ES2113858T5 - Introduccion de bacterias en huevos. - Google Patents
Introduccion de bacterias en huevos.Info
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Abstract
SE DESCRIBE UN METODO Y APARATO PARA LA INTRODUCCION DE UNA BACTERIA PROBIOTICA EN EL TRACTO DIGESTIVO DE UN AVE CON OBJETO DE EXCLUIR LAS BACTERIAS NO DESEADAS Y EN LOS HUEVOS INOCULADOS PRODUCIDOS POR ESTE MEDIO. EN OTRA DISPOSICION DE ESTA INVENCION, UN HUEVO FERTIL DE AVE ES ADMINISTRADO POR UN CULTIVO DE EXCLUSION DE LA SALMONELLA. EL CULTIVO ES INTRODUCIDO EN EL AIRE CELULAR DEL HUEVO EN UNA CANTIDAD EFECTIVA PARA COLONIZAR EL TRACTO DIGESTIVO DEL AVE EMBRIONICO CONTENIDO DENTRO DEL HUEVO, COMPRENDIENDO EL CULTIVO AL MENOS UNA BACTERIA ANAEROBICA DE ORIGEN INTESTINAL.
Description
Introducción de bacterias en huevos.
La presente invención se refiere a cultivos
bacterianos probióticos para usar en métodos y aparatos para
introducir bacterias en el tracto digestivo de aves.
Se estima que se producen cada año dos millones
de casos de envenenamiento alimentario con Salmonella sólo en
los Estados Unidos. Los síntomas agudos de este trastorno incluyen
náuseas, vómitos, diarreas, escalofríos, fiebre y agotamiento. Un
pequeño porcentaje de los afectados (0,1%, o 2.000 personas
anualmente en los Estados Unidos) mueren de envenenamiento con
Salmonella, siendo estas víctimas habitualmente niños y
enfermos y las personas mayores. Véase generalmente T. Roberts,
The Economic Losses Due to Selected Foodborne Diseases,
5-6 (1986) (Economic Research Service /USDA, 1301
New York Avenue, N.W., Room 1108, Washington, D.C. 20005-
4788).
4788).
De todas las fuentes potenciales de
envenenamiento con Salmonella, los productos avícolas se han
identificado como la fuente principal. Así, romper la cadena de
Salmonellas que pasan de una generación de aves a la siguiente ha
sido el objetivo de los investigadores de la avicultura durante al
menos veinticinco años. Sin embargo, existe un tipo especial de
relación simbiótica (una relación de comensalismo) entre un ave
huésped y las Salmonellas que viven con ella. Debido a que la salud
del ave no es deteriorada por las Salmonellas, hace poco por
excluir el organismo o por tratar de liberarse del organismo una
vez que ha sido colonizada. La prevención de la colonización por
Salmonellas en aves de corral es por lo tanto extremadamente
difícil.
Un procedimiento para prevenir la colonización
por Salmonellas de aves de corral es la exclusión competitiva.
Véase generalmente H. Pivnick y E. Nurmi, Developments in Food
Micobiology 1, 41 (1982). En este procedimiento, un
cultivo bacteriano probiótico (esto es, un cultivo bacteriano que
tiene un efecto beneficioso sobre el animal al que se administra)
se introduce en un tracto digestivo de ave antes de su colonización
por Salmonella. El cultivo bacteriano probiótico se
selecciona para ocupar el mismo nicho ambiental en el tracto
digestivo del ave que ocuparía la Salmonella, de modo que la
Salmonella que posteriormente pasará al tracto digestivo del
ave tiende a ser excluida por las bacterias que se han introducido
a propósito. La exclusión competitiva es un método prometedor para
prevenir que la Salmonella colonice aves que se crían en un
entorno comparativamente libre de Salmonella.
Desgraciadamente, hay numerosas fuentes potenciales de contaminación
por Salmonellas en una explotación avícola moderna, incluyendo
polluelos, pienso, roedores, aves, insectos y los procedimientos de
transporte y procesamiento a los que se someten las aves. Estas
fuentes diversas de contaminación hacen difícil administrar un
cultivo de exclusión competitiva a un ave antes de que sea
colonizado en primer lugar por Salmonella.
