EA031639B1 - ЗАМЕЩЕННЫЕ 4,5,6,7-ТЕТРАГИДРОПИРАЗОЛО[1,5-а]ПИРИМИДИНОВЫЕ ПРОИЗВОДНЫЕ И 2,3-ДИГИДРО-1H-ИМИДАЗО[1,2-b]ПИРАЗОЛЬНЫЕ ПРОИЗВОДНЫЕ В КАЧЕСТВЕ ИНГИБИТОРОВ ROS1 - Google Patents

Abstract

Изобретение относится к замещенным 4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-а]пиримидиновым производным и 2,3-дигидро-1H-имидазо[1,2-b]пиразольным производным формулы (I), а также соединениям формулы (I'), где переменные имеют значения, определенные в формуле изобретения. Соединения согласно настоящему изобретению пригодны в качестве ингибиторов ROS1. Изобретение, кроме того, относится к способам получения таких новых соединений, к фармацевтическим композициям, содержащим указанные соединения в качестве активного ингредиента, а также к применению указанных соединений в качестве лекарственного препарата.

Description

Изобретение относится к замещенным 4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-а]пиримидиновым производным и 2,3-дигидро-1Н-имидазо[1,2-Ь]пиразольным производным формулы (I), а также соединениям формулы (Г), где переменные имеют значения, определенные в формуле изобретения. Соединения согласно настоящему изобретению пригодны в качестве ингибиторов ROS1. Изобретение, кроме того, относится к способам получения таких новых соединений, к фармацевтическим композициям, содержащим указанные соединения в качестве активного ингредиента, а также к применению указанных соединений в качестве лекарственного препарата.

031639 В1

031639 Bl

х₃-х₂

Область техники, к которой относится изобретение

Изобретение относится к замещенным 4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-а]пиримидиновым производным и 2,3-дигидро-1Н-имидазо[1,2-Ъ]пиразольным производным, пригодным в качестве ингибиторов ROS1. Изобретение дополнительно относится к способам получения таких соединений, к фармацевтическим композициям, содержащим указанные соединения в качестве активного ингредиента, а также к применению указанных соединений в качестве лекарственного препарата.

Предпосылки изобретения

ROS1 представляет собой рецепторную тирозинкиназу, тесно связанную с киназами ALK и LTK на основе сходства последовательностей их киназных доменов. Белок Ros1 состоит из внеклеточного домена, содержащего несколько фибронектин-подобных повторов, и цитоплазматического киназного домена. Функция Ros1 не полностью изучена, но наличие фибронектиновых доменов свидетельствует о его роли в адгезии или взаимодействиях клеток с внеклеточным матриксом. Однако эндогенные лиганды Ros1 еще не были идентифицированы. Его экспрессия у взрослых людей была обнаружена в нескольких тканях, как, например, в почке, мозжечке и желудочно-кишечном тракте, но, оказывается, она является низкой или отсутствует в других тканях. Его экспрессия в развивающейся почке и кишечном тракте свидетельствует о том, что он может играть роль в эпителиально-мезенхимальном переходе. Мыши с недостатком ROS1 являются здоровыми и жизнеспособными, но самцы являются бесплодными вследствие дефектов в придатке яичка, что в результате приводит к неполному созреванию сперматоцитов.

Несколько отличающихся перестроек генома, включающих ROS1, были обнаружены в ряде видов рака, в том числе при немелкоклеточном раке легкого (NSCLC), глиобластоме, холангиокарциноме, колоректальном раке, аденокарциноме желудка, раке яичников, ангиосаркоме, эпителиоидной гемангиоэндотелиоме, меланоме и воспалительных миофибробластических опухолях. Данные перестройки приводят в результате к белкам, которые содержат С-концевой киназный домен Ros1, слитый с N-концевыми доменами ряда различных неродственных белков. Было показано, что несколько из данных слитых белков являются онкогенными. Экспрессия в фибробластах содействует их пролиферации, росту в мягком агаре и способности образовывать опухоли у мышей. Экспрессия в клетках Ba/F3 мышей обеспечивает их независимость от IL-3 для роста и содействует их способности образовывать опухоли у мышей (Takeuchi K. et al., Nat. Med. 2012, 18:378-81; Gu T.L. et al., PLoS One 2011, 6:el5640). Доля онкогенных слияний с Ros1, как правило, является низкой, в диапазоне 1-2% при NSCLC (Kim M.H. et al., Lung Cancer 2014, 83:389-95; Takeuchi K. et al., Nat. Med. 2012, 18:378-81; Davies K.D. et al., Clin Cancer Res. 2012, 18:4570-9; Li C. et al., PLoS One 2011, 6:e28204; Rimkunas V.M. et al., Clin. Cancer Res. 2012, 18:4449-57), но может быть относительно высокой при других видах рака, вплоть до 9% при холангиокарциноме (Gu T.L. et al., PLoS One 2011, 6(1):e15640) и 17% при (меланоме) опухолях по типу невуса Шпица (Wiesner T. et al., Nat. Commun. 2014, 5:3116).

Вследствие сходства между киназными доменами ALK и Ros1 многие ингибиторы ALK также ингибируют Ros1. Ингибирование Ros1 отрицательно влияет на пролиферацию сконструированных клеток Ba/F3, экспрессирующих слитые белки с Ros1, а также пролиферацию полученных от пациента с NSCLC клеток НСС78, которые содержат слияние SLC34A2-ROS1. Ингибирование Ros1 также отрицательно влияет на рост опухолей, содержащих слитые белки с Ros1, в сконструированных клетках Ba/F3 и HEK293 у мышей.

Недавно ряд ингибиторов, описанных как обладающие активностью относительно Ros1, прошел клиническое испытание. Было показано, что первый ингибитор, кризотиниб (Xalkori®), уменьшает опухоли и значительно продлевает жизнь пациентов с перестройками ROS1. Однако после первоначальной реакции наблюдается устойчивость, и в одном докладе показано, что это связано с мутацией G2032R в киназном домене Ros1, который, как ожидается, влияет на связывание кризотиниба.

В документе WO 2004/058176 раскрыты ациклические пиразольные соединения для ингибирования протеинкиназы-2, активируемой митоген-активируемой протеинкиназой.

В J. Med. Chem., 2011, 54, 5820-5835 раскрыты пиразолопроизводные в качестве ингибиторов фосфодиэстеразы 10 подтипа.

WO 2009/086129 в целом относится к пиразоло[1,5-а]пиримидиновым модуляторам печеночных рецепторов X.

WO 2009/108838 относится к композициям с пиразоло[1,5-а]пиримидином, которые пригодны для ингибирования патологического роста определенных типов клеток.

EP 1505068 относится к пиразоло[1,5-а]пиримидиновым производным и аналогам в качестве ингибиторов NAD(P)H-оксидазы.

В WO 2004/017908 предусмотрены модуляторы кальций-чувствительного рецептора.

Таким образом, существует острая потребность в новых ингибиторах киназы Ros1, что открывает тем самым новые пути для лечения или предупреждения рака, в частности немелкоклеточного рака легкого (конкретно аденокарциномы), холангиокарциномы, глиобластомы, колоректального рака, аденокарциномы желудка, рака яичников, ангиосаркомы, эпителиоидной гемангиоэндотелиомы, воспалительных миофибробластических опухолей, рака молочной железы и хронического миелолейкоза. В конкретном варианте осуществления существует потребность в ингибиторах киназы Ros1, на которые не влияют му

- 1 031639 тации, которые нейтрализуют ингибирование первой волны ингибиторов Rosl.

Следовательно, целью изобретения является обеспечение таких соединений.

Краткое описание изобретения

Было обнаружено, что соединения согласно изобретению пригодны в качестве ингибиторов ROS1. Соединения согласно настоящему изобретению и их композиции могут быть пригодны для лечения или предупреждения, в частности для лечения рака, в частности немелкоклеточного рака легкого (конкретно аденокарциномы), холангиокарциномы, глиобластомы, колоректального рака, аденокарциномы желудка, рака яичников, ангиосаркомы, эпителиоидной гемангиоэндотелиомы, воспалительных миофибробластических опухолей, рака молочной железы, хронического миелолейкоза и т.п.

Изобретение относится к соединениям формулы (I)

их таутомерам и стереоизомерным формам, где y₁ представляет собой CR_7a или N;

у₂ представляет собой СН;

R_7a представляет собой водород;

R₇ представляет собой водород;

X представляет собой -CR₁R_1a- или ковалентную связь;

R1 представляет собой водород;

R_1a представляет собой водород; С_1-6алкил, замещенный одной гидроксильной группой; С_1-6алкил, замещенный одним -NR_9aR_9b; или -C(=O)-NR_9aR_9b;

R_2a представляет собой водород;

R_2b представляет собой водород или

R₃ представляет собой водород; С_1-6алкил, замещенный одной гидроксильной группой;

R_4a представляет собой водород; С_1-6алкил; С_1-6алкил, замещенный одной гидроксильной группой; или С_1-6алкил, замещенный одним R₁₁;

R_4b представляет собой водород или

R_4a и R_4b взяты вместе с образованием =O;

Y представляет собой -O-;

Z представляет собой -CHR₆-;

R₆ представляет собой водород;

кольцо А представляет собой фенил или 6-членный ароматический гетероциклил, причем указанный гетероциклил содержит один или два атома азота; где фенил или гетероциклил необязательно замещен одним или двумя заместителями R₈;

причем каждый R₈ независимо представляет собой водород; циано или галоген;

каждый из R_9a и R_9b независимо представляет собой водород; C_1-4алкил;

каждый из R_10a и R_10b независимо представляет собой водород;

R₁₁ представляет собой -NR_10aR_10b;

x₁ представляет собой CR_5a;

х₂ представляет собой CR_5b х₃ представляет собой CR_5c;

каждый R₁₅ независимо выбран из группы, состоящей из водорода и галогена;

каждый из R_5a и R_5c независимо выбран из группы, состоящей из водорода; циано; галогена и C_1-6алкила, замещенного одной или двумя гидроксильными группами;

R_5b представляет собой C_1-6алкил или О_3-6циклоалкил;

и их фармацевтически приемлемым солям присоединения и сольватам.

- 2 031639

Изобретение также относится к соединениям формулы (I')

их таутомерам и стереоизомерным формам, где y₁ представляет собой CR_7a;

y₂ представляет собой СН;

R_7a представляет собой водород;

R₇ представляет собой водород;

X представляет собой -CR_1a-;

R_1a представляет собой водород; -C(=O)-NR_9aR₉b или С_1-6алкил-О-карбонил-;

R_2a представляет собой водород;

R4_a представляет собой водород; галоген; С_1-6алкил; С_1-6алкил, замещенный одной или двумя гидроксильными группами; С_1-6алкил-О-карбонил-; С_1-6алкилкарбонилокси-;

R_4b и R₃ взяты вместе с образованием связи или

R_4a и R_4b вместе образуют =O, причем в таком случае R₃ представляет собой водород;

Y представляет собой -O-;

Z представляет собой ^HR^;

R6 представляет собой водород;

кольцо А представляет собой фенил; где фенил необязательно замещен одним или двумя заместителями R₈;

причем каждый R₈ независимо представляет собой галоген;

каждый из R_9a и R_9b независимо представляет собой водород или С_1-4алкил;

x₁ представляет собой CR_5a;

х₂ представляет собой CR_5b;

х₃ представляет собой CRs_c;

каждый R₁₅ представляет собой водород;

каждый из R_5a и R_5c представляет собой водород;

R_5b представляет собой С_1-6алкил;

и их фармацевтически приемлемым солям присоединения.

Соединения формулы (I') можно использовать для получения соединений формулы (I).

Настоящее изобретение также относится к способам получения соединений согласно настоящему изобретению и фармацевтическим композициям, содержащим их.

Было обнаружено, что соединения согласно настоящему изобретению ингибируют ROS1 и, следовательно, могут быть пригодны в лечении или предупреждении, в частности в лечении, рака, в частности немелкоклеточного рака легкого (конкретно аденокарциномы), холангиокарциномы, глиобластомы, колоректального рака, аденокарциномы желудка, рака яичников, ангиосаркомы, эпителиоидной гемангиоэндотелиомы, воспалительных миофибробластических опухолей, рака молочной железы, хронического миелолейкоза и т.п. Соединения согласно настоящему изобретению также могут быть применимы для мужской контрацепции.

Из вышеупомянутой фармакологии соединений формулы (I), (I') и их фармацевтически приемлемых солей присоединения следует, что они могут быть подходящими для применения в качестве лекарственного препарата.

В частности, соединения формулы (I), (I') и их фармацевтически приемлемые соли присоединения могут быть подходящими в лечении или предупреждении, в частности в лечении рака.

Настоящее изобретение также относится к применению соединений формулы (I), (I') и их фармацевтически приемлемых солей присоединения для получения лекарственного препарата для ингибирования ROS1, для лечения или предупреждения рака.

Настоящее изобретение будет описано далее. В следующих параграфах более подробно определены различные аспекты настоящего изобретения. Каждый аспект, определенный таким образом, может быть объединен с любым другим аспектом или аспектами, если четко не указано обратное. В частности, любой признак, указанный как являющийся предпочтительным или преимущественным, может быть объединен с любым другим признаком или признаками, указанными как являющиеся предпочтительными или преимущественными.

- 3 031639

Подробное описание

При описании соединений согласно настоящему изобретению используемые термины следует толковать в соответствии со следующими определениями, если в контексте не указано иное.

Если какая-либо переменная встречается более одного раза в любом компоненте или любой формуле (например, формуле (I) или (I')), то ее определение в каждом случае зависит от ее определения в каждом отличном случае.

Предполагается, что термин замещенный во всех случаях использования в настоящем изобретении означает, если иное не указано или четко не следует из контекста, что один или несколько атомов водорода, предпочтительно от 1 до 3 атомов водорода, предпочтительно 1 или 2 атома водорода, более предпочтительно 1 атом водорода, при атоме или радикале, обозначенном с использованием выражения замещенный, замещены выбранным из указанной группы, при условии, что не превышается нормальная валентность и что замещение дает в результате химически стабильное соединение, т.е. соединение, которое является достаточно устойчивым, чтобы выдержать выделение из реакционной смеси до пригодной степени чистоты и составление в терапевтическое средство.

Всякий раз, когда радикал или группа определены как необязательно замещенные в настоящем изобретении, это означает, что указанные радикал или группа являются незамещенными или замещенными.

Линии, проведенные от заместителей к кольцевым системам, указывают на то, что такая связь может быть присоединена к любому из подходящих атомов кольца.

Приставка C_x-y (где х и у представляют собой целые числа), используемая в данном документе, относится к числу атомов углерода в данной группе. Таким образом, C_1-6алкильная группа содержит от 1 до 6 атомов углерода, C_3-6циклоалкильная группа содержит от 3 до 6 атомов углерода, C_1-4алкоксигруппа содержит от 1 до 4 атомов углерода и т.д.

Термин галоген как группа или часть группы является общим названием для фтора, хлора, брома, йода, если иное не указано или четко не следует из контекста.

Термин C^^km как группа или часть группы относится к гидрокарбильному радикалу формулы C_nH_2n+1, где n представляет собой число в диапазоне от 1 до 6. и^алкильные группы содержат от 1 до 6 атомов углерода, предпочтительно от 1 до 4 атомов углерода, более предпочтительно от 1 до 3 атомов углерода, еще более предпочтительно от 1 до 2 атомов углерода. Алкильные группы могут быть линейными или разветвленными и могут быть замещенными, как указано в данном документе. Если в данном документе применяется нижний индекс после атома углерода, то нижний индекс означает число атомов углерода, которые может содержать названная группа. Таким образом, например, Cb^KM включает все линейные или разветвленные алкильные группы с 1-6 атомами углерода и, следовательно, включает такие как, например, метил, этил, н-пропил, изопропил, 2-метил-этил, бутил и его изомеры (например, нбутил, изобутил и трет-бутил), пентил и его изомеры, гексил и его изомеры и т.п.

Термин C^^km как группа или часть группы относится к гидрокарбильному радикалу формулы C_nH_2n+1, где n представляет собой число в диапазоне от 1 до 4. С1_-4алкильные группы содержат от 1 до 4 атомов углерода, предпочтительно от 1 до 3 атомов углерода, более предпочтительно от 1 до 2 атомов углерода. C_1-4алкильные группы могут быть линейными или разветвленными и могут быть замещенными, как указано в данном документе. Если в данном документе применяется нижний индекс после атома углерода, то нижний индекс означает число атомов углерода, которые может содержать названная группа.

и_-4алкил включает все линейные или разветвленные алкильные группы с 1-4 атомами углерода и, следовательно, включает метил, этил, н-пропил, изопропил, 2-метилэтил, бутил и его изомеры (например, н-бутил, изобутил и трет-бутил) и т.п.

Термин C_1-6алкилокси как группа или часть группы относится к радикалу, характеризующемуся формулой -OR^b, где R^b представляет собой Cb^KM. Неограничивающие примеры подходящего алкилокси включают метилокси, этилокси, пропилокси, изопропилокси, бутилокси, изобутилокси, вторбутилокси, трет-бутилокси, пентилокси и гексилокси.

Термин '^^алкилокси как группа или часть группы относится к радикалу формулы -OR^c, где R^c представляет собой С_1-4алкил. Неограничивающие примеры подходящего С_1-4алкилокси включают метилокси (также метокси), этилокси (также этокси), пропилокси, изопропилокси, бутилокси, изобутилокси, втор-бутилокси и трет-бутилокси.

Термин ^^алкилкарбонил как группа или часть группы относится к радикалу -С(=О)-C_1-6алкил. Термин С_1-4алкилкарбонил как группа или часть группы относится к радикалу -С(=О)-C_1-4алкил.

Термин C_3-8циклоалкил отдельно или в комбинации относится к циклическому насыщенному углеводородному радикалу с 3-8 атомами углерода. Неограничивающие примеры подходящего ТТхииклоалкила включают циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогептил и циклооктил.

Термин C_3-6циклоалкил отдельно или в комбинации относится к циклическому насыщенному углеводородному радикалу с 3-6 атомами углерода. Неограничивающие примеры подходящего ТТлциклоалкила включают циклопропил, циклобутил, циклопентил и циклогексил.

- 4 031639

В частности, 4-, 5- или 6-членные насыщенные гетероциклилы (например, в определении R₁₄) содержат 1, 2 или 3 гетероатома, выбранные из О, S и N, в частности 1 или 2 гетероатома, в частности, выбранные из О и N.

Примеры 4-, 5- или 6-членных насыщенных гетероциклилов включают без ограничения пирролидинил, диоксоланил, оксазолидинил, оксетанил, тетрагидрофуранил и т.п.

Примеры 6-членных ароматических гетероциклилов, содержащих один или два атома азота (например, в определении кольца А), включают без ограничения пиримидинил, пиридинил, пиразинил и т.п.

Примеры 6-членных частично насыщенных гетероциклилов, содержащих один или два атома азота (например, в определении кольца А), включают без ограничения 1,2,3,6-тетрагидро-пиридинил и т.п. В конкретном варианте осуществления 1,2,3,6-тетрагидропиридинил присоединен со своим атомом азота к переменной Y.

Примеры 6-членных насыщенных гетероциклилов, содержащих один или два атома азота (например, в определении кольца А), включают без ограничения пиперидинил и т.п. В конкретном варианте осуществления пиперидинил присоединен со своим атомом азота к пиразолильному кольцу.

Термин субъект, используемый в данном документе, относится к животному, предпочтительно млекопитающему (например, кошке, собаке, примату или человеку), более предпочтительно человеку, которое является или являлось объектом лечения, наблюдения или эксперимента.

Термин терапевтически эффективное количество, используемый в данном документе, означает такое количество активного соединения или фармацевтического средства, которое вызывает биологический или медицинский эффект в системе тканей, у животного или человека, необходимый для исследователя, ветеринара, врача или другого клинициста, что включает облегчение или нивелирование симптомов заболевания или нарушения, лечение которого осуществляют.

Термин композиция предназначен для охвата продукта, содержащего определенные ингредиенты в определенных количествах, а также любого продукта, который получают, прямо или опосредованно, в результате комбинаций определенных ингредиентов в определенных количествах.

Термин лечение, используемый в данном документе, предназначен для обозначения всех способов, которые могут предусматривать замедление, нарушение, торможение или остановку развития заболевания, но необязательно означает полное устранение всех симптомов.

Подразумевается, что термин соединения согласно изобретению, используемый в данном документе, включает соединения формулы (I), (I') и их N-оксиды, фармацевтически приемлемые соли присоединения и сольваты.

Как используется в данном документе, любая химическая формула со связями, показанными только в виде сплошных линий, а не в виде сплошных клиновидных или пунктирных клиновидных связей или иным образом показанная как имеющая конкретную конфигурацию (например, R, S) вокруг одного или нескольких атомов, подразумевает каждый возможный стереоизомер или смесь двух или более стереоизомеров.

Всякий раз, когда одна из кольцевых систем замещена одним или несколькими заместителями, эти заместители могут замещать любой атом водорода, связанный с атомом углерода или азота кольцевой системы.

