EP0464531A2 - Enzymatic bating preparations - Google Patents

Enzymatic bating preparations Download PDF

Info

Publication number
EP0464531A2
EP0464531A2 EP91110302A EP91110302A EP0464531A2 EP 0464531 A2 EP0464531 A2 EP 0464531A2 EP 91110302 A EP91110302 A EP 91110302A EP 91110302 A EP91110302 A EP 91110302A EP 0464531 A2 EP0464531 A2 EP 0464531A2
Authority
EP
European Patent Office
Prior art keywords
proteases
activity
weight
protease
optimum
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
EP91110302A
Other languages
German (de)
French (fr)
Other versions
EP0464531A3 (en
EP0464531B1 (en
Inventor
Jürgen Dr. Christner
Ernst Pfleiderer
Tilman Dr. Taeger
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Roehm GmbH Darmstadt
Original Assignee
Roehm GmbH Darmstadt
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Roehm GmbH Darmstadt filed Critical Roehm GmbH Darmstadt
Publication of EP0464531A2 publication Critical patent/EP0464531A2/en
Publication of EP0464531A3 publication Critical patent/EP0464531A3/en
Application granted granted Critical
Publication of EP0464531B1 publication Critical patent/EP0464531B1/en
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Lifetime legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C14—SKINS; HIDES; PELTS; LEATHER
    • C14C—CHEMICAL TREATMENT OF HIDES, SKINS OR LEATHER, e.g. TANNING, IMPREGNATING, FINISHING; APPARATUS THEREFOR; COMPOSITIONS FOR TANNING
    • C14C1/00—Chemical treatment prior to tanning
    • C14C1/08—Deliming; Bating; Pickling; Degreasing

Definitions

  • Conventional leather technology consists of a sequence of individual steps, the first section of which represents the so-called water workshop, followed by the actual tanning and finishing of the leather (cf. F. Stather, tanning chemistry and tanning technology, Akademie-Verlag, Berlin 1967).
  • the hides and skins are usually subjected to a liming process, which is usually followed by so-called descaling and pickling.
  • the liming is usually a treatment in the alkaline range (pH 12-14), carried out either as a purely alkaline "hydroxyl ash” using calcium hydroxide and sodium hydroxide or in the majority of cases as a reducing "sulphide ash".
  • Sulfide ash usually contain inorganic sulfide in the form of S2 ⁇ or SH ⁇ ion.
  • the present object can be achieved by using an enzymatic pickling preparation for carrying out the pickling, which has a balanced activity spectrum in the entire pH range of the CO2 decalcification with simultaneous activity optimum at pH 6-8, especially at pH 6.5-7. 5.
  • proteolytically active enzymes can take place from various points of view, for example according to the origin (plant / animal / microbiological), according to the point of attack (exo-versus-endo-enzymes), using the "Active Site "of the proteases (" serine proteases ”) and according to the pH optimum of the proteolytic activity.
  • the alkaline bacterial proteases to be used according to the invention [EC3.4.21.14; see. L. Keay in Process Biochemistry 17-21 (1971) also mostly belongs to the serine type. They are preferably the so-called subtilisins, which are derived from various Bacillus sp. are produced, in particular by B.subtilis, B.licheniformis, B.pumilis, B.alkalophilus, B.firmus, B.megaterium, B.cereus, B.amylosacchariticus.
  • the alkaline proteases, the structure of which has in part been analyzed, generally have molar masses in the range from 26,000 to 34,000.
  • subtilisins are predominantly quite stable in the pH range from 5 to 10 as long as work is carried out in the temperature range below 35 ° C. At temperatures of around 65 degrees C and above, however, activity is quickly lost.
  • the subtilisins are more active against casein than against hemoglobin or bovine serum albumin.
  • Technical preparations often show activities between 1 and 6 ANSON units per g (while the activity of crystalline subtilisin is between 25 and 30 ANSON units / g).
  • pancreatic proteases as they are used industrially, are mixtures of trypsin, chymotrypsin and various peptidases. They can contain amylase and lipase as accompanying enzymes. They are usually obtained by salt precipitation from fresh pancreatic press juice or from residues from insulin production. Compared to the substrates casein, hemoglobin and gelatin, the optimal pH value of the effect is 9.0 (30 - 40 degrees C), whereby it should be noted that the proteases are inactivated in the optimal range with increasing temperature.
  • the proteolytic activity of enzymes is customarily determined using the Anson-Hemoglobin method (ML Anson J. Gen. Physiol. 22, 79 (1939) or the Löhlein-Volhard method (Löhlein-Volhard's method for determining the proteolytic method Activity: Ger Schlem. Paperback, Dresden-Leipzig, 1955) determined as "LVE” (Löhlein-Volhard unit).
  • Löhlein-Volhard unit is the amount of enzyme that digests 1.725 mg casein under the specific conditions of the method.
  • units which are derived from the Anson method are used in the following for the activity determination of the enzymes active in the acidic range. These are referred to as "proteinase units (hemoglobin)" U Hb .
  • the enzymatic pickling preparations to be used according to the invention can be in the form of solid mixtures or preferably as preparations in a liquid medium (DE-A 39 04 465; unpublished German patent application P 39 27 286.9).
  • the pickling preparations advantageously also contain known additives such as stabilizers, adjusting agents and the like.
  • Calcium salts for example, are suitable as stabilizers.
  • Alkali chlorides, sulfates or bicarbonates are recommended as adjusting agents.
  • Ammonium salts such as ammonium sulfate or chloride can be used in small amounts ( ⁇ 0.5% by weight, based on the skin material) to accelerate the decalcification.
  • the proportion of the salts in the pickling agents is generally ⁇ 90% by weight, based on the agents as a whole.
  • the mordant especially in liquid form, can also contain emulsifiers and solvents, for example of the type described in DE-A 33 12 840 or DE-A 33 22 840.
  • the proportion of emulsifiers is in the range from 0.01 up to 5% by weight, preferably 0.1 to 0.5% by weight, based on the weight of the skin.
  • nonionic emulsifiers if appropriate in combination with anionic emulsifiers, is particularly preferred.
  • Suitable solvents which are generally used in amounts of 0.1 to 5% by weight, based on the weight of the decalcifying liquor, are conventional, for example from the group of mineral oils or mineral oil fractions, the lower alcohols and glycols and their etherified derivatives in question. For example, mineral oils with between 10 and 60, in particular 15 and 30,% by weight aromatics content may be mentioned.
  • the implementation of the invention can closely follow the known procedures for CO2 decalcification.
  • the process is preferably carried out in the tanning drum or in the tanning machine, a recirculation or pumping device being advantageous for the liquor.
  • the liquors used are generally in the range up to 150%, based on the weight of the nakedness.
  • CO2 gas is fed directly into the pumping system.
  • the dosage is advantageously 7-11 l / min.
  • the pickling agent for example product A according to the exemplary embodiments, is metered in right at the start.
  • the pH of the liquor then drops from close to 12 to a value around 8 in the first period, after about 20 minutes, after one another time period of about 10 minutes to a value of approx. 6.5 - 7.
  • the pelts with a thickness of 1.8 - 2.5 mm are completely decalcified after a descaling period of approx. 120 minutes.
  • the skins are to be rated better than when using a purely pancreatic mordant with the same activity (with optimum activity at pH 8) if the procedure is otherwise identical.
  • the process according to the invention does not require a fundamental change in the CO2 decalcification and pickling process.
  • Enzyme preparations consisting of:
  • pancreatic enzyme suspension 100 kg of squeezed juice obtained after grinding, activating and extracting pancreatic glands is mixed with 50 kg of ammonium sulfate and the pancreatic enzymes are precipitated.
  • the pancreatic enzyme suspension has an activity of 8 400 U HB at pH 8 and a density of approx. 1.22 to 1.23 g / cm3. This suspension is then washed with as much thickened isotonic ammonium sulfate solution (480 mPa s) diluted to achieve an activity of 250 U HB at pH 8.
  • Product B was used with the same dosage and application. Since product B is liquid, it can be added automatically via a dosing device. In this case an additional opening of the tanning drum is not necessary. This avoids exposure to toxic hydrogen sulfide, which is released to a greater extent during CO2 decalcification.
  • product C is used in the same application and dosage.
  • Product C contains emulsifiers which further improve the basic purity of the skins.