Un objetivo de la presente invención es, de
acuerdo con esto, proporcionar una nueva técnica para introducir
bacterias probióticas en los tractos digestivos de aves. Un
objetivo más particular de la presente invención es proporcionar una
nueva técnica para excluir competitivamente la Salmonella
del tracto digestivo de aves antes de la colonización por
Salmonella.
De acuerdo con esto, la presente invención
proporciona un cultivo bacteriano probiótico para usar en un método
para introducir bacterias en el tracto digestivo de un ave, que
comprende administrar un cultivo bacteriano probiótico a un huevo
de ave fertilizado, que contiene un ave embrionaria, en una cantidad
eficaz para colonizar el tracto digestivo del ave embrionaria e
inhibir la colonización del tracto digestivo de dicho ave después
de la eclosión por bacterias indeseables. El cultivo bacteriano,
preferiblemente, comprende al menos una cepa de bacterias anaerobias
de origen intestinal. Preferiblemente, el cultivo bacteriano se
administra depositándolo en la cámara aérea del huevo. Después de
la inyección, los huevos se incuban hasta eclosionar. Se encuentra
que los tractos digestivos de las crías de estos huevos están
colonizados por el cultivo bacteriano en el momento de la
eclosión.
En un segundo aspecto, la presente invención
proporciona un aparato para inyección de huevos que comprende:
medios de sujeción de huevos para retener al
menos un huevo; y
medios inyectores de huevos, que contienen un
cultivo bacteriano probiótico de acuerdo con la invención en su
primer aspecto, asociados operativamente con dichos medios de
sujeción de huevos, para inyectar en cada uno de dicho al menos un
huevo una cantidad de dicho cultivo bacteriano probiótico eficaz
para colonizar el tracto digestivo de un ave embrionaria, dentro de
cada dicho al menos un huevo, y para inhibir la colonización del
tracto digestivo de dicho ave después de la eclosión por bacterias
indeseables.
Tal aparato es útil en la inyección automatizada
de huevos de aves. El inyector se coloca para inyectar un huevo
portado por los medios de sujeción de huevos con el cultivo
bacteriano probiótico. Los medios de sujeción de huevos y los
medios inyectores de huevos pueden estar cada uno conectados a una
estructura de soporte. Preferiblemente, los medios inyectores de
huevos están situados, dimensionados y configurados para inyectar
el líquido de inyección dentro de la cámara aérea del (de los)
huevo(s). El cultivo bacteriano contenido en los medios
inyectores de huevos comprende preferiblemente al menos una
bacteria anaerobia de origen intestinal. Los medios inyectores de
huevos están configurados para suministrar al (a los)
huevo(s) el cultivo bacteriano en una cantidad eficaz para
colonizar el tracto digestivo del ave embrionaria. Preferiblemente,
el aparato también comprende medios de punción (que pueden estar
conectados a la estructura de soporte) asociados operativamente con
los medios inyectores de huevos para proporcionar un agujero en la
cáscara del huevo antes de la inyección, agujero a través del cual
se inserta una
aguja.
aguja.
La presente invención puede ponerse en práctica
con cualquier tipo de huevo de ave, incluyendo huevos de pollo,
pavo, pato, ganso, codorniz o faisán. Los huevos de pollo y pavo se
prefieren, los huevos de pollo se prefieren más. Los huevos
inyectados con el cultivo bacteriano probiótico de la presente
invención son huevos fértiles que están preferiblemente en el
último cuarto de incubación. Los huevos de pollo son tratados
aproximadamente el día decimoquinto a decimoctavo de incubación (el
día decimoctavo de desarrollo embrionario), y lo más
preferiblemente son tratados aproximadamente el día decimoctavo de
incubación. Los huevos de pavo son tratados preferiblemente
aproximadamente el día decimoprimero a decimosexto de incubación, y
lo más preferiblemente son tratados aproximadamente el día
decimoquinto de incubación.
Cualquier cultivo bacteriano probiótico capaz de
proliferar en el tracto digestivo de un ave puede emplearse para
poner en práctica la presente invención, ajustándose la
dosificación suministrada según sea apropiado dado el tamaño del
sujeto. Los cultivos bacterianos probióticos son cultivos de
bacterias no patógenas capaces de habitar en al menos una región del
intestino del ave. Tales cultivos se administran a animales por una
variedad de razones, incluyendo la mejora de la eficacia digestiva
y la prevención de enfermedades. Véase, por ejemplo, la Patente de
EE.UU. Nº 3.953.609 de Farr. Se prefieren cultivos bacterianos que
comprenden al menos una cepa de bacterias anaerobias, siendo
preferiblemente estas bacterias anaerobias de origen intestinal.
