CN116590197A - 罗伊氏黏液乳杆菌在肉鸡发育调控中的应用 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及微生物技术领域，公开了罗伊氏黏液乳杆菌在肉鸡发育调控中的应用。本发明研究团队筛选到一株罗伊氏黏液乳杆菌LR21，并通过研究发现，将该菌通过胚蛋注射的方式注射进肉鸡的机体中，可以对肉鸡胚胎肠道发育进行调控，促进肉鸡发育，改善肉鸡生长性能。具体而言，可以提高出壳雏鸡小肠器官重和器官指数，促进卵黄囊吸收；并显著提高1～7日龄肉鸡体增重和采食量；1～7日龄肉鸡十二指肠绒毛高度，显著促进十二指肠隐窝干细胞增殖。

Description

罗伊氏黏液乳杆菌在肉鸡发育调控中的应用
技术领域
本发明涉及微生物技术领域，尤其涉及罗伊氏黏液乳杆菌在肉鸡发育调控中的应用。
背景技术
传统畜牧业一直使用亚治疗剂量的抗生素用于提高生产性能和预防疾病，其作为饲料添加剂可提高动物生产性能并降低因临床、亚临床疾病引起的发病率和死亡率。
尽管抗生素对动物健康和生产力有益，但动物产品中的抗生素耐药性及残留正在威胁人类健康。为此，2021年7月1日起，我国农业农村部194号公告正式颁布，禁止饲料生产企业生产含有促生长类药物饲料添加剂的商品饲料。然而，抗生素的限制导致了动物生产性能和饲料转化率下降以及某些动物疾病发病率增加等问题。因此，开发安全、无毒副作用的抗生素替代品，促进动物发育和改善生长性能，提高动物生产力是一项关键、紧迫的任务。
生命活动早期肠道菌群对新生个体肠道发育有着长远的影响。然而，新生个体肠道菌群在建立之初是一个敏感多变的系统，易受到环境应激和各种病原体的影响，导致组成和结构异常，继而引发肠道功能性紊乱。
对胎生动物而言，母体与胎儿接触过程中，如分娩和喂养，来自母体产道、乳汁和皮肤中复杂多样的细菌会通过胎儿口腔传递到肠道中。这些母源细菌中的双歧杆菌属、乳酸杆菌属等有益菌进入肠道后有利于建立起平衡稳定的菌群结构，促进粘膜免疫系统发育，完善胃肠道形态和功能。
肉鸡生产是畜牧业的重要组成部分。然而，雏鸡在现代笼养养殖模式下无法与母体接触，不利于雏鸡从母体“继承”平衡而稳定的肠道菌群。加之雏鸡免疫系统尚未发育完全，外界环境中沙门氏菌、大肠杆菌等致病菌侵入肠道后，不易被肠道内有益菌以及肠粘膜免疫系统排斥，容易在肠道内发展成为优势菌，影响雏鸡的生长与健康。
随着肉鸡育种和营养调控技术的发展，肉鸡饲养周期也在不断缩短，相较于整个饲养周期，肉鸡种蛋孵化时间约占1/3至1/2。孵化期间胚胎发育状态与雏鸡后期生长性能密切相关，而孵化阶段采取调控措施以促进鸡胚和肉鸡的早期发育，也可提高肉鸡生长性能。
发明内容
为了解决上述促进肉鸡发育、改善肉鸡生长性能的技术问题，本发明提供了罗伊氏黏液乳杆菌在肉鸡发育调控中的应用。本发明研究团队筛选到一种罗伊氏黏液乳杆菌，经研究发现，该罗伊氏黏液乳杆菌可以通过胚胎注射的方式，对肉鸡胚胎肠道发育进行调控，促进肉鸡发育，改善肉鸡生长性能。
本发明的具体技术方案为：
本发明提供了罗伊氏黏液乳杆菌在肉鸡发育调控中的应用，所述罗伊氏黏液乳杆菌保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址是中国武汉，保藏日期是2022年4月22日，保藏编号为CCTCC NO:M 2022464。
