 R^{19}, y heterociclo sustituido con 0-1 R^{19};
C_{h} está seleccionado entre:
10
en el que,
Q^{1} y Q^{4} son SH o S(Pg);
Q^{2} y Q^{3} son NR^{22};
E está independientemente seleccionado entre el grupo: CHR^{27}, CH_{2}CHR^{27}, CH_{2}CH_{2}CHR^{27}, y CHR^{27}C(=O);
R^{22} está seleccionado entre el grupo: H, alquilo de C_{1}-C_{6} sustituido con 0-1 R^{27}; y
R^{27} está independientemente seleccionado entre H y un enlace a L_{n'},
y,
11
en el que,
Q^{1} es NH_{2} o N=C(R^{30})(R^{31});
E es un enlace;
Q^{2} es NHR^{23}, en el que R^{23} es heterociclo sustituido con R^{27}, en el que el heterociclo está seleccionado entre piridina y tiazol, R^{27} está seleccionado entre C(=O)NHR^{28} y C(=O)R^{28}, y R^{28} es un enlace a L_{n'};
R^{30} está seleccionado entre el grupo: -CO_{2}R^{35}, 1-alqueno de C_{2}-C_{3} sustituido con 0-1 R^{34}, arilo sustituido con 0-1 R^{34}, y heterociclo insaturado sustituido con 0-1 R^{34};
R^{31} es H;
R^{34} está independientemente seleccionado cada vez que está presente entre el grupo: -CO_{2}R^{34}, -OR^{34}, -SO_{3}H, y -N(R^{34})_{2};
R^{35} está independientemente seleccionado cada vez que está presente entre el grupo: hidrógeno, y metilo;
A^{10} es NR^{41};
R^{39} es alcoxi de C_{1}-C_{10} sustituido con 1 R^{44}; y
R^{45}está independientemente seleccionado cada vez que está presente entre el grupo: OH, C(=O)OH, -Cl, -F, y NH_{2}.
[5] En un alcance adicional, la presente invención proporciona un reactivo seleccionado entre:
4-etil-2-(4-fluorofenil)-[5-[5,5-dimetil-6-[[6-[[[(2-sulfonilfenil)metilen]hidracin]-3-piridinil]carbonil]amino]hexil]oxi]fenol;
4-etil-2-(4-fluorofenil)-[5-[4-[[6-[[[(2-sulfonilfenil)metilen]hidracin]-3-piridinil]carbonil]amino]butil]oxi]fenol;
ácido 2-[[[5-[[(6-[(4,6-difenil-2-piridinil)oxi]-1-hexanamino]carbonil]-2-piridinil]hidrazon]metil]-bencenosulfónico;
ácido 2-[[[5-[[2,2-dimetil-6-[(6-fluorofenil-4-fenil-2-piridinil)oxi]-1-hexanamino]carbonil]-2-piridinil]hidrazon]metil]-bencenosulfónico;
ácido 2-[[[5-[[N-[6-[(6-(4-fluorofenil)-4-fenil-2-piridinil)oxi]-hexanoil]-tirosin-O-[3-propanamino]]carbonil]-2-piridinil]hidrazon]-metil]-bencenosulfónico;
ácido 2-[[[5-[[N-[6-[(4,6-difenil-2-piridinil)oxi]-hexanoil]-tirosin-O-[3-propanamino]]carbonil]-2-piridinil]hidrazon]-metil]-bencenosulfónico;
ácido 2-[[[5-[[N-[6-[(4-(3,4-metilendioxifenil)-6-fenil-2-piridinil)oxi]-hexanoil]-tirosin-O-[3-propanamino]]-carbonil]-2-piridinil]hidrazon]-metil]-bencenosulfónico;
ácido 2-[[[5-[[alfa-N-[6-[(4,6-difenil-2-piridinil)oxi]-hexanoil]-lisin-epsilon-N-amino]carbonil]-2-piridinil]hidrazon]-metil]-bencenosulfónico;
conjugado de 4-etil-2-(4-fluorofenil)-5-[(5,5-dimetil-6-aminohexil)oxi]fenol N-[4-(carboxi)bencil]-N,N'-bis[2-tioetil]-glicinamida;
ácido, 2-[[[5-[[[6-[(4,6-difenil-2-piridinil)oxi]-2,2-dimetil-1-hexil]aza]carbonil]-2-piridinil]hidrazon]metil]bencenosulfónico;
ácido 2-[[[5-[[[[6-[(4,6-Difenil-2-piridinil)oxi]-hexanoil]-4-sulfonamidil]bencilamino]carbonil]-2-piridinil]-hidrazon]metil]-bencenosulfónico;
4-etil-2-(4-fluorofenil)-[5-[6,6-dimetil-7-[[6-[[[(2-sulfonilfenil)metilen]hidracin]-3-piridinil]carbonil]amino]heptil]oxi]fenol;
4-etil-2-(5-pirazolil)-[5-[5,5-dimetil-6-[[6-[[[(2-sulfonilfenil)metilen]hidracin]-3-piridinil]carbonil]amino]hexil]oxi]fenol;
el conjugado entre el ácido 2-[6-[(4,6-difenil-2-piridinil)oxi]pentil]-6-(8-amino-5-aza-4-oxooctiloxi)bencenopropanoico y el ácido 2-[[[5-[[(2,5-Dioxo-1-pirrolidinil)oxi]carbonil]-2-piridinil]hidrazon]metil]bencenosulfónico;
el conjugado entre el ácido 6-(11-amino-3,6,9-trioxaundeciloxi)-2-[5-[(5-oxo-1-(2-propenil)-5,6,7,8-tetrahidro-2-naftalenil)oxi]pentiloxi]bencenopropanoico y el ácido 2-[[[5-[[(2,5-Dioxo-1-pirrolidinil)oxi]carbonil]-2-piridinil]hidrazon]metil]bencenosulfónico;
4-etil-2-(4-fluorofenil)-[5-[6,6-dimetil-7-[[6-[[[fenilmetilen]hidracin]-3-piridinil]carbonil]amino]heptil]oxi]fenol;
N-((6-((1-aza-2-fenilvinil)amino)(3-piridil))sulfonil)-3-(1-((N-(2-feniletil)carbamoil)metil)-5-(fenilmetoxi)indol-3-il)prop-2-enamida;
3-((7-(3-(6-etil-4-(4-fluorofenil)-3-hidroxifenoxi)propoxi)-8-propilcroman-2-il)carbonilamino)propanoato de propilo, ácido 2-(2-aza-2-((5-carbamoil(2-piridil)amino)vinil)bencenosulfónico;
3-((7-(-(6-etil-4-(4-fluorofenil)-3-hidroxifenoxi)propoxi)-8-propilcroman-2-il)carbonilamino)propil-2-metilpropanoato, ácido 2-(2-aza-2((5-carbamoil(2-piridil)amino)vinil)bencenosulfónico;
N-(3-((7-(3-(6-etil-4-(4-fluorofenil)-3-hidroxifenoxi)propoxi)-8-propilcroman-2-il)carbonilamino)propil)-2-metilpropanamida, ácido 2-(2-aza-2-((5-carbamoil(2-piridil))amino)vinil)bencenosulfónico;
ácido 2-(2-aza-2-((5-(N-(6-(6-etil-3-hidroxi-4-(1-metilpirazol-5-il)fenoxi)-22-dimetilhexil)carbamoil)(2-piridil))amino)vinil)bencenosulfónico;
ácido 2-(2-aza-2-((5-(N-(6-(6-etil-3-hidroxi-4-(1-metilpirazol-5-il)fenoxi)-2,2-dimetilhexil)carbamoil)(2-piridil))amino)vinil)bencenosulfónico;
ácido 2-(2-aza-2-((5-((3-((6-etil-4-(4-fluorofenil)-3-hidroxifenoxi)metil)piperidil)carbonil)(2-piridil)) amino)vinil)bencenosulfónico;
2-(((4-(N-(6-(4,6-Difenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)carbamoil)fenil)metil)(2-sulfaniletil)amino)-N-(2-sulfaniletil)etanamida;
ácido 2-(2-Aza-2-((5-(N-(3-(2-(2-(3-(5-(4-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-1,1-dimetilpentil)(1,2,3,5-tetraazolil)) pentanoilamino)propoxi)etoxi)etoxi)propil)carbamoil)(2-piridil)) amino)vinil)bencenosulfónico;
ácido 2-(2-aza-2-((5-(N-(3-(2-(2-(3-(5-(5-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-1,1-dimetilpentil)(1,2,3,4-tetraazolil)) pentanoilamino) propoxi)etoxi)etoxi)propil)carbamoil)(2-piridil))amino)vinil)bencenosulfónico;
ácido 2-(2-aza-2-((5-(N-(2-(2-(2-(2-(2-(2-(2-(2-(5-(4-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-1,1-dimetilpentil)(1,2,3,5-etraazolil))pentanoilamino)etoxi)etoxi) etoxi)etoxi)etoxi)etoxi)etoxi)etil)carbamoil)(2-piridil)) amino)vinil)bencenosulfónico;
ácido 2-(2-aza-2-((5-(N-(5-(4-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-1,1-dimetilpentil)(1,2,3,5-tetraazolil))pentanoilami-no)-1-(6-deoxi-\beta-ciclodextril)carbamoil)pentil)carbamoil)(2-piridil))amino)vinil) bencenosulfónico;
ácido 2-(2-aza-2-((5-(N-(3-(2-(2-(3-(2-(5-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-1,1-dimetilpentil)(1,2,3,4-tetraazolil)) acetilamino)propoxi) etoxi)etoxi)propil)carbamoil)(2-piridil))amino)vinil)bencenosulfónico;
ácido 2-(2-aza-2-((5-(N-(3-(2-(2-(3-(2-(4-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-1,1-dimetilpentil)(1,2,3,5-tetraazolil)) acetilamino) propoxi)etoxi)etoxi)propil)carbamoil)(2-piridil))amino)vinil)bencenosulfónico;
ácido 3-(6-(3-(N-(5-((6-((1-aza-2-(sulfofenil)vinil)amino)(3-piridil))carbonilamino)-5-(N-(\omega-metoxipolietilen(750)glicoxietil)carbamoil)pentil)carbamoil)propoxi)2-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))pentiloxi)fenil)propanoico;
ácido 3-(6-(3-(N-(3-(2-(2-(3-((6-((1-aza-2-(2-sulfofenil)vinil)amino)(3-piridil))carbonilamino)propoxi)etoxi)etoxi)propil)carbamoil)propoxi)2-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))pentiloxi)fenil)propanoico;
ácido 3-(6-(3-(N-(5-((6-((1-aza-2-(2-sulfofenil)vinil)amino)(3-piridil))carbonilamino)-5-(N-(2,3,4,5,6-pentahidroxihexil)carbamoil)pentil)carbamoil)propoxi)2-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))pentiloxi)fenil)propanoico;
ácido 3-(6-(3-(N-(3-((6-((1-aza-2-(2-sulfofenil)vinil)amino)(3-piridil))carbonilamino)propil)carbamoil)propoxi)-2-(5-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi))pentiloxi)fenil)propanoico;
ácido 3-(6-(3-N-(2-(2-(2-(2-(2-(2-(2-(2-((6-((1-aza-2-(2-sulfofenil)vinil)amino)(3-piridil)) carbonilamino)etoxi)etoxi)etoxi)etoxi) etoxi)etoxi)etoxi)etil)carbamoil)propoxi)-2-(5-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi)) pentiloxi)fenil)propanoico;
ácido 3-(6-(3-N-(5-((6-((1-aza-2-(2-sulfofenil)vinil)amino)(3-piridil))carbonilamino)-5-(N-(2,3,4,5,6-pentahidroxihexil)carbamoil)pentil)carbamoil)propoxi-2-(5-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi))pentiloxi)fenil)propanoico;
ácido 3-(6-(3-N-(5-((6-((1-aza-2-(2-sulfofenil)vinil)amino)(3-piridil))carbonilamino)-5-(N-(6-deoxi-\beta-ciclodextril)carbamoil)pentil)carbamoil)propoxi-2-(5-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi))pentiloxi)fenil)propanoico;
ácido 3-(6-(3-(N-(3-((6-((1-aza-2-(2-sulfofenil)vinil)amino)(3-piridil))-Gli-Lys-Lys-Lys)aminopropil)carbamoil)propoxi)-2-(5-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi))pentiloxi)fenil)propanoico;
hidrazona de la 2-sulfobenzaldehído (E)-N-[3-(6-hidracinonicotinamido)propil]-3-[6-[[(2,6-dichlorofenil)tio]metil]-3-(2-feniletoxi)-2-piridinil]-2-propenamida;
hidrazona de la 2-sulfobenzaldehído (E)-N-[3-(6-hidracinonicotinamido)propil]-3-[6-[(feniltio)metil]-3-(2-feniletoxi)-2-piridinil]-2-propenamida;
hidrazona de la 2-sulfobenzaldehído (E)-N-[3-(6-hidracinonicotinamido)propil]-3-[6-[[(2-chlorofenil)tio]metil]-3-(2-feniletoxi)-2-piridinil]-2-propenamida;
hidrazona de la 2-sulfobenzaldehído (E)-N-[3-(6-hidracinonicotinamido)propil]-3-[6-[[(2,6-dimetilfenil)tio]metil]-3-(2-feniletoxi)-2-piridinil]-2-propenamida;
hidrazona de la 2-sulfobenzaldehído (E)-N-[3-(6-hidracinonicotinamido)propil]-3-[6-[[(2,3,5,6-tetrafluorofenil)tio]metil]-3-(2-feniletoxi)-2-piridinil]-2-propenamida;
hidrazona de la 2-sulfobenzaldehído (E)-N-[3-(6-hidracinonicotinamido)propil]-3-[6-[[(4-hidroxifenil)tio]metil]-3-(2-feniletoxi)-2-piridinil]-2-propenamida;
hidrazona de la 2-sulfobenzaldehído (E)-N-[2-(6-hidracinonicotinamido)etil]-3 -[6-[[(2,6-dichlorofenil)tio]metil]-3-(2-feniletoxi)-2-piridinil]-2-propanamida;
hidrazona de la 2-sulfobenzaldehído N-[3-(6-hidracinonicotinamido)propil]-1 -[3-([1,1'-bifenil]-4-ilmetil)-2H-1-benzopiran-7-il]-ciclopentanecarboxamida;
hidrazona de la 2-sulfobenzaldehído 6-[5-(6-hidracinonicotinamido)pentiloxi]-5-(2-propenil)-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-ona;
hidrazona de la 2-sulfobenzaldehído 6-[6-(6-hidracinonicotinamido)hexiloxi]-5 -(2-propenil)-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-ona;
hidrazona de la 2-sulfobenzaldehído 6-[6-(6-hidracinonicotinamido)-4,4-dimetilpentiloxi]-5-(2-propenil)-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-ona;
hidrazona de la 2-sulfobenzaldehído 6-[6-(6-hidracinonicotinamido)-5,5-dimetilhexiloxi]-5-(2-propenil)-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-ona;
hidrazona de la 2-sulfobenzaldehído 6-[4-(6-sidracinonicotinamido)butoxi]-5 -(2-propenil)-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-ona;
hidrazona de la 2-sulfobenzaldehído 6-[3-(6-hidracinonicotinamido)propoxi]-5 -(2-propenil)-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-ona;
hidrazona de la 2-sulfobenzaldehído 6-[2-(6-hidracinonicotinamido)etoxi]-5-(2-propenil)-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-ona;
ácido 2-[[[5-[[2,2-Dimetil-6-[(4-(3,4-metilendioxifenil)-6-fenil-2-piridinil)oxi]-1-hexanamino]carbonil]-2-piridinil]hidrazon]metil]-bencenosulfónico;
N-[2,2-dimetil-6-[(4-(3,4-metilendioxifenil)-6-fenil-2-piridinil)oxi]-hexil]-bis-S-(1-etoxietilmercapto-acetil)pentanoato;
ácido 2-[[[5-[[N-[6-[(4,6-difenil-2-piridinil)oxi]-hexanoil]-glicina-alfa-amino]carbonil]-2-piridinil]hidrazon]-metil]-bencenosulfónico;
2-acetil-4-etil-[5-[6-[[6-[[[(2-sulfonilfenil)metilen]hidracin]-3-piridinil]carbonil]amino]hexil]oxi]fenol;
2,4-dietil-[5-[5,5-dimetil-6-[[6-[[[(2-sulfonilfenil)metilen]hidracin]-3-piridinil]carbonil]amino]hexil]oxi]fenol;
3-(4-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))pentiloxi)-3-etoxifenil)-N-((6-hidracino(3-piridil))sulfonil)prop-2-enamida;
ácido 2-((6-((1-aza-2-(2-sulfofenil)vinil)-amino)(3-piridil))carbonil)-7-(5 -(4,6-difenil(2-piridil-oxi))pentiloxi)-1,2,3,4-tetrahidro-isoquinolina-3-carboxílico;
ácido 2-((6-((1-aza-2-(2-sulfofenil)vinil)-amino) (3-piridil)carbonilamino)-3-(4-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi)) pentiloxi)fenil)propanoico;
ácido 2-((6-((1-aza-2-(2-sulfofenil)vinil)-amino) (3-piridil)carbonilamino)-3-(2-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi)) pentiloxi)fenil)propanoico;
ácido 3-((6-((1-aza-2-(2-sulfofenil)vinil)amino)(3-piridil)carbonilamino)-3 -(N-(6-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)carbamoil)propanoico;
ácido 2-(2-aza-2-((5-(N-(3-(2-(2-(3-((1-((N-metil-N-(2-feniletil)carbamoil)metil)-5-(fenilmetoxi)-indol-2-il)carbonilamino)propoxi)etoxi)etoxi)propil)-carbamoil)(2-piridil))amino)vinil)bencenosulfónico;
ácido 2-(2-((6-((1-aza-2-(2-sulfofenil)vinil)-amino)(3-piridil)carbonilamino)-3-carboxipropanoilamino)-3-(2-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))pentiloxi)fenil)propanoico;
ácido 2-(2-aza-2-((5-(N-(2-(N-(3-(2-(2-(3-(2-(2,5-dioxoimidazolidin-4-il)acetilamino)-propoxi)etoxi)etoxi)-propil)carbamoil)-1-(N-(6-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)carbamoil)-etil)carbamoil(2-piridil))amino)-vinil)bencenosulfónico;
ácido 6-((6-((1-aza-2-(2-sulfofenil)-vinil)amino)(3-piridil)carbonilamino)-2 -((1-((N-metil-N-(2-feniletil)carbamoil)metil)-5-(fenilmetoxi)indol-2-il)carbonilamino)hexanoico;
ácido 1-(3-((6-((1-aza-2-(2-sulfofenil)vinil)amino)-(3-piridil)carbonilamino)-3-(N-(6-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)carbamoil)propanoilamino)-etan-1,2-dicarboxílico;
ácido 1-(2-(3-((6-((1-aza-2-(2-sulfofenil)vinil)-amino)(3-piridil)carbonilamino)-3-(N-(6-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)carbamoil)propanoilamino)-3-carboxipropanoilamino)etan-1,2-dicarboxílico;
ácido 2-(2-aza-2-((5-(N-(1-(N-(6-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)carbamoil)-2-(3-(((4,5,6-trihidroxi-3-(hidroximetil)(2-oxanil))amino)carbonilamino)-propanoilamino)etil)carbamoil(2-piridil))amino)vinil)-bencenosulfónico;
ácido 2-(2-aza-2-((5-((6-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexanoil-amino)sulfonil)-(2-piridil))amino)vinil)bencenosulfónico;
6-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))-N-(1-(N-((6-hidracino(3-piridil))sulfonil)carbamoil)-2-(4-hidroxifenil)etil)-2,2-dimetilhexanamida;
4-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-N-(1-(N-(1-(N-((6-hidracino(3-piridil))sulfonil)carbamoil)-2-(4-hidroxifenil)etil)-carbamoil)-isopropil)butanamida;
ácido 3-(4-(3-((6-((1-aza-2-(2-sulfofenil)vinil)amino)(3-piridil))carbonilamino)-propoxi)fenil)-2-(2,2-dimetil-6-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi))hexanoilamino)propanoico;
ácido 3-((6-((1-aza-2-(2-sulfofenil)vinil)amino)(3-piridil)carbonilamino)-3 -(N-(6-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)carbamoil)propanoico;
ácido 2-(2-aza-2-((5-(N-(1-(N-(6-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetil-hexil)carbamoil)-2-(4-hidroxifenil)etil)carbamoil(2-piridil))amino)vinil)-bencenosulfónico;
ácido 2-((6-((1-aza-2-(2-sulfofenil)vinil)amino)(3-piridil)carbonilamino)-2 -(2,2-dimetil-6-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi))hexanoilamino)acético;
ácido 2-((6-((1-aza-2-(2-sulfofenil)vinil)amino)(3-piridil)carbonilamino)-2 -(2,2-dimetil-6-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi))hexanoilamino)acético;
ácido 3-((6-((1-aza-2-(2-sulfofenil)vinil)amino)(3-piridil)carbonilamino)-3 -(N-(6-(6-etil-3-hidroxi-4-fenilfenoxi)-2,2-dimetilhexil)carbamoil)propanoico;
ácido 2-((6-((1-aza-2-(2-sulfofenil)vinil)amino)(3-piridil)carbonilamino)-2 -(6-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexanoilamino)acético;
ácido 2-(2-aza-2-((5-(N-(5-((3-((N-(6-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexanoilamino)-3-(4-hidroxifenil)propanoilamino)-1-(N-(2,3,4,5,6-pentahidroxihexil)carbamoil)pentil)carbamoil(2-piridil))amino)vinil)bencenosulfónico;
ácido 2-(2-aza-2-((5-(N-(5-((3-((N-(6-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)-carbamoil)-2-(N-(2,3,4,5,6-pentahidroxihexil)carbamoil)-etil)carbamoil(2-piridil))amino)vinil)bencenosulfónico;
ácido 2-(2-aza-2-((5-(N-(5-((3-((N-(6-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)carbamoil)amino)fenil)carbonilamino)-1-(N- (2,3,4,5,6-pentahidroxihexil)carbamoil)pentil)carbamoil(2-piridil))amino)vinil)bencenosulfónico;
ácido 2-((6-((1-aza-2-(2-sulfofenil)vinil)amino)(3-piridil))carbonilamino)-3 -(N-(6-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)carbamoil)-propanoilamino)-3-carboxipropanoilamino)-3-carboxipropanoilamino)-etan-1,2-dicarboxílico;
ácido 2-((6-((1-aza-2-(2-sulfofenil)vinil)amino)(3-piridil))carbonilamino)-3 -(2-(5-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))pentiloxi)fenil)propanoico.
En un segundo alcance, la presente invención proporciona un nuevo equipo que comprende un reactivo previamente descrito.
En otro alcance preferido, el equipo comprende además un agente de reducción.
En otro alcance más preferido, el agente de reducción es estaño (II).
En otro alcance incluso más preferido, el equipo comprende además uno o más ligandos auxiliares.
En otro alcance adicionalmente preferido, los agentes auxiliares son tricina y TPPTS.
En un tercer alcance, la presente invención proporciona un nuevo agente de unión a LTB4 marcado isotópicamente en el que el radioisótopo está seleccionado entre ^{99m}Tc, ^{111}In, ^{95}Tc, ^{62}Cu, ^{67}Ga, ^{68}Ga, ^{123}I, ^{125}I, ^{18}F, ^{11}C, ^{13}N, ^{15}O, y ^{75}Br.
En otro alcance preferido, el agente de unión a LTB4 marcado isotópicamente está preparado a partir de un reactivo descrito previamente en el que el agente de unión es preparado entre un reactivo previamente descrito en el que el radioisótopo es ^{99m}Tc.
En otro alcance más preferido, los agentes de unión a LTB4 marcados isotópicamente están seleccionados entre:
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(4-etil-2-(4-fluorofenil)-[5-[5,5-dimetil-6-[[[6-diazenido-3-piridinil]carbonil]amino]hexil]oxi]fenol);
^{99m}Tc(tricina)(TPPDS)(4-etil-2-(4-fluorofenil)-[5-[5,5-dimetil-6-[[[6-diazenido-3-piridinil]carbonil]amino]hexil]oxi]fenol);
^{99m}Tc(tricina)(TPPMS)(4-etil-2-(4-fluorofenil)-[5-[5,5-dimetil-6-[[[6-diazenido-3-piridinil]carbonil]amino]hexil]oxi]fenol);
^{99m}Tc(tricina)(3-sulfonatopiridina))(4-etil-2-(4-fluorofenil)-[5-[5,5-dimetil-6-[[[6-diazenido-3-piridinil]carbonil]amino]hexil]oxi]fenol);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(4-etil-2-(4-fluorofenil)-[5-[4-[[[6-diazenido-3-piridinil]carbonil]amino]butil]oxi]fenol);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(2-[[5-[[(6-[(4,6-difenil-2-piridinil)oxi]-1-hexanamino]carbonil]-2-piridinil]diazenido]);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(2-[[5-[[2,2-dimetil-6-[(6-fluorofenil-4-fenil-2-piridinil)oxi]-1-hexanamino]carbonil]-2-piridinil]diazenido]);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(2-[[5-[[N-[6-[(4,6-difenil-2-piridinil)oxi]-hexanoil]-tirosin-O-[3-propanamino]]carbonil]-2-piridinil]diazenido]);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(2-[[[5-[[N-[6-[(4-(3,4-metilendioxifenil)-6-fenil-2-piridinil)oxi]-hexanoil]-tirosin-O-[3-propanamino]]-carbonil]-2-piridinil]diazenido]);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(2-[[[5-[[alfa-N-[6-[(4,6-difenil-2-piridinil)oxi]-hexanoil]-lisin-epsilon-N-amino]carbonil]-2-piridinil]diazenido]);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(2-[[[5-[[[6-[(4,6-difenil-2-piridinil)oxi]-2,2-dimetil-1-hexil]aza]carbonil]-2-piridinil]diazenido]);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(4-etil-2-(4-fluorofenil)- [5-[6,6-dimetil-7- [[6-[[6-diazenido]-3-piridinil] carbonil]amino]heptil]oxi]fenol);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(ácido 2-[6-[(4,6-Difenil-2-piridinil)oxi] pentil]-6-(8-[[[6-diazenido]-3-piridinil]carbonil]amino-5-aza-4-oxooctiloxi) bencenopropanoico);
^{99m}Tc(tricina)(ácido 3-piridinasulfónico))(ácido 2-[6-[(4,6-Difenil-2-piridinil)oxi]pentil]-6-(8-[[[6-diazenido]-3-piridinil]carbonil]amino-5-aza-4-oxooctiloxi)bencenopropanoico);
^{99m}Tc(tricina)(ácido 3,5-piridinadicarboxílico)(ácido 2-[6-[(4,6-Difenil-2-piridinil)oxi]pentil]-6-(8-[[[6-diazenido]-3-piridinil]carbonil]amino-5-aza-4-oxooctiloxi)bencenopropanoico);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(ácido 6-(11-[[[6-diazenido]-3-piridinil]carbonil]amino-3,6,9-trioxaundeciloxi)-2-[5-[(5-oxo-1-(2-propenil)-5,6,7,8-tetrahidro-2-naftalenil)oxi]pentiloxi]bencenopropanoico);
^{99m}Tc(tricina)(TFP)(ácido 6-(11-[[[6-diazenido]-3-piridinil]carbonil]amino-3,6,9-trioxaundeciloxi)-2-[5-[(5-oxo-1-(2-propenil)-5,6,7,8-tetrahidro-2-naftalenil)oxi]pentiloxi]bencenopropanoico);
^{99m}Tc(tricina)(ácido 3,5-piridinadicarboxílico)(6-(11-[[[6-diazenido]-3-piridinil]carbonil]amino-3,6,9-trioxaundeciloxi)-2-[5-[(5-oxo-1-(2-propenil)-5,6,7,8-tetrahidro-2-naftalenil)oxi]pentiloxi]bencenopropanoico);
^{99m}Tc(tricina)(ácido isonicotínico)(ácido 6-(11-[[[6-diazenido]-3-piridinil]carbonil]amino-3,6,9-trioxaundeciloxi)-2-[5-[(5-oxo-1-(2-propenil)-5,6,7,8-tetrahidro-2-naftalenil)oxi]pentiloxi]bencenopropanoico Acid);
^{99m}Tc(tricina)(ácido nicotínico)(ácido 6-(11-[[[6-diazenido]-3-piridinil]carbonil]amino-3,6,9-trioxaundeciloxi)-2-[5-[(5-oxo-1-(2-propenil)-5,6,7,8-tetrahidro-2-naftalenil)oxi]pentiloxi]bencenopropanoico);
^{99m}Tc(tricina)(ácido 3-piridinasulfónico)(ácido 6-(11-[[[6-diazenido]-3-piridinil]carbonil]amino-3,6,9-trioxaundeciloxi)-2-[5-[(5-oxo-1-(2-propenil)-5,6,7,8-tetrahidro-2-naftalenil)oxi]pentiloxi]bencenopropanoico);
^{99m}Tc(tricina)(hidroxietilisonicotinamida)(ácido 6-(11-[[[6-diazenido]-3-piridinil]carbonil]amino-3,6,9-trioxaundeciloxi)-2-[5-[(5-oxo-1-(2-propenil)-5,6,7,8-tetrahidro-2-naftalenil)oxi]pentiloxi]bencenopropanoico);
^{99m}Tc(tricina)(4-metil-5-imidazolmetanol)(ácido 6-(11-[[[6-diazenido]-3-piridinil]carbonil]amino-3,6,9-trioxaundeciloxi)-2-[5-[(5-oxo-1-(2-propenil)-5,6,7,8-tetrahidro-2-naftalenil)oxi]pentiloxi]bencenopropanoico);
^{99m}Tc(tricina)(4-metil-5-tiazoletanol)(ácido 6-(11-[[[6-diazenido]-3-piridinil]carbonil]amino-3,6,9-trioxaundeciloxi)-2-[5-[(5-oxo-1-(2-propenil)-5,6,7,8-tetrahidro-2-naftalenil)oxi]pentiloxi]bencenopropanoico);
^{99m}Tc(tricina)(piridina)(ácido 6-(11-[[[6-diazenido]-3-piridinil]carbonil]amino-3,6,9-trioxaundeciloxi)-2-[5-[(5-oxo-1-(2-propenil)-5,6,7,8-tetrahidro-2-naftalenil)oxi]pentiloxi]bencenopropanoico);
^{99m}Tc(tricina)(ácido 4-piridiletilsulfónico)(ácido 6-(11-[[[6-diazenido]-3-piridinil]carbonil]amino-3,6,9-trioxaundeciloxi)-2-[5-[(5-oxo-1-(2-propenil)-5,6,7,8-tetrahidro-2-naftalenil)oxi]pentiloxi]bencenopropanoico);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(N-((6-(diazenido)(3-piridil))sulfonil)-3-(1-((N- (2-feniletil)carbamoil)metil)-5-(fenilme-toxi)indol-3-il)prop-2-enamida);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)((2-((5-carbamoil(2-piridil)diazenido) 3-((7-(3-(6-etil-4-(4-fluorofenil)-3-hidroxifenoxi) propoxi)-8-propilcroman-2-il)carbonilamino)propanoato de etilo);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(3-((7-(-(6-etil-4-(4-fluorofenil)-3-hidroxifenoxi)propoxi)-8-propilcroman-2-il)carbonilamino)propil-2-metilpropanoato, 2-(2((5-carbamoil(2-piridil)diazenido);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(N-(3-((7-(3-(6-etil-4-(4-fluorofenil)-3-hidroxifenoxi)propoxi)-8-propilcroman-2-il)carbonilamino)propil)-2-metilpropanamida, 2-(2-((5-carbamoil(2-piridil))diazenido);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(2-(2-((5-(N-(6-(6-etil-3-hidroxi-4-(1-metilpirazol-5-il)fenoxi)-2,2-dimetilhexil)carbamoil)(2-piridil))diazenido);
^{99m}Tc(tricina)(3-piridinasulfónico acid)(2-(2-((5-(N-(6-(6-etil-3-hidroxi-4-(1-metilpirazol-5-il)fenoxi)-2,2-dimetilhexil)carbamoil)(2-piridil))diazenido);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(2-(2-((5-((3-((6-etil-4-(4-fluorofenil)-3-hidroxifenoxi)metil)piperidil)carbonil)(2-piridil))diazenido);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(2-(2-((5-(N-(3-(2-(2-(3-(5-(5-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-1,1-dimetilpentil)(1,2,3,4-tetraazolil))pentanoilamino) propoxi)etoxi)etoxi)propil)carbamoil)(2-piridil))diazenido);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(2-(2-((5-(N-(2-(2-(2-(2-(2-(2-(2-(2-(5-(4-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-1,1-dimetilpentil)(1,2,3,5-tetraazolil)) pentanoilamino)etoxi)etoxi)etoxi)etoxi)etoxi)etoxi)etoxi)etil) carbamoil)(2-piridil))diazeni-do);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(2-(2-((5-(N-(5-(4-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-1,1-dimetilpentil)(1,2,3,5-tetraazolil))pentanoilamino)-1-(6-deoxi-\beta-ciclodextril)carbamoil)pentil)carbamoil)(2-piridil))diazenido);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(ácido 3-(6-(3-(N-(5-((6-(diazenido)(3-piridil))carbonilamino)-5-(N-(\omega-metoxipolietilen(750)glicoxietil)carbamoil)pentil)carbamoil)propoxi)2-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))pentiloxi)fenil)propanoico);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(ácido 3-(6-(3-(N-(3-(2-(2-(3-((6-(diazenido)(3-piridil))carbonilamino)propoxi)etoxi)etoxi)propil)carbamoil)propoxi)2-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))pentiloxi)fenil)propanoico);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(ácido 3-(6-(3-(N-(5-((6-(diazenido)(3-piridil))carbonilamino)-5-(N-(2,3,4,5,6-pentahidroxihexil)carbamoil)pentil)carbamoil)propoxi)2-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))pentiloxi)fenil)propanoico);
^{99m}Tc(tricina)(TFP)(ácido 3-(6-(3-(N-(5-((6-(diazenido)(3-piridil))carbonilamino)-5-(N-(2,3,4,5,6-pentahidroxihexil)carbamoil)pentil)carbamoil)propoxi)2-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))pentiloxi)fenil)propanoico);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(ácido 3-(6-(3-(N-(3-((6-(diazenido)(3-piridil))carbonilamino)propil)carbamoil)propoxi)-2-(5-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi))pentiloxi)fenil)propanoico);
^{99m}Tc(tricina)(TFP)(ácido 3-(6-(3-(N-(3-((6-(diazenido)(3-piridil))carbonilamino)propil)carbamoil)propoxi)-2-(5-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi))pentiloxi)fenil)propanoico);
^{99m}Tc(tricina)(piridina)(ácido 3-(6-(3-(N-(3-((6-(diazenido)(3-piridil))carbonilamino)propil)carbamoil)propoxi)-2-(5-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi))pentiloxi)fenil)propanoico);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(ácido 3-(6-(3-N-(2-(2-(2-(2-(2-(2-(2-(2-((6- (diazenido)(3-piridil)) carbonilamino)etoxi)etoxi)etoxi)etoxi)etoxi)etoxi) etoxi)etil)carbamoil)propoxi)-2-(5-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi)) pentiloxi)fenil)propanoico);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(ácido 3-(6-(3-N-(5-((6-(diazenido)(3-piridil)) carbonilamino)-5-(N-(2,3,4,5,6-pentahidroxihexil)carbamoil)pentil) carbamoil)propoxi-2-(5-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi)) pentiloxi)fenil)propanoico);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(ácido 3-(6-(3-N-(5-((6-(diazenido)(3-piridil))carbonilamino)-5-(N-(6-deoxi-\beta-ciclodextril)carbamoil)pentil)carbamoil)propoxi-2-(5-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi))pentiloxi)fenil)propanoico);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(ácido 3-(6-(3-(N-(3-((6-((diazenido)(3-piridil))-Gli-Lys-Lys-Lys)aminopropil)carbamoil)propoxi)-2-(5-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi))pentiloxi)fenil)propanoico);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)((E)-N-[3-(6-diazenidonicotinamido)propil]-3-[6- [[(2,6-dichlorofenil)tio]metil]-3-(2-feniletoxi)-2-piridinil]-2-propenamida);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)((E)-N-[3-(6-diazenidonicotinamido)propil]-3-[6- [(feniltio)metil]-3-(2-feniletoxi)-2-piridinil]-2-propenamida);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)((E)-N-[3-(6-diazenidonicotinamido)propil]-3-[6- [[(2-chlorofenil)tio]metil]-3-(2-feniletoxi)-2-piridinil]-2-propenamida);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)((E)-N-[3-(6-diazenidonicotinamido)propil]-3-[6- [[(2,6-dimetilfenil)tio]metil]-3-(2-feniletoxi)-2-piridinil]-2-propenamida);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)((E)-N-[3-(6-diazenidonicotinamido)propil]-3-[6- [[(2,3,5,6-tetrafluorofenil)tio]metil]-3-(2-feniletoxi)-2-piridinil]-2-propenamida);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)((E)-N-[3-(6-diazenidonicotinamido)propil]-3-[6- [[(2,3,5,6-tetrafluorofenil)tio]metil]-3-(2-feniletoxi)-2-piridinil]-2-propenamida);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)((E)-N-[2-(6-diazenidonicotinamido)etil]-3-[6- [[(2,6-dichlorofenil)tio]metil]-3-(2-feniletoxi)-2-piridinil]-2-propanamida);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(6-[6-(6-diazenidonicotinamido)-4,4-dimetilpentiloxi]-5-(2-propenil)-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-ona);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(2-[[[5-[[2,2-Dimetil-6-[(4-(3,4-metilendioxifenil)-6-fenil-2-piridinil)oxi]-1-hexanamino]carbonil]-2-piridinil]diazenido);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(2-[[[5-[[N-[6-[(4,6-difenil-2-piridinil)oxi]-hexanoil]-glicina-alfa-amino]carbonil]-2-piridinil]diazenido);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(2,4-Dietil-[5-[5,5-dimetil-6-[[6-[[diazenido]-3-piridinil]carbonil]amino]hexil]oxi]fenol);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(ácido 2-((6-(diazenido)(3-piridil)carbonilamino)-3-(2-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))pentil-oxi)fenil)propanoico);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(ácido 3-((6-(diazenido)(3-piridil)carbonilamino)-3-(N-(6-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)carbamoil)propanoico);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(ácido 2-(2-((6-(diazenido)(3-piridil)carbonilamino)-3-carboxipropanoilamino)-3-(2-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))pentiloxi)fenil)propanoico);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(2-(2-((5-(N-(2-(N-(3-(2-(2-(3-(2-(2,5-dioxoimidazolidin-4-il)acetilamino)-propoxi)etoxi)etoxi)-propil)carbamoil)-1-(N- (6-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)carbamoil)-etil)carbamoil(2-piridil))dia-zenido);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(ácido 1-(3-((6-(diazenido)-(3-piridil)carbonilamino)-3-(N-(6-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)carbamoil)propanoilamino)-etan-1,2-dicarboxílico);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(2-(2-((5-(N-(1-(N-(6-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)carbamoil)-2-(3-(((4,5,6-trihidroxi-3-(hidroximetil)(2-oxanil))amino)carbonilamino)-propanoilamino)etil)carbamoil(2-piridil))diazenido);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(2-(2-((5-((6-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexanoil-amino)sulfonil)-(2-piridil))diazenido);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(ácido 3-((6-((diazenido)(3-piridil)carbonilamino)-3-(N-(6-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)carbamoil)propanoico);
^{99m}Tc(tricina)(TFP)(ácido 3-((6-((diazenido)(3-piridil)carbonilamino)-3- (N-(6-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)carbamoil)propanoico);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(2-(2-((5-(N-(1-(N-(6-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetil-hexil)carbamoil)-2-(4-hidroxifenil)etil)carbamoil(2-piridil))diazenido);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(ácido 2-((6-(diazenido)(3-piridil)carbonilamino)-2-(6-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexanoilamino)acético);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(2-(2-((5-(N-(5-((3-((N-(6-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexanoilamino)-3-(4-hidroxifenil)propanoilamino)-1-(N- (2,3,4,5,6-pentahidroxihexil)carbamoil)pentil)carbamoil(2-piridil))diazenido);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(2-(2-((5-(N-(5-((3-((N-(6-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)-carbamoil)-2-(N-(2,3,4,5,6-pentahidroxihexil)carbamoil)-etil)carbamoil(2-piridil))diazenido);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(2-(2-((5-(N-(5-((3-((N-(6-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)carbamoil)amino)fenil)carbonilamino)-1-(N-(2,3,4,5,6-pentahidroxihexil)carbamoil)pentil)carbamoil(2-piridil))diazenido);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(ácido 2-((6-(diazenido)(3-piridil))carbonilamino)-3-(N-(6-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)carbamoil)-propanoilamino)-3-carboxipropanoilamino)-3-carboxipropanoilamino)-etan-1,2-dicarboxílico);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(ácido 2-((6-(diazenido)(3-piridil))carbonilamino)-3-(2-(5-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))pentiloxi)fenil)propanoico);
^{99m}TcO(4-etil-2-(4-fluorofenil)-5-[(5,5-dimetil-6-aminohexil)oxi]fenol N-[4-(carboxi)bencil]-N,N'-bis[2-tiolatoetil]-glicinamida); y,
^{99m}TcO(N-[2,2-Dimetil-6-[(4-(3,4-metilendioxifenil)-6-fenil-2-piridinil)oxi]-hexil]-bis(mercapto-acetil)pentanoato).
En un cuarto alcance, la presente invención proporciona un nuevo método para detectar los sitios de infección e inflamación en un mamífero que comprende la administración a dicho mamífero de un agente de unión a LTB4 marcado isotópicamente y a continuación detectar dichos sitios utilizando una prueba de detección de radiación.
En un quinto alcance, la presente invención proporciona un nuevo método de tomar imágenes de los sitios de infección e inflamación en un mamífero que comprende la administración a dicho mamífero de un agente de unión a LTB4 marcado isotópicamente y a continuación tomar imágenes de dichos sitios utilizando una cámara gamma planar o circular.
En un sexto alcance, la presente invención proporciona un nuevo método de diagnóstico de enfermedad en un mamífero asociado con la infección e inflamación que comprende la toma de imágenes de dicho mamífero utilizando un agente de unión al LTB4 marcado isotópicamente y la determinación de la presencia de dicha enfermedad.
En un séptimo alcance, la presente invención proporciona un nuevo compuesto que tiene la fórmula: W_{e'}-O-(CR^{54}R^{55})_{k''}-Y'; en la que,
W_{e'} está seleccionado entre el grupo:
12
en el que,
R^{47} está seleccionado entre el grupo: alquilo de C_{1}-C_{6} sustituido con 0-3 R^{50}, alcoxi de C_{1}-C_{6} sustituido con 0-3 R^{50}, arilo sustituido con 0-3 R^{51}, y heterociclo sustituido con 0-3 R^{51};
R^{48} y R^{49}están seleccionados entre el grupo: alquilo de C_{1}-C_{3}, alquenilo de C_{2}-C_{3}, ciclopropilo, ciclopropilmetilo, y arilo sustituido con 0-3 R^{51};
R^{50} está independientemente seleccionado entre el grupo: -F, -Cl, -Br, -I, =O, -N(R^{52})(R^{53}), y -CF_{3};
R^{51} está independientemente seleccionado entre el grupo: -F, -Cl, -Br, -I, -N(R^{52})(R^{53}), -CF_{3}, alquilo de C_{1}-C_{3}, alcoxi de C_{1}-C_{3}, y metilendioxi;
R^{52} y R^{53} son independientemente H o alquilo de C_{1}-C_{3};
R^{54} y R^{55} están independientemente seleccionados cada vez que están presentes entre el grupo: H, alquilo de C_{1}-C_{5}, y alcoxi de C_{1}-C_{5}, o alternativamente, R^{54} y R^{55} pueden ser tomados juntos para formar un cicloalquilo de 3-6 miembros;
k'' es 4-7;
Y' está seleccionado entre el grupo: C(=O)NHR^{56}, NHC(=O)R^{56}, y NHC(=O)NHR^{57};
R^{56} está seleccionado entre el grupo: heterociclo aromático sustituido con 0-3 R^{58}, arilo sustituido con 0-3 R^{58}, y alquilo de C_{1}-C_{5} sustituido con 1-3 R^{59};
R^{57} está seleccionado entre el grupo: heterociclo sustituido con 0-3 R^{58}, arilo sustituido con 0-3 R^{58}, y alquilo de C_{1}-C_{5} sustituido con 0-3 R^{60};
R^{58} está independientemente seleccionado cada vez que está presente entre el grupo: -Cl, -F, -Br, -I, COOR^{61}, OR^{61}, C(=O)N(R^{61})_{2}, y alquilo de C_{1}-C_{3} sustituido con 0-3 R^{62};
R^{59}está independientemente seleccionado cada vez que está presente entre el grupo: -Cl, -F, -Br, -I, COOR^{61}, OR^{61}, C(=O)N(R^{61})_{2}, N(R^{61})_{2}, y NHC(=O)R^{63}, siempre que al menos un R^{59} sea NH(C=O)R^{63};
R^{60}está independientemente seleccionado cada vez que está presente entre el grupo: -Cl, -F, -Br, -I, COOR^{61}, OR^{61}, C(=O)N(R^{61})_{2}, N(R^{61})_{2}, y NHC(=O)R^{63};
R^{61} está independientemente seleccionado cada vez que está presente entre el grupo: H, y alquilo de C_{1}-C_{5};
R^{62} está independientemente seleccionado cada vez que está presente entre el grupo: -Cl, -F, -Br, -I, COOR^{64}, OR^{64}, C(=O)N(R^{64})_{2}, y NH(C=O)R^{64};
R^{63} está independientemente seleccionado cada vez que está presente entre el grupo: arilo sustituido con 0-3 R^{65}, y heterociclo sustituido con 0-3 R^{65};
R^{64} está independientemente seleccionado cada vez que está presente entre el grupo: H, y alquilo de C_{1}-C_{5};
R^{65} está independientemente seleccionado cada vez que está presente entre el grupo: -Cl, -F, -Br, -I, COOR^{66}, OR^{66}, y C(=O)N(R^{66})_{2}; y
R^{66} está independientemente seleccionado cada vez que está presente entre el grupo: H, y alquilo de C_{1}-C_{5};
y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos.
En otro alcance preferido, la presente invención proporciona un nuevo compuesto, en el que:
R^{50} está independientemente seleccionado entre el grupo: -F, -Cl, =O, -N(R^{52})(R^{53}), y -CF_{3};
R^{51} está independientemente seleccionado entre el grupo: -F, -Cl, -CF_{3}, alquilo de C_{1}-C_{3}, alcoxi de C_{1}-C_{3}, y metilendioxi;
R^{54} y R^{55} están independientemente seleccionados cada vez que están presentes entre el grupo: H, alquilo de C_{1}-C_{3}, y alcoxi de C_{1}-C_{3};
k'' es 5-6;
R^{56} está seleccionado entre el grupo: piridina sustituida con 0-3 R^{58}, arilo sustituido con 0-3 R^{58}, y alquilo de C_{1}-C_{3} sustituido con 1-3 R^{59};
R^{57} está seleccionado entre el grupo: piridina sustituida con 0-3 R^{58}, arilo sustituido con 0-3 R^{58}, y alquilo de C_{1}-C_{3} sustituido con 0-3 R^{60};
R^{58} está independientemente seleccionado cada vez que está presente entre el grupo: -Cl, -F, COOR^{61}, OR^{61}, y C(=O)N(R^{61})_{2};
R^{59} está independientemente seleccionado cada vez que está presente entre el grupo: COOR^{61}, OR^{61}, C(=O)N(R^{61})_{2}, y NHC(=O)R^{63}, siempre que al menos un R^{59} sea NH(C=O)R^{63};
R^{60} está independientemente seleccionado cada vez que está presente entre el grupo: COOR^{61}, OR^{61}, 
\hbox{C(=O)N(R ^{61})_{2} }
, y NHC(=O)R^{63};
R^{61} está independientemente seleccionado cada vez que está presente entre el grupo: H, y alquilo de C_{1}-C_{5};
R^{63} está independientemente seleccionado cada vez que está presente entre el grupo: fenilo sustituido con 0-3 R^{65}, y piridina sustituida con 0-3 R^{65}; y,
R^{65} está independientemente seleccionado cada vez que está presente entre el grupo: -Cl, -F, COOR^{66}, y OR^{66}.
En otro alcance más preferido, la presente invención proporciona un nuevo compuesto, en el que:
R^{47} es fenilo o p-fluorofenilo;
R^{48} es fenilo sustituido con 0-1 R^{51};
R^{49} es alquilo de C_{2}-C_{3};
R^{51} es-F o metilendioxi;
R^{54} y R^{55} son independientemente H o metilo;
R^{56} está seleccionado entre el grupo:
piridina sustituida con 0-1 R^{58}, fenilo sustituido con 0-1 R^{58}, y alquilo de C_{1}-C_{3} sustituido con 1-3 R^{59};
R^{57} está seleccionado entre el grupo:
piridina sustituida con 0-1 R^{58}, fenilo sustituido con 0-1 R^{58}, y alquilo de C_{1}-C_{3} sustituido con 0-3 R^{60};
R^{58} está independientemente seleccionado cada vez que está presente entre el grupo: -F, COOH, y OH;
R^{59}está independientemente seleccionado cada vez que está presente entre el grupo: COOH, OH, y NHC(=O)R^{63}, siempre que al menos un R^{59} sea NH(C=O)R^{63};
R^{60}está independientemente seleccionado cada vez que está presente entre el grupo: COOH, OH, C(=O)NH_{2}, y NHC(=O)R^{63};
R^{61} está independientemente seleccionado cada vez que está presente entre el grupo: H, y alquilo de C_{1}-C_{3};
R^{63} está independientemente seleccionado cada vez que está presente entre el grupo: fenilo sustituido con 0-1 R^{65}, y piridina sustituida con 0-1 R^{65}; y
R^{65} está independientemente seleccionado cada vez que está presente entre el grupo: -Cl, -F, COOH, y OH.
En otro alcance incluso más preferido, el compuesto está seleccionado entre:
13
14
Cuando cualquier variable se produce más de una vez en cualquier constituyente o en cualquier fórmula, su definición en cada ocasión que está presente es independiente de su definición en cualquier otra ocasión. Así, por ejemplo, si un grupo se muestra estar sustituido con 0-2 R^{52}, entonces dicho grupo puede estar opcionalmente sustituido con hasta dos R^{52}, y R^{52} cada vez que está presente está seleccionado independientemente entre la lista definida de posibles R^{52}. También, por vía del ejemplo, para el grupo-N(R^{53})_{2}, cada uno de los dos sustituyentes R^{53} sobre el N está independientemente seleccionado entre la lista definida de posibles R^{53}. Las combinaciones de sustituyentes y/o variables son permisibles sólo si dichas combinaciones dan lugar a compuestos estables.
Por ``reactivo'' se entiende un compuesto de esta invención capaz de sufrir una transformación directa al radiofármaco de esta invención. Los reactivos pueden ser utilizados directamente para la preparación de los radiofármacos de esta invención o pueden ser un componente en un equipo de esta invención.
El término ``agente de unión'' significa un radiofármaco de esta invención que tiene afinidad para, y es capaz de unirse al, LTB4. Los agentes de unión de esta invención tienen una Ki < 1000nM.
Por ``compuesto estable'' o ``estructura estable'' se entiende en la presente invención un compuesto que sea suficientemente robusto para sobrevivir al aislamiento hasta un grado útil de pureza a partir de la mezcla de reacción, y a su formulación en un agente de diagnóstico eficaz.
El término ``sustituido'', tal como se utiliza en la presente invención, significa que uno o más hidrógenos en el átomo o grupo designado están sustituidos con una selección entre el grupo indicado, siempre que no se exceda la valencia normal del átomo o del grupo designado, y que la sustitución de lugar a un compuesto estable. Cuando un sustituyente es ceto (es decir, =O), entonces se sustituyen 2 hidrógenos en el átomo.
El término ``enlace'', tal como se utiliza en la presente invención, significa tanto un enlace simple como doble.
El término ``sal'', tal como se utiliza en la presente invención, se utiliza tal como se ha definido en el CRC Handbook of Chemistry y Physics, 65ª Edición, CRC Press, Boca Raton, Fla, 1984, como cualquier sustancia que da lugar a iones, diferentes de los iones hidrógeno o hidroxilo.
Tal como se utiliza en la presente invención, ``alquilo'' pretende incluir tanto los grupos hidrocarburos alifáticos saturados de cadena lineal como ramificada teniendo el número especificado de átomos de carbono; ``cicloalquilo'' o ``carbociclo'' pretende incluir los grupos de anillo saturados o parcialmente insaturados, incluyendo los sistemas de anillo mono-, bi- o poli-cíclico, tales como ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, cicloheptilo, ciclooctilo y adamantilo; ``bicicloalquilo'' pretende incluir los grupos de anillo parcialmente insaturados, tales como [3.3.0]biciclooctano, [4.3.0]biciclononano, [4.4.0]biciclodecano (decalina), [2.2.2]biciclooctano, y similares.
Tal como se utiliza en la presente invención, el término ``alqueno'' o ``alquenilo'' pretende incluir tanto los grupos de cadena lineal como ramificada de fórmula C_{n}H_{2n-1} que tiene el número especificado de átomos de carbono.
Tal como se utiliza en la presente invención, el término ``alquino'' o ``alquinilo'' pretende incluir tanto los grupos de cadena lineal como ramificada de fórmula C_{n}H_{2n-3} que tienen el número especificado de átomos de carbono.
Tal como se utiliza en la presente invención, ``arilo'' o ``residuo aromático'' pretende significar fenilo o naftilo, el cual en el caso de estar sustituido puede tener la sustitución en cualquier posición.
Tal como se utiliza en la presente invención, el término ``heterociclo'' o ``sistema de anillo heterocíclico'' pretende significar un anillo hetrocíclico estable de 5- a 7- miembros monocíclico o bicíclico o de 7- a 14- miembros bicíclico o tricíclico, que puede estar saturado, parcialmente insaturado, o aromático, y que consiste en átomos de carbono y entre 1 y 4 heteroátomos independientemente seleccionados entre el grupo que consiste en N, O y S y en el que los heteroátomos de nitrógeno y de azufre pueden estar opcionalmente cuaternizados, e incluir cualquier grupo bicíclico en el que cualquiera de los anillos heterocíclicos anteriormente definidos esté fusionado a un anillo de benceno. El anillo heterocíclico puede estar unido a su grupo pendiente por cualquier heteroátomo o átomo de carbono que de lugar a una estructura estable. Los anillos heterocíclicos descritos en la presente invención pueden estar sustituidos en el átomo de carbono o en el de nitrógeno si el compuesto resultante es estable. Ejemplos de dichos heterociclos incluyen, pero no están limitados a, benzopiranilo, tiadiacina, tetrazolilo, benzofuranilo, benzotiofenilo, indoleno, quinolina, isoquinolinilo o benzimidazolilo, piperidinilo, 4-piperidona, 2-pirrolidona, tetrahidrofurano, tetrahidroquinolina, tetrahidroisoquinolina, decahidroquinolina, octahidroisoquinolina, azocina, triacina (incluyendo 1,2,3-, 1,2,4-, y 1,3,5-triacina), 6H-1,2,5-tiadiacina, 2H,6H-1,5,2-ditiacina, tiofeno, tetrahidrotiofeno, tiantreno, furano, pirano, isobenzofurano, cromeno, xanteno, xantona, fenoxatiina, 2H-pirrol, pirrol, imidazol, pirazol, tiazol, isotiazol, oxazol (incluyendo 1,2,4- y 1,3,4-oxazol), isoxazol, triazol, piridina, piracina, pirimidina, piridacina, indolizina, isoindol, 3H-indol, indol, 1H-indazol, purina, 4H-quinolizina, isoquinolina, quinolina, ftalacina, naftiridina, quinoxalina, quinazolina, cinnolina, pteridina, 4aH-carbazol, carbazol, \beta-carbolina, fenantridina, acridina, perimidina, fenantrolina, fenacina, fenarsacina, fenotiacina, furazano, fenoxacina, isocromano, croman, cromanona, pirrolidina, pirrolina, imidazolidina, imidazolina, pirazolidina, pirazolina, piperacina, indolina, isoindolina, quinuclidina, o morfolina. También se incluyen compuestos de anillo y espiro fusionados conteniendo, por ejemplo, los heterociclos anteriores.
Tal como se utiliza en la presente invención, el término ``alcarilo'' significa un grupo arilo soportando un grupo alquilo de 1-10 átomos de carbono; el término ``aralquilo'' significa un grupo alquilo de 1-10 átomos de carbono que soporta un grupo arilo; el término ``arilalcarilo'' significa un grupo arilo que soporta un grupo alquilo de 1-10 átomos de carbono que soporta un grupo arilo; y el término ``heterocicloalquilo'' significa un grupo alquilo de 1-10 átomos de carbono que soporta un heterociclo.
Un ``polialquilen glicol'' es un polietilen glicol, polipropilen glicol o polibutilen glicol que tiene un peso molecular de menos de aproximadamente 5000, terminando tanto en una mitad hidroxi como éster de alquilo.
Un ``carbohidrato'' es un polihidroxi aldehído, cetona, alcohol o ácido, o derivados de los mismos, incluyendo polímeros de los mismos que poseen uniones poliméricas de tipo acetal.
Una ``ciclodextrina'' es un oligosacárido cíclico. Ejemplos de ciclodextrinaas incluyen, pero no están limitadas a, \alpha-ciclodextrina, hidroxietil-\alpha-ciclodextrina, hidroxipropil-\alpha-ciclodextrina, \beta-ciclodextrina, hidroxipropil-\beta-ciclodextrina, carboximetil-\beta-ciclodextrina, dihidroxipropil-\beta-ciclodextrina, hidroxietil-\beta-ciclodextrina, 2,6 di-O-metil-\beta-ciclodextrina, \beta-ciclodextrina sulfatada, \gamma-ciclodextrina, hidroxipropil-\gamma-ciclodextrina, dihidroxipropil-\gamma-ciclodextrina, hidroxietil-\gamma-ciclodextrina, y \gamma-ciclodextrina sulfatada.
Tal como se utiliza en la presente invención, el término ``policarboxialquilo'' significa un grupo alquilo que tiene entre dos y aproximadamente 100 átomos de carbono y una pluralidad de sustituyentes carboxilo; y el término ``poliazaalquilo'' significa un grupo alquilo lineal o ramificado de entre dos y aproximadamente 100 átomos de carbono, interrumpido por o sustituido con una pluralidad de grupos amino.
Un ``agente de reducción'' es un compuesto que reacciona con el radionúclido, el cual se obtiene de forma típica como un compuesto en un alto estado de oxidación, relativamente no reactivo, para disminuir su estado de oxidación por trasferencia de electrón(s) al radionúclido, con lo que éste se hace más reactivo. Los agentes de reducción útiles en la preparación de los radiofármacos y en los equipos de diagnóstico útiles para la preparación de dichos radiofármacos incluyen, pero no están limitados a, cloruro de estannoso, fluoruro estannoso, formamidina del ácido sulfínico, ácido ascórbico, cisteína, fosfinas, y sales de cobre o hierro. Otros agentes de reducción son descritos por Brodack y col., solicitud de patente PCT 94/22496.
Un ``ligando de transferencia'' es un ligando que forma un complejo intermedio con el radionúclido que es suficientemente estable para prevenir las reacciones secundarias indeseadas pero suficientemente lábil para ser convertido en el radiofármaco. La formación del complejo intermedio está cinéticamente favorecida mientras que la formación del radiofármaco está termodinámicamente favorecida. Los ligandos de transferencia útiles en la preparación de los radiofármacos y en los equipos de diagnóstico útiles para la preparación de dichos radiofármacos incluyen pero no están limitados a gluconato, glucoheptonato, manitol, glucarato, ácido N,N,N',N'-etilendiaminotetraacético, pirofosfato y metilendifosfonato. En general, los ligandos de transferencia están comprendidos de átomos donadores de oxígeno o nitrógeno.
El término ``átomo donante'' hace referencia al átomo directamente unido a un metal por un enlace químico.
``Auxiliar'' o ``co-ligandos'' son ligandos que se incorporan al radiofármaco durante su síntesis. Sirven para completar la esfera de coordinación del radionúclido junto con el quelador o la unidad de unión del radionúclido del reactivo. Para los radiofármacos constituidos por un sistema ligando binario, la esfera de coordinación de radionúclido está compuesta por uno o más queladores o unidades de unión a partir de uno o más reactivos y uno o más auxiliares o co-ligandos, siempre que haya un total de dos tipos de ligandos, queladores o unidades de unión. Por ejemplo, un radiofármaco constituido por un quelador o una unidad de unión a partir de un reactivo y dos del mismo auxiliar o co-ligandos y un radiofármaco constituido por dos queladores o unidades de unión a partir de uno o dos reactivos y un auxiliar o co-ligando son considerados como que están constituidos por sistemas de ligandos binarios. Para los radiofármacos constituidos por un sistema de ligando ternario, la esfera de coordinación del radionúclido está compuesta por uno o más queladores o unidades de unión a partir de uno o más reactivos y uno o más de los dos tipos diferentes de auxiliares o co-ligandos, siempre que en total haya tres tipos de ligandos, queladores o unidades de unión. Por ejemplo, se considera que un radiofármaco constituido por un quelador o unidad de invención a partir de un reactivo y dos diferentes auxiliares o co-ligandos está constituido por un sistema de ligando ternario.
Los auxiliares o co-ligandos útiles en la preparación de radiofármacos y en los equipos de diagnóstico útiles para la preparación de dichos radiofármacos están constituidos por uno o más átomos donantes de oxígeno, nitrógeno, carbono, azufre, fósforo, arsénico, selenio y telurio. Un ligando puede ser un ligando de transferencia en la síntesis de un radiofármaco y también sirve como un auxiliar o co.ligando en otro radiofármaco. El que un ligando sea llamado como de transferencia o auxiliar o co-ligando depende de si el ligando permanece en la esfera de coordinación en el radiofármaco, lo cual viene determinado por la química de coordinación del radionúclido y el quelador o unidad de unión del reactivo o reactivos.
Un ``quelador'' o ``unidad de unión'' es la mitad o el grupo en un reactivo que une a un radionúclido metálico a través de la formación de enlaces químicos con uno o más átomos donadores.
El término ``sitio de unión'' significa el sitio in vivo o in vitro que une a una molécula biológicamente activa.
Un ``equipo de diagnóstico'' o ``equipo'' comprende una colección de componentes, denominados la formulación, en uno o más recipientes que se utilizan por el utilizador destinatario final en una clínica o farmacia con el objetivo de sintetizar el radiofármaco. El equipo proporciona todos los componentes requeridos para la síntesis y el uso del radiofármaco excepto aquellos que es comúnmente asequible al utilizador destinatario final, tal como agua o solución salina para inyección, una solución del radionúclido, equipo para calentar el equipo durante la síntesis del radiofármaco, en el caso de que se requiera, equipo necesario para administrar el radiofármaco al paciente tal como jeringas y protector, y equipo para la toma de imágenes.
Un ``tampón'' es un compuesto que se utiliza para el control del pH del equipo durante su fabricación y durante la síntesis del radiofármaco.
Un ``auxiliar de liofilización'' es un componente que tiene propiedades físicas favorables para la liofilización, tales como la temperatura de transición de cristal, y se adiciona al equipo de diagnóstico para mejorar las propiedades físicas de la combinación de todos los componentes del equipo para la liofilización.
Un ``auxiliar de estabilización'' es un componente que se añade al radiofármaco o al equipo de diagnóstico tanto para estabilizar al radiofármaco una vez que ha sido sintetizado como para prolongar la duración de conservación del equipo antes de su utilización. Los auxiliares de estabilización pueden ser antioxidantes, agentes de reducción o captadores de radicales y pueden proporcionar una estabilidad mejorada por reacción preferencial con especies que degradan otros componentes o el radiofármaco.
Un ``auxiliar de solubilización'' es un componente que mejora la solubilidad de uno o más componentes en el medio requerido para la síntesis del radiofármaco.
Un ``bacterioestato'' es un componente que inhibe el crecimiento de las bacterias en el equipo de diagnóstico tanto durante su almacenamiento antes o después del uso del equipo para sintetizar el radiofármaco.
En un alcance esta invención es un radiofármaco antagonista del LTB4 marcado isotópicamente. El radiofármaco es un radioisótopo adecuado que tiene una emisión que puede ser detectada fuera del cuerpo después de la inyección del antagonista del LTB4 marcado isotópicamente en un mamífero. La detección utilizando una cámara gamma da lugar a una imagen de las áreas de localización de glóbulos blancos que corresponden al receptor del LTB4 al que está unido el radiofármaco. Nuestra aproximación en el diseño de los radiofármacos antagonistas del LTB4 fue identificar características comunes en los compuestos de los que se conoce que tienen usos terapéuticos potenciales, y a continuación, el diseño de los radiofármacos que poseen dichos rasgos, asistidos por un mapa en 3 dimensiones del receptor de LTB4 que hemos desarrollado.
Se conocen un número de compuestos de LTB4 terapéuticos. Estos compuestos muestran una amplia variedad de tipos estructurales. Muchos de estos compuestos comparten una similitud que es la presencia de dos regiones clave en la molécula, descritas en la literatura como los finales este y oeste de la molécula, conectados por un grupo tetérico flexible. Recientes revisiones de los antagonistas de LTB4 incluyen las publicaciones de Djuric y col., Drugs of the Future, 1992, 17, págs. 819-830; Cohen, N. y Yagaloff, K., Curr. Opin. Invest. Drugs, 1994, 3, pp. 13-22; y Brooks, C. y Summers, J., J. Med. Chem., 1996, 39, págs. 2629-2654.
Hemos identificado dos conceptos para el diseño de los antagonistas de LTB4 marcados isotópicamente. En uno de los conceptos la unida que se une al radioisótopo está incorporada en la estructura de modo que participa en la unión del compuesto al lugar del receptor incluso cuando se une al radioisótopo. En el segundo concepto, la unidad que une el radioisótopo se incorpora al lugar de la molécula que no es parte del lugar de reconocimiento, y se elimina suficientemente del sitio de reconocimiento de modo que su presencia no interfiere con la unión del compuesto al receptor.
Un ejemplo del primer concepto es diseñar un radiofármaco de LTB4 en el que tanto el final este como el oeste de un antagonista de LTB4 terapéutico potencial es sustituido con una unidad de unión al radionúclido apropiada que une al Tc-99m o al sustituyente radiohalógeno. El Esquema 1 muestra el potencial antagonista de LTB4 terapéutico, (I), el cual tiene una excelente afinidad para el receptor de LTB4 (Sawyer y col.; J. Med. Chem., 1995, 38, 4411-32). En (I) el sustituyente tetrazol sirve como un aceptor de la unión de hidrógeno, con lo que se favorece la unión del compuesto al receptor. Cuando el tetrazol está ausente, el compuesto no tiene afinidad (7 \muM) para el receptor de LTB4. En el Esquema I también se muestra el radiofármaco (II), que es un antagonista del receptor de LTB4 marcado con Tc-99m. En este radiofármaco, el grupo tetrazol de (I) está sustituido con el complejo quelador metálico HYNIC al Tc, cuya esfera de coordinación está completada por don ligandos auxiliares. (II) mantiene buena actividad para el receptor de LTB4. (II) puede ser preparado a partir del reactivo (IIa), el cual soporta un grupo de hidrazonicotinamida con la hidrazona protegida, por reacción de (IIa) con Tc-99m en presencia de un agente de reducción adecuado y de ligandos auxiliares apropiados. (IIa) mantiene muy buena afinidad para el LTB4 (Ki = 8 nM en comparación con los 
\hbox{3 nM}
para I).
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Esquema 1
Un ejemplo de la segunda aproximación se muestra en el Esquema 2. El compuesto III es un antagonista del LTB4 activo (Ki = 41 nM). Este compuesto se elaboró en un reactivo de esta invención. Esto se consiguió por conjugación de grupo hidracinonicotinamida protegido en la hidrazona a través de un téter de tres carbonos al oxígeno del hidroxilo de la tirosina para proporcionar un reactivo para preparar el radiofármaco de Tc-99m de la presente invención, reactivo IV. El reactivo (IV), con Ki = 52nM, tuvo esencialmente la misma afinidad para el LTB4 que la que tuvo (III). El reactivo IV es convertido con facilidad en el análogo radiomarcado utilizando los métodos descritos anteriormente.
El anillo aromático de tirosina de (III) también puede ser radioyodado para formar un radiofármaco de la presente invención.
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Esquema 2
En los reactivos de la presente invención, los compuestos IIa y IV mostrados anteriormente, tienen los tres rasgos estructurales comunes: un final oeste comprendido por un aceptor del enlace de hidrógeno, tanto un oxígeno fenólico como un nitrógeno de piridina, y un sustituyente aromático; un espaciador o téter; y un final oeste comprendido por un aceptor del enlace de hidrógeno, un oxígeno carbonilo. En el Esquema 3 se muestran algunos ejemplos de mitades del final oeste alternativos.
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Esquema 3
Algunos ejemplos de espaciadores alternativos o téteres incluyen alquilos acíclicos, tanto de cadena lineal como ramificada y heterocicloalquilos. En el Esquema 4 se muestran algunos ejemplos de finales oeste alternativos soportando un segundo espaciador opcional o téter y un quelador o unidad de unión del metal.
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Esquema 4
El segundo espaciador o téter proporciona un medio de incorporar un modificador farmacocinético en los radiofármacos de la presente invención. El modificador farmacocinético sirve para dirigir la biodistribución de la parte del radiofármaco inyectado que no se asocia con los glóbulos blancos. Una amplia variedad de grupos funcionales puede servir como modificadores farmacocinéticos incluyendo, pero sin estar limitado a, carbohidratos, polialquilen glicoles, péptidos o otros poliamino ácidos, y ciclodextrinas. Los modificadores están generalmente caracterizados por una pluralidad de átomos seleccionados entre oxígeno y nitrógeno, que proporcionan una hidrofilicidad mejorada a los radiofármacos y de este modo pueden afectar a su velocidad de eliminación en sangre y a la ruta de eliminación. Los modificadores farmacocinéticos preferidos son aquellos que dan lugar a una moderada eliminación en sangre y a una excreción renal incrementada.
Otros radiofármacos de la presente invención están constituidos por mitades antagonistas de LTB4 más compactas a las que está unido un espaciador opcional o téter y un quelador o unidad de unión al metal. Ejemplos de estas mitades antagonistas compactas de LTB4 se muestran en el Esquema 5.
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Esquema 5 Síntesis de los Radiofármacos
Los compuestos antagonistas del LTB4 radiomarcados de la presente invención pueden ser sintetizados utilizando métodos sintéticos estándar conocidos para los expertos en la materia, utilizando radioisótopos de halógenos (tales como cloro, flúor, bromo e yodo), tecnecio e indio, así como otros. Los radiosiótopos preferidos incluyen ^{123}I, ^{125}I, ^{131}I, ^{99m}Tc, y ^{111}In.
Los compuestos antagonistas del LTB4 de la invención pueden ser marcados tanto directamente (es decir, por incorporación del radio isótopo directamente en los compuestos) o indirectamente (es decir, por incorporación del radioisótopo en los compuestos a través de un quelador que ha sido incorporado en los compuestos. Para el marcaje directo, tal como reconocerían los expertos en la materia, el marcaje puede ser isotópico o no isotópico. Con el marcaje isotópico, un grupo ya presente en el compuesto cíclico es sustituido con (intercambiado por) el radioisótopo. Con el marcaje no isotópico, el radioisótopo es adicionado a los compuestos cíclicos sin sustituirlo con (intercambiado por) un grupo ya existente.
De forma general, los compuestos marcados son preparados por procedimientos que introducen el átomo marcado en una etapa última de la síntesis. Esto permite un máximo rendimiento radioquímico. Cuando se manejan isótopos de vida media corta, el tiempo requerido para llevar a cabo los procedimientos de síntesis, y los métodos de purificación tienen una mayor consideración. Los protocolos para la síntesis de los radiofármacos están descritos en Tubis y Wolf, Eds., ``Radiopharmacy'', Wiley-Interscience, New York (1976); Wolf, Christman, Fowler, Lambrecht, ``Synthesis of Radiopharmaceuticals and Labeled Compounds Using Short-Lived Isotopes'', en Radiopharmaceuticals and Labeled Compounds, Vol 1, p. 345-381 (1973).
Pueden utilizarse varios procedimientos para la preparación de compuestos marcados isotópicamente de la invención en los que el átomo marcado isotópicamente es un halógeno. Algunas de las metodologías sintéticas comunes para el marcaje isotópico de halógenos de compuestos aromáticos tales como el tipo aquí presente son la iododediazonización, iododeborobación, iododestannilación, iododesilación, iododetalación, y reacciones de intercambio de halógeno. La metodología sintética más común para el marcaje de halógeno no isotópico de compuestos aromáticos tales como el tipo presente en este documento es la iododesprotonación o las reacciones de sustitución aromática electrofílica. Estos métodos y los procedimientos adicionales han sido descritos en Merkushev, Synthesis, 923 (1988), y Seevers y col., Chem. Rev., 82: 575 (1982).
De forma alternativa, dichos compuestos pueden ser preparados por medio del marcaje isotópico a partir de derivados bromo o yodo no marcados por varias secuencias de reacción de dos etapas, tales como mediante el uso de sintones de trialquilsililo tal como se ha descrito en Wilson y col., J. Org. Chem., 51: 483 (1986) y Wilbur y col., J. Label. Compound. Radiopharm., 19: 1171 (1982), el uso de sintones de trialquilsililo tal como se ha descrito en Chumpradit y col., J. Med. Chem., 34: 877 (1991) y Chumpradit y col., J. Med. Chem., 32: 1431 (1989), y el uso de sintones de ácido borónico tal como se ha descrito en Kabalka y col., J. Label. Compound. Radiopharm., 19: 795 (1982) y Koch y col., Chem. Ber., 124:2091 (1991).
Los compuestos yodo no marcados son precursores versátiles que pueden ser convertidos en los derivados marcados por cualquiera de las secuencias de reacción en dos etapas descritas anteriormente. La funcionalidad útil para incorporar en los antagonistas de LTB4 incluyen el bromo, el nitro, el trialquilsililo, el trialquiestaño, y los grupos de ácido borónico. La síntesis y la aplicación de cada uno de estos precursores está descrita en las referencias citadas anteriormente.
El complejo mínimo significa que la radioiodinación de los compuestos cíclicos de la presente invención a través del marcaje isotópico durante las etapas finales de su preparación es la sustitución del yodo radioactivo por un átomo de yodo estable ya presente en la molécula. Esto puede ser llevado a cabo a menudo por el calentamiento del compuesto con yodo radioactivo en un disolvente apropiado tal como se ha descrito en Ellis y col., Aust. J. Chem., 26: 907 (1973). Cuando se aplica a yoduros aromáticos, las cantidades extremadamente pequeñas y la baja concentración de yodo radioactivo utilizado conducen a la incorporación de sólo una actividad específica modesta.
Los compuestos antagonistas del LTB4 también pueden ser marcados isotópicamente con yodo durante las etapas finales de su preparación a partir de las anilinas por la reacción de Sandmeyer tal como se ha descrito en Ellis y col., Aust. J. Chem., 26: 907 (1973). Esta aproximación conduce a un compuesto cíclico marcado con una actividad específica elevada. Para evitar complicaciones en la síntesis del compuesto antagonista del LTB4, el grupo nitro proporciona un sintón ideal para la anilina.
Los derivados de yodo marcados también pueden ser preparados fácilmente de forma no isotópica a partir de los compuestos cíclicos sustituidos con amino, hidroxi, o metoxi tal como se ha descrito en Arora y col., J. Med. Chem., 30:918 (1987). Las reacciones de sustitución aromática electrofílica se mejoran por la presencia de dichos sustituyentes donadores de electrones.
También pueden utilizarse varios procedimientos en la preparación de los compuestos de la invención marcados isotópicamente en los que el marcado isotópicamente es un metal, tal como sucede cuando el marcado isotópicamente es tecnecio o indio. Procedimientos a modo de ejemplo para dicho marcaje con tecnecio o indio, se encuentran descritos, por ejemplo, en Cerqueira y col., Circulación, Vol. 85, No. 1, pp. 298-304 (1992), Pak y col., J. Nucl. Med., Vol. 30, No. 5, p. 793, 36th Ann. Meet. Soc. Nucl. Med. (1989), Epps y col., J. Nucl. Med., Vol. 30, No. 5, p. 794, 36th Ann. Meet. Soc. Nucl. Med. (1989), Pak y col., J. Nucl. Med., Vol. 30, No. 5, p. 794, 36th Ann. Meet. Soc. Nucl. Med. (1989), y Dean y col., J. Nucl. Med., Vol. 30, No. 5, p. 794, 36th Ann. Meet. Soc. Nucl. Med. (1989).
Los reactivos preferidos de la presente invención están comprendidos de queladores o unidades de unión a radionúclidos como son los diaminoditioles, monoamino-monoamidaditioles, triamida-monotioles, monoamino-diamida-monotioles, diaminodioximas, o hidracinas. Los queladores son generalmente tetradentados con átomos donadores seleccionados entre nitrógeno, oxígeno y azufre. Los reactivos más preferidos están comprendidos de queladores que poseen los átomos donadores de nitrógeno de la amina y de azufre del tiol y las unidades de unión de hidracina. Los átomos de azufre del tiol y las hidracinas pueden tener un grupo protector que puede ser desplazado tanto antes de utilizar el reactivo para sintetizar un radiofármaco o preferiblemente in situ durante la síntesis del radiofármaco.
Grupos protectores de tiol a modo de ejemplo incluyen los listados en Greene y Wuts, ``Protective Groups in Organic Synthesis'' John Wiley & Sons, New York (1991), cuya descripción se incorpora por referencia a la presente invención. Ejemplos de grupos protectores del tiol incluyen, pero no están limitados a, los siguientes: acetamidometilo, benzamidometilo, 1-etoxietilo, benzoilo, y trifenilmetilo.
Ejemplos de grupos protectores para las unidades de unión de hidracina son las hidrazonas que pueden ser hidrazonas de aldehído o cetona que tienen sustituyentes seleccionados entre hidrógeno, alquilo, arilo y heterociclo. Las hidrazonas particularmente preferidas se describen en la patente de Estados Unidos U.S. No. 5.750.088.
La unidad de unión a la hidracina cuando se une a un radionúclido metálico es conocida como un grupo hidrazido, o diazenido y sirve como punto de unión del radionúclido al resto del radiofármaco. Un grupo diazenido puede ser tanto terminal (sólo un átomo del grupo está unido al radionúclido) o quelador. Con el objetivo de tener un grupo diazenido quelador al menos otro de los átomos del grupo también debe estar unido al radionúclido. Los átomos que se unen al metal son átomos llamados donadores.
El radionúclido del metal de transición está seleccionado entre el grupo: tecnecio-99m, renio-186 y renio-188. Para los objetivos de diagnóstico el Tc-99m es el isótopo preferido. Su vida media de 6 horas y su energía de emisión de rayos gamma de 140 keV son casi ideales para la escintigrafía gamma utilizando equipo y procedimientos bien establecidos para los expertos en la materia. Los isótopos de renio también tienen energía de eemisión de rayos gamma que so compatibles con la escintigrafía gamma, sin embargo, también emiten partículas beta de alta energía que son más dañinas para los tejidos vivientes. Las emisiones de partículas beta pueden ser utilizadas para objetivos terapéuticos, por ejemplo, la radioterapia del cáncer.
