EP1165620A1 - Complexes d'inclusion d'acides gras polyinsatures et de leurs derives avec la y-cyclodextrine - Google Patents

Complexes d'inclusion d'acides gras polyinsatures et de leurs derives avec la y-cyclodextrine

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EP1165620A1
EP1165620A1 EP00909441A EP00909441A EP1165620A1 EP 1165620 A1 EP1165620 A1 EP 1165620A1 EP 00909441 A EP00909441 A EP 00909441A EP 00909441 A EP00909441 A EP 00909441A EP 1165620 A1 EP1165620 A1 EP 1165620A1
Authority
EP
European Patent Office
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cyclodextrin
fatty acids
aqueous solution
complex
polyunsaturated fatty
Prior art date
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Withdrawn
Application number
EP00909441A
Other languages
German (de)
English (en)
Inventor
Florence Djedaini Pilard
Bruno Perly
Jean-Pierre Dalbiez
Quitterie Michon
Béatrice ROUSSEAU
Pascale Barrier
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Sea Oil
Commissariat a lEnergie Atomique et aux Energies Alternatives CEA
Original Assignee
Commissariat a lEnergie Atomique CEA
Sea Oil
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Commissariat a lEnergie Atomique CEA, Sea Oil filed Critical Commissariat a lEnergie Atomique CEA
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Withdrawn legal-status Critical Current

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    • C08B37/0012—Cyclodextrin [CD], e.g. cycle with 6 units (alpha), with 7 units (beta) and with 8 units (gamma), large-ring cyclodextrin or cycloamylose with 9 units or more; Derivatives thereof
    • C08B37/0015—Inclusion compounds, i.e. host-guest compounds, e.g. polyrotaxanes
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    • A61K2800/56—Compounds, absorbed onto or entrapped into a solid carrier, e.g. encapsulated perfumes, inclusion compounds, sustained release forms

Definitions

  • the invention relates to solubilization
  • Polyunsaturated fatty acids such as arachidonic or eicosatetraenoic (AA) eicosapentaenoic (EPA) and docosahexaenoic (DHA) acids are long chain polyunsaturated fatty acids
  • DHA Docosahexaenoic acid
  • Triglycerides RR 2 , R 3 represent the fatty acid hydrocarbon group such as EPA, DHA or the like. These n-3 series polyunsaturated fatty acids (PUFA) have very interesting properties in the prevention of certain inflammatory pathologies (psoriasis, arthritis) and cardiovascular diseases.
  • PUFA polyunsaturated fatty acids
  • n-3 PUFAs exert their beneficial effect by intervening at two levels:
  • the period of perinatal development is special in that it corresponds to the most active phase of incorporation of long chain PUFAs (22: 6 n-3; i.e. 22 carbon atoms, 6 ethylenic unsaturations , the first being on carbon n-3) in the structural lipids of the central nervous system, but also the most sensitive to dietary intake of PUFAs.
  • this period of rapid growth extends from the last three months of fetal life until the age of two. During the first year, the newborn's brain will take two grams per day mainly due to the phenomenon of myelinization. This implies that dietary intake of PUFA must be quantitatively and qualitatively correct.
  • document FR-A-2 547 829 [1] provides a stable composition containing compounds of unsaturated fatty acids and a stabilizing organic compound corresponding to the formula:
  • R 1 and R 2 represent Ls respectively fatty acid residues while R represents H 3 or
  • Document EP-A-0 470 452 [3] also describes the production of a product comprising ⁇ -cyclodextrin and an oleaginous substance containing EPA or DHA, by precipitation from a solution.
  • the present invention specifically relates to formulations in the form of aqueous solutions containing in solution at least one oleaginous substance belonging to the group of polyunsaturated fatty acids and their derivatives (salts, esters and triglycerides), which are suitable for such incorporation.
  • the subject of the invention is an aqueous solution comprising at least one oleaginous substance chosen from polyunsaturated fatty acids and the salts, esters and triglycerides of polyunsaturated fatty acids, in which the said substance (s) are in the form of an inclusion complex in ⁇ -cyclodextrin.