本发明研究团队从健康肉鸡的盲肠内容物分离筛选到一株罗伊氏黏液乳杆菌，经测序鉴定为新菌株，并命名为罗伊氏黏液乳杆菌Limosilactobacillus reuteri LR21。本发明研究团队将筛选到的罗伊氏黏液乳杆菌Limosilactobacillus reuteri LR21，于2022年4月22日保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏编号为CCTCC NO:M 2022464，保藏地址为湖北省武汉市武昌区八一路299号。
经研究发现，上述罗伊氏黏液乳杆菌可以在制备促进肉鸡发育的生物兽药中得到应用，在制备促进肉鸡发育的功能性饲料添加剂中也具有较大的应用前景。具体原因为，罗伊氏黏液乳杆菌可以促进肉鸡早期肠道发育和生长性能。
同时，本发明给出了罗伊氏黏液乳杆菌在肉鸡发育调控中应用的方法，包括以下步骤：将所述罗伊氏黏液乳杆菌的发酵液注射进肉鸡的胚蛋。
胚蛋注射上述罗伊氏黏液乳杆菌可以在肉鸡生命早期有效调控肠道发育和生产性能，对肉鸡胚胎肠道发育进行有效的调控。将所述罗伊氏黏液乳杆菌的发酵液注射进肉鸡的胚蛋，可在雏鸡暴露在外界环境微生物之前引入罗伊氏黏液乳杆菌，利于罗伊氏黏液乳杆菌作为先锋细菌定植在肠道中以发挥各种益生作用。
作为本发明上述技术方案的优选，所述罗伊氏黏液乳杆菌的发酵液中，罗伊氏黏液乳杆菌的浓度为0.5×108～5×108CFU/mL。
在本发明提供的肉鸡发育调控的方法中，罗伊氏黏液乳杆菌LR21作为起主要作用的物质，其作用效果除了与其递送至肉鸡机体中的方式有关，也即除了通过发酵液注射肉鸡的胚蛋保证罗伊氏黏液乳杆菌LR21的发育调控效果外，还与注射的发酵液中罗伊氏黏液乳杆菌LR21的浓度有关。本发明研究团队在研究中发现，注射的发酵液中罗伊氏黏液乳杆菌的浓度为0.5×108～5×108CFU/mL，对于肉鸡发育调控的效果较好。
作为本发明上述技术方案的优选，所述注射的注射量不超过0.5mL。
同时，在本发明提供的肉鸡发育调控的方法中，通过胚蛋注射将罗伊氏黏液乳杆菌LR21递送至肉鸡机体中，要注意注射量不超过0.5mL。若注射量大于0.5mL，有可能会导致胚蛋中的液体微环境发生变化，影响胚蛋发育。
作为本发明上述技术方案的优选，所述注射的时间为孵化期第18～19天。
另外，在本发明提供的肉鸡发育调控的方法中，注射罗伊氏黏液乳杆菌LR21发酵液的时间为孵化期第18～19天，具有较好的肉鸡发育调控效果。若早于第18天孵化期注射，此时胚蛋中羊水体积少，无法准确注射进羊膜腔，进而导致罗伊氏黏液乳杆菌LR21无法定植在鸡胚肠道中；若晚于第19天孵化期注射，此时胚蛋快要发育完全，雏鸡器官明显发育，罗伊氏黏液乳杆菌LR21注射在不同的机体位置，对于罗伊氏黏液乳杆菌LR21发挥作用会有不同的影响。
与现有技术相比，本发明具有以下技术效果：
本发明研究团队筛选到的罗伊氏黏液乳杆菌LR21，通过胚蛋注射的方式注射进肉鸡的机体中，可以对肉鸡胚胎肠道发育进行调控，促进肉鸡发育，改善肉鸡生长性能。具体而言，可以提高出壳雏鸡小肠器官重和器官指数，促进卵黄囊吸收；并显著提高1～7日龄肉鸡体增重和采食量；1～7日龄肉鸡十二指肠绒毛高度，显著促进十二指肠隐窝干细胞增殖。
将筛选到的罗伊氏黏液乳杆菌LR21应用于肉鸡发育调控、促进肉鸡生产中，本发明还提供了肉鸡发育调控的应用方法，即将所述罗伊氏黏液乳杆菌的发酵液注射进肉鸡的胚蛋，并对该方法中注射的发酵液中罗伊氏黏液乳杆菌的浓度、注射量、注射时间进行了优化，使发育调控效果最大化。
附图说明
图1为实施例2中胚蛋注射24小时、48小时的鸡胚消化道图；
图2为实施例3中1日龄肉雏鸡十二指肠绒毛形态结果图；
图3为实施例3中7日龄肉雏鸡十二指肠绒毛形态结果图；
图4为实施例3中1日龄肉雏鸡十二指肠增殖细胞核抗原PCNA蛋白表达结果图；
