EA038350B1 - Антибактериальные хинолиновые производные - Google Patents

Abstract

Изобретение относится к замещенным хинолиновым производным общей формулы (Ia) или формулы (Ib)или их стереоизомерной форме или их фармацевтически приемлемым солям, причем значения радикалов определены в формуле изобретения. Заявленные соединения являются применимыми для лечения бактериальной инфекции. Также заявляется композиция, включающая фармацевтически приемлемый носитель и в качестве активного ингредиента терапевтически эффективное количество заявленных соединений, применение заявленных соединений или композиций для производства медикамента для лечения бактериальной инфекции и способ получения заявленных соединений.

Description

Настоящее изобретение относится к новым замещенным хинолиновым производным, применимым для лечения бактериальных заболеваний, в том числе без ограничения заболеваний, вызванных патогенной микобактерией, такой как Mycobacterium tuberculosis, М. bovis, M. leprae, M. avium и М. marinum, или патогенной Staphylococci или Streptococci.

Предпосылки изобретения

Mycobacterium tuberculosis является возбудителем туберкулеза (ТВ), тяжелой и потенциально смертельной инфекции, распространенной во всем мире. Оценки Всемирной организации здравоохранения показывают, что каждый год ТВ заболевают более 8 миллионов людей, и 2 миллиона людей ежегодно умирают от туберкулеза. В последнее десятилетие число случаев ТВ возросло на 20% во всем мире с самым высоким уровнем в наиболее бедных странах. Если эта тенденция сохранится, то распространенность ТВ возрастет на 41% в следующие 20 лет. Через 50 лет с момента внедрения эффективной химиотерапии ТВ остается после AIDS ведущей инфекционной причиной смертности взрослого населения в мире. Эпидемия ТВ осложняется увеличением штаммов с устойчивостью к нескольким лекарственным средствам и смертоносным симбиозом с HIV. Люди, являющиеся HIV-позитивными и инфицированными ТВ, в 30 раз более склонны к развитию активной формы ТВ, чем люди, являющиеся HIVотрицательными, и ТВ является причиной смерти одного из каждых трех человек, страдающих HIV/AIDS, во всем мире.

Все существующие подходы к лечению туберкулеза предусматривают комбинацию нескольких средств. Например, режим, рекомендованный Службой здравоохранения США, представляет собой комбинацию изониазида, рифампицина и пиразинамида в течение двух месяцев с последующим изониазидом и рифампицином отдельно в течение следующих четырех месяцев. Эти лекарственные средства назначаются в течение следующих семи месяцев пациентам, инфицированным HIV. Для пациентов, инфицированных устойчивыми к нескольким лекарственным средствам штаммами М. tuberculosis, к комбинированным видам терапии добавляют средства, такие как этамбутол, стрептомицин, канамицин, амикацин, капреомицин, этионамид, циклосерин, ципрофоксацин и офлоксацин. Не существует ни одного средства, эффективного в клиническом лечении туберкулеза, ни какой-либо комбинации средств, обладающих возможностью лечения длительностью менее шести месяцев.

В медицине существует острая потребность в новых лекарственных средствах, которые улучшают имеющееся лечение, обеспечивая режимы, облегчающие соблюдение режима лечения для пациента и врача. Для достижения этого наилучшим путем являются более короткие режимы и требующие меньшее наблюдение. Наибольшая польза от лечения наступает в первые 2 месяца интенсивной или бактерицидной фазы, когда четыре лекарственных средства принимают одновременно; бактериальная нагрузка значительно снижается, и пациенты становятся неинфекционными. Требуется 4-6 месяцев, или фаза стерилизации, для устранения сохраняющихся бацилл и сведения к минимуму риска рецидива. Сильнодействующее стерилизующее лекарственное средство, которое уменьшает продолжительность лечения до 2 месяцев или менее, было бы чрезвычайно полезно. Также необходимы лекарственные средства, которые облегчат соблюдение режима терапии за счет того, что они требуют меньшего тщательного наблюдения врача. Очевидно, что соединение, которое уменьшает как общую продолжительность лечения, так и частоту приема лекарственного средства, принесло бы наибольшую пользу.

Эпидемия ТВ осложняется все возрастающим числом случаев заражения устойчивыми к нескольким лекарственным средствам штаммами или MDR-TB. Вплоть до четырех процентов всех случаев заражения по всему миру рассматриваются как заражение MDR-TB, устойчивым к самым эффективным лекарственным средствам стандарта из четырех лекарственных средств, изониазиду и рифампину. Инфекция MDR-TB является летальной при отсутствии лечения и не может лечиться надлежащим образом с помощью стандартной терапии, поэтому лечение требует приема лекарственных средств второй линии вплоть до 2 лет. Эти лекарственные средства часто являются токсичными, дорогими и малоэффективными. В отсутствие эффективной терапии инфицированные MDR-TB пациенты продолжают распространять заболевание, продуцируя новые инфекции MDR-TB штаммами. В медицине существует большая потребность в новом лекарственном средстве с новым механизмом действия, которое, вероятно, проявит активность в отношении устойчивых к лекарственным средствам штаммов, в частности MDR штаммов.

Термин устойчивый к лекарственным средствам, как используется выше и ниже в настоящем изобретении, является термином, понятным специалисту в микробиологии. Микобактерией, устойчивой к лекарственному средству, является микобактерия, которая больше не является чувствительной по меньшей мере к одному ранее эффективному лекарственному средству; которая развила способность выдерживать антибиотическое действие по меньшей мере одного ранее эффективного лекарственного средства. Штамм, устойчивый к лекарственному средству, может передавать эту способность выдерживать действие лекарственного средства своему потомству. Упомянутая устойчивость может быть результатом случайных генетических мутаций в бактериальной клетке, которые изменяют чувствительность к одному лекарственному средству или различным лекарственным средствам. MDR туберкулез является особой формой туберкулеза, устойчивого к лекарственным средствам, благодаря бактериальной устойчивости, по меньшей мере, к изониазиду и рифампицину (с устойчивостью к другим лекарственным средствам

- 1 038350 или без таковой), которые являются в настоящее время двумя самыми мощными лекарственными средствами против ТВ. Таким образом, при применении выше и ниже в настоящем документе устойчивый к лекарственным средствам предусматривает устойчивость к нескольким лекарственным средствам.

Другим фактором в контроле эпидемии ТВ является проблема латентного ТВ. Несмотря на десятилетия проведения программ по борьбе с туберкулезом (ТВ) около 2 миллиардов людей инфицированы М. tuberculosis, хотя и бессимптомно. Около 10% из этих индивидуумов подвержены риску развития активного ТВ в течение их жизни. Всемирной эпидемии ТВ способствует заражение ВИЧ пациентов ТВ и появление штаммов ТВ с множественной лекарственной устойчивостью (MDR-TB). Реактивация латентного ТВ является фактором с высокой степенью риска развития заболевания и обуславливает 32% смертей HIV-инфицированных индивидуумов. Для борьбы с эпидемией ТВ необходимо открытие новых лекарственных средств, которые могут уничтожать дремлющие или латентные бациллы. Дремлющие ТВ могут становиться реактивированными, вызывая заболевание, несколькими факторами, например подавлением иммунитета хозяина при применении иммунодепрессивных лекарственных средств, подобных антителам к фактору некроза опухолей α или интерферона-γ. В случае пациентов, зараженных ВИЧ, единственным профилактическим лечением, пригодным для латентного ТВ, являются двухтрехмесячные режимы приема рифампицина, пиразинамида. Эффективность режима лечения еще не установлена, и, кроме того, продолжительность лечения является важным ограничивающим фактором в среде с ограниченными ресурсами. Следовательно, существует большая необходимость в разработке новых лекарственных средств, которые могут действовать в качестве химиопрофилактических средств для индивидуумов, зараженных латентными бациллами ТВ.

Туберкулезные бациллы проникают в тела здоровых людей при вдыхании; они подвергаются фагоцитозу альвеолярными макрофагами легких. Это приводит к мощному иммунному ответу и образованию гранулем, которые состоят из макрофагов, инфицированных М. tuberculosis, окруженных Т-клетками. После 6-8-недельного периода иммунный ответ хозяина вызывает смерть инфицированных клеток путем некроза и накопления казеозного материала с определенными внеклеточными бациллами, окруженными макрофагами, эпителиоидными клетками и слоями лимфоидной ткани на периферии. В случае здоровых индивидов большая часть микобактерий уничтожается в таком окружении, но небольшая часть бацилл все же выживает, и полагают, что они существуют в нереплицируемом состоянии пониженного метаболизма и являются устойчивыми к уничтожению лекарственными средствами против ТВ, подобными изониазиду. Эти бациллы могут сохраняться в измененной физиологической среде даже в течение жизни отдельного человека без проявления каких бы то ни было клинических симптомов заболевания. Однако в 10% из этих случаев эти латентные бациллы могут реактивироваться, вызывая заболевание. Одной из гипотез о развитии этих устойчивых бактерий является гипотеза о патофизиологической среде при патологических изменениях у человека, а именно пониженном давлении кислорода, ограничении в питательных веществах и кислом рН. Допускают, что эти факторы приводят к тому, что эти бактерии становятся фенотипически выносливыми к основным антимикобактериальным лекарственным средствам.

Кроме контроля эпидемии ТВ, возникла проблема устойчивости к антибиотикам первой линии. Некоторые важные примеры включают пенициллин-устойчивый Streptococcus pneumoniae, ванкомицинустойчивые энтерококки, метициллин-устойчивый стафилококк золотистый, устойчивую к нескольким лекарственным средствам сальмонеллу.

Последствия устойчивости к антибиотикам являются серьезными. Инфекции, вызванные устойчивыми микробами, не поддаются лечению, приводя в результате к увеличению продолжительности заболевания и большему риску смерти. Неудачные результаты лечения также приводят к более длительным периодам инфективности, которая увеличивает число инфицированных людей, взаимодействующих в обществе, и, таким образом, подвергает все слои населения риску заражения устойчивыми штаммами. Больницы являются крайне важным компонентом проблемы антимикробной резистентности по всему миру. Комбинация высоковосприимчивых пациентов, интенсивного и продолжительного антимикробного лечения и перекрестной инфекции привела в результате к инфекциям с чрезвычайно устойчивыми бактериальными патогенными микроорганизмами.

Самолечение противомикробными лекарственными средствами является другим важным фактором, вносящим вклад в приобретение устойчивости. Противомикробные лекарственные средства при самолечении могут быть ненужными, часто неадекватно дозируемыми или могут не содержать достаточных количеств активных лекарственных средств.

Соблюдение пациентом рекомендованного лечения является другой важной проблемой. Пациенты забывают принять лекарственное средство, прерывают свое лечение, когда начинают чувствовать себя лучше, или могут быть не способны провести полный курс, что ведет к созданию идеальной среды для микробов, скорее для приспособления, чем для уничтожения.

Из-за возникновения устойчивости к нескольким антибиотикам лечащие врачи борются с инфекциями, для которых не существует эффективной терапии. Распространенность болезни, смертность и финансовые расходы на такие инфекции накладывают на системы медицинского обслуживания по всему миру все возрастающую нагрузку.

Следовательно, существует большая необходимость в новых соединениях для лечения бактериаль- 2 038350 ных инфекций, особенно микобактериальных инфекций, включая латентные микобактериальные инфекции, устойчивые к лекарственным средствам, а также других бактериальных инфекций, особенно инфекций, вызванных устойчивыми бактериальными штаммами.

WO 2004/011436, WO 2005/070924, WO 2005/070430, WO 2005/075428 и WO 2007/014885 описывают определенные замещенные хинолиновые производные, обладающие активностью в отношении Mycobacteria, в частности в отношении Mycobacterium tuberculosis. WO 2005/117875 описывает замещенные хинолиновые производные, обладающие активностью в отношении устойчивых микобактериальных штаммов. WO 2006/067048 описывает замещенные хинолиновые производные, обладающие активностью в отношении латентного туберкулеза. Одно конкретное соединение из этих замещенных хинолиновых производных описывается в Science (2005), 307, 223-227 и его способ действия описывается в WO 2006/035051.

WO 2006/131519, WO 2007/000434, WO 2007/000435, WO 2007/000436, WO 2007/014934, WO 2007/014940 и WO 2007/014941 описывают определенные замещенные хинолиновые производные, обладающие активностью в отношении бактерий, таких как Staphylococcus и Streptococcus.

WO 2008/068266, WO 2008/068267, WO 2008/068268, WO 2008/068269, WO 2008/068270 и WO 2008/068272 описывают определенные замещенные хинолиновые производные, обладающие активностью в отношении Mycobacteria, в частности против Mycobacterium tuberculosis, а также в отношении бактерий, таких как Staphylococcus и Streptococcus.

Другие замещенные хинолины описываются в патенте США № 5965572 (Соединенные Штаты Америки) для лечения устойчивых к антибиотикам инфекций и в WO 00/34265 для ингибирования роста бактериальных микроорганизмов.

Цель настоящего изобретения заключается в обеспечении новыми соединениями, в частности замещенными хинолиновыми производными, обладающими способностью ингибировать бактериальный рост, особенно стрептококков, стафилококков или микобактерий, и, следовательно, пригодными для лечения бактериальных заболеваний, особенно тех заболеваний, которые вызваны патогенными бактериями, такими как Streptococcus pneumonia, Staphylococcus aureus или Mycobacterium tuberculosis (в том числе латентного заболевания и в том числе устойчивыми к лекарственным средствам штаммами М. tuberculosis), M. bovis, M. leprae, M. avium и М. marinum.

Краткое описание изобретения

Настоящее изобретение относится к новым замещенным хинолиновым производным согласно формуле (Ia) или (Ib) или их стереоизомерной форме, или их фармацевтически приемлемым солям, где р равно 1;

n представляет собой целое число, равное 1 или 2; при условии, что если n равняется 2, то оба заместителя R⁵ соединены с одним и тем же атомом углерода пиперидинового фрагмента;

R¹ представляет собой водород, карбоксил, галоген, C_1-6 алкилтио, аминоС_1-6алкил или Het;

R² представляет собой С_1-6алкилокси;

R³ представляет собой водород;

R⁴ представляет собой арил¹ или Het;

R⁵ представляет собой арил, арилС_1-6алкил, С_3-6циклоалкил, С_3-6циклоалкилС_1-6алкил, Het, HetC_1-6алкuл, С_1-6алкил, гидроксиС_1-6 алкил, аминоС_1-6алкил, моно- или ди(С_1-4алкил) аминоС_1-6алкил, арил-NH-С_1-6алкил, Het-NH-C_1-6алкил, С_2-6алкенил или галоген;

R⁶ представляет собой водород, С1-6алкил, арилС1-6алкил, Het¹, Het¹C1-6алкил или -C(=NH)-NH₂;

R⁷ представляет собой водород или С_1-6алкил;

R⁸ представляет собой оксо; или

R⁷ и R⁸ вместе образуют радикал -CH=CH-N=;

R^9a и R^10a вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют радикал, выбранный из группы, состоящей из пирролидинила, пиперидинила, пиперазинила, морфолинила, 4-тиоморфолинила, 2,3-дигидроизоиндол-1 -ила, тиазолидин-3-ила, 1,2,3,6-тетрагидропиридила, гексагидро-1 Н-азепинила, гексагидро- 1Н-1,4-диазепинила, гексагидро-1,4-оксазепинила, 1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-2-ила, пирролинила, пирролила, имидазолидинила, пиразолидинила, 2-имидазолинила, 2-пиразолинила, имидазолила, пиразолила, триазолила, пиридинила, пиридазинила, пиримидинила, пиразинила и триазинила, при этом каждый радикал необязательно замещен 1, 2, 3 или 4 заместителями, каждый заместитель независимо выбран из C_1-6 алкила, полигалогенС_1-6алкила, галогена, арилС_1-6алкила, гидрокси, С_1-6алкилокси, амино, моно- или ди(С_1-6алкил)амино, C_1-6 алкилтио, алкилтиоС_1-6алкила, арила, пиридила или пирими- 3 038350 динила;

R^9b и R^10b каждый независимо представляет собой водород, С_1-6алкил, арил или Het;

R¹¹ представляет собой водород или С_1-6алкил;

арил представляет собой гомоциклическое ядро, выбранное из фенила, нафтила, аценафтила или тетрагидронафтила, при этом каждый необязательно замещен 1, 2 или 3 заместителями, при этом каждый заместитель независимо выбран из гидрокси, гидроксиС_1-6 алкила, галогена, циано, цианоС_1-6алкила, нитро, амино, моно-или ди(С_1-6алкил)амино, С_1-6алкила, С_2-6алкенила, необязательно замещенного фенилом, полиС_1-6галогеналкила, С_1-6алкилокси, C_1-6 алкилоксиС_1-6алкила, полигалогенС_1-6алкилокси, карбоксила, C_1-6алкиоксикарбонила, аминокарбонила, морфолинила или моно- или ди(С_1-6алкил) аминокарбонила;

арил¹ представляет собой гомоциклическое ядро, выбранное из фенила, нафтила, аценафтила или тетрагидронафтила, при этом каждый необязательно замещен 1, 2 или 3 заместителями, при этом каждый заместитель независимо выбран из гидрокси, гидроксиС_1-6 алкила, галогена, циано, цианоС_1-6алкила, нитро, амино, моно-или ди(С_1-6алкил)амино, С_1-6алкила, полигалогенС_1-6алкила, C_1-6алкилокси, С_1-6алкилоксиС_1-6алкила, С_1-6алкилтио, полигалогенС_1-6 алкилокси, карбоксила, С_1-6алкилоксикарбонила, аминокарбонила, Het, моно- или ди (С_1-6алкил) аминокарбонила или C_1-4алкил-S(=O)₂-;

Het представляет собой моноциклический гетероцикл, выбранный из N-феноксипиперидинила, пиперидинила, пиперазинила, морфолинила, 4-тиоморфолинила, пирролила, пиразолила, имидазолила, фуранила, тиенила, оксазолила, изоксазолила, тиазолила, изотиазолила, пиридинила, пиримидинила, пиразинила или пиридазинила; или бициклический гетероцикл, выбранный из хинолинила, хиноксалинила, индолила, бензимидазолила, бензоксазолила, бензизоксазолила, бензотиазолила, бензизотиазолила, бензофуранила, бензотиенила, 2,3-дигидробензо[1,4]диоксинила или бензо[1,3]диоксолила; при этом каждый моноциклический и бициклический гетероцикл необязательно замещен 1, 2 или 3 заместителями, при этом каждый заместитель независимо выбран из галогена, гидрокси, C_1-6алкuла C_1-6 алкилокси;

Het¹ представляет собой моноциклический, насыщенный гетероцикл, выбранный из пирролидинила, пиперидинила, пиперазинила, морфолинила, 4-тиоморфолинила, имидазолидинила, пиразолидинила; при этом каждый моноциклический, насыщенный гетероцикл необязательно замещен С_1-6алкилом или арилС1 _-6алкилом.

Подразумевают, что фармацевтически приемлемые соли, упоминаемые выше и ниже в данном документе, включают нетоксичные терапевтически активные формы соли присоединения кислоты, которые могут быть образованы соединениями формулы (Ia) или формулы (Ib). Упомянутые соли присоединения кислоты можно получить путем обработки основной формы соединений формулы (Ia) или формулы (Ib) подходящими кислотами, например неорганическими кислотами, как например, галогенводородной кислотой, в частности хлористоводородной кислотой, бромистоводородной кислотой, серной кислотой, азотной кислотой и фосфорной кислотой; органическими кислотами, например уксусной кислотой, гидроксиуксусной кислотой, пропионовой кислотой, молочной кислотой, пировиноградной кислотой, щавелевой кислотой, малоновой кислотой, янтарной кислотой, малеиновой кислотой, фумаровой кислотой, яблочной кислотой, винной кислотой, лимонной кислотой, метансульфокислотой, этансульфокислотой, бензолсульфокислотой, п-толуолсульфокислотой, цикламиновой кислотой, салициловой кислотой, паминосалициловой кислотой и памовой кислотой.

Соединения формулы (Ia) или (Ib), содержащие кислотные протоны, можно превращать в их терапевтически активные формы солей присоединения нетоксичного металла или амина путем обработки соответствующими органическими и неорганическими основаниями. Подразумевают, что фармацевтически приемлемые соли, упоминаемые выше и ниже в данном документе, также включают терапевтически активные нетоксичные формы солей присоединения металла или амина (формы соли присоединения основания), которые могут быть образованы соединениями формулы (Ia) или формулы (Ib). Соответствующие формы солей присоединения основания включают, например, соли аммония, соли щелочных и щелочноземельных металлов, например соли лития, натрия, калия, магния, кальция и т.п., соли с органическими основаниями, например с первичными, вторичными и третичными алифатическими и ароматическими аминами, такими как метиламин, этиламин, пропиламин, изопропиламин, четыре изомера бутиламина, диметиламин, диэтиламин, диэтаноламин, дипропиламин, диизопропиламин, ди-н-бутиламин, пирролидин, пиперидин, морфолин, триметиламин, триэтиламин, трипропиламин, хинуклидин, пиридин, хинолин и изохинолин, бензатин, N-метил-D-глюкамин, 2-амино-2-(гидроксиметил)-1,3-пропандиол, гидрабаминовые соли и соли с аминокислотами, такими как, например, аргинин, лизин и т.п.

И наоборот, упомянутые формы солей присоединения кислоты и основания можно превратить в свободные формы путем обработки соответствующим основанием или кислотой.

Термин фармацевтически приемлемая соль также включает четвертичные аммониевые соли (четвертичные амины), которые способны образовывать соединения формулы (Ia) или (Ib) путем реакции между основным азотом соединения формулы (Ia) или (Ib) и соответствующим кватернизирующим агентом, таким как, например, необязательно замещенный С_1-6алкилгалогенид, арилС_1-6 алкилгалогенид, С_1-6алкилкарбонилгалогенид, арилкарбонилгалогенид, HetC_1-6алкилгалогенид или Het карбонилгалогенид, например метилйодид или бензилйодид. Предпочтительно Het представляет собой моноциклический гетероцикл, выбранный из фуранила или тиенила; или бициклический гетероцикл, выбранный из

- 4 038350 бензофуранила или бензотиенила; при этом каждый моноциклический и бициклический гетероцикл может необязательно быть замещенным 1, 2 или 3 заместителями, каждый заместитель независимо выбран из группы галогена, алкила и арила. Предпочтительно кватернизирующий агент представляет собой С_1-6алкилгалогенид. Можно также использовать другие реагенты с легко уходящими группами, такими как С_1-6алкилтрифторметансульфонаты, С_1-6алкилметансульфонаты и C_1-6αлкил-п-толуолсульфонаты. Четвертичный амин имеет положительно заряженный атом азота. Фармацевтически приемлемые противоионы включают хлор, бром, йод, трифторацетат, ацетат, трифлат, сульфат, сульфонат. Предпочтительно противоионом является йод. Предпочтительный противоион можно ввести, используя ионообменные смолы.

Предпочтительно выражение фармацевтически приемлемые соли означает фармацевтически приемлемые соли присоединения кислоты и основания, как упомянуто в данном документе выше.

В рамках настоящей заявки предусматривают, что соединение в соответствии с настоящим изобретением, в сущности, содержит все комбинации своих стереоизомерных форм. Выражение стереоизомерные формы, используемое выше и ниже в данном документе, обозначает все возможные стереоизомерные формы, которыми могут обладать соединения формулы (Ia) и (Ib), фармацевтически приемлемые соли. Если не упомянуто или указано иное, химические обозначения соединений означают смесь всех возможных стереоизомерных форм. В частности, стереогенные центры могут иметь R- или Sконфигурацию; заместители на двухвалентных циклических (частично) насыщенных радикалах могут иметь как цис-, так и трансконфигурацию. Соединения, содержащие двойные связи, могут обладать Е (entgegen - напротив) или Z (zusammen - вместе) стереохимией при упомянутых двойных связях. Выражения цис, транс, R, S, Е и Z хорошо известны специалистам в данной области. Разумеется, стереоизомерные формы соединений формулы (Ia) и (Ib) предназначены для включения в объем настоящего изобретения.

Особый интерес представляют собой соединения формулы (Ia) или (Ib), которые являются стереохимически чистыми.

Следуя условным обозначениям CAS-номенклатуры, если в молекуле присутствуют два стереогенных центра известной абсолютной конфигурации, тогда присваивают обозначение R или S (на основании правила последовательности Канна-Ингольда-Прелога) хиральному центру с наименьшим номером, представляющий собой базовый центр.

Если абсолютная конфигурация стереогенного центра не известна, то такие центры обозначают в настоящем документе произвольно как R* или S*, если соответствующее соединение является стереохимически чистым, или как RS*, если соединение представляет собой стереохимическую смесь. Во многих случаях соединения в соответствии с настоящим изобретением конфигурация атома углерода на пиперидиновом кольце с заместителем R⁵ известна из литературы или из способа синтеза пиперидинового фрагмента; в этом случае соответствующий атом углерода обозначают как R или S согласно известной стереохимической конфигурации атома. С помощью стандартных аналитических методов легко установить, что заместитель R⁵ и 4-гидрокси-заместитель на пиперидиновом кольце находятся в одной плоскости (т.е. цис) или в противоположных плоскостях (т.е. транс), что обеспечивает одну абсолютную конфигурацию для атома углерода в 4-положении пиперидинового кольца, т.е. R или S; т.е. этот атом углерода идентифицируют как R* или S*, что указывает на неизвестную абсолютную конфигурацию. Атом углерода, расположенный между пиперидиновым кольцом и хинолином, условно обозначают как R* или S*, если конфигурация неизвестна.

Если указана конкретная стереоизомерная форма, это означает, что указанная форма практически чистая, т.е. связана с менее 50%, предпочтительно менее 20%, более предпочтительно менее 10%, еще более предпочтительно менее 5%, в частности предпочтительно менее 2% и наиболее предпочтительно менее 1% других изомеров. Таким образом, если соединение формулы (Ia) или (Ib) указано, например, как конкретный энантиомер, это означает, что соединение практически не содержит других энантиомеров.

Соединения любой из формул (Ia) и (Ib), а также некоторые другие промежуточные соединения неизменно имеют по меньшей мере два стереогенных центра в своей структуре, что может приводить к образованию по меньшей мере 4 стереохимически отличающихся структур. В структурах, приведенных ниже, по меньшей мере два стереогенных центра отмечены*

За исключением тех соединений формулы (Ia) или (Ib), где n равняется 2, и два заместителя R⁵ являются идентичными, соединения в соответствии с настоящим изобретением также имеют неизменный дополнительный хиральный центр на атоме углерода пиперидинового фрагмента, несущего замести

- 5 038350 тель(и) R⁵. Это предполагает по меньшей мере 8 стереохимически разных структур.

Соединения любой из формул (Ia) и (Ib) можно синтезировать в форме смесей, в частности рацемических смесей, энантиомеров, которые можно отделить друг от друга согласно известным из уровня техники процедурам разделения. Соединения любой из формул (Ia) и (Ib) можно превращать в формы соответствующей диастереомерной соли путем реакции с подходящей хиральной кислотой. Указанные формы диастереомерной соли затем разделяют, например, с помощью селективной или фракционной кристаллизации, а энантиомеры выделяют оттуда с помощью щелочи. Альтернативный способ отделения энантиомерных форм соединений любой из формул (Ia) и (Ib) включает жидкостную хроматографию с использованием хиральной неподвижной фазы. Указанные чистые стереоизомерные формы также можно получить из соответствующих чистых стереоизомерных форм подходящих исходных материалов при условии, что реакция протекает стереоспецифично. Если необходим определенный стереоизомер, предпочтительно, чтобы указанное соединение было синтезировано стереоспецифическими способами получения. В этих способах преимущественно используют энантиомерно чистые исходные материалы.

В рамках настоящей заявки С_1-6алкил представляет прямой или разветвленный предельный углеводородный радикал с 1-6 атомов углерода, такой как, например, метил, этил, пропил, 2-метил-этил, пентил, гексил и т.п. Предпочтительной подгруппой C_1-6 алкила является С_1-4алкил, который представляет собой прямой или разветвленный предельный углеводородный радикал с 1-4 атомами углерода, такой как, например, метил, этил, пропил, 2-метил-этил и т.п.

В рамках настоящей заявки С_2-6алкенил представляет собой прямой или разветвленный углеводородный радикал с 2-6 атомами углерода, содержащий двойную связь, такой как этенил, пропенил, бутенил, пентенил, гексенил и т.п.; С_2-6алкинил прямой или разветвленный углеводородный радикал с 2-6 атомами углерода, содержащий тройную связь, такой как этинил, пропинил, бутинил, пентинил, гексинил и т.п.; С_3-6циклоалкил представляет собой циклический предельный углеводород с 3-6 атомами углерода и являющийся типичным в отношении циклопропила, циклобутила, циклопентила и циклогексила.

В рамках настоящей заявки галоген представляет собой заместитель, выбранный из группы фтора, хлора, брома и йода. Предпочтительно галоген представляет собой бром, фтор или хлор; в частности хлор или бром.

В рамках настоящей заявки полигалогенС_1-6алкил определен как моно- или полигалогензамещенный С_1-6алкил, например метил с одним или несколькими атомами фтора, например дифторметил или трифторметил, 1,1-дифторэтил и т.п. В случае более одного атома галогена, присоединенного к С_1-6алкильной группе, в определении полигалогенС_1-6алкила они могут быть одинаковыми или различными.

Представляющий интерес вариант осуществления относится к соединению формулы (Ia) или (Ib), имеющему следующую формулу:

или его стереоизомерной форме или его фармацевтически приемлемой соли, где р равно 1;

n представляет собой целое число, равное 1 или 2; при условии, что если n равняется 2, то оба заместителя R⁵ соединены с одним и тем же атомом углерода пиперидинового фрагмента;

R¹ представляет собой водород, карбоксил, галоген, C_1-6 алкилтио, аминоС_1-6алкил или Het;

R² представляет собой С_1-6алкилокси;

R³ представляет собой водород;

R⁴ представляет собой арил¹ или Het;

R⁵ представляет собой арил, арилС_1-6алкил, С_3-6циклоалкил, С_3-6циклоалкилС_1-6алкил, Het, HetC_1-6алкил, С_1-6алкил, гидроксиС_1-6 алкил, аминоС_1-6алкил, моно- или ди(С_1-4алкил)аминоС_1-6алкил, арил-NH-С_1-6алкил, Het-NH-C_1-6алкил, С_2-6алкенил или галоген;

R⁶ представляет собой водород, С1-6алкил, арилС1-6алкил, Het¹, Het¹C1-6алкил или -C(=NH)-NH2;

R⁷ представляет собой водород или С_1-6алкил;

R⁸ представляет собой оксо; или

R⁷ и R⁸ вместе образуют радикал -CH=CH-N=;

R^9a и R^10a вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют радикал, выбранный из группы, состоящей из пирролидинила, пиперидинила, пиперазинила, морфолинила, 4-тиоморфолинила, 2,3-дигидроизоиндол-1-ила, тиазолидин-3-ила, 1,2,3,6-тетрагидропиридила, гексагидро-1Н-азепинила, гексагидро-1Н-1,4-диазепинила, гексагидро-1,4-оксазепинила, 1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-2-ила, пирролинила, пирролила, имидазолидинила, пиразолидинила, 2-имидазолинила, 2-пиразолинила, имидазолила, пиразолила, триазолила, пиридинила, пиридазинила, пиримидинила, пиразинила и триазинила, при

- 6 038350 этом каждый радикал необязательно замещен 1, 2, 3 или 4 заместителями, каждый заместитель независимо выбран из C_1-6 алкила, полигалогенС_1-6алкила, галогена, арилС_1-6алкила, гидрокси, С_1-6алкилокси, амино, моно- или ди(С_1-6алкил)амино, C_1-6 алкилтио, алкилтиоС_1-6алкила, арила, пиридила или пиримидинила;

R^9b и R^10b каждый независимо представляет собой водород, C_1-6алкил, арил или Het;

R¹¹ представляет собой водород или С_1-6алкил;

арил представляет собой гомоциклическое ядро, выбранное из фенила, нафтила, аценафтила или тетрагидронафтила, при этом каждый необязательно замещен 1, 2 или 3 заместителями, при этом каждый заместитель независимо выбран из гидрокси, гидроксиС_1-6 алкила, галогена, циано, цианоС_1-6алкила, нитро, амино, моно- или ди(С_1-6алкил)амино, С_1-6алкила, С_2-6алкенила, необязательно замещенного фенилом, полиС_1-6галогеналкила, С_1-6алкилокси, C_1-6 алкилоксиС_1-6алкила, полигалогенС_1-6алкилокси, карбоксила, C_1-6алкиоксикарбонила, аминокарбонила, морфолинила или моно- или ди(C_1-6алкил)аминокарбонила;

арил¹ представляет собой гомоциклическое ядро, выбранное из фенила, нафтила, аценафтила или тетрагидронафтила, при этом каждый необязательно замещен 1, 2 или 3 заместителями, при этом каждый заместитель независимо выбран из гидрокси, гидроксиС_1-6 алкила, галогена, циано, цианоС_1-6алкила, нитро, амино, моно- или ди(С_1-6алкил)амино, С_1-6алкила, полигалогенС_1-6алкила, C_1-6 алкилокси, С_1-6алкилоксиС_1-6алкила, С_1-6алкилтио, полигалогенС_1-6 алкилокси, карбоксила, С_1-6алкилоксикарбонила, аминокарбонила, Het, моно- или ди(С_1-6алкил)аминокарбонила или С_1-4алкил-S(=O)₂-;

Het представляет собой моноциклический гетероцикл, выбранный из N-феноксипиперидинила, пиперидинила, пиперазинила, морфолинила, 4-тиоморфолинила, пирролила, пиразолила, имидазолила, фуранила, тиенила, оксазолила, изоксазолила, тиазолила, изотиазолила, пиридинила, пиримидинила, пиразинила или пиридазинила; или бициклический гетероцикл, выбранный из хинолинила, хиноксалинила, индолила, бензимидазолила, бензоксазолила, бензизоксазолила, бензотиазолила, бензизотиазолила, бензофуранила, бензотиенила, 2,3-дигидробензо[1,4]диоксинила или бензо[1,3]диоксолила; при этом каждый моноциклический и бициклический гетероцикл необязательно замещен 1, 2 или 3 заместителями, при этом каждый заместитель независимо выбран из галогена, гидрокси, С_1-6алкила C_1-6 алкилокси;

Het¹ представляет собой моноциклический, насыщенный гетероцикл, выбранный из пирролидинила, пиперидинила, пиперазинила, морфолинила, 4-тиоморфолинила, имидазолидинила, пиразолидинила; при этом каждый моноциклический насыщенный гетероцикл необязательно замещен С_1-6алкилом или арилС1 _-6алкилом.

Второй представляющий интерес вариант осуществления относится к соединению формулы (Ia) или (Ib), где R⁴ представляет собой фенил, необязательно замещенный 1 заместителем, при этом указанный заместитель выбран из галогена, циано, C_1-4алкил-S(=O)₂- или С_1-6алкилтио.

Третий представляющий интерес вариант осуществления относится к соединению формулы (Ia) или (Ib), где R⁴ представляет собой моноциклический гетероцикл, выбранный из пиперидинила, пиразолила, фуранила или пиридинила, особенно пиразолила или пиридинила; при этом каждый моноциклический гетероцикл необязательно замещен 1 заместителем, выбранным из галогена, гидрокси, С_1-6алкила или С_1-6алкилокси.

Четвертый представляющий интерес вариант осуществления относится к соединению формулы (Ia) или (Ib), где R⁵ представляет собой фенил; при этом фенил замещен 1 или 2 заместителями, каждый из которых независимо выбран из галогена или С_1-6алкила; бензил или бензил, в котором фенильный фрагмент замещен 1 или 2 заместителями, каждый из которых независимо выбран из галогена или С_1-6алкила.

Пятый представляющий интерес вариант осуществления относится к соединению формулы (Ia) или (Ib), где R⁶ представляет собой водород, С_1-6алкил или бензил.

Шестой представляющий интерес вариант осуществления относится к соединению формулы (Ia) или (Ib), где R⁷ представляет собой водород, a R⁸ представляет собой оксо.

Седьмой представляющий интерес вариант осуществления относится к соединению формулы (Ia) или (Ib), где соединением является соединение формулы (Ia).

Восьмой представляющий интерес вариант осуществления относится к соединению формулы (Ia) или (Ib), где R¹ находится в положении 6 хинолинового кольца.

Девятый представляющий интерес вариант осуществления относится к соединению формулы (Ia) или (Ib), где n равняется 1.

Десятый представляющий интерес вариант осуществления относится к соединению формулы (Ia) или (Ib), где арил представляет собой фенил, необязательно замещенный одним или двумя заместителями, каждый из которых независимо выбран из галогена; циано; С_1-6алкила или С_1-6алкилокси.

Одиннадцатый представляющий интерес вариант осуществления относится к соединению формулы (Ia) или (Ib), где Het представляет собой пиридинил или пиразолил.

Двенадцатый представляющий интерес вариант осуществления относится к соединению формулы (Ia) или (Ib), где р равняется 1; n равняется 1; R¹ представляет собой галоген; С1-6алкилтио; С1-4алкилS(=O)2 или Het; R² представляет собой С1-6алкилокси; R³ представляет собой водород; R⁴ представляет собой фенил, необязательно замещенный галогеном; R⁵ представляет собой арил; арилС_1-6алкил; С₃₆циклоалкилС_1-6 алкил; HetC_1-6алкил; или С_1-6алкил; и где R⁵ находится в положении 2 пиперидинового

- 7 038350 кольца; a R⁶ представляет собой водород.

Как указано выше, соединение формулы (Ia) или (Ib) имеет два или три хиральных центра и поэтому способно формировать соответственно четыре или восемь энантиомеров. Если соединение формулы (Ia) или (Ib) получают реакцией хинолинового производного и пиперидонового производного, как описано ниже, то конфигурация заместителя R⁵ на пиперидиновом кольце может быть известна либо из литературы, либо из способа синтеза, т.е. представляет собой R- или S-конфигурацию для чистого соединения, или может быть неизвестна, т.е. представляет собой R*- или S*-конфигурацию для чистого соединения, в результате потенциальные стереоизомеры ограничиваются максимум до четырех, что таким образом облегчает разделение и выделение таких изомеров.

Цис- и трансконфигурацию чистых изомеров определяют протонным ЯМР. Такие чистые изомеры обозначают в настоящем документе как 1, 2, 3 или 4 согласно порядку, в котором их разделяют и выделяют в протоколе синтеза, например, путем хроматографии. Такие обозначения делают в отношении либо протокола синтеза, осуществляемого в последнем этапе, если разделение и выделение происходит во время этого этапа, либо протокола, осуществляемого на более раннем этапе, если разделение и выделение происходит на этом этапе, и на последнем этапе используют отделенный и выделенный чистый стереоизомер. Для однозначной идентификации соответствующего стереоизомера протокол синтеза, в частности условия хроматографии, при которых отделяют и выделяют соответствующий стереоизомер, приводят в настоящем документе для каждого такого соединения.

Соединения формулы (Ia) или (Ib) также могут быть получены в виде смеси двух энантиомеров. Предпочтительно получать соединения стереоспецифическим способом так, что, например, асимметричный атом углерода, несущий заместитель(и) R⁵ на пиперидиновом кольце, имеет известную абсолютную конфигурацию (например, 2R или 2S) или неизвестную чистую абсолютную конфигурацию (например, 2R* или 2S*), в результате потенциальные стереоизомеры ограничиваются максимум до четырех, что таким образом облегчает разделение и выделение таких изомеров. Если чистые изомеры не разделяется физически, то смесь двух энантиомеров обозначают как А или В. А или В зависит либо от первого выделенного в протоколе синтеза (т.е. А), либо от второго (т.е. В).

В некоторых случаях можно получать смесь двух изомеров неопределенной абсолютной конфигурации. Такие смеси могут быть идентифицированы как M1, М2, М3 или М4, если атом углерода, несущий заместитель R⁵ на пиперидиновом кольце, характеризуется смесью RS изомеров.

Такие смеси могут быть идентифицированы как S1 или S2, если атом углерода, несущий два идентичных заместителя R⁵, на пиперидиновом кольце характеризуется смесью неизвестных изомеров. Эти смеси нумеруют согласно порядку, в котором их разделяют и выделяют в протоколе синтеза.

Предпочтительные соединения в соответствии с настоящим изобретением выбраны из следующих соединений:

CI Ду О у' он 1.....1 1 V 5 ......о т F (2R),транс-3	CI А О \эн .....χιχ ιχ„ и (2R*),цис-1
Cl F ,1.......1. □ ......JI.....Д Вг ,.............................. А% АлА \ (3R*), (В)	А О X он At Л Ан X 0 А Гд F F (2S*),цис-1
J 0 о. ......ЛХь Α Χ X15 А (2R),транс-3	CI О вг.........................А,...... ί Х.Х......дх \ν (Μ V (2R*),цис-2
а и Д°н АХх.....Сv vs J F (2S*),цис-2	. Q f у...........................2X1 ...................ХА....... N V yR О (2R),цис-1

- 8 038350

А О Υ^ΤΑ XXXV JU F F (2R*),цис-2	CI А 0 о Ύ II он .......Ал.....Т ^|Υ Ί0 ЦК А (2R),цис-3
CI Y 0 ] он ργΤτ ТТТ .о А (2R),цис-1	CI А 0 Тон Вг Л\1/\ АТ 1 Ί А (2R),цис-4
О Ϊ О ААЭ ^^0 0 А и т F (2S),цис-2	Cl I 0 .-.....τ.....-Α....... ΤΟ......Τ Υο ΥΥ m (2R),транс-2
CI А 0 Аон AAVpO ТО А АА Ао \ н X X/ (2R),транс-3	α Α 0 {он Бг А^·--, 1 А''·,.. .....есс.......ΙΑ 1 (2S),цис-4
ci ......Ν..... (j..... о................,......а. ............ТСС.........А Ха (2R),цис-4	Р1 Q..... Т он Br YY/M/R АХ........А ....................... 1 Л (2R),цис-4
ci А ° А 1 1 01-1 хоххХт о А F (2R),транс-2	CI у.................Аа 1 ТО........А (3S*), (А)
CI А 0 ХОТО А (2S*) , (А)	0 *...............00........ СТА Ν 0 рН н CJ А F (2R),транс-2
Cl F Т Ϊ Т ОН р бг тТ ССС......А н (3S*) , (А)	а А 0 0 11 1 04 ΟΛΟ ΙΛ V А ТА Ат/ (2R*),цис-2
0 т 0 |сн АЭА 1 0 (2R*),цис-3	аа Т1 СТ 0 о^ 1 1 01-1 АТ А н Л\ ......о Y F (2S),цис-4

в том числе их любая стереоизомерная форма; их фармацевтически приемлемая соль.

- 9 038350

Фармакология

Было показано, что соединения согласно настоящему изобретению можно применять для лечения бактериальной инфекции, включая микобактериальную инфекцию, особенно заболеваний, вызванных патогенными микобактериями, такими как Mycobacterium tuberculosis (включая его латентную и устойчивую к лекарственным средствам форму), М. bovis, M. avium, M. leprae и М. marinum. Таким образом, настоящее изобретение также относится к соединениям формулы (Ia) или (Ib), как определено в настоящем документе выше, и их стереоизомерным формам, их фармацевтически приемлемым солям для использования в качестве лекарственного препарата, в частности для использования в качестве лекарственного препарата для лечения бактериальной инфекции, включая микобактериальную инфекцию.

Кроме того, настоящее изобретение также относится к применению соединения формулы (Ia) или (Ib) и его стереоизомерных форм, его фармацевтически приемлемых солей, а также к их применению в качестве любой из фармацевтических композиций, как описано выше в данном документе, для производства лекарственного препарата для лечения бактериальной инфекции, включая микобактериальную инфекцию.

Соответственно в другом аспекте настоящее изобретение предлагает способ лечения пациента, страдающего от бактериальной инфекции, включая микобактериальную инфекцию, или подверженному риску таковой, который предусматривает введение пациенту терапевтически эффективного количества соединения или фармацевтической композиции в соответствии с настоящим изобретением.

Помимо их активности в отношении микобактерий соединения в соответствии с настоящим изобретением также активны в отношении других бактерий. В общем бактериальные патогены можно классифицировать либо как грамположительные, либо как грамотрицательные патогены. Соединенияантибиотики с активностью в отношении как грамположительных, так и грамотрицательных патогенов обычно рассматривают как обладающие широким спектром действия. Соединения по настоящему изобретению рассматривают как активные в отношении грамположительных и/или грамотрицательных бактериальных патогенов, в частности в отношении грамположительных бактериальных патогенов. В частности, соединения по настоящему изобретению являются активными в отношении по меньшей мере одной грамположительной бактерии, предпочтительно в отношении нескольких грамотрицательных бактерий, более предпочтительно в отношении одной или нескольких грамположительных бактерий и/или одной или нескольких грамотрицательных бактерий.

Соединения по настоящему изобретению обладают бактерицидной или бактериостатической активностью.

Примеры грамположительных и грамотрицательных аэробных и анаэробных бактерий включают Staphylococci, например S. aureus; Enterococci, например Е.faecalis; Streptococci, например S. pneumoniae, S. mutans, S. pyogens; Bacilli, например Bacillus subtilis; Listeria, например Listeria monocytogenes; Haemophilus, например Н. influenza; Moraxella, например М. catarrhalis; Pseudomonas, например Pseudomonas aeruginosa; и Escherichia, например E. coli.