  • natural cyclodextrins are cyclic oligosaccharides consisting of D-glucopyranosyl units linked in ⁇ -1,4.
  • ⁇ -cyclodextrin which is a natural cyclodextrin, comprises eight D-glycopyranosyl units.
  • the oleaginous substances used in the invention can be of different types and from various origins, for example from fish or plants.
  • the polyunsaturated fatty acids AA, EPA and DHA mentioned above are used, in particular in the form of triglycerides. It is possible to use a mixture of one or more of these acids with other saturated or unsaturated fatty acids, for example a fish oil.
  • the solution comprises several oleaginous substances, these being constituted by a fish oil.
  • the fish oil can in particular be a sardine oil or a tuna oil.
  • Such an oil comprises unsaturated fatty acids having from 1 to 6 ethylenic unsaturations as well as fatty acids without ethylenic unsaturation.
  • the invention also relates to a process for the preparation of an aqueous solution comprising at least one oleaginous substance chosen from polyunsaturated fatty acids and the salts, esters and triglycerides of polyunsaturated fatty acids.
  • ⁇ -cyclodextrin is used to dissolve these substances and the process comprises the following steps: a) dissolving ⁇ -cyclodextrin in water, b) adding to the solution obtained in a) oleaginous substance (s) to be dissolved, and c) separating the precipitated complex of ⁇ -cyclodextrin and of oleaginous substance (s)
  • the precipitated complex can also be recovered, dried, then put back into an aqueous solution.
  • the complex obtained can be recovered and dried in the supernatant and then put back into an aqueous solution.
  • the method may further comprise a step of recovering and drying at least one of the complexes obtained in step c) followed by the re-solution in aqueous solution of the dried complex (s). .
  • one begins by dissolving the ⁇ -cyclodextrin in water with stirring using an amount of ⁇ -cyclodextrin which can go to the saturation of the. solution, i.e. 230 g / 1.
  • step b) which follows, the oleaginous substance (s) are added in an amount such that it corresponds to a slight excess relative to the amount of ⁇ -cyclodextrin necessary to form the equimolar complex. It is also subjected to agitation.
  • step c) the supernatant is separated from the precipitate, for example by centrifugation.
  • oleaginous substances in ⁇ -cyclodextrin overcomes the following problems: the polymerization of polyunsaturated fatty acids, the migration of cis double bonds in trans, and peroxidation.
  • Such aqueous formulations can be used to include these polyunsaturated fatty acids and / or their triglycerides, salts and esters in food compositions and in cosmetic compositions.
  • the subject of the invention is also pharmaceutical, food or cosmetic compositions comprising an aqueous solution of at least one oleaginous substance chosen from polyunsaturated fatty acids and the salts, esters and triglycerides of polyunsaturated fatty acids, in which the (said) substance (s) are in the form of an inclusion complex in ⁇ -cyclodextrin.
  • FIG. 1 is the spectrum obtained by nuclear magnetic resonance of the proton, in pyridine, of the ⁇ -cyclodextrin-fish oil complex, precipitated in the example given below.
  • the following example illustrates the solubilization of fish oil using ⁇ -cyclodextrin.
  • 9.9931 g of ⁇ -cyclodextrin and 87 ml of water are introduced into a container to obtain a solution of 114.86 g / 1 of ⁇ -cyclodextrin, which corresponds substantially to half of the maximum solubility (230 g / 1) ⁇ -cyclodextrin.
  • the mixture is stirred on a turntable at 300 revolutions / minute until the ⁇ -cyclodextrin is completely dissolved, which is obtained in a few minutes.
  • TGL (noted TGL in the figure) which are unambiguously attributed to triglycerides from fish oil.
  • the amount of triglycerides included in the supernatant is quite large and the amount included in the precipitate is even greater.
  • the solubility of the lyophilized complexes is then examined by re-solution in water. To this end, the quantity of water necessary to obtain the dissolution of 0.0846 g of lyophilized complex is added; this is 47.08 ml and it leads to an opalescent solution, the complex concentration of which is 1.79 g / l.