La esfera de coordinación del radionúclido incluye todos los ligandos o grupos unidos al radionúclido. Para que un radionúclido de un metal de transición sea estable, éste tiene, de forma típica, un número de coordinación (número de átomos donadores) que está comprendido entre un número entero mayor que o igual a 4 y menor que o igual a 8; es decir que hay entre 4 y 8 átomos unidos al metal y se dice que tiene una esfera de coordinación completa. El número de coordinación requerido para un complejo radionúclido estable viene determinado por la identidad del complejo radionúclido, su estado de oxidación, y por el tipo de átomos donadores. Si el quelador o la unidad de unión no proporciona todos los átomos necesarios para estabilizar el radionúclido metálico completando su esfera de coordinación, la esfera de coordinación es completada por los átomos donadores para otros ligandos, llamados auxiliares o co.ligandos, que también pueden ser terminales o queladores.
Un gran número de ligandos puede servir como auxiliares o co-ligandos, determinándose la selección de los mismos por una variedad de consideraciones tales como la facilidad de síntesis del radiofármaco, las propiedades químicas y físicas del ligando auxiliar, la velocidad de formación, el rendimiento, y el número de formas isoméricas de los radiofármacos resultantes, la facilidad para administrar dicho auxiliar o co-ligando al paciente sin consecuencias fisiológicas adversas a dicho paciente, y la compatibilidad del ligando en una formulación del equipo liofilizado. La carga y la lipofilicidad del ligando auxiliar tendrán efecto sobre la carga y la lipofilicidad de los radiofármacos. Por ejemplo, el uso del disulfonato del 4,5-dihidroxi-1,3-benceno dará lugar a radiofármacos con dos grupos aniónicos adicionales debido a que los grupos sulfonato serán aniónicos bajo condiciones fisiológicas. El uso de 3,4-hidroxipiridinonas N-alquil sustituidas da lugar a rediofármacos con grados variados de lipofilicidad dependiendo del tamaño de los sustituyentes alquilo.
Los radiofármacos preferidos de la presente invención están comprendidos de una unidad de unión de tipo hidrazido o diazenido y de un ligando auxiliar, A_{L1}, o de una unidad de unión y de dos tipos de auxiliares A_{L1} y A_{L2}, o de un quelador tetradentado que comprende dos átomos de nitrógeno y dos átomos de azufre. Los ligandos auxiliares A_{L1} que comprenden dos o más átomos fuertemente dadores tales como oxígeno y el nitrógeno de la amina (con hibridación sp^{3}). Los átomos dadores ocupan al menos dos de los sitios en la esfera de coordinación del metal radionúclido; el ligando auxiliar A_{L1} sirve como uno de los tres ligandos en el sistema ligando ternario. Ejemplos de ligandos auxiliares A_{L1} incluyen pero no están limitados a los ligandos de dioxígeno y los aminocarboxilatos funcionalizados. Un gran número de dichos ligandos es asequible de fuentes comerciales.
Los ligandos de dioxígeno auxiliares incluyen ligandos que se coordinan al ión del metal a través de al menos dos átomos dadores de oxígeno. Ejemplos de ellos incluyen, pero no están limitados a: glucoheptonato, gluconato, 2-hidroxiisobutirato, lactato, tartrato, manitol, glucarato, maltol, ácido de Kojic, ácido 2,2-bis(hidroximetil)propiónico, disulfonato de 4,5-dihidroxi-1,3-benceno, o 1,2 ó 3,4 hidroxipiridinonas sustituidas o no. (Los nombres de los ligandos en estos ejemplos hacen referencia tanto a las formas de los ligandos protonadas como a las no protonadas).
Los aminocarboxilatos funcionalizados incluyen ligandos que tienen una combinación de átomos dadores de nitrógeno de amina y de oxígeno. Ejemplos de los mismos incluyen, pero no están limitados a: ácido iminodiacético, ácido 2,3-diaminopropiónico, ácido nitrilotriacético, ácido N,N'-etilendiamino diacético, ácido N,N,N'-etilendiamino triacético, ácido hidroxietiletilendiamino triacético, y N,N'-etilendiamino bis-hidroxifenilglicina. (Los nombres de los ligandos en estos ejemplos hacen referencia tanto a las formas de los ligandos protonadas como a las no protonadas.)
Unas series de aminocarboxilatos funcionalizados han sido descritos por Bridger y col. en la patente U.S. 5.350.837, que dan lugar a velocidades mejoradas de formación de las proteínas modificadas con hidrazino marcado con tecnecio. Hemos determinado que algunos de estos aminocarboxilatos dan lugar a rendimientos mejorados de los radiofármacos de la presente invención. Los ligandos auxiliares preferidos A_{L1} son aminocarboxilatos funcionalizados que son derivados de la glicina; el más preferidos es la tricina (tris(hidroximetil)metilglicina).
Los radiofármacos más preferidos de la presente invención que comprenden una unidad de unión hidrazido o diazenido y dos tipos de auxiliares designados como A_{L1} y A_{L2}, o un quelador diaminoditiol. El segundo tipo de ligandos auxiliares A_{L2} que comprende uno o más de los átomos débilmente dadores están seleccionados entre el grupo: fosfina fósforo, arsina arsénico, nitrógeno de la imina (con hibridación sp^{2}), azufre (con hibridación sp^{2}) y carbono (con hibridación sp); átomos con un carácter p-ácido. Los ligandos A_{L2} pueden ser monodentados, bidentados o tridentados, estando definida la denticidad por el número de átomos dadores en el ligando. Uno de los dos átomos dadores en un ligando bidentado y uno de los tres átomos dadores en un ligando tridentado debe ser un átomo débilmente dador. Hemos descrito en las patentes de Estados Unidos No. 5.744.120 y de Estados Unidos No. 5.879.659 y en la WO 97/33627 que los radiofármacos que comprenden uno o más auxiliares o co-ligandos A_{L2} son más estables en comparación con los radiofármacos que no comprenden uno o más ligandos auxiliares, A_{L2}; es decir, tienen un número mínimo de formas isoméricas, cuyas relaciones relativas no cambian de forma significativa con el tiempo, y que permanecen intactas de forma sustancial con la disolución.
Los ligandos A_{L2} que comprenden átomos dadores de fosfina o arsina son fosfinas trisustituidas, arsinas trisustituidas, difosfinas tetrasustituidas y diarsinas tetrasustituidas. Los ligandos A_{L2} que comprenden nitrógeno de imina son heterociclos de 5 ó 6 miembros, insaturados o conteniendo un nitrógeno aromático. Los ligandos que comprenden átomos dadores de azufre (con hibridación sp^{2}) son tiocarbonilos que comprenden la mitad C=S. Los ligandos que comprenden átomos dadores de carbono (con hibridación sp) son isonitrilos, que comprenden la mitad CNR, en la que R es un radical orgánico. Un gran número de dichos ligandos es asequible de fuentes comerciales. Los isonitrilos pueden ser sintetizados tal como se ha descrito en la patente europea 0107734 y en la patente U. S. 4.988.827.
Los ligandos auxiliares preferidos A_{L2} son fosfinas trisustituidas y heterociclos aromáticos de 5 o 6 miembros. Los ligandos auxiliares más preferidos A_{L2} son fosfinas trisustituidas y heterociclos insaturados de 5 miembros.
Los ligandos auxiliares A_{L2} pueden estar sustituidos con grupos alquilo, arilo, alcoxi, heterociclo, aralquilo, alcarilo y ariloalcarilo y pueden tener o no grupos funcionales que comprenden heteroátomos tales como oxígeno, nitrógeno, fósforo o azufre. Ejemplos de dichos grupos funcionales incluyen, pero no están limitados a: hidroxilo, carboxilo, carboxamida, nitro, éter, cetona, amino, amonio, sulfonato, sulfonamida, fosfonato, y fosfonamida. Los grupos funcionales pueden ser seleccionados para alterar la lipofilicidad y la solubilidad en agua de los ligandos que pueden afectar las propiedades biológicas de los radiofármacos, tales como alterar la distribución en los tejidos no objetivo, células o fluidos, y el mecanismo y la velocidad de eliminación del cuerpo.
Los radiofármacos de la presente invención que comprenden una unidad de unión de tipo hidrazido o diazenido pueden ser fácilmente preparados por mezcla de una sal de un radionúclido, un reactivo de la presente invención, un ligando auxiliar A_{L1}, un ligando auxiliar A_{L2}, y un agente de reducción, en una solución acuosa a temperaturas comprendidas entre 0 y 100ºC. Los radiofármacos de la presente invención que comprenden un quelador tetradentado tienen dos átomos de nitrógeno y dos de azufre pueden ser fácilmente preparados por mezcla de una sal de un radionúclido, un reactivo de la presente invención, y un agente de reducción, en una solución acuosa a temperaturas comprendidas entre 0 y 100ºC.
Cuando la unidad de unión en el reactivo de la presente invención está presente como un grupo hidrazona, entonces debe ser convertida en primer lugar en una hidracina, que puede ser protonada o no, antes de la formación del complejo con el radionúclido del metal. La conversión del grupo hidrazona en la hidracina puede tener lugar antes de la reacción con el radionúclido, en cuyo caso el radionúclido y el auxiliar o el co-ligando o ligandos están combinados no con el reactivo sino con una forma hidrolizada del reactivo que soporta el quelador o la unión de enlace, o en presencia del radionúclido en cuyo caso el reactivo en sí mismo está combinado con el radionúclido y el auxiliar o co-ligando o ligandos. En este último caso, el pH de la mezcla de reacción debe ser neutro o ácido.
Alternativamente, los radiofármacos de la presente invención que comprenden una unidad de unión de tipo hidrazido o diazenido pueden ser preparados por una mezcla, en primer lugar, de una sal de un radionúclido, un ligando auxiliar A_{L1}, y un agente de reducción en una solución acuosa a temperaturas comprendidas entre 0 y 100ºC para formar un complejo radionúclido intermedio con el ligando auxiliar A_{L1} y adición a continuación de un reactivo de la presente invención y un ligando auxiliar A_{L2} y llevando a cabo la reacción a temperaturas comprendidas entre 0 y 100ºC.
Alternativamente, los radiofármacos de la presente invención que comprenden una unidad de enlace de tipo hidrazido o diazenido pueden ser preparados por una mezcla, en primer lugar, de un radionúclido, un ligando auxiliar A_{L1}, un reactivo de la presente invención, y un agente de reducción en una solución acuosa a temperaturas comprendidas entre 0 y 100ºC para formar un complejo radionúclido intermedio, y adición a continuación de un ligando auxiliar A_{L2} y reacción adicional a temperaturas comprendidas entre 0 y 100ºC.
El tiempo total de preparación variará dependiendo de la identidad del radionúclido, las identidades y cantidades de los reactivos y el procedimiento utilizado para la preparación. Las preparaciones pueden ser completas, dando lugar a un rendimiento del radiofármaco > 80%, en 1 minuto o puede requerir más tiempo. Si se precisa o desea mayor pureza del radiofármaco, los productos pueden ser purificados por cualquiera de las técnicas bien conocidas para los expertos en la materia tales como la cromatografía líquida, la extracción en fase sólida, la extracción con disolvente, la diálisis o la ultrafiltración.
Los radionúclidos tecnecio y renio son preferibles en la forma química de pertecnetato o perrenato y un catión farmacéuticamente aceptable. La forma de sal del pertecnetato es preferiblemente el pertecnetato de sodio tal como la obtenida a partir de generadores comerciales de Tc-99m. La cantidad de pertecnetato utilizada para preparar los radiofármacos de la presente invención puede oscilar entre 0,1 mCi y 1 Ci, o más, preferiblemente entre 1 y 200 mCi.
La cantidad del reactivo de la presente invención utilizada para preparar los radiofármacos de la presente invención puede oscilar entre 0,01 \mug y 10 mg, o más preferiblemente entre 0,5 \mug y 200 \mug. La cantidad utilizada vendrá determinada por las cantidades de los otros reactivos y la identidad de los radiofármacos a preparar de la presente invención.
Las cantidades de los ligandos auxiliares A_{L1} utilizados puede oscilar entre 0,1 mg y 1 g, o más preferiblemente entre 1 mg y 100 mg. La cantidad exacta para un radiofármaco particular es una función de identidad de los radiofármacos a preparar de la presente invención, del procedimiento utilizado y de las cantidades e identidades de los demás reactivos. Una cantidad demasiado grande de A_{L1} dará lugar a la formación de productos secundarios que comprenden A_{L1} marcado con tecnecio sin una molécula biológicamente activa o sub-productos que comprenden moléculas biológicamente activas marcadas con tecnecio con el ligando auxiliar A_{L1} pero sin el ligando auxiliar A_{L2}. Una cantidad demasiado pequeña de A_{L1} dará lugar a otros sub-productos tales como moléculas biológicamente activas marcadas con tecnecio con el ligando auxiliar A_{L2} pero sin el ligando auxiliar A_{L1}, o tecnecio hidrolizado reducido, o tecnecio coloide.
Las cantidades de ligandos auxiliares A_{L2} utilizadas pueden oscilar entre 0,001 mg y 1 g, o más, preferiblemente entre 0,01 mg y 10 mg. La cantidad exacta de un radiofármaco en particular es una función de la identidad de los radiofármacos a preparar de la presente invención, del procedimiento utilizado y de las cantidades e identidades de los demás reactivos. Una cantidad demasiado grande de A_{L2} dará lugar a la formación de sub-productos que comprenden A_{L2} marcado con tecnecio sin una molécula biológicamente activa o sub-productos que comprenden moléculas biológicamente activas marcadas con tecnecio con el ligando auxiliar A_{L2} pero sin el ligando auxiliar A_{L1}. Si el reactivo tiene uno o más sustituyentes que comprendan un átomo débilmente dador, tal como se ha definido anteriormente, se precisará al menos un exceso molar de diez veces del ligando auxiliar A_{L2} respecto al reactivo de fórmula 2 para prevenir que el sustituyente interfiera con la coordinación del ligando auxiliar A_{L2} al radionúclido metálico.
Agentes de reducción adecuados para la síntesis de los radiofármacos de la presente invención incluyen sales de estaño, sales de ditionito o bisulfito, sales de borohidruro, y ácido formamidinsulfínico, en los que las sales son de cualquier forma farmacéuticamente aceptable. El agente de reducción preferido es una sal estannosa. La cantidad del agente de reducción utilizada puede oscilar entre 0,001 mg y 10 mg, o más, preferiblemente entre 0,005 mg y 1 mg.
La estructura específica del radiofármaco de la presente invención comprende una unidad de unión de tipo hidrazido o diazenido dependiendo de la identidad de cualquier ligando auxiliar A_{L1}, de la identidad de cualquier ligando auxiliar A_{L2}, y de la identidad del radionúclido. Los radiofármacos que comprenden una unidad de unión del tipo hidrazido o diazenido sintetizados utilizando concentraciones de reactivos de <100 \mug/mL, comprenderán un grupo hidrazido o diazenido. Los sintetizados utilizando concentraciones de >1 mg/mL comprenderán dos grupos hidrazido o diazenido entre dos moléculas de reactivo. Para más aplicaciones, sólo puede inyectarse una cantidad limitada de la molécula biológicamente activa y no dará lugar a efectos secundarios indeseados, tales como toxicidad química, interferencia con un procedimiento biológico o una biodistribución alterada del radiofármaco. Por consiguiente, los radiofármacos requieren mayores concentraciones de los reactivos comprendidos en parte de la molécula biológicamente activa, deberás ser diluidos o purificados después de la síntesis para evitar efectos secundarios.
Las identidades y cantidades utilizadas de los ligandos auxiliares A_{L1} y A_{L2} determinará los valores de las variables y y z. Los valores de y y z pueden ser independientemente un número entero de valor 1 ó 2. En combinación, los valores de y y z darán lugar a una esfera de coordinación de tecnecio que está constituida por al menos cinco y no más de siete átomos dadores. Para los ligandos auxiliares monodentados A_{L2}, z puede ser un número entero de valor 1 ó 2; para los ligandos auxiliares bidentados o tridentados A_{L2}, z es 1. La combinación preferida para los ligandos monodentados es y igual a 1 ó 2 y z igual a 1. La combinación preferida para los ligandos bidentados o tridentados es y igual a 1 y z igual a 1.
Otro aspecto de la presente invención son los equipos de diagnóstico para la preparación de radiofármacos útiles como agentes para la toma de imágenes de la inflamación e infección. Los equipos de diagnóstico de la presente invención comprenden uno o más frascos conteniendo la formulación estéril, no pirogénica que comprende una cantidad predeterminada del reactivo de la presente invención, uno o más auxiliares y otros componentes opcionales tales como agentes de reducción, ligandos de transferencia, tampones, auxiliares de liofilización, auxiliares de estabilización, auxiliares de solubilización y bacterioestáticos. La inclusión de uno o más componentes opcionales en la formulación mejorará frecuentemente la facilidad de la síntesis del radiofármaco por el utilizador final, la facilidad de fabricación del equipo, la duración de conservación del equipo, o la estabilidad y duración de conservación del radiofármaco. Los uno o más frascos que contienen toda o parte de la formulación pueden estar, de forma independiente, en la forma de una solución estéril o de un sólido liofilizado.
Los tampones útiles en la preparación de los radiofármacos y en los equipos de diagnóstico útiles para la preparación de dichos radiofármacos incluyen, pero no están limitados a, fosfato, citrato, sulfosalicilato, y acetato. Una lista más completa puede ser encontrada en la Farmacopea de Estados Unidos.
Los auxiliares de liofilización útiles en la preparación de los equipos de diagnóstico útiles para la preparación de radiofármacos incluyen, pero no están limitados a, manitol, lactosa, sorbitol, dextrano, Ficoll, y polivinilpirrolidina(PVP).
Los auxiliares de estabilización útiles en la preparación de los radiofármacos y de equipos de diagnóstico útiles para la preparación de dichos radiofármacos incluyen, pero no están limitados a, ácido ascórbico, cisteina, monotioglicerol, bisulfito de sodio, metabisulfito de sodio, ácido gentísico, e inositol.
Los auxiliares de solubilización útiles en la preparación de los radiofármacos y en los equipos de diagnóstico útiles para la preparación de dichos radiofármacos incluyen, pero no están limitados a, etanol, glicerina, polietilen glicol, propilen glicol, monooleato de polioxietilen sorbitan, monooleato de sorbitan, polisorbatos, copolímeros de bloque de poli(oxietilen)poli(oxipropilen)poli(oxietilen) (Pluronics) y lecitina. Los auxiliares de solubilización preferidos son el polietilen glicol, y Pluronics.
Los bacterioestáticos útiles en la preparación de los radiofármacos y en los equipos de diagnóstico útiles para la preparación de dichos radiofármacos incluyen, pero no están limitados a, alcohol bencílico, cloruro de benzalconio, clorbutanol, y metil, propil o butil paraben.
Un componente en un equipo de diagnóstico también puede servir para más de una función. Un agente de reducción también puede servir como auxiliar de estabilización, un tampón también puede servir como ligando de transferencia, un auxiliar de liofilización también puede servir como un auxiliar de transferencia o co-ligando y así sucesivamente.
Las cantidades predeterminadas de cada componente en la formulación vienen determinadas por una variedad de consideraciones que son en algunos casos específicas para dicho componente y en otros casos dependientes de la cantidad del otro componente o de la presencia y cantidad de un componente opcional. En general, se utiliza la cantidad mínima de cada componente que dará lugar al efecto deseado de la formulación. El efecto deseado de la formulación es que el destinatario final pueda sintetizar el radiofármaco y tenga un alto grado de certeza de que el radiofármaco pueda ser inyectado de forma segura al paciente y proporcione información del diagnóstico sobre el estado de enfermedad de dicho paciente.
Los radiofármacos son administrados por inyección intravenosa, normalmente en solución salina, a una dosis de entre 1 y 100 mCi por 70 kg de peso corporal, o preferiblemente a una dosis de entre 5 y 50 mCi. La toma de imágenes se lleva a cabo utilizando procedimientos conocidos.
Ejemplos
Los materiales utilizados para sintetizar los siguientes ejemplos de la presente invención se obtuvieron de fuentes comerciales o se prepararon tal y como se describen en las siguientes referencias.
El ácido (E)-3-[6-(ariltiometil)-3-(2-feniletoxi)-2-piridinil]-2-propenoico substituido y el ácido 3-[6-(ariltiometil)-3-(2-feniletoxi)-2 piridinil]propanoico substituido, útiles como intermedios en la síntesis de los compuestos de la invención se prepararon utilizando procedimientos estándar, por ejemplo, tal y como se describe en Daines y col., J. Med. Chem, 39: 3837 (1996); Daines y col. Med. Chem, 37: 3327 (1994); Daines, Aplicación internacional PCT WO 95/15752; Daines, Aplicación internacional PCT WO 95/15950.
Los derivados del ácido [3-(4-Fenilbencil)-4-hidroxicroman-7-il]ciclopentano carboxílico, útiles como intermedios en la síntesis de los compuestos de la invención se prepararon utilizando procedimientos estándar, por ejemplo, tal y como se describe en Koch y col., J. Med. Chem, 37: 3197 (1994); Koch y col., Aplicación internacional PCT WO 93/15066; Koch y col., Aplicación internacional PCT WO 93/15067.
Los derivados de 5-Alil-6-hidroxi-1-tetralona, útiles como intermedios en la síntesis de los compuestos de la invención se prepararon utilizando procedimientos estándar, por ejemplo, tal y como se describe en Cohen y col., Bioorg. & Med. Chem. Lett., 4: 2883 (1994); Cohen y col., Aplicación internacional PCT WO 95/15956.
El 6-Bromo-2,2-dimetilhexanonitrilo se sintetizó tal y como se describe por Larcheveque, M. Y col., Bull. Soc. Chim. Fr., 1974, 1710-1714.
Se sintetizaron el 4,6-Difenil-2-piridona, 4-(3,4-Metilendioxifenil)-6-difenil-2-piridona, 6-[(4,6-difenil-2-piridinil)oxi]-2,2-dimetilhexanonitrilo, 6-(5-(2H-2,3,4,5-tetraazolilo)-5-metilhexiloxi)-2,4-difenilpiridina y 6-(5-(2H-2,3,4,5-tetraazolil)-5-metilhexiloxi)-2,4-difenilpiridina tal y como se describe por Labaudiniere, R. Y col., J. Med. Chem., 1992, 35, 4315-4324.
El t-Butil 4-bromobutirato se sintetizó tal y como se describe por Morin, C. Y col., Tetrahedron, 1992, 48, 9277-9282.
Se sintetizaron la 11-Amino-3,6,9-trioxaundecanol, 2-(2-(2-(3-aza-3-diazoprop-3-eniloxi)etoxi)etoxi)etan-1-ol tal y como se describe por Bertozzi, C. R. Y col., J. Org. Chem., 1991, 56, 4326-4329.
Se sintetizaron el éster metílico del ácido 2-Hidroxi-6-[(5 hidroxipentil)oxi]bencenpropanoico y la 6-hidroxi-5-prop-2-enil-2,3,4-trihidronaftalen-1-ona tal y como se describe por Cohen, N., Aplicación Patente Europea EP 0531823A1.
Se preparó la 2-Hidrazino-5-sulfamoilpiridina de acuerdo con la Patente US 4,204,870.
Se preparó la N-Metil-N-fenetil-2-[5-benciloxi-3-(2-carboxivinil)indol-1-il]acetamida de acuerdo con F.C. Huang y col., Aplicación internacional PCT WO 92/04321.
Se preparó el ácido 7-(3-(2-Etil-4-(4-flurofenil)-5- (fenilmetoxi)fenoxi)propoxi)-8-propilcromano-2-carboxílico de acuerdo con Sawyer, y col., J.Med.Chem., 1995, 38, 4411.
Una mezcla de 4-etil-2(1-metil-1H-pirazol-5-il)-5-[[5-metil-5-cianohexil]oxi]fenol y 4-etil-2(1-metil-1H-pirazol-3-il)-5-[[5-metil-5-cianohexil]oxi]fenol se preparó tal y como se describe en R.W. Harper, y col., J.Med.Chem., 1994, 37, 2411.
Se sintetizó el éster de N-[4-(Carboxi)bencil]-N,N'-bis[(2-trifenilmetiltio)etil]glicinamida N-hidroxisuccinimida tal y como se describe por Harris, T. D. Y col., Bioorg. Med. Chem. Lett. 1996, 6, 1741-1746.
Se preparó la N-(2-(2-(2-(2-Aminoetoxi)etoxi)etoxi)etil)(tert-butoxi)formamida (5,87 g, 20 mmol) tal y como se describe por Levenson, C., Patente US 4,803,297.
Se preparó la 6-Desoxi-6-amino-\beta-ciclodextrina tal y como se describe por Petter, R.C. y col., J. Am. Chem. Soc., 1990, 112, 3860-3868.
Se preparó el bis-S-(1-etoxietilmercapto-acetil)pentanoato tetrafluorofenilo tal y como se describe en Fritzberg, A. Y col., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 1988, 85, 4025.
Abreviaciones utilizadas en esta sección:
TEA: trietilamina
DCM: diclorometano
ACN: acetonitrilo
Z: benciloxicarbonilo
Ms: mesilato
TFA: ácido trifluoroacético
DIEA: diisopropiletilamina
HATU: Hexafluorofosfato de O-(7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio
HBTU: Hexafluorofosfato de O-(Benzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio
TMSI: ioduro de trimetilsililo
TPPTS: sal sódica de la tris(3-sulfonatofenil)fosfina
TPPDS: sal sódica de la Bis(3-sulfonatofenil)fenilfosfina
TPPMS: sal monosódica de la (3-sulfonatofenil)difenilfosfina
TFP: tris(2-furanil)fosfina
Ejemplo 1 Síntesis del 4-etil-2-(4-fluorofenil)-[5-[5,5-dimetil-6-[[6-[[[(2-sulfonilfenil)metileno]hidrazino]-3-piridinil]carbonil]amino]hexil]oxi]fenol
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Paso A
Preparación de la 4-(benciloxi)-2-[(5-metil-5-cianohexil)oxi]-benzofenona
Se calentó una solución de 4-benciloxi-2-hidroxiacetofenona (2,45 g), carbonato de potasio (3,25 g), ioduro de potasio (0,42 g), y 5-ciano-5-metil-1-bromohexano (2,6 g) en dimetilformamida (40 mL) a 90ºC durante 22 horas bajo nitrógeno. La mezcla se enfrió, se vertió en agua (150 mL) y se extrajo con acetato de etilo. Los extractos combinados se lavaron con agua, se secaron (MgSO_{4}), se filtraron, y se concentraron a presión reducida a un aceite naranja. Éste se purificó por cromatografía flash (acetato de etilo:hexano) para dar el producto (2,4 g) como un aceite transparente. RMN(CDCl_{3}): 1,37, s (6H); 1,64, m (4H); 1,89, m (2H); 2,58, s (3H); 4,03, t (3H); 5,09, s (2H); 6,50, s (1H); 6,58, d (1H); 7,37, m (5 H); 7,81, d (1H). Espectro de Masas (GC-MS) m/z = 365 (M).
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Paso B
Preparación del 4-(benciloxi)-2-[(5-metil-5-cianohexil)oxi]-etilbenceno
Se disolvió la acetofenona (2,4 g) en tetracloruro de carbono (6 mL) y en ácido trifluoroacético (6 mL) y se añadió trietilsilano (5,9 mL). La solución se agitó durante 2 horas y se vertió en bicarbonato de sodio saturado y acetato de etilo. Las fases se separaron y la fase orgánica se lavó con bicarbonato saturado hasta que los lavados quedaron básicos, se secó (MgSO_{4}), filtró, y se concentró al vacío para dar un aceite rojizo (2,6 g). Éste se purificó por cromatografía flash (hexano:acetato de etilo) para dar el producto (2,0 g) como un aceite transparente. RMN (CDCl_{3}): 1,15, t (3H); 1,34, s (6H); 1,5-1,9, m (6H); 2,55, q (2H); 3,94, t (2H); 5,02, s (2H); 6,48, m (2H); 7,02, d (1H); 7,37, m (5H). Espectro de Masas (GC-MS) m/z = 351 (M).
Paso C
Preparación del 1-bromo-2-(benciloxi)-5-etil-4-[(5-metil-5-cianohexil)oxi]benceno
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Se disolvió el etilbenceno (2,0 g) en tetracloruro de carbono (25 mL) y se añadió N-bromosuccinimida (1,16 g). La solución se agitó 18 horas, se diluyó con diclorometano (50 mL), se lavó con agua, se secó (MgSO_{4}), se filtró y se concentró a vacío para dar un sólido naranja. Éste se recristalizó con hexano/acetato de etilo para dar lugar al producto como un sólido blanco (1,65 g). RMN (CDCl_{3}): 1,14, t (3H); 1,35, s (6H) 1,5-1,9, m (6H); 2,52, q (2H); 3,88, t (2H); 5,12, s (2H); 6,45, s (1H); 7,2-7,5, m (6H). MS (EI) m/z = 454.2 (M+Na).
Paso D
Preparación del 1-(benciloxi)-4-etil-2-(4-fluorofenil)-5-[(5-metil-5-cianohexil)oxi]-benceno
22
Se añadió ácido 4-fluorofenilborónico (0,84 g) a etanol (5mL). A esto se le añadió tolueno (15 mL), bromonitrilo (1,29g), una solución de carbonato de sodio 1,82N (4,9 mL), y tetrakis-trifenilfosfina de paladio (0,35 g) bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla se calentó a reflujo durante 18 horas, se enfrió, y se mezcló con acetato de etilo (50 mL). Las fases se separaron y la orgánica se lavó con una solución de cloruro de amonio saturado, se secó (MgSO_{4}), se filtró, y se concentró al vacío para dar un aceite verde (1,75 g). Éste se purificó por cromatografía flash para dar el producto (1,13 g) como un aceite transparente. RMN (CDCl_{3}): 1,19, t (3H); 1,36, s (6H) 1,5-1,9, m (6H); 2,612, q (2H); 3,97, t (2H); 5,02, s (2H); 6,55, s (1H); 7,06, m (3H); 7,32, m (5H); 7,50, dd (2H). MS (EI) m/z = 468.2 (M+Na).
Paso E
Preparación del 1-(benciloxi)-4-etil-2-(4-fluorofenil)-5-[(5,5-dimetil-6-aminohexil)oxi]benceno
23
Se añadió éter anhidro (10 mL) a cloruro de aluminio anhidro (670 mg) a 0ºC bajo nitrógeno y se agitó hasta que la disolución fue completa. Se añadió hidruro de aluminio litio (190 mg) en una porción y la solución se calentó a reflujo. Se añadió 1-(benciloxi)-4-etil-2-(4-fluorofenil)-5-[(5-metil-5-cianohexil)oxi]-benceno(1,05 g) disuelto en éter anhidro (5 mL) gota a gota a reflujo. Se eliminó el calentamiento y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 5 horas. La reacción se trató por adición de agua, seguido por ácido sulfúrico 6 N hasta que se obtuvo una solución transparente. Ésta se extrajo con éter. La solución acuosa se enfrió y se trató con hidróxido de sodio al 50%. La mezcla básica se extrajo con éter. Las fases orgánicas se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtró, y se concentró a presión reducida para dar 900 mg de 1-(benciloxi)-4-etil-2-(4-fluorofenil)-5-[(6,6-dimetil-6-aminohexil)oxi]benceno como un sólido blanco, el cual no se purificó pero se utilizó más adelante. RMN (CDCl_{3}) 0,83 s (6H); 1,17, t (3H); 1,25, m (2H); 1,42, m (2H); 1,55 ancho (2H); 1,77, m (2H); 2,47, s (2H); 2,61 q (2H); 3,95, t (2H); 5,00, s (2H); 6,55, s (1H); 7,03, d (2H); 7,08, s (1H); 7,31, m (5H); 7,50, d of d (2H). Espectro de masas (EI), m/e = 450.3 (M+H).
Paso F
Preparación del 4-etil-2-(4-fluorofenil)-5-[(5,5-dimetil-6-aminohexil)oxi]fenol
Se disolvió en 1-(benciloxi)-4-etil-2-(4-fluorofenil)-5-[(5,5-dimetil-6-aminohexil)oxi]benceno (900 mg) en etanol (7 mL) y se añadió a una solución de paladio en carbono al 10% (200 mg) en 10 mL de etanol. El matraz se equipó con un globo y se presurizó con hidrógeno gas para mantener inflado el globo. La reacción se agitó durante toda la noche. La solución se filtró a través de Celite y se concentró a presión reducida para dar III como un aceite ámbar, esencialmente puro por TLC. Una trituración con hexano/acetato de etilo 19:1 dió el producto 4-etil-2-(4-fluorofenil)-5-[(6,6-dimetil-7-aminoheptil)oxi]fenol(625 mg) como un sólido blanco grisáceo. RMN (CDCl_{3}): 0,84, s, (6H); 1,17, t (3H); 1,24, m (2H); 1,76, m (2H); 2,43, s (2H); 2,57, q (2H); 2,82, ancho (2H); 3,95, t (2H); 6,45, s (1H); 6,96, s (1H); 7,11, d de d (2H); 7,43, d de d (2H). Espectro de Masas (EI), m/e = 360.2 (M+H).
Paso G
Preparación del 2-[[[5-[[(2,5-dioxo-1-pirolidinil)oxi]carbonil]-2-piridinil]hidrazono]metil]-bencensulfonato de sodio
24
Se añadió a una solución de sal sódica del ácido 2-formilbencensulfónico (13,6 g) en dimetilformamida (
\hbox{400 mL}
) ácido 2-hidrazinoincotinico (10,0 g) y la mezcla se agitó durante tres horas. Se añadieron a la reacción N-hidroxisuccinimida (7,52 g) y diciclohexilcarbodiimida (27,6 g) y se agitó durante 16 horas. La mezcla se filtró a través de Celite y el filtrado se concentró a presión reducida para dar un aceite espeso. Éste se trituró con acetato de etilo para dar un sólido que se filtró para dar un producto crudo (32,8 g). Los sólidos se pusieron a reflujo en metanol caliente durante 5 horas, se filtraron, se lavaron con metanol, y se secaron al vacío para dar el 2-[[[5-[[(2,5-dioxo-1-pirolidinil)oxi]carbonil]-2-piridinil]hidrazono]metil]-bencensulfonato de sodio (21,2 g) como un sólido amarillo pálido. RMN (DMSO-d_{6}): 2,88, s (4H); 7,36, m (3H); 7,79, d de d (1H); 8,10, m (2H); 8,79, t (1H); 9,16, s (1H); 11,90, s (1H).
Paso H
Preparación del 4-etil-2-(4-fluorofenil)-[5-[5,5-dimetil-6-[[6-[[[(2-sulfonilfenil)metilen]hidrazino]-3-piridinil]carbonil]amino]heptil]oxi]fenol
Se introdujo dimetilformamida (7 mL) a un matraz bajo nitrógeno. A esto se le añadió 4-etil-2-(4-fluorofenil)-5-[(5,5-dimetil-6-aminohexil)oxi]fenol (180 mg) y 2-[[[5-[[(2,5-dioxo-1-pirolidinil)oxi]carbonil]-2-piridinil] hidrazono]metil]-bencensulfonato de sodio (275 mg) seguido por diisopropiletilamina (97 mg) y 4-dimetilaminopiridina (15 mg). La solución se agitó durante toda la noche. El disolvente se concentró al vacío y el aceite residual se extrajo con agua/acetato de etilo. El acetato de etilo se concentró y los sólidos resultantes se trituraron con etanol caliente. El producto crudo se purificó por HPLC preparativo (columna C18 5 x 25cm de Vydac Pharmaceutical C18 column, 0,1% de ácido trifluoroacético en gradiente de agua/acetonitrilo). RMN (DMSO-d_{6}): 0,88, s (6 H); 1,11, t (3H); 1,33, m (2H); 1,48, m (2H); 1,73, m (2H); 2,50, m (2H); 3,16, d (2H); 3,93, t (2H); 6,52, s (1H); 6,99, s (1H); 7,16, t (2H); 7,19, m (1H); 7,45, m (2H); 7,52, d de d (2H); 7,81, m (1H); 8,26, d (1H); 8,35, d (1H); 8,47, s (1H); 8,53, ancho (1H); 9,33, ancho (2H). m/e = 661.3 (M-H).
Ejemplo 2 Síntesis de 4-etil-2-(4-fluorofenil)-[5-[4-[[6-[[[(2-sulfonilfenil)metilen]hidrazino]-3-piridinil]carbonil]amino]butil]oxi]fenol
25
Paso A
Preparación de la 4-(Benciloxi)-2-[(3-cianopropil)oxi]-acetofenona
Se añadieron 2-hidroxil-4-benciloxi-acetofenona (5 g), 4-bromobutironitrilo (3,66 g), carbonato de potasio en polvo (5,7 g), y ioduro de potasio (0,85 g) a dimetilformamida (100 mL) bajo nitrógeno. La mezcla se calentó con agitación a 100ºC durante 24 horas, se enfrió, y se vertió en agua (200 mL) y acetato de etilo (50 mL). Las fases se separaron y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo. Los combinados orgánicos se lavaron con una solución de bisulfito de sodio y sal, se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtró y se concentró al vacío para dar un sólido naranja (5,8 g). Éste se recristalizó con etanol para dar la 4-(benciloxi-2-[(3-cianopropil)oxi]-acetofenona pura (
\hbox{5,2 g}
). RMN (DMSO-d_{6}): 2,10, m (2H); 2,50, s (3 H); 2,70, t (2H); 4,16, t (2H); 5,19, s (2H); 6,69, m (1H); 6,75, d (1H); 7,40, m (5 H); 7,67, d (1H). Espectro de Masas (EI), m/e = 310.1 (M+H).
Paso B
Preparación del 4-(Benciloxi)-2-[(3-cianopropil)oxi]-1-etilbenceno
Se disolvió la 4-(Benciloxi)-2-[(3-cianopropil)oxi]-acetofenona (5 g) en tetracloruro de carbono (12,5 mL) bajo nitrógeno. A esto se añadió ácido trifluoroacético (15 mL) y trietilsilano (15,5 mL)con agitación. La solución se agitó durante tres horas y luego se vertió en hidróxido de sodio 0,1N (190 mL)/acetato de etilo (50 mL) con anfriamiento. Las fases se separaron y la fase acuosa se volvió a extraer con acetato de etilo. Las fases orgánicas combinadas se lavaron con una solución de bicarbonato de sodio, sal, y se secó sobre sulfato de magnesio. El disolvente se eliminó al vacío después de la filtración para dar un aceite naranja. Éste se purificó por cromatografía flash en sílica gel utilizando como eluyente hexano/acetato de etilo (9:1). Después de la concentración, se obtuvo 4-(Benciloxi)-2-[(3-cianopropil)oxi]-1-etilbenceno como un aceite transparente (2,5 g). RMN (CDCl_{3}): 1,16, t (3H); 2,16, m (2H); 2,56, m (4H); 4,03, t (2H); 5,03, s (2H); 6,50, m (2H), 7,04, d (1H); 7,37, m (5H). Espectro de Masas (EI), m/e = 296.3 (M+H).
Paso C
Preparación del 1-(benciloxi)-2-bromo-4-etil-5-[(3-cianopropil)oxi]-benceno
Se utilizó tetracloruro de carbono (20 mL) para disolver el 4-(Benciloxi)-2-[(3-cianopropil)oxi]-1-etilbenceno (
\hbox{2,5 g}
). Se añadió a la solución N-bromosuccinimida (1,66 g) y se agitó durante 5,5 horas. La mezcla se diluyó con diclorometano (50 mL), se lavó con agua, se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y se concentró al vacío. El aceite resultante se cristalizó con hexano/acetato de etilo a -20ºC para dar lugar al 1-(benciloxi)-2-bromo-4-etil-5-[(3-cianopropil)oxi]-benceno como un sólido blanco cristalino (1,5 g). RMN (CDCl_{3}) 1,14, t (3H); 2,14, m (2H); 2,55, m (4H); 3,98, t (2H); 5,12, s (2H); 6,45, s (1H); 7,37, m (6H).
Paso D
Preparación del 1-Benciloxi-2-(4-fluorofenil)-4-etil-5-[(3-cianopropil)oxi]-benceno
Se disolvió en etanol (7 mL) el ácido 4-fluorobencen borónico (1,14 g). Se le añadió a ésto 1-(benciloxi)-2-bromo-4-etil-5-[(3-cianopropil)oxi]-benceno (1,5 g), tolueno (20 mL), tetrakis-trifenilfosfina de paladio (470 mg), y una solución de carbonato de sodio 2M (6.1 mL).
La mezcla resultante se calentó a reflujo y se mantuvo así durante 24 horas. La solución se enfrió, se diluyó con acetato de etilo, y se separaron las fases. La fase orgánica se lavó con cloruro de amonio saturado, se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró, y se concentró para dar lugar a un aceite verde. Éste se purificó por cromatografía flash en sílica utilizando hexano/acetato de etilo (9:1). Las fracciones resultantes se concentraron al vacío para dar lugar al 1-Benciloxi-2-(4-fluorofenil)-4-etil-5-[(3-cianopropil)oxi]-benceno (1,1 g) como un aceite transparente. RMN (CDCl_{3}): 1,18, t (3H); 2,15, m (2H); 2,59, m (4 H); 4,06, t (2H); 5,00, s (2H); 6,53, s (1H); 7,06, t (2H); 7,09, s (1H); 7,30, m (5H); 7,49, d of d (2H). Espectro de Masas (EI), m/e = 412.2 (M+Na).
Paso E
Preparación del 1-Benciloxi-2-(4-fluorofenil)-4-etil-5-[(4-aminobutil)oxi]-benceno
26
Se añadió éter anhidro (10 mL) a cloruro de aluminio anhidro (693 mg) a 0ºC bajo nitrógeno y se agitó hasta que la disolución fue completa. Se añadió hidruro de aluminio litio (197 mg) en una porción y la disolución se calentó a reflujo. Se añadió 1-Benciloxi-2-(4-fluorofenil)-4-etil-5-[(3-cianopropil)oxi]-benceno(1,05 g) disuelto en éter anhidro (5 mL) gota a gota a reflujo. Se eliminó el calor y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 4,5 horas. La reacción se trató por adición de agua, seguido por ácido sulfúrico 6 N hasta que se obtuvo una solución transparente. Esto se extrajo con éter. La solución acuosa se enfrió y se trató con hidróxido de sodio al 50%. La mezcla básica se extrajo con éter. Las fases orgánicas se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron, y concentraron a presión reducida para dar 500 mg 1-Benciloxi-2-(4-fluorofenil)-4-etil-5-[(4-aminobutil)oxi]-benceno como un aceite, el cual no se purificó pero se utilizó más adelante. Espectro de Masas (EI), m/e = 394.3 (M+H).
Paso F
Preparación del 4-Etilo-2-(4-fluorofenil)-5-[(4-aminobutil)oxi]fenol
27
Se introdujo a un matraz paladio sobre carbono al 10% (200 mg), etanol (20 mL) y 1-benciloxi-2-(4-fluorofenil)-4-etil-5-[(4-aminobutil)oxi]-benceno (500 mg). El matraz se equipó con un globo y se presurizó con hidrógeno para inflar del todo el globo. La reacción se agitó durante 3,5 horas, se filtró a través de celite, y el filtrado se concentró al vacío para dar el 4-etil-2-(4-luorofenil)-5-[(4-aminobutil)oxi]fenol como un polvo blanco (350 mg). El HPLC mostró que quedaba un \sim25% del material de Partida. No se purificó pero seutilizó directamente en el próximo paso. Espectro de Masas (EI), m/e = 304.1 (M+H).
Paso G
Preparación del 4-etil-2-(4-fluorofenil)-[5-[4-[[6-[[[(2-sulfonilfenil)metilen]hidrazino]-3-piridinil]carbonil]amino]butil]oxi]fenol
Se disolvió 4-Etil-2-(4-fluorofenil)-5-[(4-aminobutil)oxi]fenol (300 mg) en dimetilformamida (10 mL) bajo nitrógeno. Se añadieron 2-[[[5-[[(2,5-dioxo-1-pirolidinil)oxi]carbonil]-2-piridinil] hidrazono]metil]-bencensulfonato de sodio (440 mg) y trietilamina (324 mg) y la reacción se agitó durante toda la noche a temperatura ambiente. El disolvente se eliminó al vacío para dar un aceite marrón, el cual se purificó por HPLC preparativo (columna Farmacéutica Vydac 5 cm x 25 cm, ácido trifluoroacético/agua al 0.1% (A): acetonitrilo/agua al 90% (B) gradiente, del 50% -> 85% B en 255 minutos) y las fracciones d producto liofilizadas dieron un polvo blanco (120 mg) (descompone= 250ºC). RMN (CDCl_{3}): 1,11, t (6H); 1,79, m (4H); 2,50, q (2 H); 3,36, m (2H); 3,97, t (2H); 6,53, s (1H); 6,99, s (1H); 7,18, m (3H); 7,49, m (4H); 7,83, m (1H); 8,28, d (1H); 8,38, d (1H); 8,46, s (1H); 8,78, m (1H); 9,36, s (1H). Espectro de Masas (EI), m/e = 605.2 (M-H).
Ejemplo 3 Síntesis del ácido 2-[[[5-[[(6-[(4,6-difenil-2-piridinil)oxi]-1-hexanamino]carbonil]-2-piridinil]hidrazono]metil]-bencenesulfónico
28
Parte A
Preparación del 1-Amino-6-[(4,6-difenil-2-piridinil)oxi]-hexano
Se añadió cloruro de aluminio (0,857 g, 6,42 mmol) a un matraz seco. El matraz se enfrió a menos de 0ºC con un baño de hielo/etanol. Se añadió éter (15 mL), y se agitó la reacción durante 5 minutos hasta que se disolvió el cloruro de aluminio. Se añadió luego hidruro de aluminio litio (0,244 g, 6,42 mmol), y la reacción se calentó a reflujo. Se disolvió 6-[(4,6-Difenil-2-piridinil)oxi]-hexanonitrilo (1,0 g, 2,92 mmol) en éter (5 mL) y se añadió gota a gota a la solución a reflujo. Una vez que se disolvió completamente, se agitó la reacción durante toda la noche a temperatura ambiente. La reacción se tratóluego con agua. Se añadió ácido sulfúrico 6N hasta que se formó una solución transparente. Esta mezcla se extrajo luego con éter (3x). La fase acuosa se enfrió luego en un baño de hielo y se basificó hasta pH 14 con NaOH aq. Al 50%. Se extrajo luego ésta con éter (4x). La fase orgánica se lavó luego con NaCl saturado, se secó sobre sulfato de magnesio, y se evaporó para dar 0,7184 g (71%) de 1-amino-6-[(4,6-difenil-2-piridinil)oxi]-hexano como un aceite. ESMS: Calculado para C_{23}H_{26}N_{2}O, 346.20; Encontrado, 347.3 (M+H)^{+1}.
Parte B
Preparación del ácido 2-[[[5-[[(6-[(4,6-difenil-2-piridinil)oxi]-1-hexanamino]carbonil]-2-piridinil]hidrazono]metil]-bencenesulfónico
Se disolvió en DMF (5 mL) el 1-Amino-6-[(4,6-difenil-2-piridinil)oxi]-hexano (0,200g, 0,557 mmol). Se añadió trietilamina (232,9 \muL, 1,67 mmol), y la reacción se agitó durante 5 minutos. Se añadió entonces la sal monosódica del ácido 2-[[[5-[[(2,5-Dioxo-1-pirrolidinil)oxi]carbonil]-2-piridinil]hidrazono]metil]-bencensulfónico (294,3 mg, 0,668 mmol), y la mezcla de reacción se concentró a un aceite y se trituró con acetato de etilo. El producto crudo se purificó por HPLC preparativo, utilizando el siguiente método para dar 133 mg (35%) del compuesto purificado del título. ESMS: Calculado para C_{36}H_{35}N_{5}O_{5}S, 649.23; Encontrado, 648.3 (M-H)^{-1}.
HPLC Método 1
Instrumento: Conejo Rainin; Software Dynamax
Columna: Vydac C-18 (21.2 mm x 25 cm)
Detector: Knauer VWM
Velocidad de flujo: 15 mL/min
Temperatura de la columna: RT
Fase móvil: A: 0.05 M acetato de amonio
B: 90% ACN, 10% 0.05 M acetato de amonio
Gradiente: Time (min) %A %B
0 80 20
20 0 100
30 0 100
31 80 20 
\newpage
Ejemplo 4 Síntesis del ácido 2-[[[5-[[2,2-dimetil-6-[(6-fluorofenil-4-fenil-2-piridinil)oxi]-1-hexanamino]carbonil]-2-piridinil]hidrazono]metil]-bencensulfónico
Parte A
Preparación del 2,2-Dimetil-6-[(6-(4-fluorofenil)-4-fenil-2-piridinil)oxi]-hexanonitrilo
Se disolvió en tolueno la 6-(4-Fluorofenil)-4-fenil-2-piridona (1,0 g, 3,77 mmol). Se añadieron carbonato de plata (1,04 g, 3,77 mmol) y 6-bromo-2,2-dimetil-hexanonitrilo (1,15 g, 5,66 mmol), y la reacción se calentó a reflujo y se mantuvo a oscuras durante 2 días. La reacción se filtró y se concentró. El residuo resultante se purificó por cromatografía en columna flash utilizando hexano/acetato de etilo 9:1 para dar 1,110 g (76%) del nitrilo purificado. ESMS: Calculado para C_{25}H_{25}FN_{2}O, 388.20; Encontrado, 388 GCMS
Parte B
Preparación del 1-Amino-2,2-dimetil-6-[(6-fluorofenil-4-fenil-2-piridinil)oxi]-hexano
29
Se añadió cloruro de aluminio a un matraz seco.
El matraz se enfrió a menos de 0ºC con un baño de hielo/etanol. Se añadió éter (10 mL), y se agitó la reacción durante 5 minutos hasta que se disolvió el cloruro de aluminio. Se añadió luego hidruro de aluminio litio (
\hbox{0,214 g}
, 5,65 mmol), y la reacción se calentó a reflujo. Se disolvió 2,2-Dimetil-6-[(6-fluorofenil)-4-fenil-2-piridinil)ox]-hexanonitrilo (1,0 g, 2,57 mmol) en éter (5 mL) y se añadió gota a gota a la solución a reflujo. Una vez que finalizó la adición, se agitó la reacción durante 5 h a temperatura ambiente. La reacción se tratóluego con agua. Se añadió ácido sulfúrico 6N hasta que se formó una solución transparente. Esta mezcla se extrajo luego con éter (3x). La fase acuosa se enfrió luego en un baño de hielo y se basificó hasta pH 14 con NaOH aq. Al 50%. Se extrajo luego ésta con éter (4x). La fase orgánica se lavó luego con NaCl saturado, se secó sobre sulfato de magnesio, y se evaporó para dar 1,2 g (119%) del producto amina como un aceite. ESMS: Calculado para C_{25}H_{29}FN_{2}O, 392.23; Encontrado, 393.2 
\hbox{(M+H) ^{+1} }
.
Parte C
Preparación del ácido 2-[[[5-[[2,2-dimetil-6-[(6-fluorofenil-4-fenil-2-piridinil)oxi]-1-hexanamino]carbonil]-2-piridinil]hidrazono]metil]-bencensulfónico
Se disolvió en dimetilformamida (5 mL) 1-Amino-2,2-dimetil-6-[(6-fluorofenil-4-fenil-2-piridinil)oxi]-hexano (0,200 g, 0,51 mmol).
Se añadió trietilamina (213,2 \muL, 1,53 mmol), y la reacción se agitó durante 5 minutos. Se añadió entonces la sal monosódica del ácido 2-[[[5-[[(2,5-Dioxo-1-pirrolidinil)oxi]carbonil]-2-piridinil]hidrazono]metil]-bencensulfónico (269,5 mg, 0,612 mmol), y la reacción se agitó durante 24 horas bajo nitrógeno. La reacción se concentró a un aceite al vacío. EL aceite se trituró con acetato de etilo. El producto crudo se purificó por el siguiente método para dar 10 mg (3%) del compuesto del título. ESMS: Calculado para C_{38}H_{38}FN_{5}O_{5}S, 695.26; Encontrado, 696,4 (M+H)^{+1}.
Método HPLC 2
Instrumento: Ratón Rainin; Software Dynamax
Columna: Vydac C-18 (21.2 mm x 25 cm)
Detector: Knauer VWM
Velocidad de flujo: 15 mL/min
Temperatura de la columna: RT
Fase móvil: A: 0.1% TFA en H_{2}0
B: 0.1% TFA en ACN/H_{2}0 (9:1)
Gradiente: Tiempo (min) %A %B
0 80 20
20 0 100
30 0 100
31 80 20
Ejemplo 5 Síntesis del ácido 2-[[[5-[[N-[6-[(6-(4-fluorofenil)-4-fenil-2-piridinil)oxi]-hexanoilo]-tirosina-O-[3-propanamino]]carbonil]-2-piridinil]hidrazono]-metil]-bencensulfónico
30
Parte A
Preparación de la N-[6-[(6-(4-fluorofenil)-4-fenil-2-piridinil)oxi]-hexanoil]tirosina
Se añadió a una bolsa de té (filtros de propileno de 5x5 cm, 0,75 \mum mesh) 0,30 g de resina Fmoc-Tyr(OtBu)-Wang. La bolsa de té se lavó con lo siguiente (10 mL/bolsa): DMF 2 x 3 min, 20% piperidina en DMF 1 x 3 min, 20% piperidina en DMF 1 x 30 min, DCM 8 x 3 min, y DMF 3 x 3 min. Se añadieron aproximadamente 2,5 equivalentes de ácido 6-[(6-(4-fluorofenil)-4-fenil-2-piridinil)oxi]-hexanoico, cinco equivalentes de cada uno de lo que sigue a continuación: HBTU, HOBT, diisopropiletilamina(DIEA) y DMF (10 mL/bolsa). La bolsa se agitó luego durante toda la noche, aproximadamente 18 h. La bolsa se lavó luego con lo siguiente (10 mL/bolsa): DMF 3 x 3 min, DCM 8 x 3 min. La bolsa se secó bajo alto vacío. Los contennidos de la bolsa se colocaro luego en un matraz erlenmeyer pequeño. Se le añadió al matraz 10 mL de un cocktail de escisión (95% de ácido trifluoroacético, 2.5% de triisopropilsilano, y 2,5% de agua). La resina se mantuvo en reposo durante 2 horas, mientras que se agitó de vez en cuando. Después de cada agitación los lados de los matraces se lavaron con una mezcla adicional hasta que el volumen total de la mezcla añadida fue de 15 mL. Después de 2 horas, se filtró la resina y se lavó con TFA (2x4 mL). Los filtrados se concentraron luego a un aceite bajo alto vacío. Los aceites se purificaron luego por HPLC preparativo utilizando el método 2 descrito anteriormente, para dar 36,2 mg del compuesto del título. ESMS: Calculado para C_{32}H_{31}FN_{2}O_{5}, 542.22; Encontrado, 543.4 (M+H)^{+1}.
Parte B
Preparación del N-[6-[(6-(4-fluorofenil)-4-fenil-2-piridinil)oxi]-hexanoil]-O-[N-tert-butiloxicarbonil-3-aminopropil]tirosina
31
Se disolvió en dimetilformamida (0,5 mL) la N-[6-[(6-(4-fluorofenil)-4-fenil-2-piridinil)oxi]-hexanoil]tirosina y se enfrió a 0ºC en un baño de hielo. Se añadió hidruro de sodio (2,2 equivalentes), y la reacción se agitó durante 1 hora a 0ºC. Se disolvió en 0,2 mL de dimetilformamida N-Boc-Bromopropilamina (1,1 equivalentes) y se añadió gota a gota a la solución. La reacción se agitó durante 24 horas adicionales bajo nitrógeno. La reacción se concentró luego a un aceite. El residuo resultante se trató en acetato de etilo. Se acidificó con hidrógenosulfato de potasio al 10%. La fase orgánica se lavó con sal, se secó sobre sulfato de Magnesio, y se evaporó para dar 45,3 mg del producto crudo como un aceite. ESMS: Calculado para C_{40}H_{46}FN_{3}O_{7}S, 699,33; Encontrado, 698,4 (M+H)^{+1}.
Parte C
Preparación del ácido 2-[[[5-[[N-[6-[(6-(4-fluorofenil)-4-fenil-2-piridinil)oxi]-hexanoil]-tirosin-O-[3-propanamino]]carbonil]-2-piridinil]hidrazono]-metil]-bencensulfónico
Se añadió ácido trifluoroacético (1 mL) a una solución de N-[6-[(6-(4-fluorofenil)-4-fenil-2-piridinil)oxi]-hexanoil]-O-[N-tert-butiloxicarbonil-3-aminopropil]tirosina disuelta en 1 mL de diclorometano, y la mezcla de reacción se agitó durante 2 horas. La mezcla de reacción se concentró luego a un aceite bajo alto vacío. El aceite crudo se disolvió en 1 mL de dimetilformamida. Se añadió trietilmamina (3 equivalentes) y la reacción se agitó durante 5 minutos. Se añadió sal monosódica del ácido 2-[[[5-[[(2,5-Dioxo-1-pirrolidinil)oxi]carbonil]-2-piridinil]hidrazono]-metil]-bencensulfónico (1,2 equivalentes), y la reacción se agitó durante 24 g bajo nitrógeno. La reacción se concentró luego a un aceite bajo alto vacío. El aceite se trituró con acetato de etilo. El producto crudo se purificó luego por el método 2, descrito anteriormente para dar 13,3 mg del producto del título. ESMS: Calculado para C_{48}H_{47}FN_{6}O_{9}S, 902,31; Encontrado, 903,32 (M+H)^{+1}.
Ejemplo 6 Síntesis del ácido 2-[[[5-[[N-[6-[(4,6-difenil-2-piridinil)oxi]-hexanoil]-tirosine-O-[3-propanamino]]carbonil]-2-piridinil]hidrazono]-metil]-bencensulfónico
32
Parte A
Preparación de la N-[6-[(4,6-difenil-2-piridinil)oxi]-hexanoil]tirosina
Se añadió a una bolsa de té (filtros de polipropileno 5x5 cm, 0.75 \mum mesh) 0.30 g de resina Fmoc-Tyr(OtBu)-Wang.
La bolsa de té se lavó con lo siguiente (10 mL/bolsa): DMF 2 x 3 min, 20% piperidina en DMF 1 x 3 min, 20% piperidina en DMF 1 x 30 min, DCM 8 x 3 min, y DMF 3 x 3 min. Se añadieron aproximadamente 2,5 equivalentes de ácido 6-[(4,6-Difenil-2-piridinil)oxi]-hexanoico, cinco equivalentes decada uno de lo que sigue a continuación: HBTU, HOBT, diisopropiletilamina(DIEA) y DMF (10 mL/bolsa). La bolsa se agitó durante toda la noche, aproximadamente 18 h. La bolsa se lavó luego con lo siguiente (10 mL/bolsa): DMF 3 x 3 min, DCM 8 x 3 min. La bolsa se secó bajo alto vacío. Los contenidos de la bolsa se colocaron luego en un matraz erlenmeyer pequeño.
Se le añadió al matraz 10 mL de un cocktail de escisión (95% de ácido trifluoroacético, 2.5% de triisopropilsilano, y 2.5% de agua). La resina se mantuvo en reposo durante 2 horas, mientras que se agitó de vez en cuando. Después de cada agitación los lados de los matraces se lavaron con una mezcla adicional hasta que el volumen total de la mezcla añadida fue de 15 mL. Después de 2 horas, se filtró la resina y se lavó con TFA (2x4 mL). Los filtrados se concentraron luego a un aceite bajo alto vacío. Los aceites se purificaron luego por HPLC preparativo utilizando el método 2 descrito anteriormente, para 43,2 mg de N-[6-[(4,6-difenil-2-piridinil)oxi]-hexanoil]tirosina. ESMS: Calculado para C_{32}H_{32}N_{2}O_{5}, 524,23; Encontrado, 525,4 (M+H)^{+1}.
\newpage
Parte B
Preparación de la N-[6-[(4,6-difenil-2-piridinil)oxi]-hexanoil]-O-[N-tert-butiloxicarbonil-3-aminopropil]tirosina
33
Se disolvió la N-[6-[(4,6-difenil-2-piridinil)oxi]-hexanoil]tirosina en dimetilformamida (0,5 mL) y se enfrió a 0ºC en un baño de hielo. Se añadió hidruro de sodio (2,2 equivalentes), y la reacción se agitó durante 1 hora a 0ºC. Se disolvió en 0,2 mL de dimetilformamida N-Boc-Bromopropilamina (1,1 equivalentes) y se añadió gota a gota a la solución. La reacción se agitó durante 24 horas adicionales bajo nitrógeno. La reacción se concentró luego a un aceite. El residuo resultante se trató en acetato de etilo. Se acidificó con hidrogenosulfato de potasio al 10%. La fase orgánica se lavó con sal, se secó sobre sulfato de Magnesio, y se evaporó para dar un producto crudo como un aceite. (35,0 mg). ESMS: Calculado para C_{40}H_{47}N_{3}O_{7}, 681,34; encontrado, 680,4 (M+H)^{+1}.
Parte C
Preparación del ácido 2-[[[5-[[N-[6-[(4,6-difenil-2-piridinil)oxi]-hexanoil]-tirosina-O-[3-propanamino]]carbonil]-2-piridinil]hidrazono]-metil]-bencensulfónico
Se añadió ácido trifluoroacético (1 mL) a una solución de N-[6-[(4,6-difenil-2-piridinil)oxi]-hexanoil]-O-[N-tert-butiloxicarbonil-3-aminopropil]tirosina disuelta en 1 mL de diclorometano, y la mezcla de reacción se agitó durante 2 horas. La mezcla de reacción se concentró luego a un aceite a alto vacío. El aceite crudo se disolvió en 1 mL de dimetilformamida. Se añadió trietilmamina (3 equivalentes) y la reacción se agitó durante 5 minutos. Se añadió sal monosódica del ácido 2-[[[5-[[(2,5-Dioxo-1-pirrolidinil)oxi]carbonil]-2-piridinil]hidrazono]-metil]-bencensulfónico (1,2 equivalentes), y la reacción se agitó durante 24 h bajo nitrógeno. La reacción se concentró luego a un aceite bajo alto vacío. El aceite se trituró con acetato de etilo. El producto crudo se purificó luego por el método 2, descrito anteriormente para dar 17,1 mg del producto. ESMS: Calculado para C_{48}H_{48}N_{6}O_{9}S, 884,32; Found, 885,33 (M+H)^{+1}.
Ejemplo 7 Síntesis del ácido 2-[[[5-[[N-[6-[(4-(3,4-metilendioxifenil)-6-fenil-2-piridinil)oxi]-hexanoil]-tirosina-O-[3-propanamino]]-carbonil]-2-piridinil]hidrazono]-metil]-bencensulfónico
34
Parte A
Preparación de la N-[6-[(4-(3,4-metilendioxifenil)-6-fenil-2-piridinil)oxi]-hexanoil]tirosina
Se añadió a una bolsa de té (filtros de polipropileno 5x5 cm, 0.75 \mum mesh) 0.30 g de resina Fmoc-Tyr(OtBu)-Wang.
La bolsa de té se lavó con lo siguiente (10 mL/bolsa): DMF 2 x 3 min, 20% piperidina en DMF 1 x 3 min, 20% piperidina en DMF 1 x 30 min, DCM 8 x 3 min, y DMF 3 x 3 min. Se añadieron aproximadamente 2,5 equivalentes de ácido 6-[(4-6-Diaril-2-piridinil)oxi]-hexanoico, cinco equivalentes de cada uno de lo que sigue a continuación: HBTU, HOBT, diisopropiletilamina(DIEA) y DMF (10 mL/bolsa). La bolsa se agitó durante toda la noche, aproximadamente 18 h. La bolsa se lavó luego con lo siguiente (10 mL/bolsa): DMF 3 x 3 min, DCM 8 x 3 min. La bolsa se secó bajo alto vacío. Los contenidos de la bolsa se colocaron luego en un matraz erlenmeyer pequeño. Se le añadió al matraz 10 mL de un cocktail de escisión (95% de ácido trifluoroacético, 2.5% de triisopropilsilano, y 2.5% de agua). La resina se mantuvo en reposo durante 2 horas, mientras que se agitó de vez en cuando. Después de cada agitación los lados de los matraces se lavaron con una mezcla adicional hasta que el volumen total de la mezcla añadida fue de 15 mL. Después de 2 horas, se filtró la resina y se lavó con TFA (2x4 mL). Los filtrados se concentraron luego a un aceite bajo alto vacío. Los aceites se purificaron luego por HPLC preparativo utilizando el método 2 descrito anteriormente, para dar 35,3 mg del producto deseado. ESMS: Calculado para C_{33}H_{32}N_{2}O_{7}, 568,22; encontrado, 569,4 (M+H)^{+1}.
Parte B
Preparación de la N-[6-[(4-(3,4-metilendioxifenil)-6-fenil-2-piridinil)oxi]-hexanoil]-O-[N-tert-butiloxicarbonil-3-aminopropil]tirosina
35
Se disolvió la N-[6-[(4-(3,4-Metilenidioxifenil)-6-fenil-2-piridinil)oxi]-hexanoil]tirosina en dimetilformamida (
\hbox{0,5 mL}
) y se enfrió a 0ºC en un baño de hielo. Se añadió hidruro de sodio (2,2 equivalentes), y la reacción se agitó durante 1 hora a 0ºC. Se disolvió en 0,2 mL de dimetilformamida N-Boc-Bromopropilamina (1,1 equivalentes) y se añadió gota a gota a la solución. La reacción se agitó durante 24 horas adicionales bajo nitrógeno. La reacción se concentró luego a un aceite. El residuo resultante se trató con acetato de etilo. Se acidificó con hidrogenosulfato de potasio al 10%. La fase orgánica se lavó con sal, se secó sobre sulfato de magnesio, y se evaporó para dar 39,2 mg del producto crudo como un aceite. ESMS: Calculado para C_{41}H_{47}N_{3}O_{9}, 725,33; Encontrado, 726,3 (M+H)^{+1}.
Parte C
Preparación del ácido 2-[[[5-[[N-[6-[(4-(3,4-metilendioxifenil)-6-fenil-2-piridinil)oxi]-hexanoil]-tirosina-O-[3-propanamino]]-carbonil]-2-piridinil]hidrazono]-metil]-bencensulfónico
Se añadió ácido trifluoroacético (1 mL) a una solución de N-[6-[(4-(3,4-metilendioxifenil)-6-fenil-2-piridinil)oxi]-hexanoil]tirosina disuelta en 1 mL de diclorometano, y la mezcla de reacción se agitó durante 2 horas. La mezcla de reacción se concentró luego a un aceite bajo alto vacío. El aceite crudo se disolvió en 1 mL de dimetilformamida. Se añadió trietilmamina (3 equivalentes) y la reacción se agitó durante 5 minutos. Se añadió sal monosódica del ácido 2-[[[5-[[(2,5-Dioxo-1-pirrolidinil)oxi]carbonil]-2-piridinil]hidrazono]-metil]-bencensulfónico (1,2 equivalentes), y la reacción se agitó durante 24 h bajo nitrógeno. La reacción se concentró luego a un aceite bajo alto vacío. El aceite se trituró con acetato de etilo. El producto crudo se purificó luego por el método 2, descrito anteriormente para dar 
\hbox{3,8 mg}
del producto. ESMS: Calculado para C_{49}H_{48}N_{6}O_{11}S, 928,31; Encontrado, 929,32 (M+H)^{+1}. Ejemplo 8 Síntesis del ácido 2-[[[5-[[alfa-N-[6-[(4,6-difenil-2-piridinil)oxi]-hexanoil]-lisina-epsilon-N-amino]carbonil]-2-piridinil]hidrazono]-metil]-bencensulfónico
36 
\newpage
Parte A
Preparación de la alfa-N-[6-[(4,6-difenil-2-piridinil)oxi]-hexanoil]lisina
37
Se añadió a una bolsa de té (filtros de polipropileno 5x5 cm, 0.75 \mum mesh) 0.88 g de resina Fmoc-Lys(boc)-Wang.
La bolsa de té se lavó con lo siguiente (10 mL/bolsa): DMF 2 x 3 min, 20% piperidina en DMF 1 x 3 min, 20% piperidina en DMF 1 x 30 min, DCM 8 x 3 min, y DMF 3 x 3 min. Se añadieron 2,2 equivalentes de ácido 6-[(4,6-Difenil-2-piridinil)oxi]-hexanoico, cinco equivalentes de cada uno de lo que sigue a continuación: HBTU, HOBT, diisopropiletilamina(DIEA) y DMF (10 mL/bolsa). La bolsa se agitó durante toda la noche, aproximadamente 18 h. La bolsa se lavó luego con lo siguiente (10 mL/bolsa): DMF 3 x 3 min, DCM 8 x 3 min. La bolsa se secó bajo alto vacío. Los contenidos de la bolsa se colocaron luego en un matraz erlenmeyer pequeño. Se le añadió al matraz 10 mL de un cocktail de escisión (95% de ácido trifluoroacético, 2.5% de triisopropilsilano, y 2.5% de agua). La resina se mantuvo en reposo durante 2 horas, mientras que se agitó de vez en cuando. Después de cada agitación los lados de los matraces se lavaron con una mezcla adicional hasta que el volumen total de la mezcla añadida fue de 15 mL. Después de 2 horas, se filtró la resina y se lavó con TFA (2x4 mL). Los filtrados se concentraron luego a un aceite bajo alto vacío. Los aceites se purificaron luego por HPLC preparativo utilizando el método 2 descrito anteriormente, para dar 115 mg del producto. ESMS: Calculado para C_{29}H_{35}N_{3}O_{4}, 489,26; Encontrado, 490,4 (M+H)^{+1}.
Parte B
Preparación del ácido 2-[[[5-[[alfa-N-[6-[(4,6-difenil-2-piridinil)oxi]-hexanoil]-lisina-epsilon-N-amino]carbonil]-2-piridinil]hidrazono]-metil]-bencensulfónico
El derivado de lisina (20 mg, 0,061 mmol) se disolvió en 0,5 mL de dimetilformamida. Se añadió trietilamina (
\hbox{25,5  \mu L}
, 0,183 mmol) y la reacción se agitó durante 5 minutos.
Se añadió sal monosódica del ácido 2-[[[5-[[(2,5-dioxo-1-pirrolidinil)oxi]carbonil]-2-piridinil]hidrazono]metil]-bencensulfónico (32,2 mg, 0,073 mmol) y la reacción se agitó durante 24 h bajo nitrógeno. La reacción se concentró a un aceite bajo alto vacío. El aceite se trituró con acetato de etilo. El producto crudo se purificó luego por el método 2 descrito anteriormente para dar 4,7 mg (10%) del compuesto del título. ESMS: Calculado para C_{42}H_{44}N_{6}O_{8}S, 792,29; Encontrado, 793,30 (M+H)^{+1}.
Ejemplo 9 Síntesis del conjugado de 4-etil-2-(4-fluorofenil)-5-[(5,5-dimetil-6-aminohexil)oxi]fenol N-[4-(carboxi)bencil]-N,N'-bis[2-tioetil]-glicinamida
38
Parte A
Preparación del S-Trifenilmetil-2-aminoetantiol
Se trató una solución de hidrocloruro de cisteamina (79,5 g, 0,7 mol) en TFA (500 mL) con trifenilmetanol (182 g, 0,7 mol), y se agitó a temperatura ambiente durante una hora. Se eliminó el TFA a presión reducida a una temperatura de 45ºC y el aceite naranja oscuro resultante se disolvió en EtOAc (700 mL). La solución de EtOAc se lavó con NaOH 2N frío (3x350 mL), H_{2}O (2x350 mL), NaHCO_{3} saturado(350 ml), y NaCl saturado (350 ml). Los lavados acuosos combinados se extrajeron de nuevo con EtOAc (350 mL). Las fases orgánicas combinadas se secaron (MgSO_{4}) y se concentraron a un sólido amarillo. La trituración con éter (500 mL) dió un producto (97,2 g, 43%) como un sólido incoloro, mp 90-92ºC. La concentración del triturante etéreo hasta un volumen de 100 mL y enfriamiento, produjo 40,9 g adicionales de producto, mp 89-91ºC, con un rendimiento combinado del 62%.
Parte B
Preparación del N-2-Bromoacetil-S-trifenilmetil-2-aminoetantiol
Se añadió lentamente una solución de S-trifenilmetil-2-aminoetantiol (48 g, 0,15 mol) y Et_{3}N (20,9 ml, 0,15 mol) en DCM (180 ml) a una solución agitada de bromuro de bromoacetilo (13.9 ml, 0.15 mol) en DCM (100 ml) a una temperatura de -20ºC. La reacción se dejó calentar a temperatura ambiente durante un periodo de una hora. La reacción se lavó con porciones de 500 mL de H_{2}O, 0.2 N HCl, NaHCO_{3} saturado y NaCl saturado. La solución orgánica se secó (MgSO_{4}) y se concentró a un aceite. Este aceite se cristalizó con DCM-hexano para dar el producto (54.9 g, 83%) como un sólido incoloro, mp 137-139,5ºC.
Parte C
Preparación de la N,N'-Bis[(2-trifenilmetiltio)etil]glicinamida
Se mantuvo una solución de N-2-Bromoacetil-S-trifenilmetil-2-aminoetantiol (35,2 g, 0,08 mol), S-trifenilmetil-2-aminoetantiol (25,5 g, 0,08 mol), y Et_{3}N (16,7 ml, 0,12 mol) en DCM (375 ml) a temperatura ambiente durante 24 horas. La solución se lavó con porciones de 200 mL de H_{2}O (1X), NaHCO_{3} saturado (2X), H_{2}O (1X), y NaCl saturado (1X), se secó (MgSO_{4}), y se concentró para dar un aceite viscoso. El aceite se disolvió en DCM:EtOAc (150 mL) al 70:30 y se enfrió en un baño de hielo. El sólido que se formó se eliminó por filtración. El filtrado se concentró a un aceite viscoso. Este aceite se purificó por cromatografía flash sobre sílica gel de 60 \AA de 200-400 mesh, utilizando una fase móvil de DCM:AcOEt al 70:30 para dar el producto (34,4 g, 63%) como un sólido amorfo espumoso incoloro.
^{1}H RMN (CDCl_{3}) 7,42-7,18 (m, 30H), 3,12-3,01 (m, 4H), 2,48-2,27 (m, 6H).
Parte D
Preparación del benzoato de Metil 4-(Metansulfonilmetilo)
Se trató una solución de benzoato de metil 4-(hidroximetilo) (10,8 g, 0,065 mol) y una esponja de protones (19,5 g, 0,091 mol) en DCM (200 mL) con anhídrido de metansulfónico (13,94 g, 0,08 mol) y se agitó a temperatura ambiente durante 20 horas. La mezcla de reacción se lavó con porciones de 100 mL de H_{2}O (1X), 1N HCl (2X), H_{2}O (1X), NaHCO_{3} saturado (1X), y H_{2}O (1X). La fase orgánica se secó (MgSO_{4}) y se concentró para dar 15.5 g de sólido amarillo pálido. Una recristalización con CCl_{4} (150 mL) utilizando carbono decolorante dió el producto (14,2 g, 90%) como agujas incoloras, mp 91-94ºC.
Parte E
Preparación de la N-[4-(Carbometoxi)bencil]-N,N'-bis[(2-trifenilmetiltio)etil]glicinamida
Se calentó a reflujo una solución de N,N'-Bis[(2-trifenilmetiltio)etil]glicinamida (16,27 g, 0,024 mol) y benzoato de metil 4-(metansulfonilmetilo) (4,88 g, 0,02 mol) en dicloruro de etileno (200 ml) durante 28 horas. La reacción se lavó con porciones de 200 mL de NaHCO_{3} saturado y H_{2}O, se secó (MgSO_{4}), y se concentró a un aceite ligeramente marrón (30 g). Este aceite se purificó por cromatografía flash sobre sílica gel de 60 \AA de 200-400 mesh, utilizando una fase móvil de DCM:EtOAc para dar el producto (9,9 g, 60%) como un sólido amorfo espumoso incoloro. ^{1}H RMN (CDCl_{3}) 7,90 (d, 2H, J = 6,5 Hz), 7,49-7,18 (m, 32H), 3,91 (s, 3H), 3,47 (s, 2H), 3,01 (q, 2H, J = 6,2 Hz), 2,88 (s, 2H), 2,43 (t, 2H, J = 6,2 Hz), 2,39-2,27 (m, 4H).
Parte F
Preparación de la N-[4-(Carboxi)bencil]-N,N'-bis[(2-trifenilmetiltio)etil]glicinamida
Se agitó a temperatura ambiente una mezcla de N-[4-(carbometoxi)bencil]-N,N'-bis[(2-trifenilmetiltio)etil]glicinamida (6,00 g, 7,26 mmol) en dioxano (65 ml) y NaOH 1N (65 ml) durante 24 horas. La mezcla se acidificó con ácido cítrico 2,5 M (100 mL) y el precipitado viscoso formado se extrajo en AcOEt (400 mL). La solución de EtOAc se lavó con H_{2}O (3 X 200 ml) y NaCl saturado (100 ml), se secó (MgSO_{4}), y se concentró para dar el producto (
\hbox{5,90 g}
, 100%) como un sólido espumoso amorfo incoloro. ^{1}H RMN (CDCl_{3}) 7,96 (d, 2H, J = 8,1 Hz), 7,40-7,16 (m, 32H), 3,71 (s, 3H), 3,49 (s, 2H), 3,00 (q, 2H, J = 5,4 Hz), 2,91 (s, 2H), 2,44 (t, 2H, J = 5,4 Hz), 2,38-2,30 (m, 4H).
Parte G
Preparación del éster de la N-[4-(Carboxi)bencil]-N,N'-bis[(2-trifenilmetiltio)etil]glicinamida N-Hidroxisuccinimida
Se trató una solución de N-[4-(carboxi)bencil]-N,N'-bis[(2-trifenilmetiltio)etil]glicinamida (450 mg, 0,55 mmol) y N-hidroxisuccinimida (76 mg, 0,66 mmol) en DCM (10 ml) con una solución de WSCD\cdotHCl (122 mg, 0,66 mmol) en DCM (7 ml) y se agitó a temperatura ambiente durante 22 horas. La mezcla de reacción se concentró y los sólidos se redisolvieron en EtOAc (60 mL). La solución de EtOAc se lavó con H_{2}O (2 X 25 ml), 0,1 N NaOH (35 ml), H_{2}O (2 x 25 ml), y NaCl saturado (35 ml), se secó (Na_{2}SO_{4}), y se concentró para dar el producto (469 mg, 93%) como un sólido incoloro.
Parte H
Preparación del conjugado de la 4-etil-2-(4-fluorofenil)-5-[(5,5-dimetil-6-aminohexil)oxi]fenol N-[4-(carboxi)bencil]-N,N'-bis[(2-trifenfilmetiltio)etil]-glicinamida
39
Se disolvió el 4-etil-2-(4-fluorofenil)-5-[(5,5-dimetil-6-aminohexil)oxi]fenol (100 mg) en dimetilformamida (
\hbox{5 mL}
) bajo nitrógeno. Se le añadió a esto trietilamina (84 mg), éster de la N-[4-(carboxi)bencil]-N,N'-bis[(2-trifenilmetiltio)etil]-glicinamida N-hidroxisuccinimida (254 mg), y 4-dimetilaminopiridina (7mg). La mezcla se agitó durante toda la noche a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se diluyó con agua (20 mL) y se extrajo con acetato de etilo. Los combinados orgánicos se secaron (sulfato de magnesio), se filtraron y se concentraron a sequedad para dar lugar a un aceite (205 mg). Éste se purificó por HPLC preparativo (Columna farmacéutica Vydac de 5 cm x 25 cm, 0,1% ácido trifluoroacético/agua (A):90% acetonitrilo/agua (B) gradiente,) y las fracciones liofilizados para dar lugar el producto (118 mg) como un polvo blanco. RMN (CDCl_{3}): 0,93, s (6H); 1,15, t (3H); 1,34, m (2H); 1,51, m (2H); 1,78, m (2H); 2,31, t (2H); 2,45, m (2H); 2,55, m (4H); 2,95, m (2H); 2,45, s (2H); 3,28, d (2H); 3,73, s (2H); 3,96, t (2H); 6,05, t (1H); 6,48, s (1H); 6,94, s (1H); 7,07, t (2H); 7,20, m (20H); 7,38, m (15H); 7,56, d (2H): Espectro de Masas (EI), m/e = 1154,7 (M+H).
