EP1425256A1 - Procede de preparation des hydroxy-acides gras insatures et de leurs esters, leur utilisation dans des preparations pharmaceutiques et/ou cosmetiques - Google Patents

Procede de preparation des hydroxy-acides gras insatures et de leurs esters, leur utilisation dans des preparations pharmaceutiques et/ou cosmetiques

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EP1425256A1
EP1425256A1 EP02798004A EP02798004A EP1425256A1 EP 1425256 A1 EP1425256 A1 EP 1425256A1 EP 02798004 A EP02798004 A EP 02798004A EP 02798004 A EP02798004 A EP 02798004A EP 1425256 A1 EP1425256 A1 EP 1425256A1
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EP
European Patent Office
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preparation
formula
product
hydroxy
collagen
Prior art date
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Withdrawn
Application number
EP02798004A
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German (de)
English (en)
Inventor
Pierre Potier
Françoise PICOT
Jean-Louis Brayer
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PHARMAMENS
Original Assignee
Individual
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Publication date
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Withdrawn legal-status Critical Current

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    • C07C59/42—Unsaturated compounds containing hydroxy or O-metal groups
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    • C07C67/30—Preparation of carboxylic acid esters by modifying the acid moiety of the ester, such modification not being an introduction of an ester group
    • C07C67/333—Preparation of carboxylic acid esters by modifying the acid moiety of the ester, such modification not being an introduction of an ester group by isomerisation; by change of size of the carbon skeleton
    • C07C67/343—Preparation of carboxylic acid esters by modifying the acid moiety of the ester, such modification not being an introduction of an ester group by isomerisation; by change of size of the carbon skeleton by increase in the number of carbon atoms

Definitions

  • the present invention relates to the field of chemical processes and to the use of the products obtained by these chemical processes.
  • the present invention relates more particularly to a process for the preparation of unsaturated hydroxy fatty acids and their esters corresponding to the following general formula (Id):
  • R x OH, Cl, Br, OR 3 where R 3 represents an alkyl, alkenyl, alkynyl radical, linear or branched from 1 to 16 carbons or glycerol esters, optionally substituted by one or more carbon atoms, nitrogen, sulfur or halogens such as fluorine, chlorine, bromine and iodine,
  • metal salts has a number of drawbacks.
  • the latter can be contaminated by metal salts and therefore their cosmetic application and / or pharmacological is limited due to this contamination.
  • the use of metal salts leads to contamination of the environment of the industries in which the synthesis is carried out.
  • the preparation process therefore aims to solve the problems mentioned above by proposing a new original synthetic route allowing industrial transposition.
  • the process of the invention is remarkable in that it makes it possible to obtain a faster method of synthesis with better yields than the processes already known from the prior art.
  • the process of the invention makes it possible to avoid, in the first steps of said process, chromatographies which are not industrial purification techniques.
  • R 17 R 2 , m and n have the same meaning as in formula (Id).
  • the first step in this synthesis is bromination, the starting compound for the reaction is a diol of formula (II).
  • This bromination requires the use of a solvent which can in particular be toluene, benzene, dimethylformamide, tetrahydrofuran, cyclohexane, heptane, petroleum ether, etc.
  • the reagent used in this bromination step can be aqueous HBr or no, Ph 3 P, Br 2 , carbon tetrabromide triphenylphosphine, hydrobromic acid.
  • the second step is an oxidation to aldehyde of formula (IV) in the presence of a cyclic or non-cyclic, anhydrous or non-anhydrous tertiary amine N-oxide in the presence of DMSO.
  • the hydrobromide of the corresponding tertiary amine is removed by simple filtration.
  • the cyclic or non-cyclic, anhydrous or non-anhydrous tertiary amine N-oxides present in the second step are chosen from N methyl morpholine oxide, trimethylamine oxide or triethylamine oxide or mixture thereof.
  • the prior art knows other techniques for synthesizing aldehydes of general formula IV.
  • step 2 of the method of the invention overcomes the drawbacks of the techniques already known in the state of the art.
  • mention may be made of the oxidation reaction in the presence of manganese salts of the corresponding cyclic alkenes (Lee et al., 1993, J. Org. Chem., Vol. 10, pages 2918-2919).
  • Step 2 of the process which is the subject of the invention therefore makes it possible to avoid a step in the presence of metal salts.
  • the article by Guindon et al., Of 1984 J. Org. Chem., Vol.
  • Step 3 of the process of the invention is a Witting-Horner reaction.
  • This reaction is a reaction known to a person skilled in the art (Modem Synthetic Reaction, Second edition, Herbet O. House, Wittig Horner reaction pages 682 to 709) and any experimental condition described in the state of the art can be used in the part of the present invention.
  • the Witting-Horner reaction can be carried out in the presence of triethylphosphonoacetate and potassium carbonate.
  • Step 4 of the process of the invention is a saponification step. No particular experimental condition is implemented in the process of the invention. Those skilled in the art will be able to find the appropriate experimental conditions to use for this step.
  • Step 5 of the process is a step of specific protection of the alcohol function of the compound of general formula Ib obtained in step 4.
  • This reaction is carried out in any enol ether in the presence of an acid catalyst.
  • the reaction is carried out in the dihydropyran in the presence of APTS (Para toluene sulfonic acid).
  • APTS Par toluene sulfonic acid
  • the product of general formula obtained after step 5 is purified by simple aqueous washing and drying over sulfate.
  • Step 2 and step 5 of the process of the invention are not described in the state of the art. They make it possible to solve the technical problems described above while increasing the yield and the speed of the process for the synthesis of the compounds of general formula I.
  • step 5 of the process of the invention can undergo a final deprotection in order to obtain the compound of general formula
  • the product of formula (Id) obtained in step 5 of the process of the invention can be used in a glycerol esterification reaction.
  • monoesters (2 possible isomers: in positions 1 and 2)
  • diesters (2 possible isomers: diesters 1,1 and 1,2)
  • triesters can be obtained.
  • the compound obtained can undergo a final deprotection under experimental conditions identical to the deprotection conditions of the product of formula (Id) mentioned above.
  • Collagen is the most abundant and important protein in the human body and the skin. This scleroprotein notably represents 75% of the proteins of the dermis to which it ensures solidity.
  • the fibroblast manufactures from amino acids (hydroxyproline, lysine, proline) procollagen molecules which transform in the presence of vitamin C into collagen molecules. To form a network of fibrils, collagen must create bonds between these different molecules.
  • the renewal of collagen changes with age.
  • the soluble collagen which gives flexibility and resistance to the skin and mucous membranes degrades more and more quickly under the influence of a proteolytic enzyme that is collagenase, which leads, at the level of the dermis, to an aging of the structure fibrous proteins.
  • the insoluble collagen which causes a loss of elasticity stiffens by polymerizing with glucose molecules thanks to multiple bonds that are difficult to reverse (glycation phenomenon). These bonds make collagen more resistant to attack by collagenases, which results in increasing rigidity of the collagen fibers. This hardening phenomenon, characteristic of aged skin tissue, must be combated as soon as possible because it increases the destruction of fibroblasts by free radicals but also the denaturation of proteins in the dermis.
  • Collagenases are enzymes weakly expressed under normal physiological conditions. Their overexpression during aging and in particular during menopause in women leads to greater denaturation of the fibrous proteins of the dermis.
  • the invention therefore relates to the use of the products capable of being obtained by the process of the invention as an anti-collagenase active agent.
  • the work of the Applicant has more particularly made it possible to demonstrate the anti-collagenase activity of hydroxy-10-decene-2 (trans) oic acid (DHA) and of the glycerol ester of hydroxy-10-decene acid.
  • -2 (trans) oic glycerol monoester in position 1).
  • the invention also relates to the use of hydroxy-10-decene-2 (trans) oic acid (DHA) or of the glycerol ester of hydroxy-10-decene acid.