  • the lyophilized complex obtained from the supernatant and the lyophilized complex obtained from the precipitate are dissolved in a minimum volume of dimethylformamide DMF, which denatures the complex by separating the two species which constitute it. Having taken a mass of 1 g of complex, a volume of DMF of 4 ml is necessary to dissolve everything. About 60 ml of ether are added to each sample because the triglycerides are soluble therein but not the cyclodextrin which precipitates instantly.
  • the fraction of the triglycerides which have been included in the ⁇ -cyclodextrin is thus recovered.
  • the fluid obtained is oily in appearance.
  • the mass of triglycerides recovered is 0.1178 g per 1 g of the complex from the supernatant and 0.2164 g for 1 g of the complex from the precipitate.
  • the samples are stored under argon to avoid any degradation in air, before their analysis by gas chromatography, which will give their characteristic fatty acid profile.
  • fatty acids are identified by their number of carbon atoms, followed by the number of ethylenic unsaturations and the location in the chain of the first unsaturation.
  • EPA corresponds to 20: 5 n-3.

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Abstract

L'invention a pour objet une solution aqueuse comprenant au moins une substance oléagineuse choisie parmi les acides gras polyinsaturés et les sels, esters et triglycérides d'acides gras polyinsaturés, dans laquelle la (lesdites) substance(s) sont sous la forme de complexe d'inclusion dans la gamma -cyclodextrine. La (les) substance(s) oléagineuse(s) peuvent être choisies parmi l'acide arachidonique (AA), l'acide eicosapentaénoïque (EPA), l'acide docosahexaénoïque (DHA) et leurs triglycérides ainsi que parmi les huiles de poisson.

Description

COMPLEXES D'INCLUSION D'ACIDES GRAS POLYINSATURES ET DE LEURS DERIVES AVEC LA 7-CYCLODEXTRINE
DESCRIPTION
Domaine technique
L'invention concerne la solubilisation et
10 la stabilisation d'acides gras polyinsaturés et des sels, esters et triglycérides correspondants, par inclusion dans la γ-cyclodextrine en vue d'obtenir des formulations solubles dans l'eau, incorporables à des compositions pharmaceutiques, alimentaires ou
15 cosmétiques.
Les acides gras polyinsaturés tels que les acides arachidonique ou eicosatétraénoïque (AA) eicosapentaénoique (EPA) et docosahexaénoique (DHA) sont des acides gras polyinsaturés à longue chaîne de
20 la série n-3. Ils sont contenus dans les produits issus de la mer, c'est-à-dire principalement dans les huiles de poissons, mais aussi dans certaines micro-algues. Ils sont obtenus par hydrolyse-estérification des triglycérides. Ces acides et les triglycérides
25 correspondants répondent aux formules :
Acide arachidonique (AA)
Acide eicosapentaénoïque (EPA)
Acide docosahexaenoïque (DHA)
Triglycérides : R R2, R3 représentent le groupe hydrocarboné acide gras tel que EPA, DHA ou autre. Ces acides gras polyinsaturés de la série n-3 (AGPI) présentent des propriétés très intéressantes dans la prévention de certaines pathologies inflammatoires (psoriasis, arthrite) et des maladies cardio-vasculaires.
Les premières études épidémiologiques suggérant l'existence d'effets potentiellement bénéfiques de ces acides gras sur la mortalité cardio- vasculaire, remontent aux observations effectuées chez les Esquimaux groenlandais . Dans cette population, consommatrice quasi-exclusive de mammifères marins et de poissons, environ 14 g d'AGPI n-3 sont ingérés quotidiennement, et les décès par maladies cardio- vasculaires sont rares. La relation entre le niveau de consommation de poissons (et à fortiori d'AGPI n-3) et l'incidence des maladies cardio-vasculaires a été retrouvée au Japon et dans certaines études prospectives .
