EA038894B1

EA038894B1 - Антидиабетическое лекарственное средство

Info

Publication number: EA038894B1
Application number: EA201800408A
Authority: EA
Inventors: Тагир Аббасели оглы Сулейманов; Айтен Садиг кызы Шукюрова; Айтач Тагир кызы Бадалова
Original assignee: Айтен Садиг кызы Шукюрова
Priority date: 2018-06-08
Filing date: 2018-06-08
Publication date: 2021-11-03
Also published as: EA201800408A1

Abstract

Изобретение относится к области фармации, в частности к средствам из растительного сырья, обладающим гипогликемическим действием. Сущность изобретения состоит в создании лекарственного средства, обладающего антидиабетическим действием, в качестве которого является экстракт, полученный экстракцией 30% водно-спиртовым растворителем растительного сырья Зопника колючего (Ph. pungens Willd). Сущность изобретения состоит также в создании на основе полученного экстракта лекарственного средства в форме таблетки. Технический эффект заявляемого изобретения заключается в создании нового лекарственного средства в виде сухого водного-спиртового экстракта зопника колючего, обладающего антидиабетическими свойствами и позволяющего на его основе производить лекарственные препараты различных форм, а также и в создании на основе полученного экстракта лекарственной формы в виде таблеток.

Description

Изобретение относится к области фармации, в частности к средствам из растительного сырья, обладающим гипогликемическим действием.

Гипогликемические, или противодиабетические средства - лекарственные средства, снижающие уровень глюкозы в крови и из растительного сырья, обладающие гипогликемическим действием, применяемые для лечения сахарного диабета - эндокринного заболевания, приводящего к нарушению всех видов обмена веществ, прежде всего углеводного, поражению сосудов (ангиопатии), нервной системы (нейропатии), а также других органов и систем.

В настоящее время в качестве терапевтических средств лечения сахарного диабета применяют различные синтезированные препараты: сульфонилмочевину, тиазолидин, метформин и его производные. Однако их лечебная эффективность не является удовлетворительной и они создают много проблем, например побочные эффекты, вызывающие кому из-за быстрого снижения уровня глюкозы в крови. Учитывая это, возникает необходимость найти средство, которое не было бы так токсично, как перечисленные выше.

Известна способность некоторых растений уменьшать проявления сахарного диабета. Механизм сахароснижающего эффекта различных растений многообразен и до конца не изучен (ряд растений содержат инсулиноподобные вещества, аминокислоты, активные левулёзы, другие гипогликемизирующие вещества). Растительные сахароснижающие средства не токсичны, не оказывают побочных эффектов и, за редким исключением, не аккумулируют. Их можно назначать пациентам любого возраста, независимо от степени тяжести болезни и выраженности ангионейропатий. Поэтому одним из перспективных направлений в этой области является создание высокоэффективных препаратов на основе природного сырья, что позволяет свести к минимуму возникновение побочных эффектов у пациентов и создает возможности для длительной, безопасной компенсации нарушений углеводородного обмена.

Известны (1) гипогликемические средства растительного происхождения, представляющие собой измельченные до состояния порошка варианты растительных сборов, которые рекомендуется использовать при сахарном диабете второй степени.

Известна (2) композиция, обладающая антидиабетическим действием, содержащая, в форме фиточая в фильтр-пакетах траву козлятника лекарственного (галеги), корни одуванчика лекарственного, цветки липы сердцевидной, листья шелковицы белой, корни девясила высокого, листья брусники обыкновенной, створки плодов фасоли обыкновенной, листья лавра благородного, траву череды поникшей, при определенном содержании компонентов. Вышеописанная композиция обладает выраженным антидиабетическим действием. Сбор применяется как гипогликемическое средство для профилактики и лечения диабета легкой и средней тяжести.

Наиболее близкой к заявляемому изобретению известна (3) композиция, обладающая мультикомпонентным механизмом противодиабетического действия. Композиция содержит сухие водные экстракты гимнемы лесной, девясила высокого и гребней винограда, взятые в определенном соотношении. Композиция эффективно воздействует на все патогенетические звенья инсулинозависимого сахарного диабета: нормализует уровень углеводов крови в преддиабетический период, нормализует углеводный обмен, аутоиммунные реакции и метаболизм при диабете II типа. Композиция может быть использована для производства биологически активных добавок или лекарственных средств в виде таблеток, гранул, порошка, капсул.

