EP1482907A2 - Composition cosmetique mimant le sebum, et utilisations - Google Patents

Composition cosmetique mimant le sebum, et utilisations

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EP1482907A2
EP1482907A2 EP02796831A EP02796831A EP1482907A2 EP 1482907 A2 EP1482907 A2 EP 1482907A2 EP 02796831 A EP02796831 A EP 02796831A EP 02796831 A EP02796831 A EP 02796831A EP 1482907 A2 EP1482907 A2 EP 1482907A2
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EP
European Patent Office
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sebum
equivalent
skin
composition
acid
Prior art date
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Withdrawn
Application number
EP02796831A
Other languages
German (de)
English (en)
Inventor
Philippe Catroux
Nelly Billoni
José Cotovio
Bruno Buan
Gilles Rubinstenn
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LOreal SA
Original Assignee
LOreal SA
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Filing date
Publication date
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Application filed by LOreal SA filed Critical LOreal SA
Publication of EP1482907A2 publication Critical patent/EP1482907A2/fr
Withdrawn legal-status Critical Current

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    • A61P17/08—Antiseborrheics
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    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
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    • G09—EDUCATION; CRYPTOGRAPHY; DISPLAY; ADVERTISING; SEALS
    • G09B—EDUCATIONAL OR DEMONSTRATION APPLIANCES; APPLIANCES FOR TEACHING, OR COMMUNICATING WITH, THE BLIND, DEAF OR MUTE; MODELS; PLANETARIA; GLOBES; MAPS; DIAGRAMS
    • G09B19/00—Teaching not covered by other main groups of this subclass
    • G09B19/0076—Body hygiene; Dressing; Knot tying

Definitions

  • Cosmetic composition mimicking sebum, and uses.
  • the subject of the invention is a cosmetic composition mimicking sebum, a method of preparation, the use in cosmetics of a cosmetic composition mimicking sebum, the use of a cosmetic composition mimicking sebum for the preparation of an equivalent of skin comprising a sebum equivalent, a skin equivalent comprising a sebum equivalent and the use of a skin equivalent comprising a sebum equivalent.
  • Sebum is a product excreted by the sebaceous glands of the skin of most mammals.
  • the excretion mechanism is a holocrine mechanism by which sebum is deposited on the surface of the skin.
  • One of the roles of sebum is to provide the skin and hair with a hydrophobic coating through the sebaceous canals.
  • human sebum has unique characteristics compared to that of other mammals. In particular, it contains a very small portion of cholesterol derivatives and a large amount of squalene.
  • sebum in some cases (significant photo-oxidative stress, over-proliferation of the bacterial flora 7) is probably a disruptive factor in skin homeostasis, the effects of which are possibly expressed by undesirable side effects in the deep layers of the epidermis. Sebum is particularly present on the face, in the perineal and frontal areas.
  • the subject of the invention is a cosmetic composition mimicking sebum, comprising at least one lipophilic fraction itself comprising at least: from 5% to 20% of squalene, from 50% to 70% of a mixture of triglycerides d linear fatty acids having a chain of 12 to 22 carbon atoms and linear fatty acids having a chain of 12 to 22 carbon atoms, from 15% to 25% of esters of linear fatty acids and fatty alcohols linear having chains of 12 to 22 carbon atoms, from 0.5% to 3% of cholesterol esters, the acid fraction of which comprises a chain of 12 to 22 carbon atoms and from 0% to 5% of cholesterol.
  • the ratio between unsaturated fatty chains and saturated fatty chains is between 10 and 0.1.
  • linear fatty acid functions free or in the form of esters, saturated or unsaturated, having a chain of 12 to 22 carbon atoms, there may be mentioned lauric, myristic, palmitic, stearic, arachidic, docosanoic myristoleic, palmitoleic, oleic acids , linoleic, linolenic, ⁇ -linolenic or even arachidonic.
  • linear, saturated or unsaturated fatty alcohols having a chain of 12 to 22 carbon atoms there may be mentioned lauryl, myristilic, cetyl, stearyl alcohols or also oleilic alcohol.
  • the squalene can be in an amount representing from 12% to 18% of the lipophilic fraction.
  • the mixture of triglycerides linear fatty acids having a chain of 12 to 22 carbon atoms and linear fatty acids having a chain of 12 to 22 carbon atoms may be in an amount representing from 56% to 64% of the lipophilic fraction.
  • esters of linear fatty acids and of linear fatty alcohols having chains of 12 to 22 carbon atoms can be in an amount representing from 19% to 22% of the lipophilic fraction .
  • the cholesterol esters whose acid fraction comprises a chain of 12 to 22 carbon atoms may be in an amount representing from 0% to 1.5% of the lipophilic fraction.
  • the cholesterol can be in an amount representing from 1% to 3% of the lipophilic fraction.
  • the ratio between unsaturated fatty chains and saturated fatty chains is between 5 and 0.2.
  • the subject of the invention is a cosmetic composition mimicking sebum, characterized in that it comprises at least 12% to 18% of squalene, from 0% to 10% of trimyristine, from 0% to 10% of trimyristoline , from 0% to 10% of tripalmitin, from 0% to 10% of tripalmitoline from 0% to 20% of triolein, from 0% to 10% of tristearin, from 0% to 60% glycerol, from 0% to 15% oleic acid, 0% to 10% palmitic acid, 0% to 15% palmitoleic acid, 0% to 10% myristic acid, 0% to 10% myristoleic acid, 5% to 20% of myristyl oleate, 5% to 10% of palmityl oleate, 0.5% to 3% of cholesteryl palmitate and 0% to 5% of cholesterol.
  • squalene from 0% to 10% of trimyristine, from 0% to 10% of trimyristoline , from 0% to 10% of tripalmitin,
  • This lipid composition will be such that the sum of the percentages of the free fatty acid fractions added to the sum of the percentages of the triglyceride fractions will be between 55% and 65%.
  • the ratio between unsaturated fatty chains and saturated fatty chains is between 8 and 0.2.
  • a very particular composition of the invention is a composition which comprises at least 16% of squalene, 8% of tripalmitine, 18% of tripalmitoline, 12% of trioleine, 10% of oleic acid, 7% of palmitoleic acid, 5 % myristoleic acid, 10% myristyl oleate, 10% palmityl oleate, 1% cholesteryl oleate and 3% cholesterol.
  • This cosmetic composition may contain all the active agents, in particular lipophilic agents, capable of improving or modifying the skin condition. More particularly, the composition of the invention can comprise vitamin E at a concentration of between 0.0025% and 0.01% and preferably between 0.001% and 0.1%.