  • 2 (trans) oic as an active anti-collagenase agent in a pharmaceutical and / or cosmetic preparation.
  • the invention relates to the use of hydroxy-10-decene-2 (trans) oic acid (DHA) and / or the glycerol ester of hydroxy-10-decene-2 (trans) oic acid for the preparation of 'a medicine intended to prevent or cure the breakdown of collagen.
  • This medication is especially intended to prevent or cure the breakdown of collagen by bacterial collagenases during a bacterial infection.
  • the invention also relates to the use of hydroxy-10-decene acid.
  • the invention also relates to the use of hydroxy-10-decene-2 (trans) oic acid (DHA) and / or of the glycerol ester of hydroxy-10-dececene acid.
  • the invention also relates to the use of hydroxy-10-decene-2 (trans) oic acid (DHA) and / or the glycerol ester of hydroxy-10-decene-2 (trans) oic acid for the preparation. of a medicament intended to prevent or cure degenerative diseases presenting a fibrinoid degeneration of collagen and also called "collagen diseases".
  • DHA hydroxy-10-decene-2
  • trans oic acid
  • a medicament intended to prevent or cure degenerative diseases presenting a fibrinoid degeneration of collagen and also called "collagen diseases”.
  • the products obtained by the process which is the subject of the pending invention are, as indicated above, used in the cosmetic and / or pharmaceutical field.
  • the work of the Applicant has made it possible to demonstrate that the products obtained by the process of the invention followed by a final deprotection step and, more particularly, hydroxy (10 - decene - 2 (trans) oic acid ( DHA) exhibit lipolytic activity. Consequently, the products obtained by the process of the invention followed by a final deprotection step and, more particularly, DHA can, in particular, be used in slimming treatments and in any treatment known to require lipolytic activity.
  • the products obtained by the process which is the subject of the pending invention are, as indicated above, used in the cosmetic and / or pharmaceutical field.
  • the work of the Applicant has made it possible to demonstrate that the products obtained by the process of the invention followed by a final deprotection step and, more particularly, hydroxy (10 - decene) 2 (trans) oic acid ( DHA) have anti-acne activity.
  • the treatment of acne requires the treatment of two major problems which are, on the one hand, hyperseborrhea and, on the other hand, the bacterial proliferation responsible for skin inflammation.
  • the work of the Applicant has made it possible to demonstrate that the products obtained by the process of the invention followed by a final deprotection step and, more particularly, DHA exhibit both a seboregulatory activity and an anti activity -bacterial.
  • DHA is capable of inhibiting cutaneous 5-alpha reductase, the enzyme responsible for the production of di-hydro-testosterone.
  • Treatment with 0.1% DHA and treatment with 0.5% DHA respectively reduced by approximately 70% and by approximately 90% the activity of 5-alpha-reductase compared to an untreated control. This inhibition leads to a considerable reduction in the level of sebum.
  • DHA DHA exhibits, after 14 or 28 days of treatment, a bactericidal effect of approximately 95 to 100% tested on Propionibacterium acnes, Staphylococcus aureus and Malassezia furfur.
  • .7 15.6 and 7Hz
  • the product is purified by chromatography on silica CH 2 Cl 2 / acetone 9/1 to l / l and CH 2 Cl 2 / methanol 95/5.
  • 27 g of product are obtained in the form of an oil which crystallizes in the form of an amorphous yellow white solid with a purity between 85-90%.
  • Step 2 Oxidation to aldehyde.
  • the product is purified by distillation at 81 ° C under P ⁇ lmbar (9g, 57%).
  • Example 3 Evaluation of the anti-collagenase activity of products obtained by the process of the invention on frozen sections of human skin.
  • the sections are covered with the solutions to be tested and then incubated for 2 hours at 37 ° C. in a humid chamber.
  • the solutions are eliminated by repetitive rinsing and the sections are stained with picrosirius.
  • the microscopic examination is carried out at the objective of 2.5 and the paper photographs are taken with a Kodak Gold 100 ASA film.
  • Table 2 summarizes the results of the alteration of the collagen structure as a function of the solution tested. An absence of alteration of the collagen structure is indicated by 0 while a moderately or markedly to very strongly altered collagen structure is indicated by 1 or 2 respectively.
  • the application of the Tris buffer control or of the excipient does not induce any alteration of the collagen structure.
  • the 1% and 2% DHA product completely inhibits collagenase activity, so that ML40 and GM at 2% slightly inhibits the activity of collagenase.
  • Example 4 Evaluation of the anti-collagenase activity of GM obtained by the method of the invention on explants of human skin maintained in survival.
  • the study is carried out on a product at 5% GM in comparison with the excipient (hydrocerin), a positive control and a control in the presence of collagenase at 100 U / ml.
  • Hydrocerin is used as an excipient for the preparation of the product to be applied. This study was carried out twice. In the first study, it was found that the action of collagenase on D2 remains very limited and not significant. In the second study, the application time is extended and the explants are removed on D2 and D4.
  • the product is applied on D0 and D2 at a rate of 20 mg per explant and the collagenase is incorporated into the culture media of the last 24 batches.
  • the histological study includes: paraffin impregnation, sections, staining with sirius red F3B colorimetric measurements of collagen by image analysis report with photos.
  • the dermis has a normal structure, with regular collagen bundles in all the compartments, - for the controls with collagenase, the collagen bundles are very strongly degraded and the thickness of the dermis has halved, for the explants with excipient and collagenase, the collagen bundles are strongly degraded, the alteration being less than that observed on the controls with collagenase, and the thickness of the dermis decreased by almost half,
  • the collagen bundles are very slightly degraded and the thickness of the dermis has slightly decreased
  • the dermal structure is identical to that of controls without collagenase.
  • the GM product shows a marked anti-collagenase activity.
  • Example 5 Evaluation of the anti-lipolytic activity of DHA obtained by the method of the invention on explants of adipose tissues ex vivo.
  • DHA is incorporated into the culture medium at the final concentration of 0.25 and 0.5%. After an 8-day contact, the activity is evaluated by assaying the lipids released into the culture medium.
  • P202-AB31 are prepared and put to survival in BEM medium (BIO-EC's Explants Medium). The explants are divided into 4 batches of 3 explants: a control batch, a positive control batch (0.1% caffeine), two batches produced (DHA 0.25 and 0.5%).
  • the explants are put into survival in 2 ml of culture medium, in which the product to be tested is incorporated.
  • the culture medium is removed.
  • the media taken on D2, D4, D6 and D8 are combined in the same tube and stored at -20 ° C for the determination of lipids.
  • explants of fixed adipose tissue are dehydrated, impregnated with paraffin, placed in a block, cut and colored with Masson trichrome.
  • the lipids are separated and assayed by TLC.
  • the viability and the morphology of the adipocytes is controlled by the histological study. Lipolytic activity is evaluated by analyzing the proportions of monoglycerides, diglycerides, triglycerides and free fatty acids. at . Histology.
  • control and treated explants show no visible alterations or cellular necrosis.
  • results obtained are collated in Table 4 below.
  • the results are expressed in mass ( ⁇ g) of each category of lipids released into the culture medium, during the 8 days of treatment.
  • Table 5 represents the statistical analysis by the Student test of the results of the assay of fatty acids released in the culture medium, during the 8 days of treatment.
  • the essential parameter in this study is the variation in the amount and percentage of fatty acids released into the culture medium after the treatment period.
  • DHA at 0.25 and 0.50% leads to a significant increase of 1075 and 1087% respectively.
  • the increase in the concentration used does not have any effects on efficacy. It seems that the maximum effective dose is around 0.25%.
  • the DHA applied at 0.25 and 0.5% exhibits significant lipolytic activity in comparison with that of caffeine.

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Abstract

La présente invention se rapporte à un procédé de préparation des hydroxy-acides gras insaturés et de leurs esters répondant à la formule générale suivante (Id) : Formule (Id) et à leur utilisation dans des préparations pharmaceutiques et/ou cosmétiques comme agent actif anti-collagénase, lipolytique, et/ou anti-acnéique.

