EA031718B1 - Лечение фиброза и рака, связанных с тирозинкиназой - Google Patents
Лечение фиброза и рака, связанных с тирозинкиназой Download PDFInfo
- Publication number
- EA031718B1 EA031718B1 EA201591345A EA201591345A EA031718B1 EA 031718 B1 EA031718 B1 EA 031718B1 EA 201591345 A EA201591345 A EA 201591345A EA 201591345 A EA201591345 A EA 201591345A EA 031718 B1 EA031718 B1 EA 031718B1
- Authority
- EA
- Eurasian Patent Office
- Prior art keywords
- fibrosis
- cancer
- tumors
- compound
- treatment
- Prior art date
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/38—Heterocyclic compounds having sulfur as a ring hetero atom
- A61K31/381—Heterocyclic compounds having sulfur as a ring hetero atom having five-membered rings
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
- A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
- A61K31/192—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having aromatic groups, e.g. sulindac, 2-aryl-propionic acids, ethacrynic acid
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
- A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
- A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/04—Drugs for skeletal disorders for non-specific disorders of the connective tissue
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
- A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Physical Education & Sports Medicine (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Neurology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Vascular Medicine (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
Изобретение относится к применению соединения 1-[4-метилтиофенил]-3-[3,5-диметил-4-карбоксидиметилметилоксифенил]проп-2-ен-1-он для лечения или профилактики фиброзных заболеваний, связанных с тирозинкиназой, где фиброзное заболевание не является фиброзом печени, или для лечения или профилактики рака, связанного с тирозинкиназой. Настоящее изобретение также относится к применению соединения 1-[4-метилтиофенил]-3-[3,5-диметил-4-карбоксидиметилметилоксифенил]проп-2-ен-1-он для радикального лечения рака печени.
Description
Изобретение относится к применению соединения 1-[4-метилтиофенил]-3-[3,5-диметил-4карбоксидиметилметилоксифенил]проп-2-ен-1-он для лечения или профилактики фиброзных заболеваний, связанных с тирозинкиназой, где фиброзное заболевание не является фиброзом печени, или для лечения или профилактики рака, связанного с тирозинкиназой. Настоящее изобретение также относится к применению соединения 1-[4-метилтиофенил]-3-[3,5-диметил-4карбоксидиметилметилоксифенил]проп-2-ен-1-он для радикального лечения рака печени.
031718 Bl
Область техники, к которой относится изобретение
Настоящее изобретение относится к применению соединения 1-[4-метилтиофенил]-3-[3,5-диметил4-карбоксидиметилметилоксифенил]проп-2-ен-1-она для лечения фиброзных заболеваний и рака.
Уровень техники
Тирозинкиназы являются важными медиаторами сигнального каскада, играя ключевые роли в различных биологических процессах, таких как рост, дифференцировка, метаболизм и апоптоз в ответ на внешние и внутренние стимулы. Недавно полученные данные выявили роль тирозинкиназ в патофизиологии фиброза или рака.
В отношении фиброза, были идентифицированы различные тирозинкиназы в качестве детерминант прогрессирования заболевания и потенциальных мишеней для антифиброзной терапии. Они включают рецепторные тирозинкиназы (например, рецептор PDGF, рецептор VEGF, рецептор EGF и семейство Янус-киназ), а также нерецепторные тирозинкиназы (например, киназы c-Abl, с-Kit и Src) [1]. При всех фиброзных заболеваниях фибробласты, включая звездчатые клетки, пролиферируют и активируются с превращением в миофибробласты. Миофибробласты являются основным типом клеток, продуцирующих коллаген, которые подвергаются гиперпролиферации [2]. PDGF представляют основные митогены для клеток мезенхимального происхождения. Избыточная активность PDGF ассоциирована с несколькими расстройствами человека, включая фиброз органов и туморогенез [3]. В частности, сообщалось о повышенных уровнях или активности PDGF при фиброзе легких, фиброзе печени [2], склеродерме [4-6], почечных фибропролиферативных заболеваниях [7, 8], миелопролиферативных заболеваниях, таких как идиопатический миелофиброз [9, 10], лейкозах, в частности в лейкозных клетках костного мозга во время прогрессирования острого мегакариобластного лейкоза с выраженным миелофиброзом [11], и хронического миелогенного лейкоза [12-14].
Возможно, наиболее перспективными лекарственными препаратами для лечения фиброза являются ингибиторы рецепторной тирозинкиназы PDGF. Было показано, что введение ингибитора тирозинкиназы PDGF снижает выраженность фиброза легких на крысиной модели индуцированного металлами повреждения легких [15] и ослабляет хроническую нефропатию аллотрансплантата на крысах [16]. Было показано, что у пациентов с хроническим миелогенным лейкозом неселективный ингибитор PDGF, иматиниб (Gleevec), вызывает регрессию фиброза костного мозга [17]. В совокупности результаты данных опытов на животных и предварительных клинических исследований указывают, что ингибирование рецепторной тирозинкиназы PDGF может предложить перспективную стратегию лечения фиброзных заболеваний в различных тканях.
В дополнении к агентам, которые блокируют активность пути PDGF, моноклональные антитела и низкомолекулярные ингибиторы, которые блокируют абберантную активность других тирозинкиназ, тестировали на доклинических моделях различных фиброзных заболеваний (например, идиопатического фиброза легких, фиброза почек, фиброза печени и фиброза кожи). Результаты данных исследований были обещающими и ускорили проведение клинических испытаний различных соединений при фиброзных заболеваниях. К настоящему времени опубликованы результаты исследований с интеданибом при идиопатическом фиброзе легких и иматинибом при идиопатическом фиброзе легких и системном склерозе. Хотя, ни в одном из этих исследований не сообщалось о положительном первичном результате, обещающие тенденции в антифиброзной эффективности породили надежды на создание новой группы эффективных нацеленных антифиброзных препаратов [1].
В отношении рака, сверхэкспрессия ростовых факторов и последующая активация специфических рецепторных тирозинкиназ, подобных PDGFR[J>. VEGFR, может вызвать сверхактивацию сигнального пути киназы митоген-активируемого белка Raf/MEK/ERK (MAP) [18, 19]. Известно, что активация сигнального пути киназы митоген-активируемого белка Raf/MEK/ERK (MAP) непосредственно повышает пролиферацию и выживаемость клеток, и может опосредованно стимулировать ангиогенез посредством усиления продукции VEGF и PDGF [18]. Данные процессы необходимы для роста опухолей, и таким образом, молекулярные компоненты сигнального пути Raf/MEK/ERK являются потенциальными терапевтическими мишенями для лечения рака, в частности, гепатоцеллюлярной карциномы (НСС) [20].
Противоопухолевый препарат сорафениб ингибирует находящиеся выше рецепторные тирозинкиназы, которые являются важными для ангиогенеза, включая VEGFR-2, VEGFR-3, PDGFR[J> и kit, и изоформы серин/треониновых киназ Raf (например, Raf-1 и B-Raf). Таким образом, сорафениб может индуцировать гибель опухолевых клеток и ингибировать ангиогенез. Также было показано, что сорафениб индуцировал апоптоз на нескольких опухолевых клеточных линиях посредством механизмов действия, которые еще плохо установлены [20, 21]. Сорафениб является первым системным препаратом, разрешенным Управлением по контролю за пищевыми продуктами и лекарственными препаратам, для пациентов с ГЦК на поздних стадиях, не чувствительных к лечению хирургической резекцией или трансплантацией печени.
В совокупности эти данные показывают интерес в идентификации новых препаратов, функционирующих на тирозинкиназах, для лечения фиброзных заболеваний или рака.
- 1 031718
Сущность изобретения
Настоящее изобретение относится к новому применению 1-[4-метилтиофенил]-3-[3,5-диметил-4карбоксидиметилметилоксифенил]проп-2-ен-1-она для лечения фиброзных заболеваний и рака. 1-[4Метилтиофенил]-3-[3,5-диметил-4-карбоксидиметилметилоксифенил]проп-2-ен-1-он обладает антифиброзными и антираковыми свойствами в результате ингибирования рецепторных и нерецепторных тирозинкиназ и/или ингибирования их внутриклеточных сигнальных путей в фибробластах.
Описание фигур и таблиц.
Сокращения, использованные на фигурах, в таблицах и в тексте:
Col1a1 = коллаген типа I альфа 1;
Col4a1 = коллаген типа 4 альфа 1;
Cpm = имп./мин;
Ctrl = контроль или растворитель;
EGFR = рецептор эпидермального фактора роста;
ERK = регулируемая внеклеточными сигналами киназа;
FBS = фетальная бычья сыворотка;
FCS = фетальная телячья сыворотка;
FDA = управление по контролю за лекарственными препаратами и продуктами питания;
FGFR = рецептор фактора роста фибробластов;
GIST = гастроинтестинальная стромальная опухоль;
НСС = гепатоцеллюлярная карцинома;
HGFR = рецептор фактора роста гепатоцитов;
hHSC = первичные звездчатые клетки печени человека;
JAK = Янус-киназа;
MAP = митоген-активируемый белок;
MEK = митоген-активируемая киназа протеинкиназы;
PDGFR = рецептор фактора роста тромбоцитов;
RCC = почечно-клеточная карцинома;
RT-PCR = полимеразная цепная реакция с обратной транскрипцией;
TGF[J> = рецептор трансформирующего фактора роста бета;
VEGFR = рецептор эндотелиального фактора роста сосудов.
