EP2640850A1 - Procédé pour la détection d'acides nucléiques - Google Patents

Procédé pour la détection d'acides nucléiques

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EP2640850A1
EP2640850A1 EP11785410.9A EP11785410A EP2640850A1 EP 2640850 A1 EP2640850 A1 EP 2640850A1 EP 11785410 A EP11785410 A EP 11785410A EP 2640850 A1 EP2640850 A1 EP 2640850A1
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EP
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bodipy
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oligonucleotides
dna
primer
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EP11785410.9A
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Bernhard Ronacher
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ANAGNOSTICS BIOANALYSIS GmbH
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    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
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    • C12Q1/6813—Hybridisation assays
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    • C12Q1/6837—Enzymatic or biochemical coupling of nucleic acids to a solid phase using probe arrays or probe chips
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
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    • C12Q1/6844—Nucleic acid amplification reactions
    • C12Q1/6853—Nucleic acid amplification reactions using modified primers or templates

Abstract

L'invention concerne un procédé pour la détection parallèle d'au moins une molécule cible d'ADN spécifique dans une pluralité d'échantillons au moyen d'une amplification d'acides nucléiques. Ledit procédé comporte les étapes suivantes : a) préparation d'au moins deux échantillons comprenant de l'ADN ; b) mise en contact des échantillons issus de l'étape a) avec une amorce sens et une amorce anti-sens comprenant un segment 3' et 5', l'amorce sens et l'amorce anti-sens comprenant dans le segment 3' une séquence nucléotidique complémentaire de la molécule cible d'ADN à amplifier, et l'amorce sens ou anti-sens comprenant dans le segment 5' un oligonucléotide présentant une séquence d'ADN artificielle associée aux échantillons individuels ; c) amplification des échantillons issus de l'étape b) ; d) mise en contact des échantillons amplifiés issus de l'étape c) avec un support solide, sur lequel sont immobilisés des oligonucléotides en un emplacement présélectionné, lesquels comprennent la séquence d'ADN artificielle associée aux échantillons individuels en leur extrémité 3' ; et e) la constatation de la liaison des produits d'amplification issus de l'étape c) aux oligonucléotides immobilisés sur le support solide.
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