Description

PROCEDE DE PREPARATION DES HYDROXY-ACIDES GRAS
INSATURÉS ET DE LEURS ESTERS, LEUR UTILISATION DANS DES
PRÉPARATIONS PHARMACEUTIQUES E /OU COSMÉTIQUES
La présente invention se rapporte au domaine des procédés chimiques et à l ' utilisation des produits obtenus par ces procédés chimiques .
La présente invention se rapporte plus particulièrement à un procédé de préparation des hydroxy-acides gras insaturés et de leurs esters répondant à la formule générale suivante (Id) :
avec n= 1 à 4 m = 2 à 16
Rx= OH, Cl, Br, OR3 où R3 représente un radical alkyl, alcényl, alcynyl, linéaire ou ramifié de 1 à 16 carbones ou esters du glycérol, éventuellement substitué par un ou plusieurs atomes de carbone, d'azote, de soufre ou d'halogènes tels que fluor, chlore, brome et iode,
R2= H, SiR'1R, 2R'3 où R' l t R'2, R'3 identiques ou différents les uns des autres, représentent un radical alkyl, alcényl, alcynyl, linéaire ou ramifié de 1 à 16 carbones ou esters du glycérol, éventuellement substitué par un ou plusieurs atomes de carbone, d'azote, de soufre ou d'halogènes tels que fluor, chlore, brome et iode, ou R2= C-Ar3 avec Ar représentant un radical aryl éventuellement substitué par un ou plusieurs atomes de carbone, d'azote, de soufre ou d'halogènes tels que fluor, chlore, brome et iode, ou R2= le tétrahydropyranyl de formule
et à l'utilisation desdits produits comme agent anti-collagénase, agent lipolytique ou agent anti-acnéique dans une préparation médicamenteuse et/ou cosmétique .
Les produits répondant à la formule générale (Id) sont connus et décrits dans la littérature pour leurs propriétés biologiques et plus particulièrement pour leurs propriétés cosmétiques et pharmacologiques . D'ailleurs, le principal constituant lipidique de la gelée royale des abeilles qui est l'acide hydroxy-10-décène-2 (trans) oique (ou DHA) répond à la formule générale (Id) dans laquelle Rx= OH, R2= H, n= 1 et m= 3.
Différents documents de l'état de la technique rapportent des procédés de préparation des hydroxy-acides gras insaturés et de leurs esters (Lee et al., 1993, J. Org. Chem. , vol. 58, pages 2918-2919 ; Hurd et Saunders, 1952, J. Am. Chem. Soc, vol. 74, pages 5324-5328 ; Krishnamurthy et al., 1989, Indian J. Chem. Sect. A, vol. 28, pages 288-291 ; Plettner et al., 1995, J. Chem. Ecol . , vol. 21, pages 1017-1030). Les procédés déjà connus dans l'état de la technique présentent une étape d'oxydation durant laquelle des sels métalliques comme les sels de chrome ou de manganèse sont employés. Or, l'utilisation de sels métalliques présente un certain nombre d'inconvénients. D'une part, au niveau des produits obtenus par lesdits procédés, ces derniers peuvent être contaminés par les sels métalliques et donc leur application cosmétique et/ou pharmacologique est limitée du fait de cette contamination. D'autre part, l'utilisation de sels métalliques entraîne une contamination de l'environnement des industries dans lesquelles la synthèse est effectuée.
Le procédé de préparation vise donc à résoudre les problèmes cités ci -dessus en proposant une nouvelle voie de synthèse originale permettant une transposition industrielle.
De plus, le procédé de l'invention est remarquable en ce qu'il permet d'obtenir une méthode de synthèse plus rapide avec de meilleurs rendements que les procédés déjà connus de l'art antérieur. En effet, le procédé de l'invention permet d'éviter, dans les premières étapes dudit procédé, les chromatographies qui ne sont pas des techniques industrielles de purification.
Le schéma général de synthèse est le suivant
Ib la
où R17 R2, m et n ont la même signification que dans la formule (Id) .
La première étape de cette synthèse est une bromation, le composé de départ de la réaction est un diol de formule (II) . De nombreuses techniques permettant une bromation sont connues dans l'état de la technique et sont utilisables par l'homme du métier à cette étape. Cette bromation nécessite l'utilisation d'un solvant qui peut notamment être le toluène, le benzène, le diméthylformamide, le tétrahydrofuran, le cyclohexane, l'heptane, 1 ' éther de pétrole, etc.. Le réactif utilisé dans cette étape de bromation peut être le HBr aqueux ou non, le Ph3P,Br2, le tétrabromide de carbone triphénylphosphine, l'acide hydrobromique. A titre d'exemple, on peut citer les conditions expérimentales de bromation utilisant du HBr aqueux décrites dans Geresh et al., Tetrahedron Asymmery, 1998, vol. 9, pages 89-96.
La seconde étape est une oxydation en aldéhyde de formule (IV) en présence d'un N-oxyde d'aminé tertiaire cyclique ou non cyclique, anhydre ou non anhydre en présence de DMSO. En fin de réaction, le bromydrate de l'aminé tertiaire correspondante est éliminé par simple filtration. De façon avantageuse, les N-oxydes d'aminé tertiaire cycliques ou non cycliques, anhydres ou non anhydres présents à la seconde étape sont choisis parmi le N méthyl morpholine oxyde, le triméthylamine oxyde ou le triéthylamine oxyde ou mélange de ceux-ci. L'art antérieur connaît d'autres techniques permettant de synthétiser les aldéhydes de formule générale IV. Cependant, l'étape 2 du procédé de l'invention permet de résoudre les inconvénients des techniques déjà connues dans l'état de la technique. A titre d'exemple, on peut citer la réaction d'oxydation en présence de sels de manganèse des alcènes cycliques correspondant (Lee et al., 1993, J. Org. Chem., vol. 10, pages 2918-2919). L'étape 2 du procédé objet de l'invention permet donc d'éviter une étape en présence de sels métalliques. L'article de Guindon et al., de 1984 (J. Org. Chem., vol. 49, pages 3912-3920) décrit la synthèse de 8-hydroxy-octanal à partir de 1 , 1-diméthoxy- 8 -méthoxyméthoxy-octane . Cependant le rendement de synthèse de 8-hydroxy-octanal est relativement faible (36%) alors que l'étape 2 de l'invention permet d'obtenir des rendements plus élevés. Les autres techniques connues dans l'art antérieur permettant de synthétiser les aldéhydes de formule générale IV sont des méthodes de synthèse longues présentant plus de 4 étapes .
L'étape 3 du procédé de l'invention est une réaction de Witting-Horner . Cette réaction est une réaction connue de l'homme du métier (Modem Synthetic Reaction, Second édition, Herbet O. House, Wittig Horner reaction pages 682 à 709) et toute condition expérimentale décrite dans l'état de la technique peut être utilisée dans le cadre de la présente invention. A titre d'exemple, la réaction de Witting-Horner peut être réalisée en présence de triëthylphosphonoacétate et de carbonate de potassium.
L'étape 4 du procédé de l'invention est une étape de saponification. Aucune condition expérimentale particulière n'est mise en œuvre dans le procédé de l'invention. L'homme du métier sera à même de trouver les conditions expérimentales adéquates à utiliser pour cette étape.
L'étape 5 du procédé est une étape de protection spécifique de la fonction alcool du composé de formule générale Ib obtenu à l'étape 4. Cette réaction s'effectue dans tout éther d'énol en présence d'un catalyseur acide. De façon avantageuse, la réaction s'effectue dans le dihydropyrane en présence d'APTS (Acide para toluène sulfonique) . Le produit de formule générale le obtenu après l'étape 5 est purifié par simple lavage aqueux et séchage sur sulfate. L'étape 2 et l'étape 5 du procédé de l'invention sont non décrites dans l'état de la technique. Elles permettent de résoudre les problèmes techniques décrits ci -dessus tout en augmentant le rendement et la rapidité du procédé de synthèse des composés de formule générale I .