  • Another object of the invention is a process for the preparation of a cosmetic composition as described, comprising a first step of weighing each of the ingredients entering into the composition in a sterile container, opaque to light, previously coated with a coating. non-stick, a second step of replacing the air with an inert gas, a third step of raising the temperature to a temperature between 50 ° C. and 100 ° C, preferably between 80 ° C and a fourth step of maintaining the temperature for a time between 25 to 45 minutes, preferably 30 and 40 minutes, with stirring.
  • the non-stick coating can be obtained by applying a silane product, particularly a solution of dimethyldichlorosilane in 1, 1, 1 tricholoroethane, very particularly dimethyldichlorosilane at a concentration of between 10g / l and 30g. / l, preferably 20 g / l in 1, 1, 1 tricholoroethane.
  • a silane product particularly a solution of dimethyldichlorosilane in 1, 1, 1 tricholoroethane, very particularly dimethyldichlorosilane at a concentration of between 10g / l and 30g. / l, preferably 20 g / l in 1, 1, 1 tricholoroethane.
  • the inert gas used in the preparation process can be chosen from argon, nitrogen, neon, krypton, xenon.
  • argon Preferably we use argon.
  • the subject of the invention is also a cosmetic composition capable of being obtained by the process which has just been described.
  • the subject of the invention is also the use of a cosmetic composition as described for overcoming the unsightly inconveniences associated with a sebum deficit, particularly for treating dry skin.
  • robust solution is meant a solution which would make it possible to eliminate the phenomenon of lateral diffusion without having to systematically verify or verify by a clinical test the lateral diffusion of the constituents of the formula which is intended for the market and be obliged to modify dramatically the composition of this formula if this effect is observed.
  • the invention also relates to the use of a cosmetic composition mimicking sebum, particularly that described above, for controlling the lateral diffusion of cosmetic formulas or active agents.
  • the cosmetic composition mimicking sebum is applied prior to the application of the cosmetic formulas or active agents, in particular on asbogenic (body) or sebogenic areas but cleaned as is the case for example before making up the face.
  • the invention will make it possible to avoid the lateral diffusion of the active agents and pigment contained in makeup products.
  • the invention therefore also relates to a cosmetic method for limiting the lateral diffusion of cosmetic formulations, characterized in that it comprises a step consisting in applying to the skin, the mucous membranes or the scalp, a composition mimicking sebum such as defined above, and a second step consisting in applying the cosmetic formulation to the zone previously treated with the composition mimicking sebum.
  • the cosmetic formulation may in particular be a cosmetic active agent intended to improve the appearance or the condition of the skin, or a makeup product, intended to color or mask parts of the skin covering.
  • the skin equivalents available are characterized by the absence of sebum or sebum equivalent. It would be particularly interesting, to study the phenomena of sebogenesis and in particular comedogenesis, to have a model of skin reconstructed surface with a lipid composition close to sebum.
  • Another object of the invention is the use of a cosmetic composition mimicking sebum, particularly that described above, for the preparation of a skin equivalent comprising a sebum equivalent.
  • compositions mimicking sebum on reconstructed skins in order to obtain physiological or super physiological sebum mimetic rates.
  • the sebum is applied in the form of a composition obtained by dispersion or of an emulsion of a sebum analog as defined above in a physiological liquid, with a dilution of between 1/50 and 3/20, preferably about 1/20; this dilution being adapted by those skilled in the art depending on the desired end result.
  • a composition obtained by dispersion or of an emulsion of a sebum analog as defined above in a physiological liquid with a dilution of between 1/50 and 3/20, preferably about 1/20; this dilution being adapted by those skilled in the art depending on the desired end result.
  • such formulations can be obtained without adding conventional formulation additives in cosmetics, such as surfactants or preservatives.
  • the subject of the invention is therefore the process for preparing the compositions intended to be applied to the skin equivalents.
  • physiological liquid in particular aqueous phases compatible with tissues, such as water, more or less diluted saline solutions such as physiological saline, cell culture and maintenance media, serum, sweat and their mixtures in all proportions.
  • composition obtained by diluting the sebum analog is applied to the reconstructed skin, this application being able to be repeated over time, on a regular basis.
  • the subject of the invention is also a skin equivalent comprising an equivalent of sebum, particularly an equivalent of sebum constituted by the cosmetic composition of the invention.
  • a skin equivalent comprising on its surface, a sebum equivalent at a concentration of between 0 and 600 ⁇ g / cm 2 , preferably greater than or equal to 50 ⁇ g / cm 2 .
  • the final concentration will be adjusted by a person skilled in the art according to the use of the reconstructed epidermis, it will preferably be less than or equal to 400 ⁇ g / cm 2 , in particular less than or equal to 300 ⁇ g cm 2 .
  • the invention also relates to the use of a skin equivalent comprising a sebum equivalent as described above for studying the interactions between the skin tissue, particularly the epidermis and / or the dermis, and the sebum, particularly in the skin homeostasis.
  • the invention also relates to the use of a skin equivalent comprising a sebum equivalent as described above for studying the interactions between the skin tissue, particularly the epidermis and / or the dermis, and the sebum after modification of the latter by different exogenous and / or endogenous environmental factors or to assess the efficacy, penetration or toxicity of raw materials and cosmetic formulations.
  • the Applicant has surprisingly noticed that the repeated treatment of a composition mimicking sebum rich in fatty acids on a reconstructed epidermis model has the effect of gradually thickening the surface layers of the epidermis to the detriment of the deep living layers.
  • the Applicant has been able to show by viability and cell proliferation measures that the effect observed is not due to cytotoxicity.
  • the triglycerides of sebum are transformed into free fatty acids, known for their comedogenic properties. Under these conditions, one observes at the level of the pilosebaceous channel, a hyperproliferation of keratinocytes of the infrainfundibulum associated with a hypercomification.
  • the Applicant notes an analogy between the natural phenomenon of comedogenesis and that induced on an equivalent of skin comprising an equivalent of sebum rich in free fatty acids.
  • the Applicant therefore proposes the use of such a biomimetic sebum, enriched in free fatty acids for the preparation of a reconstructed skin model allowing, in particular the evaluation of new substances or combinations of anti-comedogenic substances.
  • the percentage of free fatty acids present in the composition mimicking sebum is greater than or equal to 40%.
  • the subject of the invention is also the use of a skin equivalent comprising a sebum equivalent as described above to study comedogenesis in the presence or in the absence of cosmetic formulas or active agents.