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Detergent Compositions (AREA)
  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Treatment And Processing Of Natural Fur Or Leather (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

The invention concerns enzymatic bating preparations for carbonic acid deliming using proteases, which bating preparations contain A) alkaline bacterial protease having a pH optimum between 9 and 11 in proportions of 10 - 20% by weight, based on the totality of the proteases P, B) pancreas protease having a pH optimum between 7 and 9 in proportions of between 40 - 70% by weight, based on the totality of proteases P, and C) fungal or bacterial protease having a pH optimum within the pH range 5 to 7 in proportions of from 20 to 40% by weight, based on the totality of proteases P, with the proviso that the proteolytic activities of the A') alkaline bacterial proteases at pH 10, B') the pancreatic enzymes at pH 8 and C') the acidic fungal or bacterial protease at pH 6.5 have been adjusted to the same level.

Description

Stand der TechnikState of the art

Die herkömmliche Ledertechnologie besteht aus einer Abfolge von Einzelschritten, deren erster Abschnitt die sogenannte Wasserwerkstatt darstellt, gefolgt von der eigentlichen Gerbung und der Zurichtung der Leder (vgl. F. Stather, Gerbereichemie und Gerbereitechnologie, Akademie-Verlag, Berlin 1967). Im Rahmen der Wasserwerkstatt werden die Häute und Felle gewöhnlich einem Äscherverfahren unterworfen, dem sich heute üblicherweise die sogenannte Entkälkung und die Beize anschließen. Der Äscher stellt in der Regel eine Behandlung im alkalischen Bereich (pH 12 - 14) dar, durchgeführt entweder als rein alkalischer "Hydroxyläscher" unter Verwendung von Calciumhydroxid und Natriumhydroxid oder in der überwiegenden Zahl der Fälle als reduzierend wirkender "Sulfidäscher". Sulfidäscher enthalten anorganisches Sulfid gewöhnlich in Form von S²⁻- oder SH⁻-Ion.Conventional leather technology consists of a sequence of individual steps, the first section of which represents the so-called water workshop, followed by the actual tanning and finishing of the leather (cf. F. Stather, tanning chemistry and tanning technology, Akademie-Verlag, Berlin 1967). As part of the water workshop, the hides and skins are usually subjected to a liming process, which is usually followed by so-called descaling and pickling. The liming is usually a treatment in the alkaline range (pH 12-14), carried out either as a purely alkaline "hydroxyl ash" using calcium hydroxide and sodium hydroxide or in the majority of cases as a reducing "sulphide ash". Sulfide ash usually contain inorganic sulfide in the form of S²⁻ or SH⁻ ion.

Vor der eigentlichen Gerbung sollte die Schwellung der Häute, die durch die Alkalieinwirkung im Äscher eintritt, wieder rückgängig gemacht werden, um eine ausreichende Gerbung zu gewährleisten. Bei der sogenannten Entkälkung wird der pH-Wert der Blößen von ca. 13 auf ca. 8 herabgesetzt. Bei der Anwendung von starken Säuren ist indessen Vorsicht geboten, da ein auch nur zeitweiliger Säureüberschuß eine Säureschwellung in den äußeren Hautschichten, insbesondere in der empfindlichen Narbenschicht hervorrufen kann. (vgl. H.J. Rehm und G. Reed Ed., Biotechnology Vol, 6b, S. 736 - 739, VCH 1988). Aus diesem Grund wurde die Anwendung saurer Salze (d.h. von Salzen schwacher Basen mit starken Säuren) wie z.B. der Ammoniumsalze der Schwefelsäure oder der Salzsäure oder die Anwendung organischer Säuren empfohlen. Allerdings stoßen diese Verfahren auf oekologische Bedenken.Before the actual tanning, the swelling of the skins, which occurs due to the alkali in the liming, should be reversed in order to ensure adequate tanning. In so-called descaling, the pH value of the nakedness is reduced from approx. 13 to approx. 8. However, caution should be exercised when using strong acids, since even a temporary excess of acid can cause acid swelling in the outer layers of the skin, especially in the sensitive scar layer. (see H.J. Rehm and G. Reed Ed., Biotechnology Vol, 6b, pp. 736 - 739, VCH 1988). For this reason, the use of acidic salts (i.e. salts of weak bases with strong acids) such as e.g. ammonium salts of sulfuric acid or hydrochloric acid or the use of organic acids is recommended. However, these processes have ecological concerns.

Aufgabe und LösungTask and solution

Anstelle der Verwendung von Ammoniumsalzen, welche in der Abwasserklärung zu einer starken Sauerstoffzehrung führen und daher als Abwassergifte wirken, zeigt in Wasser gelöstes Kohlendioxid (vgl. F. Stather, Gerbereichemie und Gerbereitechnologie, S. 214, Akademie Verlag Berlin 1967; E.E. Ochs J. Am. Leather Assoc. 48, 105 (1953); US-A 2 147 542) keine umweltschädigende Wirkung. Durch die hohe Löslichkeit von CO₂ erreicht man frühzeitig eine gesättigte CO₂-Lösung welche über intermediär gebildete Kohlensäure zur Neutralisation des in der Haut befindlichen Alkalis befähigt ist.Instead of using ammonium salts, which in the wastewater treatment lead to a strong consumption of oxygen and therefore act as wastewater poisons, carbon dioxide dissolved in water shows (cf. F. Stather, Ger borders chemistry and tanning technology, p. 214, Akademie Verlag Berlin 1967; EE Ochs J. Am. Leather Assoc. 48, 105 (1953); US-A 2 147 542) has no environmentally harmful effect. Due to the high solubility of CO₂, a saturated CO₂ solution is reached at an early stage which is capable of neutralizing the alkaline present in the skin via carbonic acid formed as an intermediate.

Es hat sich nun in der Praxis gezeigt, daß die Durchentkälkung am schnellsten verläuft, wenn die CO₂-Eindosierung kontinuierlich erfolgt.
Zu Beginn der CO₂-Entkälkung liegt der pH-Wert bei 11,5 - 12,5 und sinkt bereits nach 15 - 25 Minuten bis auf 6,5 ab. Die nachfolgende Beize wird in der Regel mittels proteolytischer Enzyme durchgeführt, beispielsweise mit Proteasen (vgl. H.J. Rehm und G. Reed, loc.cit., F. Stather loc.cit). Es ist bekannt, daß Beizmittel auf Basis pankreatischer Proteasen ein Aktivitätsoptimum bei pH 7,5

  • 8,5 besitzen. Bei pH-Werten um 6,5 liegen üblicherweise nur noch ca. 60
  • 80 % der Aktivität vor, so daß die Beizaktivität nicht in befriedigendem Umfang ausgenutzt wird.
Um diesen Nachteil zu umgehen, wird in der Patentliteratur (PCT/SE88/00313) vorgeschlagen, die CO₂-Dosierung so vorzunehmen, daß der pH-Wert nicht unter das Optimum der Beizaktivität abfällt (pH = 7,5 ) bzw. das Beizmittel erst dann zuzusetzen, wenn die Entkälkung mit CO₂ abgeschlossen ist und der pH-Wert so weit angestiegen ist, daß dieser in das pH-Optimum des Beizmittels fällt. Bei dieser Verfahrensweise muß aber mit einer verringerten Druchkälkungskinetik gerechnet werden. Es bestand daher die Aufgabe, nach Lösungen zu suchen, die bei Anwendung der CO₂-Entkälkung eine bessere Ausnutzung der Beizaktivität in der Beize ermöglichen.It has now been shown in practice that through-decalcification takes place fastest if the CO₂ metering is carried out continuously.
At the beginning of CO₂ decalcification, the pH is 11.5 - 12.5 and drops to 6.5 after just 15 - 25 minutes. The subsequent pickling is generally carried out using proteolytic enzymes, for example with proteases (cf. HJ Rehm and G. Reed, loc.cit., F. Stather loc.cit). It is known that pickling agents based on pancreatic proteases have an optimum activity at pH 7.5
  • Own 8.5. At pH values around 6.5, there are usually only about 60
  • 80% of the activity before, so that the pickling activity is not used to a satisfactory extent.
To avoid this disadvantage, it is proposed in the patent literature (PCT / SE88 / 00313) to make the CO₂ dosage so that the pH does not drop below the optimum of the pickling activity (pH = 7.5) or the pickling agent only then add when the descaling is completed with CO₂ and the pH has risen so much that it falls within the pH optimum of the pickling agent. With this procedure, however, reduced liming kinetics must be expected. It was therefore the task to look for solutions that allow better utilization of the pickling activity in the pickling when using CO₂ decalcification.