Le produit de formule (Id) obtenu à l'étape 5 du procédé de l'invention peut subir une déprotection finale afin d'obtenir le composé de formule générale
(le) . Cette déprotection est réalisée dans une solution de méthanol contenant un catalyseur acide. Tout catalyseur acide peut être utilisé dans l'invention. De façon avantageuse, le catalyseur acide utilisé est 1 ' ATPS .
Le produit de formule (Id) obtenu à l'étape 5 du procédé de l'invention peut être utilisé dans une réaction d' estérification du glycérol. Suivant les quantités relatives de glycérol utilisées, peuvent être obtenus des monoesters (2 isomères possibles : en position 1 et 2) , des diesters (2 isomères possibles : diesters 1,1 et 1,2) et des triesters . Après l'étape d' estérification du glycérol, le composé obtenu peut subir une déprotection finale dans des conditions expérimentales identiques aux conditions de déprotection du produit de formule (Id) citées ci- dessus .
Les produits obtenus par le procédé objet de l'invention en instance sont, comme indiqué précédemment, utilisés dans le domaine cosmetologique et/ou pharmaceutique. Cependant, les travaux de la Demanderesse ont permis de mettre en évidence que les produits obtenus par le procédé de l'invention suivi d'une étape de déprotection finale présentent une activité anti-collagénase .
Le collagene est la protéine la plus abondante et la plus importante du corps humain et de la peau. Cette scléroprotéine représente notamment 75% des protéines du derme auquel elle assure solidité. Le fibroblaste fabrique à partir des acides aminés (hydroxyproline, lysine, proline) des molécules de procollagene qui se transforment en présence de vitamine C en molécules de collagene. Pour former un réseau de fibrilles, le collagene doit créer des liaisons entre ces différentes molécules.
Le renouvellement du collagene change avec l'âge. Le collagene soluble qui donne souplesse et résistance à la peau et aux muqueuses se dégrade de plus en plus rapidement sous l'influence d'une enzyme protéolytique qu'est la collagénase, ce qui entraîne, au niveau du derme, un vieillissement de la structure fibreuse des protéines. En outre, le collagene insoluble qui entraîne une perte d'élasticité se rigidifie en se polymérisant avec des molécules de glucose grâce à des liaisons multiples difficilement réversibles (phénomène de glycation) . Ces liaisons rendent le collagene plus résistant à l'attaque par les collagénases ce qui entraîne une rigidité croissante des fibres de collagene. Ce phénomène de durcissement, caractéristique des tissus cutanés âgés, doit être combattu le plus tôt possible car il augmente la destruction des fibroblastes par les radicaux libres mais aussi la dénaturation des protéines du derme.
Les collagénases sont des enzymes faiblement exprimées dans les conditions physiologiques normales. Leur surexpression lors au vieillissement et en particulier lors de la ménopause chez la femme entraîne une dénaturation plus importante des protéines fibreuses du derme.
Cependant, la destruction des fibres de collagene peut survenir lors d' autres circonstances que le vieillissement. En effet, lors d'une infection bactérienne, les collagénases bactériennes peuvent détruire les fibres de collagene de l'hôte infecté.
De plus, l'invasion tumorale nécessite une dégradation de la membrane basale et de la matrice extra-cellulaire et de toutes les protéines de structure de ces composants parmi lesquelles se trouve le collagene. Ainsi, il a été montré une très nette relation entre le pouvoir invasif des tumeurs et la présence d'activité collagénase dans les tumeurs humaines. On retrouve les collagénases au niveau des cellules tumorales, mais aussi dans les fibroblastes entourant la tumeur. Les cellules épithéliales normales sécrètent un taux très faible de collagénases, alors que ces protéines sont surexprimées par les cellules tumorales invasives ou métastatiques .
D'autres maladies dégénérâtives présentent une dégénérescence fibrinoide du collagene et sont également appelées « maladies du collagene ».
L'invention concerne donc l'utilisation des produits susceptibles d'être obtenus par le procédé de l'invention comme agent actif anti-collagénase. Les travaux de la Demanderesse ont plus particulièrement permis de mettre en évidence l'activité anti- collagénase de l'acide hydroxy-10-décène-2 (trans) oïque (DHA) et du glycérol ester de l'acide hydroxy-10- décène-2 (trans) oique (monoester du glycérol en position 1). L'invention concerne également l'utilisation de l'acide hydroxy-10-décène-2 (trans) oïque (DHA) ou du glycérol ester de l'acide hydroxy- 10 -décène- 2 (trans) oïque comme agent actif anti-collagénase dans une préparation pharmaceutique et/ou cosmétique.
L'invention concerne l'utilisation de l'acide hydroxy-10-décène-2 (trans) oïque (DHA) et/ou du glycérol ester de l'acide hydroxy- 10 -dëcène- 2 (trans) oïque pour la préparation d'un médicament destiné à prévenir ou à guérir la dégradation du collagene. Ce médicament est tout particulièrement destiné à prévenir ou à guérir la dégradation du collagene par les collagénases bactériennes lors d'une infection bactérienne.
L' invention concerne également l'utilisation de l'acide hydroxy- 10 -décène -
2 (trans) oïque (DHA) et/ou du glycérol ester de l'acide hydroxy-10-décène-2 (trans) oïque pour la préparation d'un médicament destiné à la régénérescence de la peau et des ligaments.
L'invention concerne aussi l'utilisation de l'acide hydroxy- 10 -décène- 2 (trans) oïque (DHA) et/ou du glycérol ester de l'acide hydroxy- 10 -décène-
2 (trans) oïque pour la préparation d'un médicament destiné à prévenir ou à guérir l'invasion tumorale.
L'invention concerne aussi l'utilisation de l'acide hydroxy- 10 -décène-2 (trans) oïque (DHA) et/ou du glycérol ester de l'acide hydroxy- 10-décêne- 2 (trans) oïque pour la préparation d'un médicament destiné à prévenir ou à guérir des maladies dégénératives présentant une dégénérescence fibrinoïde du collagene et également appelées « maladies du collagene » . Les produits obtenus par le procédé objet de l'invention en instance sont, comme indiqué précédemment, utilisés dans le domaine cosmetologique et/ou pharmaceutique. Les travaux de la Demanderesse ont permis de mettre en évidence que les produits obtenus par le procédé de l'invention suivi d'une étape de déprotection finale et, plus particulièrement, l'acide hydroxy- 10 - décène - 2 ( trans ) oïque (DHA) présentent une activité lipolytique. Par conséquent, les produits obtenus par le procédé de l'invention suivi d'une étape de déprotection finale et, plus particulièrement, le DHA peuvent, notamment, être utilisés dans les traitements amincissants et dans tout traitement connu pour nécessiter une activité lipolytique.
Les produits obtenus par le procédé objet de l'invention en instance sont, comme indiqué précédemment, utilisés dans le domaine cosmetologique et/ou pharmaceutique. Les travaux de la Demanderesse ont permis de mettre en évidence que les produits obtenus par le procédé de l'invention suivi d'une étape de déprotection finale et, plus particulièrement, l'acide hydroxy- 10 - décène- 2 ( trans ) oïque (DHA) présentent une activité anti-acnéique.
Le traitement de l'acné nécessite le traitement de deux problèmes majeurs que sont, d'une part, 1 ' hyperséborrhée et, d'autre part, la prolifération bactérienne responsable de l'inflammation cutanée. Les travaux de la Demanderesse ont permis de mettre en évidence que les produits obtenus par le procédé de l'invention suivi d'une étape de déprotection finale et, plus particulièrement, le DHA présentent à la fois une activité sébo-régulatrice et une activité anti-bactérienne . En effet, le DHA est capable d'inhiber la 5 -alpha reductase cutanée, enzyme responsable de la production de la di-hydro-testosterone . Un traitement avec 0,1% de DHA et un traitement avec 0,5% de DHA réduisent respectivement d'environ 70% et d'environ 90% l'activité de la 5-alpha-rëductase par rapport à un contrôle non traité. Cette inhibition entraîne une réduction considérable du taux de sébum.