Недостатками всех указанных сборов можно считать их многокомпонентность (многокомпонентное средство трудно стандартизируется), а также недоступность входящих в него некоторых видов лекарственного растительного сырья из-за их ареалов произрастания.

Задачей настоящего изобретения является создание из растительного сырья - зопника колючего, фармакологического средства и, на его основе - лекарственной формы в виде таблетки, обладающих антидиабетическим действием, расширяющих арсенал лекарственных средств противодиабетического действия и использованием регионального лекарственного сырья.

Сущность изобретения состоит в создании лекарственного средства, обладающего антидиабетическим действием, в качестве которого является экстракт, полученный экстракцией 30% водно-спиртовым растворителем растительного сырья Зопника колючего (Ph. pungens Willd).

Сопоставительный анализ заявляемого изобретения с прототипом показал, что заявляемое изобретение отличается от известного существенным признаком - густым водно-спиртовым экстрактом из однокомпонентного вида растительного сырья - зопника колючего.

Анализ других источников в данной области показал, что зопник колючий достаточно хорошо изучен по составу биологически активных веществ - он обладает вяжущими и дубильными свойствами. Трава зопника колючего обладает мочегонным, желчегонным и сосудосуживающим свойством. Она может влиять на свертываемость крови, стимулировать иммунитет. Однако при достаточно хорошо изученных свойствах зопника колючего не удалось обнаружить информации о его антидиабетических свойствах и решений противостоящих заявляемому изобретению.

Для получения экстракта, обладающего антидиабетическим действием, используют наземную часть зопника колючего, исследования которого показали, что его сухой экстракт обладает ярко выраженным противодиабетическим свойством. Для получения густого экстракта высушенное на открытом воздухе и

- 1 038894 измельченное сырье трижды экстрагировали 30% этиловым спиртом при комнатной температуре в течение 48 ч каждую экстракцию. Экстракты объединяют, под вакуумом отгоняют спирт до получения водного остатка и выдерживают при комнатной температуре (20-25°C) в течение 5-6 ч.

Пример получения экстракта:

2,5 кг высушенного и измельченного сырья трижды экстрагируют методом мацерации 12,5 л (30%) этиловым спиртом при комнатной температуре в течение 48 ч каждую экстракцию. Объединенные экстракты в количестве 7,5 л концентрируют под вакуумом, отгоняют спирт до получения 0,5 водного остатка и выдерживают при комнатной температуре (20-25°C) в течение 5-6 ч.

Качественный анализ полученного экстракта на наличие биологически активных веществ осуществлялся методом УФ-, ИК- и ЯМР-спектроскопии и хроматографических исследований посредством ВЭЖХ-МС. В полученном экстракте обнаружены фенилэтаноидный гликозид 3-гидрокси-4-метокси-вфенилэтокси-O-[α-рамнопиранозил-(1^3)]-O-[β-апиофуранозил-(1^6)]-4'-O-ферулоил-β-глюкопиранозид (лейкоцептозид Б), 3,4-дигидрокси-β-фенилэтокси-O-[α-рамнопиранозил-(1^3)]-O-[βапиофуранозил-(1^6)]-4'-O-каффеоил-β-глюкопиранозид(форситозид Б), ламиид - иридоидное соединение, лютеолин 7-O-[4-O-ацетил-α-рамнопираносил-(1^2)]-β-глюкуронопиранозид, хлорогеновая кислота, неохлорогеновая кислота, форситозид Б, кверцетин-глюкозид, кверцетин-глюкуронид, вербакозид, лютеолин-глюкозид, лютеолин-глюкуронид, лютеолин 7-O-[2-O-(4'-O-ацетил-α-L-рамнопираносил)] -β D-глюкуронопиранозид и апигенин-диглюкозид.

Исследования антидиабетических свойств экстракта из растительного сырья были проведены на кафедре патологической физиологии Азербайджанского медицинского университета. Экспериментальный сахарный диабет вызывали путем одноразового внутривенного введения аллоксана в дозе 70 мг/кг крысам самкам массой 200-250 г.

Тест-образец (экстракт зопника колючего (ЭЗК) вводили внутрижелудочно в дозах 25 и 50 мг/кг ежедневно один раз на протяжении 28 дней эксперимента. Контрольные животные получали воду в аналогичном режиме. В качестве препарата сравнения использовали Метформин в дозе 100 мг/кг. Базальную гликемию определяли в динамике: исходный уровень и после введения аллоксана - на 3-ю (период острого развития гипергликемии), 1, 2 и 4 недели эксперимента.

