EP1508373A2 - Probenträger mit Flüssigkeitskanal - Google Patents

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EP1508373A2
EP1508373A2 EP04019480A EP04019480A EP1508373A2 EP 1508373 A2 EP1508373 A2 EP 1508373A2 EP 04019480 A EP04019480 A EP 04019480A EP 04019480 A EP04019480 A EP 04019480A EP 1508373 A2 EP1508373 A2 EP 1508373A2
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channel
sample
venting
inflow
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Herbert Backes
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Herbener Heinz-Gerd
Latza Reinhard Dr med
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Herbener Heinz-Gerd
Latza Reinhard Dr med
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    • B01L2400/0406—Moving fluids with specific forces or mechanical means specific forces capillary forces
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    • B01L2400/08—Regulating or influencing the flow resistance
    • B01L2400/084—Passive control of flow resistance

Definitions

  • the carrier has at least a sample application site, has at least one distribution channel, from the at least one supply channel to at least one test well takes you. This at least one test well is with a vent channel connected to escape the displaced by the test liquid air can.
  • the carrier is produced by micro-injection and surface-activated by plasma treatment or grafting, so that fill the test wells using capillary forces.
  • the invention is therefore based on the object, a generic To further develop sample carriers.
  • sample carrier several annular venting channels having.
  • several examination systems be arranged on a sample carrier, each one ring-like venting channel is associated with a sample feeder.
  • a particularly favorable arrangement is achieved when the sample inflow, that is, the sample supply means within the ring-like Venting channel is located.
  • sample inflow crosses the annular venting channel This Allows the sample carrier system to work more easily with other microsystems to connect.
  • sample preparation elements Mentioned PCR devices and external pumps.
  • reaction chambers each equally spaced to the vent channel arranged are.
  • the present invention dispenses with the distribution channel, as this has proven to be disadvantageous.
  • this chip is not made by micro-injection process, but from a liquid material, which consists of methacrylate and an additive which is brought to hardening by means of laser irradiation.
  • the additive ensures that the critical angle of a drop of water on the surface is between 15 and 40 degrees. In this way, the fluidics are permanently guaranteed.
  • the method described has the further advantage that the bottom, body and cap of this chip can be made of different materials. This makes it possible to use the optical. Requirements of different measuring methods.
  • the chip can have between 1 and 10,000 test wells per cm 2 .
  • the fluid channels with a cover Mistake. Between the cover and the walls of the sosstechniksleitkanals This creates an angle of maximum 90 degrees. This angle can cause an accumulation of fluid at the junction between the Walls and the cover lead and thus filling the sosstechniksleitkanäle hinder with liquid. Therefore, according to the invention suggested that between the walls and the cover a bevel is provided so that the angle between the cover and the bevel and the angle between the bevel and the copessiersleitkanalwand has more than 90 degrees.
  • venting channels are hydrophobized. This is made by hydrophobic polymers or special structures such as Lotus effect or achieved by coating with nanogels.
  • a sample application site is provided by which leads away a distribution channel. Between the distribution channel and different Test wells are provided in supply channels that are in their Diameter smaller than the distribution channel. This structure leads to flow obstructions at the junction between distribution channel and Feed channel and complicates a precisely adapted to the flow flow Dimensioning of the cables.
  • the invention therefore provides each one fluid channel directly from the sample receiving chamber to leads to the reaction chambers. This channel can be in its sizing optimal to the supplying liquid volume and the required Capillary forces are adjusted.
  • the sample inflow into a Reaction chamber is formed at an acute angle and the acute-angled Inflow preferably to the bottom of the reaction chamber extends.
  • the sample inflow is thus initially in an acute angle opening area over. This area extends vertically in the direction to the bottom of the reaction chamber and allows the liquid through Capillary forces pulled along walls bounding this area to flow down.
  • the reaction chambers have structured walls, preferably with a zig-zag structure, their edges extend vertically.
  • the structuring The walls of the reaction chambers increase the capillary forces generated by the Walls on the liquid in the reaction chamber act.
  • a zigzag structure with vertical edges leads to a good wetting of the walls of the reaction chamber.
  • FIG. 1 shows a sample carrier 1 with two marked reaction paths 2, 3 between the sample inlet 4 and the venting channel 5 through reaction chambers 11 and 12. For clarity the remaining four pathways were not drawn.
  • FIG. 1 An enlarged detail of Figure 1 shows the figure 2. Special Difficulties arise in the inlet and outlet of the vent lines 5. Care must be taken here that liquids do not leak through Capillary forces are forwarded.
  • a dedicated venting structural element 6 is shown in FIG. The dotted lines show as the outer edges of the vent structure element 6 from simple composed of geometric bodies.
  • FIG. 4 shows the outer contour of a sample or reaction vessel with the mentioned zigzag structure 8 for increasing the capillary forces.
  • the schematic representation in Figure 4 shows a horizontal Section through a reaction vessel with an inlet 9 and a drain 10, where the vertical edges are clearly visible.