De plus, 0,5% de DHA présentent, après 14 ou 28 jours de traitement, un effet bactéricide d'environ 95 à 100% testé sur Propionibacterium acnés, Staphylococcus aureus et Malassezia furfur.
D'autres avantages et caractéristiques de 1 ' invention apparaîtront des exemples qui suivent concernant, d'une part, des procédés de synthèse de l'invention, et d'autre part, des propriétés anti- collagénase et lipolytique des produits susceptibles d'être obtenus par les procédés de synthèse de 1 ' invention .
Exemple 1 : Mode opératoire pour la synthèse de la (n=l, m=6, Rl=OEt) et le (triester de glycérol) .
1. Etape 1 de Bromation.
438g (3mol) de 1, 8-octanediol sont mis en solution dans 31 de toluène. 375ml (3.3mol) d'HBr aqueux 48% sont ensuite ajoutés. Le milieu est ensuite chauffé pour éliminer l'eau présente et l'eau formée lors de la réaction par distillation azéotropique . Après 13.5h de contact, le milieu est refroidi et repris par une solution saturée de NaHC03. La phase organique est séparée et lavée par une solution saturée de NaCl . Après séchage sur MgS04, le milieu est concentré pour donner un brut de 672g.
Le 8 -bromooctanol est purifié par distillation sous pression réduite, à 96°C sous P<lmbar, m=575g (92%) .
Caractérisât ion :
- CCM : Rf = 0,8 (heptane/éther iso 8/2)
- RMN XH (200Mhz, CDC13) : 3.65 (t, 2H, J=6.4Hz) ; 3.43 (t, 2H, ιJ=6.8Hz) ; 1.87 (m, 2H) ; 1.36-
1.69 (m, 10H) .
2. Etape d'oxydation en aldéhyde.
M=209.13 M= 144.22
708 g (5.87, 3éq) de N- Oxyde de N- Methylmorpholine anhydre sont mis en solution, sous N2, dans 31 de DMSO. 410g (1,96 mol) de 8 -bromooctanol dissous dans 11 de DMSO sont ensuite additionnés en 30min. Le milieu devient limpide. Le bromure d'ammonium de la N-Methylmorpholine précipite. Après 65h d'agitation à température ambiante, ce sel est filtré et le milieu est repris par 4 1 d'une solution saturée de NaCl . Après extraction par 4 x 11 d'acétate d'éthyle et séchage, 320 g de brut, constitués à 74% d'aldéhyde (R=83%) et 26% de 1.8-octanediol . Caractérisât ion :
- CCM : Rf = 0,6 (heptane/acétate d'éthyle 8/2)
- RMN 1H (400Mhz, CDCl3) : 9.74 (t, 1H, <J=1.7Hz) ; 3.61 (t, 2H, J=6.6Hz) ; 2.41 (dt, 2H, .7=1.7 et 7.3Hz) ; 1.51-1.65 (m, 4H) ; 1.24 -1.37 (m, 6H) .
3. Etape 3 : Réaction de Witting-Horner,
Le brut précédent (320g) est placé en solution dans 31 d'eau. 800ml (4.2mol, 2.1éq) de triethylphosphonoacetate sont ensuite ajoutés suivis de 830g (6mol) de carbonate de potassium. Après 20h d'agitation, la réaction est terminée. Le milieu est extrait par 4 x 11 d' éther isopropylique. Après séchage sur MgS04, les phases organiques sont évaporées pour conduire à 650g de brut.
Le produit est purifié soit par distillation E=120°C sous P<lmbar.
Dans ce cas, on récupère 280g d'un liquide incolore conforme par RMN (R=80% à partir de l'aldéhyde ou 66% à partir du dérivé brome) soit par chromatographie avec une élution heptane/acétate d'éthyle 8/2 dans ce cas 119.6g de produits sont obtenus (28% à partir du dérivé brome) . Caractérisât ion :
- CCM : Rf = 0,8 (heptane/acétate d'éthyle
8/2)
- RMN XH (400Mhz, CDC13) : 6.91-6.99 (m,
1H) ; 5.78-5.82 (dt, 1H, «7=1.4 et 15.6Hz) ; 4.17 (q,
2H, «7=7.1Hz ) ; 3.63 (t, 2H, =6.6Hz) ; 2.18 (dq, 2H, J=1.2 et 7.3Hz) ; 1.22 -1.65 (m, 11H) .
4. Etape 4 : Réaction de saponification.
EtOH/HzO
M =214.31 M =186.25
119.6g (0.56mol) d' hydroxyester est dissous dans 600ml d'éthanol et 400ml d'une solution 4.6N de KOH sont additionnés. Le milieu est agité 8h. Le milieu est extrait par de l' éther isopropylique. La phase aqueuse est acidifiée à pH=l et extraite à l'acétate d'éthyle. Après séchage et évaporation , 99.6g de solide rose sont obtenus. Recristallisé dans un mélange éther isopropylique / éther de pétrole, le produit est obtenu sous forme d'un solide blanc (86g, 83%) .
Caractérisât ion : CCM : Rf = 0,2 (heptane/acétate d'éthyle
7/3)
Point de fusion : F=61.3°C
RMN 1H (400Mhz, CDC13) : 7.06 (dt, 1H,
.7=15.6 et 7Hz) ; 5.81 (dt, 1H, .7=1.5 et 15.6Hz) ; 3.64 (t, 2H, «7=6.6Hz) ; 2.22 (dq, 2H, «7=1.2 et 7.3Hz) ;
1.52-1.58 (m, 2H) ; 1.45 -1.48 (m, 2H) ; 1.33 -1.3765
(m, 6H) . 5. Etape 5 : Réaction de protection.
86g (0.46mol) d' hydroxyacide sont placés en solution avec 45ml (0.48mol) de 3 , 4-dihydro-2H-pyranne dans 500ml de THF. 1ml d'HCl concentré est ajouté et le milieu est agité 24h.
Le THF est ensuite concentré, le brut est repris dans de l'acétate d'éthyle et lavé avec une solution de NaCl saturée jusqu'à pH neutre. Après séchage sur MgS04, 132g de produit brut sont obtenus (>100%) .
Caractérisât ion
CCM : Rf = 0,4 (heptane/acétate d'éthyle
7/3)
RMN XH (400Mhz, CDCl3) : 7.06 (dt, 1H, «7=15.6 et 7Hz) ; 5.81 (dd, 1H, «7=1.6 et 15.6Hz) ; 4.58 (t, 1H, «7=2.8Hz) ; 3.82-3.91 (m, 1H) ; 3.71-3.73 (m, 1H) ; 3.51 -3.52 (m, 1H) ; 3.36 -3.39 (m, 1H) ; 2.20 (m, 2H) ; 1.33 -1.89 (m, 16H) .
6. Etape 6 : réaction d' estérif ication du glycérol
8.4g (0.091mol) de glycérol sont placés en solution dans 500ml de dichlorométhane . Le brut précédent (0.46mol) , après élimination des traces d'eau par distillation azéotropique, est dissous dans 500ml de dichloro éthane et ajouté au milieu. 56.8g (0.46mol) de diméthylaminopyridine sont ensuite ajouté suivis de 97g (0.46mol) de dicyclohexylcarbodiimide . Le milieu est agité 78h. Un précipité apparaît qui est filtré. Le milieu est concentré et repris dans de l'éther isopropylique. Après filtration et concentration, 156g de brut sont obtenus et purifiés par chromatographie et avec une élution heptane/acétate d λéthyle 7/3. 99g d'une fraction contenant 2/3 de produit et 1/3 d' acylurée sont obtenus.