Выше и ниже в данном документе подразумевается, что термин соединение формулы (I) включает его стереоизомеры и его таутомерные формы.

Выше и ниже в данном документе подразумевается, что термин соединение формулы (I') включает его стереоизомеры и его таутомерные формы.

Термины стереоизомеры, стереоизомерные формы или стереохимически изомерные формы выше или ниже в данном документе применяют взаимозаменяемо.

Настоящее изобретение включает все стереоизомеры соединений согласно настоящему изобретению либо в виде чистого стереоизомера, либо в виде смеси двух или более стереоизомеров.

Энантиомеры представляют собой стереоизомеры, которые представляют собой несовпадающие при наложении зеркальные отображения друг друга. Смесь 1: 1 пары энантиомеров представляет собой рацемат или рацемическую смесь.

Диастереомеры (или диастереоизомеры) представляют собой стереоизомеры, которые не являются энантиомерами, т.е. они не соотносятся как зеркальные отображения. Если соединение содержит двойную связь, то заместители могут находиться в Е- или Z-конфигурации. Заместители в двухвалентных циклических (частично) насыщенных радикалах могут находиться либо в цис-, либо в трансконфигурации; например, если соединение содержит двузамещенную циклоалкильную группу, то заместители могут быть в цис- или транс-конфигурации. Таким образом, настоящее изобретение включает энантиомеры, диастереомеры, рацематы, Е-изомеры, Z-изомеры, цис-изомеры, транс-изомеры и их смеси во всех случаях, когда это возможно с химической точки зрения.

Значения всех этих терминов, т.е. энантиомеры, диастереомеры, рацематы, Е-изомеры, Z-изомеры, цис-изомеры, транс-изомеры и их смеси, известны специалисту в данной области.

Абсолютную конфигурацию определяют согласно системе Кана-Ингольда-Прелога. Конфигурацию при асимметрическом атоме определяют либо как R, либо как S. Разделенные стереоизомеры, абсолют

- 5 031639 ная конфигурация которых не известна, могут обозначаться как (+) или (-) в зависимости от направления, в котором они вращают плоскость поляризации света. Например, выделенные энантиомеры, абсолютная конфигурация которых неизвестна, могут обозначаться как (+) или (-) в зависимости от направления, в котором они вращают плоскость поляризации света.

Если указан конкретный стереоизомер, это означает, что указанный стереоизомер практически не содержит других изомеров, т.е. связан менее чем с 50%, предпочтительно менее чем с 20%, более предпочтительно менее чем с 10%, еще более предпочтительно менее чем с 5%, в частности менее чем с 2%, и наиболее предпочтительно менее чем с 1% других изомеров. Таким образом, если соединение формулы (I) указывают, например, как (R), это означает, что соединение практически не содержит изомера (S); если соединение формулы (I) указывают, например, как Е, это означает, что соединение практически не содержит Z-изомера; если соединение формулы (I) указывают, например, как цис-, это означает, что соединение практически не содержит транс-изомера.

Некоторые соединения формулы (I) или (I') могут также существовать в их таутомерной форме. Предполагается, что такие формы, ввиду того, что они могут существовать, включены в объем настоящего изобретения.

Из этого следует, что одно соединение может существовать как в стереоизомерной, так и в таутомерной форме.

Для терапевтического применения соли соединений формулы (I), (I'), противоион которых является фармацевтически приемлемым. Однако соли кислот и оснований, которые не являются фармацевтически приемлемыми, также могут находить применение, например, при получении или очистке фармацевтически приемлемого соединения. Все соли, независимо от того, являются ли они фармацевтически приемлемыми или нет, включены в объем настоящего изобретения.

Предполагается, что фармацевтически приемлемые соли присоединения, упоминаемые выше или ниже в данном документе, включают терапевтически активные нетоксичные формы солей присоединения кислоты и основания, которые могут образовывать соединения формулы (I), (I'). Фармацевтически приемлемые соли присоединения кислоты в целях удобства можно получать путем обработки основной формы такой соответствующей кислотой. Соответствующие кислоты включают, например, неорганические кислоты, такие как галогенводородные кислоты, например хлористоводородная или бромистоводородная кислота, серная, азотная, фосфорная кислоты и т.п.; или органические кислоты, такие как, например, уксусная, пропановая, гидроксиуксусная, молочная, пировиноградная, щавелевая (т.е. этандновая), малоновая, янтарная (т.е. бутандиовая кислота), малеиновая, фумаровая, яблочная, винная, лимонная, метансульфоновая, этансульфоновая, бензолсульфоновая, п-толуолсульфоновая, цикламовая, салициловая, п-аминосалициловая, памовая кислоты и т.п. И наоборот, указанные формы солей можно превратить путем обработки соответствующим основанием в форму свободного основания.

Соединения формулы (I), (I'), содержащие кислотный протон, также можно превратить в формы их нетоксичных солей присоединения металла или амина путем обработки соответствующими органическими и неорганическими основаниями. Соответствующие основные формы солей включают, например, соли аммония, соли щелочных и щелочно-земельных металлов, например соли лития, натрия, калия, магния, кальция и т.п., соли с органическими основаниями, например первичными, вторичными и третичными алифатическими и ароматическими аминами, такими как метиламин, этиламин, пропиламин, изопропиламин, четыре изомера бутиламина, диметиламин, диэтиламин, диэтаноламин, дипропиламин, диизопропиламин, ди-н-бутиламин, пирролидин, пиперидин, морфолин, триметиламин, триэтиламин, трипропиламин, хинуклидин, пиридин, хинолин и изохинолин; бензатиновые, N-метил-О-глюкаминовые, гидрабаминовые соли и соли с аминокислотами, такими как, например, аргинин, лизин и т.п. И наоборот, форму соли можно превратить путем обработки кислотой в форму свободной кислоты.

Термин сольват включает гидраты и формы присоединения растворителя, которые могут образовывать соединения формулы (I) или (I'), а также их N-оксиды и фармацевтически приемлемые соли присоединения. Примерами таких форм являются, например, гидраты, алкоголяты и т.п.

Соединения согласно настоящему изобретению, полученные в описанных ниже способах, могут быть синтезированы в форме смесей энантиомеров, в частности рацемических смесей энантиомеров, которые можно отделить друг от друга согласно известным в уровне техники процедурам разделения. Способ разделения энантиомерных форм соединений формулы (I), (I') и их фармацевтически приемлемых солей присоединения включает жидкостную хроматографию с использованием хиральной неподвижной фазы. Указанные чистые стереохимически изомерные формы можно также получить из соответствующих чистых стереохимически изомерных форм подходящих исходных материалов при условии, что реакция протекает стереоспецифически. Предпочтительно, если необходим определенный стереоизомер, то указанное соединение можно синтезировать стереоспецифическими способами получения. В данных способах преимущественно применяют энантиомерно чистые исходные материалы.

В рамках данной заявки элемент, в частности при упоминании в отношении соединения формулы (I) или (I'), включает все изотопы и смеси изотопов этого элемента, либо встречающиеся в природе, либо полученные синтетическим путем, либо с природным изотопным составом, либо в изотопнообогащенной форме. Меченные радиоактивным изотопом соединения формулы (I) или (I') могут содер- 6 031639

Э Д 11 15? 1 О 1 дд ί д с 1Д1 д с жать радиоактивный изотоп, выбранный из группы, состоящей из Н, Н, C, F, I, I, I, I, Br, °Br, Br и Br. Предпочтительно радиоактивный изотоп выбран из группы, состоящей из Н, Н, C и ¹⁸F. Более предпочтительно радиоактивный изотоп представляет собой ²Н.

В частности, дейтерированные соединения предназначены для включения в объем настоящего изобретения.

Используемая в данном описании и прилагаемой формуле изобретения форма единственного числа также включает объекты во множественном числе, если в контексте явно не указано иное. Например, соединение означает 1 соединение или более чем 1 соединение.

В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к новым соединениям формулы (I), их таутомерам и стереоизомерным формам, где у₁ представляет собой СН;

у₂ представляет собой СН;

R₇ представляет собой водород;

X представляет собой ковалентную связь;

R_2a представляет собой водород;

R_2b представляет собой водород;

R₃ представляет собой водород или и^алкил, замещенный одной гидроксильной группой;

R_4a представляет собой водород;

R_4b представляет собой водород;

Y представляет собой -О-;

Z представляет собой -CHR··-;

Rs представляет собой водород;

кольцо А представляет собой фенил, необязательно замещенный одним заместителем R₈;

причем каждый R₈ независимо представляет собой водород или галоген;

x₁ представляет собой СН;

х₂ представляет собой CR_5b;

х3 представляет собой СН;

каждый R₁₅ представляет собой водород;

R_5b представляет собой и^алкил или ^^и^оил^л. и их фармацевтически приемлемым солям присоединения.

В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к таким соединениям формулы (I) и их фармацевтически приемлемым солям присоединения, где C_1-6алкил ограничен С_1-4алкилом.

Другой вариант осуществления настоящего изобретения относится к таким соединениям формулы (I) и их фармацевтически приемлемым солям присоединения и сольватам или любой их подгруппе, которая упомянута в любом из других вариантов осуществления, где применяются одно или несколько из следующих ограничений:

(i) y₁ представляет собой CR_7a или N;

(ii) y₂ представляет собой СН;

(iii) R_7a представляет собой водород;

(iv) R₇ представляет собой водород;

(v) X представляет собой -CR_|R_|a- или ковалентную связь;

(vi) R1 представляет собой водород;

(vii) R_1a представляет собой водород; C_1-6алкил, замещенный одной гидроксильной группой; C_1-6алкил, замещенный одним -NR_9aR_9b; или -C(=O)-NR9_aR9_b;

(viii) R2a представляет собой водород; R2b представляет собой водород;

(ix) R₃ представляет собой водород или ^^алкил, замещенный одной гидроксильной группой;

(x) R_4a представляет собой водород; Cm-цлкил; и^алиил, замещенный одной гидроксильной группой; или

C_1-6алкил, замещенный одним R₁₁;

R4b представляет собой водород или

R4a и R4b взяты вместе с образованием =O;

(xi) кольцо А представляет собой фенил или 6-членный ароматический гетероциклил, причем указанный гетероциклил содержит один или два атома азота; где фенил или гетероциклил необязательно замещен одним или двумя заместителями R₈;

(xii) каждый R₈ независимо представляет собой водород; циано или галоген;

(xiii) каждый из R_9a и R_9b независимо представляет собой водород или _Ь-4алкил;

(xiv) каждый из R_10a и R_10b представляет собой водород;

(xv) R₁₁ представляет собой -NR_10aR_10b (xvi) Y представляет собой -О-;

(xvii) Z представляет собой -CHR₆-;

(xviii) R₆ представляет собой водород;

(xix) x1 представляет собой CR5a;

- 7 031639 x₂ представляет собой CR₅b;

x₃ представляет собой CR_5c;

(xx) каждый R₁₅ независимо выбран из группы, состоящей из водорода и галогена;

(xxi) каждый из R_5a и R_5c независимо выбран из группы, состоящей из водорода; циано; галогена и C₁.₆алкила, замещенного одной или двумя гидроксильными группами;

(xxii) R_5b представляет собой С_1-6алкил или С_3-6циклоалкил.

Другой вариант осуществления настоящего изобретения относится к таким соединениям формулы (I) и их фармацевтически приемлемым солям присоединения или любой их подгруппе, которая упомянута в любом из других вариантов осуществления, где применяются одно или несколько из следующих ограничений:

(i) y₁ представляет собой СН;

(ii) y₂ представляет собой СН;

(iii) R₇ представляет собой водород;

(iv) X представляет собой ковалентную связь;

(v) R_2a представляет собой водород; R_2b представляет собой водород;

(vi) R₃ представляет собой водород или С_1-6алкил, замещенный одной гидроксильной группой;

(vii) R4_a представляет собой водород; R4_b представляет собой водород;

(viii) кольцо А представляет собой фенил, необязательно замещенный одним заместителем R₈;

(ix) каждый R₈ независимо представляет собой водород или галоген;

(x) Y представляет собой -О-;

(xi) Z представляет собой -CHR₆-;

(xii) Re представляет собой водород;

(xiii) x1 представляет собой СН;

х2 представляет собой CR5b;

x3 представляет собой СН;

(xiv) каждый R₁₅ представляет собой водород;

(xv) R_5b представляет собой С_1-6алкил или С_3-6циклоалкил.

В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к таким соединениям формулы (I) и их фармацевтически приемлемым солям присоединения или любой их подгруппе, которая упомянута в любом из других вариантов осуществления, где R4a представляет собой водород.

В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к таким соединениям формулы (I) и их фармацевтически приемлемым солям присоединения или любой их подгруппе, которая упомянута в любом из других вариантов осуществления, где кольцо А представляет собой фенил или 6-членный ароматический гетероциклил, причем указанный гетероциклил содержит один или два атома азота; где фенил или гетероциклил необязательно замещен одним или двумя заместителями R₈; причем каждый R₈ независимо представляет собой водород; циано; или галоген.

В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к таким соединениям формулы (I) и их фармацевтически приемлемым солям присоединения или любой их подгруппе, которая упомянута в любом из других вариантов осуществления, где кольцо А представляет собой фенил или 6-членный ароматический гетероциклил, причем указанный гетероциклил содержит один или два атома азота.

В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к таким соединениям формулы (I) и их фармацевтически приемлемым солям присоединения или любой их подгруппе, которая упомянута в любом из других вариантов осуществления, где кольцо А представляет собой фенил.

В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к таким соединениям формулы (I) и их фармацевтически приемлемым солям присоединения или любой их подгруппе, которая упомянута в любом из других вариантов осуществления, где R_1a представляет собой водород; С_1-6алкил; моноили полигалоген-С_1-6алкил; С_1-6алкил, замещенный одной или двумя гидроксильными группами; или С_1-6алкил, замещенный одним -NR_9aR_9b.

В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к таким соединениям формулы (I) и их фармацевтически приемлемым солям присоединения или любой их подгруппе, которая упомянута в любом из других вариантов осуществления, где X представляет собой -СИ^_1а-; в частности СН₂.

В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к таким соединениям формулы (I) и их фармацевтически приемлемым солям присоединения или любой их подгруппе, которая упомянута в любом из других вариантов осуществления, где X представляет собой ковалентную связь.

В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к таким соединениям формулы (I) и их фармацевтически приемлемым солям присоединения или любой их подгруппе, которая упомянута в любом из других вариантов осуществления, где R₁ и R_1a представляют собой водород.

В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к таким соединениям формулы (I) и их фармацевтически приемлемым солям присоединения или любой их подгруппе, которая упомянута в любом из других вариантов осуществления, где -Y-Z- представляет собой -О-СН2-.

В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к таким соединениям формулы (I) и их фармацевтически приемлемым солям присоединения или любой их подгруппе, которая упомяну

- 8 031639 та в любом из других вариантов осуществления, где Z представляет собой CHR₆, в частности СН₂.

В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к таким соединениям формулы (I) и их фармацевтически приемлемым солям присоединения или любой их подгруппе, которая упомянута в любом из других вариантов осуществления, где R₃ представляет собой водород или Cl_-6алкил, замещенный одной гидроксильной группой.

В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к таким соединениям формулы (I) и их фармацевтически приемлемым солям присоединения или любой их подгруппе, которая упомянута в любом из других вариантов осуществления, где R_4a и R_4b представляют собой водород.

В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к таким соединениям формулы (I) и их фармацевтически приемлемым солям присоединения или любой их подгруппе, которая упомянута в любом из других вариантов осуществления, где R_4a и R_4b взяты вместе с образованием =0.

В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к таким соединениям формулы (I) и их фармацевтически приемлемым солям присоединения или любой их подгруппе, которая упомянута в любом из других вариантов осуществления, где x₁ и х₃ представляют собой СН; и х₂ представляет собой CR_5b,

В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к таким соединениям формулы (I) и их фармацевтически приемлемым солям присоединения или любой их подгруппе, которая упомянута в любом из других вариантов осуществления, где R₁₅ представляет собой водород.

В одном варианте осуществления изобретение относится к таким соединениям формулы (I) и их фармацевтически приемлемым солям присоединения или любой их подгруппе, которая упомянута в любом из других вариантов осуществления, где R₁₅ представляет собой водород или F, в частности F.

В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к таким соединениям формулы (I) и их фармацевтически приемлемым солям присоединения или любой их подгруппе, которая упомянута в любом из других вариантов осуществления, где кольцо А представляет собой фенил, необязательно замещенный одним или двумя заместителями R₈; причем каждый R₈ независимо представляет собой водород; циано или галоген;

Y представляет собой -О-; Z представляет собой -СН₂-; R₁₅ представляет собой Н; x₁ и х₃ представляют собой СН; х2 представляет собой CR5b; R5b представляет собой изопропил.

В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к таким соединениям формулы (I) и их фармацевтически приемлемым солям присоединения или любой их подгруппе, которая упомянута в любом из других вариантов осуществления, где y₁ и у₂ представляют собой СН; R₇ представляет собой Н; X представляет собой ковалентную связь; R_2a и R_2b представляют собой Н;

R_4a и R_4b представляют собой Н;

кольцо А представляет собой фенил, необязательно замещенный одним или двумя заместителями R₈; причем каждый R₈ независимо представляет собой водород; циано или галоген;

Y представляет собой -О-;

Z представляет собой -СН₂-;

R₁₅ представляет собой Н;

x₁ и х₃ представляют собой СН;

х2 представляет собой CR5b;

R5b представляет собой изопропил.

В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к таким соединениям формулы (I) и их фармацевтически приемлемым солям присоединения или любой их подгруппе, которая упомянута в любом из других вариантов осуществления, где y₁ и у₂ представляют собой СН;

R7 представляет собой Н;

X представляет собой ковалентную связь;

R2a и R2b представляют собой Н;

R4a и R4b представляют собой Н;

кольцо А представляет собой фенил;

Y представляет собой -О-; Z представляет собой -СН₂-;

R₁₅ представляет собой Н;

x₁ и х₃ представляют собой СН;

х2 представляет собой CR5b;

R5b представляет собой изопропил.

В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к таким соединениям формулы (I) и их фармацевтически приемлемым солям присоединения или любой их подгруппе, которая упомянута в любом из других вариантов осуществления, где x1 и х3 представляют собой СН; х2 представляет собой CR5b; R5b представляет собой изопропил.

В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к таким соединениям формулы (I) и их фармацевтически приемлемым солям присоединения или любой их подгруппе, которая упомяну

- 9 031639 та в любом из других вариантов осуществления, где х₂ представляет собой CR_5bl; R_5b представляет собой изопропил.

В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к таким соединениям формулы (I) и их фармацевтически приемлемым солям присоединения или любой их подгруппе, которая упомянута в любом из других вариантов осуществления, где y₁ и у₂ представляют собой СН.

В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к таким соединениям формулы (I) и их фармацевтически приемлемым солям присоединения или любой их подгруппе, которая упомянута в любом из других вариантов осуществления, где R₈ представляет собой водород.

В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к подгруппе формулы (I), которая определена на общих схемах реакций.

Предполагается, что все возможные комбинации вышеуказанных вариантов осуществления попадают в объем настоящего изобретения.

По возможности, любой интересный вариант осуществления для соединений формулы (I), которые перечислены выше в данном документе, также действителен для соединений формулы (I').

В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к новым соединениям формулы (I'), их таутомерам и стереоизомерным формам, где yi представляет собой CR_7a;

у₂ представляет собой СН;

R_7a представляет собой водород;

R7 представляет собой водород,

X представляет собой -CR_1a-;

R_1a представляет собой водород; -C(=O)-NR_9aR_9b или С_1-6алкил-О-карбонил-;

R2a представляет собой водород;

R_4a представляет собой водород; галоген; С^алкил; С_-6алкил, замещенный одной или двумя гидроксильными группами; С^алкил-О-карбонил-; C_1-6алкилкарбонилокси-;

R_4b и R₃ взяты вместе с образованием связи или

R4_a и R_4b вместе образуют =O, причем в таком случае R₃ представляет собой водород;

Y представляет собой -O-;

Z представляет собой -CHRg-;

R6 представляет собой водород;

кольцо А представляет собой фенил; где фенил необязательно замещен одним или двумя заместителями R_g;

причем каждый R_g независимо представляет собой галоген;

каждый из R_9a и R_9b независимо представляет собой водород или С_-4алкил;

x₁ представляет собой CR_5a;

х2 представляет собой CR5b х₃ представляет собой CR_5c;

каждый R₁₅ представляет собой водород;

каждый из R5a и R5c представляет собой водород;

R_5b представляет собой С^алкил;

и их фармацевтически приемлемым солям присоединения.