Les AGPI n-3 exercent leur effet bénéfique en intervenant à deux niveaux :
1) ils abaissent la triglycéridémie (et non la cholestérolémie) , cette diminution résultant pour l'essentiel d'une synthèse des lipoprotéines de basse densité et de leurs constituants ;
2) ils inhibent les phénomènes d'agrégation plaquettaire, de coagulation et d'inflammation en jouant sur la synthèse d'un grand nombre de molécules (thromboxanes, prostacylines, leucotriènes, PAF, fibrinogène, PDGF, cytokines, ... ) . Dans le souci de limiter le taux de mortalité coronarienne pour l'ensemble de la population, il semble prudent de recommander la consommation de poisson. Les AGPI présentent également d'autres intérêts notamment au niveau de la peau et des structures nerveuses au cours du développement périnatal.
En effet, des modifications apparaissent lors de déficience en AGPI au niveau de l'épiderme : perméabilité à l'eau augmentée, hyperprolifération cellulaire (problème de kératinisation) , augmentation de l'épaisseur et du nombre de couches, eczémas, irritations, érythèmes...
Sur le plan nutritionnel, la période de développement périnatal est particulière en ce sens qu'elle correspond à la phase la plus active d'incorporation des AGPI à longue chaîne (22 : 6 n-3 ; soit 22 atomes de carbone, 6 insaturations éthyléniques, la première étant sur le carbone n-3) dans les lipides de structure du système nerveux central, mais également la plus sensible aux apports alimentaires en AGPI. Pour le cerveau humain, cette période de croissance rapide s'étend des trois derniers mois de la vie fœtale jusqu'à l'âge de deux ans. Au cours de la première année, le cerveau du nouveau-né va prendre deux grammes par joiir en raison principalement du phénomène de myelinisation. Cela implique que les apports alimentaires en AGPI doivent être corrects quantitativement et qualitativement.
En raison d'une consommation moyenne faible de ces acides gras dans les pays industrialisés (200 à 400 mg/jour) , un certain nombre d'industriels commencent à se pencher sur la façon d' enrichir certains aliments en ces acides gras en y additionnant des huiles de poisson (pain, margarine, mayonnaise...)
Cependant l'incorporation de ces acides gras à longue chaîne dans des compositions alimentaires ou cosmétiques est rendue difficile en raison de l'insolubilité dans l'eau, de l'odeur indésirable et du manque de stabilité de ces acides gras.
En effet, ceux-ci sont sensibles à la température et à la lumière. Ils sont instables et s'oxydent très facilement.
Etat de la technique antérieure
Pour surmonter ces difficultés, le document FR-A-2 547 829 [1] propose une composition stable contenant des composés d'acides gras insaturés et un composé organique stabilisant répondant à la formule :
H2COR1
I R2— O— CH 0 | ||
H2C — 0 — P — OCH2CH2N+R3
dans laquelle R 1 et R 2 repré Lsentent respectivement des restes d'acides gras alors que R représente H3 ou
(CH3)3. On peut aussi ajouter à la composition une cyclodextrine dont le rôle est de réduire très fortement l'odeur déplaisante et l'amertume propres aux composés d' acides gras polyinsaturés et dont le rôle est également de rendre la composition agréable au palais.
Dans le document FR-A-2 550 445 [2], on a proposé d' inclure un acide gras polyinsaturé tel que EPA dans la γ-cyclodextrine. Dans ce but, on mélange les deux composés sous forme de pâte en présence de petits volumes d'eau, ce qui conduit à l'obtention d'une poudre contenant un composé d'inclusion γ- cyclodextrine-EPA.
Le document EP-A-0 470 452 [3] décrit également l'obtention d'un produit comprenant de la γ- cyclodextrine et une substance oléagineuse contenant EPA ou DHA, par précipitation à partir d'une solution.
Toutes ces techniques ont l'inconvénient de conduire à des produits solides qui ne conviennent pas pour l'incorporation dans toutes les compositions pharmaceutiques, alimentaires ou cosmétiques.
La présente invention a précisément pour objet des formulations sous forme de solutions aqueuses contenant en solution au moins une substance oléagineuse appartenant au groupe des acides gras polyinsaturés et de leurs dérivés (sels, esters et triglycérides), qui conviennent pour une telle incorporation. Exposé de l'invention
Aussi, l'invention a pour objet une solution aqueuse comprenant au moins une substance oléagineuse choisie parmi les acides gras polyinsaturés et les sels, esters et triglycérides d'acides gras polyinsaturés, dans laquelle la (les) dite (s) substance (s) sont sous la forme de complexe d'inclusion dans la γ-cyclodextrine.