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Abstract

Um einen Probeträger weiterzuentwickeln, schlägt die Erfindung einen Probeträger mit mindestens einem Flüssigkeitskanal vor, wobei mehrere Flüssigkeitskanäle in einen ringartigen beispielsweise sechseckigen, Entlüftungskanal münden.
Dies hat den Vorteil, dass bei einer Verstopfung im Entlüftungskanal die Entlüftung über eine andere Wegstrecke erfolgen kann.

Description

Im PCT-Antrag der WO 99/46045 ist ein Probenträger beschrieben, der im Wesentlichen folgende Merkmale aufweist: Der Träger besitzt wenigstens eine Probenauftragstelle, hat mindestens einen Verteilerkanal, von dem mindestens ein Zuleitungskanal zu mindestens einer Testvertiefung hinführt. Diese mindestens eine Testvertiefung ist mit einem Entlüftungskanal verbunden, damit die durch die Testflüssigkeit verdrängte Luft entweichen kann. Der Träger wird durch Mikrospritzverfahren hergestellt und durch Plasmabehandlung bzw. Pfropfung oberflächenaktiviert, damit sich die Testvertiefungen mittels Kapillarkräften füllen können.
Es hat sich herausgestellt, dass beim Befüllen der Reaktionskammern Flüssigkeit in die Entlüftungskanäle gelangen kann. Eine verschlechterte Entlüftung führt jedoch dazu, dass auch die Befüllung der Reaktionskammern behindert ist.
Der Erfindung liegt daher die Aufgabe zu Grunde, ein gattungsgemäßen Probenträger weiter zu entwickeln.
Dies wird dadurch gelöst, dass mehrere Flüssigkeitskanäle in einen ringartigen, beispielsweise sechseckigen, Entlüftungskanal münden.
Dies hat den Vorteil, dass bei einer Verstopfung im Entlüftungskanal die Entlüftung über eine andere Wegstrecke erfolgen kann.
Vorteilhaft ist es, wenn der Probenträger mehrere ringartige Entlüftungskanäle aufweist. Beispielsweise können mehrere Untersuchungssysteme auf einem Probenträger angeordnet werden, wobei jeweils einem ringartigen Entlüftungskanal eine Probezuführeinrichtung zugeordnet ist.
Eine besonders günstige Anordnung wird erreicht, wenn der Probenzufluss, dass heißt die Probenzuführeinrichtung innerhalb des ringartigen Entlüftungskanals liegt.
Besondere Gegebenheiten können dazu führen, dass es vorteilhaft ist, wenn der Probenzufluss den ringartigen Entlüftungskanal kreuzt. Dies ermöglicht es, dass das Probenträgersystem einfacher mit anderen Mikrosystemen zu verbinden ist. Hierbei seien insbesondere Probenvorbereitungselemente, PCR-Einrichtungen und externe Pumpen erwähnt.
Kumulativ oder alternativ wird vorgeschlagen, dass mehrere Reaktionskammern jeweils gleich beabstandet zum Entlüftungskanal angeordnet sind.
Weiterhin ist das von Vorteil, wenn der Entlüftungskanal mehrere Entlüftungsöffnungen aufweist. Hierdurch kann erreicht werden, dass auch bei Verstopfungen noch eine gute Entlüftung des Systems stattfinden kann.
Die vorliegende Erfindung verzichtet auf den Verteilerkanal, da sich dieser als nachteilig erwiesen hat. Fernerhin wird dieser Chip nicht durch Mikrospritzverfahren hergestellt, sondern aus einem flüssigen Material, das aus Methacrylat und einem Zusatzstoff besteht, der mittels Lasereinstrahlung zur Härtung gebracht wird. Mit dem Zusatzstoff wird erreicht, dass der Grenzwinkel eines Wassertropfens auf der Oberfläche zwischen 15 und 40 Grad liegt. Auf diese Art wird die Fluidik dauerhaft gewährleistet. Das beschriebene Verfahren hat weiterhin den Vorteil, dass Boden, Körper und Deckelung dieses Chips aus unterschiedlichen Materialien sein können. Dadurch ist es möglich, den optischen. Anforderungen unterschiedlicher Messverfahren gerecht zu werden. Der Chip kann zwischen 1 und 10000 Testvertiefungen pro cm2 besitzen.