Грамположительные патогены, например Staphylococci, Enterococci и Streptococci, особенно важны из-за развития устойчивости штаммов, которые трудно как лечить, так и искоренять, например, в больничной среде, при их возникновении. Примерами таких штаммов являются метициллин-устойчивый Staphylococcus aureus (MRSA), метициллин-устойчивые коагулаза-отрицательные стафилококки (MRCNS), пенициллин-устойчивый Streptococcus pneumoniae и устойчивый к нескольким лекарственным средствам Enterococcus faecium.

Соединения по настоящему изобретению также демонстрируют активность в отношении устойчивых бактериальных штаммов.

Соединения в соответствии с настоящим изобретением особенно активны против Streptococcus pneumoniae и Staphylococcus aureus, в том числе устойчивого Staphylococcus aureus, такого как, например, метициллин-устойчивый Staphylococcus aureus (MRSA).

Следовательно, настоящее изобретение также относится к применению соединения формулы (Ia) или (Ib) и его стереоизомерных форм, его фармацевтически приемлемых солей, а также к их применению в качестве любой из фармацевтических композиций, как описано выше в данном документе, для производства лекарственного препарата для лечения бактериальной инфекции, включая инфекцию, вызванную Staphylococci и/или Streptococci.

Соответственно в другом аспекте настоящее изобретение предлагает способ лечения пациента, страдающего от бактериальной инфекции, включая инфекцию, вызванную Staphylococci и/или Streptococci, или подверженный риску таковых, который предусматривает введение пациенту терапевтически эффективного количества соединения или фармацевтической композиции в соответствии с настоящим изобретением.

Без привязки к какой-либо теории можно предположить, что активность соединений по настоящему изобретению основана на ингибировании F1F0-АТФ-синтазы, в частности ингибировании комплекса F0 в F1F0-АТФ-синтазе, более конкретно ингибировании субъединицы с комплекса F0 в F1F0-АТФ-синтазе, приводя к уничтожению бактерий путем истощения уровней клеточной АТФ бактерий. Поэтому, в частности, соединения по настоящему изобретению активны в отношении тех бактерий, жизнеспособность

- 10 038350 которых зависит от нормального функционирования FlFO-АТФ-синтазы.

Бактериальные инфекции, которые можно лечить соединениями по настоящему изобретению, включают, например, инфекции центральной нервной системы, инфекции наружного уха, инфекции среднего уха, такие как острый средний отит, инфекции черепных пазух, глазные инфекции, инфекции ротовой полости, такие как инфекции зубов, десен и слизистой оболочки, инфекции верхних дыхательных путей, инфекции нижних дыхательных путей, мочеполовые инфекции, желудочно-кишечные инфекции, гинекологические инфекции, септицемию, инфекции костей и суставов, инфекции кожи и подкожной клетчатки, бактериальный эндокардит, ожоги, антибактериальную профилактику хирургической операции и антибактериальную профилактику у пациентов с ослабленным иммунитетом, таких как пациенты, получающие противораковую химиотерапию, или пациенты с трансплантированными органами.

Всякий раз, когда в данном документе выше или ниже идет речь о том, что соединения могут лечить бактериальную инфекцию, это означает, что соединения могут лечить инфекцию, вызванную одним или несколькими бактериальными штаммами.

Настоящее изобретение также относится к композиции, включающей фармацевтически приемлемый носитель и в качестве активного ингредиента терапевтически эффективное количество соединения в соответствии с настоящим изобретением. Соединения в соответствии с настоящим изобретением могут быть сформулированы в различных фармацевтических формах в целях введения. В качестве подходящих композиций могут быть упомянуты все композиции, обычно используемые для системного введения лекарственных средств. Для получения фармацевтических композиций по настоящему изобретению эффективное количество конкретного соединения, необязательно в форме соли присоединения, в качестве активного ингредиента объединяется в однородную смесь с фармацевтически приемлемым носителем, при этом носитель может принимать широкое разнообразие форм в зависимости от формы препарата, требуемого для введения. Эти фармацевтические композиции желательны в форме единичных доз, пригодных, в частности для введения перорально или путем парентерального введения. Например, при получении композиций в пероральной лекарственной форме, может быть использована любая из обычных фармацевтических сред, например вода, гликоли, масла, спирты и тому подобные, в случае пероральных жидких препаратов, таких как суспензии, сиропы, эликсиры, эмульсии и растворы; или твердые носители, такие как воски, сахара, каолин, разбавители, смазывающие вещества, связующие, разрыхлители и тому подобные, в случае порошков, пилюль, капсул и таблеток. Из-за простоты их введения таблетки и капсулы представляют наиболее удобные пероральные единицы дозирования, в таком случае, очевидно, используют твердые фармацевтические носители. Для парентеральных композиций носитель будет, как правило, по меньшей мере, в значительной степени содержать стерильную воду, хотя может содержать и другие ингредиенты, например, для улучшения растворимости. Например, могут быть получены растворы для инъекций, в которых носитель включает физиологический раствор, раствор глюкозы или смесь физиологического раствора и раствора глюкозы. Также могут быть получены суспензии для инъекций, в случае которых могут использоваться подходящие жидкие носители, суспендирующие средства и т.п. Также включены препараты в твердой форме, которые предназначены для преобразования, непосредственно перед применением, в препараты в жидкой форме.

В зависимости от режима введения фармацевтическая композиция будет предпочтительно содержать от 0,05 до 99 вес.%, более предпочтительно от 0,1 до 70 вес.%, еще более предпочтительно от 0,1 до 50 вес.% соединения формулы (I) и от 1 до 99,95 вес.%, более предпочтительно от 30 до 99,9 вес.%, еще более предпочтительно от 50 до 99,9 вес.% фармацевтически приемлемого носителя, при этом все процентные соотношения берутся исходя из общего веса композиции.

Фармацевтическая композиция может дополнительно содержать другие разнообразные ингредиенты, известные в данной области техники, например смазка, стабилизирующий агент, буферный агент, эмульгатор, агент, регулирующий вязкость, поверхностно-активное средство, консервант, ароматизатор или краситель.

Особенно предпочтительно составление вышеуказанных фармацевтических композиций в единичной лекарственной форме для простоты введения и равномерности дозирования. Единичная лекарственная форма, применяемая в настоящем документе, относится к физически отдельным единицам, подходящим в качестве единичных доз, при этом каждая единица содержит предварительно установленное количество активного ингредиента, рассчитанное для получения желаемого терапевтического эффекта, в сочетании с необходимым фармацевтическим носителем. Примерами таких единичных лекарственных форм являются таблетки (включая делимые таблетки или таблетки, покрытые оболочкой), капсулы, пилюли, пакеты для порошкообразного продукта, пластинки, суппозитории, инъекционные растворы или суспензии и т.п., и их отдельное кратное количество.

Суточная доза соединения в соответствии с настоящим изобретением будет, конечно, варьировать в зависимости от используемого соединения, режима введения, требуемого лечения и от указанного микобактериального заболевания. Однако в целом удовлетворительные результаты будут получены, если соединение в соответствии с настоящим изобретением вводится в дневной дозе, не превышающей 1 г, например, в диапазоне от 10 до 50 мг/кг массы тела.

Учитывая тот факт, что соединения формулы (Ia) или формулы (Ib) активны в отношении бактери- 11 038350 альных инфекций, соединения по настоящему изобретению можно комбинировать с другими антибактериальными средствами в целях эффективной борьбы с бактериальными инфекциями.

Следовательно, настоящее изобретение также относится к комбинации (а) соединения в соответствии с настоящим изобретением и (b) одного или нескольких других антибактериальных средств.

Настоящее изобретение также относится к комбинации (а) соединения в соответствии с настоящим изобретением и (b) одного или нескольких других антибактериальных средств для использования в качестве лекарственного препарата.

Настоящее изобретение также относится к применению комбинации или фармацевтической композиции, как указано непосредственно выше, для лечения бактериальной инфекции.

Фармацевтическая композиция, включающая фармацевтически приемлемый носитель и в качестве активного ингредиента терапевтически эффективное количество (а) соединения в соответствии с настоящим изобретением и (b) один или несколько других антибактериальных средств, также включена в настоящее изобретение.

Весовое соотношение (а) соединения в соответствии с настоящим изобретением и (b) другого антибактериального средства(средств), если дано в виде комбинации, может быть определено специалистом в данной области техники. Указанные соотношение и точная дозировка и частота введения зависят от конкретного применяемого соединения в соответствии с настоящим изобретением и другого антибактериального средства (средств), конкретного состояния, лечение которого осуществляют, тяжести состояния, лечение которого осуществляют, возраста, веса, пола, диеты, времени введения и общего физического состояния конкретного пациента, режима введения, также как другие лекарственные средства, которые индивидуум может применять, как хорошо известные специалисту в данной области техники. Более того, является очевидным, что эффективное суточное количество может быть снижено или увеличено в зависимости от реакции подвергаемого лечению субъекта и/или в зависимости от оценки врача, назначающего соединения настоящего изобретения. Конкретное весовое соотношение для данного соединения формулы (Ia) или (Ib) и другого антибактериального средства может варьировать от 1/10 до 10/1, более предпочтительно от 1/5 до 5/1, даже более предпочтительно от 1/3 до 3/1.

Соединения в соответствии с настоящим изобретением и одно или несколько других антибактериальных средств можно сочетать в единой лекарственной форме или их можно составлять в отдельных лекарственных формах таким образом, чтобы вводить одновременно, раздельно или последовательно. Таким образом, настоящее изобретение также относится к продукту, содержащему (а) соединение в соответствии с настоящим изобретением и (b) одно или несколько других антибактериальных средств, в качестве комбинированного препарата для одновременного, раздельного или последовательного применения в лечении бактериальных инфекций.

Другие антибактериальные средства, которые можно комбинировать с соединениями формулы (Ia) или (Ib), являются, например, антибактериальными средствами, известными в уровне техники. Другие антибактериальные средства включают антибиотики группы β-лактамов, такие как пенициллины природного происхождения, полусинтетические пенициллины, цефалоспорины природного происхождения, полусинтетические цефалоспорины, цефамицины, 1-оксацефемы, клавулановые кислоты, пенемы, карбапенемы, нокардицины, монобактамы; тетрациклины, ангидротетрациклины, антрациклины; аминогликозиды; нуклеозиды, такие как N-нуклеозиды, С-нуклеозиды, карбоциклические нуклеозиды, бластицидин S; макролиды, такие как макролиды с 12-членным кольцом, макролиды с 14-членным кольцом, макролиды с 16-членным кольцом; ансамицины; пептиды, такие как блеомицины, грамицидины, полимиксины, бацитрацины, пептидные антибиотики с большим кольцом, содержащие лактоновые связи, актиномицины, амфомицин, капреомицин, дистамицин, ендурацидины, микамицин, неокарциностатин, стендомицин, биомицин, виргиниамицин; циклогексимид; циклосерин; вариотин; саркомицин А; новобиоцин; гризеофульвин; хлорамфеникол; митомицины; фумагиллин; моненсины; пирролнитрин; фосфомицин; фузидовая кислота; D- (п-гидроксифенил)глицин; D-фенилглицин; энедиины.

Конкретными антибиотиками, которые можно комбинировать с соединениями по настоящему изобретению формулы (Ia) или (Ib), являются, например, бензилпенициллин (калия, прокаин, бензатин), феноксиметилпенициллин (калия), фенетициллин калия, пропициллин, карбенициллин (динатрия, фенилнатрия, инданилнатрия), сулбенициллин, тикарциллин динатрия, метициллин натрия, оксациллин натрия, клоксациллин натрия, диклоксациллин, флюклоксациллин, ампициллин, мезлоциллин, пиперациллин натрия, амоксициллин, циклациллин, гектациллин, сульбактам натрия, талампициллин гидрохлорид, бакампициллин гидрохлорид, пивмециллинам, цефалексин, цефаклор, цефалоглицин, цефадроксил, цефрадин, цефроксадин, цефапирин натрия, цефалотин натрия, цефацетрил натрия, цефсулодин натрия, цефалоридин, цефатризин, цефоперазон натрия, цефамандол, цефотиама гидрохлорид, цефазолин натрия, цефтизоксим натрия, цефотаксим натрия, цефменоксима гидрохлорид, цефуроксим, цефтриаксон натрия, цефтазидим, цефокситин, цефметазол, цефотетан, латамоксеф, клавулановая кислота, имипенем, азтреонам, тетрациклин, хлортетрациклина гидрохлорид, деметилхлортетрациклин, окситетрациклин, метациклин, доксициклин, ролитетрациклин, миноциклин, даунорубицина гидрохлорид, доксорубицин, акларубицин, канамицина сульфат, беканамицин, тобрамицин, гентамицина сульфат, дибекацин, амикацин, микрономицин, рибостамицин, неомицина сульфат, паромомицина сульфат, стрептомицина сульфат,

- 12 038350 дигидрострептомицин, дестомицин А, гигромицин В, апрамицин, сизомицин, нетилмицина сульфат, спектиномицина гидрохлорид, астромицина сульфат, валидамицин, касугамицин, полиоксин, бластицидин S, эритромицин, эритромицина эстолат, олеандомицина фосфат, трацетилолеандомицин, китасамицин, джозамицин, спирамицин, тилозин, ивермектин, мидекамицин, блеомицин сульфат, пепломицин сульфат, грамицидин S, полимиксин В, бацитрацин, колистина сульфат, колистинметансульфонат натрия, энрамицин, микамицин, виргиниамицин, капреомицин сульфат, биомицин, энвиомицин, ванкомицин, актиномицин D, неокарциностатин, бестатин, пепстатин, монензин, лазалоцид, салиномицин, амфотерицин В, нистатин, натамицин, трикомицин, митрамицин, линкомицин, клиндамицин, клиндамицина пальмитат гидрохлорид, флавофосфолипол, циклосерин, пецилоцин, гризеофульвин, хлорамфеникол, хлорамфеникола пальмитат, митомицин С, пирролнитрин, фосфомицин, фузидовая кислота, бикозами цин, тиамулин, сикканин.

Другими антимикобактериальными средствами, которые можно комбинировать с соединениями формулы (Ia) или (Ib), являются, например, рифампицин (=рифампин); изониазид; пиразинамид; амикацин; этионамид; этамбутол; стрептомицин; парааминосалициловая кислота; циклосерин; капреомицин; канамицин; тиоацетазон; РА-824; хинолоны/фторхинолоны, такие как, например, моксифлоксацин, гатифлоксацин, офлоксацин, ципрофлоксацин, спарфлоксацин; макролиды, такие как, например, кларитромицин, клофазимин, амоксициллин с клавулановой кислотой; рифамицины; рифабутин; рифапентин; соединения, раскрытые в WO 2004/011436.

Общее получение

Соединения согласно настоящему изобретению в большинстве случаев можно получать при помощи последовательности этапов, каждый из которых известен квалифицированному специалисту.

Соединения формулы (Ia), где R⁶ представляет собой водород, при этом указанные соединения, представленные формулой (Ia-1), можно получить путем удаления защитной группы промежуточного соединения формулы (II-а), где Р¹ представляет собой подходящую защитную группу, такую как C1-6 алкилоксикарбонильную группу, а именно трет-бутоксикарбонильную группу, с помощью, например, подходящей кислоты, такой как трифторуксусная кислота или хлористоводородная кислота, в подходящем растворителе, таком как дихлорметан или изопропанол; альтернативно, Р¹ может представлять собой арилС1-6алкилоксикарбонильную группу, такую как бензилоксикарбонил, и снятие защитной группы можно провести путем обработки трибромидом бора в подходящем растворителе, таком как дихлорметан

Соединения формулы (Ib), где R⁶ представляет собой водород, R⁷ представляет собой водород, и R⁸ представляет собой оксо, при этом указанные соединения, представленные формулой (Ib), можно получить путем удаления защитных групп промежуточного соединения формулы (IIa) с помощью подходящей кислоты, например хлористоводородной кислоты или трифторуксусной кислоты, в подходящем растворителе, таком как тетрагидрофуран или изопропанол

Соединения формулы (Ia), где R⁵ представляет собой гидроксиметильную группу, при этом указанные соединения представлены формулой (Ia-3), могут быть получены путем обработки промежуточного соединения формулы (IV-a), где Р³ представляет собой приемлемую защитную группу, такую как алкилсилильная группа, например трет-бутилдиметилсилильная группа, солью четвертичного аммония, такой как тетрабутиламмония хлорид, в приемлемом растворителе, таком как тетрагидрофуран

Соединения формулы (Ia) можно получить путем реакции промежуточного соединения формулы (Va) с соединением формулы (VIa), например, в присутствии н-бутил-лития в гексане в системе растворителей, содержащих, например, диизопропиламин в тетрагидрофуране. В качестве альтернативы, реакцию можно выполнять в присутствии, например, н-бутил-лития в растворе N-(1-метилэтил)-2пропанамина в тетрагидрофуране. Обе реакции предпочтительно выполняют при низкой температуре, например, от приблизительно -70 до -78°С

- 13 038350

Принято считать, что специалисту в данной области известны соответствующие температуры, разбавления и время реакций для оптимизации указанных выше реакций в целях получения желаемого соединения.

Соединения формулы (Ia) или (Ib) можно, кроме того, получать путем превращения соединений формулы (Ia) или (Ib) друг в друга согласно известным в уровне техники реакциям превращения.

Соединения формулы (Ia) или (Ib), где R¹ представляет галоген, например бром, могут быть превращены в соединение формулы (Ia) или (Ib), где R¹ представляет Het, путем реакции с Het-B(OH)2 в присутствии приемлемого катализатора, такого как, например, Pd(OAc)2 или Pd(PPh₃)₄, в присутствии приемлемого основания, такого как, например, K₃PO₄ или Na2CO₃, и приемлемого растворителя, такого как, например, толуол или 1,2-диметоксиэтан (DME).

Аналогичным образом, соединения формулы (Ia) или (Ib), в которых R¹ представляет собой галоген, например бром, могут быть превращены в соединения формулы (Ia) или (Ib), в которых R¹ представляет собой алкил, например метил, путем обработки соответствующим алкилирующим средством, таким как CH₃B(OH)₂ или (CH₃)₄Sn, в присутствии подходящего катализатора, такого как, например, Pd(PPh₃)₄, в подходящем растворителе, таком как, например, толуол или 1,2-диметоксиэтан (DME).

Соединения формулы (Ia) или (Ib), где R¹ представляет собой галоген, в частности бром или арилС_1-6алкил, могут быть превращены в соединение (Ia) или (Ib), где R¹ представляет собой водород, путем реакции с HCOONH4 в присутствии подходящего катализатора, такого как, например, палладий/на угле, и в присутствии подходящего растворителя, такого как, например, спирт, например метанол. В качестве альтернативы, такое превращение можно выполнять с использованием, например, н-бутил-лития в подходящем растворителе, таком как диэтиловый эфир.

Соединения формулы (Ia) или (Ib), где R¹ представляет собой галоген, в частности бром или хлор, a R⁶ представляет собой отличное от водорода, например, арилС_1-6алкильную группу, такую как 1этилфенил, могут быть превращены в соединение формулы (Ia) или (Ib), где R¹ представляет собой водород, и R⁶ представляет собой водород, путем гидрогенизации с палладием/на угле в присутствии уксусной кислоты в подходящем растворителе, таком как метанол.

Соединения формулы (Ia) или (Ib), где R¹ представляет собой галоген, в частности бром, могут быть так же превращены в соединение, где R¹ представляет собой формил, путем реакции с N,Nдиметилформамидом в присутствии н-бутил-лития и подходящего растворителя, такого как, например, тетрагидрофуран. Затем эти соединения можно превращать в соединения формулы (Ia) или (Ib), где R¹ представляет собой -СН2-ОН, путем реакции с подходящим восстановителем, таким как, например, NaBH4, и в присутствии подходящего растворителя, такого как, например, спирт, например метанол, и тетрагидрофурана.

Соединения формулы (Ia) или (Ib), где R¹ представляет собой аминокарбонил, моно- или ди(алкил)аминокарбонил или R^9aR^10aN-C(=O)-, могут быть получены путем реакции соединения формулы (Ia) или (Ib), где R¹ представляет собой карбоксил, с подходящим амином, подходящим связывающим реагентом, таким как, например, гидроксибензотриазол, подходящим активирующим реагентом, таким как, например, 1,1'-карбонилдиимидазол, или N,N'-дициклогексилкарбодиимид, или 1-(3диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимид, подходящим основанием, таким как, например, триэтиламин, и подходящим растворителем, таким как, например, тетрагидрофуран и метиленхлорид.

Соединения формулы (Ia) или (Ib), где R⁴ представляет собой фенил, замещенный галогеном, могут быть превращены в соединение формулы (Ia) или (Ib), где R⁴ представляет собой фенил, замещенный Het, путем реакции с Het-B(OH)2 в присутствии подходящего катализатор, такого как, например, Pd(PPh3)4, в присутствии подходящего основания, такого как, например, Na2CO3, а также подходящего растворителя, такого как, например, толуол или 1,2-диметоксиэтан (DME), и спирта, например метанола.

Соединения формулы (Ia), где R² представляет собой метокси, могут быть превращены в соответствующее соединение формулы (Ib), где R⁸ представляет собой водород, a R⁹ представляет собой оксо, путем гидролиза в присутствии соответствующей кислоты, такой как, например, хлористоводородная кислота, и подходящего растворителя, такого как, например, диоксан или тетрагидрофуран.

Соединения формулы (Ia) или (Ib), где R⁶ представляет собой водород, могут быть превращены в соответствующие соединения формулы (Ia) или (Ib), где R⁶ представляет собой отличное от водорода, с использованием стандартных методик. Например, соединение формулы (Ia) или (Ib), где R⁶ представляет собой C_1-6алкил, может быть получено путем алкилирования соединения формулы (Ia) или (Ib), где R⁶ представляет собой водород, например, в случае, если R⁶ представляет собой метил, путем обработки водным раствором формальдегида в присутствии триацетоксиборгидрида натрия в подходящем растворителе, таком как дихлорметан.

Соединения формулы (Ia) или (Ib), где R⁶ представляет собой отличное от водорода, могут быть превращены в соответствующее соединение формулы (Ia) или (Ib), где R⁶ представляет собой водород, с использованием стандартных методик. Например, соединение формулы (Ia) или (Ib), где R⁶ представляет собой арилС_1-6алкильную группу, например этил-1-фенильную группу, может быть превращен в соответствующее соединение формулы (Ia) или (Ib), где R⁶ представляет собой водород, путем гидрогенизации в присутствии палладия/на угле в подходящем растворителе, таком как метанол.

- 14 038350

Очевидно, что в предыдущих и в последующих реакциях продукты реакции можно выделить из реакционной среды и при необходимости подвергнуть дополнительной очистке в соответствии с методиками, которые в целом известны в уровне техники, как например, экстракция, кристаллизация и хроматография. Кроме того, очевидно, что продукты реакции, которые существуют в более чем одной энантиометрической форме, могут быть выделены из их смеси путем известных методик, в частности препаративной хроматографией, такой как препаративная HPLC, хиральная хроматография. Отдельные диастереоизомеры или отдельные энантиомеры могут также быть получены путем сверхкритической жидкостной хроматографии (SCF).

Исходные вещества и промежуточные соединения являются соединениями, которые либо коммерчески доступны, либо могут быть получены в соответствии со стандартными реакционными процедурами, общеизвестными в уровне техники. Соединения пиперидона, используемые в качестве исходных материалов в вышеупомянутых способах, можно получить, например, в соответствии с процедурами, описанными в Xiaocong M. Ye el., Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters, 20 (2010) 2195-2199, Michel Guillaume et al., Organic Process Research and Development 2007, 11, 1079-1086 и WO 2005/123081. Различные процедуры получения соединений, используемых в качестве исходных материалов на основе хинолина, раскрыты в WO описаниях, на которые ссылаются выше.

В частности, промежуточные соединения (IIa) могут быть получены в соответствии со следующей схемой реакции (1):

Схема 1

В реакционной схеме 1 соединение хинолина вступает в реакцию с производным пиперидин-4-она, например с н-бутил-литием в гексане в подходящем растворителе, таком как тетрагидрофуран.

Исходный материал хинолина, используемый в схеме 1, может быть получен стандартным способом, например, согласно следующей схеме 1-а, если R³ представляет собой водород

Схема 1-а

В схеме 1-а этап (а) предусматривает циклизацию соединения бензолпропанамида с превращением оксогруппы в галогеновую (Hal) группу, предпочтительно хлор, например, путем обработки оксихлорида фосфора в подходящем растворителе, таком как диметилформамид.

На этапе (b) полученную галогеновую (Hal) группу можно превратить в соответствующую R²группу при помощи стандартного способа, например обработкой соединением алкоксида, таким как метилат натрия, с образованием С_1-6алкилоксигруппы, в частности метилоксигруппы, в подходящем рас творителе, таком как метанол.

Исходный материал хинолина, используемый в схеме 1, может быть получен стандартным способом, например, согласно следующей схеме 1-а, если R³ представляет собой галоген, в частности хлор

Схема 1-b

В схеме 1-b этап (а) предусматривает реакцию производного аминобензола с производным гидро коричной кислоты в присутствии галогенирующего средства, в частности хлорирующего средства, такого как трихлорид фосфора, при повышенной температуре в течение, например, приблизительно 80°С.

На этапе (b) 2-Hal группа может быть превращена в требуемую R²-группу с помощью стандартного способа, например с помощью соответствующего алкоксилирующего средства, такого как алкоголят на трия, например метилата натрия, для введения алкилоксигруппы, предпочтительно в подходящем рас творителе, таком как метанол.

Исходный материал хинолина, используемый в схеме 1, может быть получен согласно следующей схеме 1-с, если R³ представляет собой алкил, арил или Het

Схема 1-с

- 15 038350

В схеме 1-с этап (а) предусматривает реакцию аминофенилалканона с соответствующим сложным алкиловым (alk) эфиром β -оксобензол (или гетероциклил)пропановой кислоты, предпочтительно сложным эфиром бензолпропановой кислоты, например сложным этиловым эфиром, при повышенной температуре, например приблизительно 180°С.

На этапе (b) полученное производное хинолина восстанавливают с превращением оксогруппы, соединенной в 3-положении хинолинового ядра с метиленовой (-СН2-) группой, например, путем реакции с гидразином в подходящем растворителе, таком как 1,2-этандиол, предпочтительно при повышенной температуре, такой как приблизительно 100°С, с последующим присоединением основания, такого как гидроксид калия.

На этапе (с) 2-оксогруппа может быть превращена в галогеновую (Hal) группу, например хлоргруппу, при помощи стандартного способа путем обработки соответствующим галогенирующим средством, таким как оксихлорид фосфора, в присутствии бензилтриметиламмония хлорида в соответствующем растворителе, таком как ацетон, предпочтительно при повышенной температуре, такой как 80°С.

На этапе (d) 2-галогеновая группа может быть превращена в требуемую R²-группу с помощью соот ветствующего алкоксилирующего средства, такого как алкоголят натрия, например метилата натрия, для введения алкилоксигруппы, предпочтительно в подходящем растворителе, таком как метанол.

Производные пиперидин-4-она, используемые в схеме 1, в общем известны и могут быть получены с помощью способов, известных в литературе или аналогичных известным. Например, такие производные могут быть получены в соответствии со следующей схемой реакции 2

Схема 2

На этапе (а) производное пиперидина, в котором Р⁴, представляющий группу-предшественник для оксогруппы, такой как С1-4алкилендиоксидиоксигруппа, в частности 1,2-этилендиоксигруппа, обрабатывают для превращения группы-предшественника в требуемую оксогруппу, например, путем обработки кислотой, такой как хлористоводородная кислота, для осуществления превращения С1-4алкилдиоксигруппы в оксогруппу. На этапе (b) защитная группа Р¹ может быть введена стандартным способом. Таким образом, например, если группа Р¹ представляет собой C1-6 алкилоксикарбонильную группу, то соединение пиперидин-4-она может вступать в реакцию с соответствующим ди-С_1-6 алкилдикарбонатом, таким как ди-трет-бутилдикарбонат, в присутствии основания, такого как триэтиламин, и в подходящем растворителе, таком как тетрагидрофуран.

Этот способ особенно приемлем для получения соединения, в котором R⁵ представляет собой цик логексилметильную группу, при этом исходное соединение, полученное путем восстановления соответствующего фенилметильного соединения, например, путем гидрогенизирования в присутствии катализатора рений/алюминия оксид и в приемлемом растворителе, таком как метанол.

В качестве альтернативы, вышеуказанное производное пиперидин-4-она может быть получено путем восстановления соответствующего соединения 3,4-дигидропиридина в соответствии со схемой реакции 3

Схема 3

В данной реакции соединение 3,4-дигидропиридина восстанавливают, например, с помощью восстановителя, такого как гидротрис(1-метилпропил)(1-)борат лития, в подходящем растворителе, таком как тетрагидрофуран, предпочтительно при температуре приблизительно -78°С.

Вышеуказанное соединение пиперидин-4-она, где R⁵ представляет собой С2-6алкенильную группу, особенно этенильную группу, может быть получено согласно реакционной схеме 4, в которой R_b представляет собой С_1-4алкильную группу

Схема 4 /=\ (а) /=\ (Ь) / \ .

^Rb°—(N----► 0=( N-P¹ -----► О=( N-P¹

C₂_₆ алкенил C₂_₆ алкенил

На этапе (а) исходное пиридиновое соединение обрабатывают для введения защитной группы Р¹ традиционным способом. Таким образом, например, если защитной группой Р¹ является C_1-6 алкилоксикарбонильная группа, то пиридиновое соединение может реагировать с приемлемым ди-С_1-6алкилбикарбонатом, таким как ди-трет-бутилдикарбонат, в приемлемом растворителе, таком как тетрагидрофуран. Затем осуществляют реакцию защищенного соединения с приемлемым алкенилмагний галогенидным реагентом Гриньяра, таким как винилмагния бромид, в приемлемом растворителе, таком как тетрагидрофуран. Затем полученное в результате соединение может быть восстановлено на этапе (b) до пиперидин-4-она, как описано выше.

Вышеупомянутые промежуточные соединения алкенилпиперидин-4-она, в которых R⁵ представляет собой винил, могут быть использованы для получения промежуточных соединений формулы (IIa), в ко- 16 038350 торых R⁵ представляет собой гидроксиметильную группу, согласно следующей реакционной схеме 5

Схема 5

На этапе (а) осуществляют реакцию соединения пиперидин-4-она с приемлемым хинолином, как описано выше, с использованием, например, н-бутил-лития в гексане с системе растворителей, содержащей, например, диизопропиламин в тетрагидрофуране. Реакцию предпочтительно выполняют при низкой температуре например при приблизительно -78°С.

На этапе (b) превращение этинильной группы в 1,2-дигидроксиэтильную группу может быть осуществлено путем окисления, например, обработкой оксидом осмия в н-бутаноле в присутствии основания, такого как 4-метилморфолин-4-оксид, и приемлемого растворителя, такого как тетрагидрофуран.

На этапе (с) 1,2-дигидроксиэтильную группу превращают в альдегидную группа путем обработки, например, периодатом натрия, в приемлемом растворителе, таком как тетрагидрофуран.

На этапе (d) альдегидное соединение восстанавливают до гидроксиметильного соединения, например, восстанавливающим средством, таком как боргидрид натрия, в приемлемом растворителе, таком как метанол.

Соединения пиперидин-4-она, в которых R⁵ находится в 2-положении и представляет собой, например, Het группу, такую как пиридил, особенно 3-пиридил, a R⁶ представляет собой, например, фенил-1этиловую группу, могут быть получены согласно следующей реакционной схеме 6

Схема 6

На этапе (а) осуществляют реакцию исходного метанамина со смесью ЗА молекулярного сита, 1,1би-2-нафтола и трифенилбората в приемлемом растворителе, таком как дихлорметан, и полученную в результате реакционную смесь смешивают с 1-метилокси-3-(триметилсилилокси)-1,3-бутадиеном и осуществляют реакцию при низкой температуре, например -78°С.

На этапе (b) осуществляют превращение путем обработки исходного материала с L-селектридом (лития три-втор-бутил(гидридо)боратом(1-)) в приемлемом растворителе, таком как тетрагидрофуран, при низкой температуре, например при приблизительно -78°С, для восстановления двойной связи в пиперидиновом кольце и превращения оксогруппы в гидроксигруппу.

На этапе (с) окисляют гидроксисоединение, например, путем обработки периодинаном ДессМартина (1,1,1-триацетокси-1,1-дигидро-1,2-бензиодоксол-3(1Н)-он) в приемлемом растворителе, например в дихлорметане.

Соединения формулы (IVa) могут быть получены согласно следующей реакционной схеме (7): Схема 7

На этапе (а) пиперидин-4-он получают путем реакции вышеупомянутых реагентов, а именно R⁶NH², глиоксилатный сложный эфир и бутандиеновое производное, в котором Р⁷ представляет собой защитную группу, такую как триС_1-6алкил (например, метил)силильная группа, в присутствии трифторуксусной кислоты, трифторида бора и 3 А молекулярного сита в приемлемом растворителе, таком как ди- 17 038350 хлорметан, предпочтительно при низкой температуре, такой как приблизительно -78°С.

На этапе (b) защитную оксогруппу Р⁵, такую как 4,4-ди-С_1-6 алкильная (например, этильная) группа, вводят, например, путем обработки три-С_1-6алкил(например, этил)ортоформиатом в присутствии кислоты, такой как п-толуолсульфокислота, в приемлемом растворителе, таком как этанол.

На этапе (с) защищенное пиперидиновое соединение восстанавливают с превращением сложноэфирной группы в гидроксиметильную группу, например, с помощью литий-алюминия гидрида, в приемлемом растворителе, таком как диэтиловый эфир.

На этапе (d) защитную группу Р⁵ удаляют, например, обработкой кислотой, такой как трифторуксусная кислота, в приемлемом растворителе, например в воде.

На этапе (е) гидроксиметильную группу защищают, например, три-С_1-6алкил(например, третбутилдиметил)силильной группой, которая может быть введена, например, обработкой приемлемым триС_1-6алкил(например, трет-бутилдиметил)силилгалогенидом, например хлоридом, в присутствии, например, имидазола, в приемлемом растворителе, таком как диметилформамид.

На этапе (f) осуществляют реакцию защищенного пиперидинового соединения, полученного на этапе (е), с хинолиновым производным традиционным способом, как описано выше.

Экспериментальная часть.

Следующие примеры иллюстрируют настоящее изобретение.

Далее BuLi означает н-бутиллитий, цикло означает циклогексан, DCM означает дихлорметан, DIPE означает диизопропиловый эфир, DME означает 1,2-диметоксиэтан, DMF означает N,Nдиметилформамид, ETIP означает смесь 1:1 этанола и 2-пропанола, EtOAc означает этилацетат, EtOH означает этанол, iPA означает изопропиламин, iPrOH означает 2-пропанол, МеОН означает метанол, TFA означает трифторуксусную кислоту, THF означает тетрагидрофуран, SFC означает сверхкритическую жидкостную хроматографию. Если не указано иное, SFC проводят с использованием подвижной фазы со скоростью потока 50 мл/мин, при этом колонку выдерживают при температуре 35°С и выходном давлении 100 бар.

А. Получение промежуточных соединений.

Пример А1.

a) Получение промежуточного соединения 1

С1 ό

Ύ Т Т

DMF (12,45 мл) каплями добавляли в оксихлорид фосфора 99% (755, 015 ммоль) при 5°С, затем порциями добавляли 4-хлор-N-(4-хлорфенил)бензолпропанамид (107,859 ммоль) при 5°С. Полученную в результате смесь нагревали при 80°С в течение ночи, затем охлаждали до комнатной температуры и выливали в воду со льдом. Осадок отфильтровывали, промывали водой и помещали в DIPE. Осадок отфильтровывали и сушили (вакуум, 60°С), получая 32,1 г промежуточного соединения 1.

b) Получение промежуточного соединения 2

С1 ό

Ύ Т Т 4

Метилат натрия 30% в МеОН (132,7 мл, 0,696 моль) добавляли в раствор промежуточного соединения 1 (32,1 г, 0,1 моль) в МеОН (623 мл). Смесь перемешивали при 80°С в течение ночи, затем охлаждали до комнатной температуры и растворитель выпаривали при пониженном давлении. Смесь выливали в воду со льдом и осадок отфильтровывали, а затем промывали водой. Порошок сушили в вакууме при 60°С с получением коричневого твердого вещества. Этот остаток (26,31 г) очищали флэшхроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 400 г, DCM/Cyclo: 50/50). Очищенные фракции собирали и выпаривали досуха с получением желтого твердого вещества, получая 15,7 г промежуточного соединения 2.

c) Получение промежуточного соединения 3

BuLi 1,6 М в гексане (4,7 мл, 7,54 ммоль) медленно добавляли при -20°С в потоке N₂ к раствору диизопропиламина (1,06 мл, 7,54 ммоль) в THF (11 мл). Смесь перемешивали при -20°С в течение 20 мин,

- 18 038350 затем охлаждали до -70°С. Медленно добавляли раствор промежуточного соединения 2 (2 г, 6,285 ммоль) в THF (20 мл). Смесь перемешивали при 70°С в течение 1,30 ч. Медленно добавляли раствор (2R)-2-(4-фтор-2-метилфенил)-4-оксо-1-пиперидинкарбоновой кислоты 1,1-диметилэтилового сложного эфира (2,32 г, 7,54 ммоль) в THF (23 мл). Данную смесь перемешивали при -70°С в течение 2 ч, гидролизовали при -30°С с помощью ледяной воды и экстрагировали, используя EtOAc. Органический слой отделяли, промывали солевым раствором, сушили над MgSO₄, фильтровали и растворитель выпаривали. Неочищенный продукт (4,3 г) очищали флэш-хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 90 г, Cyclo/EtOAc 85/15). Очищенные фракции собирали и выпаривали досуха, получая 3,8 г промежуточного соединения 3. Остаток не был чистым на 100%, но его использовали без дополнительной очистки.

Пример А2.

а) Получение промежуточного соединения 4

Следующий способ и обработку выполняли дважды. Смесь 7-(фенилметил)-1,4-диокса-8азаспиро[4.5]декана (0,375 моль) в МеОН (500 мл) гидрогенизировали в течение 16 ч при 125°С (давление Н₂: 100 атм) с 5% Rh/Al₂O₃ (15 г) в качестве катализатора. После поглощения Н₂ (3 экв.) катализатор отфильтровывали и фильтрат выпаривали, получая 178 г (99%) промежуточного соединения 4, используемого в следующем реакционном этапе без дополнительной очистки.

b) Получение промежуточного соединения 5 о

НС1

Промежуточное соединение 4 (41,0 ммоль) в хлористоводородной кислоте (100 мл) перемешивали с обратным холодильником в течение 4 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры и выливали в лед и подкисляли 10%-ным водным раствором карбоната калия. Смесь экстрагировали с помощью EtOAc, органический слой отделяли, промывали водой, затем солевым раствором, сушили (MgSO₄) и выпаривали досуха, получая 9,3 г промежуточного соединения 5.

c) Получение промежуточных соединений 6 и 7

0^0

Промежуточное соединение 6 (2S*)

Промежуточное соединение 7 (2R*)

Раствор промежуточного соединения 5 (9,3 г, 47,6 ммоль), ди-трет-бутилбикарбоната (10,4 г, 47,6 ммоль) и триэтиламина (13,2 мл, 95,2 ммоль) в THF (100 мл) перемешивали в течение ночи при комнатной температуре, затем смесь выливали в воду и экстрагировали с помощью EtOAc. Органический слой отделяли, промывали водой, затем солевым раствором, сушили над MgSO₄, фильтровали и растворитель выпаривали досуха. Остаток (12,9 г) очищали флэш-хроматографией на силикагеле (20-45 мкм, 450 г, Cyclo/EtOAc 80/20). Очищенные фракции собирали и выпаривали досуха состояния. Остаток (9,8 г) очищали с помощью SFC на колонке Chiralpak AD-HTM (5 мкм 20x250 мм) со скоростью потока 50 мл/мин, при этом колонку выдерживали при температуре 35°С и выходном давлении 100 бар. Подвижная фаза представляет собой СО₂ 90%, МеОН 10% в изократическом режиме. Очищенные фракции собирали и выпаривали досуха, получая 4,34 г промежуточного соединения 6 и 4,47 г промежуточного соединения 7.

d) Получение промежуточных соединений 8 и 9 о Т он

Промежуточное соединение 8 (2S*), (А)-1

Промежуточное соединение 9 (2S*), (В)-2

BuLi 1,6 М в гексане (4,74 мл, 7,58 ммоль) каплями добавляли в потоке N2 к раствору диизопропиламина (1,07 мл, 7,58 ммоль) в THF (10 мл) при -20°С. Смесь перемешивали в течение 20 мин при -20°С, затем охлаждали до -78°С. Добавляли раствор 6-бром-3-[(4-хлорфенил)метил]-2-метокси-хинолина (2,29 г, 6,32 ммоль) в THF (23 мл), затем перемешивали при -78°С в течение 1 ч. Раствор промежуточного соединения 6 (2,24 г, 7,58 ммоль) в THF (22 мл) добавляли при -78°С, затем перемешивали в течение 2 ч

- 19 038350 при -78°С. Добавляли воду и EtOAc, органический слой отделяли, промывали водой, а затем солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и растворитель выпаривали досуха. Остаток (4,8 г) очищали хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 200 г, Cyclo/EtOAc 90/10). Очищенные фракции собирали и выпаривали досуха, получая соответственно 1 г фракции F1 и 0,45 г фракции F2. F1 очищали высокоэффективной жидкостной хроматографией (Irregular SiOH 15-40 мкм 300 г MERCK) с подвижной фазой (DCM 98%, EtOAc 2%), получая 0,628 г промежуточного соединения 9 и 0,21 г промежуточного соединения 8.

Пример A3. Получение промежуточных соединений 10, 11, 12 и 13

CI г

Промежуточное соединение 11 (2S),транс,(А)-1 Промежуточное соединение 10 (25),цис,(А)-2 Промежуточное соединение 12 (2S),транс,(В)-3 Промежуточное соединение 13 (25),цис,(В)-4

BuLi 1,6 М в гексане (0,0056 моль) медленно добавляли при -20°С к раствору N-(1-метилэтил)-2пропанамина (0,0056 моль) в THF (8 мл) в потоке N2. Смесь перемешивали при -20°С в течение 20 мин, затем охлаждали до -70°С. Медленно добавляли раствор 6-бром-3-[(4-хлорфенил)метил]-2-метоксихинолина (0,0047 моль) в THF (17 мл). Смесь перемешивали при -70°С в течение 1 ч 30 мин. Медленно добавляли раствор (2R)2-(4-фтор-2-метилфенил)-4-оксо-1-пиперuдинкарбоновой кислоты 1,1диметилэтилового сложного эфира (0,0052 ммоль) в THF (16 мл). Смесь перемешивали при -70°С в течение 2 ч, выливали в ледяную воду при -30°С и экстрагировали с помощью EtOAc. Органический слой отделяли, сушили (MgSO₄), фильтровали и растворитель выпаривали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (элюент: Cyclo/EtOAc 90/10; 15-40 мкм). Собирали две фракции и растворитель выпаривали, получая соответственно F1 0,8 г промежуточного соединения 11 и 0,8 г F2. F2 очищали с помощью SFC (элюент: CO₂/iPrOH/MeOH/iPA 85/7,5/7,5/0,3). Собирали три фракции и растворитель выпаривали, получая соответственно 0,111 г (3,5%) промежуточного соединения 10, 0,303 г (10%) промежуточного соединения 12 и 0,083 г (3%) промежуточного соединения 13.

Пример А4.

a) Получение промежуточного соединения 14

Раствор (2S)-4,4-диэтокси-1-[(1S)-1-фенилэтил]-2-пиперuдинметанола (1,4 г, 4,55 ммоль) в TFA (6,5 мл) и воде (0,5 мл) перемешивали при 0°С в течение 4 ч. Смесь выливали в 10%-ный водный раствор K₂CO₃ (основный рН). Органический слой отделяли, промывали водой, сушили (MgSO₄) и выпаривали досуха, получая 1 г (94%) промежуточного соединения 14.

b) Получение промежуточного соединения 15

Раствор промежуточного соединения 14 (1,0 г, 4,29 ммоль), трет-бутилдиметилсилилхлорида (0,775 г, 5,14 ммоль) и имидазола (0,35 г, 5,14 ммоль) в DMF (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 5 ч. Смесь выливали в воду, экстрагировали с помощью EtOAc, органический слой отделяли, промывали водой, затем солевым раствором, сушили (MgSO₄) и выпаривали досуха. Остаток (1,44 г) очищали флэш-хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 90 г, Cyclo 100 - Cyclo/EtOAc 90/10). Очищенные фракции собирали и выпаривали досуха, получая 1,2 г промежуточного соединения 15.

c) Получение промежуточного соединения 16

- 20 038350

BuLi 1,6 M в гексане (2,81 мл, 4,49 ммоль) каплями добавляли в потоке N₂ к раствору диизопропиламина (0,631 мл, 4,49 ммоль) в THF (6 мл) при -20°С. Смесь перемешивали в течение 20 мин при -20°С, затем охлаждали до -78°С. Добавляли раствор промежуточного соединения 2 (1,32 г, 4,14 ммоль) в THF (13 мл), затем перемешивали при -78°С в течение 1 ч. Добавляли раствор промежуточного соединения 15 (1,2 г, 3,45 ммоль) в THF (12 мл) при -78°С, затем перемешивали в течение 1 ч при -78°С. Добавляли воду и EtOAc, органический слой отделяли, промывали водой, затем солевым раствором, сушили над MgSO₄, фильтровали и растворитель выпаривали досуха, получая 1,42 г (61,8%) промежуточного соединения 16.