  • the invention finally relates to a process for preparing a dispersion of the cosmetic composition of the invention, allowing its application both on normal skin and on skin equivalents which comprises a step of dispersing the composition as prepared according to the invention and maintained at a temperature between 50 ° C and 100 ° C, preferably 80 ° C, in a liquid physiological medium, preferably chosen from sweat, physiological saline, a physiological medium containing serum albumin bovine (BSA), skim milk or any other surfactant or a cell culture medium.
  • a liquid physiological medium preferably chosen from sweat, physiological saline, a physiological medium containing serum albumin bovine (BSA), skim milk or any other surfactant or a cell culture medium.
  • a preferred embodiment of the dispersion according to the invention consists in a light opaque flask previously coated with a non-stick coating, to weigh a desired amount of artificial sebum, to add a desired amount of physiological liquid medium, to heat at a temperature between 50 ° C. and 100 ° C, preferably at 80 ° C, for a time between 10 seconds and one minute, preferably 20 seconds, pass the flask through an ultrasonic bath for a time between 10 seconds and 2 minutes, preferably 30 seconds and then shake with a vortex for a time between 5 seconds and one minute, preferably 10 seconds.
  • the desired quantities of artificial sebum and of liquid physiological medium are such that the application of 2 ⁇ l of the dispersion provides the skin with the physiological quantity necessary, namely 10O ⁇ g of sebum.
  • one of the advantages of the invention is to allow the delivery to the skin of a physiological amount of sebum, that is to say for normal skin between 100 to 200 ⁇ g / cm 2 , which, to the knowledge of Applicant is not realized in the solutions proposed by the prior art.
  • the following cosmetic composition mimicking the sebum S1 is produced.
  • the amounts are given as a percentage of the total weight of the composition: squalene 16% tripalmitin 8% tripalmitoline 18% triolein 12% oleic acid 10% palmitoleic acid 7% myristoleic acid 5% myristyl oleate 10% palmityl oleate 10% cholesteryl oleate 1% cholesterol 3%
  • the reconstituted sebum solidifies after 10 minutes at room temperature, so it is necessary to keep it in a water bath at 80 ° C until the dispersion is prepared.
  • the sebum is kept under Argon.
  • Example 2 Preparation of the dispersion: In a previously silanized amber flask, 10 mg of artificial sebum S1 of Example 1 are weighed, then 200 ⁇ l of DMEM / F12 culture medium 1: 1 is added (Eagle medium modified by Dulbecco / Mixture nutrient-F12). The flask is then heated in a water bath at 80 ° C for 20 seconds, and then passed into an ultrasonic bath for 30 seconds and finally stirred with a vortex for 10 seconds.
  • DMEM / F12 culture medium 1: 1 is added (Eagle medium modified by Dulbecco / Mixture nutrient-F12).
  • the desired amount of artificial sebum S1 can then be applied to the skin (normal or artificial) by spreading using a spatula.
  • the dispersed form has the advantage of allowing the application of physiological amount of artificial sebum, ie between 100 to 200 ⁇ g / cm 2 .
  • the effect of diffusion of the formulas is estimated on the forearm of voluntary subjects.
  • the formulas are applied up to 2mg.cm "1.
  • the application surface is a rectangle of 4cm by 7cm (28cm 2 are therefore treated) whose length is positioned in the axis of the arm.
  • the strip stripping method (Wigman, H. et al., (1999) Skin Pharmacopoeia. Apple. Skin Physiol. 12, 46-53.5) is evaluated, the residual amount of butylmethoxydibenzoylmethane in the central part and the part which has migrated more 3mm from the edges of the rectangle.
  • compositions of formulas I and II The quantities are given as a percentage by weight of the total weight of the composition
  • Example 4 Effect of the pre-treatment with the sebum S1 of Example 1 on the lateral diffusion of the formula II:
  • Example 3 The protocol of Example 3 is repeated with formula II. 1 hour before the application of formula II, a suspension of sebum S1 from Example 1 at 5% in an aqueous 0.9% NaCl solution is applied to the right forearm (forearm left as a witness), so that a measurement at sebumeter (MONADERM TM) indicates an application of 200 ⁇ g.cm "2.
  • the surface of application of sebum S1 is a rectangle whose center is identical to that of application of the formulas (example 3) and whose length and width are 2 cm higher than the latter (i.e. a 6 x 7 cm rectangle).
  • the amount of sebum S1 actually applied in this example ( ⁇ 200 ⁇ g.cm '2 ) is analogous to the amount of sebum naturally found on the surface of the face (anatomical area, naturally seborrheic) of individuals with normally oily skin. This does not mean, however, that individuals with oily skin would not be affected by the phenomenon of lateral diffusion since facial care products are, in general, applied to a clean and therefore defatted face.
  • Epskin® compositions progressively enriched in free fatty acids, to obtain a comedogenesis model.
  • the figure in the appendix shows the changes in the proliferation / differentiation balance on day 13.
  • the thickening of the epidermis is observed from a sebum composition comprising 40% fatty acids.
  • morphological change induced in vitro presents an analogy with the natural phenomenon of comedogenesis.
  • a hyperproliferation of the keratinocytes of the infrainfundibulum associated with hypercomification is observed in the pilosebaceous canal.

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Abstract

L'invention a pour objet une composition cosmétique mimant le sébum, un procédé de préparation, l'utilisation en cosmétique d'une composition cosmétique mimant le sébum, l'utilisation d'une composition cosmétique mimant le sébum pour la préparation d'un équivalent de peau comprenant un équivalent de sébum, un équivalent de peau comprenant un équivalent de sébum et l'utilisation d'un équivalent de peau comprenant un équivalent de sébum.

Description

Composition cosmétique mimant le sébum, et utilisations.
L'invention a pour objet une composition cosmétique mimant le sébum, un procédé de préparation, l'utilisation en cosmétique d'une composition cosmétique mimant le sébum, l'utilisation d'une composition cosmétique mimant le sébum pour la préparation d'un équivalent de peau comprenant un équivalent de sébum, un équivalent de peau comprenant un équivalent de sébum et l'utilisation d'un équivalent de peau comprenant un équivalent de sébum.
Le sébum est un produit excrété par les glandes sébacées de la peau de la plupart des mammifères. Le mécanisme d'excrétion est un mécanisme holocrine par lequel le sébum est déposé à la surface de la peau. Un des rôles du sébum est de fournir à la peau et aux cheveux un revêtement hydrophobique au travers des canaux sébacés. Par ailleurs, le sébum humain présente des caractéristiques uniques par rapport à celui des autres mammifères. En particulier, il contient une portion très réduite de dérivés de cholestérol et une quantité importante de squalène.