Die vorliegende Aufgabe kann gelöst werden, indem man zur Durchführung der Beize ein enzymatisches Beizpräparat verwendet, welches im gesamten pH-Bereich der CO₂-Entkälkung ein ausgeglichenes Aktivitätsspektrum besitzt bei gleichzeitigem Aktivitätsoptimum bei pH 6 - 8, speziell bei pH 6,5 - 7,5.The present object can be achieved by using an enzymatic pickling preparation for carrying out the pickling, which has a balanced activity spectrum in the entire pH range of the CO₂ decalcification with simultaneous activity optimum at pH 6-8, especially at pH 6.5-7. 5.

Die vorliegende Erfindung betrifft somit ein enzymatisches Beizpräparat mit einem Gehalt an beizwirksamen Proteasen wobei das enzymatische Beizpräparat als enzymatisch wirksame Komponenten

  • A) alkalische Bakterienprotease mit einem pH-Optimum zwischen 9 und 11, speziell 9,5 und 10,5 in Anteilen von 10 - 20 Gew.-% bezogen auf die Gesamtheit der Proteasen P
  • B) Pankreasprotease mit einem pH-Optimum zwischen pH 7 und 9 in Anteilen von 40 bis 70 Gew.-% bezogen auf die Gesamtheit der Poteasen P und
  • C) Pilzprotease oder Bakterienprotease mit ausgeprägtem pH-Aktivitätsoptimum im pH-Bereich 5 bis 7 in Anteilen von 20 bis 40 Gew.-% bezogen auf die Gesamtheit der Proteasen P mit der Maßgabe, daß die
    • A') alkalischen Bakterienproteasen bei pH 10, der
    • B') pankreatischen Enzyme bei pH 8 und der
    • C') sauren Pilz- oder Bakterienprotease bei pH 6,5 bezüglich ihrer proteolytischen Aktivität gleich stark eingestellt sind,
und gegebenenfalls daneben an sich bekannte Stabilisatoren und Hilfsmittel enthält.
Die Summe der Proteasen A) + B) + C) sei stets zu 100 Gew.-% angenommen.The present invention thus relates to an enzymatic pickling preparation containing active proteases, the enzymatic pickling preparation being used as enzymatically active components
  • A) alkaline bacterial protease with a pH optimum between 9 and 11, especially 9.5 and 10.5 in proportions of 10-20% by weight based on the totality of the proteases P.
  • B) pancreatic protease with a pH optimum between pH 7 and 9 in proportions of 40 to 70% by weight, based on the totality of the potentiates P and
  • C) Fungal protease or bacterial protease with a pronounced optimum pH activity in the pH range 5 to 7 in proportions of 20 to 40% by weight, based on the totality of the proteases P, with the proviso that the
    • A ') alkaline bacterial proteases at pH 10, the
    • B ') pancreatic enzymes at pH 8 and
    • C ') acidic fungal or bacterial proteases at pH 6.5 are equally adjusted with regard to their proteolytic activity,
and optionally also contains known stabilizers and auxiliaries.
The sum of the proteases A) + B) + C) is always assumed to be 100% by weight.

Die Proteasen PThe proteases P

Die Klassifizierung proteolytisch wirksamer Enzyme (E.C.3.4) kann unter verschiedenen Gesichtspunkten erfolgen, z.B. nach dem Ursprung (pflanzlich/tierisch/mikrobiologisch), nach dem Angriffsort (Exo-versus-Endo-Enzyme), anhand der "Active Site" der Proteasen ("Serin-Proteasen") und nach dem pH-Optimum der proteolytischen Aktivität. (Vgl. Kirk-Othmer, 3rd Ed. Vol.9, 199 - 202, J. Wiley 1980; K. Anstrup in B. Spencer, Industrial Aspects of Biochemistry, Vol. 30, pp. 23 - 46, North Holland 1974; H.J. Rehm & G. Reed Ed. Biotechnology Vol. 6b, 729 - 743, VCH 1988; Ullmann's Encyclopaedia of Industrial Chemistry 5th Ed. Vol. A9, pp 295 - 397 VCH 1987; Ullmanns Encyclopädie der Techn. Chemie. 4. Auflage, Bd. 10, 475 -561, Verlag Chemie 1975).The classification of proteolytically active enzymes (EC3.4) can take place from various points of view, for example according to the origin (plant / animal / microbiological), according to the point of attack (exo-versus-endo-enzymes), using the "Active Site "of the proteases (" serine proteases ") and according to the pH optimum of the proteolytic activity. (See Kirk-Othmer, 3rd Ed. Vol. 9, 199-202, J. Wiley 1980; K. Anstrup in B. Spencer, Industrial Aspects of Biochemistry, Vol. 30, pp. 23 - 46, North Holland 1974; HJ Rehm & G. Reed Ed.Biotechnology Vol. 6b, 729 - 743, VCH 1988; Ullmann's Encyclopaedia of Industrial Chemistry 5th Ed. Vol A9, pp 295 - 397 VCH 1987; Ullmanns Encyclopadie der Techn. Chemie. 4th edition, vol. 10, 475 -561, Verlag Chemie 1975).

Zu A)To A)

Die erfindungsgemäß einzusetzenden alkalischen Bakterien-Proteasen [E.C.3.4.21.14; vgl. auch L. Keay in Process Biochemistry 17 - 21 (1971)] gehören meist dem Serin-Typ an.
Vorzugsweise handelt es sich um die sogenannten Subtilisine, die von verschiedenen Bacillus sp. produziert werden, insbesondere von B.subtilis, B.licheniformis, B.pumilis, B.alkalophilus, B.firmus, B.megaterium, B.cereus, B.amylosacchariticus. Die alkalischen Proteasen, deren Struktur z.T. analysiert wurde, haben in der Regel Molmassen im Bereich 26 000 - 34 000. Sie sind überwiegend im pH-Bereich 5 - 10 recht stabil, solange im Temperaturbereich unterhalb 35 Grad C gearbeitet wird. Bei Temperaturen von ca. 65 Grad C und darüber geht indessen die Aktivität rasch verloren. Die Subtilisine sind aktiver gegenüber Casein als gegen Haemoglobin oder Rinder-Serumalbumin.
Technische Präparate Zeigen oft Aktivitäten zwischen 1 und 6 ANSON-Einheiten pro g (während die Aktivität von kristallinem Subtilisin bei 25 - 30 ANSON-Einheiten/g liegt).The alkaline bacterial proteases to be used according to the invention [EC3.4.21.14; see. L. Keay in Process Biochemistry 17-21 (1971) also mostly belongs to the serine type.
They are preferably the so-called subtilisins, which are derived from various Bacillus sp. are produced, in particular by B.subtilis, B.licheniformis, B.pumilis, B.alkalophilus, B.firmus, B.megaterium, B.cereus, B.amylosacchariticus. The alkaline proteases, the structure of which has in part been analyzed, generally have molar masses in the range from 26,000 to 34,000. They are predominantly quite stable in the pH range from 5 to 10 as long as work is carried out in the temperature range below 35 ° C. At temperatures of around 65 degrees C and above, however, activity is quickly lost. The subtilisins are more active against casein than against hemoglobin or bovine serum albumin.
Technical preparations often show activities between 1 and 6 ANSON units per g (while the activity of crystalline subtilisin is between 25 and 30 ANSON units / g).