Preferiblemente, el cultivo bacteriano es uno
capaz de excluir la Salmonella del tracto digestivo de un
ave. Tales cultivos bacterianos se denominan cultivos de exclusión
competitiva (EC). El cultivo puede incluir opcionalmente un agente
eliminador de oxígeno tal como cisteína, según se describe en la
Patente de EE.UU. Nº 4.657.762 de Mikkola y otros. Los cultivos
pueden ser cultivos definidos o cultivos indefinidos, prefiriéndose
actualmente los cultivos indefinidos. Los cultivos indefinidos
comprenden, muy simplemente, cultivos de bacterias obtenidas de los
tractos digestivos de aves maduras que están libres de
Salmonella. Tales cultivos se conocen. Véase H. Pivnick y E.
Nurmi, anteriormente, en 49-54. Aunque el cultivo
indefinido puede obtenerse de cualquier zona en el tracto digestivo
de un pájaro, se obtiene preferiblemente del ciego o del intestino
grueso.
Los cultivos definidos (también llamados cultivos
puros) son cultivos en los que las identidades de las bacterias
contenidas en los mismos son conocidas. Están disponibles numerosos
cultivos definidos que pueden usarse para poner en práctica la
presente invención. Véase, por ejemplo, H. Pivnick y E. Nurmi,
anteriormente, en 64-65. Cultivos definidos que
consisten esencialmente en al menos cuatro cepas
co-cultivadas anaerobiamente de especies bacterianas
normales del tracto alimentario, con cada cepa seleccionada para
tener una eficacia de adhesión sobre las células epiteliales del
tracto alimentario de aves de corral de al menos 10 bacterias por
célula, según se determina por el ensayo de adhesión de Fuller, se
describen en la Patente de EE.UU. Nº 4.689.226 de Nurmi y otros.
Otros cultivos definidos adecuados se describen en la Patente de
EE.UU. Nº 4.335.107 de Snoeyenbos y otros. Los cultivos definidos
por Snoeyenbos son mezclas de microflora intestinal aviaria
tratadas para prevenir la inactivación de las mismas, teniendo la
microflora la propiedad de bloquear la colonización posterior en el
tracto intestinal de aves de corral por Salmonella
paratifoidea, estando las mezclas sustancialmente libres de
patógenos.
El sitio de inyección del cultivo bacteriano es
preferiblemente dentro de la región definida por el amnios,
incluyendo el fluido amniótico y el propio embrión, el saco
vitelino o la cámara aérea. La cámara aérea está situada en el
extremo grande del huevo adyacente a la propia cáscara, y puede
accederse convenientemente mediante una inyección superficial en la
parte superior del extremo grande del huevo. Al principio del
último cuarto de incubación, el amnios está suficientemente
agrandado para que la penetración del mismo esté asegurada casi
todo el tiempo cuando la inyección se hace desde el centro del
extremo grande del huevo a lo largo del eje longitudinal.
El mecanismo de inyección no es crítico, pero se
prefiere que el método no dañe excesivamente los tejidos y órganos
del embrión o las membranas extraembrionarias que lo rodean, de
modo que el tratamiento no disminuya la velocidad de eclosión. Una
jeringa hipodérmica equipada con una aguja de calibre
aproximadamente Nº 22 es adecuada para el propósito. Para inyectar
en la cámara aérea, la aguja sólo necesita insertarse dentro del
huevo justo desde el interior de la superficie interna del huevo
hasta aproximadamente siete milímetros dentro de la cáscara. Un
agujero piloto puede puncionarse o taladrarse a través de la
cáscara antes de la inserción de la aguja para evitar el daño o el
embotamiento de la aguja. Si se desea, el huevo puede sellarse con
un material sellador sustancialmente impermeable a las bacterias,
tal como cera o similares, para evitar la entrada posterior de
bacterias indeseables.
Se prevé que un sistema de inyección automatizado
de alta velocidad para embriones aviarios será particularmente
adecuado para poner en práctica la presente invención. Están
disponibles muchos de tales dispositivos, siendo ejemplares
aquéllos descritos en las Patentes de EE.UU. Nº 4.040.388, 4.469.047
y 4.593.646, todas de Miller. Todos estos dispositivos, puesto que
están adaptados para poner en práctica la presente invención,
comprenden un inyector, conteniendo el inyector un líquido de
inyección, conteniendo el líquido de inyección un cultivo
bacteriano según se describe aquí, con el inyector situado para
inyectar un huevo portado por el aparato con el cultivo bacteriano.