On connaît l'importance du sébum dans l'homéostasie du tissu cutané : les parties du corps humain déficientes en sébum (plantes des pieds et paumes des mains) révèlent une morphologie et une esthétique de surface de la peau profondément différentes de celle du reste du corps. De même, dans le domaine du soin de la peau, il apparaît que certains désagréments inesthétiques
(peaux sèches) ainsi que des désordres dermatologiques importants (photovieillissement prématuré) peuvent être attribués à l'absence ou à l'insuffisance de sébum à la surface cutanée. Cependant, le sébum dans certains cas, (stress photo-oxydatif important, surprolifération de la flore bactérienne...) est vraisemblablement un facteur perturbateur de l'homéostasie cutanée dont les effets se traduisent éventuellement par des effets secondaires indésirables au niveau des couches profondes de l'épiderme. Le sébum est particulièrement présent au niveau du visage, dans les zones périnasales et frontales.
Il est donc nécessaire et toujours intéressant de pouvoir disposer d'une composition cosmétique mimant le sébum afin de pouvoir traiter les conséquences d'un déficit en sébum naturel.
Par ailleurs, dans le domaine des équivalents de peau, à ce jour aucun modèle n'inclut d'équivalent de glande sébacée et dès lors tous les modèles existants présentent une absence totale de sébum.
Il s'avère là encore intéressant de pouvoir disposer d'une composition cosmétique mimant le sébum afin de pouvoir l'appliquer sur un équivalent de peau et ainsi obtenir un équivalent de peau comprenant du sébum, équivalent de peau qui sera encore plus proche de la peau normale que les équivalents actuellement disponibles.
C'est pour répondre entres autres à ces besoins que la demanderesse a mis au point une composition cosmétique mimant le sébum.
Ainsi, l'invention a pour objet une composition cosmétique mimant le sébum, comprenant au moins une fraction lipophile comprenant elle-même au moins : de 5% à 20% de squalène, de 50% à 70% d'un mélange de triglycérides d'acides gras linéaires ayant une chaîne de 12 à 22 atomes de carbones et d'acides gras linéaires ayant une chaîne de 12 à 22 atomes de carbones, de 15% à 25% d'esters d'acides gras linéaires et d'alcools gras linéaires ayant des chaînes de 12 à 22 atomes de carbones, de 0,5% à 3% d'esters de cholestérol dont la fraction acide comprend une chaîne de 12 à 22 atomes de carbones et de 0% à 5% de cholestérol. étant entendu que le ratio entre chaînes grasses insaturées et chaînes grasses saturées est compris entre 10 et 0,1.
Comme fonctions acides gras linéaires, libres ou sous forme d'esters, saturés ou insaturés, ayant une chaîne de 12 à 22 atomes de carbones, on peut citer les acides laurique, myristique, palmitique, stéarique, arachidique, docosanoïque myristoléique, palmitoléique, oléique, linoléique, linolénique, γ-linolénique ou encore arachidonique.
Comme alcools gras linéaires, saturés ou insaturés, ayant une chaîne de 12 à 22 atomes de carbones, on peut citer les alcools laurylique, myristilique, cétylique, stéarylique ou encore l'alcool oléilique.
Selon une forme particulière de l'invention, le squalène peut être en une quantité représentant de 12% à 18% de la fraction lipophile.
Selon une autre forme particulière de l'invention, le mélange de triglycérides d'acides gras linéaires ayant une chaîne de 12 à 22 atomes de carbones et d'acides gras linéaires ayant une chaîne de 12 à 22 atomes de carbones, peut être en une quantité représentant de 56% à 64% de la fraction lipophile.
Selon encore une autre forme de l'invention encore, les esters d'acides gras linéaires et d'alcools gras linéaires ayant des chaînes de 12 à 22 atomes de carbones peuvent être en une quantité représentant de 19% à 22% de la fraction lipophile.
Toujours selon l'invention, les esters de cholestérol dont la fraction acide comprend une chaîne de 12 à 22 atomes de carbones peuvent être en une quantité représentant de 0% à 1 ,5% de la fraction lipophile.
Enfin selon l'invention, le cholestérol peut être en une quantité représentant de 1 % à 3% de la fraction lipophile.
Préférentiellement selon l'invention, le ratio entre chaînes grasses insaturées et chaînes grasses saturées est compris entre 5 et 0,2.
Plus particulièrement l'invention a pour objet une composition cosmétique mimant le sébum, caractérisée en ce qu'elle comprend au moins de 12% à 18% de squalène, de 0% à 10% de trimyristine, de 0% à 10% de trimyristoléine, de 0% à 10% de tripalmitine, de 0% à 10% de tripalmitoléine de 0% à 20% de trioléine, de 0% à 10% de tristéarine, de 0% à 60% glycérol, de 0% à 15% d'acide oléique, de 0% à 10% d'acide palmitique, de 0% à 15% d'acide palmitoléique, de 0% à 10% d'acide myristique, de 0% à 10% d'acide myristoléique, de 5% à 20% de myristyl oléate, de 5% à 10% de palmityl oléate, de 0,5% à 3% de cholestéryl palmitate et de 0% à 5% de cholestérol. Cette composition lipidique sera telle que la somme des pourcentages des fractions acides gras libres additionnée de la somme des pourcentages des fractions triglycérides sera comprise 55% et 65%. De plus le ratio entre chaînes grasses insaturées et chaînes grasses saturées est compris entre 8 et 0,2.
Une composition très particulière de l'invention est une composition qui comprend au moins 16% de squalène, 8% de tripalmitine, 18% de tripalmitoléine, 12% de trioléine, 10% d'acide oléique, 7% d'acide palmitoléique, 5% d'acide myristoléique, 10% de myristyl oléate, 10% de palmityl oléate, 1% de cholestéryl oléate et 3% de cholestérol. Cette composition cosmétique pourra contenir tous les actifs, en particulier lipophiles, susceptibles d'améliorer ou de modifier la condition cutanée. Plus particulièrement, la composition de l'invention peut comprendre de la vitamine E à une concentration comprise entre 0.0025% et 0.01% et de préférence entre 0.001% et 0.1%.
