EA031679B1

EA031679B1 - Производные тетрагидрохинолина в качестве ингибиторов бромодомена

Info

Publication number: EA031679B1
Application number: EA201790484A
Authority: EA
Inventors: Стивен Джон Аткинсон; Дэвид Джонатан Хирст; Филип Дж. Хамфрис; Мэттью Дж. Линдон; Александер Дж. Престон; Джонатан Томас Сиал; Кристофер Роланд Уэллавэй
Original assignee: Глаксосмитклайн Интеллекчуал Проперти (№2) Лимитед
Priority date: 2014-09-12
Filing date: 2015-09-09
Publication date: 2019-02-28
Also published as: CO2017001601A2; CL2017000587A1; JP6531167B2; AU2015314184A1; RS58135B1; TW201625587A; CN106687453B; EA031679B9; HUE041694T2; EP3191476A1; DK3191476T3; CR20170090A; CN106687453A; PH12017500348B1; TWI686389B; PH12017500348A1; MA40366A; IL250397A0; SG11201701043UA; HRP20182064T1

Abstract

Настоящее изобретение относится к конкретным новым производным тетрагидрохинолин-6-карбоксамида, к фармацевтическим композициям, содержащим такие соединения, и к их применению в терапии в качестве ингибиторов бромодомена. Такие производные могут быть поэтому полезны для лечения заболеваний или состояний, при которых показан ингибитор бромодомена, таких как острое или хроническое аутоиммунное и/или воспалительное состояние или рак.

Description

Настоящее изобретение относится к конкретным новым производным тетрагидрохинолин-6карбоксамида, к фармацевтическим композициям, содержащим такие соединения, и к их применению в терапии в качестве ингибиторов бромодомена. Такие производные могут быть поэтому полезны для лечения заболеваний или состояний, при которых показан ингибитор бромодомена, таких как острое или хроническое аутоиммунное и/или воспалительное состояние или рак.

Область изобретения

Настоящее изобретение относится к новым соединениям, фармацевтическим композициям, содержащим такие соединения, и к их применению в терапии.

Предшествующий уровень техники

Геномы эукариотических организмов высокоупорядочены в ядре клетки. Длинные нити двухцепочечной ДНК (дезоксирибонуклеиновой кислоты) обернуты вокруг октамера гистоновых белков (чаще всего содержащих две копии гистонов Н2А, Н2В, Н3 и Н4) с образованием нуклеосомы. Затем эта основная единица далее упаковывается посредством агрегации и сворачивания нуклеосом с образованием высококонденсированной структуры хроматина. Возможен ряд различных состояний конденсации, и плотность этой структуры изменяется в ходе клеточного цикла, будучи наиболее компактной во время процесса деления клетки. Структура хроматина играет критически важную роль в регуляции транскрипции генов, которая не может эффективно осуществляться из высококонденсированного хроматина. Структура хроматина контролируется серией посттрансляционных модификаций гистоновых белков, в частности гистонов Н3 и Н4, и чаще всего в пределах гистоновых хвостов, которые простираются за пределы структуры коровой части нуклеосомы. Эти модификации включают ацетилирование, метилирование, фосфорилирование, убиквитинилирование, сумоилирование. Эти эпигенетические метки вносятся и стираются особыми ферментами, которые ставят метки на конкретных остатках в гистоновом хвосте, формируя таким образом эпигенетический код, который затем интерпретируется клеткой, давая возможность ген-специфичной регуляции структуры хроматина и, таким образом, транскрипции.

Ацетилирование гистонов чаще всего связано с активацией транскрипции генов, так как эта модификация ослабляет взаимодействие ДНК и гистонового октамера за счет изменения электростатического притяжения. Кроме этого физического изменения особые белки распознают и связываются с ацетилированными лизиновыми остатками в гистонах для считывания эпигенетического кода. Бромодомены представляют собой небольшие (приблизительно 110 аминокислот) обособленные домены в белках, которые связываются с ацетилированными лизиновыми остатками, как правило, но не эксклюзивно, в контексте гистонов. Существует семейство, состоящее примерно из 50 известных белков, которые содержат бромодомены, и они выполняют ряд функций в клетке.

Семейство BET бромодоменсодержащих белков включает 4 белка (BRD2, BRD3, BRD4 и BRDT), которые содержат тандемные бромодомены, способные связываться с двумя ацетилированными лизиновыми остатками, находящимися в непосредственной близости друг к другу, увеличивая специфичность взаимодействия. При нумерации с N-терминального конца каждого белка BET тандемные бромодомены обычно обозначают как связывающий домен 1 (BD1) и связывающий домен 2 (BD2) (Chung et al., J Med. Chem, 2011, 54, 3827-3838).

В Funabashi et al. описаны 1,2,3,4-тетрагидрохинолины и проведение анализа конфигурации и конформации (Funabashi et al., Bulletin of the Chemical Society of Japan, 1969, 42, 2885-2894).

В заявках на патенты WO 2011/054841, WO 2011/054848, WO 2012/143413, WO 2012/143415, WO 2012/150234 и PCT/EP 2014/054795 (опубликованной как WO 2014/140076) описан ряд производных тетрагидрохинолина в качестве ингибиторов бромодомена.

Были обнаружены дополнительные производные тетрагидрохинолина, которые ингибируют связывание бромодоменов с их штатными ацетилированными белками, более конкретно соединения, которые ингибируют связывание бромодоменов BET семейства с ацетилированными лизиновыми остатками (далее называемые ингибиторы бромодомена) и которые, как полагают, обладают одним или более чем одним свойством, которое может сделать их особенно подходящими для разработки в качестве фармацевтического продукта.

Краткое изложение сущности изобретения

В первом аспекте настоящего изобретения предложено соединение, выбранное из группы, состоящей из

- 1 031679

1-ацетил-4-((5-цианопиридин-2-ил)амино)-Л/-этил-2,3-диметил-1,2,3,4тетрагидрохинолин-6-карбоксамида;

-ацетил-4-((5-цианопиридин-2-ил)амино)-2,3-диметил-1,2,3,4тетрагидрохинолин-6-карбоксамида;

1-ацетил-4-((5-цианопиридин-2-ил)амино)-2,3-диметил-/\/-(тетрагидро-2/-/-пиран4-ил)-1,2,3,4-тетрагид рохинолин-6-карбоксамида;

1-ацетил-4-((5-цианопиридин-2-ил)амино)-/\/-((Я)-2-гидроксипропил)-2,3диметил-1,2,3,4-тетрагид рохинолин-6-карбоксамида;

1-ацетил-4-((5-цианопиридин-2-ил)амино)-/\/-((Б)-2-гидроксипропил)-2,3диметил-1,2,3,4-тетрагид рохинолин-6-карбоксамида;

1-ацетил-4-((5-хлорпиримидин-2-ил)амино)-/\/-этил-2,3-диметил-1,2,3,4тетрагидрохинолин-6-карбоксамида;

-ацетил-4-((5-хлорпиримидин-2-ил)амино)-2,3-диметил-1,2,3,4тетрагидрохинолин-6-карбоксамида;

1-ацетил-4-((5-хлорпиримидин-2-ил)амино)-2,3-диметил-Л/-(тетрагидро-2Нпиран-4-ил)-1,2,3,4-тетрагид рохинолин-6-карбоксамида;

1-ацетил-4-((5-хлорпиримидин-2-ил)амино)-Л/-((Б)-2-гидроксипропил)-2,3диметил-1,2,3,4-тетрагид рохинолин-6-карбоксамида;

1-ацетил-4-((5-хлорпиримидин-2-ил)амино)-/\/-((Я)-2-гидроксипропил)-2,3диметил-1,2,3,4-тетрагид рохинолин-6-карбоксамида;

-ацетил-4-((5-цианопиразин-2-ил)амино)-2,3-диметил-1,2,3,4тетрагидрохинолин-6-карбоксамида;

1-ацетил-4-((5-цианопиразин-2-ил)амино)-Л/-этил-2,3-диметил-1,2,3,4тетрагидрохинолин-6-карбоксамида;

1-ацетил-Л/-этил-4-((5-фторпиридин-2-ил)амино)-2,3-диметил-1,2,3,4тетрагидрохинолин-6-карбоксамида;

1-ацетил-4-((5-хлорпиримидин-2-ил)амино)-2-метил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин6-карбоксамида;

1-ацетил-4-((5-хлорпиримидин-2-ил)амино)-/\/-этил-2-метил-1,2,3,4тетрагидрохинолин-6-карбоксамида и

1-ацетил-4-((5-цианопиридин-2-ил)амино)-/\/-этил-2-метил-1,2,3,4тетрагидрохинолин-6-карбоксамида, или его соль, более предпочтительно его фармацевтически приемлемая соль.

Во втором аспекте настоящего изобретения предложена фармацевтическая композиция, содержащая соединение или его фармацевтически приемлемую соль по первому аспекту изобретения и один или более чем один фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель или эксципиент.

В третьем аспекте настоящего изобретения предложено соединение или его фармацевтически приемлемая соль по первому аспекту изобретения для применения в терапии, в частности в лечении заболеваний или состояний, при которых показан ингибитор бромодомена.

В четвертом аспекте настоящего изобретения предложен способ лечения заболеваний или состояний, при которых показан ингибитор бромодомена, у субъекта, нуждающегося в этом, включающий введение терапевтически эффективного количества соединения или его фармацевтически приемлемой соли по первому аспекту изобретения.

В пятом аспекте настоящего изобретения предложено применение соединения или его фармацевтически приемлемой соли по первому аспекту изобретения в изготовлении лекарственного средства для лечения заболеваний или состояний, при которых показан ингибитор бромодомена.

Подробное описание изобретения

В первом аспекте настоящее изобретение относится к соединениям, выбранным из группы, состоящей из соединения формулы (I), (II), (III), (IV), (V), (VI), (VII), (VIII), (IX), (X), (XI), (XII), (XIII), (XIV), (XV) и (XVI) _________________________________________

1-ацетил-4-((5-цианопиридин-2-ил)амино)-Л/-этил- 2,3-диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6карбоксамид (соединение формулы (I))	О ΗΝ Ν ^^лс/х Ά_ο о
1-ацетил-4-((5-цианопиридин-2-ил)амино)-2,3диметил-1,2,3,4-тетрагид рохинолин-6карбоксамид (соединение формулы (II))	ГУ о нмАС ^η’^νΛΟ& А_о
1-ацетил-4-((5-цианопиридин-2-ил)амино)-2,3диметил-Л/-(тетрагидро-2/-/-пиран-4-ил)-1,2,3,4тетрагидрохинолин-6-карбоксамид (соединение формулы (III))	о „Ж ^а«^лсй А_о о)

- 2 031679

1-ацетил-4-((5-цианопиридин-2-ил)амино)-Л/-((Я)-2- гидроксипропил)-2,3-диметил-1,2,3,4тетрагидрохинолин-6-карбоксамид (соединение формулы (IV))	гг™ О HN N А_о <^ιν>
1-ацетил-4-((5-цианопиридин-2-ил)амино)-Л/-((5)-2-	rr
гидроксипропил)-2,3-диметил-1,2,3,4-
тетрагидрохинолин-6-карбоксамид (соединение формулы (V))	CA_nA А_о μ
1-ацетил-4-((5-хлорпиримидин-2-ил)амино)-Л/этил-2,3-диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6карбоксамид (соединение формулы (VI))	аТ О HN N
	А_о μ)
1-ацетил-4-((5-хлорпиримидин-2-ил)амино)-2,3- диметил-1,2,3,4-тетрагид рохинолин-6-	лТ О HN N Д 1 /
карбоксамид (соединение формулы (VII))	^н*АА
	До
1-ацетил-4-((5-хлорпиримидин-2-ил)амино)-2,3диметил-Л/-(тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)-1,2,3,4тетрагидрохинолин-6-карбоксамид (соединение формулы (VIII))	N^Y^CI оХ о ηνΆ Xi А_о (VIII)
1- ацетил-4-((5-хлорпиримидин-2-ил)амино)-Л/-((Б)- 2- гидроксипропил)-2,3-диметил-1,2,3,4-	о АТ ΧΛίΎΫ
тетрагидрохинолин-6-карбоксамид (соединение формулы (IX))	- АД А_о ex)
1- ацетил-4-((5-хлорпиримидин-2-ил)амино)-Л/-((Я)- 2- гидроксипропил)-2,3-диметил-1,2,3,4-	^ΝΑθ' о нмАг хАА
тетрагидрохинолин-6-карбоксамид (соединение формулы (X))	А_о (х)
1-ацетил-4-((5-цианопиразин-2-ил)амино)-2,3-	-ncn о ΑΪ
диметил-1,2,3,4-тетрагид рохинолин-6карбоксамид (соединение формулы (XI))	^нАА
	А_о ^(Х\|)
1-ацетил-4-((5-цианопиразин-2-ил)амино)-Л/-этил- 2,3-диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-	X У О HN N
карбоксамид (соединение формулы (XII))
	А_о <^Х\|\|>
1-ацетил-Л/-этил-4-((5-фторпиридин-2-ил)амино)-	X
2,3-диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6карбоксамид (соединение формулы (XIII))	А_о о⁰¹¹»
1-ацетил-4-((5-хлорпиримидин-2-ил)амино)-2-	гг
метил-1,2,3,4-тетрагид рохинолин-6-карбоксамид (соединение формулы (XIV))	^АА
А_о ^(XIV)
1-ацетил-4-((5-хлорпиримидин-2-ил)амино)-Л/-	о „ДА
этил-2-метил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6карбоксамид (соединение формулы (XV))	Ао «
1- ацетил-4-((5-цианопиридин-2-ил)амино)-Л/-этил- 2- метил-1,2,3,4-тетрагид рохинолин-6-карбоксамид (соединение формулы (XVI))	О HN N -АА А_о (XVI)

Соединения формул (I)-(XVI) содержат по меньшей мере 2 хиральных атома, в результате чего могут быть образованы оптические изомеры, например энантиомеры и диастереомеры. Таким образом, настоящим изобретением охватываются все изомеры соединений формул (I)-(XVI) как в виде индивидуальных изомеров, выделенных так, что они являются, по существу, свободными от других изомеров (то есть чистые), так и в виде смесей (например рацематов и рацемических смесей). Индивидуальный изомер, выделенный так, что он является, по существу, свободным от других изомеров (то есть чистый), может быть выделен таким образом, что присутствует менее 10%, в частности менее чем примерно 1%, например менее чем примерно 0,1% других изомеров. Разделение изомеров может быть достигнуто посредством использования традиционных методик, известных специалистам в данной области техники, например посредством фракционной кристаллизации, колоночной флэш-хроматографии или ВЭЖХ (высокоэффективной жидкостной хроматографии).

В одном воплощении согласно настоящему изобретению предложено соединение формулы (Ia), которое представляет собой (2S,3R,4R)-1-ацетил-4-((5-цианопиридин-2-ил)амино)-N-этил-2,3-диметил1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксамид

(1а)

- 3 031679 или его соль.

В одном воплощении согласно настоящему изобретению предложено соединение формулы (IIa), которое представляет собой (2S,3R,4R)-1-ацетил-4-((5-цианопиридин-2-ил)амино)-2,3-диметил-1,2,3,4тетрагидрохинолин-6-карбоксамид

(На) или его соль.

В одном воплощении согласно настоящему изобретению предложено соединение формулы (IIIa), которое представляет собой (2S,3R,4R)-1 -ацетил-4-((5 -цианопиридин-2-ил)амино)-2,3 -диметил-№-(тетрагидро-2И-пиран-4-ил)-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксамид

или его соль.

В одном воплощении согласно настоящему изобретению предложено соединение формулы (IVa), которое представляет собой (2S,3R,4R)-1 -ацетил-4-((5-цианопиридин-2-ил)амино)-№-(^)-2-гидроксипропил)-2,3-диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксамид

или его соль.

В одном воплощении согласно настоящему изобретению предложено соединение формулы (Va), которое представляет собой (2S,3R,4R)-1-ацетил-4-((5-цианопиридин-2-ил)амино)-N-((S)-2-гидроксипропил)-2,3-диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксамид

или его соль.

В одном воплощении согласно настоящему изобретению предложено соединение формулы (VIa), которое представляет собой (2S,3R,4R)-1-ацетил-4-((5-хлорпиримидин-2-ил)амино)-N-этил-2,3-диметил-

или его соль.

В одном воплощении согласно настоящему изобретению предложено соединение формулы (VIIa), которое представляет собой (2S,3R,4R)-1-ацетил-4-((5-хлорпиримидин-2-ил)амино)-2,3-диметил-1,2,3,4тетрагидрохинолин-6-карбоксамид

или его соль.

В одном воплощении согласно настоящему изобретению предложено соединение формулы (VIIIa), которое представляет собой (2S,3R,4R)-1-ацетил-4-((5-хлорпиримидин-2-ил)амино)-2,3-диметил-N-(тет

- 4 031679 рагидро-2Н-пиран-4-ил)-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксамид

или его соль.

В одном воплощении согласно настоящему изобретению предложено соединение формулы (IXa), которое представляет собой ДО,3К,4К)-1-ацетил-4-((5-хлорпиримидин-2-ил)амино)-Ы-(^)-2-гидроксипропил)-2,3-диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксамид

или его соль.

В одном воплощении согласно настоящему изобретению предложено соединение формулы (Ха), которое представляет собой (2S,3R,4R)-1 -ацетил-4-((5-хлорпиримидин-2-ил)амино)-Ы-(^)-2-гидроксипропил)-2,3-диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксамид

или его соль.

В одном воплощении согласно настоящему изобретению предложено соединение формулы (XIa), которое представляет собой (2S,3R,4R)-1-ацетил-4-((5-цианопиразин-2-ил)амино)-2,3-диметил-1,2,3,4тетрагидрохинолин-6-карбоксамид

(Х1а) или его соль.

В одном воплощении согласно настоящему изобретению предложено соединение формулы (XIIa), которое представляет собой (2S,3R,4R)-1 -ацетил-4-((5-цианопиразин-2-ил)амино)-Ы-этил-2,3-диметил1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксамид

или его соль.

В одном воплощении согласно настоящему изобретению предложено соединение формулы (XIIIa), которое представляет собой (2S,3R,4R)-1-ацетил-N-этил-4-((5-фторпиридин-2-ил)амино)-2,3-диметил-

или его соль.

В одном воплощении согласно настоящему изобретению предложено соединение формулы (XIVa), которое представляет собой (2S,4R)- 1 -ацетил-4-((5-хлорпиримидин-2-ил)амино)-2-метил- 1 ,2,3,4-тетра

- 5 031679 гидрохинолин-6-карбоксамид

или его соль.

В одном воплощении согласно настоящему изобретению предложено соединение формулы (XVa), которое представляет собой (2S,4R)-1-ацетил-4-((5-хлорпиримидин-2-ил)амино)-N-этил-2-метил-1,2,3,4тетрагидрохинолин-6-карбоксамид

(XVa) или его соль.

В одном воплощении согласно настоящему изобретению предложено соединение формулы (XVIa), которое представляет собой (2S,4R)-1 -ацетил-4-((5-цианопиридин-2-ил)амино)-Ы-этил-2-метил-1,2,3,4тетрагидрохинолин-6-карбоксамид

(XVIa) или его соль.

Термин фармацевтически приемлемые относится к таким соединениям, веществам, композициям и лекарственным формам, которые согласно установленным медицинским требованиям являются подходящими для применения в контакте с тканями людей и животных, не проявляя излишнюю токсичность, раздражающее действие или другую проблему или осложнение, в соответствии с надлежащим соотношением риск/польза.

Используемые здесь термины, такие как соединение формулы (I)-(XVI) и соединения формул (I)(XVI), предназначены для обозначения каждого и всех соединений, как определено выше, то есть соединений формул (I), (II), (III), (IV), (V), (VI), (VII), (VIII), (IX), (X), (XI), (XII), (XIII), (XIV), (XV) и (XVI), а также соединений формул (Ia), (IIa), (IIIa), (IVa), (Va), (VIa), (VIIa), (VIIIa), (IXa), (Xa), (XIa), (XIIa), (XIIIa), (XIVa), (XVa) и (XVIa).

Следует понимать, что настоящим изобретением охватываются соединения формул (I)-(XVI) в виде свободного основания и в виде его солей, например в виде его фармацевтически приемлемой соли. В одном из воплощений изобретение относится к соединениям формул (I)-(XVI) в форме свободного основания. В одном из воплощений изобретение относится к соединениям формул (I)-(XVI) или к их фармацевтически приемлемой соли.

Вследствие их потенциального применения в медицине соли соединений формулы (I)-(XVI) желательно являются фармацевтически приемлемыми. Подходящие фармацевтически приемлемые соли могут включать соли присоединения кислот. Для обзора подходящих фармацевтически приемлемых солей см. Berge et al., J. Pharm. Sci., 66:1-19 (1977). Типично, фармацевтически приемлемая соль может быть легко получена при использовании желаемой кислоты или основания, как целесообразно. Полученная соль может осаждаться из раствора, и ее можно собрать посредством фильтрации или выделить посредством выпаривания растворителя.