Parte I
Preparación del conjugado de la 4-etil-2-(4-fluorofenil)-5-[(5,5-dimetil-6-aminohexil)oxi]fenol N-[4-(carboxi)bencil]-N,N'-bis[2-tioetil]-glicinamida
Se mezcló el conjugado de la 4-etil-2-(4-fluorofenil)-5-[(5,5-dimetil-6-aminohexil)oxi]fenol N-[4-(carboxi)bencil]-N,N'-bis[(2-trifenilmetiltio)etil]-glicinamida (92 mg) con ácido trifluoroacético (4,6 mL) y trietilsilano (36 mg) y se agitó durante 3 horas bajo nitrógeno. La solución se filtró y se concentró al vacío. El sólido resultante se disolvió en cloroformo, se introdujo en un SepPak® (SiO_{2}) y se eluyó con cloroformo (5 mL). Luego se eluyó con metanol y el metanol se recogió y se concentró al vacío para dar el producto (25 mg). RMN (CDCl_{3}): 0,97, s (6H); 1,15, t (3H); 1,36, m (2H); 1,49, m (2H); 1,80, m (2H); 2,58, m (4H); 2,78, t (2H); 2,97, t (2H); 3,31, m (2H); 3,39, m (2H); 3,91, s (2H); 3,97, t (2H); 6,16, t (1H); 6,48, s (1H); 6,96, s (1H); 7,11, t (2H); 7,43, m (4H); 7,69, d (2H); 7,79, b (1H): Espectro de Masas (EI), m/e = 670.3 (M+H).
Ejemplo 10 Síntesis del ácido bencensulfónico, 2-[[[5-[[[6-[(4,6-difenil-2-piridinil)oxi]-2,2-dimetil-1-hexil]aza]carbonil]-2-piridinil]hidrazono]metil]
40 
\newpage
Parte A
Preparación de la 6-[(4,6-Difenil-2-piridinil)oxi]-2,2-dimetil-1-hexilamina
Se trató una suspensión de NaBH_{4} (255 mg, 6,75 mmol) en THF (4 mL) con TFA (52 ul, 6,75 mmol). Se añadió gota a gota a la solución resultante una solución de 6-[(4,6-difenil-2-piridinil)oxi]-2,2-dimetilhexanonitrilo (500 mg, 1,35 mmol) en THF (5 mL). La solución se agitó a temperatura ambiente durante 4 hr, y el exceso de reactivo se descompuso a 0ºC por adición cautelosade agua. La solución se concentró a sequedad y el residuo se extrajo con DCM (30 mL) y agua (30 mL). La fase orgánica se extrajo adicionalmente con DCM (3 x 30 mL). Los extractos combinados de DCM se lavaron con agua (50 mL) y NaCl saturado (50 mL), se secó (MgSO_{4}), y se concentró para dar un aceite amarillo. La purificación por HPLC preparativo en una columna Vydac C-18 (21,2x25 cm) utilizando un gradiente de 1,35%/minuto de un 50 a un 80% de ACN que contiene un 0,1% de TFA a una velocidad de flujo de 
\hbox{15 mL/min}
dió el compuesto del título como un aceite incoloro (321 mg, 63,5%). ^{1}H RMN (CDCl_{3}): 8,00-7,93 (m, 2H), 7,71-7,62 (m, 2H), 7,56-7,41 (m, 7H), 6,96 (s, 1H), 4,64-4,38 (m, 4H), 2,82-2,70 (m, 2H), 1,90-1,75 (m, 2H), 1,58-1,32 (m 4H), 0,97 (s, 6H); MS: m/e 375,2 [M+H].
Parte B
Preparación del ácido bencensulfónico, 2-[[[5-[[[6-[(4,6-difenil-2-piridinil)oxi]-2,2-dimetil-1-hexil]aza]carbonil]-2-piridinil]hidrazono]metil]
Se agitó a temperatura ambiente una solución de 6-[(4,6-difenil-2-piridinil)oxi]-2,2-dimetil-1-hexilamina (
\hbox{64,8 mg}
, 0,17 mmol), ácido bencensulfónico, 2-[[[5-[[(2,5-dioxo-1-pirrolidinil)oxi]carbonil]-2-piridinil]hidrazono]metil] (76,2 mg, 0,17 mmol), y TEA (96 ul, 0,53 mmol) en DMF (2 mL) bajo nitrógeno durante 24 horas. La DMF se eliminó al vacío y el residuo se purificó por HPLC preparativo en una columna Vydac C-18 (21,2x25 cm) utilizando un gradiente de 1,8%/minuto de un 20 a un 90% de ACN que contenía NH_{4}OH 0,05 M a una velocidad de flujo de 
\hbox{15 mL/min}
. Una segunda purificación por HPLC en la misma columna y gradiente utilizando ACN dío el compuesto del título como un aceite incoloro (9,6 mg, 8,4%). ES-MS: m/e 676,3 [M-H]. Ejemplo 11 Síntesis del ácido 2-[[[5-[[[[6-[(4,6-Difenil-2-piridinil)oxi]-hexanoil]-4-sulfonamidil]bencilamino]carbonil]-2-piridinil]-hidrazono]metil]-bencensulfónico
41
Parte A
Preparación de la 4-(tert-butil-aminometil)bencen sulfonamida
Se disolvió en dioxano (10 mL) el hidrato del hidrocloruro de la 4-aminometilbencensulfonamida (0,5 g, 2,25 mmol). Se añadió trietilamina (0,627 mL, 4,5 mmol) y la reacción se agitó durante 5 minutos. Se añadió Di-tert-butil-dicarbonato (0,490 g, 2,25 mmol), y la reacción se agitó durante toda la noche a temperatura ambiente. La reacción se concentró luego a alto vacío. El aceite resultante se mezcló en agua y se extrajo con diclorometano. La fase orgánica se lavó luego con sal, se secó sobre sulfato de magnesio, y se evaporó hasta un volumen pequeño. Se añadió hexano y el producto precipitó. El producto se filtró, se lavó con hexano, y se secó para dar 0,476 g (74%) de 4-(tert-butil-aminometil)bencensulfonamida. ESMS: Calculado para C_{12}H_{18}N_{2}O_{4}S, 286,10; Encontrado, 285,1 (M-H)^{-1}.
\newpage
Parte B
Preparación de la sal de ácido trifluoroacético del ácido 4- (Aminometil)-benzosulfonimida de 6-[(4,6-Difenil-2-piridinil)oxi]-hexanoico
42
Se disolvió en diclorometano (8 mL) el 6-[(4,6-Difenil-2-piridinil)oxi]-hexanoico (0,100 g, 0,276 mmol). Se añadieron 4-Dimetilaminopiridina (43,8 mg, 0,358 mmol), hidrocloruro de la 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida (50,9 mg, 0,276 mmol), y la 4-(tert-butil-aminometil)bencensulfonamida (79,0 mg, 0,276 mmol). Se añadió tamiz molecular de 4\AA y la reacción se agitó toda la noche durante 22 h. La reacción se filtró luego, y se lavó con diclorometano. El filtrado se lavó con HCl 1N (1x), agua (2x), NaCl saturado (2x), se secó sobre sulfato de magnesio, y se concentró para dar un sólido blanco que se recristalizó con hexano/acetato de etilo para dar 106,7 mg (61%) del producto sulfonimida boc-protegido. ESMS: Calculado para C_{35}H_{39}N_{3}O_{6}S, 629,26; Encontrado, 628,3 (M-H)^{-1}.
El producto boc-protegido (97,3 mg, 0,154 mmol) se disolvió luego en diclorometano (1,5 mL). Se añadió ácido trifluoroacético (1,5 mL), y la reacción se agitó durante 2 h a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se concentró luego a un aceite y se trituró con éter. El producto se filtró, se lavó con éter, y se secó para dar 98,2 mg (119%) de la 4-(aminometil)-benzosulfonimida de la sal de ácido trifluoroacético del ácido 6-[(4,6-Difenil-2-piridinil)oxi]-hexanoico. ESMS: Calculado para C_{30}H_{31}N_{3}O_{4}S, 529,20; Encontrado, 530,2 (M+H)^{+1}.
Parte C
Preparación del ácido 2-[[[5-[[[[6-[(4,6-Difenil-2-piridinil)oxi]-hexanoil]-4-sulfonamidil]bencilamino]carbonil]-2-piridinil]-hidrazono]metil]-bencensulfónico
Se disolvió en dimetilformamida (3 mL) la sulfonimido-amina (0,080 g, 0,124 mmol). Se añadió trietilamina (51,8 \mul, 0,372 mmol) y la reacción se agitó durante 5 minutos. Se añadió la sal monosódica del ácido 2-[[[5-[[(2,5-Dioxo-1-pirrolidinil)oxi]-carbonil]-2-piridinil]hidrazono]metil]-bencensulfónico (65,5 mg, 0,149 mmol) y la reacción se agitó durante 36 h bajo nitrógeno. La reacción se concentró luego a un aceite a alto vacío. El aceite se trituró con acetato de etilo para dar 100,9 mg (98%) del compuesto del título. ESMS: Calculado para C_{43}H_{40}N_{6}O_{8}S_{2}, 832,23; Encontrado, 831,4 (M+H)^{+1}.
Ejemplo 12 Síntesis del 4-etil-2-(4-fluorofenil)-[5-[6,6-dimetil-7-[[6-[[[(2-sulfonilfenil)metilene]hidrazino]-3-piridinil]carbonil]amino]heptil]oxi]fenol
43
Parte A
Preparación del 1-(benciloxi)-4-etil-2-(4-fluorofenil)-5-[(6-metil-6-cianoheptil)oxi]-benceno
Se preparó el 1-(benciloxi)-4-etil-2-(4-fluorofenil)-5-[(6-metil-6-cianoheptil)oxi]-benceno tal y como se describe en el Ejemplo 1 para la síntesis del 1-(benciloxi)-4-etil-2-(4-fluorofenil)-5-[(5-metil-5-cianohexil)oxi]-benceno substituyendo el 6-ciano-6-metil-1-bromoheptano por el 5-ciano-5-metil-1-bromohexano.
Parte B
Preparación del 4-etil-2-(4-fluorofenil)-5-[(6,6-dimetil-7-aminoheptil)oxi]fenol
44
Se disolvió el 1-(benciloxi)-4-etil-2-(4-fluorofenil)-5-[(6-metil-6-cianoheptil)oxi]-benceno (485 mg) en etanol (
\hbox{15 mL}
) y se añadió a una solución de óxido de platino (20 mg) en 10 mL de etanol en una botella Parr. La botella se presurizó a 55 psi con hidrógeno y se agitó durante 20 horas. Se añadió más catalizador (120 mg) y la botella se agitó a 55 psi de hidrógeno durante 18 horas adicionales. La solución se filtró a través de Celite y se concentró al vacío para dar un crudo de 4-etil-2-(4-fluorofenil)-5-[(6,6-dimetil-7-aminoheptil)oxi]fenol (475 mg) como un aceite. Se purificó por cromtaografía en sílica gel con cloroformo/metanol como eluyente. Las fracciones del producto se combinaron y se concentraron al vacío (120 mg). RMN (CDCl_{3}): 1,00, s, (6H); 1,15, t (3H); 1,33, m (2H); 1,44, m (2H); 1,77, m (2H); 2,55, q (2H); 2,74, s (2H); 3,92, t (2H); 6,52, s (1H); 6,96, s (1H); 7,11, d of d (2H); 7,43, d of d (2H). Espectro de Masas (EI), m/e = 374,3 (M+H).
Parte C
Preparación del 4-etil-2-(4-fluorofenil)-[5-[6,6-dimetil-7-[[6-[[[(2-sulfonilfenil)metilen]hidrazino]-3-piridinil]carbonil]amino]heptil]oxi]fenol
Se introdujo dimetilformamida seca (5 mL) a un matraz bajo nitrógeno. Se le añadió 4-etil-2-(4-fluorofenil)-5-[(6,6-dimetil-7-aminoheptil)oxi]fenol (85 mg) y 2-[[[5-[[(2,5-dioxo-1-pirolidinil)oxi]carbonil]-2-piridinil] hidrazono]metil]-bencensulfonato de sodio (100 mg) seguido por diisopropiletilamina (94 mg) y 4-dimetilaminopiridina (
\hbox{5 mg}
). La solución se agitó durante toda la noche. El disolvente se concentró al vacío y el aceite residual se purificó por HPLC preparativo (Columna farmacéutica Vydac C18 5 x 25cm, 0.1% de ácido trifluoroacético en gradiente de agua/acetonitrilo)y se liofilizó para dar el producto (30 mg) como un polvo blanco grisáceo. RMN (DMSO-d_{6}): 0,88, s (6 H); 1,10, t (3H); 1,33, m (6H); 1,76, m (2H); 2,50, m (2H); 3,16, d (2H); 3,93, t (2H); 6,52, s (1H); 6,99, s (1H); 7,16, t (2H); 7,19, m (1H); 7,41, m (2H); 7,53, d de d (2H); 7,80, m (1H); 8,19, b (2H); 8,51, s (1H); 9,18, ancho (1H); 9,33, ancho (1H). Espectro de Masas (EI), m/e = 675,3 (M-H). Ejemplo 13 Preparación of 4-etil-2-(5-pirazolil)-[5-[5,5-dimetil-6-[[6-[[[(2-sulfonilfenil)metilen]hidrazino]-3-piridinil]carbonil]amino]hexil]oxi]fenol
45
Parte A
Preparación de la 2-hidroxi-5-etil-4-[(5-metil-5-cianohexil)oxi]-acetofenona
Se calentó a 110ºC una solución de 2,4-dihidroxi-5-etil-acetofenona (2,65 g), carbonato de potasio (3,6 g), ioduro de potasio (0,49 g), y 5-ciano-5-metil-1-bromohexano (3,0 g) en dimetilsulfóxido (4 mL) y 2-butanona (15 mL) durante 18 horas bajo nitrógeno. La mezcla se enfrió, se diluyó con agua (40 mL), y se extrajo con tolueno. Los combinados orgánicos se lavaron con agua, se secaron (sulfato de magnesio), se filtraron, y se concentraron al vacío para dar un aceite amarillo. Se cromatografió con sílica flash (hexano/acetato de etilo 6:1) y las fracciones combinadas se concentraron para dar el producto como un aceite (3,3g). RMN (CDCl_{3}): 1,17, t (3H); 1,35, s (6H); 1,6-1,9, m (6H); 2,55, s (3H); 2,56, q (2H); 4,01, t (2H); 6,35, s (1H); 7,41, s (1H); 12,69, s (1H); Espectro de Masas (GC/MS), m/e = 303 (M).
Parte B
Preparación del 3-[(5-metil-5-cianohexil)oxi]-4-etil-6-pirazoil-fenol
46
Se mezcló la 2-hidroxi-5-etil-4-[(5-metil-5-cianohexil)oxi]-acetofenona (1,0 g) con el dimetilacetal de la dimetilformamida (1,6 g) y se calentó en un baño de aceite a 100ºC, en el que se disolvió el sólido. Después de 3 horas, se había formado un precipitado amarillo y los volátiles se eliminaron al vacío. Los sólidos se suspendieron en etanol (
\hbox{20 mL}
) y se añadió hidrato de hidracina (375 mg). La mezcla se agitó durante 18 horas a temperatura ambiente y luego durante 24 horas a reflujo. La solución se filtró y el filtrado se concentró a un aceite que se purificó por cromatografía flash (hexano/cloroformo/acetonirilo/metanol, 6:2:1:1). Las fracciones deseadas se combinaron y se concentraron para dar el producto como un aceite (600 mg). RMN (CDCl_{3}): 1,19, t (3H); 1,35, s (6H); 1,6-1,9, m (6H); 2,60, q (2H); 4,01, t (2H); 6,51, s (1H); 6,62, d (1H); 7,31, s (1H); 7,60, d (1H); 10,2, b (1H); Espectro de Masas (EI), m/e = 326,2 (M-H).
Parte C
Preparación del 3-[(5,5-dimetil-6-aminohexil)oxi]-4-etil-6-pirazoil-fenol
47
Se disolvió el 3-[(5-metil-5-cianohexil)oxi]-4-etil-6-pirazoil-fenol (285 mg) en metanol (25 mL) en una botella Parr y se añadió óxido de platino (100 mg) y ácido clorhídrico concentrado (270 \muL). El matraz se tapó, se presurizó a 54 psi de hidrógeno y se agitó durante 24 horas. La reacción se filtró a través de Celite y el filtrado se concentró para dar el producto como un aceite (265 mg). RMN (DMSO-d_{6}): 092, s (6H); 1,14, t (3H); 1,2-1,5, m (4H); 1,6-1,8, m (2H); 2,48, q (2H); 2,64, m (2H); 3,97, t (2H); 6,51, s (1H); 6,76, d (1H); 7,45, s (1H); 7,85, d (1H); Espectro de Masas (EI), m/e = 332,2 (M+H).
Parte D
Preparación del 4-etil-2-(5-pirazolil)-[5-[5,5-dimetil-6-[[6-[[[(2-sulfonilfenil)metilen]hidrazino]-3-piridinil]carbonil]amino]hexil]oxi]fenol
Se disolvió en dimetilformamida (12 mL) el 3-[(5,5-dimetil-6-aminohexil)oxi]-4-etil-6-pirazoil-fenol (260 mg) y se añadió trietilamina (230 mg), seguido por 2- [[[5-[[(2,5-dioxo-1-pirolidinil)oxi]carbonil]-2-piridinil] hidrazono]metil]-bencenesulfonato de sodio (398 mg) y dimetilaminopiridina (8 mg). La reacción púrpura se agitó durante toda la noche, se concentró al vacío, y el aceite resultante (840 mg) se purificó por HPLC preparativo (columna farmacéutica Vydac 5 cm x 25 cm, al 0,1% de ácido trifluoroacético/agua (A):90% de acetonitrilo/agua (B) gradiente). Las fracciones se liofilizaron para dar el producto como un polvo gris (140 mg). RMN (DMSO-d_{6}): 0,88, s (6H); 1,12, t (3H); 1,2-1,9 m (6H); 2,53, q (2H); 3,15, m (2H); 3,95, t (2H); 4,2, b (5H); 6,46, s (1H); 6,75, s (1H); 7,17, d (1H); 7,43, m (3H); 7,84, m (2H); 8,29, d (1H); 8,38, d (1H); 8,45, s (1H), 8,54, t (1H); 9,34, s(1H); 13,10, b (1H); Espectro de Masas (EI), m/e = 633,2 (M-H);
Ejemplo 14 Síntesis del conjugado entre el ácido 2-[6-[(4,6-Difenil-2-piridinil)oxi]pentil]-6-(8-amino-5-aza-4-oxooctiloxi)bencenpropanoico y el ácido bencensulfónico, 2-[[[5-[[(2,5-Dioxo-1-pirrolidinil)oxi]carbonil]-2-piridinil]hidrazono]metil]
48
Parte A
Preparación del éster metílico del ácido 6-[(5-Hidroxipentil)oxi]-2-(4-t-butoxi-4-oxobutiloxi)bencenpropanoico
Se agitó una mezcla del éster metílico del ácido 2-hidroxi-6-[(5-hidroxipentil)oxi]bencenepropanoico (2,04 g, 
\hbox{7,23 mmol}
) (tal y como se describe por Cohen, N. EP Appl. 531,823), 4-bromobutirato de t-butilo (1,93 g, 
\hbox{8,67 mmol}
), y K_{2}CO_{3} (2,29 g, 16,6 mmol) en DMSO (60 mL) a temperatura ambiente bajo nitrógeno durante 21 horas. Se eliminaron los sólidos por filtración y el filtrado se diluyó con agua (100 mL), y se extrajo con EtOAc (3x100 mL). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con agua y NaCl saturado, se secó (MgSO_{4}) y se concentró para dar el producto como un aceite amarillo (2,98 g). Una porción (487 mg) se purificó por cromatografía flash en sílica gel (40:60 EtOAc/hexano) para dar el compuesto del título como un aceite incoloro (367 mg, 73,3%). ^{1}H RMN (CDCl_{3}): 7,08 (t, J = 8,2 Hz, 1H), 6,48 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 4,00-3,89 (m, 4H), 3,70-3,62 (m, 5H), 3,04-2,93 (m, 2H), 2,50-2,39 (m, 4H), 2,11-1,99 (m, 2H), 1,88-1,75 (m, 2H), 1,72-1,52 (m, 5H), 1,43 (s, 9H); MS: m/e 447.3 [M+Na].
Parte B
Preparación del éster metílico del ácido 6-(4-t-Butoxi-4-oxobutoxi)-2- [[5-(metilsulfonil)oxi]pentil]oxi] bencenpropanoico
Se agitó a temperatura ambiente una solución del éster metílico del ácido 6- [(5-hidroxipentil)oxi]-2-(4-t-butoxi-4-oxobutiloxi)bencenpropanoico (1,68 g, 3,96 mmol), TEA (1,10 ml, 11,8 mmol), y cloruro de metansulfonilo (0,46 mL, 5,9 mmol) en DCM (30 mLbajo nitrógeno durante 1 hora. La solución se diluyó con DCM (50 mL) y agua (30 mL), y la fase acuosa se extrajo con más DCM (3x50 mL). Los extractos de DCM combinados se lavaron sucesivamente con HCl 0,1N (100 mL), NaHCO_{3} sat. (50 mL), y NaCl saturado (50 mL), se secó (MgSO_{4}), y se concentró para dar el producto como un aceite amarillo pálido (1,99, 100%). ^{1}H RMN (CDCl_{3}): 7,08 (t, J = 8,3 Hz, 1H), 6,48 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 4,25 (t, J = 6,4 Hz, 2H), 4,00-3,90 (m, 4H), 3,67 (s, 3H), 3,01-2,91 (m, 5H), 2,50-2,37 (m, 4H), 2,13-2,00 (m, 2H), 1,89-1,75 (m, 4H), 1,68-1,56 (m, 2H), 1,43 (s, 9H); MS: m/e 520,3 [M+NH_{4}].
Parte C
Preparación del éster metílico del ácido 2-[6-[(4,6-Difenil-2-piridinil)oxi]hexil]-6-(4-t-butoxi-4-oxobutoxi)bencenpropanoico
49
Se agitó a temperatura ambiente el éster metílico del ácido 6-(4-t-butoxi-4-oxobutoxi)-2-[[5-(metilsulfonil)oxi]pentil]oxi]bencenpropanoico (2,08 g, 3,6 mmol), 4,6-difenil-2-piridinona (0,89 g, 3,6 mmol), y K_{2}CO_{3} (1,19 g, 
\hbox{8,64
mmol}
) en DMSO (40 mL) bajo nitrógeno durante 23 horas. La mezcla de reacción se diluyó con agua (50 mL) y se extrajo con EtOAc (3x70 mL). Los extractos orgánicos combinados se lavaron sucesivamente con agua, y NaCl saturado, se secó (MgSO_{4}), y se concentró para dar un aceite amarillo. La purificación por cromatografía flash en sílica gel (1:6 EtOAc/hexano) dió el compuesto del título como un aceite incoloro (1,56 g, 66,4%). ^{1}H RMN (CDCl_{3}): 8,07 (d, J = 6,7 Hz, 2H), 7,70-7,63 (m, 2H), 7,54-7,35 (m, 7H), 7,08 (t, J = 8,1 Hz, 1H), 6,89 (s, 1H), 6,52-6,43 (m, 1H), 4,50 (t, J = 6,3 Hz, 2H), 4,05-3,93 (m, 4H), 3,63 (s, 3H), 3,05-2,94 (m, 2H), 2,54-2,39 (m, 4H), 2,11-1,98 (m, 2H), 1,98-1,83 (m, 4H), 1,76-1,61 (m, 2H), 1,43 (s, 9H); MS: m/e 654,5 [M+H].
Parte D
Preparación del éster metílico del ácido 2-[6-[(4,6-Difenil-2-piridinil)oxi]hexil]-6-(3-carboxipropoxi)bencenepropanoico
Se agitó a temperatura ambiente una solución del éster metílico del ácido 2-[6- [(4,6-difenil-2-piridinil)oxi]-hexil]-6-(4-t-butoxi-4-oxobutoxi)bencenpropanoico (200 mg, 0,3 mmol) y anisol (65 ul, 0,6 mmol) en TFA (5 mL) durante 2 horas. La solución se evaporó a sequedad y el residuo se extrajo con EtOAc (40 mL) y H_{2}O (40 mL). La fase orgánica se extrajo con más EtOAc (3x20 mL). Los extractos orgánicos combinados se lavaron sucesivamente con NaHCO_{3} saturado (30 mL) y NaCl saturado (2x 30 mL), se secó (MgSO_{4}), y se concentró para dar un sólido incoloro. La liofilización con ACN 70% dió el compuesto del título como un sóllido incoloro (170 mg, 94,8%) MS de alta resolución: calculado para C_{36}H_{39}NO_{7}: 598,2805, Encontrado: 598,2813.
Parte E
Preparación del éster metílico del ácido 2-[6-[(4,6-Difenil-2-piridinil)oxi]hexil]-6-(5-aza-8-t-butoxicarbonilamino-4-oxooctiloxi)bencenpropanoico
50
Se trató una solución del éster metílico del ácido 2-[6-[(4,6-difenil-2-piridinil)oxi]-hexil]-6-(3-carboxipropoxi)bencenpropanoico (118 mg, 0,197 mmol) en DMF (4 mL) con HBTU (82 mg, 0,217 mmol). Después de 5 minutos se añadió una solución de mono-N-Boc-1,3-diaminopropano (34,3 mg, 0,197 mmol) y DIEA (86 ul, 0,49 mmol) en DMF (1 mL) y se continuó con la agitación a temperatura ambiente durante 10 minutos. Se eliminó la DMF por evaporación y el residuo se disolvió en una mezcla de EtOAc (40 mL) y H_{2}O (30 mL). La fase orgánica se ajustó a pH 2 con HCl 0,2N y las fases se mezclaron completamente. La fase de EtOAc se lavó consecutivamente con NaHCO_{3} saturado (
\hbox{30 mL}
) y NaCl saturado (2x30 mL), se secó (MgSO_{4}), y se concentró para dar el compuesto del título como un aceite incoloro (129 mg, 86,8%). MS de alta resolución: Calculado para C_{44}H_{55}N_{3}O_{8}: 754,4067, Encontrado: 754,4077.
Parte F
Preparación del ácido 2-[6-[(4,6-Difenil-2-piridinil)oxi]hexil]-6-(8-amino-5-aza-4-oxooctiloxi)bencenepropanoico
51
Se agitó a temperatura ambiente el éster metílico del ácido 2-[6-[(4,6-difenil-2-piridinil)oxi]hexil]-6-(5-aza-8-t-butoxicarbonilamino-4-oxooctiloxi)bencenpropanoico (120 mg, 0,159 mmol) y LiOH 3 M (0,77 mL, 2,3 mmol) en THF (7,6 mL) durante 4 días. El THF y el H_{2}O se eliminaron por evaporación al vacío y el residuo se trató poco a poco con enfriamiento en TFA (4 mL). La solución resultante se agitó a temperatura ambiente durante 70 minutos y el TFA se eliminó por evaporación. El residuo se trató con EtOAc (30 mL) y NaHCO_{3} saturado (30 mL), haciendo que se formase un sólido incoloro en la fase de EtOAc. Esta mezcla de sólido/EtOAc se lavó con agua (2x10 mL) y se filtró para eliminar el sólido. El sólido se secó para dar el compuesto del título como un sólido incoloro (77 mg, 76%). MS de alta resolución: calculado para C_{38}H_{45}N_{3}O_{6}: 640,3387, Encontrado: 640,3384.
Parte G
Preparación del Conjugado entre el ácido 2-[6-[(4,6-Difenil-2-piridinil)oxi]hexil]-6-(8-amino-5-aza-4-oxooctiloxi)bencenpropanoico y el ácido bencensulfónico, 2-[[[5-[[(2,5-Dioxo-1-pirrolidinil)oxi]carbonil]-2-piridinil]hidrazono]metil]
Se agitó a temperatura ambiente una mezcla del ácido 2-[6-[(4,6-difenil-2-piridinil)oxi]hexil]-6-(8-amino-5-aza-4-oxooctiloxi)bencenpropanoico (55 mg, 0,086 mmol), ácido bencenesulfonico, 2-[[[5-[[(2,5-dioxo-1-pirrolidinil)oxi]carbonil]-2-piridinil]hidrazono]metil] (45,4 mg, 0,103 mmol), y TEA (56 ul, 0,344 mmol) en DMF (0,6 mL) durante 17 horas. La mezcla de reacción se purificó directamente por HPLC preparativo en una columna C-18 Vydac (
\hbox{21,2x25 cm}
) utilizando un gradiente de 1,33%/min de un 40 a un 80% de ACN que contenía NH_{4}OH 0,05 M a una velocidad de flujo de 15 mL/min. La liofilización del producto que contenía la fracción dió el compuesto del título como un sólido incoloro (50 mg, 61,7%). MS de alta resolución: calculado para C_{51}H_{54}N_{6}O_{10}S: 943,3700, Encontrado: 943,3701. Ejemplo 15 Síntesis del conjugado entre el ácido 6-(11-Amino-3,6,9-trioxaundeciloxi)-2- [5-[(5-oxo-1-(2-propenil)-5,6,7,8-tetrahidro-2-naftalenil)oxi]pentiloxi]bencenpropanoico y ácido Bencensulfonico, 2-[[[5-[[(2,5-Dioxo-1-pirrolidinil)oxi]carbonil]-2-piridinil]hidrazono]metil]
52
Parte A
Preparación del 11-Benciloxicarbonilamino-3,6,9-trioxaundecanol
Se trató una solución de 11-amino-3,6,9-trioxaundecanol (6,56 g, 0,034 mol) y TEA (5,2 mL, 0,037 mol) en DCM (200 mL) con cloroformato de bencil (5,1 mL, 0,036 mol) en una porción. Después de 18 horas, la solución se concentró a un aceite viscoso y se trituró con éter (3x100 mL). Los triturados combinados se concentraron para dar un aceite ámbar (9,4 g). La cromatografía flash en sílica gel)6% MEOH/EtOAc) dió el compuesto del título (7,0 g, 63%). ^{1}H RMN (CDCl_{3}): 7,36-7,25 (m, 5H), 6,04 (bs, 1H), 5,08 (s, 2H), 3,72-3,48 (m, 14H), 3,41-3,31 (m, 2H).
Parte B
Preparación del mesilato de 11-Benciloxicarbonilamino-3,6,9-trioxaundecilo
Se agitó una solución de 11-benciloxicarbonilamino-3,6,9-trioxaundecanol (2,10 g, 6,4 mmol), TEA (2,7 mL, 
\hbox{19,2 mmol}
) y cloruro de metansulfonilo (0,8 mL, 10,2 mmol) en DCM (20 mL). Después de 2 h la solución se diluyó con DCM (80 mL). Se lavó sucesivamente con HCl 0,2M (40 mL), agua (40 mL), NaHCO_{3} sat. (40 mL), y NaCl saturado (2x40 mL) y se secó (MgSO_{4}). La concentración dió el compuesto del título como un aceite viscoso (2,3 g, 88,6%). ^{1}H RMN (CDCl_{3}): 7,37-7,23 (m, 5H), 5,34 (bs, 1H), 5,08 (s, 2H), 4,35-4,26 (m, 2H), 3,72-3,50 (m, 12H), 3.41-332 (m, 2H), 3,02 (s, 3H); MS: m/e 406,2 [M+H].
Parte C
Preparación de la N-Benciloxicarbonil-11-iodo-3,6,9-trioxaundecilamina
Se calentó una mezcla del mesilato de 11-benciloxicarbonilamino-3,6,9-trioxaundecil (3,0 g, 7,4 mmol) y NaI (2,2 g, 14,8 mmol) en ACN (45 mL) a 80ºC con agitación durante 3 horas. La mezcla se extrajo con éter (140 mL) y agua (80 mL). La fase acuosa se extrajo con más éter (2x100 mL). Los extractos de éter combinados se lavaron sucesivamente con agua (60 mL), tiosulfato de sodio al 10% (60 mL) y NaCl saturado (2x60 mL). La solución de éter se secó (MgSO_{4}) y se concentró para dar el compuesto del título como un aceite incoloro (3,20 g, 98,9)%. ^{1}H RMN (CDCl_{3}): 7,39-7,26 (m, 5H), 5,35 (bs, 1H), 5,08 (s, 2H), 3,73-3,50 (m, 12H), 3,42-3,32 (m, 2H), 3,27-3,16 (m, 2H); MS: m/e 438,1 [M+H].
Parte D
Preparación del éster metílico del ácido 6-[(5-Hidroxipentil)oxi]-2- (11-benciloxicarbonilamino-3,6,9-trioxaundeciloxi)bencenpropanoico
53
Se agitó a temperatura ambiente una mezcla de éster metílico del ácido 2-hidroxi-6-[(5-hidroxipentil)oxi]bencenpropanoico (1,39 g, 4,93 mmol), N-benciloxicarbonil-11-iodo-3,6,9-trioxaundecilamina (1,96 g, 4,48 mmol), y K_{2}CO_{3} (1,24 mg, 8,96 mmol) en DMSO (6 mL) bajo nitrógeno durante 6 días. La mezcla de reacción se utilizó directamente para la purificación en una columna C-18 Vydac (212x25 cm) utilizando un gradiente de 1,5%/minuto de un 30 a un 80% de ACN a una velocidad de flujo de 15 mL/min. Las fracciones de producto de las nueve inyecciones se recogieron juntas y se liofilizaron para dar el compuesto del título como un aceite incoloro (626 mg, 23,6%). ^{1}H RMN (CDCl_{3}): 7,34-7,25 (m, 5H), 7,07 (t, J = 8,3 Hz, 1H), 6,48 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,46 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 5,4 (s, 1H), 5,08 (s, 2H), 4,07-3,35 (m, 23H), 2,98 (t, J = 8,1 Hz, 2H), 2,48 (t, J = 8,1 Hz, 2H), 1,83-1,61 (m, 8H); MS: m/e 592,3 [M+H].
Parte E
Preparación del éster metílico del ácido 6-(11-benciloxicarbonilamino-3,6,9-trioxaundeciloxi)-2-[[5-(metilsulfonil)oxi]pentil]oxi]bencenpropanoico
Se agitó a temperatura ambiente una solución del éster metílico del ácido 6-[(5-hidroxipentil)oxi]-2-(11-benciloxicarbonilamino-3,6,9-trioxaundeciloxi) bencenpropanoico (75 mg, 0,13 mmol), TEA (51 mg, 0,51 mmol), y cloruro de metansulfonilo (29 mg, 0,25 mmol) en DCM (10 mL) durante 1 hora. La solución se diluyó con DCM (6 mL) y se lavó sucesivamente con agua (3 mL), HCl pH 2.0 (3 mL), NaHCO_{3} sat. (3 mL), y NaCl saturado (2x3 mL). La solución de DCM se secó (MgSO_{4}), y se concentró para dar el producto como un aceite viscoso (67 mg, 79%). MS: m/e 670,3 [H+H].
Parte F
Preparación of 6-(11-Benciloxicarbonilamino-3,6,9-trioxaundeciloxi)-2- [5-[(5-oxo-1-(2-propenil)-5,6,7,8-tetrahydro-2-naftalenil)oxi]pentiloxi]bencenpropanoico Acid Metil Ester
54
Se agitó a temperatura ambiente una mezcla del mesilado preparado en la Parte C (67 mg, 0,10 mmol), 6-hidroxi-5-(2-propenil)-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-ona (22,5 mg, 0,11 mmol), y K_{2}CO_{3}anhidro(27 mg, 0,20 mmol) en DMSO (500 ul) bajo nitrógeno durante 96 horas. La solución de la reacción se utilizó directamente para su purificación por HPLC preparativo en una columna C-18 Vydac (21,2x25 cm) utilizando un gradiente de 1,8%/min de un 27 a un 81% de ACN a una velocidad de flujo de 15 mL/min. La liofilización de la fracción de producto dió el compuesto del título como un aceite viscoso (38 mg, 49%). ^{1}H RMN (CDCl_{3}): 7,99 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 740-7,20 (m, 5H), 7,08 (t, J = 8,3 Hz, 1H), 6,83 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 6,49 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,46 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 5,94-5,79 (m, 1H), 5,35 (s, 1H), 5,08 (s, 2H), 4,97-4,87 (m, 2H), 4,07-3,94 (m, 6H), 3,80-3,38 (m, 18H), 2,98-2,85 (m, 4H), 2,59-2,48 (m, 4H), 2,08-1,65 (m, 8H); ^{13}C RMN (CDCl_{3}): 197,74, 174,06,160,64, 157,62, 157,44, 156,40, 144,39, 136,61, 135,50, 128,43, 128,05, 128,00, 127,800, 127,16, 126,30, 125,19, 117,34, 114,72, 109,14, 104,59, 70,86, 70,63, 70,49, 70,24, 69,96, 69,73, 68,00, 67,91, 66,57, 51,31, 40,86, 38,43, 33,32, 29,86, 28,98, 28,86, 26,31, 22,87, 22,73, 18,84; DCI-MS: m/e 793,6 [M+NH_{4}]; MS de alta resolución: Calculado para C_{44}H_{58}N_{1}O_{11} [M+H]: 776,4010, Encontrado 776,4011.
Parte G
Preparación del ácido 6-(11-Benciloxicarbonilamino-3,6,9-trioxaundeciloxi)-2-[5-[(5-oxo-1-(2-propenil)-5,6,7,8-tetrahidro-2-naftalenil)oxi]pentiloxi]bencenpropanoico
55
Se trató el éster preparado en la parte C (28,5 mg, 0,037 mmol) con THF (1,8 mL) y LiOH 3N acuoso (0,18 mL). La mezcla se agitó a temperatura ambiente bajo nitrógeno durante 6 días. La solución amarilla resultante se concentró a sequedad, se trató el residuo con agua (4 mL) y se ajustó el pH a 2 con HCl 1N. La solución turbia se extrajo con EtOAc (3x8 mL). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con agua (20 mL), y luego con NaCl saturado (15 mL), se secó (MgSO_{4}) y se concentró para dar el compuesto del título como un aceite incoloro (27,0 mg, 95,7%).
DCI-MS: m/e 779,5 [M+NH_{4}]; MS de alta resolución: Calculado para C_{43}H_{55}NO_{11} [M+H]: 762,3853, Encontrado: 762,3859.
\newpage
Parte H
Preparación del ácido 6-(11-Amino-3,6,9-trioxaundeciloxi)-2-[5-[(5-oxo-1-(2-propenil)-5,6,7,8-tetrahidro-2-nafthalenil)oxi]pentiloxi]bencenpropanoico
Se agitó a temperatura ambiente una solución de ácido 6-(11-benciloxicarbonilamino-3,6,9-trioxaundeciloxi)-2-[5-[(5-oxo-1-(2-propenil)-5,6,7,8-tetrahidro-2-nafthalenil)oxi]pentiloxi]bencenpropanoico (22 mg, 0,0289 mmol) y TMSI (58 ul, 0,0458 mmol) en ACN (1 mL) durante 30 minutos. El análisis por HPLC indicó que aproximadamente quedaba un 50% del material de partida y se añadió más TMSI (58 ul). Después de 30 minutos adicionales la solución se concentró y el residuo se extrajo con un 5% de NAHCO_{3} (10 mL) y EtOAc (10 mL). La fase orgánica se extrajo con más EtOAc (2x5 mL). Los extractos de EtOAc combinados se lavaron con tiosulfato de sodio al 10% (5 mL), se secó (MgSO_{4}) y se concentró para dar el compuesto del título como un aceite amarillo pálido (9,8 mg, 54%). MS: m/e 628,4 [H+H].
Parte I
Preparación del conjugado entre el ácido 6-(11-Amino-3,6,9-trioxaundeciloxi)-2-[5-[(5-oxo-1-(2-propenil)-5,6,7,8-tetrahidro-2-naftalenil)oxi]pentiloxi]bencenpropanoico y el ácido Bencenesulfónico, 2-[[[5-[[(2,5-Dioxo-1-pirrolidinil)oxi]carbonil]-2-piridinil]hidrazono]metil]
Se agitó a temperatura ambiente una solución de 6-(11-amino-3,6,9-trioxaundeciloxi)-2-[5-[(5-oxo-1-(2-propenil)-5,6,7,8-tetrahidro-2-naftalenil)oxi]pentiloxi]bencenpropanoico (7 mg, 0,0111 mmol), ácido bencensulfónico, 2-[[[5-[[(2,5-dioxo-1-pirrolidinil)oxi]carbonil]-2-piridinil]hidrazono]metil] (5,6 mg, 0,0134 mmol),y TEA (6,2 ul, 
\hbox{0,0444 mmol}
) en DMF (0,3 mL) durante 16 h. La mezcla de reacción se purificó directamente por HPLC preparativo en una columna C-18 Vydac (21,2 x 25 cm) utilizando un gradiente de 2,0%/min de un 20 a un 80% de ACN que contenía NH_{4}OH 0,05 M a una velocidad de flujo de 15 mL/min. La liofilización del producto que contenía la fracción dió el compuesto del título como un sólido incoloro. MS: m/e 931,4 [H+H]. Ejemplo 16 Síntesis del 4-etil-2-(4-fluorofenil)-[5-[6,6-dimetil-7-[[6- [[[fenilmetilene]hidrazino]-3-piridinil]carbonil]amino]heptil]oxi]fenol
56
Paso A
Preparación del 2-[[[5-[[(2,5-dioxo-1-pirolidinil)oxi] carbonil]-2-piridinil]hidrazono]metil]-benceno
57
Éste se preparó de una manera idéntica al Ejemplo 1, Parte G, substituyendo el benzaldehido por el ácido 2-formilbencensulfónico. Se obtuvo un sólido transparente de 2-[[[5-[[(2,5-dioxo-1-pirolidinil)oxi]carbonil]-2-piridinil]hidrazono]metil]-benceno por simple evaporación rotatoria sin trituración.
RMN (DMSO-d_{6}): 2,88, s (4H); 7,36, m (3H); 7,79, d de d (1H); 8,10, m (2H); 8,79, t (1H); 9,16, s (1H); 11,90, s (1H). Espectro de Masas (EI): m/z = (M+H)
Paso B
Preparación del 4-etil-2-(4-fluorofenil)-[5-[6,6-dimetil-7-[[6- [[[fenilmetilene]hidrazinobencene]-3-piridinil] carbonil]amino]heptil]oxi]fenol
Se introdujo dimetilformamida anhidra (10 mL) a un matraz bajo nitrógeno. A esto se le añadió el 4-etil-2-(4-fluorofenil)-5-[(5,5-dimetil-6-aminohexil)oxi]fenol (Ejemplo 1, Parte C) (188 mg) y 2-[[[5-[[(2,5-dioxo-1-pirolidinil)oxi] carbonil]-2-piridinil]hidrazono]metil]-benceno (200 mg) seguido por diisopropiletilamina (231 mg) y 4-dimetilaminopiridina (15 mg). La solución se agitó durante 18 horas y se concentró luego a presión reducida. El aceite residual se extrajo en agua/acetato de etilo. El acetato de etilo se concentró y el crudo resultante se purificó por HPLC preparativo (columna farmacéutica Vydac, 5x25 cm; agua/acetonitrilo/0,1% ácido trifluoroacético y en gradiente) y se liofilizó para dar 98 mg del producto. RMN (CDCl_{3}): 0,96, s (6 H); 1,15, t (3H); 1,37, m (2H); 1,53, m (2H); 1,80, m (2H); 2,53, q (2H); 3,31, d (2H); 4,00, t (2H); 6,50, s (1H); 6,92, s (1H); 7,06, t (2H); 7,38, m (5H); 7,71, m (31H); 8,21, m (3H); 13,81, b (1H). LRMS (EI): m/z = 583,3 (M+H); HRMS(FAB): Calculado para C_{35}H_{40}N_{4}O_{3}F-583,3084; Encontrado 583,3070
Ejemplo 17 Síntesis de la N-((6-((1-aza-2-fenilvinil) amino)(3-piridil))sulfonil)-3-(1- ((N-(2-feniletil)carbamoil)metil)-5-(fenil-metoxi)indol-3-il)prop-2-enamida
58
Paso A
Preparación del 2-[[[5-[[(2,5-dioxo-1-pirolidinil)oxi]carbonil]-2-piridinil] hidrazono]metil]-bencenesulfonato de sodio
59
Se combinaron la 2-Hidrazino-5-sulfamoilpiridina (0,2 g, 1,06 mmol), benzaldehido (170 mg, 1,6 mmol), y DMF (3 mL) y se agitaron durante toda la noche. La solución se concentró a un sólido amarillo, que se trituró con acetato de etilo, se filtró, y se secó al vacío para dar 240 mg (82%) del producto como un sólido amarillo. RMN (DMSO-d_{6}): 7,40, m (6H); 7,75, d (2H); 8,02, dd (1H); 8,16, s (1H); 8,47, d (1H); 11,85, b (intercambio). Espectro de Masas (EI) m/z = 277,1 (M+H).
Paso B
Preparación de la N-((6-((1-aza-2-fenilvinil)amino)(3-piridil))sulfonil)-3-(1-((N-(2-feniletil)carbamoil)metil)-5-(fenilmetoxi)indol-3-il)prop-2-enamida
Se añadieron la N-Metil-N-fenetil-2-[5-benciloxi-3-(2-carboxivinil)indol-1-il]acetamida (70 mg, 0,15 mmol), 2-[[[5-[[(2,5-dioxo-1-pirolidinil)oxi]carbonil]-2-piridinil] hidrazono]metil]-bencensulfonato de sodio (43 mg, 0,155 mmol), etildimetilaminopropil carbodiimida (EDC) (30,7 mg, 0,16 mmol) y 4-dimetilaminopiridina (25 mg, 0,021mmol) a DMF seca (3 mL) en un matraz seco bajo nitrógeno con agitación. Se añadió más EDC (31 mg, 0,16 mmol) después de 24 horas. Después de 16 horas más de agitación, se añadió agua (15 mL), y la mezcla se lavó con HCl 0,1 N, NaHCO_{3} saturado y sal. La solución se secó (MgSO_{4}), se filtró y se concentró a un aceite amarillo, que se purificó por cromatografía flash (acetato de etilo/hexano) para dar 21 mg de producto. RMN(CDCl_{3} + D_{2}O): 2,88, m (2H); 2,94, d (3H); 3,58, m (2H); 4,27, s, (1H); 4,82, d (2H); 4,86, d (2H); 6,01, dd (1H); 6,67, dd (1H); 6,91, s (1H); 6,94, s (1H); 7,17, m (5H); 7,34, m (10H); 7,63, m (3H); 7,78, s (1H); 8,23, d (1H); 8,74, s, (1H). HRMS (FAB): Calculado para C_{41}H_{39}N_{6}O_{5}S-727,270266; Encontrado-727,271253.
Ejemplo 18 Síntesis del (2-sulfonato-(2-aza-2-((5-carbamoil(2-piridil)amino)vinil)bencene) etil 3-((7-(3-(6-etil-4-(4-fluorofenil)-3-hidroxifenoxi)propoxi)-8-propilcroman-2-il)carbonilamino)propanoato
60
Paso A
Preparación del 2-[N-(t-butoxicarbonil)etil]3-carbobenciloxiaminopropionato
Se disolvieron la N-(t-butoxicarbonil)-2-hidroxietilamina (2,2 g, 13,7 mmol), N-benciloxicarbonil-\beta-alanina (3,05 g, 13,7 mmol), y 4-dimetilaminopiridina (0,84 g, 6,85 mmol) en DMF anhidra(45 mL) bajo nitrógeno y se enfrió a-5ºC. Se añadió la etil dimetilaminopropil carbodiimida (2,9 g, 15,1 mmol) y la reacción se dejó calentar a temperatura ambiente. Se agitó durante 18 horas, y se diluyó con agua (300 mL). La mezcla se extrajo con acetato de etilo y los orgánicos combinados se lavaron con ácido cítrico al 10%, sal, se secó (MgSO_{4}), se filtró, y se concentró al vacío. El aceite resultante se purificó por cromatografía flash (hexano/acetato de etilo) para dar 3,7 g (74%) del producto como un aceite transparente. RMN (CDCl_{3}): 1,42, s (9H); 2,54, t (2H); 3,35, m (2H); 3,46, m (2H); 4,12, t (2H); 4,85, b (1H); 5,08, s (2H); 5,40, b (1H); 7,33, s (5H). Espectro de masas (EI): m/z = 384,3 (M+NH_{4}).
Paso B
Preparación de la sal de acetato de 2-[N-t-butoxicarbonilaminoetil]-3-aminopropionato
Se disolvió en etanol (50 mL) el 2-[N-(t-butoxicarbonil)etil]3-carbobenciloxiaminopropionato (3,7 g, 10,1 mmol) con un equivalente de ácido acético y paladio sobre carbono al 10% (500 mg). Se burbujeó hidrógeno gas en la mezcla durante cuatro horas, se filtró la mezcla en Celite, se lavó con etanol y se concentró a presión reducida. El aceite se mezcló en tolueno (50 mL) y se reconcentró para dar 2,4 g de un aceite transparente.
RMN (CDCl_{3}): 1,42, s (9H); 1,95, s (3H); 2,63, t (2H); 3,09, t (2H); 3,37, m (2H); 4,14, dd (2H); 5,38, b (1H); 6,32, s (3H). Espectro de Masas (EI): m/z = 233.0 (M+H).
Paso C
Preparación del 2-((tert-butoxi)carbonilamino)etil-3-((7-(3-(2-etil-4- (4-fluorofenil)-5-(fenilmetoxi)fenoxi)propoxi)-8-propilcroman-2-il)carbonilamino)propanoato
61
Se añadieron el ácido 7-(3-(2-etil-4-(4-flurofenil)-5- (fenilmetoxi)fenoxi)propoxi)-8-propilcroman-2-carboxílico (200 mg, 0,33 mmol), la sal de acetato del 2-[N-t-butoxicarbonilaminoetil]-3-aminopropionato (122 mg, 0,42 mmol), hidroxibenzotriazol (76,6 mg, 0,50 mmol), HBTU (190 mg, 0,50 mmol), y diisopropiletilamina (132 mmol, 233 \muL) a DMF anhidra (1,7 mL) y se agitó bajo nitrógeno durante 24 horas. Se añdieron un 50% más de HOBT, HBTU y diisopropiletilamina y la reacción se agitó durante otras 24 horas. Se añadió agua a la mezcla (7 mL) y se extrajo con acetato de etilo, Los combinados orgánicos se lavaron con HCl 0,1 N, bicarbonato, y sal, se secó sobre MgSO_{4}, se filtró y se concentró al vacío. El aceite resultante se purificó por cromatografía flash (hexano/acetato de etilo) para dar 120 mg de producto. Espectro de Masas (EI) m/z = 830,6 (M+NH_{4}).
Paso D
Preparación del 2-((tert-butoxi)carbonilamino)etil-3-((7-(3-(6-etil-4- (4-fluorofenil)-3-hidroxifenoxi)propoxi)-8-propilcroman-2-il)carbonilamino)propanoato
62
Se disolvió en metanol/cloroformo (2:1, 5 mL) el 2-((tert-butoxi)carbonilamino)etil-3-((7-(3-(2-etil-4-(4-fluorofenil)-5- (fenilmetoxi)fenoxi)propoxi)-8-propilcroman-2-il)carbonilamino)propanoato (110 mg) con Pd/C al 10% (24 mg) y se burbujeó hidrógeno gas durante 2 horas. La mezcla se filtró a través de Celite®, se lavó con metanol, y se concentró al vacío para dar 80 mg de 2-((tert-butoxi)carbonilamino)etil-3-((7-(3-(6-etil-4- (4-fluorofenil)-3-hidroxifenoxi)propoxi)-8-propilcroman-2-il)carbonilamino)propanoato. Espectro de Masas (EI): 723,5 (M+H).
Paso E
Preparación del 2-aminoetil-3-((7-(3-(6-etil-4-(4-fluorofenil)-3-hidroxifenoxi)propoxi)-8-propilcroman-2-il)carbonilamino)propanoato
Se añadió el 2-((tert-butoxi)carbonilamino)etil-3-((7-(3-(6-etil-4-(4-fluorofenil)-3-hidroxifenoxi)propoxi)-8-propilcroman-2-il)carbonilamino)propanoato (55,4 mg, 0,07 mmol) a diclorometano (4 mL), seguido por anisol (30 mg, 0,28 mmol) y ácido trifluoroacético (4 mL). La solución se agitó durante 2 horas, se concentró a presión reducida, y se purificó en una corta columna de sílica (cloroformo/metanol) para dar 48 mg de producto. RMN (CDCl_{3}): 0,90, t (3H); 1,14, t (3H), 1,50, m (2H); 1,62, m (2H); 1,87, m (2H); 2,27, m(3H); 2,54, q (2H); 2,58, m (4H); 3,42, b (2H); 4,14, m (6H); 4,44, b (1H); 6,47, d (1H); 6,57, s (1H); 6,80, m (2H); 6,95, s (1H); 7,10, dd (2H); 7,40, dd (2H); 8,81, b (3H). Espectro de Masas (EI): m/z = 623,4 (M+H).
Paso F
Preparación del 3-((7-(3-(6-etil-4-(4-fluorofenil)-3-hidroxifenoxi)propoxi)-8-propilcroman-2-il)carbonilamino)propanoato de propilo, ácido 2-(2-aza-2-((5-carbamoil(2-piridil)amino)vinil)bencensulfónico
Se añadieron el 2-aminoetil-3-((7-(3-(6-etil-4-(4-fluorofenil)-3-hidroxifenoxi)propoxi)-8-propilcroman-2-il)carbonilamino)propanoato (43 mg, 0,072 mmol), 2-[[[5-[[(2,5-dioxo-1-pirolidinil)oxi]carbonil]-2-piridinil] hidrazono]metil]-bencenesulfonato de sodio (32 mg, 0,08 mmol), y diisopropiletilamina (23,4 mg, 0,18 mmol) a DMF anhidra (0,3 mL) y se agitó durante 18 horas. La solución se diluyó con agua y acetonitrilo y se purificó por inyección directa en una Vydac C18 utilizando acetonitrilo/agua/0,01% de ácido trifluoroacético en gradiente. Las fracciones recogidas se liofilizaron para dar 20 mg del producto. RMN (DMSO-d_{6}): 0,82, t (3H); 1,14, t (3H), 1,42, m (2H); 1,80, m (1H); 2,18, m (3H); 2,50, m (6H); 3,42, t (2H); 4,09, m (6H); 4,42, d (1H); 6,51, d (1H); 6,55, s (1H); 6,80, d (1H); 6,98, s (1H); 7,16, m (4H); 7,41, t (2H); 7,51, dd (2H); 7,72, t (1H); 7,79 d (1H); 8,21, b (2H); 8,50, s (1H); 8,72, b (1H); 9,35, d (2H). LRMS (EI): m/z = 926,5 (M+H). HRMS (FAB): Calculado para C_{48}H_{53}N_{5}O_{11}FS: 926,344633; Encontrado: 926,346995.
Ejemplo 19 Síntesis del 3-((7-(-(6-etil-4-(4-fluorofenil)-3-hidroxifenoxi)propoxi)-8-propilcroman-2-il)carbonilamino)propil-2-metilpropanoato, ácido 2-(2-aza-2((5-carbamoil(2-piridil)amino)vinil)bencenesulfonico
63 
\newpage
Paso A
Preparación del 3-(N-tert-butoxicarbonilaminopropil)-2-(N-carbobenzioxiamino)propionato
Se siguió el procedimiento utilizado en el Ejemplo 18, Parte A, utilizando N-carbobenciloxialanina y 3-(N-tert-butoxicarbonil)-aminopropanol para dar 1,8 g del 3-(N-tert-butoxicarbonilaminopropil)-2-(N-carbobenzioxiamino)propionato después de cromatografía flash (Acetato de etilo/hexano). RMN (CDCl_{3}): 1,40, d (3H); 1,43, s (9H); 1,80, t (2H); 3,15, m (2H); 4,14, t (2H); 4,35, m (1H); 4,68, b (1H); 5,09, s (2H); 5,38, b (1H); 7,33, s (5H). Espectro de Masas (EI): m/z = 381,2 (M+H).
Paso B
Preparación del trifluoroacetato del 3-aminopropil-2-(N-carbobenciloxi) aminopropionato
64
Se disolvió en diclorometano (10 mL) el 3-(N-tert-butoxicarbonilaminopropil)-2- (N-carbobenzioxiamino)propionato (510 mg) y se añadió ácido trifluoroacético (10 mL). La solución se agitó durante 2,5 horas y se concentró a presión reducida a un aceite transparente. RMN (CDCl_{3}): 1,37, d (3H); 2,04, m (2H); 3,12, m (2H); 4,24, m (3H); 5,06, dd (2H); 5,44, b (1H); 7,32, m (5H); 12,67, s (3H). Espectro de Masas (EI): m/z = 281,0 (M+H).
Paso C
Preparación del 3-((7-(3-(2-etil-4-(4-fluorofenil)-5- (fenilmetiloxi)fenoxi)propoxi)-8-propilcroman-2-il)carbonilamino)propil 2- ((fenilmetoxi)carbonilamino)propanoato
65
Esto se llevó a cabo de manera idéntica a la del Ejemplo 18, Parte C, utilizando 3-aminopropil-2-(N-carbobenciloxi)aminopropionato, para dar 125 mg de producto. Espectro de Masas (EI) m/z = 861,5 (M+H).
Paso D
Preparación del 3-((7-(3-(6-etil-4-(4-fluorofenil)-3-hidroxifenoxi)propoxi)-8-propilcroman-2-il)carbonilamino)propil 2-aminopropanoato
Se disolvió el 3-((7-(3-(2-etil-4-(4-fluorofenil)-5- (fenilmetiloxi)fenoxi)propoxi)-8-propilcroman-2-il)carbonilamino)propil 2- ((fenilmetoxi)carbonilamino)propanoato (125 mg) en metanol/cloroformo (2:1, 7 mL) con 50 mg de catalizador de Pd/C. Se burbujeó hidrógeno gas durante 3 horas, momento en que se filtró la mezcla a través de Celite® y se concentró para dar 88 mg de producto como una espuma blanca crunchy. Espectro de Masas (EI) m/z = 637,5 (M+H).
Paso E
Preparación del 3-((7-(-(6-etil-4-(4-fluorofenil)-3-hidroxifenoxi)propoxi)-8-propilcroman-2-il)carbonilamino)propil-2-metilpropanoato, ácido 2-(2-aza-2((5-carbamoil(2-piridil)amino)vinil)bencensulfónico
Este procedimiento se llevó a cabo con 3-((7-(3-(6-etil-4-(4-fluorofenil)-3-hidroxifenoxi)propoxi)-8-propilcroman-2-il)carbonilamino)propil 2-aminopropanoato como en el Ejemplo 18, Parte F, para dar 41 mg después de la liofilización. RMN (DMSO-d_{6}): 0,82, t (3H); 1,07, t (3H), 1,42, m (5H); 1,76, m (3H); 2,18, m (3H); 2,70, m (6H); 3,25, m (2H); 4,09, m (6H); 4,43, m (2H); 6,53, d (1H); 6,55, s (1H); 6,82, d (1H); 6,99, s (1H); 7,16, m (3H); 7,51, m (4H); 7,78, t (1H); 7,80 d (1H); 8,21, b (2H); 8,31, b (1H); 8,53, s (1H); 9,05, b (1H); 9,35, d (2H). Espectro de Masas (EI): m/z = 940,4 (M+H).
Ejemplo 20 Síntesis de la N-(3-((7-(3-(6-etil-4-(4-fluorofenil)-3-hidroxifenoxi)propoxi)-8-propilcroman-2-il)carbonilamino)propil)-2-metilpropanamida, ácido 2-(2-aza-2- ((5-carbamoil(2-piridil))amino)vinil)bencensulfónico
66
Paso A
Preparación de la N-(3-((tert-butoxi)carbonilamino)propil)-2- ((fenilmetoxi)carbonilamino)-2-metilpropanamida
67
Se añadieron N-carbobenciloxialanina (1,3 g, 5,7 mmol), 3-(N-tertbutoxicarbonilamino)-1,3-propanediamina (1 g, 5,7 mmol), hidroxibenzotriazol (0,88 g, 5,8 mmol), HBTU (2,4 g, 0,63 mmol), y diisopropiletilamina (1,48 g, 11,5 mmol) a DMF anhidra (25 mL) bajo nitrógeno y se agitó 16 horas, momento en que la reacción se vertió en agua (
\hbox{100 mL}
) y se extrajo con acetato de etilo. Los combinados orgánicos se lavaron con HCl 0,1 N y bicarbonato saturado, y se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró, y se concentró a presión reducida. La mezcla de reacción no se purificó posteriormente pero se utilizó directamente en el siguiente paso. Espectro de Masas (EI): m/z = 380,3 (M+H).
Paso B
Preparación de la sal de trifluoroacetato de la N-(3-aminopropil)-2- ((fenilmetoxi)carbonilamino)-2-metilpropanamida
Este procedimiento se llevó a cabo como en el Ejemplo 19, Parte B, utilizando N- (3-((tert-butoxi)carbonilamino)propil)-2-((fenilmetoxi)carbonilamino)-2-metilpropanamida (2 g) para dar 1.4 g de la sal de trifluoroacetato de la N-(3-aminopropil)-2-((fenilmetoxi)carbonilamino)-2-metilpropanamida. Espectro de Masas (EI): m/z = 280,1 (M+H).
Paso C
Preparación de la N-(3-((7-(3-(2-etil-4-(4-fluorofenil)-5- (fenilmetoxi)fenoxi)propoxi)-8-propilcroman-2-il)carbonilamino)propil)-2- ((fenilmetoxi)carbonilamino)-2-metilpropanamida
68
Este procedimiento se llevó a cabo como en el Ejemplo 18, Parte C, utilizando la sal de trifluoroacetato de la N-(3-aminopropil)-2-((fenilmetoxi)carbonilamino)-2-metilpropanamida (82 mg, 0,3 mmol) para dar 165 mg del producto, que no se purificó pero se utilizó directamente más adelante. Espectro de Masas (EI): m/z = 860,5 (M+H).
Paso D
Preparación de la 2-amino-N-(3-((7-(3-(6-etil-4-(4-fluorofenil)-3-hidroxifenoxi)propoxi)-8-propilcroman-2-il)carbonilamino)propil)-2-metilpropanamida
Este paso se llevó a cabo como en el Ejemplo 19, Parte D, utilizando la N-(3- ((7-(3-(2-etil-4-(4-fluorofenil)-5-(fenilmetoxi)fenoxi)propoxi)-8-propilcroman-2-il)carbonilamino)propil)-2-((fenilmetoxi)carbonilamino)-2-metilpropanamida (160 mg) para dar 100 mg de producto, que no se purificó pero se utilizó más adelante directamente. Espectro de Masas (EI): m/z = 636.3 (M+H).
Paso E
Preparación de la N-(3-((7-(3-(6-etil-4-(4-fluorofenil)-3-hidroxifenoxi)propoxi)-8-propilcroman-2-il)carbonilamino)propil)-2-metilpropanamida, ácido 2-(2-aza-2-((5-carbamoil(2-piridil))amino)vinil)bencensulfónico
Este procedimiento se llevó a cabo como en el Ejemplo 18, Parte F, utilizando 2-amino-N-(3-((7-(3-(6-etil-4-(4-fluorofenil)-3-hidroxifenoxi)propoxi)-8-propilcroman-2-il)carbonilamino)propil)-2-metilpropanamida (100 mg) para dar 74 mg del producto después de la liofilización. RMN (DMSO-d_{6}): 0,81, t (3H); 1,07, t (3H), 1,33, d (2H); 1,42, m (2H); 1,55, t (2H); 1,80, m (1H); 2,18, m (3H); 2,70, m (6H); 3,09, m (3H); 4,09, m (4H); 4,40, m (2H); 6,53, d (1H); 6,54, s (1H); 6,83, d (1H); 6,99, s (1H); 7,16, m (3H); 7,51, m (4H); 7,80 m (2H); 8,04, t (1H); 8,25, d (1H); 8,40, b (1H); 8,54, s (1H); 9,35, b (2H). Espectro de Masas (EI): m/z = 956,4 (M+NH_{4}).
Ejemplo 21 Síntesis del ácido 2-(2-aza-2-((5-(N-(6-(6-etil-3-hidroxi-4-(1-metilpirazol-5-il)fenoxi)-2,2-dimetilhexil)carbamoil)(2-piridil))amino)vinil)bencensulfónico
69
Paso A
Preparación del 4-Etil-2-(1-metil-1H-pirazol-3-il)-5-[[5,5-dimetil-6-aminohexil]oxi]fenol y 4-Etil-2-(1-metil-1H-pirazol-5-il)-5-[[5,5-dimetil-6-aminohexil]oxi]fenol
70
Se añadió una mezcla de 4-etil-2(1-metil-1H-pirazol-5-il)-5-[[5-metil-5-cianohexil]oxi]fenol y 4-etil-2(1-metil-1H-pirazol-3-il)-5-[[5-metil-5-cianohexil]oxi]fenol (350 mg, 1,05 mmol) a metanol (20 mL) que contenía óxido de platino (120 mg, 0,53 mmol) en una botella Parr. Se añadieron luego 4 equivalentes de ácido clorhídrico concentrado y la mezcla se hidrogenó a 55 psi durante 18 horas. La mezcla se filtró sobre Celite®, se lavó con metanol y se concentró a presión reducida para dar 318 mg de un sólido balnco-grisáceo. El análisis por HPLC mostró dos picos, en una proporción de 4:1, consistente en los dos productos isoméricos. Estos no se separaron, pero se utilizaron directamente a la próxima reacción.
Paso B
Preparación del ácido 2-(2-aza-2-((5-(N-(6-(6-etil-3-hidroxi-4-(1-metilpirazol-5-il)fenoxi)-22-dimetilhexil)carbamoil)(2-piridil))amino)vinil)bencensulfónico
Se reaccionó la mezcla obtenida en el Paso A (318 mg, 0,92 mmol) de la misma manera como se describe en el Ejemplo 18, Parte F. La purificación por HPLC (acetonitrilo/agua/0,1% de ácido trifluoroacético, Vydac C18) dió dos productos limpios. El producto que eluyó primero (66 mg después de la liofilización) se identificó como el compuesto 1-metil-5-pirazolil por RMN. RMN (DMSO-d_{6}): 0,88, s (6H); 1,09, t (3H), 1,33, m (2H); 1,49, m (2H); 1,73, m (2H); 2,47, m (2H); 3,16, s (2H); 3,64, s (3H); 3,95, t (2H); 6,14, s (1H); 6,53, s (1H); 6,89, s (1H); 7,19, d (1H); 7,38, s (1H); 7,46, m (2H); 7,80 d (1H); 8,30, d (1H); 8,39, d (1H); 8,47, s (1H); 8,53, m (1H); 9,34, s (1H); 9,65, b (1H). LRMS(EI): m/z = 647,3 (M-H). HRMS(FAB): Calculado para C_{33}H_{41}N_{6}O_{6}S-649,2808; Encontrado-649,2834.
Ejemplo 22 Síntesis del ácido 2-(2-aza-2-((5-(N-(6-(6-etil-3-hidroxi-4-(1-metilpirazol-5-il)fenoxi)-2,2-dimetilhexil)carbamoil)(2-piridil))amino)vinil)bencensulfónico
71
Se aisló el isómero del 1-metil-3-pirazolil como el segundo pico de elución del Ejemplo 21, Parte B (8 mg). RMN (DMSO-d_{6}): 0,88, s (6H); 1,09, t (3H), 1,33, m (2H); 1,49, m (2H); 1,73, m (2H); 2,47, m (2H); 3,15, bs (2H); 3,83, s (3H); 3,95, t (2H); 6,14, s (1H); 6,44, s (1H); 6,68, s (1H); 7,17, d (1H); 7,38, s (1H); 7,46, m (2H); 7,75 m (1H); 8,30, d (1H); 8,39, d (1H); 8,53, m (2H); 9,34, s (1H); 9,65, b (1H). LRMS (EI): m/z = 649,3 (M+H); HRMS(FAB): Calculado para C_{33}H_{41}N_{6}O_{6}S-649,2808; Encontrado-649,2831
Ejemplo 23 Síntesis del ácido 2-(2-aza-2-((5-((3-((6-etil-4-(4-fluorofenil)-3-hidroxifenoxi)metil)piperidil)carbonil)(2-piridil)) amino)vinil)bencensulfónico
72
Paso A
Preparación de la 2-mesiloxi-4-benciloxiacetofenona
Se disolvieron en cloroformo (200 mL) la 4-Benciloxi-2-hidroxiacetofenona (25 g, 0,1 mol) y la diisopropiletilamina (17,3 g, 0,134 mol). Se añadió lentamente cloruro de metansulfonilo (14,2 g, 0,124 mmol) y la reacción se agitó durante 24 horas. El cloroformo se vertió en agua (150 mL), se separaron las fases, y la fase orgánica se lavó con NaOH 0,1N, agua, HCl 0,1N, agua, se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y se concentró a un sólido marrón crudo. La cromatografía flash (hexano/acetato de etilo) dió 15,1 g de producto como un sólido naranja. RMN (CDCl_{3}): 2,57, s (3H); 3,23, s, (dH); 5,11, s (2H); 6,94, dd (1H); 7,01, d (1H); 7,40, m (5H); 7,77, d (1H). Espectro de Masas (GCMS): 320 (M).
Paso B
Preparación del 2-mesiloxi-4-benciloxietilbenceno
Se disuelve la 2-mesiloxi-4-benciloxiacetofenona (15 g, 47 mmol) en tetracloruro de carbono (40 mL). A esta solución agitada bajo nitrógeno se le añade ácido trifluoroacético (45 mL) y la reacción se agita durante 24 horas. Se eliminan los volátiles a presión reducida y el residuo se redisuelve en diclorometano, se lava con NaOH 0,1 N, se seca sobre sulfato de sodio, se filtra y se concentra para dar un aceite naranja que solidifica para dar 10,8 g (75%) de un sólido naranja luminoso. RMN (CDCl_{3}): 1,21, t, (3H); 2,66, q (2H); 3,14, s (3H); 5,04, s (2H); 6,88, dd (1H); 6,95, d (1H); 7,19, d (1H); 7,38, m (5H). Espectro de Masas (GCMS): 306 (M).
Paso C
Preparación del 2-mesiloxi-4-benciloxi-5-bromoetilbenceno
Se disuelve el 2-mesiloxi-4-benciloxietilbenceno (10,3 g, 33,7 mmol) en tetracloruro de carbono (25 mL) con agitación. Se añade N-bromosuccinimida (6,6 g, 37 mmol) y la reacción se agita 18 horas bajo nitrógeno. La mezcla se diluye con diclorometano (100 mL) y se lava con agua, se seca sobre sulfato de magnesio, se filtra y se concentra. Los sólidos crudos se recristalizan con hexano para dar 6 g de 2-mesiloxi-4-benciloxi-5-bromoetilbenceno como un sólido blanco-grisáceo. RMN (CDCl_{3}): 1,20, t, (3H); 2,60, q (2H); 3,09, s (3H); 5,13, s (2H); 6,93, s (1H); 7,38, m (6H). Espectro de Masas (GCMS): 384 (M).
Paso D
Preparación del 5-(4-fluorofenil)-4-benciloxi-2-mesiloxietilbenceno
73
Se mezcla el ácido 4-Fluorofenilboronico (2,18 g, 15,6 mmol) en etanol (13 mL). A esto se le añade el 2-mesiloxi-4-benciloxi-5-bromoetilbenceno disuelto en tolueno (40 mL), seguido por tetrakistrifenilfosfina de paladio (150 mg) y una solución de carbonato de sodio (0,2M, 12 mL). La mezcla se calienta a reflujo bajo nitrógeno y la temperatura se mantiene durante 24 horas. La mezcla se enfría y se diluye con acetato de etilo. La fase orgánica se separa y se lava con cloruro de amonio saturado, se seca sobre sulfato de magnesio, se filtra y se concentra a presión reducida para dar un sólido naranja luminoso, que se recristalizó con hexano para dar el 5-(4-fluorofenil)-4-benciloxi-2-mesiloxietilbenceno (2,5 g) como un sólido blanco grisáceo. RMN (DMSO-d_{6}): 1,17, t, (3H); 2,66, q (2H); 3,48, s (3H); 5,14, s (2H); 7,38, m (8H); 7,59, dd (2H); 7,83, dd (1H). Espectro de Masas (GCMS): 400 (M).
Paso E
Preparación del 5-(4-fluorofenil)-4-benciloxi-2-hidroxietilbenceno
74
Se disolvió en metanol (80 mL) el 5-(4-fluorofenil)-4-benciloxi-2-mesiloxietilbenceno (2,5 g, 6,24 mmol). A esto se le añadió hidróxido de sodio (300 mg, 7,5 mmol) disueltos en agua (20 mL). La solución se calentó a reflujo y el calentamiento se mantuvo durante 24 horas, momento en que se adicionó un equivalente más de hidróxido de sodio, y el reflujo se mantuvo durante 16 horas más. La mezcla se enfrió, se acidificó con HCl 1 N, y se extrajo con acetato de etilo. Las fases orgánicas se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron, y se concentraron a presión reducida para dar un sólido naranja que se trituró con hexano para dar 5-(4-fluorofenil)-4-benciloxi-2-hidroxietilbenceno (1,4 g) como un polvo blanco grisáceo. RMN (DMSO-d_{6}): 1,11, t, (3H); 2,50, q (2H); 3,34, s (3H); 5,02, s (2H); 6,60, d (1H); 6,98, s (1H); 7,16, t (2H); 7,35, m (5H); 7,50, dd (2H); 9,44, s (1H). Espectro de Masas (GCMS): 322 (M).
Paso F
Preparación de la 3-(metansulfoniloximetil)-N-(tertbutoxicarbonil)-piperidina
Se disolvió en dicloroetano (50 mL) la 3-Hidroximetil-N-(tert-butoxicarbonil)-piperidina (4,3 g, 20 mmol) con una Esponja de Protones® (6,08 g, 28,3 mmol). Se disolvió en dicloroetano (50 mL) anhídrido tríflico (4,94 g, 28,4 mmol) y se añadió gota a gota a esta solución. La reacción se agitó durante 3 días, se trató con HCl 1N, agua, bicarbonato, agua y sal. La solución se secó sobre sulfato de sodio, se filtró, y se concentró a presión reducida para dar la 3- (metansulfoniloximetil)-N-(tertbutoxicarbonil)-piperidina (6 g) como un aceite amarillo. RMN (CDCl_{3}): 1,39, m (1H); 1,42, s (9H); 1,65, m (2H); 1,85, m (2H); 2,77, m (1H); 2,89, t (1H); 2,99, s (3H); 3,81, m (1H); 3,92, m (1H); 4,06, m (2H). Espectro de Masas (EI): 316,10 (M+Na).
Paso G
Preparación del tert-butil 3-((2-etil-4-(4-fluorofenil)-5- (fenilmetoxi)fenoxi)metil)piperidincarboxilato
75
Se añadieron la 3-(Metansulfoniloximetil)-N-(tertbutoxicarbonil)-piperidina (143 mg, 0,9 mmol) y el 5-(4-fluorofenil)-4-benciloxi-2-hidroxietilbenceno (150 mg, 0,47 mmol) a metil etil cetona (7 mL) seguido por carbonato de potasio (113 mg, 0,82 mmol), ioduro de potasio (15,5 mg, 93 \mumol) y dimetilsulfóxido (4 mL). La mezcla se calentó a reflujo durante 40 horas, momento en que se enfrió, se diluyó con agua (50 mL) y se extrajo con acetato de etilo. Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron, y se concentraron a presión reducida a un aceite incoloro que no se purificó pero se utilizó para el siguiente paso. Espectro de Masas (EI): 537,4 (M+NH_{4}).
Paso H
Preparación del 5-(4-fluorofenil)-4-benciloxi-2-[(3-piperidinil)metoxi]etilbenceno
Se disolvió el producto del crudo del tert-butil 3-((2-etil-4-(4-fluorofenil)-5-(fenilmetoxi)fenoxi)metil)piperidincarboxilato (125 mg) en etanol (5 mL) que contenía un 10% de catalizador de Pd/C (55 mg). La mezcla se hidrogenó a la presión de un globo durante 28 horas, se filtró a través de Celite®, y se concentró a presión reducida para dar 80 mg de un aceite. Este se disolvió en diclorometano (5 mL) y se añadió ácido trifluoroacético (5 mL). La solución se agitó durante 3 horas, y se concentró a presión reducida para dar 85 mg del 5-(4-fluorofenil)-4-benciloxi-2-[(3-piperidinil)metoxi]etilbenceno como un aceite. Espectro de Masas (EI): 330,2 (M+H).
Paso I
Preparación del ácido 2-(2-aza-2-((5-((3-((6-etil-4-(4-fluorofenil)-3-hidroxifenoxi)metil)piperidil)carbonil)(2-piridil))amino)vinil)bencensulfónico
El crudo de 5-(4-fluorofenil)-4-benciloxi-2-[(3-piperidinil)metoxi]etilbenceno (60 mg, \sim70% puro) se reaccionó de acuerdo con el procedimiento del Ejemplo 18, Parte F y se purificó por HPLC preparativo (acetonitrilo/agua/0,1% ácido trifluoroacético en gradiente). Las fracciones de producto se combinaron y liofilizaron para dar 20 mg de un polvo amarillo. RMN (DMSO-d_{6}): 0,86, b (2H); 1,08, m (3H); 1,43, m (2H); 1,72, m (1H); 1,85, m (1H); 2,06, m (1H); 2,21, m (1H); 2,45, m (2H); 3,06, m (1H); 3,88, m (2H); 6,42, m (1H); 6,93, m (1H); 7,15, m (4H); 7,45, m (5H); 7,78, s (1H); 7,79, d (1H); 7,97, d (1H); 8,13, s (1H); 8,24, m (1H); 9,19, s (1H). LRMS(EI): 631,1 (M-H). HRMS(FAB): Calculado para C_{33}H_{34}FN_{4}O_{6}S (M+H)-633,2183; Encontrado-633,2160.
Ejemplo 24 Síntesis de la 2-(((4-(N-(6-(4,6-Difenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)carbamoil)fenil)metil)(2-sulfaniletil)amino)-N-(2-sulfaniletil)etanamida
76
Parte A
Preparación de la 2-(((4-(N-(6-(4,6-Difenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)carbamoil)fenil)metil)(2-trifenilmetiltio)etil)amino)-N-(2-trifenilmetiltio)etil)etanamida
Se agitó a temperatura ambiente durante 18 horas una solución de la 6-[(4,6-difenil(2-piridinil)oxi]-2,2-dimetil-1-hexilamina (37,6 mg, 0,077 mmol), éster de la N-[4-(carboxi)bencil]-N,N'-bis[(2-trifenilmetiltio)etil]glicinamida N-hidroxisuccinimida (70,0 mg, 0,077 mmol), y TEA (32 ul, 0,23 mmol) en DMF (1,0 mL). La solución de la reacción se utilizó directamente para su purificación por HPLC en una columna C-18 Vydac (22x250 mm) utilizando un gradiente de 3,6%/min de un 72 a un 90% de ACN que contenía un 0,1% de TFA seguido por elución isocrática a un 90% de ACN que contenía un 0,1% de TFA a una velocidad de flujo de 15 mL/min para dar el compuesto del título como un sólido incoloro (27 mg, 19%). RMN ^{1}H (CDCl_{3}): 8,11-8,03 (m, 2H), 7,70-7,12 (m, 43H), 6,88 (s, 1H), 5,96-5,85 (m, 1H), 4,53-4,43 (m, 2H), 3,44 (s, 2H), 3,33-3,25 (m, 2H), 3,08-2,96 (m, 2H), 2,86 (s, 2H), 2,48-2,24 (m, 6H), 1,90-1,73 (m, 2H), 1,61-1,22 (m, 4H), 0,91 (s, 6H); ^{13}C RMN (CDCl_{3}): \boxempty 170,23, 167,27, 164,34, 155,16, 151,97, 144,68, 144,63, 140,97, 139,24, 138,81, 134,25, 129,50, 129,06, 128,94, 128,84, 128,59, 127,92, 127,04, 126,80, 126,72, 111,69, 107,12, 66,86, 66,65, 65,80, 58,17, 57,61, 53,31, 49,54, 39,86, 37,74, 34,63, 32,05, 29,96, 29,76, 29,68, 24,94, 20,66; MS: m/e 1191,8 [M+Na]; MS de alta resolución: Calculado para C_{77}H_{76}N_{4}O_{3}S_{2}: 1169,5437, Encontrado: 1169,5448.