Другой вариант осуществления настоящего изобретения относится к таким соединениям формулы (I') и их N-оксидам, фармацевтически приемлемым солям присоединения и сольватам или любой их подгруппе, которая упомянута в любом из других вариантов осуществления, где применяются одно или несколько из следующих ограничений:

(i) y₁ представляет собой СН;

(ii) y₂ представляет собой СН;

(iii) R7 представляет собой водород;

(iv) X представляет собой -CR_1a-;

(v) R_1a представляет собой водород; -C(=O)-NR_9aR_9b или C_1-6алкил-О-карбонил-;

(vi) R2a представляет собой водород;

(vii) R_4a представляет собой водород; галоген; C_1-^hm; С^алкил-О-карбонил-;

R_4b и R₃ взяты вместе с образованием связи; или

R4a и R4b вместе образуют =O, причем в таком случае R3 представляет собой водород;

(viii) кольцо А представляет собой фенил, необязательно замещенный одним или двумя заместителями R_g;

(ix) каждый Rg независимо представляет собой водород или галоген;

(x) каждый из R_9a и R_9b независимо представляет собой водород или С_-4алкил;

(xi) Y представляет собой -O-;

(xii) Z представляет собой -CHR6-;

(xiii) R6 представляет собой водород;

(xiv) x1 представляет собой CR5a;

- 10 031639 x₂ представляет собой CR₅b;

x₃ представляет собой CR_5c;

(xv) каждый R₁₅ представляет собой водород;

(xvi) R_5a и R_5c представляют собой водород;

(xvii) R_5b представляет собой С_1-6алкил.

В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к таким соединениям формулы (I') и их фармацевтически приемлемым солям присоединения или любой их подгруппе, которая упомянута в любом из других вариантов осуществления, где R_4b и R₃ взяты вместе с образованием связи; или R_4a и R_4b вместе образуют =O, причем в таком случае R₃ представляет собой водород.

В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к таким соединениям формулы (I') и их фармацевтически приемлемым солям присоединения или любой их подгруппе, которая упомянута в любом из других вариантов осуществления, где R4b и R3 взяты вместе с образованием связи.

В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к таким соединениям формулы (I') и их N-оксидам, фармацевтически приемлемым солям присоединения или любой их подгруппе, которая упомянута в любом из других вариантов осуществления, где R_4a и R_4b вместе образуют =0 и R₃ представляет собой Н.

В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к таким соединениям формулы (I') и их фармацевтически приемлемым солям присоединения или любой их подгруппе, которая упомянута в любом из других вариантов осуществления, где

R2a представляет собой водород;

R_4a представляет собой водород; галоген; С_1-6алкил;

R4b и R3 взяты вместе с образованием связи или

R4a и R4b вместе образуют =O, причем в таком случае R3 представляет собой водород.

В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к подгруппе формулы (I'), которая определена на общих схемах реакций.

Предполагается, что все возможные комбинации вышеуказанных вариантов осуществления попадают в объем настоящего изобретения.

Способы получения соединений формулы (I) и (I').

В этом разделе, как и во всех других разделах, если контекст не указывает на иное, ссылки к формуле (I) и (I') также включают все другие подгруппы и их примеры, которые определены в данном документе.

Общие способы получения некоторых типичных примеров соединений формулы (I) и (I') описаны в данном документе и в конкретных примерах, и, как правило, их получают из исходных материалов, являющихся либо коммерчески доступными, либо получаемыми с помощью стандартных способов синтеза, широко применяемых специалистами в данной области. Последующие схемы направлены только на представление примеров настоящего изобретения и ни в коей мере не направлены на ограничение настоящего изобретения.

Альтернативно, соединения согласно настоящему изобретению можно также получать с помощью протоколов реакций, аналогичных описанным на общих схемах ниже, в сочетании со стандартными способами синтеза, широко применяемыми специалистами в области органической химии.

Специалисту в данной области будет понятно, что в реакциях, описанных на схемах, может потребоваться защита реакционноспособных функциональных групп, например гидрокси-, амино- или карбоксигрупп, при этом они желательны в конечном продукте во избежание нежелательного участия их в реакциях. Традиционные защитные группы можно применять в соответствии со стандартной практикой.

Специалисту в данной области будет понятно, что в реакциях, описанных на схемах, возможно будет целесообразно или необходимо проводить реакцию в инертной атмосфере, такой как, например, в атмосфере газа N₂, например, при использовании NaH в реакции.

Специалисту в данной области будет очевидно, что возможно будет необходимо охлаждать реакционную смесь перед исследованием реакции (касается ряда манипуляций, необходимых для выделения и очистки продукта(продуктов), полученного(полученных) при химической реакции, такой как, например, гашение, колоночная хроматография, экстракция).

Специалисту в данной области будет понятно, что нагревание реакционной смеси при перемешивании может увеличить выход реакции. В некоторых реакциях можно применять нагревание микроволнами вместо традиционного нагревания для сокращения общего времени реакции.

Специалисту в данной области будет понятно, что промежуточные соединения и конечные соединения, показанные на схемах ниже, могут быть дополнительно функционализированы в соответствии со способами, хорошо известными специалисту в данной области.

Все переменные определены, как упомянуто выше в данном документе, если не указано иное или четко не следует из контекста.

- 11 031639

1) Схема 1.

В общем, соединения формулы (Ia-Ie) можно получать согласно схеме реакций 1. На схеме 1 применяют следующие определения:

кольцо А1' представляет собой необязательно замещенный фенил или необязательно замещенный 6-членный ароматический гетероцикл, содержащий один или два атома азота, но R₈ не взят вместе с заместителем R₆ из Z (не образует бициклическое кольцо);

R' и R представляют собой функциональные группы в пределах объема;

Et означает этил, и Ph означает фенил;

и все другие переменные на схеме 1 определены в соответствии с объемом настоящего изобретения.

1a: в присутствии подходящего основания, такого как, например, K₂CO₃, и подходящего растворителя, такого как, например, CH₃CN;

1: промежуточное соединение формулы (II) можно вводить в реакцию с промежуточным соединением формулы (III) в присутствии подходящего основания, такого как, например, калия 2-метил-2бутоксид, и подходящего растворителя, такого как, например, тетрагидрофуран (THF), в результате чего получают промежуточное соединение формулы (IV);

2: промежуточное соединение формулы (IV) можно вводить в реакцию с моногидратом гидразина в присутствии подходящей кислоты, такой как, например, уксусная кислота (АсОН), и подходящего растворителя, такого как, например, этанол (EtOH), в результате чего получают промежуточное соединение формулы (V);

3: промежуточное соединение формулы (V) можно вводить в реакцию с реагентом формулы (VI) в присутствии подходящего основания, такого как, например, диизопропилэтиламин (DIPEA), и подходящего растворителя, такого как, например, Ν,Ν-диметилформамид (DMF), в результате чего получают соединение формулы (Ia);

- 12 031639

4: промежуточное соединение формулы (V) можно вводить в реакцию с промежуточным соединением формулы (XII), где W представляет собой подходящую уходящую группу, такую как, например, йодид, бромид, хлорид или тозилат, в присутствии подходящего основания, такого как, например, NaH, и подходящего растворителя, такого как, например, DMF, в результате чего получают промежуточное соединение формулы (VII);

5: промежуточное соединение формулы (VII) можно вводить в реакцию с подходящим основанием, таким как, например, KOH, в присутствии подходящего растворителя или смеси растворителей, такой как, например, EtOH и вода. Полученное в результате промежуточное соединение можно превращать в соединение формулы (Ib) путем введения в реакцию с подходящими конденсирующими реагентами для образования пептидной связи, такими как, например, 1-гидроксибензотриазол (HOBt) и 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимид, HCl (EDCI), подходящим основанием, таким как, например, триэтиламин (Et₃N), и подходящим растворителем, таким как, например, N.N-диметилформамид (DMF);

6: промежуточное соединение формулы (V) можно вводить в реакцию с промежуточным соединением формулы (XI) в присутствии подходящего основания, такого как, например, K₂CO₃, и подходящего растворителя, такого как, например, DMF, в результате чего получают промежуточное соединение формулы (VIII);

7: промежуточное соединение формулы (VIII) можно превращать в соединение формулы (Ic) путем введения в реакцию с метансульфонилхлоридом в присутствии подходящего основания, такого как, например, Et₃N, и подходящего растворителя, такого как, например, CH₃CN;

8: промежуточное соединение формулы (V) можно вводить в реакцию с промежуточным соединением формулы (X) в присутствии подходящего восстанавливающего средства, такого как, например, триацетоксиборогидрид натрия (ЦаВЩОАсБ), и подходящего растворителя, такого как, например,

1,2-дихлорэтан (DCE), в результате чего получают промежуточное соединение формулы (IX);

9: промежуточное соединение формулы (IX) можно превращать в соединение формулы (Id) путем введения в реакцию с реагентом формулы (VI) в присутствии подходящего основания, такого как, например, DIPEA, и подходящего растворителя, такого как, например, DMF;

10: соединение формулы (Ib) можно превращать в соединение формулы (Ie) путем введения в реакцию с LiAlH₄ в присутствии подходящего растворителя, такого как, например, THF.

2) Схема 2. Второй путь получения конечных соединений (I).

Соединения формул (Ia-а), (Ic-а) и (Ib-a) можно получать согласно изложенной ниже схеме реакций 2.

На схеме 2 применяют следующие определения:

Y_x определен как О, и кольцо А1 представляет собой фенил или 6-членный ароматический гетероцикл, содержащий один или два атома азота; где фенил или гетероцикл необязательно замещен одним или двумя заместителями R₈;

причем каждый R₈ независимо представляет собой водород; Cl_-4алкилокси; гидроксил; циано; Ci_-^rm или галоген;

или заместитель R₈ из кольца А1 при атоме, смежном с атомом, несущим заместитель Y_x-Z, взят вместе с заместителем R₆ из Z с образованием бициклического кольца;

и все переменные на схеме 2 определены, как упомянуто выше

- 13 031639

1: промежуточное соединение формулы (XIII) можно вводить в реакцию с CH₃CN в присутствии подходящего основания, такого как, например, калия 2-метил-2-бутоксид, и подходящего растворителя, такого как, например, THF, в результате чего получают промежуточное соединение формулы (XIV);

2: промежуточное соединение формулы (XIV) можно вводить в реакцию с промежуточным соединением формулы (XV) в присутствии подходящей кислоты, такой как, например, HCl, и подходящего растворителя, такого как, например, EtOH, в результате чего получают промежуточное соединение формулы (XVI);

3: промежуточное соединение формулы (XVI) можно превращать в промежуточное соединение формулы (XVII) путем введения в реакцию с N-бромсукцинимидом (NBS) в присутствии подходящего растворителя, такого как, например, DCM;

4: промежуточное соединение формулы (XVII) можно превращать в промежуточное соединение формулы (XVIII) путем введения в реакцию с подходящим основанием, таким как, например, Et₃N, в присутствии подходящего растворителя, такого как, например, метанол (МеОН);

5: промежуточное соединение формулы (XVIII) можно вводить в реакцию с промежуточным соединением формулы (VI) в присутствии подходящего основания, такого как, например, DIPEA, и подходящего растворителя, такого как, например, DMF, в результате чего получают промежуточное соединение формулы (XIXa);

6: промежуточное соединение формулы (XIXa), (XIXb) или (XIXc) можно вводить в реакцию с промежуточным соединением формулы (XX) в присутствии подходящего катализатора, такого как, например, Pd₂dba₃, подходящего лиганда, такого как, например, трис(1,1-диметилэтил)фосфин, тетрафторборат(1-) (1:1) (также три-трет-бутилфосфония тетрафторборат) (P(tBu)₃-HBF₄), подходящего основания, такого как, калия фосфат (K₃PO₄), и подходящего растворителя или смеси растворителей, такой как, например, диоксан и вода, в результате чего получают соединение формулы (Ia-а), (Ic-а) или (Ib-a), соответственно;

7: промежуточное соединение формулы (XVIII) можно вводить в реакцию с промежуточным соединением формулы (XI) в присутствии подходящего основания, такого как, например, K2CO3, и подходящего растворителя, такого как, например, DMF. Полученное в результате промежуточное соединение можно превращать в промежуточное соединение формулы (XIXb) путем введения в реакцию с метансульфонилхлоридом в присутствии подходящего основания, такого как, например, Et₃N, и подходящего растворителя, такого как, например, CH₃CN;

- 14 031639

8: промежуточное соединение формулы (XVIII) можно вводить в реакцию с промежуточным соединением формулы (XII), где W представляет собой подходящую уходящую группу, такую как, например, йодид, бромид, хлорид или тозилат, в присутствии подходящего основания, такого как, например, NaH, и подходящего растворителя, такого как, например, DMF.

Полученное в результате промежуточное соединение можно вводить в реакцию с подходящим основанием, таким как, например, KOH, в присутствии подходящего растворителя или смеси растворителей, такой как, например, этанол (EtOH) и вода. Полученное в результате промежуточное соединение можно превращать в соединение формулы (XIXc) путем введения в реакцию с соответствующими конденсирующими реагентами для образования пептидной связи, такими как, например, 1-гидроксибензотриазол (HOBt) и 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида HCl (EDCI), подходящим основанием, таким как, например, Et₃N, и подходящим растворителем, таким как, например, DMF.

3) Схема 2а. Промежуточное соединение (Y_x = О).

Промежуточные соединения формулы (XX), где Y_x представляет собой О, и кольцо А1 ограничено до А1' (нет образованных бициклов), называемые в данном документе промежуточным соединением формулы (ХХа), можно получать согласно изложенной ниже схеме реакций 2а, где все переменные являются такими, как определено выше

1: промежуточное соединение формулы (XXI) можно вводить в реакцию с промежуточным соединением формулы (XXII) в присутствии трифенилфосфина (PPh₃), подходящего реагента Мицунобу, такого как, например, DBAD, и подходящего растворителя, такого как, например, дихлорметан (DCM) или THF, в результате чего получают промежуточное соединение формулы (ХХа);

2: промежуточное соединение формулы (XXIIIa) можно вводить в реакцию с промежуточным соединением формулы (XXIV) в присутствии подходящего основания, такого как, например, K₂CO₃ или Ag₂CO₃, и подходящего растворителя, такого как, например, CH₃CN или DMF, в результате чего получают промежуточное соединение формулы (ХХа);

3: промежуточное соединение формулы (XXI) можно вводить в реакцию с промежуточным соединением формулы (XXV), где W₁ представляет собой подходящий галоген, такой как, например, йодид или бромид, и где W₂ представляет собой подходящую уходящую группу, такую как, например, хлорид, фторид или бромид, в присутствии подходящего основания, такого как, например, гидрид натрия (NaH), и подходящего растворителя, такого как, например, DMF, в результате чего получают промежуточное соединение формулы (XXVa);

4: промежуточное соединение формулы (XXIII) можно вводить в реакцию с промежуточным соединением формулы (XXIV), где W1 представляет собой подходящий галоген, такой как, например, йодид или бромид, в присутствии подходящего основания, такого как, например, K₂CO₃ или Ag₂CO₃, и подходящего растворителя, такого как, например, CH₃CN или DMF, в результате чего получают промежуточное соединение формулы (XXVa);

5: промежуточное соединение формулы (XXVa) можно вводить в реакцию с промежуточными соединениями формулы (XXVI) или (XXVII) в присутствии подходящего основания, такого как, например,

- 15 031639 nBuLi или ацетат калия (AcOK), и подходящего растворителя, такого как, например, THF или диоксан, в результате чего получают промежуточное соединение формулы (ХХа).

4) Схема 2b) Промежуточное соединение (бицикл).

Промежуточные соединения формулы (XX), где Y_x-Z образует бицикл с кольцом А1, который показан в промежуточных соединениях формул (XXb), (XXc), (XXd), можно получать согласно изложенной ниже схеме реакций 2b-1. На схеме 2b-1 все переменные являются такими, как определено выше

?13

KI D.

(XXVU)

1: промежуточное соединение формулы (XXVIII) можно вводить в реакцию с промежуточным соединением формулы (XXIX), где W₃ представляет собой гидроксил, в присутствии трифенилфосфина (PPh₃), подходящего реагента Мицунобу, такого как, например, ди-трет-бутилазодикарбоксилат (DBAD), и подходящего растворителя, такого как, например, THF, в результате чего получают промежуточное соединение формулы (XXX).

Промежуточное соединение формулы (XXVIII) также можно вводить в реакцию с промежуточным соединением формулы (XXIX), где W₃ представляет собой бромид, в присутствии подходящего основания, такого как, например, гидрид натрия (NaH), и подходящего растворителя, такого как, например, THF, в результате чего получают промежуточное соединение формулы (XXX);

2: промежуточное соединение формулы (XXX) можно превращать в промежуточное соединение формулы (XXVb) путем введения в реакцию с Fe в присутствии подходящего растворителя, такого как, например, уксусная кислота (АсОН);

3: промежуточное соединение формулы (XXVb), (XXVc) или (XXVd) можно вводить в реакцию с бис-(пинаколато)дибором в присутствии подходящего основания, такого как, например, AcOK, подходящего катализатора, такого как, например, [1,1'-бис-(дифенилфосфино-кР)ферроцен]дихлорпалладий (PdCl₂(dppf)), и подходящего растворителя, такого как, например, 1,2-диметоксиэтан (DME), в результате чего получают промежуточное соединение формулы (XXb), (ХХс) или (XXd) соответственно;

4: промежуточное соединение формулы (XXVb) можно восстанавливать до промежуточного соединения формулы (XXVc) путем реакции с LAH в присутствии подходящего растворителя, такого как, например, THF;

5: промежуточное соединение формулы (XXVc) можно вводить в реакцию с промежуточным соединением формулы R₁₃-W, где W представляет собой подходящую уходящую группу, такую как, например, йодид, в присутствии подходящего основания, такого как, например, K₂CO₃, и подходящего растворителя, такого как, например, DMF, в результате чего получают промежуточное соединение формулы (XXVd).

Промежуточные соединения формулы (XX), где Y_x-Z образует бицикл с кольцом А1, который показан в промежуточном соединении формулы (XXf), можно получать согласно изложенной ниже схеме реакций 2b-2. На схеме 2b-2 все переменные являются такими, как определено выше

- 16 031639

1: промежуточное соединение формулы (XXXI) можно вводить в реакцию с промежуточным соединением формулы (XXXII) в присутствии подходящего основания, такого как, например, Et₃N, и подходящего растворителя, такого как, например iPrOH, в результате чего получают смесь промежуточного соединения формулы (XXXIII) и промежуточного соединения формулы (XXXIV);

2: смесь промежуточного соединения формулы (XXXIII) и промежуточного соединения формулы (XXXIV) можно превращать в промежуточное соединение формулы (XXXV) путем введения в реакцию с NaBH₄ в присутствии подходящего растворителя или смеси растворителей, такой как, например, THF и МеОН;

3: промежуточное соединение формулы (XXXV) можно превращать в промежуточное соединение формулы (XXXVI) путем введения в реакцию с PPh₃, подходящим реагентом Мицунобу, таким как, например, DBAD, и подходящим растворителем, таким как, например, DCM;

4: промежуточное соединение формулы (XXXVI) можно вводить в реакцию с NBS в присутствии подходящего растворителя, такого как, например, АсОН, в результате чего получают промежуточное соединение формулы (XXVf);

5: промежуточное соединение формулы (XXVf) можно вводить в реакцию с бис-(пинаколато)дибором в присутствии подходящего основания, такого как, например, AcOK, подходящего катализатора, такого как, например, PdCl₂(dppf), и подходящего растворителя, такого как, например,

1,2-диметоксиэтан, в результате чего получают промежуточное соединение формулы (XXf) соответственно.

Промежуточные соединения формулы (XX), где Y_x-Z образует бицикл с кольцом А1, который показан в промежуточном соединении формулы (XXg), можно получать согласно изложенной ниже схеме реакций 2b-3. На схеме 2b-3 все переменные являются такими, как определено выше

- 17 031639

1: промежуточное соединение формулы (XXXVII) можно вводить в реакцию с промежуточным соединением формулы (XXXVIII) в присутствии подходящего основания, такого как, например, KOH, и подходящего растворителя, такого как, например, EtOH, в результате чего получают промежуточное соединение формулы (XXXIX);

2: промежуточное соединение формулы (XXXIX) можно превращать в промежуточное соединение формулы (XL) путем введения в реакцию с NaBH₄ в присутствии хлорида индия и подходящего растворителя, такого как, например, ацетонитрил;

3: промежуточное соединение формулы (XL) можно превращать в промежуточное соединение формулы (XXVg) путем введения в реакцию с PPh₃, подходящим реагентом Мицунобу, таким как, например, DBAD, и подходящим растворителем, таким как, например, DCM;

4: промежуточное соединение формулы (XXVg) можно вводить в реакцию с бис(пинаколато)дибором в присутствии подходящего основания, такого как, например, AcOK, подходящего катализатора, такого как, например, PdCl₂(dppf), и подходящего растворителя, такого как, например,

1,2-диметоксиэтан, в результате чего получают промежуточное соединение формулы (XXg).

5) Схема 2c) Промежуточные соединения формулы (XXh) (Y представляет собой карбонил).

Путем получения производных промежуточных соединений формулы (XX), где общее определение Y представляет собой карбонил, называемых в данном документе промежуточным соединением формулы (XXh), можно получить больше соединений формулы (I) при помощи протоколов реакций, аналогичных описанным выше или ниже, и/или протоколов реакций, известных специалисту в данной области.