Фиг. 1. Соединение формулы (I) оказывает отрицательное влияние на пролиферацию клеток, которая индуцируется PDGF-BB.
Пролиферацию первичных звездчатых клеток печени человека (hHCS) индуцировали in vitro PDGFBB (10 нг/мл), который является основным митогеном для мезенхимальных клеток. В качестве положительного контроля использовали креноланиб, эффективный ингибитор PDGFR. Креноланиб и соединение формулы (I) добавляли в клеточную культуру за 1 ч до индукции PDGF-BB в бессывороточной среде. Пролиферацию клеток оценивали через 24 ч инкубации по определению включения бромдезоксиуридина (BrdU).
Результаты опытов выражали в виде среднего значения ± стандартное отклонение (SD) и строили графики в виде столбцов. Статистический анализ проводили с использованием одностороннего анализа ANOVA с последующей обработкой апостериорными тестами Бонферрони с использованием программного обеспечения Sigma Plot 11.0.
[* р<0,05; ** р<0,01; *** р<0,001 (сравнение против группы с PDGF-BB в концентрации 10 нг/мл)].
Фиг. 2. Соединение формулы (I) оказывает отрицательное влияние на пролиферацию клеток hHSC, которая индуцируется сывороткой крови.
Пролиферацию первичных звездчатых клеток печени человека (hHCS) индуцировали in vitro фетальной бычьей сывороткой, FBS (0,5%). В качестве положительного контроля использовали креноланиб, эффективный ингибитор PDGFR. Креноланиб и соединение формулы (I) добавляли в клеточную культуру за 1 ч до индукции FBS. Пролиферацию клеток оценивали через 48 ч инкубации по определению включения бромдезоксиуридина (BrdU).
Результаты опытов выражали в виде среднего значения ± стандартное отклонение (SD) и строили графики в виде столбцов. Статистический анализ проводили с использованием одностороннего анализа ANOVA с последующей обработкой апостериорными тестами Бонферрони с использованием программного обеспечения Sigma Plot 11.0.
[* р<0,05; ** р<0,01; *** р<0,001 (сравнение против группы с FBS 0,5%)].
Фиг. 3. Соединение формулы (I) оказывает отрицательное влияние на фосфорилирование PDGFRP, индуцируемое PDGF-BB.
Фосфорилирование PDGFR[J> индуцировали в hHSC с использованием PDGF-BB в бессывороточных условиях. Вначале HSC обрабатывали в течение 60 мин креноланибом (ингибитором PDGFR) или соединением формулы (I), затем инкубировали в течение 10 мин PDGF-BB (30 нг/мл). Затем определяли степень фосфорилирования PDGFR[J> по тирозину 751 с использованием набора для клеточного ELISA
- 2 031718 для определения фосфорилирования Human Phosplio-PDGFR[J> (Y751) (R&D Systems) при фиксации в культуральных лунках.
Результаты опытов выражали в виде среднего значения ± стандартное отклонение (SD) и строили графики в виде столбцов. Статистический анализ проводили с использованием одностороннего анализа ANOVA с последующей обработкой апостериорными тестами Бонферрони с использованием программного обеспечения Sigma Plot 11.0.
[*:р<0,05; **р<0,01; ***р<0,001 (сравнение против группы с PDGF-BB в концентрации 30 нг/мл)].
Фиг. 4. Обработка соединением формулы (I) предупреждала индукцию фиброза ободочной кишки на модели воспалительного заболевания кишечника.
Экспрессия α-SMA, общепризнанного биомаркера фиброзного ответа, при колите, индуцированном TNBS, частично предупреждалась введением соединения формулы (I).
Результаты опытов выражали в виде среднего значения ± стандартное отклонение (SD) и строили графики в виде столбцов. Статистический анализ проводили с использованием t-теста [* р<0,05].
Фиг. 5. Обработка соединением формулы (I) индуцировала умеренный проапоптотический ответ в активированных hHSC и достоверно потенцировала проапоптотический эффект стауроспорина.
Проапоптотические свойства соединения формулы (I), одного или в комбинации со стауроспорином, ингибитором протеинкиназ широкого спектра, оценивали на hHSC. При культивировании hHSC вначале лишали сыворотки в течение 16 ч и затем обрабатывали соединением формулы (I) одним или комбинацией соединения формулы (I) и стауроспорина. Проапоптотический эффект данных обработок оценивали с использованием набора для оценки активности каспазы Caspase-Glo® 3/7.
Результаты опытов выражали в виде среднего значения ± стандартное отклонение (SD) и строили графики в виде столбцов.
Статистический анализ проводили с использованием непарного двухстороннего анализа ANOVA с последующей обработкой апостериорными тестами Бонферрони с использованием программного обеспечения Sigma Plot 11.0.
[* р<0,05; ** р<0,01; *** р<0,0 01 (сравнение против группы со стауроспорином 0,3 мкМ].
[t р< 0,0 5; Φ Ф р< 0,01; Φ Φ Ф р<0,001 (сравнение против группы без стауроспорина].
Подробное описание изобретения
Настоящее изобретение относится к применению соединения 1-[4-метилтиофенил]-3-[3,5-диметил4-карбоксидиметилметилоксифенил]проп-2-ен-1-она для лечения фиброза и рака, где такое соединение способно снижать непредполагаемым ранее образом пролиферацию и активацию человеческих фибробластов, включая звездчатые клетки, которые являются основным типом клеток, ответственных за формирование внеклеточного матрикса и фиброза.
Соединение 1-[4-метилтиофенил]-3-[3,5-диметил-4-карбоксидиметилметилоксифенил]проп-2-ен-1он, предназначенное для применения по настоящему изобретению, имеет следующую формулу:
На предшествующем уровне не было известно, что антифибротические эффекты или противораковые эффекты ассоциированы с 1-[4-метилтиофенил]-3-[3,5-диметил-4карбоксидиметилметилоксифенил]проп-2-ен-1-оном в результате прямого и/или опосредованного ингибирования рецепторных тирозинкиназ.
Следовательно, изобретение относится к применению соединения 1-[4-метилтиофенил]-3-[3,5диметил-4-карбоксидиметилметилоксифенил]проп-2-ен-1-ону для лечения или профилактики связанных с тирозинкиназой фиброзных заболеваний, где фиброзное заболевание не является фиброзом печени, или для лечения или профилактики связанного с тирозинкиназой рака.
Согласно настоящему изобретению термин фиброз включает, в частности, фиброз легких, сердца, мышечной ткани, кожи, мягких тканей (например, фиброз средостения или ретроперитонеальный фиброз), костного мозга, кишечника и суставов (например, коленного, плечевого сустава или других суставов). В частности, термин фиброз включает фиброз легких, идиопатический фиброз легких, кистозный фиброз, фиброз эндомиокарда, фиброз средостения, миелофиброз, ретроперитонеальный фиброз, прогрессирующий массивный фиброз (осложненный пневмокониоз у шахтеров-угольщиков), нефрогенный системный фиброз, болезнь Крона, келоид, перенесенный инфаркт миокарда, склеродерму/системный склероз, артрофиброз и некоторые формы адгезивного капсулита. Термин фиброз не включает фиброз печени в контексте настоящего изобретения.
При раке отмечается избыточная экспрессия и нарушение регуляции рецепторных тирозинкиназ, и в течение нескольких десятилетий усилия были сфокусированы на создании нацеленных препаратов с
- 3 031718 использованием небольших молекул или антител [22-24].
Таблица 1 Выбранные примеры противораковых препаратов, нацеленных на тирозинкиназы
Тип рака | Мишень | Ссылки |
Рак молочной железы | HER2, EGFR, PDGFR, FGFR, IGFR, VEGFR, SRC | [25-28] |
Хронический миелоидный лейкоз | BCR-ABL, SRC, ТЕС | [29-31] |
Колоректальный рак | EGFR, VEGFR | [32-34] |
Дерматофибросаркома | c-KIT, PDGFR, VEGFR | [35-38] |
GIST | PDGFR, c-KIT, VEGFR, HER2 | [39-42] |
Рак почек | VEGFR, PDGFR, c-KIT | [43-46] |
Рак легких | EGFR, VEGFR, ALK | [47-49] |
Мастоцитоз | BCR-ABL, PDGFR, c-KIT | [50-52] |
Нейрофиброматоз типа 2 | PDGFR, EGFR, VEGFR | [53-57] |
Рак поджелудочной железы | VEGFR, mTOR | [58, 59] |
Рак предстательной железы | VEGFR, PDGFR, FGFR, EGFR, IGF1R | [28, 60] |
Рак щитовидной железы | VEGFR, EGFR, c-met, RET | [61, 62] |
Согласно настоящему изобретению выражение рак, связанный с тирозинкиназами означает любую форму рака, который опосредован разрегулированной активностью или экспрессией одного или группы рецепторов тирозинкиназ. В конкретном варианте осуществления изобретения тирозинкиназа представляет рецепторную тирозинкиназу, более конкретно PDGFR, VEGFR, FGFR, EGFR, c-Kit или Янус, или нерецепторные тирозинкиназы, более конкретно c-Abl, или киназ Src. Согласно конкретному варианту осуществлению термин рак включает гепатоцеллюлярную карциному, почечно-клеточную карциному, гастроинтестинальную стромальную опухоль (GIST), рак желудка, менингиому, связанную с нейрофиброматозом, нейроэндокринные опухоли поджелудочной железы, экзокринные опухоли поджелудочной железы, лейкоз, миелопролиферативные/миелодиспластические заболевания, мастоцитоз, дерматофибросаркому, солидные опухоли, включая рак молочной железы, легких, щитовидной железы и колоректальный рак, рак предстательной железы.