Un autre objet de l'invention est un procédé de préparation d'une composition cosmétique telle que décrite comprenant une première étape de pesage de chacun des ingrédients entrant dans la composition dans un récipient stérile, opaque à la lumière, préalablement enduit d'un revêtement anti-adhérent, une deuxième étape de remplacement de l'air par Un gaz inerte, une troisième étape d'élévation de la température à une température comprise entre 50°C. et 100°C, préférentieller ent 80°C et une quatrième étape de maintient de la température pendant un temps compris entre 25 à 45 minutes, preferentiellement 30 et 40 minutes, sous agitation.
Preferentiellement selon l'invention, le revêtement anti-adhérent peut être obtenu par application d'un produit silané, particulièrement une solution de dimethyldichlorosilane dans du 1 ,1 ,1 tricholoroethane, très particulièrement du dimethyldichlorosilane à une concentration comprise entre 10g/l et 30g/l, preferentiellement à 20 g/l dans du 1 ,1 ,1 tricholoroethane.
Selon l'invention, le gaz inerte utilisé dans le procédé de préparation peut être choisi parmi l'argon, l'azote, néon, krypton, xénon. Preferentiellement on utilise de l'argon.
L'invention a encore pour objet une composition cosmétique susceptible d'être obtenue par le procédé qui vient d'être décrit.
L'invention a également pour objet l'utilisation d'une composition cosmétique telle que décrite pour palier les désagréments inesthétiques liés à un déficit en sébum, particulièrement pour traiter la peau sèche.
La demanderesse a remarqué que, de façon surprenante, le prétraitement par une composition dont la phase grasse mime les propriétés, chimiques et rhéologiques du sébum humain, inhibait de façon quasi complète l'effet de diffusion latérale des formules cosmétiques. La diffusion transversale des actifs et/ou composants des formules appliquées topiquement, au travers de l'épiderme humain a fait l'objet d'études nombreuses par le passé.
Moins connue, mais néanmoins étudiée, est la capacité de l'organisation superficielle de là couche cornée à générer une diffusion latérale des molécules. Les ordres de grandeur (distance et vitesse) classiquement décrits pour ce phénomène sont cependant très réduits.
Des travaux récents ont remis le caractère limité de cette diffusion latérale en cause et montré, dans le cas du clobétasol, que des quantités importantes d'actifs pouvaient être retrouvées, assez rapidement, à des distances macroscopiques du point d'application.
Pour l'homme de l'art, il s'agit d'un phénomène qui peut se révéler gênant dans le cas, où l'on souhaite cibler un actif (rides front et patte d'oie, traitement des taches pigmentaires, soins corps ciblés type amincissant, filtre solaire à haute capacité dans les zones fortement exposées) pour une efficacité maximale.
Pour résoudre ce problème, il n'existe pas de solution robuste répertoriée.
Par solution robuste, on entend une solution qui permettrait d'éliminer le phénomène de diffusion latérale sans devoir ni vérifier systématiquement par un test clinique la diffusion latérale des constituants de la formule que l'on destine au marché et être dans l'obligation de modifier dramatiquement la composition de cette formule si cet effet est observé.
De ce qui précède, il est clair qu'une solution simple et aisée à mettre en œuvre pour s'affranchir de l'effet de diffusion latérale serait hautement souhaitable.
Or la demanderesse a pu montrer que la composition cosmétique mimant le sébum de l'invention a pour effet de limiter la diffusion latérale des formules ou actifs cosmétiques.
Ainsi, l'invention se rapporte également à l'utilisation d'une composition cosmétique mimant le sébum, particulièrement celle décrite précédemment, pour contrôler la diffusion latérale des formules ou actifs cosmétiques.
Preferentiellement, la composition cosmétique mimant le sébum est appliquée préalablement à l'application des formules ou actifs cosmétiques, en particulier sur des zones asébogènes (corps) ou sébogène mais nettoyées comme cela est le cas par exemple avant le maquillage du visage. Dans ce cas particulier l'invention permettra d'éviter la diffusion latérale des actifs et pigment contenu dans les produits de maquillage.
L'invention a donc également pour objet un procédé cosmétique pour limiter la diffusion latérale des formulations cosmétiques, caractérisé en ce qu'il comprend une étape consistant à appliquer sur la peau, les muqueuses ou le cuir chevelu, une composition mimant le sébum telle que définie précédemment, et une seconde étape consistant à appliquer la formulation cosmétique sur la zone préalablement traitée par la composition mimant le sébum. La formulation cosmétique peut notamment être un actif cosmétique destiné à améliorer l'aspect ou l'état de la peau, ou un produit de maquillage, destiné à colorer ou à masquer des parties du revêtement cutané.
Comme on l'a vu précédemment, les équivalents de peau disponibles se caractérisent par l'absence de sébum ou d'équivalent de sébum. Il serait particulièrement intéressant, pour étudier les phénomènes de sébogénèse et en particulier de comédogénèse, de disposer d'un modèle de peau reconstruite surface avec une composition lipidique proche du sébum.
Un autre objet de l'invention est l'utilisation d'une composition cosmétique mimant le sébum, particulièrement celle décrite précédemment, pour la préparation d'un équivalent de peau comprenant un équivalent de sébum.
En effet, de manière inattendue, la demanderesse a trouvé qu'il est possible d'appliquer des compositions mimant le sébum sur des peaux reconstruites pour obtenir des taux de mimétique de sébum physiologiques ou supra physiologiques.
Avantageusement, on applique le sébum sous forme d'une composition obtenue par dispersion ou d'une émulsion d'un analogue de sébum tel que défini précédemment dans un liquide physiologique, avec une dilution comprise entre 1/50 et 3/20, de préférence d'environ 1/20; cette dilution étant adapté par l'homme du métier en fonction du résultat final recherché. En effet, de telles formulations peuvent être obtenues sans adjonction des additifs de formulation classiques en cosmétique, tels que les tensio-actifs ou les conservateurs. L'invention a donc pour objet le procédé de préparation des compositions destinées à être appliquées sur les équivalents de peau.
Par liquide physiologique on entend en particulier des phases aqueuses compatibles avec les tissus, telles que l'eau, les solutions salines plus ou moins diluées comme le sérum physiologique, les milieux de culture et de maintenance cellulaire, le sérum, la sueur et leurs mélanges en toutes proportions.
La composition obtenue par dilution de l'analogue de sébum est appliquée sur la peau reconstruite, cette application pouvant être répétée dans le temps, de manière régulière.
L'invention a aussi pour objet un équivalent de peau comprenant un équivalent de sébum, particulièrement un équivalent de sébum constitué par la composition cosmétique de l'invention.