Такое промежуточное соединение формулы (XXh) можно получать согласно изложенной ниже схеме реакций 2с, где кольцо А1' представляет собой необязательно замещенный фенил или необязательно замещенный 6-членный ароматический гетероцикл, содержащий один или два атома азота, где Z₁ представляет собой -CHR₆-; где Me представляет собой метил и где все другие переменные являются такими, как определено выше

1: промежуточное соединение формулы (XXIII) можно превращать в промежуточное соединение формулы (XLI) путем введения в реакцию с магнием и подходящим растворителем, таким как, например, THF или диэтиловый эфир (Et₂O). Данный тип реакции также можно осуществлять в присутствии подходящего реагента, такого как, например, 1,2-дибромэтан;

- 18 031639

2: промежуточное соединение формулы (XLI) можно вводить в реакцию с промежуточным соединением формулы (XLII) в присутствии подходящего растворителя, такого как, например, метилтетрагидрофуран (метил-THF) или THF, в результате чего получают промежуточное соединение формулы (XXVh);

3: промежуточное соединение формулы (XXVh) можно вводить в реакцию с промежуточным соединением формулы (XXVII) в присутствии подходящего основания, такого как, например, ацетат калия (АсОК), и подходящего растворителя, такого как, например, диоксан, в результате чего получают промежуточное соединение формулы (XXh).

6) Схема 3.

Соединения формулы (Ii-Im), где кольцо А1 ограничено до А1' (нет образованных бициклов), можно получать согласно изложенной ниже схеме реакций 3, где все переменные являются такими, как определено выше

1: промежуточное соединение формулы (V) можно вводить в реакцию с этилакрилатом в присутствии подходящего основания, такого как, например, пиридин, в результате чего получают промежуточное соединение формулы (XLIII);

2: промежуточное соединение формулы (XLIII) можно превращать в соединение формулы (Ii-a) в присутствии подходящего основания, такого как, например, Cs₂CO₃, и подходящего растворителя, такого как, например, МеОН;

3: соединение формулы (Ii-a) можно превращать в соединение формулы (Ij-a) путем введения в реакцию с комплексом боран-тетрагидрофуран (BH₃-THF) в присутствии подходящего растворителя, такого как, например, THF;

4: промежуточное соединение формулы (XLIII) можно вводить в реакцию с промежуточным соединением формулы (X) в присутствии подходящего восстанавливающего средства, такого как, например, триацетоксиборогидрид натрия (NaBH(OAc)₃), и подходящего растворителя, такого как, например, ОСЕ,

- 19 031639 в результате чего получают промежуточное соединение формулы (XLIV);

5: промежуточное соединение формулы (XLIV) можно превращать в соединение формулы (Im-a) в присутствии подходящего основания, такого как, например, Cs₂CO₃, и подходящего растворителя, такого как, например, МеОН;

6: соединение формулы (Im-a) можно превращать в соединение формулы (Ik-a) путем введения в реакцию с комплексом боран-тетрагидрофуран (BH₃-THF) в присутствии подходящего растворителя, такого как, например, THF;

7: промежуточное соединение формулы (V) можно вводить в реакцию с промежуточным соединением формулы (XLV), где W представляет собой подходящую уходящую группу, такую как, например, йодид, бромид, хлорид или тозилат, в присутствии подходящего основания, такого как, например, NaH, и подходящего растворителя, такого как, например, DMF, в результате чего получают промежуточное соединение формулы (XLVI);

8: промежуточное соединение формулы (XLVI) можно превращать в соединение формулы (Ii) в присутствии подходящего основания, такого как, например, Cs2CO3, и подходящего растворителя, такого как, например, МеОН;

9: соединение формулы (Ii) можно превращать в соединение формулы (Ij) путем введения в реакцию с комплексом боран-тетрагидрофуран (BH₃-THF) в присутствии подходящего растворителя, такого как, например, THF;

10: соединение формулы (Ij-a) можно вводить в реакцию с промежуточным соединением формулы (X), в присутствии подходящего восстанавливающего средства, такого как, например, триацетоксиборогидрид натрия (NaBH(ОАс)₃), и подходящего растворителя, такого как, например, DCE, в результате чего получают соединение формулы (Ik-a);

11: соединение формулы (Ii-a) можно вводить в реакцию с промежуточным соединением R₃-W₂, где W2 представляет собой подходящую уходящую группу, такую как, например, хлорид, бромид или йодид, в присутствии подходящего основания, такого как, например, Ag₂OH₂, и подходящего растворителя, такого как, например, DMF, в результате чего получают соединение формулы (Im-b).

7) Схема 3 а.

Соединения формулы (Ij-b), (Ik-b) и Ца), где кольцо А1 ограничено до А1', и где все переменные являются такими, как определено выше, можно получать согласно изложенной ниже схеме 3 а реакций

1: промежуточное соединение формулы (V) можно вводить в реакцию с промежуточным соединением формулы (XLVII) (Me представляет собой метил) в присутствии подходящей кислоты, такой как, например, АсОН, в результате чего получают соединение формулы (Га), где R_4a представляет собой водород.

Промежуточное соединение формулы (V) также можно вводить в реакцию с промежуточным соединением формулы (XLVIII) в присутствии подходящей кислоты, такой как, например, АсОН, и подходящего растворителя, такого как, например, EtOH, в результате чего получают соединение формулы (Х'а);

2: соединение формулы (Га) можно превращать в соединение формулы (Ij-b) путем введения в реакцию с подходящим восстанавливающим средством, таким как, например, NaBH₄, в присутствии подходящего растворителя, такого как, например, EtOH;

3: соединение формулы (Ij-b) можно вводить в реакцию с промежуточным соединением формулы

- 20 031639 (X), в присутствии подходящего восстанавливающего средства, такого как, например, триацетоксиборогидрид натрия (NaBH(OAc)₃), и подходящего растворителя, такого как, например, DCE или DCM, в результате чего получают соединение формулы (Ik-Ъ).

8) Схема 3Ъ) Синтез соединений (I').

Соединения формулы (1'а-х) можно получать согласно изложенной ниже схеме реакций 3Ъ.

На схеме 3Ъ применяют следующие определения.

Y_x определен как О, и кольцо А1 представляет собой фенил или 6-членный ароматический гетероцикл, содержащий один или два атома азота; где фенил или гетероцикл необязательно замещен одним или двумя заместителями R₈;

или заместитель R₈ из кольца А1 при атоме, смежном с атомом, несущим заместитель Y_x-Z, взят вместе с заместителем R₆ из Z с образованием бициклического кольца;

и все переменные на схеме 3Ъ являются такими, как определено ниже

1: промежуточное соединение формулы (XIV) можно вводить в реакцию с промежуточным соединением формулы (XV) в присутствии подходящей кислоты, такой как, например, HCl, и подходящего растворителя, такого как, например, EtOH. Полученное в результате промежуточное соединение затем можно вводить в реакцию с подходящим основанием, таким как, например, K₂CO₃, в результате чего получают промежуточное соединение формулы (XLIX);

2: промежуточное соединение формулы (XLIX) можно вводить в реакцию с промежуточным соединением формулы (XLVII) в присутствии подходящей кислоты, такой как, например, АсОН, в результате чего получают промежуточное соединение формулы (L), где R_4a представляет собой водород.

Промежуточное соединение формулы (XLIX) также можно вводить в реакцию с промежуточным соединением формулы (XLVIII) в присутствии подходящей кислоты, такой как, например, АсОН, и подходящего растворителя, такого как, например, EtOH, в результате чего получают промежуточное соединение формулы (L);

3: промежуточное соединение формулы (L) можно превращать в промежуточное соединение формулы (LI) путем введения в реакцию с NBS в присутствии подходящего растворителя, такого как, например, CH3CN;

4: промежуточное соединение формулы (LI) можно вводить в реакцию с промежуточным соединением формулы (XX) в присутствии подходящего катализатора, такого как, например, [1,1'-бис-(дифенилфосфиноЖР)ферроцен]дихлорпалладий (PdCl₂dppf), подходящего основания, такого как, например, фосфат калия (K₃PO₄), и подходящего растворителя или смеси растворителей, такой как, например, диоксан и вода, в результате чего получают соединение формулы (Га-х);

5: промежуточное соединение формулы (XVIII) можно вводить в реакцию с промежуточным соединением формулы (XLVII) в присутствии подходящей кислоты, такой как, например, АсОН, в резуль

- 21 031639 тате чего получают промежуточное соединение формулы (LI), где R_4a представляет собой водород.

Промежуточное соединение формулы (XVIII) также можно вводить в реакцию с промежуточным соединением формулы (XLVIII) в присутствии подходящей кислоты, такой как, например, АсОН, и подходящего растворителя, такого как, например, EtOH, в результате чего получают промежуточное соединение формулы (LI).

9) Схема 3 c) Синтез соединений (I').

Соединения формулы (I'b-а), (Га-а) и (Га-я1), где R_4a' представляет собой Е_1-6алкил-О-карбонил-, и кольцо А1' и другие переменные являются такими, как определено выше, можно также получать согласно изложенной ниже схеме реакций 3 с

1: промежуточное соединение формулы (V) можно вводить в реакцию с промежуточным соединением формулы (LII) в присутствии подходящего основания, такого как, например, этилат натрия (NaOEt), и подходящего растворителя, такого как, например, 2-метил-2-бутанол, в результате чего получают соединение формулы (I'b-а);

2: соединение формулы (I'b-а) можно превращать в соединение формулы (Га-а1) путем введения в реакцию с тионилхлоридом в присутствии подходящего катализатора, такого как, например, DMF, и подходящего растворителя, такого как, например, DCE;

3: соединение формулы (Га-а1), где R_4a представляет собой хлорид, можно превращать в соединение формулы (I'a-а) путем введения в реакцию с монооксидом углерода в присутствии подходящего катализатора, такого как, например, Pd(OAc)₂, подходящего лиганда, такого как, например, 1,2-бис(дифенилфосфино)этан, подходящего основания, такого как, например, Et₃N, и подходящего растворителя, такого как, например, МеОН, в результате чего получают соединение формулы (I'a-а), где R_4a' представляет собой C_1-6алкил-О-карбонил- (например, СООМе).

10) Схема 4.

Соединения формулы (Га-а2) и (Га-а3) и соединения формулы (Ij-c), где все переменные являются такими, как определено выше, можно получать согласно изложенной ниже схеме реакций 4. Кольцо А1 является таким, как определено выше

1: соединение формулы (Га-а2), где R_4a представляет собой метил, можно окислять путем введения в реакцию с подходящим окисляющим средством, таким как, например, SeO₂, в присутствии подходящего растворителя, такого как, например, диоксан. Полученное в результате промежуточное соединение можно превращать в соединение формулы (Га-а3) путем введения в реакцию с подходящей кислотой, такой как, например, H2SO4, в присутствии подходящего растворителя, такого как, например, МеОН;

2: соединение формулы (Га-а3) можно восстанавливать до соединения формулы (Ij-с) в присутствии подходящего восстанавливающего средства, такого как, например, NaBHi, подходящего растворителя или смеси растворителей, такой как, например, THF и метанол (МеОН), необязательно в присутствии

- 22 031639

CaCl2.

11) Схема 5.

Соединения формулы (Ib-b1), (I'b-b2) и соединения формулы (In-a), (In-b) и (In-c) можно получать согласно изложенной ниже схеме реакций 5, где все переменные являются такими, как определено выше

1: промежуточное соединение формулы (V) можно превращать в соединение формулы (I'b-b1) путем введения в реакцию с этилпируватом и N.N-диметилформамид-диметилацетатом (DMF-DMA) в присутствии подходящего растворителя, такого как, например, АсОН;

2: соединение формулы (Ib-b1) можно превращать в соединение формулы (In-a) путем введения в реакцию с подходящим восстанавливающим средством, таким как, например, NaBH₄, и подходящим растворителем, таким как, например, EtOH;

3: соединение формулы (I'b-b1) можно вводить в реакцию с промежуточным соединением формулы (LIII) в присутствии подходящего растворителя, такого как, например, THF, в результате чего получают соединение формулы (I'b-b2);

4: соединение формулы (I'b-b2) можно превращать в соединение формулы (In-b) в присутствии подходящего восстанавливающего средства, такого как, например, NaBH₄, и подходящего растворителя, такого как, например, EtOH;

5: соединение формулы (In-b) можно превращать в соединение формулы (In-c) путем введения в реакцию с комплексом боран-тетрагидрофуран (BH₃-THF) в присутствии подходящего растворителя, такого как, например, THF.

12) Схема 6. Синтез конечных соединений, где кольцо А частично насыщено, X представляет собой ковалентную связь, и Y = (С=О).

Соединения формулы (Io) можно получать согласно изложенной ниже схеме 6 реакций, где все переменные являются такими, как определено выше (tBu представляет собой трет-бутил).

- 23 031639

1: промежуточное соединение формулы (XIX) можно защищать при помощи подходящей защитной группы R₃, такой как, например, SEM-группа, путем введения в реакцию с 2-(триметилсилил)этоксиметила (SEM) хлоридом в присутствии подходящего основания, такого как, например, NaH, и подходящего растворителя, такого как, например, THF или DMF, в результате чего получают промежуточное соединение формулы (XIX-d);

2: промежуточное соединение формулы (XIX-d) можно вводить в реакцию с промежуточным соединением формулы (LIV) в присутствии подходящего катализатора, такого как, например, ацетат палладия или (PdCl₂dppf), подходящего основания, такого как Na₂CO₃, и подходящего растворителя, такого как, например, диоксан, в результате чего получают промежуточное соединение формулы (LV);

3: с промежуточного соединения формулы (LV) можно снимать защиту с получением промежуточного соединения формулы (LVI) путем введения в реакцию с подходящей кислотой, такой как, например, HCl, и подходящим растворителем, таким как, например, ACN;

4: промежуточное соединение формулы (LVI) можно вводить в реакцию с промежуточным соединением формулы (LVII) в присутствии подходящего основания, такого как, например, Et₃N, и подходящего растворителя, такого как, например, DCM, в результате чего получают соединение формулы (Id-a);

5: с соединения формулы (Id-a) можно снимать защиту с получением соединения формулы (Io) при помощи подходящей кислоты, такой как, например, тетрабутиламмония фторид, и подходящего растворителя, такого как, например, THF.

13) Схема 7. Синтез конечных соединений, где кольцо А частично насыщенно, и Y = (С=О). Соединения формулы (I'd) и (Ip) можно получать согласно изложенной ниже схеме реакций 7

1: промежуточное соединение формулы (LI) можно вводить в реакцию с промежуточным соединением формулы (LIV) в присутствии подходящего катализатора, такого как, например, ацетат палладия или (PdCl2dppf), подходящего основания, такого как Na2CO3, и подходящего растворителя, такого как,

- 24 031639 например, диоксан, в результате чего получают промежуточное соединение формулы (LVIII);

2: с промежуточного соединения формулы (LVIII) можно снимать защиту с получением промежуточного соединения формулы (LVIX) путем введения в реакцию с подходящей кислотой, такой как, например, HCl, и подходящим растворителем, таким как, например, ACN;

3: промежуточное соединение формулы (LVIX) можно вводить в реакцию с промежуточным соединение формулы (LVII) в присутствии подходящего основания, такого как, например, Et₃N, и подходящего растворителя, такого как, например DCM, в результате чего получают соединение формулы (I'd);

4: соединение формулы (I'd) можно превращать в соединение формулы (Ip) в присутствии подходящего восстанавливающего средства, такого как, например, NaBH4, и подходящего растворителя, такого как, например, EtOH.

Во всех этих способах получения продукты реакций можно выделять из реакционной среды и при необходимости дополнительно очищать в соответствии с методиками, как правило, известными из уровня техники, такими как, например, экстракция, кристаллизация, растирание в порошок и хроматография. В частности, стереоизомеры можно выделить хроматографическим способом посредством сверхкритической флюидной хроматографии с использованием хиральной неподвижной фазы на основе полисахаридов.

Хирально чистые формы соединений формулы (I) образуют предпочтительную группу соединений. Из этого следует, что хирально чистые формы промежуточных соединений и их солевые формы являются особо пригодными в получении хирально чистых соединений формулы (I) и (I'). Также энантиомерные смеси промежуточных соединений являются пригодными в получении соединений формулы (I) и (I') с соответствующей конфигурацией.

Фармакология.

Было обнаружено, что соединения согласно настоящему изобретению ингибируют активность киназы ROS1. В частности, соединения согласно настоящему изобретению являются эффективными и селективными ингибиторами Ros1.

Как следствие их активности в ингибировании киназ ROS, соединения и композиции с ними будут пригодны в получении средства для предупреждения роста или индуцирования апоптоза неоплазий. Таким образом, ожидается, что соединения или композиции с ними будут подтверждены как пригодные в лечении или предупреждении, в частности лечении, пролиферативных нарушений, таких как виды рака. Кроме того, соединения согласно настоящему изобретению могут быть пригодными в лечении заболеваний, в которых присутствует нарушение пролиферации, апоптоза или дифференциации.

Примеры видов рака, которые можно лечить (или подавлять), включают без ограничения карциному, например карциному мочевого пузыря, рак молочной железы, рак толстой кишки (например, виды рака ободочной и прямой кишки, такие как аденокарцинома толстой кишки и аденома толстой кишки), рак почек, рак уротелия, рак матки, рак эпидермиса, рак печени, рак легкого (например, аденокарциному, мелкоклеточный рак легкого и немелкоклеточные карциномы легкого, плоскоклеточный рак легкого), рак пищевода, рак головы и шеи, рак желчного пузыря, рак яичников, рак поджелудочной железы (например, экзокринную карциному поджелудочной железы), рак желудка, рак желудочно-кишечного тракта (также известный как рак желудка) (например, гастроинтестинальные стромальные опухоли), рак шейки матки, рак эндометрия, рак щитовидной железы, рак предстательной железы или рак кожи (например, эпидермоидный рак или выбухающую дерматофибросаркому); рак гипофиза, опухоль кроветворной ткани лимфоидного происхождения, например, лейкоз, острый лимфоцитарный лейкоз, хронический лимфоцитарный лейкоз, В-клеточную лимфому (например, диффузную В-крупноклеточную лимфому), Т-клеточную лимфому, лимфому Ходжкина, неходжкинскую лимфому, волосатоклеточную лимфому или лимфому Беркетта; опухоль кроветворной ткани миелоидного происхождения, например виды лейкоза, острый и хронический виды миелоидного лейкоза, хронический миеломоноцитарный лейкоз (CMML), миелопролиферативное нарушение, миелопролиферативный синдром, миелодиспластический синдром или промиелоцитарный лейкоз; множественную миелому; фолликулярный рак щитовидной железы; гепатоцеллюлярный рак, опухоль мезенхимального происхождения (например, саркому Юинга), например, фибросаркому или рабдомиосаркому; опухоль центральной или периферической нервной системы, например астроцитому, нейробластому, глиому (такую как мультиформная глиобластома) или шванному; меланому; семиному; тератокарциному; остеосаркому; пигментную ксеродерму; кератоакантому; фолликулярный рак щитовидной железы или саркому Капоши.

В конкретных примерах видов рака, которые можно лечить (или подавлять) включают немелкоклеточный рак легкого (конкретно аденокарциному), холангиокарциному, глиобластому, колоректальный рак, аденокарциному желудка, рак яичников, ангиосаркому, эпителиоидную гемангиоэндотелиому, воспалительные миофибробластические опухоли, рак молочной железы и хронический миелолейкоз.

В одном варианте осуществления соединения согласно настоящему изобретению и композиции с ними могут быть пригодными для применения в лечении или предупреждении, в частности в лечении, немелкоклеточного рака легкого, холангиокарциномы и мультиформной глиобластомы.

В одном варианте осуществления все или некоторые из соединений согласно настоящему изобретению и композиций с ними могут быть пригодными для применения в уменьшении опухолей или продле

- 25 031639 нии жизни пациентов с мутацией G2032R в киназном домене Ros1.

В одном варианте осуществления все или некоторые из соединений согласно настоящему изобретению и композиций с ними могут быть пригодными для применения в уменьшении опухолей или продлении жизни пациентов с мутацией L2026M в киназном домене Ros1.

Соединения согласно настоящему изобретению можно также применять в лечении связанных с кроветворением заболеваний аномальной пролиферации клеток, либо предраковых, либо стабильных, таких как миелопролиферативные заболевания. Миелопролиферативные заболевания (MPD) представляют собой группу заболеваний костного мозга, при котором продуцируется избыток клеток. Они связаны с миелодиспластическим синдромом и могут быть вовлечены в него. Миелопролиферативные заболевания включают истинную полицитемию, эссенциальную тромбоцитемию и первичный миелофиброз. Дополнительное гематологическое нарушение представляет собой гиперэозинофильный синдром. Т-клеточные лимфопролиферативные заболевания включают такие, которые происходят от естественных клеток-киллеров.

Таким образом, при фармацевтических композициях, применениях или способах согласно настоящему изобретению для лечения заболевания или состояния, включающего аномальный рост клеток, заболевание или состояние, включающее аномальный рост клеток, в одном варианте осуществления представляет собой рак.