图5为实施例3中7日龄肉雏鸡十二指肠增殖细胞核抗原PCNA蛋白表达结果图。
具体实施方式
下面结合实施例及附图对本发明作进一步的描述。
本实施例所用罗伊氏黏液乳杆菌LR21分离自健康肉鸡的盲肠内容物，其命名为罗伊氏黏液乳杆菌Limosilactobacillus reuteri LR21，该菌株于2022年4月22日保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏编号为CCTCC NO:M 2022464，保藏地址为湖北省武汉市武昌区八一路299号。
实施例1罗伊氏黏液乳杆菌LR21菌株的培养和菌液的制备
将冻存的罗伊氏黏液乳杆菌LR21按5％(v/v)接种到灭菌MRS液体培养基中，于37℃下培养12h获得菌液，连续接种培养3次，以活化菌株。收集第3次接种培养12h获得的培养发酵液，室温8000rpm离心，收集菌体。菌体经无菌PBS缓冲液清洗3次后，取10mL体积的菌悬液，离心后将其重悬于200μg/mL FITC-PBS液体中，37℃暗室下孵育2h。待孵育结束后，再次用无菌PBS缓冲液清洗菌体，洗去多余染料，并用PBS缓冲液调节菌液浓度至1×108CFU/mL，得罗伊氏黏液乳杆菌LR21菌液，37℃下保存备用。
其余菌悬液用相同的方法调节菌液浓度至1×108CFU/mL，37℃下保存备用。
实施例2肉鸡孵化阶段胚蛋注射罗伊氏黏液乳杆菌LR21
将360枚重量相近(42.1±3.4g)的光大梅岭黄羽肉鸡种蛋经表面消毒后放入全自动孵化机中，随机分配到2个处理组，2个处理组具体为：
①对照组：CON组，于孵化期第18天注射无菌PBS；
②罗伊氏黏液乳杆菌组：IOF组，于孵化期第18天注射FITC标记的罗伊氏黏液乳杆菌LR21。
孵化参数设定为：第1～18天，温度37.8℃，相对湿度60％，每隔120min翻蛋一次，每次翻蛋持续时间180s；第19～21天，温度37.2℃，相对湿度68％，停止翻蛋，种蛋平放于出雏盘。在孵化第10天、16天时照蛋，共2次，剔除死胚蛋。
胚蛋注射操作按如下方法进行：
(1)75％酒精棉擦拭蛋壳表面消毒灭菌后，在照蛋器辅助下找到气室与绒毛尿囊膜分界，标记出胚蛋内活动黑影所在处，无菌打孔器在相应位置钻取约1mm直径小孔；
(2)采用一次性1mL灭菌注射器(8号针头)从所钻小孔中垂直进针，在无阻力情况下进针约2cm深度后，将0.2mL FITC标记的PBS或实施例1制备得到的罗伊氏黏液乳杆菌LR21菌液缓慢注入到鸡胚中；
(3)在注射完毕后，迅速用酒精灯烤化石蜡，将蛋壳开孔密封后，送回孵化机中。
在孵化期第18天时，对照组按上述胚蛋注射操作注射无菌PBS，罗伊氏黏液乳杆菌组按上述胚蛋注射操作注射实施例1制备得到的罗伊氏黏液乳杆菌LR21，操作完毕后放入孵化箱中。继续孵化24、48小时后，每组取胚蛋3枚，采集鸡胚完整消化道(胃、小肠、盲肠和直肠)，冰上避光保存，在小动物活体成像系统(IVIS Spectrum，PerkinElmer)上观察记录，每组随机1只鸡胚在胚蛋注射操作后的情况如图1所示。
由图1可知，罗伊氏黏液乳杆菌LR21可被鸡胚吞食，24小时后主要富集在鸡胚的肌胃和腺胃中，少数富集于前肠段；48小时后虽然仍有大量LR21储存在肌胃和腺胃中，但相当一部分罗伊氏黏液乳杆菌LR21随着肠道蠕动推进到回肠和直肠中，少量LR21出现在盲肠部位。由此说明，在鸡胚发育至18天时，通过胚蛋注射的方式，罗伊氏黏液乳杆菌LR21可被成功递送到羊膜腔，并随鸡胚吞食羊水进而定植在鸡胚肠道中。