Plus particulièrement elle a pour objet un équivalent de peau comprenant à sa surface, un équivalent de sébum à une concentration comprise entre 0 et 600 μg/cm2, de préférence supérieur ou égal à 50 μg/cm2.
La concentration finale sera ajustée par l'homme du métier selon l'utilisation de l'épiderme reconstruit, elle sera de préférence inférieure ou égale à 400 μg/cm2, notamment inférieur ou égale à 300 μg cm2 .
L'invention concerne aussi l'utilisation d'un équivalent de peau comprenant un équivalent de sébum tel que décrit précédemment pour étudier les interactions entre le tissu cutané, particulièrement l'épiderme et/ou le derme, et le sébum, particulièrement dans l'homéostasie cutanée.
L'invention concerne aussi l'utilisation d'un équivalent de peau comprenant un équivalent de sébum tel que décrit précédemment pour étudier les interactions entre le tissu cutané, particulièrement l'épiderme et ou le derme, et le sébum après modification de ce dernier par différents facteurs environnementaux exogènes et /ou endogènes ou encore pour évaluer l'efficacité, la pénétration ou la toxicité de matières premières et de formulations cosmétiques.
La demanderesse a remarqué de façon surprenante que le traitement répété d'une composition mimant le sébum riche en acides gras sur un modèle d'épiderme reconstruit a pour effet d'épaissir progressivement les couches superficielles de l'épiderme au détriment des couches vivantes profondes. La demanderesse a pu montrer par des mesures de viabilité et de prolifération cellulaire que l'effet observé n'est pas dû à une cytotoxicité. Or en présence d'une forte activité bactérienne, les triglycérides du sébum sont transformés en acides gras libres, connus pour leurs propriétés comédogènes. Dans ces conditions, on observe au niveau du canal pilo-sébacé, une hyperprolifération des kératinocytes de l'infrainfundibulum associée à une hypercomification. La demanderesse constate une analogie entre le phénomène naturel de comédogénèse et celui induit sur un équivalent de peau comprenant un équivalent de sébum riche en acides gras libres.
La demanderesse propose donc l'utilisation d'un tel sébum biomimétique, enrichi en acides gras libres pour la préparation d'un modèle de peau reconstruite permettant, en particulier l'évaluation de nouvelles substances ou combinaisons de substance anti-comédogènes.
De préférence, dans ces applications, le pourcentage d'acides gras libres présents dans la composition mimant le sébum est supérieur ou égal à 40%.
L'invention a aussi pour objet l'utilisation d'un équivalent de peau comprenant un équivalent de sébum tel que décrit précédemment pour étudier la comédogénèse en présence ou en l'absence de formules ou actifs cosmétiques.
L'invention a enfin pour objet un procédé de préparation d'une dispersion de la composition cosmétique de l'invention, permettant son application tant sur la peau normale que sur les équivalents de peau qui comprend une étape de dispersion de la composition telle que préparée selon l'invention et maintenue à une température comprise entre 50°C et 100°C, preferentiellement 80°C, dans un milieu physiologique liquide, preferentiellement choisi parmi la sueur, le sérum physiologique, un milieu physiologique contenant de l'albumine de sérum bovin (BSA), du lait écrémé ou tout autre surfactant ou encore un milieu de culture cellulaire.
Un mode de réalisation préféré de la dispersion selon l'invention consiste dans une fiole opaque à la lumière préalablement enduite d'un revêtement antiadhérent, à peser une quantité désirée de sébum artificiel, de lui ajouter une quantité désirée de milieu physiologique liquide, de chauffer à une température comprise entre 50°C. et 100°C, preferentiellement à 80°C, pendant un temps compris entre 10 secondes et une minute, preferentiellement 20 secondes, passer la fiole dans un bain à ultrasons pendant un temps compris entre 10 secondes et 2 minutes, preferentiellement 30 secondes puis agiter avec un vortex pendant un temps compris entre 5 secondes et une minute, preferentiellement 10 secondes.
Preferentiellement selon l'invention les quantités désirées de sébum artificiel et de milieu physiologique liquide sont telles que l'application de 2μl de la dispersion apporte à la peau la quantité physiologique nécessaire à savoir 10Oμg de sébum.
En effet, un des avantages de l'invention est de permettre la délivrance sur la peau d'une quantité physiologique de sébum c'est à dire pour une peau normale entre 100 à 200 μg/cm2, ce qui à la connaissance de la demanderesse n'est pas réalisé dans les solutions proposées par l'art antérieur.
Les exemples suivants illustrent l'invention sans la limiter aucunement. Dans ces exemples on se référera à la figure en annexe, représentant l'influence de la qualité du sébum sur un modèle Episkin.
Exemple 1 : formulation du sébum :
La composition cosmétique mimant le sébum S1 suivante est réalisée. Les quantités sont données en pourcentage du poids total de la composition : squalène 16% tripalmitine 8% tripalmitoléine 18% trioléine 12% acide oléique 10% acide palmitoléique 7% acide myristoléique 5% myristyl oléate 10% palmityl oléate 10% cholestéryl oléate 1% cholestérol 3%
Dans une fiole en verre ambré à vis préalablement silanisée (Repel Silane, Dimethyldichlorosilane solution, 20g/l in 1 ,1 ,1 ,-trichloroethane, Pharmacia Biotech No 17-1331-01) et autoclavee, peser les différents ingrédients entrant dans la composition du sébum S1 , ajouter un barreau aimanté et remplir la fiole avec un gaz inerte de type argon pour éviter toute peroxydation des ingrédients à l'air. Placer le sébum dans un bain chauffant à 80°C et sous agitation pendant 30 à 40 minutes jusqu'à l'obtention d'un liquide parfaitement limpide.
Précautions:
Le sébum reconstitué se solidifie après 10 minutes à température ambiante, il est donc nécessaire de le maintenir dans un bain-marie à 80°C jusqu'à la préparation de la dispersion. Le sébum est conservé sous Argon.
Exemple 2 : préparation de la dispersion : Dans une fiole ambrée préalablement silanisee on pèse 10mg de sébum artificiel S1 de l'exemple 1 , puis on ajoute 200μl de milieu de culture DMEM/F12 1 :1 (Milieu de Eagle modifié par Dulbecco/Mélange nutritif-F12). La fiole est alors chauffée au bain-marie à 80°C pendant 20 secondes, et puis passée dans un bain à ultrasons pendant 30 secondes et enfin agitée avec un vortex pendant 10 secondes.
La quantité désirée de sébum artificiel S1 peut alors être appliqué sur la peau (normale ou artificielle) par étalement à l'aide d'une spatule.