Фармацевтически приемлемая соль присоединения кислоты может быть образована посредством взаимодействия соединения формул (I)-(XVI) с подходящей неорганической или органической кислотой (такой как бромисто-водородная, соляная, серная, азотная, фосфорная, янтарная, малеиновая, уксусная, пропионовая, фумаровая, лимонная, винная, молочная, бензойная, салициловая, аспарагиновая, паратолуолсульфоновая, бензолсульфоновая, метансульфоновая, этансульфоновая, нафталинсульфоновая, такая как 2-нафталинсульфоновая, или гексановая кислота), возможно в подходящем растворителе, таком как органический растворитель, с получением соли, которую обычно выделяют например посредством кристаллизации и фильтрации или посредством упаривания с последующим растиранием в порошок. Фармацевтически приемлемая соль присоединения кислоты соединений формул (I)-(XVI) может содер

- 6 031679 жать или представлять собой, например, гидробромид, гидрохлорид, сульфат, нитрат, фосфат, сукцинат, малеат, ацетат, пропионат, фумарат, цитрат, тартрат, лактат, бензоат, салицилат, глутамат, аспартат, паратолуолсульфонат, бензолсульфонат, метансульфонат, этансульфонат, нафталинсульфонат (например, 2-нафталинсульфонат) или гексаноат.

Другие фармацевтически неприемлемые соли, например формиаты, оксалаты или трифторацетаты, могут быть использованы, например, при выделении соединений формул (I)-(XVI) и включены в объем настоящего изобретения.

В объем изобретения включены все возможные стехиометрические и нестехиометрические формы солей соединений формул (I)-(XVI).

Следует понимать, что многие органические соединения могут образовывать комплексы с растворителями, в которых они подвергаются взаимодействию или из которых их осаждают или кристаллизуют. Эти комплексы известны как сольваты. Например, комплекс с водой известен как гидрат. Для образования сольватов могут быть использованы растворители с высокими температурами кипения и/или способные образовывать водородные связи, такие как вода, ксилол, N-метилпирролидинон, метанол и этанол. Способы идентификации сольватов включают ЯМР (ядерный магнитный резонанс) и микроанализ, но не ограничиваются ими. Сольваты соединений формул (I)-(XVI) входят в объем изобретения.

В объем изобретения включены все возможные стехиометрические и нестехиометрические формы сольватов соединений формул (I)-(XVI).

Изобретением охватываются все пролекарства соединений формул (I)-(XVI) или их фармацевтически приемлемой соли, которые при введении реципиенту способны давать (прямо или опосредованно) соединения формул (I)-(XVI), или их фармацевтически приемлемую соль, или их активный метаболит или остаток. Такие производные известны специалистам в данной области техники без дополнительных исследований. Тем не менее, сделана ссылка на учебное пособие Burger's Medicinal Chemistry and Drug Discovery, 5^th Edition, Vol 1: Principles and Practice, которое включено в данное описание посредством ссылки для расширения знаний о таких производных.

Соединения формул (I)-(XVI) могут находиться в кристаллической или аморфной форме. Кроме того, некоторые из кристаллических форм соединений формул (I)-(XVI) могут существовать в виде полиморфов, которые включены в объем настоящего изобретения. Такие полиморфные формы могут быть охарактеризованы и дифференцированы при использовании ряда традиционных аналитических методик, включая картины дифракции рентгеновских лучей на порошке (ДРЛП), инфракрасные (ИК) спектры, рамановские спектры, дифференциальную сканирующую калориметрию (ДСК), термогравиметрический анализ (ТГА) и твердотельный ядерный магнитный резонанс (ТТЯМР), но не ограничиваясь ими.

Из вышеизложенного следует понимать, что в объем изобретения включены сольваты, изомеры и полиморфные формы соединений формул (I)-(XVI) и их солей.

Соединения формул (I)-(XVI) или их соли могут быть получены различными способами, в частности теми, которые описаны здесь.

Специалистам в данной области техники следует понимать, что во время такого синтеза можно преимущественно защитить одну или более чем одну функциональную группу описанных выше соединений. Примеры защитных групп и способы их удаления могут быть найдены в T.W. Greene Protective Groups in Organic Synthesis (4^th edition, J. Wiley and Sons, 2006). Подходящие защитные группы амина включают ацил (например ацетил, карбамат (например 2',2',2'-трихлорэтоксикарбонил, бензилоксикарбонил или трет-бутоксикарбонил) и арилалкил (например, бензил), которые могут быть удалены посредством гидролиза (например при использовании кислоты, такой как соляная кислота в 1,4-диоксане или трифторуксусная кислота в дихлорметане) или восстановления (например, гидрогенолиза бензильной или бензилоксикарбонильной группы или восстановительного отщепления 2',2',2'-трихлорэтоксикарбонильной группы с использованием цинка в уксусной кислоте), как целесообразно. Другие подходящие защитные группы амина включают трифторацетил (-COCF₃), который может быть удален посредством катализируемого основанием гидролиза.

Следует также понимать, что точный порядок стадий синтеза, в ходе которых в молекулу вводятся различные группы и группировки, может быть изменен. В компетенции специалиста в данной области техники убедиться в том, что группы или группировки, введенные на одной стадии способа, не будут затронуты в ходе последующих превращений и взаимодействий, и соответствующим образом выбрать порядок стадий синтеза.

Соединение, (2S,4R)-1-ацетил-4-((5-хлорпиримидин-2-ил)амино)-2-метил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксамид, также можно получить способом, описанным на схеме 1 ниже.

- 7 031679

Схема 1

о

Соединения формулы (I)-(XVI) или их фармацевтически приемлемая соль могут демонстрировать улучшенный профиль по сравнению с известными ингибиторами BET, в том что они могут обладать, например, одним или более чем одним из следующих свойств:

(I) сильная BET ингибиторная активность;

(II) селективность относительно других известных бромодоменсодержащих белков, не принадлежащих к белкам семейства BET; или (III) подходящий профиль проявления (например подходящая растворимость, профиль межлекарственного взаимодействия, in vitro токсикологический профиль и фармакокинетика/фармакодинамика).

Некоторые соединения, раскрытые здесь, могут обладать сочетанием вышеуказанных свойств, что делает их особенно подходящими для перорального введения людям. Например, соединение формулы (XIVa), как было установлено, не демонстрирует зависимого от метаболизма цитохрома Р450 3А4 ингибирования, не демонстрирует hERG чувствительности и может обладать профилем, который обеспечивает пероральный прием людьми один раз в сутки или периодически.

Соединения формул (I)-(XVI) и их фармацевтически приемлемые соли, как полагают, обладают потенциальной пользой в лечении ряда заболеваний или состояний. Соединения формул (I)-(XVI) или их фармацевтически приемлемая соль являются ингибиторами бромодомена и, следовательно, могут быть использованы в лечении заболеваний или состояний, при которых показан ингибитор бромодомена.

В дополнительном аспекте настоящего изобретения предложено соединение формулы (I)-(XVI) или его фармацевтически приемлемая соль для применения в терапии, в частности в лечении заболеваний или состояний, при которых показан ингибитор бромодомена.

В одном воплощении настоящего изобретения предложено соединение, (2S,3R,4R)-1-ацетил-4-((5цианопиридин-2-ил)амино)-Ы-этил-2,3-диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксамид или его фармацевтически приемлемая соль для применения в терапии, в частности в лечении заболеваний или состояний, при которых показан ингибитор бромодомена.

В одном воплощении настоящего изобретения предложено соединение, (2S,3R,4R)-1-ацетил-4-((5цианопиридин-2-ил)амино)-2,3-диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксамид или его фармацевтически приемлемая соль для применения в терапии, в частности в лечении заболеваний или состояний, при которых показан ингибитор бромодомена.

В одном воплощении настоящего изобретения предложено соединение, (2S,3R,4R)-1-ацетил-4-((5цианопиридин-2-ил)амино)-2,3-диметил-Ы-(тетрагидро-2Ы-пиран-4-ил)-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6карбоксамид, или его фармацевтически приемлемая соль для применения в терапии, в частности в лечении заболеваний или состояний, при которых показан ингибитор бромодомена.

В одном воплощении настоящего изобретения предложено соединение, (2S,3R,4R)-1-ацетил-4-((5цианопиридин-2-ил)амино)-Ы-(^)-2-гидроксипропил)-2,3-диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6карбоксамид, или его фармацевтически приемлемая соль для применения в терапии, в частности в лечении заболеваний или состояний, при которых показан ингибитор бромодомена.

В одном воплощении настоящего изобретения предложено соединение, (2S,3R,4R)-1-ацетил-4-((5хлорпиримидин-2-ил)амино)-Ы-этил-2,3-диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксамид, или его фармацевтически приемлемая соль для применения в терапии, в частности в лечении заболеваний или

- 8 031679 состояний, при которых показан ингибитор бромодомена.

В одном воплощении настоящего изобретения предложено соединение, (^,3И,4К)-1-ацетил-4-((5хлорпиримидин-2-ил)амино)-2,3-диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксамид, или его фармацевтически приемлемая соль для применения в терапии, в частности в лечении заболеваний или состояний, при которых показан ингибитор бромодомена.

В одном воплощении настоящего изобретения предложено соединение, (2S,3R,4R)-1-ацетил-4-((5хлорпиримидин-2 -ил)амино )-2,3 -диметил-N-(тетрагидро -2И-пиран-4 -ил) -1,2,3,4 -тетрагидрохино лин-6карбоксамид, или его фармацевтически приемлемая соль для применения в терапии, в частности в лечении заболеваний или состояний, при которых показан ингибитор бромодомена.

В одном воплощении настоящего изобретения предложено соединение, (2S,3R,4R)-1-ацетил-4-((5хлорпиримидин-2-ил)амино)-№(^)-2-гидроксипропил)-2,3-диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6карбоксамид, или его фармацевтически приемлемая соль для применения в терапии, в частности в лечении заболеваний или состояний, при которых показан ингибитор бромодомена.

В одном воплощении настоящего изобретения предложено соединение, (2S,3R,4R)-1-ацетил-4-((5цианопиразин-2-ил)амино)-2,3-диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксамид, или его фармацевтически приемлемая соль для применения в терапии, в частности в лечении заболеваний или состояний, при которых показан ингибитор бромодомена.

В одном воплощении настоящего изобретения предложено соединение, (2S,3R,4R)-1-ацетил-4-((5цианопиразин-2-ил)амино)-№этил-2,3-диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксамид, или его фармацевтически приемлемая соль для применения в терапии, в частности в лечении заболеваний или состояний, при которых показан ингибитор бромодомена.

В одном воплощении настоящего изобретения предложено соединение, (2S,3R,4R)-1-ацетил-Nэтил-4-((5-фторпиридин-2-ил)амино)-2,3-диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксамид или его фармацевтически приемлемая соль для применения в терапии, в частности в лечении заболеваний или состояний, при которых показан ингибитор бромодомена.

В одном воплощении настоящего изобретения предложено соединение, (2S,4R)-1-ацетил-4-((5хлорпиримидин-2-ил)амино)-2-метил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксамид, или его фармацевтически приемлемая соль для применения в терапии, в частности в лечении заболеваний или состояний, при которых показан ингибитор бромодомена.

В одном воплощении настоящего изобретения предложено соединение, (2S,4R)-1-ацетил-4-((5хлорпиримидин-2-ил)амино)-№этил-2-метил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксамид, или его фармацевтически приемлемая соль для применения в терапии, в частности в лечении заболеваний или состояний, при которых показан ингибитор бромодомена.

В одном воплощении настоящего изобретения предложено соединение, (2S,4R)-1-ацетил-4-((5цианопиридин-2-ил)амино)-№этил-2-метил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксамид, или его фармацевтически приемлемая соль для применения в терапии, в частности в лечении заболеваний или состояний, при которых показан ингибитор бромодомена.

В одном воплощении предложено соединение формулы (I)-(XVI) или его фармацевтически приемлемая соль для применения в лечении острых или хронических аутоиммунных и/или воспалительных состояний.

В другом воплощении предложено соединение формулы (I)-(XVI) или его фармацевтически приемлемая соль для применения в лечении заболеваний или состояний, которые включают воспалительные реакции на инфекции, вызываемые бактериями, вирусами, грибами, паразитами или их токсинами.

В другом воплощении предложено соединение формулы (I)-(XVI) или его фармацевтически приемлемая соль для применения в лечении вирусных инфекций.

В другом воплощении предложено соединение формулы (I)-(XVI) или его фармацевтически приемлемая соль для применения в лечении рака.

Также предложено применение соединения формулы (I)-(XVI) или его фармацевтически приемлемой соли в изготовлении лекарственного средства для лечения заболеваний или состояний, при которых показан ингибитор бромодомена.

В одном воплощении предложено применение соединения формулы (I)-(XVI) или его фармацевтически приемлемой соли в изготовлении лекарственного средства для лечения острых или хронических аутоиммунных и/или воспалительных состояний. В другом воплощении предложено применение соединения формулы (I)-(XVI) или его фармацевтически приемлемой соли в изготовлении лекарственного средства для лечения заболеваний или состояний, которые включают воспалительные реакции на инфекции, вызываемые бактериями, вирусами, грибами, паразитами или их токсинами. В другом воплощении предложено применение соединения формулы (I)-(XVI) или его фармацевтически приемлемой соли в изготовлении лекарственного средства для лечения вирусных инфекций. В другом воплощении предло

- 9 031679 жено применение соединения формулы (I)-(XVI) или его фармацевтически приемлемой соли в изготовлении лекарственного средства для лечения рака.

Также предложен способ лечения заболеваний или состояний, при которых показан ингибитор бромодомена, у субъекта, нуждающегося в этом, включающий введение терапевтически эффективного количества соединения формулы (I)-(XVI) или его фармацевтически приемлемой соли. В одном воплощении субъект является человеком.

В одном воплощении предложен способ лечения острых или хронических аутоиммунных и/или воспалительных состояний у субъекта, нуждающегося в этом, включающий введение терапевтически эффективного количества соединения формулы (I)-(XVI) или его фармацевтически приемлемой соли. В другом воплощении предложен способ лечения заболеваний или состояний, которые включают воспалительные реакции на инфекции, вызываемые бактериями, вирусами, грибами, паразитами или их токсинами у субъекта, нуждающегося в этом, включающий введение терапевтически эффективного количества соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли. В другом воплощении предложен способ лечения вирусных инфекций у субъекта, нуждающегося в этом, включающий введение терапевтически эффективного количества соединения формулы (I)-(XVI) или его фармацевтически приемлемой соли. В дополнительном воплощении предложен способ лечения рака у субъекта, нуждающегося в этом, включающий введение терапевтически эффективного количества соединения формулы (I)-(XVI) или его фармацевтически приемлемой соли. В конкретном воплощении предложен способ лечения рака у субъекта, нуждающегося в этом, включающий введение терапевтически эффективного количества соединения формулы (XIVa), а именно (2S,4R)-1-ацетил-4-((5-хлорпиримидин-2-ил)амино)-2-метил-1,2,3,4тетрагидрохинолин-6-карбоксамида, или его фармацевтически приемлемой соли.

Полагают, что ингибиторы бромодомена являются полезными в лечении ряда заболеваний или состояний, связанных с системным или тканевым воспалением, воспалительными реакциями на инфекцию или гипоксию, клеточной активацией и пролиферацией, метаболизмом липидов, фиброзом, и в предотвращении и лечении вирусных инфекций.

Ингибиторы бромодомена могут быть полезными в лечении широкого ряда острых или хронических аутоиммунных и/или воспалительных состояний, таких как ревматоидный артрит, остеоартрит, острая подагра, псориаз, системная красная волчанка, рассеянный склероз, воспалительное заболевание кишечника (болезнь Крона и неспецифический язвенный колит), астма, хроническая обструктивная болезнь дыхательных путей, пневмония, миокардит, перикардит, миозит, экзема, дерматит (включая атопический дерматит), алопеция, витилиго, буллезные заболевания кожи, нефрит, васкулит, гиперхолестеринемия, атеросклероз, болезнь Альцгеймера, депрессия, синдром Шегрена, сиалоаденит, окклюзия центральной вены сетчатки, окклюзия ветвей центральной вены сетчатки, синдром Ирвина-Г асса (после катаракты и послеоперационный), пигментный ретинит, парспланит, ретинохороидопатия выстрел дробью, эпиретинальная мембрана, кистозный макулярный отек, парафовеолярная телеангиэктазия, тракционные макулопатии, витреомакулярные тракционные синдромы, отслоение сетчатки, нейроретинит, идиопатический макулярный отек, ретинит, синдром сухого глаза (сухой кератоконъюнктивит), весенний кератоконъюнктивит, атопический кератоконъюнктивит, увеит (передний увеит, панувеит, задний увеит, связанный с увеитом макулярный отек), склерит, диабетическая ретинопатия, диабетический макулярный отек, возрастная макулярная дистрофия, гепатит, панкреатит, первичный биллиарный цирроз, склерозирующий холангит, болезнь Аддисона, гипофизит, тироидит, диабет I типа, диабет II типа, гигантоклеточный артериит, нефрит, включая волчаночный нефрит, васкулит с вовлечением органов, такой как гломерулонефрит, васкулит, включая гигантоклеточный артериит, гранулематоз Вегенера, нодозный полиартериит, болезнь Бехчета, болезнь Кавасаки, артериит Такаясу, гангренозная пиодермия, васкулит с вовлечением органов и острое отторжение трансплантированных органов.

В одном воплощении острое или хроническое аутоиммунное и/или воспалительное состояние представляет собой расстройство метаболизма липидов через регуляцию АРО-А1 (аполипопротеин А1), такое как гиперхолестеринемия, атеросклероз и болезнь Альцгеймера.

В другом воплощении острое или хроническое аутоиммунное и/или воспалительное состояние представляет собой респираторное расстройство, такое как астма или хроническая обструктивная болезнь дыхательных путей.

В другом воплощении острое или хроническое аутоиммунное и/или воспалительное состояние представляет собой системное воспалительное расстройство, такое как ревматоидный артрит, остеоартрит, острая подагра, псориаз, системная красная волчанка, рассеянный склероз или воспалительное заболевание кишечника (болезнь Крона и неспецифический язвенный колит). В конкретном воплощении острое или хроническое аутоиммунное и/или воспалительное состояние представляет собой ревматоидный артрит, в частности рефрактерный (резистентный к терапии) ревматоидный артрит.

В другом воплощении острое или хроническое аутоиммунное и/или воспалительное состояние представляет собой рассеянный склероз.

В дополнительном воплощении острое или хроническое аутоиммунное и/или воспалительное состояние представляет собой диабет I типа.

Ингибиторы бромодомена могут быть полезными в лечении заболеваний или состояний, которые

- 10 031679 включают воспалительные реакции на инфекции, вызываемые бактериями, вирусами, грибами, паразитами или их токсинами, таких как сепсис, острый сепсис, септический синдром, септический шок, эндотоксемия, синдром системной воспалительной реакции (SIRS), синдром полиорганной недостаточности, синдром токсического шока, острое повреждение легких, ARDS (респираторный дистресс-синдром взрослых), острая почечная недостаточность, фульминантный гепатит, ожоги, острый панкреатит, постхирургические синдромы, саркоидоз, реакции Херксхеймера, энцефалит, миелит, менингит, малярия и SIRS, ассоциированный с вирусными инфекциями, такими как грипп, опоясывающий герпес, простой герпес и коронавирус. В одном воплощении заболевание или состояние, которое включает воспалительную реакцию на инфекцию, вызываемую бактериями, вирусом, грибами, паразитом или их токсинами, представляет собой острый сепсис.

Ингибиторы бромодомена могут быть полезными в лечении состояний, ассоциированных с ишемически-реперфузионным повреждением, таким как инфаркт миокарда, цереброваскулярная ишемия (инсульт), острые коронарные синдромы, почечное реперфузионное повреждение, трансплантация органа, аортокоронарное обходное шунтирование, процедуры в условиях искусственного кровообращения, эмболия легких, почек, печени, желудочно-кишечного тракта или периферических артерий конечностей.

Ингибиторы бромодомена могут быть полезными в лечении сердечно-сосудистых заболеваний, таких как коронарные болезни сердца (например стенокардия и инфаркт миокарда), цереброваскулярная ишемия (инсульт), сердечная недостаточность, легочная артериальная гипертензия (РАН), гипертензивная кардиопатия, ревматическая болезнь сердца, кардиомиопатия, фибрилляция предсердий, врожденный порок сердца, эндокардит, аневризмы аорты и заболевание периферических артерий.