Ein Problem bei dem aus der WO 99/46045 bekannten Probenträger liegt darin, dass ein frisch hergestellter Chip noch keine Kapillarkräfte auf die Flüssigkeit ausübt. Daher muss der Chip unterschiedlichen Oberflächenbehandlungsverfahren unterzogen werden, um die geforderten Kapillarkräfte auf die Flüssigkeit auswirken zu können. Die bekannten Verfahren sind jedoch nicht zufriedenstellend. Der Erfindung liegt daher das Problem zugrunde, dass eine große Kavität nicht dazu geeignet ist, die geforderten Kapillarkräfte auf die Flüssigkeit auszuüben. Daher werden am Boden der Kavität anstelle einer ebenen Fläche Bodenkanäle vorgesehen. Diese Bodenkanäle erleichtern die Verteilung der Flüssigkeit am Kavitätsboden und verhindern einen Abriss der Kapillarströmung. Nach der vollständigen Bedeckung des Bodens mit Flüssigkeit entfällt das Problem eines Strömungsabrisses und die Kavität füllt sich schnell auf.
Diese Bodenkanäle ermöglichen das Anordnen von Siebstrukturen. So können innerhalb eines Flüssigkeitsleitkanals kammartige Barrieren oder siebartige Trennvorrichtungen vorgesehen werden, um größere Partikel aus der Flüssigkeit zurück zu halten. Beispielsweise kann auch der gesamte Flüssigkeitsleitkanal in mehrere kleinere Flüssigkeitsleitkanäle zerlegt werden, um die an der Flüssigkeit Kapillarkräfte ausübende Oberfläche zu erhöhen.
Üblicherweise werden die Flüssigkeitskanäle mit einer Abdeckung versehen. Zwischen der Abdeckung und den Wänden des Flüssigkeitsleitkanals entsteht hierbei ein Winkel von maximal 90 Grad. Dieser Winkel kann zu einer Ansammlung von Flüssigkeit am Übergang zwischen den Wänden und der Abdeckung führen und somit das Ausfüllen der Flüssigkeitsleitkanäle mit Flüssigkeit behindern. Erfindungsgemäß wird daher vorgeschlagen, dass zwischen den Wänden und der Abdeckung eine Abschrägung vorgesehen ist, so dass der Winkel zwischen der Abdeckung und der Abschrägung sowie der Winkel zwischen der Abschrägung und der Flüssigkeitsleitkanalwand mehr als 90 Grad aufweist.
Auch beim Einleiten der Flüssigkeit in eine Vertiefung entsteht an der Mündung gerne ein Flüssigkeitsabriss. Dieser wird dadurch verhindert, dass die Tiefe des Leitkanals zur Vertiefung hin zunimmt.
Bei bekannten Probenträgern entstehen auch Probleme mit Luftblasen in Entlüftungsleitungen. Dem wird dadurch entgegengewirkt, dass der Übergang zwischen einer eine Flüssigkeit enthaltenen Vertiefung und dem Entlüftungskanal abgerundet ist. Dies führt zu einem kontinuierlichen Übergang zwischen Vertiefung und Entlüftungskanal, der den Abfluss von Luft erleichtert.
Die Entfernung von Luft aus dem Probenträger wird weiterhin dadurch verbessert, dass die Entlüftungskanäle hydrophobisiert sind. Dies wird durch hydrophobe Polymere oder spezielle Strukturen wie zum Beispiel Lotuseffekt oder durch Beschichtung mit Nanogelen erzielt.