Состояние глюкозного гомеостаза животных на фоне модельной патологии оценивали по уровню базальной гликемии и толерантности к глюкозе, которую определяли с помощью внутрибрюшинного теста толерантности к глюкозе (ВБТТГ).

Внутрибрюшинный тест толерантности к глюкозе проводили следующим образом: после ночного голодания (16-18 ч) крысам утром внутрибрюшинно вводили раствор глюкозы в дозе 3 г/кг. Концентрацию глюкозы в крови, которую получали из хвостовой вены животных, определяли до введения глюкозы и через 20, 40, 60, 90 и 120 мин глюкозооксидазным методом.

Полученные данные представлены в табл. 1 и 2.

Таблица 1. Динамика базальной гликемии экстракта зопника колючого (ЭЗК) при внутрижелудочном введении крысам с аллоксановым диабетом (M±m)

Группы	η	Доза,	Концентрация глюкозы, ммоль/л
животных		мг/кг	1 неделя 2 неделя 3 неделя 4 неделя
Интактный	5	-	4,68±0,45 4,45±0,14 4,44±0,41 3,50±0,31
контроль Контрольная	7		11,11±1,96* 10,33±1,65* 12,78±1,47* 9,87±2,06*
патология	7	25	6,43±1,77 9,00±1,26 8,93±2,37 6,00±0,39**
ЭЗК	7	50	4,92±1,45 9,3±1,42 7,5±0,49 6,8±0,62**
Метформин	7	100	4,97±1,49 10,00±0,55 9,3±0,14 7,5±0,62

Примечания:

* - отличия достоверные относительно интактного контроля, p<0,05;

** - отличия достоверные относительно контрольной патологии, p<0,05; n - количество животных в каждой группе.

- 2 038894

Таблица 2. Влияние ЭЗК на развитие гипергликемической реакции у крыс с аллоксановым _____диабетом на углеводную нагрузку (ВБТТГ, глюкоза 3 г/кг, M±m)_____

Период наблюдения	Группы животных
Интактный контроль (п = 5)	Контрольная патология (аллоксан, η = 7)	ЭЗК	Метформин, 100 mq / кг (η = 6)
25 мг / кг (п = 6)	50 мг / кг (п = 6)
Предваритель ная информация	3,50 ±0,31	9,87 ± 2,06 *	4.00 ± 0,46 **	4,77 ±0,65 **	4,54 ± 0,62 **
20 мин.	14,12 ±0,94	24,82 ± 1,64*	1:5,23 ± 1,71 **	13,48 ±0,65 **	14,90 ±1,37**
40 мин	7,30 ± 0,77	22,25 ± 2,27 *	13,43 ±1,58/*	12,74 ± 0,89 * / **	15,61 ± 1,38 * / **
60 минут	5,45 ± 0,49	22,02 ± 2,20 *	12,70 ±0,34/*	9,92 ± 1,01 /*	11,74 ±2,52 **
90 мин	4,21 ± 0,53	18,10 ±2,48*	10,92 ± 1,77 **	,17 ±2,31 **	99,10 ± 1,24**
120 мин	4,25 ± 0,49	14,71 ± 1,12 *	8,40 ± 1,11 /*	8,42 ± 0,68 * / **	7,00 ±0,80

Примечание:

* целостность различий по сравнению с содержанием под стражей;

r <0,05;

* * - точность различий по сравнению с контрольной патологией; r <0,05;

n - количество животных в каждой группе.

В результате проведенных исследований было установлено, что экстракт зопника колючего (ЭЗК) проявляет гипогликемическое действие в дозе 25 и 50 мг/кг на протяжении 4 недель исследований. Наиболее выраженное гипогликемическое действие ЭЗК проявил к концу исследований, т.е. на 4 неделе и достоверно уменьшал уровень глюкозы в крови в сравнении с контрольной патологией (КП) на 40%.

По гипогликемической активности экстракт зопника колючего в 2-х дозах - 25 и 50 мг/кг проявляли почти одинаковый эффект и достоверно не отличались между собой. При сравнени активности препарата метформин с исследуемым экстрактом было установлено, что его гипогликемическое действие было менее активно на всех этапах исследования.