В конкретном аспекте изобретение относится к радикальному лечению рака печени, в частности, гепатоцеллюлярной карциномы.
В еще одном аспекте изобретение относится к лечению или профилактике рака, отличного от рака печени. В частности, рак может быть выбран из почечно-клеточной карциномы, гастроинтестинальной стромальной опухоли (GIST), менингиомы, ассоциированной с нейрофиброматозом, нейроэндокринных опухолей поджелудочной железы, экзокринных опухолей поджелудочной железы, лейкоза, миелопролиферативных/миелодиспластических заболеваний, мастоцитоза, дерматофибросаркомы, солидных опухолей, включая рак молочной железы, легких, щитовидной железы и колоректальный рак, рак предстательной железы. В конкретном аспекте лечат или предотвращают фиброзный рак.
Лечение или профилактика включает введение соединения пациенту с установленным диагнозом расстройства для излечения, замедления или снижения прогрессирования, тем самым улучшения состояния пациента или здоровому субъекту, в частности, субъекту с риском развития фиброзного заболевания.
Субъектов, предназначенных для лечения по изобретению, можно выбрать на основе нескольких критериев, ассоциированных с фиброзными заболеваниями или раком, таких как предшествующее лечение препаратами, ассоциированные патологии, генотип, воздействие факторов риска, вирусная инфекция, а также с учетом любого релевантного биомаркера, который может быть оценен с помощью визуализирующих методов и иммунологических, биохимических, ферментативных, химических методов или методов детектирования нуклеиновой кислоты.
1-[4-Метилтиофенил]-3-[3,5-диметил-4-карбоксидиметилметилоксифенил]проп-2-ен-1-он может иметь различные стабильные изомерные формы.
Синтез 1-[4-метилтиофенил]-3-[3,5-диметил-4-карбоксидиметилметилоксифенил]проп-2-ен-1-она можно проводить, например, как описано для соединения 29 в WO 2004/005233.
Соединение формулы (I) можно формулировать в виде фармацевтически приемлемых солей, которые являются малотоксичными или нетоксичными солями, полученными из органических или неорганических оснований или кислот соединения формулы (I). Данные соли могут быть получены на конечной стадии очистки соединения или включением соли в ранее выделенное соединение.
Соединение формулы (I) можно вводить в эффективном количестве. В контексте изобретения термин эффективное количество относится к количеству соединения, эффективного для обеспечения же
- 4 031718 лаемого терапевтического эффекта.
Соединение формулы (I) можно вводить различными путями и в различных формах. Так, например, его можно вводить системным путем, перорально, парентерально, ингаляцией или инъекцией, например, внутривенно, внутримышечным путем, подкожным путем, трансдермальным путем, внутриартериальным путем и т.д. Пероральное введение является предпочтительным путем введения.
Частота и/или доза относительно к введению могут быть адаптированы специалистом со средним уровнем компетентности в данной области в зависимости от пациента, патологии, формы введения и т.д. Как правило, соединение формулы (I) можно вводить для лечения фиброзных заболеваний или рака в дозах, варьирующих в пределах от 0,01 мг до 1 г на введение, предпочтительно от 1 до 100 мг на введение. Введение можно проводить один раз в сутки или даже несколько раз в сутки, при необходимости.
Изобретение дополнительно описано при обращении к следующим, неограничивающим примерам.
Примеры
Материалы и методы.
Соединения растворяли в диметилсульфоксиде (ДМСО, Fluca, каталожный номер 41640).
Культура hHSC и условия обработки.
Человеческие первичные звездчатые клетки печени (hHSC) (ScienCell) культивировали в среде STeCM (ScienCell, каталожный номер 5301), в которую добавляли 2% фетальной бычьей сыворотки (FBS, ScienCell, каталожный номер 0010), 1% пенициллина/стрептомицина (ScienCell, каталожный номер 0503) и добавку для роста звездчатых клеток (SteCGC; ScienCell, каталожный номер 5352). Культуральные пластики покрывали поли-Ь-лизином (Sigma, каталожный номер Р4707). hHSC высевали с плотностью 1,2х104 клеток/лунку в 96-луночных планшетах и культивировали в течение ночи при 37°С и в атмосфере 5% СО2 с последующей отмывкой клеток PBS (Invitrogen, каталожный номер 14190) и замещением культуральной среды на бессывороточную и не содержащую SteCGS среду, и культивированием еще в течение 24 ч.
Для анализа пролиферации, индуцированной PDGF, клетки предварительно обрабатывали всеми соединениями в течение 1 ч перед добавлением PDGF-BB (10 нг/мл; R&D Systems, каталожный номер 520-ВВ). Затем обработки продолжали еще в течение 20 ч. Для анализа пролиферации, индуцированной сывороткой, клетки предварительно обрабатывали всеми соединениями в течение 1 ч перед добавлением FBS (0,5%) (ScienCell, каталожный номер 0010) в среде, не содержащей SteCGS, в течение 20 ч.
Оценка пролиферации, индуцированной PDGF.
Пролиферацию клеток оценивали по включению бромдезоксиуридина (BrdU) с использованием набора для введения метки и детектирования BrdU (Roche, каталожный номер 11647229001). Раствор BrdU для мечения добавляли к клеткам с последующей инкубацией еще в течение 4 ч перед фиксацией, добавлением нуклеаз, добавлением анти-BrdU-POD и субстрата пероксидазы. Поглощение при длине волны 405 нм (с длиной референс-волны при 690 нм) определяли с использованием ридера для планшетов при постановке ELISA (Tecan).
Анализ фосфорилирования PDGFR[J>. индуцированного PDGF.
Фосфорилирование PDGFR[J> в hHSC оценивали с использованием набора для клеточного ELISA (R&D Systems, каталожный номер КСВ1767), следуя инструкциям изготовителя. Вкратце, после стимуляции PDGF клетки фиксировали и пермеабилизовали в лунках. Затем оценивали фосфорилирование PDGFR[J> с использованием процедуры двойного иммуноферментного мечения. Клетки одновременно инкубировали с двумя первичными антителами: фосфо-специфическим антителом, которое детектирует фосфорилирование PDGFR[J> по тирозину 751, и контрольным антителом, которое распознает одновременно фосфорилированную и нефосфорилированную формы PDGFR[J>. Для детектирования использовали два вторичных антитела, меченных пероксидазой хрена (HPR) или щелочной фосфатазой (АР), и два спектрально различающихся флуорогенных субстрата для HPR или АР. Флуоресценцию фосфорилированного PDGFRP нормализовали к этому показателю для панбелка. Флуоресценцию определяли с использованием ридера для планшетов при постановке ELISA (Tecan).
Активация HSC под действием TGF-βΕ
Человеческие первичные звездчатые клетки печени (hHSC) (ScienCell) культивировали в обычных условиях, как описано выше. Для опытов с целью определения паттернов экспрессии генов hHSC высевали с плотностью 1,4х105 клеток/лунку в 12-луночных планшетах и культивировали в течение ночи. На следующие сутки культуральную среду удаляли, клетки промывали PBS (Invitrogen, каталожный номер 14190) и добавляли бессывороточную и не содержащую SteCGS среду, и культивировали еще в течение 16 ч. Клетки обрабатывали соединениями в дополнении к TGF[J>1 (1 нг/мл) в бессывороточной и не содержащей SteCGS среде в течение 24 ч.
Экспрессия генов.
Общую фракцию РНК выделяли с использованием набора RNeasy® Mini (Qiagen), следуя инструкциям изготовителя. 250 нг общей фракции РНК обратно транскрибировали в кДНК с использованием обратной транскриптазы вируса лейкоза мышей M-MLV RT (Moloney Murine Leukemia Virus Reverse Transcriptase) (Invitrogen, каталожный номер 28025) в присутствии буфера RT 1x (Invitrogen), 1 мМ DTT
- 5 031718 (Invitrogen), 0,18 мМ dNTP (Promega), 200 нг pdN6 (Amersham) и 30E ингибитора РНКазы (Promega).