Im Stand der Technik wird eine Probenauftragstelle vorgesehen, von der ein Verteilerkanal wegführt. Zwischen dem Verteilerkanal und verschiedenen Testvertiefungen sind Zuleitungskanäle vorgesehen, die in ihrem Durchmesser kleiner sind als der Verteilerkanal. Dieser Aufbau führt zu Strömungsbehinderungen am Übergang zwischen Verteilerkanal und Zuführkanal und erschwert eine genau an den Strömungsfluss angepasste Dimensionierung der Leitungen. Erfindungsgemäß wird daher vorgesehen, dass je ein Flüssigkeitskanal direkt von der Probenaufnahmekammer zu den Reaktionskammern führt. Dieser Kanal kann in seiner Dimensionierung optimal an das zuführende Flüssigkeitsvolumen und die erforderlichen Kapillarkräfte angepasst werden.
Um am Zufluss zu einer Reaktionskammer einen optimalen Flüssigkeitsfluss zu erreichen wird vorgeschlagen, dass der Probenzufluss zu einer Reaktionskammer spitzwinklig ausgebildet ist und der spitzwinklige Zufluss sich vorzugsweise bis zum Bodenbereich der Reaktionskammer erstreckt. Der Probenzufluss geht somit zunächst in einen sich spitzwinklig öffnenden Bereich über. Dieser Bereich erstreckt sich vertikal in Richtung zum Boden der Reaktionskammer und ermöglicht der Flüssigkeit durch Kapillarkräfte gezogen entlang der diesen Bereich begrenzenden Wände nach unten zu fließen.
Das gleiche Prinzip der Kapillarkräfte wird auch zur besseren Benetzung der Wände genutzt. Hierzu wird vorgeschlagen, dass die Reaktionskammem strukturierte Wände aufweisen, vorzugsweise mit einer Zick-Zack-Struktur, deren Kanten sich senkrecht erstrecken. Die Strukturierung der Wände der Reaktionskammern erhöht die Kapillarkräfte, die von den Wänden auf die in der Reaktionskammer befindliche Flüssigkeit wirken. Insbesondere eine Zickzackstruktur mit senkrechten Kanten führt zu einer guten Benetzung der Wände der Reaktionskammer.
Besonders gute Ergebnisse wurden dadurch erzielt, dass genau diagonal zum Zufluss eine Be- und/oder Entlüftung vorgesehen ist. Dies reduziert Totraumbereiche, die schlechter zu entlüften sind.
Die speziellen Ausbildungsarten der Kammer sind auch unabhängig von den übrigen Ansprüchen und insbesondere unabhängig von der ringförmigen Ausbildung der Kanäle erfindungswesentlich.
Die Figur 1 zeigt einen Probenträger 1 mit zwei eingezeichneten Reaktionswegen 2, 3 zwischen dem Probenzulauf 4 und dem Entlüftungskanal 5 durch Reaktionskammern 11 und 12. Zur Erhöhung der Übersichtlichkeit wurden die übrigen vier Reaktionswege nicht eingezeichnet.
Einen vergrößerten Ausschnitt aus Figur 1 zeigt die Figur 2. Besondere Schwierigkeiten entstehen beim Ein- und Auslauf der Entlüftungsleitungen 5. Hier muss dafür gesorgt werden, dass Flüssigkeiten nicht durch Kapillarkräfte weitergeleitet werden. Ein hierfür vorgesehenes Entlüftungsstrukturelement 6 ist in Figur 3 gezeigt. Die gepunkteten Linien zeigen, wie die Außenkanten des Entlüftungsstrukturelementes 6 aus einfachen geometrischen Körpern zusammengesetzt sind.
Figur 4 zeigt die Außenkontur eines Proben- oder Reaktionsgefäßes mit der angesprochenen Zickzackstruktur 8 zur Erhöhung der Kapillarkräfte. Die schematische Darstellung in Figur 4 zeigt einen waagerechten Schnitt durch ein Reaktionsgefäß mit einem Zufluss 9 und einem Abfluss 10, bei dem die senkrechten Kanten deutlich zu erkennen sind.