Влияние ЭЗК на базальную гликемию в условиях глюкозной загрузки

Введение экстракта в 2-х дозах и метформина в профилактической дозировке препятствовало достоверному увеличению базальной гликемии в период глюкозной загрузки в сравнении с КП. Об этом свидетельствует снижение уровня глюкозы для экспозиции 20 мин при изучении животных, получавших ЭЗК в дозах 25 мг на 39,6% и 50 мг на 45,3% соответственно. Подобная тенденция в группе животных, получавших ЭЗК, наблюдалась в течении всего эксперимента. На фоне глюкозной нагрузки наиболее выраженное гипогликемическое действие проявлял экстракт зопника колючего в дозе 50 мг/кг и превосходил по активности метформин.

Экстракт зопника колючего проявляет выраженное гипогликемическое действие на фоне эксудального аллоксанового диабета средней тяжести.

На фоне глюкозной нагрузки экстракт зопника колючего снижает уровень базальной гликемии за счет снижения инсулинрезистентности и превышает по активности метформин в дозе 50 мг/кг.

Известны (4) пероральные противодиабетические лекарственные средства (метформин, глиформин, сиофор и др.) в виде таблеток, предназначенных для лечения, профилактики или как дополнительное срдество для лечения диабета. Действующим веществом является метформин с различными вспомогательными таблеткообразующими веществами. Главным недостатком этих препаратов является их синтетическое происхождение и, как следствие, большой перечень противопоказаний.

Сущность изобретения состоит также в разработке на основе полученного экстракта лекарственного средства в форме таблетки. Таблетки содержат в качестве действующего вещества сухой водноспиртовый экстракт зопника колючего и вспомогательные компоненты: лактозу, крахмал, метилцеллюлозу, аэросил, тальк, и стеарат кальция при следующем компонентном составе, вес.%:

- 3 038894 экстракт: 45,46 - 45,46 лактоза: 45,5 - 46,0 крахмал: 4,8 - 4,6 метилцеллюлоза: 0,89 - 0,95 аэросил: 1,25 - 1,38 тальк. 1,65 - 1,16 стеарат кальция. 0,45 - 0,45

В заявляемом изобретении таблетки выполнены на основе густой водно-спиртового экстракта (ЭЗК), который содержит биологически активные компоненты обладающие антидиабетическим свойством. Кроме того, как показали проведенные исследования, сухой водно-спиртовый экстракт зопника колючего - действующее вещество заявляемых таблеток, гораздо активнее и безвреднее метформина. В качестве вспомогательных веществ были использованы вещества, известные в фармацевтической практике и применяемые в производстве таблеток. При приготовлении таблеток для обеспечения точности дозирования, механической прочности, распадаемости и стабильности таблеток в процессе хранения расчет вспомогательных веществ на компонентный состав (для 300 таблеток) осуществлялся по основному действующему веществу. Таблетки получают следующим образом.

В смеситель типа Panasonic MS-M 176 загружают при перемешивании лактозу и метилцеллюлозу. Затем добавляют сухой экстракт и вымешивают до однородной массы. Отдельно из части крахмала готовят крахмальный клейстер, которую затем добавляют в смеситель и перемешивают до образования тестообразной массы. Полученную массу переносят в гранулятор типа Сферонизатор F-250 и получают гранулы диаметром 2 мм. Влажные гранулы распределяют тонким слоем на стеклянной пластине и сушат в термостате типа DSI-500D при температуре 40-50°C до остаточной влажность не более 2,5%. Остальную часть крахмала, аэросил, тальк и стеарат кальция последовательно и равномерно добавляют в подсушенную гелевую массу и хорошо перемешивают. Полученную массу гранул доставляют на лабораторный планшет ПК Бонапаза СЛР-6 и дозируют таблетки по 0,44 г, Пример конкретного выполнения (оптимальный).

В смеситель загружают при перемешивании 60 г лактозы и 1,2 г метилцеллюлозы. Затем к смеси частями (по 10 г) добавляют 60 г густого экстракта и перемешивают до однородной массы. Для приготовления таблетки необходимо 6,6 г крахмала. Из 3,0 г готовится 30 мл 10% -го клейстера. 30 мл смеси крахмального клейстера добавляют частями к массе в смесителе и перемешивают. Смешивание продолжают до получения тестообразной массы. Полученную массу переносят в гранулятор и получают гранулы диаметром 2 мм. Влажные гранулы распределяют тонким слоем на стеклянной пластине и сушат в термостате при температуре 40-50°C до остаточной влажности не более 2,5%. 3,6 г Крахмала, 1,8 г аэросила, 1,8 г талька и 0,6 г стеарат кальция последовательно и равномерно добавляют в подсушенную гелевую массу и хорошо перемешивают. Полученную массу гранул (132 г) доставляют на лабораторный планшет ПК и дозируют таблетки по 0,44 г. Из подготовленной массы получают 300 шт таблеток.