在孵化期第21天时，统计各组出壳雏鸡和未出壳胚蛋数量，计算入孵蛋孵化率(％)，记录出壳雏鸡初生重。2个组选取体重相近的健雏120只，随机分成6个重复，每个重复20只。然后每个重复选取2只雏鸡单个称重，折颈处死，分离卵黄囊、肝、胃、小肠、胰腺、脾脏和法氏囊称重，计算器官指数(％)。其中，孵蛋孵化率(％)＝出雏数÷入孵种蛋数×100，器官指数(％)＝器官绝对重量÷体重×100。
各组入孵蛋孵化率(％)及初生重结果如表1所示。
表1
由表1可知，胚蛋注射罗伊氏黏液乳杆菌LR21对种蛋孵化率和雏鸡的初生重无明显影响。
各组雏鸡的卵黄囊、肝、胃、小肠、胰腺、脾脏和法氏囊器官重量和器官指数结果见表2。
表2
由表2可知，胚蛋注射罗伊氏黏液乳杆菌LR21显著降低了1日龄雏鸡卵黄囊绝对重量和相对重量，且有增加小肠相对重量的趋势(0.05<P<0.1)，但肝、胃、胰、脾、法氏囊等器官重量无明显差异。由此说明，胚蛋注射罗伊氏黏液乳杆菌LR21促进了鸡胚卵黄囊吸收和小肠发育。
实施例3对孵化阶段胚蛋注射罗伊氏黏液乳杆菌LR21的肉鸡进行饲养将实施例2中孵化期第21天时从2个组选取出来的体重相近的健雏形成本实施例的2个处理组，2个处理组具体为：
①对照组：CON组，沿用实施例2对照组中孵化期第21天时孵化出来的光大梅岭黄羽肉鸡进行饲养试验，6个重复，每个重复18只；
②罗伊氏黏液乳杆菌组：IOF组，沿用实施例2罗伊氏黏液乳杆菌组中孵化期第21天时孵化出来的光大梅岭黄羽肉鸡进行饲养试验，6个重复，每个重复18只。
采用垫料平养模式，公母混养，饲养管理按照肉鸡常规程序进行，24小时光照，自由采食和饮水。试验为期21天，前7天室温保持在35℃，而后每周降低2℃。
(1)分别在出雏当天、7日龄和21日龄对肉鸡以重复为单位进行称重，21日龄时结料，计算2个组内每个重复的体增重、采食量和料重比；饲养期间，每日记录死亡鸡数和重量，结果见表3。
表3
由表3可知，罗伊氏黏液乳杆菌组的肉鸡，即胚蛋注射了罗伊氏黏液乳杆菌LR21的肉鸡，显著增加了肉雏鸡1～7天体增重和采食量(P<0.05)，也增加了8～21天、1～21天体增重和采食量，但各阶段料重比差异均不显著。
(2)取1日龄、7日龄雏鸡进行十二指肠绒毛形态的表征。各组每重复选取2只体重相近的雏鸡，折颈处死，采集十二指肠样品固定于4％多聚甲醛中，用于苏木精伊红染色及免疫荧光染色，1日龄肉雏鸡十二指肠绒毛形态结果见图2，7日龄肉雏鸡十二指肠绒毛形态结果见图3。图2中，A为各组1日龄随机肉雏鸡的十二指肠切片图，B为各组1日龄随机肉雏鸡的绒毛高度、隐窝深度、绒隐比结果图。图2中，A为各组7日龄随机肉雏鸡的十二指肠切片图，B为各组7日龄随机肉雏鸡的绒毛高度、隐窝深度、绒隐比结果图。
由图2可知，罗伊氏黏液乳杆菌组的肉鸡，即胚蛋注射了罗伊氏黏液乳杆菌LR21的肉鸡，显著增加1日龄肉雏鸡十二指肠绒毛高度和绒隐比。由图3可知，胚蛋注射了罗伊氏黏液乳杆菌LR21的肉鸡有提高7日龄肉雏鸡十二指肠绒毛高度的趋势，但隐窝深度、绒隐比无明显影响。
(2)取1日龄、7日龄肉雏鸡进行十二指肠增殖细胞核抗原PCNA蛋白表达的表征。各组每重复选取2只体重相近的雏鸡，折颈处死，采集十二指肠样品固定于4％多聚甲醛中，用于苏木精伊红染色及免疫荧光染色，1日龄、7日龄随机肉雏鸡十二指肠增殖细胞核抗原PCNA蛋白表达结果分别见图4、图5。
由图4～5可知，罗伊氏黏液乳杆菌组的肉鸡，即胚蛋注射了罗伊氏黏液乳杆菌LR21的肉鸡，显著增加1日龄核7日龄肉雏鸡十二指肠隐窝处PCNA阳性细胞数量，说明胚蛋注射罗伊氏黏液乳杆菌LR21促进肠道干细胞的增殖。
实施例4罗伊氏黏液乳杆菌LR21递送至肉鸡机体的条件优化