Пример А5.

a) Получение промежуточных соединений 17 и 18

Промежуточное соединение 17 (*R)

Промежуточное соединение 18 (*S)

Лития гидротрис(1-метилпропил)борат (1-) (1:1) (28,539 ммоль) каплями добавляли в азоте к раствору 3,4-дигидро-2-метил-4-оксо-1(2H)-пиридинкарбоновой кислоты, фенилметилового сложного эфира (28,539 ммоль) в THF при -78°С и реакционную смесь перемешивали в течение 5 ч при -78°С. Добавляли воду и EtOAc при -78°С. Органический слой отделяли, промывали водой, затем солевым раствором, сушили над MgSO₄, фильтровали и растворитель выпаривали досуха. Остаток (11,9 г) очищали колоночной хроматографией на силикагеле (SiO₂ 20-45 мкм, элюент: Cyclo/EtOAc: 75/25). Очищенные фракции собирали и растворитель выпаривали досуха с получением 4,1 г смеси энантиомеров. Чистую смесь очищали хиральной SFC (Chiralpack AD-H, элюент: СО₂/МеОН: 80/20). Очищенные фракции собирали и растворитель выпаривали досуха, получая 1,7 г (24,1%) промежуточного соединения 17 и 1,9 г (27,0%) промежуточного соединения 18.

b) Получение промежуточных соединения 19 и 20

С1

Промежуточное соединение 19 (2Е?*),цис,(А)

Промежуточное соединение 20 (2R*),транс,(А)

BuLi 1,6 М в гексане (1,6 М) каплями добавляли в потоке N₂ к раствору диизопропиламина в безводном THF (8 мл) при -20°С. Смесь перемешивали в течение 20 мин при -20°С, затем охлаждали до -78°С. Добавляли раствор 6-бром-3-[(4-хлорфенил)метил]-2-метокси-хинолина (4,718 ммоль) в THF (17 мл), затем перемешивали при -78°С в течение 2 ч. Раствор промежуточного соединения 17 (5,661 ммоль) в THF (14 мл) добавляли при -78°С. Реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч при -78°С. Добавляли воду и EtOAc при -78°С. Органический слой отделяли, промывали водой затем солевым раствором, сушили над MgSO₄, фильтровали и растворитель выпаривали досуха. Остаток (3,1 г) очищали хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 450 г, Cyclo/EtOAc: 85/15). Очищенные фракции собирали и выпаривали досуха с получением 1,45 г смеси, содержащей три изомера 56/40/4. Эту смесь разделяли на ее энантиомеры с помощью SFC на колонке Chiralpak AD-HTM (5 мкм, 20x250 мм) со скоростью потока 50 мл/мин, при этом колонку выдерживали при температуре 35°С и выходном давлении 100 бар. Подвижная фаза представляет собой СО₂ 50%, iPrOH 50% и iPA 0,3% (в метаноле) в изократическом режиме. Очищенные фракции собирали и выпаривали досуха, получая 0,72 г промежуточного соединения 20 и 0,46 г промежуточного соединения 19.

Пример А6.

a) Получение промежуточного соединения 21 о

Ди-трет-бутил бикарбонат (58,333 ммоль) порциями добавляли в атмосфере N₂ и при энергичном перемешивании к раствору 4-метоксипиридина (58,333 ммоль) в THF (60 мл). Смесь охлаждали до 0°С, каплями добавляли винилмагния бромид (70 ммоль) и смесь перемешивали в течение 3 ч при комнатной температуре. Добавляли HCl (1н) (приблизительно 150 мл) при 5°С (комнатной температуры 25°С) и смесь перемешивали в течение 10 мин. Смесь экстрагировали с помощью EtOAc. Органический слой промывали 10%-ным водным раствором NaHCO₃, затем солевым раствором, сушили над MgSO₄, фильтровали и выпаривали досуха, получая 10,7 г (82,1%) промежуточного соединения 21.

b) Получение промежуточных соединений 22 и 23

- 21 038350

Промежуточное соединение 22 (2R*)

Промежуточное соединение 23 (2S*)

Лития гидротрис(1-метилпропил)борат (1-) (1:1) (47,9 мл, 47,9 ммоль) каплями добавляли в N2 к раствору промежуточного соединения 21 (10,7 г, 47,9 ммоль) в THF (110 мл) при -78°С и смесь перемешивали при той же температуре в течение 3 ч. Добавляли воду и EtOAc, органический слой отделяли, промывали водой затем солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и растворитель выпаривали досуха. Остаток (19,5 г) очищали нормальной фазой на SiOH с зернами неправильной формы (20-45 мкм, 450 г MATREX), подвижной фазой (80% Cyclo, 20% EtOAc). Очищенные фракции собирали и растворитель выпаривали. Остаток (4,3 г) разделяли на его энантиомеры хиральной SFC на Chiralpak AD-H, 5 мкм, 250x20 мм, подвижная фаза (90% СО₂, 10% МеОН). Очищенные фракции собирали и растворитель выпаривали досуха, получая 1,9 г (17,6%) промежуточного соединения 22 и 1,5 г (13,9%) промежуточного соединения 23.

c) Получение промежуточного соединения 24

BuLi 1,6 М в гексане (5,27 мл, 8,43 ммоль) каплями добавляли в потоке N2 к раствору диизопропиламина (1,19 мл, 8,43 ммоль) в THF (12 мл) при -20°С. Смесь перемешивали в течение 20 мин при -20°С, затем охлаждали до -78°С. Добавляли раствор промежуточного соединения 2 (2,24 г, 7,03 ммоль) в THF (22 мл), затем перемешивали при -78°С в течение 1 ч. Раствор промежуточного соединения 22 (1,9 г, 8,43 ммоль) в THF (19 мл) добавляли при -78°С, затем перемешивали в течение 2 ч при -78°С. Добавляли воду и EtOAc, органический слой отделяли, промывали водой, затем солевым раствором, сушили над MgSO₄, фильтровали и растворитель выпаривали досуха. Остаток (4,5 г) очищали флэш-хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 90 г, Cyclo 100/0 - Cyclo/EtOAc 90/10, затем Cyclo/EtOAc 80/20). Очищенные фракции собирали и выпаривали досуха, получая 1,15 г промежуточного соединения 24, смесь (2R*).

d) Получение промежуточного соединения 25

Раствор промежуточного соединения 24 (3,238 ммоль), оксида осмия в бутаноле 2,5% (0,0486 ммоль) и 4-метилморфолин-4-оксида (4,857 ммоль) в THF (16 мл) и воде (4 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Раствор выливали в насыщенный раствор Na₂S₂O₃, затем экстрагировали с помощью EtOAc. Органический слой отделяли, промывали водой, сушили над MgSO₄, фильтровали и растворитель выпаривали досуха, получая 1,8 г (96,2%) промежуточного соединения 25.

e) Получение промежуточного соединения 26

Перйодат натрия (3,584 ммоль) добавляли к раствору промежуточного соединения 25 (3,117 ммоль) в THF (20 мл) и воде (10 мл) при комнатной температуре и смесь перемешивали в течение 3 ч. Добавляли воду и EtOAc. Органический слой отделяли, промывали водой и солевым раствором, сушили (MgSO₄), фильтровали и выпаривали досуха. Остаток 1,86 г (109%) очищали флэш-хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 90 г, Cyclo 100/0 - Cyclo/EtOAc 80/20). Очищенные фракции собирали и выпаривали досуха, получая 1,47 г (86,5%) промежуточного соединения 26.

f) Получение промежуточных соединений 27 и 28

- 22 038350

Промежуточное соединение 27 (2К*),цис, А-2

Промежуточное соединение 28 (2К*),цис, А-1

Боргидрид натрия (36,4 мг, 0,962 ммоль) добавляли к раствору промежуточного соединения 26 (700 мг, 1,28 ммоль) в МеОН (10 мл) при 0°С, затем перемешивали в течение одного часа при 0°С. Добавляли воду и EtOAc. Органический слой отделяли, промывали солевым раствором, сушили (MgSO₄) и выпаривали досуха. Остаток (0,66 г) очищали хиральной SFC на Chiralpak AD-Н, 5 мкм, 250x20 мм; подвижная фаза (0,3% iPA, 70% СО₂, 30% EtOH 50%, iPrOH 50%). Очищенные фракции собирали и растворитель выпаривали, получая 212 мг (30,2%) промежуточного соединения 28 и 383 мг (54,5%) промежуточного соединения 27.

Пример А7.

а) Получение промежуточного соединения 29

Этилглиоксилат (85,083 ммоль) нагревали с обратным холодильником в течение 30 мин до деполимеризации реагента, затем его выливали в N2 в суспензию молекулярного сита (4А, 25 г) в DCM (150 мл) при 0°С. Добавляли (S)-(-)-α-метилбензиламин (85,083 ммоль) при 0°С, смесь перемешивали в течение 45 мин при 0°С, затем охлаждали до -78°С. Последовательно добавляли TFA (85,083 ммоль), трифторид бора диэтилэтерат (85,083 ммоль) и триметил[(1-метилен-2-пропен-1-ил)окси]силан (85,083 ммоль) при -78°С при перемешивании с периодом 5 мин между каждым добавлением. Реакционную смесь перемешивали при -78°С, затем обеспечивали достижение -30°С и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при -30°С. Добавляли воду (40 мл) и смесь перемешивали в течение 30 мин. Добавляли дополнительное количество воды (50 мл) и обеспечивали отстаивание смеси в течение ночи. Порциями добавляли KH₂PO₄ до рН 4-5. Реакционную смесь фильтровали через прокладку целита, которую промывали с помощью DCM. Органический слой отделяли, промывали водой, сушили (MgSO₄) и выпаривали досуха.

Остаток очищали нормальной фазой на SiOH с зернами неправильной формы (20-45 мкм, 1000 г MATREX); подвижной фазой (80% Cyclo, 2 0% EtOAc). Очищенные фракции собирали и растворитель выпаривали, получая 7,7 г фракции F1 и 5,5 г фракции F2.

Фракцию F2 помещали в DCM и HCl 3н. и полученный в результате раствор перемешивали в течение 30 мин, затем выливали в 10%-ный водный раствор K₂CO₃ (основный). Органический слой отделяли, промывали водой, сушили (MgSO₄) и выпаривали досуха, получая 5,9 г промежуточного соединения 29.

b) Получение промежуточных соединений 30 и 31

О

II о

Промежуточное соединение 30 (1'S,2R)

Промежуточное соединение 31 (1'S,2S)

Смесь промежуточного соединения 29 (5,9 г, 21,43 ммоль), триэтилортоформиата (35,7 мл, 0,214 моль) и п-толуолсульфокислоты моногидрат (5,54 г, 32,14 ммоль) в EtOH (60 мл) перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь нейтрализовали бикарбонатом натрия (рН 7-8) и дважды экстрагировали с помощью DCM. Органический слой отделяли, промывали водой, сушили (MgSO₄) и выпаривали досуха. Остаток очищали флэш-хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 200 г, Cyclo 100 - Cyclo/EtOAc 90/10) с получением двух фракций, которые собирали, и растворитель выпаривали досуха, получая соответственно 4,75 г промежуточного соединения 30 и 1,5 г промежуточного соединения 31.

c) Получение промежуточного соединения 32

- 23 038350

Раствор промежуточного соединения 30 (4,75 г, 13,6 ммоль) в диэтиловом эфире (30 мл) каплями добавляли в потоке N2 к суспензии лития-алюминия гидрида (0,774 г, 20,4 ммоль) в диэтиловом эфире (20 мл) с такой скоростью, при которой раствор осторожно нагревался с обратным холодильником. Затем реакционную смесь затем перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь охлаждали до 0°С, EtOAc (50 мл), затем осторожно добавляли воду (15 мл). После перемешивания в течение 10 мин реакционную смесь фильтровали через короткую прокладку целита, промывали с помощью EtOAc. Фильтрат промывали солевым раствором, сушили (MgSO₄) и выпаривали досуха, получая 4,2 г промежуточного соединения 32.

d) Получение промежуточного соединения 33

Раствор промежуточного соединения 32 (1,9 г, 6,18 ммоль) в TFA (9 мл) и воде (1 мл) перемешивали при 0°С в течение 4 ч. Смесь выливали в 10%-ный водный раствор K₂CO₃ (основный рН). Органический слой отделяли, промывали водой, сушили (MgSO₄) и выпаривали досуха, получая 2,7 г промежуточного соединения 33.

e) Получение промежуточного соединения 34

Раствор промежуточного соединения 33 (4,5 г, 19,3 ммоль), трет-бутилдиметилсилилхлорида (3,49 г, 23,1 ммоль) и имидазола (1,58 г, 23,1 ммоль) в DMF (45 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь выливали в воду, экстрагировали с помощью EtOAc, органический слой отделяли, промывали водой, затем солевым раствором, сушили (MgSO₄) и выпаривали досуха. Остаток очищали флэш-хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 200 г, Cyclo 100/0 - Cyclo/EtOAc 90/10). Очищенные фракции собирали и выпаривали досуха, получая 5,3 г промежуточного соединения 34.

f) Получение промежуточного соединения 35

BuLi (1,6 М в гексане, 13,3 мл, 21,2 ммоль) каплями добавляли в потоке N2 к раствору диизопропиламина (2,98 мл, 21,2 ммоль) в THF (30 мл) при -20°С. Смесь перемешивали в течение 20 мин при -20°С, затем охлаждали до -78°С. Добавляли раствор промежуточного соединения 37 (6,41 г, 21,2 ммоль) в THF (65 мл), затем перемешивали при -78°С в течение 1 ч. Раствор промежуточного соединения 34 (6,15 г, 17,7 ммоль) в THF (60 мл) добавляли при -78°С, затем перемешивали в течение 1 ч при -78°С. Добавляли воду и EtOAc, органический слой отделяли, промывали водой, затем солевым раствором, сушили над MgSO₄, фильтровали и растворитель выпаривали досуха. Остаток (13,4 г) очищали флэшхроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 400 г, DCM 100/0 - DCM/EtOAc 97/3, затем 90/10). Очищенные фракции собирали и выпаривали досуха. Остаток очищали хроматографией с нормальной фазой на SiOH с зернами неправильной формы (20-45 мкм, 450 г MATREX); подвижной фазой (градиент от 95% DCM, 5% EtOAc до 90% DCM, 10% EtOAc, затем толуол/EtOAc 80/20). Очищенные фракции собирали и растворитель выпаривали, получая 1,02 г промежуточного соединения 35.

Пример А8.

a) Получение промежуточного соединения 36

Медленно каплями добавляли DMF (17,7 мл, 0,23 моль) к оксихлориду фосфора (100 мл, 1,06 моль) при 0°С. Порциями добавляли 4-хлор-N-(4-фторфенил)бензолпропанамид (42,2 г, 0,15 моль) при 0°С, а

- 24 038350 затем обеспечивали достижение смесью комнатной температуры. Смесь перемешивали в течение ночи при 85°С, а затем охлаждали до 40°С во избежание осаждения и порциями выливали в воду со льдом при поддержании температуры ниже 25°С. Смесь перемешивали в течение 1 ч, затем осадок отфильтровывали, помещали в 2-пропанол при 5°С, снова отфильтровывали и сушили при 60°С с получением желтого твердого вещества с выходом 33,76 г промежуточного соединения 36.

b) Получение промежуточного соединения 37

Метилат натрия 30% в МеОН (148 мл, 0,77 моль) добавляли к раствору промежуточного соединения 36 (33,76 г, 0,11 ммоль) в МеОН (550 мл). Смесь перемешивали при 60°С в течение ночи, затем охлаждали до комнатной температуры и растворитель выпаривали при пониженном давлении. Добавляли воду, осадок отфильтровывали и промывали с помощью iPrOH. Порошок сушили в вакууме при 60°С, получая 24,54 г промежуточного соединения 37. Фильтрат экстрагировали с помощью DCM, сушили над MgSO₄, фильтровали и концентрировали, получая 4,33 г промежуточного соединения 37.

Пример А9.

a) Получение промежуточного соединения 38

1,1'би-2-нафтол (5,48 г) и трифенилборат (5,56 г) добавляли к суспензии активированного порошка 4 А молекулярного сита (50 г) в DCM (200 мл) в потоке N2 при комнатной температуре. Смесь перемешивали в течение 2 ч, а затем охлаждали до 0°С, добавляли раствор α-метил-N-(3пиридинилметилен)бензолметанамина (aR) (4,03 г) в DCM (20 мл) и перемешивали в течение 10 мин при 0°С. Смесь охлаждали до -78°С, каплями добавляли 1-метилокси-3-(триметилсилокси)-1,3-бутадиен (4,86 мл) и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при -78°С и в течение ночи при -20°С. Добавляли воду и смесь фильтровали через короткую прокладку целита. Органический слой отделяли и добавляли HCl 3н. Эту смесь перемешивали в течение 5 мин. Водный слой подкисляли K₂CO₃ (твердое вещество) и обратно экстрагировали с помощью DCM. Органический слой отделяли и сушили (MgSO₄). Остаток (3,1 г) очищали флэш-хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 90 г) из DCM DCM/MeOH/NH₄OH: 95/5/0,1. Очищенные фракции собирали и выпаривали досуха, получая 1,6 г промежуточного соединения 38.

b) Получение промежуточного соединения 39

L-Селектрид (R) (6,9 мл, 6,9 ммоль) каплями добавляли в N₂ к раствору промежуточного соединения 38 (1,6 г, 5,75 ммоль) в THF (30 мл) при -78°С и смесь перемешивали при той же температуре в течение 2 ч. Добавляли воду и EtOAc, органический слой отделяли, промывали водой затем солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и растворитель выпаривали досуха. Остаток очищали флэшхроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 90 г) из DCM 100/0 - DCM/MeOH/NH₄OH: 95/5/0,1. Очищенные фракции собирали и выпаривали досуха, получая 2,1 г промежуточного соединения 39.

c) Получение промежуточного соединения 40

Добавляли периодинан Десс-Мартина (27,3 мл, 13,1 ммоль) к раствору промежуточного соединения 39 (1,85 г, 6,55 ммоль) в DCM (40 мл) при 0°С и смесь перемешивали при 0°С в течение 3 0 мин и при комнатной температуре в течение 1 ч. Добавляли 10%-ный водный раствор K₂CO₃, органический слой отделяли, промывали водой, затем солевым раствором, сушили над MgSO₄, фильтровали и растворитель выпаривали досуха. Остаток помещали в DCM, осадок отфильтровывали и фильтрат очищали флэшхроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 90 г) из DCM 100/0 - DCM/MeOH 99/1). Очищенные фракции собирали и выпаривали досуха, получая 0,9 г промежуточного соединения 40.

Пример А10. Получение промежуточных соединений 41, 42, 43 и 44

- 25 038350

Cl

Промежуточное соединение 41 (2R),цис,(А)

Промежуточное соединение 42 (2R),транс,(А)

Промежуточное соединение 43 (2R),транс,(В) Промежуточное соединение 44 (2R),цис,(В)

BuLi 1,6 М в гексане (26,7 ммоль; 16,7 мл) каплями добавляли в потоке N₂ к раствору диизопропиламина (26,7 ммоль; 3,8 мл) в THF (55 мл) при -20°С. Смесь перемешивали 20 мин при -20°С, затем охлаждали до -78°С. Добавляли раствор 6-бром-3-[(4-хлорфенил)метил]-2-метокси-хинолина (24,75 ммоль, 9 г) в THF (90 мл), затем перемешивали при -78°С в течение 1 ч. Добавляли раствор (2R)-4-okco-2(фенилметил)-1-пиперидинкарбоновой кислоты сложного 1,1-диметилэтилового эфира (19,04 ммоль; 5,51 г) в THF (55 мл) при -78°С, затем перемешивали в течение 1 ч при -78°С. Добавляли воду и EtOAc при -50°С. Выполняли очистку остатка (6,17 г) флэш-хроматографией на силикагеле (20-45 мкм, 450 г, Cyclo/EtOAc 90/10). Очищенные фракции собирали и выпаривали досуха, получая соответственно 3,45 г фракции промежуточного соединения 41 и 3,3 г фракции F2 (смесь).

Фракцию F2 очищали с помощью SFC на колонке Chiralpak AD-НТМ (5 мкм 20x250 мм) со скоростью потока 50 мл/мин, при этом колонку поддерживали при температуре 35°С и выходном давлении 100 бар. Подвижная фаза представляет собой СО₂ 60%, iPrOH 40% и iPA 0,3% (в метаноле) в изократическом режиме. Очищенные фракции собирали и выпаривали досуха, получая соответственно 0,60 г промежуточного соединения 42, 0,45 г промежуточного соединения 43 и 2,25 г промежуточного соединения 44.

Пример A11. Получение промежуточных соединений 45, 46, 47 и 48

CI

Промежуточное соединение 45 (2S),транс,(В)

Промежуточное соединение 46 (2S),цис,(А)

Промежуточное соединение 47 (2S),транс,(А)

Промежуточное соединение 48 (2S),цис,(В)

BuLi 1,6 М в гексане (9,19 ммоль) каплями добавляли в потоке N₂ к раствору диизопропиламина (9,19 ммоль) в THF (19 мл) при -20°С. Смесь перемешивали в течение 20 мин при -20°С, затем охлаждали до -78°С. Добавляли раствор 6-бром-3-[(4-хлорфенил)метил]-2-метокси-хинолина в THF (30 мл), затем перемешивали при -78°С в течение 1 ч. Добавляли раствор (2S)-4-оксо-2-(фенилметил)-1пиперидинкарбоновой кислоты, сложного 1,1-диметилэтилового эфира (10 ммоль) в THF (29 мл) при -78°С, затем перемешивали в течение 1,5 ч при -78°С. Добавляли воду и EtOAc при -50°С. Органический слой отделяли, промывали водой, затем солевым раствором, сушили над MgSO₄, фильтровали и растворитель выпаривали досуха. Остаток (6,1 г) очищали посредством колоночной хроматографии на силикагеле (SiO₂ 15-40 мкм, элюент: DCM:100). Очищенные фракции собирали и растворитель выпаривали досуха, получая соответственно 1,0 г (18%) промежуточного соединения 46 и 1,1 г фракции F2 (смесь 3 изомеров).

F2 очищали с помощью SFC (Chiralpack AD-H, CO₂/MeOH/iPrOH/IPA: 70/15/15/0,3). Очищенные фракции собирали и растворитель выпаривали досуха, получая соответственно 0,11 г (2%) промежуточного соединения 45, 0,03 г промежуточного соединения 46, 0,07 г (1,3%) промежуточного соединения 47 и 0,55 г (10%) промежуточного соединения 48.

Пример А12. Получение промежуточных соединений 49, 50 и 51

Промежуточное соединение 49 (2К),цис,(А)

Промежуточное соединение 50 (2R),qnc,(B)

Промежуточное соединение 51, смесь изомеров

- 26 038350

Каплями добавляли BuLi 1,6 М в гексане (9,1 ммоль) в потоке N2 к раствору диизопропиламина (9,1 ммоль) в THF (20 мл) при -20°С. Смесь перемешивали в течение 20 мин при -20°С, затем охлаждали до -78°С. Добавляли раствор 6-бром-3-[(3-хлорфенил)метил]-2-метокси-хинолина (8,27 ммоль) в THF (30 мл), затем перемешивали при -78°С в течение 1 ч. Добавляли раствор (2R)-4-оксо-2-(фенилметил)-1пиперидинкарбоновой кислоты сложного 1,1-диметилэтилового эфира (8,27 ммоль) в THF (25 мл) при -78°С, затем перемешивали в течение 1 ч при -78°С. Добавляли воду и EtOAc при -50°С. Органический слой отделяли, промывали водой, затем солевым раствором, сушили над MgSO₄, фильтровали и растворитель выпаривали досуха. Остаток очищали посредством колоночной хроматографии на силикагеле (Merck 200 г, SiO₂ 15-40 мкм, элюент: Cyclo/EtOAc: 85/15). Очищенные фракции собирали и растворитель выпаривали досуха. Остаток (3,15 г, 59%) очищали посредством колоночной хроматографии на силикагеле (SiO₂ 15-40 мкм, элюент: DCM 100). Очищенные фракции собирали и растворитель выпаривали досуха, получая соответственно 1,1 г (20%) промежуточного соединения 49, 0,5 г (9%) промежуточного соединения 51 (смесь изомеров) и 1,0 г (19%) промежуточного соединения 50.

Пример А13. Получение промежуточных соединений 52, 53, 54 и 55

Промежуточное соединение 52 (2R),транс,(В)-3

Промежуточное соединение 53 (2R),транс,(А)-1

Промежуточное соединение 54 (2R),l(hc,(A)-2

Промежуточное соединение 55 (2R),цис,(В)-4

Медленно добавляли BuLi 1,6 М в гексане (7,07 мл, 11,31 ммоль) при -20°С в потоке N2 к раствору диизопропиламина (1,59 мл, 11,31 ммоль) в THF (16 мл). Смесь перемешивали при -20°С в течение 20 мин, а затем охлаждали при -70°С. Медленно добавляли раствор промежуточного соединения 2 (3 г, 9,43 ммоль) в THF (30 мл). Смесь перемешивали при 70°С в течение 1,5 ч. Медленно добавляли раствор (2R)4-оксо-2-(фенилметил)-1-пиперидинкарбоновой кислоты сложного 1,1-диметилэтилового эфира (3,27 г, 11,31 ммоль) в THF (33 мл). Данную смесь перемешивали при -70°С в течение 2 ч, гидролизовали при -30°С с помощью ледяной воды и экстрагировали, используя EtOAc. Органический слой отделяли, сушили над MgSO4, фильтровали и растворитель выпаривали. Остаток (6,21 г) очищали высокоэффективной жидкостной хроматографией на SiOH с зернами неправильной формы (20-45 мкм, 450 г MATREX); подвижной фазой (цикло 90%, EtOAc 10%). Собирали две фракции и растворитель выпаривали, получая соответственно 1300 мг фракции F1 и 1300 мг фракции F2.

F1 очищали высокоэффективной жидкостной хроматографией (Chiralpak IC 5 мкм 250x20 мм); подвижной фазой (iPA 0,3%; СО₂ 60%, iPrOH 40%). Собирали две фракции и растворитель выпаривали, получая 150 мг промежуточного соединения 53 и 1020 мг промежуточного соединения 54.

F2 очищали высокоэффективной жидкостной хроматографией (Chiralpak AD-H 5 мкм, 250x20 мм); подвижной фазой (iPA 0,3%; СО₂ 70%, iPrOH 30%), получая 120 мг промежуточного соединения 52 и 800 мг промежуточного соединения 55.

Пример А14.

a) Получение промежуточного соединения 56

Каплями добавляли BuLi 1,6 М в гексане (66,2 ммоль, 41,3 мл) в N2 к раствору 6-бром-3-[(4хлорфенил)метил]-2-метокси-хинолина (55,1 ммоль; 20 г) в THF (135 мл) при -70°С, затем смесь перемешивали в течение 1,5 ч. Добавляли раствор метилдисульфида (137,8 ммоль; 12,4 мл) в THF (15 мл) при -78°С, затем обеспечивали достижение смесью комнатной температуры и перемешивали в течение 2 ч. К смеси добавляли воду и EtOAc. Органический слой экстрагировали, промывали водой, затем солевым раствором, сушили над MgSO₄ и растворитель выпаривали. Остаток кристаллизовали при отстаивании и помещали в DIPE, отфильтровывали и сушили (вакуум, 60°С) , получая 11,23 г промежуточного соединения 56. Фильтрат выпаривали и остаток очищали флэш-хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 450 г, DCM/цикло 30/70). Очищенные фракции собирали и выпаривали досуха, получая 5,45 г промежуточного соединения 56.

b) Получение промежуточных соединений 57 и 58

- 27 038350

Cl 1

Промежуточное соединение 57 (2R),₄hc,(B)-3

Промежуточное соединение 58 (2К),цис,(А)-1

Дважды осуществляли следующие реакции.

BuLi 1,6 М в гексане (23 мл, 8,37 ммоль) медленно добавляли при -20°С в потоке N₂ к раствору диизопропиламина (1,17 мл, 8,37 ммоль) в THF (12 мл). Смесь перемешивали при -20°С в течение 20 мин, затем охлаждали при -70°С. Медленно добавляли раствор промежуточного соединения 56 (2,3 г, 6,97 ммоль) в THF (23 мл). Смесь перемешивали при 70°С в течение 1,5 ч. Медленно добавляли раствор (2R)4-оксо-2-(фенилметил)-1-пиперидинкарбоновой кислоты сложного 1,1-диметилэтилового эфира (3,03 г, 10,46 ммоль) в THF (30 мл). Данную смесь перемешивали при -70°С в течение 2 ч, гидролизовали при -30°С с помощью ледяной воды и экстрагировали, используя EtOAc. Органический слой отделяли, промывали солевым раствором, сушили над MgSO₄, фильтровали и растворитель выпаривали.

Остаток очищали хроматографией с нормальной фазой на SiOH с зернами неправильной формы (20-45 мкм, 450 г MATREX); подвижной фазой (90% цикло, 10% EtOAc), получая соответственно фракцию F1, содержащую 0,73 г промежуточного соединения 58, фракцию F2, содержащую смесь изомеров, и фракцию F3, содержащую исходный материал (2R)-4-оксо-2-(фенилметил)-1-пиперидинкарбоновой кислоты сложный 1,1-диметилэтиловый эфир.

Фракцию F2 очищали хиральной SFC на Chiralpak AD-H (5 мкм 250x20 мм); подвижной фазой (0,3% iPA, 65% СО₂, 35% EtOH), получая соответственно фракцию F2/1, содержащую 280 мг (2R), транс, (А)-2 изомера, фракцию F2/2, содержащую 980 мг (11,4%) промежуточного соединения 57, и фракцию F2/3, содержащую 370 мг (2R), транс, (В)-4 изомера.

c) Получение промежуточного соединения 59

CI

(2Р),цис,(В)

Смесь промежуточного соединения 57 (0,98 г, 1,58 ммоль) и 3-хлорпероксибензойной кислоты (1,17 г, 4,75 ммоль) в DCM (20 мл) перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Смесь выливали в 10%-ный водный раствор K₂CO₃ и экстрагировали с помощью DCM. Органический слой отделяли, промывали водой, сушили над MgSO₄, фильтровали и растворитель выпаривали досуха, получая 1,02 г (99,0%) промежуточного соединения 59.

Пример А15. Получение промежуточных соединений 60, 61 и 62

CI 1

Промежуточное соединение 60 (2R),₄hc,(B)

Промежуточное соединение 61 (2R),цис,(А) Промежуточное соединение 62 (2R),транс,(А)

Медленно добавляли BuLi 1,6 М в гексане (5,17 мл, 8,27 ммоль) при -20°С в потоке N₂ к раствору диизопропиламина (1,16 мл, 8,27 ммоль) в THF (12 мл). Смесь перемешивали при -20°С в течение 20 мин, затем охлаждали до -70°С. Медленно добавляли раствор промежуточного соединения 66 (2,5 г, 6,89 ммоль) в THF (25 мл). Смесь перемешивали при -70°С в течение 1,5 ч. Медленно добавляли раствор 6бром-3-[(4-хлорфенил)метил]-2-метокси-хинолина (2,47 г, 7,58 ммоль) в THF (25 мл). Данную смесь перемешивали при -70°С в течение 2 ч, гидролизовали при -30°С с помощью ледяной воды и экстрагировали, используя EtOAc. Органический слой отделяли, сушили над MgSO₄, фильтровали и растворитель выпаривали. Остаток (4,15 г) очищали посредством колоночной хроматографии на силикагеле (15-40 мкм, 450 г), Cyclo/EtOAc, 80/20. Очищенные фракции собирали и растворитель выпаривали досуха, получая соответственно 1,18 г фракции F1 и 1,04 г промежуточного соединения 62.

- 28 038350

F1 очищали с помощью SFC (элюент: MeOH/CO2/iPA, 30/70/0,3, Chiralpack AD-H). Очищенные фракции собирали и растворитель выпаривали досуха, получая соответственно 100 мг промежуточного соединения 61 и 730 мг промежуточного соединения 60.

Пример А16.

a) Получение промежуточных соединений 63 и 64

Промежуточное соединение 63 (R)

Промежуточное соединение 64 (S)

Смесь 7-[(3,4-дифторфенил)метил]-1,4-диокса-8-азаспиро[4.5]декан (0,657 моль) в МеОН (200 мл) концентрировали при 60°С и полученный в результате остаток (177 г) разделяли на энантиомеры хиральным разделением (Chiralpak AD, элюент: гептан/EtOH 30/70). Две фракции продукта собирали и растворители выпаривали, получая соответственно 80,0 г (90%) промежуточного соединения 63 (R) и 84 г (95%) промежуточного соединения 64 (S).

b) Получение промежуточного соединения 65

Промежуточное соединение 63 (11 ммоль) в HCl 6 н (30 мл) перемешивали при 75°С в течение ночи. Затем смесь перемешивали при комнатной температуре и выливали в стеклянную емкость. Раствор подкисляли NaOH (30%) (порциями). Смесь экстрагировали с помощью DCM, сушили с MgSO₄ и концентрировали при пониженном давлении, получая 3,6 г (96%) промежуточного соединения 65.

c) Получение промежуточного соединения 66

К раствору промежуточного соединения 65 (3,7 г, 16,43 ммоль) в THF (164 мл) добавляли триэтиламин (2,29 мл, 16,43 ммоль), затем ди-трет-бутилбикарбонат (3,59 г, 16,43 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. К смеси добавляли воду и EtOAc. органический слой промывали водой, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении, получая 5,3 г (99,2%) промежуточного соединения 66.

Пример А17. Получение промежуточных соединений 67 и 68

CI

Br,

I?

О

II о

Промежуточное соединение 67 (2S),цис,(А)

Промежуточное соединение 68 (2S),цис,(В)

Медленно добавляли BuLi 1,6 М в гексане (5,17 мл, 8,27 ммоль) при -20°С в потоке N2 к раствору диизопропиламина (1,16 мл, 8,27 ммоль) в THF (12 мл). Смесь перемешивали при -20°С в течение 20 мин, а затем охлаждали при -70°С. Медленно добавляли раствор 6-бром-3-[(4-хлорфенил)метил]-2метоксихинолина (2,5 г, 6,89 ммоль) в THF (25 мл). Смесь перемешивали при -70°С в течение 1,5 ч. Медленно добавляли раствор промежуточного соединения 70 (S) (2,47 г, 7,58 ммоль) в THF (25 мл). Данную смесь перемешивали при -70°С в течение 2 ч, гидролизовали при -30°С с помощью ледяной воды и экстрагировали с помощью EtOAc. Органический слой отделяли, сушили над MgSO₄, фильтровали и растворитель выпаривали. Остаток (4,6 г) очищали посредством колоночной хроматографии на силикагеле (элюент: Cyclo/EtOAc, 95/5, 15-40 мкм, 450 г). Очищенные фракции собирали и растворитель выпаривали досуха, получая соответственно 310 мг промежуточного соединения 67 и 720 мг промежуточного соединения 68.

Пример А18.

a) Получение промежуточного соединения 69

- 29 038350

Промежуточное соединение 64 (11 ммоль) в HCl 6 н (30 мл) перемешивали при 75°С в течение ночи. Затем смесь перемешивали при комнатной температуре и выливали в стеклянную емкость. Раствор подкисляли NaOH (30%) (порциями). Смесь экстрагировали с помощью DCM, сушили с MgSO₄ и концентрировали при пониженном давлении, получая 4,32 г (99%) промежуточного соединения 69.

b) Получение промежуточного соединения 70

К раствору промежуточного соединения 69 (4,32 г, 19,18 ммоль) в THF (192 мл) добавляли триэтиламин (2,67 мл, 19,18 ммоль), затем ди-трет-бутилбикарбонат (4,19 г, 19,18 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. К смеси добавляли воду и EtOAc. Органический слой промывали водой, сушили над MgSO₄, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении, получая 6,1 г (97,8%) промежуточного соединения 70.

Пример А19. Получение промежуточных соединений 71 и 72 CI

Вг

Промежуточное соединение 71 (3R*),(A)

Промежуточное соединение 72, смесь 3 изомеров

Каплями добавляли BuLi 1,6 M в гексане (0,829 ммоль) в потоке N2 к раствору диизопропиламина (0,829 ммоль) в THF (1 мл) при -20°С. Смесь перемешивали в течение 20 мин при -20°С, а затем охлаждали до -78°С. Добавляли раствор 6-бром-3-[(4-хлорфенил)метил]-2-метоксихинолина (0,691 ммоль) в THF (2 мл), затем перемешивали при -78°С в течение 2 ч. Добавляли раствор (3R)-4-okco-3(фенилметил)-1-пиперидинкарбоновой кислоты сложного 1,1-диметилэтилового эфира (0,691 ммоль) в THF (2 мл) при -78°С, затем перемешивали в течение 2 ч при -78°С. Добавляли воду и EtOAc при -78°С. Органический слой отделяли, промывали водой, затем солевым раствором, сушили над MgSO₄, фильтровали и растворитель выпаривали досуха. Остаток (0,45 г) очищали посредством колоночной хроматографии на силикагеле (Kromasil 10 мкм, элюент: Cyclo/EtOAc: 90/10). Очищенные фракции собирали и растворитель выпаривали досуха, получая соответственно 43 мг (9,5%) промежуточного соединения 71 и 80 мг (17,8%) промежуточного соединения 72 [смесь 3 изомеров].

Пример А20.

a) Получение промежуточного соединения 73

2-(4-Фтор-2-метилфенил)-3,4-дигидро-4-оксо-1(2H)пиридинкарбоновой кислоты сложный 1,1диметилэтиловый эфир (21 г, 68,774 ммоль) в EtOAc (400 мл) гидрогенизировали при давлении Н₂ 1 бар с Pd 10% (3 г) в качестве катализатора. Катализатор фильтровали через прокладку целита, а затем промывали с EtOAc. Фильтрат выпаривали. Остаток (22,9 г) очищали флэш-хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 400 г, Cyclo/EtOAc: 90/10-85/15). Очищенные фракции собирали и растворитель выпаривали досуха, получая 17,4 г (82%) промежуточного соединения 73.

b) Получение промежуточных соединений 73 и 74 и 75

Промежуточное соединение 74 (R)

Промежуточное соединение 75 (S)

Промежуточное соединение 73 (84 г, 273,291 ммоль) очищали хроматографией на Chiralpak ADTM (20 мкм, 450 г) со скоростью потока 80 мл/мин. Подвижная фаза представляет собой гептен/изопропанол 98,5/1,5. Очищенные фракции собирали и выпаривали досуха, получая 41 г промежуточного соединения 74 и 41,1 г промежуточного соединения 75.

с) Получение промежуточных соединений 76, 77, 78 и 79

- 30 038350

Промежуточное соединение 76 (2S),транс,(А)

Промежуточное соединение 77 (2S),транс,(В)

Промежуточное соединение 78 (2S),цис,(А)

Промежуточное соединение 79 (2S),цис,(В)

Медленно добавляли BuLi 1,6 М в гексане (13,6 мл, 21 ,7 ммоль) при -20°С в потоке N₂ к раствору диизопропиламина (3,05 мл, 21,7 ммоль) в THF (31 мл). Смесь перемешивали при -20°С в течение 20 мин, а затем охлаждали при -70°С. Медленно добавляли раствор промежуточного соединения 81 (5,5 г, 16,67 ммоль) в THF (55 мл). Смесь перемешивали при -70°С в течение 1,5 ч. Медленно добавляли раствор промежуточного соединения 75 (6,15 г, 20,01 ммоль) в THF (61 мл). Данную смесь перемешивали при -70°С в течение 2 ч, гидролизовали при -30°С с помощью ледяной воды и экстрагировали, используя EtOAc. Органический слой отделяли, сушили над MgSO4, фильтровали и растворитель выпаривали. Остаток очищали хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 450 г, Cyclo/EtOAc: 80/20). Желаемые фракции собирали и выпаривали досуха, получая 2,15 г промежуточного соединения 76 и 1,73 г фракции F3.

Выполняли очистку фракции F3 с помощью SFC на колонке Chiralpak AD-H (5 мкм, 21x250 мм) со скоростью потока 50 мл/мин, при этом колонку держали при температуре 35°С и выходном давлении 100 бар. Подвижной фазой служила CO₂ 85%, iPrOH 15% и iPA 0,3% (в метаноле) в изократическом режиме. Желаемые чистые фракции собирали и выпаривали досуха, получая соответственно 355 мг промежуточного соединения 78, 411 мг промежуточного соединения 77 и 250 мг промежуточного соединения 79.

d) Получение промежуточного соединения 80

Раствор промежуточного соединения 79 (0,25 г, 0,39 ммоль) и 3-хлорпербензойной кислоты (0,29 г, 1,18 ммоль) в DCM (2,5 мл) перемешивали в течение ночи. Смесь выливали в 10%-ный водный раствор K₂CO₃ и экстрагировали с помощью DCM. Органический слой отделяли, промывали водой, сушили над MgSO4, фильтровали и растворитель выпаривали досуха, получая 255 мг (97,1%) промежуточного соединения 80.

Пример А21. Получение промежуточного соединения 81

Каплями добавляли BuLi 1,6 М в гексане (20,7 мл, 33,09 ммоль) к раствору 6-бром-3-[(3хлорфенил)метил]-2-метоксихинолина (10 г, 27,57 ммоль) в THF (100 мл) при -70°С в потоке N₂ и смесь перемешивали в течение 1,5 ч. Затем медленно добавляли раствор метилдисульфида (6,21 мл, 68,94 ммоль) в THF (30 мл) при -70°С, обеспечивали достижение смесью комнатной температуры и перемешивали в течение 2 ч. Добавляли воду и EtOAc при комнатной температуре. Органический слой отделяли, промывали водой, затем солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и растворитель выпаривали досуха. Остаток кристаллизовали из DIPE и осадок отфильтровывали, получая 6,4 г (70%) промежуточного соединения 81.

Пример А22. Получение промежуточных соединений 82, 83 и 84

Br

Промежуточное соединение 82 (2R),транс,(А)

Промежуточное соединение 83 (2R),транс,(В)

Промежуточное соединение 84 (2R),₄hc,(A)

Медленно добавляли BuLi 1,6 М в гексане (6,9 мл, 11,09 ммоль) при -20°С в потоке N₂ к раствору

- 31 038350 диизопропиламина (1,6 мл, 11,1 ммоль) в THF (16 мл). Смесь перемешивали при -20°С в течение 20 мин, а затем охлаждали до -70°С. Медленно добавляли раствор 6-бром-2-метокси-3-(фенилметил)хинолина (2,8 г, 8,53 ммоль) в THF (28 мл). Смесь перемешивали при -70°С в течение 1,5 ч. Медленно добавляли раствор (2R)-2-(4-фтор-2-метилфенил)-4-оксо-1-пиперидинкарбоновой кислоты сложного 1,1диметилэтилового эфира (3,15 г, 10,24 ммоль) в THF (31 мл). Данную смесь перемешивали при -70°С в течение 2 ч, гидролизовали при -30°С с помощью ледяной воды и экстрагировали, используя EtOAc. Органический слой отделяли, сушили над MgSO₄, фильтровали и растворитель выпаривали. Остаток (6,39 г) очищали хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 450 г, Cyclo/EtOAc 90/10). Очищенные фракции собирали и выпаривали досуха, получая соответственно фракции F1 (2,64 г), F2 (0,125 г) и F3 (0,174 г). Выполняли очистку F1 с помощью SFC на колонке Chiralpak AD-HTM (5 мкм, 20x250 мм) со скоростью потока 50 мл/мин, при этом колонку держали при температуре 35°С и выходном давлении 100 бар. Подвижной фазой служила СО₂ 75%, этанол 25% и iPA 0,3% (в метаноле) в изократическом режиме. Очищенные фракции собирали и выпаривали досуха, получая соответственно 1,393 г промежуточного соединения 82, 514 мг промежуточного соединения 83 и 192 мг промежуточного соединения 84.

Пример А23.

a) Получение промежуточного соединения 86

BuLi 1,6 М в гексане (13,6 мл, 21,7 ммоль) медленно добавляли при -20°С в потоке N2 к раствору диизопропиламина (3,05 мл, 21 ммоль) в THF (31 мл). Смесь перемешивали при -20°С в течение 20 мин и охлаждали до -70°С. Медленно добавляли раствор промежуточного соединения 81 (5,5 г, 16,7 ммоль) в THF (55 мл). Смесь перемешивали при -70°С в течение 1,5 ч. Медленно добавляли раствор промежуточного соединения 74 (6,15 г, 20 ммоль) в THF (61 мл). Данную смесь перемешивали при -70°С в течение 2 ч, гидролизовали при -30°С с помощью ледяной воды и экстрагировали, используя EtOAc. Органический слой отделяли, сушили над MgSO₄, фильтровали и растворитель выпаривали. Остаток (12 г) очищали хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 450 г, Cyclo/EtOAc 98/2). Очищенные фракции собирали и выпаривали досуха, получая 7,87 г (74%) промежуточного соединения 86.

b) Получение промежуточного соединения 87

Раствор промежуточного соединения 86 (5,8 г, 9,1 ммоль) и 3-хлор-бензолкарбопероксовую кислоты (6,73 г, 27,31 ммоль) в DCM (58 мл) перемешивали в течение ночи. Смесь выливали в 10%-ный водный раствор K₂CO₃ и экстрагировали с помощью DCM. Органический слой отделяли, промывали водой, сушили над MgSO4, фильтровали и растворитель выпаривали досуха с получением 6,07 г промежуточного соединения 87.