Варианты граничных примеров, которые не дают достичь необходимых требований к лекарственной форме в виде таблеток, представлены в табл. 3.

Таблица 3

Компоненты в%	1	2	3
экстракт	45,46	45,46	45,46
лактоза	45,5	45,46	46,0
крахмал	4,8	5,0	4,6
метилцеллюлоза	0,89	0,91	0,95
аэросил	1,25 1,36	1,38
тальк	1,65	1,36	1,16
стеарат кальция	0,45	0,45	0,45

Полученные таблетки с использованием указанных вспомогательных веществ в указанных количествах не оказывают отрицательного воздействия на качество таблеток при их приготовлении, транспортировке и хранении.

Технический эффект заявляемого изобретения заключается в создании нового лекарственного средства в виде густого водного-спиртового экстракта зопника колючего, обладающего антидиабетическими

- 4 038894 свойствами и позволяющими на его основе приготовить лекарственные препараты различных форм. Технический эффект заключается также и в создании на основе полученного экстракта лекарственной формы в виде таблеток.

Литература:

1. Гипогликемическое средство растительного происхождения. Справочник лекарственных препаратов. Фармако-терапевтическая группа Госреестра Минздрава РФ https://www.vidal.ru > ФТГ

2. Патент РФ № 2611353 Композиция, обладающая антидиабетическим действием, 14.07.2015

3. Патент РФ. № 2289419 Композиция, обладающая мультикомпонентным механизмом противодиабетического действия 20.12.2004 (прототип)

4. Метформин, таблетки, покрытые оболочкой - Продукция - РУП ... https://bclmcdprcparaty.com/product/anot.php⁹anat_id=313

Claims

1. Антидиабетическое лекарственное средство, состоящее из биологически активных веществ, выделенных водно-спиртовой экстракцией из зопника колючего (Ph. pungens Willd), отличающееся тем, что комплекс биологически активных веществ в виде густого экстракта, выделенного из наземной части зопника колючего путем трехкратной экстракции 30% этиловым спиртом при комнатной температуре по 48 ч каждая, объединения экстрактов, отгонки спирта и высушивания с получением остатка, содержащего фенилэтаноидный гликозид 3-гидрокси-4-метокси-Р-фенилэтокси-О-[а-рамнопиранозил-(1—>3)]-Ο-[βапиофуранозил-(1—>6)]-4'-O-φepyлoил-β-глюκoπиpaнoзид (лейкоцептозид Б), 3,4-дигидрокси^- фенилэтокси-О-[а-рамнопиранозил-(1—>3)]-О-[Р-апиофуранозил-(1—>6)]-4'-О-каффеоил-Р-глюкопиранозид (форситозид Б), ламиид - иридоидное соединение, лютеолин 7-О-[4-О-ацетил-а-рамнопираносил(1—>2)]^-глюкуронопиранозид, хлорогеновую кислоту, неохлорогеновую кислоту, форситозид Б, кверцетин-глюкозид, кверцетин-глюкуронид, вербакозид, лютеолин-глюкозид, лютеолин-глюкуронид, лютеолин 7-O-[2-O-(4'-O-aцeτил-α-L-paмнoπиpaнocил)]-β-D-глюκypoнoπиpaнoзид и апигенин-диглюкозид.

2. Лекарственное средство по п.1, обладающее антидиабетическим действием, отличающееся тем, что оно изготовлено в виде твердой лекарственной формы - таблеток, которые содержат в качестве действующего вещества сухой водно-спиртовый экстракт зопника колючего и вспомогательные компоненты: лактозу, крахмал, метилцеллюлозу, аэросил, тальк и стеарат кальция при следующем компонентном составе, вес.%: экстракт - 45,46; лактоза - 45,5-46,0; крахмал - 4,8-4,6; метилцеллюлоза - 0,89-0,95; аэросил - 1,25-1,38; тальк - 1,65; стеарат кальция - 0,45.