Otras características el aparato se describen anteriormente.
Además, si se desea, puede proporcionarse un aparato de sellado
conectado a la estructura de soporte y asociado operativamente con
el aparato de inyección para sellar el agujero del huevo, después
de la inyección del mismo, con un material de sellado adecuado.
Un aparato preferido para poner en práctica la
presente invención se describe en la Solicitud de Patente Europea
Nº 87305746.7 de Embrex, Inc., presentada el 29 de Junio de 1987.
Este dispositivo comprende un aparato de inyección para suministrar
sustancias fluidas dentro de una pluralidad de huevos y un aparato
de succión (que sirve como la sujeción de los huevos) que
simultáneamente se acopla a y levanta una pluralidad de huevos
individuales desde sus porciones que dan la cara hacia arriba y
coopera con el aparato de inyección para inyectar los huevos
mientras los huevos están acoplados con el aparato de succión. Las
características de este aparato pueden combinarse con las
características del aparato descrito anteriormente para poner en
práctica la presente invención.
Los siguientes ejemplos se proporcionan para
ilustrar más a fondo la presente invención, y no deben tomarse como
restrictivos de la misma.
Ciegos y material cecal obtenidos de un pollo
adulto negativo a las Salmonellas se cultivaron anaerobiamente en
caldo VL durante 48 horas a 37ºC. El caldo VL se prepara mediante
procedimientos estándar. Véase, por ejemplo, Pivnick y otros, J.
Food. Prot. 44, 909 (1981). El cultivo así producido se
denomina cultivo de EC indefinido, no diluido. Según se indica
posteriormente, las diluciones de EC se realizaron en solución
salina fisiológica esté-
ril.
ril.
Para el procedimiento de EC en huevos se usó una
aguja de calibre 18 para puncionar un pequeño agujero en el extremo
grande (el extremo de la cámara aérea) de huevos fértiles que se
habían incubado durante 18 días. A continuación, usando una jeringa
estéril y una aguja de calibre 22, se suministraron 0,1 ml del EC
diluido apropiadamente a través del agujero dentro de la cámara
aérea. Los huevos se pusieron a continuación en una cabina de
eclosión (60% de humedad, 37ºC) y se mantuvieron allí hasta que
eclosionaban el día 21. El día de la eclosión, los polluelos fueron
estimulados oralmente con el nivel indicado de Salmonella
typhimurium. Grupos de polluelos de tratamiento se mantuvieron
en unidades de aislamiento y se les administró agua y pienso
iniciador de engorde acelerado, no medicado, a voluntad. Después de
7 días los polluelos fueron sacrificados y los ciegos se analizaron
semi-cuantitativamente para la presencia de la
Salmonella de ensayo.
La resistencia de polluelos de engorde acelerado
el día de la eclosión a una estimulación de 10^{6} S.
typhimurium después de una inyección en el huevo de bacterias
de exclusión competitiva el día 18º de incubación se da en la Tabla
1 posteriormente.
| Tratamiento | Positivos | FC | FP |
| No tratado | 11/12 | 0,9 | |
| Cámara aérea (T)^{1} | 0/4 | 0 | <100 |
| Cámara aérea (M)^{2} | 4/5 | 2,5 | 1 |
| Amnios (M)^{3} | 2/2 | 2,1 | 1 |
| - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - | |||
| ^{1}La Cámara Aérea era el sitio de inyección y el caldo VL de 48 horas de diluyó 1:1.000. | |||
| ^{2}La Cámara Aérea era el sitio de inyección y el caldo VL de 48 horas de diluyó 1:1.000.000. | |||
| ^{3}El Amnios era el sitio de inyección y el caldo VL de 48 horas de diluyó 1:1.000.000. | |||
| FC - \begin{minipage}[t]{145mm} El Factor de Colonización es el conteo de Salmonella medio por gramo de ciegos y material cecal para un grupo de tratamiento. \end{minipage} | |||
| FP - \begin{minipage}[t]{145mm} El Factor de Protección es el FC del grupo de control dividido por el FC del grupo de tratamiento. \end{minipage} |
Once de los doce polluelos no tratados fueron
colonizados con estimulación oral de 10^{6} el día de la
eclosión, mientras que ninguno de los cuatro polluelos de cámara
aérea (T) fue colonizado con la misma estimulación. El FP de 100
significa que los polluelos tratados eran más de 100 veces más
resistentes a S. typhimurium que los polluelos no tratados.