Затем проводили количественную ПЦР с использованием детектирующей системы ПЦР в режиме реального времени MyiQ Single-Color или детектирующей системы ПЦР в режиме реального времени iCycler iQ Multiplex (обе системы производства Biorad). Вкратце, реакции ПЦР проводили в 96-луночных планшетах с 5 мкл 5х разбавленной смеси для обратной транскрипции с использованием набора iQ SYBR Green Supermix.
Экспериментальными условиями были: объем реакционной смеси 25 мкл, 3 мМ MgCl2 и по 0,5 мкл каждого из обратного и прямого праймеров (10 пмоль)_____________________________
Название праймера | Порядковый номер последовательности | Последовательность (5’->3’) |
Прямой праймер aS МА | 1 | ACTGCCTTGGTGTGTGACAA |
Обратный праймер aS МА | 2 | TGGTGATGATGCCATGTTCT |
Прямой праймер Со11а1 | 3 | AATGGTGCTCCTGGTATTGC |
Обратный праймер Со11а1 | 4 | ACCAGGTTCACCGCTGTTAC |
Прямой праймер Со14а1 | 5 | GTTGGTCTACCGGGACTCAA |
Обратный праймер Со14а1 | 6 | GTTCACCTCTGATCCCCTGA |
Прямой праймер TG Fβ R1 | 7 | TGTTGGTACCCAAGGAAAGC |
Обратный npaHMcpTGFPRI | 8 | CACTCTGTGGTTTGGAGCAA |
Прямой праймер VEGFR1 | 9 | TGTCAATGTGAAACCCCAGA |
Обратный npaHucpVEGFRI | 10 | GTCACACCTTGCTTCGGAAT |
Прямой праймер VEGFR2 | 11 | AGCGATGGCCTCTTCTGTAA |
Обратный праймер VEGFR2 | 12 | ACACGACTCCATGTTGGTCA |
Прямой праймер HGFR | 13 | CAGGCAGTGCAGCATGTAGT |
Обратный праймер HGFR | 14 | GATGATTCCCTCGGTCAGAA |
Прямой праймер FGFR1 | 15 | GAAGTTCAAATGCCCTTCCA |
Обратный праймер FGFR1 | 16 | CCAGCTGGTATGTGTGGTTG |
Прямой праймер C-KIT | 17 | GTCTCCACCATCCATCCATC |
Обратный праймер C-KIT | 18 | GTTGGTGCACGTGTATTTGC |
Прямой праймер 36В4 | 19 | CATGCTCAACATCTCCCCCTTCTCC |
Обратный праймер 36В4 | 20 | GGGAAGGTGTAATCCGTCTCCACAG |
Уровни экспрессии нормализовали с использованием экспрессии гена 36В4.
Для каждого гена строили стандартные кривые выбором наилучших точек (по меньшей мере, три точки) для того, чтобы эффективность реакции ПЦР была близкой к 100%, и коэффициент корреляции был близок к 1. Уровни экспрессии определяли с использованием уравнения стандартной кривой для гена домашнего хозяйства и гена-мишени (принимая во внимание специфическую эффективность ПЦР для каждого гена-мишени).
Коэффициент индукции против TGF31 определяли следующим образом:
А-В
Коэффициент индукции = В ;
где А = уровень экспрессии исследуемого гена в опытной группе;
В = уровень экспрессии исследуемого гена в группе с TGF31 в концентрации 1 нг/мл.
Таким образом, чем ниже коэффициент индукции, тем сильнее интересующее соединение ингибирует активацию TGF31 в hHSC. Результаты опытов выражали в виде среднего значения коэффициента индукции ± стандартное отклонение (SD).
Оценка апоптоза по определению активации каспазы 3/7.
Человеческие первичные звездчатые клетки печени (hHSC) (ScienCell) культивировали в обычных условиях, как описано выше. Для анализа апоптоза hHSC высевали с плотностью 1,2х104 клеток/лунку в черных 96-луночных планшетах и культивировали в течение 24 ч при 37°С и в атмосфере 5% СО2 с последующей отмывкой клеток PBS (Invitrogen, каталожный номер 14190) и заменой культуральной среды на бессывороточную и не содержащую SteCGS среду, и культивировали еще в течение 16 ч. Клетки обрабатывали соединением формулы (I) одним или в комбинации со стауроспорином в бессывороточной среде и не содержащей SteCGS среде в течение 24 ч. Активность каспазы-3 и каспазы-7 определяли с
- 6 031718 использованием набора для анализа активности этих ферментов производства Promega (Promega, каталожный номер G8093), следуя инструкциям изготовителя. В конце периода инкубации 100 мкл реагента для определения активности каспазы Caspase-Glo® 3/7 вносили в каждую лунку, содержащую 100 мкл клеток без обработки, которые использовали в качестве отрицательного контроля, или обработанные клетки в культуральной среде. После лизиса клеток определяли расщепление субстрата (содержащего последовательность DEVD) под действием активированных каспаз 3 и 7 по измерению интенсивности люминесцентного сигнала в обычном ридере для планшетов производства Tecan. Интенсивность люминесценции была пропорциональна уровню активности каспазы, присутствующей в обработанных клетках.
Определение ингибирования активности протеинкиназ FGFR, PDGFR, VEGFR и c-Kit.
Ингибирование киназ под действием соединения формулы (I) тестировали в концентрации 10 мкМ на 10 выбранных киназах, представленных в таблице ниже. Использовали радиометрический анализ активности протеинкиназ (анализ активности 33PanQuinase®) для определения активности киназ. Смесь для анализа всех протеинкиназ содержала 70 мМ HEPES-NaOH, рН 7,5, 3 мМ MgCl2, 3 мМ MgCl2, 3 мкМ Naортованадата, 1,2 мМ DTT, АТФ (различные количества, соответствующие значению кажущейся АТФKm соответствующей киназы, см. табл. 1), [у-^рАТФ (примерно 8х105 имп./мин на лунку), протеинкиназу (различные количества, см. табл. 1) и субстрат (различные количества, см. таблицу ниже).
Параметры анализа тестированных протеинкиназ.
Киназа | Концентрация киназы (нМ) | Концентрация АТФ (мкМ) | Субстрат | Концентрация субстрата (мкг/50 мкл) |
FGFR1 | 10,4 | 3,0 | Poly(Glu,Tyr)4:1 | 0,125 |
FGFR2 | 1,2 | 1,0 | Poly(Glu, Tyr)4:1 | 0,125 |
FGFR3 | 13,5 | 3,0 | Poly(Glu, Tyr)4:1 | 0,250 |
FGFR4 | 6,6 | 1,0 | Poly(Glu, Tyr)4:1 | 0,125 |
c-KIT | 6,5 | 3,0 | Poly(Glu, Tyr)4:1 | 0,125 |
PDGFRa | 22,2 | 10,0 | Poly(Ala, Glu, Lys, Tyr)6:2:5:1 | 0,125 |
PDGFRp | 4,5 | 0,3 | Poly(Ala, Glu, Lys, Tyr)6:2:5:1 | 0,125 |
VEGFR1 | 4,5 | 1,0 | Poly(Glu, Tyr)4:1 | 0,125 |
VEGFR2 | 5,7 | 1,0 | Poly(Glu, Tyr)4:1 | 0,125 |
VEGFR3 | 4,7 | 3,0 | Poly(Glu, Tyr)4:1 | 0,125 |
Реакционные смеси инкубировали при 30°С в течение 60 мин. Реакцию останавливали добавлением 50 мкл 2% Н3РО4 (об./об.), содержимое планшетов аспирировали и два раза промывали 200 мкл 0,9% NaCl (мас./об.). Включение 33Р определяли на сцинтилляционном счетчике для микропланшетов (Microbeta, Wallac).
Для каждой киназы среднее значение имп./мин для трех лунок с полными реакционными смесями, но без киназы, принимали в качестве низкого контроля. Данное значение отражает неспецифическое связывание радиоактивности с планшетом в отсутствии протеикиназы, но в присутствии субстрата. Кроме того, для каждой киназы среднее значение имп./мин для трех других лунок с полными реакционными смесями, но без какого-либо соединения, принимали в качестве высокого контроля, т.е. полная активность в отсутствии какого-либо ингибитора. Различие между высоким и низким контролем принималось за 100% активность для каждой киназы.
В качестве части данных по оценке значение низкого контроля вычитали из значения высокого контроля, а также из соответствующих им значений для соединения. Рассчитывали остаточную активность (в %) для каждой лунки с определенным соединением с использованием следующей формулы:
Остаточная активность (%) = 100 х [(имп./мин для соединения - низкий контроль)/(высокий контроль низкий контроль)]
Оценка ингибирования пролиферации клеток человеческой опухолевой линии.