В одном воплощении заболевание или состояние, при котором показан ингибитор бромодомена, представляет собой легочную артериальную гипертензию (РАН).

Ингибиторы бромодомена могут быть полезными в лечении фиброзных состояний, таких как идиопатический легочный фиброз, фиброз почек, послеоперационная стриктура, образование келоидных рубцов, склеродермия (включая очаговую склеродермию) и фиброз сердца. В одном воплощении заболевание или состояние, при котором показан ингибитор бромодомена, представляет собой склеродермию (системный склероз).

Ингибиторы бромодомена могут быть полезными в лечении вирусных инфекций, таких как инфекции и реактивации вируса простого герпеса, герпес на губах, инфекции и реактивации вируса опоясывающего герпеса, ветряная оспа, опоясывающий лишай, вирус папилломы человека (ВПЧ), вирус иммунодефицита человека (ВИЧ), неоплазия шейки матки, аденовирусные инфекции, включая острое респираторное заболевание, поксвирусные инфекции, таких как коровья оспа и черная оспа, и вирус африканской чумы свиней. В одном воплощении вирусная инфекция представляет собой ВПЧ инфекцию кожи или эпителиальных тканей шейки матки. В другом воплощении вирусная инфекция представляет собой скрытую ВИЧ-инфекцию.

Ингибиторы бромодомена могут быть полезными в лечении широкого ряда поражений костей, таких как остеопороз и остеопения.

Ингибиторы бромодомена могут быть полезными в лечении рака, включая гематологический (такой как лейкоз, лимфома и множественная миелома), эпителиальный, включая карциномы легких, молочной железы и толстой кишки, срединные карциномы, мезенхимальные, печеночные, почечные опухоли и опухоли нервной системы.

Ингибиторы бромодомена могут быть полезными в лечении одного или более чем одного вида рака, выбранного из рака головного мозга (глиом), глиобластом, синдрома Банаяна-Зонана, болезни Каудена, болезни Лермитта-Дюкло, рака молочной железы, воспалительного рака молочной железы, рака толстой и прямой кишки, опухоли Вильмса, саркомы Юинга, рабдомиосаркомы, эпендимомы, медуллобластомы, рака толстой кишки, рака головы и шеи, рака почки, рака легких, рака печени, меланомы, плоскоклеточной карциномы, рака яичников, рака поджелудочной железы, рака предстательной железы, саркомы, остеосаркомы, гигантоклеточной опухоли кости, рака щитовидной железы, Т-клеточного лимфобластного лейкоза, хронического миелолейкоза, хронического лимфолейкоза, волосатоклеточного лейкоза, острого лимфобластного лейкоза, острого миелогенного лейкоза, хронического нейтрофильного лейкоза, острого Т-клеточного лимфобластного лейкоза, плазмоцитомы, иммунобластной крупноклеточной лейкемии, мантийноклеточного лейкоза, множественной миеломы, мегакариобластного лейкоза, острого мегакариоцитарного лейкоза, промиелоцитарного лейкоза, лейкоза смешанного происхождения, эритролейкоза, злокачественной лимфомы, лимфомы Ходжкина, неходжкинской лимфомы, лимфобластной Тклеточной лимфомы, лимфомы Беркитта, фолликулярной лимфомы, нейробластомы, рака мочевого пузыря, уротелиального рака, рака вульвы, рака шейки матки, рака эндометрия, рака почки, мезотелиомы, рака пищевода, рака слюнных желез, гепатоцеллюлярного рака, рака желудка, рака носоглотки, рака щеки, рака ротовой полости, GIST (желудочно-кишечной стромальной опухоли), срединной NUTкарциномы и рака яичка.

В одном воплощении рак представляет собой лейкоз, например лейкоз, выбранный из острого моноцитарного лейкоза, острого миелогенного лейкоза, хронического миелолейкоза, хронического лимфолейкоза и лейкоза смешанного происхождения (MLL). В другом воплощении рак представляет собой

- 11 031679 срединную NUT-карциному. В другом воплощении рак представляет собой множественную миелому. В другом воплощении рак представляет собой рак легких, такой как мелкоклеточный рак легких (SCLC). В другом воплощении рак представляет собой нейробластому. В другом воплощении рак представляет собой лимфому Беркитта. В другом воплощении рак представляет собой рак шейки матки. В другом воплощении рак представляет собой рак пищевода. В другом воплощении рак представляет собой рак яичников. В другом воплощении рак представляет собой рак молочной железы. В другом воплощении рак представляет собой рак толстой и прямой кишки.

В одном воплощении заболевание или состояние, при котором показан ингибитор бромодомена, выбрано из заболеваний, ассоциированных с синдромом системной воспалительной реакции, таких как сепсис, ожоги, панкреатит, обширная травма, кровотечение и ишемия. В этом воплощении ингибитор бромодомена будут вводить при постановке диагноза для уменьшения частоты возникновения SIRS, наступления шока, синдрома полиорганной недостаточности, который включает возникновение острого повреждения легких, ARDS, острого поражения почек, печени, миокарда или желудочно-кишечного тракта и смерти. В другом воплощении ингибитор бромодомена будут вводить перед хирургическими или другими процедурами, связанными с высоким риском сепсиса, кровотечения, обширного повреждения тканей, SIRS или MODS (синдром полиорганной недостаточности). В конкретном воплощении заболевание или состояние, при котором показан ингибитор бромодомена, представляет собой сепсис, септический синдром, септический шок или эндотоксемию. В другом воплощении ингибитор бромодомена показан для лечения острого или хронического панкреатита. В другом воплощении ингибитор бромодомена показан для лечения ожогов.

Использованная здесь ссылка на термин лечение конкретного заболевания или состояния включает предупреждение или профилактику такого заболевания или состояния.

Термин заболевания или состояния, при которых показан ингибитор бромодомена предназначен для включения любого или всех из вышеуказанных заболеваний или состояний.

Несмотря на то, что для применения в терапии соединение формулы (I)-(XVI), а также его фармацевтически приемлемые соли могут быть введены в форме исходного химического соединения, обычно активный ингредиент присутствует в виде фармацевтической композиции.

В дополнительном аспекте согласно настоящему изобретению предложена фармацевтическая композиция, содержащая соединение формулы (I)-(XVI) или его фармацевтически приемлемую соль и один или более чем один фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель или эксципиент.

В одном воплощении согласно настоящему изобретению предложена фармацевтическая композиция, содержащая (2S,3R,4R)-1-ацетил-4-((5-цианопиридин-2-ил)амино)-N-этил-2,3-диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксамид или его фармацевтически приемлемую соль и один или более чем один фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель или эксципиент.

В одном воплощении согласно настоящему изобретению предложена фармацевтическая композиция, содержащая (2S,3R,4R)-1 -ацетил-4-((5-цианопиридин-2-ил)амино)-2,3-диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксамид или его фармацевтически приемлемую соль и один или более чем один фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель или эксципиент.

В одном воплощении согласно настоящему изобретению предложена фармацевтическая композиция, содержащая (2S,3R,4R)-1-ацетил-4-((5-цианопиридин-2-ил)амино)-2,3-диметил-N-(тетрагидро-2Hпиран-4-ил)-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксамид или его фармацевтически приемлемую соль и один или более чем один фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель или эксципиент.

В одном воплощении согласно настоящему изобретению предложена фармацевтическая композиция, содержащая (2S,3R,4R)-1-ацетил-4-((5-цианопиридин-2-ил)амино)-N-((R)-2-гидроксипропил)-2,3диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксамид или его фармацевтически приемлемую соль и один или более чем один фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель или эксципиент.

В одном воплощении согласно настоящему изобретению предложена фармацевтическая композиция, содержащая (2S,3R,4R)-1-ацетил-4-((5-цианопиридин-2-ил)амино)-N-((S)-2-гидроксипропил)-2,3-диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксамид или его фармацевтически приемлемую соль и один или более чем один фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель или эксципиент.

В одном воплощении согласно настоящему изобретению предложена фармацевтическая композиция, содержащая (2S,3R,4R)-1-ацетил-4-((5-хлорпиримидин-2-ил)амино)-N-этил-2,3-диметил-1,2,3,4тетрагидрохинолин-6-карбоксамид или его фармацевтически приемлемую соль и один или более чем один фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель или эксципиент.

В одном воплощении согласно настоящему изобретению предложена фармацевтическая композиция, содержащая (2S,3R,4R)-1-ацетил-4-((5-хлорпиримидин-2-ил)амино)-2,3-диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксамид или его фармацевтически приемлемую соль и один или более чем один фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель или эксципиент.

В одном воплощении согласно настоящему изобретению предложена фармацевтическая композиция, содержащая (2S,3R,4R)-1-ацетил-4-((5-хлорпиримидин-2-ил)амино)-2,3-диметил-N-(тетрагидро-2Hпиран-4-ил)-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксамид или его фармацевтически приемлемую соль и один или более чем один фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель или эксципиент.

- 12 031679

В одном воплощении согласно настоящему изобретению предложена фармацевтическая композиция, содержащая (^,3К,4К)-1-ацетил-4-((5-хлорпиримидин-2-ил)амино)-Ы-((Б)-2-гидроксипропил)-2,3диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксамид или его фармацевтически приемлемую соль и один или более чем один фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель или эксципиент.

В одном воплощении согласно настоящему изобретению предложена фармацевтическая композиция, содержащая (2S,3R,4R)-1-ацетил-4-((5-хлорпиримидин-2-ил)амино)-N-((R)-2-гидроксипропил)-2,3диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксамид или его фармацевтически приемлемую соль и один или более чем один фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель или эксципиент.

В одном воплощении согласно настоящему изобретению предложена фармацевтическая композиция, содержащая (2S,3R,4R)-1-ацетил-4-((5-цианопиразин-2-ил)амино)-2,3-диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксамид или его фармацевтически приемлемую соль и один или более чем один фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель или эксципиент.

В одном воплощении согласно настоящему изобретению предложена фармацевтическая композиция, содержащая (2S,3R,4R)-1-ацетил-4-((5-цианопиразин-2-ил)амино)-N-этил-2,3-диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксамид или его фармацевтически приемлемую соль и один или более чем один фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель или эксципиент.

В одном воплощении согласно настоящему изобретению предложена фармацевтическая композиция, содержащая (2S,3R,4R)-1-ацетил-N-этил-4-((5-фторпиридин-2-ил)амино)-2,3-диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксамид или его фармацевтически приемлемую соль и один или более чем один фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель или эксципиент.

В одном воплощении согласно настоящему изобретению предложена фармацевтическая композиция, содержащая (2S,4R)-1-ацетил-4-((5-хлорпиримидин-2-ил)амино)-2-метил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксамид или его фармацевтически приемлемую соль и один или более чем один фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель или эксципиент.

В одном воплощении согласно настоящему изобретению предложена фармацевтическая композиция, содержащая (2S,4R)-1-ацетил-4-((5-хлорпиримидин-2-ил)амино)-N-этил-2-метил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксамид или его фармацевтически приемлемую соль и один или более чем один фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель или эксципиент.

В одном воплощении согласно настоящему изобретению предложена фармацевтическая композиция, содержащая (2S,4R)-1-ацетил-4-((5-цианопиридин-2-ил)амино)-N-этил-2-метил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксамид или его фармацевтически приемлемую соль и один или более чем один фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель или эксципиент.

Носитель(и), разбавитель(и) или эксципиент(ы) должны быть фармацевтически приемлемыми в том смысле, что они должны быть совместимы с другими ингредиентами композиции и безвредны для их реципиента. В соответствии с другим аспектом изобретения также предложен способ получения фармацевтической композиции, включающий смешивание соединения формулы (I)-(XVI) или его фармацевтически приемлемой соли с одним или более чем одним фармацевтически приемлемым носителем, разбавителем или эксципиентом. Фармацевтическая композиция может быть использована в лечении любого из состояний, описанных здесь.

Так как соединения формул (I)-(XVI) предназначены для использования в фармацевтических композициях, нетрудно будет понять, что все они предпочтительно представлены, по существу, в чистой форме, например по меньшей на 85% чистой, особенно по меньшей мере на 98% чистой (% в пересчете на массу).

Фармацевтические композиции могут быть представлены в виде стандартных лекарственных форм, содержащих заранее определенное количество активного ингредиента на единицу дозировки. Предпочтительными стандартными лекарственными композициями являются композиции, содержащие суточную дозу, или субдозу, или ее соответствующую часть активного ингредиента. Поэтому, такие единицы дозировки можно вводить более чем один раз в сутки.

Фармацевтические композиции могут быть предназначены для введения любым подходящим путем, например пероральным (включая трансбуккальный или сублингвальный), ректальным, ингаляционным, интраназальным, местным (включая трансбуккальный, сублингвальный или чрескожный), окулярным (включая местный, внутриглазной, субконъюнктивальный, эписклеральный или субтеноновый), вагинальным или парентеральным (включая подкожный, внутримышечный, внутривенный и внутрикожный) путем. Такие композиции могут быть приготовлены любым способом, известным в области фармацевтики, например посредством объединения активного ингредиента с носителем(ями) или эксципиентом(ами).

В одном воплощении фармацевтическая композиция предназначена для парентерального введения, в частности внутривенного введения.

В одном воплощении фармацевтическая композиция предназначена для перорального введения.

В одном воплощении фармацевтическая композиция предназначена для местного введения.

Фармацевтические композиции, предназначенные для парентерального введения, включают водные и неводные стерильные инъекционные растворы, которые могут содержать антиоксиданты, буферы, бак

- 13 031679 термостатические агенты и растворенные вещества, которые делают композицию изотоничной с кровью предполагаемого реципиента; и водные и неводные стерильные суспензии, которые могут содержать суспендирующие агенты и загустители. Композиции могут быть представлены в однодозовых или многодозовых контейнерах, например, в запаянных ампулах и флаконах, и могут храниться в высушенном путем сублимации (лиофилизированном) состоянии, требующем только добавления стерильного жидкого носителя, например воды для инъекций, непосредственно перед применением. Предназначенные для немедленного приема инъекционные растворы и суспензии могут быть приготовлены из стерильных порошков, гранул и таблеток.

Фармацевтические композиции, предназначенные для перорального введения, могут быть представлены в виде отдельных единиц, таких как капсулы или таблетки; порошков и гранул; растворов или суспензий в водных или неводных жидкостях; съедобных пен или муссов; или жидких эмульсий типа масло-в-воде или жидких эмульсий типа вода-в-масле.

Например, для перорального введения в виде таблетки или капсулы активный компонент лекарственного средства может быть объединен с пероральным, нетоксичным фармацевтически приемлемым инертным носителем, таким как этанол, глицерин, вода и тому подобное. Порошки, подходящие для включения в таблетки или капсулы, могут быть приготовлены путем измельчения соединения до частиц подходящего небольшого размера (например посредством микронизации) и смешивания с аналогичным образом приготовленным фармацевтическим носителем, таким как пищевой углевод, например крахмал или маннит. Также может присутствовать ароматизатор, консервант, диспергирующий агент и краситель.

Капсулы могут быть получены посредством приготовления порошкообразной смеси, как описано выше, и заполнения сформированных желатиновых оболочек. Скользящие и смазывающие вещества, такие как коллоидный диоксид кремния, тальк, стеарат магния, стеарат кальция или твердый полиэтиленгликоль, могут быть добавлены к порошкообразной смеси перед процедурой наполнения. Разрыхлитель или солюбилизатор, такой как агар-агар, карбонат кальция или карбонат натрия, также может быть добавлен для улучшения доступности лекарственного средства при проглатывании капсулы.

Кроме того, когда желательно или необходимо, подходящие связующие вещества, скользящие агенты, смазывающие вещества, подсластители, ароматизаторы, разрыхлители и красители также могут быть включены в смесь.

Подходящие связующие вещества включают крахмал, желатин, природные сахара, такие как глюкоза или бета-лактоза, сахаристые вещества кукурузы, природные и синтетические камеди, такие как аравийская камедь, трагакант или альгинат натрия, карбоксиметилцеллюлозу, полиэтиленгликоль, воски и тому подобное. Смазывающие вещества, используемые в этих лекарственных формах, включают олеат натрия, стеарат натрия, стеарат магния, бензоат натрия, ацетат натрия, хлорид натрия и тому подобное. Разрыхлители включают крахмал, метилцеллюлозу, агар, бентонит, ксантановую камедь и тому подобное. Таблетки готовят, например посредством получения порошкообразной смеси, гранулирования или агрегирования, добавления смазывающего вещества и разрыхлителя и прессования в таблетки. Порошкообразную смесь получают посредством смешивания соответствующим образом измельченного соединения с разбавителем или основой, как описано выше, и возможно со связующим веществом, таким как карбоксиметилцеллюлоза, альгинат, желатин или поливинилпирролидон, веществом, замедляющим растворение, таким как парафин; веществом, способствующим быстрому всасыванию, таким как соль четвертичного основания и/или абсорбирующим агентом, таким как бентонит, каолин или дикальцийфосфат. Порошкообразную смесь можно гранулировать посредством смачивания связующим веществом, таким как сироп, крахмальный клейстер, клейковина акации или растворы целлюлозных или полимерных материалов, и продавливания через сито. В качестве альтернативы гранулированию порошкообразная смесь может быть пропущена через таблетировочную машину, и результатом являются комки неидеальной формы, разбиваемые на гранулы. Гранулы могут быть смазаны для предотвращения прилипания к образующему таблетки пресс-инструменту посредством добавления стеариновой кислоты, стеарата, талька или минерального масла. Смазанную смесь затем спрессовывают в таблетки. Соединения формулы (I) и их фармацевтически приемлемые соли также можно объединять со свободно текучим инертным носителем и непосредственно спрессовывать в таблетки, не прибегая к стадиям гранулирования или агрегирования. Может быть предложено прозрачное или непрозрачное защитное покрытие, состоящее из изолирующего слоя шеллака, покрытия из сахара или полимерного материала и глянцевого покрытия из воска. К этим покрытиям могут быть добавлены красители, чтобы отличать различные единицы дозировки.

Жидкости для перорального введения, такие как растворы, сиропы и эликсиры, могут быть приготовлены в стандартной лекарственной форме, так чтобы определенное количество содержало заданное количество соединения. Сиропы могут быть приготовлены путем растворения соединения в соответствующим образом ароматизированном водном растворе, тогда как эликсиры приготавливают с использованием нетоксичного спиртового носителя. Суспензии могут быть приготовлены в виде препарата путем диспергирования соединения в нетоксичном носителе. Также могут быть добавлены солюбилизаторы и эмульгаторы, такие как этоксилированные изостеариловые спирты и полиоксиэтиленовые эфиры сорбита, консерванты, ароматизаторы, такие как масло мяты перечной или природные подсластители, или са

- 14 031679 харин, или другие искусственные подсластители, и тому подобное.

Композиции для перорального введения могут быть разработаны так, чтобы обеспечивать профиль модифицированного высвобождения, чтобы способствовать или иным образом контролировать высвобождение терапевтически активного агента.

Когда это целесообразно, композиции в виде единиц дозировки для перорального введения могут быть микроинкапсулированы. Также может быть приготовлена композиция для пролонгированного или продолжительного высвобождения, например, путем нанесения покрытия или заключения гранулированного материала в полимеры, воск или тому подобное.

Композиции также могут быть введены в форме липосомальных систем доставки, таких как малые моноламеллярные везикулы, большие моноламеллярные везикулы и мультиламеллярные везикулы. Липосомы могут быть образованы из различных фосфолипидов, таких как холестерин, стеариламин или фосфатидилхолины.

Фармацевтические композиции, предназначенные для местного введения, могут быть приготовлены в виде мазей, кремов, суспензий, эмульсий, лосьонов, порошков, растворов, паст, гелей, пен, спреев, аэрозолей или масел. Такие фармацевтические композиции могут содержать традиционные вспомогательные вещества, которые включают консерванты, растворители для содействия проникновению лекарственного средства, сорастворители, смягчающие средства, пропелленты, модификаторы вязкости (желирующие агенты), поверхностно-активные вещества и носители, но не ограничиваются ими. В одном воплощении предложена фармацевтическая композиция, предназначенная для местного введения, содержащая от 0,01 до 10% или от 0,01 до 1% соединения формулы (I)-(XVI) или его фармацевтически приемлемой соли от массы композиции.

Для лечения глаза или других поверхностных тканей, например ротовой полости и кожи, композиции предпочтительно используют в виде мази, крема, геля, спрея или пены для местного применения. При приготовлении в виде мази активный ингредиент может быть использован либо с парафиновой, либо с водорастворимой мазевой основой. Альтернативно, активный ингредиент может быть приготовлен в виде крема с кремовой основой типа масло-в-воде или основой типа вода-в-масле.