Claims (20)

  1. Probenträger mit mindestens einem Flüssigkeitskanal, dadurch gekennzeichnet, dass mehrere Flüssigkeitskanäle in einen ringartigen, beispielsweise sechseckigen, Entlüftungskanal münden.
  2. Probenträger nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass er mehrere ringartige Entlüftungskanäle aufweist.
  3. Probenträger nach einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, dass der Probenzufluss innerhalb des ringartigen Entlüftungskanals liegt.
  4. Probenträger nach einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, dass der Probenzufluss den ringartigen Entlüftungskanal kreuzt.
  5. Probenträger nach einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, dass der Flüssigkeitskanal mit Mikrosystemelementen wie PCR, Sensoren, Pumpen in Verbindung steht.
  6. Probenträger nach einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, dass mehrere Reaktionskammern jeweils gleich beabstandet zum Entlüftungskanal angeordnet sind.
  7. Probenträger nach einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, dass der Entlüftungskanal mehrere Entlüftungsöffnungen aufweist.
  8. Probenträger nach einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, dass der Flüssigkeitskanal eine Bodenfläche aufweist, die weitere Leitkanäle aufweist, wobei die weiteren Leitkanäle so dimensioniert sind, dass der Flüssigkeitstransport in ihnen infolge von Kapillarkräften erfolgt.
  9. Probenträger, dadurch gekennzeichnet, dass die weiteren Leitkanäle zumindest eine Trenneinrichtung aufweisen, die vorzugsweise eine Kamm- oder Siebstruktur enthält.
  10. Probenträger, dadurch gekennzeichnet, dass mindestens ein Leitkanal eine Leitkanalabdeckung aufweist und zwischen Leitkanalwänden und der Leitkanalabdeckung eine Abschrägung vorgesehen ist, wobei die Winkel zwischen Leitkanalabdeckung und Abschrägung und zwischen Abdeckung und Leitkanalwänden größer als 90° sind.
  11. Probenträger, dadurch gekennzeichnet, dass ein Leitkanal in eine Vertiefung mündet und die Tiefe des Leitkanals zur Vertiefung hin zunimmt.
  12. Probenträger, dadurch gekennzeichnet, dass er mindestens eine Vertiefung und einen dort mündenden Entlüftungskanal aufweist, wobei der Übergang zwischen Vertiefung und Entlüftungskanal abgerundet ist.
  13. Probenträger, dadurch gekennzeichnet, dass er einen Entlüftungskanal aufweist, der hydrophobisiert ist.
  14. Probenträger, dadurch gekennzeichnet, dass er Probenaufnahmekammem und Reaktionskammern aufweist und je ein Flüssigkeitsleitkanal direkt von der Probenaufnahmekammer zur Reaktionskammer führt.
  15. Probenträger, dadurch gekennzeichnet, dass er aus Methacrylat und einem Zusatzstoff hergestellt ist, der bei Licht-, vorzugsweise Laserstrahlung aushärtet.
  16. Probenträger, dadurch gekennzeichnet, dass der Grenzwinkel eines Wassertropfens auf einer seiner Oberflächen zwischen 15 und 40° liegt.
  17. Probenträger, dadurch gekennzeichnet, dass Boden, Körper und/oder Deckelung aus unterschiedlichen Materialien hergestellt sind.
  18. Probenträger, dadurch gekennzeichnet, dass der Probenzufluss zu einer Reaktionskammer spritzwinklig ausgebildet ist und der spitzwinklige Zufluss sich vorzugsweise bis zum Bodenbereich der Reaktionskammer erstreckt.
  19. Probenträger, dadurch gekennzeichnet, dass die Reaktionskammer strukturierte Wände aufweist, vorzugsweise mit einer Zickzackstruktur, deren Kanten sich senkrecht erstrecken.
  20. Probenträger, dadurch gekennzeichnet, dass genau diagonal zum Zufluss eine Be- und/oder Entlüftung vorgesehen ist.
EP04019480A 2003-08-19 2004-08-17 Probenträger mit Flüssigkeitskanal Withdrawn EP1508373A3 (de)

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