Los tratamientos en cámara aérea (M) y amnios (M) no producían
polluelos más resistentes que los controles no tratados.
Siguiendo el experimento descrito en el Ejemplo 2
anteriormente, se ensayó la resistencia de polluelos de días a
niveles variables de una estimulación oral con S.
typhimurium después de la inyección de bacterias de exclusión
competitiva en el huevo el día 18º de incubación de acuerdo con los
mismos procedimientos dados en el Ejemplo 2 anteriormente. Los
datos para estrías directas de muestras cecales de estas aves se
dan en la Tabla 2 posteriormente.
| Nivel de Estimulación | ||||
| Tratamiento | 10^{1} | 10^{3} | 10^{5} | 10^{7} |
| Control | 6/8^{3} | 7/8 | 4/4 | 6/6 |
| Cámara aérea (T)^{1} | 1/8 | 0/8 | 0/7 | 4/8 |
| Cámara aérea (M)^{2} | 0/8 | 4/6 | 7/8 | 7/8 |
| - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - | ||||
| ^{1}La Cámara Aérea era el sitio de inyección y el caldo VL de 48 horas de diluyó 1:1.000. | ||||
| ^{2}La Cámara Aérea era el sitio de inyección y el caldo VL de 48 horas de diluyó 1:1.000.000. | ||||
| ^{3}Número de portadores positivos de Salmonella por número de polluelos analizados. |
Cuando los polluelos eran estimulados oralmente
con entre 10^{1} y 10^{7} células de S. typhimurium, los
polluelos de control no tratados eran fácilmente colonizados,
incluso con sólo diez células de Salmonella. Cuando el EC se
diluía 1:1.000.000, niveles de estimulación por encima de diez
células por ave colonizaban la mayoría de los polluelos. Sin
embargo, cuando los polluelos se trataban con EC con la dilución
1:1.000, los polluelos eran considerablemente menos susceptibles a
la colonización que los controles. Ningún ave con el nivel de
colonización de 10^{5} y sólo la mitad de las aves con 10^{7}
eran colonizadas.
Siguiendo los experimentos del Ejemplo 2
anterior, se investigaron la capacidad de eclosión, la viabilidad y
el peso corporal de polluelos administrados con EC el día 18 de
incubación en la cámara aérea o el amnios. Estos datos se dan en la
Tabla 3 posteriormente.
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\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
(Tabla pasa a página
siguiente)
Estos datos muestran que cuando un cultivo de EC
no diluido se situaba en la Cámara aérea, la capacidad de eclosión
se reducía significativamente cuando se comparaba con los
controles. Sin embargo, cuando el cultivo de EC se diluía 1:1.000 o
más, la capacidad de eclosión y la viabilidad se aproximaban a la
aceptabilidad comercial. Poner el cultivo de EC en el amnios,
incluso con una dilución de 1:1.000.000, mataba a la mayoría de los
polluelos antes de la eclosión. Para todos los tratamientos, la
viabilidad y el peso corporal de los polluelos que eclosionaban no
estaban significativamente afectados por el tratamiento de EC.
Claims (39)
1. Un procedimiento para la fabricación de un
medicamento, caracterizado porque dicho medicamento es para
usar en un método para introducir bacterias en el tracto digestivo
de un ave, comprendiendo dicho método administrar dicho cultivo a
un huevo de ave fertilizado, que contiene un ave embrionaria, en una
cantidad eficaz para colonizar el tracto digestivo del ave
embrionaria e inhibir la colonización del tracto digestivo de dicho
ave después de la eclosión por bacterias indeseables.
2. Un procedimiento de acuerdo con la
reivindicación 1, en el que dicha etapa de administración es seguida
por la etapa de incubar dicho huevo de ave hasta la eclosión.
3. Un procedimiento de acuerdo con las
reivindicaciones 1 ó 2, en el que dicho huevo de ave es un huevo de
pollo, pavo, pato, ganso, codorniz o faisán.