La forme dispersée présente l'avantage de permettre l'application de quantité physiologique de sébum artificiel soit entre 100 à 200 μg/cm2.
Exemple 3 : Effet de diffusion latérale pour deux formules cosmétiques :
L'effet de diffusion des formules est estimé sur l'avant-bras de sujets volontaires. Les formules sont appliquées à hauteur de 2mg.cm"1. La surface d'application est un rectangle de 4cm par 7cm (28cm2 sont donc traités) dont la longueur est positionnée dans l'axe du bras. Au bout de 1 heure, on évalue par la méthode du tape stripping (Wigman, H. et collaborateurs, (1999) Skin Pharmacopée. Apple. Skin Physiol. 12, 46-53.5), la quantité résiduelle de butylméthoxydibenzoylmethane dans la partie centrale et la partie ayant migré à plus de 3mm des bords du rectangle.
Résultat : sur l'avant-bras traité, on retrouve, en moyenne 82% du butylméthoxydibenzoylmethane appliqué dans la partie centrale pour la formule I et 69% pour la formule II. Parallèlement, la quantité de butyl methoxydibenzoylmethane pouvant être prélevée sur l'extrémité supérieure ou inférieure du rectangle (par rapport au bras) sur des surfaces de 1 ,9cm x 4 cm, placées à 3mm de la zone d'application est 0,8% pour la formule I et 7,6% pour la formule II.
Compositions des formules I et II : Les quantités sont données en pourcentage en poids du poids total de la composition
Formules I II
PEG-100 Stéarate 0,75 0,75
Glyceryl Stéarate 0,75 0,75
Palmitic Acid 1 ,21 1 ,21
Myristyc Acid 0,0825 0,0825
Stearic Acid 1 ,4575 1 ,4575
Cetyl Alcohol 0,5 0,5
Dimethicone 0,5 0,5
C12-15 Alkyl Benzoate 8,5 20,0
Butyl Methoxydibenzoylmethane 3,72 3,72
Methylparaben 0,174 0,174
Butylparaben 0,042 0,042
Propylparaben 0,021 0,021
Isobutylparaben 0,021 0,021
Phénoxyéthanol 0,7 0,7
Ethylparaben 0,042 0,042
Triéthanolamine 0,45 0,45
Glycérine 5,0 5,0
Potassium Cetyl Phosphate 1 ,0 1 ,0
Carbomer 0,3 0,3
Octocrylene 10,0 -
Eau QSP QSP
100 % 100 %
Exemple 4 : Effet du pré-traitement par le sébum S1 de l'exemple 1 sur la diffusion latérale de la formule II :
Le protocole de l'exemple 3 est repris avec la formule II. 1 heure avant l'application de la formule II, une suspension de sébum S1 dé l'exemple 1 à 5% dans une solution aqueuse à 0,9% de NaCI est appliquée sur l'avant-bras droit (l'avant-bras gauche servant de témoin), de telle sorte qu'une mesure au sébumètre (MONADERM™) indique une application de 200μg.cm"2. La surface d'application du sébum S1 est un rectangle dont le centre est identique à celui d'application des formules (exemple 3) et dont la longueur et la largeur sont supérieures de 2 cm à ce dernier (soit un rectangle de 6 x 7 cm).
Résultats : dans ces conditions, sur l'avant-bras pré-traité par le sébum S1 , la quantité de butylméthoxydibenzoylmethane retrouvée dans la partie centrale est de 94% (par rapport à 69% sans prétraitement) et la quantité de butylméthoxydibenzoylmethane pouvant être prélevée sur l'extrémité supérieure ou inférieure du rectangle (par rapport au bras) sur des surface de 1 ,9cm x 4 cm, placées à 3mm de la zone d'application est abaissée à 0,7% (comparé à 7,6%).
On notera que la quantité de sébum S1 réellement appliquée dans cet exemple (≈200μg.cm'2) est analogue à la quantité de sébum naturellement retrouvée à la surface du visage (zone anatomique, naturellement séborrhéique) des individus à la peau normalement grasse. Ceci ne veut pas dire néanmoins que les individus à la peau grasse ne seraient pas concernés par le phénomène de diffusion latérale car les produits de soins visage sont, en général appliqués sur un visage propre et donc délipidé.
Exemple 5: influence de la qualité du sébum sur un modèle de peau reconstruite
On applique sur un modèle de peau reconstruite Epskin®des compositions enrichies progressivement en acides gras libres, pour obtenir un modèle de comédogénèse.
La figure en annexe montre les modifications de l'équilibre prolifération /différenciation au jour 13.
Ces photos illustrent les différences de morphologies que présente un modèle de peau reconstruite (Episkin®) enrichi progressivement en acides gras libres ((de 0% d'acides gras (photo extrémité gauche) à 60% d'acides gras libres (photo extrémité droite)) et appauvri progressivement en triglycérides (de 60% à 0%). Le sébum riche en triglycérides favorise le maintien et l'apparition de la couche granuleuse, le sébum riche en acides gras entraine l'épaississement du stratum corneum. Le traitement répété d'une composition mimant le sébum riche en acides gras a pour effet d'épaissir progressivement les couches superficielles de l'épiderme au détriment des couches vivantes profondes. L'épaississement de l'épiderme est observé à partir d'une composition de sébum comprenant 40% d'acides gras. Ce changement morphologique induit in vitro présente une analogie avec le phénomène naturel de comédogénèse. In vivo, on observe au niveau du canal pilo-sébacé, une hyperproliferation des keratinocytes de l'infrainfundibulum associé à une hypercomification

Claims

REVENDICATIONS
1. Composition cosmétique mimant le sébum, comprenant au moins une fraction lipophile comprenant elle-même au moins : de 5% à 20% de squalène, de 50% à 70% d'un mélange de triglycérides d'acides gras linéaires ayant une chaîne de 12 à 22 atomes de carbones et d'acides gras linéaires ayant une chaîne de 12 à 22 atomes de carbones, de 15% à 25% d'esters d'acides gras linéaires et d'alcools gras linéaires ayant des chaînes de 12 à 22 atomes de carbones, de 0,5% à 3% d'esters de cholestérol dont la fraction acide comprend une chaîne de 12 à 22 atomes de carbones et de 0% à 5% de cholestérol. étant entendu que le ratio entre chaînes grasses insaturées et chaînes grasses saturées est compris entrel 0 et 0,1.
2. Composition selon la revendication précédente, caractérisée en ce que le squalène est en une quantité représentant de 12% à 18% de la fraction lipophile.