\newpage
Parte B
Preparación de la 2-(((4-(N-(6-(4,6-Difenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)carbamoil)fenil)metil)(2-sulfaniletil)amino)-N-(2-sulfaniletil)ethanamida
Se disolvió en TFA (4 mL) la 2-(((4-(N-(6-(4,6-Difenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)carbamoil)fenil)metil)(2-trifenilmetiltio)etil)amino)-N-(2-trifenilmetiltio)etil)etanamida (64 mg, 0,092 mmol) junto con trietilsilano (57 \muL) y se agitó bajo atmósfera de nitrógeno durante 2 horas a temperatura ambiente. El precipitado de trifenilmetano se eliminó por filtración y el filtrado se concentró. El producto crudo se purificó por HPLC en una columna Vydac C-18 (22x250 mm) utilizando un gradiente de 2,1%/min de un 27 a un 90% de ACN que contenía un 0,1% de TFA a una velocidad de flujo de 15 mL/min para dar el compuesto del título como un aceite incoloro (18 mg, 28%). MS: m/e 685,4 [M+H].
Ejemplo 25 Síntesis del ácido2-(2-Aza-2-((5-(N-(3-(2-(2-(3-(5-(4-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-1,1-dimetilpentil)(1,2,3,5-tetraazolil))pentanoilamino)propoxi)etoxi)etoxi)propil)carbamoil)(2-piridil))amino)vinil)bencensulfónico
77
Parte A
Preparación del 5-(5-(5-(4,6-Difenil(2-piridiloxi))-1,1-dimetilpentil)-1,2,3,4-tetraazolil)pentanoato de etilo y el 5-(4-(5-(4,6-Difenil(2-piridiloxi))-1,1-dimetilpentil)-1,2,3,5-tetraazolil)pentanoato de etilo
78
Se calentó a reflujo una solución de 6-(5-(2H-2,3,4,5-tetraazolil)-5-metilhexiloxi)-2,4-difenilpiridina (880 mg, 2,13 mmol), 5-bromovalerato de etilo (1,35 mL, 8,51 mmol), y TEA (1,31 mL, 9,36 mmol) en ACN (50 mL) bajo nitrógeno durante 3 horas. La solución se concentró y el residuo se extrajo con EtOAc (150 mL) y agua (50 mL). La fase de EtOAc se lavó con HCl 0,1 N (50 mL), se secó (MgSO_{4}), y se concentró a un aceite ámbar. La cromatografía flash en sílica gel (25% de ETOAc/hexano) dió el isómero N2 del 5-(4-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-1,1-dimetilpentil)-1,2,3,5-tetraazolil)pentanoato de etilo como un aceite incoloro(925 mg, 80,2%). ^{1}H RMN (CDCl_{3}): 8,10-8,01 (m, 2H), 7,69-7,61 (m, 2H), 7,55-7,35 (m, 7H), 6,86 (s, 1H), 4,54 (t, J = 7,1 Hz, 2H), 4,42 (t, J = 6,6 Hz, 2H), 4,09 (q, J = 7,1 Hz, 2H), 2,31 (t, J = 7,3 Hz, 2H), 2,09-1,95 (m, 2H), 1,90-1,70 (m, 4H), 1,70-1,56 (m, 2H), 1,45-1,28 (m, 8H), 1,21 (t, J = 7,1 Hz, 3H); ^{13}C RMN (CDCl_{3}): 173,50, 172,81, 164,32, 155,2, 151,97, 139,18, 138,82, 128,94, 128,84, 128,57, 127,03, 126,81, 111,66, 107,10, 65,83, 60,40, 52,32, 42,40, 34,77, 33,32, 29,59, 28,63, 27,21, 21,74, 21,31, 14,18; MS: m/e 542,4 [M+H]; MS de alta resolución: Calculado para C_{32}H_{40}N_{5}O_{3} [M+H]: 542,3131, Encontrado: 542,3143; CHN Calculado: C, 70,95; H, 7,26; N, 12,93; Encontrado: C, 71,02; H, 6,89; N, 13,04.
Después de la elución del compuesto anterior de la columna flash, el disolvente eluyente se cambió a un 40% de EtOAc/hexano para dar el isómero N1 5-(5-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-1,1-dimetilpentil)-1,2,3,4-tetraazolil)pentanoato de etilo como un aceite incoloro (113 mg, 9,8%). ^{1}H RMN (CDCl_{3}): 8,10-8,01 (m, 2H), 7,69-7,62 (m, 2H), 7,55-7,36 (m, 7H), 6,85 (s, 1H), 4,43 (t, J = 6,3 Hz, 2H), 4,34 (t, J = 7,5 Hz, 2H), 4,09 (q, J = 7,1 Hz, 2H), 2,32 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 2,07-1,92 (m, 2H), 1,91-1,60 (m, 8H), 1,50 (s, 6H), 1,21 (t, J = 7,1 Hz, 3H); MS: m/e 542,4 [M+H]; MS de alta resolución: Calculado para C_{32}H_{40}N_{5}O_{3} [M+H]: 542,3131, Encontrado: 542,3140.
\newpage
Parte B
Preparación del ácido 5-(4-(5-(4,6-Difenil(2-piridiloxi))-1,1-dimetilpentil)-1,2,3,5-tetraazolil)pentanoico
79
Se agitó a temperatura ambiente una mezcla de 5-(4-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-1,1-dimetilpentil)-1,2,3,5-tetraazolil)pentanoato de etilo (464 mg, 0,858 mmol), 3 M LiOH (3,0 mL) y THF (25 mL) durante 45 horas. La mezcla se concentró a un volumen de 5 mL y se extrajo con éter (25 mL) y agua (75 mL). Las fases se separaron y la fase acuosa se acidificó a pH=4,0 con HCl 1N. La fase acuosa se extrajo con EtOAc (3x25 mL). Los extractos orgánicos combinados se secaron (MgSO_{4}) y se concentraron para dar el compuesto del título como un aceite incoloro (418 mg, 94,8%).
^{1}H RMN (CDCl_{3}): 8,04 (d, J = 6,8 Hz, 2H), 7,65 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,55-7,31 (m, 7H), 6,84 (s, 1H), 4,53 (t, J = 6,9 Hz, 2H), 4,40 (t, J = 6,6 Hz, 2H), 2,40-2,25 (m, 2H), 2,09-1,94 (m, 2H), 1,86-1,70 (m, 4H), 1,70-1,52 (m, 2H), 1,50-1,25 (m, 8H).
Parte C
Preparación de la N-(3-(2-(2-(3-Aminopropoxi)etoxi)etoxi)propil)(tert-butoxi)formamida
Se equipó un matraz de fondo redondo de 3 bocas de 1L con un embudo de adición de 500 mL con línea de nitrógeno, un termómetro y un agitador mecánico. El matraz se cargó con 4,7,10-trioxa-1,13-tridecanediamina (72,5 g, 0,329 mol), THF anhidro (250 mL), y MeOH anhidro (100 mL). El embudo de adición se cargó con una solución de di-tert-butil dicarbonato (22,4 g, 0,103 mol) en THF anhidro (100 mL). Los contenidos del embudo de adición se añadieron al matraz con agitación rápida a temperatura ambiente durante 30 minutos, dando lugar a un ligero ascenso de la temperatura de 21º a 32ºC. La reacción se agitó 3 horas más a temperatura ambiente y los disolventes se eliminaron a presión reducida. El aceite espeso resultante se trató con NaCl (1500 mL) y se extrajo con éter (
\hbox{5x1000 mL}
). Los extractos de éter combinados se secaron (MgSO_{4}) y se concentraron para dar un aceite incoloro (29,8 g). Una muestra de 5,00 g de este aceite se purificó por cromatografía flash en sílica gel (DCM:MeOH:TEA, 20:15:0,75) para dar el compuesto del título como un aceite incoloro (4,00 g, 72,2%). ^{1}H RMN (CDCl_{3}): 5,13 (s, 1H), 3,63-3,47 (m, 12H), 3,17 (q, J = 6,2 Hz, 2H), 2,75 (t, J = 6,7 Hz, 2H), 1,75-1,64 (m, 4H), 1,39 (s, 9H), 1,36 (s, 2H); MS: m/e 321,2 [M+H].
Parte D
Preparación de la N-(3-(2-(2-(3-((tert-Butoxi)carbonilamino)propoxi)etoxi)etoxi)propil)-5-(4-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-1,1-dimetilpentil)(1,2,3,5-tetraazolil))pentanamida
80
Se pre-activó una solución de ácido 5-(4-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-1,1-dimetilpentil)-1,2,3,5-tetraazolil)pentanoico (185 mg (0,360 mmol) y TEA (208 uL, 1,50 mmol) en DMF anhidra (2,5 mL) por tratamiento con HBTU (218 mg, 0,576 mmol). Después de 5 minutos a temperatura ambiente, se añadió una solución de N- (3-(2-(2-(3-aminopropoxi)etoxi)etoxi)propil)(tert-butoxi)formamida (180 mg, 0,562 mmol) en DMF (500 uL) y la solución se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. Se eliminó la DMF a presión reducida y el aceite resultante se extrajo con EtOAc (20 mL) y HCl 0,1 N (5 mL). La fase orgánica se lavó consecutivamente con HCl 0,1N y NaHCO_{3} saturado (2x5 mL), se secó (MgSO_{4}), y se concentró para dar un aceite ámbar (177 mg). El aceite se purificó por cromatografía flash en sílica gel (hexano:EtOAc:CHCl_{3}) para dar el compuesto del título como un aceite amarillo pálido (162 mg, 55%). MS: 816,5 [M+H].
\newpage
Parte E
Preparación del ácido 2-(2-Aza-2-((5-(N-(3-(2-(2-(3-(5-(4-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-1,1-dimetilpentil)(1,2,3,5-tetraazolil))pentanoilamino) propoxi)etoxi)etoxi)propil)carbamoil)(2-piridil))amino)vinil)bencensulfónico
Se disolvió en TFA la N-(3-(2-(2-(3-((tert-Butoxi)carbonilamino)propoxi)etoxi)etoxi)propil)-5-(4-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-1,1-dimetilpentil)(1,2,3,5-tetraazolil))pentanamida (60 mg, 0,074 mmol) y se agitó a temperatura ambiente durante 45 minutos. Se eliminó el TFA a presión reducida y el aceite espeso resultante se disolvió en DMF anhidro (0,70 mL) y se añadió a la solución TEA (82 uL, 0,588 mmol) y el papel de pH se hizo básico. La solución se trató con el ácido 2-(2-aza-2-((5-((2,5-dioxopirrolidinil)carbonil)(2-piridil))amino)vinil)bencensulfónico (48,5 mg, 0,110 mmol) y se agitó a temperatura ambiente durante 24 horas. Se eliminó la DMF al vacío, y el aceite resultante se disolvió en ACN al 80% y se purificó por HPLC preparativo en una columna C-18 Vydac (22x250 mm) utilizando un gradiente de 1,80%/min de un 18 a un 72% de ACN que contenía NH_{4}Oac 0,05M a una velocidad de flujo de 15 mL/min. El pico del producto principal que eluyó a 26,3 minutos se recogió y liofilizó para dar el compuesto del título como un polvo incoloro (54,5 mg, 72,8%). MS: 1019,5 [M+H]; MS de alta resolución: Calculado para C_{53}H_{67}N_{10}O_{9}S [M+H]: 1019,4813, Encontrado: 1019,4842.
Ejemplo 26 Síntesis del ácido 2-(2-Aza-2-((5-(N-(3-(2-(2-(3-(5-(5-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-1,1-dimetilpentil)(1,2,3,4-tetraazolil))pentanoilamino) propoxi)etoxi)etoxi)propil)carbamoil)(2-piridil))amino)vinil)bencensulfónico
81
Parte A
Preparación del ácido 5-(5-(5-(4,6-Difenil(2-piridiloxi))-1,1-dimetilpentil)-1,2,3,4-tetraazolil)pentanoico
82
Se agitó una mezcla de 5-(5-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-1,1-dimetilpentil)-1,2,3,4-tetraazolil)pentanoato de etilo (113 mg, 0,21 mmol), 3 M LiOH (1,0 mL), y THF (6 mL) a temperatura ambiente durante 45 horas. La mezcla se extrajo con EtOAc (50 mL) y agua (25 mL). La fase acuosa se acidificó a pH=3,0 con HCl 1N y las fases se separaron. La fase acuosa se extrajo con EtOAc (25 mL). Los extractos orgánicos combinados se secaron (MgSO_{4}) y se concentraron para dar el compueto del título como un aceite incoloro (106 mg, 98,3%). ^{1}H RMN (CDCl_{3}): 8,02 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,65(d, J = 8,2 Hz, 2H), 7,55-7,35 (m, 7H), 6,84 (s, 1H), 4,43-4,31 (m, 4H), 2,36 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 2,10-1,92 (m, 2H), 1,89-1,62 (m, 6H), 1,49 (s, 6H), 1,42-1,20 (m, 2H); MS: m/e 512,5 [M-H]; MS de alta resolución: Calculado para C_{30}H_{36}N_{5}O_{3} [M+H]: 514,2818, Encontrado: 514,2819.
\newpage
Parte B
Preparación de la N-(3-(2-(2-(3-((tert-Butoxi)carbonilamino)propoxi)etoxi)etoxi)propil)-5-(5-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-1,1-dimetilpentil)(1,2,3,4-tetraazolil))pentanamida
83
Se trató una solución de ácido 5-(5-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-1,1-dimetilpentil)-1,2,3,4-tetraazolil)pentanoico (90 mg, 0,175 mmol) y DIEA (122 uL, 0,70 mmol) en DMF anhidra (8 mL) con HBTU (73 mg, 0,192 mmol) y se agitó a temperatura ambiente durante 1 minuto. Se añadió una solución de N-(3-(2-(2-(3-aminopropoxi)etoxi)etoxi)propil)(tert-butoxi)formamida (63,2 mg, 0,197 mmol) en DMF (4 mL) y la solución se agitó durante 2,5 horas. La DMF se eliminó por evaporación al vacío y el aceite espeso resultante se extrajo con EtOAc (50 mL) y agua (10 mL). La fase orgánica se ajustó a pH=3 con HCl 1,0 N, las fases se mezclaron completamente y se separaron. La fase orgánica se lavó con NaOH 1N (2x10 mL) y NaCl saturado (10 mL), se secó (MgSO_{4}), y se concentró para dar el compuesto del título como un aceite ámbar pálido (144 mg, 100%). MS: m/e 816,6 [M+H]; MS de alta resolución: Calculado para C_{45}H_{66}N_{7}O_{7} [M+H]: 816,5024, Encontrado: 816,5044.
Parte C
Preparación del ácido 2-(2-Aza-2-((5-(N-(3-(2-(2-(3-(5-(5-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-1,1-dimetilpentil)(1,2,3,4-tetraazolil))pentanoilamino)propoxi)etoxi)etoxi)propil)carbamoil)(2-piridil))amino)vinil)bencensulfónico
Se disolvió en TFA (5 mL) la N-(3-(2-(2-(3-((tert-Butoxi)carbonilamino)propoxi)etoxi)etoxi)propil)-5-(5-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-1,1-dimetilpentil)(1,2,3,4-tetraazolil))pentanamida (146 mg, 0,179 mmol) y se agitó a temperatura ambiente durante 45 minutos. El TFA se eliminó al vacío y el aceite ámbar espeso se disolvió en DMF anhidro (3 mL) y se añadió TEA (200 uL) y el papel de pH se hizo básico. Se trató la solución con ácido 2-(2-aza-2-((5-((2,5-dioxopirrolidinil)carbonil)(2-piridil))amino)vinil)bencensulfónico (94,6 mg, 0,215 mmol) y se agitó a temperatura ambiente durante 18 horas en atmósfera de nitrógeno. La solución de la reacción e concentró a un volumen de 1,0 mL, se diluyó con ACN (4 mL), y se purificó por HPLC preparativo en una columna C-81 Vydac (22x250 mm) utilizando un gradiente de 1,80%/min de un 18 a un 72% de ACN que contenía NH_{4}Oac 0,05M a una velocidad de flujo de 15 mL/min. El pico del producto principal que eluyó a 24,7 minutos se recogió y se liofilizó para dar el compuesto del título como un polvo incoloro (131 mg, 71,8%). MS: m/e 1019,5 [M+H]; MS de alta resolución: Calculado para C_{53}H_{67}N_{10}O_{9}S [M+H]: 1019,4813, Encontrado: 1019,4839.
Ejemplo 27 Síntesis del ácido 2-(2-Aza-2-((5-(N-(2-(2-(2-(2-(2-(2-(2-(2-(5-(4-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-1,1-dimetilpentil) (1,2, 3,5-tetraazolil)) pentanoilamino)etoxi)etoxi)etoxi)etoxi)etoxi)etoxi)etoxi)etil) carbamoil)(2-piridil))amino)vinil)ben-censulfónico
84
Parte A
Preparación de la (tert-Butoxi)-N-(2-(2-(2-(2-((4-metilfenil)sulfoniloxi)etoxi)etoxi)etoxi)etil)formamida
Se trató una solución de N-(2-(2-(2-(2-aminoetoxi)etoxi)etoxi)etil)(tert-butoxi)formamida (5,87 g, 20 mmol) y TEA (6,12 mL, 44 mmol) en éter con cloruro de p-toluensulfonilo (4,00 g, 21 mmol) y se agitó a reflujo bajo atmósfera de nitrógeno durante 24 horas, y durante otras 24 horas a temperatura ambiente. La solución se concentró y el residuo aceitoso se agitó con NaCl saturado (100 mL) y éter (400 mL), originado la formación de un sólido cristalino en la fase acuosa. La fase acuosa se extrajo con una segunda porción de éter (400 mL). Los extractos de éter combinados se secaron (MgSO_{4}) y se concentraron a un aceite oscuro. Este aceite se purificó por cromatografía flash en sílica gel (hexano/EtOAc) para dar el compuesto del título como un aceite amarillo pálido (2,85 g, 31,8%). ^{1}H RMN (CDCl_{3}): 7,78 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,32 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 4,18-4,08 (m, 2H), 3,71-3,46 (m, 12H), 3,32-3,22 (m, 2H), 2,43 (s, 3H), 1,42 (s, 9H); MS: m/e 465,4 [M+NH_{4}].
Parte B
Preparación de la N-(2-(2-(2-(2-(2-(2-(2-(3-Aza-3-diazoprop-3-eniloxi)etoxi)etoxi)etoxi)etoxi)etoxi)etoxi)etil)(tert-butoxi)formamida
Se trató una solución de 2-(2-(2-(3-aza-3-diazoprop-3-eniloxi)etoxi)etoxi)etan-1-ol (0,723 g, 3,30 mmol) en THF anhidro (20 mL) con NaH (144 mg de una dispersión al 60%, 3,6 mmol) y se agitó a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno hasta que cesó la evolución de gas. Se añadió una solución de (tert-butoxi)-N-(2-(2-(2-(2-((4-metilfenil)sulfoniloxi)etoxi)etoxi)etoxi)etil)formamida (1,61 g, 3,6 mmol) en THF anhidro (20 mL) y la mezcla se agitó durante 48 horas a temperatura ambiente bajo nitrógeno. El THF se eliminó bajo vacío y el residuo se trituró con éter (3x50 mL). Los triturantes combinados se concentraron para dar un aceite ámbar. Este aceite se purificó por cromatografía flash en sílica gel (hexano/EtOAc:MeOH, 47,5:47,5:5) para dar el compuesto del título como un aceite incoloro (1,11 g, 68%). ^{1}H RMN (CDCl_{3}): 5,00 (s, 1H), 3,67-3,51 (m, 26H), 3,49 (t, J = 5,2 Hz, 2H), 3,34 (t, J = 5,1 Hz, 2H) 3,30-3,20 (m, 2H), 1,40 (s, 9H); MS: m/e 512,4 [M+NH_{4}]; MS de alta resolución: Calculado para C_{21}H_{43}N_{4}O_{8} [M+H]: 495,3030, Encontrado: 495,3047.
Parte C
Preparación de la N-(2-(2-(2-(2-(2-(2-(2-(2-Aminoetoxi)etoxi)etoxi)etoxi)etoxi)etoxi)etoxi)etil)(tert-butoxi)formamida
85
Se hidrogenó sobre PtO_{2} (100 mg) una solución de N-(2-(2-(2-(2-(2-(2-(2-(3-aza-3-diazoprop-3-eniloxi)etoxi)etoxi)etoxi)etoxi)etoxi)etoxi)etil)(tert-butoxi)formamida (960 mg, 1,94 mmol) en MeOH (100 mL) a una presión de 60 psi durante 2 horas a temperatura ambiente. El catalizador se eliminó por filtración a través de un filtro y el filtrado se concentró para dar el compuesto del título como un aceite ámbar (953 mg). ^{1}H RMN (CDCl_{3}): 5,06 (s, 1H), 3,67-3,40 (m, 28H), 3,28-3,18 (m, 2H), 2,79 (t, J = 5,2 Hz, 2H), 1,40 (s, 2H), 1,38 (s, 9H); MS: m/e 469,3 [M+H]; MS de alta resolución: Calculado para C_{21}H_{45}N_{2}O_{9} [M+H]: 469,3126, Encontrado: 469,3125.
Parte D
Preparación de la N-(2-(2-(2-(2-(2-(2-(2-(2-((tert-Butoxi)carbonilamino)etoxi)etoxi)etoxi)etoxi)etoxi)etoxi)etoxi)etil)-5-(4-(5- (4,6-difenil(2-piridiloxi))-1,1-dimetilpentil)(1,2,3,5-tetraazolil))pentanamida
86
Se activó una solución del ácido 5-(4-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-1,1-dimetilpentil)-1,2,3,5-tetraazolil)pentanoico (99 mg, 0,193 mmol) y DIEA (134 uL, 0y772 mmol) en DMF anhidro (8 mL) por tratamiento con HBTU (80,5 mg, 0,212 mmol) durante 2 minutos a temperatura ambiente. Se añadió a esta solución la N-(2-(2-(2-(2-(2-(2-(2-(2-aminoetoxi) etoxi)etoxi)etoxi)etoxi)etoxi)etoxi)etil)(tert-butoxi)formamida (103 mg, 0,220 mmol) en DMF (4 mL) y la solución resultante se agitó 2 horas a temperatura ambiente bajo nitrógeno.La DMF se eliminó a presión reducida y el aceite espeso se extrajo con EtOAc (50 mL) y agua (10 mL). La fase acuosa se ajustó a pH=2,0 con HCl 0,1 N y las fases se mezclaron. La fase orgánica se lavó con NaHCO_{3} saturado (10 mL) y NaCl saturado (10 mL), se secó (MgSO_{4}), y se concentró para dar el compuesto del título como un aceite ámbar (208 mg, 92,2%). MS: m/e 981,7 [M+NH_{4}]; MS de alta resolución: calculado para C_{51}H_{78}N_{7}O_{11} [M+H]: 964,5759, Encontrado: 964,5788.
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Parte E
Preparación del ácido 2-(2-Aza-2-((5-(N-(2-(2-(2-(2-(2-(2-(2-(2-(5-(4- (5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-1,1-dimetilpentil) (1,2,3,5-tetraazolil))pentanoilamino)etoxi)etoxi)etoxi)etoxi)etoxi)etoxi)etoxi)etil)-carbamoil)(2-piridil))amino)vinil)bencensulfónico
Se disolvió en TFA la N-(2-(2-(2-(2-(2-(2-(2-(2-((tert-Butoxi)carbonilamino)etoxi)etoxi)etoxi)etoxi)etoxi)etoxi)etoxi)etil)-5-(4-(5- (4,6-difenil(2-piridiloxi))-1,1-dimetilpentil)(1,2,3,5-tetraazolil))pentanamida (170 mg, 0,193 mmol) en TFA (5 mL) y se agitó a temperatura ambiente durante 45 minutos. Se eliminó el TFA a presión reducida y el aceite espeso resultante se mezcló en DMF anhidro y se añadió TEA (315 uL, 2,32 mmol) hasta pH básico en papel de pH. Esta solución se trató con ácido 2-(2-aza-2-((5-((2,5-dioxopirrolidinil)carbonil)(2-piridil))amino)vinil)bencensulfónico (102 mg, 0,232 mmol) y se agitó a temperatura ambiente durante 20 horas. Se eliminó la DMF a presión reducida y el aceite espeso se disolvió en ACN (3 mL) y se purificó por HPLC preparativo en una columna C-18 Vydac (22x250 mm) utilizando un gradiente de 1,80%/minuto de un 18 a un 72% de ACN que contenía NH_{4}OAc 0,05 M a una velocidad de flujo de 15 mL/minuto. El pico del producto principal a 27,5 minutos se recogió y se liofilizó para dar el compuesto del título como un polvo amarillo pálido (157 mg, 67,1%). MS: m/e 1167,8 [M+H]; MS de alta resolución: Calculado para C_{59}H_{79}N_{10}O_{13}S [M+H]: 1167,5549, Encontrado: 1167,5577.
Ejemplo 28 Síntesis del 2-(2-Aza-2-((5-(N-(5-(4-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-1,1-dimetilpentil)(1,2,3,5-tetraazolil)) pentanoilamino)-1-(6-deoxi-\beta-ciclodextril)carbamoil)pentil) carbamoil)(2-piridil))amino)vinil)bencensulfónico
87
Parte A
Preparación de la 6-Amino-2-((tert-butoxi)carbonilamino)-N-(6-deoxi-\beta-ciclodextril)hexanamida
Se agitó una solución de 6-deoxi-6-amino-\beta-ciclodextrina (70 mg, 0,062 mmol), Boc-Lys(Z)-OSu (29,5 mg, 0,062 mmol), y TEA (12,6 uL, 0,092 mmol) en DMF anhidra (3 mL) bajo atmósfera de nitrógeno a temperatura ambiente durante 90 minutos. El disolvente se eliminó a presión reducida. El sólido ligeramente verde se mezcló en MeOH (6 mL) y agua (0,5 mL), se trató con anisol (100 uL) y se hidrogenó sobre Pd/C al 10% (50 mg) a 30 psi y a temperatura ambiente durante 18 horas. El catalizador se eliminó por filtración a través de un filtro y el filtrado se concentró al vacío para dar el compuesto del título como un sólido ligeramente verde. (87 mg). MS: 1362,7 [M+H].
Parte B
Preparación de la 2-((tert-Butoxi)carbonilamino)-6-(5-(4-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-1,1-dimetilpentil)(1,2,3,5-tetraazolil))pentanoilamino)-N-(6-deoxi-\beta-ciclodextril)hexanamida
88
Se disolvió el ácido 5-(4-(5-(4,6-Difenil(2-piridiloxi))-1,1-dimetilpentil)-1,2,3,5-tetraazolil)pentanoico (31,6 mg, 0,062 mmol) en DMF anhidra (3 mL) y se preactivó por adición de HBTU (25,6 mg, 0,068 mmol) y DIEA (28 uL, 0,186 mmol). Después de 5 minutos se añadió una solución de la 6-amino-2-((tert-butoxi)carbonilamino)-N-(6-deoxi-\beta-ciclodextril)hexanamida (84 mg, 0,062 mmol) y DIEA (28 uL, 0,186 mmol) en DMF (3 mL) y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente bajo nitrógeno durante 18 horas. Los disolventes se eliminaron a presión reducida y el residuo se disolvió en MeOH:agua:DMF, 10:2:2 (1,4 mL). Esta solución se utilizó para la purificación por HPLC preparativo en una columna C-18 Vydac (22x250 mm) utilizando un gradiente de 1,80%/minuto de un 18 a un 72% de ACN a una velocidad de flujo de 15 mL/min. El pico del producto principal que eluyó a 27,3 minutos se recogió y liofilizó para dar el compuesto del título como un polvo incoloro (52 mg, 45,5%). MS: 1857,9 [M+H]; MS de alta resolución: Calculado para C_{83}H_{125}N_{8}O_{39} [M+H]: 1857,8044, Encontrado: 1857,8068.
Parte C
Preparación del ácido 2-(2-Aza-2-((5-(N-(5-(4-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-1,1-dimetilpentil)(1,2,3,5-tetraazolil)) pentanoilamino)-1-(6-deoxi-\beta-ciclodextril)carbamoil)pentil)carbamoil)(2-piridil))amino)vinil)bencensulfónico
Se disolvió en TFA la 2-((tert-Butoxi)carbonilamino)-6-(5-(4-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-1,1-dimetilpentil) (1,2,3,5-tetraazolil))pentanoilamino)-N-(6-deoxi-\beta-ciclodextril)hexanamida (52 mg, 0,028 mmol) y se agitó a temperatura ambiente durante 45 minutos. El TFA se eliminó al vacío, y el residuo se disolvió en DMF anhidra (3 mL) y se añadió TEA (58 uL, 0,42 mmol) y el papel de pH se hizo básico. La solución se trató con el éster activo del ácido 2-(2-aza-2-((5-((2,5-dioxopirrolidinil)carbonil)(2-piridil))amino)vinil)bencensulfónico (14,8 mg, 0,034 mmol) y se agitó bajo atmósfera de nitrógeno a temperatura ambiente. Se adicionó más éster activo a las 72 horas (17 mg) y a las 96 horas (20 mg). Después de un tiempo de reacción de 8 días, la solución se concentró para dar un aceite espeso. Este aceite se disolvió en 50% MeOH y se purificó por HPLC preparativo en una columna C-18 Vydac (22x250 mm) utilizando un gradiente de 1,50%/minuto de un 18 a un 63% de ACN que contenía NH_{4}Oac 0,05M a una velocidad de flujo de 15 mL/min. El pico del producto principal que eluyó a 27,1 minutos se recogió y se liofilizó para dar el compuesto del título como un polvo incoloro (30 mg, 53%). MS: 2061,6 [M+H]; MS de alta resolución: Calculado para C_{91}H_{126}N_{11}O_{41}S [M+H]: 2060,7833, Encontrado: 2060,7874.
Ejemplo 29 Síntesis del ácido 2-(2-Aza-2-((5-(N-(3-(2-(2-(3-(2-(5-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-1,1-dimetilpentil) (1,2,3,4-tetraazolil))acetilamino)propoxi)etoxi)etoxi)propil)carbamoil)(2-piridil))amino)vinil)bencensulfónico
89
Parte A
Preparación del 2-(5-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-1,1-dimetilpentil)-1,2,3,4-tetraazolil)acetato de etilo y del 2-(4-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-1,1-dimetilpentil)-1,2,3,5-tetraazolil)acetato de etilo
90
Se agitó a reflujo una solución de 6-(5-(2H-2,3,4,5-tetraazolil)-5-metilhexiloxi)-2,4-difenilpiridina (827 mg, 2,00 mmol) y óxido de bis-tri-n-butilestaño (596 mg, 1,00 mmol) en EtOH (50 mL) a reflujo bajo atmósfera de nitrógeno durante 20 minutos y se concentró a un aceite amarillo pálido a presión reducida. El aceite se disolvió en ACN (25 mL), se trató con bromoacetato de etilo (333 uL, 3,00 mmol) y se calentó a reflujo bajo nitrógeno durante 60 horas. El ACN se eliminó al vacío y el aceite ámbar resultante se trató con EtOAc (50 mL). Esta solución orgánica se lavó consecutivamente con HCl 0,1N (10 mL), NaHCO_{3} saturado (15 mL), NaCl saturado (15 mL), se secó (MgSO_{4}) y se concentró a un aceite ámbar (1,662 g). El aceite se disolvió en éter (60 mL) y se lavó con un 10% de KF (2x30 mL). El precipitado se eliminó por filtración y las dos fases del filtrado se separaron. La fase orgánica se secó (MgSO_{4}) y se concentró para dar un sólido amarillo (0,957 G). La cromatografía flash en sílica gel (20% de EtOAc/hexano) dió el isómero N2 del 2-(4-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-1,1-dimetilpentil)-1,2,3,5-tetraazolil)acetato de etilo como un sólido incoloro (617 mg). La recristalización con hexano dió el producto como un sólido incoloro (490 mg, 49,1%). MP: 76-79ºC; ^{1}H RMN (CDCl_{3}): 8,06 (d, J = 6,8 Hz, 2H), 7,66 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 7,58-7,34 (m, 7H), 6,86 (s, 1H), 5,33 (s, 2H), 4,42 (t, J = 6,6 Hz, 2H), 4,22 (q, J = 7,1 Hz, 2H), 1,90-1,72 (m, 4H), 1,50-1,28 (m, 8H), 1,22 (t, J = 7,1 Hz, 3H); MS: m/e 500,3 [M+H]; MS de alta resolución: Calculado para C_{29}H_{34}N_{5}O_{3} [M+H]: 500,2662, Encontrado: 500,2668; CHN Calculado: C, 69,72; H, 6,66; N, 14,02; Encontrado: C, 69,43; H, 6,69; N, 13,90.
Después de la elución del compuesto anterior se cambió el disolvente de elución de la columna flash a un 30% de EtOAc/hexano para dar el isómero N1 del 2-(5-(5- (4,6-difenil(2-piridiloxi))-1,1-dimetilpentil)-1,2,3,4-tetraazolil)acetato de etilo como un aceite amarillo pálido (142 mg, 14,2%). ^{1}H RMN (CDCl_{3}): 8,05 (d, J = 6,8 Hz, 2H), 7,66 (d, J = 6,5 Hz, 2H), 7,60-7,33 (m, 7H), 6,85 (s, 1H), 5,20 (s, 2H), 4,43 (t, J = 6,4 Hz, 2H), 4,22 (q, J = 7,1 Hz, 2H), 1,89-1,70 (m, 4H), 1,52-1,38 (m, 8H), 1,24 (t, J = 7,1 Hz, 3H); MS: m/e 500,3 [M+H]; MS de alta resolución: Calculado para C_{29}H_{34}N_{5}O_{3} [M+H]: 500,2662, Encontrado: 500,2653.
Parte B
Preparación del ácido 2-(5-(5-(4,6-Difenil(2-piridiloxi))-1,1-dimetilpentil)-1,2,3,4-tetraazolil)acético
91
Se agitó a 50ºC una mezcla del 2-(5-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-1,1-dimetilpentil)-1,2,3,4-tetraazolil)acetato de etilo (97 mg, 0,194 mmol) y LiOH 3N (1,2 mL, 3,6 mmol) en THF (2 mL) durante 23 horas bajo atmósfera de nitrógeno. Se eliminó el THF al vacío y el residuo se disolvió en EtOAc (20 mL), se lavó con HCl diluido (pH=2, 5 mL) y luego con agua (5 mL). La solución orgánica se secó (MgSO_{4}) y se concentró para dar el compuesto del título como un sólido incoloro. MS: 470,3 [M-H].
Parte C
Preparación del ácido 2-(2-Aza-2-((5-(N-(3-(2-(2-(3-(2-(5-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-1,1-dimetilpentil)(1,2,3,4-tetraazolil))acetilamino)propoxi)etoxi)etoxi)propil)carbamoil)(2-piridil))amino)vinil)bencensulfónico
Se agitó una solución del ácido 2-(5-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-1,1-dimetilpentil)-1,2,3,4-tetraazolil)acético (
\hbox{76 mg}
, 0,161 mmol), TEA (181 uL, 1,30 mmol), N-(3-(2-(2-(3-aminopropoxi)etoxi)etoxi)propil)(tert-butoxi)formamida (157 mg, 0,488 mmol), y HBTU (195 mg, 0,512 mmol) en DMF anhidra (3 mL) a temperatura ambiente bajo nitrógeno durante 27 horas. La solución se concentró a presión reducida y el aceite ámbar oscuro resultante se disolvió en EtOAc (20 mL), se lavó con HCl 0,1 N (10 mL) y NaCl saturado (2x10 mL), se secó (MgSO_{4}), y se concentró para dar el conjugado enlazado al crudo como un aceite ámbar (280 mg). Se confirmó la presencia del conjugado deseado por espectrometría de masas de baja resolución (MS: 774.4 [M+H]).
Se disolvió el aceite anterior en TFA (3 mL) y se agitó a temperatura ambientedurante 45 minutos. El TFA se eliminó al vacío, el aceite resultante se disolvió en DMF (1 mL) y se añadió TEA (285 uL, 2,76 mmol) y el papel de pH se hizo básico. La solución se trató con el éster activo del ácido 2-(2-aza-2-((5- ((2,5-dioxopirrolidinil)carbonil)(2-piridil))amino)vinil)bencensulfónico (264 mg, 0,598 mmol) y se agitó a temperatura ambiente durante 48 horas. La solución se diluyó con ACN al 50% (2,5 mL) y se purificó por HPLC preparativo en una columna C-18 Vydac (22x250 mm) utilizando un gradiente de 1,50%/minutos de un 18 a un 63% de ACN que contenía NH_{4}OAc 
\hbox{0,05 M}
a una velocidad de flujo de 15 mL/min. El pico del producto principal que eluyó a 29,4 minutos se recogió y se liofilizó para dar el compuesto del título como un polvo amarillo pálido (49 mg, 31,2%). MS: 977,4 [M+H]; MS de alta resolución: Calculado para C_{50}H_{61}N_{10}O_{9}S [M+H]: 977,4344, Encontrado: 977,4333. Ejemplo 30 Síntesis del ácido 2-(2-Aza-2-((5-(N-(3-(2-(2-(3-(2-(4-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-1,1-dimetilpentil)(1,2,3,5-tetraazolil))acetilamino)propoxi)etoxi)etoxi)propil)carbamoil)(2-piridil))amino)vinil)bencensulfónico
92
Parte A
Preparación del ácido 2-(4-(5-(4,6-Difenil(2-piridiloxi))-1,1-dimetilpentil)-1,2,3,5-tetraazolil)acético
93
Se agitó una mezcla de 2-(4-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-1,1-dimetilpentil)-1,2,3,5-tetraazolil)acetato de etilo (370 mg, 0,739 mmol) y 3 N LiOH (3,6 mL, 10,8 mmol) en THF (1 mL) a 50ºC durante 17 horas y se concentró a sequedad. El residuo se extrajo con EtOAc (20 mL) y HCl diluido (pH=2, 5 mL). La fase orgánica se lavó con agua (5 mL), se secó (MgSO_{4}), y se concentró para dar el compuesto del título como un sólido incoloro (278 mg, 75,1%). MS: 470,3 [M-H].
Parte B
Preparación del ácido 2-(2-Aza-2-((5-(N-(3-(2-(2-(3-(2-(4-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-1,1-dimetilpentil)(1,2,3,5-tetraazolil))acetilamino)propoxi)etoxi)etoxi)propil)carbamoil)(2-piridil))amino)vinil)bencensulfónico
Se agitó a temperatura ambiente una solución de ácido 2-(4-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-1,1-dimetilpentil)-1,2,3,5-tetraazolil)acético (261 mg, 0,553 mmol), TEA (920 uL, 6,60 mmol), HBTU (754 mg, 1,99 mmol), y N-(3-(2-(2-(3-aminopropoxi)etoxi)etoxi)propil)(tert-butoxi)formamida (398 mg, 1,24 mmol) en DMF anhidra (1,5 mL) bajo nitrógeno durante 21 horas. La solución se concentró a presión reducida y el aceite ámbar oscuro resultante se disolvió en EtOAc (20 mL), se lavó con HCl 0,1 N (10 mL) y NaHCO_{3} saturado (2x10 mL), se secó (MgSO_{4}), y se concentró para dar el crudo de N-(3-(2-(2- (3-((tert-butoxi)carbonilamino)propoxi)etoxi)etoxi)propil)-2-(4-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-1,1-dimetilpentil)(1,2,3,5-tetraazolil))etanamida como un aceite ámbar pálido (430 mg). La presencia de este conjugado se confirmó por espectrocopia de masas de baja resolución (MS: 774,4 [M+H]).
Se disolvió en TFA el aceite anterior y se agitó a temperatura ambiente durante 45 minutos. Se eliminó el TFA a presión reducida, el aceite resultante se disolvió en DMF (2 mL) y se añadió TEA (464 uL, 3,34 mmol) y el papel de pH se hizo básico. La solución se trató con el éster activo del ácido 2-(2-aza-2-((5- ((2,5-dioxopirrolidinil)carbonil)(2-piridil))amino)vinil)bencensulfónico (490 mg, 1,11 mmol) y se agitó a temperatura ambiente durante 93 horas. La solución se diluyó con ACN al 50% (2,5 mL) y se purificó por HPLC preparativo en una columna C-18 Vydac (22x250 mm) utilizando un gradiente de 1,80%/min de un 18 a un 72% de ACN que contenía NH_{4}OAc 0,05 M a una velocidad de flujo de 15 mL/min. El pico del producto principal que eluyó a 26,8 min se recogió y se liofilizó para dar el compuesto del título como un polvo amarillo (120 mg, 22,2%). MS: 977,4 [M+H]; MS de alta resolución: Calculado para C_{50}H_{61}N_{10}O_{9}S [M+H]: 977,4344, Encontrado: 977,4341.
Ejemplo 31 Síntesis del ácido 3-(6-(3-(N-(5-((6-((1-Aza-2-(sulfofenil)vinil)amino)(3-piridil))carbonilamino)-5-(N-(\omega-metoxipolietileno(750)glicoxietil)carbamoil)pentil)carbamoil)propoxi)2-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))pentiloxi)fenil)propanoico
94
Parte A
Preparación del 3-Aza-3-diazo-1-(\omega-metoxipolietileno(750)glicoxi)prop-3-eno
Se equipó un matraz de 100 mL de 3 bocas con un agitador mecánico, un embudo de adición con línea de nitrógeno, y un termómetro. El matraz se cargó con \omega-metoxipolietileno(750)glicoxietanol (75 g, 0,10 mol), TEA (28 mL, 0,20 mol), éter anhidro (300 mL), y THF anhidro (200 mL). La solución se enfrió a 5ºC en un baño de hielo. El embudo de adición se cargó con cloruro de metansulfonilo (11,6 mL, 0,16 mol), éter (250 mL), y THF (250 mL). Los contenidos del embudo de adición se añadieron al matraz gota a gota con agitación mientras se mantenían los contenidos del matraz a 5-10ºC. Una vez que la adición finalizó, se eliminó el baño de hielo y se continuó la agitación a temperatura ambiente durante 1 hora. La mezcla se filtró para eliminar la sal de TEA\cdotHCl y el filtrado se concentró para dar un aceite amarillo pálido. El aceite se trituró con hexano (6x100 mL) y se secó al vacío para dar el mesilato como un aceite amarillo pálido (86,8 g).
El mesilato se disolvió en EtOH anhidro (600 mL) y se trató con azida sódica (6,8 g, 0,104 mmol). La mezcla se calentó a reflujo durante 24 horas, tiempo en el que se añadió más azida sódica (2,0 g), y el calentamiento se continuó otras 24 horas. Se eliminó el EtOH al vacío para dar una mezcla de aceite y sólido. El aceite se disolvió en éter (500 mL) y se filtró, y el filtrado se concentró para dar el compuesto del título como un aceite amarillo pálido (74,6 g, 96%). ^{13}C RMN (CDCl_{3}): 58,8 (O-CH_{2}CH_{2}NH_{2}), 50,5 (CH_{2}-N_{3}); IR (limpio/KBr cm^{-1}): 2100 (s).
Parte B
Preparación de la 2-(\omega-Metoxipolietileno(750)glicoxi)etilamina
95
Se hidrogenó el 3-Aza-3-diazo-1-(\omega-metoxipolietileno(750)glicoxi)prop-3-eno (14,0 g, 18,0 mmol) en MeOH (200 mL) sobre PtO_{2} (1,0 g) a 60 psi y a temperatura ambiente durante 15 horas. El catalizador se eliminó por filtración a través de un filtro y el filtrado se concentró para dar el compuesto del título como un aceite amarillo pálido (11,3 g, 83,3%). ^{13}C RMN (CDCl_{3}): 58,8 (O-CH_{2}CH_{2}NH_{2}), 41,4 (CH_{2}-NH_{2}); IR (limpio/KBr cm^{-1}): 3350 (s); MS: 516,4 (n=11), 560,4 (n=12), 604,4 (n=13), 648,4 (n=14), 692,4 (n=15), 736,5 (n=16), 780,5 (n=17), 824,5 (n=18) [M+H].
Parte C
Preparación de la 2-((tert-Butoxi)carbonilamino)-N-(\omega-metoxipolietileno(750)glicoxietil)-6-((fenilmetoxi)carbonilamino)hexanamida
96
Se agitó a temperatura ambiente una solución de 2-(\omega-metoxipolietileno(750)glicoxi)etilamina (11,2 g, 14,9 mmol), Boc-Lys(Z)-OSu (6,2 g, 0,13 mmol), y TEA (2,7 mL, 0,195 mmol) en THF anhidro (500 mL) durante 24 horas. La solución se diluyó con éter-CHCl_{3} 70:30 (1200 mL) y se lavó con NaCl saturado (500 mL). El lavado de NaCl se extrajo de nuevo con éter-CHCl_{3} 70:30 (500 mL). Los extractos orgánicos combinados se secaron (MgSO_{4}) y se concentró para dar un aceite incoloro (15,1 g). Una muestra de 2,0 g de este aceite se purificó por cromatografía flash en sílica gel (CHCl_{3}:MeOH) para dar el compuesto del título como un aceite incoloro (1,30 g, 65%). MS: 939,5 (n=12), 983,7 (n=13), 1027,7 (n=14), 1071,8 (n=15), 1115,7 (n=16), 1159,7 (n=17), 1203,8 (n=18) [M+NH_{4}]; MS de alta resolución: Calculado para C_{50}H_{92}N_{3}O_{20} (n=15) [M+H]: 1054,6274, Encontrado: 1054,6224; Calculado para C_{52}H_{96}N_{3}O_{21} (n=16) [M+H]: 1098,6536, Encontrado: 1098,6476.
Parte D
Preparación de la 6-Amino-2-((tert-butoxi)carbonilamino)-N-(\omega-metoxipolietileno(750)glicoxietil)hexanamida
97
Se hidrogenolizó 2-((tert-Butoxi)carbonilamino)-N-(\omega-metoxipolietileno(750)glicoxietil)-6-((fenilmetoxi)carbonilamino)hexanamida (1,00 g, 0,86 mmol) en MeOH (20 mL) sobre Pd/C al 10% (200 mg) a 1 atm y a temperatura ambiente durante 4 horas. El catalizador se eliminó por filtración a través de un filtro y el filtrado se concentró para dar el compuesto del título como un aceite incoloro (0,79 g, 89%). MS: 832,6 (n=13), 876,7 (n=14), 920,8 (n=15), 964,8 (n=16), 1008,7 (n=17), 1052,6 (n=18), 1096,8 (n=19) [M+H].
Parte E
Preparación del 3-(6-(3-(N-(5-((tert-Butoxi)carbonilamino)-5-(N- (\omega-metoxipolietileno(750)glicoxietil)carbamoil)pentil)carbamoil)propoxi)2-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))pentiloxi)fenil)propanoato de metilo
98
Se trató una solución de ácido 4-(3-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))pentiloxi)-2- (2-(metoxicarbonil)etil)fenoxi)butanoico (27,5 mg, 0,045 mmol) y TEA (12 uL) en DMF anhidro (2,5 mL) con HBTU (18,9 mg, 0,049 mmol) bajo atmósfera de nitrógeno. La solución se agitó 5 minutos a temperatura ambiente y se trató con una solución de 6-amino-2-((tert-butoxi)carbonilamino)-N-(\omega-metoxipolietileno(750)glicoxietil)hexanamida (55,7 mg, 0,57 mmol) en DMF (3,0 mL). La solución se agitó 3 horas a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno y se concentró a un aceite incoloro. Este aceite se disolvió en ACN (1,5 mL) y se purificó por HPLC preparativo en una columna Vydac C-18 (22x250 mm) utilizando un gradiente de 1,80%/min de un 36 a un 90% de ACN que contenía TFA al 0,1% a una velocidad de flujo de 15 mL/min. El pico del producto principal que eluyó a 20,4 min se recogió y se liofilizó para dar el compuesto del título como un aceite incoloro (40 mg, 56,5%). MS: 1478,0 (n=14), 1521,8 (n=15), 1565,9 (n=16), 1610,0 (n=17), 1654,1 (n=18) [M+Na]; MS de alta resolución: Calculado para C_{78}H_{123}N_{4}O_{24} (n=15) [M+H]: 1499,8527, Encontrado: 1499,8579; Calculado para C_{82}H_{131}N_{4}O_{26} (n=17) [M+H]: 1587,9052, Encontrado: 1587,9026.
Parte F
Preparación del ácido 3-(6-(3-(N-(5-((6-((1-Aza-2-(2-sulfofenil)vinil)amino)(3-piridil))carbonilamino)-5-(N-(\omega-metoxipolietileno(750)glicoxietil)carbamoil)pentil)carbamoil)propoxi)2-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))pentiloxi)fenil)propanoico
Se agitó a temperatura ambiente una mezcla de 3-(6-(3-(N-(5-((tert-butoxi)carbonilamino)-5-(N-(\omega-metoxipolietileno(750)glicoxietil)carbamoil)pentil)carbamoil)propoxi)2-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))pentiloxi)fenil)propanoato de metilo (35,7 mg, 0,0226 mmol) y 3 N LiOH (609 uL) en THF (3,5 mL) bajo nitrógeno durante 96 horas. La solución se concentró a presión reducida y el sólido incoloro se mezcló en TFA (4 mL) y se agitó a temperatura ambiente durante 45 minutos. Se eliminó el TFA al vacío para dar el ácido 3-(6-(3-(N-(5-amino-5-(N-(\omega-metoxipolietileno(750)glicoxietil)carbamoil)pentil)carbamoil)propoxi)2-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))pentiloxi)fenil)propanoico como un sólido naranja (32,2 mg).
Se agitó a temperatura ambiente una solución del aceite naranja anterior (32,2 mg, 0,0245 mmol), TEA (101 uL), y ácido 2-(2-aza-2-((5-((2,5-dioxopirrolidinil)carbonil)(2-piridil))amino)vinil)bencensulfónico (20,0 mg, 0,0454 mmol) en DMF anhidro (2 mL) bajo nitrógeno durante 72 horas. La DMF se eliminó al vacío y el aceite espeso resultante se disolvió en ACN (1,0 mL) y se purificó por HPLC preparativo en una columna Vydac C-18 (22x250 mm) utilizando un gradiente de 1,80%/min de un 18 a un 72% de ACN que contenía NH_{4}OAc 0,05 M a una velocidad de flujo de 15 mL/min. El pico del producto principal que eluyó a 25,7 minutos se recogió y se liofilizó para dar el compuesto del título como un aceite amarillo pálido (21,0 mg, 57,9%). MS: 1643,5 (n=14), 1687,6 (n=15), 1731,7 (n=16), 1775,2 (n=17), 1819,2 (n=18), 1863,2 (n=19), 1907,5 (n=20) [M+H].
Ejemplo 32 Síntesis del ácido 3-(6-(3-(N-(3-(2-(2-(3-((6-((1-Aza-2-(2-sulfofenil)vinil)amino)(3-piridil))carbonilamino)propoxi)etoxi)etoxi)propil)carbamoil)propoxi)2-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))pentiloxi)fenil)propanoico
99
Parte A
Preparación del 3-(6-(3-(N-(3-(2-(2-(3-((tert-Butoxi)carbonilamino)propoxi)etoxi)etoxi)propil)carbamoil)propoxi)2-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))pentiloxi)fenil)propanoato de metilo
100
Se trató una solución del ácido 4-(3-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))pentiloxi)-2-(2-(metoxicarbonil)etil)fenoxi)butanoico (100 mg, 0,167 mmol) en DMF anhidro (0,75 mL) con HBTU (90 mg, 0,237 mmol) bajo atmósfera de nitrógeno. La solución se agitó 5 minutos a temperatura ambiente y se trató con una solución de N-(3-(2-(2-(3-aminopropoxi)etoxi)etoxi)propil)(tert-butoxi)formamida (59 mg, 0,184 mmol) en DMF anhidra (0,75 mL), seguido por DIEA (73 mg, 0,418 mmol). La solución se agitó 3 horas a temperatura ambiente bajo nitrñogeno. La solución de la reacción se purificó directamente por HPLC preparativo utilizando una columna Vydac C-18 (22x250 mm) utilizando un gradiente de 1,80%/min de un 36 a un 90% de ACN a una velocidad de flujo de 15 mL/min. El pico del producto principal que eluyó a 33,9 minutos se recogió y se liofilizó para dar el compuesto del título como un aceite incoloro (105 mg, 69,7%). ^{1}H RMN (CDCl_{3}): 8,10-8,06 (m, 2 H), 7,70-7,62 (m, 2H), 7,56-7,35 (m 7H), 7,08 (t, J = 8,1 Hz, 1H), 6,89 (d, J = 1,2 Hz, 1H), 6,53-6,44(m, 3H), 4,95 (s, 1H), 4,51 (t, J = 6,5 Hz, 2H), 3,97 (q, J = 6,2 Hz, 2H), 3,62-3,45 (m, 15H), 3,33 (q, J = 6,2 Hz, 2H), 3,23-3,15 (m, 2H), 3,05-2,95 (m, 2H), 2,59-2,34 (m, 4H), 216-2,04 (m, 2H), 1,98-1,63 (m, 10H), 1,42 (s, 9H); MS: m/e 900,7 [M+H]; MS de alta resolución: Calculado para C_{51}H_{70}N_{3}O_{11} [M+H]: 900,5010, Encontrado: 900,5012.
Parte B
Preparación del ácido 3-(6-(3-(N-(3-(2-(2-(3-((tert-Butoxi)carbonilamino)propoxi)etoxi)etoxi)propil)carbamoil)propoxi)2-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))pentiloxi)fenil)propanoico
Se agitó a temperatura ambiente una mezcla del 3-(6-(3-(N-(3-(2-(2-(3-((tert-butoxi)carbonilamino)propoxi)etoxi)etoxi)propil)carbamoil)propoxi)2-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))pentiloxi)fenil)propanoato de metilo (107 mg, 0,119 mmol) y LiOH 3 M (0,57 mL, 1,72 mmol) en THF (5,8 mL) durante 4 días. Se eliminó el THF por evaporación al vacío y la mezcla resultante se trató con agua (20 mL). La mezcla acuosa se ajustó a pH=2 con HCl 1,0 N, y se extrajo con EtOAc (3x40 mL). Las fases orgánicas combinadas se lavaron consecutivamente con agua (20 mL) y NaCl saturado (20 mL), se secó (MgSO_{4}), y se concentró par dar el compuesto del título como un aceite incoloro (93,0 mg, 88,3%). MS: m/e 886,6 [M+H]; MS de alta resolución: Calculado para C_{50}H_{68}N_{3}O_{11} [M+H]: 886,4854, Encontrado: 886,4872.
Parte C
Preparación del ácido 3-(6-(3-(N-(3-(2-(2-(3-((6-((1-Aza-2-(2-sulfofenil)vinil)amino)(3-piridil))carbonilamino)propoxi)etoxi)etoxi)propil)carbamoil)propoxi)2-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))pentiloxi)fenil)propanoico
Se agitó una solución del ácido 3-(6-(3-(N-(3-(2-(2-(3-((tert-butoxi)carbonilamino)propoxi)etoxi)etoxi)propil)carbamoil)propoxi)2-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))pentiloxi)fenil)propanoico (89 mg, 0,100 mmol) en TFA (4 mL) bajo atmósfera de nitrógeno durante 60 minutos a temperatura ambiente. El TFA se eliminó por evaporación al vacío y el aceite resultante se disolvió en DMF (0,7 mL). Se añadió TEA hasta que la solución se hizo básica con papel de pH (106 uL, 0,76 mmol), y se añadió ácido 2-(2-aza-2-((5-((2,5-dioxopirrolidinil)carbonil)(2-piridil))amino)vinil)bencensulfónico (53,0 mg, 0,12 mmol). La solución resultante se agitó 17 horas a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno. La solución se purificó directamente por HPLC preparativo en una columna Vydac C-18 (22x250 mm) utilizando un gradiente de 1,80%/min de un 20 a un 80% de ACN que contenía NH_{4}OAc 0,05 M a una velocidad de flujo de 15 mL/min. El pico del producto principal que eluyó a 25,8 min se recogió y se liofilizó para dar el compuesto del título como un sólido incoloro (75,6 mg, 69%). MS: m/e 1087,5 [M-H]; MS de alta resolución: Calculado para C_{58}H_{69}N_{6}O_{13}S [M+H]: 1089,4643, Encontrado: 1089,4661.
Ejemplo 33 Síntesis del ácido 3-(6-(3-(N-(5-((6-((1-Aza-2-(2-sulfofenil)vinil)amino)(3-piridil))carbonilamino)-5-(N-(2,3,4,5,6-pentahidroxihexil)carbamoil)pentil)carbamoil)propoxi)2-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))pentiloxi)fenil)propanoico
101
Parte A
Preparación de la 2-((tert-Butoxi)carbonilamino)-N-(2,3,4,5,6-pentahidroxihexil)-6-((fenilmetoxi)carbonilamino)hexanamida
102
Se agitó una mezcla de 1-amino-1-deoxisorbitol (1,99 g, 11,0 mmol), Boc-Lys- (Z)-OSu (4,77 g, 10,0 mmol), TEA (0,556 g, 4,0 mmol), THF (50 mL), y agua (10 mL) a temperatura ambiente durante 2 horas seguido por concentración a un volumen de 10 mL. Se añadió agua (100 mL), y la mezcla se extrajo con EtOAc (3x 200 mL). Los extractos orgánicos combinados se lavaron consecutivamente con HCl 0,05 N (50 mL), agua (50 mL), y NaCl saturado (50 mL), se secó (MgSO_{4}) y se concentró por evaporación al vacío hasta que se empezaron a formar cristales. La mezcla se diluyó con éter, dando lugar a una cristalización adicional. Se recogió el sólido por filtración y se secó para dar el compuesto del título como cristales incoloros (1,08 g, 19,9%). ^{1}H RMN (CD_{3}OD): 7,41-7,26 (m, 5H), 5,09 (s, 2H), 4,05-3,94 (m, 2H), 3,88-3,45 (m, 7H), 3,14 (t, J = 6,6 Hz, 2H), 1,87-1,31 (m, 16H); MS: m/e 544,4 [M+H]; MS de alta resolución: Calculado para C_{25}H_{42}N_{3}O_{10} [M+H]: 544,2870, Encontrado: 544,2895.
Parte B
Preparación de la 6-Amino-2-((tert-butoxi)carbonilamino)-N-(2,3,4,5,6-pentahidroxihexil)hexanamida
Se disolvió la 2-((tert-Butoxi)carbonilamino)-N-(2,3,4,5,6-pentahidroxihexil)-6-((fenilmetoxi)carbonilamino)hexanamida (450 mg, 0,829 mmol) en MeOH (10 mL) y se hidrogenolizó sobre Pd/C al 10% (85 mg) a presión atmosférica durante 90 minutos. El catalizador se eliminó por filtración a través de un filtro y el filtrado se concentró a presión reducida para dar el compuesto del título como un aceite amarillo pálido (331 mg, 97,7%). MS: m/e 410,3 [M+H].
Parte C
Preparación del 3-(6-(3-(N-(5-((tert-Butoxi)carbonilamino)-5-(N- (2,3,4,5,6-pentahidroxihexil)carbamoil)pentil)carbamoil)propoxi)-2-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))pentiloxi)fenil)propanoato de metilo
103
Se preactivó una solución de ácido 4-(3-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))pentiloxi)-2-(2-(metoxicarbonil)etil)fenoxi)butanoico (90 mg, 0,152 mmol), y DIEA (66 uL, 0,380 mmol) en DMF anhidro (2 mL) con HBTU (69,2 mg, 0,182 mmol) durante 5 minutos a temperatura ambiente, y se trató luego con una solución de 6-amino-2-((tert-butoxi)carbonilamino)-N-(2,3,4,5,6-pentahidroxihexil)hexanamida (74,7 mg, 0,182 mmol) en DMF anhidra (2 mL). La solución se agitó a temperatura ambiente durante 45 minutos y se purificó directamente por HPLC preparativo en una columna Vydac C-18 (22x250 mm) utilizando un gradiente de 2,10%/min de un 27 a un 90% de ACN a una velocidad de flujo de 15 mL/min. El pico del producto principal que eluyó a 29,5 minutos se recogió y se liofilizó para dar el compuesto del título como un aceite incoloro (88 mg, 58,5%). MS: m/e 989,5 [M+H]; MS de alta resolución: Calculado para C_{53}H_{73}N_{4}O_{14} [M+H]: 989,5123, Encontrado: 989,5145.
Parte D
Preparación del ácido 3-(6-(3-(N-(5-Amino-5-(N-(2,3,4,5,6-pentahidroxihexil)carbamoil)pentil)carbamoil)propoxi)-2-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))pentiloxi)fenil)propanoico
Se agitó una mezcla del 3-(6-(3-(N-(5-((tert-butoxi)carbonilamino)-5-(N- (2,3,4,5,6-pentahidroxihexil)carbamoil)pentil)carbamoil)propoxi)-2-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))pentiloxi)fenil)propanoato de metilo (37 mg, 0,037 mmol) y 3M LiOH (181 uL) en THF (1,8 mL) a temperatura ambiente durante 3 horas y se concentró luego a sequedad al vacío. El residuo sólido se enfrió a-10ºC y se trató con TFA (4 mL). La solución resultante se agitó 60 minutos a temperatura ambiente y se concentró a presión reducida para dar la sal de TFA del compuesto del título como un aceite ámbar. MS: m/e 875,5 [M+H].
Parte E
Preparación del ácido 3-(6-(3-(N-(5-((6-((1-Aza-2-(2-sulfofenil)vinil)amino)(3-piridil))carbonilamino)-5-(N-(2,3,4,5,6-pentahidroxihexil)carbamoil)pentil)carbamoil)propoxi)-2-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))pentiloxi)fenil)propanoico
Se trató una solución de ácido 3-(6-(3-(N-(5-amino-5-(N-(2,3,4,5,6-pentahidroxihexil)carbamoil)pentil)carbamoil)propoxi)-2-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))pentiloxi)fenil)propanoico en DMF anhidro (0,5 mL) con TEA hasta que el papel de pH se hizo básico (57 uL, 0,41 mmol). Esta solución se trató con ácido 2-(2-aza-2-((5-((2,5-dioxopirrolidinil)carbonil)(2-piridil))amino)vinil)bencensulfónico (18,2 mg, 0,041 mmol) y se agitó a temperatura ambiente durante 17 horas bajo atmósfera de nitrógeno. La solución se diluyó con ACN al 180% (0,5 mL) y se purificó directamente por HPLC preparativo en una columna Vydac C-18 (22x250 mm) utilizando un gradiente de 1,80%/min de un 18 a un 72% de ACN que contenía NHOAc 0,05 M a una velocidad de flujo de 15 mL/minuto. El pico del producto principal que eluyó a 23 minutos se recogió y se liofilizó para dar el compuesto del título como un polvo incoloro (11,5 mg, 28,7%). MS: m/e 1176,7 [M-H]; MS de alta resolución: Calculado para C_{60}H_{72}N_{7}O_{16}S [M+H]: 1178,4756, Encontrado: 1178,4792.
Ejemplo 34 Síntesis del ácido 3-(6-(3-(N-(3-((6-((1-Aza-2-(2-sulfofenil)vinil)amino)(3-piridil))carbonilamino)propil)carbamoil)propoxi)-2-(5-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi))pentiloxi)fenil)propanoico
104
Parte A
Preparación del 4-(2-(2-(Metoxicarbonil)etil)-3-(5-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi))pentiloxi)fenoxi)butanoato de tert-butilo
105
Se agitó a temperatura ambiente una mezcla del 4-(2-(2-(metoxicarbonil)etil)-3- (5-(metilsulfoniloxi)pentiloxi)fenoxi)butanoato de tert-butilo (482 mg, 0,959 mmol), 6-hidroxi-5-prop-2-enil-2,3,4-trihidronaftalen-1-ona (204 mg, 1,01 mmol), y K_{2}CO_{3} anhidro (265 mg, 1,92 mmol) en DMSO anhidro (4,5 mL) bajo atmósfera de nitrógeno durante 67 horas. La mezcla de reacción se diluyó con ACN al 80% y se utilizó directamente para su purificación por HPLC en una columna Vydac C-18 (22x250 mm) utilizando un gradiente de 1,80%/min de un 36 a un 90% de ACN a una velocidad de flujo de 15 mL/min. El pico del producto principal que eluyó a 32 minutos se recogió y se liofilizó para dar el compuesto del título como un aceite amarillo pálido (330 mg, 57%). ^{1}H RMN (CDCl_{3}): 8,00 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 7,08 (t, J = 8,3 Hz, 1H), 6,83 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 6,48 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 5,95-5,78 (m, 1H), 5,00-4,84 (m, 2H), 4,05 (t, J = 6,2 Hz, 2H), 4,01-3,91 (m, 4H), 3,64 (s, 3H), 3,43 (d, J = 5,9 Hz, 2H), 2,98 (t, J = 8,2 Hz, 2H), 2,88 (t, J = 6,1 Hz, 2H), 2,57 (t, J = 6,5 Hz, 2H), 2,53-2,37 (m, 4H), 2,16-1,57 (m, 10H), 1,43 (s, 9H); MS: m/e 609,4 [M+H]; MS de alta resolución: Calculado para C_{36}H_{49}O_{8} [M+H]: 609,3427, Encontrado: 609,3398.
Parte B
Preparación del ácido 4-(2-(2-(Metoxicarbonil)etil)-3-(5-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi))pentiloxi)fenoxi)butanoico
Se agitó una solución de 4-(2-(2-(metoxicarbonil)etil)-3-(5-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi))pentiloxi)fenoxi)butanoato de tert-butilo (252 mg, 0,414 mmol) y anisol (90 uL, 0,823 mmol) en TFA (6 mL) 15 minutos a temperatura ambiente. El TFA se eliminó por evaporación al vacío, se disolvió el aceite resultante en ACN al 70% y se liofilizó para dar el compuesto del título como un polvo incoloro (224 mg, 97%). ^{1}H RMN (CDCl_{3}): 7,99 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 7,05 (t, J = 8,2 Hz, 1H), 6,83 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 6,48 (t, J = 8,2 Hz, 2H), 5,94-5,78 (m, 1H), 4,99-4,84 (m, 2H), 4,10-3,92 (m, 6H), 3,67 (s, 3H), 3,42 (d, J = 5,9 Hz, 2H), 3,01-2,84 (m, 4H), 2,62-2,42 (m, 6H), 2,22-2,01 (m, 4H), 1,95-1,80 (m, 4H), 1,73-1,59 (m, 2H); MS: m/e 553,3 [M+H]; MS de alta resolución: Calculado para C_{32}H_{37}O_{8} [M+H]: 553,2801, Encontrado: 553,2796.
\newpage
Parte C
Preparación del 3-(6-(3-(N-(3-((tert-Butoxi)carbonilamino)propil)carbamoil)propoxi)-2-(5-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi))pentiloxi)fenil)propanoato de metilo
106
Se preactivó una solución de ácido 4-(2-(2-(metoxicarbonil)etil)-3-(5-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi))pentiloxi)fenoxi)butanoico (110 mg, 0,191 mmol) en DMF anhidro (3 mL) por tratamiento con HBTU /79,7 mg, 0,21 mmol) durante 5 minutos a temperatura ambiente. Se añadió una solución de N-(3-aminopropil)(tert-butoxi)formamida (33,3 mg, 0,191 mmol) y DIEA (83 uL, 0,478 mmol) en DMF anhidra (1 mL) y se mantuvo la agitación a temperatura ambiente durante 15 minutos. Se eliminó la DMF por evaporación al vacío y el aceite amarillo resultante se trató con una mezcla de EtOAc (40 mL) y agua (30 mL). La fase acuosa se ajustó a pH=2 con HCl 0,2 N y las fases se mezclaron completamente. La fase orgánica se lavó consecutivamente con NaHCO_{3} saturado (30 mL), y NaCl saturado (2x30 mL), se secó (MgSO_{4}), y se concentró para dar el compuesto del título como un aceite amarillo pálido (129 mg, 95,3%). MS: m/e 709.4 [M+H].
Parte D
Preparación del ácido 3-(6-(3-(N-(3-((tert-Butoxi)carbonilamino)propil)carbamoil)propoxi)-2-(5-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi))pentiloxi)fenil)propanoico
Se agitó a temperatura ambiente una mezcla de 3-(6-(3-(N-(3-((tert-butoxi)carbonilamino)propil)carbamoil)propoxi)-2-(5-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi))pentiloxi)fenil)propanoato de metilo (105 mg, 0,148 mmol), y 3 M LiOH (0,72 mL) en THF (7,2 mL) durante 4 días y se concentró a sequedad al vacío. Se añadió agua (20 mL) al residuo aceitoso y se ajustó a pH=2,0 con HCl 1,0 N. La solución turbia se extrajo con EtOAc (3x40 mL). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con agua (20 mL) y con NaCl saturado (20 mL), se secaron (MgSO_{4}), y se concentró para dar el compuesto del título como un sólido incoloro (93,5 mg, 91%). MS: m/e 693,4 [M-H].
Parte E
Preparación del ácido 3-(6-(3-(N-(3-((6-((1-Aza-2-(2-sulfofenil)vinil)amino)(3-piridil))carbonilamino)propil)carbamoil)propoxi)-2-(5- (5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi))pentiloxi)fenil)propanoico
Se agitó a temperatura ambiente una solución de ácido 3-(6-(3-(N-(3-((tert-butoxi)carbonilamino)propil)carbamoil)propoxi)-2-(5-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi))pentiloxi)fenil)propanoico (72 mg, 0,104 mmol) en TFA (3 mL) durante 70 minutos y se concentró a un aceite viscoso a presión reducida. Este aceite se disolvió en DMF anhidro (0,7 mL) y se trató con TEA hasta que se hizo básica (58 uL, 0,415 mmol). Esta solución se trató con ácido 2-(2-aza-2- ((5-((2,5-dioxopirrolidinil)carbonil)(2-piridil))amino)vinil)bencensulfónico (55 mg, 0,125 mmol) y se agitó a temperatura ambiente durante 16 horas bajo atmósfera de nitrógeno. La solución se diluyó con ACN al 80% (0,7 mL) y se purificó directamente por HPLC preparativo en una columna Vydac C-18 (22x250 mm) utilizando un gradiente de 1,80%/min de un 18 a un 72% de ACN que contenía NH_{4}OAc 0,05 M a una velocidad de flujo de 15 mL/min. El pico del producto principal que eluyó a 20,7 minutos se recogió y se liofilizó para dar el compuesto del título como un polvo incoloro (52 mg, 57%). MS: m/e 896,4 [M-H]; MS de alta resolución: Calculado para C_{47}H_{56}N_{5}O_{11}S [M+H]: 898,3697, Encontrado: 898,3699.
Ejemplo 35 Síntesis del ácido 3-(6-(3-N-(2-(2-(2-(2-(2-(2-(2-(2-((6-((1-Aza-2-(2-sulfofenil)vinil)amino)(3-piridil)) carbonilamino)etoxi)etoxi)etoxi)etoxi)etoxi)etoxi)etoxi)etil)carbamoil) propoxi)-2-(5-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi)) pentiloxi)fenil)propanoico
107
Parte A
Preparación del 3-(6-(3-N-(2-(2-(2-(2-(2-(2-(2-(2-((tert-Butoxi)carbonilamino)etoxi)etoxi)etoxi)etoxi)etoxi)etoxi)etoxi)etil)carbamoil) propoxi)-2-(5-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi))pentiloxi)fenil)propanoato de metilo
108
Se trató una solución de ácido 4-(2-(2-(metoxicarbonil)etil)-3-(5-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi))pentiloxi)fenoxi)butanoico (80 mg, 0,139 mmol) en DMF anhidro (1 mL) con HBTU (58 mg, 0,152 mmol). Después de 5 minutos se añadió una solución de N-(2-(2-(2-(2-(2-(2-(2-(2-aminoetoxi)etoxi)etoxi)etoxi)etoxi)etoxi)etoxi)etil)(tert-butoxi)formamida (71,2 mg, 0,152 mmol) y DIEA (60,5 uL, 0,348 mmol) en DMF anhidro (2 mL) y la solución resultante se agitó a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno durante 15 minutos. Se eliminó la DMF por evaporación al vacío y el aceite resultante se disolvió en una mezcla de EtOAc (40 mL) y agua (30 mL). La fase acuosa se ajustó a pH=2,0 con HCl 0,2 N y las fases se mezclaron completamente. La fase orgánica se lavó consecutivamente con NaHCO_{3} saturado (30 mL), y NaCl saturado (2x30 mL), se secó (MgSO_{4}), y se concentró para dar el compuesto del título como un aceite incoloro (114 mg, 81,7%). MS: m/e 1020,7 [M+NH_{4}].
Parte B
Preparación del ácido 3-(6-(3-N-(2-(2-(2-(2-(2-(2-(2-(2-((tert-Butoxi)carbonilamino)etoxi)etoxi)etoxi)etoxi)etoxi) etoxi)etoxi)etil)carbamoil)propoxi)-2-(5-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi))pentiloxi)fenil)propanoico
109
Se agitó a temperatura ambiente una mezcla de 3-(6-(3-N-(2-(2-(2-(2-(2-(2-(2- (2-((tert-butoxi)carbonilamino)etoxi)etoxi)etoxi)etoxi)etoxi)etoxi)etoxi)etil)carbamoil)pr opoxi)-2-(5-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi))pentiloxi)fenil)propanoato de metilo (110 mg, 0,11 mmol) y 3 M LiOH (0,53 mL, 1,59 mmol) en THF (5,3 mL) bajo atmósfera de nitrógeno durante 3 días y se concentró a sequedad a presión reducida. Se añadió agua (20 mL) a la mezcla y se ajustó a pH=2,0 utilizando HCl 1,0 N. La mezcla se extrajo con EtOAc (3x40 mL). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con agua (20 mL) y con NaCl saturado (20 mL), se secó (MgSO_{4}), y se concentró para dar el compuesto del título como un aceite incoloro (93 mg, 85,8%). MS: m/e 1006,7 [M+NH_{4}].
Parte C
Preparación del ácido 3-(6-(3-N-(2-(2-(2-(2-(2-(2-(2-(2-((6-((1-Aza-2- (2-sulfofenil)vinil)amino)(3-piridil)) carbonilamino)etoxi)etoxi)etoxi)etoxi)etoxi)etoxi)etoxi)etil)carbamoil) propoxi)-2-(5-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi)) pentiloxi)fenil)propanoico
Se agitó a temperatura ambiente una solución de ácido 3-(6-(3-N-(2-(2-(2-(2-(2- (2-(2-(2-((tert-butoxi)carbonilamino)etoxi)etoxi)etoxi)etoxi)etoxi)etoxi)etoxi)etil)carbamoil)pr opoxi)-2-(5-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi))pentiloxi)fenil)propanoico (83 mg, 0,084 mmol) en TFA (4 mL) bajo atmósfera de nitrógeno durante 60 minutos. El TFA se eliminó a presión reducida para dar un aceite ámbar. Este aceite se disolvió en DMF anhidro (0,7 mL) y se trató con TEA hasta que se hizo básico con papel de pH (71 uL, 0,511 mmol). Se trató esta solución con ácido 2-(2-aza-2-((5-((2,5-dioxopirrolidinil)carbonil)(2-piridil))amino)vinil)bencensulfónico (45 mg, 0,102 mmol) y se agitó a temperatura ambiente durante 19 horas bajo atmósfera de nitrógeno. La solución se diluyó con ACN al 80% (0,7 mL) y se purificó directamente por HPLC preparativo en una columna Vydac C-18 (22x250 mm) utilizando un gradiente de 1,80%/min de un 18 a un 72% de ACN que contenía NH_{4}OAc 0,05 M a una velocidad de flujo de 15 mL/min. El pico del producto principal se recogió y se liofilizó para dar el compuesto del título como un polvo incoloro (64 mg, 63%). MS: m/e 1209,7 [M+NH_{4}]; MS de alta resolución: Calculado para C_{60}H_{82}N_{5}O_{18}S [M+H]: 1192,5376, Encontrado: 1192,5394.
Ejemplo 36 Síntesis del ácido 3-(6-(3-N-(5-((6-((1-Aza-2-(2-sulfofenil)vinil)amino)(3-piridil))carbonilamino)-5-(N-(2,3,4,5,6-pentahidroxihexil)carbamoil)pentil)carbamoil)propoxi-2-(5-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi))pentiloxi)fenil)propanoico
110
Parte A
Preparación del 3-(6-(3-N-(5-((tert-Butoxi)carbonilamino)-5-(N- (2,3,4,5,6-pentahidroxihexil)carbamoil)pentil)carbamoil)propoxi-2-(5-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi))pentiloxi)fenil)propanoato de metilo
111
Se trató una solución de ácido 4-(2-(2-(metoxicarbonil)etil)-3-(5-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi))pentiloxi)fenoxi)butanoico (55 mg, 0,096 mmol) en DMF anhidra (0,8 mL) con HBTU (43,5 mg, 0,115 mmol) y la solución se agitó a temperatura ambiente durante 5 minutos. Se añadió a esta solución 6-amino-2-((tert-butoxi)carbonilamino)-N-(2,3,4,5,6-pentahidroxihexil)hexanamida (47 mg, 0,115 mmol) y DIEA (42 uL, 0,239 mmol) en DMF anhidra (0,8 mL) y se mantuvo la agitación a temperatura ambiente durante 45 minutos. La solución se concentró al 25% de su volumen original y se diluyó con ACN al 80% (1,2 mL). Esta solución se purificó directamente por HPLC preparativo en una columna Vydac C-18 (22x250 mm) utilizando un gradiente de 2,10%/min de un 27 a un 90% de ACN a una velocidad de flujo de 15 mL/min. El pico del producto principal que eluyó a 22,1 minutos se recogió y se liofilizó para dar el compuesto del título como un polvo incoloro (70 mg, 77,5%). ^{1}H RMN (CDCl_{3}): 7,98 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,25 (s, 1H), 7,07 (t, J = 8,4 Hz, 1H), 6,90 (s, 1H), 6,83 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 6,47 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 5,94-5,77 (m, 2H), 4,98-4,84 (m, 2H), 4,40-3,10 (m, 27H), 3,05-2,81 (m, 4H), 2,61-2,36(m, 6H), 2,16-1,98 (m, 4H), 1,94-1,25 (m, 21H); MS: m/e 961,6 [M+NH_{4}]; MS de alta resolución: Calculado para C_{49}H_{74}N_{3}O_{15} [M+H]: 944,5120, Encontrado: 944,5117.
Parte B
Preparación del ácido 3-(6-(3-N-(5-((6-((1-Aza-2-(2-sulfofenil)vinil)amino)(3-piridil))carbonilamino)-5-(N-(2,3,4, 5,6-pentahidroxihexil)carbamoil)pentil)carbamoil)propoxi-2-(5-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi)) pentiloxi)fenil)propanoico
Se agitó a temperatura ambiente una mezcla de 3-(6-(3-N-(5-((tert-butoxi)carbonilamino)-5-(N-(2,3,4,5,6-pentahidroxihexil)carbamoil)pentil)carbamoil)propoxi-2-(5-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi))pentiloxi)fenil)propanoato de metilo (55 mg, 0,058 mmol) y 3 M LiOH (280 uL) en THF (2.8 mL) duramnte 2,5 horas y se concentró a sequedad a presión reducida. La presencia del producto de hidrólisis esperado se confirmó por espectroscopia de masas de baja resolución. MS: m/e 928,5 [M-H].