Zu B)To B)

Die Pankreasproteasen wie sie technisch zur Anwendung kommen, stellen Gemische aus Trypsin, Chymotrypsin und verschiedenen Peptidasen dar. Sie können als Begleitenzyme Amylase und Lipase enthalten. Gewonnen werden sie gewöhnlich durch Salzfällung von frischem Pankreasdrüsen-Preßsaft bzw. aus Rückständen der Insulingewinnung. Gegenüber den Substraten Casein, Haemoglobin und Gelatine liegt der optimale pH-Wert der Wirkung bei 9,0 (30 - 40 Grad C), wobei zu beachten ist, daß die Proteasen im optimalen Wirkungsbereich mit steigender Temperatur inaktiviert werden.The pancreatic proteases, as they are used industrially, are mixtures of trypsin, chymotrypsin and various peptidases. They can contain amylase and lipase as accompanying enzymes. They are usually obtained by salt precipitation from fresh pancreatic press juice or from residues from insulin production. Compared to the substrates casein, hemoglobin and gelatin, the optimal pH value of the effect is 9.0 (30 - 40 degrees C), whereby it should be noted that the proteases are inactivated in the optimal range with increasing temperature.

Zu C)To C)

Die Pilzproteinasen bzw. Bakterienproteasen mit ausgeprägtem Aktivitätsoptimum im Bereich zwischen pH 5 und 7 stammen vorzugsweise aus Aspergillus sp., Streptomyces sp., Microsporum sp.. Besonders genannt seien A.sojae, A.niger bzw. oryzae, A.parasiticus, S.griseus, S.naraensis, Piricularia oryzae u.ä. bzw. aus Bacillus-Arten wie B.subtilis, B. thermoproteolyticus, B. cereus, B. megaterium, B.polymixa. Das Molgewicht dieser, im allgemeinen als nicht sehr stabil geltenden Proteasen liegt gewöhnlich im Bereich 35 000 bis 45 000. Ausweislich der Literatur, verlangt die Anwendung von Enzymen dieses Typs

  • strikte Einhaltung des tolerierten pH-Bereichs
  • Anwesenheit von Metallionen (ca⁺² bzw. Zn⁺²)
  • Unterdrückung der Aktivität evtl. vorhandener alkalischer Proteasen (wegen deren Tendenz zur gegenseitigen proteolytischen Spaltung).
The fungal proteinases or bacterial proteases with a pronounced optimum activity in the range between pH 5 and 7 preferably come from Aspergillus sp., Streptomyces sp., Microsporum sp .. A.sojae, A.niger or oryzae, A.parasiticus, S. are particularly mentioned. griseus, S.naraensis, Piricularia oryzae and the like or from Bacillus species such as B. subtilis, B. thermoproteolyticus, B. cereus, B. megaterium, B. polymixa. The molecular weight of these proteases, which are generally not considered to be very stable, is usually in the range from 35,000 to 45,000. According to the literature, the use of enzymes of this type is required
  • strict adherence to the tolerated pH range
  • Presence of metal ions (ca⁺² or Zn⁺²)
  • Suppression of the activity of any existing alkaline proteases (because of their tendency towards mutual proteolytic cleavage).

Die proteolytische Wirksamkeit von Enzymen wird gebräuchlicherweise nach der Anson-Haemoglobin-Methode (M.L. Anson J. Gen. Physiol. 22, 79 (1939) bzw. nach der Löhlein-Volhard-Methode (die Löhlein-Volhard'sche Methode zur Bestimmung der proteolytischen Aktivität. Gerbereichem. Taschenbuch, Dresden-Leipzig, 1955) als "LVE" (Löhlein-Volhard-Einheit) bestimmt.
Unter einer Löhlein-Volhard-Einheit ist diejenige Enzymmenge zu verstehen, die unter den spezifischen Bedingungen der Methode 1,725 mg Casein verdaut. Weiter werden im folgenden für die Aktivitätsbestimmung der im sauren Bereich wirksamen Enzyme Einheiten verwendet, die aus der Anson-Methode abgeleitet sind. Diese werden als "Proteinase-Units (Haemoglobin)" UHb bezeichnet. Eine UHb entspricht der Enzymmenge, welche die Freisetzung von trichloressigsäure-löslichen Bruchstücken aus Haemoglobin äquivalent 1 µMol Tyrosin pro Minute bei 37 Grad C (gemessen bei 280 nm) katalysiert. (1 mUHb = 10⁻³ UHb).The proteolytic activity of enzymes is customarily determined using the Anson-Hemoglobin method (ML Anson J. Gen. Physiol. 22, 79 (1939) or the Löhlein-Volhard method (Löhlein-Volhard's method for determining the proteolytic method Activity: Gerbereichem. Paperback, Dresden-Leipzig, 1955) determined as "LVE" (Löhlein-Volhard unit).
A Löhlein-Volhard unit is the amount of enzyme that digests 1.725 mg casein under the specific conditions of the method. Furthermore, units which are derived from the Anson method are used in the following for the activity determination of the enzymes active in the acidic range. These are referred to as "proteinase units (hemoglobin)" U Hb . A U Hb corresponds to the amount of enzyme which catalyzes the release of trichloroacetic acid-soluble fragments from hemoglobin equivalent to 1 μmol tyrosine per minute at 37 degrees C (measured at 280 nm). (1 mU Hb = 10⁻³ U Hb ).

Durchführung der ErfindungImplementation of the invention

Die Anwendung der erfindungsgemäßen Beizpräparate geht zweckmäßig von folgenden Bemessungsregeln aus:
Gesamtgehalt der Proteasepräparationen A) - C) 0,1 bis 2 Gew.-% bezogen auf das Hautmaterial.
Die Proteasepräparationen setzen sich vorzugsweise wie folgt zusammen:

  • A) alkalische Bakterienproteasen mit einer Enzymaktivität von 2 000 - 50 000 UHB vorzugsweise mit 10 000 - 30 000 UHB gemessen bei pH 10
  • B) Pankreasproteinasen mit einer Enzymaktivität von 2 000 - 60 000, vorzugseise mit 5 000 - 15 000 UHB gemessen bei pH 8
  • C) Pilzproease oder saure Bakterienproteasen mit einer Enzymaktivität von 5 000 - 100 000 UHB, vorzugsweise mit 10 000 - 20 000 UHB gemessen bei pH 6,5.
The application of the pickling preparations according to the invention expediently starts from the following design rules:
Total content of the protease preparations A) - C) 0.1 to 2% by weight based on the skin material.
The protease preparations are preferably composed as follows:
  • A) alkaline bacterial proteases with an enzyme activity of 2,000-50,000 U HB, preferably 10,000-30,000 U HB, measured at pH 10
  • B) Pancreatic proteinases with an enzyme activity of 2,000-60,000, preferably 5,000-15,000 U HB measured at pH 8
  • C) Fungal protease or acidic bacterial proteases with an enzyme activity of 5,000-100,000 U HB , preferably with 10,000-20,000 U HB measured at pH 6.5.