Пример А24.

a) Получение промежуточного соединения 88

NaH 60% в масле (0,62 г, 15,48 ммоль) порциями добавляли к раствору 1,3-(4-оксопиперидин)дикарбоновой кислоты сложного 1-(1,1-диметилэтил)-3-этилового эфира (2 г, 7,37 ммоль), суспендированного в THF (20 мл), охлаждали при 0°С. Смесь перемешивали в течение 30 мин при 0°С, а затем обеспечивали нагревание до комнатной температуры и перемешивали еще 1 ч. Добавляли 3фторбензилбромид (1,36 мл, 11,06 ммоль) и полученный в результате раствор перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Затем добавляли воду и EtOAc. Органический слой экстрагировали, промывали солевым раствором, сушили над MgSO₄, фильтровали и концентрировали. Остаток (2,78 г) очищали нормальной фазой на SiOH с зернами неправильной формы (15-40 мкм, 300 г); подвижной фазой (85% гептан, 15% EtOAc). Очищенные фракции собирали и растворитель выпаривали, получая 1 г

- 32 038350 (35,7%) промежуточного соединения 88.

b) Получение промежуточного соединения 89

NH

Раствор промежуточного соединения 88 (1 г, 2,64 ммоль) в HCl 6н (8 мл) и МеОН (1,5 мл) нагревали до температуры флегмы при перемешивании в течение 20 ч. После охлаждения до комнатной температуры смесь подкисляли до рН 10 с помощью NaOH 6н (2,5 мл) и экстрагировали с помощью DCM (3 раза). Объединенные органические слои сушили над MgSO₄, фильтровали и концентрировали, к остатку добавляли HCl 6н (8 мл) и МеОН (1,5 мл), полученную в результате смесь затем нагревали до температуры флегмы и перемешивали в течение 20 ч. После охлаждения до комнатной температуры смесь подкисляли до рН 10 с помощью NaOH 6н (2,5 мл) и экстрагировали с помощью DCM (3 раза). Объединенные органические слои сушили над MgSO₄, фильтровали и концентрировали, получая 260 мг (47,6%) промежуточного соединения 89.

c) Получение промежуточных соединений 90 и 91 о

Ν ί

Промежуточное соединение 90 (3R*)

Промежуточное соединение 91 (3S*)

Раствор промежуточного соединения 89 (10,4 г, 42,7 ммоль), ди-трет-бутилбикарбоната (9,31 г, 42,7 ммоль) и триэтиламина (11,9 мл, 85,3 ммоль) в THF (100 мл) перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Смесь выливали в воду и экстрагировали с помощью EtOAc. Органический слой отделяли, промывали водой, затем солевым раствором, сушили над MgSO₄, фильтровали и растворитель выпаривали досуха. Остаток (13,1 г) очищали флэш-хроматографией на силикагеле (20-45 мкм, 450 г, Cyclo/EtOAc 80/20). Очищенные фракции собирали и выпаривали досуха. Остаток (12 г) очищали с помощью SFC на колонке Chiralpak AD-HTM (5 мкм 20x250 мм) со скоростью потока 50 мл/мин, колонку выдерживали при температуре 35°С и выходном давлении 100 бар. Подвижной фазой служил СО₂ 95%, метанол 5% и изопропиламин 0,3% (в метаноле) в изократическом режиме. Очищенные фракции собирали и выпаривали досуха, получая 4,8 г (35,6%) промежуточного соединения 90 и 5,2 г (39,6%) промежуточного соединения 91.

d) Получение промежуточных соединений 92 и 93

Cl F

Промежуточное соединение 92 (3R*),(B)-2

Промежуточное соединение 93 (3R*),(A)-1

BuLi 1,6 М в гексане (4,14 мл, 6,62 ммоль) каплями добавляли в потоке N2 к раствору диизопропиламина (0,93 мл, 6,62 ммоль) в THF (10 мл) при -20°С. Смесь перемешивали 20 мин при -20°С, затем охлаждали до -78°С. Добавляли раствор 6-бром-3-[(4-хлорфенил)метил]-2-метоксихинолина (2 г, 5,52 ммоль) в THF (20 мл), затем перемешивали при -78°С в течение 1 ч. Добавляли раствор промежуточного соединения 90 (2 г, 6,62 ммоль) в THF (20 мл) при -78°С, затем перемешивали в течение 2 ч при -78°С. Добавляли воду и EtOAc. Органический слой отделяли, промывали водой, затем солевым раствором, сушили над MgSO₄, фильтровали и растворитель выпаривали досуха.

Остаток (4,2 г) очищали высокоэффективной жидкостной хроматографией (SiOH с зернами неправильной формы (20-45 мкм, 450 г, MATREX); подвижной фазой (DCM 80%/цикло 20%). Собирали две фракции и растворитель выпаривали, получа соответственно 950 мг промежуточного соединения 93 и 1500 мг промежуточного соединения 92.

Пример А25.

a) Получение промежуточных соединений 94 и 95

Промежуточное соединение 94 (3S*),(A)-1

Промежуточное соединение 95 (3S*),(B)-2

BuLi 1,6 M в гексане (4,14 мл, 6,62 ммоль) каплями добавляли в потоке N2 к раствору диизопропи- 33 038350 ламина (0,93 мл, 6,62 ммоль) в THF (10 мл) при -20°С. Смесь перемешивали в течение 20 мин при -20°С, затем охлаждали до -78°С. Добавляли раствор 6-бром-3-[(4-хлорфенил)метил]-2-метоксихинолина (2 г, 5,52 ммоль) в THF (20 мл), затем перемешивали при -78°С в течение 1 ч. Раствор промежуточного соединения 91 (2 г, 6,62 ммоль) в THF (20 мл) добавляли при -78°С, затем перемешивали в течение 1 ч при -78°С. Добавляли воду и EtOAc. Органический слой отделяли, промывали водой, затем солевым раствором, сушили над MgSO₄, фильтровали и растворитель выпаривали досуха. Остаток (4,3 г) очищали высокоэффективной жидкостной хроматографией на SiOH с зернами неправильной формы (20-45 мкм, 450 г MATREX); подвижной фазой (DCM 80%/цикло 20%). Собирали две фракции и растворитель выпаривали, получая соответственно 820 мг промежуточного соединения 94 и 1,6 г промежуточного соединения 95.

Пример А26.

a) Получение промежуточного соединения 96

BuLi 1,3 М в Cyclo (70 мл, 91 ммоль) каплями добавляли к раствору 4,4-(этилендиокси)-1-третбутоксикарбонилпиперидина (17 г, 70 ммолей) и N, N, N',N-тетраметилэтилендиамина (10,5 мл, 100 ммоль) в диэтиловом эфире (110 мл) при -70°С и смесь перемешивали при -70°С в потоке N2 в течение 3 ч. Добавляли раствор 2,4-дифторбензальдегида (8,4 мл, 77 ммолей) в диэтиловом эфире (15 мл) с такой скоростью, что сохранялась температура -60°С. Смесь перемешивали в течение 3 ч при -70°С. Добавляли 10%-ный водный раствор NH₄Cl (130 мл), затем добавляли EtOAc и органический слой отделяли, сушили (MgSO₄) и концентрировали. Неочищенный продукт очищали хроматографией на силикагеле с использованием Cyclo/EtOAc 70/30 в качестве элюента. Очищенные фракции собирали и растворитель выпаривали, получая 9,3 г промежуточного соединения 96.

b) Получение промежуточного соединения 97

Смесь промежуточного соединения 96 (6,7 г, 17,4 ммоль) и третбутоксид калия (0,2 г, 1,74 ммоль) в iPrOH (20 мл) перемешивали и нагревали с обратным холодильником в течение 2 ч и затем охлаждали до комнатной температуры. Добавляли воду и остаток экстрагировали с помощью DCM, декантировали, сушили над MgSO₄ и концентрировали. Неочищенный продукт очищали хроматографией на силикагеле с использованием Cyclo/EtOAc 70/30 в качестве элюента. Очищенные фракции собирали и растворитель выпаривали, получая 4,4 г (81,3%) промежуточного соединения 97.

c) Получение промежуточного соединения 98

Раствор промежуточного соединения 97 (7,5 г, 24,1 ммоль) в МеОН (150 мл) гидрогенизировали (3 бар) при 50°С с Pd/C 10% (2 г) в качестве катализатора в течение 12 ч. Катализатор отфильтровывали и фильтрат выпаривали. Неочищенный продукт очищали хроматографией на силикагеле с использованием DCM/MeOH/NH₄OH 97/3/0,1 в качестве элюента. Очищенные фракции собирали и растворитель выпаривали, получая 1,5 г (23,1%) промежуточного соединения 98.

d) Получение промежуточного соединения 99

Промежуточное соединение 98 (4,2 г, 15,6 ммоль) в HCl 6 н (80 мл) перемешивали с обратным холодильником в течение 12 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры и выливали на лед, подкисляли и насыщали раствором K₂CO₃. Смесь экстрагировали с помощью EtOAc, органический слой отделяли, промывали водой, затем солевым раствором, сушили (MgSO4) и выпаривали досуха, получая 3,5 г (99,6%) промежуточного соединения 99.

e) Получение промежуточных соединений 100 и 101 о

Промежуточное соединение 100 (R)*

Промежуточное соединение 101 (S)*

Раствор промежуточного соединения 99 (3,5 г, 15,5 ммоль), ди-трет-бутил бикарбоната (3,4 г, 15,5

- 34 038350 ммоль) и триэтиламина (2,2 мл, 15,5 ммоль) в THF (50 мл) перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Смесь выливали в воду и экстрагировали с помощью EtOAc. Органический слой отделяли, промывали водой, затем солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и растворитель выпаривали досуха. Остаток очищали высокоэффективной жидкостной хроматографией (Chiralpak AD-H, 5 мкм, 250x20 мм); подвижной фазой (iPA 0%; СО₂ 90%, МеОН 10%). Собирали две фракции и растворитель выпаривали, получая 2900 мг промежуточного соединения 100 и 2700 мг промежуточного соединения 101.

f) Получение промежуточного соединения 102 и 103

Промежуточное соединение 102 (23*),цис,(А)-1

Промежуточное соединение 103 (25*),цис,(В)-2

BuLi 1,6 M в гексане (6,1 ммоль; 3,85 мл) каплями добавляли в потоке N2 к раствору диизопропиламина (6,1 ммоль; 0,90 мл) в THF (15 мл) при -20°С. Смесь перемешивали в течение 20 мин при -20°С, затем охлаждали до -78°С. Добавляли раствор промежуточного соединения 81 (5,12 ммоль, 1,7 г) в THF (30 мл), затем перемешивали при -78°С в течение 1 ч. Добавляли раствор промежуточного соединения 101 (6,14 ммоль; 2 г) в THF (30 мл) при -78°С, затем перемешивали в течение 1 ч при -78°С. Добавляли воду и EtOAc при -70°С. Органический слой отделяли, промывали водой и солевым раствором, сушили (MgSO₄) и выпаривали досуха. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией на силикагеле (Cyclo/EtOAc: 90/10). Очищенную смесь собирали и выпаривали досуха. Остаток очищали высокоэффективной жидкостной хроматографией (Chiracel OD-H, 5 мкм, 250x20 мм); подвижной фазой (iPA 0%; СО₂ 70%, МеОН 30%), получая соответственно 95 мг фракции F1, содержащей (2S*), транс, (А)-3 и (2S*), транс, (В)-4 изомеры, фракции F2, содержащей 500 мг промежуточного соединения 102, и фракции F3, содержащей 730 мг промежуточного соединения 103.

Пример А27. Получение промежуточных соединений 104, 105, 106 и 107

CI I

F

Промежуточное соединение 104 (2R),транс,(А)1

Промежуточное соединение 105 (2R*),транс,(В)-2

Промежуточное соединение 106 (2R*),цис,(А)-3

Промежуточное соединение 107 (2R*),l(hc,(B)-4

BuLi 1,6 M в гексане (6,1 ммоль; 3,85 мл) каплями добавляли в потоке N2 к раствору диизопропиламина (6,1 ммоль; 0,90 мл) в THF (15 мл) при -20°С. Смесь перемешивали 20 мин при -20°С, затем охлаждали до -78°С. Добавляли раствор 6-бром-3-[(4-хлорфенил)метил]-2-метоксихинолина (5,12 ммоль, 1,86 г) в THF (30 мл), затем перемешивали при -78°С в течение 1 ч. Раствор промежуточного соединения 100 (6,14 ммоль, 2 г) в THF (30 мл) добавляли при -78°С, затем перемешивали в течение 1 ч при -78°С. Добавляли воду и EtOAc -70°C. Органический слой отделяли, промывали водой и солевым раствором, сушили (MgSO₄) и выпаривали досуха. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией на силикагеле (Cyclo/EtOAc 90/10). Очищенную смесь собирали и выпаривали досуха. Остаток (1,7 г) очищали высокоэффективной жидкостной хроматографией (Chiralpak AD-H, 5 мкм, 250x20 мм); подвижной фазой (iPA 0%; СО₂ 70%, EtOH 15%, iPrOH 15%), получая 38 мг промежуточного соединения 104, 18 мг промежуточного соединения 105, 670 мг промежуточного соединения 106 и 460 мг промежуточного соединения 107.

Пример А28. Получение промежуточного соединения 108

CI

Смесь R изомеров

BuLi 1,6 M в гексане (3,76 мл, 6 ммоль) медленно добавляли при -20°С в потоке N2 к раствору диизопропиламина (0,84 мл, 6 ммоль) в THF (9 мл). Смесь перемешивали при -20°С в течение 20 мин, а затем охлаждали при -70°С. Медленно добавляли раствор промежуточного соединения 37 (1,5 г, 4,9

- 35 038350 ммоль) в THF (15 мл). Смесь перемешивали при -70°С в течение 1,5 ч. Медленно добавляли раствор (2R)-4-оксо-2-(фенилметил)-1-пиперидинкарбоновой кислоты сложного 1,1-диметилэтилового эфира (1,85 г, 6 ммоль) в THF (19 мл). Данную смесь перемешивали при -70°С в течение 2 ч, гидролизовали при -30°С с помощью ледяной воды и экстрагировали, используя EtOAc. Органический слой отделяли, промывали солевым раствором, сушили над MgSO₄, фильтровали и растворитель выпаривали. Остаток очищали флэш-хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 90 г, Cyclo/EtOAc, 90/10). Очищенные фракции собирали и выпаривали досуха, получая 1,3 г промежуточного соединения 108.

Пример А29.

a) Получение промежуточного соединения 109

CI

F

Смесь изомеров

BuLi 1,6 М в гексане (7,28 ммоль; 4,6 мл) каплями добавляли в потоке N₂ к раствору диизопропиламина (7,28 ммоль; 1,02 мл) в THF (10 мл) при -20°С. Смесь перемешивали в течение 20 мин при -20°С, затем охлаждали до -78°С. Добавляли раствор промежуточного соединения 56 (2,6 ммоль, 2 г) в THF (20 мл), затем перемешивали при -78°С в течение 1 ч. Добавляли раствор промежуточного соединения 117 (7,28 ммоль, 2,24 г) в THF (20 мл) при -78°С, затем перемешивали в течение 1 ч при -78°С. Добавляли воду и EtOAc при -70°С. Органический слой отделяли, промывали водой и солевым раствором, сушили (MgSO₄) и выпаривали досуха. Остаток очищали флэш-хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 90 г, Cyclo/EtOAc 80/20). Очищенные фракции собирали и выпаривали досуха, получая 2,3 г промежуточного соединения 109.

b) Получение промежуточного соединения 110

CI

F

Смесь промежуточного соединения 109 (2,3 г, 3,609 ммоль) и 3-хлор-бензолкарбопероксовой кислоты (1,87 г, 10,9 ммоль) в DCM (100 мл) перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Смесь выливали в 10%-ный водный раствор K₂CO₃ и экстрагировали с помощью DCM. Органический слой отделяли, промывали водой, сушили над MgSO₄, фильтровали и растворитель выпаривали досуха с получением 2,6 г промежуточного соединения 110.

Пример A30. Получение промежуточных соединений 111 и 112

CI

Промежуточное соединение 111 (2Р*),цис,(А)-1

Промежуточное соединение 112 (2R*),₄hc,(B)-2

BuLi 1,6 М в гексане (1,37 мл, 2,19 ммоль) каплями добавляли в потоке N₂ к раствору диизопропиламина (0,31 мл, 2,19 ммоль) в THF (3 мл) при -20°С. Смесь перемешивали в течение 20 мин при -20°С, затем охлаждали до -78°С. Добавляли раствор 6-бром-3-[(4-хлорфенил)метил]-2-метоксихинолина (0,79 г, 2,19 ммоль) в THF (8 мл), затем перемешивали при -78°С в течение 40 мин. Раствор промежуточного соединения 123 (0,53 г, 1,83 ммоль) в THF (5 мл) добавляли при -78°С, затем перемешивали в течение 40 мин при -78°С. Добавляли воду и EtOAc, органический слой отделяли, промывали водой, затем солевым раствором, сушили над MgSO₄, фильтровали и растворитель выпаривали досуха. Остаток (1,3 г) очищали высокоэффективной жидкостной хроматографией (SiOH с зернами неправильной формы 15-40 мкм, 300 г MERCK); подвижной фазой (циклом 80% EtOAc 20%). Собирали две фракции и растворитель выпаривали, получая соответственно 0,29 г промежуточного соединения 111 и 0,35 г промежуточного соединения 112.

Пример A31.

a) Получение промежуточного соединения 113

- 36 038350

BuLi 1,3 M в Cyclo (70 мл, 91 ммоль) каплями добавляли в N2 к раствору 4,4-(этилендиокси)-1-третбутоксикарбонилпиперидина (17 г, 7 0 ммоль) и N, N, N',N'-тетраметилэтилендиамина (10,5 мл, 70 ммоль) в диэтиловом эфире (110 мл) при -70°С. Смесь перемешивали при -70°С в течение 3 ч. Добавляли раствор 4-фторбензальдегида (7,4 мл, 77 ммоль) в диэтиловом эфире (15 мл) с такой скоростью, что сохранялась температура ниже -60°С, а затем смесь перемешивали в течение 3 ч при -70°С. Добавляли 10%-ный водный раствор NH₄Cl (130 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Осадок отфильтровывали и сушили (60°С, вакуум). Остаток очищали высокоэффективной жидкостной хроматографией (SiOH с зернами неправильной формы 20-45 мкм, 450 г MATREX); подвижной фазой (цикло 60%, EtOAc 40%). Очищенные фракции собирали и растворитель выпаривали, получая 11 г промежуточного соединения 113.

b) Получение промежуточного соединения 114

Смесь промежуточного соединения 113 (12,9 г, 35,11 ммоль) и третбутоксида калия (0,394 г, 3,511 ммоль) в iPrOH (80 мл) перемешивали и нагревали с обратным холодильником в течение 2 ч, затем охлаждали до комнатной температуры. Полученную в результате суспензия охлаждали до 0°С, перемешивали в течение 30 мин и отфильтровали. Осадок промывали холодным iPrOH (20 мл) и сушили (50°С, вакуум). Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем SiO₂ (15-40 мкм, 450 г) Cyclo/EtOAc 60/40. Очищенные фракции собирали и растворитель выпаривали, получая 2 г промежуточного соединения 114.

c) Получение промежуточного соединения 115

Раствор промежуточного соединения 114 (8,5 г, 37,17 ммоль) в MeOH (120 мл) гидрогенизировали (3 бар) при 50°С с сухим Pd/C 10% (3 г) в качестве катализатора в течение 4 ч. Катализатор отфильтровывали и фильтрат выпаривали, получая 7,1 г (97,5%) промежуточного соединения 115.

d) Получение промежуточного соединения 116 о

ΧχΔ н

Промежуточное соединение 115 (18,3 ммоль) в HCl 6 н (50 мл) перемешивали с обратным холодильником в течение 4 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры, выливали на лед и подкисляли 10%-ным водным раствором K₂CO₃. Смесь экстрагировали с помощью EtOAc, органический слой отделяли, промывали водой, затем солевым раствором, сушили (MgSO₄) и выпаривали досуха, получая 9,4 г (82,6%) промежуточного соединения 116.

e) Получение промежуточного соединения 117 и 118 о νχ А

Промежуточное соединение 117 (2R*)

Промежуточное соединение 118 (2S*)

Раствор промежуточного соединения 116 (7,5 г, 36,19 ммоль), ди-трет-бутилбикарбоната (7,9 г, 36,19 ммоль) и триэтиламина (5,03 мл, 36,19 ммоль) в THF (85 мл) перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Смесь выливали в воду и экстрагировали с помощью EtOAc. Органический слой отделяли, промывали водой, затем солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и растворитель выпаривали досуха. Остаток (14,7 г) очищали высокоэффективной жидкостной хроматографией на SiOH с зернами неправильной формы 20-45 мкм, 1000 г MATREX; подвижной фазой (цикло 70%, EtOAc 30%). Очищенные фракции собирали и растворитель выпаривали досуха. Остаток (12,4 г) очищали высокоэф фективной жидкостной хроматографией (Chiralpak AD-H, 5 мкм, 250x20 мм); подвижной фазой (iPA 0%; CO₂ 90%, МеОН 10%). Собирали две фракции и растворитель выпаривали, получая 5,2 г (37,3%) промежуточного соединения 117 и 5,4 г (38,7%) промежуточного соединения 118.

Пример A32.

a) Получение промежуточного соединения 119

- 37 038350

BuLi 1,6 М в гексане (8,29 мл, 13,3 ммоль) каплями добавляли к раствору 2-бромпиридина (1,26 мл, 13,3 ммоль) в диэтиловом эфире (15 мл) при -78°С в потоке N₂, затем смесь перемешивали 45 мин при -78°С. Каплями добавляли раствор 7-формил-1,4-диокса-8-азаспиро[4.5]декан-8-карбоновой кислоты сложный 1,1-диметилэтиловый эфир (3 г, 11,1 ммоль) в диэтиловом эфире (30 мл), затем смесь перемешивали при -78°С в течение 4 ч. Добавляли воду и EtOAc, органический слой отделяли, промывали водой затем солевым раствором, сушили над MgSO₄, фильтровали и растворитель выпаривали досуха.

Остаток очищали хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 200 г), DCM/MeOH/NH₄OH: 97/3/0,1. Очищенные фракции собирали и растворитель выпаривали досуха, получая 1,4 г промежуточного соединения 119.

b) Получение промежуточного соединения 120

Смесь промежуточного соединения 119 (1,1 г, 3,14 ммоль) и третбутоксида калия (0,035 г, 0,314 ммоль) в iPrOH (4 мл) перемешивали и нагревали с обратным холодильником в течение 2 ч, а затем охлаждали до комнатной температуры. Смесь выливали в воду и экстрагировали с помощью EtOAc. Органический слой отделяли, промывали водой, затем солевым раствором, сушили над MgSO₄, фильтровали и растворитель выпаривали досуха, получая 0,74 г (85,3%) промежуточного соединения 120.

c) Получение промежуточного соединения 121

Раствор промежуточного соединения 120 (0,74 г, 2,68 ммоль) в МеОН (10 мл) гидрогенизировали (3 бар) при 50°С с сухим Pd/C 10% (0,1 г) в качестве катализатора в течение 2 ч. Катализатор отфильтровывали и фильтрат выпаривали, получая 0,52 г (82,9%) промежуточного соединения 121.

d) Получение промежуточного соединения 122

Промежуточное соединение 121 (1,15 г, 4,91 ммоль) в HCl 6н (10 мл) перемешивали при 100°С в течение 5 ч, затем охлаждали до комнатной температуры. Смесь выливали в NaOH 3 н и экстрагировали с помощью DCM (три раза). Органический слой отделяли, промывали водой, сушили над MgSO₄, фильтровали и растворитель выпаривали досуха, получая 0,6 г (67,1%) промежуточного соединения 122.

e) Получение промежуточных соединений 123 и 124

Раствор промежуточного соединения 122 (0,6 г, 3,15 ммоль), ди-трет-бутилбикарбоната (0,69 г, 3,15 ммоль) и триэтиламина (0,44 мл, 3,15 ммоль) в THF (10 мл) выдерживали в течение ночи при комнатной температуре, затем смесь выливали в воду и экстрагировали с помощью EtOAc. Органический слой отделяли, промывали водой, затем солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и растворитель выпаривали досуха.

Остаток очищали хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 30 г), DCM/MeOH/NH₄OH: 97/3/0,1. Очищенные фракции собирали и растворитель выпаривали досуха. Остаток (0,45 г) объединяли с фракцией, полученной подобным путем, а затем очищали высокоэффективной жидкостной хроматографией (Chiralpak AD-H, 5 мкм, 250x20 мм); подвижной фазой (СО₂ 90%, МеОН 10%). Собирали две фракции и растворитель выпаривали, получая 533 мг промежуточного соединения 123 и 506 мг промежуточного соединения 124.

Пример А33. Получение промежуточных соединений 125 и 126

CI

Промежуточное соединение 125 (А)

Промежуточное соединение 126 (В)

- 38 038350

BuLi 1,6 М в гексане (3,41 мл, 5,46 ммоль) каплями добавляли в потоке N₂ к раствору диизопропиламина (0,767 мл, 5,46 ммоль) в THF (8 мл) при -20°С. Смесь перемешивали в течение 20 мин при -20°С, затем охлаждали до -78°С. Добавляли раствор промежуточного соединения 56 (1,5 г, 4,55 ммоль) в THF (15 мл), затем перемешивали при -78°С в течение 1 ч. Добавляли раствор 3,3-диметил-4-оксо-1пиперидинкарбоновой кислоты сложный 1,1-диметилэтиловый эфир (1,24 г, 5,46 ммоль) в THF (12 мл) при -78°С, затем перемешивали в течение 2 ч при -78°С. Добавляли воду и EtOAc, органический слой отделяли, промывали водой, затем солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и растворитель выпаривали досуха. Остаток (2,8 г) очищали нормальной фазой на SiOH с зернами неправильной формы, 15-40 мкм, 300 г, Merck, подвижной фазой (85% цикло, 15% EtOAc). Очищенные фракции собирали и растворитель выпаривали. Остаток (2 г) очищали хиральной SFC на Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм); подвижной фазой (iPA 0,3%, 70% СО₂, 30% EtOH). Собирали две фракции и растворитель выпаривали, получая 0,58 г (22,9%) промежуточного соединения 125 и 0,87 г (34,3%) промежуточного соединения 126.

Пример A34. Получение промежуточного соединения 127

Раствор промежуточного соединения 26 (0,917 ммоль), триацетоксиборгидрида натрия (1,833 ммоль) и N-метилпропиламина (1,833 ммоль) в THF (10 мл) и уксусной кислоты (2,75 ммоль) перемешивали в течение 4 ч. Добавляли 10%-ный водный раствор K₂CO₃ и EtOAc, органический слой отделяли, промывали водой, затем солевым раствором, сушили над MgSO₄, фильтровали и растворитель выпаривали досуха, получая 0,49 г (88,7%) промежуточного соединения 127.

Пример A35.

a) Получение промежуточного соединения 128

Раствор 4-оксо-3-(2-пиридинилметил)-1,3-пиперидиндикарбоновой кислоты, сложного 1-(1,1диметилэтил)-3-этилового эфира (13 г, 35,869 ммоль) в HCl 6 н (88 мл) и МеОН (15 мл) нагревали до температуры флегмы при перемешивании в течение 20 ч. После охлаждения до комнатной температуры смесь подкисляли до рН 10 с помощью NaOH 6 н (2,5 мл) и экстрагировали с помощью DCM (3 раза). Объединенные органические слои сушили над MgSO₄, фильтровали и концентрировали, получая 4,52 г промежуточного соединения 128.

b) Получение промежуточных соединений 129 и 130 о

Промежуточное соединение 129 R*

Промежуточное соединение 130 S*

Триэтиламин (6,61 мл, 47,52 ммоль), а затем ди-трет-бутилбикарбонат (5,2 г, 23,8 ммоль) добавляли к раствору промежуточного соединения 128 (4,52 г, 23,76 ммоль) в THF (60 мл). Полученную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Раствор выливали в воду и экстрагировали с помощью EtOAc. Органический слой отделяли, промывали солевым раствором, сушили над MgSO₄, фильтровали и растворитель выпаривали. Остаток (6,8 г) очищали нормальной фазой на SiOH с зернами неправильной формы (15-40 мкм, 300 г, Merck); подвижной фазой (90% СО₂, 10% (МеОН 50% iPrOH 50%)). Очищенные фракции собирали и растворитель выпаривали. Остаток очищали хиральной SFC на Chiralpak AD; подвижной фазой (90% СО₂, 5% МеОН, 5% iPrOH, 0,3% iPa). Собирали две фракции и растворитель выпаривали, получая 2,2 г (31,89%) промежуточного соединения 129 и 2 г (29,0%) промежуточного соединения 130.

c) Получение промежуточного соединения 131

- 39 038350

BuLi 1,6 M в гексане (1,94 мл, 3,1 ммоль) медленно добавляли при -20°С в потоке N₂ к раствору диизопропиламина (0,43 мл, 3,1 ммоль) в THF (4,5 мл). Смесь перемешивали при -20°С в течение 20 мин, затем охлаждали до -70°С. Медленно добавляли раствор промежуточного соединения 56 (0,85 г, 2,58 ммоль) в THF (9 мл). Смесь перемешивали при -70°С в течение 90 мин. Медленно добавляли раствор промежуточного соединения 129 (0,9 г, 3,11 ммоль) в THF (9 мл). Данную смесь перемешивали при -70°С в течение 2 ч, гидролизовали при -30°С с помощью ледяной воды и экстрагировали, используя EtOAc. Органический слой отделяли, промывали солевым раствором, сушили над MgSO₄, фильтровали и растворитель выпаривали. Остаток очищали флэш-хроматографией на силикагеле (30 г, 15-40 μ, Cyclo/EtOAc 85/15). Очищенные фракции собирали и растворитель выпаривали, получая 0,9 г (56,1%) промежуточного соединения 131.

d) Получение промежуточного соединения 132

Смесь промежуточного соединения 131 (0,9 г, 1,45 ммоль) и хлорпероксибензойной кислоты (1,07 г, 4,35 ммоль) в DCM (20 мл) перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Смесь выливали в 10%-ный водный раствор K2CO3 и экстрагировали с помощью DCM. Органический слой отделяли, промывали водой, сушили над MgSO4, фильтровали и растворитель выпаривали досуха, получая 805 мг (83%) промежуточного соединения 132.

Пример A36.

a) Получение промежуточного соединения 133

6-Бром-2-метокси-3-метил-хинолин (7,9 г, 31,34 ммоль), N-бромсукцинимид (5,58 г; 31,34 ммоль) и бензоилпероксид (0,76 г, 3,13 ммоль) добавляли в 1,2-дихлорэтан (79 мл). Смесь перемешивали при 80°С в течение ночи, выливали в воду, подкисляли 10%-ным водным раствором K₂CO₃ и экстрагировали с помощью DCM. Органический слой сушили над MgSO₄, фильтровали и выпаривали при пониженном давлении досуха. Остаток (10,08 г) очищали нормальной фазой на SiOH с зернами неправильной формы (20-45 мкм, 450 г, Matrex); подвижной фазой, градиент от 90% гептана, 10% EtOAc до 85% гептана, 15% EtOAc. Очищенные фракции собирали и концентрировали, получая 5,90 г промежуточного соединения 133.

b) Получение промежуточного соединения 134

Раствор промежуточного соединения 133 (1,49 г, 0,0045 моль), пиразола (0,34 г, 0,005 моль), K₂CO₃ (0,68 г, 0,005 моль) в ацетонитриле перемешивали и нагревали с обратным холодильником в течение ночи. Раствор охлаждали до комнатной температуры и выливали в ледяную воду. Добавляли DCM и органический слой экстрагировали, сушили над MgSO₄, отфильтровывали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией на силикагеле (гептан/EtOAc 80/20). Чистые фракции собирали и выпаривали с получением 1,2 г (82%) промежуточного соединения 134.

c) Получение промежуточного соединения 135

BuLi 1,6М в гексане (1,9 мл, 3,1 ммоль) каплями добавляли в диизопропиламин (0,43 мл, 3,1 ммоль) в THF (3 мл), перемешивали в N2 при -20°С. Смесь перемешивали в течение 20 мин при -20°С, затем охлаждали до -78°С. Каплями добавляли промежуточное соединение 134 (0,82 г, 2,6 ммоль) в THF (8 мл) и полученный в результате красный раствор перемешивали при -78°С в течение 1 ч. Добавляли (2R)-4оксо-2-(фенилметил)-1-пиперидинкарбоновой кислоты сложный 1,1-диметилэтиловый эфир (0,89 г, 3,1 ммоль) в THF (8 мл) и смесь перемешивали при -78°С в течение 1 ч. Добавляли воду. Водный слой экстрагировали с помощью EtOAc. Объединенные органические слои промывали водой и солевым раствором, сушили над MgSO₄, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток (1,83 г) очищали нормальной фазой на SiOH с зернами неправильной формы (15-40 мкм, 300 г, MERCK); подвижной фазой 90% цикло, 10% EtOAc. Очищенные фракции собирали и растворитель выпаривали. Остаток (0,486 г) очищали хиральной SFC на Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм); подвижной фазой, градиент

- 40 038350 от 0,3% iPa, 75% СО2, 25% МеОН до 0,3% iPa, 75% СО2, 25% МеОН). Очищенные фракции собирали и растворитель выпаривали, получая 20,18 г промежуточного соединения 135.

В. Получение конечных соединений.

Пример B1. Получение соединений 1, 2, 3 и 4

Соединение 1 (2И),цис-1

Соединение 2 (2R),транс-2

Соединение 3 (2R),транс-3

Соединение 4 (2R),цис-4

Трифторуксусную кислоту (12 мл) добавляли к раствору промежуточного соединения 3 (3,8 г, 6,07 ммоль) в DCM (38 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч и подкисляли 10%-ным водным раствором карбоната калия. Органический слой экстрагировали с помощью DCM, сушили над MgSO₄, фильтровали и концентрировали. Остаток (3,6 г) очищали высокоэффективной жидкостной хроматографией (Cartridge, 15-40 мкм, 90 г); подвижной фазой (NH4OH 0,3%; DCM 95%, MeOH 5%), получая соответственно 160 мг фракции F1 и 2,7 г фракции F2.

Фракцию F2 очищали высокоэффективной жидкостной хроматографией (Chiralpak AD-H, 5 мкм, 250x20 мм); подвижной фазой (iPA 0,3%; СО₂ 60%, МеОН 40%), получая соответственно 2,15 г фракции F2/1 и 150 мг соединения 1.

Фракцию F2/1 очищали высокоэффективной жидкостной хроматографией (Chiralpak AD-H, 5 мкм, 250x20 мм); подвижной фазой (iPA 0,3%; СО₂ 75%, МеОН 12,5%, iPrOH 12.5%), получая соответственно 1,2 г соединения 2, температура плавления 126°С, 620 мг соединения 3, температура плавления 146°С, и 135 мг соединения 4.

Соединение 1: оптическое вращение -153,8° (589 нм, с 0,342% мас./об., DMF, 20°С).

Соединение 2: оптическое вращение +76,76° (589 нм, с 0,37% мас./об., DMF, 20°С).

Соединение 3: оптическое вращение -182,79° (589 нм, с 0,3835% мас./об. DMF, 20°С).

Соединение 4: оптическое вращение +140,04° (589 нм, с 0,2835% мас./об., DMF, 20°С).

Пример В2. Получение соединения 5

CI А о о........./ А (2R),транс-3 . 0,94 HCI

Раствор соединения 37 (0,052 г, 0,102 ммоль) и хлористоводородной кислоты (3 N, 0,6 мл) в THF (0,6 мл) перемешивали в течение ночи при 70°С. Смесь охлаждали до комнатной температуры и осадок фильтровали, промывали водой и сушили в вакууме при 60°С, получая 41 мг соединения 5, температура плавления >250°С.

Пример B3. Получение соединения 6

CI

(2S*),(A) .0.97 HCl

Смесь промежуточного соединения 8 (0,45 г, 0,684 ммоль) в хлористоводородной кислоте (5 мл) и THF (5 мл) перемешивали при 60°С в течение ночи, затем охлаждали до комнатной температуры. Осадок отфильтровывали и сушили (вакуум, 60°С), получая 0,165 г соединения 6, температура плавления >250°С.

Пример В4. Получение соединения 7

- 41 038350

Смесь промежуточного соединения 10 (0,0002 моль) и трифторуксусной кислоты (0,004 моль) в DCM (1,6 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч, выливали в 10%-ный водный раствор карбоната калия и экстрагировали с помощью DCM. Органический слой промывали водой, сушили (MgSO₄), фильтровали и растворитель выпаривали досуха. К осадку порциями добавляли 0,037 г фумаровой кислоты (в 2-пропаноне). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Осадок отфильтровывали, промывали 2-пропаноном и сушили при 60°С в вакууме. Остаток (0,073 г) растворяли в DCM. Смесь подкисляли 10%-ным водным раствором карбоната калия и растворяли в диэтиловом эфире. Каплями добавляли HCl 5н (в 2-пропаноне). Смесь отфильтровывали и сушили в вакууме. Остаток растворяли в THF (1 мл) и добавляли HCl 3н (1 мл). Смесь перемешивали при 70°С в течение ночи и охлаждали до комнатной температуры. Добавляли лед и воду. Смесь перемешивали при 0°С в течение 15 мин. Осадок отфильтровывали и сушили при 60°С в вакууме, получая 0,02 г (20%) соединения 7, оптическое вращение: +78,57° (589 нм, с 0,224% мас./об., DMF, 20°С).

Пример В5.

a) Получение соединений 8 и 9

Соединение 9 (Т8,23*),цис-1

Раствор промежуточного соединения 16 (0,52 г, 0,781 ммоль) и тетрабутиламмония фторида 1 М в THF (0,781 мл, 0,781 ммоль) в THF (10 мл) перемешивали при 0°С в течение 2 ч. Добавляли воду и EtOAc, органический слой отделяли, промывали водой, затем солевым раствором, сушили над MgSO₄, фильтровали и растворитель выпаривали досуха. Остаток (0,52 г) очищали хиральной SFC (Chiralpak AD-H, 5 мкм, 250x20 мм); подвижной фазой (градиент от 0,3% iPA, 60% СО₂, 40% EtOH до 0,3% iPA, 60% СО₂, 40% EtOH). Собирали две фракции и растворитель выпаривали, получая 134 мг соединения 8 и 193 мг F1. F1 кристаллизовали из МеОН, получая 135 мг (31,3%) соединения 9, температура плавления 182°С.

b) Получение соединения 10

Смесь соединения 8 (0,243 ммоль) в МеОН (5 мл) и EtOAc (5 мл) гидрогенизировали (Patm) при комнатной температуре с Pd/C (25 мг) в качестве катализатора в течение 1,30 ч, затем 2 ч и в течение ночи. Катализатор фильтровали через тонкую подушку из целита, целит промывали с помощью EtOAc, фильтрат промывали 10%-ным водным раствором карбоната калия, затем солевым раствором, сушили (MgSO₄) и выпаривали досуха. Остаток очищали хроматографией с обращенной фазой на NucleodurSphinx RP 5 мкм 21x150 мм; подвижной фазой (градиент от 30% NH4HCO3 0,5%, 70% МеОН до 0% NH4HCO3 0,5%, 100% МеОН). Очищенные фракции собирали и растворитель выпаривали, получая 27 мг соединения 10.

Пример B6. Получение соединения 11

Трибромид бора (3,77 мл, 3,77 ммоль) каплями добавляли к раствору промежуточного соединения 19 (0,46 г, 0,754 ммоль) в DCM (10 мл) при 5°С, реакционную смесь перемешивали в течение 3 ч и обеспечивали достижение приблизительно 15°С. Реакционную смесь выливали в 10%-ный водный раствор карбоната калия и экстрагировали с помощью DCM. Органический слой отделяли, сушили над MgSO₄, фильтровали и растворитель выпаривали досуха. Остаток очищали хроматографией на колонке с SiOH (3,5 мкм, 30x150 мм; от DCM/MeOH/NH₄OH 98/2/0,2 до DCM/MeOH/NH₄OH 90/10/1). Очищенные фракции собирали и выпаривали до сухого состояния. Остаток (0,11 г) кристаллизовали из DIPE, получая 0,054 г соединения 11, температура плавления 143°С, оптическое вращение +189,15° (589 нм, с 0,3225% мас./об., DMF, 20°С).

Пример B7. Получение соединения 12

CI т о 1 он cl Д. ι

Ш Ц %н (2R*),₄mc-2

Раствор промежуточного соединения 27 (0,7 ммоль) в HCl/iPrOH 5-6M (4 мл) перемешивали при 0°С в течение 2 ч. Гелеобразный остаток помещали в EtOAc и 10%-ный водный раствор карбоната калия. Органический слой отделяли, промывали водой, затем солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и растворитель выпаривали досуха. Остаток кристаллизовали из DIPE, получая 137 мг соединения 12, температура плавления 135°С, оптическое вращение -134,65° (589 нм, с 0,303% мас./об., DMF, 20°С).

Пример В8. Получение соединений 13 и 14

CI .....т о Т он

ТГХ......t......1..........0

.................I Т ^............... он

Соединение 13 (2R*),lihc-1 Соединение 14 (2R*),lihc-2

Раствор промежуточного соединения 35 (1,02 г, 1,571 ммоль) и тетрабутиламмония фторида 1 М в THF (1,57 мл, 1,57 ммоль) в THF (20 мл) перемешивали при 0°С в течение 2 ч. Добавляли воду и EtOAc, органический слой отделяли, промывали водой, затем солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и растворитель выпаривали досуха. Остаток (0,9 г) очищали хиральной SFC (Chiralpak AD-H, 5 мкм, 250x20 мм); подвижной фазой (0,3% iPA, 70% СО₂, 30% EtOH). Очищенные фракции собирали и растворитель выпаривали, получая соответственно 0,245 г соединения 13, оптическое вращение +99,45° (589 нм, с 0,2735% мас./об., DMF, 20°С), и 0,4 г соединение 14, температура плавления 162°С, оптическое вращение -87,9° (589 нм, с 0,281% мас./об., DMF, 20°С).

Пример B9. Получение соединения 15

(2R),₄hc-4

Смесь соединения 34 (0,362 ммоль), пиридин-3-бороновой кислоты сложного 1,3-пропандиолового циклического эфира (0,544 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)палладия (0,0362 ммоль) и карбоната калия 2М (0,725 ммоль) в DME перемешивали в N2 при 90°С в течение 2 ч, затем в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь выливали в воду и экстрагировали с помощью EtOAc. Органический слой отделяли, промывали водой, затем солевым раствором, сушили над MgSO₄, фильтровали и растворитель выпаривали досуха. Неочищенный продукт кристаллизовали из МеОН, получая 0,075 г соединения 15, температура плавления 220°С.

Пример В10. Получение соединения 16 (2S),транс-2 .С4Н4О4

- 43 038350

Раствор соединения 248 (0,15 г, 0,28 ммоль), аммония формиата (0,088 г, 1,401 ммоль) и Pd/C (0,15 г, 1,41 ммоль) в МеОН (3 мл) нагревали с обратным холодильником в течение 2 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры, а затем раствор фильтровали через целит и промывали с помощью DCM. Фильтрат промывали водой и солевым раствором, сушили над MgSO₄, фильтровали и концентрировали. Фумаровую кислоту (0,056 г, 0,48 ммоль) порциями добавляли к раствору чистого продукта (0,110 г, 0,24 ммоль) в ацетоне (4 мл). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Осадок отфильтровывали, промывали ацетоном и сушили в вакууме при 60°С, получая 0,085 г соединения 16, температура плавления 166-168°С.

Пример В11. Получение соединений 17 и 18

О (2R), цис-1

Соединение 18. 1.97 С₄Н₄О₄

Соединение 17. Основание

Промежуточное соединение 41 лишали защитной группы способом, аналогичным таковому в примере В1. Лишенное защитной группы соединение (0,0009 моль) смешивали с формальдегидом (0,0038 моль) в DCM (9 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 15 мин. Добавляли триацетоксиборгидрид натрия (0,0023 моль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Добавляли воду. Смесь экстрагировали с помощью DCM. Органический слой отделяли, сушили (MgSO4), фильтровали и растворитель выпаривали при пониженном давлении. Остаток (0,416 г) очищали посредством колоночной хроматографии на силикагеле (элюент: DCM/MeOH 97/3; 15-40 мкм). Очищенные фракции собирали и растворитель выпаривали, получая соединение 17 (0,1 г), которое превращали в соль (Е)-2-бутендиовой кислоты. Осадок фильтровали, промывали с помощью DIPE и сушили в вакууме, получая 0,078 г соединения 18.