Se enfrió el sólido resultante de la hidrólisis anterior a 0ºC, se disolvió en TFA (5mL), y se agitó a temperatura ambiente 25 minutos. Se eliminó el TFA a presión reducida y el aceite ámbar resultante se utilizó directamente en la próxima reacción.
Se disolvió el aceite en DMF anhidro (0,75 mL) y se añadió TEA (49 uL, 0,35 mmol) y el papel de pH se hizo básico. La solución se trató con ácido 2-(2-aza-2-((5-((2,5-dioxopirrolidinil)carbonil)(2-piridil))amino)vinil)bencensulfónico (31 mg, 0,070 mmol) y se agitó a temperatura ambiente durante 22 horas. La solución se diluyó con ACN al 80% (0,75 mL) y se purificó directamente por HPLC preparativo en una columna Vydac C-18 (22x250 mm) utilizando un gradiente de 1,80%/min de un 18 a un 72% de ACN que contenía NH_{4}OAc 0,05M a una velocidad de flujo de 15 mL/min. El pico del producto principal que eluyó a 18,7 minutos se recogió y se liofilizó para dar el compuesto del título como un polvo amarillo pálido (31,5 mg, 47,7%). MS: m/e 1131,7 [M-H]; MS de alta resolución: Calculado para C_{56}H_{73}N_{6}O_{17}S [M+H]: 1133,4753, Encontrado: 1133,4722.
Ejemplo 37 Síntesis del ácido 3-(6-(3-N-(5-((6-((1-Aza-2-(2-sulfofenil)vinil)amino)(3-piridil))carbonilamino)-5-(N-(6-deoxi-\beta-ciclodextril)carbamoil)pentil)carbamoil)propoxi-2-(5-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi))pentiloxi)fenil)propanoico
112 
\newpage
Parte A
Preparación del 3-(6-(3-N-(5-((tert-Butoxi)carbonilamino)-5-(N-(6-deoxi-\beta-ciclodextril)carbamoil)pentil)carbamoil)propoxi-2-(5-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi))pentiloxi)fenil)propanoato de metilo
113
Se preactivó una solución de ácido 4-(2-(2-(metoxicarbonil)etil)-3-(5-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi))pentiloxi)fenoxi)butanoico (21,3 mg, 0,0386 mmol) en DMF anhidro (1,0 mL) con HBTU (14,6 mg, 0,0386 mmol) y TEA (80 uL, 0,579 mmo) durante 5 minutos a temperatura ambiente. Se añadió una solución de 6-amino-2-((tert-butoxi)carbonilamino)-N-(6-deoxi-\beta-ciclodextril)hexanamida (52,5 mg, 0,0386 mmol) en DMF (1,5 mL) y se mantuvo la agitación durante 17 horas a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno. La DMF se eliminó por evaporación al vacío y el sólido incoloro resultante (90 mg) se disolvió en una combinación de ACN al 80% (800 uL), MeOH (200 uL) y DMF (300 uL). Esta solución se purificó por HPLC preparativo en una columna Vydac 
\hbox{C-18}
(22x250 mm) utilizando un gradiente de 1,80%/min de un 18 a un 72% de ACN a una velocidad de flujo de 15 mL/min. El pico del producto principal que eluyó a 24,2 minutos se recogió y se liofilizó para dar el compuesto del título como un polvo incoloro (28,2 mg, 38,5%). MS: 1897,0 [M+H].
Parte B
Preparación del ácido 3-(6-(3-N-(5-((6-((1-Aza-2-(2-sulfofenil)vinil)amino)(3-piridil))carbonilamino)-5-(N-(6-deoxi-\beta-ciclodextril)carbamoil)pentil)carbamoil)propoxi-2-(5-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi))pentiloxi)fenil)propanoico
Se agitó a temperatura ambiente una mezcla de 3-(6-(3-N-(5-((tert-butoxi)carbonilamino)-5-(N-(6-deoxi-\beta-ciclodextril)carbamoil)pentil)carbamoil)propoxi-2-(5-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi))pentiloxi)fenil)propanoato de metilo (28,2 mg, 0,0149 mmol) y 3 N LiOH (138 uL, 0,416 mmol) en THF bajo nitrógeno durante 4,5 horas. Esta solución se concentró y el sólido incoloro se disolvió en TFA (3 mL), y se agitó a temperatura ambiente bajo nitrógeno durante 1,5 horas. El TFA se eliminó para dar el ácido 3-(6-(3-N-(5-amino-5-(N-(6-deoxi-\beta-ciclodextril)carbamoil)pentil)carbamoil)propoxi-2-(5-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi))pentiloxi)fenil)propanoico como un aceite rosa (35,4 mg).
El aceite anterior se disolvió en DMF anhidro (500 uL), se añadió TEA (130 uL) y el papel de pH se hizo básico, y se trató con ácido 2-(2-aza-2-((5-((2,5-dioxopirrolidinil)carbonil)(2-piridil))amino)vinil)bencensulfónico (20,1 mg, 0,0444 mmol). Esta solución se agitó bajo atmósfera de nitrógeno a temperatura ambiente durante 7 días. La muestra se concentró a presión reducida, el residuo aceitoso se disolvió en ACN al 50% (1,5 mL) y se purificó por HPLC preparativo en una columna Vydac C-18 (22x250 mm) utilizando un gradiente de 1,50% /min de un 18 a un 63% de ACN que contenía NH_{4}OAc 0,05M a una velocidad de flujo de 15 mL/min. El pico del producto principal que eluyó a 18,4 minutos se recogió y se liofilizó para dar el compuesto del título como un polvo incoloro (1,0 mg, 3,22%). MS: 1041,7 [M-2H].
Ejemplo 38 Síntesis del ácido 3-(6-(3-(N-(3-((6-((1-Aza-2-(2-sulfofenil)vinil)amino)(3-piridil))-Gli-Lys-Lys-Lys)aminopropil)carbamoil)propoxi)-2-(5-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi))pentiloxi)fenil)propanoico
114
Parte A
Preparación de Boc-Gli-Lys(Dde)-Lys(Dde)-Lys(Dde)-OH
Se añadió resina HMPB-BHA (9,0 g, nivel de substitución=0,86 mmol/g) a un matraz de reacción peptídico de 250 mL. La resina se pre-lavó con DMF anhidro (3x100 mL). La resina se suspendió en DMF (60 mL), se trató con Fmoc-Lys(Dde)-OH (8,25 g, 15,5 mmol), y después de un mezclado suave durante 15 minutos se trató con piridina anhidra (2,1 mL, 25,5 mmol) y con cloruro de 2,6-diclorobenzoilo (2,36 mL, 15,5 mmol). La mezcla se agitó suavemente a temperatura ambiente durante 22 horas y la resina se lavó completamente con porciones de 180 mL de DMF (3x), MeOH (1x), DCM (3x), MeOH (2x), y DCM (3x). El nivel de substitución se determinó para que fuese0,73 mmol/g por el test del aducto de fulveno-piperidina. Los grupos de hidroxilo que no reaccionaron se bloquearon por tratamiento con cloruro de benzoilo (3 mL) y piridina (3 mL) en DCM durante 2 horas, y la resina se lavó con porciones de 180 mL de DCM (3x), MeOH (1x), DCM (3x), MeOH (2x) y DCM (3x).
Los siguientes pasos se realizaron después: (Paso 1) la resina se lavó con porciones de 70 mL de DMF (3x). (Paso 2) La resina se lavó con 80 mL de piperidina al 20% en DMF y el grupo Fmoc se eliminó utilizando 80 mL de piperidina al 20% en DCM durante 30 minutos. (Paso 3) la resina se lavó completamente con porciones de 180 mL de DCM (3x), MeOH (1x), DCM (2x), MeOH(3x) y DMF (3x). (Paso 4) Se añadieron a la resina Fmoc-Lys(Dde)-OH (8,0 g, 15 mmol), HATU (5,7 g, 15 mmol), DIEA (5,0 ml, 28 mmol), y DMF (70 ml) y la se dejó proseguir la reacción durante 18 horas. (Paso 5) Se monitorizó la finalización de la reacción de acoplamient por el test de ninhidrina. Se repitieron los Pasos 1-5 hasta que se había conseguido la sequencia deseada. La resina se lavó completamente con porciones de 180 mL de DCM (3x), MeOH (1x), DCM (2x), MeOH(3x) y DCM (3x) y se secó a presión reducida para dar 15,1 g de un sólido marrón.
EL péptido lineal completamente protegido se separó de la resina utilizando un 1% de TFA. Se colocó el péptido-resina (3,0 g) en un matraz de vidrio sinterizado y se lavó con DCM (30 mL) para inflar la resina. La resina se trató con TFA al 1% en DCM (30 mL) durante 2 minutos y se filtró directamente en piridina al 10% en MeOH (4 mL). Este procedimiento se repitió hasta que todo el peptido deseado se había separado de la resina. Los filtrados se monitorizaron por TLC (sílica gel, CHCl_{3}:MeOH, 10:1) teniendo el producto peptídico un Rf=0,75. Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se concentraron para dar un aceite espeso. La trituración con éter (3x100 mL) dió un sólido naranja (1,5 g). La purificación se llevó a cabo utilizando HPLC de fase reversa en una columna Vydac C-18 (22x250 mm) utilizando un gradiente de 2,10%/min de un 18 a un 81% de ACN a una velocidad de flujo de 15 mL/min. EL pico del producto principal que eluyó a 22,7 minutos se recogió y se liofilizó para dar el compuesto del título como un sólido incoloro (350 mg, 35%). MS: m/e 1069,6 [M+NH_{4}].
Parte B
Preparación del 3-(6-(3-(N-(3-(tert-Butoxicarbonil-Gli-Lys(Dde)-Lys(Dde)-Lys(Dde))aminopropil)carbamoil)propoxi)-2-(5-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi))pentiloxi)fenil)propanoato de metilo
115
Se disolvió en TFA (2 mL) el 3-(6-(3-(N-(3-((tert-butoxi)carbonilamino)propil)carbamoil)propoxi)-2-(5-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi))pentiloxi)fenil)propanoato de metilo (100 mg, 0,141 mmol) y se agitó a temperatura ambiente durante 20 minutos. El TFA se eliminó a presión reducida para dar un aceite amarillo pálido. Este aceite se disolvió en DMF anhidra (1,5 mL) y se preactivó por adición de HBTU (58,8 mg, 0,155 mmol). Después de 5 minutos la solución se trató con una solución de Boc-Gli-Lys(Dde)-Lys(Dde)-Lys(Dde)-OH (148 mg, 0,141 mmol) y DIEA (147 uL, 0,89 mmol) en DMF (1,5 mL). Después de 10 minutos a temperatura ambiente se eliminó la DMF y se disolvió el aceite amarillo pálido en una mezcla de EtOAc (50 mL) y agua (40 mL). La fase acuosa se ajustó a pH=2,0 utilizando HCl 0,2 N y las fases se mezclaron completamente. La fase orgánica se lavó consecutivamente con NaHCO_{3} saturado (5 mL) y NaCl saturado (2x4 mL), se secó (MgSO_{4}) y se concentró para dar un sólido incoloro (155 mg). Este sólido se purificó por HPLC preparativo en una columna Vydac C-18 (22x250 mm) utilizando un gradiente de 1,80%/min de un 36 a un 90% de ACN a una velocidad de flujo de 15 mL/min. El pico del producto principal que eluyó a 27,3 minutos se recogió y se liofilizó para dar el compuesto del título como un sólido incoloro. ^{1}H RMN (CDCl_{3}): 13,40-13,17 (m, 3H), 7,97 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,82 (s, 1H), 7,55 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,04 (t, J = 8,3 Hz, 1H), 6,97 (s, 1H), 6,90-6,70 (m, 2H), 6,47 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 6,00-5,75 (, 2H), 4,95-4,80 (m 2H), 4,29 (s, 3H), 4,15-3,90 (m, 6H), 3,90-3,55 (m, 5H), 3,55-3,10 (m, 11H), 3,10-2,75 (m, 4H), 2,75-2,20 (m, 29H), 2,20-1,25 (m, 39H), 1,25-0,90 (m, 18H); MS: m/e 1660,9 [M+NH_{4}]; MS de alta resolución: Calculado para C_{90}H_{132}N_{9}O_{19} [M+H]: 1642,9640, Encontrado: 1642,9602;.
Parte C
Preparación del ácido 3-(6-(3-(N-(3-((6-((1-Aza-2-(2-sulfofenil)vinil)amino)(3-piridil))-Gli-Lys-Lys-Lys)aminopropil)carbamoil)propoxi)-2-(5-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi))pentiloxi)fenil)propanoico
Se disolvió en TFA (3 mL) el 3-(6-(3-(N-(3-(tert-butoxicarbonil-Gli-Lys(Dde)-Lys(Dde)-Lys(Dde))aminopropil)carbamoil)propoxi)-2-(5-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi))pentiloxi)fenil)propanoato de metilo (37 mg, 0,0225 mmol) y se agitó a temperatura ambiente durante 15 minutos. Se eliminó el TFA al vacío y el residuo aceitoso se trató en DMF anhidro (0,5 mL) y se añadió TEA (19 uL, 0,135 mmol) y el papel de pH se hizo básico. La solución se trató con ácido 2-(2-aza-2-((5-((2,5-dioxopirrolidinil)carbonil)(2-piridil))amino)vinil)bencensulfónico (10,9 mg, 0,025 mmol) y se agitó a temperatura ambiente durante 20 horas. La DMF se eliminó al vacío. El residuo se mezcló en LiOH 3 M (110 uL) y THF (1,1 mL) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 21 horas. Se eliminó el THF por evaporación al vacío, se disolvió la mezcla en ACN al 50% (1,0 mL) y se ajustó hasta pH=7,0 con ácido acético. La solución se purificó por HPLC preparativo en una columna Vydac C-18 (22x250 mm) utilizando un gradiente de 1,80%/min de un 18 a un 72% de ACN que contenía NH_{4}OAc 0,05 M a una velocidad de flujo de 15 mL/min. El pico del producto principal que eluyó a 18,6 minutos se recogió y se liofilizó par dar el compuesto del título como un polvo incoloro (10 mg, 35%). MS: m/e 1339,6 [M+H].
Ejemplo 39 Síntesis de la hidrazona de la 2-Sulfobenzaldehido (E)-N-[3-(6-Hidrazinonicotinamido)propil]-3-[6-[[(2,6-diclorofenil)tio]metil]-3-(2-feniletoxi)-2-piridinil]-2-propenamida
116
Parte A
Síntesis de la (E)-N-[N-(tert-Butiloxicarbonil)-3-aminopropil]-3-[6- [[(2,6-diclorofenil)tio]metil]-3-(2-feniletoxi)-2-piridinil]-2-propenamida
117
Se añadió diisopropiletilamina (2,00 mL, 11,48 mmol) a una solución de ácido (E)-3-[6-[[(2,6-diclorofenil)tio]metil]-3-(2-feniletoxi)-2-piridinil]-2-propenoico (702 mg, 1,52 mmol), N-(3-aminopropil)carbamato de tert-butilo (341 mg, 1,96 mmol), y TBTU (596 mg, 1,86 mmol) en DMF (10 ml). La mezcla de reacción se dejó agitar a temperatura ambiente durante 3 horas, se concentró, se diluyó con EtOAc, se lavó con agua, con NaHCO_{3} saturado, sal, se secó (Na_{2}SO_{4}) y se concentró. El residuo se purificó por cromatografía en columna (sílica gel) utilizando EtOAc:CH_{2}Cl_{3} 3:1. Se recuperó el compuesto del título (805 mg, 86%) como una espuma seca blanca. ^{1}H RMN (D_{6}-DMSO) 8,18 (br t, NH), 7,63 (d, =CH), 7,51 (d, 2Ar-H), 7,45-7,10 (m, 8 Ar-H), 6,85 (m, NH), 6,79 (d, =CH), 4,23 (t, CH_{2}O), 4,15 (s, CH_{2}S), 3,16 (q, CH_{2}N), 3,07 (t, CH_{2}Ph), 2,95 (q, CH_{2}N), 1,57 (quintuplete, CH_{2}), 1,38 (s, t-Bu); ES-MS: [M+H]^{+} = 616,2; FAB-HRMS: [M+H]^{+} = 616,1815 (Calculado para C_{31}H_{36}Cl_{2}N_{3}O_{4}S = 616,1804).
Parte B
Síntesis de la hidrazona de la 2-Sulfobenzaldehido (E)-N-[3-(6-Hidrazinonicotinamido)propil]-3-[6-[[(2,6-diclorofenil)tio]metil]-3-(2-feniletoxi)-2-piridinil]-2-propenamida
Se añadió TFA (4 mL, 51,92 mmol) a una solución de (E)-N-[N-(tert-Butiloxicarbonil)-3-aminopropil]-3-[6-[[(2,6-diclorofenil)tio]metil]-3-(2-feniletoxi)-2-piridinil]-2-propenamida (502 mg, 0,81 mmol) en CH_{2}Cl_{2} (8 ml). La mezcla de reacción se dejó agitar a temperatura ambiente durante toda la noche, luego se concentró, se diluyó con CH_{2}Cl_{2}, se concentró, y se secó al alto vacío durante 3 horas.
El residuo crudo y la hidrazona del succinimidil 2-sulfobenzaldehido 6-hidrazinonicotinato (410 mg, 0,93 mmol) se disolvieron en DMF DMF (5 ml), seguido por adición de Et_{3}N (1 ml, 7,18 mmol). La mezcla de reacción se dejó agitar a temperatura ambiente durante 24 horas, y se concentró para proporcionar un aceite oscuro. La purificación de una porción del producto crudo se llevó a cabo por HPLC de fase reversa en una columna preparativa Vydac C-18 (2,5x25 cm) utilizando un gradiente de un 40 a un 100% de una solución B (90% de acetonitrilo/10% NH_{4}Oac 0,05M) durante 30 minutos, y una solución A (100% de NH_{4}OAc 0,05M) para dar el compuesto del título (306 mg) como un polvo amarillo pálido. Los datos espectroscópicos del RMN de protón indicaron la presencia de algunas sales de trietilamonio, por consiguiente, se puso en funcionamiento un segundo HPLC preparativo con idénticas condiciones para proporcionar el compuesto del título (126 mg) como un polvo amarillo pálido. ^{1}H RMN (D_{6}-DMSO) 11,75 (br s, OH), 9,15 (br s, NH), 8,58 (s, 1H), 8,50 (br s, 1H), 8,27 (t, 1H), 8,15 (m, 2H), 7,80 (d, 1H), 7,64 (d, =CH), 7,55-7,00 (m, 15H), 6,90 (s, 1H), 6,81 (d, =CH),4,23 (t, CH_{2}O), 4,15 (s, CH_{2}S), 3,31 (m, 2CH_{2}N), 3,07 (t, CH_{2}Ph), 1,74 (quintuplete, CH_{2}); ES-MS: [M-H]^{-} = 817,2; FAB-HRMS: [M+H]^{+} = 819,1577 (Calculado para C_{39}H_{37}Cl_{2}N_{6}O_{6}S_{2} = 819,1593).
Ejemplo 40 Síntesis de la hidrazona de la 2-Sulfobenzaldehido (E)-N-[3-(6-Hidrazinonicotinamido)propil]-3-[6-[(feniltio)metil]-3-(2-feniletoxi)-2-piridinil]-2-propenamida
118
Parte A
Síntesis de la (E)-N-[N-(tert-Butiloxicarbonil)-3-aminopropil]-3-[6- [(feniltio)metil]-3-(2-feniletoxi)-2-piridinil]-2-propenamida
119
El compuesto del título se preparó por el procedimiento general descrito anteriormente para la (E)-N-[N-(tert-Butiloxicarbonil)-3-aminopropil]-3-[6- [[(2,6-diclorofenil)tio]metil]-3-(2-feniletoxi)-2-piridinil]-2-propenamida, substituyendo el ácido (E)-3-[6-[(feniltio)metil]-3-(2-feniletoxi)-2-piridinil]-2-propenoico. Se recuperó el compuesto del título (773 mg, 98%) como un sólido amarillo pálido que se utilizó sin una purificación adicional. ^{1}H RMN (D_{6}-DMSO) 8,30 (br t, NH), 7,71 (d, =CH), 7,48 (d, Ar-H), 7,40-7,10 (m, 11 Ar-H), 7,03 (d, =CH), 6,80 (t, NH), 4,28 (s, CH_{2}S), 4,25 (t, CH_{2}O), 3,17 (q, CH_{2}N), 3,08 (t, CH_{2}Ph), 2,96 (m, CH_{2}N), 1,57 (quintuplete, CH_{2}), 1,38 (s, t-Bu); ES-MS: [M+H]^{+} = 548,3.
Parte B
Síntesis de la hidrazona de la 2-Sulfobenzaldehido (E)-N-[3-(6-Hidrazinonicotinamido)propil]-3-[6-[(feniltio)metil]-3-(2-feniletoxi)-2-piridinil]-2-propenamida
El compuesto del título se preparó por el procedimiento general descrito anteriormente para la hidrazona de la 2-Sulfobenzaldehido (E)-N-[3-(6-Hidrazinonicotinamida)propil]-3-[6-[[(2,6-diclorofenil)tio]metil]-3-(2-feniletoxi)-2-piridinil]-2-propenamida, substituyendo la (E)-N-[N-(tert-Butiloxicarbonil)-3-aminopropil]-3-[6-[(feniltio)metil]-3-(2-feniletoxi)-2-piridinil]-2-propenamida.
La purificación de una porción del producto crudo se llevó a cabo por HPLC de fase reversa en una columna preparativa Vydac C-18 (2,5x25 cm) utilizando un gradiente de un 40 a un 100% de una solución B (90% de acetonitrilo/10% de NH_{4}OAc 0,05M) durante 30 minutos, y una solución A (100% de NH_{4}OAc 0,05M) para dar el compuesto del título como un polvo amarillo pálido. ^{1}H RMN (D_{6}-DMSO) 11,75 (br s, OH), 9,11 (br s, NH), 8,63 (s, 1H), 8,50 (br s, 1H), 8,39 (t, 1H), 8,12 (m, 2H), 7,81 (d, 1H), 7,74 (d, =CH), 7,50-7,00 (m, 18H), 6,91 (s, 1H), 4,28 (s, CH_{2}S), 4,25 (t, CH_{2}O), 3,34 (m, 2CH_{2}N), 3,08 (t, CH_{2}Ph), 1,75 (quintuplete, CH_{2}); ES-MS: [M+H]^{+} = 751,4; FAB-HRMS: [M+H]^{+} = 751,2357 (Calculado para C_{39}H_{39}N_{6}O_{6}S_{2} = 751,2372).
Ejemplo 41 Síntesis de la hidrazona de la 2-Sulfobenzaldehido (E)-N-[3-(6-Hidrazinonicotinamido)propil]-3-[6-[[(2-clorofenil)tio]metil]-3-(2-feniletoxi)-2-piridinil]-2-propenamida
120
Parte A
Síntesis de la (E)-N-[N-(tert-Butiloxicarbonil)-3-aminopropil]-3-[6- [[(2-clorofenil)tio]metil]-3-(2-feniletoxi)-2-piridinil]-2-propenamida
121
El compuesto del título se preparaó por el procedimiento general descrito anteriormente para la (E)-N-[N-(tert-Butiloxicarbonil)-3-aminopropil]-3-[6- [[(2,6-diclorofenil)tio]metil]-3-(2-feniletoxi)-2-piridinil]-2-propenamida, substituyendo el ácido (E)-3-[6-[[(2-clorofenil)tio]metil]-3-(2-feniletoxi)-2-piridinil]-2-propenoico. Se recuperó el compuesto del título (847 mg, 97%) como una espuma seca rojiza pálida que se utilizó sin purificación adicional. ^{1}H RMN (D_{6}-DMSO) 8,31 (br t, NH), 7,72 (d, =CH), 7,55-7,40 (m, 4Ar-H), 7,40-7,10 (m, 7 Ar-H), 7,04 (d, =CH), 6,85 (t, NH), 4,33 (s, CH_{2}S), 4,26 (t, CH_{2}O), 3,17 (q, CH_{2}N), 3,09 (t, CH_{2}Ph), 2,96 (m, CH_{2}N), 1,57 (quintuplete, CH_{2}), 1,38 (s, t-Bu); ES-MS: [M+H]^{+} = 582,3.
Parte B
Síntesis de la hidrazona de la 2-Sulfobenzaldehido (E)-N-[3-(6-Hidrazinonicotinamido)propil]-3-[6-[[(2-clorofenil)tio]metil]-3-(2-feniletoxi)-2-piridinil]-2-propenamida
El compuesto del título se preparó por el procedimiento general descrito anteriormente para la hidrazona de la 2-Sulfobenzaldehido (E)-N-[3-(6-Hidrazinonicotinamida)propil]-3-[6-[[(2,6-diclorofenil)tio]metil]-3-(2-feniletoxi)-2-piridinil]-2-propenamida, substituyendo la (E)-N-[N-(tert-Butiloxicarbonil)-3-aminopropil]-3-[6-[[(2-clorofenil)tio]metil]-3-(2-feniletoxi)-2-piridinil]-2-propenamida.
La purificación de una porción del producto crudo se llevó a cabo por HPLC de fase reversa en una columna preparativa Vydac C-18 (2,5x25 cm) utilizando un gradiente de un 40 a un 100% de una solución B (90% de acetonitrilo/10% de NH_{4}OAc 0,05M) durante 30 minutos, y una solución A (100% de NH_{4}OAc 0,05M) para dar el compuesto del título como un polvo amarillo pálido. ^{1}H RMN (D_{6}-DMSO) 11,75 (br s, OH), 9,13 (br s, NH), 8,61 (s, 1H), 8,50 (br s, 1H), 8,40 (t, 1H), 8,13 (m, 2H), 7,81 (d, 1H), 7,75 (d, =CH), 7,55-7,00 (m, 18H), 6,90 (s, 1H), 4,33 (s, CH_{2}S), 4,26 (t, CH_{2}O), 3,28 (m, 2CH_{2}N), 3,08 (t, CH_{2}Ph), 1,75 (quintuplete, CH_{2}); ES-MS: [M+H]^{+} = 785,3; FAB-HRMS: [M+H]^{+} = 785,2013 (Calculado para C_{39}H_{38}ClN_{6}O_{6}S_{2} = 785,1983).
Ejemplo 42 Síntesis de la hidrazona de la 2-Sulfobenzaldehido (E)-N-[3-(6-Hidrazinonicotinamido)propil]-3-[6-[[(2,6-dimetilfenil)tio]metil]-3-(2-feniletoxi)-2-piridinil]-2-propenamida
122
Parte A
Síntesis de la (E)-N-[N-(tert-Butiloxicarbonil)-3-aminopropil]-3-[6- [[(2,6-dimetilfenil)tio]metil]-3-(2-feniletoxi)-2-piridinil]-2-propenamida
123
El compuesto del título se preparó por el procedimiento general descrito anteriormente para la (E)-N-[N-(tert-Butiloxicarbonil)-3-aminopropil]-3-[6- [[(2,6-diclorofenil)tio]metil]-3-(2-feniletoxi)-2-piridinil]-2-propenamida, substituyendo el ácido (E)-3-[6-[[(2,6-dimetilfenil)tio]metil]-3-(2-feniletoxi)-2-piridinil]-2-propenoico. Se recuperó el compuesto del título (847 mg, 97%) como una espuma seca rojiza pálida que se utilizó sin purificación adicional. ^{1}H RMN (D_{6}-DMSO) 8,25 (br t, NH), 7,69 (d, =CH), 7,40-7,15 (m, 6Ar-H), 7,15-7,00 (m, 3Ar-H), 6,95 (d, =CH), 6,88 (d, Ar-H), 6,80 (t, NH), 4,21 (t, CH_{2}O), 3,89 (s, CH_{2}S), 3,17 (q, CH_{2}N), 3,07 (t, CH_{2}Ph), 2,96 (q, CH_{2}N), 2,32 (s, 2Me), 1,57 (quintuplete, CH_{2}), 1,38 (s, t-Bu); ES-MS: [M+H]^{+} = 576,4.
Parte B
Síntesis de la hidrazona de la 2-Sulfobenzaldehido (E)-N-[3-(6-Hidrazinonicotinamido)propil]-3-[6-[[(2,6-dimetilfenil)tio]metil]-3-(2-feniletoxi)-2-piridinil]-2-propenamida
El compuesto del título se preparó por el procedimiento general descrito anteriormente para la hidrazona de la 2-Sulfobenzaldehido (E)-N-[3-(6-Hidrazinonicotinamida)propil]-3-[6-[[(2,6-diclorofenil)tio]metil]-3-(2-feniletoxi)-2-piridinil]-2-propenamida, substituyendo la (E)-N-[N-(tert-Butiloxicarbonil)-3-aminopropil]-3-[6-[[(2,6-dimetilfenil)tio]metil]-3-(2-feniletoxi)-2-piridinil]-2-propenamida. La purificación de una porción del producto crudo se llevó a cabo por HPLC de fase reversa en una columna preparativa Vydac C-18 (2,5x25 cm) utilizando un gradiente de un 40 a un 100% de una solución B (90% de acetonitrilo/10% de NH_{4}OAc 0,05M) durante 30 minutos, y una solución A (100% de NH_{4}OAc 0,05M) para dar el compuesto del título como un polvo amarillo pálido. ^{1}H RMN (D_{6}-DMSO) 11,75 (br s, OH), 9,12 (br s, NH), 8,63 (s, 1H), 8,50 (br s, 1H), 8,36 (t, 1H), 8,13 (m, 2H), 7,82 (d, 1H), 7,71 (d, =CH), 7,40-7,15 (m, 10H), 7,15-6,85 (m, 7H), 4,22 (t, CH_{2}O), 3,89 (s, CH_{2}S), 3,32 (m, 2CH_{2}N), 3,07 (t, CH_{2}Ph), 2,32 (s, 2CH_{3}), 1,75 (quintuplete, CH_{2}); ES-MS: [M+H]^{+} = 779,4; FAB-HRMS: [M+H]^{+} = 779,2691 (Calculado para C_{41}H_{43}N_{6}O_{6}S_{2} = 779,2686).
Ejemplo 43 Síntesis de la hidrazona de la 2-Sulfobenzaldehido (E)-N-[3-(6-Hidrazinonicotinamido)propil]-3-[6-[[(2,3,5,6-tetrafluorofenil)tio]metil]-3-(2-feniletoxi)-2-piridinil]-2-propenamida
124
Parte A
Síntesis de la (E)-N-[N-(tert-Butiloxicarbonil)-3-aminopropil]-3-[6- [[(2,3,5,6-tetrafluorofenil)tio]metil]-3-(2-feniletoxi)-2-piridinil]-2-propenamida
125
El compuesto del título se preparó por el procedimiento general descrito anteriormente para la (E)-N-[N-(tert-Butiloxicarbonil)-3-aminopropil]-3-[6- [[(2,6-diclorofenil)tio]metil]-3-(2-feniletoxi)-2-piridinil]-2-propenamida, substituyendo el ácido (E)-3-[6-[[(2,3,5,6-tetrafluorofenil)tio]metil]-3-(2-feniletoxi)-2-piridinil]-2-propenoico. Se recuperó el compuesto del título (865 mg, 98%) como una espuma seca amarilla pálida que se utilizó sin purificación adicional. ^{1}H RMN (D_{6}-DMSO) 8,22 (br t, NH), 7,89 (m, Ar-H), 7,63 (d, =CH), 7,48 (d, Ar-H), 7,35-7,20 (m, 6Ar-H), 6,83 (d, =CH), 6,80 (m, NH), 4,26 (t, CH_{2}O), 4,19 (s, CH_{2}S), 3,16 (q, CH_{2}N), 3,08 (t, CH_{2}Ph), 2,96 (m, CH_{2}N), 1,57 (quintuplete, CH_{2}), 1,38 (s, t-Bu); ES-MS: [M+H]^{+} = 620,3.
Parte B
Síntesis de la hidrazona de la 2-Sulfobenzaldehido (E)-N-[3-(6-Hidrazinonicotinamido)propil]-3-[6-[[(2,3,5,6-tetrafluorofenil)tio]metil]-3-(2-feniletoxi)-2-piridinil]-2-propenamida
El compuesto del título se preparó por el procedimiento general descrito anteriormente para la hidrazona de la 2-Sulfobenzaldehido (E)-N-[3-(6-Hidrazinonicotinamida)propil]-3-[6-[[(2,6-diclorofenil)tio]metil]-3-(2-feniletoxi)-2-piridinil]-2-propenamida, substituyendo la (E)-N-[N-(tert-Butiloxicarbonil)-3-aminopropil]-3-[6-[[(2,3,5,6-tetrafluorofenil)tio]metil]-3- (2-feniletoxi)-2-piridinil]-2-propenamida. La purificación de una porción del producto crudo se llevó a cabo por HPLC de fase reversa en una columna preparativa Vydac C-18 (2,5x25 cm) utilizando un gradiente de un 40 a un 100% de una solución B (90% de acetonitrilo/10% de NH_{4}OAc 0,05M) durante 30 minutos, y una solución A (100% de NH_{4}OAc 0,05M) para dar el compuesto del título como un polvo amarillo pálido. ^{1}H RMN (D_{6}-DMSO) 11,75 (br s, OH), 9,11 (br s, NH), 8,63 (s, 1H), 8,52 (br s, 1H), 8,32 (t, 1H), 8,12 (m, 2H), 7,90 (m, 2H), 7,65 (d, =CH), 7,50-7,15 (m, 11H), 7,10 (s, 1H), 6,90 (s, 1H), 6,87 (d, =CH), 4,25 (t, CH_{2}O), 4,19 (s, CH_{2}S), 3,34 (m, 2CH_{2}N), 3,08 (t, CH_{2}Ph), 1,75 (quintuplete, CH_{2}); ES-MS: [M+H]^{+} = 823,4; FAB-HRMS: [M+H]^{+} = 823,2014 (Calculado para C_{39}H_{35}F_{4}N_{6}O_{6}S_{2} = 823,1996).
Ejemplo 44 Síntesis de la hidrazona de la 2-Sulfobenzaldehido (E)-N-[3-(6-Hidrazinonicotinamido)propil]-3-[6-[[(4-hidroxifenil)tio]metil]-3-(2-feniletoxi)-2-piridinil]-2-propenamida
126
Parte A
Síntesis de la (E)-N-[N-(tert-Butiloxicarbonil)-3-aminopropil]-3-[6- [[(4-hidroxifenil)tio]metil]-3-(2-feniletoxi)-2-piridinil]-2-propenamida
127
El compuesto del título se preparó por el procedimiento descrito anteriormente para la (E)-N-[N-(tert-Butiloxicarbonil)-3-aminopropil]-3-[6-[[(2,6-diclorofenil)tio]metil]-3-(2-feniletoxi)-2-piridinil]-2-propenamida, substituyendo (E)-N-[N-(tert-Butiloxicarbonil)-3-aminopropil]-3-[6-[[(4-hidroxifenil)tio]metil]-3-(2-feniletoxi)-2-piridinil]-2-propenamida. Se recuperó el compuesto del título (675 mg, 99%) como una espuma seca rojiza pálida que se utilizó sin purificación adicional. ^{1}H RMN (D_{6}-DMSO) 9,55 (s, OH), 8,28 (br t, NH), 7,71 (d, =CH), 7,44 (d, Ar-H), 7,35-7,10 (m, 8Ar-H), 7,00 (d, =CH), 6,82 (t, NH), 6,68 (d, Ar-H), 4,25 (t, CH_{2}O), 4,08 (s, CH_{2}S), 3,17 (q, CH_{2}N), 3,08 (t, CH_{2}Ph), 2,96 (q, CH_{2}N), 1,56 (quintuplete, CH_{2}), 1,38 (s, t-Bu); ES-MS: [M+H]^{+} = 564,4.
Parte B
Síntesis de la hidrazona de la 2-Sulfobenzaldehido (E)-N-[3-(6-Hidrazinonicotinamido)propil]-3-[6-[[(4-hidroxifenil)tio]metil]-3-(2-feniletoxi)-2-piridinil]-2-propenamida
El compuesto del título se preparó por el procedimiento general descrito anteriormente para la hidrazona de la 2-Sulfobenzaldehido (E)-N-[3-(6-Hidrazinonicotinamida)propil]-3-[6-[[(2,6-diclorofenil)tio]metil]-3-(2-feniletoxi)-2-piridinil]-2-propenamida, substituyendo la (E)-N-[N-(tert-Butiloxicarbonil)-3-aminopropil]-3-[6-[[(4-hidroxifenil)tio]metil]-3-(2-feniletoxi)-2-piridinil]-2-propenamida. La purificación de una porción del producto crudo se llevó a cabo por HPLC de fase reversa en una columna preparativa Vydac C-18 (2,5x25 cm) utilizando un gradiente de un 40 a un 100% de una solución B (90% de acetonitrilo/10% de NH_{4}OAc 0,05M) durante 30 minutos, y una solución A (100% de NH_{4}OAc 0,05M) para dar el compuesto del título como un polvo amarillo pálido. ^{1}H RMN (D_{6}-DMSO) 11,75 (br s, OH), 9,57 (br s, OH), 9,13 ( br s, NH), 8,64 (s, 1H), 8,50 (br s, 1H), 8,38 (t, 1H), 8,14 (m, 2H), 7,82 (d, 1H), 7,73 (d, =CH), 7,45-6,90 (m, 15H), 6,70 (d, 2H), 4,24 (t, CH_{2}O), 4,07 (s, CH_{2}S), 3,35 (m, 2CH_{2}N), 3,08 (t, CH_{2}Ph), 1,75 (quintuplete, CH_{2}); ES-MS: [M+H]^{+} = 767,3; FAB-HRMS: [M+H]^{+} = 767,2335 (Calculado para C_{39}H_{39}N_{6}O_{7}S_{2} = 767,2322).
Ejemplo 45 Síntesis de la hidrazona de la 2-Sulfobenzaldehido (E)-N-[2-(6-Hidrazinonicotinamido)etil]-3-[6-[[(2,6-diclorofenil)tio]metil]-3-(2-feniletoxi)-2-piridinil]-2-propanamida
128
Parte A
Síntesis de la (E)-N-[N-(tert-Butiloxicarbonil)-2-aminoetil]-3-[6- [[(2,6-diclorofenil)tio]metil]-3-(2-feniletoxi)-2-piridinil]-2-propanamida
129
El compuesto del título se preparó por el procedimiento general descrito anteriormente para la (E)-N-[N-(tert-Butiloxicarbonil)-3-aminopropil]-3-[6- [[(2,6-diclorofenil)tio]metil]-3-(2-feniletoxi)-2-piridinil]-2-propenamida, substituyendo la (E)-N-[N-(tert-Butiloxicarbonil)-3-aminopropil]-3-[6-[[(2,6-diclorofenil)tio]metil]-3-(2-feniletoxi)-2-piridinil]-2-propanamida y el N-(3-aminoetil)carbamato de tert-butilo y se utilizó sin purificación adicional. ES-MS: 
\hbox{[M+H] ^{+} }
= 604,2.
Parte B
Síntesis de la hidrazona de la 2-Sulfobenzaldehido (E)-N-[2-(6-Hidrazinonicotinamido)etil]-3-[6-[[(2,6-diclorofenil)tio]metil]-3-(2-feniletoxi)-2-piridinil]-2-propanamida
El compuesto del título se preparó por el procedimiento general descrito anteriormente para la hidrazona de la 2-Sulfobenzaldehido (E)-N-[3-(6-Hidrazinonicotinamida)propil]-3-[6-[[(2,6-diclorofenil)tio]metil]-3-(2-feniletoxi)-2-piridinil]-2-propenamida, substituyendo la (E)-N-[N-(tert-Butiloxicarbonil)-2-aminoetil]-3-[6-[[(2,6-diclorofenil)tio]metil]-3-(2-feniletoxi)-2-piridinil]-2-propanamida. La purificación de una porción del producto crudo se llevó a cabo por HPLC de fase reversa en una columna preparativa Vydac C-18 (2,5x25 cm) utilizando un gradiente de un 40 a un 100% de una solución B (90% de acetonitrilo/10% de NH_{4}OAc 0,05M) durante 30 minutos, y una solución A (100% de NH_{4}OAc 0,05M) para dar el compuesto del título como un polvo amarillo pálido. ^{1}H RMN (D_{6}-DMSO) 11,75 (br s, OH), 9,01 (br s, NH), 8,61 (s, 1H), 8,40 (t, 1H), 8,03 (t, 2H), 7,92 (t, 1H), 7,77 (d, 1H), 7,48 (d, 2H), 7,40-7,10 (m, 11H), 6,94 (d, 1H), 4,15 (t, CH_{2}O), 4,08 (s, CH_{2}S), 3,29 (m, 2CH_{2}N), 3,17 (t, CH_{2}Ph), 3,02 (m, CH_{2}Ar), 2,26 (m, CH_{2}CO); ES-MS: [M+H]^{+} = 807,2; FAB-HRMS: [M+H]^{+} = 807,1609 (Calculado para C_{38}H_{37}Cl_{2}N_{6}O_{6}S_{2} = 807,1593).
Ejemplo 46 Síntesis de la hidrazona de la 2-Sulfobenzaldehido N-[3-(6-Hidrazinonicotinamido)propil]-1-[3-([1,1'-bifenil]-4-ilmetil)-2H-1-benzopiran-7-il]-ciclopentanecarboxamida
130
Parte A
Síntesis de (trans)-N-[N-(tert-Butiloxicarbonil)-3-aminopropil]-1-[3- ([1,1'-bifenil]-4-ilmetil)-3,4-dihidro-4-hidroxi-2H-1-benzopiran-7-il]-ciclopentanecarboxamida
131
El compuesto del título se preparó por el procedimiento general descrito anteriormente para la (E)-N-[N-(tert-Butiloxicarbonil)-3-aminopropil]-3-[6- [[(2,6-diclorofenil)tio]metil]-3-(2-feniletoxi)-2-piridinil]-2-propenamida, substituyendo el ácido [3-([1,1'-bifenil]-4-ilmetil)-3,4-dihidro-4-hidroxi-2H-1-benzopiran-7-il]-ciclopentanecarboxílico. Se recuperó el compuesto del título (530 mg, 98%) como un cristal incoloro que se utilizó sin purificación adicional. ^{1}H RMN (D_{6}-DMSO) 7,62 (m, 4ArH), 7,50-7,30 (m, 3Ar-H, NH), 7,25 (m, 3ArH), 6,86 (d, ArH), 6,74 (s, ArH), 6,70 (m, NH), 5,45 (d, OH), 4,29 (t, CHO), 4,03 (dABq, CH_{2}O), 2,95 (q, CH_{2}N), 2,80 (q, CH_{2}N), 2,70 (m, 1H), 2,45 (m, CH_{2}Ar), 2,10 (m, 1H), 1,80-1,50 (m, 6H), 1,40 (m, 2H), 1,35 (s, t-Bu); ES-MS: [M+H]^{+} = 585,4; FAB-HRMS: 
\hbox{[M+H] ^{+} }
= 585,3345 (Calculado para C_{36}H_{45}N_{2}O_{5} = 585,3328).
Parte B
Síntesis de la hidrazona de la 2-Sulfobenzaldehido N-[3-(6-Hidrazinonicotinamido)propil]-1-[3-([1,1'-bifenil]-4-ilmetil)-2H-1-benzopiran-7-il]-ciclopentanecarboxamida
El compuesto del título se preparó por el procedimiento general descrito anteriormente para la hidrazona de la 2-Sulfobenzaldehido (E)-N-[3-(6-Hidrazinonicotinamida)propil]-3-[6-[[(2,6-diclorofenil)tio]metil]-3-(2-feniletoxi)-2-piridinil]-2-propenamida, substituyendo la (trans)-N-[N-(tert-Butiloxicarbonil)-3-aminopropil]-1-[3-([1,1'-bifenil]-4-ilmetil)-3,4-dihidro-4-hidroxi-2H-1-benzopiran-7-il]-ciclopentanecarboxamida. La purificación de una porción del producto crudo se llevó a cabo por HPLC de fase reversa en una columna preparativa Vydac C-18 (2,5x25 cm) utilizando un gradiente de un 40 a un 100% de una solución B (90% de acetonitrilo/10% de NH_{4}OAc 0,05M) durante 30 minutos, y una solución A (100% de NH_{4}OAc 0,05M) para dar el compuesto del título como un polvo amarillo pálido. ^{1}H RMN (D_{6}-DMSO) 11,50 (br s, OH), 9,00 (br s, NH), 8,56 (s, 1H), 8,30 (br s, 1H), 8,04 (m, 2H), 7,78 (d, 1H), 7,65 (m, 4H), 7,50-6,80 (m, 14H), 6,70 (s, 1H), 6,24 (s, =CH), 4,63 (s, CH_{2}O), 3,08 (m, 2CH_{2}N), 2,45 (m, 2H), 1,80-1,50 (m, 8H); ES-MS: [M-H]^{-} = 768,3.
Ejemplo 47 Síntesis de la hidrazona 2-Sulfobenzaldehido 6-[5-(6-Hidrazinonicotinamido)pentiloxi]-5-(2-propenil)-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-ona
132
Parte A
Síntesis de la 6-[N-(tert-Butiloxicarbonil)-5-aminopentiloxi]-5-(2-propenil)-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-ona
133
Se añadió azadicarboxilato de dietilo (2,00 mL, 11,48 mmol) a una solución de 6-hidroxi-5-(2-propenil)-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-ona (1,00 g, 4,94 mmol), N-(5-hidroxipentil)carbamato de tert-butilo (1,10 g, 4,97 mmol), y PPh_{3} (1,30 g, 4,96 mmol) en THF anhidro (31 ml), enfriado en un baño de hielo, durante 15 minutos, entonces se calentó lentamente a temperatura ambiente durante 1 hora. La mezcla de reacción se concentró, se trituró con hexanoEtOAc (4:1), se enfrió a 0ºC, se filtró, y el filtrado se concentró. El residuo se purificó por cromatografía en columna (silica gel) utilizando hexano/EtOAc 3:1. Se recuperó el compuesto del título (1,55 g, 81%) como un sólido blanco. ^{1}H RMN (CDCl_{3}) 7,99 (d, ArH), 6,81 (d, ArH), 5,86 (m, =CH), 4,96 (dd, =CHH), 4,89 (dd, =CHH), 4,50 (br s, NH), 4,01 (t, CH_{2}O), 3,42 (m, CH_{2}C=), 3,12 (q, CH_{2}N), 2,88 (t, CH_{2}Ar), 2,57 (t, CH_{2}CO), 2,08 (quintuplete, CH_{2}), 1,81 (quintuplete, CH_{2}), 1,51 (m, 2CH_{2}), 1,43 (s, t-Bu); ES-MS: [M+H]^{+} = 388,3.
\newpage
Parte B
Síntesis de la hidrazona de la 2-Sulfobenzaldehido 6-[5-(6-Hidrazinonicotinamido)pentiloxi]-5-(2-propenil)-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-ona
Se añadió TFA (4 mL. 51,92 mmol) a una solución de 6-[N-(tert-Butiloxicarbonil)-5-aminopentiloxi]-5-(2-propenil)-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-ona (502 mg, 0,81 mmol) en CH_{2}Cl_{2} (8 ml). La mezcla de reacción se dejó agitar a temperatura ambiente durante 3 horas, luego se concentró, se diluyó con CH_{2}Cl_{2}, se concentró, y se secó a alto vacío durannte toda la noche. ^{1}H RM (CDCl_{3}) 8,86 (br s, NH_{3}), 7,94 (d, ArH), 7,44 (br s, 2H), 6,77 (d, ArH), 5,83 (m, =CH), 4,94 (dd, =CHH), 4,84 (dd, =CHH), 4,01 (t, CH_{2}O), 3,40 (m, CH_{2}C=), 3,06 (q, CH_{2}N), 2,86 (t, CH_{2}Ar), 2,60 (t, CH_{2}CO), 2,07 (quintuplete, CH_{2}), 1,80 (m, 2CH_{2}), 1,51 (m, CH_{2}); ES-MS: [M+H]^{+} = 288,3.
Se disolvió la sal del crudo amina\cdotTFA (100 mg, 0,25 mmol) y la hidrazona del succinimidil 2-sulfobenzaldehido 6-hidrazinonicotinato (131,6 mg, 0,30 mmol) en DMF (2 mL), seguido por la adición de NEt_{3} (200 \mul, 1,44 mmol). La mezcla de reacción se dejó agitar a temperatura ambiente durante 48 horas, y se concentró. La purificación del producto crudo se llevó a cabo por HPLC de fase reversa en una columna preparativa Vydac C-18 (2,5x25 cm) utilizando un gradiente de un 40 a un 100% de una solución B (90% de acetonitrilo/10% de NH_{4}OAc 0,05M) durante 30 minutos, y una solución A (100% de NH_{4}OAc 0,05M) para dar el compuesto del título (39 mg) como un sólido amarillo. Los satos espectroscópicos de RMN de protón indicaron la presencia de algunas sales de trietilamonio. ^{1}H RMN (D_{6}-DMSO) 9,05 (br s, NH), 8,58 (s, 1H), 8,35 (br s, 1H), 8,05 (br d, 2H), 7,82 (d, ArH), 7,78 (dd, 1H), 7,34 (m, 1H), 7,23 (d, 1H), 7,01 (d, ArH), 5,81 (m, =CH), 4,90 (m, =CHH), 4,07 (t, CH_{2}O), 3,37 (m, CH_{2}C=, CH_{2}N), 3,10 (m, CH_{2}N sal), 2,85 (t, CH_{2}), 2,50 (m, CH_{2}), 1,98 (quintuplete, CH_{2}), 1,78 (quintuplete, CH_{2}), 1,55 (m, 2CH_{2}), 1,18 (t, CH_{3}CH_{2}N sal); ES-MS: [M+H]^{+} = 591,4; FAB-HRMS: [M+H]^{+} = 591,2276 (Calculado para C_{31}H_{35}N_{4}O_{6}S = 591,2277).
Ejemplo 48 Síntesis de la hidrazona de la 2-Sulfobenzaldehido 6-[6-(6-Hidrazinonicotinamido)hexiloxi]-5-(2-propenil)-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-ona
134
Parte A
Síntesis de la 6-[N-(tert-Butiloxicarbonil)-6-aminohexiloxi]-5-(2-propenil)-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-ona
135
El compuesto del título se preparó por el procedimiento general descrito anteriormente para la 6-[N-(tert-Butiloxicarbonil)-5-aminopentiloxi]-5-(2-propenil)-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-ona substituyendo el N-(6-hidroxihexil)carbamato de tert-butilo. Se recuperó el compuesto del título como un sólido blanco. ^{1}H RMN (D_{6}-DMSO) 7,82 (d, ArH), 6,99 (d, ArH), 6,76 (br t, NH), 5,84 (m, =CH), 4,96 (dd, =CHH), 4,91 (dd, =CHH), 4,04 (t, CH_{2}O), 3,40 (d, CH_{2}C=), 2,86 (m, 2CH_{2}), 2,50 (m, CH_{2}), 1,98 (quintuplete, CH_{2}), 1,71 (quintuplete, CH_{2}), 1,36 (m, 3CH_{2}), 1,36 (s, t-Bu); ES-MS: [M+H]^{+} = 402,5.
\newpage
Parte B
Síntesis de la 2-Sulfobenzaldehido 6-[6-(6-Hidrazinonicotinamido)hexiloxi]-5-(2-propenil)-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-ona Hidrazona
El compuesto del título se preparó por el procedimiento general descrito anteriormente para la hidrazona de la 2-Sulfobenzaldehido 6-[5-(6-Hidrazinonicotinamido)pentiloxi]-5-(2-propenil)-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-ona, substituyendo la 6-[N-(tert-Butiloxicarbonil)-6-aminohexiloxi]-5-(2-propenil)-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-ona. la purificación del producto crudo se llevó a cabo por HPLC de fase reversa en una columna preparativa Vydac C-18 (2,5x25 cm) utilizando un gradiente de un 40 a un 100% de una solución B (90% de acetonitrilo/10% de NH_{4}OAc 0,05M) durante 30 minutos, y una solución A (100% de NH_{4}OAc 0,05M) para dar el compuesto del título como un polvo amarillo pálido. Los datos espectroscópicos de RMN de protón indicaron la presencia de algunas sales de trietilamonio. ^{1}H RMN (D_{6}-DMSO) 11,45 (br s, OH), 9,04 (br s, NH), 8,57 (s, 1H), 8,35 (br s, 1H), 8,06 (br d, 2H), 7,82 (d, ArH), 7,78 (dd, 1H), 7,34 (m, 1H), 7,22 (d, 1H), 7,00 (d, ArH), 5,83 (m, =CH), 4,94 (m, =CHH), 4,06 (t, CH_{2}O), 3,38 (m, CH_{2}C=), 3,26 (q, CH_{2}N), 3,10 (m, CH_{2}N sal), 2,85 (t, CH_{2}), 2,50 (m, CH_{2}), 1,98 (quintuplete, CH_{2}), 1,75 (quintuplete, CH_{2}), 1,50 (m, 3CH_{2}), 1,17 (t, CH_{3}CH_{2}N sal); ES-MS: [M-H]^{-} = 603,2; FAB-HRMS: [M+H]^{+} = 605,2433 (Calculado para C_{32}H_{37}N_{4}O_{6}S = 605,2434).
Ejemplo 49 Síntesis de la hidrazona de la 2-Sulfobenzaldehido 6-[6-(6-Hidrazinonicotinamido)-4,4-dimetilpentiloxi]-5-(2-propenil)-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-ona
136
Parte A
Síntesis del 5-(tert-Butildimetilsililoxi)-2,2-dimetilpentanenitrilo
Se añadió isobutironitrilo (10,00 g, 144,70 mmol) a una solución de LDA\cdotTHF en ciclohexane (1,5 M, 100 ml, 150 mmol) y THF anhidro (100 ml) enfriado a-78ºC durante 15 minutos. La mezcla de reacción se dejó calentar a-40ºC durante 30 minutos, se volvió a enfriar a-78ºC, luego se añadió el bromuro de 3-(tert-butildimetilsililoxi)propilo (26,08 g, 102,98 mmol) durante 30 minutos. La mezcla de reacción se dejó calentar a 0ºC durante 1 hora, se trató con HCl 1N, se extrajo con éter, y los extractos combinados se lavaron con H_{2}O, NaHCO_{3}, sal, se secó (Na_{2}SO_{4}), y se concentró. Se recuperó el compuesto del título (22,23 g, 89,4%) como un líquido amarillo pálido que se utilizó sin purificación adicional. ^{1}H RMN (CDCl_{3}) 3,64 (t, CH_{2}O), 1,60 (m, 2CH_{2}), 1,34 (s, 2CH_{3}), 0,88 (s, t-Bu), 0,04 (s, 2CH_{3}Si); ES-MS: [M+H]^{+} = 242,1.
Parte B
Síntesis del cloruro de (5-Hidroxil-2,2-dimetilpentil)amonio
Se añadió HCl concentrado (2,5 mL, 30, 0 mmol) a una solución de 5-(tert-Butildimetilsililoxi)-2,2-dimetilpentanenitrilo (5,00 g, 20,71 mmol) en MeOH (50 ml) / H_{2}O (5 ml) seguido por PtO_{2} (100 mg). La mezcla se hidrogenó en un aparato Parr a 60 psi durante 36 horas, el catalizador se eliminó por filtración, y la mezcla de reacción se concentró. Se recuperó el compuesto del título (4,72 g, contenía metanol residual) como un aceite incoloro que se utilizó sin purificación adicional. ^{1}H RMN (D_{6}-DMSO) 7,97 (br s, NH_{3}), 3,36 (t, CH_{2}O), 2,59 (q, CH_{2}N), 1,30 (m, 2CH_{2}), 0,90 (s, 2CH_{3}); ES-MS: [M+H]^{+} = 132,0.
Parte C
Síntesis del N-(tert-Butiloxicarbonil)-5-amino-4,4-dimetilpentanol
Se añadió Net_{3} (3 mL, 21,52 mmol) a una suspensión de cloruro de (5-Hidroxil-2,2-dimetilpentil)amonio (crudo, 20,78 mmol) en CH_{2}Cl_{2} (50 ml), enfriado en un baño de hielo, seguido por Boc_{2}O (5,1 ml, 22,20 mmol). Se quitó el baño de enfriamiento y la mezcla de reacción se concentró. Se extrajo con EtOAc/H_{2}O, y la fase orgánica se lavó con ácido cítrico al 5%, H_{2}O, NaHCO_{3} saturado, sal, se secó (Na_{2}SO_{4}) y se concentró. El residuo se purificó por cromatografía en columna (silica gel) utilizando hexano/EtOAc de un 3:1 A un 1:1. Se recuperó el compuesto del título (4,45 g, 93%) como un aceite incoloro. ^{1}H RMN (CDCl_{3}) 4,60 (br s, NH), 3,60 (t, CH_{2}O), 2,92 (d, CH_{2}N), 1,74 (br s, OH), 1,51 (m, CH_{2}), 1,42 (s, t-Bu), 1,25 (m, CH_{2}), 0,84 (s, 2CH_{3}); ES-MS: [M+H]^{+} = 232,1.
Parte D
Síntesis de la 6-[N-(tert-Butiloxicarbonil)-5-amino-4,4-dimetilpentiloxi]-5-(2-propenil)-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-ona
El compuesto del título se preparó por el procedimiento general descrito anteriormente para la 6-[N-(tert-Butiloxicarbonil)-5-aminopentiloxi]-5-(2-propenil)-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-ona, substituyendo el N-(tert-Butiloxicarbonil)-5-amino-4,4-dimetilpentanol. Se recuperó el compuesto del título como un aceite amarillo pálido ES-MS: 
\hbox{[M+H] ^{+} }
= 416,2.
Parte E
Síntesis de la hidrazona de la 2-Sulfobenzaldehido 6-[5-(6-Hidrazinonicotinamido)-4,4-dimetilpentiloxi]-5-(2-propenil)-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-ona
El compuesto del título se preparó por el procedimiento general descrito anteriormente para la hidrazona de la 2-Sulfobenzaldehido 6-[5-(6-Hidrazinonicotinamido)pentiloxi]-5-(2-propenil)-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-ona, substituyendo la 6-[N-(tert-Butiloxicarbonil)-5-amino-4,4-dimetilpentiloxi]-5-(2-propenil)-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-ona. La purificación del producto crudo se llevó a cabo por HPLC de fase reversa en una columna preparativa Vydac C-18 (2,5x25 cm) utilizando un gradiente de un 40 a un 100% de una solución B (90% de acetonitrilo/10% de NH_{4}OAc 0,05M) durante 30 minutos, y una solución A (100% de NH_{4}OAc 0,05M) para dar el compuesto del título como un polvo amarillo pálido. ^{1}H RMN (D_{6}-DMSO) 11,40 (br s, OH), 9,01 (s, NH), 8,61 (s, 1H), 8,17 (br t, 1H), 8,03 (t, 2H), 7,82 (d, ArH), 7,78 (dd, 1H), 7,40-7,20 (m, 3H), 6,99 (d, ArH), 5,82 (m, =CH), 4,89 (m, =CHH), 4,03 (br t, CH_{2}O), 3,36 (m, CH_{2}C=), 3,14 (d, CH_{2}N), 2,84 (m, CH_{2}), 2,50 (m, CH_{2}), 1,97 (m, CH_{2}), 1,75 (m, CH_{2}), 1,40 (m, CH_{2}), 0,89 (s, 2CH_{3}); ES-MS: [M+H]^{+} = 619,3; FAB-HRMS: [M+H]^{+} = 619,2610 (Calculado para C_{33}H_{39}N_{4}O_{6}S = 619,2590).
Ejemplo 50 Síntesis de la hidrazona de la 2-Sulfobenzaldehido 6-[6-(6-Hidrazinonicotinamido)-5,5-dimetilhexiloxi]-5-(2-propenil)-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-ona
137
Parte A
Síntesis del 6-(tert-Butildimetilsililoxi)-2,2-dimetilhexanenitrilo
El compuesto del título se preparó utilizando el procedimiento descrito anteriormente para el 5-(tert-Butildimetilsililoxi)-2,2-dimetilpentanenitrilo. Se recuperó el compuesto del título como un líquido amarillo pálido que se utilizó sin purificación adicional. ^{1}H RMN (CDCl_{3}) 3,62 (br t, CH_{2}O), 1,52 (br s, 3CH_{2}), 1,32 (s, 2CH_{3}), 0,88 (s, t-Bu), 0,04 (s, 2CH_{3}Si); ES-MS: [M+H]^{+} = 256,1.
Parte B
Síntesis del cloruro de (6-Hidroxil-2,2-dimetilhexil)amonio
El compuesto del título se preparó utilizando el procedimiento descrito anteriormente para el cloruro de (5-Hidroxil-2,2-dimetilpentil)amonio. Se recuperó el compuesto del título como un aceite incoloro que se utilizó sin purificación adicional. ^{1}H RMN (D_{6}-DMSO) 8,02 (br s, NH_{3}), 3,38 (t, CH_{2}O), 2,58 (q, CH_{2}N), 1,38 (m, CH_{2}), 1,22 (m, 2CH_{2}), 0,89 (s, 2CH_{3}); ES-MS: [M+H]^{+} = 146,0.
\newpage
Parte C
Síntesis del N-(tert-Butiloxicarbonil)-6-amino-5,5-dimetilhexanol
El compuesto del título se preparó utilizando el procedimiento descrito anteriormente para el N-(tert-Butiloxicarbonil)-5-amino-4,4-dimetilpentanol. Se recuperó el compuesto del título como un aceite incoloro. ^{1}H RMN (CDCl_{3}) 4,60 (br s, NH), 3,58 (t, CH_{2}O), 2,88 (d, CH_{2}N), 2,19 (br s, OH), 1,49 (m, CH_{2}), 1,40 (s, t-Bu), 1,40-1,10 (m, 2CH_{2}), 0,81 (s, 2CH_{3}); ES-MS: [M+H]^{+} = 246,1.
Parte D
Síntesis de la 6-[N-(tert-Butiloxicarbonil)-6-amino-5,5-dimetilhexiloxi]-5-(2-propenil)-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-ona
El compuesto del título se preparó por el procedimiento general descrito anteriormente para la 6-[N-(tert-Butiloxicarbonil)-5-aminopentiloxi]-5-(2-propenil)-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-ona, substituyendo el N-(tert-Butiloxicarbonil)-6-amino-5,5-dimetilhexanol. Se recuperó el compuesto del título como un aceite amarillo pálido. ^{1}H RMN (CDCl_{3}) 7,69 (d, ArH), 6,81 (d, ArH), 6,75 (br m, NH), 5,85 (m, =CH), 4,94 (m, =CHH), 4,04 (t, CH_{2}O), 3,37 (m, CH_{2}CC=), 3,35 (m, CH_{2}N), 2,8 (t, CH_{2}), 2,46 (t, CH_{2}), 1,96 (quintuplete, CH_{2}), 1,68 (m, CH_{2}), 1,36 (s, t-Bu), 1,17 (m, 2CH_{2}), 0,76 & 0,74 (2s, 2CH_{3}); ES-MS: [M+H]^{+} = 430,3.
Parte E
Síntesis de la hidrazona de la 2-Sulfobenzaldehido 6-[6-(6-Hidrazinonicotinamido)-5,5-dimetilhexiloxi]-5-(2-propenil)-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-ona
El compuesto del título se preparó por el procedimiento general descrito anteriormente para la hidrazona de la 2-Sulfobenzaldehido 6-[5-(6-Hidrazinonicotinamido)pentiloxi]-5-(2-propenil)-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-ona, substituyendo la 6-[N-(tert-Butiloxicarbonil)-6-amino-5,5-dimetilhexiloxi]-5-(2-propenil)-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-ona. La purificación del producto crudo se llevó a cabo por HPLC de fase reversa en una columna preparativa Vydac 
\hbox{C-18}
(2,5x25 cm) utilizando un gradiente de un 40 a un 100% de una solución B (90% de acetonitrilo/10% de NH_{4}OAc 0,05M) durante 30 minutos, y una solución A (100% de NH_{4}OAc 0,05M) para dar el compuesto del título como un polvo amarillo pálido. ^{1}H RMN (D_{6}-DMSO) 11,50 (br s, OH), 9,09 (br s, NH), 8,56 (s, 1H), 8,20 (br s, 1H), 8,09 (m, 2H), 7,82 (d, ArH), 7,78 (dd, 1H), 7,40-7,15 (m, 4H), 7,08 (s, 1H), 6,99 (d, ArH), 6,89 (s, 1H), 5,85 (m, =CH), 4,94 (m, =CHH), 4,06 (br t, CH_{2}O), 3,35 (m, CH_{2}C=), 3,13 (d, CH_{2}N), 2,84 (br t, CH_{2}), 2,50 (m, CH_{2}), 1,98 (m, CH_{2}), 1,71 (m, CH_{2}), 1,45 (m, CH_{2}), 1,30 (m, CH_{2}), 0,86 (s, 2CH_{3}); ES-MS: [M+H]^{+} = 633,3; FAB-HRMS: [M+H]^{+} = 633,2752 (Calculado para C_{34}H_{41}N_{4}O_{6}S = 633,2747). Ejemplo 51 Síntesis de la hidrazona de la 2-Sulfobenzaldehido 6-[4-(6-Hidrazinonicotinamido)butoxi]-5-(2-propenil)-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-ona
138
Parte A
Síntesis de la 6-[N-(tert-Butiloxicarbonil)-4-aminobutoxi]-5-(2-propenil)-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-ona
El compuesto del título se preparó por el procedimiento general descrito anteriormente para la 6-[N-(tert-Butiloxicarbonil)-5-aminopentiloxi]-5-(2-propenil)-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-ona, substituyendo el N-(tert-Butiloxicarbonil)-4-aminobutanol. Se recuperó el compuesto del título como un sólido blanco. ^{1}H RMN (CDCl_{3}) 7,98 (d, ArH), 6,80 (d, ArH), 5,85 (m, =CH), 4,94 (dd, =CHH), 4,88 (dd, =CHH), 4,55 (br s, NH), 4,03 (t, CH_{2}O), 3,42 (m, CH_{2}C=), 3,17 (q, CH_{2}N), 2,87 (t, CH_{2}), 2,57 (t, CH_{2}), 2,07 (quintuplete, CH_{2}), 1,82 (quintuplete, CH_{2}), 1,68 (quintuplete, CH_{2}), 1,43 (s, t-Bu); ES-MS: [M+H]^{+} = 374,4.
\newpage
Parte B
Síntesis de la hidrazona 2-Sulfobenzaldehido 6-[4-(6-Hidrazinonicotinamido)butoxi]-5-(2-propenil)-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-ona
El compuesto del título se preparó por el procedimiento general descrito anteriormente para la hidrazona de la 2-Sulfobenzaldehido 6-[5-(6-Hidrazinonicotinamido)pentiloxi]-5-(2-propenil)-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-ona, substituyendo la 6-[N-(tert-Butiloxicarbonil)-4-aminobutoxi]-5-(2-propenil)-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-ona. La purificación del producto crudo se llevó a cabo por HPLC de fase reversa en una columna preparativa Vydac C-18 (2,5x25 cm) utilizando un gradiente de un 40 a un 100% de una solución B (90% de acetonitrilo/10% de NH_{4}OAc 0,05M) durante 30 minutos, y una solución A (100% de NH_{4}OAc 0,05M) para dar el compuesto del título como un polvo amarillo pálido. Los datos espectroscópicos de RMN de protón indicaron la presencia de algunas sales de trietilamonio. ^{1}H RMN (D_{6}-DMSO) 11,45 (br s, OH), 9,04 (br s, NH), 8,56 (s, 1H), 8,40 (br s, 1H), 8,05 (br s, 2H), 7,82 (d, ArH), 7,77 (dd, 1H), 7,35 (m, 1H), 7,22 (d, 1H), 7,02 (d, ArH), 5,84 (m, =CH), 4,93 (m, =CHH), 4,10 (t, CH_{2}O), 3,40 (m, CH_{2}C=), 3,25 (m, CH_{2}N), 3,10 (m, CH_{2}N sal), 2,84 (t, CH_{2}), 2,50 (m, CH_{2}), 1,98 (quintuplete, CH_{2}), 1,80-1,55 (m, 2CH_{2}), 1,17 (t, CH_{3}CH_{2}N sal); ES-MS: [M-H]^{-} = 575,3; FAB-HRMS: [M+H]^{+} = 577,2130 (Calculado para C_{30}H_{33}N_{4}O_{6}S = 577,2121).
Ejemplo 52 Síntesis de la hidrazona de la 2-Sulfobenzaldehido 6-[3-(6-Hidrazinonicotinamido)propoxi]-5-(2-propenil)-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-ona
139
Parte A
Síntesis de la 6-[N-(tert-Butiloxicoarbonil)-3-aminopropoxi]-5-(2-propenil)-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-ona
El compuesto del título se preparó por el procedimiento general descrito anteriormente para la 6-[N-(tert-Butiloxicoarbonil)-5-aminopentiloxi]-5-(2-propenil)-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-ona, substituyendo el N-(tert-Butiloxicoarbonil)-3-aminopropanol. Se recuperó el compuesto del título como un sólido blanco. ^{1}H RMN (CDCl_{3}) 8,00 (d, ArH), 6,82 (d, ArH), 5,90 (m, =CH), 4,98 (dd, =CHH), 4,86 (dd, =CHH), 4,75 (br s, NH), 4,08 (t, CH_{2}O), 3,43 (d, CH_{2}C=), 3,32 (q, CH_{2}N), 2,88 (t, CH_{2}), 2,58 (t, CH_{2}), 2,08 (quintuplete, CH_{2}), 2,02 (quintuplete, CH_{2}), 1,43 (s, t-Bu); ES-MS: [M+H]^{+} = 360,3.
Parte B
Síntesis de la hidrazona de la 2-Sulfobenzaldehido 6-[3-(6-Hidrazinonicotinamido)propoxi]-5-(2-propenil)-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-ona
El compuesto del título se preparó por el procedimiento general descrito anteriormente para la hidrazona de la 2-Sulfobenzaldehido 6-[5-(6-Hidrazinonicotinamido)pentiloxi]-5-(2-propenil)-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-ona, substituyendo la 6-[N-(tert-Butiloxicoarbonil)-3-aminopropoxi]-5-(2-propenil)-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-ona. La purificación del producto crudo se llevó a cabo por HPLC de fase reversa en una columna preparativa Vydac C-18 (2,5x25 cm) utilizando un gradiente de un 40 a un 100% de una solución B (90% de acetonitrilo/10% de NH_{4}OAc 0,05M) durante 30 minutos, y una solución A (100% de NH_{4}OAc 0,05M) para dar el compuesto del título como un polvo blanco grisáceo. Los datos espectroscópicos de RMN de protón indicaron la presencia de algunas sales de trietilamonio.^{1}H RMN (D_{6}-DMSO) 9,04 (br s, NH), 8,58 (s, 1H), 8,45 (br s, 1H), 8,05 (br t, 2H), 7,83 (d, ArH), 7,77 (dd, 1H), 7,34 (m, 1H), 7,23 (d, 1H), 7,02 (d, ArH), 5,82 (m, =CH), 4.97 (m, =CHH), 4,13 (t, CH_{2}O), 3,44 (br d, CH_{2}C=), 3,32 (m, CH_{2}N), 3,10 (m, CH_{2}N sal), 2,87 (t, CH_{2}), 2,50 (m, CH_{2}), 2,01 (m, 2CH_{2}), 1,17 (t, CH_{3}CH_{2}N sal); ES-MS: [M+H]^{+} = 563,4; FAB-HRMS: [M+H]^{+} = 563,1978 (Calculado para C_{29}H_{31}N_{4}O_{6}S = 563,1964).
Ejemplo 53 Síntesis de la hidrazona de la 2-Sulfobenzaldehido 6-[2-(6-Hidrazinonicotinamido)etoxi]-5-(2-propenil)-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-ona
140
Parte A
Síntesis de la 6-[N-(tert-Butiloxicoarbonil)-2-aminoetoxi]-5-(2-propenil)-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-ona
El compuesto del título se preparó por el procedimiento general descrito anteriormente para la 6-[N-(tert-Butiloxicoarbonil)-5-aminopentiloxi]-5-(2-propenil)-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-ona, substituyendo N-(tert-Butiloxicoarbonil)-2-aminoetanol. Se recuperó el compuesto del título como un sólido blanco. ^{1}H RMN (CDCl_{3}) 8,00 (d, ArH), 6,81 (d, ArH), 5,90 (m, =CH), 5,00 (dd, =CHH), 4,90 (br s, NH), 4,89 (dd, =CHH), 4,08 (t, CH_{2}O), 3,54 (q, CH_{2}), 3,44 (d, CH_{2}C=), 2,88 (t, CH_{2}), 2,58 (t, CH_{2}), 2,09 (quintuplete, CH_{2}), 1,36 (m, 3CH_{2}), 1,43 (s, t-Bu); ES-MS: [M+H]^{+} = 346,2.
Parte B
Síntesis de la hidrazona de la 2-Sulfobenzaldehido 6-[2-(6-Hidrazinonicotinamido)etoxi]-5-(2-propenil)-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-ona
El compuesto del título se preparó por el procedimiento general descrito anteriormente para la hidrazona de la 2-Sulfobenzaldehido 6-[5-(6-Hidrazinonicotinamido)pentiloxi]-5-(2-propenil)-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-ona, substituyendo la 6-[N-(tert-Butiloxicoarbonil)-2-aminoetoxi]-5-(2-propenil)-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-ona. La purificación del producto crudo se llevó a cabo por HPLC de fase reversa en una columna preparativa Vydac C-18 (2,5x25 cm) utilizando un gradiente de un 40 a un 100% de una solución B (90% de acetonitrilo/10% de NH_{4}OAc 0,05M) durante 30 minutos, y una solución A (100% de NH_{4}OAc 0,05M) para dar el compuesto del título como un polvo amarillo pálido. Los datos espectroscópicos de RMN de protón indicaron la presencia de algunas sales de trietilamonio. ^{1}H RMN (D_{6}-DMSO) 9,21 (br s, NH), 8,80 (br s, 1H), 8,52 (s, 1H), 8,18 (br m, 2H), 7,82 (d, ArH), 7,79 (dd, 1H), 7,41 (m, 1H), 7,22 (d, 1H), 7,05 (d, ArH), 5,80 (m, =CH), 4,88 (m, =CHH), 4,21 (t, CH_{2}O), 3,67 (m, CH_{2}C=), 3,40 (m, CH_{2}N), 3,10 (m, CH_{2}N sal), 2,85 (t, CH_{2}), 2,50 (m, CH_{2}), 1,97 (quintuplete, CH_{2}), 1,17 (t, CH_{3}CH_{2}N sal); ES-MS: [M+H]^{+} = 549,2; FAB-HRMS: [M+H]^{+} = 549,1792 (Calculado para C_{28}H_{29}N_{4}O_{6}S = 549,1808).
Ejemplo 54 Síntesis del ácido 2-[[[5-[[2,2-Dimetil-6-[(4-(3,4-metilenedioxifenil)-6-fenil-2-piridinil)oxi]-1-hexanamino]carbonil]-2-piridinil]hidrazono]metil]-benzensulfónico
141 
\newpage
Parte A
Preparación del 2,2-Dimetil-6-[(4-(3,4-metilenedioxifenil)-6-fenil-2-piridinil)oxi]-hexanonitrilo
142
Se disolvió en dimetilformamida (60 mL) la 4-(3,4-Metilenedioxifenil)-6-fenil-2-piridona (1,1 g, 3,77 mmol). Se añadieron 6-Bromo-2,2-dimetilhexanonitrilo (1,54 g, 7,54 mmol) y carbonato de plata (1,04 g, 3,77 mmol), y la reacción se puso a reflujo a oscuras durante 36 horas. La reacción luego se enfrió, se filtró, y se concentró a alto vacío. El residuo se trató con cloruro de metileno y se pasó a través de sílica gel. El filtrado se concentró a alto vacío. El residuo resultante se recristalizó con hexano/acetato de etilo para dar 1,18 g (76%) de producto. ESMS: Calculado para C_{26}H_{26}N_{2}O_{3}, 414.19; Encontrado 415.3 [M+H]^{+1}.
Parte B
Preparación del 1-Amino-2,2-dimetil-6-[(4-(3,4-metilenedioxifenil)-6-fenil-2-piridinil)oxi]-hexano
Se añadió cloruro de aluminio (0,707 g, 5,30 mmol) a un matraz seco. El matraz se enfrió a menos de 0ºC con un baño de hielo/etanol. Se añadió éter (10 mL), y la reacción se agitó durante 5 minutos hasta que el cloruro de aluminio se disolvió. Se añadió luego hidruro de aluminio litio (0,201 g, 5,30 mmol), y la reacción se calentó a reflujo. Se disolvió en éter (5 mL) el 2,2-Dimetil-6- [(4-(3,4-metilenedioxifenil)-6-fenil-2-piridinil)oxi]-hexanenitrilo (1,0g, 2,41 mmol) y se añadió gota a gota a la solución a reflujo. Después que se acabó la adición, la reacción se agitó durante 5 horas a temperatura ambiente. La reacción se trató luego con agua. Se añadió ácido sulfúrico acuoso (6 N) hasta que se formó una solución transparente. La mezcla se extrajo luego con éter (3x). La fase acuosa se enfrió luego en un baño de hielo y se basificó a pH 14 con hidróxido de sodio acuoso al 50%. La solución resultante se extrajo con éter (4x). La fase orgánica se lavó con NaCl saturado, se secó sobre sulfato de magnesio, y se evaporó para dar un aceite. El aceite se cristalizó con hexano/acetato de etilo para dar 0,3184 g (31%) de producto. ESMS: Calculado para C_{26}H_{30}N_{2}O_{3}, 418,23; Encontrado, 419,3 [M+H]^{+1}.
Parte C
Preparación del ácido 2-[[[5-[[2,2-dimetil-6-[(4-(3,4-metilenedioxifenil)-6-fenil-2-piridinil)oxi]-1-hexanamino]carbonil]-2-piridinil]hidrazono]metil]-benzensulfónico
Se disolvió en dimetilformamida (5 mL) el 1-Amino-2,2-dimetil-6-[(4-(3,4-metilenedioxifenil)-6-fenil-2-piridinil)oxi]-hexano (0,100 g, 0,239 mmol). Se añadió trietilamina (99,7 \muL, 0,717 mmol) y la reacción se agitó durante 5 minutos. Se añadió la sal monosódica del ácido 2-[[[5-[[(2,5-Dioxo-1-pirrolidinil)oxi]carbonil]-2-piridinil]hidrazono]metil]-benzensulfónico (0,126 g, 0,287 mmol) y la reacción se agitó durante 24 horas bajo nitrógeno. La reacción se concentró luego a un aceite a alto vacío. El aceite se trituró con acetato de etilo. El producto crudo se purificó luego por HPLC preparativo con el Método 1 para dar 16 mg (9%) del producto. HRMS: Calculado para C_{39}H_{39}N_{5}O_{7}S + H, 722,2648; Encontrado, 722,2669.