Die erfindungsgemäß einzusetzenden enzymatischen Beizpräparate können in Form von festen Mischungen oder vorzugsweise als Präparate in flüssigem Medium (DE-A 39 04 465; unveröffentlichte deutsche Patentanmeldung P 39 27 286.9) vorliegen.
Die Beizpräparate enthalten neben den Proteasen A) - C) noch zweckmäßigerweise an sich bekannte Zusätze wie Stabilisatoren, Stellmittel u.ä.. Als Stabilisatoren kommen z.B. Calciumsalze infrage. Als Stellmittel empfehlen sich Alkalichloride, -sulfate oder -bicarbonate.
Zur Beschleunigung der Durchentkälkung können in geringen Mengen (< 0,5 Gew.-% bezogen auf das Hautmaterial) Ammoniumsalze wie Ammonsulfat oder -chlorid eingesetzt werden.
Der Anteil der Salze an den Beizmitteln liegt in der Regel bei < 90 Gew.-% bezogen auf die Mittel als ganzes. Weiterhin kann das Beizmittel, vor allem in flüssiger Form noch Emulgatoren und Lösemittel enthalten, beispielsweise der in der DE-A 33 12 840 bzw. DE-A 33 22 840 beschriebenen Art. Im allgemeinen liegt der Anteil an Emulgatoren im Bereich von 0,01 bis 5 Gew.-%, vorzugsweise bei 0,1 bis 0,5 Gew.-% bezogen auf das Hautgewicht.The enzymatic pickling preparations to be used according to the invention can be in the form of solid mixtures or preferably as preparations in a liquid medium (DE-A 39 04 465; unpublished German patent application P 39 27 286.9).
In addition to the proteases A) - C), the pickling preparations advantageously also contain known additives such as stabilizers, adjusting agents and the like. Calcium salts, for example, are suitable as stabilizers. Alkali chlorides, sulfates or bicarbonates are recommended as adjusting agents.
Ammonium salts such as ammonium sulfate or chloride can be used in small amounts (<0.5% by weight, based on the skin material) to accelerate the decalcification.
The proportion of the salts in the pickling agents is generally <90% by weight, based on the agents as a whole. Furthermore, the mordant, especially in liquid form, can also contain emulsifiers and solvents, for example of the type described in DE-A 33 12 840 or DE-A 33 22 840. In general, the proportion of emulsifiers is in the range from 0.01 up to 5% by weight, preferably 0.1 to 0.5% by weight, based on the weight of the skin.

Besonders bevorzugt ist die Verwendung nichtionischer Emulgatoren gegebenenfalls in Kombination mit anionischen Emulgatoren. Genannt seien vor allem die Ethoxylate der C11-C13-Fettalkoholate mit 6 bis 25 Mol Ethylenoxid, vorzugsweise mit 6 - 9 Mol Ethylenoxid.
Als Lösungsmittel, die im allgemeinen in Mengen von 0,1 bis 5 Gew.-% bezogen auf das Gewicht der Entkälkungs-Flotte eingesetzt werden, kommen an sich übliche, beispielsweise aus der Gruppe der Mineralöle bzw. Mineralölfraktionen, der niederen Alkohole und Glykole und deren veretherte Derivate infrage. Beispielsweise seien Mineralöle mit zwischen 10 und 60, insbesondere 15 und 30 Gew.-% Aromatengehalt genannt.The use of nonionic emulsifiers, if appropriate in combination with anionic emulsifiers, is particularly preferred. The ethoxylates of the C11-C13 fatty alcoholates with 6 to 25 moles of ethylene oxide, preferably with 6-9 moles of ethylene oxide, should be mentioned above all.
Suitable solvents, which are generally used in amounts of 0.1 to 5% by weight, based on the weight of the decalcifying liquor, are conventional, for example from the group of mineral oils or mineral oil fractions, the lower alcohols and glycols and their etherified derivatives in question. For example, mineral oils with between 10 and 60, in particular 15 and 30,% by weight aromatics content may be mentioned.

Ausführung der ErfindungImplementation of the invention

Die Ausführung der Erfindung kann sich eng an die bekannten Vorgehensweisen bei der CO₂-Entkälkung anschließen.
Vorzugsweise arbeitet man dabei im Gerbfass oder in der Gerbmaschine wobei eine Rezirkulations- bzw. Umpumpeinrichtung für die Flotte vorteilhaft ist. Die angewendeten Flotten liegen im allgemeinen im Bereich bis 150 % bezogen auf das Blößengewicht. Zur Entkälkung wird CO₂-Gas unmittelbar in das Umpumpsystem eingespeist. Vorteilhafterweise liegt die Dosierung bei 7 - 11 l/min. Im allgemeinen dosiert man gleich zu Beginn das Beizmittel, beispielsweise das Produkt A gemäß den Ausführungsbeispielen zu. In der Regel fällt dann der pH-Wert der Flotte im ersten Zeitabschnitt, etwa nach ca. 20 Minuten von nahe 12 auf einen Wert um 8., nach einem weiteren Zeitabschnitt von etwa 10 Minuten auf einen Wert von ca. 6,5 - 7. Im allgemeinen sind die Blößen mit einer Stärke 1,8 - 2,5 mm nach einer Entkälkungsdauer von ca. 120 Minuten völlig durchentkälkt.The implementation of the invention can closely follow the known procedures for CO₂ decalcification.
The process is preferably carried out in the tanning drum or in the tanning machine, a recirculation or pumping device being advantageous for the liquor. The liquors used are generally in the range up to 150%, based on the weight of the nakedness. For descaling, CO₂ gas is fed directly into the pumping system. The dosage is advantageously 7-11 l / min. In general, the pickling agent, for example product A according to the exemplary embodiments, is metered in right at the start. As a rule, the pH of the liquor then drops from close to 12 to a value around 8 in the first period, after about 20 minutes, after one another time period of about 10 minutes to a value of approx. 6.5 - 7. In general, the pelts with a thickness of 1.8 - 2.5 mm are completely decalcified after a descaling period of approx. 120 minutes.

Vorteilhafte WirkungenBeneficial effects

Die Häute sind im Hinblick auf Grundreinheit, Glätte und Hautaufschluß besser zu bewerten als bei Anwendung eines rein pankreatischen Beizmittels gleicher Aktivität (mit Aktivitätsoptimum bei pH 8) bei sonst identischer Durchführung. Andererseits fällt positiv ins Gewicht, daß das erfindungsgemäße Verfahren keine grundsätzliche Umstellung der CO₂-Entkälkungs- und Beizverfahrensweise erfordert.With regard to their basic purity, smoothness and skin disruption, the skins are to be rated better than when using a purely pancreatic mordant with the same activity (with optimum activity at pH 8) if the procedure is otherwise identical. On the other hand, it is positive that the process according to the invention does not require a fundamental change in the CO₂ decalcification and pickling process.

Die nachfolgenden Beispiele dienen zur Erläuterung der Erfindung.The following examples serve to explain the invention.

BEISPIELEEXAMPLES Produkt AProduct A Enzympräparationen bestehend aus:Enzyme preparations consisting of:

10 Gew.-%10% by weight
einer alkalischen Bakterienprotease aus Bacillus licheniformis mit einer Aktivität von 250 UHB bei pH 10an alkaline bacterial protease from Bacillus licheniformis with an activity of 250 U HB at pH 10
50 Gew.-%50% by weight
eines Pankreasenzym mit einer Aktivität von 250 UHB bei pH 8a pancreatic enzyme with an activity of 250 U HB at pH 8
40 Gew.-%40% by weight
einer sauren Pilzprotease aus Aspergillus niger mit einer Aktivität von 250 UHB bei pH 6,5 Stellsalz der Einzelenzympräparate ist Natriumsulfat. Die Gesamtprotease-aktivität der Mischung bei pH 8 beträgt 180 UHB.An acidic fungal protease from Aspergillus niger with an activity of 250 U HB at pH 6.5, the salt of the individual enzyme preparations is sodium sulfate. The total protease activity of the mixture at pH 8 is 180 U HB .
Produkt BProduct B Herstellung einer absetzstabilen flüssigen Enzympräparation:Preparation of a settable liquid enzyme preparation:

  • a) 10 Gew.-% einer flüssigen wäßrigen alkalischen Bakterienproteaseformulierung aus Bacillus licheniformis mit einer Aktivität von 250 UHB bei pH 10 (Präparation 1 siehe unten) unda) 10% by weight of a liquid aqueous alkaline bacterial protease formulation from Bacillus licheniformis with an activity of 250 U HB at pH 10 (preparation 1 see below) and
  • b) 50 Gew.-% einer flüssigen, wäßrigen Prankreasenzympräparation mit einer Aktivität von 250 UHB bei pH 8 (Präparation 2) undb) 50% by weight of a liquid, aqueous prancreas enzyme preparation with an activity of 250 U HB at pH 8 (preparation 2) and
  • c) 40 Gew.-% einer flüssigen, wäßrigen Pilzproteaseformulierung aus Aspergillus niger mit einer Aktivität von 250 UHB bei pH 6,5 (Präparation 3) werden homogen vermischt.
    Die Präparation hat eine Gesamtaktivität bei pH 8 von 180 UHB und wird durch einfaches Mischen der Einzelpräparationen a) bis c) hergestellt.    c) 40% by weight of a liquid, aqueous fungal protease formulation from Aspergillus niger with an activity of 250 U HB at pH 6.5 (preparation 3) are mixed homogeneously.
    The preparation has an overall activity at pH 8 of 180 U HB and is produced by simply mixing the individual preparations a) to c).
Präparation 1Preparation 1 Herstellung der flüssigen EinzelpräparationenProduction of liquid single preparations