(1)递送方式的优化
将480枚重量相近(45.1±2.4g)的光大梅岭黄羽肉鸡种蛋经表面消毒后放入全自动孵化机中，随机分配到3个处理组，3个处理组具体为：
①对照组：CON组，在种蛋孵化至18天时，羊膜腔注射无菌PBS；
②罗伊氏黏液乳杆菌组：IOF组，在孵化至18天时，羊膜腔注射1×108CFU/mL；
③饲用益生菌组：LR21组，孵化阶段不做处理。
胚蛋注射操作与实施例2同。
待孵化结束后各组随机选取体重相近的雏鸡进行饲养试验，每组6个重复，每个重复20只。
采用垫料平养模式，公母混养，饲养管理按照肉鸡常规程序进行，24小时光照，自由采食和饮水，其中，饲用益生菌组中饲料添加罗伊氏黏液乳杆菌LR21，罗伊氏黏液乳杆菌LR21的有效含量为1.0×108CFU/g。试验为期7天，室温保持在35℃。
在7日龄时对肉鸡以重复为单位进行称重，结料，计算2个组内每个重复的体增重、采食量和料重比；饲养期间，每日记录死亡鸡数和重量，结果见表4。
表4
项目 对照组 罗伊氏黏液乳杆菌组 饲用益生菌组
体增重BWG(g) 88.0a±2.5 92.1b±3.0 94.6b±1.6
采食量FI(g) 178.22a±8.18 196.33b±15.85 192.33b±13.46
料重比 2.03±0.12 2.13±0.11 2.03±0.15
由表4可知，罗伊氏黏液乳杆菌组的肉鸡，即通过胚蛋注射的方式注射了罗伊氏黏液乳杆菌LR21的肉鸡，相较于通过孵化后，雏鸡饲养时给料添加罗伊氏黏液乳杆菌LR21的方式，也显著增加了肉雏鸡1～7天体增重和采食量(P<0.05)。
(2)注射时间的优化
将120枚重量相近(43.2±2.1g)的光大梅岭黄羽肉鸡种蛋经表面消毒后放入全自动孵化机中，随机分配到4个处理组，4个处理组具体为：
①组：对照组，孵化期不做处理；
②组：于孵化期第16天羊膜腔注射1×108CFU/mL罗伊氏黏液乳杆菌LR21；
③组：于孵化期第18天羊膜腔注射1×108CFU/mL罗伊氏黏液乳杆菌LR21；
④组：于孵化期第19天羊膜腔注射1×108CFU/mL罗伊氏黏液乳杆菌LR21。
胚蛋注射操作与实施例2同。
孵化参数设定为：第1～18天，温度37.8℃，相对湿度60％，每隔120min翻蛋一次，每次翻蛋持续时间180s；第19～21天，温度37.2℃，相对湿度68％，停止翻蛋，种蛋平放于出雏盘。在孵化第10天、16天时照蛋，共2次，剔除死胚蛋。
在孵化期第21天时，统计各组出壳雏鸡和未出壳胚蛋数量，计算入孵蛋孵化率(％)，记录出壳雏鸡初生重。然后每个组随机挑选体重相近的10只雏鸡，分离盲肠收集内容物后涂布于MRS固体平板，培养24h计算乳酸菌菌落数。结果见表5。
表5
项目 ①组 ②组 ③组 ④组
孵化率(％) 88.9±2.2 89.1±2.3 89.5±1.4 89.2±1.8
初始重(g) 37.12±1.1 37.51±1.8 37.86±1.2 37.25±1.8
菌落数(LgCFU/mL) 2.62a±0.05 4.04b±0.04 6.24c±0.06 6.28c±0.06
由表5可知，在孵化期18天时羊膜腔注射相同剂量的罗伊氏黏液乳杆菌，出壳雏鸡盲肠内容物乳酸菌数量显著高于孵化期16天羊膜腔注射罗伊氏黏液乳杆菌；在孵化期16天时由于羊膜腔体积较小，可能无法准确注射到羊膜腔，导致出壳雏鸡肠道内定植的乳酸菌数减少。
(3)注射剂量的优化
将280枚重量相近(42.1±3.4g)的光大梅岭黄羽肉鸡种蛋经表面消毒后放入全自动孵化机中，随机分配到7个处理组，7个处理组具体为：