Соединения согласно настоящему изобретению и композиции с ними могут быть пригодны в лечении других состояний, которые являются результатом нарушений пролиферации, таких как сахарный диабет II типа или инсулиннезависимый сахарный диабет, аутоимунные заболевания, травма головы, инсульт, эпилепсия, нейродегенеративные заболевания, такие как болезнь Альцгеймера, заболевание двигательных нейронов, прогрессирующий надъядерный паралич, кортико-базальная дегенерация и болезнь Пика, например аутоимунные заболевания и нейродегенеративные заболевания.

Также известно, что ROS участвует в апоптозе, пролиферации, дифференциации и транскрипции, и, таким образом, соединения согласно настоящему изобретению также могут быть пригодны в лечении следующих заболеваний, отличных от рака; хронических воспалительных заболеваний, например системной красной волчанки, опосредованного аутоиммунным ответом гломерулонефрита, ревматоидного артрита, псориаза, воспалительного заболевания кишечника, аутоиммунного сахарного диабета, реакций гиперчувствительности в виде экземы, астмы, COPD, ринита и заболеваний верхних дыхательных путей; сердечно-сосудистых заболеваний, например гипертрофии сердца, рестеноза, атеросклероза; нейродегенеративных нарушений, например болезни Альцгеймера, СПИД-ассоциированной деменции, болезни Паркинсона, бокового амиотрофического склероза, пигментного ретинита, спинальной мышечной атрофии и мозжечковой дегенерации; гломерулонефрита; миелодиспластических синдромов, инфаркта миокарда, ассоциированного с ишемическим повреждением, инсульта и реперфузионного повреждения, аритмии, атеросклероза, вызванных токсинами или связанных со злоупотреблением алкоголя заболеваний печени, заболеваний органов кроветворения, например хронической анемии и апластической анемии; дегенеративных заболеваний опорно-двигательной системы, например остеопороза и артрита, чувствительного к аспирину риносинусита, муковисцидоза, рассеянного склероза, заболеваний почек и ассоциированной с раковым заболеванием боли.

Соединения согласно настоящему изобретению и композиции с ними также могут быть применимы для мужской контрацепции.

Соединения согласно настоящему изобретению также могут иметь терапевтические применения в повышении чувствительности опухолевых клеток к лучевой терапии и химиотерапии.

Таким образом, соединения согласно настоящему изобретению можно применять в качестве радиосенсибилизатора и/или хемосенсибилизатора или их можно давать в комбинации с другим радиосенсибилизатором и/или хемосенсибилизатором.

Термин радиосенсибилизатор, используемый в данном документе, определен как молекула, предпочтительно молекула с низким молекулярным весом, вводимая животным в терапевтически эффективных количествах для повышения чувствительности клеток к ионизирующему излучению и/или для повышения эффективности лечения заболеваний, которые поддаются лечению ионизирующим излучением.

Термин хемосенсибилизатор, используемый в данном документе, определен как молекула, предпочтительно молекула с низким молекулярным весом, вводимая животным в терапевтически эффективных количествах для повышения чувствительности клеток к химиотерапии и/или повышения эффективности лечения заболеваний, которые поддаются лечению химиотерапевтическими средствами.

В литературе были предложены несколько механизмов способа действия радиосенсибилизаторов, включающих радиосенсибилизаторы, приводящие к гипоксии клеток (например, 2-нитроимидазольные соединения и соединения, включающие бензотриазина диоксид), имитирующие кислород или, альтернативно, ведущие себя как биовосстановительные средства при гипоксии; радиосенсибилизаторы, не приводящие к гипоксии клеток (например, галогенированные пиримидины), могут быть аналогами оснований ДНК и преимущественно включатся в ДНК раковых клеток и, таким образом, они способствуют индуцированному облучением разрушению молекул ДНК и/или предупреждают нормальные механизмы репарации ДНК; и различные другие предполагаемые механизмы действия были выдвинуты в качестве

- 26 031639 гипотезы для радиосенсибилизаторов в лечении заболевания.

Во многих протоколах лечения рака в настоящее время применяют радиосенсибилизаторы совместно с облучением х-лучами. Примеры активируемых х-лучами радиосенсибилизаторов включают без ограничения следующие: метронидазол, мизонидазол, десметилмизонидазол, пимонидазол, этанидазол, ниморазол, митомицин С, RSU 1069, SR 4233, EO9,

RB 6145, никотинамид, 5-бромдезоксиуридин (BUdR), 5-йоддезоксиуридин (IUdR), бромдезоксицитидин, фтордезоксиуридин (FudR), гидроксимочевину, цисплатин и их терапевтически эффективные аналоги и производные.

При фотодинамической терапии (PDT) видов рака применяют видимый свет в качестве радиационного активатора сенсибилизатора. Примеры фотодинамических радиосенсибилизаторов включают без ограничения следующие: производные гематопорфирина, фотофрин, производные бензопорфирина, этиопорфирин олова, феоборбид-a, бактериохлорофилл-a, нафталоцианины, фталоцианины, фталоцианин цинка и их терапевтически эффективные аналоги и производные.

Радиосенсибилизаторы можно вводить совместно с терапевтически эффективным количеством одного или нескольких других соединений, в том числе без ограничения: соединений, которые способствуют включению радиосенсибилизаторов в целевые клетки; соединений, которые контролируют поток терапевтических средств, питательных веществ и/или кислорода к целевым клеткам; химиотерапевтических средств, которые действуют на опухоль при помощи дополнительного облучения или без него; или других терапевтически эффективных соединений для лечения рака или других заболеваний.

Хемосенсибилизаторы можно вводить совместно с терапевтически эффективным количеством одного или нескольких других соединений, в том числе без ограничения соединений, которые способствуют включению хемосенсибилизаторов в целевые клетки; соединений, которые контролируют поток терапевтических средств, питательных веществ и/или кислорода к целевым клеткам; химиотерапевтических средств, которые действуют на опухоль, или других терапевтически эффективных соединений для лечения рака или другого заболевания. Обнаружено, что антагонисты кальция, например верапамил, пригодны в комбинации с антинеопластическими средствами для придания чувствительности к химиотерапии опухолевым клеткам, устойчивым к общепринятым химиотерапевтическим средствам и для усиления эффективности таких соединений при чувствительных к лекарственному средству злокачественных новообразованиях.

Изобретение относится к соединениям формул (I), (I') и их N-оксидам, фармацевтически приемлемым солям присоединения и сольватам для применения в качестве лекарственного препарата.

Настоящее изобретение также относится к соединениям формул (I), (I') и их N-оксидам, фармацевтически приемлемым солям присоединения и сольватам для применения в ингибировании киназной активности ROS, в частности ROS1.

Соединения согласно изобретению могут быть противораковыми средствами, данный термин также охватывает средства против роста опухолевых клеток и антинеопластические средства.

Настоящее изобретение также относится к соединениям формул (I), (I') и их фармацевтически приемлемым солям присоединения для применения в лечении упомянутых выше заболеваний.

Настоящее изобретение также относится к соединениям формул (I), (I') и их фармацевтически приемлемым солям присоединения для лечения или предупреждения, в частности для лечения, указанных заболеваний.

Настоящее изобретение также относится к соединениям формул (I), (I') и их фармацевтически приемлемым солям присоединения для лечения или предупреждения, в частности для лечения, опосредованных ROS, в частности ROS1, заболеваний или состояний.

Настоящее изобретение также относится к применению соединений формул (I), (I') и их фармацевтически приемлемых солей присоединения для получения лекарственного препарата.

Настоящее изобретение также относится к применению соединений формул (I), (I') и их фармацевтически приемлемых солей присоединения для получения лекарственного препарата для ингибирования ROS, в частности ROS1.

Настоящее изобретение также относится к применению соединений формул (I), (I') и их фармацевтически приемлемых солей присоединения для получения лекарственного препарата для лечения или предупреждения, в частности для лечения, любого из упомянутых выше в данном документе болезненных состояний.

Настоящее изобретение также относится к применению соединений формул (I), (I') и их фармацевтически приемлемых солей присоединения для получения лекарственного препарата для лечения любого из упомянутых выше в данном документе болезненных состояний.

Соединения формул (I), (I') и их фармацевтически приемлемые соли присоединения можно вводить млекопитающим, предпочтительно людям, для лечения или предупреждения любого из упомянутых выше в данном документе заболеваний.

Ввиду применимости соединений формул (I), (I') и их фармацевтически приемлемых солей присоединения представлен способ лечения теплокровных животных, в том числе людей, страдающих любым из упомянутых выше в данном документе заболеваний, или способ предупреждения у теплокровных жи

- 27 031639 вотных, в том числе у людей, любого из упомянутых выше в данном документе заболеваний.

Указанные способы включают введение, т.е. системное или местное введение, предпочтительно пероральное введение, эффективного количества соединения формул (I), (I') или его фармацевтически приемлемой соли присоединения теплокровным животным, включая людей.

Специалисты в области лечения таких заболеваний смогут определить эффективное суточное терапевтическое количество из результатов испытаний, представленных ниже в данном документе. Эффективное суточное терапевтическое количество будет составлять от приблизительно 0,005 до 50 мг/кг, в частности от 0,01 до 50 мг/кг веса тела, более конкретно от 0,01 до 25 мг/кг веса тела, предпочтительно от приблизительно 0,01 до приблизительно 15 мг/кг, более предпочтительно от приблизительно 0,01 до приблизительно 10 мг/кг, еще более предпочтительно от приблизительно 0,01 до приблизительно 1 мг/кг, наиболее предпочтительно от приблизительно 0,05 до приблизительно 1 мг/кг веса тела. Количество соединения в соответствии с настоящим изобретением, также называемого в настоящем документе как активный ингредиент, которое требуется для достижения терапевтического действия, будет, конечно, различным в каждом конкретном случае, например, для определенного соединения, пути введения, возраста и состояния получающего лечения пациента, а также определенного нарушения или заболевания, лечение которого осуществляют.

Способ лечения может также включать введение активного ингредиента в режиме от одного до четырех раз в сутки. В таких способах лечения соединения в соответствии с настоящим изобретением предпочтительно составлены до введения. Как описано в данном документе ниже, подходящие фармацевтические составы получают с помощью известных процедур с применением широко известных и общедоступных ингредиентов.

Соединения согласно настоящему изобретению, которые могут быть подходящими для лечения или предупреждения рака или связанных с раковым заболеванием состояний, можно вводить отдельно или в комбинации с одним или несколькими дополнительными терапевтическими средствами. Комбинированная терапия включает введение единого дозированного фармацевтического состава, который содержит соединение формулы (I) или (I'), его фармацевтически приемлемую соль присоединения и один или несколько дополнительных терапевтических средств, а также введение соединения формулы (I) или (I'), его фармацевтически приемлемой соли присоединения и каждого дополнительного терапевтического средства в своем собственном отдельном дозированном фармацевтическом составе. Например, соединение формулы (I) или (I'), его фармацевтически приемлемую соль присоединения и терапевтическое средство можно вводить пациенту вместе в единой дозированной композиции для перорального применения, такой как таблетка или капсула, или каждое средство можно вводить по отдельности в дозированных составах для перорального применения.

Хотя активный ингредиент можно вводить отдельно, предпочтительно, чтобы он был представлен в виде фармацевтической композиции.

Следовательно, настоящее изобретение также относится к фармацевтической композиции, содержащей фармацевтически приемлемый носитель и в качестве активного ингредиента терапевтически эффективное количество соединения формулы (I) или (I'), его фармацевтически приемлемой соли присоединения.

Носитель или разбавитель должен быть приемлемым в том смысле, что он должен быть совместим с другими ингредиентами композиции и не быть вредным для получающих ее пациентов.

Для облегчения введения соединения в соответствии с настоящим изобретением могут быть составлены в различных фармацевтических формах для целей введения. Соединения в соответствии с настоящим изобретением, в частности соединения формул (I), (I') и фармацевтически приемлемые соли присоединения или какая-либо их подгруппа или комбинация могут быть составлены в различные фармацевтические формы для целей введения. В качестве подходящих композиций могут быть упомянуты все композиции, обычно применяемые для системно вводимых лекарственных средств.

Для получения фармацевтических композиций согласно настоящему изобретению эффективное количество определенного соединения в качестве активного ингредиента объединяют в однородную смесь с фармацевтически приемлемым носителем, при этом носитель может принимать широкое разнообразие форм в зависимости от формы препарата, необходимого для введения. Данные фармацевтические композиции являются желательными в единичной лекарственной форме, подходящей, в частности, для введения перорально, ректально, чрескожно, путем парентеральной инъекции или путем ингаляции. Например, при получении композиций в лекарственной форме для перорального введения, в случае жидких препаратов для перорального введения, таких как суспензии, сиропы, эликсиры, эмульсии и растворы, можно использовать любую из обычных фармацевтических сред, например воду, гликоли, масла, спирты и т.п.; или твердые носители, такие как крахмалы, сахара, каолин, разбавители, смазывающие вещества, связующие, разрыхлители и т.п., в случае порошков, пилюль, капсул и таблеток. Вследствие простоты их введения таблетки и капсулы являются наиболее преимущественными единичными лекарственными формами для перорального введения, в этом случае, очевидно, используют твердые фармацевтические носители. В случае композиций для парентерального введения носитель, как правило, по меньшей мере в значительной степени будет включать в себя стерильную воду, хотя может включать и другие ингреди

- 28 031639 енты, например для улучшения растворимости. Например, можно получать растворы для инъекций, в которых носитель содержит физиологический раствор, раствор глюкозы или смесь физиологического раствора и раствора глюкозы. Например, можно получать растворы для инъекций, в которых носитель содержит физиологический раствор, раствор глюкозы или смесь физиологического раствора и раствора глюкозы. Растворы для инъекций, содержащие соединение формулы (I) или (I'), его фармацевтически приемлемую соль присоединения могут быть составлены в масле для пролонгированного действия. Подходящими маслами для данных целей являются, например, ореховое масло, кунжутное масло, хлопковое масло, кукурузное масло, соевое масло, синтетические сложные эфиры глицерина и длинноцепочечных жирных кислот, а также смеси этих и других масел. Также можно получать суспензии для инъекций, в таком случае можно применять подходящие жидкие носители, суспендирующие средства и т.п. Также включены препараты в твердой форме, которые предназначены для преобразования, непосредственно перед применением, в препараты в жидкой форме. В композициях, подходящих для чрескожного введения, носитель необязательно включает в себя средство, повышающее проницаемость, и/или подходящее смачивающее средство, необязательно в комбинации с подходящими добавками любой природы в минимальных пропорциях, при этом добавки не оказывают значительного вредного воздействия на кожу. Указанные добавки могут облегчать введение в кожу и/или могут быть полезными при получении необходимых композиций. Данные композиции можно вводить различными путями, например в форме трансдермального пластыря, в форме точечного нанесения, в форме мази. Соли присоединения кислоты или основания соединений формулы (I) или (I') вследствие их повышенной водорастворимости по сравнению с соответствующей формой основания или кислоты являются более приемлемыми при получении водных композиций.

Особенно предпочтительным является составление упомянутых выше фармацевтических композиций в единичную лекарственную форму для простоты введения и равномерности дозирования. Единичная лекарственная форма, используемая в настоящем документе, относится к физически отдельным единицам, подходящим в качестве единичных доз, при этом каждая единица содержит предварительно установленное количество активного ингредиента, рассчитанное для получения необходимого терапевтического эффекта в сочетании с требуемым фармацевтическим носителем. Примерами таких единичных лекарственных форм являются таблетки (в том числе делимые или покрытые оболочкой таблетки), капсулы, пилюли, пакетики с порошком, пластинки, суппозитории, растворы или суспензии для инъекций и т.п., а также их отдельные множества.

Для повышения растворимости и/или стабильности соединений формулы (I), (I') и их фармацевтически приемлемых солей присоединения в фармацевтических композициях может быть предпочтительным использование α-, β- или γ-циклодекстринов или их производных, в частности замещенных гидроксиалкилом циклодекстринов, например 2-гидроксипропил-в-циклодекстрина или сульфобутил-βциклодекстрина. Сорастворители, такие как спирты, также могут улучшать растворимость и/или стабильность соединений согласно настоящему изобретению в фармацевтических композициях.

В зависимости от способа введения фармацевтическая композиция будет предпочтительно содержать от 0,05 до 99 вес.%, более предпочтительно от 0,1 до 70 вес.%, еще более предпочтительно от 0,1 до 50 вес.% соединения формулы (I) или (I'), его N-оксида, фармацевтически приемлемой соли присоединения или сольвата и от 1 до 99,95 вес.%, более предпочтительно от 30 до 99,9 вес.%, еще более предпочтительно от 50 до 99,9 вес.% фармацевтически приемлемого носителя, при этом все процентные содержания приводятся в расчете на общий вес композиции.

В качестве другого аспекта настоящего изобретения предусмотрена комбинация соединения согласно настоящему изобретению с другим противораковым средством, в особенности для применения в качестве медикамента, более конкретно для применения в лечении рака или родственных заболеваний.

Для лечения вышеуказанных состояний соединения согласно настоящему изобретению можно преимущественно применять в комбинации с одним или несколькими другими медицинскими средствами, более конкретно, с другими противораковыми средствами или вспомогательными средствами при терапии рака. Примеры противораковых средств или вспомогательных средств (поддерживающих средств при терапии) включают без ограничения следующее:

координационные соединения платины, например цисплатин, необязательно комбинированный с амифостином, карбоплатин или оксалиплатин;

таксановые соединения, например паклитаксел, связанные с белком частицы паклитаксела (Abraxane™) или доцетаксел;

ингибиторы топоизомеразы I, такие как камптотециновые соединения, например иринотекан, SN-38, топотекан, топотекан hcl;

ингибиторы топоизомеразы II, такие как противоопухолевые эпиподофиллотоксины или производные подофиллотоксина, например этопозид, этопозида фосфат или тенипозид;

противоопухолевые алкалоиды барвинка, например винбластин, винкристин или винорелбин; противоопухолевые нуклеозидные производные, например 5-фторурацил, лейковорин, гемцитабин, гемцитабин hcl, капецитабин, кладрибин, флударабин, неларабин;

- 29 031639 алкилирующие средства, такие как азотистый иприт или нитрозомочевина, например циклофосфамид, хлорамбуцил, кармустин, тиотепа, мефалан (мелфалан), ломустин, алтретамин, бусульфан, дакарбазин, эстрамустин, ифосфамид необязательно в комбинации с месной, пипоброман, прокарбазин, стрептозоцин, темозоломид, урацил;

противоопухолевые производные антрациклина, например даунорубицин, доксорубицин необязательно в комбинации с дексразоксаном, доксил, идарубицин, митоксантрон, эпирубицин, эпирубицин hcl, валрубицин;

молекулы, которые целенаправленно воздействуют на IGF-1-рецептор, например пикроподофилин; производные тетракарцина, например тетрокарцин А;

глюкокортикоиды, например преднизон;

антитела, например трастузумаб (антитело HER2), ритуксимаб (антитело CD20), гемтузумаб, гемтузумаб-озогамицин, цетуксимаб, пертузумаб, бевацизумаб, алемтузумаб, экулизумаб, ибритумомаб тиуксетан, нофетумомаб, панитумумаб, тозитумомаб, CNTO328;

антагонисты эстрогеновых рецепторов, или селективные модуляторы эстрогеновых рецепторов, или ингибиторы синтеза эстрогена, например тамоксифен, фулвестрант, торемифен, дролоксифен, фаслодекс, ралоксифен или летрозол;

ингибиторы ароматазы, такие как эксеместан, анастрозол, летразол, тестолактон и ворозол; способствующие дифференцировке средства, такие как ретиноиды, витамин D или ретиноевая кислота и средства, блокирующие метаболизм ретиноевой кислоты (RAMBA), например аккутан;

ингибиторы ДНК-метилтрансферазы, например азацитидин или децитабин;

антифолаты, например преметрекседа динатрий;

антибиотики, например антиномицин D, блеомицин, митомицин С, дактиномицин, карминомицин, дауномицин, левамизол, пликамицин, митрамицин;

ингибиторы обмена веществ, например клофарабин, аминоптерин, цитозин-арабинозид или метотрексат, азацитидин, цитарабин, флоксуридин, пентостатин, тиогуанин;

средства, индуцирующие апоптоз, и антиангиогенные средства, такие как ингибиторы Bcl-2, например YC 137, ВН 312, АВТ 737, госсипол, НА 14-1, TW 37 или декановая кислота;

тубулин-связывающие средства, например комбрестатин, колхицины или нокодазол;

ингибиторы киназ (например, ингибиторы EGFR (рецептора эпидермального фактора роста), MTKI (многоцелевые ингибиторы киназ), mTOR-ингибиторы), например флавоперидол, иматиниба мезилат, эрлотиниб, гефитиниб, дазатиниб, лапатиниб, лапатиниба дитозилат, сорафениб, сунитиниб, сунитиниб малеат, темсиролимус;

ингибиторы фарнезилтрансферазы, например типифарниб;

ингибиторы гистондеацетилазы (HDAC), например бутират натрия, субероиланилидгидроксамовая кислота (SAHA), депсипептид (FR 901228), NVP-LAQ824, R306465, JNJ-26481585, трихостатин А, вориностат;

ингибиторы убиквитин-протеасомного пути, например PS-341, MLN .41 или бортезомиб;

йонделис;

ингибиторы теломеразы, например теломестатин;

ингибиторы матриксной металлопротеиназы, например батимастат, маримастат, приностат или метастат;

рекомбинантные интерлейкины, например альдеслейкин, денилейкин-дифтитокс, интерферональфа 2а, интерферон-альфа 2b, пегинтерферон-альфа 2b;

MAPK-ингибиторы;

ретиноиды, например алитретиноин, бексаротен, третиноин;

триоксид мышьяка;

аспарагиназа;

стероиды, например дромостанолон пропионат, мегестрола ацетат, нандролон (деканоат, фенпропионат), дексаметазон;

агонисты или антагонисты гонадотропин-высвобождающего гормона, например абареликс, гозерелина ацетат, гистрелина ацетат, лейпролида ацетат;

талидомид, леналидомид;

меркаптопурин, митотан, памидронат, пегадемаза, пегаспаргаза, расбуриказа;

миметики ВН3, например АВТ-737;

MEK-ингибиторы, например PD98059, AZD6244, CI-1040;

аналоги колониестимулирующего фактора, например филграстим, пегфилграстим, сарграмостим; эритропоэтин или его аналоги (например, дарбепоэтин-α); интерлейкин-11; опрелвекин; золедронат, золедроновая кислота; фентанил; бисфосфонат; палифермин;

стероидный ингибитор цитохрома Р450, 17-а-гидроксилазы/17,20-лиазы (CYP17), например абиратерон, абиратерона ацетат;

ингибиторы гликолиза, такие как 2-дезоксиглюкоза;

- 30 031639 mTOR-ингибиторы, такие как рапамицины и рапалоги, и ингибиторы mTOR-киназы;

Р13К-ингибиторы и двойные ингибиторы mTOR/PI3K;

ингибиторы аутофагии, такие как хлорохин и гидроксихлорохин;

лекарственные средства-антагонисты андрогеновых рецепторов, например энзалутамид или ARN509;

антитела, которые повторно активируют иммунную реакцию на опухоли, например ниволумаб (к PD-1), ламбролизумаб (к PD-1), ипилимумаб (к CTLA4) и MPDL3280A (к PD-L1).