Фармацевтические композиции, предназначенные для местного введения в глаз, включают глазные капли, в которых активный ингредиент растворен или суспендирован в подходящем носителе, особенно в водном растворителе. Композиции для введения в глаз будут иметь офтальмологически совместимый pH и осмоляльность. В композицию по изобретнию может быть включен один или более чем один офтальмологически приемлемый регулятор pH и/или буферный агент, включая кислоты, такие как уксусная, борная, лимонная, молочная, фосфорная и соляная кислоты; основания, такие как гидроксид натрия, фосфат натрия, борат натрия, цитрат натрия, ацетат натрия и лактат натрия; и буферы, такие как цитрат/декстроза, бикарбонат натрия и хлорид аммония. Такие кислоты, основания и буферы могут быть включены в количество, требуемое для поддержания pH композиции в офтальмологически приемлемом диапазоне. Одна или более чем одна офтальмологически приемлемая соль может быть включена в композицию в количестве, достаточном для доведения осмоляльности композиции до офтальмологически приемлемого диапазона. Такие соли включают соли, имеющие катионы натрия, калия или аммония и хлорид-, цитрат-, аскорбат-, борат-, фосфат-, бикарбонат-, сульфат-, тиосульфат- или бисульфит-анионы.

Устройство для доставки лекарственного средства в глаз может быть разработано для контролируемого высвобождения одного или более чем одного терапевтического агента с несколькими определенными скоростями высвобождения и замедленной кинетикой высвобождения дозы и проницаемостью. Контролируемое высвобождение может быть достигнуто путем разработки полимерных матриц, включающих различный выбор и свойства биоразрушаемых/биоразлагаемых полимеров (например, поли(этиленвинил)ацетат (EVA), сверхгидролизованный поливинилацетат (PVA), гидроксиалкилцеллюлоза (НРС), метилцеллюлоза (МС), гидроксипропилметилцеллюлоза (НРМС), поликапролактон, поли(гликолевая) кислота, поли(молочная) кислота, полиангидрид) с молекулярными массами, кристалличностью, соотношениями сополимеров, условиями обработки, поверхностной обработкой, геометрией, добавлением эксципиентов и полимерными покрытиями, которые ускорят диффузию лекарственного средства, эрозию, растворение и осмос.

Фармацевтические композиции для доставки в глаз также включают желируемую in situ водную композицию. Такая композиция содержит желирующий агент в концентрации, эффективной для стимуляции желирования при контакте с глазом или слезной жидкостью. Подходящие желирующие агенты включают термоотверждающиеся полимеры, но не ограничиваются ими. Использованный здесь термин желируемый in situ включает не только жидкости с низкой вязкостью, которые образуют гели при контакте с глазом или слезной жидкостью, но также включает более вязкие жидкости, такие как полужидкие и тиксотропные гели, которые проявляют существенно повышенную вязкость или густоту при введении в глаз. См., например, Ludwig (2005) Adv. Drug Deliv. Rev. 3; 57:1595-639, включенную в данное описание посредством ссылки с целью изучения примеров полимеров для применения при доставке лекарственных средств в глаз.

Лекарственные формы для назального или ингаляционного введения могут быть легко приготовлены в виде аэрозолей, растворов, суспензий, гелей или сухих порошков.

- 15 031679

Для композиций, подходящих и/или предназначенных для ингаляционного введения, предпочтительно, чтобы соединение формулы (I)-(XVI) или его фармацевтически приемлемая соль находилось в форме измельченных частиц, например, полученных путем микронизации. Предпочтительный размер частиц измельченного (например микронизированного) соединения или соли определен значением D50 от примерно 0,5 до примерно 10 мкм (например, как измерено с использованием лазерной дифракции).

Аэрозольные композиции, например для ингаляционного введения, могут содержать раствор или мелкодисперсную суспензию активного вещества в фармацевтически приемлемом водном или неводном растворителе. Аэрозольные композиции могут быть представлены в количествах, соответствующих однократному или многократному приему, в стерильной форме в герметичном контейнере, который может принимать форму картриджа или сменного баллончика для применения с распылителем или ингалятором. Альтернативно герметичный контейнер может представлять собой одноразовое дозирующее устройство, такое как назальный ингалятор с однократной дозой или аэрозольный дозатор, оснащенный дозирующим клапаном (дозирующий ингалятор), который предназначен для утилизации, как только содержимое контейнера израсходуется.

Когда лекарственная форма содержит аэрозольный распылитель, она предпочтительно будет содержать подходящий пропеллент под давлением, такой как сжатый воздух, диоксид углерода, или органический пропеллент, такой как гидрофторуглерод (HFC). Подходящие HFC пропелленты включают 1,1,1,2,3,3,3-гептафторпропан и 1,1,1,2-тетрафторэтан. Аэрозольные лекарственные формы могут также иметь форму помпового распылителя. Аэрозоль под давлением может содержать раствор или суспензию активного соединения. Это может требовать включения дополнительных эксципиентов, например сорастворителей и/или поверхностно-активных веществ для улучшения дисперсионных характеристик и гомогенности суспензионных препаратов. Препараты в виде растворов также могут требовать добавления сорастворителей, таких как этанол.

Для фармацевтических композиций, подходящих и/или предназначенных для ингаляционного введения, фармацевтическая композиция может представлять собой сухую порошковую ингалируемую композицию. Такие композиции могут содержать порошковую основу, такую как лактоза, глюкоза, трегалоза, маннит или крахмал, соединение формулы (I)-(XVI) или его фармацевтически приемлемую соль (предпочтительно в измельченной форме, например в микронизированной форме) и, возможно, модификатор активности, такой как L-лейцин или другая аминокислота и/или металлическая соль стеариновой кислоты, такая как стеарат магния или кальция. Предпочтительно сухая порошковая ингалируемая композиция содержит сухую порошковую смесь лактозы, например моногидрата лактозы, и соединения формулы (I)-(XVI) или его соли. Такие композиции могут быть введены пациенту при использовании подходящего устройства, такого как устройство DISKUS®, поставляемого GlaxoSmithKline, которое описано, например, в GB 2242134 А.

Соединения формулы (I)-(XVI) и их фармацевтически приемлемые соли могут быть приготовлены в виде жидкого препарата для доставки из дозатора жидкости, например дозатора жидкости, имеющего дозирующую насадку или дозирующий наконечник, через который отмеренная доза жидкого препарата дозируется при приложении усилия пользователя к насосному механизму дозатора жидкости. Такие дозаторы жидкости обычно оснащены резервуаром многократного дозирования жидкого препарата, причем дозы распределяются при последовательных приведениях насоса в действие. Дозирующей насадке или наконечнику может быть придана форма для введения в ноздри пользователя для струйного дозирования жидкого препарата в полость носа. Дозатор жидкости вышеупомянутого типа описан и проиллюстрирован в WO-A-2005/044354.

Терапевтически эффективное количество соединения формулы (I)-(XVI) или его фармацевтически приемлемой соли будет зависеть от ряда факторов, включая, например, возраст и вес субъекта, точное состояние, требующее лечения, и его тяжесть, природу препарата и путь введения, и, в конечном счете, будет определяться лечащим врачом или ветеринаром. В фармацевтической композиции каждая единица дозировки для перорального или парентерального введения предпочтительно содержит от 0,01 до 3000 мг, более предпочтительно от 0,5 до 1000 мг соединения формулы (I)-(XVI) или его фармацевтически приемлемой соли в пересчете на свободное основание. Каждая единица дозировки для назального или ингаляционного введения предпочтительно содержит от 0,001 до 50 мг, более предпочтительно от 0,01 до 5 мг соединения формулы (I)-(XVI) или его фармацевтически приемлемой соли в пересчете на свободное основание.

Фармацевтически приемлемые соединения формулы (I)-(XVI) и их фармацевтически приемлемые соли могут быть введены в суточной дозе (для взрослого пациента), например пероральной или парентеральной дозе от 0,01 до 3000 мг в сутки, от 0,5 до 1000 мг в сутки или от 100 до 2500 мг в сутки, или назальной или ингаляционной дозе от 0,001 до 50 мг в сутки или от 0,01 до 5 мг в сутки соединения формулы (I)-(XVI) или его фармацевтически приемлемой соли в пересчете на свободное основание. Это количество может быть дано в виде одной дозы в сутки или, еще чаще, в виде нескольких (таких как две, три, четыре, пять или шесть) субдоз в сутки, так что общая суточная доза является такой же. Эффективное количество его соли может быть определено как доля эффективного количества соединения формулы (I)-(XVI) как такового.

- 16 031679

Соединения формул (I)-(XVI) и их фармацевтически приемлемые соли могут быть использованы отдельно или в комбинации с другими терапевтическими агентами. Таким образом, виды комбинационной терапии по настоящему изобретению включают введение по меньшей мере одного соединения формулы (I)-(XVI) или его фармацевтически приемлемой соли и применение по меньшей мере одного другого терапевтически активного агента. Соединение(я) формул (I)-(XVI) и их фармацевтически приемлемые соли и другой терапевтически активный агент(ы) могут быть введены вместе в одной фармацевтической композиции или раздельно, и при раздельном введении это может осуществляться одновременно или последовательно в любом порядке. Количества соединения(й) формул (I)-(XVI) и их фармацевтически приемлемых солей и другого терапевтически активного агента(ов) и относительные сроки их введения будут выбраны для достижения требуемого терапевтического эффекта от комбинации.

Таким образом, в дополнительном аспекте предложен комбинированный продукт, содержащий соединение формулы (I)-(XVI) или его фармацевтически приемлемую соль вместе с одним или более чем одним другим терапевтически активным агентом.

В одном воплощении соединение формулы (I)-(XVI) или его фармацевтически приемлемая соль и фармацевтические композиции, содержащие соединение формулы (I)-(XVI) или его фармацевтически приемлемую соль, могут быть использованы в комбинации с одним или более чем одним другим терапевтическим агентом или включать такой агент, например выбранный из антибиотиков, противовирусных агентов, глюкокортикостероидов, антагонистов мускариновых рецепторов, агонистов бета-2 рецепторов и аналогов витамина D3. В дополнительном воплощении соединение формулы (I)-(XVI) или его фармацевтически приемлемая соль может быть использована в комбинации с дополнительным терапевтическим агентом, который подходит для лечения рака. Примеры таких дополнительных терапевтических агентов описаны в Cancer Principles and Practice of Oncology (редакторы) V.T. Devita и S. Hellman, 6е издание (2001), Lippincott Williams & Wilkins Publishers. Специалист в данной области техники сможет определить, какие комбинации агентов будут полезны, на основании конкретных свойств лекарственных средств и рассматриваемого вида рака. Дополнительные терапевтические агенты, используемые в комбинации с соединением формул (I)-(XVI) или его фармацевтически приемлемой солью, включают антимикротрубочковые агенты (такие как дитерпеноиды и винкаалкалоиды); координационные комплексы платины; алкилирующие агенты (такие как аналоги азотистого иприта, оксазафосфорины, алкилсульфонаты, нитрозомочевины и триазены); антибиотические агенты (такие как антрациклины, актиномицины и блеомицины); ингибиторы топоизомеразы II (такие как эпиподофиллотоксины); антиметаболиты (такие как пуриновые и пиримидиновые аналоги и антифолатные соединения); ингибиторы топоизомеразы I (такие как камптотецины; гормоны и гормональные аналоги); ингибиторы путей сигнальной трансдукции (такие как ингибиторы рецепторов тироксина); ингибиторы ангиогенеза нерецепторной тирозинкиназы; иммунотерапевтические агенты; проапоптотические агенты; эпигенетические или транскрипционные модуляторы (такие как ингибиторы деацетилазы гистонов), ингибиторы передачи сигналов клеточного цикла и ингибиторы ядерных рецепторов гормонов, но не ограничиваются ими.

Следует понимать, что когда соединение формулы (I)-(XVI) или его фармацевтически приемлемую соль вводят в комбинации с другими терапевтическими агентами, обычно вводимыми посредством ингаляционного, внутривенного, перорального или интраназального пути, то полученную фармацевтическую композицию можно вводить теми же путями. Альтернативно, отдельные компоненты композиции могут быть введены различными путями.

Одним воплощением изобретения охватываются комбинации, содержащие один или два других терапевтических агента.

Специалисту в данной области техники будет ясно, что, когда это целесообразно, другой терапевтический ингредиент(ы) можно использовать в форме солей, например в форме солей щелочных металлов или аммониевых солей, или в форме солей присоединения кислот, или пролекарств, или в форме сложных эфиров, например сложных эфиров низших алкилов, или в форме сольватов, например гидратов, для оптимизации активности и/или стабильности и/или физических свойств, таких как растворимость терапевтического ингредиента. Также будет ясно, что, когда это целесообразно, терапевтические ингредиенты могут быть использованы в оптически чистой форме.

Комбинации, описанные выше, могут быть удобным образом представлены для применения в форме фармацевтической композиции, и, таким образом, фармацевтические композиции, содержащие комбинацию, как определено выше, вместе с фармацевтически приемлемым разбавителем или носителем представляют собой дополнительный аспект изобретения.

Соединения формул (I)-(XVI) и их фармацевтически приемлемые соли могут быть получены способами, описанными ниже, или аналогичными способами. Таким образом, следующие промежуточные соединения и примеры служат для иллюстрации их получения и не должны считаться ограничивающими объем изобретения каким-либо образом.

Общие подробности эксперимента.

Все упоминаемые температуры приведены в °C.

Наименования следующих соединений были получены с использованием программы для наименования соединений Chem Draw Ultra 12.0 или ACD Name Pro 6.02.

- 17 031679

Аббревиатуры

AcCI	ацетилхлорид
DCM	дихлорметан
DIPEA	диизопропилэтиламин
DMAP	4-(диметиламино)пиридин
DMF	Л/,Л/-диметилформамид
DMSO	диметилсульфоксид
Et₂O	диэтиловый эфир
EtOH	этанол
EtOAc	этилацетат
ч	час(ы)
HATU	гексафторфосфат О-(7-азабензотриазол-1 -]λπ)-Ν,Ν,Ν’,Ν’- тетраметилурония)
HCl	соляная кислота
/-pent PEP PSI	дихлор[1,3-бис(2,6-ди-3-пентилфенил)имидазол-2-илиден](3хлорпиридил)палладий(Н)
ЖХМС	жидкостная хроматография/масс-спектрометрия
LiOH	гидроксид лития
M	молярная (концентрация)
MeOH	метанол
MDAP	масс-направленная автопрепаративная хроматография
мин	минута(минуты)
n₂	азот
NEt₃	триэтиламин
Pd/C	палладий на углероде
Pd₂(dba)₃	трис(дибензилиденацетон)дипалладий
QPhos	1,2,3,4,5-пентафенил-1 ^,-(ди-/77рет-бутилфосфино)ферроцен
Rt	время удерживания
rt	комнатная температура
с, сек	секунда(секунды)
THF	тетрагидрофуран
СВЭЖХ	сверхэффективная жидкостная хроматография

Методика ЖХМС

Формиатный способ

Условия ЖХ

Анализ СВЭЖХ проводили на колонке Acquity UPLC ВЕН C18 (50 ммх2,1 мм i.d. (внутренний диаметр), диаметр зерна наполнителя 1,7 мкм) при 40°C.

Использовали растворители:

А - 0,1 об./об.% раствор муравьиной кислоты в воде;

В - 0,1 об./об.% раствор муравьиной кислоты в ацетонитриле.

Использовали градиент .__________________________________________

Время (мин)	Скорость потока (мл/мин)	% А	% В
0	1	97	3
1,5	1	0	100
1,9	1	0	100
2,0	1	97	3

УФ-детектирование представляло собой суммированный сигнал длин волн от 210 до 350 нм. Условия МС

МС	Waters ZQ
Режим ионизации:	электроспрей с попеременным сканированием

Диапазон сканирования:

Время сканирования:

в положительном и отрицательном режиме от 100 до 1000 а.е.м.

0,27 сек

Задержка между сканированиями: 0,10 сек

Способ с высоким значением pH

Условия ЖХ

Анализ СВЭЖХ проводили на колонке Acquity СВЭЖХ ВЕН C18 (50 ммх2,1 мм i.d., диаметр зерна наполнителя 1,7 мкм) при 40°C.

Использовали растворители:

А - 10 мМ гидрокарбонат аммония в воде, доведенный до pH 10 раствором аммиака;

В - ацетонитрил.

- 18 031679

Использовали градиент

Время (мин)	Скорость потока (мл/мин)	% А	% В
0	1	99	1
1,5	1	3	97
1,9	1	3	97
2,0	1	0	100

УФ-детектирование представляло собой суммированный сигнал длин волн от 210 до 350 нм.

Условия МС

МС

Режим ионизации:

Диапазон сканирования:

Время сканирования:

Waters ZQ электроспрей с попеременным сканированием в положительном и отрицательном режиме от 100 до 1000 а.е.м.

0,27 с

ЯМР

Задержка между сканированиями: 0,10 с

Спектры снимали на ЯМР-томографе с частотой 400 МГц либо при 302 К, либо при 392-393 К для спектров VT.

Промежуточное соединение 1: (Б)-бензил-проп-1-ен-1-илкарбамат о ^н и

Диизопропилазодикарбоксилат (4,05 мл; 20,85 ммоль) по каплям добавляли в течение 5 мин в раствор трифенилфосфина (5,47 г; 20,85 ммоль) в THF (125 мл) при -78°C. Смесь перемешивали в течение минуты и затем по каплям добавляли (2S,3R)-2-(((бензилокси)карбонил)амино)-3-гидроксимасляную кислоту (4,8 г; 18,95 ммоль) в THF (50 мл) в течение 10 мин при -78°C. Раствор перемешивали в течение 1 ч при -78°C и оставляли для нагревания до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи. Растворитель затем выпаривали под вакуумом и остаток загружали на картридж с 100 г диоксида кремния и очищали посредством колоночной хроматографии с использованием градиента 0-30% EtOAc/циклогексан. Требуемые фракции объединяли и упаривали под вакуумом с получением продукта в виде белого твердого вещества (3,06 г). ЖХМС (2 мин, формиатный способ): Rt: 0,99 мин, [МН]⁺ не наблюдалось.

Промежуточное соединение 2: (2S,3S,4R)-этил-4-(((бензилокси)карбонил)амино)-2,3-диметил-

1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксилат

Этил-4-аминобензоат (15,6 г; 94 ммоль) и ацетальдегид (8,00 мл; 142 ммоль) помещали в DCM (300 мл) и оставляли для перемешивания при комнатной температуре в течение 1 ч. Реакционную смесь затем охлаждали до 0°C и обрабатывали (E)-бензил-проп-1-ен-1-илкарбаматом (см. получение Промежуточного соединения 1; 19,86 г; 104 ммоль) и (11bS)-2,6-бис-(4-хлорфенил)-4-гидрокси-8,9,10,11,12,13,14,15октагидродинафто[2,1-б:1’,2’-1][1,3,2]диоксафосфепин-4-оксидом (получение см. в JACS, 2011, 133, 14804; 0,545 г; 0,944 ммоль), реакционную смесь оставляли для перемешивания при 0°C в течение 3 ч, затем реакционную смесь добавляли в делительную воронку. Смесь разбавляли DCM (300 мл), промывали насыщенным раствором бикарбоната натрия (600 мл) с получением плотной эмульсии, из которой через полчаса отстаивания отделяли органический слой. Оставшуюся водную эмульсию экстрагировали (200 мл), затем разбавляли насыщенным рассолом (300 мл) и снова экстрагировали DCM (200 мл). Эту смесь оставляли стоять в течение ночи. Объединенные органические слои сушили и упаривали под вакуумом с получением бесцветного твердого вещества. Твердое вещество суспендировали в EtOAc (300 мл) и нагревали до температуры дефлегмации с получением прозрачного бесцветного раствора. Его разбавляли циклогексаном до тех пор, пока смесь не становилась мутной, затем повторно нагревали для растворения всех твердых веществ и оставляли для охлаждения до комнатной температуры в течение 1 ч. Суспензию фильтровали под вакуумом и твердый продукт сушили в вакуумной печи с получением продукта в виде бесцветного твердого вещества (23,3 г). Анализ посредством хиральной ВЭЖХ проводили при использовании колонки Chiralcel IC 250x4,6 мм, элюируя 15% этанолом в гептане при скорости потока 1 мл/мин. Пик 1/минорный энантиомер (0,2%, определено с помощью УФ) элюируется при 10,6 мин, и пик 2/основной энантиомер (99,8%, определено с помощью УФ) элюируется при 15,4 мин. Это показало, что продукт имел ее (энантиомерный избыток) 99,6%. ЖХМС (2 мин, способ с высоким значением pH): Rt: 1,20 мин, [МН]⁺: 383.