Caractérisât ion :
CCM : Rf = 0.7 (heptane/acétate d'éthyle 7/3)
RMN *H (400Mhz, CDC13) : 6.96 (m, 3H) ; 5.80
(dd, 3H, «7=1.6 et 15.6Hz) ; 5.29-5.31 (m, 1H) ; 4.54-
4.57 (m, 3H) ; 4.20-4.39 (m, 4H) ; 3.81-3.89 (m, 3H) ;
3.68 -3.72 (m, 3H) ; 3.41-3.49 (m, 3H) ; 3.34-3.39 (m, 3H) ; 2.25-2.18 (m, 6H) ; 1.33 -1.99 (m, 48H) .
7. Etape 7 : Déprotection finale.
99g (0.136mol) du mélange précédent est solubilisé dans 11 de méthanol avec 9.9g d'APTS. Le milieu est agité 14h. La réaction est terminée, le milieu est alors concentré. L'huile obtenue est alors reprise dans H20 et amenée à pH=6 avec une solution saturée de NaHC03. La phase aqueuse est extraite avec du dichlorométhane . Après séchage de la phase organique et évaporation, 77g d'une huile jaune sont obtenus.
Le produit est purifié par chromatographie sur silice CH2Cl2/acétone 9/1 à l/l et CH2Cl2/méthanol 95/5.
27 g de produit sont obtenus sous forme d'une huile qui cristallise sous forme d'un solide blanc jaune amorphe de pureté entre 85-90%.
Caractérisât ion :
CCM : Rf = 0.2 (CH2Cl2/acétone 9/1) RMN ^Η (400Mhz, CDCl3) : 6.94-7.01 (m, 3H) ; 5.78-5.84 (m,3H) ; 5.29-5.31 (m, 1H) ; 4.20-4.34 (m, 4H) ; 3.60 -3.65 (m, 6H) ; 2.16 -2.22 (m, 6H) ; 1.33 - 1.99 (m, 30H) .
Exemple 2 ; Mode opératoire pour la synthèse de;
1. Etape 1 : Protection du 8-bromooctanol
M =209.13 M =323.39
21 g (0,1 mol) de 8 -bromooctanol sont dissous dans 200ml de dichlorométhane. 16 g (0,104 mol) de chlorure de terbutyldimethylsilyle sont ensuite ajouté à 0°C, suivis de 7,5 g (0,11 mol) d'imidazole. Un précipité se forme instantanément. Après 3h d'agitation, le milieu est filtré, concentré et le brut est distillé.
25,8 g de produit sont ainsi isolés à 99- 104°C sous P <1 mbar (82%) . Caractérisât ion :
RMN XH (400Mhz, CDC13) 3.59 (t, 2H, «J=
6.6Hz) ; 3.39 (t, 2H, «7= 6.9Hz) ; 1.82-1.89 (m, 2H) ; 1.30-1.50 (m, 10H) ; 0.88 (t, 9H, «7= 2.7Hz) ; 0.04 (s, 6H) .
2. Etape 2 : Oxydation en aldéhyde .
M =323.39 M = 258.48
20 g (61 mmol) de dérivé silylé sont mis en solution dans 200ml de DMSO. 21,7 g (0,18 mol) de N- oxyde de jV-methylmorpholine sont ensuite ajoutés. Le milieu est agité 72h. Un précipité apparaît. Le milieu est dilué avec NaCl saturé puis extrait avec de l' éther isopropylique. Après séchage et évaporation, 15,3 g de brut sont obtenus .
Le produit est purifié par distillation à 81°C sous P<lmbar ( 9g, 57%) .
Caractérisât ion :
RMN αH (400Mhz, CDCl3) : 9.76 (t, 1H, «J= 1.9Hz) ; 3.59 (t, 2H, «J= 6.6Hz) ; 2.42 (dt, 2H, «7= 1.8 et 7.2Hz) ; 1.49-1.68 (m, 4H) ; 1.30-1.32 (m, 6H) ; 0.88 (t, 9H, «7= 2.7Hz) ; 0.04 (t, 6H, «7= 2.9Hz).
3. Etape 3 : Réaction de Wittinq.
TBDMSO^ -2U°~ . TBDMSO^ COOEt
NaH
M =258.48 835 mg (21 mmol) de NaH sont mis en solution avec 5 ml de THF et refroidis à T<°C. 4,2 ml (22 mmol) de triethylphosphonoacetate sont ajoutés goutte à goutte. Après 3h d'agitation à température ambiante, 5 g (19 mmol) d'aldéhyde sont ajoutés à froid et l'agitation est maintenue 17 h. Après hydrolyse avec H20, extraction à l'acétate d'éthyle, séchage et évaporation, 6,7 g de brut sont obtenus.
3,7 g de produits sont obtenus par purification sur gel de silice (élution heptane/acétate d'éthyle 8/2) (60%) .
Caractérisât ion :
CCM : Rf= 0.6 (heptane /acétate d'éthyle 8/2)
RMN ^Η (400Mhz, CDCl3) : 6.95 (dt, 1H, «7=
8.6 et 15.6Hz) ; 5.79 (dt, 1H, «7= 1.4 et 15.6Hz) ; 4.17
(q, 2H, «7= 7.1Hz ) ; 3.58 ( dt, 2H, J= 6.6 et 9.8Hz) ;
2.15-2.21 (m, 2H) ; 1.46 -1.51 (m, 4H) ; 1.24 -1.42 (m, 9H) ; 0.88 (t, 9H, «7= 2.7Hz) ; 0.04 (t, 6H, «7= 2.9Hz).
4. Etape 4 : Saponification.
TBDMSO v/\ /\^\/-*ï5i^COOEt KOH ,COθH EtθH/H,0
2 g (6 mmol) d'ester sont dissous dans 10 ml d'éthanol et 5 ml d'une solution de NaOH 3,8 N sont ajoutés. La réaction est terminée en 4h. Le milieu est acidifié à pH=l et extrait à l'acétate d'éthyle. Le produit est ainsi obtenu sans autre purification (1,5 g, 83%) . Caractérisât ion :
CCM : 0.2 (heptane/acétate d'éthyle 7/3)
RMN XH (400Mhz, CDCl3) : 7.07 (dt, 1H, «7=
8.6 et 15.6Hz) ; 5.81 (dt, 1H, «7= 1.4 et 15.6Hz) ; 3.59
( dt, 2H, «7= 6.6 et 9.8Hz) ; 2.21 -2.27 (m, 2H) ; 1.46
-1.51 (m, 4H) ; 1.24 -1.42 (m, 6H) ; 0.89 (t, 9H, «J= 2.7Hz) ; 0.04 (t, 6H, J= 2.9Hz).
Exemple 3 : Evaluation de l'activité anti- collagénase de produits obtenus par le procédé de l'invention sur coupes congelées de peau humaine.
1. Mode opératoire.
Cette étude est réalisée sur différentes solutions à la concentration de 1 % et 2 % de principes actifs en comparaison avec l'excipient seul, les témoins tampon et collagénase. Les principes actifs utilisés sont le DHA, le 2-diméthylamino éthyl ester de l'acide hydroxy-10 -décène-2 (trans) oïque (ML40) et le glycérol ester de l'acide hydroxy- 10 -décène- 2 (trans) oïque (GM) . Le tableau 1 résume les différentes solutions testées.
Tableau 1
Des coupes congelées de 5 μm, provenant d'une plastie mammaire d'une femme de 54 ans, sont placées sur des lames histologiques (4 coupes par lame) . Chaque solution est testée sur une lame.
Les coupes sont recouvertes des solutions à tester puis mises à incuber pendant 2 heures à 37°C en chambre humide. Les solutions sont éliminées par rinçages répétitifs et les coupes sont colorées au picrosirius. L'examen microscopique est réalisé à l'objectif de 2,5 et les photographies papier sont prises avec un film Kodak Gold 100 ASA.