Ejemplo 55 Síntesis del N-[2,2-Dimetil-6-[(4-(3,4-metilenedioxifenil)-6-fenil-2-piridinil)oxi]-hexil]-bis-S-(1-etoxietilmercapto-acetil)pentanoato
143
Se disolvió en dimetilformamida (1 mL) el 1-Amino-2,2-dimetil-6-[(4-(3,4-metilenedioxifenil)-6-fenil-2-piridinil)oxi]-hexano (0,010 g, 0,0238 mmol), tal y como se describe en el Ejemplo 54, Parte B. Se añadió trietilamina (
\hbox{10,0  \mu L}
, 0,0286 mmol) y la reacción se agitó durante 5 minutos. Se añadió bis-S- (1-etoxietilmercapto-acetil)pentanoatode tetrafluorofenilo (MAPT, 0,015 g, 0,0262 mmol) y la reacción se agitó durante 24 horas bajo nitrógeno. La reacción se concentró luego a un aceite a alto vacío. El aceite se trituró con acetato de etilo para dar 20,0 mg (100%) del producto. Calculado para C_{43}H_{60}N_{4}O_{8}S_{2} + H, 825,3931; Encontrado, 825,3959. Ejemplo 56 Síntesis del ácido 2-[[[5-[[N-[6-[(4,6-difenil-2-piridinil)oxi]-hexanoil]-glycine-alpha-amino]carbonil]-2-piridinil]hidrazono]-metil]-benzensulfónico
144
Parte A
Preparación de la sal de ácido trifluoroacético del ácido 2-amino-[2'-N'-[6-[(4,6-difenil-2-piridinil)oxi]-hexanoil]-amino]etanoico
145
Se colocó Resina Wang (0,60 mmol/g) (5 g, 3,0 mmol) en un matraz de reacción. Se le añadió dimetilformamida (100 mL) y la reacción se hizo girar durante 10 minutos. Se eliminó la DMF, y se añadieron lo que sigue: Fmoc-Gly(NH-Boc)-OH (2,46 g, 6,0 mmol); HATU (2,85 g, 7,5 mmol); diisopropiletilamina (3,13 mL, 18,0 mmol); dimetilformamida (50 mL). La reacción se hizo girar durante 24 horas. La resina se lavó luego con 100 mL de DMF 3x, MeOH 1x, DCM 3x, MeOH 2x, DCM 3x. La resina se secó al vacío. La nueva substitución se determinó al utilizar el ensayo de ácido pícrico (0,495 mmol/g). Entonces, se tapó la resina: se añadió a la resina piridina (3 mL), cloruro de benzoilo (3 mL), en dicloroetano (80 mL), y la reacción se hizo girar durante 2 horas. La resina se lavó luego con 100 mL de DCE 3x, DCM 3x, MeOH 1x, DCM 2x, MeOH 2x, DCM 2x. La resina se secó al alto vacío.
Se añadió a una bolsa de té (filtro de polipropileno de 5x5 cm, 0.75 \mum mesh) 0,50 g de Resina Fmoc-Gly(NH-Boc)-Wang preparada anteriormente. La bolsa de té se lavó con lo siguiente (10 mL/bolsa) DMF 2x 3 minutos, 20% piperidina en solución de DMF 1x3 minutos, 20% de piperidina en solución de DMF 1x30 minutos, DCM 8x3 minutos y DMF 3x3 minutos. Se añadió al reactor 3 equivalentes de ácido 6-[(4,6-difenil-2-piridinil)oxi]-hexanoico, cinco equivalentes de cada uno de lo siguiente: HBTU, HOBT, diisopropiletilamina (DIEA) y DMF (10 mL/bolsa). La bolsa se agitó luego durante toda la noche durante aproximadamente 18 horas. La bolsa se lavó luego con lo siguiente (10 mL/bolsa): DMF 3x3 minutos, DCM 8x3 minutos. La bolsa se secó a alto vacío. Los contenidos de la bolsa se colocaron luego en un matraz erlenmeyer pequeño. Se añadió al matraz un cocktail de escisión (10 mL) (95% de ácido trifluororacético, 2,5% triisopropilsilano, y 2,5% de agua). La resina se mantuvo en reposo durante 2 horas aunque se agitó de vez en cuando. Después de cada agitación el lado del matraz se aclaró con cocktail adicional hasta que el volumen total del cocktail añadido fue de 15 mL. Después de dos horas, se filtró la resina y se lavó con TFA 2x4 mL. El filtrado se concentró a un aceite a alto vacío. El aceite se trituró con éter para dar 96 mg del producto. ESMS: Calculado para C_{25}H_{27}N_{3}O_{4,}433,20; Encontrado, 434,3 [M+H]^{+1}.
\newpage
Parte B
Preparación del ácido 2-[[[5-[[N-[6-[(4,6-difenil-2-piridinil)oxi]-hexanoil]-glycine-alpha-amino]carbonil]-2-piridinil]hidrazono]-metil]-benzensulfónico
Se disolvió en dimetilformamida (2 mL) la sal de ácido trifluoroacético del ácido 2-Amino-[2'-N'-[6-[(4,6-difenil-2-piridinil)oxi]-hexanoil]-amino]etanoico (0,040 g, 0,0731 mmol). Se añadió trietilamina (30,6 \muL, 0,219 mmol) y la reacción se agitó durante 5 minutos. Se añadió la sal monosódica del 2-[[[5- [[(2,5-Dioxo-1-pirrolidinil)oxi]carbonil]-2-piridinil]hidrazono]metil]-benzensulfónico (0,0386 g, 0,0877 mmol) y la reacción se agitó durante 24 horas bajo nitrógeno. La reacción se concentró luego a un aceite a alto vacío. El aceite se trituró con acetato de etilo. El producto crudo se purificó luego por HPLC preparativo por el Método 3 para dar 12 mg (22%) del producto. HRMS: Calculado para C_{38}H_{36}N_{6}O_{8}S + H,737,2394; Encontrado,737,2420.
HPLC Método 3
Instrumento: Rainin Rabbit; Software Dynamax
Columna: Vydac C-18 (21.2 mm x 25 cm)
Detector: Knauer VWM
Velocidad de flujo: 15ml/min
Temperatura de la columna: RT
Fase móvil: A: H_{2}0
B: ACN/H_{2}0 (9:1)
Gradiente: Tiempo (min) %A %B
0 60 40
20 40 60
21 0 100
30 0 100
31 60 40
Ejemplo 57 Síntesis del 2-Acetil-4-etil-[5-[6-[[6-[[[(2-sulfonilfenil)metilene]hidrazino]-3-piridinil]carbonil]amino]hexil]oxi]fenol
146
Parte A
Preparación de la 2-Hidroxi-5-etil-4-[[6-(N-tert-butiloxicoarbonil)aminohexil]oxi]acetofenona
147
Se disolvieron en metiletilcetona (5,5 mL) la 2,4-Dihidroxi-5-etil-acetofenona (1,5 g, 8,32 mmol) y la N-tert-butiloxicoarbonil-6-bromohexilamina (2,45 g, 8,73 mmol). Se añadieron carbonato de potasio (2,01 g, 14,6 mmol), ioduro de potasio (0,276 g, 1,66 mmol) y metil sulfóxido (1,2 mL) y la reacción se calentó a reflujo durante 30 horas. La reacción se enfrió, se trató con agua, y se extrajo con tolueno. La fase orgánicoa se lavó con NaOH(3x) 1,0 N, HCl 1 N (1x), y agua. La fase orgánicoa se agitó luego con sílica gel durante 15 minutos. La silica se eliminó por filtración. El filtrado se concentró. El sólido resultante se trató con hexano y se filtró y secó para dar 1,63 g (52%) del producto. ESMS: Calculado para C_{21}H_{33}NO_{5}, 379,24; Encontrado, 380,3 [M+H]^{+1}.
\newpage
Parte B
Preparación de la sal de trifluoroacetato de la 2-Hidroxi-5-etil-4-[[6-aminohexil]oxi]acetofenona
Se disolvió en cloruro de metileno (1,5 mL) la 2-Hidroxi-5-etil-4-[[6-(N-tert-butiloxicoarbonil)-aminohexil]oxi]acetofenona (0,100 g, 0,264 mmol). Se añadió ácid trifluoroacético (1,5 mL), y la reacción se agitó durante 2 horas. La reacción se concentró a alto vacío. El aceite resultante se trató con acetonitrilo/agua 50:50 y se liofilizó para dar 100,2 mg (97%) del producto. ESMS: Calculado para C_{16}H_{25}NO_{3}, 279,18; Encontrado, 280,2 [M+H]^{+1}.
Parte C
Preparación del 2-Acetil-4-etil-[5-[6-[[6-[[[(2-sulfonilfenil)metilene]hidrazino]-3-piridinil]carbonil]amino]hexil]oxi]fenol
Se disolvió en dimetilformamida (5 mL) la sal de trifluoroacetato de la 2-Hidroxi-5-etil-4-[[6-aminohexil]oxi]acetofenona (0,095 g, 0,241 mmol). Se añadió trietilamina (100,9 \muL, 0,723 mmol) y la reacción se agitó durante 5 minutos. Se añadió la sal monosódica del ácido 2-[[[5-[[(2,5-Dioxo-1-pirrolidinil)oxi]carbonil]-2-piridinil]hidrazono]metil]-benzensulfónico (0,127 g, 0,289 mmol) y la reacción se agitó durante 24 horas bajo nitrógeno. La reacción se concentró luego a un aceite a alto vacío. El aceite se trituró con acetato de etilo. El producto crudo se purificó luego por HPLC preparativo con el Método 2 para dar 3,1 mg (2%) del producto. HRMS: Calculado para C_{29}H_{34}N_{4}O_{7}S + H, 583,2226; Encontrado, 583,2213.
Ejemplo 58 Síntesis del 2,4-Dietil-[5-[5,5-dimetil-6-[[6-[[[(2-sulfonilfenil)metilene]hidrazino]-3-piridinil]carbonil]amino]hexil]oxi]fenol
148
Parte A
Preparación de la 2-Benziloxi-5-etil-4-[(5-metil-5-cyanohexil)oxi-acetofenona
149
Se disolvió en dimetilformamida (40 mL) la 2-Hidroxi-5-etil-4-[(5-metil-5-cyanohexil)oxi-acetofenona (2,8 g, 9,22 mmol), tal y como se describe en el Ejemplo 13, Parte A. Se añadieron carbonato de potasio (2,04 g, 14,8 mmol) y bromuro de benzilo (2,19 mL. 18,4 mmol) y la reacción se calentó a 75ºC durante 18 horas. La reacción se enfrió. Se filtró y concentró. El aceite resultante se trató con acetato de etilo. La fase orgánico se lavó con agua, sal, se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y se concentró. El producto crudo se purificó por cromatografía flash utilizando hexano: acetato de etilo 6:1 seguido por hexano:acetato de etilo:metanol 3:1:0,05 para dar 1,79 g (49%) del producto. ESMS: Calculado para C_{25}H_{31}NO_{3}, 393,23; Encontrado 394,3 [M+H]^{+1}.
Parte B
Preparación del 1-Benziloxi-2,4-dietil-5-[(5,5-dimetil-6-aminohexil)oxi]benzeno
Se añadió cloruro de aluminio (0,186 g, 13,9 mmol) a un matraz seco. El matraz se enfrió a menos de 0ºC con un baño de hielo/etanol. Se añadió éter (5 mL), y la reacción se agitó durante 5 minutos hasta que el cloruro de aluminio se disolvió. Se añadió luego hidruro de aluminio litio (0,0531 g, 13,9 mmol), y la reacción se calentó a reflujo. Se disolvió en éter (2 mL) la 2-Benziloxi-5-etil-4-[(5-metil-5-cyanohexil)oxi-acetofenona (0,250, 0,635 mmol) y se añadió gota a gota a la solución a reflujo. Después que se acabó la adición, la reacción se agitó durante 5 horas a temperatura ambiente. La reacción se trató luego con agua. Se añadió ácido sulfúrico acuoso 5 N hasta que se formó una solución transparente. La mezcla se extrajo luego con éter (3x). La fase acuosa se enfrió luego en un baño de hielo y se basificó a pH 14 con hidróxido de sodio acuoso al 50%. La solución resultante se extrajo con éter (4x). La fase orgánicoa se lavó con agua, NaCl saturado, se secó sobre sulfato de magnesio, y se evaporó para dar un aceite. El aceite se cristalizó con hexano/acetato de etilo para dar 0,140 g (57%) de producto como un aceite. ESMS: Calculado para C_{25}H_{37}NO_{2}, 383,28; Encontrado, 384,4 [M+H]^{+1}.
Parte C
Preparación del 2,4-Dietil-5-[(5,5-dimetil-6-aminohexil)oxi]fenol
Se purgó con nitrógeno un matraz pequeño de fondo redondo. Se le añadió paladio sobre carbono (10 mg, 10% p/p) seguido por etanol (5 mL). Se disolvió en etanol (5 mL) el 1-Benziloxi-2,4-dietil-5-[(5,5-dimetil-6-aminohexil)oxi]benzeno (0,100 g, 0,527 mmol) y se añadió a la reacción. Se evacuó la reacción y se purgó con nitrógeno dos veces, y luego se evacuó y se llenó de hidrógeno dos veces. La reacción se agitó bajo nitrógeno durante 1 hora. La reacción se filtró a través de celite, se lavó con etanol. El filtrado se concentró a alto vacío para dar 67,4 mg (88%) como un aceite. ESMS: Calculado para C_{18}H_{31}NO_{2}, 293,24; Encontrado, 294,3 [M+H]^{+1}.
Parte D
Preparación del 2,4-Dietil-[5-[5,5-dimetil-6-[[6-[[[(2-sulfonilfenil)metileno]hidrazino]-3-piridinil]carbonil]amino]hexil]oxi]fenol
Se disolvió en dimetilformamida (2 mL) el 2,4-Dietil-5-[(5,5-dimetil-6-aminohexil)oxi]fenol (0,040 g, 0,136 mmol). Se añadió trietilamina (56,8 \muL, 0,408 mmol) y la reacción se agitó durante 5 minutos. Se añadió la sal monosódica del ácido 2-[[[5-[[(2,5-Dioxo-1-pirrolidinil)oxi]carbonil]-2-piridinil]hidrazono]metil]-benzensulfónico (0,072 g, 0,163 mmol) y la reacción se agitó durante 24 horas bajo nitrógeno. La reacción se concentró luego a un aceite bajo vacío. El aceite se trituró con acetato de etilo. El producto crudo se purificó luego por HPLC preparativo con el Método 2 para dar 15,1 mg (19%) del producto. MS: Calculado para C_{31}H_{40}N_{4}O_{6}S + H, 597,2747; Encontrado, 597,2754.
Ejemplo 59 Síntesis del ácido 2-(5-Carboxipentiloxi)-6-[6-[[4-acetil-2-etil-5-hidroxifenil]oxi]hexil]benzenpropanoico
150
Parte A
Preparación del éster metílico del ácido 2-(6-Metoxi-6-oxohexiloxi)-6- [6-[[4-acetil-2-etil-5-hidroxifenil]oxi]hexil]benzenpropanoico
151
Se disolvieron en acetonitrilo (5 mL) la 2,4-Dihidroxi-5-etil-acetofenona (20,8 mg, 0,117 mmol) y el éster metílico del ácido 2-(6-Metoxi-6-oxohexiloxi)-6-[6-iodohexil]benzen-propanoico (50 mg, 0,0964 mmol). Se añadió carbonato de potasio (53,3 mg, 0,386 mmol), y la reacción se calentó a 80ºC durante toda la noche. La reacción se concentró a alto vacío. El residuo resultante se trató con acetato de etilo y se lavó con agua, sal, se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y evaporó. El producto crudo resultante se purificó por cromatografía en columna flash (hexano:acetato de etilo 5:1) para dar 38,1 mg (69%) del producto. MS: Calculado para C_{33}H_{46}O_{8}, 570,32; Encontrado, 571,4 [M+H]^{+1}.
\newpage
Parte B
Preparación del ácido 2-(5-Carboxipentiloxi)-6-[6-[[4-acetil-2-etil-5-hidroxifenil]oxi]hexil]benzenpropanoico
Se disolvió en tetrahidrofurano (5 mL) el éster metílico del ácido 2-(6-Metoxi-6-oxohexiloxi)-6-[6-[[4-acetil-2-etil-5-hidroxifenil]oxi]hexil]benzenpropanoico (25,8 mg, 0,0452 mmol). Se disolvió en agua (1 mL) el monohidrato del hidróxido de litio (18,9 mg, 0,452 mmol) y se añadió a la reacción. La reacción se agitó durante 18 horas. La reacción luego se concentró, se introdujo en agua, se acidificó a pH 5 con HCl 1 N, y se extrajo con acetato de etilo. La fase orgánica se lavó con agua, sal, se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y se evaporó. El aceite resultante se recristalizó con hexano:acetato de etilo para dar 24,5 mg (100%) del producto. MS: Calculado para C_{31}H_{42}O_{8} + H, 543,2958; Encontrado, 543,2946.
Ejemplo 60 Síntesis del ácido 2-((tert-butil)oxicoarbonil)-7-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))pentiloxi)-1,2,3,4-tetrahidro-isoquinolina-3-carboxílico
152
Parte A
Preparación del acetato de 5-(4,6-difenil-2-piridiloxi)-pentilo
153
Se calentó una mezcla de 4,6-difenil-2-piridona (2,5 g, 10,1 mmol), N,N-dimetilformamida (137,5 mL), 6-bromohexanoato de metilo (3,17 g, 15,15 mmol) y carbonato de plata (2,9 g, 7,58 mmol) a 110ºC a oscuras durante 48 horas. La mezcla se dejó enfriar a temperatura ambienbte, se filtró y se concentró a alto vacío. El residuo se purificó por cromatografía flash en silica gel (hexano/acetato de etilo, 10:1) para dar 2,85 g (75%) del producto. ^{1}H RMN (CDCl_{3}): 8,12-6,90 (m, 12H), 4,52 (t, 2H), 4,18 (t, 2H), 2,05 (s, 3H), 1,98-1,50 (m, 6H); ESMS: Calculado para C_{24}H_{25}NO_{3}, 375,18 Encontrado 376,3 [M+H]^{+1}; R_{t} = 21,013 min (88,5% puro, Columna C-18 Vydac; gradiente de un 20 a un 100% acetonitrilo/agua + 0,1% TFA durante 30 min).
Parte B
Preparación del 5-(4,6-Difenil-2-piridiloxi)-pentan-1-ol
Se trató una solución de acetato de 5-(4,6-difenil-2-piridiloxi)-pentilo (2,85 g, 7,59 mmol) en MeOH (107 mL) con NaOH 1N (26,82 mL) y se agitó a temperatura ambiente durante 16 horas. EL disolvente se evaporó al vacío, y el residuo se acidificó con KHSO_{4} al 10% y se extrajo con EtOAc (3x). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con NaCl saturado, se secó sobre MgSO_{4}, se filtró y se concentró a alto vacío para dar 2,3 g (91%) de un sólido amarillento. El producto se utilizó sin purificación adicional. ^{1}H RMN (CDCl_{3}): 8,15-6,90 (m, 12H), 4,56 (t, 2H), 3,76 (t, 2H), 1,95-1,50 (m, 7H); ESMS: Calculado para C_{22}H_{23}NO_{2}, 333,17 Encontrado 334,3 [M+H]^{+1}; R_{t} = 17,468 min (96,6% puro, columna C18 Vydac; gradiente de un 20 a un 100% acetonitrilo/agua + 0,1% TFA durante 30 min).
Parte C
Preparación del (5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))pentil)(metilsulfonil)oxi
Se agitó a 0-5ºC una mezcla de 5-(4,6-difenil-2-piridiloxi)-pentan-1-ol (2,3 g, 6,9 mmol), acetato de etilo (50 mL), trietilamina (7,4 mL) y cloruro de metansulfonilo (3,4 g, 29,7 mmol) durante 24 horas. La mezcla se acidificó con HCl 1N y se extrajo con éter. El extracto de éter se lavó con agua y sal, se secó sobre MgSO_{4}, se filtró y se concentró al vacío para dar 2,8 g (98%) de un sólido amarillento que se utilizó sin purificación adicional. ^{1}H RMN (CDCl_{3}): 8,14-6,90 (m, 12H), 4,56 (t, 2H), 4,34 (t, 2H), 3,05 (s, 3H), 1,98-1,52 (m, 7H); ESMS: Calculado para C_{23}H_{25}NO_{4}S, 411,15 Encontrado 412,3 [M+H]^{+1}; R_{t} = 18,935 min (97.0% puro, columna C18 Vydac; gradiente de un 20 a un 100% acetonitrilo/agua + 0,1% TFA durante 30 min).
Parte D
Preparación del ácido 2-((tert-butil)oxicoarbonil)-7-hidroxi-1,2,3,4-tetrahidroisoquinolina-3-carboxílico
154
Se añadió trietilamina (0,87 mL, 6,23 mmol) a una solución de ácido L-1,2,3,4-tetrahidro-7-hidroxilisoquinolina-3-carboxílico (1g, 5,18 mmol) en DMF (5,3 mL) seguido por di-t-butil-dicarbonato (1,13 g, 5,18 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 17 horas, se evaporó al vacío, se disolvió en la mínima cantidad de acetato de etilo y se filtró a través de sílica gel utilzando acetato de etilo como eluyente. El filtrado se concentró a alto vacío para dar 1,2 g (79%) de un sólido amarillo que se utilizó sin purificación adicional. ESMS: Calculado para C_{15}H_{19}NO_{5}, 293,13 Encontrado 292,2 [M-H]^{-1}; R_{t} = 9,091 min (92,1% puro, Columna C18 Vydac; gradiente de 20 a 100% acetonitrilo/agua + 0,1% TFA durante 30 min).
Parte E
Preparación del ácido 2-((tert-butil)oxicoarbonil)-7-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))pentiloxi)-1,2,3,4-tetrahidro-isoquinolina-3-carboxílico
Se trató una solución de ácido 2-((tert-butil)oxicoarbonil)-7-hidroxi-1,2,3,4-tetrahidroisoquinolina-3-carboxílico (72 mg, 0,244 mmol) en DMF (0,53 mL) con NaH (dispersión al 50% en aceite, 6,4 mg, 0,268 mmol) y se agitó a 0ºC durante 1 hora. Se añadió gota a gota una solución de (5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))pentil)(metilsulfonil)oxi (50 mg, 0,122 mmol) en DMF (0,20 mL) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 24 horas. El disolvente se eliminó al vacío, y el residuo se purificó por fase reversa en HPLC (gradiente de agua-acetonitrilo que contenía un 0,1% de TFA) para dar 47 mg (63%) de un sólido en polvo blanco). ^{1}H RMN (CDCl_{3}): 8,18-6,60 (m, 15H), 4,50-4,38 (m, 3H), 4,05 (m, 11H), 3,18 (t, 2H), 1,98-1,60 (m, 6H), 1,50 (m, 9H). ESMS: Calculado para C_{37}H_{40}N_{2}O_{6}, 608,29 Encontrado 607,3 [M-H]^{-1}; R_{t} = 22,403 min (96,5% puro, columna C18 Vydac; gradiente de 20 a 100% acetonitrilo/agua + 0,1% TFA durante 30 min).
Ejemplo 61 Síntesis de 3-(4-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))pentiloxi)-3-etoxifenil)-N-((6-hidrazino(3-piridil))sulfonil)prop-2-enamida
155 
\newpage
Parte A
Preparación del 4-(5-(4,6-difenil(2-piridil-oxi))pentiloxi)-3-etoxibenzaldehido
156
Se calentó una mezcla de (5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))pentil)- (metilsulfonil)oxi (0,5 g, 1,21 mmol), 3-etoxi-4-hidroxil benzaldehido (0,2 g, 1,21 mmol), N,N-dimetilforamida (17 mL) y carbonato de cesio (0,79 g, 2,43 mmol) a 60ºC durante 18 horas. La mezcla se concentró a alto vacío, se trató con agua, y se extrajo con EtOAc (3x). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con NaCl saturado, se secó sobre MgSO_{4}, se filtró y se evaporó al vacío para dar 0,38 g (65%) de producto que se utilizó sin purificación adicional. ESMS: Calculado para C_{31}H_{31}NO_{4}, 481,23 Encontrado 482,4 [M+H]^{+1}; R_{t} = 22,024 min (83.4% puro, columna C18 Vydac; gradiente de 20 a 100% acetonitrilo/agua + 0,1% TFA durante 30 min).
Parte B
Preparación del 3-(4-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))pentiloxi)-3-etoxifenil)prop-2-enoato de etilo
157
Se agitó a 0ºC una mezcla de NaH (dispersión al 50% en aceite, 29 mg, 1,22 mmol), tetrahidrofurano (3,75 mL), fosfonoacetato de trietilo (0,24 mL, 1,18 mmol) durante 15 minutos. Se añadió una solución de 4-(5-(4,6-difenil(2-piridil-oxi))pentiloxi)-3-etoxibenzaldehido (380 mg, 0,789 mmol) en tetrahidrofurano (2 mL). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 18 horas, se concentró a alto vacío., y se dividió entre EtOAc y agua. La fase orgánica se lavó con sal, se secó sobre MgSO_{4}, se filtró y se evaporó al vacío. La purificación por cromatografía flash en silica gel (hexano/acetato de etilo, 4:!) dió 310 mg (71%) de un sólido blanco. ^{1}H RMN (CDCl_{3}): 8,14 (d, 2H), 7,73-6,30 (m, 15H), 4,58 (t, 2H), 4,30 (q, 2H), 4,04 (m, 5H), 2,00 (m, 5H), 1,78 (m, 2H), 1,45 (m, 12H); ESMS: Calculado para C_{35}H_{37}NO_{5}, 551,27 Encontrado 552,4 [M+H]^{+1}; R_{t} = 23,450 min (96,5% puro, columna C18 Vydac; gradiente de 20 a 100% acetonitrilo/agua + 0,1% TFA durante 30 min).
Parte C
Preparación del ácido 3-(4-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))pentiloxi)-3-etoxifenil)prop-2-enoico
Se trató una solución de 3-(4-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))pentiloxi)-3-etoxifenil)prop-2-enoato de etilo (250 mg, 0,453 mmol) en etanol (7 mL) con KOH (2,24 M, 0,68 mL) y se calentó a 50ºC durante 72 horas. La mezcla se concentró a alto vacío, se diluyó con agua, se acidificó a pH 7 con HCl 1 N y se extrajo con éter (3x). El extracto de éter se lavó con NaCl saturado, se secó sobre MgSO_{4}, se filtró y se concentró al vacío para dar 140 mg (59%) de producto que se utilizó sin purificación adicional. ^{1}H RMN (DMSO-d_{6}): 8,25 (d, 2H), 7,98-6,30 (m, 15H), 4,50 (t, 2H), 4,0 (t, 5H), 1,90-1,25 (m, 9H); ESMS: Calculado para C_{33}H_{33}NO_{5}, 523,24 Encontrado 524,3 [M+H]^{+1}; R_{t} = 20,436 min (96,5% puro, columna C18 Vydac; gradiente de un 20 a un 100% acetonitrilo/agua + 0,1% TFA durante 30 min).
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Parte D
Preparación de la 3-(4-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))pentiloxi)-3-etoxifenil)-N-((6-hidrazino(3-piridil))sulfonil)prop-2-enamida
Se añade 2-cloro-piridina-5-sulfonamida (0,243 mmol), dimetilaminopiridina (0,300 mmol), hidrocloruro de 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etil carbodiimida (0,231 mmol) y tamiz molecular de 4 A a una solución de ácido 3-(4-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-pentiloxi)-3-etoxifenil)prop-2-enoico (0,231 mmol) en cloruro de metileno. La mezcla de reacción se agita durante toda la noche durante 18 horas y luego se filtra. El filtrado se lava con HCl 1 N, agua, sal. La fase orgánica se lava sobre sulfato de magnesio, se filtra, y se concentra hasta un volumen pequeño. La solución concentrada resultante se tritura con hexano. El producto se filtra, se lava con hexano y se seca a alto vacío para dar el intermedio de cloropiridina. Este intermedio (0,164 mmol) se trata con hidrato de hidracina (5 mL). La reacción se calienta a 70ºC durante 18 horas. El precipitado se disuelve en etanol (10 mL) y la reacción se calienta a 80ºC durante otras 20 horas. La reacción se concentra luego a alto vacío para dar el producto crudo, que se purifica por cromatografía flash.
Ejemplo 62 Síntesis del ácido 2-((6-((1-aza-2-(2-sulfofenil)vinil)-amino)(3-piridil))carbonil)-7-(5-(4,6-difenil(2-piridil-oxi)) pentiloxi)-1,2,3,4-tetrahidro-isoquinolina-3-carboxílico
158
Parte A
Preparación de la sal de ácido trifluoroacético del ácido 7-(5-(4,6-difenil(2-piridil-oxi))pentiloxi)-1,2,3,4-tetrahidroisoquinolina-3-carboxílico
159
Se trató una solución de ácido 2-((tert-butil)oxicoarbonil)-7-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))pentiloxi)-1,2,3,4-tetrahidro-isoquinolina-3-carboxílico (30 mg, 0,049 mmol), el compuesto del Ejemplo 60, en diclorometano (2,5 mL) con ácido trifluoroacético (2,5 mL) y se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. La solución se concentró a alto vacío y el residuo se liofilizó para dar 21 mg (84%) de un sólido en polvo blanco. ^{1}H RMN (CD_{3}OD): 8,20-6,80 (m, 16H), 4,61 (t, 2H), 4,42 (s, 2H), 4,14 (m, 3H), 3,70 (m, 2H), 2,02-1,66 (m, 6H); ESMS: Calculado para C_{32}H_{32}N_{2}O_{4}, 508,24 encontrado 509,3 [M+H]^{+1}; R_{t} = 16,871 min (85,2% puro, columna C18 Vydac; gradiente de un 20 a 100% acetonitrilo/agua + 0,1% TFA durante 30 min).
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Parte B
Preparación del ácido 2-((6-((1-aza-2-(2-sulfofenil)vinil)-amino)(3-piridil))carbonil)-7-(5-(4,6-difenil(2-piridil-oxi)) pentiloxi)-1,2,3,4-tetrahidro-isoquinolina-3-carboxílico
Se agita a temperatura ambiente una mezcla de sal de ácido trifluoroacético del ácido 7-(5-(4,6-difenil(2-piridil-oxi))pentiloxi)-1,2,3,4-tetrahidroisoquinolina-3-carboxílico (0,0805 mmol), N,N-dimetil formamida (2 mL), y trietilamina (0,2478 mmol) durante 15 minutos. Se añade la sal monosódica del ácido 2-[[[5-[[(2,5-Dioxo-1-pirrolidinil)oxi] carbonil]-2-piridinil]hidrazono]metil]-benzensulfónico (0,0991 mmol) y la mezcla se agita bajo nitrógeno. Después de 24 horas, la mezcla se concentra a alto vacío. La purificación por HPLC en fase reversa (gradiente de agua-acetonitrilo que contenía un 0,1% de TFA) da el producto deseado.
Ejemplo 63 Síntesis del ácido 2-((6-((1-aza-2-(2-sulfofenil)vinil)-amino)(3-piridil)carbonilamino)-3-(4-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))pentiloxi)fenil)propanoico
160
Parte A
Preparación del 2-((tert-butoxi)-carbonilamino)-3-(4-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-pentiloxi)fenil)propanoato de bencilo
161
Se calentó a 60ºC una mezcla de (5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))pentil)- (metilsulfonil)oxi (200 mg, 0,487 mmol), Boc-Tyr-OBzl (181mg, 0,487 mmol), N,N-dimetilforamida (7 mL) y carbonato de cesio (317 mg, 0,974 mmol) durante 18 horas. La mezcla se concentró a alto vacío, se diluyó con agua y se extrajo con EtOAc (3x). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con agua y NaCl saturado, se secó sobre MgSO_{4}, y se concentró al vacío. La purificación por HPLC en fase reversa (gradiente de agua-acetonitrilo que contenía 0,1% de TFA) dió 140 mg (42%) de un sólido blanco en polvo. ^{1}H RMN (CDCl_{3}): 8,14-6,66 (m, 22H), 5,11 (m, 3H), 4,59 (t, 2H), 4,00 (t, 2H), 3,08 (d, 2H), 1,88 (m, 10H), 1,40 (m, 12H); ESMS: Calculado para C_{43}H_{46}N_{2}O_{6}, 686,34 Encontrado 687,4 [M+H]^{+1}; R_{t} = 23,460 min (99,6% puro, columna C18 Vydac; gradiente de un 20 a un 100% acetonitrilo/agua + 0,1% TFA durante 30 min).
Parte B
Preparación del ácido 2-((tert-butoxi)-carbonilamino)-3-(4-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-pentiloxi)fenil)propanoico
Se añadió una mezcla de Pd sobre carbono al 10% (13 mg) y acetato de etilo (5 mL) a un matraz seco y se agitó a temperatura ambiente durante 10 minutos.Se añadió gota a gota una solución de 2-((tert-butoxi)-carbonilamino)-3-(4-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-pentiloxi)fenil)propanoato de bencilo (130 mg, 0,189 mmol) en 5 mL de acetato de etilo. La mezcla se agitó en hidrógeno atmosférico durante 24 horas y se filtró a través de celite utilizando acetato de etilo como eluyente. El filtrado se concentró a alto vacío para dar 52 mg (46%) de un aceite amarillento que se utilizó sin purificación adicional. ESMS: Calculado para C_{36}H_{40}N_{2}O_{6}, 596,29 Encontrado 597,3 [M+H]^{+1}; R_{t} = 20,989 min (100% puro, columna Vydac C_{18}; gradiente de un 20 a un 100% acetonitrilo/agua + 0,1% TFA durante 30 min).
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Parte C
Preparación de la sal de ácido trifluoroacético del ácido 2-amino-3-(4- (5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-pentiloxi)fenil)propanoico
Se trató una solución de ácido 2-((tert-butoxi)-carbonilamino)-3-(4-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-pentiloxi)fenil)propanoico (53 mg, 0,088 mmol) en diclorometano (4,9 mL) con ácido trifluoroacético (4,9 mL) y se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. La solución se concentró a alto vacío, y el residuo se liofilizó para dar 43 mg (97%) de un sólido blanco en polvo. ^{1}H RMN (DMSO-d_{6}): 8,25-6,80 (m, 16H), 4,54 (t, 2H), 4,12 (m, 3H), 3,06 (d, 2H), 1,80 (m, 6H); ESMS: Calculado para C_{31}H_{32}N_{2}O_{4}, 496,24 Encontrado 497,3 [M+H]^{+1}; R_{t} = 16,257 min (100% puro, columna C18 Vydac; gradiente de un 20 a un 100% acetonitrilo/agua + 0,1% TFA durante 30 min).
Parte D
Preparación del ácido 2-((6-((1-aza-2-(2-sulfofenil)vinil)amino)(3-piridil)carbonilamino)-3-(4-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))pentiloxi)fenil)propanoico
Se agitó a temperatura ambiente durante 15 minutos una mezcla de ácido 2-amino-3-(4-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-pentiloxi)fenil)propanoico (40 mg, 0,0805 mmol), N,N-dimetil formamida (2 mL), y trietilamina (34,5 mL, 0,2478 mmol). Se añadió la sal monosódica del ácido 2-[[[5-[[(2,5-Dioxo-1-pirrolidinil)oxi] carbonil]-2-piridinil]hidrazono]metil]-benzensulfónico (43,6 mg, 0,0991 mmol) y la mezcla se agitó bajo nitrógeno. Después de 24 horas, la mezcla se concentró a alto vacío. La purificación por HPLC en fase reversa (gradiente de agua-acetonitrilo que contenía 0,1% de TFA) dió 25 mg (39%) de un sólido blanco en polvo. ^{1}H RMN (DMSO-d_{6}): 9,40 (s, 1H), 9,02 (s, 1H), 8,54 (s, 1H), 8,30-6,76 (m, 26H), 4,58 (m, 3H), 4,00 (t, 2H), 3,10 (m, 2H), 1,78 (m, 6H); ESMS: Calculado para C_{44}H_{41}N_{5}O_{8}S, 799,26 Encontrado 800,3 [M+H]^{+1}; R_{t} = 16,691 min (98,0% puro, columna C18 Vydac; gradiente de un 20 a un 100% de acetonitrilo/agua + 0,1% TFA durante 30 min).
Ejemplo 64 Síntesis de ácido 2-((6-((1-aza-2-(2-sulfofenil)vinil)-amino)(3-piridil)carbonilamino)-3-(2-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))pentiloxi)fenil)propanoico
162
Parte A
Preparación del hidrocloruro del 2-amino-3-(2-hidroxifenil)propanoato de metilo
163
Se trató una solución de DL-o-tirosina (2g, 11,04 mmol) en metanol (40 mL) con HCl concentrado (0,67 mL, 22,08 mmol) y se puso a reflujo durante 24 horas. La solución se enfrió a temperatura ambiente y se concentró a alto vacío para dar 2 g (93%9 de un sólido marronoso que se utilizó sin purificación adicional. ^{1}H RMN (DMSO-d_{6}): 7,15-6,12 (m, 4H), 4,22 (t, 1H), 3,75 (s, 3H), 3,08 (d, 2H); ESMS: Calculado para C_{10}H_{13}NO_{3}, 195,09 Encontrado 196,1 [M+H]^{+1}; R_{t} = 2,956-3,850 min (100% puro, columna C18 Vydac; gradiente de un 20 a un 100% de acetonitrilo/agua + 0,1% TFA durante 30 min).
Parte B
Preparación del 2-((tert-butoxi)-carbonilamino)-3-(2-hidroxifenil)propanoato de metilo
Se añadió trietilamina (2,14 mL, 15,36 mmol) a una solución de 2-amino-3-(2-hidroxifenil)-propanoato de metilo (1,5 g, 7,68 mmol) en DMF (10 mL) seguido por di-tert-butil-di-carbonato (1,68 g,7,68 mmol), y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 18 horas. La mezcla se concentró a alto vacío se disolvió en una mínima cantidad de EtOAc, se filtró a través de sílica gel utilizando EtOAc como eluyente. El filtrado se concentró al vacío y se purificó por cromatografía flash en sílica gel (hexano/acetato de etilo, 7:3) para proporcionar 1,1 g (48%) de un sólido blanco. ^{1}H RMN (CDCl_{3}): 7,20-6,76 (m, 4H), 4,47 (s, 1H), 3,77 (s, 3H), 3,12 (m, 2H), 1,47 (m, 9H); ESMS: Calculado para C_{15}H_{21}NO_{5}, 295,14 Encontrado 294,2 [M-H]^{-1}; R_{t} = 11,471 min (89,1% puro, columna C18 Vydac; gradiente de un 20 a un100% de acetonitrilo/agua + 0,1% TFA durante 30 min).
Parte C
Preparación del 2-((tert-butoxi)-carbonilamino)-3-(2-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-pentiloxi)fenil)propanoato de metilo
164
Se calentó una mezcla de (5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))pentil)- (metilsulfonil)oxi (400 mg, 0,972 mmol) y 2-((tert-butoxi)-carbonilamino)-3-(2-hidroxifenil)propanoato d metilo (287 mg, 0,972 mmol), N,N-dimetilforamida (20 mL), carbonato de cesio (633 mg, 1,944 mmol) a 79ºC durante 18 horas. La mezcla se concentró a alto vacío, se diluyó con agua y se extrajo con EtOAc (3x). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con agua y con NaCl saturado, se secó sobre MgSO_{4}, se filtró y se concentró al vacío. La purificación por HPLC en fase reversa (gradiente de agua-acetonitrilo, que contenía 0,1% de TFA) dió 350 mg (57%) de un sólido blanco en polvo. ESMS: Calculado para C_{37}H_{42}N_{2}O_{6}, 610,30 Encontrado 611,3 [M+H]^{+1}; R_{t} = 23,124 min (100% puro, Columna C18 Vydac; gradiente de un 20 a un 100% acetonitrilo/agua + 0,1% TFA durante 30 min).
Parte D
Preparación de ácido 2-((tert-butoxi)-carbonilamino)-3-(2-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-pentiloxi)fenil)propanoico
165
Se trató una solución de 2-((tert-butoxi)-carbonilamino)-3-(2-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))pentiloxi)fenil)propanoato de metilo (145 mg, 0,237 mmol) en THF (15,8 mL) con monohidrato de hidróxido de litio (0,6 M, 4 mL) y se agitó a temperatura ambiente durante 18 horas. La mezcla se concentró a alto vacío, se diluyó con agua, se acidificó a pH 3 con HCl 1 N y se extrajo con EtOAc (3x). El extracto de EtOAc se lavó con agua y sal, se secó sobre MgSO_{4}, se filtró y concentró al vacío para dar 125 mg (88%) de un sólido blanco que se utilizó sin purificación adicional. ESMS: Calculado para C_{36}H_{40}N_{2}O_{6}, 596,29 Encontrado 597,3 [M+H]^{+1}; R_{t} = 21,353 min (95,8% puro, Columna C18 Vydac; gradiente de un 20 a un 100% acetonitrilo/agua + 0,1% TFA durante 30 min).
Parte E
Preparación de la sal de ácido trifluoroacético del ácido 2-amino-3-(2- (5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-pentiloxi)fenil)propanoico
Se trató una solución de ácido 2-((tert-butoxi)-carbonilamino)-3-(2-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-pentiloxi)fenil)propanoico (95 mg, 0,159 mmol) en diclorometano (5 mL) con ácido trifluoroacético (5 mL) y se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. La solución se concentró a alto vacío, y el residuo se liofilizó par dar 79 mg (100%) de un sólido blanco en polvo. ESMS: Calculado para C_{31}H_{32}N_{2}O_{4}, 496,24 Encontrado 497,3 [M+H]^{+1}; R_{t} = 16,002 min (97,1% puro, Columna C18 Vydac; gradiente de 20 a un 100% acetonitrilo/agua + 0,1% TFA durante 30 min).
Parte F
Preparación de un ácido 2-((6-((1-aza-2-(2-sulfofenil)vinil)amino)(3-piridil)carbonilamino)-3-(2-(5-(4,6-difenil(2 piridiloxi))pentiloxi)fenil)propanoico
Se añadió trietilamina (44,3 mL, 0,318 mmol) a una solución de ácido 2-amino-3- (2-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-pentiloxi)fenil)propanoico (53 mg, 0,106 mmol) en DMF (2 mL) y se agitó a temperatura ambiente durante 15 minutos. Se añadió la sal monosódica del ácido 2-[[[5-[[(2,5-Dioxo-1-pirrolidinil)oxi] carbonil]-2-piridinil] hidrazono]metil]-benzensulfónico (56,4 mg, 0,128 mmol). Se agitó la mezcla durante 4horas, se concentró a alto vacío, y se purificó por HPLC en fase reversa (gradiente de agua-acetonitrilo que contenía un 0,1% de TFA) para dar 41 mg (48%) de un sólido blanco en polvo. ^{1}H RMN (DMSO-d_{6}): 8,54 (s, 1H), 8,28-6,70 (m, 22H), 4,80 (d, 1H), 4,55 (t, 2H), 4,12 (t, 2H), 3,00 (t, 1H), 1,85 (m, 6H); ESMS: Calculado para C_{44}H_{41}N_{5}O_{8}S, 799,27 Encontrado 800,3 [M+H]^{+1}; R_{t} = 16,407 min (100% puro, Columna C18 Vydac; gradiente de un 20 a 100% de acetonitrilo/agua + 0,1% TFA durante 30 min).
Ejemplo 65 Síntesis de ácido 3-((6-((1-aza-2-(2-sulfofenil)vinil)amino)(3-piridil)carbonilamino)-3-(N-(6-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)carbamoil)propanoico
166
Parte A
Preparación del 3-((tert-butoxi)carbonilamino)-3-(N-(6-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)carbamoil)propanoato de tert-butilo
167
Se añadió trietilamina (112 mL, 0,801 mmol) a una solución de 6-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexilamina (100 mg, 0,267 mmol), tal y como se describe en el Ejemplo 10, Parte C, en DMF (5 mL) y se agitó a temperatura ambiente durante 15 minutos. Se añadió Boc-Asp(OtBu)-OSu (124 mg, 0,320 mmol), y la mezcla se agitó durante 4 horas. La mezcla se concentró a alto vacío, se mezcló en agua y se extrajo con EtOAc. El extracto de EtOAc se lavó con agua y con NaCl saturado, se secó sobre MgSO_{4}, se filtró y se evaporó al vacío. El residuo resultante se liofilizó para dar 155 mg (90%) de producto. El producto se utilizó sin purificación adicional. ESMS: Calculado para C_{38}H_{51}N_{3}O_{6}, 645,38 Encontrado 646,3 [M+H]^{+1}; R_{t} = 23,397 min (94,1% puro, Columna C18 Vydac; gradiente de un 20 a un 100% de acetonitrilo/agua + 0,1% TFA durante 30 min).
Parte B
Preparación de la sal de ácido trifluoroacético del ácido 3-amino-3-(N- (6-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)carbamoil)propanoico
Se trató una solución de 3-((tert-butoxi)carbonilamino)-3-(N-(6-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)-carbamoil)propanoato de tert-butilo (150 mg, 0,232 mmol) en diclorometano (5 mL) con ácido trifluoroacético (7 mL) y se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. La solución se concentró a alto vacío, y el residuo se liofilizó para dar 180 mg del producto que se utilizó sin purificación adicional. ESMS: Calculado para C_{29}H_{35}N_{3}O_{4}, 489,26 Encontrado 490,3 [M+H]^{+1}; R_{t} = 15,685 min (95,2% puro, Columna C18 Vydac; gradiente de un 20 a un 100% de acetonitrilo/agua + 0,1% TFA durante 30 min).
Parte C
Preparación del ácido 3-((6-((1-aza-2-(2-sulfofenil)vinil)amino)(3-piridil)carbonilamino)-3-(N-(6-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)-carbamoil)propanoico
Se agitó una mezcla del ácido 3-amino-3-(N-(6-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)carbamoil)propanoico (20 mg, 0,0408 mmol), N,N-dimetilformamida (1 mL) y trietilamina (17 mL, 0,122 mmol) a temperatura ambiente durante 15 minutos. Se añadió la sal monosódica del ácido 2-[[[5-[[(2,5-Dioxo-1-pirrolidinil)oxi]carbonil]-2-piridinil] hidrazono]metil]-benzensulfónico (21,6 mg, 0,0492 mmol), y la mezcla se agitó durante 25 horas. La mezcla se concentró a alto vacío, y el residuo se purificó por HPLC en fase reversa (gradiente de agua-acetonitrilo que contenía un 0,1% de TFA) para dar 15 mg (46%) de un sólido blanco en polvo. ^{1}H RMN (DMSO-d_{6}): 9,45 (s, 1H), 9,00 (s, 1H), 8,50-7,15 (m, 19H), 7,10 (s, 1H), 4,95 (t, 1H), 4,51 (t, 2H), 3,25-2,50 (m, 4H), 1,80-1,25 (m, 6H), 0,80 (s, 6H); ESMS: Calculado para C_{42}H_{44}N_{6}O_{8}S, 792,29 Encontrado 793,4 [M+H]^{+1}; R_{t} = 15,488 min (98.3% puro, Columna C18 Vydac; gradiente de un 20 a un 100% de acetonitrilo/agua + 0,1% TFA durante 30 min).
Ejemplo 66 Síntesis de ácido 2-(2-aza-2-((5-(N-(3-(2-(2-(3-((1-((N-metil-N-(2-feniletil)carbamoil)metil)-5-(fenilmetoxi)-indol-2-il)carbonilamino)propoxi)etoxi)etoxi)propil)-carbamoil)(2-piridil))amino)vinil)benzensulfónico
168
Parte A
Preparación de 2-(2-(N-(3-(2-(2-(3-((tert-butoxi)carbonilamino)propoxi)etoxi)etoxi)propil)carbamoil)-5- (fenilmetoxi)indolil)-N-metil-N-(2-feniletil)-etanamida
169
Se añadió diisopropiletilamina (130 mL, 075 mmol) a una solución de ácido 1-((N-metil-N-(2-feniletil)-carbamoil)metil-5-(benziloxi)indole-2-carboxílico (133 mg, 0,3 mmol), tal y como se describe en el Ejemplo 25, Parte C, en DMF (3 mL) seguido por hexafluorofosfato de 2-(1H-benzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio (114 mg, 0,3 mmol). La solución se agitó a temperatura ambiente durante 5 minutos, y se añadió N-(3-(2-(2-(3-amino)propoxi)etoxi)etoxi)propil)-(tert-butoxil)formamida (80 mg, 0,250 mmol). La mezcla se agitó durante 18 horas, se concentró a alto vacío y se purificó por HPLC en fase reversa (gradiente de agua-acetonitrilo que contenía un 0,1% de TFA) para dar 140 mg (75%) de producto. ESMS: Calculado para C_{42}H_{56}N_{4}O_{8}, 744,41. Encontrado 745,5 [M+H]^{+1}; R_{t} = 18,006 min (96,2% puro, Columna C18 Vydac; gradiente de un 20 a un 100% de acetonitrilo/agua + 0,1% TFA durante 30 min).
Parte B
Preparación de la sal de ácido trifluoroacético de la 2-(2-(N-(3-(2-(2- (3-aminopropoxi)etoxi)etoxi)propil)carbamoil)-5-(fenilmetoxi)indolil)-N-metil-N- (2-feniletil)-etanamida
Se trató una solución de 2-(2-(N-(3-(2-(2-(3-((tert-butoxi)-carbonilamino)propoxi)etoxi)etoxi)propil)carbamoil)-5-(fenilmetoxi)indolil)-N-metil-N-(2-feniletil)-etanamida (140 mg, 0,188 mmol) en diclorometano (7 mL) con ácido trifluoroacético (7 mL) y se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. La solución se concentró a alto vacío, y el residuo se liofilizó para dar 130 mg (91%) de un sólido blanco en polvo. ESMS: Calculado para C_{37}H_{48}N_{4}O_{6}, 644,36 Encontrado 645,4 [M+H]^{+1}; R_{t} = 13,737 min (94,6% puro, Columna C18 Vydac; gradiente de un 20 a un 100% de acetonitrilo/agua + 0,1% TFA durante 30 min).
Parte C
Preparación del ácido 2-(2-aza-2-((5-(N-(3-(2-(2-(3-((1-((N-metil-N-(2-feniletil)carbamoil)metil)-5-(fenilmetoxi)-indol-2-il)carbonilamino)propoxi)-etoxi)etoxi)propil)-carbamoil)(2-piridil))amino)-vinil)benzensulfónico
Se añadió trietilamina (84 mL, 0,606 mmol) a una solución de 2-(2-(N-(3-(2-(2- (3-aminopropoxi)etoxi)-etoxi)propil)carbamoil)-5-(fenilmetoxi)indolil)-N-metil-N-(2-feniletil)-etanamida (130 mg, 0,171 mmol) en DMF (4 mL) y se agitó a temperatura ambiente durante 15 minutos. Se añadió la sal monosódica del ácido 2-[[[5-[[(2,5-Dioxo-1-pirrolidinil)oxi]carbonil]-2-piridinil] hidrazono]metil]-benzensulfónico, (107 mg, 0,242 mmol), y la mezcla se agitó durante 24 horas. La mezcla se concentró a alto vacío y se purificó por HPLC en fase reversa (gradiente de agua-acetonitrilo que contenía un 0,1% de TFA) para proporcionar 116 mg (71%) de un sólido blanco en polvo. ^{1}H RMN (DMSO-d_{6}): 8,60-6,75 (m, 24H), 5,5 (s, 1H), 5,36 (s, 1H), 5,18 (t, 2H), 3,60 (m, 16H), 3,15-2,64 (m, 7H), 1,80 (m, 4H), 1,25 (t, 1H); ESMS: Calculado para C_{50}H_{57}N_{7}O_{10}S, 947,39 Encontrado 948,4 [M+H]^{+1}; R_{t} = 13,750 min (98,1% puro, Columna C18 Vydac; gradiente de un 20 a un 100% de acetonitrilo/agua + 0,1% TFA durante 30 min).
Ejemplo 67 Síntesis del ácido 2-(2-((6-((1-aza-2-(2-sulfofenil)vinil)-amino)(3-piridil)carbonilamino)-3-carboxipropanoilamino)-3-(2-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))pentiloxi)fenil)propanoico
170 
\newpage
Parte A
Preparación del 2-(3-((tert-butil)oxicoarbonil)-2-((tert-butoxi)-carbonilamino)propanoilamino)-3-(2-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-pentiloxi)fenil)propanoato
171
Se agitó una mezcla de ácido 2-amino-3-(2-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-pentiloxi)fenil)propanoico (166 mg, 0,334 mmol), N,N-dimetilformamida (4 mL) y trietilamina (0,14 mL, 1,00 mmol) a temperatura ambiente durante 15 minutos. Se añadió Boc-Asp(OtBu)-OSu (155 mg, 0,401 mmol) y la mezcla se agitó durante 2 horas. La mezcla se concentró a alto vacío, se diluyó con agua y se extrajo con EtOAc (3x). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con agua y con NaCl saturado, se secó sobre MgSO_{4} y se filtró. El filtrado se concentró al vacío y se liofilizó para dar 228 mg (89%) de un producto que se utilizó sin purificación adicional. ESMS: Calculado para C_{44}H_{53}N_{3}O_{9}, 767,38 Encontrado 768,4 [M+H]^{+1}; R_{t} = 17,484 min (88,7% puro, Columna C18 Vydac; gradiente de un 20 a un 100% de acetonitrilo/agua + 0,1% TFA durante 30 min).
Parte B
Preparación de la sal de ácido trifluoroacético del ácido 2-(amino-3-carboxipropanoil-amino)-3-(2-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))pentiloxi)-fenil)propanoico
Se trató una solución de 2-(3-((tert-butil)oxicoarbonil)-2-((tert-butoxi)-carbonilamino)propanoilamino)-3-(2-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-pentiloxi)fenil)propanoato (205 mg, 0,267 mmol) en diclorometano (5 mL) con ácido trifluoroacético (7 mL) y se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. La solución se concentró a alto vacío, y el residuo se liofilizó para dar 210 mg del producto. ESMS: Calculado para C_{35}H_{37}N_{3}O_{7}, 611,26 Encontrado 612,4 [M+H]^{+1}; R_{t} = 15,413 min (91,0% puro, Columna C18 Vydac; gradiente de un 20 a un 100% de acetonitrilo/agua + 0,1% TFA durante 30 min).
Parte C
Preparación del ácido 2-(2-((6-((1-aza-2-(2-sulfofenil)vinil)amino)(3-piridil)carbonilamino)-3-carboxipropanoilamino)-3-(2-(5-(4,6-difenil(2-piridil-oxi))pentiloxi)fenil)propanoico
Se añadió trietilamina (57 mL) a una solución de ácido 2-(amino-3-carboxipropanoilamino)-3-(2-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))pentiloxi)fenil)propanoico (84 mg, 0,137 mmol) en DMF (2 mL) y se agitó a temperatura ambiente durante 15 minutos. Se añadió la sal monosódica del ácido 2-[[[5-[[(2,5-Dioxo-1-pirrolidinil)oxi]carbonil]-2-piridinil] hidrazono]metil]-benzensulfónico (73 mg, 0,165 mmol) y la mezcla se agitó durante 48 horas. La reacción se monitorizó por HPLC analítico, y el cromatograma mostró que había dos diasteroisómeros en la reacción. La mezcla se concentró a alto vacío, y los dos diastereoisómeros se separaron por HPLC en fase reversa (gradiente de agua-acetonitrilo que contenía un 0,1% de TFA) para dar 11 mg (9%) de cada isómero. ESMS: Calculado para C_{48}H_{46}N_{6}O_{11}S, 914,9 Encontrado 915,4 [M+H]^{+1}; para SK983: R_{t} = 14,686 min (88,5% puro, Columna C18 Vydac; gradiente de un 20 a un 100% dee acetonitrilo/agua + 0,1% TF durante 30 min); Para SK894: R_{t} = 15,129 min (95,7% puro, Columna C18 Vydac; gradiente de un 20 a un 100% de acetonitrilo/agua + 0,1% TFA durante 30 min).
Ejemplo 68 Síntesis del ácido 2-(2-aza-2-((5-(N-(2-(N-(3-(2-(2-(3-(2-(2,5-dioxoimidazolidin-4-il)acetilamino)-propoxi)etoxi)etoxi)-propil)carbamoil)-1-(N- (6-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)carbamoil)-etil)carbamoil(2-piridil)) amino)-vinil)benzensulfónico
172
Parte A
Preparación de la N-(3-(2-(2-(3-((tert-butoxi)carbonilamino)propoxi)etoxi)etoxi)propil-2-(2,5-dioxoimidazolidin-4-il)etanamida
173
Una mezcla del ácido 5-hidrantoinacético (0,44 g, 2,78 mmol), N,N-dimetilformamida (10 mL), diisopropiletilamina (1,2 mL, 6,96 mmol) y hexafluorofosfato de 2-(1H-benzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametil uronio (2,64 g, 6,96 mmol) se agitó a temperatura ambiente durante 5 minutos. Se añadió la N-(3-(2-(2-(3-amino)propoxi)etoxi)etoxi)propil)(tert-butoxil)formamida (0,744 g, 2,32 mmol) y la mezcla se agitó durante 24 horas. La mezcla se concentró a alto vacío, y el residuo se purificó por cromatografía flash en sílica gel (cloroforomo:metanol, 4:1) para dar 0,75 g (70%) de un aceite marronoso. ESMS: Calculado para C_{20}H_{36}N_{4}O_{8}, 460,25 Encontrado 461,3 [M+H]^{+1}.
Parte B
Preparación de la sal de ácido trifluoroacético de la N-(3-(2-(2-(3-aminopropoxi)-etoxi)etoxi)propil-2-(2,5-dioxoimidazolidin-4-il)-etanamida
Se trató una solución de N-(3-(2-(2-(3-((tert-butoxi)-carbonilamino)propoxi)etoxi)etoxi)propil-2-(2,5-dioxoimidazolidin-4-il)etanamida (0,75 g, 1,64 mmol) en diclorometano (10 mL) con ácido trifluoroacético (10 mL) y se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. La solución se concentró a alto vacío y el residuo se liofilizó para dar 0,75 g (96%) del producto. ESMS: Calculado para C_{15}H_{28}N_{4}O_{6}, 360,20 Encontrado 361,2 [M+H]^{+1}.
\newpage
Parte C
Preparación del ácido 3-((tert-butoxi)carbonilamino-3-(N-(6-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)-carbamoil)-propanoico
174
Se añadió trietilamina (42,4 mL) a una solución de ácido 3-amino-3-(N-(6-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)carbamoil)propanoico (120 mg, 0,253 mmol) en acetonitrilo (3 mL) seguido por dicarbonato de di-tert-butilo (55 mg, 0,253 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente furante 4 horas, se concentró a alto vacío y se filtró a través de silica gel utilizando acetato de etilo como eluyente. El filtrado se evaporó al vacío y se liofilizó para proporcionar 163 mg de produco que se utilizó sin purificación adicional. ESMS: Calculado para C_{34}H_{43}N_{3}O_{6}, 589,32, Encontrado 590,2 [M+H]^{+1}; R_{t} = 20,268 min (94.2% puro, Columna C18 Vydac; gradiente de un 20 a un 100% de acetonitrilo/agua + 0,1% TFA durante 30 min).
Parte D
Preparación de la 2-((tert-butoxi)carbonilamino-N'-(3-(2-(2-(3-(2- (2,5-dioxoimidazolidin-4-il)acetilamino)-propoxi)etoxi)etoxi)propil)-N-(6-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)butane-1,4-diamida
175
Se agitó a temperatura ambiente una mezcla de ácido 3-((tert-butoxi)carbonilamino-3-(N-(6-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)carbamoil)-propanoico (141 mg, 0,239 mmol), N,N-dimetilformamida (6 mL), diisopropiletilamida (0,1 mL, 0,60 mmol) y hexafluorofosfato de 2-(1H-benzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio (90 mg, 0,239 mmol) durante 15 minutos. Se añadió N-(3-(2-(2-(3-aminopropoxi)etoxi)-etoxi)propil-2-(2,5-dioxoimidazolidin-4-il)etanamida (94 mg, 0,199 mmol) y la mezcla se agitó durante 18 horas. La mezcla se concentró a alto vacío y se purificó por HPLC en fase reversa (agua-acetonitrilo que contenía 0,1% TFA) para dar 68 mg (37%) de un sólido blanco en polvo. ESMS: Calculado para C_{49}H_{69}N_{7}O_{11}, 931,50, Encontrado 932,6 [M+H]^{+1}; R_{t} = 17,822 min (82,3% puro, Columna C18 Vydac; gradiente de un 20 a un 100% de acetonitrilo/agua + 0,1% TFA durante 30 min).
Parte E
Preparación de la sal de ácido trifluroacético de la 2-amino-N'-(3-(2- (2-(3-(2-(2,5-dioxoimidazolidin-4-il)acetilamino)-propoxi)etoxi)-etoxi)propil)-N-(6-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)butane-1,4-diamida
Se trató una solución de 2-((tert-butoxi)carbonilamino-N'-(3-(2-(2-(3-(2-(2,5-dioxoimidazolidin-4-il)acetilamino)-propoxi)etoxi)etoxi)propil)-N-(6-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)butane-1,4-diamida (68 mg, 0,073 mmol) en diclorometano (4 mL) con ácido trifluoroacético (4 mL) y se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. La solución se concentró a alto vacío y el residuo se liofilizó para dar 60 mg (98%) del producto. ESMS: Calculado para C_{44}H_{61}N_{7}O_{9}, 831,45 Encontrado 832,5 [M+H]^{+1}; R_{t} = 14,308 min (75,8% puro, Columna C18 Vydac; gradiente de un 20 a un 100% de acetonitrilo/agua + 0,1% TFA durante 30 min).
\newpage
Parte F
Preparación del ácido 2-(2-aza-2-((5-(N-(2-(N-(3-(2-(2-(3-(2-(2,5-dioxoimidazolidin-4-il)acetilamino)-propoxi)etoxi)etoxi)propil)carbamoil)-1-(N- (6-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)carbamoil)-etil)carbamoil(2-piridil)) amino)vinil)benzensulfónico
Se añadió trietilamina (30 mL, 0,216 mmol) a una solución de 2-amino-N'-(3-(2- (2-(3-(2-(2,5-dioxoimidazolidin-4-il)acetilamino)-propoxi)etoxi)-etoxi)propil)-N-(6-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)butane-1,4-diamida (60 mg, 0,072 mmol) en DMF (2 mL) y se agitó a temperatura ambiente durante 15 minutos. Se añadió la sal monosódica del ácido 2-[[[5[[(2,5-Dioxo-1-pirrolidinil)oxi] carbonil]-2-piridinil]hidrazono]-metil]-benzensulfónico (73 mg, 0,165 mmol) y la mezcla se agitó durante 48 horas. La mezcla se concentró a alto vacío y el residuo se purificó por HPLC en fase reversa (gradiente de agua-acetonitrilo que contenía un 0,1% de TFA) para dar 12,8 mg (16%) de un sólido blanco en polvo. ESMS: Calculado para C_{57}H_{70}N_{10}O_{13}S, 1134,48, Encontrado 1135,6 [M+H]^{+1}; R_{t} = 14,167 min (86.1% puro, Columna C18 Vydac; gradiente de un 20 a un 100% de acetonitrilo/agua + 0,1% TFA durante 30 min).
Ejemplo 69 Síntesis del ácido 6-((6-((1-aza-2-(2-sulfofenil)-vinil)amino)(3-piridil)carbonilamino)-2-((1-((N-metil-N-(2-feniletil)carbamoil)metil)-5- (fenilmetoxi)indol-2-il)carbonilamino)hexanoico
176
Parte A
Preparación del ácido tert-butil 6-((tert-butoxi)-carbonilamino)-2- ((1-((N-metil-N-(2-feniletil)carbamoil)-metil)-5-(fenilmetoxi)indol-2-il)carbonilamino)hexanoico
177
Se añadió el hexafluorofosfato de 2-(1H-benzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio (154 mg, 0,407 mmol) a una mezcla de ácido 1-((N-metil-N-(2-feniletil)-carbamoil)metil-5-(benziloxi)indole-2-carboxílico (180 mg, 0,407 mmol), N,N-dimetilformamida (4 mL). diisopropiletilamida (0,18 mL, 1,02 mmol). Después de agitar a temperatura ambiente durante 5 minutos se añadió H-Lys(Boc)-OtBu.HCl (103 mg, 0,339 mmol) y la mezcla se agitó durante 24 horas. La mezcla se concentró a alto vacío y se purificó por HPLC en fase reversa (gradiente de agua-acetonitrilo que contenía un 0,1% de TFA) para dar 137 mg (56%) de un sólido blanco en polvo. ESMS: Calculado para C_{42}H_{54}N_{4}O_{7}, 726,40 Encontrado 744,6 [M+NH_{4}]+1; R_{t} = 19,783 min (98,6% puro, Columna C18 Vydac; gradiente de un 20 a un 100% de acetonitrilo/agua + 0,1% TFA durante 30 min).
Parte B
Preparación de la sal de ácido trifluoroacético del ácido 6-amino-2- ((1-((N-metil-N-(2-feniletil)carbamoil)metil)-5-(fenilmetoxi)indol-2-il)carbonilamino)hexanoico
Se trató una solución de ácido tert-butil 6-((tert-butoxi)carbonilamino)-2-((1- ((N-metil-N-(2-feniletil)carbamoil)metil)-5-(fenilmetoxi)indol-2-il)carbonilamino)hexanoico (137 mg, 0,188 mmol) en diclorometano (7 mL) con ácido trifluoroacético (7 mL) y se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. La solución se concentró a alto vacío, y el residuo se liofilizó para dar 103 mg (80%) del producto. ESMS: Calculado para C_{33}H_{38}N_{4}O_{5}, 570,28, Encontrado 569,3 [M-H]^{-1}; R_{t} = 12,423 min (93,1% puro, Columna C18 Vydac; gradiente de un 20 a un 100% de acetonitrilo/agua + 0,1% TFA durante 30 min).
Parte C
Preparación del ácido 6-((6-((1-aza-2-(2-sulfofenil)vinil)amino)(3-piridil)carbonilamino)-2-((1-((N-metil-N-(2-feniletil)carbamoil)metil)-5- (fenilmetoxi)-indol-2-il)carbonilamino)hexanoico
Se añadió trietilamina (50 mL, 0,357 mmol) a una solución de ácido 6-amino-2- ((1-((N-metil-N-(2-feniletil)carbamoil)metil)-5-(fenilmetoxi)indol-2-il)carbonilamino)hexanoico (68 mg, 0,119 mmol) en DMF (1,5 mL) y se agitó a temperatura ambiente durante 15 minutos. Se añadió la sal monosódica del ácido 2-[[[5-[[(2,5-Dioxo-1-pirrolidinil)oxi] carbonil]-2-piridinil]hidrazono]metil-benzensulfónico (63 mg, 0,143 mmol) y la mezcla se agitó durante 24 horas. La mezcla se concentró al alto vacío y se purificó por HPLC en fase reversa (gradiente de agua-acetonitrilo que contenía un 0,1% de TFA) para dar (48%) de un sólido blanco en polvo. ESMS: Calculado para C_{46}H_{47}N_{7}O_{9}S, 873,31 Encontrado 872,3 [M-H]^{-1}; R_{t} = 11,569 min (100% puro, Columna C18 Vydac; gradiente de un 20 a un 100% de acetonitrilo/agua + 0,1% TFA durante 30 min).
Ejemplo 70 Síntesis del ácido 1-(3-((6-((1-aza-2-(2-sulfofenil)vinil)amino)-(3-piridil)carbonilamino)-3-(N-(6-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)carbamoil)propanoilamino)-etane-1,2-dicarboxílico
178
Se agitó a temperatura ambiente una mezcla de ácido 3-((tert-butoxi)carbonilamino-3-(N-(6-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)carbamoil)-propanoico (50 mg, 0,0847 mmol), N,N-dimetilformamida (2 mL), diisopropiletilamina (45 mL, 0,254 mmol) y hexafluorofosfato de 2-(1H-benzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio (32 mg, 0,0847 mmol) durante 10 minutos. Se añadió H-Asp-OH (11,4 mg, 0,0847 mmol) en porciones y la mezcla se agitó durante 18 horas. La mezcla se concentró a alto vacío y se purificó por HPLC en fase reversa (gradiiente de agua-acetonitrilo qu contenía un 0,1% de TFA) para proporcionar el producto intermedio. Se trató una solución de este intermedio en diclorometano (4 mL) con ácido trifluoroacético (4 mL) y se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. La solución se concentró a alto vacío y el residuo se liofilizó para dar la sal de amina desprotegida. Se añadió trietilamina (35 mL) a una solución de esta sal de amina en DMF (1,5 mL). Después de agitar durante 10 minutos, se añadió la sal monosódica del ácido 2-[[[5-[[(2,5-Dioxo-1-pirrolidinil)oxi] carbonil]-2-piridinil] hidrazono] metil]-benzensulfónico (44,76 mg, 0,102 mmol). La mezcla se agitó durante 24 horas y se concentró a alto vacío. La purificación por HPLC en fase reversa (gradiente de agua-acetonitrilo que contenía un 0,1% de TFA) dió 7 mg (9.1%) de un sólido blanco en polvo. ESMS: Calculado para C_{46}H_{49}N_{7}O_{11}S, 907,32 Encontrado 908,3 [M+H]^{+1}; R_{t} = 14,158 min (100% puro, Columna C18 Vydac; gradiente de un 20 a un 100% de acetonitrilo/agua + 0,1% TFA durante 30 min).
Ejemplo 71 Síntesis del ácido 1-(2-(3-((6-((1-aza-2-(2-sulfofenil)vinil)-amino)(3-piridil)carbonilamino)-3-(N-(6-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)carbamoil)propanoilamino)-3-carboxipropanoilamino)etane-1,2-dicarboxílico
179
Se agitó a temperatura ambiente una mezcla de ácido 3-((tert-butoxi)carbonilamino-3-(N-(6-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)carbamoil)-propanoico (50 mg, 0,0847 mmol), N,N-dimetilformamida (2 mL), diisopropiletilamina (45 mL, 0,254 mmol) y hexafluorofosfato de 2-(1H-benzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio (32 mg, 0,0847 mmol) durante 10 minutos. Se añadió H-Asp-OH (11,4 mg, 0,0847 mmol) en porciones y la mezcla se agitó durante 18 horas. La mezcla se concentró a alto vacío y se purificó por HPLC en fase reversa (gradiente de agua-acetonitrilo que contenía un 0,1% de TFA) para proporcionar el producto intermedio. Se trató una solución de este intermedio en diclorometano (4 mL) con ácido trifluoroacético (4 mL) y se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. La solución se concentró a alto vacío y el residuo se liofilizó para dar la sal de amina desprotegida. Se añadió trietilamina (35 mL) a una solución de esta sal de amina en DMF (1,5 mL). Después de agitar durante 10 minutos, se añadió la sal monosódica del ácido 2- [[[5-[[(2,5-Dioxo-1-pirrolidinil)oxi] carbonil]-2-piridinil] hidrazono] metil]-benzensulfónico (44,76 mg, 0,102 mmol). La mezcla se agitó durante 24 horas y se concentró a alto vacío. La purificación por HPLC en fase reversa (gradiente de agua-acetonitrilo que contenía un 0,1% de TFA) dió 13 mg (15,1%) de un sólido blanco en polvo. ESMS: Calculado para C_{50}H_{54}N_{8}O_{14}S, 1022,35, Encontrado 1023,3 [M+H]^{+1}; R_{t} = 13,570 min (90,6% puro, Columna C18 Vydac; gradiente de un 20 a un 100% de acetonitrilo/agua + 0,1% TFA durante 30 min).
Ejemplo 72 Síntesis del ácido 2-(2-aza-2-((5-(N-(1-(N-(6-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)carbamoil)-2-(3-(((4,5,6-trihidroxi-3-(hidroximetil)(2-oxanil))amino)carbonilamino)-propanoilamino)etil)carbamoil(2-piirdil))amino)vinil)-benzensulfónico
180 
\newpage
Parte A
Preparación de la 2-((tert-butoxi)carbonilamino)-N-(6-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)-3-((fluoren-9-ilmetoxi)carbonilamino)propanamida
181
Se añadió diisopropiletilamina (0,18 mL, 1,04 mmol) a una solución de 6-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexilamida (130 mg, 0,347 mmol) en DMF (6 mL) seguido por hexafluorofosfato de 2-(1H-Benzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio (158 mg, 0,416 mmol). Después de agitar a temperatura ambiente durante 15 minutos, se añadió Boc-DAP(Fmoc)-OH (178 mg, 0,416 mmol). La mezcla se agitó durante 24 horas, se concentró a alto vacío y se purificó por HPLC en fase reversa (gradiente de agua-acetonitrilo que contenía un 0,1% de TFA) para dar 171 mg (63%) de un sólido blanco en polvo. ESMS: Calculado para C_{48}H_{54}N_{4}O_{6}, 782,40 Encontrado 783,5 [M+H]^{+1}; R_{t} = 23,382 min (87,9% puro, Columna C18 Vydac; gradiente de un 20 a un 100% de acetonitrilo/agua + 0,1% TFA durante 30 min).
Parte B
Preparación de la 3-amino-2-((tert-butoxi)-carbonilamino)-N-(6-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)propanamida
Se añadió piperidina (1,25 mL) a una solución de 2-((tert-butoxi)carbonilamino)-N-(6-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)-3- ((fluoren-9-ilmetoxi)carbonilamino)propanamida (171 mg, 0,218 mmol) en DMF (5 mL) y se agitó a temperatura ambiente durante 1,5 horas. La solución se concentró a alto vacío, y el residuo se purificó por HPLC en fase reversa (agua-acetonitrilo que contenía 0,1% TFA) para dar 70 mg (57%) del producto. ESMS: Calculado para C_{33}H_{44}N_{4}O_{4}, 560,34, Encontrado 561,4 [M+H]^{+1}; R_{t} = 17,715 min (98,3% puro, Columna C18 Vydac; gradiente de un 20 a un 100% de acetonitrilo/agua + 0,1% TFA durante 30 min).
Parte C
Preparación de la 2-((tert-butoxi)carbonilamino)-N-(6-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)-3-(3-(((4,5,6-trihidroxi-3-(hidroximetil)(2-oxanil))amino)-carbonilamino)propanoilamino)propanamida
182
Se añadió trietilamina (52 mL, 0,375 mmol) a una solución de la 3-amino-2- ((tert-butoxi)carbonilamino)-N-(6-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)propanamida (70 mg, 0,125 mmol) en DMF (2 mL) y se agitó durante 5 minutos. Se añadió (b-D-Glucoseamido)-carbonil-b-alanine-OSu (58,7 mg, 0,15 mmol) y la mezcla se agitó durante 18 horas. La mezcla se concentró a alto vacío y el residuo se liofilizó para proporcionar 93 mg (89%) del producto que se utilizó sin purificación adicional. ESMS: Calculado para C_{43}H_{60}N_{6}O_{11}, 836,43 Encontrado 835,3 [M-H]^{-1}; R_{t} = 16,154 min (74,0% puro, Columna C18 Vydac; gradiente de un 20 a un 100% de acetonitrilo/agua + 0,1% TFA durante 30 min).
Parte D
Preparación de la sal de ácido trifluoroacético de la 2-amino-N-(6- (4,6-difenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)-3-(3-(((4,5,6-trihidroxi-3- (hidroximetil)(2-oxanil))amino)carbonilamino)propanoil-amino)propanamida
Se trató una solución de 2-((tert-butoxi)carbonilamino)-N-(6-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)-3-(3-(((4,5,6-trihidroxi-3-(hidroximetil)(2-oxanil))amino)carbonilamino)-propanoilamino)propanamida (93 mg, 0,111 mmol) en diclorometano (4 mL) con ácido trifluoroacético (5 mL) y se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. La solución se concentró a alto vacío y el residuo se liofilizó para dar 82 mg (100%) del producto. El producto se utilizó sin purificación adicional. ESMS: Calculado para C_{38}H_{52}N_{6}O_{9}, 736,38 Encontrado 737,5 [M+H]^{+1}; R_{t} = 13,320 min (80,5% puro, Columna C18 Vydac; gradiente de un 20 a un 100% de acetonitrilo/agua + 0,1% TFA durante 30 min).
Parte E
Preparación del ácido 2-(2-aza-2-((5-(N-(1-(N-(6-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)carbamoil)-2-(3-(((4,5, 6-trihidroxi-3- (hidroximetil)(2-oxanil))-amino)carbonilamino)propanoilamino)etil)carbamoil(2-piridil)) amino) vinil)benzensulfónico
Se añadió trietilamina (46 mL, 0,333 mmol) a una solución de 2-amino-N-(6-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)-3-(3-(((4,5,6-trihidroxi-3- (hidroximetil)(2-oxanil))amino)carbonilamino)propanoil-amino)propanamida (82 mg, 0,111 mmol) en DMF (2 mL) y se agitó a temperatura ambiente durante 10 minutos. Se añadió la sal monosódica del ácido 2-[[[5-[[(2,5-Dioxo-1-pirrolidinil)-oxi]carbonil]-2-piridinil]hidrazono]metil]-benzensulfónico (68 mg, 0,155 mmol) y la mezcla se agitó durante 24 horas. La mezcla se concentró a alto vacío y se purificó por HPLC en fase reversa (gradiente de agua-acetonitrilo que contenía un 0,1% de TFA) para dar 20 mg (17%) de un sólido blanco en polvo. ESMS: Calculado para C_{51}H_{61}N_{9}O_{13}S, 1039,41 Encontrado 1038,2 [M-H]^{-1}; R_{t} = 13,149 min (92,5% puro, Columna C18 Vydac; gradiente de un 20 a un 100% de acetonitrilo/agua + 0,1% TFA durante 30 min).
Ejemplo 73 Síntesis del ácido 3-(N-(6-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)carbamoil)-3-(3-piridilcarbonilamino)propanoico
183
Se agitó a temperatura ambiente una mezcla de ácido 3-amino-3-(N-(6-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)carbamoil)propanoico (100 mg, 0,204 mmol), N,N-dimetilformamida (2 mL), y trietilamina (0.1 mL) durante 5 minutos. Se añadió nicotinato de succinimidilo (69 mg, 0,315 mmol) y la mezcla se agitó durante 18 horas. La mezcla se concentró a alto vacío y el residuo se purificó utilizando HPLC en fase reversa (gradiente de agua-acetonitrilo que contenía un 0,1% de TFA) para dar 23 mg (19%) de un sólido blanco en polvo. ESMS: Calculado para C_{35}H_{38}N_{4}O_{5}, 594,2842 Encontrado 595,2 [M+H]^{+1}; R_{t} = 15.597 min (100% puro, Columna C18 Vydac; gradiente de un 20 a un 100% de acetonitrilo/agua + 0,1% TFA durante 30 min).
Ejemplo 74 Síntesis de la N-(6-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)-3-piridilformamida
184
Se agitó a temperatura ambiente una mezcla de 6-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexilamida (0,14 g, 0,373 mmol), y trietilamina (0.3 mL) durante 10 minutos. Se añadió nicotinato de succinimidilo (0,1 g, 0,447 mmol) y la mezcla se agitó durante 18 horas. La mezcla se concentró a alto vacío y el residuo se purificó utilizando HPLC en fase reversa (gradiente de agua-acetonitrilo que contenía un 0,1% de TFA) para dar 0,114 mg (64%) de un sólido blanco en polvo. ^{1}H RMN (CDCl_{3}): 8,12-6,80 (m, 16H), 4,54 (t, 2H), 3,43 (t, 2H), 1,90 (m, 6H), 1,05 (s, 6H); ESMS: Calculado para C_{31}H_{33}N_{3}O_{2}, 479,2573 Encontrado 480,2 [M+H]^{+1}; R_{t} = 17,096 min (100% puro, Columna C18 Vydac; gradiente de un 20 a un 100% de acetonitrilo/agua + 0,1% TFA durante 30 min).
Ejemplo 75 Síntesis del ácido 2-(2-aza-2-((5-((6-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexanoil-amino)sulfonil)-(2-piridil))amino)vinil)benzensulfónico
185
Parte A
Preparación de la 6-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))-N-((6-chloro(3-piridil))sulfonil)-2,2-dimetilhexanamida
186
Se añadió la 2-cloropiridina-5-sulfonamida (0,0466 g, 0,243 mmol), dimetilaminopiridina (0,037 g, 0,300 mmol), hidrocloruro de 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etil carbodiimida (0,0443 g, 0,231 mmol) y tamiz molecular de 4 A a una solución de ácido 6-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexanoico (0,100 g, 0,231 mmol) en cloruro de metileno. La mezcla de reacción se agitó por la noche durante 18 horas y luego se filtró. El filtrado se lavó con HCl 1 N, agua, sal. La fase orgánica se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y concentró a un volumen pequeño. La solución concentrada resultante se trituró con hexano., El producto se filtró, se lavó con hexano y se secó a alto vacío para dar 51.7 mgs (37%) del producto. ESMS: Calculado para C_{31}H_{30}N_{3}O_{6}S, 607,15; Encontrado, 608,4 [M+H]^{+1}.