100 kg einer wäßrigen klaren Lösung einer alkalischen Bakterienprotease aus Bacillus licheniformis mit einer Aktivität von 10 000 UHB bei pH10 wird bei 16 Grad C mit 50 kg Ammoniumsulfat versetzt, wobei die Enzyme gefällt werden. Die Enzymsuspension besitzt eine Aktivität von 9 800 UHB bei pH 10 und eine Dichte von 1,22 bis 1,23 g/cm³. Diese Enzymsuspension wird anschließend mit soviel einer verdickten isotonischen Ammoniumsulfat-Lösung (480 mPa s) unter Rühren verdünnt damit eine Aktivität von 250 UHB bei pH 10 erreicht wird.100 kg of an aqueous clear solution of an alkaline bacterial protease from Bacillus licheniformis with an activity of 10,000 U HB at pH10 is mixed with 50 kg of ammonium sulfate at 16 ° C., the enzymes being precipitated. The enzyme suspension has an activity of 9,800 U HB at pH 10 and a density of 1.22 to 1.23 g / cm³. This enzyme suspension is then diluted with as much thickened isotonic ammonium sulfate solution (480 mPa s) with stirring so that an activity of 250 U HB at pH 10 is achieved.

Präparation 2Preparation 2

100 kg Preßsaft wie er nach dem Zermahlen, Aktivieren und Extrahieren von Pankreasdrüsen anfällt wird mit 50 kg Ammoniumsulfat versetzt und die Pankreasenzyme ausgefällt. Die Pankreasenzymsuspension besitzt eine Aktivität von 8 400 UHB bei pH 8 und eine Dichte von ca. 1,22 bis 1,23 g/cm³. Diese Suspension wird anschließend mit soviel einer verdickten isotonischen Ammoniumsulfatlösung (480 mPa s) verdünnt, damit eine Aktivität von 250 UHB bei pH 8 erreicht wird.100 kg of squeezed juice obtained after grinding, activating and extracting pancreatic glands is mixed with 50 kg of ammonium sulfate and the pancreatic enzymes are precipitated. The pancreatic enzyme suspension has an activity of 8 400 U HB at pH 8 and a density of approx. 1.22 to 1.23 g / cm³. This suspension is then washed with as much thickened isotonic ammonium sulfate solution (480 mPa s) diluted to achieve an activity of 250 U HB at pH 8.

Präparation 3Preparation 3

100 kg einer wäßrigen klaren Lösung einer Pilzprotease aus Aspergillus niger werden bei 16 Grad C mit 50 kg Ammoniumsulfat versetzt, wobei die Enzyme ausgefällt werden. Die Enzymsuspension mit einer Aktivität von 8 800 UHB bei pH 6,5 und einer Dichte von 1,22 bis 1,23 g/cm³ wird mit soviel verdickter isotonischer Ammoniumsulfatlösung verdünnt, daß eine Aktivität von 250 UHB bei pH 6,5 erreicht wird.100 kg of an aqueous clear solution of a fungal protease from Aspergillus niger are mixed with 50 kg of ammonium sulfate at 16 ° C., the enzymes being precipitated. The enzyme suspension with an activity of 8,800 U HB at pH 6.5 and a density of 1.22 to 1.23 g / cm³ is diluted with so much thickened isotonic ammonium sulfate solution that an activity of 250 U HB at pH 6.5 is reached becomes.

Herstellung der verdickten isotonischen AmmoniumsulfatlösungPreparation of the thickened isotonic ammonium sulfate solution

In einem Rührkessel werden 60,7 kg Wasser vorgelegt und mit einem Zahnscheibenrührer (Umfangsgeschwindigkeit 2-3 m/sec.) werden 1 kg eines Verdickungsmittels auf Xanthanbasis eingearbeitet (z.B. K1A96, Fa. Kelco). Ist die Viskosität der Lösung auf > 1 000 mPa s angestiegen, werden 38,3 kg Ammoniumsulfat zugegeben. Man rührt so lange bis das Ammoniumsulfat gelöst ist. Die Viskosität fällt dabei auf 480 mPa s ab.60.7 kg of water are placed in a stirred kettle and 1 kg of a xanthan-based thickener (e.g. K1A96, Kelco) is incorporated using a toothed disk stirrer (peripheral speed 2-3 m / sec.). When the viscosity of the solution has risen to> 1,000 mPa s, 38.3 kg of ammonium sulfate are added. The mixture is stirred until the ammonium sulfate is dissolved. The viscosity drops to 480 mPa s.

Produkt CProduct C Herstellung einer flüssigen, nichtwäßrigen absetzstabilen Enzympräparation.Production of a liquid, non-aqueous, stable enzyme preparation.

  • a) 10 Gew.-% einer flüssigen nichtwäßrigen alkalischen Bakterienprotease aus Bacillus licheniformis mit einer Aktivität von 250 UHB bei pH 10 und
  • b) 50 Gew.-% einer flüssigen nichtwäßrigen Pankreasenzympräparation mit einer Aktivität von 250 UHB bei pH 8 und
  • c) 40 Gew.-% einer flüssigen, wäßrigen Pilzproteasepräparation aus Aspergillus niger mit einer Aktivität von 250 UHB bei pH 6,5

werden homogen vermischt. Die Gesamtformulierung hat eine Aktivität von 180 UHB bei pH 8.
  • a) 10% by weight of a liquid non-aqueous alkaline bacterial protease from Bacillus licheniformis with an activity of 250 U HB at pH 10 and
  • b) 50% by weight of a liquid non-aqueous pancreatic enzyme preparation with an activity of 250 U HB at pH 8 and
  • c) 40% by weight of a liquid, aqueous fungal protease preparation from Aspergillus niger with an activity of 250 U HB at pH 6.5

are mixed homogeneously. The overall formulation has an activity of 180 U HB at pH 8.

Herstellung der EinzelenzympräparationenProduction of single enzyme preparations

500 g C₁₃-Fettalkoholethoxylat mit 6-7 Mol Ethylenoxideinheiten, 150,5 g Petroleum (Kp. 110 Grad C) und 307 g Mineralöl (Kp. > 250 Grad C) werden nach Zusatz von 30 g eines organisch modifizierten Bentonits (z.B. Bentone 27, Fa. Kronos Titan, Leverkusen) 35 Minuten lang in einem Ultra-Turrax Rührgerät mit 16 m/sec Umfangsgeschwindigkeit dispergiert. Die Dispersion läßt man 24 Stunden stehen wonach eine Viskosität von 350 mPa s erreicht ist. Unter gleichen Dispergierbedingungen werden nun 12,5 g pulverförmiges Proteaseenzym zugegeben und weitere 5 Minuten dispergiert. Die Einzelpräparation hat bei Verwendung einer pulverförmigen

  • a) alkalischen Bakterienprotease aus Bacillus licheniformis mit der Aktivität von 20 000 UHB bei pH 10 eine Endaktivität von 250 UHB bei pH 10
  • b) Pankreasprotease mit der Aktivität von 20 000 UHB bei pH 8 eine Endaktivität von 250 UHB bei pH 8
  • c) Pilzprotease mit der Aktivität von 20 000 UHB bei pH 6,5 eine Endaktivität von 250 UHB bei pH 6,5.
500 g of C₁₃ fatty alcohol ethoxylate with 6-7 moles of ethylene oxide units, 150.5 g of petroleum (bp. 110 degrees C) and 307 g of mineral oil (bp.> 250 degrees C) are added after adding 30 g of an organically modified bentonite (e.g. Bentone 27 , From Kronos Titan, Leverkusen) dispersed for 35 minutes in an Ultra-Turrax mixer at a peripheral speed of 16 m / sec. The dispersion is left to stand for 24 hours, after which a viscosity of 350 mPa s has been reached. Under the same dispersion conditions, 12.5 g of powdered protease enzyme are then added and dispersed for a further 5 minutes. The single preparation has a powdery form when used
  • a) alkaline bacterial protease from Bacillus licheniformis with the activity of 20,000 U HB at pH 10 and an end activity of 250 U HB at pH 10
  • b) pancreatic protease with the activity of 20,000 U HB at pH 8 a final activity of 250 U HB at pH 8
  • c) fungal protease with the activity of 20,000 U HB at pH 6.5 a final activity of 250 U HB at pH 6.5.