4. Un procedimiento de acuerdo con la
reivindicación 4, en el que dicho huevo es un huevo de pollo o
pavo.
5. Un procedimiento de acuerdo con una cualquiera
de las reivindicaciones precedentes, en el que dicho cultivo
bacteriano se administra a dicho huevo de ave durante
aproximadamente el cuarto final de incubación.
6. Un procedimiento de acuerdo con la
reivindicación 5, en el que dicho huevo de ave es un huevo de pollo
y dicho cultivo bacteriano se administra a dicho huevo durante
aproximadamente el decimoctavo día de incubación del huevo.
7. Un procedimiento de acuerdo con una cualquiera
de las reivindicaciones precedentes, en el que dicho cultivo
bacteriano se administra en la región de la cámara aérea del
huevo.
8. Un procedimiento de acuerdo con una cualquiera
de las reivindicaciones precedentes, en el que dicho cultivo
comprende al menos una cepa de bacterias anaerobias de origen
intestinal.
9. Un procedimiento de acuerdo con la
reivindicación 8, en el que dicho cultivo bacteriano se administra
en combinación con un agente eliminador de oxígeno.
10. Un procedimiento de acuerdo con las
reivindicaciones 8 ó 9, en el que dicho cultivo es un cultivo de
exclusión competitiva de Salmonella.
11. Un procedimiento de acuerdo con la
reivindicación 10, en el que dicho cultivo de exclusión competitiva
de Salmonella es un cultivo de exclusión competitiva
definido.
12. Un procedimiento de acuerdo con la
reivindicación 10, en el que dicho cultivo de exclusión competitiva
de Salmonella es un cultivo de exclusión competitiva
indefinido.
13. Un procedimiento de acuerdo con la
reivindicación 1, para usar en un método para introducir bacterias
en el tracto digestivo de un ave, que comprende administrar un
cultivo de exclusión competitiva de Salmonella al saco aéreo
de un huevo de ave fertilizado que contiene un ave embrionaria,
administrándose dicho cultivo en una cantidad eficaz para colonizar
el tracto digestivo del ave embrionaria contenida dentro del huevo
de modo que se evita que las bacterias de Salmonella
colonicen dicho ave.
14. Un procedimiento de acuerdo con una
cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que dicho
cultivo bacteriano se prepara a partir del ciego o el intestino
grueso de al menos un ave madura negativa a Salmonellas.
15. Un aparato para inyección de huevos que
comprende:
medios de sujeción de huevos para retener al
menos un huevo; y
medios inyectores de huevos, que contienen un
cultivo bacteriano probiótico para usar en un método para
introducir bacterias en el tracto digestivo de un ave, que
comprende administrar dicho cultivo a un huevo de ave fertilizado,
que contiene un ave embrionaria, en una cantidad eficaz para
colonizar el tracto digestivo del ave embrionaria e inhibir la
colonización del tracto digestivo de dicho ave después de la
eclosión por bacterias indeseables, estando dichos medios
inyectores asociados operativamente con dichos medios de sujeción de
huevos, para inyectar en cada uno de dicho al menos un huevo una
cantidad de dicho cultivo bacteriano probiótico eficaz para
colonizar el tracto digestivo de un ave embrionaria, dentro de cada
uno de dicho al menos un huevo, y para inhibir la colonización del
tracto digestivo de dicho ave después de la eclosión por bacterias
indeseables.
16. Un aparato para inyección de huevos de
acuerdo con la reivindicación 15, que incluye además una estructura
de soporte conectada tanto a dichos medios de sujeción de huevos
como a dichos medios inyectores de huevos.
17. Un aparato para inyección de huevos de
acuerdo con las reivindicaciones 15 ó 16, que incluye además al
menos un huevo retenido por dichos medios de sujeción de
huevos.
18. Un aparato para inyección de huevos de
acuerdo con la reivindicación 18, en el que dicho al menos un huevo
es un huevo de pollo, pavo, pato, ganso, codorniz o faisán.
19. Un aparato para inyección de huevos de
acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones
15-18, en el que dichos medios para inyección de
huevos están dimensionados y configurados para comunicarse con la
región de la cámara aérea de cada al menos un huevo.
20. Un aparato para inyección de huevos de
acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones
15-19, en el que dicho cultivo bacteriano probiótico
viable incluye al menos una cepa de bacterias anaerobias de origen
intestinal.