В данном эксперименте показаны прямые ингибирующие эффекты соединения формулы (I) на пролиферацию раковых клеток in vitro. 22 человеческие опухолевые клеточные линии культивировали в полной среде из АТСС, содержащей 10% FBS, при 37°С в атмосфере 5% СО2 в термостате. Клетки в фазе логарифмического роста использовали для анализа пролиферации. Клетки собирали, подсчитывали их количество и затем высевали с соответствующей плотностью в 96-луночный планшет и инкубировали в течение 16-24 ч. Затем добавляли соединение формулы (I) в различных концентрациях (8 концентраций, 3-кратные разведения в порядке снижения, начиная со 100 мкМ). Среду для обработки обновляли каж
- 7 031718 дые 24 ч во время анализа пролиферации в течение 72 ч. Обработанные лекарственным препаратом клетки и контрольные клетки анализировали с использованием набора CellTiter-Glo® (Promega). Вкратце, реагент CellTiter-Glo® вносили в каждую опытную лунку и перемешивали в течение 2 мин на орбитальном шейкере. Планшеты быстро центрифугировали при 90g и инкубировали при комнатной температуре еще в течение 10 мин для стабилизации люминесцентного сигнала. Интенсивность люминесцентных сигналов детектировали на PHERAstar Plus.
Оценка развития фиброза стенки ободочной кишки на модели колита.
Соединение формулы (I) вводили перорально в дозе 30 мг/кг/сутки крысам Спрегью-Даули, начиная с 5 суток перед индукцией колита 2,4,6-тринитробензолсульфоновой кислотой (TNBS) и до эвтаназии.
Для индукции колита крыс Спрегью-Даули подвергали анестезии на 2 ч с использованием внутрибрюшинного введения пентобарбитала. Колит индуцировали ректальным введением TNBS (в дозе 80 мг/кг в 40% этаноле) на расстояние 8 см от ануса. Животных убивали через 4 суток после введения TNBS и превентивное действие соединения формулы (I) оценивали с использованием анализа экспрессии генов.
Исследование экспрессии гена α-SMA в образцах ободочной кишки.
Общую фракцию РНК выделяли с использованием набора RNeasy® Mini (Qiagen), следуя инструкциям изготовителя. 1 мкг общей фракции РНК обратно транскрибировали в кДНК с использованием обратной транскриптазы вируса лейкоза мышей M-MLV RT (Moloney Murine Leukemia Virus Reverse Transcriptase) (Invitrogen, каталожный номер 28025) в присутствии буфера RT 1x (Invitrogen), 1 мМ DTT (Invitrogen), 0,18 мМ dNTP (Promega), 200 нг pdN6 (Amersham) и 30E ингибитора РНКазы (Promega). Затем проводили количественную ПЦР с использованием детектирующей системы ПЦР в режиме реального времени CFX96 Touch™ (Biorad). Вкратце, реакции ПЦР проводили в 96-луночных планшетах с 5 мкл 5х разбавленной смеси для обратной транскрипции с использованием набора iQ SYBR Green Supermix.
Экспериментальными условиями были: объем реакционной смеси 25 мкл, 3 мМ MgCl2 и по 0,5 мкл каждого из обратного и прямого праймеров (10 пмоль).__________________________
Название праймера | Последовательность (5’->3’) |
Прямой праймер aS МА (SEQ ID NO: 1) | ACTGGGACGACATGGAAAAG |
Обратный праймер aS МА (SEQ ID NO: 2) | CATCTCCAGAGTCCAGCACA |
Уровни экспрессии нормализовали с использованием экспрессии гена 36В4 в качестве стандарта.
Название праймера | Последовательность (5’->3’) |
Прямой праймер 36В4 (SEQIDNO: 19) | CATGCTCAACATCTCCCCCTTCTCC |
Обратный праймер 36В4 (SEQIDNO: 20) | GGGAAGGTGTAATCCGTCTCCACAG |
Для каждого гена строили стандартные кривые выбором наилучших точек (по меньшей мере, три точки) для того, чтобы эффективность реакции ПЦР была близкой к 100%, и коэффициент корреляции был близок к 1. Уровни экспрессии определяли с использованием уравнения стандартной кривой для гена домашнего хозяйства и гена-мишени (принимая во внимание специфическую эффективность ПЦР для каждого гена-мишени).
Коэффициент индукции против крыс, обработанных TNBS, определяли следующим образом:
А-В
Коэффициент индукции = В ;
А = уровень экспрессии исследуемого гена в группе с введением TNBS + соединение формулы (I) в дозе 30 мг/кг/сутки;
В = уровень экспрессии исследуемого гена в группе с введением TNBS.
Таким образом, чем ниже коэффициент индукции, тем сильнее интересующее соединение ингибирует фиброз стенки ободочной кишки, индуцированный TNBS. Результаты опытов выражали в виде среднего значения коэффициента индукции ± стандартное отклонение (SD).
Результаты и выводы.
Избыточная активность PDGF ассоциирована с развитием нескольких расстройств у человека, включая фиброз органов и туморогенез. PDGF играет ключевую роль в росте миофибробластов стимуляцией их пролиферации, миграции и выживаемости.
Неожиданно результаты опытов, проведенных заявителями, показали, что соединение формулы (I) ингибирует с дозозависимым характером пролиферацию hHSC, которая индуцирована обработкой PDGF (фиг. 1) или обработкой сывороткой (фиг. 2). Как показано на фиг. 1 и 2, эффективность соединения формулы (I) сравнима с таковой селективного ингибитора PDGFR, креноланиба. Соединение формулы (I) обладает антипролиферативными свойствами и оказывает отрицательное влияние на функциональное активирование сигнального пути с участием PDGFR. Индуцированная лигандом гомо- и гетеродимеризация рецептора приводит к аутофосфорилированию определенных остатков тирозина в цитоплазмати
- 8 031718 ческом домене PDGFR и к активации некоторых путей трансдукции сигналов, включая фосфатидилинозитол-3-киназу (PI3K), Ras-MAPK, семейство киназ Src и фосфолипазу Cy (PLCy). Это приводит к стимуляции пролиферации и выживаемости клеток.
Неожиданно результаты опытов, проведенных заявителями изобретения, показали, что соединение формулы (I) ингибирует фосфорилирование тирозина 751 в PDGFRP, которая индуцируется в hHSC под действием PDGF-BB. Ингибирование соединением формулы (I) является дозозависимым и таким же эффективным, как ингибирование, вызванное селективным ингибитором PDGFR, креноланибом (фиг. 3).
В отношении фиброза, различные рецепторные тирозинкиназы уже идентифицированы в качестве детерминант прогрессирования заболевания и потенциальных мишеней для антифиброзных препаратов. Результаты недавних доклинических исследований указывают, что одновременное ингибирование путей, активированных PDGFR, VEGFR и FGFR, приводило к повышенной антифиброзной активности на моделях фиброза легких по сравнению с лечением, при котором более избирательно ингибируется сигнальный путь с участием PDGFR. Как показано в табл. 2, заявители неожиданно установили, что соединение формулы (I) было способно ингибировать киназную активность выбранных киназ, включая рецепторные тирозинкиназы PDGFR, VEGFR, FGFR, которые участвуют в развитии фиброза и рака.
Таблица 2 Соединение формулы (I) ингибирует киназную активность выбранных рецепторных тирозинкиназ по данным биохимического анализа активности киназ. Приведенные результаты получали в концентрации 10 мкмоль/л
Как показано в табл. 3, заявители неожиданно обнаружили, что в дополнении к способности напрямую ингибировать киназы, соединение формулы (I) способно ингибировать в активированных hHSC экспрессию классических профибротических генов, таких как aSMA, Col1a1, Col4a1, TGFPR1, которые индуцируются обработкой TGFP1 и экспрессией VEGFR1, VEGFR2, FGFR1, рецепторами тирозинкиназ, которые ассоциированы с развитием фиброза, судя по ранее опубликованным источникам [63]. Как показано в табл. 3, профиль ингибирования генов под действием соединения формулы (I) очень похож на профиль, полученный с сорафенибом, ингибитором тирозинкиназ, который нацелен на PDGFR, VEGFR, RAF и KIT. Ранее было показано, что сорафениб обладает высокой антифиброзной активностью на доклинических моделях и в исследованиях по оценке клинической эффективности в лечении таких видов рака, как гепатоцеллюлярная карцинома (НСС) и почечно-клеточная карцинома (RCC) [64-66].
Экспрессию профибротических и ассоциированных с раком генов индуцировали в человеческих первичных звездчатых клетках печени (hHSC) обработкой TGFP1 (1 нг/мл) в бессывороточной среде. Сорафениб (Nevaxar), ингибитор многих рецепторных тирозинкиназ, который проявляет одновременно антифиброзные и противораковые свойства, использовали в качестве стандартного препарата. Экспрессию интересующих генов в обработанных и необработанных hHSC определяли количественной ОТ-ПЦР через 24 ч после воздействия TGFP1.
Результаты опытов выражали в виде значений Emax, которые указывают на максимальное ингибирование, полученное в концентрации 10 мкмоль/л. Статистический анализ проводили с использованием одностороннего анализа ANOVA с последующей обработкой апостериорными тестами Бонферрони с использованием программного обеспечения Sigma Plot 11.0.