Beispiel 1example 1 Entkälkung und Beize von geäscherten Großviehhäuten (Gewichtsklasse 30 - 39 kg, Spaltstärke 2,2 mm).Descaling and pickling of ashed large cattle hides (weight class 30 - 39 kg, gap thickness 2.2 mm).

In ein Gerbfass mit Rezirkulations- bzw. Umpumpeinheit für die Flotte, werden 1 000 kg geäscherte Rindshaut mit 800 kg Wasser eingebracht.
Zur Entkälkung wird CO₂-Gas direkt in das Umpumpsystem eingespeist. Die Dosierung an CO₂ beträgt 8 bis 9 l/min. Gleich zu Beginn wird 0,5 % (bez. auf Blößengewicht) Beizmittel (Produkt A) zudosiert. Der Anfangs-pH-Wert in der Flotte fällt während den ersten 10 Minuten von pH 11,8 auf pH 8 - 8,2, nach weiteren 10 Minuten auf pH 6,5 -7. Nach insgesamt 120 Minuten Entklälkungszeit sind die Blößen im Querschnitt völlig durchentkälkt. Die Häute sind bzgl. Grundreinheit, Glätte und Hautaufschluß besser zu bewerten, als bei identischen Anwendungen eines reinen Pankreasbeizmittels gleicher Aktivität mit Aktivitätsoptimum bei pH 8.1,000 kg of ashed beef hide with 800 kg of water are placed in a tanning drum with a recirculation or pumping unit for the fleet.
For descaling, CO₂ gas is fed directly into the pumping system. The dosage of CO₂ is 8 to 9 l / min. Right at the start, 0.5% (based on pelt weight) pickling agent (product A) is added. The initial pH in the liquor drops from pH 11.8 to pH 8.2-8 during the first 10 minutes and to pH 6.5-7 after a further 10 minutes. After a total of 120 minutes of descaling, the bare cross-sections are completely descaled. The skins are to be rated better with regard to basic purity, smoothness and skin disintegration than with identical applications of a pure pancreatic stain with the same activity and optimum activity at pH 8.

Beispiel 2Example 2

Analog Beispiel 1 wurde Produkt B mit gleicher Dosierung und Anwendung eingesetzt. Da Produkt B flüssig ist, kann dieses automatisch über eine Dosiervorrichtung zudosiert werden. In diesem Fall ist ein zusätzliches Öffnen des Gerbfasses nicht erforderlich. Dadurch wird eine Exposition mit giftigem Schwefelwasserstoff vermieden, welcher bei der CO₂-Entkälkung in verstärktem Maße freigesetzt wird.Analogously to Example 1, Product B was used with the same dosage and application. Since product B is liquid, it can be added automatically via a dosing device. In this case an additional opening of the tanning drum is not necessary. This avoids exposure to toxic hydrogen sulfide, which is released to a greater extent during CO₂ decalcification.

Beispiel 3Example 3

Analog Beispiel 2 wird Produkt C in gleicher Anwendung und Dosierung eingesetzt. Produkt C enthält Emulgatoren wodurch die Grundreinheit der Häute zusätzlich verbessert wird.Analogously to example 2, product C is used in the same application and dosage. Product C contains emulsifiers which further improve the basic purity of the skins.

Claims (4)

Enzymatische Beizpräparate für die Kohlensäure-Entkälkung unter Verwendung von Proteasen,

dadurch gekennzeichnet,

daß die Beizpräparate als Proteasen P A) alkalische Bakterienprotease mit einem pH-Optimum zwischen 9 und 11 in Anteilen von 10 - 20 Gew.-% bezogen auf die Gesamtheit der Proteasen P B) Pankreasprotease mit einem pH-Optimum zwischen 7 und 9, in Anteilen von 40 - 70 Gew.-% bezogen auf die Gesamtheit der Proteasen P und C) Pilzprotease oder Bakterienprotease mit pH-Optimum im pH-Bereich 5 bis 7 in Anteilen von 20 bis 40 Gew.-% bezogen auf die Gesamtheit der Proteasen P, enthalten, mit der Maßgabe, daß die proteolytische Aktivität der A') alkalischen Bakterienproteasen bei pH 10, der B') pankreatischen Enzyme bei pH 8 und C') der sauren Pilz- oder Bakterienprotease bei pH 6,5 gleich stark eingestellt ist. Enzymatic pickling preparations for carbon dioxide decalcification using proteases,

characterized,

that the pickling preparations as proteases P A) alkaline bacterial protease with a pH optimum between 9 and 11 in proportions of 10-20% by weight based on the totality of the proteases P B) pancreatic protease with a pH optimum between 7 and 9, in proportions of 40-70% by weight, based on the totality of the proteases P and C) fungal protease or bacterial protease with pH optimum in the pH range 5 to 7 in proportions of 20 to 40% by weight, based on the totality of the proteases P, included, with the proviso that the proteolytic activity of A ') alkaline bacterial proteases at pH 10, the B ') pancreatic enzymes at pH 8 and C ') of the acidic fungal or bacterial protease is adjusted to the same degree at pH 6.5. Enzymatische Beizpräparate gemäß Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß sie neben den Proteasen noch an sich bekannte Hilfsmittel ausgewählt aus der Gruppe der Enzymstabilisatoren, Stellmittel, enthalten.Enzymatic pickling preparations according to claim 1, characterized in that they contain, in addition to the proteases, auxiliary agents known per se selected from the group of enzyme stabilizers, adjusting agents. Enzymatische Beizpräparate gemäß den Ansprüchen 1 und 2, dadurch gekennzeichnet, daß sie an sich bekannte Lösemittel enthalten.Enzymatic pickling preparations according to claims 1 and 2, characterized in that they contain solvents known per se. Flüssige oder feste enzymatische Beizpräparate gemäß den Ansprüchen 1 - 3, dadurch gekennzeichnet, daß sie bereits zu Beginn der CO₂-Entkälkung oder während dieser eingesetzt werden.Liquid or solid enzymatic pickling preparations according to claims 1-3, characterized in that they are used at the beginning of CO₂ decalcification or during this.
EP91110302A 1990-06-23 1991-06-22 Enzymatic bating preparations Expired - Lifetime EP0464531B1 (en)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE4020110A DE4020110A1 (en) 1990-06-23 1990-06-23 NEW ENZYMATIC SEEDING PREPARATIONS
DE4020110 1990-06-23

Publications (3)

Publication Number Publication Date
EP0464531A2 true EP0464531A2 (en) 1992-01-08
EP0464531A3 EP0464531A3 (en) 1992-09-09
EP0464531B1 EP0464531B1 (en) 1994-09-28

Family

ID=6408983

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EP91110302A Expired - Lifetime EP0464531B1 (en) 1990-06-23 1991-06-22 Enzymatic bating preparations

Country Status (5)

Country Link
EP (1) EP0464531B1 (en)
AT (1) ATE112323T1 (en)
DE (2) DE4020110A1 (en)
DK (1) DK0464531T3 (en)
ES (1) ES2062621T3 (en)

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2147542A (en) * 1937-01-27 1939-02-14 Ruby Kid Co Treating skins, hides, and pelts
DE974813C (en) * 1954-12-24 1961-05-04 Roehm & Haas G M B H Process for pickling animal skin
DE2321629A1 (en) * 1973-04-28 1974-11-14 Roehm Gmbh PICKLING PROCESS