21. Un aparato para inyección de huevos de
acuerdo con la reivindicación 20, en el que dicho cultivo
bacteriano es un cultivo de exclusión competitiva de
Salmonella.
22. Un aparato para inyección de huevos de
acuerdo con la reivindicación 21, en el que dicho cultivo de
exclusión competitiva de Salmonella es un cultivo de
exclusión competitiva indefinido.
23. Un aparato para inyección de huevos de
acuerdo con la reivindicación 21, en el que dicho cultivo de
exclusión competitiva de Salmonella es un cultivo de
exclusión competitiva definido.
24. Un aparato para inyección de huevos de
acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones
15-23, que incluye además medios de punción
asociados operativamente con dichos medios inyectores de huevos
para proporcionar un agujero en la cáscara de cada dicho al menos
un huevo para la inserción de una aguja a través de la misma.
25. Un aparato para inyección de huevos de
acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones
15-24, dispuesto para inyectar dicho cultivo
bacteriano probiótico en el saco aéreo de cada dicho al menos un
huevo en una cantidad eficaz para evitar que bacterias
Salmonella colonicen el tracto digestivo del ave.
26. Un proceso para formar un cultivo bacteriano
probiótico para usar en un método para introducir bacterias en el
tracto digestivo de un ave, comprendiendo dicho método administrar
dicho cultivo a un huevo de ave fertilizado, que contiene un ave
embrionaria, en una cantidad eficaz para colonizar el tracto
digestivo de un ave embrionaria e inhibir la colonización del tracto
digestivo de dicho ave después de la eclosión por bacterias
indeseables.
27. Un proceso de acuerdo con la reivindicación
26, en el que dicha etapa de administración es seguida por la etapa
de incubar dicho huevo de ave hasta la eclosión.
28. Un proceso de acuerdo con las
reivindicaciones 26 ó 27, en el que dicho huevo de ave es un huevo
de pollo, pavo, pato, ganso, codorniz o faisán.
29. Un proceso de acuerdo con la reivindicación
28, en el que dicho huevo es un huevo de pollo o pavo.
30. Un proceso de acuerdo con una cualquiera de
las reivindicaciones precedentes, en el que dicho cultivo
bacteriano se administra a dicho huevo de ave durante
aproximadamente el cuarto final de incubación.
31. Un proceso de acuerdo con la reivindicación
30, en el que dicho huevo de ave es un huevo de pollo y dicho
cultivo bacteriano se administra a dicho huevo durante
aproximadamente el decimoctavo día de incubación del
huevo.
huevo.
32. Un proceso de acuerdo con una cualquiera de
las reivindicaciones precedentes, en el que dicho cultivo
bacteriano se administra en la región de la cámara aérea del
huevo.
33. Un proceso de acuerdo con una cualquiera de
las reivindicaciones precedentes, en el que dicho cultivo comprende
al menos una cepa de bacterias anaerobias de origen intestinal.
34. Un proceso de acuerdo con la reivindicación
32, en el que dicho cultivo bacteriano se administra en combinación
con un agente eliminador de oxígeno.
35. Un proceso de acuerdo con las
reivindicaciones 33 ó 34, en el que dicho cultivo es un cultivo de
exclusión competitiva de Salmonella.
36. Un proceso de acuerdo con la reivindicación
35, en el que dicho cultivo de exclusión competitiva de
Salmonella es un cultivo de exclusión competitiva
definido.
37. Un proceso de acuerdo con la reivindicación
35, en el que dicho cultivo de exclusión competitiva de
Salmonella es un cultivo de exclusión competitiva
indefinido.
38. Un proceso para formar un cultivo bacteriano
probiótico para usar en un método para introducir bacterias en el
tracto digestivo de un ave de acuerdo con la reivindicación 28, que
comprende administrar un cultivo de exclusión competitiva de
Salmonella al saco aéreo de un huevo de ave fertilizado que
contiene un ave embrionaria, administrándose dicho cultivo en una
cantidad eficaz para colonizar el tracto digestivo del ave
embrionaria contenida dentro del huevo de modo que se evita que las
bacterias Salmonella colonicen dicho ave.
39. Un proceso de acuerdo con una cualquiera de
las reivindicaciones 26-38, en el que dicho cultivo
bacteriano se prepara a partir del ciego o el intestino grueso de
al menos un ave madura negativa a las Salmonellas.
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