Изобретение также относится к продукту, содержащему в качестве первого активного ингредиента соединение в соответствии с настоящим изобретением и в качестве дополнительного активного ингредиента одно или несколько противораковых средств, в виде комбинированного препарата для одновременного, раздельного или последовательного применения в лечении пациентов, страдающих от рака.

Одно или несколько других медицинских средств и соединение в соответствии с настоящим изобретением можно вводить одновременно (например, в отдельных или единых композициях) или последовательно в другом порядке. В последнем случае, два или более соединений будут введены на протяжении периода, и в количестве, и способом, что являются достаточными для гарантирования того, что достигнуто преимущественное или синергическое действие. Следует иметь в виду, что предпочтительный способ и порядок введения и соответствующие величины доз и режимы для каждого компонента комбинации будут зависеть от конкретного другого медицинского средства и соединения согласно настоящему изобретению, подлежащих введению, их путей введения, конкретной опухоли, подвергаемой лечению, и конкретного хозяина, подвергаемого лечению. Оптимальный способ и порядок введения, и величины доз, и режим могут быть легко определены специалистами в данной области с применением традиционных способов и с учетом информации, изложенной в данном документе.

Весовое соотношение соединения в соответствии с настоящим изобретением и одного другого противоракового средства или нескольких других противораковых средств, вводимых в виде комбинации, может быть определено специалистом в данной области. Указанное соотношение, и точная доза, и частота введения зависят от конкретного соединения согласно настоящему изобретению и другого(их) противоракового(ых) средства(средств), которые применяют, конкретного состояния, подлежащего лечению, тяжести состояния, подлежащего лечению, возраста, веса тела, пола, рациона, времени введения и общего физического состояния конкретного пациента, способа введения, а также от другого медикаментозного лечения, которое индивидуум может получать, как хорошо известно специалистам в данной области. Более того, очевидно, что эффективное суточное количество может быть снижено или увеличено в зависимости от реакции подвергаемого лечению субъекта и/или в зависимости от оценки врача, назначающего соединения согласно настоящему изобретению. Конкретное весовое соотношение для соединения формулы (I) или (I') согласно настоящему изобретению и другого противоракового средства может находиться в диапазоне от 1/10 до 10/1, более конкретно от 1/5 до 5/1, еще более конкретно от 1/3 до 3/1.

Координационное соединение платины преимущественно вводят в дозе 1-500 мг на квадратный метр (мг/м²) площади поверхности тела, например 50-400 мг/м², в частности для цисплатина - в дозе приблизительно 75 мг/м² и для карбоплатина - в дозе приблизительно 300 мг/м² за курс лечения.

Таксановое соединение преимущественно вводят в дозе 50-400 мг на квадратный метр (мг/м²) площади поверхности тела, например 75-250 мг/м², в частности для паклитаксела - в дозе приблизительно 175-250 мг/м² и для доцетаксела - в дозе приблизительно 75-150 мг/м² за курс лечения.

Камптотециновое соединение преимущественно вводят в дозе 0,1-400 мг на квадратный метр (мг/м²) площади поверхности тела, например 1-300 мг/м², в частности для иринотекана - в дозе приблизительно 100-350 мг/м² и для топотекана - в дозе приблизительно 1-2 мг/м² за курс лечения.

Противоопухолевое производное подофиллотоксина преимущественно вводят в дозе 30-300 мг на квадратный метр (мг/м²) площади поверхности тела, например 50-250 мг/м², в частности для этопозида в дозе приблизительно 35-100 мг/м² и для тенипозида - в дозе приблизительно 50-250 мг/м² за курс лечения.

Противоопухолевый алкалоид барвинка преимущественно вводят в дозе 2-30 мг на квадратный метр (мг/м²) площади поверхности тела, в частности для винбластина - в дозе приблизительно 3-12 мг/м², для винкристина - в дозе приблизительно 1-2 мг/м² и для винорелбина - в дозе приблизительно 10-30 мг/м² за курс лечения.

Противоопухолевое нуклеозидное производное преимущественно вводят в дозе 200-2500 мг на квадратный метр (мг/м²) площади поверхности тела, например 700-1500 мг/м², в частности для 5-FU - в дозе 200-500 мг/м², для гемцитабина - в дозе приблизительно 800-1200 мг/м² и для капецитабина - в дозе приблизительно 1000-2500 мг/м² за курс лечения.

Алкилирующие средства, такие как азотистый иприт или нитрозомочевина, преимущественно вводят в дозе 100-500 мг на квадратный метр (мг/м²) площади поверхности тела, например 120-200 мг/м², в частности для циклофосфамида - в дозе приблизительно 100-500 мг/м², для хлорамбуцила - в дозе приблизительно 0,1-0,2 мг/кг, для кармустина - в дозе приблизительно 150-200 мг/м² и для ломустина - в дозе приблизительно 100-150 мг/м² за курс лечения.

- 31 031639

Противоопухолевое производное антрациклина преимущественно вводят в дозе 10-75 мг на квадратный метр (мг/м²) площади поверхности тела, например 15-60 мг/м², в частности для доксорубицина в дозе приблизительно 40-75 мг/м², для даунорубицина - в дозе приблизительно 25-45 мг/м² и для идарубицина - в дозе приблизительно 10-15 мг/м² за курс лечения.

Антиэстрогенное средство преимущественно вводят в дозе приблизительно 1-100 мг ежесуточно в зависимости от конкретного средства и состояния, подлежащего лечению. Тамоксифен преимущественно вводят перорально в дозе 5-50 мг, предпочтительно 10-20 мг два раза в сутки, продолжая терапию в течение достаточного времени для достижения и поддержания терапевтического действия. Торемифен преимущественно вводят перорально в дозе приблизительно 60 мг один раз в сутки, продолжая терапию в течение достаточного времени для достижения и поддержания терапевтического действия. Анастрозол преимущественно вводят перорально в дозе приблизительно 1 мг один раз в сутки. Дролоксифен преимущественно вводят перорально в дозе приблизительно 20-100 мг один раз в сутки. Ралоксифен преимущественно вводят перорально в дозе приблизительно 60 мг один раз в сутки. Эксеместан преимущественно вводят перорально в дозе приблизительно 25 мг один раз в сутки.

Антитела преимущественно вводят в дозе приблизительно 1-5 мг на квадратный метр (мг/м²) площади поверхности тела или, как известно из уровня техники, в другой дозе. Трастузумаб преимущественно вводят в дозе 1-5 мг на квадратный метр (мг/м²) площади поверхности тела, в частности 2-4 мг/м², за курс лечения.

Данные дозы можно вводить, например, один раз, два раза или больше за курс лечения, который можно повторять, например, каждые 7, 14, 21 или 28 дней.

Следующие примеры иллюстрируют настоящее изобретение. В случае, если не указывается определенная стереохимия для стереоцентра соединения, то это означает, что соединение получали в виде смеси R- и S-энантиомеров.

Для ряда соединений температуры плавления (т.пл.) определяли с помощью системы DSC 1 STAR^e от Mettler Toledo. Температуры плавления измеряли с градиентом температуры ЮЮ/мин до 350°C. Температуры плавления представлены пиковыми значениями.

Примеры

Далее в данном документе термин NaH означает гидрид натрия (60% в минеральном масле); DCM означает дихлорметан; NaBH(OAc)₃ означает натрия триацетоксиборогидрид; TBAF означает тетрабутиламмония фторид; Pd(tBu₃P)₂ означает бис-[трис-(1,1-диметилэтил)фосфин]палладий; P(tBu)₃-HBF₄ означает трис-(1,1-диметилэтил)фосфин.тетрафторборат(1-) (1:1); Ас означает ацетил; MeI означает йодметан; LAH означает алюмогидрид лития; NBS означает N-бромсукцинимид; пром. соед. означает промежуточное соединение; соед. означает соединение; к.т. означает комнатную температуру; р.с. означает реакционную смесь; KOAc означает ацетат калия; BisPin означает бис-(пинаколато)дибором; DCE означает 1,2-дихлорэтан; Boc означает трет-бутоксикарбонил; ACN означает ацетонитрил; EDCI означает №-(этилкарбонимидоил)-Ы,№диметил-1,3-пропандиамина моногидрохлорид; НОВТ означает 1-гидрокси-Ш-бензотриазол; МеОН означает метанол; LC означает жидкостную хроматографию; LCMS означает жидкостную хроматографию/масс-спектрометрию; HPLC означает высокоэффективную жидкостную хроматографию; TFA означает трифторуксусную кислоту; т.пл. означает температуру плавления; N₂ означает азот; TBDMS означает трет-бутилдиметилсилил; TBDMSO или OTBDMS означает трет-бутилдиметилсилилокси; DBAD означает дитрет-бутилазодикарбоксилат; RP означает обратную фазу; мин означает минуту(ы); EtOAc означает этилацетат; Et₃N означает триэтиламин; EtOH означает этанол; THF означает тетрагидрофуран; Celite® означает диатомовую землю; DMF означает N.N-диметилформамид; DMSO означает диметилсульфоксид; iPrOH означает 2-пропанол; iPrNH₂ означает изопропиламин; SFC означает сверхкритическую флюидную хроматографию; DIPEA означает КН-диизопропилэтиламин; Pd(PPh₃)₄ означает тетракис(трифенилфосфин)палладий; вес./об. означает вес/объем; PPh₃ означает трифенилфосфин; PdCl₂(PPh₃)₂ означает бис-(трифенилфосфин)палладия (II) дихлорид; нанесенный PPh₃ означает трифенилфосфин, нанесенный на подложку (связанный с полимером); Et₂O означает диэтиловый эфир; Pd/C означает палладий на углеродной подложке; Pt/C означает платину на углеродной подложке; Pd(OAc)₂ означает палладия (II) ацетат; Et означает этил; Me означает метил; ч означает часы; и PdCl₂(dppf) означает [1,1'-бис-(дифенилфосфино-kP)ферроцен]дихлорпалладий.

Далее в данном документе пром. соед. 1 или 1 представляет собой 4-[[4-(1-метилэтил)фенил]метокси]бензолацетонитрил; пром. соед. 2 или 2 представляет собой 4-пиридинкарбонитрил; пром. соед. 5 или 5 представляет собой (2-бромэтил)дифенилсульфониятрифторметан-сульфонат.

Получение промежуточных соединений и конечных соединений.

Пример А1. Получение соединения 1.

a) Синтез промежуточного соединения 3

- 32 031639

‘CN .nh₂

К раствору 1 (= пром. соед. 1 = 4-[[4-(1-метилэтил)фенил]метокси]бензолацетонитрила) (30,5 г,

2-метил-2-бутоксид (64,5 мл, 115 ммоль). Раствор мгновенно становился красным, и его перемешивали в течение одного часа. Смесь гасили водой и концентрировали in vacuo. Оставшийся водный слой разбавляли водой и экстрагировали с помощью ПСМ (3 раза). Объединенные органические слои высушивали над MgSO₄ и выпаривали in vacuo с получением желтого твердого вещества. Остаток растирали в Et₂O и отфильтровывали на стеклянной фритте с получением 25,8 г промежуточного соединения 3 в виде светло-желтого твердого вещества (61%).

b) Синтез промежуточного соединения 4

К смеси 3 (10 г, 27 ммоль) в этаноле (47 мл) и уксусной кислоте (47 мл) добавляли моногидрат гидразина (16,5 мл, 270 ммоль). Смесь в течение ночи нагревали с обратным холодильником и охлаждали до к.т. Добавляли воду и ПСМ, а затем K^O₃ в виде твердого вещества. Смесь экстрагировали с помощью ПСМ, органический слой отделяли, высушивали над MgSO₄, фильтровали и выпаривали досуха. Остаток помещали в Et₂O. Осадок отфильтровывали и высушивали in vacuo с получением 7,2 г промежуточного соединения 4. Фильтрат выпаривали с получением 3 г, которые очищали при помощи препаративной LC (неподвижная фаза: SiOH с зернами неправильной формы, 15-40 мкм, 300 г, MERCK, подвижная фаза: 95% NH₄OH, 5% ПСМ, 0,5% МеОН). Чистые фракции собирали и растворитель выпаривали досуха с получением 1 г промежуточного соединения 4. Общий выход: 8,2 г промежуточного соединения 4 (79%).

c) Синтез соединения 1

К раствору 4 (6,3 г, 16,4 ммоль) в DMF (106 мл) добавляли диизопропилэтиламин (6,9 мл, 40 ммоль) и 5 (8,9 г, 20,1 ммоль) при к.т. Раствор нагревали при 90°С в течение 1 ч 30 мин, затем охлаждали до к.т. Неочищенную смесь разбавляли с помощью EtOAc и дважды промывали насыщенным водным раствором Nad. Органический слой отделяли, высушивали над MgSO₄, отфильтровывали и выпаривали in vacuo. Остаток очищали при помощи препаративной LC (неподвижная фаза: SiOH с зернами неправильной формы, 20-45 мкм, 120 г, СИАСЕ, градиент подвижной фазы: от 97% DCM, 3% МеОН, 0,1% NH₄OH до 95% DCM, 5% МеОН, 0,1% NH₄OH). Чистые фракции собирали и выпаривали растворитель досуха. Остаток кристаллизовали из ACN и осадок отфильтровывали и высушивали in vacuo с получением 2,6 г соединения 1 (39%).

Пример А2. Получение соединения 2.

a) Синтез промежуточного соединения 6

CN

К раствору АС№ (6 мл, 115 ммоль) этилизоникотината (51,6 мл, 345 ммоль) в сухом THF (500 мл) медленно добавляли калия 2-метил-2-бутоксид (48,3 мл, 345 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при к.т. в течение 18 ч, гасили водой и выпаривали in vacuo. Твердое вещество растирали с Et₂O, фильтровали на стеклянной фритте и промывали с помощью Et₂O (3 раза) с получением 17,3 г промежуточного соединения 6, желтого твердого вещества (количественный выход).

b) Синтез промежуточного соединения 7

- 33 031639

К суспензии 6 (11,9 г, 81,9 ммоль) в EtOH (140 мл) добавляли этилкарбазат (10,2 г, 98,2 ммоль) и HCl 37% (7,54 мл, 90,3 ммоль). Смесь перемешивали при к.т. в течение 2 ч и при 50°C в течение 1 ч. Смесь охлаждали до к.т. и осадок отфильтровывали. Фильтрат выпаривали досуха и помещали в DCM. Органический слой промывали насыщенным раствором NaHCO₃, и высушивали над MgSO₄, и выпаривали in vacuo с получением 11,98 г промежуточного соединения 7, светло-бежевого твердого вещества (63%). Неочищенный продукт использовали на следующей стадии без очистки.

c) Синтез промежуточного соединения 8

К раствору 7 (2,90 г, 12,5 ммоль) в DCM (110 мл) при 0°C частями добавляли NBS (2,44 г, 13,7 ммоль). Смесь перемешивали при к.т. в течение 1 ч и затем добавляли воду. Органический слой отделяли, высушивали над MgSO₄, отфильтровывали и выпаривали in vacuo с получением коричневого масла, которое растирали в Et₂O. Твердое вещество фильтровали на стеклянной фритте, промывали с помощью Et₂O и высушивали in vacuo с получением 3,72 г промежуточного соединения 8, прозрачного коричневого твердого вещества (96%).

(2,4 г, 7,7 ммоль) и Et₃N (10,7 мл, 77,1 ммоль) в МеОН (50 мл) перемешивали при к.т. в течение ночи. Смесь выпаривали in vacuo с получением клейкого темно-коричневого масла. Неочищенную смесь помещали в смесь DCM/MeOH (95:5) и промывали насыщенным раствором K₂CO₃. Органический слой высушивали над MgSO₄, отфильтровывали и выпаривали in vacuo с получением 1,5 г. Остаток очищали при помощи препаративной LC (неподвижная фаза: SiOH с зернами неправильной формы, 20-45 мкм, 40 г, GRACE, подвижная фаза: 40% гептана, 10% МеОН, 50% EtOAc). Чистые фракции собирали и растворитель выпаривали досуха с получением 0,65 г промежуточного соединения 9 (35%).

e) Синтез промежуточного соединения 10

К раствору 9 (0,65 г, 2,7 ммоль) в DMF (10 мл) добавляли DIPEA (1,2 мл, 6,8 ммоль) и 5 (0,96 г, 3,3 ммоль). Раствор нагревали при 90°C в течение 3 ч, затем охлаждали до к.т. Добавляли EtOAc и 10% водный раствор NH.|Cl. Органический слой отделяли, промывали водой и насыщенным водным раствором NaCl, высушивали над MgSO₄, фильтровали и выпаривали. Остаток очищали при помощи препаративной LC (SiOH с зернами неправильной формы, 15-40 мкм, 40 г, Grace, подвижная фаза: 95/5 DCM/MeOH). Чистые фракции собирали и растворитель выпаривали досуха с получением 280 мг промежуточного соединения 10), бежевого твердого вещества (39%).

f) Синтез промежуточного соединения 11

В атмосфере N₂ раствор 4-бром-2,5-дифторфенола (12 г, 58 ммоль) в ACN (150 мл) обрабатывали K₂CO₃ (16 г, 117 ммоль) и 4-изопропилбензилбромидом (9,7 мл, 58 ммоль) и реакционную смесь пере

- 34 031639 мешивали с применением обратного холодильника в течение 2 ч. Раствор фильтровали и концентрировали с получением 20 г промежуточного соединения 11, бесцветного масла (100%). Продукт использовали в таком виде на следующей стадии реакции.

g) Синтез промежуточного соединения 12

В сосуде Шленка смесь 11 (10,0 г, 29 ммоль), KOAc (8,6 г, 88 ммоль), BisPin (11 г, 44 ммоль) в сухом DME (150 мл) осторожно продували с помощью N₂. Добавляли PdCl₂(dppf)₂ (2,4 г, 2,9 ммоль) и реакционную смесь опять продували один раз с помощью N₂. Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при 100°C. Реакционную смесь разбавляли с помощью EtOAc и промывали водой (один раз) и солевым раствором (два раза). Органическую фазу высушивали над MgSO₄ и выпаривали in vacuo с получением коричневого масла. Масло очищали при помощи препаративной LC (SiOH с зернами неправильной формы, 15-40 мкм, 330 г, GraceResolv, подвижная фаза: гептан, 90%, EtOAc, 10%). Чистые фракции собирали и растворитель выпаривали досуха с получением 10,9 г промежуточного соединения 12, желтого масла (96%).

h) Синтез соединения 2

и K₃PO₄ (1,3 г, 6,0 ммоль) в 1,4-диоксане

Смесь 10 (400 мг, 1,5 ммоль), 12 (878 мг, 2,3 ммоль) (10 мл) и Н₂О (3,5 мл) в герметизированной пробирке продували с помощью N₂. Добавляли Pd₂(dba)₃ (81 мг, 75 мкмоль) и P(tBu)₃-HBF₄ (44 мг, 0,15 ммоль), смесь опять продували с помощью N₂ и нагревали при 120°C с использованием однорежимного микроволнового устройства (Biotage Initiator EXP 60) с выходной мощностью, варьирующей от 0 до 400 Вт, в течение 30 мин [фиксированное время удерживания]. Смесь разбавляли с помощью DCM и воды, органический слой отделяли, высушивали над MgSO₄, отфильтровывали и выпаривали. Остаток очищали при помощи препаративной LC (неподвижная фаза: Interchim, 40 г, подвижная фаза: 96% DCM, 4% МеОН). Необходимые фракции собирали и растворитель выпаривали досуха с получением 550 мг бесцветного масла, которое растирали в Et₂O, и образованное белое твердое вещество фильтровали и высушивали с получением 358 мг, белого твердого вещества (не достаточно чистого). Твердое вещество добавляли к фильтрату и концентрировали с получением 570 мг, светло-желтого масла, которое очищали при помощи препаративной LC (неподвижная фаза: сферические зерна диоксида кремния без покрытия, 5 мкм, 150x30,0 мм, градиент подвижной фазы: от 70% гептана, 2% МеОН (+10% NH₄OH), 28% EtOAc до 0% гептана, 20% МеОН (+10% NH₄OH), 80% EtOAc). Чистые фракции собирали и растворитель выпаривали досуха с получением 370 мг, которые растирали в Et₂O. Образованное белое твердое вещество фильтровали и высушивали с получением 245 мг соединения 2, белого твердого вещества (36%). Т.пл. = 153°C (DSC).