Пример В12. Получение соединения 19

CI ф Той ах v ~ а χ а (2R),цис-1

Промежуточное соединение 41 лишали защитной группы способом, аналогичным таковому в примере B1. BuLi (0,0025 моль) каплями добавляли при -78°С к раствору лишенного защитной группы соединения (0,0007 моль) в диэтиловом эфире (4 мл). Раствор перемешивали при -78°С в течение 4 ч. Добавляли воду. Смесь экстрагировали с помощью EtOAc. Органический слой отделяли, сушили (MgSO₄), фильтровали и растворитель выпаривали при пониженном давлении. Остаток (0,357 г) очищали хроматографией с обращенной фазой на силикагеле (элюент: DCM/MeOH/NH4HCO₃ 0,5% от 80/20 до 100/0; Sunfire 5 мкм). Очищенные фракции собирали и растворитель выпаривали. Остаток очищали посредством колоночной хроматографии на Kromasil, 10 мкм (элюент: DCM/MeOH/NH4OH 96/4/0,1). Очищенные фракции собирали и растворитель выпаривали, получая 0,046 г соединения 19.

Пример В13. Получение соединения 20

Раствор промежуточного соединения 28 (0,387 ммоль) в HCl/iPrOH (2 мл) перемешивали при 0°С в течение 2 ч и затем выпаривали досуха. Остаток кристаллизовали из диэтилового эфира. Остаток помещали в EtOAc и 10%-ный водный раствор карбоната калия, органический слой отделяли, промывали водой, затем солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и растворитель выпаривали досуха. Остаток кристаллизовали из диэтилового эфира, получая 6 мг соединения 20, температура плавления 232°С.

Пример В14. Получение соединений 21, 22, 23 и 24

- 44 038350

Cl

Соединение 21 (2S),транс-1

Соединение 22 (2S),транс-2

Соединение 23 (25),цис-3

Соединение 24 (23),цис-4

BuLi 1,6 М в гексане (1,93 мл, 3,09 ммоль) каплями добавляли в потоке N2 к раствору диизопропиламина (0,434 мл, 3,091 ммоль) в THF (4 мл) при -20°С. Смесь перемешивали в течение 20 мин при -20°С, затем охлаждали до -78°С. Добавляли раствор промежуточного соединения 2 (0,757 г, 2,38 ммоль) в THF (4 мл), затем перемешивали при -78°С в течение 1 ч. Раствор промежуточного соединения 40 (0,8 г, 2,85 ммоль) в THF (4 мл) добавляли при -78°С, затем перемешивали в течение 3 ч при -78°С. Добавляли воду и EtOAc, органический слой отделяли, промывали водой, затем солевым раствором, сушили над MgSO₄, фильтровали и растворитель выпаривали досуха. Остаток очищали флэш-хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 50 г, от DCM 100/0 до DCM/MeOH/NH4OH: 98,5/1,5/0,1). Очищенные фракции собирали и выпаривали досуха. Остаток очищали хиральной SFC на Chiralpak AD-H, 5 мкм, 250x20 мм; подвижной фазой (0,3% iPA, 50% СО₂, 50% ETIP), получая соответственно 0,089 г соединения 21, 0,124 г соединения 22, 0,177 г соединения 23 и 0,218 г соединения 24.

Пример В15. Получение соединений 25 и 26 а

Соединение 25 (А). 1.94 С₄Н₄О₄

Соединение 26 (В). 1.24 С4Н4О4

BuLi 1,6 М в гексане (0,0033 моль) каплями добавляли при -20°С к раствору N-(1-метилэтил)-2пропанамина (0,0033 моль) в THF (7 мл) в потоке N2. Смесь перемешивали при -20°С в течение 20 мин, затем охлаждали до -70°С. Добавляли раствор 6-бром-3-[(4-хлорфенил)метил]-2-метокси-хинолина (0,0027 моль) в THF (10 мл). Смесь перемешивали при -70°С в течение 1 ч. Каплями добавляли раствор 3-метил-1-(фенилметил)-4-пиперидинона (0,003 моль) в THF (6 мл). Смесь перемешивали при -70°С в течение 2 ч. Добавляли воду. Смесь экстрагировали с помощью EtOAc. Органический слой промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO₄), фильтровали и растворитель выпаривали. Остаток (1,3 г) очищали с помощью SFC (элюент: CO₂/MeOH/iPA 90/10/0,5). Собирали две фракции и растворитель выпаривали, получая 0,16 г (10%) фракции F1 и 0,2 г (13%) фракции F2. Фракцию F1 растворяли в бутендиовой кислоте (0,066 г) и превращали в соль (Е)-2-бутендиовой кислоты с 2-пропаноном (4 мл). Осадок помещали в диэтиловый эфир, отфильтровывали и сушили, получая 0,115 г (5%) соединения 25, температура плавления 154°С. Фракцию F2 растворяли в бутендиовой кислоте (0,082 г) и превращали в соль (Е)-2-бутендиовой кислоты с 2-пропаноном (4 мл). Осадок помещали в диэтиловый эфир, отфильтровывали, получая 0,24 (12%) соединения 26, температура плавления 238°С.

Пример В16. Получение соединений 27 и 28

Соединение 28 (2S),цис-3

- 45 038350

Смесь соединения 23 (0,296 ммоль) в МеОН (5 мл) и уксусной кислоты (0,4 мл) гидрогенизировали (Patm) при комнатной температуре с сухим Pd/C 10% (35 мг) в качестве катализатора в течение 3 ч. Добавляли 10%-ный водный раствор карбоната калия и EtOAc, смесь фильтровали через тонкую подушку из целита, органический слой отделяли, промывали солевым раствором, сушили (MgSO₄) и выпаривали досуха. Остаток очищали флэш-хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 10 г, от DCM до DCM/MeOH/NH4OH: 90/10/0,2). Очищенные фракции собирали и выпаривали досуха. Остаток очищали хроматографией с обращенной фазой на Х-Terra-С18 (10 мкм, 19x150 мм); подвижной фазой, градиент от 30% NH4HCO3 0,5%, 70% МеОН до 0% NH4HCO3 0,5%, 100% МеОН), получая 20 мг соединения 27 и 25 мг соединения 28.

Пример В17.

a) Получение соединения 29 (2Р*),цис-2

Смесь соединения 14 (0,654 ммоль) в МеОН (5 мл) гидрогенизировали (Patm) при комнатной температуре с Pd/C (35 мг) в качестве катализатора в течение 90 мин. Катализатор отфильтровывали и фильтрат выпаривали досуха. Остаток (260 мг) очищали хиральной SFC на Chiralpak AD-H, 5 мкм 250x20 мм; подвижной фазой (0,3% iPA, 70% СО₂, 30% EtOH). Очищенные фракции собирали и растворитель выпаривали. Остаток (225 мг) кристаллизовали из DIPE, получая 166 мг соединения 29, температура плавления 135°С.

b) Получение соединения 30

Смесь соединения 13 (0,374 ммоль) в МеОН (5 мл) и THF (2 мл) гидрогенизировали (Patm) при комнатной температуре с Pd/C (20 мг) в качестве катализатора в течение 90 мин. Катализатор отфильтровывали и фильтрат выпаривали досуха. Остаток (140 мг) очищали хроматографией с нормальной фазой на стабильном оксиде кремния 5 мкм (150x30,0 мм); подвижной фазой (градиент от 0,4% NH4OH, 96% DCM, 4% МеОН до 1,5% NH4OH, 85% DCM, 15% МеОН). Очищенные фракции собирали и растворитель выпаривали, получая 55 мг соединения 30.

Пример В18. Получение соединения 31 (2R),hmc-4

Раствор промежуточного соединения 44 (3,76 ммоль, 2,45 г) в TFA (8 мл) и DCM (25 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч. Смесь выливали в 10%-ный водный раствор K₂CO₃ и экстрагировали с помощью DCM. Органический слой отделяли, промывали водой, сушили над MgSO₄, фильтровали и растворитель выпаривали досуха. Остаток кристаллизовали из МеОН, получая 1 г соединения 31. Фильтрат повторно кристаллизовали из МеОН, получая еще 0,7 г соединения 31, температура плавления 183°С.

Пример В19. Получение соединения 32 (2R),транс-2

Раствор промежуточного соединения 42 (0,0002 моль) в TFA (1,5 мл) и DCM (1,5 мл) перемешивали

- 46 038350 при комнатной температуре в течение 1 ч. Смесь выливали в 10%-ный водный раствор K2CO3 и экстрагировали с помощью DCM. Органический слой отделяли, промывали водой, сушили над MgSO4, отфильтровывали и растворитель выпаривали досуха, получая 0,115 г (91%) соединения 32.

Пример В20. Получение соединения 33 (23),цис-4

Раствор промежуточного соединения 48 в TFA и DCM перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Смесь выливали в 10%-ный водный раствор K₂CO₃ и экстрагировали с помощью DCM. Органический слой отделяли, промывали водой, сушили над MgSO₄, фильтровали и растворитель выпаривали досуха. Остаток (0,47 г, 100%) кристаллизовали из DIPE, получая 0,317 г (71%) соединения 33, температура плавления 177°С, оптическое вращение: +232,66° (589 нм, с 0,297% мас./об., DMF, 20°С).

Пример В21. Получение соединения 34

ДЛ

Q

1^он (2R),₄hc-4

Раствор промежуточного соединения 50 в TFA и DCM перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Смесь выливали в 10%-ный водный раствор K2CO3 и экстрагировали с помощью DCM. Органический слой отделяли, промывали водой, сушили над MgSO₄, фильтровали и растворитель выпаривали досуха. Остаток (0,86 г, 100%) очищали посредством колоночной хроматографии на силикагеле (SiO₂, 15-40 мкм), элюент: DCM/iPrOH/NH₄OH: 97/3/0,1). Очищенные фракции собирали и растворитель выпаривали досуха, получая соответственно 0,63 г фракции F1 и 0,25 г фракции F2. F2 очищали с помощью SFC (элюент: CO2/MeOH/iPA: 70/30/0,5). Очищенные фракции собирали и растворитель выпаривали досуха, получая 0,025 г F2/1 и 0,188 г F2/2. F1 объединяли с F2/2 с получением 0,818 г соединения 34.

Пример В22.

a) Получение соединения 35 .1.21 С4Н4О4 (2R),цис-1

Раствор промежуточного соединения 49 (1,69 ммоль) в TFA (2,2 мл) и DCM (11 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Смесь выливали в 10%-ный водный раствор K2CO3 и экстрагировали с помощью DCM. Органический слой отделяли, промывали водой, сушили над MgSO₄, фильтровали и растворитель выпаривали досуха. Остаток (0,95 г, 100%) (0,4 г, 0,72 ммоль) растворяли в 2пропаноне (4 мл) и превращали в соль (Е)-2-бутендиовой кислоты (1 экв., 0,085 г), растворенную в ацетоне/EtOH: 50/50, 2 мл, получая 0,40 г соединения 35, температура плавления 145°С.

b) Получение соединения 36 (2R),цис-1

Смесь соединения 35 (0,525 ммоль), пиридин-3-бороновой кислоты сложного 1,3-пропандиолового циклического эфира (0,788 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)палладия(0) (0,0525 ммоль) и K₂CO₃ 2 М (1,051 ммоль) в DME (4 мл) перемешивали в N₂ при 90°С в течение 2 ч, затем в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь выливали в воду и экстрагировали с помощью EtOAc. Органический слой отделяли, промывали водой, затем солевым раствором, сушили над MgSO₄, фильтровали и

- 47 038350 растворитель выпаривали досуха. Остаток (0,32 г) очищали посредством колоночной хроматографии на силикагеле (SiO₂, 3,5 мкм), элюент: DCM/MeOH/NH₄OH водный: 98/2/0,2-92/8/0,8. Очищенные фракции собирали и растворитель выпаривали досуха. Остаток (0,225 г, 77,8%) кристаллизовали из DIPE, получая

0,107 г (37,0%) соединения 36, температура плавления 120°С.

Пример В23. Получение соединения 37

Трифторуксусную кислоту (0,36 мл) добавляли к раствору промежуточного соединения 52 (0,12 г, 0,198 ммоль) в DCM (1,2 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч и подкисляли 10%-ным водным раствором K₂CO₃. Органический слой экстрагировали с помощью DCM, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Часть (50 мг) остатка (100 мг) кристаллизовали из DIPE и сушили в вакууме при 60°С, получая 25 мг соединения 37, температура плавления 107°С.

Пример В24. Получение соединения 38

Трифторуксусную кислоту (3 мл) добавляли к раствору промежуточного соединения 59 (1,02 г, 1,57 ммоль) в DCM (10 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч и подкисляли 10%-ным водным раствором K₂CO₃. Органический слой экстрагировали с помощью DCM, сушили над MgSO₄, фильтровали и концентрировали. Остаток кристаллизовали из DIPE и сушили в вакууме при 60°С. Остаток (966 мг) очищали хроматографией с нормальной фазой на Cartridge (15-40 мкм, 30 г); подвижной фазой (0,5% NH4OH, 95% DCM, 5% МеОН). Очищенные фракции собирали и растворитель выпаривали. Остаток (670 мг) кристаллизовали из DIPE и сушили в вакууме при 60°С, получая 0,535 г (62,0%) соединения 38, температура плавления 130°С.

Пример В25. Получение соединения 39

Раствор промежуточного соединения 60 (730 мг, 1,06 ммоль) и TFA (1,96 мл, 25,46 ммоль) в DCM (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Смесь выливали в 10%-ный водный раствор K₂CO₃ и экстрагировали с помощью DCM. Органический слой отделяли, промывали водой, сушили над MgSO₄, фильтровали и растворитель выпаривали досуха. Продукт кристаллизовали из МеОН, получая 492 мг (79%) соединения 39, температура плавления 106°С, оптическое вращение -115,3° (589 нм, с 0,3365% мас./об., DMF, 20°С).

Пример В26. Получение соединения 40 ^Вг\ ^NH .0.96 НС1 (25*),цис-1

- 48 038350

Раствор промежуточного соединения 67 (1,18 ммоль) и TFA (2,18 мл, 28,26 ммоль) в DCM (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Смесь выливали в 10%-ный водный раствор K₂CO₃ и экстрагировали с помощью DCM. Органический слой отделяли, промывали водой, сушили над MgSO4, фильтровали и растворитель выпаривали досуха. Остаток растворяли в диэтиловом эфире (6 мл) и HCl 5н в iPrOH медленно каплями добавляли к полученному белому осадку. Твердое вещество отфильтровывали и сушили в вакууме, в качестве продукта была смесь хинолина и хинолона (60/40). Остаток растворяли в THF (6 мл), добавляли HCl 3н (6 мл) и смесь перемешивали при 70°С в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и добавляли воду со льдом. Раствор перемешивали в течение 15 мин при 0°С, осадок фильтровали и сушили в вакууме при 60°С, получая 415 мг (61%) соединения 40, температура плавления 224°С, оптическое вращение +48,62° (589 нм, с 0,3435% мас./об., DMF, 20°С).

Пример В27. Получение соединения 41 (3*S),(A)

Раствор промежуточного соединения 71 (65 мг, 0,0997 ммоль) в TFA (0,2 мл) и DCM (2 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Смесь выливали в 10%-ный водный раствор K₂CO₃ и экстрагировали с помощью DCM. Органический слой отделяли, промывали водой, сушили над MgSO₄, фильтровали и растворитель выпаривали досуха, получая 40 мг (72,8%) соединений 41.

Пример В28. Получение соединения 42

0,77 HCI (2S),qwc-4

Раствор промежуточного соединения 80 (255 мг, 0,38 ммоль) и HCl 3 н (2,6 мл) в THF (2,6 мл) перемешивали в течение ночи при 70°С. Смесь охлаждали до комнатной температуры и выливали в ледяную воду. Раствор перемешивали 30 мин и осадок фильтровали, промывали водой и сушили в вакууме при 60°С. Остаток кристаллизовали из DIPE, фильтровали и сушили в вакууме при 60°С, получая 211 мг (95,0%) соединения 42, температура плавления >250°С.

Пример В29.

a) Получение соединения 61 (2R), транс-2

Трифторуксусную кислоту (1,5 мл) добавляли к раствору промежуточного соединения 83 (0,514 г, 0,809 ммоль) в DCM (5 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч и подкисляли 10%-ным водным раствором K₂CO₃. Органический слой экстрагировали с помощью DCM, сушили над MgSO₄, фильтровали и концентрировали. Часть (240 мг) остатка (430 мг) кристаллизовали из DIPE и сушили в вакууме при 60°С, получая 161 мг соединения 61.

b) Получение соединения 43 .0.84 НС1 (2R),транс-2

- 49 038350

Раствор соединения 61 (0,24 г, 0,448 ммоль) и HCl 3н (2,5 мл) в THF (2,5 мл) перемешивали в течение ночи при 70°С. Смесь охлаждали до комнатной температуры и выливали в ледяную воду. Раствор перемешивали в течение 30 мин и осадок фильтровали, промывали водой и сушили в вакууме при 60°С.

Остаток кристаллизовали из DIPE, фильтровали и сушили в вакууме при 60°С, получая 215 мг (86,9%) соединения 43, температура плавления >250°С.

Пример В30. Получение соединений 44, 45, 46 и 47

Т

F

Соединение 44 (2R),транс-1

Соединение 45 (2R),транс-2 Соединение 46 (2R),l|hc-3 Соединение 47 (2R),qnc-4

Трифторуксусную кислоту (20 мл) добавляли к раствору промежуточного соединения 87 (6,07 г, 9,07 ммоль) в DCM (61 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч и подкисляли 10%-ным водным раствором K₂CO₃. Органический слой экстрагировали с помощью DCM, сушили над MgSO₄, фильтровали и концентрировали. Остаток (5,15 г) очищали флэш-хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 90 г, DCM/MeOH/NH4OH: 97/3/0,1). Очищенные фракции собирали и выпаривали досуха. Остаток (3,6 г) очищали с помощью SFC на колонке Chiralpak AD-HTM (5 мкм, 20x250 мм) со скоростью потока 50 мл/мин, при этом колонку выдерживали при температуре 35°С и выходном давлении 100 бар. Подвижная фаза представляет собой СО₂ 65%, EtOH 17,5%, iPrOH 17.5% и iPA 0,3% (в МеОН) в изократическом режиме. Очищенные фракции собирали и выпаривали досуха, получая соответственно 1,52 г соединения 44, температура плавления 148°С, оптическое вращение +46,5° (589 нм, с 0,329% мас./об., DMF, 20°С; 900 мг соединения 45, температура плавления 160°С, оптическое вращение -162,08° (589 нм, с 0,327% мас./об., DMF, 20°С; 250 мг фракции F3 и 180 мг фракции F4.

Часть (125 мг) фракции F3 кристаллизовали из DIPE и сушили при 60°С в вакууме, получая 61 мг соединения 4 6, температура плавления 145°С, оптическое вращение +126,22° (589 нм, с 0,286% мас./об., DMF, 20°С.

Часть (90 мг) фракции F4 кристаллизовали из DIPE и сушили при 60°С в вакууме, получая 51 мг соединения 47, температура плавления 174°С, оптическое вращение -141,92° (589 нм, с 0,291% мас./об., DMF, 20°С.

Пример В31. Получение соединения 48

Cl F

Л А

Q JU

I ОН Д*

Br ^^U\UX ( XX Он (3RD,(В)

Раствор промежуточного соединения 92 (1,1 г, 1,64 ммоль) в TFA (3,5 мл) и DCM (11 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч. Смесь выливали в 10%-ный водный раствор K₂CO₃ и экстрагировали с помощью DCM. Органический слой отделяли, промывали водой, сушили над MgSO₄, фильтровали и растворитель выпаривали досуха. Остаток (0,95 г) .кристаллизовали из DIPE, отфильтровывали и сушили (вакуум, 60°С), получая 0,718 г соединения 48, температура плавления 221°С.

Пример В32. Получение соединения 49

0.24 НС1 (3SD, (А)

Смесь промежуточного соединения 94 (0,4 г, 0,597 ммоль) в HCl 3н (4 мл) и THF (4 мл) перемешивали при 60°С в течение ночи, затем охлаждали до комнатной температуры. Смесь выливали в 10%-ный водный раствор K₂CO₃ и экстрагировали с помощью EtOAc. Органический слой отделяли, промывали водой, затем солевым раствором, сушили (MgSO₄), фильтровали и выпаривали досуха. Остаток кристаллизовали из DIPE, получая 0,27 г (80%) соединения 49, температура плавления 183°С.

Пример В33. Получение соединения 50

- 50 038350 .1.47 C2HF3O2 (23*),цис-2

При 0°С TFA (0,3 мл) каплями добавляли в смесь промежуточного соединения 103 (0,1 г, 0,153 ммоль) в DCM (10 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч. Растворитель выпаривали. Остаток помещали в DIPE и осадок отфильтровывали, получая 102 мг (84,1%) соединения 50, температура плавления 208°С, оптическое вращение +109,94° (589 нм, с 0,322% мас./об., DMF, 20°С).

Пример В34. Получение соединения 51 (2К*),цис-3 .1.33 c₂hf₃o₂

При 0°С TFA (1 мл) каплями добавляли в смесь промежуточного соединения 106 (0,31 г, 0,451 ммоль) в DCM (15 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч. Растворитель выпаривали. Остаток помещали в DIPE и осадок отфильтровывали, сушили на воздухе, получая 290 мг (87%) соединения 51, температура плавления 176°С, оптическое вращение -101,43° (589 нм, с 0,28% мас./об., DMF, 20°С).

Пример В35. Получение соединений 52, 53, 54 и 55

Соединение 52 (2R),цис-1

Соединение 53 (2R), цис-2

Соединение 54 0,6C₄H4O₄, (2R),транс-3

Соединение 55 1,1 С4Н4О4, (2R),транс-4

Трифторуксусную кислоту (4 мл) добавляли к раствору промежуточного соединения 108 (1,3 г, 2,2 ммоль) в DCM (13 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч и подкисляли 10%-ным водным раствором K₂CO₃. Органический слой экстрагировали с помощью DCM, сушили над MgSO₄, фильтровали и концентрировали. Остаток (0,95 г) очищали высокоэффективной жидкостной хроматографией (Chiralpak AD-H, 5 мкм, 250x20 мм), подвижной фазой: iPA 0,3%; СО₂ 60%, EtOH 20%, iPrOH 20%, получая соответственно 263 мг фракции F1 и 550 мг фракции F2.

Фракцию F2 очищали высокоэффективной жидкостной хроматографией (Chiralpak AD-H, 5 мкм, 250x20 мм), подвижной фазой: iPA 0,3%, СО₂ 70%, EtOH 15%, iPrOH 15%, получая 49 мг фракции F2/1, 273 мг фракции F2/2, 55 мг фракции F2/3 и 98 мг фракции F2/4.

Часть F1 (197 мг) кристаллизовали из DIPE, фильтровали и сушили в вакууме при 60°С, получая 97 мг соединения 52, температура плавления 176°С.

Часть F2/2 (199 мг) кристаллизовали из DIPE, фильтровали и сушили в вакууме при 60°С, получая 167 мг соединения 53, температура плавления 102°С.

Фумаровую кислоту (0,013 г, 0,112 ммоль) порциями добавляли к раствору чистого продукта F2/3 (0,055 г, 0,112 ммоль) в ацетоне (1 мл). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Осадок отфильтровывали, промывали ацетоном и сушили в вакууме при 60°С, получая 36 мг соединения 54, температура плавления 209°С.

Фумаровую кислоту (0,023 г, 0,199 ммоль) порциями добавляли к раствору чистого продукта F2/4 (0,098 г, 0,199 ммоль) в ацетоне (1 мл). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Осадок отфильтровывали, промывали ацетоном и сушили в вакууме при 60°С, получая 63 мг соединения 55, температура плавления 120°С.

- 51 038350

Пример В36. Получение соединений 56, 57, 58 и 59

Соединение 56 (2Р*),цис-1

Соединение 57 (2R*),₄hc-2

Соединение 58 (2R*),TpaHC-3 Соединение 59 (2R*),транс-4

Раствор промежуточного соединения 110 (1,15 г, 1,718 ммоль) и HCl 3н (HCl 3н, 5 мл) в THF (5 мл) перемешивали в течение ночи при 70°С. Смесь охлаждали до комнатной температуры, добавляли DCM и порошок K₂CO₃ до достижения основного рН. Органическую фазу собирали, сушили с помощью MgSO₄ и растворитель выпаривали. Часть остатка (990 мг) осаждали в DCM. Остаток очищали хроматографией с нормальной фазой на SiOH с зернами неправильной формы, 15-40 мкм, 300 г, MERCK; подвижной фазой (NH4OH 1%, 90% DCM, 10% МеОН) с получением соответственно фракции F1 (160 мг), затем F2 (165 мг). Фильтрат очищали нормальной фазой на SiOH с зернами неправильной формы (15-40 мкм, 300 г, MERCK); подвижной фазой (NH₄OH 1%, 90% DCM, 10% МеОН) с получением соответственно фракции F3 (90 мг), затем фракции F4 (60 мг).

Фракции F1, F2, F3 и F4 кристаллизовали в CH₃CN/DiPE, получая соответственно 133 мг соединения 56, температура плавления 140°С, оптическое вращение -65,4° (589 нм, с 0,367% мас./об., DMF, 20°С); 116 мг соединения 57, температура плавления 100°С, оптическое вращение +121,07° (589 нм, с 0,261% мас./об., DMF, 20°С); 46 мг соединения 58, температура плавления 192°С, оптическое вращение +59,23° (589 нм, с 0,287% мас./об., DMF, 20°С) и 49 мг соединения 59, температура плавления 182°С, оптическое вращение -70,18° (589 нм, с 0,285% мас./об., DMF, 20°С.

Пример В37. Получение соединения 60

Раствор промежуточного соединения 111 (0,29 г, 0,444 ммоль) в TFA (0,9 мл) и DCM (5 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Смесь выливали в 10%-ный водный раствор K₂CO₃ и экстрагировали с помощью DCM. Органический слой отделяли, промывали водой, сушили над MgSO₄, фильтровали и растворитель выпаривали досуха. Остаток (0,25 г) кристаллизовали из DIPE с получением 0,11 г (44,8%) соединения 60, температура плавления 161°С, оптическое вращение +245,07° (589 нм, с 0,2685% мас./об., DMF, 20°С).

Пример В38. Получение соединения 62

Раствор промежуточного соединения 125 (0,2 г, 0,359 ммоль) в TFA (0,6 мл) и DCM (5 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Смесь выливали в 10%-ный водный раствор K₂CO₃ и экстрагировали с помощью DCM. Органический слой отделяли, промывали водой, сушили над MgSO₄, фильтровали и растворитель выпаривали досуха, получая 0,088 г (53,6%) соединения 62.

Пример В39. Получение соединений 63 и 64

CI

CI

Соединение 63 (2Е*),цис-1

Соединение 64 (2БС),цис-2, .1.1 С₄Н₄О₄

- 52 038350

TFA (1,5 мл) добавляли к смеси промежуточного соединения 127 (0,813 ммоль) в DCM при 0°С, затем реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Смесь выливали в 10%-ный водный раствор K₂CO₃ и экстрагировали с помощью DCM. Органический слой отделяли, промывали водой, сушили над MgSO4, фильтровали и растворитель выпаривали досуха. Остаток (0,45 г) очищали флэш-хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 30 г, от DCM до DCM/CH3OH/NH4OH: 92/8/0,5). Очищенные фракции собирали и выпаривали досуха. Остаток (0,3 г) очищали хиральной SFC на Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), подвижной фазой, 0,3% iPA, 60% СО₂, 40% EtOH. Собирали две фракции и растворитель выпаривали, получая 98 мг фракции 1 и 120 мг фракции 2.

Фракции 1 кристаллизовали из DIPE с получением 34 мг соединения 63.

Фракции 2 растворяли в 2-пропаноне и превращали в соль (Е)-2-бутендиовой кислоты (1:2) с раствором (Е)-2-бутендиовой кислоты в 2-пропаноне/EtOH (1/1) с получением соединения 64.

Пример В40. Получение соединений 65 и 66

CI

Соединение 65 (3R*),(A)

Соединение 66 (3R*),(B)

Трифторуксусную кислоту (2,4 мл) добавляли к раствору промежуточного соединения 132 (0,805 г, 1,2 ммоль) в DCM (8 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч и подкисляли 10%-ным водным раствором K₂CO₃. Органический слой экстрагировали с помощью DCM, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток кристаллизовали из DIPE и сушили в вакууме при 60°С.

Остаток (689 мг) очищали нормальной фазой на Cartridge (15-40 мкм, 30 г); подвижной фазой, 0,5% NH4OH, 95% DCM, 5% МеОН. Собирали две фракции и растворитель выпаривали, получая 17 0 мг фракции 1 и 240 мг фракции 2. Фракцию 1 кристаллизовали из DIPE, фильтровали и сушили в вакууме при 60°С, получая 138 мг соединения 65.

Фракцию 2 кристаллизовали из DIPE, фильтровали и сушили в вакууме при 60°С, получая 164 мг соединения 66.

Пример В41. Получение соединения 67

Вг

(2R),(A) . 0.74 С4Н4О4 (0,11 г, 0,17 ммоль) в TFA (0,3 мл) и DCM (1 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч. Смесь подкисляли 10%-ным водным раствором K2CO3. Водный слой экстрагировали с помощью DCM. Объединенные органические слои промывали 10%-ным водным раствором K₂CO₃, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток (0,09 г) разбавляли ацетоном (0,9 мл). Добавляли фумаровую кислоту (20 мг) в EtOH/ацетоне 1/1 (0,6 мл). Осадок отфильтровывали и сушили при пониженном давлении (60°С), получая 71 мг (68,6%) соединения 67.

Следующие конечные соединения были получены в соответствии со способами, описанными выше. Соединения, описанные в примерах в разделе В выше, обозначены звездочкой напротив соответствующего примера В; другие соединения получены способом, аналогичным соответственно указанному примеру В. Условия хроматографии, используемые для получения соответствующих соединений, либо на конечном этапе, либо на более раннем этапе, указаны ниже соответствующих формул. Если указаны два или более условия хроматографии, то они выполняются последовательно в указанном порядке.

Таблица 1

- 53 038350

SFC (CO2/MeOH/iPA 90/10/0,5) Соед. 25; фумарат; (А); Пр. B15* Соед. 26; фумарат; (В); Пр. В15*	Силикагель, DCM/MeOH 98/2; 15-40 мкм, затем MeOH/NH4HCO3 0,5%, 88/12; 5 мкм Соед. 68; (В); Пр. В31 Соед. 69; (А) ; Пр. В31
CI т Q а,............... со.......о. с о	0 1 он осот......со и
Силикагель, 15-40 мкм, Cyclo/DCM: 30/70 Соед. 70; (2R),цис-1; Пр. В18 SFC (Chiralpak AD-H, CO2/iPrOH/iPA: 70/30/0,3) Соед. 31; (2Р),цис-4; Пр. В18* Соед. 71; (2R),транс-3; Пр. В19 Соед. 32; (2R),транс-2; Пр. В19*	SFC (Chiralpak AD-H, CO2/EtOH/iPA: 80/20/0,3) Соед. 72; (2R),цис-1; Пр. В18 Соед. 73; (2R),транс-2; Пр. В19 Соед. 74; (2Р),цис-3; Пр. В18
CI Т п 7QCOC..........о ..............С j..........-...... м	CI Л 0 {он . т γΤ 1
SFC (Chiralpak AD-H, CO2/iPrOH/iPA: 70/30/0,3) Соед. 75; (2Р),цис-4; Пр. В14 SiO2 15-40 мкм, Cyclo/DCM: 30/70 Соед. 76; фумарат; (2R),цис-1; Пр. В14	Силикагель, 15-40 мкм, DCM: 100 Соед. 77; фумарат; (23),цис-1; Пр. В20 SFC (Chiralpak AD-H, CO2/MeOH/iPrOH/iPA: 70/15/15/0,3) Соед. 78; (23),транс-2; Пр. В18 Соед. 79; (2S),транс-3; Пр. В18 Соед. 33; (23),цис-4; Пр. В20*

CI Y ......... 0 о.......,.Ч,ОО...... ...........сох......О'Ά О γ	CI I 0 I он Br /γ. /X I cci to н О и
Силикагель, 3160, 15-40 мкм, 25 г, DCM/MeOH 90/10 Соед. 80; (2R),цис-1; Пр. В9	Силикагель, 3160, 15-40 мкм, 25 г, DCM/MeOH 85/15 Соед. 81; (2R),цис-1; Пр. В26
CI Ϊ 0 \эн oct.......С............С ° 0.......... 0	CI γ 0 ............со......, cot.....ο» ас Y Тэ γ 1
Sunfire С18-5мкм-19х150 мм; MeOH/NH4HCO3 85/15 Соед. 82; (2И),цис-2; Пр. В2 Соед. 83; (2R),цис-1; Пр. В2	Chromasil 10 мкм, 65 г; DCM/MeOH/NH4OH 96/4/0,1 Соед. 19; (2R),цис-1; Пр. В12*
CI 1 С » ....... со.....о. Н Л	CI Ϊ 0 ООн со.....0*..... ............% .....
Силикагель (Merck 200 г, SiO2 15-40 мкм, Cyclo/DCM: 30/70-10/90). Соед. 84; (2R), цис-1; Пр. В2	Силикагель (Merck 200 г, SiO2 1540 мкм, Cyclo/DCM: 30/70-10/90) . Соед. 17; фумарат; (2R), цис-1; Пр. В11* Соед. 18;; AAA; (2R), цис-1; Пр. В11*

- 54 038350

Cl 0 T он XXX........tx ................... I ......г z^X	/¾. CI Q Т он БГ /X hz 1 z~z .....XXX.........п„ Н J О
Силикагель, 15-40 мкм, DCM 100 Соед. 35; фумарат; (2К),цис-1; Пр. В22* Соед. 34; (2И),цис-4; Пр. В21*	Силикагель, 15-40 мкм, DCM 100 Соед. 85; гидрохлорид; (2Р),цис1; Пр. В2 Соед. 86; гидрохлорид; (2Р),цис4; Пр. В2
CI А 0 ] он ОХ.....г / \^NH i Г	zzz CI ....... 0 (I........................Χγ........ .. z ΪΙ
Силикагель, Cyclo/EtOAc 80/20 и затем SFC Chiralpak AD, СО2 50%, EtOH 50%, iPA 0,3% Соед. 87; (2П),цис-3; Пр. В20 Соед. 88; фумарат; (2R),транс-2; Пр. В19 Соед. 89; (2Р),цис-1; Пр. В20	Силикагель, 15-40 мкм, DCM 100 Соед. 36; (2Р),цис-1; Пр. В22* Соед. 15; (2Р),цис-4; Пр. В9*
CI I О ζ=......,.........ΧΧ......, ......со с х J о	0 Xон Ν/ΥγχγγχΊ ТХХАн \ /
Силикагель, 15-40 мкм, Cyclo/EtOAc : 90/10 Соед. 90; фумарат; (2Р),цис-1; Пр. ВЗЗ SEC (Chiralpack AD-H, CO2/EtOH/iPA: 65/35/0,3) Соед. 91; (2Р),цис-2; Пр. ВЗЗ Соед. 92; (2R),транс-3; Пр. В19 SiO2, 15-40 мкм, Cyclo/EtOAc: 90/10 Соед. 93; фумарат; (2R),транс-4; Пр. В19	Силикагель, 20-45 мкм, 450 г; Cyclo 90%, EtOAc 10%, затем SFC Chiralpak AD-H, 5 мкм, 250x20 мм iPA 0,3%; СО2 70%, iPrOH 30% Соед. 37; (2R),транс-3; Пр. В23* Соед. 94; фумарат; (2Р),цис-4; Пр. В20 SiOH 20-45 мкм, 450 г; Cyclo 90%, EtOAc 10%, затем Chiralpak IC 5 мкм, 250x20 мм, iPA 0,3%; СО2 60%, iPrOH 40% Соед. 95; фумарат; (2Р),цис-2; Пр. В18 Соед. 96; (2R),транс-1; Пр. В23
CI т о О Ύ II \ он .......χχχχχ 1 о	г о XXX.....ζλ Л? V
Силикагель, 20-45 мкм, 450 г; Cyclo 90%, EtOAc 10%, затем Chiralpak IC, 5 мкм, 250x20 мм, iPA 0,3%; СО2 60%, iPrOH 40% Соед. 97; (2И),цис-1; Пр. В24 SFC (Chiralpak AD-H 5 мкм, 250x20 мм). Подвижной фазой (0,3% iPA, 65% СО2, 35% EtOH) SFC (Chiralpak AD-H 5 мкм, 250x20 мм, 0,3% iPA, 65% СО2, 35% EtOH) Соед. 38; (2Р),цис-3; Пр. В24*	SFC (Chiralpak AD-H, CO2/EtOH/iPA: 70/30/0,3) Соед. 98; (2Р),цис-2; Пр. B18 Соед. 99; (2Р),цис-3; Пр. В18 Соед. 100; (2R),транс-4; Пр. В19 Соед. 101; (2R),транс-1; Пр. В19

- 55 038350

1 rc° 0 Г он ’ГСХ.....Q 1	а Ϊ о гсгх гс 7 ГС ГС F
SFC (Chiralpak AD-H, CO2/EtOH/iPA: 70/30/0,3) Соед. 102; (2R),цис-2; Пр. В18 Соед. 103; (2И),цис-3; Пр. В18	Силикагель, 15-40 мкм, Cyclo/EtOAc, 90/10 Соед. 104; (2R),транс-1; Пр. В1 SFC (Chiralpak AD, CO2/iPOH/MeOH/iPA 75/12,5/12,5/0,3) Соед. 105; (2R),транс-3; Пр. В1
О X 0 1 он Bl ^ГС^^ XXXV X ХО ГС н ГС т F	а гсХ о %................Х?\ гсх.....χ ьГ о Or н X и т F
Силикагель, 15-40 мкм, Cyclo/EtOAc, 90/10, Соед. 106; гидрохлорид; (2S), транс-1; Пр. В4 SEC (Chiralpak AD, CO2/iPOH/MeOH/iPA 85/7,5/7,5/0,3) Соед. 107; гидрохлорид; (23),цис-4; Пр. В4 Со 7; гидрохлорид; (23),цис-2; Пр. В4* Соед. 108; фумарат; (2S),транс-3; Пр. В4	SFC (Chiralpak AD, CO2/iPOH/MeOH/iPA 75/12,5/12,5/0,3) Соед. 109; гидрохлорид; (2Р),цис4; Пр. В4 Соед. 110; гидрохлорид; (2Р),цис2; Пр. В4

а ГС 0 он ххххх ГС XX F	гс 0 вг^^ХХгс ХХХХХ ГС XX F Ύ F
Силикагель, Cyclo/EtOAc, 80/20,1540 мкм, 450 г Соед. Ill; (2R*),транс-3; Пр. В25 SFC (Chiralpak AD-H: MeOH/CO2/iPA, 30/70/0,3) Соед. 39; (2R*),цис-2; Пр. В25* Соед. 112; (2Р*),цис-1; Пр. В25	Силикагель, В-6720, Cyclo/EtOAc, 95/5,15-40 мкм, 450 г Соед. 113; фумарат; (23*),цис-2; Пр. В25
CI .....X...... Q хи вг Хгс χχχ.......'ГС \	N Ϊ...... о |θΗ ССПХ ......XX
Силикагель, В6778, Kromasil 10 мкм, Cyclo/EtOAc : 90/10 Соед. 114; (3R*),(A); Пр. В27	Силикагель, 15-40 мкм, Cyclo /EtOAc: 80/20 Соед. 115; фумарат; (2R),цис-2; Пр. В18 Соед. 116; (2И),цис-1; Пр. В18
CI Q χυ Вг Хгсгс χχχ.....Он	CI гс о ° ГСО .....(XX.....tx„ у/
Kromasil, 10 мкм, Cyclo/EtOAc: 90/10 Соед. 41; (3S*), (А); Пр. В27* Соед. 117; смесь; Пр. В27	Силикагель Flash, В6927, 20-45 мкм, 450 г, Cyclo/EtOAc 90/10 Соед. 118; трифторацетат; (2И),цис-1; Пр. В18

- 56 038350

Cl ϊ 0 ο II он XfX.....О.............s ° f	а I О 1| эн AXA н х..... fl χχ
Силикагель, 15-40 мкм, 450 г, Cyclo/EtOAc 90/10 Соед. 119; фумарат; (2R), цис-1; Пр. В28 SFC Chiralpak AD- Η (5 мкм, 20x250 мм) СО2 60%, iPrOH 40% и iPA 0,3% Соед. 120; (2Р),цис-4; Пр. В28	Силикагель, 15-40 мкм, 450 г, Cyclo/EtOAc 90/10, затем SFC Chiralpak AD- Η (5 мкм, 20x250 мм), СО2 60%, iPrOH 40% и iPA 0,3% Соед. 121; гидрохлорид; (2R),транс-2; Пр. В26 Соед. 122; гидрохлорид; (2И),цис4; Пр. В26
CI 1 Q Вг ....................J V....... χχχ.......А	CI т о вг............ха АХ......А W ys
SFC Chiralpak AD- Η (5 мкм, 20x250 мм), СО2 50%, iPrOH 50% и iPA 0,3% Соед. 123; (2R*),транс-1; Пр. Вб Соед. 11; (2R*),цис-2; Пр. Вб*	SFC Chiralpak AD- Η (5 мкм, 20x250 мм), СО2 50%, iPrOH 50% и iPA 0,3% Соед. 124; (2S*),цис-1; Пр. Вб Соед. 125; (2S*),транс-2; Пр. Вб
а А 0 TXXTi ^^А 0 А XX F1 F	0 X 0 Х^эн Вт /V Х\Л\ XXX......tx V Ав н J
SFC Chiralpak AD-HTM (5 мкм, 20x250 мм) СО2 60%, EtOH 40% и iPA 0,3% (в МеОН) Соед. 126; гидрохлорид; (2S*),транс-2; Пр. В26 Соед. 127; гидрохлорид; (2S*),транс-3; Пр. В26 Cyclo/EtOAc, 95/5, 15-40 мкм Соед. 40; гидрохлорид; (2S*),цис-1; Прим. В26*	SFC Chiralpak AD- Η (5 мкм, 20x250 мм) , СО2 60%, iPrOH 40% и iPA 0,3% (в МеОН) в изократическом режиме Соед. 128; гидрохлорид; (2R),транс-3; Пр. В2
CI т 0 Вг ДлА ХХХТан й о Г	CI Т о вг .........Х°Н..... XXX.......а н
SFC Chiralpak AD- Η (5 мкм, 20x250 мм), СО2 50%, iPrOH 50% и iPA 0,3%, затем SFC (В6817), Chiralpak AD- Η (5 мкм, 20x250 мм), СО2 50%, iPrOH 50% и iPA 0,3% (в МеОН) в изократическом режиме. Соед. 129; гидрохлорид; (2R*),транс-1; Пр. ВЗ Соед. 130; гидрохлорид; (2И*),цис2; Пр. ВЗ	SFC Chiralpak AD-H (5 мкм 20x250 мм), СО2 50%, iPrOH 50% и iPA 0,3%, затем SFC (В6817), Chiralpak AD-H (5 мкм, 20x250 мм), СО2 50%, iPrOH 50% и iPA 0,3% (в МеОН) в изократическом режиме. Со.131; гидрохлорид; (2S*),цис-1; Пр. ВЗ Со.132; гидрохлорид; (23*),транс2; Пр. ВЗ
а Ϊ О Ал А XX F Ύ F	CI о ......г.......ух......., XXX......χχ NT хо Vs и А F