3. Composition selon l'une quelconque des revendications 1 ou 2, caractérisée en ce que le mélange de triglycérides d'acides gras linéaires ayant une chaîne de 12 à 22 atomes de carbones et d'acides gras linéaires ayant une chaîne de 12 à 22 atomes de carbones, sont en une quantité représentant de 56% à 64% de la fraction lipophile.
4. Composition selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, caractérisée en ce que les esters d'acides gras linéaires et d'alcools gras linéaires ayant des chaînes de 12 à 22 atomes de carbones sont en une quantité représentant de 19% à 22% de la fraction lipophile.
5. Composition selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, caractérisée en ce que les esters de cholestérol dont la fraction acide comprend une chaîne de 12 à 22 atomes de carbones sont en une quantité représentant de 0% à 1 ,5% de la fraction lipophile.
6. Composition selon l'une quelconque des revendications 1 à 5, caractérisée en ce que le cholestérol est en une quantité représentant de 1 % à 3% de la fraction lipophile.
7. Composition selon l'une quelconque des revendications 1 à 6, caractérisée en ce que le ratio entre chaînes grasses insaturées et chaînes grasses saturées est compris entre 5 et 0,2.
8. Composition cosmétique mimant le sébum, caractérisée en ce qu'elle comprend au moins de 12% à 18% de squalène, de 0% à 10% de trimyristine, de 0% à 10% de trimyristoléine, de 0% à 10% de tripalmitine, de 0% à 10% de tripalmitoléine de 0% à 20% de trioléine, de 0% à 60% de glycérol, de 0% à 10% de tristéarine, de 0% à 15% d'acide oléique, de 0% à 10% d'acide palmitique, de 0% à 15%> d'acide palmitoléique, de 0% à 10% d'acide myristique, de 0% à 10% d'acide myristoléique, de 5% à 20% de myristyl oléate, de 5% à 10% de palmityl oléate, de 0,5% à 3% de cholestéryl palmitate et de 0% à 5% de cholestérol, étant entendu que la somme des pourcentages des fractions acides gras libres additionnée de la somme des pourcentages des fractions triglycérides sera comprise 55% et 65% et que le ratio entre chaînes grasses insaturées et chaînes grasses saturées est compris entre 8 et 0,2.
9. Composition cosmétique mimant le sébum, caractérisée en ce qu'elle comprend au moins 16% de squalène, 8% de tripalmitine, 18% de tripalmitoléine, 12% de trioléine, 10% d'acide oléique, 7% d'acide palmitoléique, 5% d'acide myristoléique, 10% de myristyl oléate, 10% de palmityl oléate, 1% de cholestéryl oléate et 3% de cholestérol.
10. Composition cosmétique mimant le sébum selon l'une quelconque des revendications 1 à 9, caractérisée en ce qu'elle comprend en outre de la vitamine E à une concentration comprise entre 0.0025% et 0.01% et de préférence entre 0.001% et 0.1%.
11. Procédé de préparation d'une composition cosmétique telle que décrite dans l'une quelconque des revendications 1 à 10, comprenant une première étape de pesage de chacun des ingrédients entrant dans la composition dans un récipient •stérile, opaque à la lumière, préalablement enduit d'un revêtement anti-adhérent, une deuxième étape de remplacement de l'air par un gaz inerte, une troisième étape d'élévation de la température à une température comprise 50°C. et 100°C, preferentiellement 80°C. et une quatrième étape de maintient de la température pendant un temps compris entre 25 à 45 minutes, preferentiellement 30 et 40 minutes, sous agitation.
12. Procédé selon la revendication 11 , le gaz inerte est choisi parmi l'argon, l'azote, néon, krypton, xénon.
13. Procédé selon la revendication précédente, caractérisé en ce que la gaz inerte est de l'argon.
14. Composition cosmétique selon l'une quelconque des revendications 1 à 10 susceptible d'être obtenue par le procédé de l'une quelconque des revendications 11 à 13.
15. Utilisation d'une composition selon l'une quelconque des revendications 1 à 10 et 14 pour palier les désagréments inesthétiques liés à un déficit en sébum.
16. Utilisation selon la revendication précédente pour traiter la peau sèche.
17. Utilisation d'une composition selon l'une quelconque des revendications 1 à 10 et 14 pour contrôler la diffusion latérale des formules ou actifs cosmétiques.
18. Utilisation selon la revendication précédente, caractérisée en ce que la composition est appliquée préalablement à l'application des formules ou actifs cosmétiques.
19. Utilisation d'une composition telle que décrite dans l'une quelconque des revendications 1 à 10 et 14 pour la préparation d'un équivalent de peau comprenant un équivalent de sébum.
20. Equivalent de peau comprenant un équivalent de sébum.
21. Equivalent de peau selon la revendication précédente, caractérisée en ce que l'équivalent de sébum est une composition cosmétique telle que décrite dans l'une quelconque des revendications 1 à 10 et 14.
22. Utilisation d'un équivalent de peau comprenant un équivalent de sébum pour étudier les interactions entre le sébum, l'épiderme et ou le derme, particulièrement dans l'homéostasie cutanée.
23. Utilisation d'un équivalent de peau comprenant un équivalent de sébum pour étudier les interactions entre le tissu cutané,' particulièrement l'épiderme et/ou le derme, et le sébum après modification de ce dernier par différents facteurs environnementaux exogènes et /ou endogènes.
24. Utilisation d'un équivalent de peau comprenant un équivalent de sébum pour évaluer l'efficacité, la pénétration ou la toxicité de matières premières et de formulations cosmétiques.
25. Utilisation d'un équivalent de peau comprenant un équivalent de sébum pour étudier la comédogénèse en présence ou en l'absence de formules ou actifs cosmétiques.
26. Procédé de préparation d'une dispersion de la composition cosmétique de l'invention comprenant une étape de dispersion de la composition telle que préparée selon l'invention et son maintien à une température comprise entre 50°C et 100°C, preferentiellement 80°C, dans un milieu physiologique liquide.
27. Procédé selon la revendication 26, caractérisé en ce que le milieu physiologique liquide est choisi parmi la sueur, le sérum physiologique, ou encore un milieu de culture cellulaire.
28. Procédé selon l'une quelconque des revendications 26 ou27, caractérisé en ce que les quantités désirées de sébum artificiel et de milieu physiologique liquide sont telles que l'application de 2μl de la dispersion apporte à la peau la quantité physiologique nécessaire à savoir 100μg de sébum.
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