2. Résultats .
Le tableau 2 résume les résultats de l'altération de la structure collagenique en fonction de la solution testée. Une absence d'altération de la structure collagenique est indiquée par 0 alors qu'une structure collagenique moyennement ou nettement à très fortement altérée est indiquée respectivement par 1 ou 2.
Tableau 2
De plus, l'application du témoin tampon Tris ou de l'excipient n'induit aucune altération de la structure collagenique.
Par conséquent, le produit DHA à 1 et à 2 % inhibe totalement l'activité de la collagénase, alors que les produits ML40 et GM à 2% inhibe légèrement l'activité de la collagénase.
Exemple 4 : Evaluation de l'activité anti- collagénase du GM obtenu par le procédé de l'invention sur explants de peau humaine maintenue en survie.
1. Mode opératoire.
L'étude est faite sur un produit à 5% de GM en comparaison avec de l'excipient (hydrocérine) , un contrôle positif et un témoin en présence de la collagénase à 100 U/ml.
L' hydrocérine est utilisé comme excipient pour la préparation du produit à appliquer. Cette étude a été réalisée deux fois. Dans la première étude, il a été constaté que l'action de la collagénase à J2 reste très limitée et non significative. Dans la deuxième étude, le temps d'application est prolongé et le prélèvement des explants est effectué à J2 et à J4.
a. Préparation des explants.
Des explants de peau humaine préparés et répartis en 16 lots de trois explants chacun sont mis en survie selon le tableau 3.
Tableau 3
J2 J4
Témoin 3 explants 3 explants
Excipient 3 explants 3 explants
Produit à 5% GM 3 explants 3 explants
Contrôle positif 3 explants 3 explants
Témoin + collagénase 3 explants 3 explants
Excipient + collagénase 3 explants 3 explants
Produit à 5% GM + collagénase 3 explants 3 explants
Contrôle positif + collagénase 3 explants 3 explants b . Application du produit à 5% de GM .
Le produit est appl iqué à J0 et à J2 à raison de 20 mg par explant et la collagénase est incorporée dans les milieux de culture des 24 derniers lots .
c. Histologie. Trois explants de chaque lot sont prélevés à J2 et à J4 fixés au Bouin ordinaire et traités en histologie .
L'étude histologique comprend : imprégnation en paraffine, coupes, coloration au rouge sirius F3B mesures colorimétriques du collagene par analyse d'images rapport avec photos .
2. Résultats.
Les prélèvements réalisés à J2 ne montrent aucune activité significative de la collagénase quelque soit le lot examiné. Pour cette raison, la survie, le contact et l'application sont prolongés jusqu'à J4. L'action de la collagénase est notée de 2 manières : intensité de la coloration du réseau de collagene et épaisseur de la structure dermique. Avec cette étude, sont corrélées la pénétration du principe actif et son activité inhibitrice vis-à-vis de la collagénase. Les résultats obtenus sont les suivants :
- pour les témoins sans collagénase, le derme présente une structure normale, avec des faisceaux de collagene réguliers dans tous les compartiments, - pour les témoins avec collagénase, les faisceaux de collagene sont très fortement dégradés et l'épaisseur du derme a diminué de moitié, pour les explants avec excipient et collagénase, les faisceaux de collagene sont fortement dégradés, l'altération étant inférieure à celle observée sur les témoins avec collagénase, et l'épaisseur du derme a diminué de presque moitié,
- pour les explants avec produit à 5% de GM et collagénase, les faisceaux de collagene sont très légèrement dégradés et l'épaisseur du derme a légèrement diminué,
- pour les explants avec contrôle positif (phénanthroline) et collagénase, la structure dermique est identique à celle des témoins sans collagénase.
Dans ces conditions expérimentales, le produit GM montre une nette activité anti-collagénase.
Exemple 5 : Evaluation de l'activité anti- lipolytique du DHA obtenu par le procédé de l'invention sur des explants de tissus adipeux ex vivo.
1 . Mode opératoire.
Le DHA est incorporé dans le milieu de culture à la concentration finale de 0,25 et de 0,5 %. Après un contact de 8 jours, l'activité est évaluée par dosage des lipides relargués dans le milieu de culture.
a. Préparation des explants. Douze explants de tissus adipeux (plastie
P202-AB31) sont préparés et mis en survie en milieu BEM (BIO-EC's Explants Médium). Les explants sont répartis en 4 lots de 3 explants : un lot Témoin, un lot Témoin Positif (caféine à 0,1%), deux lots produit (DHA à 0,25 et 0,5%) .
b. Application des produits.
A J0, les explants sont mis en survie dans 2 ml de milieu de culture, dans lequel le produit à tester est incorporé.
Ce traitement est renouvelé à J2 , J4 et Jβ .
c . Prélèvements . A J2 , J4 , J6 et J8 , le milieu de culture est prélevé. Pour chaque explant, les milieux prélevés à J2 , J4 , J6 et J8 sont regroupés dans un même tube et conservé à -20°C en vue du dosage des lipides.
A J8 , les explants de tissus adipeux sont prélevés et fixés dans du Bouin ordinaire en vue de l'étude histologique.
d. Histologie.
Les explants de tissus adipeux fixés sont déshydratés, imprégnés en paraffine, mis en bloc, coupés et colorés au trichrome de Masson.
e. Dosage des Lipides.
Après extraction du milieu de culture, les lipides sont séparés et dosés par CCM.
2. Résultats .
La viabi l ité et la morphologie des adipocytes est contrôlée par l ' étude histologique . L ' activité lipolytique est évaluée par l ' analyse des proport i ons de monoglycéri de s , diglycérides , triglycérides et acides gras libres . a . Histologie .
Après 8 jours de maintien en survie, les explants témoins et traités ne présentent pas d'altérations visibles, ni de nécroses cellulaires.
b. Dosage des lipides.
Les résultats obtenus sont regroupés dans le tableau 4 ci-dessous. Les résultats sont exprimés en masse (μg) de chaque catégorie de lipides libérés dans le milieu de culture, pendant les 8 jours de traitemen .
Tableau 4
Le tableau 5 c i - de ssous représ ente l ' analyse statistique par le test de Student des résultats du dosage des acides gras libérés dans le milieu de culture , pendant les 8 j ours de traitement . Tableau 5
Le paramètre essentiel dans cette étude est la variation de la quantité et le pourcentage des acides gras libérés dans le milieu de culture après la période de traitement .
Par rapport au Témoin non traité, une augmentation d'un facteur d'environ 29 (2780%) pour le témoin positif (caféine à 0,1%) est observée.
Le DHA à 0,25 et 0,50% entraîne une augmentation significative respectivement de 1075 et 1087%. L'augmentation de la concentration utilisée n'engendre pas des effets sur l'efficacité. Il semble que la dose maximale efficace soit de l'ordre de 0,25%.
Dans les conditions opératoires décrites ci-dessus et selon le test de Student, le DHA appliqué à 0,25 et à 0,5% présente une activité lipolytique significative en comparaison avec celle de la caféine.

Claims

REVENDICATIONS
1) Procédé de préparation des hydroxy- acides gras insaturés et de leurs esters répondant à la formule générale suivante ( Id) :
Formule ( Id)
avec n= 1 à 4 m = 2 à 16
R = OH, Cl, Br, OR3 où R3 représente un radical alkyl, alcényl, alcynyl, linéaire ou ramifié de 1 à 16 carbones ou esters du glycérol, éventuellement substitué par un ou plusieurs atomes de carbone, d'azote, de soufre ou d'halogènes tels que fluor, chlore, brome et iode,
R2= H, R'2, R'3 identiques ou différents les uns des autres, représentent un radical alkyl, alcényl, alcynyl, linéaire ou ramifié de 1 à 16 carbones ou esters du glycérol, éventuellement substitué par un ou plusieurs atomes de carbone, d'azote, de soufre ou d'halogènes tels que fluor, chlore, brome et iode, ou R2= C-Ar3 avec Ar représentant un radical aryl éventuellement substitué par un ou plusieurs atomes de carbone, d'azote, de soufre ou d'halogènes tels que fluor, chlore, brome et iode, ou R2= le tétrahydropyranyl de formule :
caractérisé en ce que le schéma réactionnel est le suivant :
III IV
Ib la
le
où Rl t R2, m et n ont la même signification que dans la formule Id.
2) Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que la première étape est une bromation, le composé de départ étant un diol de formule (II) .
3) Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 ou 2 , caractérisé en ce que la première étape nécessite l'utilisation d'un solvant. 4) Procédé selon la revendication 3, caractérisé en ce que le solvant est choisi parmi le toluène, le benzène, le diméthylformamide , le tétrahydrofuran, le cyclohexane, l'heptane, 1 'éther de pétrole.
5) Procédé selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que le réactif utilisé dans la première étape est choisi parmi le HBr aqueux ou non, le Ph3P,Br2, le tétrabromide de carbone triphénylphosphine et l'acide hydrobromique.
6) Procédé selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que la seconde étape est une oxydation en aldéhyde de formule (IV) en présence d'un N-oxyde d'aminé tertiaire cyclique ou non cyclique, anhydre ou non anhydre et en présence de DMSO.
7) Procédé selon la revendication 6, caractérisé en ce que le N-oxyde d'aminé tertiaire cyclique ou non cyclique, anhydre ou non anhydre est choisi parmi le N méthyl morpholine oxyde, le triméthylamine oxyde ou le triéthylamine oxyde ou un mélange de ceux-ci.
8) Procédé selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que l'étape 3 dudit procédé est une réaction de Witting- Horner et que l'étape 4 dudit procédé est une réaction de saponification.
9) Procédé selon la revendication 8, caractérisé en ce que ladite réaction de Witting-Horner est réalisée en présence de triethylphosphonoacetate et de carbonate de potassium.
10) Procédé selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que l'étape 5 dudit procédé est une étape de protection spécifique de la fonction alcool du composé de formule générale (Ib) obtenu à l'étape 4.
11) Procédé selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que l'étape 5 s'effectue dans tout éther d'énol en présence d'un catalyseur acide.
12) Procédé selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que l'étape 5 s'effectue dans le dihydropyrane en présence d'APTS (Acide para toluène sulfonique) .
13) Procédé selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que le produit de formule (Id) obtenu à l'étape 5 du procédé de l'invention subit une déprotection finale afin d'obtenir le composé de formule générale (le) .
14) Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 12, caractérisé en ce que le produit de formule (Id) obtenu à l'étape 5 dudit procédé est utilisé dans une réaction d' estérification du glycérol avant de subir une déprotection finale.
15) Procédé selon l'une des revendications revendication 13 ou 14, caractérisé en ce que ladite déprotection est réalisée dans une solution de méthanol contenant un catalyseur acide . 16) Procédé selon la revendication 15, caractérisé en ce le catalyseur acide utilisé est 1 ' ATPS .
17) Utilisation d'un produit susceptible d'être obtenu par un procédé selon l'une quelconque des revendications précédentes, comme agent actif anti- collagénase dans une préparation pharmaceutique et/ou cosmétique.
18) Utilisation selon la revendication 17, caractérisé en ce que ledit produit est l'acide hydroxy- 10 -décène-2 (trans) oïque (DHA) ou du glycérol ester de l'acide hydroxy-10 -décène-2 (trans) oïque .
19) Utilisation selon la revendication 18, pour la préparation d'un médicament destiné à prévenir ou à guérir la dégradation du collagene.
20) Utilisation selon la revendication 19, pour la préparation d'un médicament destiné à prévenir ou à guérir la dégradation du collagene par les collagénases bactériennes lors d'une infection bactérienne .
21) Utilisation selon la revendication 18, pour la préparation d'un médicament destiné à la régénérescence de la peau et des ligaments.
22) Utilisation selon la revendication 18, pour préparation d'un médicament destiné à prévenir ou à guérir l'invasion tumorale. 23) Utilisation selon la revendication 18, pour la préparation d'un médicament destiné à prévenir ou à guérir des maladies dégénérâtives présentant une dégénérescence fibrinoïde du collagene et également appelées « maladies du collagene » .
24) Utilisation d'un produit susceptible d'être obtenu par un procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 16, comme agent actif lipolytique dans une préparation pharmaceutique et/ou cosmétique.
25) Utilisation d'un produit susceptible d'être obtenu par un procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 16, comme agent actif anti-acnéique dans une préparation pharmaceutique et/ou cosmétique.
26) Utilisation selon l'une quelconque des revendications 24 à 25, caractérisée en ce que ledit produit est l'acide hydroxy- 10 -décène-2 (trans) oïque (DHA) .
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Families Citing this family (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
UY27304A1 (es) 2001-05-24 2002-12-31 Avanir Pharmaceuticals Inhibidores del factor inhibidor de la migración de los macrófagos y métodos para su identificación
FR2892411B1 (fr) * 2005-10-21 2009-03-20 Diverchim Sa Nouveau procede de preparation d'hydroxy-acides gras insatures
FR2892410B1 (fr) * 2005-10-21 2010-10-15 Fabre Pierre Dermo Cosmetique Nouveaux hydro-acides gras insatures et leur utilisation dermo cosmetologique
CA2641991A1 (fr) * 2006-02-09 2007-08-16 Elevance Renewable Sciences, Inc. Compositions antimicrobiennes, procedes et systemes correspondants
WO2007092632A2 (fr) * 2006-02-09 2007-08-16 Elevance Renawable Sciences, Inc. Compositions de revêtement de surface et procédés associés
FR2911134B1 (fr) * 2007-01-09 2009-03-06 Diverchim Sa Nouveau procede de preparation d'hydroxy-acides gras insatures
FR2911135B1 (fr) * 2007-01-09 2009-03-20 Diverchim Sa Nouveau procede de preparation d'hydroxy-acides gras insatures
FR2911338B1 (fr) * 2007-01-16 2014-06-13 Diverchim Nouveau procede de preparation de derives d'amino-acides insatures
CA2674568A1 (fr) 2007-01-16 2008-07-31 Pierre Fabre Dermo-Cosmetique Nouveaux derives amino-acides gras insatures et leur utilisation dermo cosmetologique
CN101570482B (zh) * 2009-06-09 2012-12-26 李应阳 由ω-氯辛醇合成蜂王酸的方法
CN102603517A (zh) * 2012-02-15 2012-07-25 武汉工程大学 10-hda的合成工艺
CN103159617B (zh) * 2013-03-12 2014-12-10 南京师范大学 一种合成10-羟基-2-癸烯酸的方法
JP6819957B2 (ja) 2014-05-08 2021-01-27 ディーエスエム アイピー アセッツ ビー．ブイ．Ｄｓｍ Ｉｐ Ａｓｓｅｔｓ Ｂ．Ｖ． １０−ヒドロキシ−２−デセン酸を含む方法及び組成物
CN115612070A (zh) * 2022-09-07 2023-01-17 齐鲁工业大学 一种聚羟基脂肪酸酯、聚羟基脂肪酸酯交联膜及制备方法

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH0215044A (ja) * 1988-07-01 1990-01-18 Shin Etsu Chem Co Ltd ローヤルゼリー酸の製造方法
FR2684988B1 (fr) * 1991-12-12 1995-07-13 Fabre Pierre Cosmetique Procede industriel de synthese de l'acide hydroxy-10-decene-e-ouique et de l'acide oxo-9-decene-2-ouique, principe actifs de la gelee royale.
FR2783517B1 (fr) * 1998-09-22 2001-02-09 Oreal Nouveaux derives de l'acide 10-hyroxy-2-decenoique et utilisation dans une composition destinee a favoriser la desquamation de la peau, et composition le comprenant

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
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