	Силикагель, 15-40 мкм, 450 г,	SFC Chiralpak AD- Η (5 мкм,
	Cyclo/EtOAc: 90/10, затем Kromasil	20x250 мм), СО2 75%, EtOH 25% и
	10 мкм, 60 г, DCM/cyclo: 50/50	iPA 0,3%
	Соед. 133; гидрохлорид; (2Р*),цис-	Соед. 135; гидрохлорид; (23),цис-
	1; Пр. В26	4; Пр. В4
	Соед. 134; гидрохлорид; (2Р*),цис-	Соед. 136; гидрохлорид;
	2; Пр. В26	(23),транс-3; Пр. В4
		Соед. 137; гидрохлорид; (23),цис-
		2; Пр. В4
		от Cyclo/EtOAc 100:0 до Cyclo/EtOAc 70:30 Соед. 138; гидрохлорид; (23),транс-1; Пр. В4
	а 4	4Ί
	0	I и | он S /у. /У /I |/\ / γγ Уу Уу γ
	......., 44 Q	14у4. 4/νη
	.....(I.....	1 1
	F τ F
	Силикагель, Cyclo/EtOAc, 95/5,15-40 мкм Соед. 139; фумарат; (23*),цис-1; Пр. В34	Силикагель, 15-40 мкм, 90 г, Cyclo/EtOAc 97/3 Соед. 141; фумарат; (2Р),цис-1; Пр. В24
		SFC Chiralpak AD- Η (5 мкм,
	SFC Chiralpak AD- Η (5 мкм, 20x250 мм), СО2 60%, EtOH 40% и iPA 0,3% Соед. 140; (23*),цис-4; Пр. В34	21x250 мм), СО2 80% МеОН 20% и iPA 0,3% Соед. 142; (2Р),цис-4; Пр. В24
	уу CI f 4	CI и
	в...........................,114....... ......ОI.......Пн ....... й ° γ	|он ......ОП γΐ уу ^|Υ \ у О \ 4о
	44 т F	[1 J т F
	SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 20x250	SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 21x250
мм), СО2 65%, iPrOH 35% и iPA 0,3%	мм) , СО2 85%, iPrOH 15% и iPA
Соед. 143; гидрохлорид; (2Р),цис-4;	0,3%
Пр. В4 Соед. 144; гидрохлорид; (2Р),цис-3;	Соед. 147; (23),транс-2; Пр. В1
Пр. В4	Силикагель, 15-40 мкм, 450 г,
Соед. 145; гидрохлорид; (2Р),транс-	Cyclo/EtOAc: 80/20
2; Пр. В4	Соед. 148; (23),транс-1; Пр. В1
Kromasil, 10 мкм, 15-40 мкм, 90 г,
DCM/MeOH/NH4OH: 95/5/0,1
Соед. 146; гидрохлорид; (2Н),транс-
1; Пр. В4
CI Г Ί	4
Il J (он	I п о 1 он
ΙΑ ,1 11 ^>4 4	°χχτ TI й 0 пэ
14 г	<1
F
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 20x250	Силикагель, 15-40 мкм, 90 г,
мм), CO2 75%, EtOH 25% и iPA 0,3%	Cyclo/EtOAc 97/3
Соед. 149; фумарат; (23)цис-4; Пр.	Соед. 153; (2И),цис-1; Пр. В36
Bl
Соед. 150; фумарат; ( 23),транс-3;	SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 21x250
Пр. В1	мм), СО2 80%, МеОН 20% iPA 0,3%
Соед. 151; фумарат; (23),цис-2; Пр.	(в МеОН)
В1	Соед. 154; (2R) , транс-2; Пр. В36 Соед. 155; (2R),транс-3; Пр. В36
Силикагель, от Cyclo/EtOAc 100:0 до Cyclo/EtOAc 70:30 Соед. 152; фумарат; (23),транс-1; Пр. В1	Соед. 156; (2К),цис-4; Пр. В36
4Ί	уА. ^С1 I Ί
I. И 0 1 1 он '4x4	О у 1 1 0,4 ^4444^^4 н К
	44
V/	1 F

- 58 038350

Силикагель, 15-40 мкм, 90 г, Cyclo/EtOAc 97/3 Соед. 157; (2К),цис-1; Пр. В24 SEC Chiralpak AD-H (5 мкм, 21x250 мм), С02 80%, МеОН 20%, iPA 0,3% (в МеОН) Соед. 158; (2Р),цис-4; Пр. В24	SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 21x250 мм), СО2 85%, iPrOH 15% и iPA 0,3% (в МеОН) Соед. 159; гидрохлорид; (23),цис- 3; Пр. В28 Соед. 42; гидрохлорид; (23),цис4; Пр. В28*
/¾. CI ст \он ......ППДД V лэ Д н 1 г F	-¾. ci О Г он ТСТТГадн %0 у ΊΟ т F
SEC Chiralpak AD-H (5 мкм, 21x250 мм), СО2 85%, iPrOH 15% и iPA 0,3% (в МеОН) Соед. 160; гидрохлорид; (23),транс2; Пр. В28 Соед. 161; гидрохлорид; (23),цис-3; Пр. В28 Силикагель, 15-40 мкм, 450 г, Cyclo/EtOAc: 80/20 Соед. 162; гидрохлорид; (23),транс1; Пр. В28	SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 20x250 мм), СО2 70%, iPrOH 15%, МеОН 15% и iPA 0,3% (в МеОН) Соед. 163; (2R),транс-1; Пр. В1 Соед. 164; фумарат; (2И),цис-3; Пр. В1 Соед. 165; фумарат; (2И),цис-4; Пр. В1 Соед. 166; фумарат; (2R),транс-2; Пр. В1
0 эн s.....03 Пн .............Д.......Д ......П т F	ii.....Д 0 Д 1 1 0,4 ддп...........СХ .......И .....г F
SFC Chiralpak AD- Η (5 мкм, 20x250 мм), СО2 65%, EtOH 17,5%, iPrOH 17,5% и iPA 0,3% (в МеОН) Соед. 167; (23),транс-1; Пр. В24 Соед. 168; (23),транс-2; Пр. В24 Соед. 169; фумарат; (23),цис-3; Пр. В24 Соед. 170; фумарат; (23),цис-4; Пр. В24	SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 21x250 мм), CO2 85%, iPrOH 15% и iPA 0,3% (в MeOH) в изократическом режиме Соед. 171; (23),транс-2; Пр. ВЗО Соед. 172; (23),транс-1; Пр. ВЗО
а О он СП........с» ..... О .....г F	о ]он Д/А/аИД/ iXCQ 4 0 Д и г F
Силикагель Kromasil, 10 мкм, 15-40 мкм, 90 г, DCM/MeOH/NH4OH: 95/5/0,1 Соед. 173; (2R),транс-1; Пр. В1	SFC Chiralpak AD- Η (5 мкм, 20x250 мм), СО2 70%, МеОН 30% и iPA 0,3% (в МеОН) Соед. 174; (2И),цис-1; Пр. В28 Соед. 175; (2Р),цис-2; Пр. В28 Соед. 176; (2R),транс-3; Пр. В28 Соед. 177; гидрохлорид; (2R),транс-4; Пр. В28
Q Т он .....Од.....д аа и хо А» н о г F	О \эн ПЭд.....И АА ХО АЙ 6...... .....1 F
SFC Chiralpak AD- Η (5 мкм, 20x250 мм), СО2 60%, iPrOH 40% и iPA 0,3% (в МеОН) Соед. 178; (23),транс-1; Пр. В28 Соед. 179; (23),транс-2; Пр. В28 Соед. 180; (23),цис-3; Пр. В28 Соед. 181; (23),цис-4; Пр. В28	SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 21x250 мм), СО2 60%, iPrOH 40% и iPA 0,3% (в МеОН) Соед. 182; гидрохлорид; (2R),транс-1; Пр. В28 Соед. 183; гидрохлорид; (2R),транс-3; Пр. В28

- 59 038350

0 0 II он '«од......Q 7 о 1 F	α A О он цЭааA
SFC Chiralpak AD- Η (5 мкм, 20x250 мм), С02 60%, iPrOH 40% и iPA 0,3% (в МеОН) Соед. 184; (2R),транс-1; Пр. ВЗО Соед. 185; (2R),цис-2; Пр. ВЗО Соед. 186; (2R),транс-3; Пр. ВЗО Соед. 187; (2R),цис-4; Пр. ВЗО	Силикагель, Cyclo/EtOAc 80/20 и затем SFC Chiralpak AD, СО2 50%, EtOH 50%, iPA 0,3% Соед. 188; фумарат; (23*),цис-1; Пр. ВЗЗ Соед. 189; (23*),цис-4; Пр. ВЗЗ
а А о *0 Ай- А	Q AAA N О VR н и А F
SFC Chiralpak AD- Η (5 мкм, 20x250 мм), СО2 60%, EtOH 20%, iPrOH 20% и iPA 0,3% (в МеОН) Соед. 190; (2И*),цис-1; Пр. ВЗЗ SFC Chiralpak AD- Η (5 мкм, 20x250 мм), СО2 95%, МеОН 5% и iPA 0,3% (в МеОН) Соед. 191; (2И*),цис-3; Пр. ВЗЗ	SFC Chiralpak AD- Η (5 мкм, 20x250 мм) , СО2 75%, EtOH 25% и iPA 0,3% (в МеОН) Соед. 192; гидрохлорид; (2R),транс-1; Пр. В29 Соед. 43; гидрохлорид; (2R),транс-2; Пр. В29*
0 А он ААА 7 и т F	Q Т он Аа 7 и А F
SFC Chiralpak AD- Η (5 мкм, 20x250 мм), СО2 75%, EtOH 25% и 1РА 0,3% (в МеОН) Соед. 193; (2R),транс-1; Пр. В1 Соед. 61; (2R),транс-2; Пр. В29* Соед. 194; (2И),цис-3; Пр. В1	SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 21x250 мм), СО2 60%, iPrOH 40% и 1РА 0,3% (в МеОН) Соед. 195; (2R),транс-1; Пр. ВЗЗ Соед. 196; (2R),цис-2; Пр. ВЗЗ Соед. 197; (2R),транс-3; Пр. ВЗЗ Соед. 198; (2R),цис-4; Пр. ВЗЗ
А О 0 А II он 'АА А О I F	а А О Т он .....аАа А ° А А
SFC Chiralpak AD- Η (5 мкм, 20x250 мм), СО2 60%, EtOH 40% и 1РА 0,3% (в МеОН) Соед. 199; (2S),транс-2; Пр. ВЗО SFC Chiralpak AD- Η (5 мкм, 20x250 мм), СО2 75%, EtOH 25% и 1РА 0,3% (в МеОН) Соед. 200; (2S),транс-4; Пр. ВЗО Силикагель, 15-40 мкм, 90 г, DCM/MeOH/NH4OH: 97/3/0,1 Соед. 201; фумарат; (23),цис-1; Пр. ВЗО SFC Chiralpak AD- Η (5 мкм, 20x250 мм), СО2 60%, EtOH 40% и 1РА 0,3% Соед. 202; (23),цис-3; Пр. ВЗО	SFC Chiralpak AD- Η (5 мкм 20x250 мм), СО2 60%, EtOH 20% iPrOH 20% и 1РА 0,3% (в МеОН) Соед. 203; (23*),цис-1; Пр. ВЗЗ SFC Chiralpak AD- Η (5 мкм, 20x250 мм) , СО2 95%, МеОН 5% и 1РА 0,3% (в МеОН) Соед. 204; гидрохлорид; (23*),цис-4; Пр. ВЗЗ
О о О II он ΑΧΟ A o Αί н ) F	а Ϊ О 0 А^ II он аАа А F

- 60 038350

SiO2, 20-45 мкм, 450 г, Cyclo/EtOAc 90/10 Соед. 205; гидрохлорид; (23*),цис1; Пр. В36 SEC Chiralpak AD- Η (5 мкм, 20x250 мм), СО2 95%, МеОН 5% и iPA 0,3% (в МеОН) в изократическом режиме. Соед. 206; гидрохлорид; (2 3*),транс-3; Пр. В36 Силикагель, 20-45 мкм, 450 г, Cyclo/EtOAc 90/10 Соед. 207; гидрохлорид; (23*),транс-2; Пр. В36 SEC Chiralpak AD- Η (5 мкм, 20x250 мм), СО2 95%, МеОН 5% и iPA 0,3% (в МеОН) Соед. 208; гидрохлорид; (23*),цис4; Пр. В36	SFC Chiralpak AD- Η (5 мкм, 20x250 мм), СО2 70%, EtOH 30% и iPA 0,3%(в МеОН) Соед. 209; (2И*),цис-1; Пр. В24 Соед. 210; (2И*),цис-3; Пр. В24
0 Л 0 0 II он АСС.....Q /А F	а Ϊ 0 0 II он аАа Jr я F
Силикагель 20-45 мкм, 450 г, Cyclo/EtOAc 90/10 Соед. 211; (2*3),цис-1; Пр. В24	Силикагель, 20-45 мкм, 450 г, Cyclo/EtOAc 90/10 Соед. 212; гидрохлорид; (2R*),транс-2; Пр. В36 SFC Chiralpak AD- Η (5 мкм, 20x250 мм), СО2 60%, EtOH 40% и iPA 0,3% (в МеОН) Соед. 213; фумарат; (2И*),транс4; Пр. В36 SFC Chiralpak AD- Η (5 мкм, 20x250 мм), СО2 70%, EtOH 30% и iPA 0,3% (в МеОН) Соед. 214; фумарат; (2Р*),цис-1; Пр. В36 Соед. 215; фумарат; (2И*),цис-3; Пр. В36
0 0 11 1 01-1 .......ό ......г F	А Q 0 II он А А 1 АА и А F
SFC Chiralpack AD- Η (5 мкм, 20x250 мм), СО2 65%, EtOH 17,5%, iPrOH 17,5% и iPA 0,3% (в МеОН) Соед. 44; (2R),транс-1; Пр. ВЗО* Соед. 45; (2R),транс-2; Пр. ВЗО* Соед. 46; (2Р),цис-3; Пр. ВЗО* Соед. 47; (2Р),цис-4; Пр. ВЗО*	Силикагель, 15-40 мкм, 300 г, DCM/MeOH/NH4OH: 95/5/0,1 Соед. 216; (2Р),цис-1; Пр. ВЗО Соед. 217; (2R),транс-2; Пр. ВЗО SFC Chiralpak AD- Η (5 мкм, 20x250 мм), СО2 60%, EtOH 40% и iPA 0,3% (в МеОН) Соед. 218; (2R),транс-3; Пр. ВЗО Соед. 219; (2Р),цис-4; Пр. ВЗО

- 61 038350

α τ 0 0 II он /Т a υΤ 1 αλτ и τ F	а т 0 0 II он .....ТАС ° с* и А F
SFC Chiralpak AD- Η (5 мкм, 20x250 мм), СО2 75%, EtOH 25% и iPA 0,3% (в МеОН) Соед. 220; гидрохлорид; (23),транс- Пр. В28 SFC Chiralpak AD- Η (5 мкм, 20x250 мм), СО2 60%, EtOH 40% и iPA 0,3% (в МеОН) Соед. 221; гидрохлорид; (2S),цис-3; Пр. В28 Соед. 222; гидрохлорид; (23),транс2; Пр. В28 Силикагель, 15-40 мкм, 90 г, DCM/MeOH/NH4OH: 97/3/0,1 Соед. 223; гидрохлорид; (23),цис-1; Пр. В28	Силикагель, 15-40 мкм, 300 г, DCM/MeOH/NH4OH: 95/5/0,1 Соед. 224; гидрохлорид; (2И),транс2; Пр. В28 SFC Chiralpak AD- Η (5 мкм, 20x250 мм), СО2 60%, EtOH 40% и iPA 0,3% (в МеОН) Соед. 225; гидрохлорид; (2И),транс- Пр. В28
Cl F Ϊ i 0 ,0 вг.....................ххт ......(XX......(X	Cl F ......I 1 0 хс X он X ΒΥ γΥ γΥ Τγ|ΧΤ XT........Ан
Высокоэффективная жидкостная хроматография (S1OH с зернами неправильной формы, 20-45 мкм, 450 г MATREX), DCM 80%/сус1о 20% Соед. 226; (33*), (В); Пр. В31 Соед. 227; (33*),(А); Пр. В31	Высокоэффективная жидкостная хроматография (SiOH с зернами неправильной формы, 20-45 мкм, 450 г MATREX), DCM 80%/Сус1о 20% Соед. 48; (3R*),(B); Пр. В31* Соед. 228; (3R*),(A); Пр. В31
Cl F Ϊ I О си Т он X Вг Ay γΑ ХА XXX......Cl Η	Cl F Ϊ U q ju Т ОН |*R вг γγ γγ yAiCA ......OX............СH
Высокоэффективная жидкостная хроматография (SiOH с зернами неправильной формы 20-45 мкм, 450 г MATREX), DCM 80%/сус1о 20% Соед. 49; гидрохлорид; (33*), (А); Пр. В32*	Высокоэффективная жидкостная хроматография (SiOH с зернами неправильной формы, 20-45 мкм, 450 г MATREX), DCM 80%/сус1о 20% Соед. 229; гидрохлорид; (3R*),(B); Пр. В32
CI Т 0 А он .....АСс.....С н А 0	CI I О s..........-..........-.....А...... АС........А γ ν γ γγ н к 0
SFC Chiralpak AD- Η (5 мкм 20x250 мм) , 3 мл/мин, 35°С, 100 бар, СО2 50%, МеОН 25% и iPrOH 25% Соед. 230; гидрохлорид; (23*),цис- Пр. В28 SiO2, 15-40 мкм, 300 г, Cyclo/EtOAc от 95/5 до 85/15 Соед. 231; гидрохлорид; (23*),транс-2; Пр. В28 Соед. 232; гидрохлорид; (23*),транс-1; Пр. В28	SFC Chiralpak AD- Η (5 мкм, 20x250 мм) , 3 мл/мин, 35°С, 100 бар, СО2 60%, МеОН 20% и iPrOH 20% Соед. 233; гидрохлорид; (2Н*),цис- Пр. В28 Силикагель, 15-40 мкм, 300 г, Cyclo/EtOAc 85/15 Соед. 234; гидрохлорид; (2R*),транс-1; Пр. В28 SFC Chiralpak AD- Η (5 мкм, 20x250 мм) , 3 мл/мин, 35°С, 100 бар, СО2 60%, МеОН 20% и iPrOH 20% Соед. 235; гидрохлорид; (2Р*),цис2; Пр. В28

- 62 038350

0 0............,. XX.......... ..................ccx.....о о у о г F	0 0 II он Αχφφχ^^ к Да k ^NH н а А IA А F
SFC Chiralpak AD- H (5 мкм, 20x250 мм), C02 75%, EtOH 25% и iPA 0,3% (в MeOH) в изократическом режиме Соед. 236; гидрохлорид; (2Р),транс1; Пр. В28	SFC Chiralpak AD- Η (5 мкм, 20x250 мм), СО2 60%, iPrOH 40% и iPA 0,3% (в МеОН) Соед. 237; гидрохлорид; (2Р),транс3; Пр. В28 Соед. 238; гидрохлорид; (2Р),транс1; Пр. В28
CI А 0 он а\/+/А'4Х (XX Xt ...........н ° \ х^Х	а А 0 A τΟΦν °аА и А F
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0,3%; С02 70%, iPrOH 30% Соед. 239; гидрохлорид; (2Р),цис-4; Пр. В2 Соед. 5; гидрохлорид; (2R),транс-3 ; Пр. В2* SFC Chiralpak IC (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0,3%; С02 60%, iPrOH 40% Соед. 240; гидрохлорид; (2Р),цис-2; Пр. В2 Соед. 241; гидрохлорид; (2Р),транс1; Пр. В2	SFC Chiralpak AD- Η (5 мкм, 20x250 мм), СО2 70%, EtOH 15%, IPrOH 15% и iPA 0,3% (в МеОН) Соед. 242; (2S),транс-1; Пр. ВЗЗ Соед. 243; (23),цис-2; Пр. ВЗЗ SFC Chiralpak AD- Η (5 мкм, 20x250 мм), СО2 60%, EtOH 40% и iPA 0,3% (в МеОН) Соед. 244; (23),цис-3; Пр. ВЗЗ Соед. 245; (2S),транс-4; Пр. ВЗЗ
0 Тон нх..........оАХ ........X χ	0 Х^он Вг\ /А^ /А^ /К ссг.....lx ....... XX 0 т F
Силикагель (В6927, 20-45 мкм, 450 г, Cyclo/EtOAc 90/10) Соед. 246; (2R),цис-1; Пр. В20	SFC Chiralpak AD- Η (5 мкм, 20x250 мм), СО2 65%, EtOH 35% и iPA 0,3% (в МеОН) Соед. 247; (2S),транс-1; Пр. В1 Соед. 248; (2S),транс-2; Пр. В1 Соед. 249; (23),цис-3; Пр. В1 Соед. 250; (23),цис-4; Пр. В1
П 0 х^ а^^Ла ЮЭТТин А Ύ и т F	CI X о DH хсх.......IX н А
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 20x250 мм), С02 60%, МеОН 40% и iPA 0,3% (в МеОН) Соед. 251; (2S),цис-1; Пр. ВЗО SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 20x250 мм), СО2 50%, МеОН 50% и iPA 0,3% (в МеОН) Соед. 252; (2S),транс-2; Пр. ВЗО SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 20x250 мм), СО2 65%, МеОН 35% и iPA 0,3% (в МеОН) Соед. 253; (2S),транс-4; Пр. ВЗО	Высокоэффективная жидкостная хроматография (SiOH с зернами неправильной формы, 15-45 мкм, 300 г MERCK), DCM 98%/EtOAc 2% Соед. 254; гидрохлорид; (2R*),(A); Пр. ВЗ Соед. 255; гидрохлорид; (2R*),(B); Пр. ВЗ

- 63 038350

Cl A ΓΊ		CI Ϊ Г Ί
]OH VvaA		он Br /л /л X-·,. А--,. А Τ 1
ХХЦX, Xa N x/		XX. X. X ан
о
Высокоэффективная жидкостная	Высокоэффективная жидкостная
хроматография (SiOH с зернами	хроматография (SiOH с зернами
неправильной формы, 15-40 мкм,	300	неправильной формы, 15-40 мкм, 300
г MERCK), DCM 98%/EtOAc 2%		г MERCK), DCM 98%/EtOAc 2%
Соед. 256; (2R*),(A); Пр. В18		Соед. 6; гидрохлорид;
Соед. 257; (2R*),(B); Пр. В18		41873312 (2S*), (А) ;
		Пр. ВЗ*
		Соед. 258; гидрохлорид; (2S*),(B);
		Пр. ВЗ
Cl г ίΐ Ί		а
Μ Τ он		О он a+vvA
ϊ XX 11 ЛЭ As		КлхХ^ XNH А
1
Высокоэффективная жидкостная	SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20
хроматография (SiOH с зернами	мм), iPA 0,3%; CO2 65%, iPrOH 35%
неправильной формы, 15-40 мкм,	300	Соед. 260; (2R*), транс-1; Пр. B24
г MERCK), DCM 98%/EtOAc 2%		Соед. 261; (2К*),цис-2; Пр. В24
Соед. 259; (2S*),(A); Пр. В18		Соед. 262; (2К*),цис-4; Пр. В24
А		а 1
0 А^ 1 он .....оХ.....t'X о А< и А F		0 /АахА ххгсх и т F
SEC Chiralpak AD- Η (5 мкм, 20х	250	SFC Chiralpak AD- Η (5 мкм, 20x250
мм), СО2 50%, МеОН 50% и iPA 0	,3%	мм), СО2 60%, EtOH 40% и iPA 0,3%
(в МеОН)		(в МеОН)
Соед. 263; гидрохлорид; (2S),транс-	Соед. 266; гидрохлорид; (23),транс-
2;		4;
Пр. В28		Пр. В28
SEC Chiralpak AD- Η (5 мкм, 20х	250	SFC Chiralpak AD- Η (5 мкм, 20x250
мм), СО2 65%, МеОН 35% и iPA 0	,3%	мм), СО2 70%, EtOH 15% iPrOH 15% и
(в МеОН)		iPA 0,3% (в МеОН)
Соед. 264; гидрохлорид; (23),цис	-3;	Соед. 267; гидрохлорид; (23),цис-2;
Пр. В28		Пр. В28
Соед. 265; гидрохлорид; (2S),транс-	Соед. 268; гидрохлорид; (23),транс-
4; Пр. В28		1; Пр. В28
CI о 0 11 1 01-1 тг А А н \ АА		а А 0 1 он .....АГ.....Q аХ XX 1
А Τ F		А А F
SFC Chiralpak AD- H (5 мкм, 20x	250	Силикагель, 15-40 мкм, 300 г,
mm), CO2 65%, EtOH 17,5% iPrOH	DCM/MeOH/NH4OH: 97,5/2,5/0,1
17,5% и iPA 0,3% (в MeOH)		Соед. 273; (2К),цис-1; Пр. ВЗО
Соед. 269; гидрохлорид; (2П),цис	-4;
Пр. B28		SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 20x250
Соед. 270; гидрохлорид; (2К),цис	-3;	мм), СО2 60%, МеОН 40% и iPA 0,3%
Пр. В28		(в МеОН)
Соед. 271; гидрохлорид; (2R),транс-	Соед. 274; (2К),цис-2; Пр. ВЗО
2;
Пр. В28		SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 20x250
Соед. 272; гидрохлорид; (2R),транс-	мм), СО2 60%, МеОН 40% и iPA 0,3%
1;		(в МеОН)
Пр. В28		Соед. 275; (2R),транс-3; Пр. ВЗО
		Соед. 276; (2R),транс-4; Пр. ВЗО

- 64 038350

A О ХССЛ)н AA *0 γκ H Λ и т F	0 ]он А А·--,. А·--,.. О АХ А/ Xq АА Н аХ ТХ А F
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 20x250 мм), C02 60%, MeOH 40% и iPA 0,3% (в MeOH) Соед. 277; гидрохлорид; (2П),транс4; Пр. В28 Соед. 278; гидрохлорид; (2П),транс3; Пр. В28	SFC Chiralpak AD- Η (5 мкм, 20x250 мм), СО2 65%, EtOH 35% и iPA 0,3% (в МеОН) Соед. 279; гидрохлорид; (23),транс2; Пр. В29 Соед. 280; гидрохлорид; (23),транс1; Пр. В29
О А 0 А- .....ХАА АХ° А А?	Cl F ϊ Ϊ п.......о .....S...................................Аа .....АХ........С» А^А А^ Αθ
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0,3%; СО2 65%, EtOH 35% Соед. 281; гидрохлорид; (2Р*),цис2; Пр. В26 Соед. 282; гидрохлорид; (2П*),цис- Пр. В26	Высокоэффективная жидкостная хроматография (SiOH с зернами неправильной формы, 15-40 мкм, 300 г MERCK), DCM 98%/EtOAc 2% Соед. 283; (3R*),(A); Пр. В31 Соед. 284; фумарат; (3R*),(B); Пр. В31
Cl F Т ϊ х.......о ,.....S...................,,Аа .....АХ........Он	CI Л 0 Хон ХХАХ N f γ8. XX
Высокоэффективная жидкостная хроматография (SiOH с зернами неправильной формы, 15-40 мкм, 300 г MERCK), DCM 98%/EtOAc 2% Соед. 285; (3S*),(A); Пр. В27 Соед. 286; фумарат; (3S*),(В); Пр. В27	Высокоэффективная жидкостная хроматография (SiOH с зернами неправильной формы, 20-40 мкм, 450 г MERCK), Cyclo 90% EtOAc 10% Соед. 287; (2S*),(B); Пр. В20 Соед. 288; фумарат; (2S*),(A); Пр. В2 0
CI А 0 Т он .....ХСХХ	Cl F Т........j........ о X.......(J 1 Т он |r* '.....1.....AXA \
Высокоэффективная жидкостная хроматография (SiOH с зернами неправильной формы, 20-40 мкм, 450 г MERCK), Cyclo 90%, EtOAc 10% Соед. 289; фумарат; (2R*),(A); Пр. В18 Соед. 290; (2R*),(B); Пр. В18	Высокоэффективная жидкостная хроматография (SiOH с зернами неправильной формы, 15-40 мкм, 300 г, MERCK), DCM 98%, EtOAc 2% Соед. 291; (3R*),(A); Пр. В31 Соед. 292; (3R*),(B); Пр. В31
Cl F А А 0 А Х1А AV^VAAa к Х\ Х\ k /NH	Cl ϊ 0 Х^эн .....ΧχΑ хх А
Высокоэффективная жидкостная хроматография (SiOH с зернами неправильной формы, 15-40 мкм, 300 г MERCK), DCM 98%, EtOAc 2% Соед. 293; (3S*),(A); Пр. В31 Соед. 294; (3S*),(B); Пр. В31	Высокоэффективная жидкостная хроматография (SiOH с зернами неправильной формы, 20-45 мкм, 450 г MERCK), Cyclo 90%, EtOAc 10% Соед. 295; гидрохлорид; (2R*),(A); Пр. ВЗ Соед. 296; гидрохлорид; (2R*),(B); Пр. ВЗ

- 65 038350

Cl X Q Т он .....ХСХХ о	α X 0 /АччХч XXXtCi
Высокоэффективная жидкостная хроматография (SiOH с зернами неправильной формы, 20-45 мкм, 450 г MATREX), Cyclo 90%, EtOAc 10% Соед. 297; гидрохлорид; (2S*),(B); Пр. ВЗ Соед. 298; гидрохлорид; (2S*) , (А) ; Пр. ВЗ	SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0,3%; CO2 70%, EtOH 30% Соед. 299; (2S*), транс-1; Пр. ВЗЗ Соед. 300; (23*),цис-2; Пр. ВЗЗ Соед. 301; (23*),цис-3; Пр. ВЗЗ Соед. 302; (2S*),транс-4; Пр. ВЗЗ
а Ϊ 0 ΰΧγ ΊΨ ХО \ Н \ Αγζ О т F	/X чС Q 0 II он .....XXXI .....χ>
SEC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0,3%; СО2 75%, iPrOH 12,5% Соед. 303; гидрохлорид; (2Р),транс3; Пр. В4 SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0,3%; СО2 60%, МеОН 40% Соед. 304; гидрохлорид; (2Р),транс2; Пр. В4	SFC Chiralcel OD-H (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0%; СО2 70%, МеОН 30% Соед. 305; трифторацетат; (23*),цис-2; Пр. В24 Соед. 306; трифторацетат; (23*),цис-1; Пр. В24
,ζ α (J 0 Ύ 1 он /-4 /Az /Az Alz\ XXX.....X	чЧа X1 ст АХХТТ н J
SFC Chiralcel OD-H (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0%; CO2 70%, MeOH 30% Соед. 307; гидрохлорид; (23*),цис2; Пр. В36 Соед. 308; гидрохлорид; (23*),цис1; Пр. В36	SFC Chiralcel OD-H (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0%; СО2 70%, МеОН 30% Соед. 309; гидрохлорид; (23*),цис2; Пр. В36 Соед. 310; гидрохлорид; (23*),цис1; Пр. В36 SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0%; СО2 70%, iPrOH 30% Соед. 311; гидрохлорид; (2S*),транс-4; Пр. В36 Соед. 312; гидрохлорид; (2S*),транс-3; Пр. В36
0 Ϊ п 1ХГСС ιΧ	0 Ϊ 0 χχ ХСХ.....X X X
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0%; СО2 70%, EtOH 15%, iPrOH 15% Соед. 313; трифторацетат; (2Р*),цис-4; Пр. В34 Соед. 51; трифторацетат; (2Р*),цис3; Пр. В34*	SFC (Chiralpak AD-H 5 мкм, 250x20 мм), iPA 0%; СО2 70%, EtOH 15%, iPrOH 15% Соед. 314; гидрохлорид; (2Р*),цис4; Пр. В28 Соед. 315; гидрохлорид; (2Р*),цис3; Пр. В28 Соед. 316; гидрохлорид; (2R*),транс -1; Пр. В28. Соед. 317; гидрохлорид; (2R*),транс -2; Пр. В28.
/А\/С| и ]эн %ХХ V J χχ	0 I 0 V,.....X-, ХД X 1 \А о т F

- 66 038350

SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0%; CO2 70%, iPrOH 30% Соед. 50; трифторацетат; (23*),цис2; Пр. ВЗЗ* Соед. 318; (23*),цис-1; Пр. ВЗЗ	SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0,3%; СО2 60%, МеОН 40% Соед. 1; (2И),цис-1; Пр. В1* SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0,3%; СО2 75%, МеОН 12,5 iPrOH 12,5% Соед. 2; (2R),транс-2; Пр. В1* Со 3.; (2R),транс-3; Пр. В1* Соед. 4; (2R),цис-4; Пр. В1*
а А 0 j он BL YY /х A. I ОС......V ........ А С	а А О ААТ ^ТТ° А F
SFC Chiralpak IC (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0,3%; СО2 70%, МеОН 15% iPrOH 15% Соед. 319; трифторацетат; (2S*),цис-2; Пр. В34 Соед. 320; (23*),цис-1; Пр. В34	SFC Chiralpak IC (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0,3%; СО2 70%, МеОН 15% iPrOH 15% Соед. 321; гидрохлорид; (23*),цис2; Пр. В28 Соед. 322; гидрохлорид; (23*),цис1; Пр. В28 SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0%; СО2 70%, EtOH 30% Соед. 323; гидрохлорид; (2S*),транс-4; Пр. В28 Соед. 324; гидрохлорид; (2S*),транс-3; Пр. В28
СТ 0 Ύ 1 он ......АХ А < V F	CI и 0 Ύ 1 ОН тхх.....а YY Yr Yq Y*r Н Гт
SFC Chiralpak IC (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0%; СО2 80%, МеОН 20% Соед. 325; трифторацетат; (2R*),цис-3; Пр. В24 SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0%; СО2 70%, iPrOH 30% Соед. 326; трифторацетат; (2R*),цис-2; Пр. В24.	SFC Chiralpak IC (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0%; СО2 80%, МеОН 20% Соед. 327; гидрохлорид; (2И*),цис3; Пр. В36 SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0%; СО2 70%, iPrOH 30% Соед. 328; гидрохлорид; (2И*),цис2; Пр. В36
Т\ иС| и Тон ТА.....А “ir*o Tr н г	0 Ϊ 0 Т сн WyyyyC~TA (А А' Гт т F
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0%; СО2 70%, iPrOH 30% Соед. 329; гидрохлорид; (2R*),транс-1; Пр. В26	SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0,3%; СО2 60%, iPrOH 40% Соед. 330; фумарат; (2R),транс-1; Пр. В35 Соед. 331; фумарат; (2R),транс-2; Пр. В35 Соед. 332; фумарат; (2R),цис-3; Пр. В35
а 0 /VvCa СХСаТн А 0 А Xх	Cl F Ϊ..........1...... п......О вг..............та Ст А н
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0,3%; СО2 70%, EtOH 30% Соед. 333; гидрохлорид; (23*),цис3; Пр. В26 Соед. 334; гидрохлорид; (23*),цис2; Пр. В26	Высокоэффективная жидкостная хроматография (SiOH с зернами неправильной формы, 20-45 мкм, 450 г MATREX). Подвижной фазой (DCM 80%/сус1о 20%) Соед. 335; (3R*),(A); Пр. В32

- 67 038350

Cl F 1 ϊ Qi......Qi Br..................,AX .....QXQ NN \0 NN H	Q А 0 он ТАА F
Высокоэффективная жидкостная хроматография (SiOH с зернами неправильной формы, 20-45 мкм, 450 г, MATREX) , DCM 80%/сус1о 20% Соед. 336; (3S*),(B); Пр. В32	SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0,3%; СО2 60%, EtOH 20%, iPrOH 20% Соед. 337; (2R*), транс-1; Пр. В25 Соед. 338; (2R*),цис-2; Пр. В25 Соед. 339; (2R*),транс-3; Пр. В25 Соед. 340; (2И*),цис-4; Пр. В25.
а А 0 χχ вц А I СА.........Q ........ й ° Ν	.....Ϊ 0 а. .......X/N XXXV QX
SEC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0,3%; СО2 60%, EtOH 20%, iPrOH 20% Соед. 341; гидрохлорид; (2Р*),цис2; Пр. В26 Соед. 342; гидрохлорид; (2Н*),цис4; Пр. В26	SFC Chiralpak AD-H (5 мкм 250x20 мм), iPA 0,3%; градиент СО2/ЕТ1Р от 80/20 до 60/40) Соед. 343; гидрохлорид; (2И*),цис4; Пр. В2 Соед. 344; гидрохлорид; (2Н*),цис2; Пр. В2
а Ϊ 0 Х^ сн cHvnvnXN/X ТХХА Q	0 \Аа АА н ° An QQ 1 F
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм 250x20 мм), iPA 0,3%; градиент СО2/ЕТ1Р от 80/20 до 60/40) Соед. 345; фумарат; (2R*),транс-1; Пр. В23 Соед. 346; фумарат; (2R*),цис-2; Пр. В23 Соед. 347; фумарат; (2R*),транс-3; Пр. В23 Соед. 348; фумарат; (2И*),цис-4; Пр. В23	SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0,3%; CO2 60%, iPrOH 40% Соед. 349; гидрохлорид; (2И),транс1; Пр. В2 Соед. 350; гидрохлорид; (2И),транс2; Пр. В2
Ϊ 0 ......Χγ uXX A A F	Q X 0 | он XXX.....X ...... Qr
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0,3%; CO2 60%, iPrOH 40% Соед. 351; (2R), транс-1; Пр. Bl Соед. 352; (2R), транс-2; Пр. Bl Соед. 353; фумарат; (2И),цис-3; Пр. В1 Соед. 354; фумарат; (2И),цис-4; Пр. В1	SFC Chiralpak IC (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0,3%; CO2 80%, ETIP 20% Соед. 355; (2S*),цис-1; Пр. B25 Соед. 356; (2S*),цис-2; Пр. В25 Соед. 357; (2S*),транс-3; Пр. В25 Соед. 358; (2S*),транс-4; Пр. В25
CI ......т X1 Ϊ он Б г VN. Xvl W АХ.......Он н N	CI А Q Ϊ он Br Х\ 1NV АХ......Qx Н R*
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0,3%; СО2 70%, EtOH 15%, iPrOH 15% Соед. 359; гидрохлорид; (2S*),(A); Пр. Вб Соед. 360; гидрохлорид; (2S*) , (В) ; Пр. Вб	SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0,3%; СО2 70%, EtOH 30% Соед. 361; гидрохлорид; (2R*), (А) ; Пр. Вб Соед. 362; гидрохлорид; (2R*),(B); Пр. Вб

- 68 038350

	а т				Д
Bl /%¾ ν дс	д Ар......, X......fl А0 А			А	0 -v-Д 1 \ . /Д д А о \ ......(5 А
SFC Chiralpak IC (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0,3%; CO2 80%, ETIP 20% Соед. 363; гидрохлорид; (23*),цис1; Пр. В26 Соед. 364; гидрохлорид; (2S*),транс-4; Пр. В26 Соед. 365; гидрохлорид; (23*),цис2; Пр. В26	SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0,3%; СО2 65%, EtOH 17,5%, iPrOH 17,5% Соед. 366; (2R),транс-1; Пр. В1 Соед. 367; (2R),транс-2; Пр. В1 Соед. 368; фумарат; (2К),цис-3; Пр. В1 Соед. 369; фумарат; (2R),цис-4; Пр. В1
	CI Ϊ				CI Ϊ
ΊίΎ	0 он,~~ ^^^Д X Ν О \ 7 ХА			АГ	0 ] он Даа Д Д /nh a) A/r О ) 7 А
	д				д
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0,3%; СО2 70%, EtOH 15%, iPrOH 15% Соед. 52; (2И),цис-1; Пр. В35* Соед. 53; (2R),цис-2; Пр. В35* Соед. 54; фумарат; (2R),транс-3; Пр. В35* Соед. 55; фумарат; (2R),транс-4; Пр. В35*	Высокоэффективная жидкостная хроматография (SiOH с зернами неправильной формы, 15-40 мкм, 300 г MERCK), DCM 98%, EtOAc 2% Соед. 370; (В); Пр. В1
	Cl X Il ί				CI X Ii 'Ί
Br А	U J Т он ДДД Л Дн			Br А	Il J ,........IV...... А.....А ......г а
SFC Chiralpak мм) , i Р А 0,3% iPrOH 15% Соед. 371; (2S Соед. 372; (2S	AD-H (5 мкм, 250x20 ; СО2 70%, EtOH 15%, *) , (А) ; Пр. Вб *),(В); Пр. Вб	SFC ( мм) , Соед. Соед.	Chiralpak iPA 0,3%; 373; (2R* 374; (2R*	AD-H (5 мкм, 2 5 СО2 70%, EtOH 30% Ч,(А); Пр. Вб Ч,(В); Пр. Вб	>0x20
	Л				CI д
А	д ,,, Хр...... ( 1 V VA АА F			А	д А ОН Даа т Дын Ao Г о
Нормальная фаза SiOH с зернами неправильной формы (15-40 мкм, 300 г MERCK), NH4OH 1%, 90% DCM, 10% МеОН Соед. 56; (2Р*),цис-1; Пр. В36* Соед. 57; (2R*),цис-2; Пр. В36* Нормальная фаза SiOH с зернами неправильной формы (15-40 мкм, 300 г MERCK), NH4OH 1%, 90% DCM, 10% МеОН Соед. 58; (2R*),транс-3; Пр. В36* Соед. 59; (2R*),транс-4; Пр. В36*	SFC Chiralpak ALPAK AD-H (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0,3%; СО2 70%, EtOH 15%, iPrOH 15% Соед. 375; гидрохлорид; (2R),цис-2; Пр. В36 Соед. 376; гидрохлорид; (2Р),цис-1; Пр. В36
	д А				а 1 if X
а\/А Д	А ДД ДДД 1% 0 Дк Ах			ВА АА д	А Аг......4 X.......Г1„
	F				А
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, мм), iPA 0,3%; СО2 65%, EtOH iPrOH 17,5% Соед. 377; гидрохлорид; (2R) 2; Пр. В4 Соед. 378; гидрохлорид; (2R) 1; Пр. В4	250x20 17,5%, ,транс- ,транс-	SFC формь: Cycle Соед. Соед.	SiOH с зернами неправильной [ (15-40 мкм, 300 г MERCK), > 80%, EtOAc 20% 60; (2Р*),цис-1; Пр. В37* 379; (2R*),цис-2; Пр. В37

- 69 038350

Cl ϊ 0 a...........................о....... (ΤΙ.....Пн ....... 1 .....г 0	CI Ϊ 0 \ он । Ύ и
Высокоэффективная жидкостная хроматография SiOH с зернами неправильной формы (15-40 мкм, 300 г MERCK), Cyclo 80%, EtOAc 20% Соед. 380; фумарат; (2S*),цис-1; Пр. В37 Соед. 381; (23*),цис-2; Пр. В37	SFC Chiralpak IC (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0,3%; СО2 75%, МеОН 25% Соед. 382; (2Р),цис-4; Пр. ВЗЗ Соед. 383; (2R),цис-1; Пр. ВЗЗ Соед. 384; (2R),транс-2; Пр. ВЗЗ Соед. 385; (2R),транс-3; Пр. ВЗЗ
а А П О ДА II он тддд А АС γ τ' \Х	а Ϊ 0 0 т 1 он /А ZA /А, / Д|/-\ .....XXX А/ γ Aj<r А/
SFC Chiralpak IC (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0,3%; C02 75%, MeOH 25% Соед. 386; (2R),цис-1; Пр. B24 Соед. 387; (2И),цис-4; Пр. В24	Силикагель (15-40 мкм, 300 г MERCK), NH4OH 0,5%, 92% DCM, 8% МеОН Соед. 388; (2R*),цис-1; Пр. В24 SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0,3%; 65% СО2, 35% (EtOH 50%, iPrOH 50%) Соед. 389; (2R*),транс-2; Пр. В24 Соед. 390; (2Р*),цис-3; Пр. В24 Соед. 391; (2R*),транс-4; Пр. В24
CI ......т Q......ii ......... АА.......А	^5^/01 А X Т ОН |*R IL L /NH Пэ aa 1
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0,3%, 70% СО2, 30% iPrOH Соед. 392; (3R*),(A); Пр. В31 Соед. 393; (3R*),(B); Пр. В31	SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0,3%, 70% CO2, 30% iPrOH Соед. 394; (3R*),(A); Пр. B31 Соед. 395; (3R*),(B); Пр. B31
Cl А 0 Ϊ н/ .......s......ОСС.......А	Cl I 0 0 X^ X / 1 оц ......AA.......A
SFC (Chiralpak AD-H 5 мкм, 250x20 мм), iPA 0,3%, 70% СО2, 30% EtOH Соед. 62; (SI); Пр. В38* Соед. 396; (S2); Пр. В38	SFC (Chiralpak AD-H 5 мкм, 250x20 мм), iPA 0,3%, 70% CO2, 30% EtOH Соед. 397; (SI); Пр. B38 Соед. 398; (S2); Пр. B38
С Xон АХ......А ...............n.....ΐ х ......0	Cl A 0 Aoh Cl Д\ Iy\ О XX aa γ Y Vr С)
SFC Chiralpak IC (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0,3%; 60% СО2, 40% (EtOH 50%, iPrOH 50%) Соед. 399; фумарат; (2R),транс-1; Пр. В12 Соед. 400; фумарат; (2R),транс-2; Пр. В12 SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0,3%, 65% СО2, 35% EtOH Соед. 401; фумарат; (2Р),цис-3; Пр. В12 Соед. 402; фумарат; (2Р),цис-4; Пр. В12	SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0,3%, 65% CO2, 35% MeOH Соед. 403; фумарат; (2R*),цис-1; Пр. Bl SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0,3%, 65% CO2, 35% EtOH Соед. 404; фумарат; (2R*) , транс-2; Пр. Bl Соед. 405; фумарат; (2П*),цис-3; Пр. В1