Пример A3. Получение соединения 3.

a) Синтез промежуточного соединения 13

Раствор 2-бром-5-гидроксибензонитрила (6,29 г, 31,8 ммоль) в ACN (90 мл) и DMF (10 мл) обрабатывали с помощью K₂CO₃ (4,83 г, 34,9 ммоль) и 4-изопропилбензилбромида (7,11 г, 33,4 ммоль) при к.т. Реакционную смесь перемешивали в течение 18 ч при к.т. Затем добавляли воду и EtOAc и органический слой промывали солевым раствором, отделяли, высушивали над MgSO₄, фильтровали и концентрировали in vacuo с получением 11,4 г промежуточного соединения 13, белого твердого вещества (количественная оценка).

- 35 031639

b) Синтез промежуточного соединения 14

Смесь 13 (4,72 г, 14,3 ммоль), BisPin (5,45 г, 21,4 ммоль) и KOAc (4,21 г, 42,9 ммоль) в DME (90 мл) осторожно продували с помощью N₂. Добавляли PdCl₂(dppf)₂ (1,17 г, 1,43 ммоль) и реакционную смесь опять продували один раз с помощью N₂. Реакционную смесь перемешивали при 100°C в течение 18 ч. Реакционную смесь разбавляли с помощью EtOAc и воды. Органический слой промывали солевым раствором и насыщенным раствором NaHCO₃, высушивали над MgSO₄, фильтровали и выпаривали in vacuo с получением 9,09 г черного твердого вещества. Твердое вещество очищали при помощи препаративной LC (SiOH с зернами неправильной формы, 15-40 мкм, 220 г, Grace, градиент подвижной фазы: от EtOAc 0%, гептана 100% до EtOAc 30%, гептана 70%). Чистые фракции собирали и растворитель выпаривали досуха с получением 3,26 г промежуточного соединения 14, белого твердого вещества (60%).

c) Синтез соединения 3

Смесь 10 (150 мг, 566 мкмоль), 14 (320 мг, 849 мкмоль) и K₃PO₄ (430 мг, 2,26 ммоль) в 1,4-диоксане (8,00 мл) и Н₂О (1,80 мл) в герметизированной пробирке продували с помощью N₂. Добавляли Pd₂(dba)₃ (30,2 мг, 28,3 мкмоль) и P(tBu)₃-HBF₄ (16,4 мг, 56,6 мкмоль), смесь опять продували с помощью N₂ и нагревали при 120°C с использованием однорежимного микроволнового устройства (Biotage Initiator EXP 60) с выходной мощностью, варьирующей от 0 до 400 Вт, в течение 30 мин [фиксированное время удерживания]. Смесь разбавляли с помощью DCM и воды, органический слой отделяли, высушивали над MgSO₄, отфильтровывали и выпаривали in vacuo с получением 422 мг, черного масла. Остаток очищали при помощи препаративной LC (неподвижная фаза: диоксид кремния Sunfire, 5 мкм, 150x30,0 мм, градиент подвижной фазы: от 0,2% NH₄OH, 98% DCM, 2% МеОН до 1% NH₄OH, 90% DCM, 10% МеОН). Чистые фракции собирали и растворитель выпаривали досуха с получением 160 мг белой пены (65%). Продукт кристаллизовали из ACN. Осадок фильтровали на стеклянной фритте и твердое вещество промывали с помощью Et₂O (два раза) и высушивали в высоком вакууме при 50°C в течение 2 ч. С получением 86 мг соединения 3, белого твердого вещества (35%). Т.пл. = 191°C (DSC).

Пример А4. Получение соединения 4.

a) Синтез промежуточного соединения 15

Раствор 4-изопропилбензилового спирта (3,1 г, 20 ммоль) в сухом DMF (50 мл) обрабатывали при 0°C с помощью NaH 60% (818 мг, 20 ммоль). После перемешивания в течение 1 ч при к.т. добавляли 5-бром-2-фторпиридин (3,0 г, 17 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при к.т. в течение 3 дней. Реакционную смесь гасили водой 200 мл и образованное белое твердое вещество фильтровали. Данное твердое вещество солюбилизировали в EtOAc и высушивали на MgSO₄, фильтровали и концентрировали с получением 5,9 г промежуточного соединения 15, белого твердого вещества (100%).

b) Синтез промежуточного соединения 16

BisPin (5,2 г, 20 ммоль) и KOAc (3,3 г, 34 ммоль) добавляли к раствору 15 (5,2 г, 17 ммоль) в 1,4-диоксане (57 мл). Раствор продували с помощью N₂ и загружали PdCl₂(PPh₃)₂ (0,60 г, 0,85 ммоль).

- 36 031639

Полученный в результате раствор опять продували с помощью N₂ и перемешивали при 80°C в течение 17 ч. После разбавления в EtOAc неочищенный материал промывали водой и солевым раствором. Органический слой высушивали над MgSO₄ и выпаривали с получением 12 г коричневого масла. Данное масло очищали при помощи препаративной LC (SiOH с зернами неправильной формы, 15-40 мкм, 120 г, GraceResolv, подвижная фаза: гептан/EtOAc 80/20). Чистые фракции собирали и растворитель выпаривали с получением 5,6 г промежуточного соединения 16, коричневого твердого вещества (93%).

с) Синтез соединения 4

Смесь 10 (150 мг, 566 мкмоль), 16 (300 мг, 0,849 ммоль) и K₃PO₄ (480 мг, 2,26 ммоль) в 1,4-диоксане

гревали при 120°C с использованием однорежимного микроволнового устройства (Biotage Initiator EXP 60) с выходной мощностью, варьирующей от 0 до 400 Вт, в течение 30 мин. [фиксированное время удерживания]. Смесь вливали в DCM и промывали водой. Органический слой отделяли, высушивали над MgSO₄, отфильтровывали и выпаривали in vacuo с получением 475 мг черного масла. Остаток очищали при помощи препаративной LC (неподвижная фаза: устойчивый диоксид кремния, 5 мкм, 150x30,0 мм, градиент подвижной фазы: от 0,5% NH₄OH, 95% DCM, 5% МеОН до 1,3% NH₄OH, 86% DCM, 13% МеОН). Чистые фракции собирали и растворитель выпаривали досуха с получением 200 мг бесцветного масла. Данное масло растирали в Et₂O с получением 167 мг соединения 4, грязно-белой пены (63%).

Т.пл. = 159°C (DSC).

Пример А5. Получение соединения 5.

a) Синтез промежуточного соединения 17 ,Вг

В атмосфере N₂ раствор 4-бром-3-фторфенола (11 г, 58 ммоль) в ACN (150 мл) обрабатывали с помощью K₂CO₃ (16 г, 117 ммоль) и 4-изопропилбензилбромида (9,7 мл, 58 ммоль) и реакционную смесь перемешивали с применением обратного холодильника в течение 2 ч. Раствор фильтровали и концентрировали с получением 18,9 г промежуточного соединения 17, бесцветного масла (100%), которое использовали в таком виде на следующей стадии реакции.

b) Синтез промежуточного соединения 18

Первый способ.

В герметизированной пробирке смесь 17 (1,00 г, 3,09 ммоль), KOAc (0,911 г, 9,28 ммоль), BisPin

0,309 ммоль) и реакционную смесь опять продували один раз с помощью N₂, затем перемешивали в течение 17 ч при 100°C. Реакционную смесь разбавляли с помощью EtOAc и промывали водой (один раз) и солевым раствором (3 раза). Органическую фазу высушивали над MgSO4, фильтровали и выпаривали in vacuo с получением 2,00 г коричневого масла. Остаток очищали при помощи препаративной LC (SiOH с зернами неправильной формы, 15-40 мкм, 50 г, MERCK, градиент подвижной фазы: от 100% гептана, 0% EtOAc до 80% гептана, 20% EtOAc). Чистые фракции собирали и растворитель выпаривали досуха с получением 903 мг промежуточного соединения 18, бесцветного масла (79%).

- 37 031639

Второй способ.

К раствору сложного пинаколового эфира 4-гидрокси-2-фторфенилбороновой кислоты (1,10 г,

4,62 ммоль) в ACN (45 мл) добавляли 4-изопропилбензилбромид (0,985 г, 4,62 ммоль) и K₂CO₃ (1,28 г,

9,24 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 80°C в течение 2 ч и охлаждали до к.т. Смесь фильтровали на стеклянной фритте и выпаривали in vacuo с получением 1,78 г промежуточного соединения 18, бесцветного масла, которое кристаллизовали в виде белого твердого вещества (100%). Промежуточное соединение 18 использовали без очистки на следующей стадии реакции.

c) Синтез соединения 5

ли при 120°C с использованием однорежимного микроволнового устройства (Biotage Initiator EXP 60) с выходной мощностью, варьирующей от 0 до 400 Вт, в течение 30 мин [фиксированное время удерживания]. Смесь разбавляли с помощью DCM и воды, органический слой отделяли, высушивали над MgSO₄, отфильтровывали и выпаривали in vacuo. Остаток очищали при помощи препаративной LC (неподвижная фаза: GRACE, 40 г, градиент подвижной фазы: от 0,2% NH₄OH, 98% DCM, 2% МеОН до 1% NH₄OH, 89% DCM, 10% МеОН). Необходимые фракции собирали и растворитель выпаривали досуха с получением 280 мг остатка. Данный остаток кристаллизовали из Et₂O. Твердое вещество отфильтровывали и высушивали с получением 140 мг соединения 5 (31%). Т.пл. = 141°C (DSC).

Пример А6. Получение соединения 6.

а) Синтез промежуточного соединения 19 он

Вг

LAH (5,52 г, 145 ммоль) добавляли к перемешанному раствору метил-3-бром-4-изопропилбензоата (34,0 г, 132 ммоль) в THF (600 мл) при -20°C. Реакционную смесь перемешивали при -20°C в течение 2 ч. Затем реакционную смесь гасили с помощью 5,3 мл воды, 5,5 мл NaOH 3н. и 16 мл воды. Осадок фильтровали и промывали с помощью DCM. Фильтрат выпаривали in vacuo с получением 20,0 г промежуточного соединения 19, желтого масла (66%).

b) Синтез промежуточного соединения 20 он

в DMF (10 мл) в герметизированной пробирке. Смесь нагревали при 120°C в течение 60 мин с использованием однорежимного микроволнового устройства (Biotage) с выходной мощностью, варьирующей от 0 до 400 Вт. Реакционную смесь охлаждали до к.т., выливали в ледяную воду и экстрагировали с помощью DCM. Органический слой отделяли, высушивали над MgSO₄, фильтровали и растворитель выпаривали досуха с получением 2,6 г остатка. Остаток очищали при помощи препаративной LC на (SiOH с зернами неправильной формы, 15-40 мкм, 50 г, Merck, подвижной фазе: 70/30 гептан/EtOAc). Чистые фракции собирали и выпаривали досуха с получением 1,4 г промежуточного соединения 20 (57%).

c) Синтез промежуточного соединения 21

DBAD (1,3 г, 5,5 ммоль) добавляли частями к раствору 20 (0,8 г, 4,6 ммоль), сложного пинаколового эфира 4-гидроксифенилбороновой кислоты (1,2 г, 5,5 ммоль), нанесенного PPh₃ (1,7 г, 5,5 ммоль) в сухом THF (30 мл). Смесь перемешивали при к.т. в течение ночи. Смесь фильтровали и фильтрат выпа

- 38 031639 ривали с получением 3,7 г, желтого масла. Неочищенный остаток очищали при помощи препаративной LC (SiOH с зернами неправильной формы, 30 мкм, 80 г, Interchim, подвижная фаза: гептан/EtOAc 90/10). Чистые фракции собирали и растворитель выпаривали досуха с получением 1,0 г промежуточного соединения 21, бесцветного масла, которое быстро кристаллизовали в белое твердое вещество (58%).

d) Синтез соединения 6

Смесь 10 (150 мг, 566 мкмоль), 21 (320 мг, 849 мкмоль) и K₃PO₄ (430 мг, 2,26 ммоль) в 1,4-диоксане (8,00 мл) и Н₂О (1,80 мл) в герметизированной пробирке продували с помощью N₂. Добавляли Pd₂(dba)₃ (30,2 мг, 28,3 мкмоль) и P(tBu)₃-HBF₄ (16,4 мг, 56,6 мкмоль), смесь опять продували с помощью N₂ и нагревали при 120°C с использованием однорежимного микроволнового устройства (Biotage Initiator EXP 60) с выходной мощностью, варьирующей от 0 до 400 Вт, в течение 30 мин [фиксированное время удерживания]. Смесь разбавляли с помощью DCM и воды, органический слой отделяли, высушивали над MgSO₄, отфильтровывали и выпаривали in vacuo с получением 517 мг черного масла. Остаток очищали при помощи препаративной LC (неподвижная фаза: диоксид кремния Sunfire, 5 мкм, 150x30,0 мм, градиент подвижной фазы: от 0,2% NH₄OH, 98% DCM, 2% МеОН до 1% NH₄OH, 89% DCM, 10% МеОН). Чистые фракции собирали и растворитель выпаривали досуха с получением 177 мг белой пены, которую растирали в Et₂O. Осадок фильтровали на стеклянной фритте и твердое вещество высушивали в высоком вакууме при 50°C в течение 2 ч с получением 139 мг соединения 6, грязно-белого твердого вещества (56%). Т.пл. = 158°C (DSC).

Пример А7. Получение соединения 7.

а) Синтез промежуточного соединения 22

В атмосфере азота DBAD (15,5 г, 67 ммоль) добавляли частями к раствору (4-циклопропилфенил)метанола (10 г, 67 ммоль), сложного пинаколового эфира 4-гидроксифенилбороновой кислоты (14,8 г, 67 ммоль) и PPh₃ (17,7 г, 67 ммоль) в сухом THF (500 мл). Смесь перемешивали при к.т. в течение ночи. THF выпаривали с получением 64 г остатка (желтого масла). Неочищенный остаток очищали при помощи препаративной LC (SiOH с зернами неправильной формы, 30 мкм, 220 + 330 г, GraceResolv™, подвижная фаза: 90% гептана, 10% EtOAc). Чистые фракции собирали и растворитель выпаривали с получением 19,7 г промежуточного соединения 22, белого твердого вещества (83%).

b) Синтез соединения 7

Смесь 10 (400 мг, 1,5 ммоль), 22 (793 мг, 2,3 ммоль) и K3PO4 (1,3 г, 6,0 ммоль) в 1,4-диоксане (10 мл) и Н₂О (3,5 мл) в герметизированной пробирке продували с помощью N₂. Добавляли Pd₂(dba)₃ (81 мг, 75 мкмоль) и P(tBu)₃-HBF₄ (44 мг, 0,15 ммоль), смесь опять продували с помощью N₂ и нагревали при 120°C с использованием однорежимного микроволнового устройства (Biotage Initiator EXP 60) с выходной мощностью, варьирующей от 0 до 400 Вт, в течение 30 мин [фиксированное время удерживания]. Смесь разбавляли с помощью DCM и воды, органический слой отделяли, высушивали над MgSO₄, отфильтровывали и выпаривали in vacuo с получением 1,37 г. Остаток очищали при помощи препаратив ной LC (неподвижная фаза: graceResolv™, 40 г, подвижная фаза: 96% DCM, 4% МеОН). Чистые фракции собирали и растворитель выпаривали досуха с получением 260 мг бесцветного масла, которое растирали в Et₂O. Образованное белое твердое вещество фильтровали и высушивали с получением 175 мг соедине

- 39 031639 ния 7, белого твердого вещества (28%). Т.пл. = 159°C (DSC). Пример А8. Получение соединения 8.

а) Синтез промежуточного соединения 23

H₂SO₄ (1,1 мл, 21 ммоль) медленно добавляли к раствору 4-бром-2,3-дифторбензойной кислоты (2,5 г, 10,5 ммоль) в МеОН (40 мл). Смесь нагревали при 50°C в течение 3 дней. Смесь концентрировали in vacuo, и остаток разделяли между EtOAc и водой, и повышали его основность с помощью K₂CO₃. Объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали над MgSO₄, фильтровали и концентрировали in vacuo с получением 2,6 г промежуточного соединения 23, бесцветного масла, которое кристаллизовали в белое твердое вещество (98%).

Ъ) Синтез промежуточного соединения 24

В сосуде Шленка смесь 23 (2,5 г, 10 ммоль), фторида цезия (3,3 г, 22 ммоль) и 2-изопропенил4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолана (2,0 мл, 11 ммоль) в сухом THF (60 мл) продували с помощью

80°C в течение ночи. Добавляли воду и EtOAc, органический слой отделяли, промывали солевым раствором, высушивали на MgSO₄, фильтровали над Celite® и выпаривали. Остаток очищали при помощи препаративной LC (SiOH с зернами правильной формы, 30 мкм, 80 г, GraceResolv™, подвижная фаза: гептан/EtOAc 95/5). Чистые фракции собирали и растворитель выпаривали досуха с получением 1,8 г промежуточного соединения 24, желтого масла (85%).

c) Синтез промежуточного соединения 25 (1,8 г, 8,5 ммоль) в сухом THF (14 мл) добавляли по каплям к суспензии LAH (0,39 г, 10 ммоль) в сухом THF (14 мл) при 0°C в атмосфере N₂. Смесь перемешивали в течение 30 мин. Очень медленно до бавляли воду (1,4 мл), затем DCM (75 мл) и перемешивали в течение ночи. Добавляли MgSO₄, и нерастворимое вещество фильтровали на подушке из Celite®, и выпаривали досуха с получением 1,5 г смеси промежуточного соединения 25, коричневого масла. Смесь использовали в таком виде на следующей стадии.

d) Синтез промежуточного соединения 26 он (1,5 г, 8,1 ммоль), формиат аммония (3,0 г, 49 ммоль), палладий на углеродной подложке 10% (433 мг, 0,41 ммоль), THF (14 мл) и МеОН (44 мл) нагревали с обратным холодильником в течение мин. Смесь фильтровали через Celite®, промывали с помощью EtOAc и фильтрат концентрировали. Остаток разделяли между солевым раствором и EtOAc. Органический слой отделяли, высушивали на MgSO₄, фильтровали и выпаривали досуха с получением 1,47 г промежуточного соединения 26, бесцветного масла (97%).

у) Синтез промежуточного соединения 27 ¹ F

В атмосфере N₂ DBAD (2,2 г, 9,5 ммоль) добавляли частями к раствору 26 (1,47 г, 7,9 ммоль), сложного пинаколового эфира 4-гидроксифенилбороновой кислоты (2,1 г, 9,5 ммоль) и нанесенного PPh₃ (3,0 г, 9,5 ммоль) в сухом THF (60 мл). Смесь перемешивали при к.т. в течение 3 дней. Нанесенный PPh₃ фильтровали и фильтрат выпаривали с получением 8 г желтого масла. Неочищенный остаток очищали

- 40 031639 при помощи препаративной LC (SiOH с зернами неправильной формы, 30 мкм, 120 г, GraceResolv™, подвижная фаза: гептан/EtOAc 90/10). Чистые фракции собирали и растворитель выпаривали досуха с получением 2,36 г промежуточного соединения 27, светло-желтого масла, которое кристаллизовалось в бежевое твердое вещество (77%).

f) Синтез соединения 8

Смесь 10 (400 мг, 1,5 ммоль), 27 (878 мг, 2,3 ммоль) и K₃PO₄ (1,3 г, 6,0 ммоль) в 1,4-диоксане

мг, 75 мкмоль) и P(tBu)₃-HBF₄ (44 мг, 0,15 ммоль), смесь опять продували с помощью N₂ и нагревали при

120°C с использованием однорежимного микроволнового устройства (Biotage Initiator EXP 60) с выходной мощностью, варьирующей от 0 до 400 Вт, в течение 30 мин [фиксированное время удерживания]. Смесь разбавляли с помощью DCM и воды, органический слой отделяли, высушивали над MgSO₄, отфильтровывали и выпаривали in vacuo. Остаток очищали при помощи препаративной LC (неподвижная фаза: GraceResolv™, 40 г, подвижная фаза: 96% DCM, 4% МеОН). Чистые фракции собирали и растворитель выпаривали досуха с получением 330 мг бесцветного масла, которое кристаллизовали из Et₂O. Образованное белое твердое вещество фильтровали и высушивали с получением 98 мг соединения 8, белого твердого вещества (15%). Т.пл. = 149°C (DSC).