[* р<0,05; ** р<0,01; *** р<0,001 (сравнение против группы с TGFP1 в концентрации 1 нг/мл)].
- 9 031718
Таблица 3
Соединение формулы (I) и сорафениб, оба, оказывают отрицательное влияние на экспрессию одних и тех же генов, которые индуцируются в hHSC обработкой ΤΘΤβί
Снижение экспрессии гена-мишени по сравнению с клетками hHSC, обработанными одним TGFpi (1 нг/мл) | ||||||
Снижение, индуцированное соединением формулы (I) | Снижение, индуцированное сорафенибом | |||||
Ген- | Концен- | Emax | Р | Концен- | Emax | Р |
мишень | трация | значение | трация | значение | ||
ocSMA | 10 мкМ | -90% | * * * | 10 мкМ | -95% | |
Collocl | 10 мкМ | -56% | * * * | 3 мкМ | -93% | |
Col4ocl | 10 мкМ | -41% | * * | 10 мкМ | -93% | * * * |
TGFpRl | 10 мкМ | -44% | * * | 10 мкМ | -80% | * * * |
VEGFR1 | 10 мкМ | -90% | * * * | 1 0 мкМ | -95% | * * * |
VEGFR2 | 10 мкМ | -45% | * | 3 мкМ | -73% | * * * |
HGFR | 10 мкМ | -47% | * | 10 мкМ | -79% | |
FGFR1 | 10 мкМ | -33% | * | 3 мкМ | -43% | * * |
c-KIT | 10 мкМ | -98% | к к к | Не определено |
Фиброз кишечника является патогенным признаком воспалительного заболевания кишечника (IBD) [67] и проявляется на доклинических моделях данного заболевания. К настоящему времени не идентифицировано препарата для предупреждения развития фиброза при IBD или лечения уже возникшего фиброза. Как показано на фиг. 4, заявители настоящего изобретения неожиданно установили, что индуцированное колитом повышение уровня экспрессии маркера фиброза (α-SMA) в ободочной кишке частично предупреждалось введением соединения формулы (I) на доклинической модели IBD, вызванной 2,4,6-тринитробензолсульфоновой кислотой (TNBS). На основании этого можно предположить, что соединение формулы (I) может предупредить развитие и/или лечить фиброз в различных органах и при различных расстройствах.
Таблица 4 Соединение формулы (I) ингибирует пролиферацию экспериментальных клеточных линий, полученных из выбранных типов рака. Степень ингибирования выражали в виде значений ЕС50 в мкмоль/л, которые рассчитывали по кривой, построенной на основе экспериментальных данных, как описано в разделе Материалы и методы
Тип рака | Опухолевая клеточная линия | ес50 (мкМ) |
Почечноклеточная карцинома | 786-0 | 28 |
Менингиома, ассоциированная с нейрофиброматозом | T98G | 4 |
U-87 MG | 17 | |
Лейкоз | CCRF-CEM | 2 |
MOLT-4 | >5 | |
Солидные опухоли при немелкоклеточном раке легких | А549 | >34 |
NCI-H460 | >29 | |
Солидные опухоли при колоректальном раке | SW480 | 3 |
Сасо-2 | >43 | |
Гастроинтестинальная стромальная опухоль (GIST) | AGS | >27 |
- ί0 031718
MKN-45 | 11 | |
Нейроэндокринная опухоль поджелудочной железы | ВхРС-3 | 14 |
AsPc-1 | 16 | |
Миелопролиферативные/миелодиспластические заболевания | RPMI 8226 | 11 |
Дерматофибросаркома | А431 | >31 |
А375 | >44 | |
Солидные опухоли при раке молочной железы | MDA-MB-468 | 22 |
MCF7 | 16 | |
Солидные опухоли при раке щитовидной железы | НТС-СЗ | 6 |
Рак предстательной железы | LNCaP | > 14 |
РС-3 | 5 |
Большинство лекарственных препаратов с противораковой активностью оказывает отрицательное действие на пролиферацию раковых клеток. Как показано в табл. 4, заявители неожиданно установили, что соединение формулы (I) ингибировало пролиферацию различных линий опухолевых клеток, соответствующих различным типам опухолей.
Способность индуцировать апоптоз активированных hHSC является важной мишенью при фиброзных заболеваниях. Заявители настоящего изобретения неожиданно установили, что соединение формулы (I) обладает умеренными проапоптотическими свойствами, как показано на фиг. 5, но неожиданно было показано, что оно потенцирует дозозависимым образом проапоптотическую активность ингибитора киназ широкого спектра, стауроспорина.