On rappelle que les cyclodextrines naturelles sont des oligosaccharides cycliques constitués d'unités D-glucopyranosyle liées en α-1,4. La γ-cyclodextrine qui est une cyclodextrine naturelle, comprend huit unités D-glycopyranosyle .
Elle répond à la formule :
avec n = 8
Les substances oléagineuses utilisées dans l'invention peuvent être de différents types et d'origines diverses, par exemple provenir de poissons ou de végétaux. On utilise avantageusement les acides gras polyinsaturés AA, EPA et DHA mentionnés précédemment, en particulier sous forme de triglycérides. On peut utiliser un mélange d'un ou plusieurs de ces acides avec d'autres acides gras saturés ou insaturés, par exemple une huile de poisson.
Dans ce cas, la solution comprend plusieurs substances oléagineuses, celles-ci étant constituées par une huile de poisson. L'huile de poisson peut être en particulier une huile de sardine ou une huile de thon. Une telle huile comprend des acides gras insaturés ayant de 1 à 6 insaturations éthyléniques ainsi que des acides gras sans insaturation éthylénique. L'invention a également pour objet un procédé de préparation d'une solution aqueuse comprenant au moins une substance oléagineuse choisie parmi les acides gras polyinsaturés et les sels, esters et triglycérides d'acides gras polyinsaturés. Selon l'invention, on utilise la γ- cyclodextrine pour solubiliser ces substances et le procédé comprend les étapes suivantes : a) dissoudre la γ-cyclodextrine dans de l'eau, b) ajouter à la solution obtenue en a) la (les) substance (s) oléagineuse (s) à solubiliser, et c) séparer le complexe précipité de γ- cyclodextrine et de substance (s) oléagineuse (s)
/ du surnageant qui contient également le complexe en solution. Ainsi, on peut obtenir directement une solution aqueuse de la ou (des) substance (s) oléagineuse (s) .
On peut aussi récupérer le complexe précipité, le sécher, puis le remettre en solution aqueuse. De même, on peut récupérer et sécher le complexe obtenu dans le surnageant et le remettre ensuite en solution aqueuse.
Aussi, le procédé peut comprendre en outre une étape de récupération et de séchage d'au moins l'un des complexes obtenus dans l'étape c) suivie de la remise en solution aqueuse du (des) complexe (s) séché (s) .
Pour mettre en œuvre le procédé décrit ci- dessus, on commence par dissoudre la γ-cyclodextrine dans de l'eau sous agitation en utilisant une quantité de γ-cyclodextrine qui peut aller jusqu'à la saturation de la. solution, soit 230 g/1.
Dans l'étape b) qui suit, on ajoute la (les) substance (s) oléagineuse (s) en quantité telle qu'elle corresponde à un léger excès par rapport à la quantité de γ-cyclodextrine nécessaire pour former le complexe équimolaire. On soumet également à une agitation. Dans l'étape c) , on sépare le surnageant du précipité, par exemple par centrifugation.
Lorsque l'on opère avec un excès de substance (s) oléagineuse (s) , on élimine tout d'abord
/ cet excès avant d'effectuer la séparation par centrifugation. Lorsque l'on soumet ensuite le (s) complexe (s) obtenu (s) à un séchage, celui-ci peut être effectué par lyophilisation ou encore par un procédé de déshydratation utilisant des zéolithes ou « Zéodratation ».
L'inclusion des substances oléagineuses précitées dans la γ-cyclodextrine permet de surmonter les problèmes suivants : la polymérisation des acides gras polyinsaturés, la migration des doubles liaisons cis en trans, et la peroxydation.
L'inclusion des acides gras polyinsaturés ou de leurs triglycérides, sels et/ou esters dans la γ-cyclodextrine, conformément à l'invention, permet d'obtenir des formulations aqueuses contenant ces acides gras en supprimant et en réduisant fortement les problèmes liés à leur oxydabilité et à leur instabilité.