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2147542A (en) * 1937-01-27 1939-02-14 Ruby Kid Co Treating skins, hides, and pelts
DE974813C (en) * 1954-12-24 1961-05-04 Roehm & Haas G M B H Process for pickling animal skin
DE2321629A1 (en) * 1973-04-28 1974-11-14 Roehm Gmbh PICKLING PROCESS

Also Published As

Publication number Publication date
DE4020110A1 (en) 1992-01-02
DE59103082D1 (en) 1994-11-03
ES2062621T3 (en) 1994-12-16
DK0464531T3 (en) 1994-11-14
ATE112323T1 (en) 1994-10-15
EP0464531A3 (en) 1992-09-09
EP0464531B1 (en) 1994-09-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP0326059B1 (en) Liming process for obtaining hair
DE2917376C2 (en) Enzymatic process for hair extraction and simultaneous skin disintegration
DE2404789C3 (en) Process for the production of ready-to-tan pelts from animal hides and skins
DE3224881A1 (en) METHOD FOR THE PRODUCTION OF HAIRY, STORAGE SKIN MATERIAL
DE2930342C2 (en)
EP0505920B1 (en) Enzymatically assisted liming process
EP1124994B1 (en) Auxiliary for liming and loosening hairs of animal skins
EP0464531B1 (en) Enzymatic bating preparations
EP0575927B1 (en) Process for liming skins and hides
EP0728844A1 (en) Multifunctional leather processing compositions
WO2004038046A1 (en) Method for removing horn substances from animal skin
EP0180135A2 (en) Microbial process for obtaining dehaired hides from animal skin
DE4332785A1 (en) Improved enzyme-assisted liming process
DE767061C (en) Process for pickling ashed skin
CH629245A5 (en) METHOD FOR SOLVING COLLAGEN-CONTAINING PRODUCTS FROM THE LEATHER INDUSTRY BY ENZYMATIC HYDROLYSIS.
DE4035839A1 (en) PROTEASE AS A ACTIVE ENZYME, TENSIDE-FREE, FIXED ENZYMERS
DE10106541B4 (en) Enzyme preparation and its use in the tannery
DE2301591C3 (en) Process for the production of ready-to-tan pelts from animal hides and skins
AT400957B (en) METHOD FOR DE-SKINNING SKIN AND SKIN IN LEATHER MANUFACTURING
DE3440750A1 (en) Process for hide-digestion of large-animal hides and calf skins
DE1288728B (en) Process for the production of tanned bare
EP0197918A1 (en) Method of liming hides and skins
DE1211349B (en) Enzymatic depilation with pancreatic stryptase
DE3617448A1 (en) Continuous unhairing of animal hides
DE1203416B (en) Process for the production of bare animals

Legal Events

Date Code Title Description
PUAI Public reference made under article 153(3) epc to a published international application that has entered the european phase

Free format text: ORIGINAL CODE: 0009012

AK Designated contracting states

Kind code of ref document: A2

Designated state(s): AT BE CH DE DK ES FR GB IT LI NL SE

PUAL Search report despatched

Free format text: ORIGINAL CODE: 0009013

AK Designated contracting states

Kind code of ref document: A3

Designated state(s): AT BE CH DE DK ES FR GB IT LI NL SE

17P Request for examination filed

Effective date: 19920923

17Q First examination report despatched

Effective date: 19940216

GRAA (expected) grant

Free format text: ORIGINAL CODE: 0009210

AK Designated contracting states

Kind code of ref document: B1

Designated state(s): AT BE CH DE DK ES FR GB IT LI NL SE

PG25 Lapsed in a contracting state [announced via postgrant information from national office to epo]

Ref country code: GB

Effective date: 19940928

Ref country code: FR

Effective date: 19940928

Ref country code: BE

Effective date: 19940928

REF Corresponds to:

Ref document number: 112323

Country of ref document: AT

Date of ref document: 19941015

Kind code of ref document: T

REF Corresponds to:

Ref document number: 59103082

Country of ref document: DE

Date of ref document: 19941103

REG Reference to a national code

Ref country code: DK

Ref legal event code: T3

ITF It: translation for a ep patent filed
REG Reference to a national code

Ref country code: ES

Ref legal event code: FG2A

Ref document number: 2062621

Country of ref document: ES

Kind code of ref document: T3

EAL Se: european patent in force in sweden

Ref document number: 91110302.6

EN Fr: translation not filed
GBV Gb: ep patent (uk) treated as always having been void in accordance with gb section 77(7)/1977 [no translation filed]

Effective date: 19940928

PG25 Lapsed in a contracting state [announced via postgrant information from national office to epo]

Ref country code: LI

Effective date: 19950630

Ref country code: CH

Effective date: 19950630

PLBE No opposition filed within time limit

Free format text: ORIGINAL CODE: 0009261

STAA Information on the status of an ep patent application or granted ep patent

Free format text: STATUS: NO OPPOSITION FILED WITHIN TIME LIMIT

26N No opposition filed
REG Reference to a national code

Ref country code: CH

Ref legal event code: PL

PGFP Annual fee paid to national office [announced via postgrant information from national office to epo]

Ref country code: NL

Payment date: 19990603

Year of fee payment: 9

PGFP Annual fee paid to national office [announced via postgrant information from national office to epo]

Ref country code: ES

Payment date: 19990607

Year of fee payment: 9

PGFP Annual fee paid to national office [announced via postgrant information from national office to epo]

Ref country code: SE

Payment date: 19990621

Year of fee payment: 9

PGFP Annual fee paid to national office [announced via postgrant information from national office to epo]

Ref country code: DK

Payment date: 19990628

Year of fee payment: 9

PGFP Annual fee paid to national office [announced via postgrant information from national office to epo]

Ref country code: AT

Payment date: 19990630

Year of fee payment: 9

PG25 Lapsed in a contracting state [announced via postgrant information from national office to epo]

Ref country code: DK

Free format text: LAPSE BECAUSE OF NON-PAYMENT OF DUE FEES

Effective date: 20000622

Ref country code: AT

Free format text: LAPSE BECAUSE OF NON-PAYMENT OF DUE FEES

Effective date: 20000622

PG25 Lapsed in a contracting state [announced via postgrant information from national office to epo]

Ref country code: SE

Free format text: LAPSE BECAUSE OF NON-PAYMENT OF DUE FEES

Effective date: 20000623

Ref country code: ES

Free format text: THE PATENT HAS BEEN ANNULLED BY A DECISION OF A NATIONAL AUTHORITY

Effective date: 20000623

PG25 Lapsed in a contracting state [announced via postgrant information from national office to epo]

Ref country code: NL

Free format text: LAPSE BECAUSE OF NON-PAYMENT OF DUE FEES

Effective date: 20010101

EUG Se: european patent has lapsed

Ref document number: 91110302.6

REG Reference to a national code

Ref country code: DK

Ref legal event code: EBP

NLV4 Nl: lapsed or anulled due to non-payment of the annual fee

Effective date: 20010101

REG Reference to a national code

Ref country code: ES

Ref legal event code: FD2A

Effective date: 20020204

PG25 Lapsed in a contracting state [announced via postgrant information from national office to epo]

Ref country code: IT

Free format text: LAPSE BECAUSE OF NON-PAYMENT OF DUE FEES;WARNING: LAPSES OF ITALIAN PATENTS WITH EFFECTIVE DATE BEFORE 2007 MAY HAVE OCCURRED AT ANY TIME BEFORE 2007. THE CORRECT EFFECTIVE DATE MAY BE DIFFERENT FROM THE ONE RECORDED.

Effective date: 20050622

PGFP Annual fee paid to national office [announced via postgrant information from national office to epo]

Ref country code: DE

Payment date: 20070630

Year of fee payment: 17

PG25 Lapsed in a contracting state [announced via postgrant information from national office to epo]

Ref country code: DE

Free format text: LAPSE BECAUSE OF NON-PAYMENT OF DUE FEES

Effective date: 20090101