Промежуточное соединение 3: (2S,3R,4R)-этил-1-ацетил-4-(((бензилокси)карбонил)амино)-2,3-диметил- 1 ,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксилат

- 19 031679

Раствор (2S,3S,4R)-этил-4-(((бензилокси)карбонил)амино)-2,3-диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин6-карбоксилата (для получения см. Промежуточное соединение 2; 29,5 г; 77 ммоль) и пиридина (18,72 мл; 231 ммоль) в безводном DCM (800 мл) охлаждали на ледяной бане в атмосфере азота, затем подвергали взаимодействию с ацетилхлоридом (6,58 мл; 93 ммоль), добавляемым по каплям в течение 10 мин. Смесь перемешивали при 0°C в течение 1 ч, затем оставляли нагреваться до комнатной температуры и перемешивали в течение еще 3 ч. Реакционную смесь переносили в делительную воронку и промывали 1 М HCl (500 мл), Н₂О (500 мл) и насыщенным раствором бикарбоната натрия (500 мл), сушили и упаривали под вакуумом с получением продукта (33,5 г). ЖХМС (2 мин, способ с высоким значением pH): Rt: 1,13 мин, [МН]⁺: 425.

Промежуточное соединение 4: (2S,3R,4R)-этил-1-ацетил-4-амино-2,3-диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксилат

Раствор (2S,3R,4R)-этил-1-ацетил-4-(((бензилокси)карбонил)амино)-2,3-диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксилат (для получения см. Промежуточное соединение 3; 7,5 г; 17,67 ммоль) в этаноле (75 мл) добавляли к 5% Pd/C (влажный) (1,43 г; 0,672 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в атмосфере водорода в течение 4,5 ч. Добавляли дополнительное количество 5% Pd/C (влажного) (1,43 г; 0,672 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в атмосфере водорода в течение еще 16 ч. Добавляли дополнительное количество 5% Pd/C (влажного) (1,43 г; 0,672 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в атмосфере водорода в течение ночи. Реакционную смесь фильтровали через картридж 10 g

Celite®, промывая EtOH (экстра). Фильтрат концентрировали под вакуумом и сушили под вакуумом в течение ночи с получением продукта в виде вязкого масла (4,5 г). ЖХМС (2 мин, формиатный способ): Rt: 0,49 мин, [М]⁺: 274 (потеря NH₂ ^-).

Промежуточное соединение 5: (2S,3R,4R)-этил-1-ацетил-4-((5-цианопиридин-2-ил)амино)-2,3-диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксилат

DIPEA (2,83 мл; 16,22 ммоль) добавляли одной порцией в перемешиваемый раствор (2S,3R,4R)этил-1-ацетил-4-амино-2,3-диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксилата (для получения см. Промежуточное соединение 4; 1,57 г; 5,41 ммоль) и 6-фторникотинонитрила (1,320 г; 10,81 ммоль) в DMSO (10 мл) при комнатной температуре. Флакон герметизировали и затем нагревали в микроволновом генераторе Biotage до 160°C при использовании начальной установки параметров высокого поглощения в течение 45 мин. После охлаждения до комнатной температуры добавляли EtOAc (40 мл) и Н₂О (40 мл). Отделенную водную фазу экстрагировали EtOAc (2x40 мл). Объединенную органическую фазу пропускали через гидрофобную фритту и упаривали при пониженном давлении с получением коричневого масла. Масло помещали в DCM и очищали посредством колоночной хроматографии (100 г диоксида кремния) при использовании градиента 0-60% EtOAc/циклогексан. Соответствующие фракции объединяли и упаривали под вакуумом с получением продукта в виде белой пены (1,95 г). ЖХМС (2 мин, формиатный способ): Rt: 1,06 мин; [МН]⁺: 393.

Промежуточное соединение 6: (2S,3R,4R)-1-ацетил-4-((5-цианопиридин-2-ил)амино)-2,3-диметил-

1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоновая кислота

Гидроксид лития (14,91 мл; 1M в H₂O; 10,98 ммоль) добавляли одной порцией в перемешиваемый раствор (2S,3R,4R)-этил-1-ацетил-4-((5-цианопиридин-2-ил)амино)-2,3-диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксилата (для получения см. Промежуточное соединение 5; 1,95 г; 4,97 ммоль) в MeOH (15 мл) и THF (15 мл) при комнатной температуре. Полученный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин и затем оставляли для выстаивания при комнатной температуре в течение 72

- 20 031679

ч. Добавляли 2 М HCl (7,5 мл) с последующим добавлением Н₂О (20 мл) и EtOAc (40 мл). Отделенную водную фазу экстрагировали EtOAc (2x20 мл). Объединенную органическую фазу пропускали через гидрофобную фритту и упаривали при пониженном давлении с получением продукта в виде бледно-желтой пены (1,75 г). ЖХМС (2 мин; формиатный способ): Rt: 0,85 мин; [МН]⁺: 365.

Промежуточное соединение 7: (2S,3R,4R)-этил-1-ацетил-4-((5-хлорпиримидин-2-ил)амино)-2,3-диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксилат

DIPEA (2,91 мл; 16,63 ммоль) добавляли одной порцией в перемешиваемый раствор (2S,3R,4R)этил-1-ацетил-4-амино-2,3-диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксилата (для получения см. Промежуточное соединение 4; 1,61 г; 5,54 ммоль) и 2,5-дихлорпиримидина (1,652 г; 11,09 ммоль) в DMSO (10 мл) при комнатной температуре. Флакон герметизировали и затем нагревали в микроволновом генераторе Biotage до 160°C при использовании начальной установки параметров высокого поглощения в течение 90 мин. После охлаждения до комнатной температуры добавляли EtOAc (40 мл) и Н2О (40 мл). Отделенную водную фазу экстрагировали EtOAc (2x40 мл). Объединенную органическую фазу пропускали через гидрофобную фритту и упаривали при пониженном давлении с получением коричневого масла. Образец помещали в DCM и очищали посредством колоночной хроматографии (100 г диоксида кремния) при использовании градиента 0-50% EtOAc/циклогексан. Соответствующие фракции объединяли и упаривали под вакуумом с получением продукта в виде бледно-желтой пены (1,475 г). ЖХМС (2 мин; формиатный способ): Rt: 1,15 мин; [МН]⁺: 403.

Промежуточное соединение 8: (2S,3R,4R)-1-ацетил-4-((5-хлорпиримидин-2-ил)амино)-2,3-диметил-

Гидроксид лития (10,98 мл; 1M в H₂O; 10,98 ммоль) добавляли одной порцией в перемешиваемый раствор (2S,3R,4R)-этил-1-ацетил-4-((5-хлорпиримидин-2-ил)амино)-2,3-диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксилата (для получения см. Промежуточное соединение 7; 1,475 г; 3,66 ммоль) в MeOH (15 мл) и THF (15 мл) при комнатной температуре. Полученный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин и затем оставляли для выстаивания при комнатной температуре в течение 72 ч. Добавляли 2 М HCl (5,5 мл). Добавляли Н₂О (20 мл) и EtOAc (40 мл), отделенную водную фазу экстрагировали EtOAc (2x20 мл). Объединенную органическую фазу пропускали через гидрофобную фритту и упаривали при пониженном давлении с получением продукта в виде бледно-желтой пены (1,36 г). ЖХМС (2 мин; формиатный способ): Rt: 0,92 мин; [МН]⁺: 375.

Промежуточное соединение 9: (2S,3R,4R)-этил-1-ацетил-4-((5-цианопиразин-2-ил)амино)-2,3-диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксилат

В пробирку для микроволновой печи добавляли (2S,3R,4R)-этил-1-ацетил-4-амино-2,3-диметил-

1.2.3.4- тетрагидрохинолин-6-карбоксилат (для получения см. Промежуточное соединение 4; 200 мг; 0,689 ммоль) и 5-хлорпиразин-2-карбонитрил (192 мг; 1,378 ммоль). Добавляли DMSO (1 мл) с последующим добавлением DIPEA (0,361 мл; 2,066 ммоль) и пробирку для микроволновой печи герметизировали и нагревали до 160°C в течение 30 мин в микроволновом реакторе. Добавляли Н2О (20 мл) с последующим добавлением Et₂O (20 мл) и слои разделяли. Водный слой далее экстрагировали Et₂O (2x20 мл) и объединенные органические слои затем подвергали обратной экстракции рассолом (2x20 мл). Объединенные органические слои затем сушили (Na₂SO₄) и концентрировали под вакуумом с получением коричневого масла. Его помещали в DCM и очищали посредством колоночной хроматографии (25 г диоксида кремния) при использовании градиента 0-60% EtOAc/циклогексан. Соответствующие фракции собирали и концентрировали под вакуумом с получением продукта в виде коричневого масла (268 мг). ЖХМС (2 мин; формиатный способ): Rt: 1,01 мин; [МН]⁺: 394.

Промежуточное соединение 10: (2S,3R,4R)-1-ацетил-4-((5-цианопиразин-2-ил)амино)-2,3-диметил-

1.2.3.4- тетрагидрохинолин-6-карбоновая кислота

- 21 031679

(28,3К,4К)-Этил-1-ацетил-4-((5-цианопиразин-2-ил)амино)-2,3-диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин6-карбоксилат (для получения см. Промежуточное соединение 9; 268 мг; 0,681 ммоль) помещали в THF (1 мл) и Н₂О (1 мл) Добавляли гидроксид лития (48,9 мг; 2,044 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 19 ч при комнатной температуре. Добавляли 2 М HCl (водн.) (1,022 мл; 2,044 ммоль) и реакционную смесь разбавляли Н₂О (20 мл) и экстрагировали в 10% MeOH/DCM (3x20 мл). Объединенные органические слои собирали и концентрировали под вакуумом с получением продукта в виде желтого твердого вещества (72 мг). ЖХМС (2 мин; формиатный способ): Rt: 0,80 мин; [МН]⁺: 366.

Промежуточное соединение 11: (2S,3R,4R)-этил-1-ацетил-4-((5-фторпиридин-2-ил)амино)-2,3-диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксилат

В колбу добавляли (2S,3R,4R)-этил-1-ацетил-4-амино-2,3-диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6карбоксилат (для получения см. Промежуточное соединение 4; 150 мг; 0,517 ммоль) и 2-бром-5фторпиридин (182 мг; 1,033 ммоль). Добавляли 1,4-диоксан (3,25 мл) с последующим добавлением карбоната цезия (370 мг; 1,137 ммоль) и смесь в колбе барботировали N₂ (5 мин). Добавляли Pd₂(dba)₃ (47,3 мг; 0,052 ммоль) и QPhos (36,8 мг; 0,052 ммоль) и смесь в колбе снова барботировали N₂. Реакционную смесь нагревали до 90°C и оставляли для перемешивания в течение 3 ч. Добавляли дополнительное количество Pd₂(dba)₃ (47,3 мг; 0,052 ммоль) и QPhos (36,8 мг; 0,052 ммоль) и реакционную смесь оставляли для перемешивания при 90°C в течение ночи. Добавляли дополнительное количество 2-бром-5-фторпиридина (91 мг) и реакционную смесь нагревали при 110°C в течение приблизительно 3 ч. Реакционную смесь оставляли охлаждаться. Реакционную смесь разбавляли EtOAc (20 мл) и фильтровали. Остатки промывали дополнительным количеством EtOAc (20 мл) и фильтрат затем концентрировали под вакуумом с получением коричневого масла. Его помещали в DCM и очищали посредством колоночной хроматографии (25 г диоксида кремния) при использовании градиента 0-60% EtOAc/циклогексан. Соответствующие фракции собирали и концентрировали под вакуумом с получением продукта в виде оранжевой пены (37 мг). ЖХМС (2 мин; формиатный способ): Rt: 1,02 мин; [МН]⁺: 386.

Промежуточное соединение 12: (2S,3R,4R)-1-ацетил-4-((5-фторпиридин-2-ил)амино)-2,3-диметил-

(2S,3R,4R)-Этил-1-ацетил-4-((5-фторпиридин-2-ил)амино)-2,3-диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин6-карбоксилат (для получения см. Промежуточное соединение 11; 37 мг; 0,096 ммоль) помещали в THF (0,5 мл) и Н2О (0,5 мл). Добавляли гидроксид лития (9,20 мг; 0,384 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 3 ч при комнатной температуре. Добавляли дополнительную порцию LiOH (4 мг) и реакционную смесь оставляли для перемешивания в течение 16 ч при комнатной температуре. Добавляли 2 М HCl (водн.) (0,288 мл; 0,576 ммоль) и реакционную смесь распределяли между 10% MeOH/DCM (20 мл) и Н₂О (20 мл). Водный слой промывали дополнительным количеством 10% MeOH/DCM (2x20 мл) и объединенные органические слои затем сушили и концентрировали под вакуумом с получением продукта в виде желтого масла (30 мг). ЖХМС (2 мин; формиатный способ): Rt: 0,66 мин; [МН]⁺: 358.

Промежуточное соединение 13: трет-бутил-((2S,4R)-1-ацетил-6-циано-2-метил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-4-ил)карбамат

Смесь трет-бутил-((2S,4R)-1-ацетил-6-бром-2-метил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-4-ил)карбамата (для получения см. Промежуточное соединение 29 в WO 2012/143415А1; 2,0 г; 5,22 ммоль) и цианида цинка (766 мг; 6,52 ммоль) в безводном дегазированном DMF (20 мл) обрабатывали тетра

- 22 031679 кис(трифенилфосфин)палладием(0) (301 мг; 5 молярных %). Реакционную смесь перемешивали при 115°C в течение 2 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали через Celite®. Растворитель выпаривали из фильтрата. Остаток распределяли между EtOAc (100 мл) и Н₂О (50 мл). Органическую фазу отделяли, промывали Н₂О, рассолом, сушили над Na₂SO₄ и упаривали. Остаток очищали посредством колоночной хроматографии с использованием градиента 25-50% EtOAc/циклогексан с получением продукта (1,36 г) в виде бесцветного твердого вещества. ЖХМС (2 мин; формиатный способ): Rt: 0,98 мин, [МН]⁺: 330.

Промежуточное соединение 14: гидрохлорид (2S,4R)-1-ацетил-4-амино-2-метил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбонитрила nh₂hci

М Хлорид водорода в 1,4-диоксане (5 мл; 20 ммоль) добавляли в перемешиваемый раствор третбутил-((2S,4R)-1-ацетил-6-циано-2-метил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-4-ил)карбамата (для получения см. Промежуточное соединение 13; 1,35 г; 4,1 ммоль) в 1,4-диоксане (5 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 24 ч. Добавляли Et₂O (50 мл) и смесь перемешивали в течение 20 мин. Раствор декантировали. Остаток растирали с Et2O с получением продукта в виде бесцветного твердого вещества (0,98 г). ЖХМС (2 мин; способ с высоким значением pH): Rt: 0,65 мин; [М]⁺: 213 (потеря NH₂ ^-).

Промежуточное соединение 15:

1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбонитрил (2S,4R)-1-ацетил-4-((5-хлорпиримидин-2-ил)амино)-2-метил-

DIPEA (0,493 мл; 2,82 ммоль) добавляли одной порцией в перемешиваемый раствор гидрохлорида (2S,4R)-1-ацетил-4-амино-2-метил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбонитрила (для получения см. Промежуточное соединение 14; 250 мг; 0,941 ммоль) и 2,5-дихлорпиримидина (280 мг; 1,882 ммоль) в DMSO (2 мл) при комнатной температуре. Флакон герметизировали и затем нагревали в микроволновом генераторе Biotage до 160°C при использовании начальной установки параметров высокого поглощения в течение 30 мин. После охлаждения до комнатной температуры флакон повторно нагревали в микроволновом генераторе Biotage до 160°C при использовании начальной установки параметров высокого поглощения в течение 30 мин. После охлаждения до комнатной температуры добавляли EtOAc (10 мл) и Н₂О (10 мл). Отделенную водную фазу экстрагировали EtOAc (2x10 мл). Объединенную органическую фазу пропускали через гидрофобную фритту и упаривали при пониженном давлении с получением коричневого масла. Масло помещали в DCM и очищали посредством колоночной хроматографии (25 г диоксида кремния) при использовании градиента 0-50% EtOAc/циклогексан. Соответствующие фракции объединяли и упаривали под вакуумом с получением продукта в виде бледно-желтого масла (248 мг). ЖХМС (2 мин; формиатный способ): Rt: 0,94 мин; [МН]⁺: 342.

Промежуточное соединение 16: (2S,4R)-бутил-1-ацетил-4-((изопропоксикарбонил)амино)-2-метил-

1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксилат

Изопропил-((2S,4R)-1-ацетил-6-бром-2-метил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-4-ил)карбамат (для получения см. WO 2012/143415А1; 5,7 г; 15,44 ммоль) помещали в 1,4-диоксан (20 мл) в атмосфере N₂. Добавляли бутан-1-ол (17,16 г; 232 ммоль), DMAP (3,77 г; 30,9 ммоль), DIPEA (5,50 мл; 31,5 ммоль), трансбис(ацетато)бис[орто-(ди-ортотолилфосфино)бензил]дипалладий(П) (0,724 г; 0,772 ммоль) и гексакарбонил молибдена (2,038 г; 7,72 ммоль) и смесь нагревали до 120°C в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали и фильтровали через Celite®. Осадок на фильтре промывали EtOAc (100 мл). Фильтрат промывали H2O (100 мл) и водный слой повторно экстрагировали EtOAc (100 мл). Объединенные органические слои сушили с Na2SO4, фильтровали и концентрировали под вакуумом с получением коричневого масла. Масло помещали в DCM и очищали посредством колоночной хроматографии при использовании градиента 5-50% EtOAc/циклогексан. Соответствующие фракции концентрировали под вакуумом с получением продукта в виде белого твердого вещества (3,7282 г).

ЖХМС (2 мин; способ с высоким значением pH): Rt: 1,20 мин; [МН]⁺: 391.

Промежуточное соединение 17: (2S,4R)-бутил-1-ацетил-4-амино-2-метил-1,2,3,4-тетрагидрохи- 23 031679 нолин-6-карбоксилат

AlCl₃ (3,82 г; 28,7 ммоль) суспендировали в DCM (100 мл) в атмосфере N₂, охлаждали на ледяной бане и перемешивали. Добавляли ^,4Я)-бутил-1-ацетил-4-((изопропоксикарбонил)амино)-2-метил-

1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксилат (для получения см. Промежуточное соединение 16; 2,9448 г; 7,54 ммоль) и смесь перемешивали в течение 30 мин, получая прозрачный раствор. Медленно добавляли NEt₃ (12,61 мл; 90 ммоль) в MeOH (13,33 мл), получая густой белый осадок. Реакционную смесь перемешивали и оставляли для нагревания до комнатной температуры в течение ночи. Добавляли дополнительное количество AlCl₃ (1,91 г) и перемешивание продолжали в течение еще 3 ч. Реакционную смесь охлаждали на ледяной бане и добавляли еще одну порцию NEt₃ (6,3 мл) в MeOH (6,5 мл). После перемешивания в течение еще 4 ч в реакционную смесь добавляли DCM (100 мл) и насыщ. NaHCO₃(100 мл) с последующим добавлением сегнетовой соли (20 г) и перемешивание проводили в течение 30 мин. Добавляли H₂O (100 мл) и перемешивание продолжали в течение 30 мин. Добавляли DCM и H₂O (100 мл) и затем разделяли. Водный слой повторно экстрагировали DCM (2x200 мл) и объединенные органические слои фильтровали через Celite®, пропускали через гидрофобную фритту и концентрировали под вакуумом с получением прозрачного масла. Масло помещали в DCM и очищали посредством колоночной хроматографии с использованием градиента 5-50% (EtOAc/EtOH, 3:1)/циклогексан. Соответствующие фракции концентрировали под вакуумом с получением продукта в виде желтого масла (2,0818 г). ЖХМС (2 мин; способ с высоким значением pH): Rt: 0,98 мин; [МН]⁺: 329.

Промежуточное соединение 18: (2S,4R)-бутил-1-ацетил-4-((5-хлорпиримидин-2-ил)амино)-2-метил-

DIPEA (0,344 мл; 1,971 ммоль) добавляли одной порцией в перемешиваемый раствор (2S,4R)бутил-1-ацетил-4-амино-2-метил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксилата (для получения см. Промежуточное соединение 17; 200 мг; 0,657 ммоль) и 2,5-дихлорпиримидина (196 мг; 1,314 ммоль) в DMSO (2 мл) при комнатной температуре. Флакон герметизировали и затем нагревали в микроволновом генераторе Biotage до 160°C при использовании начальной установки параметров высокого поглощения в течение 40 мин. После охлаждения до комнатной температуры добавляли EtOAc (10 мл) и Н₂О (10 мл). Отделенную водную фазу экстрагировали EtOAc (2x10 мл). Объединенную органическую фазу пропускали через гидрофобную фритту и упаривали при пониженном давлении с получением коричневого масла. Образец помещали в DCM и очищали посредством колоночной хроматографии (25 г, диоксид кремния) при использовании градиента 0-40% EtOAc/циклогексан. Соответствующие фракции объединяли и упаривали под вакуумом с получением продукта в виде бледно-желтого масла (265 мг). ЖХМС (2 мин; формиатный способ): Rt: 1,23 мин; [МН]⁺: 417.