De telles formulations aqueuses peuvent être utilisées pour inclure ces acides gras polyinsaturés et/ou leurs triglycérides, sels et esters dans des compositions alimentaires et dans des compositions cosmétiques.
Aussi, l'invention a encore pour objet des compositions pharmaceutiques, alimentaires ou cosmétiques comprenant une solution aqueuse d'au moins une substance oléagineuse choisie parmi les acides gras polyinsaturés et les sels, esters et triglycérides d'acides gras polyinsaturés, dans laquelle la (lesdites) substance (s) sont sous la forme de complexe d'inclusion dans la γ-cyclodextrine.
L'invention sera mieux comprise à la lecture de la description qui suit, donnée bien entendu à titre illustratif et non limitatif, en référence au dessin annexé.
Brève description du dessin
La figure 1 est le spectre obtenu par résonance magnétique nucléaire du proton, dans la pyridine, du complexe γ-cyclodextrine-huile de poisson, précipité dans l'exemple donné ci-après.
Exposé détaillé des modes de réalisation de l'invention
L'exemple qui suit illustre la solubilisation d'huile de poisson au moyen de γ-cyclodextrine. On introduit dans un récipient 9,9931 g de γ-cyclodextrine et 87 ml d'eau pour obtenir une solution à 114,86 g/1 de γ-cyclodextrine, ce qui correspond sensiblement à la moitié de la solubilité maximale (230 g/1) de la γ-cyclodextrine. On agite le mélange sur un plateau tournant à 300 tours/minute jusqu'à complète dissolution de la γ-cyclodextrine, ce qui est obtenu en quelques minutes.
On ajoute alors 10 ml d'huile de poisson brute (référence SO 30 qui/ contient au moins 30 % d'acide ω-3), et on maintient une agitation constante à
300 tours/minute sur plateau tournant pendant 24 heures. Il se forme un précipité blanc qui se dépose au fond du récipient, et on observe une phase aqueuse opalescente intermédiaire et une suspension huileuse en surface. On élimine la suspension huileuse et on sépare la phase aqueuse du précipité par centrifugation deux fois successivement à 1000 tours/minute pendant 15 minutes, à la température ambiante. On lyophilise séparément le surnageant (phase aqueuse) et le précipité, après congélation dans l'azote liquide. On examine ensuite les produits lyophilisés par résonance magnétique nucléaire du proton (RMN XH) après dissolution dans la pyridine deutériée, à 298 K, à l'aide d'un spectromètre BRUKER DRX 500, opérant à 500, 13 MHz. La figure 1 illustre le spectre de résonance magnétique nucléaire H du précipité. La comparaison de ce spectre avec celui de la γ-cyclodextrine seule montre la présence de signaux
(notés TGL sur la figure) qui sont attribués sans ambiguïté aux triglycérides issus de l'huile de poisson.
Le spectre RMN H obtenu avec le surnageant est identique à celui de la figure 1.
La quantité de triglycérides inclus dans le surnageant est assez importante et la quantité incluse dans le précipité est encore plus importante.
On examine ensuite la solubilité des complexes lyophilisés, par remise en solution dans l'eau. A cet effet, on ajoute la quantité d'eau nécessaire pour obtenir la dissolution de 0,0846 g de complexe lyophilisé ; celle-ci est de 47,08 ml et elle conduit à une solution opalescente dont la concentration en complexe est de 1,79 g/1.
On précise que dans le cas de la β- cyclodextrine, le complexe formé dans les mêmes conditions a une solubilité trois fois plus faible (0,65 g/1) .
Ceci est très intéressant en vue d'une utilisation dans des compositions alimentaires ou cosmétiques, car on peut limiter à des valeurs très faibles la quantité de solution aqueuse de complexe ajoutée .
On vérifie maintenant que le complexe du surnageant et le complexe du précipité sont tous deux des complexes d'inclusion des triglycérides dans la γ- cyclodextrine.