- 70 038350

ГС I О .........,.....ΟΥ f IΎ ГС ГСг ГС \ 1 ГСгсГС и Y F	О Ϊ он о л А I СГСОн hi 0 «0^ (................. .....0
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), 0% iPA 0,3%, 75% С02, 25% EtOH Соед. 406; (2S),транс-1; Пр. В1 Соед. 407; (2S),транс-2; Пр. В1	SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0,3%, 65% CO2, 35% iPrOH Соед. 408; фумарат; (2Р),цис-1; Пр. В23
CI ό о | ОН X ci Λ ϊ (А .....осс........to	Cl 1 0 0 Т он Ο ci Υ ι Y .....ООСОн
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0,3%; 70% С02, 30% (EtOH 50%, iPrOH 50%) Соед. 4 09; фумарат; (3R*) , (А) ; Пр. В31 Соед. 410; фумарат; (3R*),(B); Пр. В31	SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0,3%, 80% СО2, 20% EtOH Соед. 411; фумарат; (3S*),(A); Пр. В27 Соед. 412; фумарат; (3S*),(B); Пр. В27
Q Iон СООХ ГС Ar ό	0 ......Ху........., ох......to 'и т F
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0,3%, 70% СО2, 30% МеОН Соед. 413; фумарат; (2К*),цис-1; Пр. В10 Соед. 414; фумарат; (2R*),цис-2; Пр. В10 SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0,3%, 70% С02, 30% iPrOH Соед. 415; фумарат; (2R*),транс-1; Пр. В10	SFC Chiralpak AD- Η (5 мкм 20 х 250 мм), СО2 65% EtOH 35% и iPA 0,3% (в МеОН) в изократическом режиме. Соед. 16; фумарат; (2S),транс-2; Пр. В10*
0 |он οχ.....о ............о......γ ......о т F	о. Lo γ 0 ГСгсХХгс ТХХгс ГС \ X Y F
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 20x250 мм), СО2 75% EtOH 25% и iPA 0,3% (в МеОН) в изократическом режиме. Соед. 416; фумарат; (2R),транс-1; Пр. В10	SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0,3%, 75% СО2, 25% EtOH Соед. 417; (2S),транс-1; Пр. В1 Соед. 418; фумарат; (2S),цис-2; Пр. В1 SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0,3%, 60% СО2, 40% EtOH Соед. 419; (2S),транс-2; Пр. В1
CI 1 п Y ОН *s a .-j. ОгсХО .....αχ.........Он	CI Ϊ..... 0 | ОН *R с Υ\ ιΟΥ ГСХ.......Он V ГС
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), 0,3% iPA, 25% СО2, 75% МеОН Соед. 420; (3S*),(A); Пр. В27 Соед. 421; (3S*),(В); Пр. В27	SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), 0,3% iPA, 60% CO2, 40% iPrOH Соед. 422; (3R*),(A); Пр. B27 Соед. 423; (3R*),(B); Пр. B27

- 71 038350

Cl T он cl\Z4zA/M//\ /А XXX V jj OH	CI X 0 1он (XX......(х ........... 1 X он
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), градиент от 0,3% iPA, 60% CO2, 40% EtOH до 0,3% iPA, 60% CO2, 40% EtOH Соед. 8; (1'S, 23*),цис-2; Пр. B5* Соед. 9; (1'3, 23*),цис-1; Пр. В5*	SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), градиент от 0,3% iPA, 60% СО2, 40% EtOH до 0,3% iPA, 60% СО2, 40% EtOH Соед. 10; (23*),цис-2; Пр. В5* Соед. 424; (2S*),цис-1; Пр. В5
О Т ОН 1 *s ХФ\ А^н ΐ	м^Х |А Т он Br aXIa^A (ХА .............м........ΐ........( .......о
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), градиент от 0,3% iPA, 70% СО2, 30% iPrOH до 0,3% iPA, 70% СО2, 30% iPrOH Соед. 425; (3S*),(A); Пр. В27 Соед. 426; (3S*),(B); Пр. В27	Нормальная фаза на SiOH с зернами неправильной формы (20-45 мкм, 450 г MATREX); градиент от 0,1% NH4OH, 99% DCM, 1% МеОН до 0,1% NH4OH, 96% DCM, 4% МеОН Соед. 427; фумарат; (2R),цис-1; Пр. В35 Соед. 428; фумарат; (2П),цис-3; Пр. В35
М ОН Br Л I .....(XX......(X .....................N..........ΐ ......ΐ(................ .......о	а А 0 «аАуАЦа хфаа А А
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), градиент от 0,3% iPA, 75% СО2, 25% МеОН до 0,3% iPA, 75% СО2, 25% МеОН) Соед. 67; фумарат; (2R),(А); Пр. В41* Соед. 429; фумарат; (2R) , (В) ; Пр. В41.	SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), 0,3% iPA, 60% СО2, 40% (EtOH 50%, iPrOH 50%) Соед. 430; фумарат; (2R*),транс-1; Пр. В1 Соед. 431; фумарат; (2Р*),цис-2; Пр. В1 Соед. 432; фумарат; (2R*),цис/транс, 25/75; Пр. В1
CI т 0 1он XXX.....г.....1..........о ................ । χχ........... он	CI (х .О с,.....,...............А А N .....СА........(х АА АА
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), 3% iPA, 70% СО2, 30% EtOH Соед. 13; (2R*),цис-1; Пр. В8* Соед. 14; (2Р*),цис -2; Пр. В8*	SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), 3% iPA, 60% СО2, 40% (EtOH 50%, iPrOH 50%) Соед. 433; (3R*), (А); Пр. B27 Соед. 434; (3R*), (В); Пр. В27
CI т 0 он C/a/kXJ XXX........(X ΌΗ	CI .....X X Т он cl aXIaa. .....(А......(X ΛνΑ Αθ aas ΌΗ
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), 0,3% iPA, 70% СО2, 30% (EtOH 50%, iPrOH 50%) Соед. 12; (2Р*),цис-2; Пр. В7*	SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), 0,3% iPA, 70% CO2, 30% (EtOH 50%, iPrOH 50%) Соед. 435; (2S*),цис-1; Пр. B7
CI .....X О Тон F.....(XX......(.......ί.......о он	0 ф^эн ” 1

- 72 038350

SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), 3% iPA, 80% CO2, 20% iPrOH Соед. 436; (2S*) , транс-2; Пр. B8 Соед. 437; (23*),цис-3; Пр. В8	SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), 0,3% 1РА, 70% СО2, 30% EtOH Соед. 29; (2П*),цис-2; Пр. В17* Соед. 30; (2И*),цис-1; Пр. В17*
CI А 0 Ϊ он CI /5- /-5¾. Д/J АХ......Он АА ΑΝΑ\θ AAr н I он	CI ϊ.................... 0 AJ АааАА ОА.........С- А а^а а0 А/А 1
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), 0,3% iPA, 70% C02, 30% (EtOH 50%, iPrOH 50%) Соед. 20; (2Р*),цис-1; Пр. B13*	SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), 0,3% 1РА, 60% С02, 40% (EtOH 50%, iPrOH 50%) Соед. 438; (3S*),(A); Пр. В27 Соед. 439; (3S*),(В); Пр. В27
ci I 0 VvvXv ХХоТ?. 1 А Са и	CI ХА с,....._................,АХ .....АХ........Он ааа а^а aq А/А \
SFC Chiralpak IC (5 мкм, 250x20 мм), 0,3% 1РА, 65% С02, 35% МеОН Соед. 440; (23*),цис-1; Пр. В1 Соед. 441; (23*),цис-2; Пр. В1 Соед. 442; фумарат; (2S*),транс-1; Пр. В1	SFC Chiralpak IC (5 мкм, 250x20 мм), 0,3% 1РА, 70% С02, 30% МеОН Соед. 443; (3RS*),(M1); Пр. В27 SFC Chiralpak IC (5 мкм, 250x20 мм), 0,3% 1РА, 65% СО2, 35% МеОН Соед. 444; (3RS*),(M3); Пр. В27 Соед. 445; (3RS*),(M4); Пр. В27
CI X1 | он XXX......хх АА \0 *s Пн	CI ИД........0 0 Y II \ ОН ‘R 1 аД /а /А /Х|аХ 0 °.....АХ.........О» AC A^fA ао А^А \
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), 0,3% 1РА, 70% СО2, 30% (EtOH 50%, iPrOH 50%) Соед. 446; (23*),цис-2; Пр. В13	Силикагель (15-40 мкм, 30 г), 0,5% NH4OH, 95% DCM, 5% МеОН Соед. 65; (3R*),(A); Пр. В40*. Соед. 66; (3R*),(B); Пр. В40*
CI т о......о ° эн i^s 1 S /А /А/ /А/ДХ 0 ЮЭТо АА а^ \о А//	CI т 0 С!...........У......аХХХ .....ОА.......IX АА Ν Q F
Силикагель (Cartridge 15-40 мкм, 30 г), 0,5% NH4OH, 95% DCM, 5% МеОН Соед. 447; (3S*),(A); Пр. В40 Соед. 448; (3S*),(B); Пр. В40.	SFC Chiralpak IC (5 мкм, 250x20 мм), 0,3% iPA, 75% СО2, 25% (EtOH 50%, iPrOH 50%) Соед. 449; (ЗР*),цис -2; Пр. В27 SFC Chiralpak IC (5 мкм, 250x20 мм), 0,3% iPA, 70% СО2, 30% iPrOH Соед. 450; (ЗР*),цис -3; Пр. В27 SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), 0,3% 1РА, 75% СО2, 25% МеОН Соед. 451; (3R*),транс-1; Пр. В27 SFC Chiralpak IC (5 мкм, 250x20 мм), 0,3% 1РА, 70% СО2, 30% iPrOH Соед. 452; (3R*),транс-2; Пр. В27
CI /А 0 Т NH сХддА 1 АХ.......и АаА n Q F	CI 1..... Х | Од охсхх АА Ν Αθ F Η

- 73 038350

SFC Chiralpak IC (5 мкм, 250x20 мм), 0,3% iPA, 75% CO2, 25% (EtOH 50%, iPrOH 50%) Соед. 453; (33*),цис-1; Пр. B27 SFC Chiralpak IC (5 мкм, 250x20 мм), 0,3% iPA, 70% CO2, 30% iPrOH Соед. 454; (33*),цис-4; Пр. B27 SFC Chiralpak IC (5 мкм, 250x20 мм), 0,3% iPA, 70% CO2, 30% iPrOH Соед. 455; (3S*) , транс-3; Пр. B27 Соед. 456; (3S*) , транс-4; Пр. В27	SFC Chiralpak IC (5 мкм, 250x20 мм), 0,3% iPA, 75% СО2, 25% (EtOH 50%, iPrOH 50%) Соед. 457; гидрохлорид; (33*),цис1; Пр. В32
Cl т 0 у........у.......4пн ι хх......ы Ау Ή F Н	CI Л 0 он CI у, у ДуХ. (II Г1...О ...... ΐ X.......... О
SFC Chiralpak IC (5 мкм, 250x20 мм), 0,3% iPA, 75% СО2, 25% (EtOH 50%, iPrOH 50%) Соед. 458; гидрохлорид; (ЗР*),цис2; Пр. В32	SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), 0,3% iPA, 50% С02, 50% (EtOH 50%, iPrOH 50%) Соед. 22; (2S),транс-2; Пр. В14* Соед. 23; (23),цис-3; Пр. В14* Соед. 24; (23),цис-4; Пр. В14* Соед. 21; (2S),транс-1; Пр. В14*
а Л 0 о II он χχιχι О JR LI и	а Ϊ 0 ......., схх........X А^ \q Ау£ К L
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), 0,3% iPA, 50% СО2, 50% iPrOH Соед. 459; (2Р*),цис-1; Пр. В24 SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), 0,3% iPA, 55% СО2, 45% iPrOH Соед. 460; (2Р*),цис-2; Пр. В24 Соед. 461; (2R*),транс-1; Пр. В24 SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), 0,3% iPA, 50% СО2, 50% iPrOH Соед. 462; (2R*),транс-2; Пр. В24	SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), 0,3% iPA, 60% СО2, 40% EtOH Соед. 63; (2Р*),цис-1; Пр. В39* Соед. 64; фумарат; (2Р*),цис-2; Пр. В39* .
а Л 0 о χΑ II он XX.....П Г Пу и	CI ό о У.......у.......у X.......Ϊ .......СХ 'УУ' \0 УуУ
Нормальная фаза на SiOH с зернами неправильной формы (20-45 мкм, 450 г MATREX) ; градиент от 97% NH4OH, 3% DCM, 0,1% МеОН до 93% NH4OH, 7% DCM, 0,5% МеОН Соед. 463; (23*),цис-1; Пр. В36 Соед. 464; (23*),цис-2; Пр. В36 Соед. 465; (2S*),транс-3; Пр. В36 SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), 0,3% iPA, 65% СО2, 35% (EtOH 50%, iPrOH 50%) Соед. 466; (2S*),транс-4; Пр. В36	Силикагель, (15-40 мкм, 437 мг), Cyclo/EtOAc 60/40 Соед. 467; (2S*), цис-смесь 45/55; Пр. В37
CI ό о эн 11..... I...... ]....................1 А. А k /ΝΗ УсХУ у^у \0 X/	а Ϊ п | он K/xavALx ΙΧΙΛΙ а^а Αχ X^R ό

- 74 038350

Силикагель, (15-40 мкм, 540 мг), Cyclo/EtOAc 60/40 Соед. 468; (2R*), цис-смесь 60/40; Пр. В37	Силикагель, (15-40 мкм, 400 г) , от Cyclo 100 до Cyclo/EtOAc 90/10 Соед. 469; (2R*), цис; Пр. В39.
а Ϊ п | он ТХХТх А Г (5	CI 1 X1 а................А........ а.......Он ......-............Ν ΐ ¥ о
Силикагель, (15-40 мкм, 400 г), от Cyclo 100 до Cyclo/EtOAc 90/10) Соед. 470; (2S*), цис; Пр. В39.	SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), 0,3% iPA, 50% СО2, 50% (EtOH 50%, iPrOH 50%) Соед. 471; (2S), цис-4; Пр. В16 Соед. 28; (2S), цис-3; Пр. В16*

i

SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), 0,3% iPA, 50% CO₂, 50% (EtOH 50%, iPrOH 50%)

Соед. 27; (2S), цис-3; Пр. B16*

С. Аналитические способы.

С 1. LCMS.

Массу некоторых соединений регистрировали с помощью LCMS (жидкостная хроматография-массспектрометрия). Ниже описаны используемые способы.

Общая процедура А.

HPLC измерения осуществляли с применением системы Alliance НТ 2795 (Waters), содержащей четвертичный насос с дегазатором, автодозатор, диодно-матричный детектор (DAD) и колонку, как указано в соответствующих способах ниже, колонку поддерживают при температуре 30°С. Поток из колонки разделялся для MS-спектрометра. MS-детектор был оснащен источником ионизации электрораспылением. Напряжение капиллярной иглы составляло 3 кВ, а температуру источника поддерживали на уровне 100°С на LCT (времяпролетный масс-спектрометр с интерфейсом Zspray™ от Waters - для способа 1) и 3,15 кВ при 110°С на ZQ™ (простой квадрупольный масс-спектрометр с интерфейсом Zspray™ от Waters - для способов 2 и 3). В качестве газа-распылителя применяли азот. Сбор и обработку данных проводили с помощью системы обработки данных Waters-Micromass MassLynx-Openlynx.

Общая методика В.

LC измерения осуществляли с применением системы UPLC (сверхэффективной жидкостной хроматографии) Acquity (Waters), содержащей бинарный насос с дегазатором, автодозатор, диодно-матричный детектор (DAD) и колонку, как указано в соответствующих способах ниже, колонку поддерживают при температуре 40°С. Поток из колонки направляли на МС-детектор. MS-детектор был оснащен источником ионизации электрораспылением. Напряжение капиллярной иглы составляло 3 кВ, и температуру в Quattro (тройном квадрупольном масс-спектрометре от Waters) поддерживали равной 130°С. В качестве газараспылителя применяли азот. Сбор и обработку данных проводили с помощью системы обработки данных Waters-Micromass MassLynx-Openlynx.

Метод 1.

В дополнение к общей методике А: обращенно-фазовую HPLC проводили на колонке Kromasil C18 (5 мкм, 4,6x150 мм) со скоростью потока 1,0 мл/мин. Использовали три подвижные фазы (подвижная фаза А: 100% 7 мМ ацетат аммония; подвижная фаза В: 100% ацетонитрил; подвижная фаза С: 0,2% муравьиной кислоты+99,8% воды сверхвысокой очистки) использовали для соблюдения условия градиента от 30% А, 40% В и 30% С (удерживание в течение 1 мин) до 100% В за 4 мин, 100% В в течение 5 мин и повторно уравновешивали с исходными условиями в течение 3 мин. Использовали объем вводимой пробы 5 мкл. Напряжение на конусе составляло 20 В для режима положительной и отрицательной ионизации. Масс-спектры получали сканированием от 100 до 900 за 0,8 с с использованием времени задержки 0,08 с между сканированиями.

Метод 2.

В дополнение к общей методике А: обращенно-фазовую HPLC выполняли на колонке X-Bridge C18 (3,5 мкм, 4,6x1000 мм) со скоростью потока 0,8 мл/мин. Две подвижные фазы (подвижная фаза А: 100% 7 мМ ацетат аммония; подвижная фаза В: 100% ацетонитрил); применяли для соблюдения условия градиента от 80% А, 20% В (удерживание в течение 0,5 мин) до 10% А, 90% В в течение 4,5 мин, удержива- 75 038350 ние при 10% А и 90% В в течение 4 мин и повторно уравновешивали с исходными условиями в течение 3 мин. Использовали объем вводимой пробы 10 мкл. Напряжение на конусе составляло 20 В для режима положительной и отрицательной ионизации. Масс-спектры получали сканированием от 100 до 1000 за

0,4 с с использованием времени задержки 0,3 с между сканированиями.

Метод 3.

В дополнение к общей методике А: обращенно-фазовую HPLC проводили на колонке Sunfire C18 (3,5 мкм, 4,6x100 мм) со скоростью потока 0,8 мл/мин. Две подвижные фазы (подвижная фаза А: 35% 6,5 мМ ацетат аммония+30% ацетонитрил+35% муравьиная кислота (2 мл/л); подвижная фаза В: 100% ацетонитрил) использовали для соблюдения условия градиента от 100% А (удерживание в течение 1 мин) до 100% В в течение 4 мин, удерживание при 100% В при скорости потока 1,2 мл/мин в течение 4 мин и повторно уравновешивали с исходными условиями в течение 3 мин. Использовали объем вводимой пробы 10 мкл. Режим положительной ионизации использовали с четырьмя различными напряжениями на конусе (20, 40, 50, 55 В). Масс-спектры получали сканированием от 100 до 1000 за 0,4 с с использованием времени задержки 0,1 с между сканированиями.

Метод 4.

В дополнение к общей методике В: обращенно-фазовую UPLC проводили на колонке Waters Acquity ВЕН (мостиковый гибрид этилсилоксана/силикагеля) С18 (1,7 мкм, 2,1x100 мм) со скоростью потока 0,35 мл/мин. Две подвижные фазы (подвижная фаза А: 95% 7 мМ ацетат аммония/5% ацетонитрил; подвижная фаза В: 100% ацетонитрил) использовали для выполнения условия градиента от 90% А и 10% В (удерживание в течение 0,5 мин) до 8% А и 92% В, удерживание в течение 2 мин и возвращение к начальным условиям через 0,5 мин, удерживание в течение 1,5 мин. Использовали объем вводимой пробы 2 мкл. Напряжение на конусе составляло 20 В для режима положительной и отрицательной ионизации. Масс-спектры получали сканированием от 100 до 1000 за 0,2 с с использованием времени задержки 0,1 с между сканированиями.

Метод 5.

В дополнение к общей методике В: обращенно-фазовую UPLC проводили на колонке Waters Acquity ВЕН (мостиковый гибрид этилсилоксана/силикагеля) С18 (1,7 мкм, 2,1x100 мм) со скоростью потока 0,35 мл/мин. Две подвижные фазы (подвижная фаза А: 95% 7 мМ ацетат аммония/5% ацетонитрил; подвижная фаза В: 100% ацетонитрил) использовали для выполнения условия градиента от 90% А и 10% В (удерживание в течение 0,5 мин) до 8% А и 92% В, удерживание в течение 2 мин, и возвращение к начальным условиям через 0,5 мин, удерживание в течение 1,5 мин. Использовали объем вводимой пробы 2 мкл. Напряжения на конусе составляли 20, 30, 45, 60 В для режима положительной ионизации. Массспектры получали сканированием от 100 до 1000 за 0,2 с с использованием времени задержки 0,1 с между сканированиями.

Метод 6.

В дополнение к общей методике В: обращенно-фазовую UPLC проводили на колонке Thermo Hypersil Gold C18 (1,9 мкм, 2,1x100 мм) со скоростью потока 0,40 мл/мин. Две подвижные фазы (подвижная фаза А: 95% 7 мМ ацетат аммония/5% ацетонитрил; подвижная фаза В: 100% ацетонитрил) использовали для выполнения условия градиента от 72% А и 28% В (удерживание в течение 0,5 мин) до 8% А и 92% В за 3,5 мин, удерживание в течение 2 мин и возвращение к начальным условиям через 0,5 мин, удерживание в течение 1,5 мин. Использовали объем вводимой пробы 2 мкл. Напряжение на конусе составляло 20 В для режима положительной и отрицательной ионизации. Масс-спектры получали сканированием от 100 до 1000 за 0,2 с с использованием времени задержки 0,1 с между сканированиями.

Метод 7.

В дополнение к общей методике В: обращенно-фазовую UPLC проводили на колонке Thermo Hypersil Gold C18 (1,9 мкм, 2,1x100 мм) со скоростью потока 0,40 мл/мин. Две подвижные фазы (подвижная фаза А: 95% 7 мМ ацетат аммония/5% ацетонитрил; подвижная фаза В: 100% ацетонитрил) использовали для выполнения условия градиента от 72% А и 28% В (удерживание в течение 0,5 мин) до 8% А и 92% В за 3,5 мин, удерживание в течение 2 мин и возвращение к начальным условиям через 0,5 мин, удерживание в течение 1,5 мин. Использовали объем вводимой пробы 2 мкл. Напряжения на конусе составляли 20, 30, 45, 60 В для режима положительной ионизации. Масс-спектры получали сканированием от 100 до 1000 за 0,2 с с использованием времени задержки 0,1 с между сканированиями.

Метод 8.

В дополнение к общей методике В: обращенно-фазовую UPLC проводили на колонке Thermo Hypersil Gold C18 (1,9 мкм, 2,1x100 мм) со скоростью потока 0,50 мл/мин. Две подвижные фазы (подвижная фаза А: 95% 7 мМ ацетат аммония/5% ацетонитрил; подвижная фаза В: 100% ацетонитрил) использовали для выполнения условия градиента от 40% А и 60% В (удерживание в течение 0,5 мин до 5% А и 92% В за 3,5 мин, удерживание в течение 2 мин, и возвращение к начальным условиям через 0,5 мин, удерживание в течение 1,5 мин. Использовали объем вводимой пробы 2 мкл. Напряжение на конусе составляло 20 В для режима положительной и отрицательной ионизации. Масс-спектры получали сканированием от 100 до 1000 за 0,2 с с использованием времени задержки 0,1 с между сканированиями.

- 76 038350

Метод 9.

В дополнение к общей методике В: обращенно-фазовую UPLC выполняли на колонке Waters HSS (высокопрочный диоксид кремния) С18 (1,8 мкм, 2,1x100 мм) со скоростью потока 0,40 мл/мин. Две подвижные фазы (подвижная фаза А: 95% 7 мМ ацетат аммония/5% ацетонитрил; подвижная фаза В: 100% ацетонитрил) использовали для выполнения условия градиента от 72% А и 28% В (удерживание в течение 0,5 мин) до 8% А и 92% В за 3,5 мин, удерживание в течение 2 мин и возвращение к начальным условиям через 0,5 мин, удерживание в течение 1,5 мин. Использовали объем вводимой пробы 2 мкл. Напряжение на конусе составляло 20 В для режима положительной и отрицательной ионизации. Массспектры получали сканированием от 100 до 1000 за 0,2 с с использованием времени задержки 0,1 с между сканированиями.

Метод 10.

В дополнение к общей методике В: обращенно-фазовую UPLC выполняли на колонке Waters HSS (высокопрочный диоксид кремния) С18 (1,8 мкм, 2,1x100 мм) со скоростью потока 0,40 мл/мин. Две подвижные фазы (подвижная фаза А: 95% 7 мМ ацетат аммония/5% ацетонитрил; подвижная фаза В: 100% ацетонитрил) использовали для выполнения условия градиента от 50% А и 50% В (удерживание в течение 0,5 мин) до 3% А и 92% В за 3,5 мин, удерживание в течение 4,5 мин и возвращение к начальным условиям через 0,5 мин, удерживание в течение 1,0 мин. Использовали объем вводимой пробы 2 мкл. Напряжение на конусе составляло 20 В для режима положительной и отрицательной ионизации. Массспектры получали сканированием от 100 до 1000 за 0,2 с с использованием времени задержки 0,1 с между сканированиями.

Если соединение является смесью изомеров, которые дают различные пики в способе LCMS, то в таблице LCMS приводится только время удерживания основного компонента.

В следующей таблице данные LCMS приводятся как (МН⁺), протонированный молекулярный ион (свободного основания), и время удерживания (Rt, в минутах).

С2. Оптическое вращение.

Оптическое вращение измеряли с использованием поляриметра.

[a]D указывает на оптическое вращение, измеренное со светом при длине волны D-линии натрия (589 нм) при температуре 20°С. Длина оптического пути кюветы составляет 1 дм. Далее указаны [a]_D ²⁰ значения температуры, концентрации и растворителя раствора, использованного для измерения оптического вращения.

С3. Точки плавления.

Для некоторых соединений точки плавления получали с помощью столика Кофлера, состоящего из нагреваемой пластины с линейным температурным градиентом, скользящего указателя и температурной шкалы в градусах Цельсия.

Таблица 2

№	Оптическое вращение [a]D 20	Тпл (°C) (Kofler)	Вр. уд.	(МН+)	LCMS способ
25		154	5, 91	567	1
26		238	5, 77	567	1
68			5, 67	629	3
69			5, 47	629	3
70	+116,21° (589 нм, с 0,3485% масса/объем, DMF, 20°С)	112	4,53	553	5
31	-210,78° (589 нм, с 0,3525% масса/объем, DMF, 20°С)	183	4,21	553	9
71	-133,33° (589 нм, с 0,3075% масса/объем, DMF, 20°С)	138	4,49	553	5
32	+132,57° (589 нм, с 0,307% масса/объем, DMF, 20°С)		4,5	553	5
72	+ 92,09° (589 нм, с 0,493% масса/объем, DMF, 20°С)		3,56	519	7
73	-104,74° (589 нм, с 0,2635% масса/объем, DMF, 20°С)		3,48	519	7
74	-226, 18° (589 нм, с 0,3935% масса/объем, DMF, 20°С)	157	3,59	519	7

- 77 038350

75		192	5, 4	641	7
76		148	5,36	641	7
77	-108,52° (589 нм, с 0,399% масса/объем, DMF, 20°С)	155	4,21	553	6
78	+132,15° (589 нм, с 0,311% масса/объем, DMF, 20°С)	130	4,18	553	6
79	-141,91° (589 нм, с 0,241% масса/объем, DMF, 20°С)		4,14	551	6
33	+232,66° (589 нм, с 0,297% масса/объем, DMF, 20°С)	177	4,28	551	6
80			3, 95	550	4
81		233	3, 02	537	6
82		230	4,11	565	6
83		219	4,08	567	6
19			3, 68	473	6
84		238	3,34	551	6
17			4,77	567	6
35	+77,49° (589 нм, с 0,422% масса/объем, DMF, 20°С)	145	4, 6	553	6
34	-188,97° (589 нм, с 0,435% масса/объем, DMF, 20°С)	152	4,71	553	6
85		>260	3, 19	539	6
86		>260	3,54	539	6
87		227	5, 08	569	6
88		194	5, 91	569	4
89			4,75	569	6
36		120	3, 6	550	6
15		220	3,74	550	6
90	+ 123,45° (589 нм, DMF, 20°С)	140	4,26	519	6
91	-312,78° (589 нм, DMF, 20°С)	214	4,42	519	6
92	-168,5° (589 нм, DMF, 20°С)	114	4,4	519	6
93	+ 170,91° (589 нм, DMF, 20°С)	>250	4,44	519	6
37		107	3, 91	507	9
94		168	4, 61	507	6
95	+ 67,75° (589 нм, с 0,276% масса/объем, DMF, 20°С)		5, 02	507	4
96		114	3, 88	507	9
97		120	1, 12	551	8
38		130	3, 02	551	9
98	+ 175, 98° (589 нм, с 0,358% масса/объем, DMF, 20°С)		4,58	565	6
99	-277,47° (589 нм, с 0,435% масса/объем, DMF, 20°С)	214	4, 61	565	6
100	-172,22° (589 нм, с 0,36% масса/объем, DMF, 20°С)	143	4, 65	565	6
101			3,71	565	9
102		145	3, 04	597	9
103		135	2,8	597	9
104	+77,22° (589 нм, с 0,259% масса/объем, DMF, 20°С)	160	4, 65	571	9
105	-200,57° (589 нм, с 0,348% масса/объем, DMF, 20°С)	149	4,57	571	9
106	+7,14° (589 нм, с 0,364% масса/объем, DMF, 20°С)	>250	3, 92	557	4
107			4,24	555	4
7	+78,57° (589 нм, с 0,224% масса/объем, DMF, 20°С)		3, 96	557	4
108	+129,48° (589 нм, с 0,363% масса/объем, DMF, 20°С)		4,57	571	9

- 78 038350

109			3, 83	575	4
110	-59, 06° (589 нм, с 0,254% масса/объем, DMF, 20°С)		3, 95	557	4
111	+185,84° (589 нм, с 0,353% масса/объем, DMF, 20°С)	111	5, 05	589	4
39	-115,3° (589 нм, с 0,3365% масса/объем, DMF, 20°С)	106	4,98	589	4
112	+78,52° (589 нм, с 0,284% масса/объем, DMF, 20°С)	124	5, 24	589	4
113	-178,74° (589 нм, с 0,334% масса/объем, DMF, 20°С)	130	5, 07	589	4
114			3, 9	553	9
115			4,39	542	4
116		153	4,26	544	4
41			3, 9	553	9
117			3, 82	553	9
118			2,48	517	4
119		215	1,76	537	9
120	-109,96° (589 нм, с 0,281% масса/объем, DMF, 20°С)		5, 33	537	2
121		>260	3, 93	539	4
122		>260	3, 96	539	4
123	-182,89° (589 нм, с 0,339% масса/объем, DMF, 20°С)	210	3,33	477	9
11	+189,15° (589 нм, с 0,3225% масса/объем, DMF, 20°С)	143	3,34	477	9
124	-203,73° (589 нм, с 0,295% масса/объем, DMF, 20°С)	164	3,32	477	9
125	+183° (589 нм, с 0,3235% масса/объем, DMF, 20°С)	210	3,32	477	9
126		>260	2,96	575	9
127		>260	3, 09	575	9
40	+48,62° (589 нм, с 0,3435% масса/объем, DMF, 20°С)	224	3,74	575	4
128			3, 84	539	4
129		240	3,39	463	4
130		200	3,44	463	4
131		241	3,45	463	4
132		244	3,39	463	4

-57,52°

- 79 038350

152		170	4, 65	571	9
153	+ 63,31° (589 нм, с 0,387% масса/объем, DMF, 20°С)	183	2,54	503	4
154	+ 63, 19° (589 нм, с 0,288% масса/объем, DMF, 20°С)	250	2,94	503	4
155	-67,85° (589 нм, с 0,3095% масса/объем, DMF, 20°С)	194	2, 65	503	4
156	-128,4° (589 нм, с 0,3715% масса/объем, DMF, 20°С)	254	2,94	503	4
157	+85,21° (589 нм, с 0,311% масса/объем, DMF, 20°С)	100	2,28	517	9
158	-202,71° (589 нм, с 0,295% масса/объем, DMF, 20°С)	198	2,53	517	9
159		>250	3, 05	555	4
42		>250	3,44	555	4
160		>250	3, 99	523	4
161		>250	3, 8	523	4
162		>250	3,78	523	4
163			4,24	537	9
164		170	4,55	537	9
165		168	4,57	537	9
166		168	5, 01	537	4
167			3,74	503	9
168		169	3,79	503	9
169		169	4,15	503	9
170		176	4,1	503	9
171		161	3,29	569	9
172		170	3, 11	569	9
173			4,7	571	9
174		171	3,79	523	4
175		194	4,05	523	4
176		192	3,78	523	4
177		>250	4,01	523	4
178		>250	3,7	489	4
179		>250	3,52	489	4
180		186	3,75	489	4
181		173	3,52	489	4
182	-5,55° (589 нм, с 0,3605% масса/объем, DMF, 20°С)	>250	3,58	489	4
183	-93, 86° (589 нм, с 0,3175% масса/объем, DMF, 20°С)	>250	3,72	489	4
184		172	2,71	535	9
185		162	3, 17	535	9
186		166	2,88	535	9
187		167	3, 1	535	9
188	-129,97° (589 нм, с 0,397% масса/объем, DMF, 20°С)		3, 99	555	9
189	+286,5° (589 нм, с 0,4185% масса/объем, DMF, 20°С)	160	3, 95	555	9
190	+143,71° (589 нм, с 0,318% масса/объем, DMF, 20°С)		4	555	9
191	-281,85° (589 нм, с 0,336% масса/объем, DMF, 20°С)	162	3, 94	555	9
192	-16,33° (589 нм, с 0,3735% масса/объем, DMF, 20°С)	>250	3, 69	523	4
43	-94,13° (589 нм, с 0,4685% масса/объем, DMF, 20°С)	>250	3, 84	523	4
193	+23,43° (589 нм, с 0,397% масса/объем, DMF, 20°С)	147	4,18	537	9
61	-153,89° (589 нм, с 0,3535% масса/объем, DMF, 20°С)	141	4,06	537	9

- 80 038350

194	+109,12° (589 нм, с 0,34% масса/объем, DMF, 20°С)	149	4,42	537	9
195	+ 50,76° (589 нм, с 0,461% масса/объем, DMF, 20°С)	153	3, 8	503	9
196	+163,61° (589 нм, с 0,2995% масса/объем, DMF, 20°С)		4,11	503	9
197	-195,04° (589 нм, с 0,282% масса/объем, DMF, 20°С)	138	3,78	503	9
198	-173,72° (589 нм, с 0,293% масса/объем, DMF, 20°С)	187	4,16	503	9
199	-61,7° (589 нм, с 0,4895% масса/объем, DMF, 20°С)	192	3, 13	569	9
200	+171,12° (589 нм, с 0,4225% масса/объем, DMF, 20°С)	187	3,34	569	9
201	+130,34° (589 нм, с 0,267% масса/объем, DMF, 20°С)	195	3,52	569	9
202	-131,7° (589 нм, с 0,265% масса/объем, DMF, 20°С)	186	3, 61	569	9
203	-72,45° (589 нм, с 0,363% масса/объем, DMF, 20°С)	>250	3,7	541	4
204	+38,18° (589 нм, с 0,4165% масса/объем, DMF, 20°С)	>250	3, 93	541	4
205	-53,25° (589 нм, с 0,4% масса/объем, DMF, 20°С)	>250	2,98	573	4
206	+31,72° (589 нм, с 0,476% масса/объем, DMF, 20°С)	245	3, 13	573	4
207	-73,96° (589 нм, с 0,3975% масса/объем, DMF, 20°С)	>250	3,39	573	4
208	+38,88° (589 нм, с 0,2855% масса/объем, DMF, 20°С)	>250	3,31	573	4
209	+111,67° (589 нм, с 0,3385% масса/объем, DMF, 20°С)		2,98	587	9
210	-180,75° (589 нм, с 0,3325% масса/объем, DMF, 20°С)		3, 04	587	9
211	-113,84° (589 нм, с 0,419% масса/объем, DMF, 20°С)	150	2,98	587	9
212	+71,23° (589 нм, с 0,2485% масса/объем, DMF, 20°С)	>250	3,39	573	4
213	-27,33° (589 нм, с 0,3% масса/объем, DMF, 20°С)		3, 12	573	4
214	+ 58,16° (589 нм, с 0,392% масса/объем, DMF, 20°С)	213	2,99	573	4
215	-43,95° (589 нм, с 0,43% масса/объем, DMF, 20°С)		3,29	573	4
44	+ 46,5° (589 нм, с 0,329% масса/объем, DMF, 20°С)	148	3, 12	569	9
45	-162,08° (589 нм, с 0,327% масса/объем, DMF, 20°С)	160	3,3	569	9
46	+126,22° (589 нм, с 0,286% масса/объем, DMF, 20°С)	145	3, 6	569	9
47	-141,92° (589 нм, с 0,291% масса/объем, DMF, 20°С)	174	3,51	569	9
216	-164,98° (589 нм, с 0,277% масса/объем, DMF, 20°С)	152	3,53	569	9

- 81 038350

217	-169,84° (589 нм, с 0,368% масса/объем, DMF, 20°С)	169	3,35	569	9
218	+66,54° (589 нм, с 0,272% масса/объем, DMF, 20°С)	174	3, 13	569	9
219	+ 105, 06° (589 нм, с 0,336% масса/объем, DMF, 20°С)	156	3, 61	569	9
220	-27,88° (589 нм, с 0,452% масса/объем, DMF, 20°С)	>250	3, 09	555	4
221	+33,44° (589 нм, с 0,311% масса/объем, DMF, 20°С)	>250	3,49	555	4
222	+30,1° (589 нм, с 0,4485% масса/объем, DMF, 20°С)	>250	3, 08	555	4
223	+72,28° (589 нм, с 0,368% масса/объем, DMF, 20°С)	>250	3, 09	555	4
224	-95,7° (589 нм, с 0,3835% масса/объем, DMF, 20°С)	>250	3,46	555	4
225	-25, 06° (589 нм, с 0,423% масса/объем, DMF, 20°С)	>250	3, 07	555	4
226	+198,48° (589 нм, с 0,394% масса/объем, DMF, 20°С)	221	3, 91	571	9
227	-41,67° (589 нм, с 0,312% масса/объем, DMF, 20°С)	196	4,08	572	9
48	-207,64° (589 нм, с 0,275% масса/объем, DMF, 20°С)	221	3, 88	571	9
228	+ 41,36° (589 нм, с 0,295% масса/объем, DMF, 20°С)	196	4, 1	571	9
49		183	4,09	557	4
229	-114,24° (589 нм, с 0,344% масса/объем, DMF, 20°С)	>250	3, 92	557	4
230	-32,93° (589 нм, с 0,1154% масса/объем, DMF, 20°С)	>250	3, 82	491	4
231	+107,46° (589 нм, с 0,228% масса/объем, DMF, 20°С)	>250	3, 92	491	4
232	+19,57° (589 нм, с 0,1022% масса/объем, DMF, 20°С)	>250	3, 64	491	4
233	+ 25, 99° (589 нм, с 0,277% масса/объем, DMF, 20°С)	>250	3, 82	491	4
234	-29,57° (589 нм, с 0,1116% масса/объем, DMF, 20°С)	>250	3, 64	491	4
235	-46,73° (589 нм, с 0,0749% масса/объем, DMF, 20°С)	>250	3,4	491	4
236		>250	3, 06	520	4
237	-100,34° (589 нм, с 0,294% масса/объем, DMF, 20°С)	>250	3, 16	521	4
238	-38,06° (589 нм, с 0,31% масса/объем, DMF, 20°С)	>250	2, 81	521	4
239		>250	3, 94	493	4
5		>250	3, 93	103	4
240		>250	3, 67	493	4
241		>250	3, 78	493	4
242	+ 235, 76° (589 нм, с 0,302% масса/объем, DMF, 20°С)		4,3	537	9
243	-89,78° (589 нм, с 0,186% масса/объем, DMF, 20°С)	140	3, 16	553	9
244	+217,8° (589 нм, с 0,337% масса/объем, DMF, 20°С)	205	4,58	537	9

- 82 038350

245	-98,05° (589 нм, с 0,257% масса/объем, DMF, 20°С)	147	4,28	537	9
246		100	2,38	468	4
247	+144,41° (589 нм, с 0,286% масса/объем, DMF, 20°С)	132	4,05	537	9
248	-53,47° (589 нм, с 0,303% масса/объем, DMF, 20°С)	134	4,16	537	9
249	+136,02° (589 нм, с 0,2485% масса/объем, DMF, 20°С)	178	4,2	537	9
250	-148,58° (589 нм, с 0,2645% масса/объем, DMF, 20°С)	125	4,42	537	9
251	+115,43° (589 нм, с 0,324% масса/объем, DMF, 20°С)	183	3, 08	535	9
252	-35,99° (589 нм, с 0,439% масса/объем, DMF, 20°С)	152	2,71	535	9
253	+136,81° (589 нм, с 0,432% масса/объем, DMF, 20°С)	167	2,88	535	9
254	+40,58° (589 нм, с 0,067% масса/объем, DMF, 20°С)	>250	3,54	545	4
255	-42,8° (589 нм, с 0,0514% масса/объем, DMF, 20°С)	>250	4	545	4
256	+153,1° (589 нм, с 0,258% масса/объем, DMF, 20°С)	118	4, 63	559	9
257	-181,51° (589 нм, с 0,292% масса/объем, DMF, 20°С)	108	4,57	559	9
6		>250	3, 94	545	4
258	-64,24° (589 нм, с 0,0576% масса/объем, DMF, 20°С)	>250	3,58	545	4
259	+ 186, 75° (589 нм, с 0,302% масса/объем, DMF, 20°С)	168	4, 63	559	9
260	+154,66° (589 нм, с 0,247% масса/объем, DMF, 20°С)	104	3,7	537	9
261	+298,07° (589 нм, с 0,2845% масса/объем, DMF, 20°С)	122	3, 81	537	9
262	-142,69° (589 нм, с 0,253% масса/объем, DMF, 20°С)	94	3, 83	537	9
263	+35,09° (589 нм, с 0,2565% масса/объем, DMF, 20°С)	>250	2, 61	521	4

264	+30,18° (589 нм, с 0,275% масса/объем, DMF, 20°С)	>250	3, 02	521	4
265	+98,69° (589 нм, с 0,306% масса/объем, DMF, 20°С)	>250	2,94	521	4
266	+ 10,59° (589 нм, с 0,34% масса/объем, DMF, 20°С)	>250	3,5	523	4
267	+28,99° (589 нм, с 0,276% масса/объем, DMF, 20°С)	>250	3,86	539	4
268	+98,19° (589 нм, с 0,3035% масса/объем, DMF, 20°С)	>250	3,72	523	4
269	-67,05° (589 нм, с 0,349% масса/объем, DMF, 20°С)	>250	2,94	555	4
270	-43,13° (589 нм, с 0,2365% масса/объем, DMF, 20°С)	>250	3,29	555	4
271	-105,62° (589 нм, с 0,267% масса/объем, DMF, 20°С)	>250	3, 19	555	4
272	-36, 69° (589 нм, с 0,357% масса/объем, DMF, 20°С)	>250	2,85	555	4

- 83 038350

273	-206,07° (589 нм, с 0,2635% масса/объем, DMF, 20°С)	204	4,58	537	9
274			4,56	537	9
275	+95,58° (589 нм, с 0,407% масса/объем, DMF, 20°С)	140	4,26	537	9
276	-246, 45° (589 нм, с 0,31% масса/объем, DMF, 20°С)		4,29	537	9
277	-96,53° (589 нм, с 0,259% масса/объем, DMF, 20°С)	>250	3,73	523	4
278	-16,47° (589 нм, с 0,3035% масса/объем, DMF, 20°С)	>250	3,51	523	4
279		>250	3,37	523	4
280	+91,43° (589 нм, с 0,28% масса/объем, DMF, 20°С)	>250	3,49	523	4
281	+42,67° (589 нм, с 0,3% масса/объем, DMF, 20°С)	>250	3,5	523	4
282	-78,27° (589 нм, с 0,382% масса/объем, DMF, 20°С)	206	3,35	523	4
283	+54,55° (589 нм, с 0,297% масса/объем, DMF, 20°С)	184	3, 84	537	9
284	-180,15° (589 нм, с 0,393% масса/объем, DMF, 20°С)	163	3,73	537	9
285	-57,81° (589 нм, с 0,384% масса/объем, DMF, 20°С)	184	3,78	537	9
286	+190,64° (589 нм, с 0,299% масса/объем, DMF, 20°С)	177	3,74	537	9
287	+255,83° (589 нм, с 0,283% масса/объем, DMF, 20°С)	185	4,26	525	9
288	-139,37° (589 нм, с 0,287% масса/объем, DMF, 20°С)	150	4,2	525	9
289	+139,65° (589 нм, с 0,401% масса/объем, DMF, 20°С)	150	4,18	525	9
290	-253,69° (589 нм, с 0,298% масса/объем, DMF, 20°С)	185	4,29	525	9
291	+34,21° (589 нм, с 0,342% масса/объем, DMF, 20°С)	150	2,91	569	9
292	-172,52° (589 нм, с 0,262% масса/объем, DMF, 20°С)	150	2,97	610	9
293	-31,14° (589 нм, с 0,411% масса/объем, DMF, 20°С)	150	2,9	569	9
294	+175,47° (589 нм, с 0,322% масса/объем, DMF, 20°С)	150	2,96	610	9
295	+61,22° (589 нм, с 0,294% масса/объем, DMF, 20°С)	>250	3,49	511	4
296	-42,04° (589 нм, с 0,3235% масса/объем, DMF, 20°С)	>250	3, 88	511	4
297	+35,65° (589 нм, с 0,2805% масса/объем, DMF, 20°С)	>250	3, 88	511	4
298	-61,26° (589 нм, с 0,302% масса/объем, DMF, 20°С)	>250	3,49	511	4
299	+206,14° (589 нм, с 0,342% масса/объем, DMF, 20°С)	110	3,76	537	9
300	+185,42° (589 нм, с 0,295% масса/объем, DMF, 20°С)	90	3, 87	537	9