①对照组：孵化期不做处理；
②剂量A组：于孵化期第18天羊膜腔注射1×107CFU/mL罗伊氏黏液乳杆菌LR21；
③剂量B组：于孵化期第18天羊膜腔注射5×107CFU/mL罗伊氏黏液乳杆菌LR21；
④注射C组：于孵化期第18天羊膜腔注射1×108CFU/mL罗伊氏黏液乳杆菌LR21；
⑤注射D组：于孵化期第18天羊膜腔注射5×108CFU/mL罗伊氏黏液乳杆菌LR21；
⑥注射E组：于孵化期第18天羊膜腔注射1×109CFU/mL罗伊氏黏液乳杆菌LR21；
⑦注射F组：于孵化期第18天羊膜腔注射5×109CFU/mL罗伊氏黏液乳杆菌LR21；
注射操作同实施例2。
孵化参数设定为：第1～18天，温度37.8℃，相对湿度60％，每隔120min翻蛋一次，每次翻蛋持续时间180s；第19～21天，温度37.2℃，相对湿度68％，停止翻蛋，种蛋平放于出雏盘。在孵化第10天、16天时照蛋，共2次，剔除死胚蛋。
在孵化21天雏鸡出壳后，统计各组孵化率、出壳雏鸡初始重，并随机挑选体重相近的15只雏鸡，分离盲肠收集内容物后涂布于MRS固体平板，培养24h计算乳酸菌菌落数。结果见表6。
表6
由表6可知，胚蛋注射不同剂量的罗伊氏黏液乳杆菌对种蛋孵化率和初始重无明显影响，随注射剂量的增加出壳雏鸡盲肠内容物中乳酸菌含量逐渐增加，且当的发酵液中罗伊氏黏液乳杆菌的浓度为0.5×108～5×108CFU/mL范围时，盲肠内容物中乳酸菌数量与1×109～5×109CFU/mL相当。
本发明垫料平养模式饲养肉鸡所用饲养料粮的成分和营养水平(％以饲喂为基础)如下所示：
每公斤提供：Fe 80mg、Cu 8mg、Zn 60mg、Mn 80mg、I 0.35mg、Se 0.15mg、VA9,600IU、VD31,500IU、VE20mg、Vk31 mg、VB12.2 mg、2VB2、VB64.2毫克、VB120.012毫克、烟酰胺42毫克、D-泛酸钙12毫克、叶酸1.0毫克、D-生物素0.18毫克、胆碱800毫克。
本发明中所用原料、设备，若无特别说明，均为本领域的常用原料、设备；本发明中所用方法，若无特别说明，均为本领域的常规方法。
以上所述，仅是本发明的较佳实施例，并非对本发明作任何限制，凡是根据本发明技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、变更以及等效变换，均仍属于本发明技术方案的保护范围。

Claims (7)

1.罗伊氏黏液乳杆菌在肉鸡发育调控中的应用，其特征在于：所述罗伊氏黏液乳杆菌保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址是中国武汉，保藏日期是2022年4月22日，保藏编号为CCTCC NO:M 2022464。
2.如权利要求1所述的应用，其特征在于：所述应用的方法包括以下步骤：
将所述罗伊氏黏液乳杆菌的发酵液注射进肉鸡的胚蛋。
3.如权利要求2所述的应用，其特征在于：所述罗伊氏黏液乳杆菌的发酵液中，罗伊氏黏液乳杆菌的浓度为0.5×108～5×108CFU/mL。
4.如权利要求2所述的应用，其特征在于：所述注射的注射量不超过0.5mL。
5.如权利要求2所述的应用，其特征在于：所述注射的时间为孵化期第18～19天。
6.如权利要求1所述的罗伊氏黏液乳杆菌在制备促进肉鸡发育的生物兽药中的应用。
7.如权利要求1所述的罗伊氏黏液乳杆菌在制备促进肉鸡发育的功能性饲料添加剂中的应用。
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