Dans ce but, on dissout le complexe lyophilisé obtenu à partir du surnageant et le complexe lyophilisé obtenu à partir du précipité dans un volume minimum de dimethylformamide DMF, ce qui dénature le complexe en séparant les deux espèces qui le constituent. Ayant prélevé une masse de 1 g de complexe, il faut un volume de DMF de 4 ml pour tout dissoudre. On ajoute environ 60 ml d'éther à chaque échantillon car les triglycérides y sont solubles mais pas la cyclodextrine qui précipite instantanément.
Afin de bien isoler la phase organique contenant les triglycérides de la γ-cyclodextrine précipité, on a recours à une centrifugation pendant 10 minutes, à 1000 tours/minute, à la température ambiante. On transfère la partie liquide récupérée dans une ampoule à décanter. On lave quatre fois successivement à l'eau pour extraire les traces de γ- cyclodextrine restées éventuellement dans la phase organique. On sèche cette phase sur Na2S04 et on bouche le flacon. Après environ 1 heure, on filtre les échantillons sur fritte sous le vide de la trompe à eau, puis on élimine le solvant organique d'extraction (éther) à l' évaporateur rotatif.
On récupère ainsi la fraction des triglycérides qui ont été inclus dans la γ- cyclodextrine. Le fluide obtenu est d'aspect huileux. La masse de triglycérides récupérée est de 0,1178 g pour 1 g du complexe provenant du surnageant et de 0,2164 g pour 1 g du complexe issu du précipité.
Les échantillons sont stockés sous argon pour éviter toute dégradation à l'air, avant leur analyse par chromatographie en phase gazeuse, qui donnera leur profil en acides gras caractéristique.
Les résultats obtenus, exprimés en pourcentage des acides gras identifiés sont donnés dans le tableau qui suit.
Tableau 1
Dans ce tableau, les acides gras sont identifiés par leur nombre d'atomes de carbone, suivi du nombre d' insaturations éthyléniques et de l'emplacement dans la chaîne de la première insaturation. Ainsi, EPA correspond à 20 : 5 n-3.
Les résultats du tableau montrent que l'huile issue du surnageant a la même composition en acides gras que l'huile provenant du précipité. C'est bien la preuve que l'on trouve du complexe à l'état dissous dans le surnageant.
REFERENCES CITEES
[1] FR-A-2 547 829. [2] FR-A-2 550 445. [3] EP-A-0 470 452,

Claims

REVENDICATIONS
1. Solution aqueuse comprenant au moins une substance oléagineuse choisie parmi les acides gras polyinsaturés et les sels, esters et triglycérides d'acides gras polyinsaturés, dans laquelle la (les) dite (s) substance (s) sont sous la forme de complexe d'inclusion dans la γ-cyclodextrine.
2. Solution aqueuse selon la revendication 1 dans laquelle la (les) substance (s) oléagineuse (s) sont choisies parmi l'acide arachidonique' (AA) , l'acide eicosapentaénoïque (EPA), l'acide docosahexaenoïque (DHA) et leurs triglycérides.
3. Solution aqueuse selon la revendication 1 comprenant plusieurs substances oléagineuses, dans laquelle lesdites substances sont constituées par une huile de poisson.
4. Procédé de préparation d'une solution aqueuse selon la revendication 1, qui comprend les étapes suivantes : a) dissoudre la γ-cyclodextrine dans de l'eau, b) ajouter à la solution obtenue en a) la (les) substance (s) oléagineuse (s) à solubiliser, et c) séparer le complexe précipité de γ- cyclodextrine et de substance (s) oléagineuse (s) du surnageant qui contient également le complexe en solution.
5. Procédé selon la revendication 4, qui comprend de plus le séchage d'au moins l'un des complexes obtenus dans l'étape c) suivi de la remise en solution aqueuse du (des) complexe(s) séché(s).
6. Composition alimentaire comprenant une solution aqueuse selon l'une quelconque des revendications 1 à 3.
7. Composition cosmétique comprenant une solution aqueuse selon l'une quelconque des revendications 1 à 3.
8. Composition pharmaceutique comprenant une solution aqueuse selon l'une quelconque des revendications 1 à 3.
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