Промежуточное соединение 19: (2S,4R)-1-ацетил-4-((5-хлорпиримидин-2-ил)амино)-2-метил-

Гидроксид лития (1,91 мл; 1 М в Н₂О; 1,91 ммоль) добавляли одной порцией в перемешиваемый раствор (2S,4R)-бутил-1-ацетил-4-((5-хлорпиримидин-2-ил)амино)-2-метил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6карбоксилата (для получения см. Промежуточное соединение 18; 265 мг; 0,636 ммоль) в MeOH (2 мл) и THF (2 мл) при комнатной температуре. Полученный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч и затем добавляли 2 М HCl (1 мл). Добавляли Н₂О (20 мл) и EtOAc (20 мл), отделенную водную фазу экстрагировали EtOAc (2x10 мл). Объединенную органическую фазу пропускали через гидрофобную фритту и упаривали при пониженном давлении с получением продукта в виде желтого масла (212 мг). ЖХМС (2 мин; формиатный способ): Rt: 0,83 мин; [МН]⁺: 361.

Промежуточное соединение 20: гидрохлорид (2S,4R)-бутил-1-ацетил-4-амино-2-метил-1,2,3,4тетрагидрохинолин-6-карбоксилата

- 24 031679

Раствор (2S,4R)-бутил-1-ацетил-4-амино-2-метил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксилата (для получения см. Промежуточное соединение 17; 1,95 г; 6,41 ммоль) в Et₂O (20 мл) обрабатывали 1,0 М HCl в Et₂O (3,0 мл). Растворитель выпаривали с получением продукта в виде бледно-желтого твердого вещества (1,8 г). ЖХМС (2 мин; формиатный способ): Rt: 0,64 мин; [М]⁺: 288 (потеря NH₂ ^-).

Промежуточное соединение 21: (2S,4R)-бутил-1-ацетил-4-((5-цианопиридин-2-ил)амино)-2-метил-

1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксилат

DIPEA (0,384 мл; 2,200 ммоль) добавляли одной порцией в перемешиваемый раствор гидрохлорида (2S,4R)-бутил-1-ацетил-4-амино-2-метил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксилата (для получения см. Промежуточное соединение 20; 250 мг; 0,733 ммоль) и 6-фторникотинонитрила (179 мг; 1,467 ммоль) в DMSO (2 мл) при комнатной температуре. Флакон герметизировали и затем нагревали в микроволновом генераторе Biotage до 160°C при использовании начальной установки параметров высокого поглощения в течение 30 мин. После охлаждения до комнатной температуры добавляли EtOAc (10 мл) и Н₂О (10 мл). Отделенную водную фазу экстрагировали EtOAc (2x10 мл). Объединенную органическую фазу пропускали через гидрофобную фритту и упаривали при пониженном давлении с получением коричневого масла. Образец помещали в DCM и очищали посредством колоночной хроматографии (25 г, диоксид кремния) при использовании градиента 0-40% EtOAc/циклогексан. Соответствующие фракции объединяли и упаривали под вакуумом с получением продукта в виде бледно-желтого масла (285 мг). ЖХМС (2 мин; формиатный способ): Rt: 1,15 мин; [МН]⁺: 407.

Промежуточное соединение 22: (2S,4R)-1-ацетил-4-((5-цианопиридин-2-ил)амино)-2-метил-1,2,3,4тетрагидрохинолин-6-карбоновая кислота

Гидроксид лития (2,10 мл; 1 М в Н₂О; 2,10 ммоль) добавляли одной порцией в перемешиваемый раствор (2S,4R)-бутил-1-ацетил-4-((5-цианопиридин-2-ил)амино)-2-метил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6карбоксилата (для получения см. Промежуточное соединение 21; 285 мг; 0,701 ммоль) в MeOH (2 мл) и THF (2 мл) при комнатной температуре. Полученный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч и затем добавляли 2 М HCl (1 мл). Добавляли Н₂О (20 мл) и EtOAc (20 мл), отделенную водную фазу экстрагировали EtOAc (2x10 мл). Объединенную органическую фазу пропускали через гидрофобную фритту и упаривали при пониженном давлении с получением продукта в виде бледно-желтой пены (223 мг). ЖХМС (2 мин; формиатный способ): Rt: 0,78 мин; [МН]⁺: 351.

Промежуточное соединение 23: (2S,3R,4R)-этил-1-ацетил-4-((5-хлорпиридин-2-ил)амино)-2,3диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксилат

Смесь (2S,3R,4R)-этил-1-ацетил-4-амино-2,3-диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксилата (для получения см. Промежуточное соединение 4; 295,0 мг; 1,016 ммоль), 2-бром-5-хлорпиридина (217,2 мг; 1,129 ммоль), i-pent PEPPSI (40,7 мг; 0,051 ммоль) и карбоната цезия (654,4 мг; 2,008 ммоль) в 1,4диоксане (3 мл) нагревали при перемешивании в атмосфере N2 при 100°C в течение 22,5 ч. После того как ее оставили для охлаждения, смесь фильтровали через Celite, элюируя EtOAc (3x5 мл). Объединенный фильтрат концентрировали в потоке N₂ и остаток очищали посредством MDAP. Требуемые фракции концентрировали в потоке N2, объединяли и затем упаривали досуха под вакуумом с получением продукта в виде светло-коричневой смолы (46,8 мг). ЖХМС (2 мин; формиатный способ): Rt: 1,15 мин; [МН]⁺: 402.

Промежуточное соединение 24: (2S,3R,4R)-1-ацетил-4-((5-хлорпиридин-2-ил)амино)-2,3-диметил-

НО'

- 25 031679 (2S,3R,4R)-Этил-1-ацетил-4-((5-хлорпиридин-2-ил)амино)-2,3-диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин6-карбоксилат (для получения см. Промежуточное соединение 23; 67,7 мг; 0,168 ммоль) перемешивали в THF (0,5 мл) и Н₂О (0,5 мл) в атмосфере N₂. Добавляли гидроксид лития (13,6 мг; 0,568 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 24 ч. После того как ее оставили выстаиваться в течение ночи, смесь подкисляли посредством добавления 2 М HCl (3 мл) и экстрагировали

EtOAc (3x3 мл). Фазы разделяли и органическую фазу сушили посредством пропускания ее через гидрофобную фритту. Летучие вещества выпаривали из обеих фаз в потоке N₂, остатки объединяли и очищали посредством MDAP. Требуемые фракции концентрировали в потоке N₂, остатки объединяли и сушили под вакуумом с получением продукта в виде кремового твердого вещества (48 мг). ЖХМС (2 мин; формиатный способ): Rt: 0,89 мин; [МН]⁺: 374.

Пример 1: (2S,3R,4R)-1-ацетил-4-((5-цианопиридин-2-ил)амино)-N-этил-2,3-диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксамид

(2S,3R,4R)-1-Ацетил-4-((5-цианопиридин-2-ил)амино)-2,3-диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6карбоновую кислоту (для получения см. Промежуточное соединение 6; 88 мг; 0,121 ммоль) помещали в DMF (1,4 мл) и HATU (50,5 мг; 0,133 ммоль) с последующим добавлением DIPEA (0,042 мл; 0,241 ммоль). Реакционную смесь оставляли перемешиваться в течение 5 мин, затем добавляли этанамин (2M в THF) (0,121 мл; 0,241 ммоль) и реакционную смесь оставляли перемешиваться при комнатной температуре в течение приблизительно 1 ч. Реакционную смесь сразу же добавляли во флакон, а колбу промывали 2 порциями MeOH/DMSO (1:1; 0,2 мл). Содержимое флакона сразу же очищали посредством MDAP. Соответствующие фракции собирали и концентрировали под вакуумом с получением продукта в виде кремового твердого вещества (32 мг). ЖХМС (2 мин; формиатный способ): Rt: 0,82 мин; [МН]⁺: 392.

Пример 2: (2S,3R,4R)-1-ацетил-4-((5-цианопиридин-2-ил)амино)-2,3-диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксамид

(2S,3R,4R)-1-Ацетил-4-((5-цианопиридин-2-ил)амино)-2,3-диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6карбоновую кислоту (для получения см. Промежуточное соединение 6; 88 мг; 0,121 ммоль) помещали в DMF (1,4 мл) и HATU (50,5 мг; 0,133 ммоль) с последующим добавлением DIPEA (0,042 мл; 0,241 ммоль). Реакционную смесь оставляли для перемешивания в течение 5 мин, затем добавляли хлорид аммония (12,92 мг; 0,241 ммоль) и реакционную смесь оставляли перемешиваться при комнатной температуре в течение приблизительно 1 ч. Реакционную смесь сразу же добавляли во флакон, а колбу промывали 2 порциями MeOH/DMSO (1:1; 0,2 мл). Содержимое флакона сразу же очищали посредством MDAP. Соответствующие фракции собирали и концентрировали под вакуумом с получением продукта в виде кремового твердого вещества (28 мг). ЖХМС (2 мин; формиатный способ): Rt: 0,72 мин; [МН]⁺: 364.

Пример 3: (2S,3R,4R)-1-ацетил-4-((5-цианопиридин-2-ил)амино)-2,3-диметил-N-(тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксамид

HATU (172 мг; 0,453 ммоль) добавляли одной порцией в перемешиваемый раствор (2S,3R,4R)-1ацетил-4-((5-цианопиридин-2-ил)амино)-2,3-диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоновой кислоты (для получения см. Промежуточное соединение 6; 150 мг; 0,412 ммоль) и DIPEA (0,216 мл; 1,235 ммоль) в DMF (2 мл) при комнатной температуре в атмосфере N2. После перемешивания при комнатной температуре в течение 15 мин одной порцией добавляли гидрохлорид тетрагидро-2H-пиран-4-амина (113 мг; 0,823 ммоль) и полученный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. DMF раствор затем очищали посредством MDAP. Соответствующие фракции объединяли и растворитель выпаривали под вакуумом с получением продукта в виде белого твердого вещества (81 мг). ЖХМС (2 мин; формиатный способ): Rt: 0,82 мин; [МН]⁺: 448.

Пример 4: (2S,3R,4R)-1-ацетил-4-((5-цианопиридин-2-ил)амино)-N-((R)-2-гидроксипропил)-2,3-диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксамид

- 26 031679

HATU (172 мг; 0,453 ммоль) добавляли одной порцией в перемешиваемый раствор (2S,3R,4R)-1ацетил-4-((5-цианопиридин-2-ил)-амино)-2,3-диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоновой кислоты (для получения см. Промежуточное соединение 6; 150 мг; 0,412 ммоль) и DIPEA (0,216 мл; 1,235 ммоль) в DMF (2 мл) при комнатной температуре в атмосфере N₂. После перемешивания при комнатной температуре в течение 15 мин одной порцией добавляли да-1-аминопропан-2-ол (62 мг; 0,825 ммоль). Полученный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. DMF раствор затем очищали посредством MDAP. Соответствующие фракции объединяли и растворитель выпаривали под вакуумом с получением продукта в виде белого твердого вещества (119 мг). ЖХМС (2 мин; формиатный способ): Rt: 0,75 мин; [МН]⁺: 422.

Пример 5: ^^^)-1-ацетил-4-((5-цианопиридин-2-ил)амино)^-(^)-2-гидроксипропил)-2,3-диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксамид

HATU (172 мг; 0,453 ммоль) добавляли одной порцией в перемешиваемый раствор (2S,3R,4R)-1ацетил-4-((5-цианопиридин-2-ил)амино)-2,3-диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоновой кислоты (для получения см. Промежуточное соединение 6; 150 мг; 0,412 ммоль) и DIPEA (0,216 мл; 1,235 ммоль) в DMF (2 мл) при комнатной температуре в атмосфере N₂. После перемешивания при комнатной температуре в течение 15 мин одной порцией добавляли ^)-1-аминопропан-2-ол (0,065 мл; 0,823 ммоль). Полученный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. DMF раствор затем очищали посредством MDAP. Соответствующие фракции объединяли и растворитель выпаривали под вакуумом с получением продукта в виде белого твердого вещества (121 мг). ЖХМС (2 мин; формиатный способ): Rt: 0,75 мин; [МН]⁺: 422.

Пример 6: ((2S,3R,4R)-1-ацетил-4-((5-хлорпиримидин-2-ил)амино)-N-этил-2,3-диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксамид

В смесь (2S,3R,4R)-1-ацетил-4-((5-хлорпиримидин-2-ил)амино)-2,3-диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоновой кислоты (для получения см. Промежуточное соединение 8; 96,6 мг; 0,258 ммоль), этиламина (0,5 мл; 2M в THF; 1,000 ммоль) и HATU (117,5 мг; 0,309 ммоль) в DMF (1,5 мл) добавляли раствор (2S,3R,4R)-1-ацетил-4-((5-хлорпиридин-2-ил)амино)-2,3-диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6карбоновой кислоты (для получения см. Промежуточное соединение 24; 24,0 мг; 0,064 ммоль) в DMF (0,5 мл). Добавляли DIPEA (0,113 мл; 0,644 ммоль) и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Смесь разбавляли DMF с получением общего объема 3 мл и затем сразу же очищали посредством MDAP. Требуемые фракции объединяли и растворитель выпаривали под вакуумом с получением продукта в виде белого твердого вещества (58 мг). ЖХМС (2 мин; формиатный способ): Rt: 0,89 мин; [МН]⁺: 402.

Пример 7: (2S,3R,4R)-1-ацетил-4-((5-хлорпиримидин-2-ил)амино)-2,3-диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксамид

В смесь (2S,3R,4R)-1-ацетил-4-((5-хлорпиримидин-2-ил)амино)-2,3-диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоновой кислоты (для получения см. Промежуточное соединение 8; 97,1 мг; 0,259 ммоль), хлорида аммония (71,4 мг; 1,335 ммоль) и HATU (118,9 мг; 0,313 ммоль) в DMF (1,5 мл) добавляли раствор (2S,3R,4R)-1-ацетил-4-((5-хлорпиридин-2-ил)амино)-2,3-диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоновой кислоты (для получения см. Промежуточное соединение 24; 24,0 мг; 0,064 ммоль) в DMF (0,5 мл). Добавляли DIPEA (0,113 мл; 0,648 ммоль) и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Смесь разбавляли DMF с получением общего объема 3 мл и затем сразу же очи- 27 031679 щали посредством MDAP. Требуемые фракции объединяли и растворитель выпаривали под вакуумом с получением продукта в виде белого твердого вещества (72,9 мг). ЖХМС (2 мин; формиатный способ): Rt: 0,77 мин; [МН]⁺: 374.

Пример 8: (2S,3R,4R)-1-ацетил-4-((5-хлорпиримидин-2-ил)амино)-2,3-диметил-N-(тетрагидро-2Нпиран-4-ил)-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксамид

HATU (167 мг; 0,440 ммоль) добавляли одной порцией в перемешиваемый раствор (2S,3R,4R)-1ацетил-4-((5-хлорпиримидин-2-ил)-амино)-2,3-диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоновой кислоты (для получения см. Промежуточное соединение 8; 150 мг; 0,400 ммоль) и DIPEA (0,210 мл; 1,201 ммоль) в DMF (2 мл) при комнатной температуре в атмосфере N₂. После перемешивания при комнатной температуре в течение 15 мин одной порцией добавляли гидрохлорид тетрагидро-2H-пиран-4-амина (110 мг; 0,800 ммоль) и полученный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. DMF раствор затем очищали посредством MDAP. Соответствующие фракции объединяли и растворитель выпаривали под вакуумом с получением продукта в виде белого твердого вещества (88 мг). ЖХМС (2 мин; формиатный способ): Rt: 0,89 мин; [МН]⁺: 458.

Пример 9: (2S,3R,4R)-1-ацетил-4-((5-хлорпиримидин-2-ил)амино)-N-((S)-2-гидроксипропил)-2,3диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксамид

HATU (167 мг; 0,440 ммоль) добавляли одной порцией в перемешиваемый раствор (2S,3R,4R)-1ацетил-4-((5-хлорпиримидин-2-ил)-амино)-2,3-диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоновой кислоты (для получения см. Промежуточное соединение 8; 150 мг; 0,400 ммоль) и DIPEA (0,210 мл; 1,201 ммоль) в DMF (2 мл) при комнатной температуре в атмосфере N2. После перемешивания при комнатной температуре в течение 15 мин одной порцией добавляли ^)-1-аминопропан-2-ол (0,063 мл; 0,800 ммоль). Полученный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. DMF раствор затем очищали посредством MDAP. Соответствующие фракции объединяли и растворитель выпаривали под вакуумом с получением продукта в виде белого твердого вещества (120 мг). ЖХМС (2 мин; формиатный способ): Rt: 0,82 мин; [МН]⁺: 432.

Пример 10: (2S,3R,4R)-1-ацетил-4-((5-хлорпиримидин-2-ил)амино)-N-((R)-2-гидроксипропил)-2,3диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксамид

HATU (167 мг; 0,440 ммоль) добавляли одной порцией в перемешиваемый раствор (2S,3R,4R)-1ацетил-4-((5-хлорпиримидин-2-ил)-амино)-2,3-диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоновой кислоты (для получения см. Промежуточное соединение 8; 150 мг; 0,400 ммоль) и DIPEA (0,210 мл; 1,201 ммоль) в DMF (2 мл) при комнатной температуре в атмосфере N₂. После перемешивания при комнатной температуре в течение 15 мин одной порцией добавляли ^)-1-аминопропан-2-ол (60 мг; 0,799 ммоль). Полученный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. DMF раствор затем очищали посредством MDAP. Соответствующие фракции объединяли и растворитель выпаривали под вакуумом с получением продукта в виде белого твердого вещества (76 мг). ЖХМС (2 мин; формиатный способ): Rt: 0,82 мин; [МН]⁺: 432.

Пример 11: (2S,3R,4R)-1-ацетил-4-((5-цианопиразин-2-ил)амино)-2,3-диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксамид

- 28 031679 (28,3К,4К)-1-Ацетил-4-((5-цианопиразин-2-ил)амино)-2,3-диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6карбоновую кислоту (для получения см. Промежуточное соединение 10; 72 мг; 0,197 ммоль) помещали в DMF (0,7 мл) и HATU (82 мг; 0,17 ммоль) с последующим добавлением DIPEA (0,069 мл; 0,394 ммоль).

Реакционную смесь оставляли для перемешивания в течение 5 мин, затем добавляли хлорид аммония (21,08 мг; 0,394 ммоль) и реакционную смесь оставляли для перемешивания при комнатной температуре в течение приблизительно 4 ч. Реакционную смесь сразу же добавляли во флакон, а колбу промывали 2 порциями MeOH/DMSO (1:1; 0,2 мл). Содержимое флакона сразу же очищали посредством MDAP. Соответствующую фракцию собирали и концентрировали под вакуумом с получением продукта в виде кремового твердого вещества (32 мг). ЖХМС (2 мин; формиатный способ): Rt: 0,70 мин; [МН]⁺: 365.

Пример 12: (2S,3R,4R)-1-ацетил-4-((5-цианопиразин-2-ил)амино)-N-этил-2,3-диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксамид .CN (2S,3R,4R)-1-Ацетил-4-((5-цианопиразин-2-ил)амино)-2,3-диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6карбоновую кислоту (для получения см. Промежуточное соединение 10; 120 мг; 0,328 ммоль) помещали в DMF (1,4 мл) и HATU (137 мг; 0,361 ммоль) с последующим добавлением DIPEA (0,115 мл; 0,657 ммоль). Реакционную смесь оставляли для перемешивания в течение 5 мин, затем добавляли этанамин (2M в THF) (0,328 мл; 0,657 ммоль) и реакционную смесь оставляли для перемешивания при комнатной температуре в течение приблизительно 2,5 ч. Реакционную смесь сразу же добавляли в два флакона, а колбу промывали 2 порциями MeOH/DMSO (1:1; 0,2 мл). Содержимое флаконов сразу же очищали посредством MDAP. Соответствующие фракции собирали и концентрировали под вакуумом с получением продукта в виде кремового твердого вещества (58 мг). ЖХМС (2 мин; формиатный способ): Rt: 0,80 мин; [МН]⁺: 393.