- 84 038350

301	-233,7° (589 нм, с 0,3175% масса/объем, DMF, 20°С)	170	3, 8	537	9
302	-118,37° (589 нм, с 0,283% масса/объем, DMF, 20°С)	120	3,72	537	9
303		>250	3,78	511	4
304		>250	3,59	511	4
305	+80,67° (589 нм, с 0,269% масса/объем, DMF, 20°С)	133	2,95	587	9
306	-75, 99° (589 нм, с 0,2645% масса/объем, DMF, 20°С)	157	3, 06	587	9
307	+ 50,35° (589 нм, с 0,286% масса/объем, DMF, 20°С)	232	2,76	573	4
308	-31,76° (589 нм, с 0,2645% масса/объем, DMF, 20°С)	>260	3, 08	573	4
309	+85,04° (589 нм, с 0,254% масса/объем, DMF, 20°С)	>260	3,42	541	4
310	-30,37° (589 нм, с 0,349% масса/объем, DMF, 20°С)	126	3,59	541	4
311	-45,25° (589 нм, с 0,263% масса/объем, DMF, 20°С)	>260	3,46	541	4
312		>260	3,57	541	4
313	+100° (589 нм, с 0,25% масса/объем, DMF, 20°С)	147	4,34	589	9
51	-101,43° (589 нм, с 0,28% масса/объем, DMF, 20°С)	176	4,35	589	9
314	+ 39, 29° (589 нм, с 0,3385% масса/объем, DMF, 20°С)	234	3, 69	575	4
315	-69, 76° (589 нм, с 0,3125% масса/объем, DMF, 20°С)	>260	3,54	575	4
316	+45,65° (589 нм, с 0,23% масса/объем, DMF, 20°С)	>260	3,57	575	4
317		>260	3, 68	575	4
50	+109,94° (589 нм, с 0,322% масса/объем, DMF, 20°С)	208	4,01	555	9
318	-243,94° (589 нм, с 0,264% масса/объем, DMF, 20°С)	133	4,03	555	9
1	-153,8° (589 нм, с 0,342% масса/объем, DMF, 20°С)		4,79	525	9
2	+ 76, 76° (589 нм, с 0,37% масса/объем, DMF, 20°С)	126	4,53	525	9
3	-182,79° (589 нм, с 0,3835% масса/объем, DMF, 20°С)	146	4,5	525	9
4	+140,04° (589 нм, с 0,2835% масса/объем, DMF, 20°С)		4,76	525	9
319	+103,95° (589 нм, с 0,329% масса/объем, DMF, 20°С)	169	4,36	589	9
320	-188,97° (589 нм, с 0,3625% масса/объем, DMF, 20°С)	159	4,34	589	9
321	+ 70,56° (589 нм, с 0, 3685% масса/объем, DMF, 20°С)	>260	3,55	575	4
322	-37,96° (589 нм, с 0, 3925% масса/объем, DMF, 20°С)	248	3,71	575	4
323	-46, 53° (589 нм, с 0,303% масса/объем, DMF, 20°С)	>260	3,57	575	4

- 85 038350

324	+83,03° (589 нм, с 0,2505% масса/объем, DMF, 20°С)	>260	3, 69	575	4
325	-73,27° (589 нм, с 0,318% масса/объем, DMF, 20°С)	144	2,96	587	9
326	+71,7° (589 нм, с 0,3975% масса/объем, DMF, 20°С)	166	3, 07	587	9
327	-52,79° (589 нм, с 0,3675% масса/объем, DMF, 20°С)	248	2,76	573	4
328	+29,8° (589 нм, с 0,2685% масса/объем, DMF, 20°С)	>260	3, 08	573	4
329	+41,8° (589 нм, с 0,244% масса/объем, DMF, 20°С)	>260	3,46	541	4
330	+ 28,89° (589 нм, с 0,27% масса/объем, DMF, 20°С)	170	4,07	509	9
331	-89,4° (589 нм, с 0,3255% масса/объем, DMF, 20°С)	166	4,08	509	9
332	-89,97° (589 нм, с 0,289% масса/объем, DMF, 20°С)	164	4,39	509	9
333	-37° (589 нм, с 0,327% масса/объем, DMF, 20°С)		3,4	523	4
334	+69,77° (589 нм, с 0,354% масса/объем, DMF, 20°С)	232	3,38	523	4
335	Вращение: 0	180	3, 62	226	4
336	+84,24° (589 нм, с 0,311% масса/объем, DMF, 20°С)		3,54	557	4
337	+121,82° (589 нм, с 0,307% масса/объем, DMF, 20°С)	186	4,01	571	9
338	+228,63° (589 нм, с 0,255% масса/объем, DMF, 20°С)	198	4,15	571	9
339		176	4,03	571	9
340	-121,01° (589 нм, с 0,276% масса/объем, DMF, 20°С)	132	4,17	571	9
341	+ 35, 29° (589 нм, с 0, 136% масса/объем, DMF, 20°С)	>260	3, 66	557	4
342	-66, 76° (589 нм, с 0,3655% масса/объем, DMF, 20°С)	>260	3,49	557	4
343		>250	3,42	511	4
344		>250	3,59	511	4
345	+ 66,41° (589 нм, с 0,262% масса/объем, DMF, 20°С)	152-154	3, 92	525	9
346	+120,83° (589 нм, с 0,36% масса/объем, DMF, 20°С)	151-153	4,02	525	9
347	-117,61° (589 нм, с 0,301% масса/объем, DMF, 20°С)	148-150	3, 93	525	9
348	-98,33° (589 нм, с 0,3% масса/объем, DMF, 20°С)	145	4,06	525	9
349		>250	3,57	523	4
350		>250	3,7	523	4
351		128-130	4,39	537	9
352		123-125	4,23	537	9
353		166-168	4, 63	537	9
354		168-170	4,49	537	9
355	-225,37° (589 нм, с 0,339% масса/объем, DMF, 20°С)	190	4,17	571	9
356	+129,45° (589 нм, с 0,2835% масса/объем, DMF, 20°С)	98	4,2	571	9
357		104	4,05	571	9

- 86 038350

358	-110,02° (589 нм, с 0,2945% масса/объем, DMF, 20°С)	138	4,07	571	9
359	+24,72° (589 нм, с 0,267% масса/объем, DMF, 20°С)		3,26	475	4
360	-35,65° (589 нм, с 0,345% масса/объем, DMF, 20°С)		3,33	475	4
361	+40,13° (589 нм, с 0,309% масса/объем, DMF, 20°С)		3,33	475	4
362	-23,46° (589 нм, с 0,2515% масса/объем, DMF, 20°С)		3,26	475	4
363	-40,04° (589 нм, с 0,1124% масса/объем, DMF, 20°С)	>260	3, 61	557	4
364	-34,57° (589 нм, с 0,269% масса/объем, DMF, 20°С)	>260	3,51	557	4
365	+62,08° (589 нм, с 0,3415% масса/объем, DMF, 20°С)	242	3,45	557	4
366		146	3,43	569	9
367		175	3, 03	569	9
368		144	3,29	569	9
369		138	3,71	569	9
52		176	3, 6	491	9
53		102	3,57	491	9
54		209	3,42	491	9
55		120	3,34	491	9
370			3, 63	491	9
371	+ 146,51° (589 нм, с 0,258% масса/объем, DMF, 20°С)	158	3,72	489	9
372	-224,56° (589 нм, с 0,285% масса/объем, DMF, 20°С)	194	3, 81	489	9
373	+226,53° (589 нм, с 0,2865% масса/объем, DMF, 20°С)	193	3, 82	489	9
374	-146,07° (589 нм, с 0,28% масса/объем, DMF, 20°С)	162	3,72	489	9
56	-65,4° (589 нм, с 0,367% масса/объем, DMF, 20°С)		2,77	555	4
57	+121,07° (589 нм, с 0,261% масса/объем, DMF, 20°С)		3, 08	555	4
58	+59,23° (589 нм, с 0,287% масса/объем, DMF, 20°С)		2,87	555	4
59	-70, 18° (589 нм, с 0,285% масса/объем, DMF, 20°С)		3, 11	555	4
375		>250	3, 19	477	4
376		>250	3,42	477	4
377			2,97	555	4
378			3, 1	555	4
60	+245,07° (589 нм, с 0,2685% масса/объем, DMF, 20°С)	161	3, 64	554	9
379	-104,1° (589 нм, с 0,293% масса/объем, DMF, 20°С)		3, 65	554	9
380	+71,83° (589 нм, с 0,284% масса/объем, DMF, 20°С)		3, 67	554	9
381	-228,26° (589 нм, с 0,276% масса/объем, DMF, 20°С)		3, 65	554	9
382	+142,29° (589 нм, с 0,253% масса/объем, DMF, 20°С)		4,53	547	9
383	-267,89° (589 нм, с 0,246% масса/объем, DMF, 20°С)		4,53	547	9
384	-138,01° (589 нм, с 0,271% масса/объем, DMF, 20°С)		4,34	547	9

- 87 038350

385	+168,79° (589 нм, с 0,282% масса/объем, DMF, 20°С)		4,42	547	9
386	-211,7° (589 нм, с 0,2735% масса/объем, DMF, 20°С)	125	3,38	579	9
387	+118,66° (589 нм, с 0,343% масса/объем, DMF, 20°С)	204	3,22	579	9
388	+188,25° (589 нм, с 0,3065% масса/объем, DMF, 20°С)	103	2,92	569	9
389	+ 97,98° (589 нм, с 0,3225% масса/объем, DMF, 20°С)	128	2,76	569	9
390	-112,32° (589 нм, с 0,276% масса/объем, DMF, 20°С)	170	2,81	569	9
391	-131,97° (589 нм, с 0,2925% масса/объем, DMF, 20°С)	120	2,94	569	9
392		162-164	3, 66	503	9
393		159-161	3,55	503	9
394			3,53	457	9
395		150-152	3,45	457	9
62		212	4, 01	457	4
396			4,06	457	4
397		180	3,16	489	4
398			3,36	489	4
399		222-224	3, 68	439	4
400		157	3,7	439	4
401		240	3,7	439	4
402		175-177	3,75	439	4
403		176	4,4	493	9
404		168	4,1	493	9
405		184	4,38	493	9
406		206	3, 84	522	9
407			3, 93	521	9
408		135	3, 67	469	4
409		190	4,34	493	4
410		155	4,24	493	4
411		168	4,21	493	4
412		166	4,34	493	4
413		>250	3, 84	425	4
414		196	3, 84	425	4
415		160	3, 69	425	4
16		166-168	3,4	457	9
416		160-162	3,4	457	9
417		150	2, 64	553	9
418		164-166	3,28	553	9
419		154	3, 01	553	9
420			3, 19	431	9
421			3,24	431	9
422			3,25	431	9
423		174	3,16	431	9
10			2, 61	413	9
424			2, 61	413	9
425		125	2,98	441	9
426		174	3, 1	443	9
427		174	3,51	520	4
428		217	3, 63	520	4
67		245	4,06	509	4
429		>260	4,06	509	4
430		184	4,71	543	9
431		178	4,87	543	9
432		167	4, 67	543	9
13	+99,45° (589 нм, с 0,2735% масса/объем, DMF, 20°С)	162	4, 67	535	9

- 88 038350

14	-87,9° (589 нм, с 0,281% масса/объем, DMF, 20°С)		4, 69	535	9
433		114	3,55	508	9
434		197	3,71	508	9
12	-134,65° (589 нм, с 0,303% масса/объем, DMF, 20°С)	135	3, 8	447	4
435	+132,68° (589 нм, с 0,306% масса/объем, DMF, 20°С)	140	3, 13	447	9
436		135	4,02	535	9
437			4, 62	535	9
29		135	2,29	397	9
30			2,74	431	9
20		232	3, 08	433	4
438		188	3, 69	508	9
439		132	3,52	508	9
440			4,86	543	9
441			4,89	543	9
442		178	4,78	543	9
443		156	3, 05	494	9
444		172	2,93	494	9
445		154	3, 08	494	9
446		210	3, 08	433	4
65		240	2,09	568	9
66		184	2,1	568	9
447		234	2,09	568	9
448		182	2,09	568	9
449	+195,05° (589 нм, с 0,283% масса/объем, DMF, 20°С)	190	3,76	435	9
450	+163,97° (589 нм, с 0,297% масса/объем, DMF, 20°С)	200	3,78	435	9
451	-216,99° (589 нм, с 0, 1825% масса/объем, DMF, 20°С)	110	3, 6	435	9
452	-179, 09° (589 нм, с 0, 1865% масса/объем, DMF, 20°С)	114	3, 68	435	9
453	-160, 6° (589 нм, с 0,302% масса/объем, DMF, 20°С)	210	3,78	435	9
454	-180,34° (589 нм, с 0,295% масса/объем, DMF, 20°С)	186	3,77	435	9
455	+179,5° (589 нм, с 0,161% масса/объем, DMF, 20°С)	118	3, 69	435	9
456	+224,84° (589 нм, с 0,153% масса/объем, DMF, 20°С)	115	3,58	435	9
457		>250	3,35	421	4
458		>250	3,29	421	4
22			4,83	598	10
23			4, 69	598	10
24			4, 68	598	10
459		211	3, 65	587	9
460		197	3, 83	587	9
461		208	3,38	587	9
462		192	3, 6	587	9
63		157	4,24	502	9
64		141	4,25	502	9
463		160	2,57	587	10
464		154	2,8	587	10
465		168	2,19	587	10
466		188	2,49	587	10
467		148	2,19	508	10
468		148	2,2	508	10
469			3,49	523	9
470			3,48	523	9
471			3, 84	494	9
28			3, 83	494	9
27			3,31	460	9

- 89 038350

D. Фармакологические примеры.

D.1. In-vitro способ испытания антибактериальной активности в отношении штамма М. Smegmatis

ATCC607.

Пластиковые стерильные 96-луночные титрационные микропланшеты с плоским дном заполняли 180 мкл стерильной деионизированной воды, обогащенной 0,25% BSA. Затем исходные растворы (7,8хконечная испытуемая концентрация) соединений добавляли в объемах 45 мкл к серии дублирующих лунок в столбце 2 так, чтобы обеспечить оценку их влияния на бактериальный рост. Последовательные пятикратные разведения (45 мкл в 180 мкл) осуществляли непосредственно в титрационных микропланшетах из столбца 2 в 11, используя специализированную роботизированную систему (Zymark Corp., Хопкинтон, Массачусетс). Наконечники микродозаторов заменяли после каждых 3 разведений, чтобы снизить до минимума ошибки дозирования высокогидрофобных соединений. Необработанные контрольные образцы с (столбец 1) и без (столбец 12) инокулята вносили в каждый титрационный микропланшет. Приблизительно 250 КОЕ бактерий на лунку в объеме 100 мкл в 2,8х бульонной среде МюллераХинтона, добавляли в ряды А-Н, за исключением столбца 12. Тот же объем бульонной среды без инокулята вносили в столбец 12 в рядах А-Н. Культуры инкубировали при 37°С в течение 48 ч во влажной атмосфере с 5% СО₂ (инкубатор с открытым воздушным клапаном и непрерывной вентиляцией). В конце инкубирования, через два дня после инокуляции, бактериальный рост количественно оценивали флуорометрией. В связи с этим во все лунки добавляли краситель Alamar Blue (10х) в объеме 20 мкл и планшеты инкубировали еще в течение 2 ч при 50°С.

Флуоресценцию измеряли компьютеризированным флуорометром (Cytofluor, Biosearch) при длине волны возбуждения, равной 530 нм, и длине волны эмиссии, равной 590 нм (прирост 30). Ингибирование роста в процентах, достигнутое при использовании соединений, рассчитывали согласно стандартным способам и выражали в виде IC₉₀ (мкг/мл), которое определяет концентрацию для 90% ингибирования бактериального роста. Результаты показаны в табл. 3.

D.2. In vitro способ испытания антибактериальной активности соединений в отношении штаммов, не являющихся микобактериальными.

Получение бактериальных суспензий для испытания на чувствительность.

Используемые в данном исследовании бактерии выращивали в течение ночи в колбах, содержащих 100 мл бульона Mueller-Hinton (Becton Dickinson - № по кат. 275730) в стерильной деионизированной воде, при встряхивании при 37°С.

Приготовленные растворы (0,5 мл/пробирка) хранили при -70°С до использования. Титрование бактерий проводили в титрационных микропланшетах для определения TCID₅₀, где TCID₅₀ представляет разбавление, которое приводит к бактериальному росту в 50% инокулированных культур.

Для испытания на чувствительность использовали, как правило, концентрацию инокулята приблизительно 100 TCID₅₀.

Испытание на антибактериальную чувствительность.

Определение IC₉₀.

Анализ на титрационном микропланшете.

Пластиковые стерильные 96-луночные титрационные микропланшеты с плоским дном заполняли 180 мкл стерильной деионизированной воды, обогащенной 0,25% BSA. Затем исходные растворы (7,8х конечная испытуемая концентрация) соединений добавляли в объемах 45 мкл к серии дублирующих лунок в столбце 2. Последовательные пятикратные разведения (45 мкл в 180 мкл) осуществляли непосредственно в титрационных микропланшетах из столбца 2, достигая столбца 11. Необработанные контрольные образцы с (столбец 1) и без (столбец 12) инокулята вносили в каждый титрационный микропланшет. В зависимости от типа бактерий приблизительно от 10 до 60 КОЕ бактерий на лунку (100 TCID50) в объеме 100 мкл в 2,8х бульонной среде Мюллера-Хинтона добавляли в ряды А-Н, за исключением столбца 12. Тот же объем бульонной среды без инокулята вносили в столбец 12 в рядах А-Н. Культуры инкубировали при 37°С в течение 24 ч в нормальной атмосфере (инкубатор с открытым воздушным клапаном и непрерывной вентиляцией). В конце инкубирования, через один день после инокуляции, бактериальный рост количественно оценивали флуорометрией. В связи с этим во все лунки через 3 ч после инокуляции добавляли резазурин (0,6 мг/мл) в объеме 20 мкл и планшеты повторно инкубировали в течение ночи. Изменение цвета с синего на розовый указывало на рост бактерий.

Флуоресценцию измеряли компьютеризированным флуорометром (Cytofluor, Biosearch) при длине волны возбуждения, равной 530 нм, и длине волны эмиссии, равной 590 нм. Достигнутый соединениями % ингибирования роста рассчитывали согласно стандартным методам. IC90 (выраженное в мкг/мл) определяли как 90%-ю концентрацию ингибирования бактериального роста. Результаты показаны в табл. 3.

Способ с разведением в агаре.

Значения MIC₉₉ (минимальная концентрация для получения 99% ингибирования бактериального роста) можно определить путем проведения стандартной методики разбавления в агаре согласно стандартам* NCCLS, в которых используемая среда содержит агар Мюллера-Хинтона.

*Clinical laboratory standard institute. 2005. Methods for dilution Antimicrobial susceptibility tests for

- 90 038350 bacteria that grows Aerobically: approved standard-sixth edition.

Анализы зависимости гибели бактерий от времени.

Бактерицидную или бактериостатическую активность соединений можно определить в анализе зависимости гибели бактерий от времени, используя методику микроразведения в бульоне*. В анализе зависимости гибели бактерий от времени со Staphylococcus aureus концентрация исходного инокулята S. aurues составляет 10⁶ КОЕ/мл в бульоне Мюллера-Хинтона. Антибактериальные соединения использовали при концентрации 0,1 до 10-кратной MIC (т.е. IC90, как определено в анализе на титрационном микропланшете). Лунки без антибактериального средства составляли группу для контроля роста культуры. Планшеты, содержащие микроорганизм и испытуемые соединения, инкубировали при 37°С. Через 0, 3, 6 и 24 ч после инкубирования отбирали образцы для определения количества жизнеспособных микроорганизмов последовательным разведением (10^-1-10^-6) в стерильном PBS и нанесением (200 мкл) на агар Мюллера-Хинтона. Планшеты инкубировали при 37°С в течение 24 ч и определяли число колоний. Кривые лизиса можно провести, строя график log10 КОЕ на мл в зависимости от времени. Бактерицидное действие обычно определяют как 3-log₁₀ снижение в единицах КОЕ на мл в сравнении с необработанным инокулятом. Возможный остаточный эффект лекарственных средств устраняли последовательными разведениями и подсчетом колоний при наиболее высоком разведении, используемом для построения графика.

*Zurenko, G.E. et al. In vitro activities of U-100592 and U-100766, novel oxazolidinone antibacterial agents. Antimicrob. Agents Chemother. 40, 839-845 (1996).

Определение уровней клеточного ATP.

Для анализа изменения в общей концентрации клеточного АТР (используя ATP bioluminescence Kit, Roche), анализ проводили путем выращивания культуры S. aureus (ATCC29213) в 100-мл колбах с бульоном Мюллера-Хинтона, и их инкубировали в шейкере-инкубаторе в течение 24 ч при 37°С (300 об/мин). Измеряли OD₄₀₅ и рассчитывали КОЕ/мл. Разбавляли культуры до 1 х 10⁶ КОЕ/мл (конечная концентрация для измерения АТР: 1 х 10⁵ КОЕ/100 мкл на лунку) и добавляли испытуемое соединение при 0,1-10 кратном MIC (т.е. IC₉₀, как определено в анализе на титрационном микропланшете). Инкубировали данные колбы в течение 0,30 и 60 мин при 300 об/мин и 37°С. Использовали 0,6 мл бактериальной суспензии из пробирок с защелкивающимся колпачком и добавляли в новые 2 мл пробирки эппендорф. Добавляли 0,6 мл реагента для лизиса клеток (Roche kit), встряхивали при максимальной скорости и инкубировали в течение 5 мин при комнатной температуре. Охлаждали на льду. Позволяли люминометру нагреться до 30°С (Luminoskan Ascent Labsystems с инжектором). Наполняли одну колонку (=6 лунок) 100 мкл того же образца. Добавляли 100 мкл реагента люциферазы в каждую лунку, используя систему инжекции. Измеряли люминесценцию в течение 1 с.

Таблица 3

Значения IC₉₀ (мкг/мл)

IC90 (мкг/мл)

Номер соединения	STA В29213	SPN 6305	MSM 607
25	>19,87		>19,87
26	>44,79
70	4,38
31	3, 48		1,90
71	4,38
32	3, 48		1,56
72	4, 11
73	4, 11
77	5, 49		4,36
33	3, 48		>3,4 8
80	4,37
81	8,52
82	2, 84		1, 60
19	5, 95		3,76
89	3, 58		1, 80
84	6, 95		5, 52
18	19, 96		10, 00
35	2,76	4,37	2,19
34	3, 48		2,20
85	7,23		3, 62
86	1, 82	4,56	4,07
83	7, 12		3,57
87	3, 58	7, 15	2, 85
36	3, 47		2,19
15	1,74	6, 93	1,38
88	2, 63	8,32	1, 66
90	3, 18	8, 00	3, 18
91	1, 64	4, 63	1, 64

- 91 038350

92	1, 64	6, 54	1,64
93	3, 18	5, 66	2,01
37	1,14		0,90
94	3, 13	4,95	1,76
97	>13,84		13, 84
38	3,48	6, 94	3,48
98	1,78	6, 32	1,12
99	1,78	6, 32	1,42
100	7,09		7,09
109	1,49		1,49
101	3,56	6, 32	1,59
102	3,76	7,50	3,76
103	14,96		14, 96
107	1, 87		2, 65
104	1,80		1,14
106	1,87		<0, 93
7	1,49		0,94
108	2,41		1,36
110	1,87		1,87
105	1,80		0,90
39	1,17	5, 24	0,93
40	3,42	6, 83	1,93
113	2,02	4,04	1,01
112	1, 66	6, 60	0,93
95	2,02		1,43
114	1,75	4,38	0,98
115	3,30	4,16	2,08
116	3,42	6, 83	1,72
41	3,48	6, 95	3,48
117	3,48	5, 52	2,77
118	>20,58		>20,58
119	>16,90		>16,90
121	3, 62	3, 62	3, 62
122	2,88	3, 62	3, 62
11	3, 00		3,00
124	3, 00		3,00
125	3, 00		3,00
126	3, 85		3,06
127	1,93		3,06
128	4,56		3, 62
129	12,52		7,90
130	11, 60		5,81
131	>6, 27		4,98
132			9,21
133	3, 85		3,06
134	3, 07		3,86
120	6,76		5, 37
135	1, 84		1,84
136	2, 08		1,47
137	3, 69		1, 65
138	2,35		1,18
141	7,77		4,37
139	2,00		1,78
140	2,55		0,72
142	3, 06		2,16
143	1,82		2,04
144	3, 63		3,24
145	2,92		2,32
146	2,35		1,87
147	3,39		1,51
148	3,39		1,70
149	5, 63		2,52
150	2, 63		1,66
151	5,26		2,35
152	2,78		1,76
153	>12,63		>12,63
157	>12,98		>12,98
154	>12,63		>12,63

- 92 038350

155	>12,63		>12,63
156	>12,63		11,25
158	>12,98		>12,98
159	>14,69		>14,69
160	3,51		2,48
162	3,52		2,49
42	7,34		2, 60
163	1,70		1,20
164	4,23		2,38
165	5, 10		3, 61
166	3, 09		1,95
161	6, 90		6, 90
167	3, 17		1,26
168	3, 17		1,42
169	4,96		3, 94
170	5, 27		4, 69
171	7,16		5, 69
173	2,86		3,20
174	3,30		3,30
175	2,34		3,30
176	3,30		3,30
177	1,76		2,78
178	6, 15		4,89
179	8, 69		6, 15
180	3, 08		3, 08
181	6, 15		9, 75
172	7,16		3,59
182	6, 60		6, 60
184	13,43		13, 43
185	13,43		8,47
186	9, 51		8,47
187	>13,43		13, 43
188	2,20		2,77
190	1,39		1,76
189	1,76		2,78
191	3, 50		3,50
183	3, 31		3,31
192	7, 00		13, 96
43	3, 48		3,48
193	5, 35		5, 35
61	1, 69		0, 85
194	1, 69		2, 68
195	3, 17		2, 00
196	3, 17		2,52
197	1,59		1,59
198	3, 17		3, 17
199	7, 16		7,16
200	5, 69		5, 69
201	>19,28		>19,28
202	1, 80		2,27
203	10, 80		6, 81
204	3, 63		7,23
205	>15,22		>15,22
209	14,75		14,75
213	>17,31		>17,31
206	>15,08		>15,08
207	3, 83		3, 83
208	7, 60		9, 57
212	7, 60		6, 04
210	1, 86		2,94
211	14,75		7,39
214	>17,57		>17,57
215	13, 66		17,19
44	7, 16		3,59
45	1, 80		1,14
46	3, 59		1, 80
47	14,30		5, 69
216	7, 16		5, 69

217	1,27		0, 90
218	5, 69		2,85
219	3, 59		1,80
220	>14,80		>14,80
221	3, 73		2,96
222	>14,78		>14,78
223	>14,83		>14,83
224	3, 73		5, 92
225	>14,77		>14,77
226	1, 80		0, 90
227	1, 80		2,86
48	0, 90		0,72
228	1, 80		2,86
49	2,25		1,79
229	1, 86		3,31
230	1, 67		1,18
231	3, 30		2, 62
232	6, 65		5, 93
233	1, 67		1,32
234	5, 24		3,71
236	10,26		7,26
237	>13,93		11,06
238	>13,99		>13,99
96	1, 60		1,01
239	1, 67		2,97
5	1, 67		1, 67
240	6, 67		4,21
241	4,72		3,34
242	1,51		1,20
243	2, 14		2,40
244	2,40		1,51
245	1, 91		1,07
246	>11,75		>11,75
247	3, 38		1, 69
248	3, 38		2, 68
249	1, 69		1,07
250	1, 69		1,35
251	13,43		10, 67
252	>13,43		>13,43
253	>13,43		>13,43
235	4, 17		6, 60
254	3, 60		3, 60
256	2,49		2,22
6	1, 83		9, 18
258	3, 66		3, 66
259	1,76		1,40
257	4, 97		3, 14
260	3, 39		3,39
261	1,70		1,70
262	7,59		3,39
263	>13,89		>13,89
264	>13,88		3, 49
265	>13,92		13, 92
266	2,50		2,22
267	1,76		1,40
268	1,76		1,40
269	>14,75		>14,75
270	7,42		5, 89
271	7,42		9, 34
272	>14,78		>14,78
273	3, 39		1,70
274	1, 91		1, 07
275	0, 85		1,35
276	1,70		1,07
277	1,76		1,40
278	1,77		1,40
279	7, 00		7,00
280	1,75		1,10

- 94 038350

281	3,53		7, 03
283	3,39		3, 39
284	4,25		3, 38
285	>13,49		>13,49
286	4,22		2, 12
287	3,31		2, 63
289	4,23		3,36
290	2,35		2, 63
288	4,29		3,41
255	3, 65		7,28
291	7,16		7,16
292	7,16		5, 69
293	7,16		7,16
294	11,36		14,30
295	3,43		3, 43
296	3,43		6, 85
297	3,43		13, 65
298	6,88		6, 88
282	7,02		7, 02
299	1,70		1,35
300	1,07		1,70
301	6,76		6,76
302	2,14		1,35
303	6,88		5, 47
304	3,45		1,73
305	18,76		18,76
307	>15,12		>15,12
50	1,15		1, 15
309	14,50		11,52
310	3, 62		3, 62
313	2,40		1, 91
314	3,05		4, 83
51	2,34		1, 17
315	3,84		3, 84
316	3,84		3, 05
308	7 , 65		6, 08
311	7,24		3, 63
312	3, 62		3, 62
317	1,92		1, 92
306	4,70		4,70
318	1,76		1,76
1	3,32		1, 66
2	13,20		13,20
3	0,83		0, 83
4	2,63		2, 09
319	2,40		2,40
320	3,71		2, 95
321	15, 33		12,18
322	2,43		3, 85
323	7 , 68		6, 10
324	1,93		3, 43
325	>19,04		19, 04
327	>15,31		>15,31
326	5, 37		4,78
328	15, 31		12,16
329	7,27		7,27
330	2,08		1, 04
331	1,06		0, 94
332	4,38		2,20
333	2,50		3, 53
334	8,87		7, 04
335	1,76		2,21
336	3,51		7, 00
337	1,80		0, 90
338	1,80		1,43
339	3, 60		1, 80
340	2,86		1,43
341	2,36		4,71

- 95 038350

343	6, 90		4,35
344	3,46		8,68
345	4,38		3,48
346	2,13		1,69
347	4,27		1,70
348	4,19		1,67
349	7,04		7,04
350	2,80		1,77
351	1,70		1,35
352	1,70		0,85
353	2,18		1,73
354	3,95		3,14
342	7,46		3,74
355	3, 60		1,43
356	1,80		1,80
357	5,70		3, 60
358	3, 60		1,43
359	12, 82		10, 18
360	12, 82		6, 42
361	12, 82		6, 42
362	12, 82		10, 18
363	1,87		3,74
364	3,74		2,97
366	7,16		3,59
367	7,16		5, 69
368	17,71		14,06
369	9, 12		4,57
52	1,23		0, 62
53	1,55		2,46
54	3,54		1,77
55	6,19		3,90
370	3,09		1,55
371	3,08		2,44
372	6, 14		3,08
373	3, 08		3, 08
374	3, 08		1,23
365	3, 74		3,74
56	>13,94		>13,94
57	3, 50		3,50
58	>13,94		>13,94
59	6, 99		5, 55
375	>12,90		12,90
376	3, 24		2,57
377	>14,86		>14,86
378	14,86		11,80
60	2,77		1,39
379	3,49		2,77
380	5,16		4, 10
381	3,49		1,75
382	3, 45		2,18
383	3, 45		2,74
384	3, 45		2,18
385	1,73		1,37
386	3, 65		2,90
387	14,55		7,29
388	1, 80		3,59
389	7,16		7 , 16
390	14,30		11,36
391	3, 59		1,80
392	6, 32		3, 17
393	10, 01		6, 32
394	2, 89		2,29
395	5,76		2,89
62	5, 75		4,57
396	5, 75		5, 75
397	>12,28		>12,28
398	>12,28		>12,28
399	>12,47		>12,47

- 96 038350

400	>12,47		>12,47
401	>12,77		>12,77
402	>12,47		12,47
403	9, 72		8, 66
404	2,99		1, 68
405	5,26		2, 63
406	3,29		2, 61
407	1, 65		1,17
408	>19,18		>19,18
409	2,01		6,36
410	12,25		7,73
411	4,10		6, 50
412	4,02		2,02
413	18,24		18,24
414	18,39		18,39
415	15, 47		>15,47
16	7,21		9, 08
416	9, 25		9, 25
417	>13,88		>13,88
418	>17,6721		17, 67
419	11,03		11, 03
420	5, 43		5, 43
421	5, 43		5, 43
422	7 , 67		8, 61
423	5, 43		3,43
9	4,92		3,48
10	>10,37		>10,37
424	>10,37		>10,37
425	>11,09		>11,09
426	>11,09		>11,09
427	>16,08		>16,08
428	15, 06		10, 66
67	14,90		7,47
429	7,72		3, 87
			3,39
430	3, 39
431	8, 60		7 , 66
432	7,41		5, 24
13	8,48		4,77
14	6, 74		3,79
442	11,37		3, 60
433	6, 40		4,04
434	3,21		3,21
12	7, 09		2,82
435	5, 63		3, 99
436	13,44
29	>9, 96
20	>10,89
437	13,44
30	>10,82
438	3,21
439	12,77
440	8, 61
441	12,17
443	4,41
444	12,42
445	3, 50
446	10, 89		5,46
65	>14,27		>14,27
66	>14,27		>14,27
447	>14,27		>14,27
448	>14,27		>14,27
453	5,48		2,75
449	5,48		2,75
450	8, 69		4,35
454	10, 94		4,35
451	5,48		2,18
452	9, 75		4,35
455	7,74		5, 48

- 97 038350

456	10, 94		10,94
457	11,50		5,76
458	11,50		11,50
22	>15,036		>15,036
23	>15,036		>15,036
24	>15,036		>15,036
459	13, 14		3,70
460	3,70		1,86
461	2, 62		1,47
462	1,86		0, 93
63	3, 17		1,59
64	7,93		3, 98
463	14,75		2,34
464	1,47		1,17
465	5, 87		2, 62
466	3,70		1,47
467	3,21		2,55
468	3,21		3,21
469	8,30		4,16
470	5, 23		3, 08
471	4,94		2,91
27	11,55		7,29
28	6, 22		3, 12

STA B29213 означает Staphylococcus aureus (ATCC29213); MSM 6305 означает Mycobacterium smegmatis (ATCC607); АТСС означает Американская коллекция типовых культур.

Claims (28)

1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

   1. Соединение формулы (Ia) или (Ib)

   или его стереоизомерная форма или его фармацевтически приемлемая соль, где р равно 1;

   n представляет собой целое число, равное 1 или 2, при условии, что если n равняется 2, то оба заместителя R⁵ соединены с одним и тем же атомом углерода пиперидинового фрагмента;

   R¹ представляет собой водород, карбоксил, галоген, C_1-6 алкилтио, аминоС_1-6алкил или Het;

   R² представляет собой С_1-6алкилокси;

   R³ представляет собой водород;

   R4 представляет собой арил¹ или Het;

   R⁵ представляет собой арил, арилС_1-6алкил, С_3-6циклоалкил, С_3-6циклоалкилС_1-6алкил, Het, HetC_1-6aлкил, С_1-6алкил, гидроксиС_1-6 алкил, аминоС_1-6алкил, моно- или ди(С_1-4алкил) аминоС_1-6алкил, арил-NH-С_1-6αлкил, Het-NH-C_1-6алкил, С_2-6алкенил или галоген;

   R⁶ представляет собой водород, С1-6алкил, арилС1-6алкил, Het¹, Het¹ C1-6алкил или -C(=NH)-NH₂;

   R⁷ представляет собой водород или С_1-6алкил;

   R⁸ представляет собой оксо; или

   R⁷ и R⁸ вместе образуют радикал -CH=CH-N=;

   R^9a и R^10a вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют радикал, выбранный из группы, состоящей из пирролидинила, пиперидинила, пиперазинила, морфолинила, 4-тиоморфолинила, 2,3-дигидроизоиндол-1 -ила, тиазолидин-3-ила, 1,2,3,6-тетрагидропиридила, гексагидро-1 Н-азепинила, гексагидро- 1Н-1,4-диазепинила, гексагидро-1,4-оксазепинила, 1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-2-ила, пирролинила, пирролила, имидазолидинила, пиразолидинила, 2-имидазолинила, 2-пиразолинила, имидазолила, пиразолила, триазолила, пиридинила, пиридазинила, пиримидинила, пиразинила и триазинила, при этом каждый радикал необязательно замещен 1, 2, 3 или 4 заместителями, каждый заместитель независимо выбран из C_1-6αлкила, полигалогенС_1-6алкила, галогена, арилС_1-6алкила, гидрокси, С_1-6алкилокси, амино, моно- или ди(С_1-6алкил)амино, С_1-6алкилтио, алкилтиоС_1-6алкила, арила, пиридила или пиримидинила;

   R^9b и R^10b каждый независимо представляет собой водород, C_1-6 алкил, арил или Het;

   R¹¹ представляет собой водород или С_1-6алкил;

   арил представляет собой гомоциклическое ядро, выбранное из фенила, нафтила, аценафтила или тетрагидронафтила, при этом каждый необязательно замещен 1, 2 или 3 заместителями, при этом каждый

   - 98 038350 заместитель независимо выбран из гидрокси, гидроксиС_1-6 алкила, галогена, циано, цианоС_1-6алкила, нитро, амино, моно- или ди(С_1-6алкил)амино, С_1-6алкила, С_2-6алкенила, необязательно замещенного фенилом, полиС_1-6галогеналкила, С_1-6алкилокси, C_1-6 алкилоксиС_1-6алкила, полигалогенС_1-6алкилокси, карбоксила,

   C_1-6αлкиоксикарбонила, аминокарбонила, морфолинила или моно- или ди(C_1-6алкил)аминокарбонила;

   арил¹ представляет собой гомоциклическое ядро, выбранное из фенила, нафтила, аценафтила или тетрагидронафтила, при этом каждый необязательно замещен 1, 2 или 3 заместителями, при этом каждый заместитель независимо выбран из гидрокси, гидроксиС_1-6 алкила, галогена, циано, цианоС_1-6алкила, нитро, амино, моно- или ди(С1_₆алкил)амино, С1_₆алкила, полигалогенС1_₆алкила, C₁.₆алкилокси, С₁_₆алкилоксиС₁_₆алкила, С1.₆алкилтио, полигалогенС1.₆ алкилокси, карбоксила, С1.₆алкилоксикарбонила, аминокарбонила, Het, моно- или ди(С1_₆алкил)аминокарбонила или C₁_₄алкил-S(=O)₂-;

   Het представляет собой моноциклический гетероцикл, выбранный из N-феноксипиперидинила, пиперидинила, пиперазинила, морфолинила, 4-тиоморфолинила, пирролила, пиразолила, имидазолила, фуранила, тиенила, оксазолила, изоксазолила, тиазолила, изотиазолила, пиридинила, пиримидинила, пиразинила или пиридазинила; или бициклический гетероцикл, выбранный из хинолинила, хиноксалинила, индолила, бензимидазолила, бензоксазолила, бензизоксазолила, бензотиазолила, бензизотиазолила, бензофуранила, бензотиенила, 2,3-дигидробензо[1,4]диоксинила или бензо[1,3]диоксолила; при этом каждый моноциклический и бициклический гетероцикл необязательно замещен 1, 2 или 3 заместителями, при этом каждый заместитель независимо выбран из галогена, гидрокси, С₁_₆алкилаС₁_₆алкилокси;

   Het¹ представляет собой моноциклический, насыщенный гетероцикл, выбранный из пирролидинила, пиперидинила, пиперазинила, морфолинила, 4-тиоморфолинила, имидазолидинила, пиразолидинила; при этом каждый моноциклический, насыщенный гетероцикл необязательно замещен С1_₆алкилом или арилС 1 _₆алкилом.
2. 2. Соединение по любому из предыдущих пунктов, где R⁴ представляет собой фенил, необязательно замещенный 1 заместителем, при этом указанный заместитель выбран из галогена, циано, C₁_₄алкилS(=O)₂- или С1_₆алкилтио.
3. 3. Соединение по любому из пп.1 и 2, где R⁴ представляет собой моноциклический гетероцикл, выбранный из пиперидинила, пиразолила, фуранила или пиридинила, особенно пиразолила или пиридинила; при этом каждый моноциклический гетероцикл необязательно замещен 1 заместителем, выбранным из галогена, гидрокси, С1_₆алкила или С1_₆алкилокси.
4. 4. Соединение по любому из предыдущих пунктов, где R⁵ представляет собой фенил; при этом фенил замещен 1 или 2 заместителями, каждый из которых независимо выбран из галогена или C₁_₆алкила; бензил или бензил, в котором фенильный фрагмент замещен 1 или 2 заместителями, каждый из которых независимо выбран из галогена или С1_₆алкила.
5. 5. Соединение по любому из предыдущих пунктов, где R⁶ представляет собой водород, С1_₆алкил или бензил.
6. 6. Соединение по любому из предыдущих пунктов, где R⁷ представляет собой водород, a R⁸ представляет собой оксо.
7. 7. Соединение по любому из пп.1-5, где соединением является соединение формулы (Ia).
8. 8. Соединение по любому из предыдущих пунктов, где R¹ находится в положении 6 хинолинового кольца.
9. 9. Соединение по любому из предыдущих пунктов, где n равняется 1.
10. 10. Соединение по любому из предыдущих пунктов, где арил представляет собой фенил, необязательно замещенный одним или двумя заместителями, каждый из которых независимо выбран из галогена; циано; С1_₆алкила или С1_₆алкилокси.
11. 11. Соединение по любому из предыдущих пунктов, где Het представляет собой пиридинил или пиразолил.
12. 12. Соединение по любому из предыдущих пунктов, где р равняется 1;

    n равняется 1;

    R¹ представляет собой галоген; С1_₆алкилтио; C₁.₄алкил-S(=O)₂ или Het;

    R² представляет собой С1_₆алкилокси;

    R³ представляет собой водород;

    R⁴ представляет собой фенил, необязательно замещенный галогеном;

    R⁵ представляет собой арил; арилС1_₆алкил; С₃_₆циклоалкилС1_₆ алкил; HetC₁.₆алкил или С1_₆алкил; и где R⁵ находится в положении 2 пиперидинового кольца; а

    R⁶ представляет собой водород.
13. 13. Соединение по п.1, где соединение выбрано из следующих соединений:

    - 99 038350

    - 100 038350

    или его стереоизомерная форма или его фармацевтически приемлемая соль.
14. 14. Применение соединения по любому из предыдущих пунктов в качестве лекарственного препарата для лечения бактериальной инфекции.
15. 15. Фармацевтическая композиция, содержащая фармацевтически приемлемый носитель и в качестве активного ингредиента терапевтически эффективное количество соединения, определенного в любом из пп.1-13.
16. 16. Применение соединения по любому из пп.1-13 для производства медикамента для лечения бактериальной инфекции.
17. 17. Применение по п.16, где бактериальная инфекция представляет собой инфекцию, вызванную грамположительной бактерией.
18. 18. Применение по п.17, где грамположительная бактерия представляет собой Streptococcus pneumoniae.
19. 19. Применение по п.17, где грамположительная бактерия представляет собой Staphylococcus aureus.
20. 20. Применение по п.18, где грамположительная бактерия представляет собой метициллинустойчивый Staphylococcus aureus.
21. 21. Применение по п.16, где бактериальная инфекция представляет собой микобактериальную инфекцию.
22. 22. Применение по п.21, где микобактериальная инфекция представляет собой инфекцию, вызванную Mycobacterium tuberculosis.
23. 23. Комбинация (а) соединения по любому из пп.1-13 и (b) одного или несколько других антибактериальных средств для лечения бактериальной инфекции.
24. 24. Комбинированный препарат, содержащий (а) соединение по любому из пп.1-13 и (b) одно или несколько других антибактериальных средств, для одновременного, раздельного или последовательного применения в лечении бактериальной инфекции.
25. 25. Способ получения соединения формулы (Ia) по п.1, при котором удаляют защитную группу Р¹ промежуточного соединения формулы (IIa), где Р¹ представляет собой подходящую защитную группу

    Ila 1а

    - 101 038350 для получения соединений формулы (Ia), где R⁶ представляет собой водород, R² представляет собой

    С_1-6алкилокси, и р, n, R¹, R³, R4 и R⁵ имеют значения, указанные в п.1.
26. 26. Способ получения соединения формулы (Ib) по п.1, при котором удаляют защитную группу Р¹ промежуточного соединения формулы (IIa) подходящей кислотой

    для получения соединений формулы (Ib), где R² представляет собой гидрокси, R⁶ представляет собой водород, R⁷ представляет собой водород, a R⁸ представляет собой оксо, и р, n, R¹, R³, R4 и R⁵ имеют значения, указанные в п. 1.
27. 27. Способ получения соединения формулы (Ia) по п.1, при котором обрабатывают промежуточное соединение формулы (IVa), где Р³ представляет собой подходящую защитную группу, солью четвертичного аммония

    для получения соединений формулы (Ia), где R⁵ представляет собой гидроксиметильную группу, и р, n, R¹, R³, R4 и R⁶ имеют значения, указанные в п.1.
28. 28. Способ получения соединения формулы (Ia) по п.1, при котором проводят реакцию промежуточного соединения формулы (Va) с соединением формулы (VIa)

    где р, n, R¹, R², R³, R4, R⁵ и R⁶ имеют значения, указанные в п.1.