\newpage
Método 5 HPLC. R_{t} = 19,226 min Pureza = 78%
Parte B
Preparación de la 6-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))-N-((6-hidrazino(3-piridil))sulfonil)-2,2-dimetilhexanamida
Se trató la 6-(4-Benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))-N-((6-chloro(3-piridil))sulfonil)-2,2-dimetilhexanamida (0,100 g, 0,164 mmol) en hidrato de hidrazina (5 mL). La reacción se calentó a 70ºC durante 18 horas. Se añadió etanol (10 mL) ya que en la reacción había aún un precipitado. El precipitado disuelto y la reacción se calentaron a 80ºC durante otras 20 horas. La reacción se concentró luego a alto vacío para dar el producto crudo. El producto crudo se purificó por cromatografia flash (7:1 cloroformo:metnol) para dar 54,8 mgs (55%) del producto. ESMS: Calculado para C_{31}H_{33}N_{5}O_{6}S, 603,21; Encontrado, 604,4 [M+H]^{+1}.
Método 5 HPLC. R_{t} = 15,285 min Pureza = 98%
Parte C
Preparación del ácido 2-(2-aza-2-((5-((6-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexanoil-amino)sulfonil)(2-piridil))amino)vinil)benzensulfónico
Se disolvió en dimetilformamida (1 mL) la 6-(4-Benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))-N-((6-hidrazino(3-piridil))sulfonil)-2,2-dimetilhexanamida (0,050 g, 0,0828 mmol). Se añadió trietilamina (34,6 \muL, 248 mmol) y la reacción se agitó durante 5 minutos. Se añadió la sal monosódica del ácido 2-Formilbenzensulfónico (0,0181 g, 0,0869 mmol) y la reacción se agitó por la noche durante 18 horas. La reacción se concentró a aun aceite a alto vacío. El producto crudo se purificó por HPLC preparativo con el Método 2 para dar 6,4 mg (10%) del producto. ESMS: Calculado para C_{38}H_{37}N_{5}O_{9}S_{2}, 771,20; Encontrado, 772,3 [M+H]^{+1}.
Método 5 HPLC. R_{t} = 15,431 min Pureza = 97%
Ejemplo 76 Síntesis de la 6-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))-N-(1-(N- ((6-hidrazino(3-piridil))sulfonil)cabamoil)-2-(4-hidroxifenil)etil)-2,2-dimetilhexanamida
187
Parte A
Preparación del tert-butil 2-(6-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexanoil-amino)-3-(4-(tert-butoxi)fenil)propanoate
188
Se disolvió en dimetilfomamida (5 mL)el ácido6-(4-Benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexanoico (0,100 g, 0,231 mmol) en dimetilformamida (5 mL). Se añadió diisopropiletilamina (100,5 \muL, 0,578 mmol) y la reacción se agitó durante 5 minutos. Se añadieron H-Tyr(OtBu)-OtBu\cdotHCl (0,0838 g, 0,254 mmol) y el hexafluorofosfato de 2(1H-benzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio (0,0964 g, 0,254 mmol) y la reacción se agitó bajo nitrógeno durante 24 horas. La reacción se concentró a un residuo a alto vacío para dar 190,5 mg (116%) del producto. EL producto crudo se utilizó en el próximo paso. ESMS: Calculado para C_{43}H_{52}N_{2}O_{7}, 708,38; Encontrado 709,5 
\hbox{[M+H] ^{+1} }
.
Método 5 HPLC. R_{t} = 23,043 min Pureza = 87%
Parte B
Preparación del ácido 2-(6-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexanoil-amino)-3-(4-hidroxifenil)propanoico
Se disolvió en cloruro de metileno (3,0 mL) el2-(6-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexanoil-amino)-3-(4-(tert-butoxi)fenil)propanoato de tert-butilo (0,144 g, aprox.0,223 mmol). Se añadió ácido trifluoroacético (3,0 mL) y la reacción se agitó durante 2 horas. La reacción se concentró a alto vacío. El aceite resultante se mezcló en acetonitrilo/agua 50:50 y se liofilizó para dar el prodcuto como un aceite. EL producto se purificó por HPLC preparativo con el Método 2 para dar 119,1 mg (98%) del producto. HRMS: Calculado para C_{35}H_{36}N_{2}O_{7} + H, 597,2600; Encontrado, 597,2617.
Método 5 HPLC. R_{t} = 15,729 min Pureza = 100%
Parte C
Preparación de la 6-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))-N-(1-(N-((6-hidrazino(3-piridil))sulfonil)cabamoil)-2-(4-hidroxifenil)etil)-2,2-dimetilhexanamida
Se añade 2-cloro-piridina-5-sulfonamida (0,243 mmol), dimetilaminopiridina (0,300 mmol), hidrocloruro de 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etil carbodiimida (0,231 mmol), y tamiz molecular de 4 A a una solución de ácido 2-(6-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexanoil-amino)-3- (4-hidroxifenil)propanoico (0,231 mmol) en cloruro de metileno. La mezcla de reacción se agita por la noche durante 18 horas y luego se filtra. El filtrado se lava con HCl 1 N, agua, sal. La fase orgánica se seca sobre sulfato de magnesio, se filtra y concentra a un volumen pequeño. La solución concentrada resultante se tritura con hexano. El producto se filtra, se lava con hexano y se seca a alto vacío para dar el intermedio de cloropiridina. Este intermedio (0,164 mmol) se mezcla en hidrato de hidracina (5 mL). La reacción se calienta a 70ºC durante 18 horas. El precipitado se disuelve en etanol (10 mL) y la reacción se calienta a 70ºC durante 18 horas. El precipitado se disuelve en etanol (10 mL) y la reacción se calienta a 80ºC durante otras 20 horas. La reacción se concentra luego a alto vacío para dar el producto crudo, que se purifica por cromatografía flash.
Ejemplo 77 Síntesis de la 4-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-N-(1-(N-(1-(N-((6-hidrazino(3-piridil))sulfonil)cabamoil)-2-(4-hidroxifenil)etil)-carbamoil)-isopropil)butanamida
189
Parte A
Preparación del 4-(4,6-difenil-2-piridiloxi)butanenitrilo
Se disolvió la 4,6-Difenil-piridona (1,5 g, 6,07 mmol) en dimetilformamida (40 mL). Se añadieron el 4-Bromobutyronitrilo (1,81 mL, 18,2 mmol) y carbonato de plata (1,67 g, 6,07 mmol), y la reacción se puso a reflujo a oscuras durante 72 horas. La reacción se enfrió luego, se filtró y concentró a alto vacío. El residuo se trató con acetato de etilo y se pasó a través de silica gel. El filtrado se concentró a alto vacío. El residuo resultante se purificó por cromatografía flash (hexano:acetato de etilo 5:1) para dar 1,77 g (93%) del producto. ESMS: Calculado para C_{21}H_{18}N_{2}O, 314,14; Encontrado 315,3 [M+H]^{+1}.
Método 5 HPLC. R_{t} = 18,715 min Pureza = 97%.
Parte B
Preparación del ácido 4-(4,6-difenil-2-piridiloxi)butanoico
Se disolvió el 4-(4,6-Difenil-2-piridiloxi)butanenitrilo (0,813 g, 2,59 mmol) en ácido clorhídrico concentrado (10 mL), ácido acético glacial (6 mL), y agua (4 mL) y se calentó a reflujo durante 20 horas. La reacción se diluyó con agua, sal, y se extrajo con cloruro de metileno. La fase orgánica se lavó con agua, sal y se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y se evaporó. El aceite resultante se purificó por cromatografía flash (hexano:acetato de etilo 1,4:1, cloruro de metileno:acetato de etilo 2,2:1) para dar 109,1 mg (13%) del producto. ESMS: Calculado para C_{21}H_{19}NO_{3}, 333,14, Encontrado 332,3 [M-H]^{-1}.
Método 5 HPLC. R_{t} = 15,884 min Pureza = 100%.
Parte C
Preparación del ácido 2-(2-(4-(4,6-difenil-2-piridiloxi)butanoilamino)-2-metilpropanoilamino)-3-(4-hidroxifenil)propanoico
190
Se añadió 0,50 g de resina Fmoc-Tyr(OtBu)-wang a una bolsa de té (5x5 cm filtro de polipropileno, 0.75 \mum mesh). La bolsa de té se lavó con lo siguiente (10 mL/bolsa) DMF 2x3 min, 20% piperidina en solución de DMF 1x3 min, 20% piperidina en solución de DMF 1x 30 min, DCM 8x3 min y DMF 3x3 min. Se añadió al reactor cinco equivalentes de cada uno de lo siguiente; Fmoc-Aib-OH, HBTU, HOBT, diisopropiletilamina (DIEA) y DMF (10ml/bolsa). La bolsa se agitó intensamente por la noche durante aproximadamente 16 horas. La bolsa se lavó luego con lo siguiente (10 mL/bolsa): DMF 3x3 min, DCM 8x3 min, y se secó a alto vacío. El rendimiento de acoplamiento (99%) se determinó utilizando el ensayo de ácido pícrico. Luego 0,200 g de resina Fmoc-Aib-Tyr(OtBu)-wang se transfirieron a una bolsa de té (5x5 cm filtro de polipropileno, 0.75 \mum mesh). La bolsa de té se lavó con lo sgiuiente (10 mL/bolsa) DMF 2x3 min, 20% piperidina en solución de DMF 1x3 min, 20% piperidina en solución de DMF 1x30 min, DCM 8x3 min y dMF 3x3 min. Se añadió al reactor 2,5 equivalentes de ácido 4-(4,6-difenil-2-piridiloxi)-butanoico y cinco equivalentes de cada uno de lo siguiente: HBTU, HOBT, diisopropiletilamina (DIEA) y DMF (10ml/bolsa). La bolsa se agitó intensamente luego por la noche durante aproximadamente 18 horas. La bolsa se lavó luego con lo siguiente (10 mL/bolsa): DMF 3 x 3 min, DCM 8 x 3 min. La bolsa se secó a alto vacío. Los contenidos de la bolsa se colocaron luego en un matraz erlenmeyer pequeño y se añadió un cocktail de escisión (10 mL) (95% de ácido trifluoroacético, 2.5% triisopropilsilano, y 2,5% agua). La resina se dejó reposar durante dos horas mientras se agitab aocasionalmente. Después de cada agitación el lado del matraz se lavaba con cocktail adicional hasta que el volumen total del coktail añadido fue de 15 mL. Después de dos horas, la resina se filtró y se lavó con TFA (2x4 mL). El filtrado se concentró a un aceite a alto vacío. El aceite su purificó por HPLC preparativo con el Método 2 para dar 14,1 mg del producto. HRMS: Calculado para C_{34}H_{35}N_{3}O_{6} + H, 582,2604; Encontrado, 582,2606.
Método 5 HPLC. R_{t} = 13,912 min Pureza = 98%
Parte D
Preparación de la Preparación of 4-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-N-(1-(N- (1-(N-((6-hidrazino(3-piridil))sulfonil)cabamoil)-2-(4-hidroxifenil)etil)-carbamoil)-isopropil)butanamida
Se añade 2-cloro-piridina-5-sulfonamida (0,243 mmol), dimetilaminopiridina (0,300 mmol), hidrocloruro de 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etil carbodiimida (0,231 mmol), y tamiz molecular de 4 A a una solución de ácido 2-(2-(4-(4,6-difenil-2-piridiloxi)-butanoilamino)-2-metilpropanoilamino)-3-(4-hidroxifenil)propanoico (0,231 mmol) en cloruro de metileno. La mezcla de reacción se agita durante toda la noche durante 18 horas y luego se filtra. El filtrado se lava con HCl 1 N, agua, sal. La fase orgánica se seca sobre sulfato de magnesio, se filtra y concentra a un volumen pequeño. La solución concentrada resultante se tritura con hexano. El producto se filtra, se lava con hexano y se seca a alto vacío para dar el intermedio de cloropiridina. Este intermedio (0,164 mmol) se mezcla en hidrato de hidracina (5 mL). La reacción se calienta a 70ºC durante 18 horas. El precipitado se disuelve en etanol (10 mL) y la reacción se calienta a 70ºC durante 18 horas. El precipitado se disuelve en etanol (10 mL) y la reacción se calienta a 80ºC durante otras 20 horas. La reacción se concentra luego a alto vacío para dar el producto crudo, que se purifica por cromatografía flash.
Ejemplo 78 Síntesis del ácido 3-(4-(3-((6-((1-aza-2-(2-sulfofenil)vinil)amino)(3-piridil))carbonilamino)-propoxi)fenil)-2-(2,2-dimetil-6-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi))hexanoilamino)propanoico
191
Parte A
Preparación del 3-(4-(tert-butoxi)fenil)-2-(2,2-dimetil-6-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi)) hexanoilamino)propanoato de tert-butilo
192
Se disolvió en dimetilformamida (5 mL) H-Tyr(OtBu)-OtBu\cdotHCl (0,115 g, 0,348 mmol). Se añadió diisopropiletilamina (126,3 \muL, 0,725 mmol) y la reacción se agitó durante 5 minutos. Se añadieron el ácido 2,2-Dimetil-6-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi))hexanoico (0,100 g, 0,290 mmol) y hexafluorofosfato de 2(1H-benzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio (0,121 g, 0,319 mmol) y la reacción se agitó bajo nitrógeno durante 60 horas. La reacción se concentró a un residuo a alto vacío. El aceite se disolvió en ACN:H_{2}O 50:50 y se liofilizó para dar 0,457 g del producto, sin embargo, como un aceite. ESMS: Calculado para C_{38}H_{53}NO_{6}, 619,39, Encontrado 620,5 [M+H]^{+1}.
Método 5 HPLC. R_{t} = 21,882 min Pureza = 94%
Parte B
Preparación del ácido 2-(2,2-dimetil-6-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi))hexanoilamino)-3-(4-hidroxifenil)propanoico
Se disolvió en cloruro de metileno (3,0 mL) el 3-(4-(tert-butoxi)fenil)-2-(2,2-dimetil-6-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi))-hexanoilamino)propanoato de tert-butilo (0,457 g). Se añadió ácido triluoroacético (3,0 mL), y la reacción se agitó durante 2 horas. La reacción se concentró a alto vacío. El aceite resultante se purificó por HPLC preparativo con el Método 2 para dar 126,5 mg (86% en dos pasos) del producto. HRMS: Calculado para C_{30}H_{37}NO_{6} + H, 508,2699; Encontrado, 508,2703.
Método 5 HPLC. R_{t} = 13,743 min Pureza = 98%
Parte C
Preparación del ácido 3-(4-(3-((6-((1-aza-2-(2-sulfofenil)vinil)amino)(3-piridil))carbonilamino)-propoxi)fenil)-2-(2,2-dimetil-6-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi))hexanoilamino)propanoico
Se disuelve en dimetilformamida (5 mL) el H-Tyr(O-CH_{2}-CH_{2}-CH_{2}-NH-boc)-OtBu (0,348 mmol). Se añade diisopropiletilamina (0,725 mmol) y la reacción se agita durante 5 minutos. Se añade el ácido 2,2-Dimetil-6-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidro-naftiloxi))hexanoico (0,290 mmol) y el hexafluorofosfato de 2(1H-benzo-triazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio (0,319 mmol), y la reacción se agita bajo nitrógeno durante 60 horas. La mezcla de reacción se concentra a un residuo a alto vacío y se disuelve en cloruro de metileno (5 mL). Se añade ácido trifluoroacético (5,0 mL) y la reacción se agita durante 2 horas. La reacción se concentra a alto vacío para dar el producto amina. Se agita una mezcla de este producto (0,0805 mmol), N,N-dimetil formamida (2 mL), y trietilamina (0,2478 mmol) a temperatura ambiente durante 15 minutos. Se añade la sal monosódica del ácido 2-[[[5-[[(2,5-Dioxo-1-pirrolidinil)oxi] carbonil]-2-piridinil]hidrazono]metil]-benzensulfónico (0,0991 mmol) y la mezcla se agita bajo nitrógeno. Después de 24 horas, la mezcla se concentra a alto vacío. La purificación por HPLC en fase reversa (agua-acetonitrilo gradiente que contenía 0,1% TFA) da el producto deseado.
Ejemplo 79 Síntesis del ácido 3-((6-((1-aza-2-(2-sulfofenil)vinil)amino)(3-piridil)carbonilamino)-3-(N-(6-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)carbamoil)propanoico
193
Parte A
Preparación del 3-(N-(6-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)carbamoil)-3-((tertbuto-xi) carbonilamino)-propanoato de tert-butilo
194
Se disolvió en dimetilformamida (5 mL) el 1-Amino-2,2-dimetil-6-[(4-(3,4-metilenedioxifenil)-6-fenil-2-piridinil)oxi]-hexano (0,100 g, 0,239 mmol). Se añadió trietilamina (0,100 mL, 0,717 mmol) y la reacción se agitó durante 5 minutos. Se añadió Boc-Asp(OtBu)-OSu (0,110 g, 0,287 mmol) y la reacción se agitó bajo nitrógeno durante 48 horas. La reacción se concentró a un aceite a alto vacío. El aceite se disolvió en ACN/H_{2}O 50:50 y se liofilizó para dar 0,219 g (133%) del producto. ESMS: Calculado para C_{39}H_{51}N_{3}O_{8}, 689,37; Encontrado 690,5 [M+H]^{+1}.
Método 5 HPLC. R_{t} = 21,930 min Pureza = 97%
Parte B
Preparación del ácido 3-amino-3-(N-(6-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)carbamoil)propanoico
Se disolvió en cloruro de metileno (3,0 mL) el 3-(N-(6-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)carbamoil)-3- ((tertbutoxi)carbonilamino)propanoato de tert-butilo (0,145 g, 0,210 mmol). Se añadió ácido trifluoroacético (3,0 mL) y la reacción se agitó durante 2 horas. La reacción se concentró a alto vacío. El aceite resultante se trató con acetonitrilo/agua al 50:50 y se liofilizó para dar 242,0 mg (177%) del producto. ESMS: Calculado para C_{30}H_{35}N_{3}O_{6}, 533,25; Encontrado 532,3 [M-H]^{-1}.
Método 5 HPLC. R_{t} = 13,921 min Pureza = 96%
Parte C
Preparación del ácido 3-((6-((1-aza-2-(2-sulfofenil)vinil)amino)(3-piridil)carbonilamino)-3-(N-(6-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)carbamoil)propanoico
Se disolvió en dimetilformamida (5 mL) el ácido3-Amino-3-(N-(6-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)carbamoil)propanoico (0,100 g, 0,154 mmol). Se añadió trietilamina (64,4 \muL, 0,462 mmol) y la reacción se agitó durante 5 minutos. Se añadió la sal monosódica del ácido 2- [[[5-[[(2,5-Dioxo-1-pirrolidinil)oxi]carbonil]-2-piridinil]hidrazono]metil]-benzensulfónico (0,082 g, 0,185 mmol) y la reacción se agitó durante 24 horas bajo nitrógeno. La reacción se concentró luego a un aceite a alto vacío. El aceite se trituró con acetato de etilo. El producto crudo se purificó por HPLC preparativo con el Método 2 para dar 31,1 mg (24%) del producto. HRMS: Calculado para C_{43}H_{44}N_{6}O_{10}S + H, 837,2917; Encontrado, 837,2901.
Método 5 HPLC. R_{t} = 14,279 min Pureza = 93%
Ejemplo 80 Síntesis del ácido 2-(2-aza-2-((5-(N-(1-(N-(6-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetil-hexil)carbamoil)-2-(4-hidroxifenil)etil)carbamoil(2-piridil))amino)vinil)-benzensulfónico
195
Parte A
Preparación de la N-(6-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)-2-((tert-butoxi)carbonilamino)-3-(4-hidroxifenil)propanamida
196
Se disolvió en dimetilformamida (5 mL) el 1-Amino-2,2-dimetil-6-[(4-(3,4-metilenedioxifenil)-6-fenil-2-piridinil)oxi]-hexano (0,100 g, 0,239 mmol). Se añadió diisopropiletilamina (104,1 \muL, 0,598 mmol), y la reacción se agitó durante 5 minutos. Se añadieron Boc-Tyr-OH (0,081 g, 0,287 mmol) y hexafluorofosfato de 2(1H-benzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio (0,100 g, 0,263 mmol), y la reacción se agitó bajo nitrógeno durante 24 horas. La reacción se concentró a un aceite a alto vacío. El aceite se disolvió en ACN/H_{2}O al 50:50 y se liofilizó. El producto crudo se purificó luego por HPLC preparativo con el Método 2 para dar 67,9 mg (42%) del producto. ESMS: Calculado para C_{40}H_{47}N_{3}O_{7}, 681,34; Encontrado, 680,3 [M-H]^{-1}.
Método 5 HPLC. R_{t} = 19,238 min Pureza = 98%.
Parte B
Preparación de la 2-amino-N-(6-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)-3-(4-hidroxifenil)propanamida
Se disolvió en cloruro de metileno (3,0 mL) la N-(6-(4-Benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)-2-((tert-butoxi)carbonil-amino)-3- (4-hidroxifenil)propanamida (0,058 g, 0,0851 mmol). Se añadió ácido trifluoroacético (3,0 mL) y la reacción se agitó durante 2 horas. La reacción se concentró a alto vacío. El aceite resultante se mezcló en acetonitrilo/agua al 50:50 y se liofilizó para dar 53,6 mg (91%) del producto. ESMS: Calculado para C_{35}H_{39}N_{3}O_{5}, 581,29; Encontrado, 582,5 [M+H]^{+1}.
Método 5 HPLC. R_{t} = 14,920 min Pureza = 98% 
\newpage
Parte C
Preparación del ácido 2-(2-aza-2-((5-(N-(1-(N-(6-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)carbamoil)-2-(4-hidroxifenil)etil)-carbamoil(2-piridil))amino)vinil)benzensulfónico
Se disolvió en dimetilformamida (2 mL) la 2-Amino-N-(6-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)-3-(4-hidroxifenil)-propanamida (0,020 g, 0,0287 mmol). Se añadió trietilamina (12 \muL, 0,861 mmol) y la reacción se agitó durante 5 minutos. Se añadió la sal monosódica del ácido 2- [[[5-[[(2,5-Dioxo-1-pirrolidinil)oxi]carbonil]-2-piridinil]-hidrazono]metil]benzensulfónico (0,0152 g, 0,0344 mmol) ya la reacción se agitó durante 48 horas bajo nitrógeno. La reacción se concentró luego a un aceite a alto vacío. El aceite se purificó luego por HPLC preparativo con el Método 2 para dar 15,6 mg (61%) del producto. HRMS: Calculado para C_{48}H_{48}N_{6}O_{9}S + H, 885,3282; Encontrado, 885,3268.
Método 5 HPLC. R_{t} = 15,453 min Pureza = 94%
Ejemplo 81 Síntesis del ácido 2-((6-((1-aza-2-(2-sulfofenil)vinil)amino)(3-piridil)carbonilamino)-2-(2,2-dimetil-6-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi))hexanoilamino)acético
197
Parte A
Preparación del 6-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi))hexanoato de etilo
Se disolvió en dimetilformamida (15 mL) la 6-Hidroxi-5-prop-2-enil-2,3,4-trihidronaftalen-1-ona (1,0 g, 4,97 mmol). Se disolvió en dimetilformamida (15 mL) el 6-bromohexanoato de etilo (1,33 mL, 7,45 mmol) y se añadió a la reacción., Se añadieron carbonato de potasio (1,20 g, 8,70 mmol) y ioduro de potasio (0,206 g, 1,24 mmol) y la reacción se calentó a 100ºC durante 16 horas. La reacción se concentró a alto vacío. El aceite resultante se mezcló en acetato de etilo y se lavó con agua, sal, se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y evaporó. El producto crudo resultante se disolvió en hexano:acetato de etilo al 90:10 y se pasó a través de sílica gel. El filtrado se concentró luego para dar 1,218 g (71%) del producto. ESMS: Calculado para C_{21}H_{28}O_{4}, 344,20; Encontrado, 345,2 [M+H]^{+1}.
Método 5 HPLC. R_{t} = 17,662 min Pureza = 96%
Parte B
Preparación del ácido 6-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi))hexanoico
Se disolvió en etanol (20 mL) el 6-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidro-naftiloxi))hexanoato de etilo (1,10 g, 3,19 mmol). Se disolvieron gránulos de hidróxido de potasio (0,268 g, 4,78 mmol) en agua (1 mL) y se añadió a la reacción. La mezcla de reacción se calentó a reflujo durante 18 horas, luego se concentró a un aceite a alto vacío. El residuo se mezcló en agua. La solución se ajustó a pH 5 con ácido clorhídrico 1 N. La solución se extrajo con acetato de etilo. La fase orgánica se lavó con agua, sal, se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y concentró a un aceite a alto vacío. El aceite se recristalizó con hexano:acetato de etilo para dar 0,842 g (83%) del producto. ESMS: Calculado para C_{19}H_{24}O_{4}, 316,17; Encontrado, 315,2 [M-H]^{-1}.
Método 5 HPLC. R_{t} = 13,339 min Pureza = 98%
Parte C
Preparación del ácido 2-amino-2-(6-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi))hexanoilamino)acético
Se añadió 0,50 g de resina Fmoc-Gly(NH-Boc)-Wang a una bolsa de té (filtro de polipropileno 5x5 cm, 0.75 \mum mesh). La bolsa de té se lavó con lo siguiente (10 mL/bolsa) DMF 2x3 min, 20% piperidina en solución de DMF 
\hbox{1 x 3
min}
, 20% piperidina en solución de DMF 1 x 30 min, DCM 8 x 3 min, y DMF 3 x 3 min. Se añadió al reactor 3 equivalentes del ácido 6-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi))hexanoico, 5 equivalentes de cada uno de lo siguiente: HBTU, HOBT, diisopropiletilamina(DIEA) y DMF (10ml/bolsa). La bolsa se agitó luego vigorosamente por la noche durante 20 horas aproximadamente. La bolsa se lavó luego con lo siguiente (10 mL/bolsa): DMF 3 x 3 min, DCM 8 x 3 min. La bolsa se secó a alto vacío. Los contenidos de la bolsa se colocaron luego en un matraz erlenmeyer pequeño. Se añadió al matraz un coktail de escisión (10 mL) (95% ácido trifluoroacético, 2,5% triisopropilsilano, y 2.5% agua). La resina se dejó reposar durante dos horas mientras que de vez en cuando se iba agitando. Después de cada agitación el lado del matraz se lavó con coktail adicional hasta que el volumen total del coktail añadido fue de 15 mL. Después de dos horas, se filtró la resina y se lavó con TFA (2x4 mL). El filtrado se concentró a un aceite a alto vacío. El aceite se trituró con éter para dar 0,0792 g del producto. ESMS: Calculado para C_{21}H_{28}N_{2}O_{5}, 388,20; Encontrado, 389,2 [M+H]^{+1}.
Método 5 HPLC. R_{t} = 9,020 min Pureza = 95%
Parte D
Preparación del ácido 2-((6-((1-aza-2-(2-sulfofenil)-vinil)amino)(3-piridil)carbonilamino)-2-(6-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi))hexanoilamino)acético
Se disolvió en dimetilformamida (3 mL) el ácido 2-Amino-2-(6-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi))hexanoilamino)acético (0,040 g, 0,0796 mmol). Se añadió trietilamina (33,2 \muL, 0,239 mmol) y la reacción se agitó durante 5 minutos. Se añadió la sal monosódica del ácido 2-[[[5-[[(2,5-Dioxo-1-pirrolidinil)oxi]-carbonil]-2-piridinil]hidrazono]-metil]benzensulfónico (0,0421 g, 0,0955 mmol) y la reacción se agitó durante 24 horas bajo nitrógeno. La reacción se concentró luego a un aceite a alto vacío. El aceite se purificó luego por HPLC preparativo con el Método 2 para dar 14,9 mg (27%) del producto. HRMS: Calculado para C_{34}H_{37}N_{5}O_{9}S + H, 692,2390; Encontrado, 692,2404.
Método 5 HPLC. R_{t} = 9,976 min Pureza = 92%
Ejemplo 82 Síntesis del ácido 2-((6-((1-aza-2-(2-sulfofenil)vinil)amino)(3-piridil)carbonilamino)-2-(2,2-dimetil-6-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi))hexanoilamino)acético
198
Parte A
Preparación 2,2-dimetil-6-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi))hexanoato de etilo
Se disolvió en dimetilformamida (15 mL) la 6-Hidroxi-5-prop-2-enil-2,3,4-trihidronaftalen-1-ona (1,0 g, 4,97 mmol). Se disolvió en dimetilformamida (15 mL) el 6-bromo-2,2-dimetilhexanoato de etilo (1,87 g, 7,45 mmol) y se añadió a la reacción. Se añadieron carbonato de potasio (1,20 g, 8,70 mmol) y ioduro de potasio (0,206 g, 1,24 mmol) y la reacción se calentó a 100ºC durante 16 horas. La reacción se concentró a alto vacío. El aceite resultante se mezcló en acetato de etilo y se lavó con agua, sal, se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y se evaporó. El producto crudo resultante se disolvió en hexano:acetato de etilo al 90:10 y se pasó a través de sílica gel. El filtrado se concentró luego para dar 1,595 g (86%) del producto. ESMS: Calculado para C_{23}H_{32}O_{4}, 372,23; Encontrado, 373,3 [M+H]^{+1}.
Método 5 HPLC. R_{t} = 19,756 min Pureza = 98% 
\newpage
Parte B
Preparación del ácido 2,2-dimetil-6-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi))hexanoico
Se disolvió en etanol (20 mL) el 2,2-dimetil-6-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi))hexanoato (1,40 g, 3,76 mmol). Se disolvieron gránulos de hidróxido de potasio (0,316 g, 5,64 mmol) en agua (1 mL) y se añadió a la reacción. La mezcla de reacción se calentó a reflujo durante 4 días. La reacción se concentró a un aceite a alto vacío. El residuo se mezcló en agua. La solución se ajustó a pH 5 con ácido clorhídrico 1 N. La solución se extrajo con acetato de etilo. La fase orgánica se lavó con agua, sal, se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y concentró a un aceite a alto vacío. El aceite se purificó por cromatografía flash en cloruro de metileno:acetato de etilo al 7:1 para dar 0.635 g (49%) del producto como un aceite. ESMS: Calculado para C_{21}H_{28}O_{4}, 344,20; Encontrado, 345,2 [M+H]^{+1}.
Método 5 HPLC. R_{t} = 15,644 min Pureza = 92%
Parte C
Preparación del ácido 2-amino-2-(2,2-dimetil-6-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi))hexanoilamino)acético
Se añadió 0,50 g de resina Fmoc-Gly(NH-Boc)-Wang a una bolsa de té (filtro de polipropileno 5x5 cm, 0.75 \mum mesh). La bolsa de té se lavó con lo siguiente (10 mL/bolsa) DMF 2x3 min, 20% piperidina en solución de DMF 
\hbox{1 x 3
min}
, 20% piperidina en solución de DMF 1 x 30 min, DCM 8 x 3 min, y DMF 3 x 3 min. Se añadió al reactor 3 equivalentes del ácido 2,2-dimetil-6-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi))hexanoico, 5 equivalentes de cada uno de lo siguiente: HBTU, HOBT, diisopropiletilamina(DIEA) y DMF (10ml/bolsa). La bolsa se agitó luego vigorosamente por la noche durante 20 horas aproximadamente. La bolsa se lavó luego con lo siguiente (10 mL/bolsa): DMF 3 x 3 min, DCM 8 x 3 min. La bolsa se secó a alto vacío. Los contenidos de la bolsa se colocaron luego en un matraz erlenmeyer pequeño. Se añadió al matraz un coktail de escisión (10 mL) (95% ácido trifluoroacético, 2.5% triisopropilsilano, y 2.5% agua). La resina se dejó reposar durante dos horas siento mientras que de vez en cuando se agitaba. Después de cada agitación el lado del matraz se lavó con coktail adicional hasta que el volumen total del coktail añadido fue de 15 mL. Después de dos horas, se filtró la resina y se lavó con TFA (2x4 mL). El filtrado se concentró a un aceite a alto vacío. El aceite se trituró con éter para dar 0,0560 g del producto. ESMS: Calculado para C_{23}H_{32}N_{2}O_{5}, 416,23; Encontrado, 417,3 [M+H]^{+1}.
Método 5 HPLC. R_{t} = 10,429 min Pureza = 97%
Parte D
Preparación del ácido 2-((6-((1-aza-2-(2-sulfofenil)vinil)amino) (3-piridil)carbonilamino)-2-(2,2-dimetil-6-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi))hexanoilamino)acético
Se disolvió en dimetilformamida (2 mL) el ácido 2-Amino-2-(2,2-dimetil-6- (5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi))hexanoilamino)acético (0,025 g, 0,0471 mmol). Se añadió trietilamina (19,7 \muL, 0,141 mmol) y la reacción se agitó durante 5 minutos. Se añadió la sal monosódica del ácido 2-[[[5-[[(2,5-Dioxo-1-pirrolidinil)oxi]-carbonil]-2-piridinil]hidrazono]-metil]benzensulfónico (0,0249 g, 0,0565 mmol) y la reacción se agitó durante 24 horas bajo nitrógeno. La reacción se concentró luego a un aceite a alto vacío. El aceite se purificó luego por HPLC preparativo con el Método 2 para dar 8,9 mg (26%) del producto. HRMS: Calculado para C_{36}H_{41}N_{5}O_{9}S + H, 720.2703; Encontrado, 720,2727.
Método 5 HPLC. R_{t} = 11.243 min Pureza = 100%
Ejemplo 83 Síntesis del ácido 3-((6-((1-aza-2-(2-sulfofenil)vinil)amino)(3-piridil)carbonilamino)-3-(N-(6-(6-etil-3-hidroxi-4-fenilfenoxi)-2,2-dimetilhexil)carbamoil)propanoico
199 
\newpage
Parte A
Preparación del 6-(2-etil-4-fenil-5-(benziloxi)fenoxi)-2,2-dimetilhexanenitrilo
200
Se disolvió en etanol (5,82 mL) (solución 1,2mM) el ácido bencenborónico (0,851 g, 6,98 mmol). Se disolvió en tolueno (17,4 mL) (solución de 0,2 mM) el 6-(4-Bromo-2-etil-5-(benziloxi)fenoxi)-2,2-dimetilhexanenitrilo (1,5 g, 3,49 mmol) y se añadió a la solución etanólica. Se disolvió bicarbonato de sodio en agua (5,24 mL) (solución 2 mM) y se añadió a la reacción. La reacción se calentó a reflujo durante toda la noche. La reacción se enfrió a temperatura ambiente y se diluyó con acetato de etilo. La fase orgánica se lavó con cloruro de amonio saturado. La fase orgánica se concentró a un aceite y se purificó por columna de cromatografía flash (hexano:acetato de etilo 10:1) para dar 1,24 g (83%) del producto. ESMS: Calculado para C_{29}H_{33}NO_{2}, 427,25; Encontrado, 445,3 [M+NH_{4}]+1.
Método 5 HPLC. R_{t} = 21,888 min Pureza = 95%
Parte B
Preparación de la 6-(2-etil-4-fenil-5-(benziloxi)fenoxi)-2,2-dimetilhexilamida
Se añadió cloruro de aluminio (0,589 g, 4,11 mmol) a un matraz seco. El matraz se enfrió a menos de 0ºC con un baño de hielo/etanol. Se añadió éter (10 mL) y la reacción se agitó durante 5 minutos hasta que se disolvió el cloruro de aluminio. Se añadió luego hidruro de aluminio litio (0,156 g, 4,11 mmol) y la reacción se calentó a reflujo. Se disolvió en éter (5 mL) el 6-(2-Etil-4-fenil-5-(benziloxi)fenoxi)-2,2-dimetilhexane-nitrilo (0,800 g, 1,87 mmol) y se añadió gota a gota a la solución a reflujo. Después que la adición fue completa, se agitó la reacción se agitó durante 5 horas a temperatura ambiente. La reacción se trató luego con agua. Se añadió ácido sulfúrico 5 N hasta que se formó una solución clara. Esta mezcla se extrajo luego con éter (3x). La fase orgánica se enfrió luego en un baño de hielo y se basificó a pH 14 con hidróxido de sodio aquoso al 50%. La solución resultante se extrajo luego con éter (4x). La fase orgánica sa lavó con NaCl saturado, se secó sobre sulfato de magnesio y se evaporó para dar 0,982 g (121%) del producto como un aceite. ESMS: Calculado para C_{29}H_{37}NO_{2}, 431,28; Encontrado, 432,3 [M+H]^{+1}.
Método 5 HPLC. R_{t} =17,226 min Pureza = 91%
Parte C
Preparación del 3-((tert-butoxi)carbonilamino)-3-(N-(6-(2-etil-4-fenil-5-(benziloxi)fenoxi)-2,2-dimetilhexil)carbamoil)-propanoato de tert-butilo
201
Se disolvió en dimetilformamida (5 mL) la 6-(2-Etil-4-fenil-5- (benziloxi)fenoxi)-2,2-dimetilhexilamida(0,100 g, 0,232 mmol). Se añadió trietilamina (0,097 mL, 0,696 mmol) y la reacción se agitó durante 5 minutos. Se añadió Boc-Asp(OtBu)-OSu (0,107 g, 0,278 mmol) y la reacción se agitó bajo nitrógeno durante 60 horas. La reacción se concentró a un aceite a alto vacío. El aceite se disolvió en ACN/H_{2}O al 50:50 y se liofilizó para dar 0,239 g (147%) del producto como un aceite. ESMS: Calculado para C_{42}H_{58}N_{2}O_{7}, 702,42; Encontrado, 703,5 [M+H]^{+1}
Método 5 HPLC. R_{t} = 24,125 min Pureza = 89%
Parte D
Preparación del 3-amino-3-(N-(6-(6-etil-3-hidroxi-4-fenilfenoxi)-2,2-dimetilhexil)carbamoil)propanoico
Se disolvió en anisol(0,937 mL, 8,63 mmol) el 3-((tert-butoxi)carbonilamino)-3- (N-(6-(2-etil-4-fenil-5-(benziloxi)fenoxi)-2,2-dimetilhexil)-carbamoil)propanoato de tert-butilo (0,200 g, 0,284 mmol) y se enfrió a 0ºC en un baño de hielo. Se añadió ácido trifluoroacético (6,25 mL, 81,1 mmol) y la reacción se agitó durante 10 minutos a 0ºC. Se añadió gota a gota ácido trifluorometansulfónico (0,625 mL, 7,06 mmol). La reacción se concentró a alto vacío. El aceite resultante se purificó utilizando el siguiente método para dar 48,5 mg (30%) del producto. ESMS: Calculado para C_{26}H_{36}N_{2}O_{5}, 456,26; Encontrado, 455,3 [M-H]^{-1}.
Método 5 HPLC. R_{t} = 13,395 min Pureza = 87%
Parte E
Preparación del ácido 3-((6-((1-aza-2-(2-sulfofenil)vinil)amino)(3-piridil)carbonilamino)-3-(N-(6-(6-etil-3-hidroxi-4-fenilfenoxi)-2,2-dimetilhexil)-carbamoil)propanoico
Se disolvió en dimetilformamida (5 mL) el ácido 3-Amino-3-(N-(6-(6-etil-3-hidroxi-4-fenilfenoxi)-2,2-dimetilhexil)carbamoil)propanoico (0,0315 g, 0,0533 mmol). Se añadió trietilamina (22,3 \muL, 0,160 mmol) y la reacción se agitó durante 5 minutos. Se añadió la sal monosódica del ácido 2-[[[5-[[(2,5-Dioxo-1-pirrolidinil)oxi]carbonil]-2-piridinil]hidrazono]-metil]benzensulfónico (0,0281 g, 0,0640 mmol) y la reacción se agitó durante 24 horas bajo nitrógeno.
La reacción se concentró luego a un aceite a alto vacío. El aceite se purificó luego por HPLC preparativo con el método 2 para dar 14,4 mg (35%) del producto. HRMS: Calculado para C_{40}H_{45}N_{5}O_{9}S + H, 760,3016; Encontrado, 760,2997.
Método 5 HPLC. R_{t} = 13,874 min Pureza = 83%
Ejemplo 84 Síntesis del ácido 2-((6-((1-aza-2-(2-sulfofenil)vinil)amino)(3-piridil)carbonilamino)-2-(6-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexanoilamino)acético
202
Parte A
Preparación del ácido 2-amino-2-(6-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexanoilamino)acético
203
Se añadió 0,50 g de resina Fmoc-Gly(NH-Boc)-Wang a una bolsa de té (filtro de polipropileno 5x5 cm, 0.75 \mum mesh). La bolsa de té se lavó con lo siguiente (10 mL/bolsa) DMF 2x3 min, 20% piperidina en solución de DMF 
\hbox{1 x 3
min}
, 20% piperidina en solución de DMF 1 x 30 min, DCM 8 x 3 min, y DMF 3 x 3 min. SE añadió al reactor 2 equivalentes del ácido 6-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexanoico, 5 equivalentes de cada uno de lo siguiente: HBTU, HOBT, diisopropiletilamina(DIEA) y DMF (10ml/bolsa). La bolsa se agitó luego vigorosamente por la noche durante 20 horas aproximadamente. La bolsa se secó a alto vacío. Los contenidos de la bolsa se colocaron luego en un matraz erlenmeyer pequeño. Se añadió al matraz un coktail de escisión (10 mL) (95% ácido trifluoroacético, 2.5% triisopropilsilano, y 2.5% agua). La resina se dejó reposar durante dos horas mientras que de vez en cuando se agitaba. Después de cada agitación el lado del matraz se lavó con coktail adicional hasta que el volumen total del coktail añadido fue de 15 mL. Después de dos horas, se filtró la resina y se lavó con TFA (2x4 mL). El filtrado se concentró a un aceite a alto vacío. El aceite se trituró con Éter para dar 0,0460 g del producto. ESMS: Calculado para C_{28}H_{31}N_{3}O_{6}, 505,22; Encontrado, 506,3 [M+H]^{+1}.
Método 5 HPLC. R_{t} = 13,477 min Pureza = 90%
Parte B
Preparación del ácido 2-((6-((1-aza-2-(2-sulfofenil)vinil)amino)(3-piridil)carbonilamino)-2-(6-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexanoilamino)acético
Se disolvió en dimetilformamida (3 mL) el ácido 2-Amino-2-(6-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexanoilamino)acético (0,035 g, 0,0560 mmol). Se añadió trietilamina (23,4 \muL, 0,168 mmol) y la reacción se agitó durante 5 minutos. Se añadió la sal monosódica del ácido 2-[[[5-[[(2,5-Dioxo-1-pirrolidinil)oxi]carbonil]-2-piridinil]hidrazono]-metil]benzensulfónico (0,030 g, 0,0672 mmol) y la reacción se agitó durante 24 horas bajo nitrógeno. La reacción se concentró luego a un aceite a alto vacío. El aceite se purificó luego por HPLC preparativo con el método 2 para dar 11,2 mg (25%) del producto. HRMS: Calculado para C_{41}H_{40}N_{6}O_{10}S + H, 809,2605; Encontrado, 809,2578.
Método 5 HPLC. R_{t} = 13,711 min Pureza = 98%
Ejemplo 85 Síntesis del ácido 2-(2-aza-2-((5-(N-(5-((3-((N-(6-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexanoilamino)-3-(4-hidroxifenil)propanoilamino)-1-(N-(2,3,4,5,6-pentahidroxihexil)carbamoil)pentil)carbamoil(2-piridil))amino)vinil)benzensulfónico
204
Parte A
Preparación del 2-(6-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexanoilamino)-3-(4-hidroxifenil)propanoato de metilo
205
Se disolvió en dimetilformamida (5 mL) el ácido 6-(4,6-Difenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexanoico (0,200 g, 0,513 mmol). Se añadió la diisopropiletilamina (223 \muL, 1,53 mmol) y la reacción se agitó durante 5 minutos. Se añadieron H-Tyr(OBzl)-OMe (0,198 g, 0,616 mmol) y hexafluorofosfato de 2(1H-benzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio (0,214 g, 0,564 mmol) y la reacción se agitó bajo nitrógeno durante 60 horas. La reacción se concentró a un aceite a alto vacío. El aceite se disolvió en ACN/H_{2}O al 50:50 y se liofilizó. El producto crudo se purificó luego por HPLC preparativo con el método 2, para dar 322,9 mg (96%) del producto. ESMS: Calculado para C_{42}H_{44}N_{2}O_{5}, 656,33; Encontrado, 657,5 [M+H]^{+1}.
Método 5 HPLC. R_{t} = 22,768 min Pureza = 100%
Parte B
Preparación del ácido 2-(6-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexanoilamino)-3-(4-hidroxifenil)propanoico
Se disolvió en tetrahidrofurano (10 mL) el2-(6-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexanoilamino)-3-(4-hidroxifenil)propanoato de metilo (0,150 g, 0,228 mmol). Se disolvió en agua (2 mL) hidróxido de litio monohidratado (0,0958 g, 2,28 mmol) y se añadió a la reacción. La reacción se agitó durante 18 horas. La reacción se concentró luego, se mezcló en agua, se acidificó a pH 5 con HCl 1N, y se extrajo con acetato de etilo. La fase orgánica se lavó con agua, sal, se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y evaporó para dar 128,6 mg (95%) del producto. ESMS: Calculado para C_{41}H_{42}N_{2}O_{5}, 642,31; Encontrado, 643,4 [M+H]^{+1}.
Método 5 HPLC. R_{t} = 21,258 min Pureza = 95%
Parte C
Preparación de la N-(1-(N-(5-((tert-butoxi)carbonilamino)-5-(N- (2,3,4,5,6-pentahidroxihexil)carbamoil)pentil)carbamoil)-2-(4-benziloxifenil)etil)-6-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexanamida
206
Se disolvió en dimetilformamida (3 mL) la 6-Amino-2-((tert-butoxi)carbonilamino)-(N-(2,3,4,5,6-pentahidroxihexil)hexanamida (0,050 g, 0,122 mmol). Se añadió la diisopropiletilamina (63,8 \muL, 0,366 mmol) y la reacción se agitó durante 5 minutos. Se añadieron el ácido 2-(6-(4,6-Difenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexanoilamino)-3-(4-hidroxifenil)propanoico (0,0942 g, 0,146 mmol) y el hexafluorofosfato de 2(1H-benzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio (0,050 g, 0,134 mmol) y la reacción se agitó bajo nitrógeno durante 72 horas. La reacción se concentró a un aceite a alto vacío. El aceite se purificó luego por HPLC preparativo con el método 2 para dar 79,2 mg (63%) del producto. ESMS: Calculado para C_{58}H_{75}N_{5}O_{12}, 1033,54; Encontrado, 1034,5 [M+H]^{+1}.
Método 5 HPLC. R_{t} = 19,290 min Pureza = 84%
Parte D
Preparación de la N-(1-(N-(5-((tert-butoxi)carbonilamino)-5-(N- (2,3,4,5,6-pentahidroxihexil)carbamoil)pentil)carbamoil)-2-(4-hidroxifenil)etil)-6-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexanamida
Se purgó con nitrógeno unbalón pequeño de fondo redondo. Se añadió a esto paladio sobre carbono (30 mg, 10% p/p) seguido por metanol (5 mL). Se disolvió en metanol (5 mL) la N-(1-(N-(5-((Tert-butoxi)carbonilamino)-5-(N-(2,3,4,5,6-pentahidroxihexil)carbamoil)pentil)carbamoil)-2-(4-benziloxifenil)etil)-6-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexanamida (0,065 g, 0,0628 mmol) y se añadió a la reacción. La reacción se evacuó y se purgó con nitrógeno dos veces, y luego se evacuó se rellenó con hidrógenodos veces. La reacción se agitó bajo nitrógeno durante 4 horas. La reacción no finalizó por lo que se añadió más paladio sobre carbono (30 mg). La reacción se agitó por la noche durante 18 horas. La reacción se filtró a través de Celite, se lavó con metanol. El filtrado se concentró a un aceite a alto vacío para dar 57,0 mg (96%) del producto. ESMS: Calculado para C_{51}H_{69}N_{5}O_{12}, 943,49; Encontrado, 944,5 
\hbox{[M+H] ^{+1} }
.
Método 5 HPLC. R_{t} = 15,990 min Pureza = 85%
Parte E
Preparación de la N-(1-(N-(5-amino-5-(N-(2,3,4,5,6-pentahidroxihexil)carbamoil)pentil)carbamoil)-2-(4-hidroxifenil)etil)-6-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexanamida
Se disolvió en cloruro de metileno (1,5 mL) la N-(1-(N-(5-((Tert-butoxi)carbonilamino)-5-(N-(2,3,4,5,6-pentahidroxihexil)carbamoil)pentil)carbamoil)-2-(4-hidroxifenil)etil)-6-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexanamida (0,054 g, 0,0572 mmol). Se añadió ácido trifluoroacético (1,5 mL) y la reacción se agitó durante 2 horas. La reacción se concentró a alto vacío. El aceite resultante se trituró con éter para dar 40 mg (73%) del producto. ESMS: Calculado para C_{46}H_{61}N_{5}O_{10}, 843,44; Encontrado, 844,6 [M+H]^{+1}.
Método 5 HPLC. R_{t} = 13,804 min Pureza = 89%
Parte F
Preparación del ácido 2-(2-aza-2-((5-(N-(5-((3-((N-(6-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexanoilamino)-3-(4-hidroxifenil)propanoilamino)-1-(N- (2,3,4,5,6-pentahidroxihexil)carbamoil)pentil)carbamoil(2-piridil))amino)vinil)benzensulfónico
Se disolvió en dimetilformamida (3 mL) la N-(1-(N-(5-Amino-5-(N-(2,3,4,5,6-pentahidroxihexil)-carbamoil)pentil)carbamoil)-2-(4-hidroxifenil)etil)-6-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexanamida (0,040 g, 0,0418 mmol). Se añadió trietilamina (17,5 \muL, 0,125 mmol) y la reacción se agitó durante 5 minutos. Se añadió la sal monosódica del ácido 2- [[[5-[[(2,5-Dioxo-1-pirrolidinil)oxi]carbonil]-2-piridinil]hidrazono]metil]-benzensulfónico (0,0221 g, 0,0501 mmol) y la reacción se agitó durante 24 horas bajo nitrógeno. La reacción se concentró luego a un aceite a alto vacío. El aceite se purificó por HPLC preparativo con el método 2 para dar 12,1 mg (25%) del producto. HRMS: Calculado para C_{59}H_{70}N_{8}O_{14}S + H, 1147,4810; Encontrado, 1147,4826.
Método 5 HPLC. R_{t} = 13,358 min Pureza = 90%
Ejemplo 86 Síntesis del ácido 2-(2-aza-2-((5-(N-(5-((3-((N-(6-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)-carbamoil)-2-(N-(2,3,4,5,6-pentahidroxihexil)carbamoil)-etil)carbamoil(2-piridil))amino)vinil)benzensulfónico
207
Parte A
Preparación del 2-((tert-butoxi)carbonilamino)-3-(N-(2,3,4,5,6-pentahidroxihexil)carbamoil)propanoato de bencilo
208
Se disolvió en tetrahidrofurano (25 mL) el Boc-Asp(OSu)-OBzl (2,00 g, 4,76 mmol). Se disolvió en agua (5 mL) el 1-Amino-desoxisorbitol (0,948 g, 5,24 mmol) y se añadió a la reacción. Se añadió trietilamina (0,265 mL, 1,90 mmol) y la reacción se agitó durante 3 horas bajo nitrógeno. La reacción se concentró a alto vacío. El residuo se mezcló en agua y se extrajo con acetato de etilo. El acetato de etilo se lavó con ácido clorhídrico 0,1 N, agua, sal, se secó sobre sulfato de magnesio y se filtró. Como el filtrado se evaporó, el producto precipitó de la solución. El precipitado se filtró, se lavó con hexano, y se secó a alto vacío para dar 0,384 g (17%) del producto. ESMS: Calculado para C_{22}H_{34}N_{2}O_{10}, 486,22; Encontrado, 487,3 [M+H]^{+1}.
Método 5 HPLC. R_{t} =8,724 min Pureza = 100%
Parte B
Preparación del ácido 2-((tert-butoxi)carbonilamino)-3-(N-(2,3,4,5,6-pentahidroxihexil)carbamoil)propanoico
Se purgó con nitrógeno un matraz pequeño de fondo redondo. Se añadió a esto paladio sobre carbono (100 mg, 10% p/p) seguido por etanol (5 mL). Se disolvió en etanol (5 mL) el 2-((tert-butoxi)carbonilamino)-3-(N-(2,3,4,5,6-pentahidroxihexil)carbamoil)propanoato de bencilo (0,300 g, 0,617 mmol) y se añadió a la reacción. La reacción se evacuó y se purgó con nitrógeno dos veces. La reacción se agitó bajo nitrógeno durante 20 horas. La reacción se filtró a través de celite, se lavó con etanol. El filtrado se concentró a un aceite a alto vacío para dar 266 mg (109%) del producto. ESMS: Calculado para C_{15}H_{28}N_{2}O_{10}, 396.17; Encontrado, 397,2 [M+H]^{+1}.
Parte C
Preparación de la N-(6-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)-2-((tert-butoxi)carbonilamino)-N'-(2,3,4,5,6-pentahidroxihexil)butane-1,4-diamida
209
Se disolvió en dimetilformamida (5 mL) el 1-Amino-2,2-dimetil-6-[(4-(3,4-metilenedioxifenil)-6-fenil-2-piridinil)oxi]-hexano (0,100 g, 0,239 mmol). Se añadió la diisopropiletilamina (124,9 \muL, 0,717 mmol) y la reacción se agitó durante 5 minutos. Se añadieron el ácido 2-((Tert-butoxi)carbonilamino)-3-(N- (2,3,4,5,6-pentahidroxihexil)carbamoil)propanoico (0,114 g, 0,287 mmol) y el hexafluorofosfato de 2(1H-benzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio (0,109 g, 0,287 mmol) y la reacción se agitó bajo nitrógeno durante 48 horas. La reacción se concentró a un aceite a alto vacío. El aceite se purificó luego por HPLC preparativo con el Método 3 para dar 98,9 mg (52%) del producto. ESMS: Calculado para C_{41}H_{56}N_{4}O_{12}, 796,39; Encontrado, 797,5 [M+H]^{+1}.
Método 5 HPLC. R_{t} = 15,813 min Pureza = 100%
Parte D
Preparación de la 2-amino-N-(6-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)-N'-(2,3,4,5,6-pentahidroxihexil)butane-1,4-diamida
Se disolvió en cloruro de metileno (15 mL) laN-(6-(4-Benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)-2-((tert-butoxi)carbonil-amino)-N'- (2,3,4,5,6-pentahidroxihexil)butane-1,4-diamida (0,090 g, 0,113 mmol). Se añadió el ácido trifluoroacético (1,5 mL) y la reacción se agitó durante 2 horas. La reacción se concentró a alto vacío. El aceite resultante se trituró con éter para dar 80,5 mg (88%) del producto. ESMS: Calculado para C_{36}H_{48}N_{4}O_{10}, 696,34; Encontrado, 697,4 [M+H]^{+1}.
Método 5 HPLC. R_{t} = 12,776 min Pureza = 88%
Parte E
Preparación del ácido 2-(2-aza-2-((5-(N-(5-((3-((N-(6-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)carbamoil)-2-(N- (2,3,4,5,6-pentahidroxihexil)carbamoil)etil)carbamoil(2-piridil))amino)vinil)benzensulfónico
Se disolvió en dimetilformamida (3 mL) la 2-Amino-N-(6-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)-N'-(2,3,4,5,6-pentahidroxihexil)butane-1,4-diamida(0,047 g, 0,0580 mmol). Se añadió trietilamina (24,3 \muL, 0,174 mmol) y la reacción se agitó durante 5 minutos. Se añadió la sal monosódica del ácido 2-[[[5-[[(2,5-Dioxo-1-pirrolidinil)oxi]-carbonil]-2-piridinil]hidrazono]metil]-benzensulfónico (0,0306 g, 0,0696 mmol) y la reacción se agitó durante 72 horas bajo nitrógeno. La reacción se concentró luego a un aceite a alto vacío. El aceite su purificó luego por HPLC preparativo con el Método 3 para dar 25,2 mg (43%) del producto. HRMS: Calculado para C_{49}H_{57}N_{7}O_{14}S + H, 1000,3762; Encontrado, 1000,3732.
Método 5 HPLC. R_{t} = 12,730 min Pureza = 96%
Ejemplo 87 Síntesis del ácido 2-(2-aza-2-((5-(N-(5-((3-((N-(6-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)carbamoil)amino)fenil)carbonilamino)-1-(N-(2,3,4,5,6-pentahidroxihexil)carbamoil)pentil)carbamoil(2-piridil)) amino)vinil)benzensulfónico
210
Parte A
Preparación del 3-((N-(6-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)carbamoil)amino)benzoato de metilo
211
Se disolvió en dimetilformamida (10 mL) el 1-Amino-2,2-dimetil-6-[(4-(3,4-metilenedioxifenil)-6-fenil-2-piridinil)oxi]-hexano (0,300 g, 0,717 mmol). Se añadió la diisopropiletilamina (642 \muL, 3,58 mmol) y la reacción se agitó durante 5 minutos, Se añadió el isocianato de 3-etoxicarbonilfenilo (0,548 g, 2,87 mmol) y la reacción se agitó bajo nitrógeno durante 36 horas. La reacción se concentró a un aceite a alto vacío. El aceite se purificó luego por HPLC preparativo con el Método 3 para dar 431,6 mg (98%) del producto. ESMS: Calculado para C_{36}H_{39}N_{3}O_{6}, 609,28; Encontrado, 610,4 [M+H]^{+1}.
Método 5 HPLC. R_{t} = 20,452 min Pureza = 99%
Parte B
Preparación del ácido 3-((N-(6-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)carbamoil)amino)-benzoico
Se disolvió en etanol (10 mL) el3-((N-(6-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)carbamoil)amino)-benzoato de metilo (0,400 g, 0,656 mmol). Se disolvieron en agua (1 mL) gránulos de hidróxido de potasio (0,0736 g, 1,31 mmol) y se añadieron a la reacción. La reacción se calentó a reflujo durante 16 horas. La reacción se concentró a un aceite a alto vacío. El residuo se mezcló en agua. La solución se ajustó a pH 5 con ácido clorhídrico 1 N. La solución se extrajo con acetato de etilo. La fase orgánica se lavó con agua, sal, se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y se concentró para dar 0,212 g (56%) del producto. HRMS: Calculado para C_{34}H_{35}N_{3}O_{6} + H, 582,2604; Encontrado, 582,2604.
Método 5 HPLC. R_{t} = 17,966 min Pureza = 100% 
\newpage
Parte C
Preparación de la 6-((3-((N-(6-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)carbamoil)-amino)fenil)carbonilamino)-2-((tert-butoxi)carbonilamino)-(N-(2,3,4,5,6-pentahidroxihexil)hexanamida
212
Se disolvió en dimetilformamida (2 mL) la 6-Amino-2-((tert-butoxi)carbonilamino)-(N-(2,3,4,5,6-pentahidroxihexil)hexanamida (0,040 g, 0,0977 mmol). Se añadió la diisopropiletilamina (46,4 \muL, 0,266 mmol) y la reacción se agitó durante 5 minutos. Se añadieron el ácido 3-((N-(6-(4-Benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)carbamoil)amino)-benzoico (0,0516 g, 0,0888 mmol) y el hexafluorofosfato de 2(1H-benzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio (0,0404 g, 0,106 mmol) y la reacción se agitó bajo nitrógeno durante 48 horas. La reacción se concentró a un aceite a alto vacío. El aceite se purificó luego por HPLC preparativo con el método 2 para dar 55,0 mg (64%) del producto. ESMS: Calculado para C_{51}H_{68}N_{6}O_{13}, 972,48; Encontrado, 973,6 [M+H]^{+1}.
Método 5 HPLC. R_{t} = 16,354 min Pureza = 97%
Parte D
Preparación de la 2-amino-6-((3-((N-(6-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)carbamoil)amino)fenil)carbonilamino)-N- (2,3,4,5,6-pentahidroxihexil)hexanamida
Se disolvió en cloruro de metileno (3,0 mL) la 6-((3-((N-(6-(4-Benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)carbamoil)amino)fenil)-carbonilamino)-2-((tert-butoxi)carbonilamino)-(N-(2,3,4,5,6-pentahidroxihexil)hexanamida (0,045 g, 0,0462 mmol). Se añadió ácido trifluoroacético (3,0 mL) y la reacción se agitó durante 2 horas. La reacción se concentró a alto vacío. El aceite resultante se trituró con éter para dar 34,2 mg (75%) del producto. ESMS: Calculado para C_{46}H_{60}N_{6}O_{11}, 872,43; Encontrado, 873,6 [M+H]^{+1}.
Método 5 HPLC. R_{t} = 14,610 min Pureza = 91%
Parte E
Preparación del ácido 2-(2-aza-2-((5-(N-(5-((3-((N-(6-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)carbamoil)amino)fenil)carbonilamino)-1-(N-(2,3,4,5,6-pentahidroxihexil)carbamoil)pentil)carbamoil(2-piridil))amino)vinil)benzensulfónico
Se disolvió en dimetilformamida(3 mL) la 2-Amino-6-((3-((N-(6-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)carbamoil)amino)-fenil)carbonilamino)-N-(2,3,4,5,6-pentahidroxihexil)-hexanamida (0,029 g, 0,0294 mmol). Se añadió trietilamina (12,3 \muL, 0,0882 mmol) y la reacción se agitó durante 5 minutos. Se añadió la sal monosódica del ácido 2-[[[5-[[(2,5-Dioxo-1-pirrolidinil)oxi]carbonil]-2-piridinil]hidrazono]metil]-benzensulfónico (0,0155 g, 0,0353 mmol) y la reacción se agitó durante 72 horas bajo nitrógeno. La reacción se concentró luego a un aceite a alto vacío. El aceite se purificó luego por HPLC preparativo con el método 4 para dar 4,0 mg (12%) del producto. ESMS: Calculado para C_{59}H_{69}N_{9}O_{15}S, 1175,46; Encontrado, 1176,4 [M+H]^{+1}.
Método 5 HPLC. R_{t} = 13,898 min Pureza = 94%
Método 4 de HPLC preparativo
Instrumento: Ratón Rainin; Software Dynamax
Columna: Vydac C-18 (21,2 mm x 25 cm)
Detector: Knauer VWM
Velocidad de Flujo: 15 ml/min
Temperatura de la columna: RT
Fase móvil: A: 0,1% TFA en H_{2}0
B: 0,1%TFA en ACN/H_{2}0 (9:1)
Gradiente: Tiempo (min) %A %B
0 60 40
12 32 68
32 20 80
33 60 40
Ejemplo 88 Síntesis del ácido 2-((6-((1-aza-2-(2-sulfofenil)vinil)amino)(3-piridil))carbonilamino)-3-(N-(6-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)carbamoil)-propanoilamino)-3-carboxipropanoilamino)-3-carboxipropanoilamino)-etane-1,2-dicarboxílico
213
Se disolvió en dimetilformamida (3 mL) el ácido 3-((6-((1-Aza-2-(2-sulfofenil)vinil)amino)(3-piridil)carbonilamino)-3-(N-(6-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)carbamoil)propanoico(0,044 g, 0,0526 mmol). Se añadió la diisopropiletilamina (27,5 \muL, 0,158 mmol) y la reacción se agitó durante 5 minutos. Se añadieron el ácido Triasparteico (Asp-Asp-Asp-OH, 0,0229 g, 0,0631 mmol) y el hexafluorofosfato de 2(1H-benzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio (0,0239 g, 0,0631 mmol) y la reacción se agitó bajo nitrógeno durante 18 horas. La reacción se concentró a un aceite a alto vacío. El aceite se purificó por HPLC preparativo con el método 3 para dar 22,6 mg (36%) del producto. HRMS: Calculado para C_{55}H_{59}N_{9}O_{19}S + H, 1182,3726; Encontrado 1182,3765.
Método 5 HPLC. R_{t} = 12,612 min Pureza = 95%
Ejemplo 89 Síntesis del ácido 2-((6-((1-aza-2-(2-sulfofenil)vinil)amino)(3-piridil))carbonilamino)-3-(2-(5-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))pentiloxi)fenil)propanoico
214 
\newpage
Parte A
Preparación de la 4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil-2-(5-(1,1,2,2-tetrametil-1-silapropoxi)pentiloxi)piridina
215
Se mezclaron en tetrahidrofurano (15 mL) la 4-(3,4-Metilenedioxifenil)-6-fenil-2-piridona (0,585 g, 2,01 mmol) y el 5-(t-butildimetilsililoxi)-1-pentanol (0,877 g, 4,02 mmol). Se añadieron la trifenilfosfina (1,05 g, 4,02 mmol) y el dietilazodicarboxilato (0,700 g, 4,02 mmol) y la reacción se agitó durante 4 horas. La reacción se trató con cloruro de amonio saturado. La reacción se concentró a alto vacío. La fase acuosa remanente se extrajo con acetato de etilo. La fase orgánica se lavó con sal, se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y se concentró a un aceite a alto vacío. El aceite se mezcló en hexano:acetato de etilo al 90:10 y se pasó a través de de sílica gel. El filtrado se concentró a un aceite a alto vacío para dar 1,068 g (108%) del producto. ESMS muestra que un grupo TBDMS se ioniza durante el espectro de masas Calculado para C_{23}H_{22}NO_{4}, 376,15; Encontrado, 377,3 [M+H]^{+1}.
Método 5 HPLC. R_{t} = 25,623 min Pureza = 50%
Parte B
Preparación del 5-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil-2-piridiloxi)pentan-1-ol
Se purgó con nitrógeno un matraz pequeño de fondo redondo. Se añadió a esto paladio sobre carbono (200 mg, 10% p/p) seguido por acetato de etilo (7 mL). Se disolvió en acetato de etilo (8 mL) la 4-Benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil-2- (5-(1,1,2,2-tetrametil-1-silapropoxi)pentiloxi)piridina (1,04 g, 2,12 mmol) y se añadió a la reacción. La reacción se evacuó y se purgó con nitrógeno dos veces, y luego se evacuó y se rellenó con hidrógeno dos veces. La reacción se agitó bajo nitrógeno durante 3 horas. La reacción no se completó por lo que se añadió más paladio sobre carbono (200 mg) y la reacción se agitó durante 3 horas más. La reacción no se completó aún, por lo que se añadió más paladio sobre carbono (500 mg) y la reacción se agitó por la noche durante 16 horas. La reacción no se terminó aún, por lo que se añadió más paladio sobre carbono (600 mg) y la reacción se agitó durante 3 horas. La reacción se filtró a través de celite, se lavó con acetato de etilo. El filtrado se concentró a un aceite a alto vacío. El aceite se recristalizó con hexano:éter para dar 421,8 mg (53%) del producto. ESMS: Calculado para C_{23}H_{23}NO_{4}, 377,16; Encontrado, 378,2 [M+H]^{+1}.
Método 5 HPLC. R_{t} = 16,203 min Pureza = 99%
Parte C
Preparación del 3-(2-(5-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))pentiloxi)fenil)-2-((tert-butoxi)carbonilamino)propanoato de metilo
Se trató el 5-(4-Benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil-2-piridiloxi)-pentan-1-ol (0.153 g, 0.406 mmol)and metil 2-((tert-butoxi)-carbonilamino)-3-(2-hidroxifenil)propanoato (0,100 g, 0,338 mmol) en tetrahidrofurano (10 mL). Se añadieron trifenilfosfina (0,177 g, 0,676 mmol) y dietilazodicarboxilato (0,118 g, 0,676 mmol) y la reacción se agitó durante 3 horas. La reacción se trató con cloruro de amonio saturado. La reacción no se concentró a alto vacío. La fase acuosa restante se extrajo con acetato de etilo. La fase orgánica se lavó con sal, se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró, y se concentró a un aceite a alto vacío. El aceite se purificó por cromatografía flash (hexano:acetato de etilo 5:1) para dar 0,111 g (50%) del producto. ESMS: Calculado para C_{38}H_{42}N_{2}O_{8}, 654,29; Encontrado, 655,4 [M+H]^{+1}.
Método 5 HPLC. R_{t} = 21,986 min Pureza = 95% 
\newpage
Parte D
Preparación del ácido 3-(2-(5-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))pentiloxi)fenil)-2-((tert-butoxi)carbonilamino)propanoico
216
Se disolvió en tetrahidrofurano (5 mL) el 3-(2-(5-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))pentiloxi)fenil)-2-((tert-butoxi)carbonil-amino)propanoato de metilo (0,098 g, 0,150 mmol). Se disolvió en agua (1 mL) hidróxido de litio monohidratado (0,0628 g, 1,50 mmol) y se añadió a la reacción. La reacción se agitó durante 18 horas. La reacción se concentró luego, se trató en agua, se acidificó a pH 5 con HCl 1N, y se extrajo con acetato de etilo. La fase orgánica se lavó con sal, se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y evaporó para dar 93,9 mg (98%) del producto. ESMS: Calculado para C_{37}H_{40}N_{2}O_{8}, 640,27; Encontrado, 641,4 [M+H]^{+1}.
Método 5 HPLC. R_{t} = 20,109 min Pureza = 91%
Parte E
Preparación del ácido 2-amino-3-(2-(5-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))pentiloxi)fenil) propanoico
Se añadió ácido trifluoroacético (3,0 mL) a una solución de ácido 3-(2-(5-(4-Benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))pentiloxi)fenil)-2-((tert-butoxi)-carbonilamino)-propanoico (0,083 g, 0,130 mmol) en cloruro de metileno (3,0 mL) y la reacción se agitó durante 2 horas. La reacción se concentró alto vacío para dar 85 mg (100%) del producto como un aceite. ESMS: Calculado para C_{32}H_{32}N_{2}O_{6}, 540,23; Encontrado, 541,3 [M+H]^{+1}.
Método 5 HPLC. R_{t} = 15,041 min Pureza = 96%
Parte F
Preparación del ácido 2-((6-((1-aza-2-(2-sulfofenil)vinil)amino)(3-piridil))carbonilamino)-3-(2-(5-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))pentiloxi)fenil)propanoico
Se añadió trietilamina (85,0 \muL, 0,610 mmol) a una solución de ácido 2-amino-3-(2-(5-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))pentiloxi)fenil)-propanoico (0,080 g, 0,122 mmol) en dimetilformamida (3 mL) y la reacción se agitó durante 5 minutos. Se añadió la sal monosódica del ácido 2-[[[5-[[(2,5-Dioxo-1-pirrolidinil)oxi]carbonil]-2-piridinil]hidrazono]metil]-benzensulfónico (0,0646 g, 0,146 mmol) y la reacción se agitó durante 96 horas bajo nitrógeno. La reacción se concentró a un aceite a alto vacío. El aceite se purificó luego por HPLC preparativo con el método 3 para dar 36,4 mg (35%) del prooducto. HRMS: Calculado para C_{45}H_{41}N_{5}O_{10}S + H, 844,2652; Encontrado, 844,2667.
Método 5 HPLC. R_{t} = 15,161 min Pureza = 96%
Método 5 HPLC
Instrumento: HP1050
Columna: Vydac C18(4.6 x 250 mm)
Detector: Detector Diode array 220nm/500ref
Velocidad de Flujo: 1.0 mL/min.
Temperatura columna: 50ºC
Tamaño de muestra: 15 uL
Fase móvil: A: 0,1% TFA en agua
B: 0,1% TFA en ACN/Agua (9:1)
Gradiente: Tiempo(min) %A %B
0 80 20
20 0 100
30 0 100
31 80 20
Ejemplos 90-166
Los reactivos de los Ejemplos 1-58, 61-72 y 75-89 son compuestos antagonistas de LTB4 que incorporan un quelante o una unidad enlazante para Tc-99m. Los siguientes procedimientos (A-D) describen la síntesis de radiofarmacéuticos de la presente invención (Ejemplos 90-166). Los reactivos comprenden un grupo de hidrazinonicotinamida, presente ya sea como hidracina libre o en una forma protegida como un reactivo de hidrazona para formar los complejos de ligando ternarios con Tc-99m, desginado por la fórmula ^{99m}Tc(LTB4)(tricine)(phosphine) y ^{99m}Tc(LTB4)(tricine)(L) (L = Imida-Nitrógeno que contiene un heterociclo), en el que (LTB4) representa el compuesto antagonista de LTB4 enlazado al Tc a través de la mitad de undiazenido (-N=N-) o hidrazido (=N-NH-). Los otros dos ligandos en la esfera de coordinación de Tc son tricina y una fosfina o bien una imida-nitrógeno que contiene heterociclo. Los reactivos que comprenden un quelante diamidaditiol o monoamidamonoamidaditiol forman complejos con Tc-99m de fórmula ^{99m}Tc(O)(LTB4) en el que la designación (LTB4) representa el compuesto antagonista LTB4 enlazado al Tc a través de dos donadores de nitrógeno y dos donadores de sulfuro que forman una esfera de coordinación de Tc(O)(N_{2}S_{2}).
Procedimiento A
Síntesis de complejos antagonistas del Tc-99m LTB4 de Fórmula ^{99m}Tc(LTB4)(tricine)(phosphine) utilizando un agente reductor de estaño (Ejemplos 90-93, 95-97, 99, 100, 105, 111, 126, y 145-150)
Se combinaron 10-30 \mug (0,2-0,4 mL) de antagonista de LTB4 en solución salina o en 50% de etanol acuoso, 40 mg (0,4 mL) de tricina en agua, 1-7 mg (0,10-0,30 mL) de fosfina disuelta en agua o etanol, 25 \mug (25 \muL) de SnCl_{2}\cdot2H_{2}O disueltos en HCl 0,1 M, 0-0.25 mL de etanol y 50-150 mCi ^{99m}TcO_{4} en solución salina en un vial de 10 cc. El kit se calentó en un baño de agua a 100ºC durante 10-20 minutos, luego se analizaron 50 \muL de muestra por HPLC con el método 6. Si fuera necesario, el complejo se purificaría al realizar una inyección 300-400 \muL en HPLC y se recoje la fracción en un matraz protegido. La fracción recogida se evaporó a sequedad, se redisolvió con una solución de 
\hbox{0,05-5%}
de Tween 80 en solución salina y se reanalizó utilizando HPLC con el método 6.
Procedimiento B
Síntesis de complejos antagonistas de Tc-99m LTB4 de Fórmula ^{99m}Tc(LTB4)(tricine)(TPPTS) sin utilizar un agente reductor de estaño (Ejemplos 93, 97, 100-103, 105-109, 111-124, 126-143)
Se añadió 0,2-0,4 mL (20-40 \mug) de antagonista del LTB4 en solución salina o en etanol acuoso al 50%, 50-100 mCi ^{99m}TcO_{4}^{-} en solución salina a un vial liofilizado que contiene 4,84 mg TPPTS, 6,3 mg de tricina, 40 mg de manitol y amortiguador de succinato 0.25 M, pH 4.8, y solución salina adicional para dar un volumen total de 1,3-1,5 mL. El kit se calienta en un baño de agua 100ºC durante 10-15 minutos, y una muestra se analizó luego por HPLC con el método 6 ó 7. Si fuera necesario, el complejo se purificaria al realizar una inyección de 300-400 \muL en el HPLC y recogiendo la fracción en un matraz protegido. La fracción recogida se evaporó a sequedad, se redisolvió con una solución al 0,05-5% de Tween 80 en solución salina, y luego se reanalizó utilizando HPLC con el método 6 ó 7.
Procedimiento C
Síntesis de complejos antagonistas de Tc-99m LTB4 de fórmula ^{99m}Tc(LTB4)(tricina)(L) (L = Imida-Nitrogen que contiene un heterociclo) (Ejemplos 151-164)
Se añadió a un vial de 10 mL una solución de tricina (100 mg/mL en amortiguador de succinato 25 mM, pH = 5.0), 0.2 mL de solución antagonista de LTB4 (100 \mug/mL en EtOH), 0.2-0.4 mL de solución de coligando (10-50 mg/mL en 25 mM de amortiguador de succinato, pH = 5.0, dependiendo del tipo de coligando (para los análogos de piridina, la concentración de coligando fue 5-10 mg/mL mientras que la concentración de análogos de imidazol, tiazol o triazol fue de 1-5 mg/mL), 0,2-0,5 mL de solución de ^{99m}TcO_{4}^{-} (100-200 mCi/mL en solución salina), y 25 \muL de solución de SnCl_{2}^{.}2H_{2}O (1,0 mg/mL en 0,1 N HCl). La mezcla de reacción se calentó a 100ºC durante 10-15 minutos. Después de enfriar a temperatura ambiente, la mezcla de reacción se analizó por HPLC con el método 6. Si fuera necesario, el complejo se purificaria al realizar una inyección de 300-400 \muL en el HPLC y recogiendo la fracción en un matraz protegido. La fracción recogida se evaporó a sequedad, se redisolvió en una solución salina de 0,05-5% de Tween 80 y se reanalizó luego utilizando HPLC con el método 6.
\newpage
Procedimiento D
Síntesis de complejos antagonistas de Tc-99m LTB4 de fórmula ^{99m}Tc(O)(LTB4) (Ejemplos 165, 166)
Se reconstituyó un kit comercial de Glucoscan® (que contiene 200 mg de glucoheptanoato de sodio y \sim60 \mug de cloruro de estaño dihidratado) con 1,25 mL de solución salina. Se añadió a 0,5 mL de Glucoscan® reconstituido: 150 \muL 1:7 ácido acético glacial:0,2 M HCl(aq), 0,25 mg (0,5 mL) del conjugado respectivo disuelto en etanol y aproximadamente 50-150 mCi ^{99m}TcO_{4}^{-} en solución salina. Se calentó el kit en un baño de agua a 80ºC durante 30 minutos, luego se analizó una muestra de 50 \muL por HPLC con el método 6. Si fuera necesario, se purificarian los complejos al realizar una inyección de 300-400 \muL en el HPLC y recogiendo la fracción en un matraz protegido. La fracción recogida se evaporó a sequedad, se redisolvió con solución de 0,05-5% de Tween 80 en solución salina, y se reanalizó luego utilizando HPLC con el método 6.