Пример 13: (2S,3R,4R)-1-ацетил-N-этил-4-((5-фторпиридин-2-ил)-амино)-2,3-диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксамид (2S,3R,4R)-1-Ацетил-4-((5-фторпиридин-2-ил)амино)-2,3-диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6карбоновую кислоту (для получения см. Промежуточное соединение 12; 30 мг; 0,084 ммоль) помещали в DMF (0,7 мл) и HATU (35,1 мг; 0,092 ммоль) с последующим добавлением DIPEA (0,029 мл; 0,168 ммоль). Реакционную смесь оставляли перемешиваться в течение 5 мин, затем добавляли этанамин (2M в THF) (0,084 мл; 0,168 ммоль) и реакционную смесь оставляли перемешиваться при комнатной температуре в течение приблизительно 1 ч. Реакционную смесь сразу же добавляли во флакон, а колбу промывали 2 порциями MeOH/DMSO (1:1; 0,2 мл). Содержимое флакона сразу же очищали посредством MDAP. Соответствующие фракции собирали и концентрировали под вакуумом с получением продукта в виде кремового твердого вещества (16 мг). ЖХМС (2 мин; формиатный способ): Rt: 0,71 мин; [МН]⁺: 385.

Пример 14: (2S,4R)-1-ацетил-4-((5-хлорпиримидин-2-ил)амино)-2-метил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксамид

Пероксид водорода (0,12 мл; 35% по массе в H₂O; 1,40 ммоль) по каплям добавляли в течение 30 секунд в перемешиваемую суспензию (2S,4R)-1-ацетил-4-((5-хлорпиримидин-2-ил)амино)-2-метил-

1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбонитрила (для получения см. Промежуточное соединение 15; 240 мг; 0,702 ммоль) и карбоната калия (388 мг; 2,81 ммоль) в DMSO (5 мл) при комнатной температуре в атмосфере N₂. Полученную суспензию перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Добавляли EtOAc (10 мл) и H₂O (10 мл). Отделенную водную фазу экстрагировали EtOAc (2x10 мл), объединенную органическую фазу пропускали через гидрофобную фритту и упаривали при пониженном давлении с получением бледно-желтого твердого вещества. Образец помещали в DCM и очищали посредством колоночной хроматографии (25 г диоксида кремния) при использовании градиента 0-100% EtOAc/циклогексан и затем 0-10% EtOH/EtOAc. Соответствующие фракции объединяли и упаривали под вакуумом с получением продукта в виде белого твердого вещества (150 мг). ЖХМС (2 мин; формиатный

- 29 031679 способ): Rt: 0,71 мин; [МН]⁺: 360.

Ή ЯМР (400 МГц, d6-DMSO) δ м.д. 8.39 (br.s, 2Н), 7.95 (d, J=8 Гц, 2Н), 7.80 (dd, J=8,2 Гц, 1Н), 7.69 (s, 1Н), 7.41 (d, J=8 Гц, 1Н), 7.29 (br.s, 1H), 4.82 (ddd, J=12,8, 4 Гц, 1Н), 4.71-4.65 (m, 1Н), 2.57-2.53 (m, 1Н), 2.11 (s, 3Н), 1.38 (td, J=13, 9 Гц, 1Н), 1.08 (d, J=6 Гц, 3Н). Энантиомерный избыток (ее более 99%) определяли посредством анализа хиральной ВЭЖХ, колонка Chiralcel AD 25 см, 40% EtOH/гептаны, 1 мл/мин, длина волны 215 нм, комнатная температура, время удерживания: 6,845 мин.

Пример 15: (2S,4R)-1-ацетил-4-((5-хлорпиримидин-2-ил)амино)-N-этил-2-метил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-кар боксамид

HATU (246 мг; 0,646 ммоль) добавляли одной порцией в перемешиваемый раствор (2S,4R)-1ацетил-4-((5 -хлорпиримидин-2 -ил)амино)-2 -метил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоновой кислоты (для получения см. Промежуточное соединение 19; 212 мг; 0,588 ммоль) и DIPEA (0,205 мл; 1,175 ммоль) в DMF (5 мл) при комнатной температуре в атмосфере N₂. После перемешивания при комнатной температуре в течение 10 мин по каплям добавляли этиламин (0,59 мл; 2M в THF; 1,18 ммоль) в течение 30 с. Полученный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Добавляли EtOAc (10 мл) и Н₂О (10 мл). Отделенную водную фазу экстрагировали EtOAc (2x10 мл). Объединенную органическую фазу пропускали через гидрофобную фритту и упаривали при пониженном давлении с получением бледно-желтого масла. Образец помещали в DCM и очищали посредством колоночной хроматографии (25 г диоксида кремния) при использовании градиента 0-100% EtOAc/циклогексан. Соответствующие фракции объединяли и упаривали под вакуумом с получением желтого масла. Масло растворяли в смеси MeOH:DMSO 1:1 (3 мл) и очищали посредством MDAP. Растворитель выпаривали под вакуумом с получением продукта в виде белого твердого вещества (67 мг). ЖХМС (2 мин; формиатный способ): Rt: 0,83 мин; [МН]⁺: 388.

Пример 16: (2S,4R)-1-ацетил-4-((5-цианопиридин-2-ил)амино)-N-этил-2-метил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-кар боксамид

-CN

HATU (266 мг; 0,700 ммоль) добавляли одной порцией в перемешиваемый раствор (2S,4R)-1ацетил-4-((5-цианопиридин-2-ил)амино)-2-метил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоновой кислоты (для получения см. Промежуточное соединение 22; 223 мг; 0,636 ммоль) и DIPEA (0,222 мл; 1,273 ммоль) в DMF (5 мл) при комнатной температуре в атмосфере N₂. После перемешивания при комнатной температуре в течение 10 мин по каплям добавляли этиламин (0,64 мл; 2M в THF; 1,27 ммоль) в течение 30 с. Полученный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Добавляли EtOAc (10 мл) и Н₂О (10 мл). Отделенную водную фазу экстрагировали EtOAc (2x10 мл). Объединенную органическую фазу пропускали через гидрофобную фритту и упаривали при пониженном давлении с получением бледно-желтого масла. Это масло растворяли в смеси MeOH:DMSO 1:1 (3 мл) и очищали посредством MDAP. Растворитель выпаривали под вакуумом с получением продукта в виде белого твердого вещества (106 мг). ЖХМС (2 мин; формиатный способ): Rt: 0,77 мин; [МН]⁺: 378.

Методики биологического тестирования.

Соединения формул (I)-(XVI) могут быть протестированы в одном или более чем одном из следующих анализов.

Анализ резонансного переноса энергии флюоресценции с разрешением по времени (TR-FRET).

Связывание оценивали с использованием анализа резонансного переноса энергии флюоресценции с разрешением по времени. В нем использовали 6-His метку очистки на N-конце белков в качестве эпитопа для анти-6-His антитела, меченого хелатом европия (PerkinElmer AD0111), обеспечивая возможность связывания европия, который действует в качестве флуорофора-донора, с белками. Малую молекулу, связующее вещество с высоким сродством к бромодоменам BRD2, BRD3, BRD4 и BRDT, метили Alexa Fluor647 (эталонное соединение X), и она действует в качестве акцептора в FRET паре.

Эталонное соединение X: 4-((2)-3-(6-((5-(2-(^)-6-(4-хлорфенил)-8-метокси-1-метил-4Н-бензо[1][1,2,4]триазоло[4,3-а][1,4]диазепин-4-ил)-ацетамидо)пентил)амино)-6-оксогексил)-2-((2Е,4Е)-5-(3,3диметил-5-сульфо-1-(4-сульфобутил)-3Н-индол-1-ий-2-ил)пента-2,4-диен-1-илиден)-3-метил-5-сульфоиндолин-1-ил)бутан-1-сульфонат)

- 30 031679

В раствор N-(5-аминопентил)-2-((4S)-6-(4-хлорфенил)-8-метокси-1-метил-4H-бензо[f][1,2,4]триазоло[4,3-а][1,4]диазепин-4-ил)ацетамида (для получения см. Эталонное соединение J в WO 2011/054848A1; 1,7 мг; 3,53 мкмоль) в DMF (40 мкл) добавляли раствор AlexaFluor647-ONSu (2,16 мг; 1,966 мкмоль) также в DMF (100 мкл). Смесь подщелачивали с использованием DIPEA (1 мкл; 5,73 мкмоль) и перемешивали в течение ночи на вихревой мешалке. Реакционную смесь упаривали досуха. Твердое вещество растворяли в смеси ацетонитрил/вода/уксусная кислота (5/4/1; менее 1 мл), фильтровали и наносили на препаративную колонку C18 Phenomenex Jupiter и элюировали следующим градиентом (А: 0,1% трифторуксусной кислоты в воде, В: 0,1% TFA/90% ацетонитрила/10% воды); скорость потока: 10 мл/мин, AU (единицы поглощения): 20/10 (214 нм): 5-35%, t=0 мин: В = 5%; t=10 мин: В = 5%; t=100 мин: В = 35%; t=115 мин: В = 100% (шаг градиента: 0,33%/мин).

Основной компонент элюировался в диапазоне 26-28%В, но по-видимому состоял из двух пиков. Среднюю фракцию (F1.26), которая должна содержать оба компонента, анализировали посредством аналитической ВЭЖХ (сферисорб ODS2, от 1 до 35% в течение 60 мин): элюирование отдельного компонента при 28% В.

Фракции F1.25/26&27 объединяли и упаривали досуха. Переносили в DMF, упаривали досуха, растирали с безводным эфиром, и голубое твердое вещество сушили в течение ночи при менее чем 0,2 мбар (20 Па): 1,54 мг.

Аналитическая ВЭЖХ (сферисорб ODS2, от 1 до 35% В в течение 60 мин): MSM10520-1: [М+Н]⁺(набл.): 661,8/- соответствующее М-29. Это равноценно [(М+2Н)/2]⁺ для подсчитанной массы 1320,984, которая соответствует М-29. Это стандартный случай с красителем Alexa Fluor 647 и представляет собой теоретическую потерю двух метиленовых групп в условиях масс-спектрометра.

Принцип анализа: в отсутствие конкурирующего соединения возбуждение европия вызывает излучение донора при λ 618 нм, что возбуждает меченое Alexa соединение, связывающее бромодомен, приводя к повышенной передаче энергии, измеряемой при λ 647 нм. В присутствии достаточной концентрации соединения, которое может связывать эти белки, взаимодействие прерывается, приводя к определяемому количественно снижению резонансного переноса энергии флуоресценции.

Связывание соединений формул (I)-(XVI) с бромодоменами BRD2, BRD3, BRD4 и BRDT оценивают при использовании мутантных белков для обнаружения дифференциального связывания либо со связывающим доменом 1 (BD1), либо со связывающим доменом 2 (BD2) на бромодомене. Эти мутации отдельных остатков в ацетил-лизин-связывающем кармане значительно снижают сродство флуоресцентного лиганда (Эталонное соединение X) к мутантному домену (более чем 1000-кратная селективность к немутантному домену). Поэтому в окончательных условиях анализа связывание флуоресцентного лиганда с мутантным доменом не может быть обнаружено и, как следствие, анализ подходит для определения связывания соединений с отдельным немутантным бромодоменом.

Продуцирование белка: Рекомбинантные бромодомены человека [BRD2 (1-473), (Y113A) и (Y386A); BRD3 (1-435), (Y73A) и (Y348A); BRD4 (1-477), (Y97A) и (Y390A) и BRDT (1-397), (Y66A) и (Y309A)] экспрессировали в клетках E.coli (в векторе рЕТ15Ь для BRD2/3/4 и в векторе рЕТ28а для BRDT) с 6(1118)-\1еткой на N-конце. Осадок бромодомена с His-меткой ресуспендировали в 50 мМ HEPES (4-(2-гидроксиэтил)-1-пиперазинэтансульфоновая кислота) (pH 7,5), 300 мМ NaCl, 10 мМ имидазоле и 1 мкм/мл смеси ингибиторов протеаз, и экстрагировали из клеток E.coli при использовании обработки ультразвуком, и очищали при использовании колонки для высокоэффективной хроматографии с иммобилизованным на сефарозе никелем, белки отмывали и затем элюировали линейным градиентом 0-500 мМ имидазола с буфером 50 мМ HEPES (pH 7,5), 150 мМ NaCl, 500 мМ имидазола за 20 объемов колонки. Конечную очистку завершали с помощью препаративной колонки для эксклюзионной хроматографии с разделением частиц по размерам Superdex 200. Очищенный белок хранили при -80°C в 20 мМ HEPES pH 7,5 и 100 мМ NaCl. Идентичность белка подтверждали посредством идентификации белков по отпечаткам пептидных масс и расчетную молекулярную массу подтверждали посредством масс-спектрометрии.

Протокол для анализов бромодомена BRD 2, 3, 4 и Т, мутантного BD1 + BD2: все компоненты для анализа растворяли в буферной композиции 50 мМ HEPES pH 7,4; 50 мМ NaCl, 5% глицерина, 1 мМ DTT (дитиотрейтол) и 1 мМ CHAPS (3-((3-холамидопропил)диметиламмоний)-1-пропансульфоновая кислота). Конечная концентрация бромодоменовых белков составляла 10 нМ, а лиганда Alexa Fluor647 находили по Kd. Эти компоненты предварительно смешивали и 5 мкл этой реакционной смеси добавляли во все лунки, содержащие по 50 нл различных концентраций тестируемого соединения или носителя DMSO (конечная концентрация DMSO 0,5%), в 384-луночных черных малообъемных планшетах Greiner

- 31 031679 для микротитрования и инкубировали в темноте в течение 30 мин при комнатной температуре. 5 мкл смеси для обнаружения, содержащей анти-6-His антитела, меченые хелатом европия, в конечной концентрации 1,5 нМ добавляли во все лунки и проводили дополнительное инкубирование в темноте в течение по меньшей мере 30 мин. Затем планшеты считывали на планшет-ридере Envision, (/ex (длина волны возбуждения): 317 нм; донорная /_em (длина волны испускания): 615 нм; акцепторная /em: 665 нм; дихроичный двойной LANCE). Измерения интенсивности флюоресценции с разрешением по времени проводили при обеих длинах волн испускания и вычисляли соотношение акцептор/донор и использовали его для анализа данных. Все данные нормализовали по среднему из 16 максимальных (контроль ингибитора - соединение по примеру 11 из WO 2011/054846A1) и 16 минимальных (DMSO) контрольных лунок на каждом планшете. Затем применяли подбор четырехпараметрической кривой следующего вида:

y=a+((b-a)/(1+(10^Ax/10^Ac)^Ad) где а равен минимуму, b означает угловой коэффициент Хилла, c равен pIC₅₀ и d равен максимуму.

Все соединения Примеров 1-16 тестировали во всех анализах BRD4, описанных выше, и было обнаружено, что они имеют pIC₅₀ в диапазоне 5,9-7,1 в анализе BRD4 BD1 и pIC₅₀ в диапазоне 6,8-7,6 в анализе BRD4 BD2.

Измерение LPS-индуцированной секреции МСР-1 из цельной крови

Активация моноцитарных клеток агонистами toll-подобных рецепторов, такими как бактериальный липополисахарид (LPS), приводит к продуцированию ключевых медиаторов воспаления, включая МСР-1 (моноцитарный хемотаксический белок 1). Широко распространено мнение, что такие пути являются центральными в патофизиологии ряда аутоиммунных и воспалительных расстройств.

Кровь собирали в пробирку, содержащую гепарин натрия (Leo Pharmaceuticals) (10 единиц гепарина/мл крови). Подготавливали сборные 96-луночные планшеты, содержащие 1 мкл тестируемого образца в 100% DMSO (в двух повторностях вследствие разнообразия доноров). 130 мкл цельной крови распределяли в каждую лунку сборных 96-луночных планшетов и инкубировали в течение 30 мин при 37°C, 5% CO₂. 10 мкл липополисахарида, разведенного в PBS (фосфатно-солевой буферный раствор) (конечная аналитическая концентрация 200 нг/мл), добавляли в каждую лунку сборных планшетов. Планшеты затем закрывали крышками и помещали в увлажняемый инкубатор первичных клеток на 18-24 ч при 37°C, 5% CO₂. 140 мкл PBS добавляли во все лунки сборных планшетов, содержащих кровь. Планшеты затем герметично закрывали и центрифугировали в течение 10 мин при 2500 об/мин. 20 мкл клеточного супернатанта помещали в 96-луночный планшет MSD, предварительно покрытый иммобилизованным антителом к человеческому МСР-1. Планшеты герметично закрывали и помещали на шейкер при 600 об/мин в течение 2 ч (комнатная температура). 20 мкл человеческого анти-МСР-1 антитела, меченого реагентом MSD SULFO-TAG™, добавляли в каждую лунку планшета MSD (исходный 50х раствор разбавляли в соотношении 1:50 разбавителем 100, конечная аналитическая концентрация составляла 1 мкг/мл). Планшеты затем повторно герметизировали и встряхивали в течение еще одного часа перед промывкой PBS. Затем в каждую лунку добавляли 150 мкл 2х Т буфера для считывания MSD (MSD Read Buffer Т) (исходный 4х раствор Т буфера для считывания MSD разбавляли в соотношении 50:50 деионизированной водой) и планшеты считывали на устройстве для визуализации MSD Sector Imager 6000. Кривые концентрация-ответ для каждого соединения строили по полученным данным и вычисляли значение IC50.

Все соединения примеров 1-16 тестировали в вышеуказанном анализе, и было обнаружено, что они имеют значение pIC50 в диапазоне 6,2-7,8.

Эти данные демонстрируют, что ингибиторы бромодомена, протестированные в вышеуказанном анализе цельной крови, ингибировали продуцирование ключевого медиатора воспаления МСР-1.

Измерение LPS-индуцированной секреции IL-6 из цельной крови.

Активация в цельной крови преимущественно моноцитарных клеток агонистами toll-подобных рецепторов, таких как бактериальный липополисахарид (LPS), приводит к продуцированию ключевых медиаторов воспаления, включая IL-6 (интерлейкин-6). Широко распространено мнение, что такие пути являются главными в патофизиологии ряда аутоиммунных и воспалительных расстройств.

Человеческую цельную кровь от 2 доноров (n=2) собирали при использовании в качестве антикоагулянта гепарина натрия (каталог Wockhardt № FP1712) (10 единиц гепарина/мл крови). Соединения готовили в виде [10 мМ] исходных растворов в DMSO и затем разбавляли так, чтобы верхний уровень исходной концентрации составлял [1,4 мМ] с последующими 8х 3-кратными разведениями в DMSO. Конечные аналитические концентрации начинаются с [10 мкМ] для всех соединений. На лунку 96луночного планшета с U-образным дном добавляли 1 мкл разбавленного соединения. В колонку 10 добавляли только 1 мкл DMSO (+ (положительный) контроль), а в колонку 11 добавляли 1-((2S,4R)-2метил-4-(фениламино)-6-(4-(пиперидин-1 -илметил)фенил)-3,4-дигидрохинолин-1 (2Н)-ил)этанон (для получения см. Соединение 28 в J. Med. Chem. 2014, 57, 8111-8131; 1 мкл; 1,4 мМ) (-(отрицательный) контроль). 130 мкл цельной крови распределяли в каждую лунку сборных 96-луночных планшетов и инку

- 32 031679 бировали в течение 30 мин при 37°C, 5% CO₂. 10 мкл LPS (Salmonella typhosa Sigma № по каталогу L6386), разведенного в RPMI1640 (конечная аналитическая концентрация [200 нг/мл]), добавляли в каждую лунку (включая колонки с + и - контролем). Планшеты встряхивали в течение короткого периода времени и затем инкубировали в течение ночи (22-24 ч) при 37°C 5% CO₂. На следующий день в каждую лунку добавляли 140 мкл PBS, планшеты герметично закрывали, встряхивали при 600 об/мин в течение 5 мин и затем центрифугировали при х 1350g (2500 об/мин) в течение 10 мин. Осторожно отбирали 100 мкл плазмы для анализа. Перед анализом IL-6 10-кратно разбавляли в PBS для соответствия со стандартной кривой MSD. 25 мкл клеточного супернатанта помещали в 96-луночный планшет MSD, предварительно покрытый иммобилизованным антителом к человеческому IL-6. Планшеты герметично закрывали и помещали на шейкер при 600 об/мин в течение 1,5 ч (комнатная температура). 25 мкл человеческого антиIL-6 антитела, меченого реагентом MSD SULFO-TAG™, добавляли в каждую лунку планшета MSD (исходный 50х раствор разбавляли в соотношении 1:50 разбавителем 100, конечная аналитическая концентрация составляла [1 мкг/мл]). Планшеты затем повторно герметизировали и встряхивали в течение еще одного часа перед 3х промывкой смесью PBS/Tween 20 [0,05%]. Затем в каждую лунку добавляли 150 мкл 2х Т буфера для считывания MSD (исходный 4х раствор Т буфера для считывания MSD разбавляли в соотношении 50:50 деионизированной водой) и планшеты считывали на устройстве для визуализации MSD Sector Imager 6000. Кривые концентрация-ответ для каждого соединения строили по полученным данным, используя анализ внутреннего ХС₅₀, и вычисляли значение IC₅₀.