- 11 031718
Источники литературы
1. Beyer, С., et al., Biochim Biophys Acta, 2012.
2. Bonner, J.C., Cytokine Growth Factor Rev, 2004.15(4): p. 255-73.
3. Alvarez, R.H., et al., Mayo Clin Proc, 2006. 81(9): p. 1241-57.
4. Klareskog, L., etal., Arthritis Rheum, 1990. 33(10): p. 1534-41.
5. Ludwicka, A., et al., J Rheumatol, 1995. 22(10): p. 1876-83.
6. Yamakage, A., et al., J Exp Med, 1992. 175(5): p. 1227-34.
7. Abboud, H.E., Annu Rev Physiol, 1995. 57: p. 297-309.
8. Alpers, C.E., et al., Kidney Int, 1992. 42(2): p. 390-9.
9. Caenazzo, A., et al., Acta Haematol, 1989. 81(3): p. 131-5.
10. Martyre, M.C., et al., Br J Haematol, 1991.77(1): p. 80-6.
11. Kitagawa, M., et al., Hum Pathol, 1994. 25(7): p. 723-6.
12. Katoh, 0., et al., Am J Hematol, 1990. 35(3): p. 145-50.
13. Kimura, A., et al., Leuk Lymphoma, 1995. 18(3-4): p. 237-42.
14. Wickenhauser, C., et al., Leukemia, 1995. 9(2): p. 310-5.
15. Rice, A.B., et al., Am J Pathol, 1999. 155(1): p. 213-21.
16. Savikko, J., etal., Transplantation, 2003. 75(8): p. 1147-53.
17. Beham-Schmid, C„ et al., Blood, 2002. 99(1): p. 381-3.
18. Gollob, J.A., et al., Semin Oncol, 2006. 33(4): p. 392-406.
19. Stockl, L., et al., Oncogene, 2003. 22(17): p. 2604-10.
20. Wilhelm, S.M., et al., Cancer Res, 2004. 64(19): p. 7099-109.
21. Wilhelm, S.M., et al., Mol Cancer Ther, 2008. 7(10): p. 3129-40.
22. Yarden, Y., et al., Nat Rev Cancer, 2012.12(8): p. 553-63.
23. Halper, J., Vet Pathol, 2010. 47(1): p. 77-97.
24. Sliwkowski, M.X., etal., Science, 2013. 341(6151): p. 1192-8.
25. Montero, J.C., et al., Clin Cancer Res, 2011. 17(17): p. 5546-52.
26. Fratto, M.E., et al., Clin Ter, 2010. 161(5): p. 475-82.
- 12 031718
27. Malavaki, C.J., et al., FEBS J, 2013. 280(10): p. 2477-89.
28. Lemieux, S., et al., Anticancer Agents Med Chem, 2013. 13(5): p. 748-61.
29. Qiu, Z.Y., et al., Cancer Biol Ther, 2013. 15(3).
30. Cortes, J.E., et al., N Engl J Med, 2013. 369(19): p. 1783-96.
31. Rassi, F.E., et al., Pharmgenomics Pers Med, 2013. 6: p. 57-62.
32. Walker, A.S., et al., J Cancer, 2014. 5(1): p. 44-57.
33. McKeown, E., et al., J Cancer, 2014. 5(1): p. 31-43.
34. Hocking, C.M., et al., Therap Adv Gastroenterol, 2014. 7(1): p. 20-37.
35. Fields, R.C., et al., Ann Surg Oncol, 2011. 18(2): p. 328-36.
36. Kamar, F.G., et al., Clin Sarcoma Res, 2013. 3(1): p. 5.
37. Kerob, D., et al., Clin Cancer Res, 2010. 16(12): p. 3288-95.
38. Malhotra, B., et al., Curr Opin Oncol, 2012. 24(4): p. 419-24.
39. Doyle, L.A., et al., Histopathology, 2014. 64(1): p. 53-67.
40. Miettinen, M., et al., Gastroenterol Clin North Am, 2013. 42(2): p. 399-415.
41. Joensuu, H„ et al., Lancet, 2013. 382(9896): p. 973-83.
42. Corless, C.L., Mod Pathol, 2014. 27 Suppl 1: p. S1-S16.
43. Hutson, T.E., et al., J Clin Oncol, 2013.
44. Domblides, C., et al., Expert Opin Emerg Drugs, 2013.18(4): p. 495-511.
45. Hepgur, M., et al., Biologies, 2013. 7: p. 139-48.
46. Heudel, P., et al., Clin Pharmacol, 2012. 4: p. 65-70.
47. Binder, D., et al., Clin Med Insights Oncol, 2013. 7: p. 221-234.
48. Savas, P., et al., J Thorac Dis, 2013. 5(Suppl 5): p. S579-S592.
49. Zarogoulidis, K., et al., J Thorac Dis, 2013. 5(Suppl 4): p. S389-S396.
50. Maniu, C.M., et al., Rev Med Suisse, 2013. 9(368): p. 17-21.
51. Georgin-Lavialle, S„ et al., Blood, 2013.121(8): p. 1285-95.
52. Verstovsek, S., Eur J Haematol, 2013. 90(2): p. 89-98.
53. Evans, D.G., Orphanet J Rare Dis, 2009. 4: p. 16.
54. Evans, D.G., et al., Clin Cancer Res, 2009. 15(16): p. 5032-9.
55. Norden, A.D., et al., J Neurooncol, 2010. 96(2): p. 211-7.
56. Karajannis, M.A., et al., Neuro Oncol, 2012. 14(9): p. 1163-70.
57. Nunes, F.P., et al., PLoS One, 2013. 8(3): p. e59941.
58. Zhang, J., et al., J Natl Cancer Inst, 2013. 105(14): p. 1005-17.
59. Bisht, S., et al., Expert Opin Drug Metab Toxicol, 2013. 9(6): p. 777-88.
60. Heidegger, I., et al., J Steroid Biochem Mol Biol, 2013. 138: p. 248-56.
61. Haddad, R.I., J Natl Compr Cane Netw, 2013. 11(5 Suppl): p. 705-7.
62. Jin, J., et al., Curr Probl Surg, 2013. 50(6): p. 241-89.
63. Chaudhary, N.I., et al., Eur Respir J, 2007. 29(5): p. 976-85.
64. Hennenberg, M., et al., Lab Invest, 2011.91(2): p. 241-51.
65. Wang, Y., et al., J Hepatol, 2010. 53(1): p. 132-44.
66. Xie, B„ et al., Dig Dis Sci, 2012. 57(5): p. 1122-9.
67. Latella, G„ et al., Eur Rev Med Pharmacol Sci, 2013. 17(10): p. 1283-304.
- 13 031718
СПИСОК ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ <110> GENFIT <120> СПОСОБЫ ЛЕЧЕНИЯ ФИБРОЗА И РАКА <130> B1544PC00 <160> 20 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 20 <212> ДНК <213> Искусственная <220>
<223> Праймер <400> 1 actgccttgg tgtgtgacaa 20 <210> 2 <211> 20 <212> ДНК <213> Искусственная <220>
<223> Праймер <400> 2 tggtgatgat gccatgttct <210> 3 <211> 20 <212> ДНК <213> Искусственная <220>
<223> Праймер <400> 3 aatggtgctc ctggtattgc <210> 4 <211> 20 <212> ДНК <213> Искусственная <220>
<223> Праймер <400> 4 accaggttca ccgctgttac <210> 5 <211> 20 <212> ДНК
- 14 031718
<213> | Искусственная | |
<220> <223> | Праймер | |
<400> | 5 | |
gttggtctac cgggactcaa | 20 |
<210> 6 <211> 20 <212> ДНК <213> Искусственная <220>
<223> Праймер <400> 6 gttcacctct gatcccctga <210> 7 <211> 20 <212> ДНК <213> Искусственная <220>
<223> Праймер <400> 7 tgttggtacc caaggaaagc <210> 8 <211> 20 <212> ДНК <213> Искусственная <220>
<223> Праймер <400> 8 cactctgtgg tttggagcaa <210> 9 <211> 20 <212> ДНК <213> Искусственная <220>
<223> Праймер <400> 9 tgtcaatgtg aaaccccaga
<210> | 10 |
<211> | 20 |
<212> | ДНК |
<213> | Искусственная |
<220> |
- 15 031718
<223> Праймер | |
<400> 10 gtcacacctt gcttcggaat | 20 |
<210> 11 <211> 20 <212> ДНК <213> Искусственная <220>
<223> Праймер <400> 11 agcgatggcc tcttctgtaa <210> 12 <211> 20 <212> ДНК <213> Искусственная <220>
<223> Праймер <400> 12 acacgactcc atgttggtca <210> 13 <211> 20 <212> ДНК <213> Искусственная <220>
<223> Праймер <400> 13 caggcagtgc agcatgtagt <210> 14 <211> 20 <212> ДНК <213> Искусственная <220>
<223> Праймер <400> 14 gatgattccc tcggtcagaa
<210> | 15 |
<211> | 20 |
<212> | ДНК |
<213> | Искусственная |
<220> | |
<223> | Праймер |
<400> | 15 |
- 16 031718 gaagttcaaa tgcccttcca <210> 16 <211> 20 <212> ДНК <213> Искусственная <220>
<223> Праймер <400> 16 ccagctggta tgtgtggttg <210> 17 <211> 20 <212> ДНК <213> Искусственная <220>
<223> Праймер <400> 17 gtctccacca tccatccatc <210> 18 <211> 20 <212> ДНК <213> Искусственная <220>
<223> Праймер <400> 18 gttggtgcac gtgtatttgc
<210> | 19 | |
<211> | 25 | |
<212> | ДНК | |
<213> | Искусственная | |
<220> | ||
<223> | Праймер | |
<400> | 19 | |
catgctcaac atctccccct tctcc | 25 |
<210> | 20 | |
<211> | 25 | |
<212> | ДНК | |
<213> | Искусственная | |
<220> | ||
<223> | Праймер | |
<400> | 20 | |
gggaaggtgt aatccgtctc cacag | 25 |
- 17 031718
Claims (7)
- ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ1. Применение соединения 1-[4-метилтиофенил]-3-[3,5-диметил-4- карбоксидиметилметилоксифенил]проп-2-ен-1-он для лечения или профилактики фиброзных заболеваний, связанных с тирозинкиназой, где фиброзное заболевание не является фиброзом печени, или для лечения или профилактики рака, связанного с тирозинкиназой.
- 2. Применение по п.1, где фиброзное заболевание, связанное с тирозинкиназой, представляет фиброз легких, сердца, мышечной ткани, кожи, мягких тканей, костного мозга, кишечника и суставов.
- 3. Применение по п.1, где фиброзное заболевание, связанное с тирозинкиназой, представляет фиброз легких, идиопатический фиброз легких, кистозный фиброз, фиброз эндомиокарда, фиброз средостения, миелофиброз, ретроперитонеальный фиброз, прогрессирующий массивный фиброз, нефрогенный системный фиброз, фиброз, ассоциированный с воспалительным заболеванием кишечника (IBD), фиброз, ассоциированный с колитом, болезнь Крона, келоид, перенесенный инфаркт миокарда, склеродерму/системный склероз, артрофиброз и адгезивный капсулит.
- 4. Применение по п.1, где рак, связанный с тирозинкиназой, представляет рак, связанный с PDGFR, VEGFR или KIT.
- 5. Применение по п.1 или 4, где рак представляет почечно-клеточную карциному, гастроинтестинальную стромальную опухоль (GIST), рак желудка, менингиому, связанную с нейрофиброматозом, нейроэндокринные опухоли поджелудочной железы, экзокринные опухоли поджелудочной железы, лейкоз, миелопролиферативные/миелодиспластические заболевания, мастоцитоз, дерматофибросаркому, солидные опухоли, включая рак молочной железы, легких, щитовидной железы или колоректальный рак, или рак предстательной железы.
- 6. Применение соединения 1-[4-метилтиофенил]-3-[3,5-диметил-4-карбоксидиметилметилоксифенил]проп-2-ен-1-он для радикального лечения рака печени.
- 7. Применение по п.6, где рак печени представляет гепатоцеллюлярную карциному.