Métodos analíticos
HPLC Método 6
Columna: Zorbax C18, 25 cm x 4,6 mm o Vydac C18, 25 cm x 4.6 mm
Temperatura de la columna: ambiente
Flujo: 1,0 mL/min
Disolvente A: amortiguador de fosfato de sodio 10 mM pH 6
Disolvente B: 100% Acetonitrilo
Detector: sonda radiométrica de ioduro de sodio (NaI)
Gradiente A (Ej. 99, 100):
t (min) 0 20 30 31 40
%B 15 50 75 15 15
Gradiente B (Ej. 90-93, 95, 96):
t (min) 0 20 30 31 40
%B 0 90 90 0 0
Gradiente C (Ej. 94, 97, 98, 101-109, 111-144, 147-166):
t (min) 0 20 30 31 40
%B 0 75 75 0 0
Gradiente D (Ej. 145, 146):
t (min) 0 20 30 31 40
%B 0 80 80 0 0
HPLC Método 7 (Ej. 110)
Columna: Cosmosil C18, 25 cm x 4.6 mm
Temperatura de la columna: 50ºC
Flujo: 1,0 mL/min
Disolvente A: 25 mM fosfato de sodio pH 6
Disolvente B: 100% Acetonitrilo
Detector: sonda radiométrica de NaI
Gradiente:
t (min) 0 20 30 31 40
%B 40 80 80 40 40
TABLA 1 Datos analíticos y rendimiento para complejos ^{99m}Tc(LTB4)(tricine)(TPPTS)
Complejo Ej. Nº Reactivo Ej. Nº. % Rendimiento RT (min)
90 1 75 12.7
91 2 92 12.0
92 3 83 12.4
93 4 88 15.2
94 6 91 12.8
95 7 91 15.1
96 8 59 12.9
97 10 70 15.0
98 12 68 16.0
99 14 60 18.7
100 15 83 15.0
101 17 47 12.4
102 18 60 15.3
103 19 77 16.0
104 20 72 14.1
105 21 54 12.1
106 23 73 13.5
107 26 41 15.6
108 27 80 16.4
109 28 83 15.0
110 31 51 16.0
111 32 58 15.8
112 33 83 16.0
113 34 80 13.3
114 35 85 14.1
115 36 47 13.8
116 37 44 15.7
117 38 90 14.0
118 39 76 14.6
119 40 85 13.8
TABLA 1 (continuación)
Complejo Ej. Nº Reactivo Ej. Nº. % Rendimiento RT (min)
120 41 79 12.8
121 42 82 13.6
122 43 87 13.3
123 44 87 12.2
124 45 87 12.6
125 49 92 10.9
126 54 85 17.5
127 56 33 13.9
128 58 46 13.3
129 64 86 13.9
130 65 94 13.9
131 67 79 12.9
132 67 82 13.2
133 68 83 14.5
134 70 67 12.9
135 72 57 11.7
136 75 87 12.5
137 79 82 13.3
138 80 47 15.7
139 84 94 12.8
140 85 50 14.7
141 86 93 14.2
142 87 44 15.7
143 88 94 12.2
144 89 82 13.8
TABLA 2 Datos analíticos y rendimiento para complejos ^{99m}Tc(LTB4)(tricina)(TPPDS) y ^{99m}Tc(LTB4)(tricina)(TPPMS) utilizando el reactivo del Ejemplo 1
Complejo Ej. Nº. Fosfina % Rendimiento RT(min)
145 TPPDS 96 17.7
146 TPPMS 97 20.9
TABLA 3 Datos analíticos y rendimiento para complejos ^{99m}Tc(LTB4)(tricine)(TFP)
Complejo Ej. Nº. Reactivo Ej. Nº. % Rendimiento RT(min)
147 15 70 19.6
148 33 62 19.5
149 34 75 18.7
150 79 75 18.1
TABLA 4 Datos de HPLC y rendimiento de complejos ^{99m}Tc(LTB4)(tricina)(L) (L = Imida-Nitrogen que contiene un heterociclo)
Complejo Ej. Nº. Reactivo Ej. Nº. Ligando Imida (L) % Rendimiento RT (min)
151 1 A 75 16.7
152 14 A 90 16.6
153 14 B 88 17.1
154 15 B 57 13.8
155 15 C 89 14.5
156 15 D 28 13.8
157 15 A 67 14.8
158 15 E 64 16.0
159 15 F 25 15.6
160 15 G 62 16.1
161 15 H 86 17.5
162 15 I 66 14.8
163 21 A 64 13.9
164 34 H 71 16.4
Imida-nitrogen que contienen coligandos, L:
A ácido 3-piridinesulfonico
B ácido 3,5-piridinedicarboxílico
C ácido Isonicotinico
D ácido Nicotinico
E Hidroxietilisonicotinamida
F 4-Metil-5-imidazolmetanol
G 4-Metil-5-tiazoletanol
H piridine
I ácido 4-piridiletilsulfonico
TABLA 5 Datos analíticos y rendimiento para complejos ^{99m}TcO(LTB4)
Complejo Ej. Nº. Reactivo Ej. Nº. % Rendimiento RT(min)
165 9 80 16.0
166 55 81 13.9
Los tiempos de retención descritos son la media de los dos complejos diastereoméricos cuando se puedan resolver.
Utilidad
Los radiofarmacéuticos de esta invención son útiles para puntos imaginarios de infección y/o de inflamación en mamíferos. Los reactivos de esta invención són útiles en el tratamiento de enfermedades asociadas con la infección y inflamación. Los compuestos representativos se ensayaron en los tests in vitro y in vivo descritos anteriormente y se encontró que eran activos.
Ensayo de enlace al Neutrófilo humano LTB4 PMN
Se colocó sangre heparinizada en un gradiente de ficol seguido por sedimentación con dextrano. Esto resultó en preparaciones que contenían >95% de neutrófilos (PMN). La solución de PMN se ajustó para conseguir una concentración de 8 X 10^{6}PMN/ml. En este ensayo el agente de ensayo competirá activamente con 3[H] LTB4 para el receptor del PMN LTB4. Muy brevemente, el ensayo se realizó como sigue: [3H]LTB4 (1 nM) y el agente del ensayo se colocaron en un microplato de 96pozillos con filtros (0,65 \mum de tamaño de poro). Se añadió una solución de PMN (
\hbox{8 x 10 ^{6} /ml}
) y el microplato se incubó durante 10 minutos a 4ºC. El microplato se colocó luego en un sistema de filtración Milipore; Los pozillos se lavaron con solución salina fría (3x) y se secaron. Se eliminaron los filtros del microplato; se colocaron en un fluido de titilación y se determinó la concentración de [3H]LTB4.
Los compuestos de los ejemplos 1-89 se ensayaron en este ensayo y se encontró que todos eran activos.
Modelo de infección focal de los conejillos de indias
La función del modelo se evalua rápidamente por la abilidad del agente para detectar inflamación/infección así como para determinar la biodistribución. Muy brevemente, el procedimiento fue como sigue a continuación: Una aguja de trochar de #10 se utilizó para introducir una pieza de cordón umbilical sumergida en una solución de caseinato de sodio en el lado derecho y se colocó en el lado izquierdo de la cavidad peritoneal de los conejillos de indias anestesiados. La colocación del cordón sumergido sirvió como foco para la recogida de glóbulos blancos de la sangre durante las próximas 18 horas. 18 horas después los conejillos de indias se anestesiaron y se administró el agente de ensayo vía vena safenous lateral. A un tiempo apropiado de post-inyección, se eutanizaron los animales y se determinó la incorporación focal. A lo largo del transcurso del estudio, se eliminó la sangre vía punción cardíaca. La incorporación y las proporciones de objetivo/background se determinaron por cuentas de los pozillos.
Los radiofarmacéuticos de los Ejemplos 90, 92-95, 97, 99, 100, 102, 106-118, 126, 130, 133-134, 137-141, 143 y 166 se evaluaron en este modelo y todos se encontraron que tenían una incorporación focal en el lugar del rango de inflamación estéril desde 0,1 a 2,1 %i.d./g.
Modelo de infección focal de conejo
La función del modelo se evalua rápidamente por la abilidad del agente para detectar inflamación/infección por escintigrafía así como para determinar la biodistribución. El protocolo tiene lugar durante 2 días y consiste en una inducción de una infección, seguido por una biodistribución. Muy brevemente el procedimiento fue como sigue a continuación: en el día 1, se administraron intramuscularmente 2x10^{9} colonias de E. coli en el muslo de los conejos anestesiados. Se dejó acabar la infección durante 24 horas antes de la administración intravenosa del agente de ensayo. Antes de la administración del agente de ensayo, se anestesió al animal, se intubó y se monitorizó para medir la presión arterial y el ritmo cardíaco y la hematología, 5 minutos antes se realizaron imágenes consecutivas durante un período de 4 horas. Al final del protocolo el animal se eutanizó con una sobredosis de pentobarbitúricosy se evaluó la incorporación del agente de ensayo en varios órganos por cuenta de pozillos.
Los radiofarmacéuticos de los ejemplos 90, 93, 94, 97, 99, 100, 102, 107, 108, 113, 114, 118, 127, 129, 130, 133, 137, 140, y 157 se evaluaron con este modelo y se encontró que todos ellos daban una proporción objetivo respecto al blanco (lugar de infección respecto a las regiones del músculo contralateral de interés) del orden de 1,3 a 15,9.
Posología y Formulación
Los compuestos antiinfección y antiinflamatarios de esta invención se pueden administrar por tratamiento para la infección y inflamación por cualquier medio que produzca contacto del agente activo con el lugar de acción del agente. Se pueden administrar por cualquiera de los métodos convencionales disponibles para su utilización en conjunción con los farmacéuticos, ya sea como agentes terapéuticos o bien en combinación de agentes terapéuticos. Se pueden administrar solos, pero se administran preferiblemente con un portador farmacéutico seleccionado basándose en el transporte de administración escogido y la práctica estándar farmacéutica.
La dosis administrada variará dependiendo por supuesto de factores conocidos, como las características farmacodinámicas del agente particular y su modo y ruta de administración; la edad, salud y peso del receptor; la naturaleza y magnitud de los síntomas; el tipo de tratamiento concurrente; la frecuencia del tratamiento; y el efecto deseado. Se puede esperar que una dosis diaria del ingrediente activo sea aproximadamente 0,001 hasta aproximadamente 1000 miligramos por kilogramo de peso corporal, siendo la dosis preferida la de aproximadamente 0,1 hasta aproximadamente 30 mg/kg.
Las composiciones de las diferentes dosis para la administración contienen desde aproximadamente 1 mg hasta aproximadamente 100 mg de ingrediente activo por unidad. En estas composiciones farmacéuticas el ingrediente activo estará normalmente presente en una cantidad de aproximadamente 0,5-95% en peso basado en el peso total de la composición. El ingrediente activo se puede administrar oralmente mediante la aplicación de dosis sólidas, como cápsulas, pastillas y polvos, o aplicaciones de dosis líquidas, como elixires, jarabes y suspensiones. Se puede también administrar parenteralmente, mediante dosis líquidas estériles.
Las cápsulas de gelatina contienen el ingrediente activo y los portadores pulverizados, como la lactosa, almidón, derivados de celulosa, estearato de magnesio, ácido esteárico y parecidos. Se pueden utilizar diluyentes parecidos para hacer pastillas prensadas. Tanto las cápsulas como las pastillas se pueden fabricar como productos de liberación continua para proporcionar durante un periodo de horas la liberación continua de medicación. Las pastillas prensadas se pueden recubrir de azúcar o de capas para camuflar cualquier sabor desagradable y proteger la pastilla de la atmósfera o se recubren entéricamentepara la desintegración selectiva en el tracto gastrointestinal. Las dosis líquidas para la administración oral pueden contener colorantes y saborizantes para aumentar la aceptación del paciente.
En general, el agua, un aceite apropiado, una solución salina, dextrosa acuosa (glucosa), soluciones de azucares relacionados y glicoles como el propilenglicol o polietilenglicol son portadores apropiados para las soluciones parenterales. Las soluciones para la administración parenterales contienen preferiblemente una sal soluble en agua del ingrediente activo, agentes estabilizantes apropiados, y si fuera necesario, sustancias amortiguadoras. Los agentes antioxidantes como el bisulfito de sodio, sulfito de sodio o ácido ascórbico, solos o bien combinados, son agentes estabilizantes adecuados. También se utilizan el ácido cítrico y sus sales, y EDTA de sodio. Además, las soluciones parenterales pueden contener conservantes, como el cloruro de benzalconio, paraben de propilo o metilo y clorobutanol. Los portadores farmacéuticos apropiados se describen en Remington's Pharmaceutical Sciences, supra, un texto de referencia estándar en este campo.
Se pueden describir las aplicaciones de dosis farmacéuticas útiles para la administración de los compuestos de esta invención como sigue a continuación:
Cápsulas
Se puede preparar un gran número de unidades de cápsulas al rellenar cápsulas de gelatina resistente de dos piezas cada una de las cuales con 100 mg de ingrediente activo en polvo, 150 mg de lactosa, 50 mg de celulosa y 6 mg de estearato de magnesio.
Cápsulas de gelatina blanda
Se puede preparar una mezcla de ingrediente activo en un aceite digerible como el aceite de soja, aceite de semilla de algodón o aceite de oliva y inyectar por medio de una bomba de desplazamiento positiva en la gelatina para formar cápsulas de gelatina blanda que contienen 100 mg del ingrediente activo. Se deben lavar luego las cápsulas y se deben secar.
Pastillas
Se pueden preparar un gran número de pastillas por procedimientos convencionales a fin de que la unidad administrada sea 100 mg de ingrediente activo, 0,2 mg de dióxido de silicio coloidal, 5 miligramos de estereato de magnesio, 275 mg de celulosa microcristalina, 11 mg de almidón y 98,8 mg de lactosa. Se pueden aplicar recubrimientos apropiados para aumentar el buen sabor y retrasar la absorción.
Suspensión
Se puede preparar una suspensión acuosa para la administración oral para que cada 5 mL contenga 25 mg de ingrediente activo finamente dividido, 200 mg de celulosa de carboximetil de sodio, 5 mg de benzoato de sodio, U.S.P y 0,052 mg de vainilla.
Inyectable
Se puede preparar una composición parenteral apropiada para la administración por inyección al agitar un 1,5% en peso del ingrediente activo en un propilenglicol y agua al 10% en volumen. Se esteriliza la solución por técnicas utilizadas frecuentemente.

Claims (28)

1. Un compuesto que comprende
a)
un grupo de unión al receptor de leucotrieno B4 (LTB4), y
b)
una unidad de unión a un metal, de modo que el compuesto tenga una afinidad de unión por el receptor LTB4 de menos de 1000nM, y que el grupo de unión al receptor no sea un anticuerpo o proteína.
2. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 que tiene la fórmula: W_{e}-X-L_{n}-Y-L_{n'}-C_{h},
\qquad
W_{e}-X-L_{n}(L_{n'}-C_{h})-Y, 
\qquad
o 
\qquad
Z-L_{n'}-C_{h}, en la que,
W_{e} está seleccionado entre el grupo:
217
en el que,
A^{1} es N, C-OH, o CH;
A^{2} y A^{3} son independientemente N o CH;
A^{4} es N o CR^{3};
A^{5} es O o S;
A^{6} es O, CH_{2} o S;
A^{7} es C-OH, N, NH, O o S;
A^{8} es NH, CH_{2}, O, S, N, o CH;
A^{9} es N o CH;
a y b indican las posiciones alternativas de un doble enlace;
R^{1} está seleccionado entre el grupo: H, -C(=NH)NH_{2}, alquilo de C_{1}-C_{6} sustituido con 0-3 R^{4}, alcoxi de C_{1}-C_{6} sustituido con 0-3 R^{4}, arilo sustituido con 0-3 R^{5}, y heterociclo sustituido con 0-3 R^{5};
R^{2} está seleccionado entre el grupo: H, alquilo de C_{1}-C_{3}, alquenilo de C_{2}-C_{3}, ciclopropilo, ciclopropilmetilo, y arilo sustituido con 0-3 R^{5};
R^{3} es -H, -OH o alcoxi de C_{1}-C_{3};
o alternativamente, R^{1} y R^{3} pueden ser tomados juntos con los átomos a los que están unidos para formar un anillo fenilo fusionado sustituido con 0-3 R^{5};
R^{4} está independientemente seleccionado entre el grupo: -F, -Cl, -Br, -I, =O, -N(R^{6})(R^{7}), y -CF_{3};
R^{5} está independientemente seleccionado entre el grupo: -F, -Cl, -Br, -I, -N(R^{6})(R^{7}), -CF_{3}, alquilo de C_{1}-C_{3}, alcoxi de C_{1}-C_{3}, y metilendioxi;
R^{6} y R^{7} son independientemente H o alquilo de C_{1}-C_{3};
siempre que cuando A^{1} y A^{2} son CH, A^{3} es C-X, y A^{4} es CR^{3}, R^{1} esté seleccionado entre el grupo: alquilo de C_{1}-C_{5} sustituido con 1-3 R^{4}, alcoxi de C_{1}-C_{5} sustituido con 0-3 R^{4}, y arilo sustituido con 0-3 R^{5};
X es O, S, CH_{2} o CH=CH;
L_{n} es un grupo de unión que tiene la fórmula (CR^{8}R^{9})_{g}-(W^{1})_{h}-(M^{1})_{k}-(CR^{10}R^{11})_{g'} en la que,
R^{8}, R^{9}, R^{10} y R^{11} están independientemente seleccionados cada vez que están presentes entre el grupo: un enlace a L_{n'}, H, alquilo de C_{1}-C_{5}, y alcoxi de C_{1}-C_{5}, o alternativamente, R^{8} y R^{9} o R^{10} y R^{11} pueden ser tomados juntos para formar un cicloalquilo de 3-6 miembros o heterociclo;
W^{1} está independientemente seleccionado entre el grupo: O, S, C(=O)O, OC(=O), CH=CH, (OCH_{2}CH_{2})_{p} y (CH_{2}CH_{2}O)_{p'}, en la que p y p' son independientemente 1-3;
M^{1} está seleccionado entre el grupo:
fenilo sustituido con 0-3 R^{12}, heterociclo sustituido con 0-3 R^{12}, benzofenona sustituido con 0-3 R^{12}, y difeniléter sustituido con 0-3 R^{12};
R^{12} está independientemente seleccionado entre el grupo: un enlace a L_{n'}, -COOR^{13}, C_{1}-C_{5} alquilo sustituido con 0-3 R^{14}, y C_{1}-C_{5} alcoxi sustituido con 0-3 R^{14};
R^{13} es H o alquilo de C_{1}-C_{5}:
R^{14} está independientemente seleccionado entre el grupo: un enlace a L_{n'}, y -COOH;
g es 0-10;
h es 0-3;
k es 0-1;
g' es 0-5;
siempre que cuando h es 0 y k es 0, g es > 1;
y siempre que cuando W^{1} es O o S y k es 0, g + g' es = 1;
Y está seleccionado entre C(=O)NH, NHC(=O), C=O, C(=O)O, OC(=O), NHS(=O)_{2}, C(=O)NHS(=O)_{2}, COOH, C(=O)NH_{2}, NH(C=O)NH, o tetrazol;
siempre que entre 0-1 de los R^{9}, R^{10}, R^{11}, R^{12}, y R^{14} sea un enlace a L_{n'} y cuando una de estas variables sea un enlace a L_{n'}, entonces Y sea COOH, C(=O)NH_{2}, o tetrazol;
L_{n'} es un grupo de unión que tiene la fórmula: (W^{2})_{h'}-(CR^{15}R^{16})_{g''}-(M^{2})_{k'}- (W^{2})_{h''}-(CR^{17}R^{18})_{g'''}-(W^{2})_{h'''}
en la que,
W^{2} está independientemente seleccionado cada vez que está presente entre el grupo: O, S, NH, NHC(=O), C(=O)NH, C(=O), C(=O)O, OC(=O), NHC(=O)NH, SO_{2}, (OCH_{2}CH_{2})_{s}, (CH_{2}CH_{2}O)_{s'}, (OCH_{2}CH_{2}CH_{2})_{s''}, 
\hbox{(CH _{2} CH _{2} CH _{2} O) _{t} }
, y (aa)_{t'}, en la que aa es independientemente cada vez que está presente un amino ácido, y s, s', s'', t, y t' son independientemente 1-10;
M^{2} está seleccionado entre el grupo: arilo sustituido con 0-3 R^{19}, cicloalquilo sustituido con 0-3 R^{19}, y heterociclo sustituido con 0-3 R^{19};
R^{15}, R^{16}, R^{17} y R^{18} están independientemente seleccionados cada vez que están presentes entre el grupo: =O, COOH, SO_{3}H, PO_{3}H, alquilo de C_{1}-C_{5} sustituido con 0-3 R^{19}, arilo sustituido con 0-3 R^{19}, bencilo sustituido con 0-3 R^{19}, y alcoxi de C_{1}-C_{5} sustituido con 0-3 R^{19}, NHC(=O)R^{20}, C(=O)NHR^{20}, NHC(=O)NHR^{20}, NHR^{20}, R^{20}, y un enlace a C_{h};
R^{19} está independientemente seleccionado cada vez que está presente entre el grupo: COOR^{20}, OH, NHR^{20}, SO_{3}H, PO_{3}H, arilo sustituido con 0-3 R^{20}, heterociclo sustituido con 0-3 R^{20}, alquilo de C_{1}-C_{5} sustituido con 0-1 R^{21}, alcoxi de C_{1}-C_{5} sustituido con 0-1 R^{21}, y un enlace a C_{h};
R^{20} está independientemente seleccionado cada vez que está presente entre el grupo: H, arilo sustituido con 
\hbox{0-1}
R^{21}, heterociclo sustituido con 0-1 R^{21}, cicloalquilo sustituido con 0-1 R^{21}, polialquilen glicol sustituido con 0-1 R^{21}, carbohidrato sustituido con 0-1 R^{21}, ciclodextrina sustituida con 0-1 R^{21}, amino ácido sustituido con 0-1 R^{21}, policarboxialquilo sustituido con 0-1 R^{21}, poliazaalquilo sustituido con 0-1 R^{21}, péptido sustituido con 0-1 R^{21}, en el que dicho péptido comprende entre 2 y 10 amino ácidos, y un enlace a C_{h};
R^{21} es un enlace a C_{h};
k' es 0-2;
h' es 0-2;
h'' es 0-5;
h''' es 0-2;
g'' es 0-10;
g''' es 0-10;
C_{h} es una unidad de unión metálica que tiene una fórmula seleccionado entre el grupo:
218
2180
219
220
en la que:
Q^{1}, Q^{2}, Q^{3}, Q^{4}, Q^{5}, Q^{6}, Q^{7}, y Q^{8} están independientemente seleccionados cada vez que están presentes entre el grupo: NR^{22}, NR^{22}R^{23}, S, SH, S(Pg), O, OH, PR^{22}, PR^{22}R^{23}, P(NR^{24})R^{25}R^{26}, P(O)R^{25}R^{26}, y P(S)R^{25}R^{26};
E es un enlace, CH, o un grupo espaciador seleccionado entre el grupo: alquilo de C_{1}-C_{10} sustituido con 0-3 R^{27}, arilo sustituido con 0-3 R^{27}, cicloalquilo sustituido con 0-3 R^{27}, heterocicloalquilo sustituido con 0-3 R^{27}, aralquilo sustituido con 0-3 R^{27}, y alcarilo sustituido con 0-3 R^{27};
E^{a} es un grupo alquilo de C_{1}-C_{10} o un carbociclo de C_{3}-C_{14};
R^{22}, R^{23}, y R^{24} están cada uno de ellos independientemente seleccionados entre el grupo: un enlace a L_{n'}, hidrógeno, alquilo de C_{1}-C_{10} sustituido con 0-3 R^{27}, arilo sustituido con 0-3 R^{27}, cicloalquilo sustituido con 0-3 R^{27}, heterocicloalquilo sustituido con 0-3 R^{27}, aralquilo sustituido con 0-3 R^{27}, alcarilo sustituido con 0-3 R^{27}, heterociclo sustituido con 0-3 R^{27}, y un electrón, siempre que cuando uno de los R^{22} o R^{23} sea un electrón, entonces el otro sea también un electrón;
adicionalmente, R^{22} y R^{23} pueden combinarse para formar =C(R^{30})(R^{31});
R^{25} y R^{26} están cada uno de ellos independientemente seleccionados entre el grupo: un enlace a L_{n'}, -OH, alquilo de C_{1}-C_{10} sustituido con 0-3 R^{27}, alquilo de C_{1}-C_{10} sustituido con 0-3 R^{27}, arilo sustituido con 0-3 R^{27}, cicloalquilo sustituido con 0-3 R^{27}, heterocicloalquilo sustituido con 0-3 R^{27}, aralquilo sustituido con 0-3 R^{27}, alcarilo sustituido con 0-3 R^{27}, y heterociclo sustituido con 0-3 R^{27};
R^{27} está independientemente seleccionado cada vez que está presente entre el grupo: un enlace a L_{n'}, =O, F, Cl, Br, I, -CF_{3}, -CN, -CO_{2}R^{28}, -C(=O)R^{28}, -C(=O)N(R^{28})_{2}, -CHO, -CH_{2}OR^{28}, -OC(=O)R^{28}, -OC(=O)OR^{28a}, -OR^{28}, -OC(=O)N(R^{28})_{2}, -NR^{29}C(=O)R^{28}, -NR^{29}C(=O)OR^{28a}, -NR^{29}C(=O)N(R^{28})_{2}, -NR^{29}SO_{2}N(R^{28})_{2}, -NR^{29}SO_{2}R^{28a}, -SO_{3}H, -SO_{2}R^{28a}, -SR^{28}, -S(=O)R^{28a}, -SO_{2}N(R^{28})_{2}, -N(R^{28})_{2}, -NHC(=NH)NHR^{28}, -C(=NH)NHR^{28}, =NOR^{28}, NO_{2}, -C(=O)NHOR^{28}, 
\hbox{-C(=O)NHNR ^{28} R ^{28a} }
, -OCH_{2}CO_{2}H, 2-(1-morfolino)etoxi, alquilo de C_{1}-C_{5}, alquenilo de C_{2}-C_{4}, cicloalquilo de C_{3}-C_{6}, cicloalquilmetilo de C_{3}-C_{6}, alcoxialquilo de C_{2}-C_{6}, arilo sustituido con 0-2 R^{28}, y un sistema de anillo heterocíclico de 5-10 miembros conteniendo 1-4 heteroátomos independientemente seleccionados entre N, S, y O;
R^{28}, R^{28a}, y R^{29} están independientemente seleccionados cada vez que están presentes entre el grupo: un enlace a L_{n'}, H, alquilo de C_{1}-C_{6}, fenilo, bencilo, alcoxi de C_{1}-C_{6}, haluro, nitro, ciano, y trifluorometilo;
Pg es un grupo protector de tiol;
R^{30} y R^{31} están independientemente seleccionados entre el grupo:
H, alquilo de C_{1}-C_{10}, -CN, -CO_{2}R^{34}, -C(=O)R^{34}, -C(=O)N(R^{34})_{2},
1-alqueno de C_{2}-C_{10} sustituido con 0-3 R^{33},
1-alquino de C_{2}-C_{10} sustituido con 0-3 R^{33},
arilo sustituido con 0-3 R^{33},
heterociclo insaturado sustituido con 0-3 R^{33}, y
carbociclo insaturado sustituido con 0-3 R^{33};
o, alternativamente, R^{30} y R^{31}, pueden ser tomados juntos con el radical carbono divalente a los que están unidos para formar:
221
en la que:
R^{32} y R^{33} pueden estar independientemente seleccionados entre el grupo: H, R^{34}, alquilo de C_{1}-C_{10} sustituido con 0-3 R^{34}, alquenilo de C_{2}-C_{10} sustituido con 0-3 R^{34}, alquinilo de C_{2}-C_{10} sustituido con 0-3 R^{34}, arilo sustituido con 0-3 R^{34}, heterociclo sustituido con 0-3 R^{34}, y carbociclo sustituido con 0-3 R^{34};
o, alternativamente, R^{32}, R^{33} pueden ser tomados juntos para formar un anillo aromático o hetrocíclico fusionado;
c y d indican las posiciones de los dobles enlaces opcionales y n es 0 o 1,
R^{34} está independientemente seleccionado cada vez que está presente entre el grupo: =O, F, Cl, Br, I, -CF_{3}, -CN, -CO_{2}R^{35}, -C(=O)R^{35}, -C(=O)N(R^{35})_{2}, -N(R^{35})_{3}^{+}-CH_{2}OR^{35}, -OC(=O)R^{35}, -OC(=O)OR^{35a}, -OR^{35}, -OC(=O)N(R^{35})_{2}, 
\hbox{-NR ^{36} C(=O)}
R^{35}, -NR^{36}C(=O)OR^{35a}, -NR^{36}C(=O)N(R^{35})_{2}, -NR^{36}SO_{2}N(R^{35})_{2}, -NR^{36}SO_{2}R^{35a}, -SO_{3}H, -SO_{2}R^{35a}, -SR^{35}, -S(=O)R^{35a}, -SO_{2}N(R^{35})_{2}, -N(R^{35})_{2}, -NHC(=NH)NHR^{35}, -C(=NH)NHR^{35}, =NOR^{35}, -C(=O)NHOR^{35}, -OCH_{2}CO_{2}H, 
\hbox{2-(1-morfolino)}
etoxi;
R^{35}, R^{35a}, y R^{36} están cada uno de ellos independientemente seleccionados cada vez que están presentes entre el grupo: hidrógeno, alquilo de C_{1}-C_{6};
Z está seleccionado entre el grupo:
222
en la que,
A^{10} es NR^{41} o -C(R^{41})=CH-;
R^{37} está seleccionado entre el grupo: C(=O)-R^{42}, CH=CR^{43}C(=O)-R^{42}, CH_{2}C(=O)-R^{42}, y CH_{2}CH_{2}C(=O)-R^{42};
R^{38} está seleccionado entre el grupo: SR^{44}, SCH_{2}R^{44}, y S(=O)R^{44};
R^{39} está seleccionado entre el grupo: alquilo de C_{1}-C_{10} sustituido con 0-3 R^{44}, y alcoxi de C_{1}-C_{10} sustituido con 
\hbox{0-3}
R^{44};
R^{40} es C(=O)-R^{42};
R^{41} es CH_{2}C(=O)N(CH_{3})CH_{2}CH_{2}C_{6}H_{5};
R^{42} es un enlace a L_{n'};
R^{43} está seleccionado entre el grupo: H y alquilo de C_{1}-C_{3}
R^{44} es fenilo sustituido con 0-4 R^{45};
R^{45} está independientemente seleccionado cada vez que está presente entre el grupo: OR^{46}, C(=O)OR^{46}, -Cl, -Br, -F, y N(R^{46})_{2};
R^{46} está independientemente seleccionado cada vez que está presente entre el grupo: H, y alquilo de C_{1}-C_{10}; y
e indica la posición de un doble enlace opcional;
y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos.
3. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 2, en la que:
W_{e} está seleccionado entre el grupo:
223
en la que, A^{1} es N, C-OH, o CH;
A^{2} y A^{3} son CH;
A^{4} es CR^{3};
A^{5} es O;
A^{6} es O o CH_{2};
R^{4} está independientemente seleccionado entre el grupo: -F, -Cl, =O, -N(R^{6})(R^{7}), y-CF_{3};
R^{5} está independientemente seleccionado entre el grupo: -F, -Cl, -CF_{3}, alquilo de C_{1}-C_{3}, alcoxi de C_{1}-C_{3}, y metilendioxi;
X es O, CH_{2} o CH=CH;
R^{8}, R^{9}, R^{10} y R^{11} están independientemente seleccionados cada vez que están presentes entre el grupo: un enlace a L_{n'}, H, alquilo de C_{1}-C_{5}, y alcoxi de C_{1}-C_{5};
o alternativamente, R^{8} y R^{9} o R^{10} y R^{11} pueden ser tomados juntos para formar un cicloalquilo de 3-6 miembros;
C_{h} está seleccionado entre el grupo:
224
225
en la que:
Q^{1}, Q^{2}, Q^{3}, Q^{4}, Q^{5}, Q^{6}, Q^{7}, y Q^{8} están independientemente seleccionados cada vez que están presentes entre el grupo: NR^{22}, NR^{22}R^{23}, S, SH, S(Pg), OH;
E es un enlace, CH, o un grupo espaciador seleccionado entre el grupo: alquilo de C_{1}-C_{10} sustituido con 0-3 R^{27}, arilo sustituido con 0-3 R^{27}, cicloalquilo sustituido con 0-3 R^{27}, y heterociclo sustituido con 0-3 R^{27};
E^{a} es CH o un carbociclo de C_{3}-C_{6};
R^{22} y R^{23} están cada uno de ellos independientemente seleccionados entre el grupo: un enlace a L_{n'}, hidrógeno, alquilo de C_{1}-C_{10} sustituido con 0-3 R^{27}, arilo sustituido con 0-3 R^{27}, heterociclo sustituido con 0-3 R^{27}, y un electrón, siempre que cuando uno de los R^{22} o R^{23} sea un electrón;
adicionalmente, R^{22} y R^{23} puedan combinarse para formar =C(R^{30})(R^{31});
R^{27} está independientemente seleccionado cada vez que está presente entre el grupo: un enlace a L_{n'}, =O, F, Cl, Br, I, -CF_{3}, -CN, -CO_{2}R^{28}, -C(=O)R^{28}, -C(=O)N(R^{28})_{2}, -CH_{2}OR^{28}, -OC(=O)R^{28}, -OC(=O)OR^{28a}, -OR^{28}, -OC(=O)N(R^{28})_{2}, -NR^{29}C(=O)R^{28}, -NR^{29}C(=O)OR^{28a}, -NR^{29}C(=O)N(R^{28})_{2}, -NR^{29}SO_{2}N(R^{28})_{2}, -NR^{29}SO_{2}R^{28a}, -SO_{3}H, -SO_{2}R^{28a}, -SR^{28}, -S(=O)R^{28a}, -SO_{2}N(R^{28})_{2}, -N(R^{28})_{2}, -NHC(=NH)NHR^{28}, -C(=NH)NHR^{28}, =NOR^{28}, NO_{2}, -C(=O)NHOR^{28}, 
\hbox{-C(=O)}
NHNR^{28}R^{28a}, -OCH_{2}CO_{2}H, y 2-(1-morfolino)etoxi;
R^{28}, R^{28a}, y R^{29} están independientemente seleccionados cada vez que están presentes entre el grupo: un enlace a L_{n'}, H, y alquilo de C_{1}-C_{6};
R^{30} y R^{31} están independientemente seleccionados entre el grupo:
-CO_{2}R^{34},
1-alqueno de C_{2}-C_{5} sustituido con 0-3 R^{33},
1-alquino de C_{2}-C_{5} sustituido con 0-3 R^{33},
arilo sustituido con 0-3 R^{33}, y
heterociclo insaturado sustituido con 0-3 R^{33};
R^{32} y R^{33} pueden estar independientemente seleccionados entre el grupo:
H, R^{34};
o, alternativamente, R^{32}, R^{33} pueden ser tomados juntos para formar un anillo aromático o hetrocíclico fusionado;
R^{34} está independientemente seleccionado cada vez que está presente entre el grupo: -CO_{2}R^{35}, -C(=O)N(R^{35})_{2}, -CH_{2}OR^{35}, -OC(=O)R^{35}, -OR^{35}, -SO_{3}H, -N(R^{35})_{2}, y-OCH_{2}CO_{2}H;
R^{35}, R^{35a}, y R^{36} están cada uno de ellos independientemente seleccionado cada vez que están presentes entre el grupo: hidrógeno, alquilo de C_{1}-C_{3};
R^{39} está seleccionado entre el grupo: alquilo de C_{1}-C_{10} sustituido con 0-1 R^{44}, y alcoxi de C_{1}-C_{10} sustituido con 
\hbox{0-1}
R^{44};
R^{43} es H; y
R^{46} está independientemente seleccionado cada vez que está presente entre el grupo: H, y alquilo de C_{1}-C_{5}.
4. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 3, en la que:
R^{1} está seleccionado entre el grupo:
H, -C(=NH)NH_{2}, alquilo de C_{1}-C_{6} sustituido con 0-2 R^{4}, alcoxi de C_{1}-C_{6} sustituido con 0-2 R^{4}, arilo sustituido con 0-2 R^{5}, y heterociclo sustituido con 0-2 R^{5};
R^{3} es -H, -OH o alcoxi de C_{1}-C_{3};
o alternativamente, R^{1} y R^{3} pueden ser tomados juntos con los átomos a los que están unidos para formar un anillo fenilo fusionado sustituido con 0-2 R^{5};
R^{4} está independientemente seleccionado entre el grupo:
=O, y -N(R^{6})(R^{7});
R^{5} está independientemente seleccionado entre el grupo:
-F, alquilo de C_{1}-C_{3}, alcoxi de C_{1}-C_{3}, y metilendioxi;
X es O, CH_{2} o CH=CH;
R^{8}, R^{9}, R^{10} y R^{11} están independientemente seleccionados cada vez que están presentes entre el grupo: un enlace a L_{n'}, H, y alquilo de C_{1}-C_{3};
o alternativamente, R^{8} y R^{9} o R^{10} y R^{11} pueden ser tomados juntos para formar un cicloalquilo de 3-6 miembros;
W^{1} es O;
M^{1} está seleccionado entre el grupo:
fenilo sustituido con 0-1 R^{12}, heterociclo sustituido con 0-1 R^{12}, benzofenona sustituido con 0-1 R^{12}, y difeniléter sustituido con 0-1 R^{12};
R^{12} está independientemente seleccionado entre el grupo: un enlace a L_{n'}, -COOR^{13}, alquilo de C_{1}-C_{5} sustituido con 0-1 R^{14}, y alcoxi de C_{1}-C_{5} sustituido con 0-1R^{14};
M^{2} está seleccionado entre el grupo: arilo sustituido con 0-1 R^{19}, cicloalquilo sustituido con 0-3 R^{19}, y heterociclo sustituido con 0-1 R^{19};
C_{h} está seleccionado entre:
226
en la que,
Q^{1} y Q^{4} son SH o S(Pg);
Q^{2} y Q^{3} son NR^{22};
E está independientemente seleccionado entre el grupo: CHR^{27}, CH_{2}CHR^{27}, CH_{2}CH_{2}CHR^{27}, y CHR^{27}C(=O);
R^{22} está seleccionado entre el grupo: H, alquilo de C_{1}-C_{6} sustituido con 0-1 R^{27}; y
R^{27} están independientemente seleccionados entre H y un enlace a L_{n'},
y,
227
en la que,
Q^{1} es NH_{2} o N=C(R^{30})(R^{31});
E es un enlace; Q^{2} es NHR^{23}, en la que R^{23} es heterociclo sustituido con R^{27}, en la que el heterociclo está seleccionado entre piridina y tiazol, R^{27} está seleccionado entre C(=O)NHR^{28} y C(=O)R^{28}, y R^{28} es un enlace a L_{n'};
R^{30} está seleccionado entre el grupo: -CO_{2}R^{35}, 1-alqueno de C_{2}-C_{3} sustituido con 0-1 R^{34}, arilo sustituido con 0-1 R^{34}, y heterociclo insaturado sustituido con 0-1 R^{34};
R^{31} es H;
R^{34} está independientemente seleccionado cada vez que está presente entre el grupo: -CO_{2}R^{34}, -OR^{34}, -SO_{3}H, y -N(R^{34})_{2};
R^{35} está independientemente seleccionado cada vez que está presente entre el grupo: hidrógeno, y metilo;
A^{10} es NR^{41};
R^{39} es alcoxi de C_{1}-C_{10} sustituido con 1 R^{44}; y
R^{45} está independientemente seleccionado cada vez que está presente entre el grupo: OH, C(=O)OH, -Cl, -F, y NH_{2}.
5. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 4 seleccionado entre el grupo que consiste en:
4-etil-2-(4-fluorofenil)-[5-[5,5-dimetil-6-[[6-[[[(2-sulfonilfenil)metilen]hidracin]-3-piridinil]carbonil]amino]hexil]oxi]fenol;
4-etil-2-(4-fluorofenil)-[5-[4-[[6-[[[(2-sulfonilfenil)metilen]hidracin]-3-piridinil]carbonil]amino]butil]oxi]fenol;
ácido 2-[[[5-[[(6-[(4,6-difenil-2-piridinil)oxi]-1-hexanamino]carbonil]-2-piridinil]hidrazon]metil]-bencenosulfónico;
ácido 2-[[[5-[[2,2-dimetil-6-[(6-fluorofenil-4-fenil-2-piridinil)oxi]-1-hexanamino]carbonil]-2-piridinil]hidrazon]metil]-bencenosulfónico;
ácido 2-[[[5-[[N-[6-[(6-(4-fluorofenil)-4-fenil-2-piridinil)oxi]-hexanoil]-tirosin-O-[3-propanamino]]carbonil]-2-piridinil]hidrazon]-metil]-bencenosulfónico;
ácido 2-[[[5-[[N-[6-[(4,6-difenil-2-piridinil)oxi]-hexanoil]-tirosin-O-[3-propanamino]]carbonil]-2-piridinil]hidrazon]-metil]-bencenosulfónico;
ácido 2-[[[5-[[N-[6-[(4-(3,4-metilendioxifenil)-6-fenil-2-piridinil)oxi]-hexanoil]-tirosin-O-[3-propanamino]]-carbonil]-2-piridinil]hidrazon]-metil]-bencenosulfónico;
ácido 2-[[[5-[[alfa-N-[6-[(4,6-difenil-2-piridinil)oxi]-hexanoil]-lisin-epsilon-N-amino]carbonil]-2-piridinil]hidrazon]-metil]-bencenosulfónico;
conjugado entre el 4-etil-2-(4-fluorofenil)-5-[(5,5-dimetil-6-aminohexil)oxi]fenol y la N-[4-(carboxi)bencil]-N,N'-bis[2-tioetil]-glicinamida;
ácido bencenosulfónico, 2-[[[5-[[[6-[(4,6-difenil-2-piridinil)oxi]-2,2-dimetil-1-hexil]aza]carbonil]-2-piridinil]hidrazon]metil];
ácido 2-[[[5-[[[[6-[(4,6-Difenil-2-piridinil)oxi]-hexanoil]-4-sulfonamidil]bencilamino]carbonil]-2-piridinil]-hidrazon]metil]-bencenosulfónico;
4-etil-2-(4-fluorofenil)-[5-[6,6-dimetil-7-[[6-[[[(2-sulfonilfenil)metilen]hidracin]-3-piridinil]carbonil]amino]heptil]oxi]fenol;
4-etil-2-(5-pirazolil)-[5-[5,5-dimetil-6-[[6-[[[(2-sulfonilfenil)metilen]hidracin]-3-piridinil]carbonil]amino]hexil]oxi]fenol;
228
4-etil-2-(4-fluorofenil)-[5-[6,6-dimetil-7-[[6- [[[fenilmetilen]hidracin]-3-piridinil]carbonil]amino]heptil]oxi]fenol;
N-((6-((1-aza-2-fenilvinil)amino)(3-piridil))sulfonil)-3-(1-((N-(2-feniletil)carbamoil)metil)-5-(fenilmetoxi)indol-3-il)prop-2-enamida;
3-((7-(3-(6-etil-4-(4-fluorofenil)-3-hidroxifenoxi)propoxi)-8-propilcroman-2-il)carbonilamino)propanoato de propilo, ácido 2-(2-aza-2-((5-carbamoil(2-piridil)amino)vinil)bencenosulfónico;
3-((7-(-(6-etil-4-(4-fluorofenil)-3-hidroxifenoxi)propoxi)-8-propilcroman-2-il)carbonilamino)propil-2-metilpropanoato de, ácido 2-(2-aza-2((5-carbamoil(2-piridil)amino)vinil)bencenosulfónico;
N-(3-((7-(3-(6-etil-4-(4-fluorofenil)-3-hidroxifenoxi)propoxi)-8-propilcroman-2-il)carbonilamino)propil)-2-metilpropanamida, ácido 2-(2-aza-2-((5-carbamoil(2-piridil))amino)vinil)bencenosulfónico;
ácido 2-(2-aza-2-((5-(N-(6-(6-etil-3-hidroxi-4-(1-metilpirazol-5-il)fenoxi)-22-dimetilhexil)carbamoil)(2-piridil))amino)vinil)bencenosulfónico;
ácido 2-(2-aza-2-((5-(N-(6-(6-etil-3-hidroxi-4-(1-metilpirazol-5-il)fenoxi)-2,2-dimetilhexil)carbamoil)(2-piridil))amino)vinil)bencenosulfónico;
ácido 2-(2-aza-2-((5-((3-((6-etil-4-(4-fluorofenil)-3-hidroxifenoxi)metil)piperidil)carbonil)(2-piridil))amino)vinil)bencenosulfónico;
2-(((4-(N-(6-(4,6-Difenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)carbamoil)fenil)metil)(2-sulfaniletil)amino)-N-(2-sulfaniletil)etanamida;
ácido 2-(2-Aza-2-((5-(N-(3-(2-(2-(3-(5-(4-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-1,1-dimetilpentil)(1,2,3,5-tetraazolil)) pentanoilamino)propoxi)etoxi)etoxi)propil)carbamoil)(2-piridil)) amino)vinil)bencenosulfónico;
\newpage
ácido 2-(2-Aza-2-((5-(N-(3-(2-(2-(3-(5-(5-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-1,1-dimetilpentil)(1,2,3,4-tetraazolil)) pentanoilamino) propoxi)etoxi)etoxi)propil)carbamoil)(2-piridil)) amino)vinil)bencenosulfónico;
ácido 2-(2-Aza-2-((5-(N-(2-(2-(2-(2-(2-(2-(2-(2-(5-(4-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-1,1-dimetilpentil)(1,2,3,5-tetraazolil)) pentanoilamino)etoxi)etoxi)etoxi)etoxi)etoxi)etoxi)etoxi)etil) carbamoil)(2-piridil)) amino)vinil)bencenosulfónico;
ácido 2-(2-Aza-2-((5-(N-(5-(4-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-1,1-dimetilpentil)(1,2,3,5-tetraazolil))pentanoil-amino)-1-(6-deoxi-\beta-ciclodextril)carbamoil)pentil)carbamoil)(2-piridil)) amino)vinil)bencenosulfónico;
ácido 2-(2-Aza-2-((5-(N-(3-(2-(2-(3-(2-(5-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-1,1-dimetilpentil) (1,2,3,4-tetraazolil)) acetilamino)propoxi)etoxi)etoxi)propil)carbamoil)(2-piridil)) amino)vinil)bencenosulfónico;
ácido 2-(2-Aza-2-((5-(N-(3-(2-(2-(3-(2-(4-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-1,1-dimetilpentil)(1,2,3,5-tetraazolil)) acetilamino)propoxi)etoxi)etoxi)propil)carbamoil)(2-piridil)) amino)vinil)bencenosulfónico;
ácido 3-(6-(3-(N-(5-((6-((1-Aza-2-(sulfofenil)vinil)amino)(3-piridil))carbonilamino)-5-(N-(\omega-metoxipolietilen(750)glicoxietil)carbamoil)pentil)carbamoil)propoxi)2-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))pentiloxi)fenil)propanoico;
ácido 3-(6-(3-(N-(3-(2-(2-(3-((6-((1-Aza-2-(2-sulfofenil)vinil)amino)(3-piridil))carbonilamino)propoxi)etoxi)etoxi)propil)carbamoil)propoxi)2-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))pentiloxi)fenil)propanoico;
ácido 3-(6-(3-(N-(5-((6-((1-Aza-2-(2-sulfofenil)vinil)amino)(3-piridil))carbonilamino)-5-(N-(2,3,4,5,6-pentahidroxihexil)carbamoil)pentil)carbamoil)propoxi)2-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))pentiloxi)fenil)propanoico;
ácido 3-(6-(3-(N-(3-((6-((1-Aza-2-(2-sulfofenil)vinil)amino)(3-piridil))carbonilamino)propil)carbamoil)propoxi)-2-(5-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi))pentiloxi)fenil)propanoico;
ácido 3-(6-(3-N-(2-(2-(2-(2-(2-(2-(2-(2-((6-((1-Aza-2-(2-sulfofenil)vinil)amino)(3-piridil)) carbonilamino)etoxi) etoxi)etoxi)etoxi)etoxi)etoxi)etoxi)etil)carbamoil) propoxi)-2-(5-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi)) pentiloxi)fenil)propanoico;
ácido 3-(6-(3-N-(5-((6-((1-Aza-2-(2-sulfofenil)vinil)amino)(3-piridil))carbonilamino)-5-(N-(2,3,4,5,6-pentahidroxihexil)carbamoil)pentil)carbamoil)propoxi-2-(5-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi)) pentiloxi)fenil)propanoico;
ácido 3-(6-(3-N-(5-((6-((1-Aza-2-(2-sulfofenil)vinil)amino)(3-piridil))carbonilamino)-5-(N-(6-deoxi-\beta-ciclodextril)carbamoil)pentil)carbamoil)propoxi-2-(5-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi))pentiloxi)fenil)propa-noico;
ácido 3-(6-(3-(N-(3-((6-((1-Aza-2-(2-sulfofenil)vinil)amino)(3-piridil))-Gli-Lys-Lys-Lys)aminopropil)carbamoil)propoxi)-2-(5-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi))pentiloxi)fenil)propanoico;
hidrazona de la 2-sulfobenzaldehído (E)-N-[3-(6-hidracinonicotinamido)propil]-3-[6-[[(2,6-dichlorofenil)tio]metil]-3-(2-feniletoxi)-2-piridinil]-2-propenamida;
hidrazona de la 2-sulfobenzaldehído (E)-N-[3-(6-hidracinonicotinamido)propil]-3-[6-[(feniltio)metil]-3-(2-feniletoxi)-2-piridinil]-2-propenamida;
hidrazona de la 2-sulfobenzaldehído (E)-N-[3-(6-hidracinonicotinamido)propil]-3-[6-[[(2-chlorofenil)tio]metil]-3-(2-feniletoxi)-2-piridinil]-2-propenamida;
hidrazona de la 2-sulfobenzaldehído (E)-N-[3-(6-hidracinonicotinamido)propil]-3-[6-[[(2,3,5,6-tetrafluorofenil)tio]metil]-3-(2-feniletoxi)-2-piridinil]-2-propenamida;
hidrazona de la 2-sulfobenzaldehído (E)-N-[3-(6-hidracinonicotinamido)propil]-3-[6-[[(4-hidroxifenil)tio]metil]-3-(2-feniletoxi)-2-piridinil]-2-propenamida;
hidrazona de la 2-sulfobenzaldehído (E)-N-[2-(6-hidracinonicotinamido)etil]-3- [6-[[(2,6-dichlorofenil)tio]metil]-3-(2-feniletoxi)-2-piridinil]-2-propanamida;
hidrazona de la 2-sulfobenzaldehído N-[3-(6-hidracinonicotinamido)propil]-1- [3-([1,1'-bifenil]-4-ilmetil)-2H-1-benzopiran-7-il]-ciclopentanecarboxamida;
hidrazona de la 2-sulfobenzaldehído 6-[5-(6-hidracinonicotinamido)pentiloxi]-5-(2-propenil)-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-ona;
\newpage
hidrazona de la 2-sulfobenzaldehído 6-[6-(6-hidracinonicotinamido)hexiloxi]-5- (2-propenil)-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-ona;
hidrazona de la 2-sulfobenzaldehído 6-[6-(6-hidracinonicotinamido)-4,4-dimetilpentiloxi]-5-(2-propenil)-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-ona;
hidrazona de la 2-sulfobenzaldehído 6-[6-(6-hidracinonicotinamido)-5,5-dimetilhexiloxi]-5-(2-propenil)-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-ona;
hidrazona de la 2-sulfobenzaldehído 6-[4-(6-hidracinonicotinamido)butoxi]-5- (2-propenil)-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-ona;
hidrazona de la 2-sulfobenzaldehído 6-[3-(6-hidracinonicotinamido)propoxi]-5- (2-propenil)-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-ona;
hidrazona de la 2-sulfobenzaldehído 6-[2-(6-hidracinonicotinamido)etoxi]-5-(2-propenil)-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-ona;
ácido 2-[[[5-[[2,2-Dimetil-6-[(4-(3,4-metilendioxifenil)-6-fenil-2-piridinil)oxi]-1-hexanamino]carbonil]-2-piridinil]hidrazon]metil]-bencenosulfónico;
N-[2,2-Dimetil-6-[(4-(3,4-metilendioxifenil)-6-fenil-2-piridinil)oxi]-hexil]-bis-S-(1-etoxietilmercapto-acetil)pentanoato de;
ácido 2-[[[5-[[N-[6-[(4,6-difenil-2-piridinil)oxi]-hexanoil]-glicina-alfa-amino]carbonil]-2-piridinil]hidrazon]-metil]-bencenosulfónico;
2-acetil-4-etil-[5-[6-[[6-[[[(2-sulfonilfenil)metilen]hidracin]-3-piridinil]carbonil]amino]hexil]oxi]fenol;
2,4-dietil-[5-[5,5-dimetil-6-[[6-[[[(2-sulfonilfenil)metilen]hidracin]-3-piridinil]carbonil]amino]hexil]oxi]fenol;
3-(4-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))pentiloxi)-3-etoxifenil)-N-((6-hidracino(3-piridil))sulfonil)prop-2-enamida;
ácido 2-((6-((1-aza-2-(2-sulfofenil)vinil)-amino)(3-piridil))carbonil)-7-(5- (4,6-difenil(2-piridil-oxi))pentiloxi)-1, 2,3,4-tetrahidro-isoquinolina-3-carboxílico;
ácido 2-((6-((1-aza-2-(2-sulfofenil)vinil)-amino)(3-piridil)carbonilamino)-3- (4-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi)) pentiloxi)fenil)propanoico;
ácido 2-((6-((1-aza-2-(2-sulfofenil)vinil)-amino)(3-piridil)carbonilamino)-3- (2-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi)) pentiloxi)fenil)propanoico;
ácido 3-((6-((1-aza-2-(2-sulfofenil)vinil)amino)(3-piridil)carbonilamino)-3- (N-(6-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)carbamoil)propanoico;
ácido 2-(2-aza-2-((5-(N-(3-(2-(2-(3-((1-((N-metil-N-(2-feniletil)carbamoil)metil)-5-(fenilmetoxi)-indol-2-il)carbonilamino)propoxi)etoxi)etoxi)propil)-carbamoil)(2-piridil))amino)vinil)bencenosulfónico;
ácido 2-(2-((6-((1-aza-2-(2-sulfofenil)vinil)-amino)(3-piridil)carbonilamino)-3-carboxipropanoilamino)-3-(2-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))pentiloxi)fenil)propanoico;
ácido 2-(2-aza-2-((5-(N-(2-(N-(3-(2-(2-(3-(2-(2,5-dioxoimidazolidin-4-il)acetilamino)-propoxi)etoxi)etoxi)-propil)carbamoil)-1-(N-(6-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)carbamoil)-etil)carbamoil(2-piridil))amino)-vinil)bencenosulfónico;
ácido 6-((6-((1-aza-2-(2-sulfofenil)-vinil)amino)(3-piridil)carbonilamino)-2- ((1-((N-metil-N-(2-feniletil)carbamoil)metil)-5-(fenilmetoxi)indol-2-il)carbonilamino)hexanoico;
ácido 1-(3-((6-((1-aza-2-(2-sulfofenil)vinil)amino)-(3-piridil)carbonilamino)-3-(N-(6-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)carbamoil)propanoilamino)-etan-1,2-dicarboxílico;
ácido 1-(2-(3-((6-((1-aza-2-(2-sulfofenil)vinil)-amino)(3-piridil)carbonilamino)-3-(N-(6-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)carbamoil)propanoilamino)-3-carboxipropanoilamino)etan-1,2-dicarboxílico;
ácido 2-(2-aza-2-((5-(N-(1-(N-(6-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)carbamoil)-2-(3-(((4,5,6-trihidroxi-3-(hidroximetil)(2-oxanil))amino)carbonilamino)-propanoilamino)etil)carbamoil(2-pyirdil))amino)vinil)-bencenosulfónico;
ácido 2-(2-aza-2-((5-((6-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexanoil-amino)sulfonil)-(2-piridil))amino)vinil)bencenosulfónico;
6-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))-N-(1-(N-((6-hidracino(3-piridil))sulfonil)cabamoil)-2-(4-hidroxifenil)etil)-2,2-dimetilhexanamida;
4-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-N-(1-(N-(1-(N-((6-hidracino(3-piridil))sulfonil)cabamoil)-2-(4-hidroxifenil)etil)-carbamoil)-isopropil)butanamida;
ácido 3-(4-(3-((6-((1-aza-2-(2-sulfofenil)vinil)amino)(3-piridil))carbonilamino)-propoxi)fenil)-2-(2,2-dimetil-6-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi))hexanoilamino)propanoico;
ácido 3-((6-((1-aza-2-(2-sulfofenil)vinil)amino)(3-piridil)carbonilamino)-3- (N-(6-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)carbamoil)propanoico;
ácido 2-(2-aza-2-((5-(N-(1-(N-(6-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetil-hexil)carbamoil)-2-(4-hidroxifenil)etil)carbamoil(2-piridil))amino)vinil)-bencenosulfónico;
ácido 2-((6-((1-aza-2-(2-sulfofenil)vinil)amino)(3-piridil)carbonilamino)-2- (2,2-dimetil-6-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi))hexanoilamino)acético;
ácido 2-((6-((1-aza-2-(2-sulfofenil)vinil)amino)(3-piridil)carbonilamino)-2- (2,2-dimetil-6-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi))hexanoilamino)acético;
ácido 3-((6-((1-aza-2-(2-sulfofenil)vinil)amino)(3-piridil)carbonilamino)-3- (N-(6-(6-etil-3-hidroxi-4-fenilfenoxi)-2,2-dimetilhexil)carbamoil)propanoico;
ácido 2-((6-((1-aza-2-(2-sulfofenil)vinil)amino)(3-piridil)carbonilamino)-2- (6-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexanoilamino)acético;
ácido 2-(2-aza-2-((5-(N-(5-((3-((N-(6-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexanoilamino)-3-(4-hidroxifenil)propanoilamino)-1-(N-(2,3,4,5,6-pentahidroxihexil)carbamoil)pentil)carbamoil(2-piridil))amino)vinil)bencenosulfónico;
ácido 2-(2-aza-2-((5-(N-(5-((3-((N-(6-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)-carbamoil)-2-(N-(2,3,4,5,6-pentahidroxihexil)carbamoil)-etil)carbamoil(2-piridil))amino)vinil)bencenosulfónico;
ácido 2-(2-aza-2-((5-(N-(5-((3-((N-(6-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)carbamoil)amino)fenil)carbonilamino)-1-(N- (2,3,4,5,6-pentahidroxihexil)carbamoil)pentil)carbamoil(2-piridil))amino)vinil)bencenosulfónico;
ácido 2-((6-((1-aza-2-(2-sulfofenil)vinil)amino)(3-piridil))carbonilamino)-3- (N-(6-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)carbamoil)-propanoilamino)-3-carboxipropanoilamino)-3-carboxipropanoilamino)-etan-1,2-dicarboxílico;
y
ácido 2-((6-((1-aza-2-(2-sulfofenil)vinil)amino)(3-piridil))carbonilamino)-3- (2-(5-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))pentiloxi)fenil)propanoico.
6. Un equipo que comprende un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1.
7. El equipo de acuerdo con la reivindicación 6 que comprende además un agente de reducción.
8. El equipo de acuerdo con la reivindicación 7 en la que el agente de reducción es estaño (II).
9. El equipo de acuerdo con la reivindicación 6 que comprende además uno o más ligandos auxiliares.
10. El equipo de acuerdo con la reivindicación 7 que comprende además uno o más ligandos auxiliares.
11. El equipo de acuerdo con la reivindicación 8 que comprende además uno o más ligandos auxiliares.
12. El equipo de acuerdo con la reivindicación 9 en la que los ligandos auxiliares son tricina y TPPTS.
13. El equipo de acuerdo con la reivindicación 10 en la que los ligandos auxiliares son tricina y TPPTS.
14. El equipo de acuerdo con la reivindicación 11 en la que los ligandos auxiliares son tricina y TPPTS.
15. Un agente de unión al LTB4 marcado isotópicamente que comprende:
a)
un compuesto de acuerdo con la reivindicación 2
b)
un radioisótopo
en el que el radioisótopo está seleccionado entre ^{99m}Tc, ^{111}In, ^{95}Tc, ^{62}Cu, ^{67}Ga, ^{68}Ga, ^{123}I, ^{125}I, ^{18}F, ^{11}C, ^{13}N, ^{15}O, y ^{75}Br.
16. El agente de unión LTB4 marcado isotópicamente de acuerdo con la reivindicación 15 en la que el radioisótopo es ^{123}I.
17. El agente de unión LTB4 marcado isotópicamente de acuerdo con la reivindicación 15 en la que el radioisótopo es ^{111}In.
18. El agente de unión LTB4 marcado isotópicamente de acuerdo con la reivindicación 15 en la que el radioisótopo es ^{99m}Tc.
19. Un agente de unión al LTB4 marcado isotópicamente preparado entre un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 en la que el radioisótopo es ^{99m}Tc.
20. Un agente de unión al LTB4 marcado isotópicamente preparado entre un equipo de acuerdo con la reivindicación 6 en la que el radioisótopo es ^{99m}Tc.
21. Un agente de unión al LTB4 marcado isotópicamente de acuerdo con la reivindicación 18 seleccionado entre el grupo que consiste en:
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(4-etil-2-(4-fluorofenil)-[5-[5,5-dimetil-6-[[[6-diazenido-3-piridinil]carbonil]amino]hexil]oxi]fenol);
^{99m}Tc(tricina)(TPPDS)(4-etil-2-(4-fluorofenil)-[5-[5,5-dimetil-6-[[[6-diazenido-3-piridinil]carbonil]amino]hexil]oxi]fenol);
^{99m}Tc(tricina)(TPPMS)(4-etil-2-(4-fluorofenil)-[5-[5,5-dimetil-6-[[[6-diazenido-3-piridinil]carbonil]amino]hexil]oxi]fenol);
^{99m}Tc(tricina)(3-sulfonatopiridina))(4-etil-2-(4-fluorofenil)-[5-[5,5-dimetil-6-[[[6-diazenido-3-piridinil]carbonil]amino]hexil]oxi]fenol);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(4-etil-2-(4-fluorofenil)-[5-[4-[[[6-diazenido-3-piridinil]carbonil]amino]butil]oxi]fenol);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(2-[[5-[[(6-[(4,6-difenil-2-piridinil)oxi]-1-hexanamino]carbonil]-2-piridinil]diazenido]);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(2-[[5-[[2,2-dimetil-6-[(6-fluorofenil-4-fenil-2-piridinil)oxi]-1-hexanamino]carbonil]-2-piridinil]diazenido]);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(2-[[5-[[N-[6-[(4,6-difenil-2-piridinil)oxi]-hexanoil]-tirosin-O-[3-propanamino]]carbonil]-2-piridinil]diazenido]);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(2-[[[5-[[N-[6-[(4-(3,4-metilendioxifenil)-6-fenil-2-piridinil)oxi]-hexanoil]-tirosin-O-[3-propanamino]]-carbonil]-2-piridinil]diazenido]);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(2-[[[5-[[alfa-N-[6-[(4,6-difenil-2-piridinil)oxi]-hexanoil]-lisin-epsilon-N-amino]carbonil]-2-piridinil]diazenido]);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(2-[[[5-[[[6-[(4,6-difenil-2-piridinil)oxi]-2,2-dimetil-1-hexil]aza]carbonil]-2-piridinil]diazenido]);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(4-etil-2-(4-fluorofenil)-[5-[6,6-dimetil-7-[[6-[[6-diazenido]-3-piridinil]carbonil]amino]heptil]oxi]fenol);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(ácido 2-[6-[(4,6-Difenil-2-piridinil)oxi]pentil]-6- (8-[[[6-diazenido]-3-piridinil]carbonil]amino-5-aza-4-oxooctiloxi)bencenopropanoico);
^{99m}Tc(tricina)(ácido 3-piridinasulfónico))(ácido 2-[6-[(4,6-Difenil-2-piridinil)oxi]pentil]-6-(8-[[[6-diazenido]-3-piridinil]carbonil]amino-5-aza-4-oxooctiloxi)bencenopropanoico);
^{99m}Tc(tricina)(ácido 3,5-piridinadicarboxílico)(ácido 2-[6-[(4,6-Difenil-2-piridinil)oxi]pentil]-6-(8-[[[6-diazenido]-3-piridinil]carbonil]amino-5-aza-4-oxooctiloxi)bencenopropanoico);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(ácido 6-(11-[[[6-diazenido]-3-piridinil]carbonil]amino-3,6,9-trioxaundeciloxi)-2-[5-[(5-oxo-1-(2-propenil)-5,6,7,8-tetrahidro-2-naftalenil)oxi]pentiloxi]bencenopropanoico);
^{99m}Tc(tricina)(TFP)(ácido 6-(11-[[[6-diazenido]-3-piridinil]carbonil]amino-3,6,9-trioxaundeciloxi)-2-[5-[(5-oxo-1-(2-propenil)-5,6,7,8-tetrahidro-2-naftalenil)oxi]pentiloxi]bencenopropanoico);
^{99m}Tc(tricina)(ácido 3,5-piridinadicarboxílico)(ácido 6-(11-[[[6-diazenido]-3-piridinil]carbonil]amino-3,6,9-trioxaundeciloxi)-2-[5-[(5-oxo-1-(2-propenil)-5,6,7,8-tetrahidro-2-naftalenil)oxi]pentiloxi]bencenopropanoico);
^{99m}Tc(tricina)(ácido isonicotínico)(ácido 6-(11-[[[6-diazenido]-3-piridinil]carbonil]amino-3,6,9-trioxaundeciloxi)-2-[5-[(5-oxo-1-(2-propenil)-5,6,7,8-tetrahidro-2-naftalenil)oxi]pentiloxi]bencenopropanoico);
^{99m}Tc(tricina)(ácido nicotínico)(ácido 6-(11-[[[6-diazenido]-3-piridinil]carbonil]amino-3,6,9-trioxaundeciloxi)-2-[5-[(5-oxo-1-(2-propenil)-5,6,7,8-tetrahidro-2-naftalenil)oxi]pentiloxi]bencenopropanoico);
^{99m}Tc(tricina)(ácido 3-piridinasulfónico)(ácido 6-(11-[[[6-diazenido]-3-piridinil]carbonil]amino-3,6,9-trioxaundeciloxi)-2-[5-[(5-oxo-1-(2-propenil)-5,6,7,8-tetrahidro-2-naftalenil)oxi]pentiloxi]bencenopropanoico);
^{99m}Tc(tricina)(hidroxietilisonicotinamida)(ácido 6-(11-[[[6-diazenido]-3-piridinil]carbonil]amino-3,6,9-trioxaundeciloxi)-2-[5-[(5-oxo-1-(2-propenil)-5,6,7,8-tetrahidro-2-naftalenil)oxi]pentiloxi]bencenopropanoico);
^{99m}Tc(tricina)(4-metil-5-imidazolmetanol)(ácido 6-(11-[[[6-diazenido]-3-piridinil]carbonil]amino-3,6,9-trioxaundeciloxi)-2-[5-[(5-oxo-1-(2-propenil)-5,6,7,8-tetrahidro-2-naftalenil)oxi]pentiloxi]bencenopropanoico);
^{99m}Tc(tricina)(4-metil-5-tiazoletanol)(ácido 6-(11-[[[6-diazenido]-3-piridinil]carbonil]amino-3,6,9-trioxaundeciloxi)-2-[5-[(5-oxo-1-(2-propenil)-5,6,7,8-tetrahidro-2-naftalenil)oxi]pentiloxi]bencenopropanoico);
^{99m}Tc(tricina)(piridina)(ácido 6-(11-[[[6-diazenido]-3-piridinil]carbonil]amino-3,6,9-trioxaundeciloxi)-2-[5-[(5-oxo-1-(2-propenil)-5,6,7,8-tetrahidro-2-naftalenil)oxi]pentiloxi]bencenopropanoico);
^{99m}Tc(tricina)(ácido 4-piridiletilsulfónico)(ácido 6-(11-[[[6-diazenido]-3-piridinil]carbonil]amino-3,6,9-trioxaundeciloxi)-2-[5-[(5-oxo-1-(2-propenil)-5,6,7,8-tetrahidro-2-naftalenil)oxi]pentiloxi]bencenopropanoico);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(N-((6-(diazenido)(3-piridil))sulfonil)-3-(1-((N-(2-feniletil)carbamoil)metil)-5-(fenilmeto-xi) indol-3-il)prop-2-enamida);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)((2-((5-carbamoil(2-piridil)diazenido) etil 3-((7- (3-(6-etil-4-(4-fluorofenil)-3-hidroxifenoxi) propoxi)-8-propilcroman-2-il)carbonilamino)propanoato de);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(3-((7-(-(6-etil-4-(4-fluorofenil)-3-hidroxifenoxi)propoxi)-8-propilcroman-2-il)carbonilamino)propil-2-metilpropanoato de, 2-(2((5-carbamoil(2-piridil)diazenido);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(N-(3-((7-(3-(6-etil-4-(4-fluorofenil)-3-hidroxifenoxi)propoxi)-8-propilcroman-2-il)carbonilamino)propil)-2-metilpropanamida, 2-(2-((5-carbamoil(2-piridil))diazenido);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(2-(2-((5-(N-(6-(6-etil-3-hidroxi-4-(1-metilpirazol-5-il)fenoxi)-2,2-dimetilhexil)carbamoil)(2-piridil))diazenido);
^{99m}Tc(tricina)(ácido 3-piridinasulfónico)(2-(2-((5-(N-(6-(6-etil-3-hidroxi-4-(1-metilpirazol-5-il)fenoxi)-2,2-dimetilhexil)carbamoil)(2-piridil))diazenido);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(2-(2-((5-((3-((6-etil-4-(4-fluorofenil)-3-hidroxifenoxi)metil)piperidil)carbonil)(2-piridil)) diazenido);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(2-(2-((5-(N-(3-(2-(2-(3-(5-(5-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-1,1-dimetilpentil)(1,2,3,4-tetraazolil)) pentanoilamino) propoxi)etoxi)etoxi)propil)carbamoil)(2-piridil))diazenido);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(2-(2-((5-(N-(2-(2-(2-(2-(2-(2-(2-(2-(5-(4-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-1,1-dimetilpentil) (1,2,3,5-tetraazolil)) pentanoilamino)etoxi)etoxi)etoxi)etoxi)etoxi)etoxi)etoxi)etil) carbamoil)(2-piridil)) diazenido);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(2-(2-((5-(N-(5-(4-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-1,1-dimetilpentil)(1,2,3,5-tetraazolil)) pentanoilamino)-1-(6-deoxi-\beta-ciclodextril)carbamoil)pentil)carbamoil)(2-piridil))diazenido);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(ácido 3-(6-(3-(N-(5-((6-(diazenido)(3-piridil))carbonilamino)-5-(N-(\omega-metoxipolietilen(750)glicoxietil)carbamoil)pentil)carbamoil)propoxi)2-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))pentiloxi)fenil)propanoico);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(ácido 3-(6-(3-(N-(3-(2-(2-(3-((6-(diazenido)(3-piridil))carbonilamino)propoxi)etoxi)etoxi)propil)carbamoil)propoxi)2-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))pentiloxi)fenil)propanoico);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(ácido 3-(6-(3-(N-(5-((6-(diazenido)(3-piridil))carbonilamino)-5-(N-(2,3,4,5,6-pentahidroxihexil)carbamoil)pentil)carbamoil)propoxi)2-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))pentiloxi)fenil)propanoico);
^{99m}Tc(tricina)(TFP)(ácido 3-(6-(3-(N-(5-((6-(diazenido)(3-piridil))carbonilamino)-5-(N-(2,3,4,5,6-pentahidroxihexil)carbamoil)pentil)carbamoil)propoxi)2-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))pentiloxi)fenil)propanoico);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(ácido 3-(6-(3-(N-(3-((6-(diazenido)(3-piridil))carbonilamino)propil)carbamoil)propoxi)-2-(5-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi))pentiloxi)fenil)propanoico);
^{99m}Tc(tricina)(TFP)(ácido 3-(6-(3-(N-(3-((6-(diazenido)(3-piridil))carbonilamino)propil)carbamoil)propoxi)-2-(5-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi))pentiloxi)fenil)propanoico);
^{99m}Tc(tricina)(piridina)(ácido 3-(6-(3-(N-(3-((6-(diazenido)(3-piridil))carbonilamino)propil)carbamoil)propoxi)-2-(5-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi)) pentiloxi)fenil)propanoico);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(ácido 3-(6-(3-N-(2-(2-(2-(2-(2-(2-(2-(2-((6- (diazenido)(3-piridil)) carbonilamino)etoxi)etoxi)etoxi)etoxi)etoxi)etoxi)etoxi)etil)carbamoil) propoxi)-2-(5-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi)) pentiloxi)fenil)propanoico);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(ácido 3-(6-(3-N-(5-((6-(diazenido)(3-piridil))carbonilamino)-5-(N-(2,3,4,5,6-pentahidroxihexil)carbamoil)pentil)carbamoil)propoxi-2-(5-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi))pentiloxi)fenil)propanoico);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(ácido 3-(6-(3-N-(5-((6-(diazenido)(3-piridil))carbonilamino)-5-(N-(6-deoxi-\beta-ciclodextril)carbamoil)pentil)carbamoil)propoxi-2-(5-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi))pentiloxi)fenil)propanoico);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(ácido 3-(6-(3-(N-(3-((6-((diazenido)(3-piridil))-Gli-Lys-Lys-Lys)aminopropil)carbamoil)propoxi)-2-(5-(5-oxo-1-prop-2-enil(2-6,7,8-trihidronaftiloxi))pentiloxi)fenil)propanoico);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)((E)-N-[3-(6-diazenidonicotinamido) propil]-3-[6- [[(2,6-dichlorofenil)tio]metil]-3-(2-feniletoxi)-2-piridinil]-2-propenamida);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)((E)-N-[3-(6-diazenidonicotinamido) propil]-3-[6- [(feniltio)metil]-3-(2-feniletoxi)-2-piridinil]-2-propenamida);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)((E)-N-[3-(6-diazenidonicotinamido) propil]-3-[6- [[(2-chlorofenil)tio]metil]-3-(2-feniletoxi)-2-piridinil]-2-propenamida);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)((E)-N-[3-(6-diazenidonicotinamido) propil]-3-[6- [[(2,3,5,6-tetrafluorofenil)tio]metil]-3-(2-feniletoxi)-2-piridinil]-2-propenamida);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)((E)-N-[3-(6-diazenidonicotinamido) propil]-3-[6- [[(2,3,5,6-tetrafluorofenil)tio]metil]-3-(2-feniletoxi)-2-piridinil]-2-propenamida);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)((E)-N-[2-(6-diazenidonicotinamido)etil]-3-[6- [[(2,6-dichlorofenil)tio]metil]-3-(2-feniletoxi)-2-piridinil]-2-propanamida);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(6-[6-(6-diazenidonicotinamido)-4,4-dimetilpentiloxi]-5-(2-propenil)-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-ona);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(2-[[[5-[[2,2-Dimetil-6-[(4-(3,4-metilendioxifenil)-6-fenil-2-piridinil)oxi]-1-hexanamino]carbonil]-2-piridinil]diazenido);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(2-[[[5-[[N-[6-[(4,6-difenil-2-piridinil)oxi]-hexanoil]-glicina-alfa-amino]carbonil]-2-piridinil]diazenido);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(2,4-Dietil-[5-[5,5-dimetil-6-[[6-[[diazenido]-3-piridinil]carbonil]amino]hexil]oxi]fenol);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(ácido 2-((6-(diazenido)(3-piridil)carbonilamino)-3-(2-(5-(4,6-difenil(2-piridiloxi))penti-loxi)fenil)propanoico);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(ácido 3-((6-(diazenido)(3-piridil)carbonilamino)-3-(N-(6-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)carbamoil)propanoico);
\newpage
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(ácido 2-(2-((6-(diazenido)(3-piridil)carbonilamino)-3-carboxipropanoilamino)-3-(2-(5-(4, 6-difenil(2-piridiloxi))pentiloxi)fenil)propanoico);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(2-(2-((5-(N-(2-(N-(3-(2-(2-(3-(2-(2,5-dioxoimidazolidin-4-il)acetilamino)-propoxi)etoxi)etoxi)-propil)carbamoil)-1-(N- (6-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)carbamoil)-etil)carbamoil(2-piridil))dia-zenido);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(ácido 1-(3-((6-(diazenido)-(3-piridil)carbonilamino)-3-(N-(6-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)carbamoil)propanoilamino)-etan-1,2-dicarboxílico);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(2-(2-((5-(N-(1-(N-(6-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)carbamoil)-2-(3-(((4,5,6-trihidroxi-3-(hidroximetil)(2-oxanil))amino)carbonilamino)-propanoilamino)etil)carbamoil(2-piridil))diazenido);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(2-(2-((5-((6-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexanoil-amino)sulfonil)-(2-piridil))diazenido);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(ácido 3-((6-((diazenido)(3-piridil)carbonilamino)-3-(N-(6-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)carbamoil)propanoico);
^{99m}Tc(tricina)(TFP)(ácido 3-((6-((diazenido)(3-piridil)carbonilamino)-3- (N-(6-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)carbamoil)propanoico);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(2-(2-((5-(N-(1-(N-(6-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetil-hexil)carbamoil)-2-(4-hidroxifenil)etil)carbamoil(2-piridil))diazenido);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(ácido 2-((6-(diazenido)(3-piridil)carbonilamino)-2-(6-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexanoilamino)acético);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(2-(2-((5-(N-(5-((3-((N-(6-(4,6-difenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexanoilamino)-3-(4-hidroxifenil)propanoilamino)-1-(N- (2,3,4,5,6-pentahidroxihexil)carbamoil)pentil)carbamoil(2-piridil))diazenido);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(2-(2-((5-(N-(5-((3-((N-(6-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)-carbamoil)-2-(N-(2,3,4,5,6-pentahidroxihexil)carbamoil)-etil)carbamoil(2-piridil))diazenido);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(2-(2-((5-(N-(5-((3-((N-(6-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)carbamoil)amino)fenil)carbonilamino)-1-(N-(2,3,4,5,6-pentahidroxihexil)carbamoil)pentil)carbamoil(2-piridil))diazenido);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(ácido 2-((6-(diazenido)(3-piridil))carbonilamino)-3-(N-(6-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))-2,2-dimetilhexil)carbamoil)-propanoilamino)-3-carboxipropanoilamino)-3-carboxipropanoilamino)-etan-1,2-dicarboxílico);
^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)(ácido 2-((6-(diazenido)(3-piridil))carbonilamino)-3-(2-(5-(4-benzo[d]1,3-dioxolan-5-il-6-fenil(2-piridiloxi))pentiloxi)fenil)propanoico);
^{99m}TcO(4-etil-2-(4-fluorofenil)-5-[(5,5-dimetil-6-aminohexil)oxi]fenol N- [4-(carboxi)bencil]-N,N'-bis[2-tiolatoetil]-glicinamida); y,
^{99m}TcO(N-[2,2-Dimetil-6-[(4-(3,4-metilendioxifenil)-6-fenil-2-piridinil)oxi]-hexil]-bis(mercapto-acetil)pentanoato de).
22. Uso del agente de unión al LTB4 marcado isotópicamente de acuerdo con la Reivindicación 15 en la preparación de un agente para la detección de sitios de infección e inflamación, de modo que la detección comprenda la utilización de una prueba de detección de la radiación.
23. Uso de un agente de unión al LTB4 marcado isotópicamente de acuerdo con la Reivindicación 15 en la preparación de un agente para la toma de imágenes de los sitios de infección e inflamación, de modo que la toma de imágenes comprende el uso de una cámara gamma planar o circular.
24. Un uso de acuerdo con la Reivindicación 23 en donde el agente de unión marcado isotópicamente es un agente de unión marcado isotópicamente de la Reivindicación 21.
25. Uso de un agente de unión al LTB4 marcado isotópicamente de acuerdo con la Reivindicación 15 en la preparación de un agente para la toma de imágenes de los sitios de infección e inflamación, en donde la toma de imágenes comprende determinar la presencia de dicha enfermedad.
26. Un uso de acuerdo con la Reivindicación 25 en donde el agente de unión marcado isotópicamente es un agente de unión marcado isotópicamente de la Reivindicación 21.
27. Un compuesto de acuerdo con la Reivindicación 1 que es la hidrazona de la 2-sulfobenzaldehído (E)-N-[3-(6-hidrazinonicotinamido)propil]-3-[6-[[82,6-dimetilfenil)tio]metil]-3-(2-feniletoxi)-2-piridinil]-2-propenamida.
28. Un agente de unión al LTB4 marcado isotópicamente de acuerdo con la Reivindicación 18 que es la ^{99m}Tc(tricina)(TPPTS)((E)-N-[3-(6-diazenidonicotinamido)propil]-3-[6-[[(2,6-dimetilfenil)tio]metil]-3-(2-feniletoxi)-2-piridinil]-2-propenamida).
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