Соединение примера 14 тестировали в вышеуказанном анализе, и было обнаружено, что оно имеет значение pIC₅₀: 6,7 (n=6).

Измерение LPS-индуцированной секреции TNFa из цельной крови. Активация в цельной крови преимущественно моноцитарных клеток агонистами toll-подобных рецепторов, таких как бактериальный липополисахарид (LPS), приводит к продуцированию ключевых медиаторов воспаления, включая TNFa (фактор некроза опухоли-a). Широко распространено мнение, что такие пути являются главными в патофизиологии ряда аутоиммунных и воспалительных расстройств.

Человеческую цельную кровь от 2 доноров (n=2) собирали при использовании в качестве антикоагулянта гепарина натрия (каталог Wockhardt № FP1712) (10 единиц гепарина/мл крови). Соединения готовили в виде [10 мМ] исходных растворов в DMSO и затем разбавляли так, чтобы верхний уровень исходной концентрации составлял [1,4 мМ] с последующими 8х 3-кратными разведениями в DMSO. Конечные аналитические концентрации начинаются с [10 мкМ] для всех соединений. В лунку 96-луночного планшета с U-образным дном добавляли 1 мкл разбавленного соединения. В колонку 10 добавляли только 1 мкл DMSO (+ (положительный) контроль), а в колонку 11 добавляли 1-((2S,4R)-2-метил-4(фениламино)-6-(4-(пиперидин-1 -илметил)фенил)-3,4-дигидрохинолин-1 (2Н)-ил)этанон (для получения см. Соединение 28 в J. Med. Chem. 2014, 57, 8111-8131; 1 мкл; 1,4 мМ) (-(отрицательный) контроль). 130 мкл цельной крови распределяли в каждую лунку сборных 96-луночных планшетов и инкубировали в течение 30 мин при 37°C, 5% СО₂. 10 мкл LPS (Salmonella typhosa Sigma № по каталогу L6386), разведенного в RPMI1640 (конечная аналитическая концентрация [200 нг/мл]), добавляли в каждую лунку (включая колонки с + и - контролем). Планшеты встряхивали в течение короткого периода времени и затем инкубировали в течение ночи (22-24 часа) при 37°C 5% CO₂. На следующий день в каждую лунку добавляли 140 мкл PBS, планшеты герметично закрывали, встряхивали при 600 об/мин в течение 5 мин и затем центрифугировали при x1350g (2500 об/мин) в течение 10 мин. Осторожно отбирали 100 мкл плазмы для анализа. Анализ TNFa проводили при использовании исходной плазмы для соответствия со стандартной кривой MSD. 25 мкл клеточного супернатанта помещали в 96-луночный планшет MSD, предварительно покрытый иммобилизованным антителом к человеческому TNFa. Планшеты герметично закрывали и помещали на шейкер при 600 об/мин в течение 1,5 ч (комнатная температура). 25 мкл человеческого анти-TNFa антитела, меченого реагентом MSD SULFO-TAG™, добавляли в каждую лунку планшета MSD (исходный 50х раствор разбавляли в соотношении 1:50 разбавителем 100, конечная аналитическая концентрация составляла [1 мкг/мл]). Планшеты затем повторно герметизировали и встряхивали в течение еще одного часа перед 3х промывкой смесью PBS/Tween 20 [0,05%]. Затем в каждую лунку добавляли 150 мкл 2х Т буфера для считывания MSD (исходный 4х раствор Т буфера для считывания MSD разбавляли в соотношении 50:50 деионизированной водой) и планшеты считывали на устройстве для визуализации MSD Sector Imager 6000. Кривые концентрация-ответ для каждого соединения строили по полученным данным, используя анализ внутреннего XC₅₀, и вычисляли значение IC₅₀.

Соединение примера 14 тестировали в вышеуказанном анализе, и было обнаружено, что оно имеет значение pIC50: 7,2 (n=4).

Анализ индуцированного липополисахаридом (LPS) продуцирования интерлейкина-6 (IL-6) на мышах.

Соединение анализировали на способность ингибировать индуцированное липополисахаридом (LPS) продуцирование интерлейкина-6 (IL-6) у мышей. Самцам мышей CD1 (Charles River Laboratories, 5 на группу) проводили внутривенную провокацию LPS (липополисахаридом) (100 мкг/кг, L3192 Е coli 0127:B8) через 1 ч после перорального введения соединения (в 1% (мас./об.) метилцеллюлозе, водн. 400).

- 33 031679

Серии образцов крови собирали через хвостовую вену за 4-часовой период или посредством пункции сердца через 6 ч (конечный образец) после перорального введения лекарственного средства и сыворотку, отобранную из образцов крови, замораживали при -80°C. В день анализа сыворотку размораживали до комнатной температуры и уровни IL-6 измеряли при использовании спот-планшетов для анализа цитокинов (K152QXD) от Meso Scale Discovery (MSD, Gaithersburg, Maryland). Уровни IL-6 определяли согласно инструкции производителя (MSD) и считывали на устройстве для визуализации SECTOR imager 6000 (MSD). Средние значения концентрации C_max и AUC_0-t (площади под кривой) IL-6 генерировали при использовании программы WinNonlin Phoenix, версия 6.3, и среднее процентное снижение C_max и AUC_0-tIL-6 после обработки соединением подсчитывали в сравнении с группой, обработанной соответствующим носителем. Уровни значимости подсчитывали посредством дисперсионного анализа (ANOVA) с последующим множественным сравнением t-критерием Даннетта при использовании программы Graphpad Prism, версия 5.04 (Graphpad Software, San Diego, CA). Статистические различия определяли как *р < 0,05, **р < 0,01. Результаты показаны в табл. 1.

Таблица 1. Показатели эффективности соединения примера 14 в анализе LPS-индуцированного продуцирования IL-6

Параметр	Дозовая группа
Носитель	Соединение Примера 14 1 мг/кг	Соединение Примера 14 3 мг/кг	Соединение Примера 14 10 мг/кг
Стах 1L-6 (НГ/МЛ)	687	291	357	258
% снижения Стах IL-6 по сравнению с носителем	-	58	48	62*
AUCo-t IL-6 (нг ч/мл)	1091	554	495	563
% снижения AUC IL-6 по сравнению с носителем	-	49*	55**	48*

Эти данные показывают, что соединение, протестированное в вышеуказанном анализе in vivo, ингибирует продуцирование IL-6 после острой провокации и поэтому может быть полезным в лечении воспалительных заболеваний или состояний.

Анализ индуцированного конъюгатом тринитрофенол-гемоцианин фисуреллы (TNP-KLH) продуцирования иммуноглобулина-1 (IgG1) на мышах.

Соединение анализировали на способность ингибировать индуцированное конъюгатом тринитрофенол-гемоцианин фисуреллы (TNP-KLH) продуцирование иммуноглобулина-1 (IgG1) у мышей. Самцам мышей CD1 (Charles River Laboratories, 8 на группу) проводили однократное пероральное введение соединения (в 1% (мас./об.) метилцеллюлозе, водн. 400) либо один раз в сутки (QD), один раз в двое суток (QOD), либо один раз каждые 72 ч (QOED) в течение периода дозирования 14 суток. В первые сутки исследования каждой мыши проводили однократное болюсное внутрибрюшинное (ip) введение TNP-KLH (100 мкг/кг, Т-5060-25, № партии 021562-06) через 1 ч после перорального введения соединения. Серии образцов крови собирали через 1 ч после перорального введения соединения через хвостовую вену на 1, 4, 7, 9 и 11 сутки или посредством пункции сердца (конечный образец) на 14 сутки, и сыворотку, отобранную из образцов крови, замораживали при -80°C. В день анализа сыворотку размораживали до комнатной температуры и уровни IgG1 измеряли при использовании TNP ELISA (твердофазного иммуноферментного анализа (ИФА) с тринитрофенолом) (проводимого на месте) и считывали на спектрофотометре SpectraMax 190 (Molecular Devices, СА). Генерировали средние значения IgG1 и среднее процентное снижение IgG1 на 14 сутки после лечения соединением подсчитывали в сравнении с группой, обработанной соответствующим носителем. Уровни значимости подсчитывали посредством дисперсионного анализа (ANOVA) с последующим множественным сравнением t-критерием Даннетта при использовании программы Graphpad Prism, версия 5.04 (Graphpad Software, San Diego, CA). Статистические различия определяли как ***р < 0,01. Результаты показаны в табл. 2.

Таблица 2. Показатели эффективности соединения примера 14 в анализе TNP-KLH-индуцированного продуцирования IgG1 на мышах

Параметр	Дозовая группа
Носитель	Соединение Примера 14 30 мг/кг, QD	Соединение Примера 14 30 мг/кг, QOD	Соединение Примера 14 30 мг/кг, QOED
IgG 1 на 14 сутки (нг/мл)	5337	127	373	3162
% снижение lgG1 по сравнению с носителем	-	98***	93***	41

Эти данные показывают, что в этой модели хронического воспаления in vivo протестированное соединение может подходить как для дозирования один раз в сутки, так и для периодического дозирования.

- 34 031679

Анализ пролиферации клеточных линий рака.

Воздействие соединения примеров 7 и 14 на пролиферацию раковых клеток определяли с использованием взятых у пациентов клеток срединной NUT-карциномы (11060), клеток множественной миеломы (ОРМ-2, DSMZ) и клеток бифенотипического В-миеломоноцитарного лейкоза (MV-4-11, АТСС) в течение 72-часового анализа пролиферации. Клетки 11060 и ОРМ-2 поддерживали в среде RPMI 1640 (Invitrogen), содержащей 10% HI-FBS (инактивированной нагреванием фетальной бычьей сыворотки, Hyclone) и 2 мМ L-глутамина (Invitrogen) при 37°C и в атмосфере 5% СО₂. Клетки MV-4-11 поддерживали в среде IMDM (среда Дульбекко, модифицированная по способу Исков), содержащей 10% HI-FCS, 2 мМ L-глутамина, 1x заменимых аминокислот (Invitrogen) и 1x пирувата натрия (1 мМ) (Invitrogen). Клетки разводили до концентрации 1,11x 10⁵ клеток/мл и высевали в количестве 90 мкл/лунка в 96-луночные черные планшеты с прозрачным дном для культур тканей (Corning), используя питательные среды, содержащие смесь пенициллин/стрептомицин (Invitrogen). Клетки инкубировали в течение ночи при 37°C и в одном планшете измеряли уровни АТФ (аденозинтрифосфорной кислоты) с использованием анализа CellTiter Glo (Promega) согласно инструкциям производителя для получения считывания исходных данных (t=0). Готовили 3-кратные серийные разведения соединений, варьируемые в пределах от 6 мМ до 0,3 мкМ, в 100% DMSO. Перед тем как добавить 10 мкл полученных разведений в соответствующие лунки остальных планшетов с клетками, серии разведений в DMSO разводили в 20 раз в питательной среде. Конечные концентрации соединений в лунках варьировали от 30 мкМ до 1,5 нМ в 0,5% DMSO. Клетки инкубировали с соединениями в течение 72 ч перед проведением анализа на содержание АТФ при использовании CellTiter Glo (t=72). Данные CellTiter Glo, полученные в каждый момент времени t=72, нормализовали по релевантным данным в момент времени t=0 и выражали в виде % от t=0. Эти данные анализировали при использовании программного обеспечения GraphPad Prism V5.04 с подбором сигмоидальной кривой (^(ингибитора) относительно ответа - изменяемый наклон (четырхпараметрическая)), ограничивающего минимальное значение кривой значениями БЮ100% с получением значений gpIC₅₀(pIC₅₀ (концентрация, ингибирующая клеточный рост на 50%)), тогда как значения pIC₅₀, представленные в табл. 3, получали подборами сплошной кривой.

Таблица 3. Показатели эффективности соединения примера 14 и соединения примера 7 в анализе клеточной пролиферации с использованием клеток 11060, MV-4-11 и ОРМ-2

	Соединение Примера 14	Соединение Примера 7
Клеточная пролиферация: др1С₅₀	Клеточная пролиферация: рЮбо	Клеточная пролиферация: gpiCso	Клеточная пролиферация: pICso
11060 (п=3)	6,2	6,0	6,4	6,2
MV-4-11 (п=3)	6,6	6,5	6,8	6,7
ОРМ-2 (п=2)	6,9	6,7	7,3	7,0

Эти данные показывают, что соединения, протестированные в вышеуказанном анализе, ингибировали клеточный рост в ряде онкологических клеточных линий, и поэтому они могут быть полезными в лечении одного или более чем одного вида рака.

Анализ ксенотрансплантатов опухолей мышей.

x 10⁷ клеток NMC11060 в 200 мкл 75%-го матригеля вводили подкожно каждой мыши NOD/SCID. Рандомизированное пероральное введение препарата-носителя, 1% метилцеллюлозы (МС) или соединения начинали с того дня, когда объем опухоли достигал от 160 до 301 мм³. Затем измеряли объем опухоли на каждые третьи сутки либо до 21 суток после заражения, либо до превышения опухолью объема приблизительно 1000 мм³. Результаты показаны в табл. 4.

Таблица 4. Показатели эффективности соединения примера 14 в анализе ксенотрансплантатов NMC (срединной NUT-карциномы) у мышей

Группа	Лечение	Дозовая группа	Число мышей на группу	%TGI (ингибирование роста опухоли)
1	Носитель	Носитель	7	-
2	Соединение Примера 14	10 мг/кг/сутки перорально, один раз в сутки в течение 21 суток	7	51*
3	Соединение Примера 14	30 мг/кг/сутки перорально, один раз в сутки в течение 21 суток	7	93***

Ингибирование роста опухоли =100 - средний объем опухоли в группе лечения/ средний объем опухоли в контрольной группе x100. Значения Р получены из коэффициента дисперсионного анализа с использованием программного обеспечения PASS 12, при сравнении группы, получающей носитель, с

- 35 031679 группой, получающей лекарственное средство. Вычисленные на 21 сутки, *р<0,05, **р<0,01 и ***р<0,001.

Эти данные дополнительно демонстрируют пользу соединения примера 14 для использования в лечении срединной NUT-карциномы.

Все публикации, в том числе, без ограничения, патенты и патентные заявки, на которые приведены ссылки в данном описании, включены в данную заявку посредством ссылки, как если бы конкретно и индивидуально было указано, что каждая индивидуальная публикация включена в данную заявку посредством ссылки, словно была приведена целиком.

Claims

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. Соединение, выбранное из группы, состоящей из

1 -ацетил-4-((5-хлорпиримидин-2-ил)амино)-2-метил- 1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксамида;

1-ацетил-4-((5-цианопиридин-2-ил)амино)-№этил-2,3-диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6карбоксамида;

1-ацетил-4-((5-цианопиридин-2-ил)амино)-2,3-диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксамида;

1-ацетил-4-((5-цианопиридин-2-ил)амино)-2,3-диметил-№(тетрагидро-2И-пиран-4-ил)-1,2,3,4тетрагидрохинолин-6-карбоксамида;

1-ацетил-4-((5-цианопиридин-2-ил)амино)-№((И)-2-гидроксипропил)-2,3-диметил-1,2,3,4тетрагидрохинолин-6-карбоксамида;

1-ацетил-4-((5-цианопиридин-2-ил)амино)-№(^)-2-гидроксипропил)-2,3-диметил-1,2,3,4тетрагидрохинолин-6-карбоксамида;

1-ацетил-4-((5-хлорпиримидин-2-ил)амино)-№этил-2,3-диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6карбоксамида;

1-ацетил-4-((5-хлорпиримидин-2-ил)амино)-2,3-диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксамида;

1-ацетил-4-((5-хлорпиримидин-2-ил)амино)-2,3-диметил-N-(теΊрагидро-2H-пиран-4-ил)-1,2,3,4тетрагидрохинолин-6-карбоксамида;

1-ацетил-4-((5-хлорпиримидин-2-ил)амино)-№(^)-2-гидроксипропил)-2,3-диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксамида;

1-ацетил-4-((5-хлорпиримидин-2-ил)амино)-№((К)-2-гидроксипропил)-2,3-диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксамида;

1 -ацетил-4-((5-цианопиразин-2-ил)амино)-2,3-диметил- 1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксамида;

1 -ацетил-4-((5-цианопиразин-2-ил)амино)-№этил-2,3-диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6карбоксамида;

1-ацетил-№этил-4-((5-фторпиридин-2-ил)амино)-2,3-диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6карбоксамида;

1-ацетил-4-((5-хлорпиримидин-2-ил)амино)-№этил-2-метил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксамида и

1-ацетил-4-((5-цианопиридин-2-ил)амино)-№этил-2-метил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксамида, или его соль.
2. Соединение по п.1, выбранное из группы, состоящей из (2S,3R,4R)-1-ацетил-4-((5-цианопиридин-2-ил)амино)-N-этил-2,3-диметил-1,2,3,4-тетрагидро- хинолин-6-карбоксамида;

(2S,3R,4R)-1-ацетил-4-((5-цианопиридин-2-ил)амино)-2,3-диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6карбоксамида;

(2S,3R,4R)-1-ацетил-4-((5-цианопиридин-2-ил)амино)-2,3-диметил-N-(теΊрагидро-2H-пиран-4-ил)-

1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксамида;

(2S,3R,4R)-1-ацетил-4-((5-цианопиридин-2-ил)амино)-N-((R)-2-гидроксипропил)-2,3-диметил-

1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксамида;

(2S,3R,4R)-1-ацетил-((5-цианопиридин-2-ил)амино)-N-((S)-2-гидроксипропил)-2,3-диметил-1,2,3,4тетрагидрохинолин-6-карбоксамида;

(2S,3R,4R)-1-ацетил-4-((5-хлорпиримидин-2-ил)амино)-N-этил-2,3-диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксамида;

(2S,3R,4R)-1-ацетил-4-((5-хлорпиримидин-2-ил)амино)-2,3-диметил-1,2,3,4-теΊрагидрохинолин-6карбоксамида;

(2S,3R,4R)-1-ацетил-4-((5-хлорпиримидин-2-ил)амино)-2,3-диметил-N-(тетрагидро-2H-пиран-4-ил)-

1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксамида;

(2S,3R,4R)-1-ацетил-4-((5-хлорпиримидин-2-ил)амино)-N-((S)-2-гидроксипропил)-2,3-диметил-

1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксамида;

(2S,3R,4R)-1-ацетил-4-((5-хлорпиримидин-2-ил)амино)-N-((R)-2-гидроксипропил)-2,3-диметил- 36 031679

1.2.3.4- тетрагидрохинолин-6-карбоксамида;

(2Б,3Н,4Н)-1 -ацетил-4-((5 -цианопиразин-2-ил)амино)-2,3-диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6карбоксамида;

(2S,3R,4R)-1-ацетил-4-((5-цианопиразин-2-ил)амино)-N-этил-2,3-диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксамида;

(2S,3R,4R)-1-ацетил-N-этил-4-((5-фторпиридин-2-ил)амино)-2,3-диметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-карбоксамида;

(2S,4R)-1 -ацетил-4-((5 -хлорпиримидин-2-ил)амино)-^этил-2-метил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6карбоксамида и (2S,4R)-1 -ацетил-4-((5 -цианопиридин-2-ил)амино)-^этил-2-метил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6карбоксамида, или его соль.
3. Соединение, представляющее собой (2S,4R)-1-ацетил-4-((5-хлорпиримидин-2-ил)амино)-2-метил-

1.2.3.4- тетрагидрохинолин-6-карбоксамид или его соль.
4. Соединение по любому из пп.1-3 в форме свободного основания.
5. Фармацевтическая композиция, содержащая соединение или его фармацевтически приемлемую соль по любому из пп.1-3 и один или более чем один фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель или эксципиент для применения в лечении заболеваний или состояний, при которых показан ингибитор бромодомена.
6. Применение соединения или его фармацевтически приемлемой соли по любому из пп.1-3 для лечения заболеваний или состояний, при которых показан ингибитор бромодомена.
7. Применение по п.6, где заболевание или состояние представляет собой острое или хроническое аутоиммунное и/или воспалительное состояние.
8. Применение по п.6, где заболевание или состояние представляет собой рак.
9. Применение соединения или его фармацевтически приемлемой соли по любому из пп.1-3 в изготовлении лекарственного средства для лечения заболеваний или состояний, при которых показан ингибитор бромодомена.
10. Способ лечения заболеваний или состояний, при которых показан ингибитор бромодомена, у субъекта-человека, нуждающегося в этом, включающий введение терапевтически эффективного количества соединения или его фармацевтически приемлемой соли по любому из пп.1-3.
11. Способ лечения по п.10, где заболевание или состояние представляет собой острое или хроническое аутоиммунное и/или воспалительное состояние.
12. Способ лечения по п.10, где заболевание или состояние представляет собой рак.