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
EP13305067 | 2013-01-18 | ||
PCT/EP2014/051060 WO2014111584A1 (en) | 2013-01-18 | 2014-01-20 | Methods of treatment of fibrosis and cancers |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
EA201591345A1 EA201591345A1 (ru) | 2015-11-30 |
EA031718B1 true EA031718B1 (ru) | 2019-02-28 |
Family
ID=47628079
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
EA201591345A EA031718B1 (ru) | 2013-01-18 | 2014-01-20 | Лечение фиброза и рака, связанных с тирозинкиназой |
Country Status (26)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US20150352065A1 (ru) |
EP (1) | EP2948137B1 (ru) |
JP (1) | JP6218854B2 (ru) |
KR (1) | KR102196277B1 (ru) |
CN (1) | CN105120855B (ru) |
AU (1) | AU2014206781B2 (ru) |
CA (1) | CA2897258C (ru) |
CY (1) | CY1121156T1 (ru) |
DK (1) | DK2948137T3 (ru) |
EA (1) | EA031718B1 (ru) |
ES (1) | ES2702038T3 (ru) |
HK (1) | HK1214773A1 (ru) |
HU (1) | HUE042569T2 (ru) |
IL (1) | IL239715B (ru) |
LT (1) | LT2948137T (ru) |
MD (1) | MD4629B1 (ru) |
MX (1) | MX361565B (ru) |
NZ (1) | NZ709420A (ru) |
PH (1) | PH12015501566B1 (ru) |
PL (1) | PL2948137T3 (ru) |
PT (1) | PT2948137T (ru) |
SG (1) | SG11201505281PA (ru) |
SI (1) | SI2948137T1 (ru) |
TR (1) | TR201819042T4 (ru) |
WO (1) | WO2014111584A1 (ru) |
ZA (1) | ZA201505151B (ru) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2825399C1 (ru) * | 2023-08-10 | 2024-08-26 | Егор Александрович Туровский | Наночастица селена, покрытая мультикиназным ингибитором сорафенибом, с противофиброзным действием и способ ее получения |
Families Citing this family (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
HUE042569T2 (hu) | 2013-01-18 | 2019-07-29 | Genfit | Rákok és fibrózis kezelési eljárások |
US11162097B2 (en) * | 2016-02-23 | 2021-11-02 | Nogra Pharma Limited | Methods of treating intestinal fibrosis using SMAD7 inhibition |
US11478440B2 (en) * | 2017-04-18 | 2022-10-25 | Genfit | Combination of Elafibranor or derivatives thereof with an anti-NASH, anti-fibrotic or anti-cholestatic agent |
EP3830070A1 (en) | 2018-08-03 | 2021-06-09 | Genfit | Elafibranor salts |
GB201901507D0 (en) * | 2019-02-04 | 2019-03-27 | St Georges Hospital Medical School | New treatment |
JP2023513712A (ja) | 2020-02-10 | 2023-04-03 | ジェンフィット | エラフィブラノールの多形体 |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20080051465A1 (en) * | 2001-06-20 | 2008-02-28 | Metaproteomics, Llc | Xanthohumol and tetrahydro-isoalpha acid based protein kinase modulation cancer treatment |
WO2011064350A1 (en) * | 2009-11-26 | 2011-06-03 | Genfit | Use of 1,3-diphenylprop-2-en-1-one derivatives for treating liver disorders |
Family Cites Families (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
FR2841784B1 (fr) * | 2002-07-08 | 2007-03-02 | Composition a base de derives de 1,3-diphenylprop-2en-1-one substitues, preparation et utilisations | |
FR2841900B1 (fr) | 2002-07-08 | 2007-03-02 | Genfit S A | Nouveaux derives de 1,3-diphenylprop-2-en-1-one substitues, preparation et utilisations |
FR2857361B1 (fr) * | 2003-07-08 | 2005-09-09 | Genfit S A | PREPARATION DE DERIVES DE 1,3-DIPHENYPROP-2-¼n-1-one |
ES2384060B1 (es) * | 2010-03-24 | 2013-09-23 | Lipotec S.A. | Cápsulas de nanopartículas lipídicas. |
HUE042569T2 (hu) | 2013-01-18 | 2019-07-29 | Genfit | Rákok és fibrózis kezelési eljárások |
-
2014
- 2014-01-20 HU HUE14702771A patent/HUE042569T2/hu unknown
- 2014-01-20 PT PT14702771T patent/PT2948137T/pt unknown
- 2014-01-20 DK DK14702771.8T patent/DK2948137T3/en active
- 2014-01-20 EA EA201591345A patent/EA031718B1/ru not_active IP Right Cessation
- 2014-01-20 SG SG11201505281PA patent/SG11201505281PA/en unknown
- 2014-01-20 TR TR2018/19042T patent/TR201819042T4/tr unknown
- 2014-01-20 ES ES14702771T patent/ES2702038T3/es active Active
- 2014-01-20 US US14/760,880 patent/US20150352065A1/en not_active Abandoned
- 2014-01-20 MX MX2015009251A patent/MX361565B/es active IP Right Grant
- 2014-01-20 KR KR1020157021736A patent/KR102196277B1/ko active IP Right Grant
- 2014-01-20 LT LTEP14702771.8T patent/LT2948137T/lt unknown
- 2014-01-20 CA CA2897258A patent/CA2897258C/en active Active
- 2014-01-20 WO PCT/EP2014/051060 patent/WO2014111584A1/en active Application Filing
- 2014-01-20 JP JP2015553119A patent/JP6218854B2/ja active Active
- 2014-01-20 PL PL14702771T patent/PL2948137T3/pl unknown
- 2014-01-20 AU AU2014206781A patent/AU2014206781B2/en active Active
- 2014-01-20 EP EP14702771.8A patent/EP2948137B1/en active Active
- 2014-01-20 MD MDA20150076A patent/MD4629B1/ru not_active IP Right Cessation
- 2014-01-20 NZ NZ709420A patent/NZ709420A/en unknown
- 2014-01-20 SI SI201431009T patent/SI2948137T1/sl unknown
- 2014-01-20 CN CN201480005335.0A patent/CN105120855B/zh active Active
-
2015
- 2015-06-30 IL IL239715A patent/IL239715B/en active IP Right Grant
- 2015-07-14 PH PH12015501566A patent/PH12015501566B1/en unknown
- 2015-07-17 ZA ZA2015/05151A patent/ZA201505151B/en unknown
-
2016
- 2016-03-11 HK HK16102854.3A patent/HK1214773A1/zh unknown
-
2017
- 2017-05-04 US US15/586,456 patent/US10792277B2/en active Active
-
2018
- 2018-12-14 CY CY20181101346T patent/CY1121156T1/el unknown
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20080051465A1 (en) * | 2001-06-20 | 2008-02-28 | Metaproteomics, Llc | Xanthohumol and tetrahydro-isoalpha acid based protein kinase modulation cancer treatment |
WO2011064350A1 (en) * | 2009-11-26 | 2011-06-03 | Genfit | Use of 1,3-diphenylprop-2-en-1-one derivatives for treating liver disorders |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2825399C1 (ru) * | 2023-08-10 | 2024-08-26 | Егор Александрович Туровский | Наночастица селена, покрытая мультикиназным ингибитором сорафенибом, с противофиброзным действием и способ ее получения |
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Hall et al. | Preclinical activity of ARQ 087, a novel inhibitor targeting FGFR dysregulation | |
Katsha et al. | Aurora kinase A promotes inflammation and tumorigenesis in mice and human gastric neoplasia | |
AU2016341445B2 (en) | 2-aryl- and 2-heteroaryl-substituted 2-pyridazin-3(2H)-one compounds as inhibitors of FGFR tyrosine kinases | |
US10792277B2 (en) | Methods of treatment of fibrosis and cancers | |
Barr Kumarakulasinghe et al. | Molecular targeted therapy in the treatment of advanced stage non‐small cell lung cancer (NSCLC) | |
Bronte et al. | Driver mutations and differential sensitivity to targeted therapies: a new approach to the treatment of lung adenocarcinoma | |
Corless et al. | Gastrointestinal stromal tumours: origin and molecular oncology | |
Ahsan et al. | Role of epidermal growth factor receptor degradation in cisplatin-induced cytotoxicity in head and neck cancer | |
TWI827550B (zh) | 癌症之診斷及治療方法 | |
Kantarjian et al. | A phase 1 study of AMG 900, an orally administered pan‐aurora kinase inhibitor, in adult patients with acute myeloid leukemia | |
Tomida et al. | VEGF pathway-targeting drugs induce evasive adaptation by activation of neuropilin-1/cMet in colon cancer cells | |
Yoon et al. | Targeted inhibition of FAK, PYK2 and BCL-XL synergistically enhances apoptosis in ovarian clear cell carcinoma cell lines | |
KR20090095571A (ko) | 암을 검출하고 조절하기 위한 방법 | |
Amunjela et al. | POPDC1 is suppressed in human breast cancer tissues and is negatively regulated by EGFR in breast cancer cell lines | |
Park et al. | Predictive factors for the efficacy of cetuximab plus chemotherapy as salvage therapy in metastatic gastric cancer patients | |
Ferrari et al. | Antineoplastic activity of the multitarget tyrosine kinase inhibitors CLM3 and CLM94 in medullary thyroid cancer in vitro | |
Burkard et al. | Validating cancer drug targets through chemical genetics | |
Bayazeid et al. | Correlation analysis of target selectivity and side effects of FDA‐approved kinase inhibitors | |
Zhang et al. | YL143, a novel mutant selective irreversible EGFR inhibitor, overcomes EGFRL858R, T790M‐mutant resistance in vitro and in vivo | |
Steelman et al. | Combining chemo-, hormonal and targeted therapies to treat breast cancer | |
Khan | Prognostic significance, predictive value, and targeting of the HER-family members in pancreatic cancer | |
Glaspy et al. | 3 Precision Oncology | |
Fresnais et al. | Safety and Activity of the Combination of Ceritinib and Dasatinib in Osteosarcoma | |
Yonesaka et al. | Alternating Therapy With Osimertinib and Afatinib Blockades EGFR Secondary Mutation in EGFR-Mutant Lung Cancer: A Single-Arm Phase II Trial | |
Giovannetti et al. | Pharmacology and clinical development of new molecularly targeted agents |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s) |
Designated state(s): AM AZ BY KZ KG TJ TM |