Пример А9. Получение соединения 28 и соединения 9.

а) Синтез промежуточного соединения 28

К раствору метил-3-бром-4-изопропилбензоата (1,2 г, 4,7 ммоль) в сухом DMF (36 мл), дегазированном в атмосфере N₂, добавляли Pd(PPh₃)₄ (270 мг, 0,23 ммоль) и аллилтри-Ы-бутилолово (1,85 г,

5,6 ммоль). Смесь снова продували с помощью N₂ в течение 5 мин и нагревали при 80°C в течение ночи. После охлаждения смесь разделяли между EtOAc и солевым раствором и органический слой дважды промывали солевым раствором, высушивали и концентрировали с получением 3,5 г желтого масла Данное масло очищали при помощи препаративной LC (SiOH с зернами неправильной формы, 15-40 мкм, 80 г, GraceResolv™, градиент подвижной фазы: от 95% гептана, 5% EtOAc до 90% гептана, 10% EtOAc). Чистые фракции собирали и растворитель выпаривали с получением 900 мг промежуточного соединения 28, бесцветного масла (88%).

b) Синтез промежуточного соединения 29 он (900 мг, 4,1 ммоль) в сухом THF (6,5 мл) добавляли по каплям к суспензии LAH (188 мг, 4,9 ммоль) в сухом THF (6,5 мл) при 0°C в атмосфере N₂. Смесь перемешивали в течение 30 мин. Очень медленно добавляли Н2О (1 мл), затем DCM и перемешивали в течение 20 мин. Нерастворимое вещество фильтровали на подушке из Celite® и фильтрат высушивали над MgSO₄, фильтровали и выпаривали досуха с получением 845 мг промежуточного соединения 29, бесцветного масла (100%).

c) Синтез промежуточного соединения 30

К смеси 29 (800 мг, 4,2 ммоль), сложного пинаколового эфира 4-гидроксифенилбороновой кислоты

- 41 031639 (1,85 г, 8,41 ммоль) и дифенилфосфинополистирола (6,47 г, 8,41 ммоль) в сухом THF (56 мл) добавляли DBAD (1,94 г, 8,41 ммоль). Смесь перемешивали при к.т. в течение 96 ч, затем фильтровали на стеклянной фритте и твердое вещество промывали с помощью EtOAc. Фильтрат выпаривали in vacuo с получением 5 г светло-коричневого остатка. Остаток очищали при помощи препаративной LC (SiOH с зернами неправильной формы, 15-40 мкм, 50 г, Merck, осаждение жидкости с помощью DCM, подвижная фаза: гептан 80%, EtOAc 20%). Необходимые фракции собирали и растворитель выпаривали досуха с получением 1,14 г промежуточного соединения 30, светло-коричневого масла (смесь с примесями, продукт без аллильной цепи). Смесь использовали на следующей стадии реакции.

d) Синтез соединения 28

Смесь 10 (100 мг, 0,377 ммоль), 30 (163 мг) и K₃PO₄ (320 мг, 1,51 ммоль) в 1,4-диоксане (3,60 мл) и Н₂О (0,80 мл) в герметизированной пробирке продували с помощью N₂. Добавляли Pd₂(dba)₃ (20,1 мг,

18,9 мкмоль) и P(tBu)₃-HBF₄ (10,9 мг, 37,7 мкмоль), смесь опять продували с помощью N₂ и нагревали при 120°C с использованием однорежимного микроволнового устройства (Biotage Initiator EXP 60) с выходной мощностью, варьирующей от 0 до 400 Вт, в течение 30 мин [фиксированное время удерживания]. Смесь разбавляли с помощью DCM и воды, органический слой отделяли, высушивали над MgSO₄, отфильтровывали и выпаривали in vacuo с получением 320 мг промежуточного соединения 31, оранжевого масла (смесь с примесями, продукт без аллильной цепи). Смесь использовали как есть на следующей стадии реакции, без очистки.

e) Синтез соединения 9

К раствору соединения 28 (320 мг) в ацетоне (6,5 мл) и Н₂О (790 мкл) в атмосфере N₂ последовательно добавляли 4-метилморфолин-4-оксид (123 мг, 1,05 ммоль) и осмия тетраоксид 2,5% в бутаноле (590 мкл, 43,8 мкмоль). Смесь нагревали при 60°C в течение 2 ч. После охлаждения до к.т. добавляли 10% водный раствор Na₂SO₃ (4 мл) и смесь перемешивали в течение 30 мин при к.т. Растворитель выпаривали in vacuo и остаток разбавляли с помощью EtOAc и промывали насыщенным водным раствором NaCl (3 раза). Органический слой высушивали над MgSO₄, отфильтровывали и выпаривали in vacuo с получением 235 мг черного масла. Остаток очищали при помощи препаративной LC (неподвижная фаза: диоксид кремния без покрытия с зернами неправильной формы, 40 г, подвижная фаза: 0,5% NH₄OH, 95% DCM, 5% МеОН). Чистые фракции собирали и растворитель выпаривали досуха с получением 51 мг светло-желтой пены, которую растирали в Et₂O. Твердое вещество фильтровали и высушивали с получением 51 мг соединения 9, светло-коричневого твердого вещества (12%).

Пример А10. Получение соединения 10.

а) Синтез промежуточного соединения 32

К раствору 4 (1,5 г, 3,9 ммоль) в DCE (20 мл) добавляли (трет-бутилдиметилсилилокси)ацетат (1,1 мл, 5,8 ммоль) и триацетоксиборогидрид натрия (2,5 г, 11,7 ммоль) и смесь нагревали при 50°C в течение 3 ч. Смесь выливали в смесь воды и насыщенного водного раствора NaCl и добавляли DCM. Ор

- 42 031639 ганический слой отделяли, высушивали над MgSO₄, отфильтровывали и выпаривали in vacuo. Остаток очищали при помощи препаративной LC (SiOH с зернами неправильной формы, 15-40 мкм, 50 г, Merck, градиент подвижной фазы: от DCM 100% до DCM 95%, МеОН 5%). Чистые фракции собирали и растворитель выпаривали досуха с получением 1,4 г промежуточного соединения 32 (66%).

b) Синтез промежуточного соединения 33

К раствору 32 (1,4 г, 2,6 ммоль) в DMF (20 мл) добавляли DIPEA (1,1 мл, 6,5 ммоль) и 5 (1,4 г, 3,2 ммоль). Раствор нагревали при 90°C в течение ночи, затем охлаждали до к.т. Неочищенную смесь разбавляли с помощью EtOAc и промывали насыщенным водным раствором NaCl (дважды). Органический слой отделяли, высушивали над MgSO₄, отфильтровывали и выпаривали с получением 2,5 г. Остаток очищали при помощи препаративной LC (неподвижная фаза: SiOH с зернами неправильной формы, 15-40 мкм, 300 г, MERCK, подвижная фаза: 60% гептана, 5% МеОН, 35% EtOAc). Чистые фракции собирали и выпаривали досуха с получением 220 мг промежуточного соединения 33 (15%).

c) Синтез соединения 10

TBAF (0,5 мл, 0,5 ммоль) добавляли к раствору 33 (220 мг, 0,38 ммоль) в THF (5 мл). Смесь перемешивали при к.т. в течение 3 ч. Добавляли воду и EtOAc и смесь экстрагировали. Органический слой отделяли, высушивали над MgSO₄, фильтровали и выпаривали досуха с получением 142 мг, которые кристаллизовали из Et₂O. Твердое вещество отфильтровывали и высушивали с получением 95 мг соединения 10 (54%). Т.пл. = 151°C (DSC).

Пример А11. Получение соединения 11.

а) Синтез промежуточного соединения 34

(2,5 г, 6,5 ммоль) добавляли к суспензии трет-бутилдиметилсилилглицидилового эфира (1,3 г, 7,1 ммоль) и K₂CO₃ (4,5 г, 32,5 ммоль) в DMF (40 мл). Смесь нагревали в течение 48 ч при 70°C. Добавляли воду и EtOAc и смесь экстрагировали. Органический слой отделяли, высушивали над MgSO₄, фильтровали и выпаривали. Остаток очищали при помощи препаративной LC (неподвижная фаза: SiOH с зернами неправильной формы, 20-45 мкм, 45 г, MATREX, подвижная фаза: 38% гептана, 12% МеОН (+10% NH₄OH), 50% EtOAc). Чистые фракции собирали и растворитель выпаривали досуха с получением 200 мг промежуточного соединения 34 (5%).

b) Синтез соединения 11

Метансульфонилхлорид (46 мкл, 0,6 ммоль) добавляли по каплям к раствору 34 (200 мг, 0,35 ммоль), Et₃N (0,27 мл, 2 ммоль) в ACN (5 мл). Смесь перемешивали при 100°C в течение 6 ч, добавляли воду и EtOAc и смесь экстрагировали. Органический слой отделяли, высушивали над MgSO₄, фильтровали и выпаривали с получением 220 мг. Остаток очищали при помощи препаративной LC на (непод

- 43 031639 вижной фазе: SiOH с зернами неправильной формы, 20-45 мкм, 12 г, GRACE, подвижной фазе: 95/5/0,1, DCM/MeOH/NH₄OH). Необходимые фракции собирали и растворитель выпаривали досуха с получением 23 мг остатка, который очищали при помощи препаративной LC (неподвижная фаза: диоксид кремния без покрытия с зернами неправильной формы, 40 г, подвижная фаза: 0,5% NH₄OH, 94% DCM, 6% МеОН). Чистые фракции объединяли и растворитель выпаривали досуха с получением 13 мг соединения 11 (8%).

Пример А12. Получение соединения 12.

а) Синтез промежуточного соединения 3 5

К раствору 4 (1,48 г, 3,8 ммоль) и 3-[(бензилоксикарбонил)амино]пропиональдегида (1,2 г, 5,8 ммоль) в DCE (20 мл) добавляли NaBH(OAc)₃ (2,5 г, 11,5 ммоль) и смесь нагревали при 50°C в течение 2,5 ч. Смесь выливали в смесь воды и насыщенного водного раствора NaCl и добавляли DCM. Органический слой отделяли, высушивали над MgSO₄, отфильтровывали и выпаривали in vacuo. Остаток очищали при помощи препаративной LC (SiOH с зернами неправильной формы, 15-40 мкм, 40 г, Interchim, подвижная фаза: DCM 94%, МеОН 6%, NH₄OH 0,1%).

Чистые фракции собирали и растворитель выпаривали досуха с получением 1,1 г промежуточного соединения 35, бесцветного масла (50%).

b) Синтез промежуточного соединения 36

К раствору 35 (1,1 г, 1,9 ммоль) в DMF (15 мл) добавляли DIPEA (0,82 мл, 4,8 ммоль) и 5 (1,1 г, 2,4 ммоль). Раствор нагревали при 90°C в течение ночи, затем охлаждали до к.т. Неочищенную смесь разбавляли с помощью EtOAc и промывали насыщенным водным раствором NaCl (дважды). Органический слой отделяли, высушивали над MgSO₄, отфильтровывали и выпаривали. Остаток очищали при помощи препаративной LC (неподвижная фаза: SiOH с зернами неправильной формы, 15-40 мкм, 40 г, GraceResolv, градиент подвижной фазы: DCM/MeOH/NH₄OH, от 100/0/0 до 95/5/0,1). Необходимые фракции собирали и растворитель выпаривали досуха с получением 120 мг промежуточного соединения 36, бесцветного масла (10%).

c) Синтез соединения 12

TBAF (0,7 мл, 1,0 ммоль) добавляли по каплям к раствору 36 (0,12 г, 0,14 ммоль) в THF (3,4 мл) при к.т. Смесь перемешивали с применением обратного холодильника в течение ночи. Смесь концентрировали с получением 320 мг, фиолетового масла. Остаток очищали при помощи препаративной LC (неподвижная фаза: диоксид кремния без покрытия с зернами неправильной формы, 40 г, подвижная фаза: 0,5% NH₄OH, 92% DCM, 8% МеОН). Необходимые фракции собирали и растворитель выпаривали с получением 57 мг. Остаток очищали при помощи ахиральной SFC (неподвижная фаза: 2-этилпиридин, 6 мкм, 150x21,2 мм, подвижная фаза: 80% СО₂, 20% МеОН (0,3% iPrNH₂)). Чистые фракции собирали и растворитель выпаривали досуха с получением 42 мг остатка, который помещали в ACN и воду (1/5,

- 44 031639 мл) и лиофилизировали с получением 35 мг соединения 12, бежевого порошка (54%). Пример А13. Получение соединения 13.

а) Синтез промежуточного соединения 37

К раствору 4 (100 мг, 0,26 ммоль) в сухом DMF (1,5 мл) добавляли NaH 60% (11,4 мг, 0,29 ммоль). Через 15 мин добавляли этилхлорацетат (30,8 мкл, 0,29 ммоль). Через 30 мин реакционную смесь гасили льдом и разбавляли водой. Водный слой экстрагировали с помощью DCM (3x25 мл) и объединенные органические слои высушивали над MgSO₄, выпаривали in vacuo с получением 140 мг, которые растирали в Et₂O и отфильтровывали с получением 103 мг промежуточного соединения 37, желтого твердого вещества (84%).

b) Синтез промежуточного соединения 38

К раствору 37 (337 мг, 0,72 ммоль) в смеси EtOH (6,5 мл) и Н₂О (6,5 мл) добавляли KOH (402 мг, 7,16 ммоль). Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 2 ч и охлаждали до к.т. После выпаривания при пониженном давлении неочищенное вещество помещали в 1н. HCl и желтый осадок фильтровали с получением 339 мг промежуточного соединения 38, желтого порошка (количественная оценка).

с) Синтез соединения 13

К смеси 38 (297 мг, 0,62 ммоль) в DMF (7 мл) последовательно добавляли EDCI (192 мг, 1,24 ммоль), НОВТ (92,1 мг, 0,68 ммоль) и по каплям Et₃N (0,27 мл, 1,92 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при к.т. в течение ночи и разбавляли водой. Органический слой экстрагировали с помощью DCM (3x75 мл) и объединенные органические слои промывали с помощью 10% раствора KHSO₄ (50 мл), насыщенного раствора NaHCO₃ (50 мл), солевого раствора (50 мл), высушивали над MgSO₄ и фильтровали. Растворитель выпаривали in vacuo и получали 102 мг желтого твердого вещества, которое растирали в iPr₂O, отфильтровывали и высушивали с получением 85 мг соединения 13, желтого твердого вещества (32%). Т.пл. = 157°C, 248°C (полиморф, DSC).

Пример А14. Получение соединения 14.

а) Синтез промежуточного соединения 39

К раствору метилпиримидин-4-карбоксилата (10,0 г, 72,4 ммоль) и ACN (1,89 мл, 36,2 ммоль) в сухом THF (100 мл) медленно добавляли калия 2-метил-2-бутоксид в толуоле (16,8 мл, 29,0 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при к.т. в течение 18 ч, гасили водой и выпаривали in vacuo. Твердое вещество поглощали с помощью минимального количества холодного EtOH, фильтровали на стеклянной фритте, промывали с помощью Et₂O (3 раза) и высушивали с получением 5,55 г промежуточного соединения 39, коричневого твердого вещества (83%). Промежуточное соединение 39 использовали без очистки на следующей стадии реакции.

- 45 031639

b) Синтез промежуточного соединения 40

К суспензии 39 (5,55 г, 30,0 ммоль) в EtOH (64 мл) добавляли этилкарбазат (4,78 г, 45,9 ммоль) и HCl 37% в Н₂О (3,52 мл, 42,2 ммоль). Смесь перемешивали при 50°C в течение 1 ч и затем охлаждали до к.т. Осадок фильтровали на стеклянной фритте и прополаскивали с помощью EtOH. Фильтрат выпаривали in vacuo и помещали в DCM. Органический слой промывали насыщенным водным раствором NaHCO₃, высушивали над MgSO₄ и выпаривали in vacuo с получением 3,68 г промежуточного соединения 40, желтого масла, которое кристаллизовали (53%).

с) Синтез промежуточного соединения 41

К раствору 40 (3,68 г, 15,8 ммоль) в DCM (140 мл) при 0°C частями добавляли NBS (3,09 г, 17,4 ммоль). Смесь перемешивали при 0°C в течение 1 ч и затем добавляли воду. Органический слой отделяли, высушивали над MgSO₄, отфильтровывали и выпаривали in vacuo с получением коричневого масла, которое растирали в Et₂O и высушивали in vacuo с получением 4,24 г промежуточного соединения 41, коричневого твердого вещества (86%).

d) Синтез промежуточного соединения 42

nh₂

К раствору 41 (4,24 г, 13,6 ммоль) в МеОН (130 мл) добавляли Et₃N (18,9 мл, 136 ммоль), раствор перемешивали при к.т. в течение 18 ч и растворитель выпаривали in vacuo с получением коричневого масла. Масло разбавляли в минимальном количестве DCM и добавляли Et₂O. Образованный осадок фильтровали на стеклянной фритте с получением коричневого твердого остатка. Фильтрат выпаривали in vacuo с получением коричневого остатка, который очищали при помощи препаративной LC (SiOH с зернами неправильной формы, 15-40 мкм, 80 г, Grace, осаждение твердого вещества, градиент подвижной фазы: от DCM 100% до DCM 90%, МеОН 10%). Чистые фракции собирали и растворитель выпаривали досуха с получением 1,18 г промежуточного соединения 42, белого твердого вещества (36%).

е) Синтез промежуточного соединения 43

К раствору 42 (1,15 г, 4,79 ммоль) в DMF (18 мл) добавляли DIPEA (2,06 мл, 12,0 ммоль) и 5 (1,69 г, 5,75 ммоль). Раствор нагревали при 90°C в течение 18 ч, затем охлаждали до к.т. и выпаривали in vacuo с получением 4,22 г черного масла. Остаток очищали при помощи препаративной LC (SiOH с зернами неправильной формы, 15-40 мкм, 120 г, Grace, осаждение твердого вещества, градиент подвижной фазы: от DCM 100% до DCM 95%, МеОН 5%). Чистые фракции собирали и растворитель выпаривали досуха с получением 448 мг промежуточного соединения 43, грязно-белого твердого вещества (35%).

- 46 031639

f) Синтез промежуточного соединения 44

Первый способ.

К суспензии сложного пинаколового эфира 4-гидроксибензолбороновой кислоты (5,00 г, 22,7 ммоль), 4-(1-метилэтил)бензолметанола (5,12 г, 34,1 ммоль) и нанесенного PPh₃ (8,94 г, 34,1 ммоль) в сухом ОСМ (150 мл) добавляли DBAD (7,85 г, 34,1 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при к.т. в течение 18 ч. Реакционную смесь затем фильтровали через стеклянную фритту и промывали с помощью EtOAc. Фильтрат выпаривали in vacuo с получением остатка (27 г), желтого масла. Остаток очищали при помощи хроматографии на силикагеле (SiOH с зернами неправильной формы, 15-40 мкм, 150 г, подвижная фаза: 90% гептана, 10% EtOAc). Чистые фракции собирали и растворитель выпаривали с получением 8,00 г промежуточного соединения 44, белого смолистого вещества (количественная оценка).

Второй способ.

Раствор 4-изопропилбензилбромида (7,00 г, 31,8 ммоль) в ACN (75 мл) обрабатывали с помощью К₂СО₃ (5,28 г, 38,2 ммоль) и сложного пинаколового эфира 4-гидроксибензолбороновой кислоты (6,03 мл, 35,0 ммоль) при к.т. P.c) перемешивали при к.т. в течение ночи. Затем реакционную смесь фильтровали на подушке из Се1йе® и прополаскивали с помощью ОСМ. Растворители выпаривали до объема 100 мл и добавляли Et₂O и гептан. Растворители выпаривали in vacuo с получением 12,36 г желтого твердого остатка. Данный остаток очищали при помощи препаративной LG' (SiOH с зернами правильной формы, 50 мкм, 220 г, Grace, градиент подвижной фазы: от гептана 100% до гептана 80%, EtOAc 20%). Чистые фракции собирали и растворитель выпаривали досуха с получением 9,88 г промежуточного соединения 44, белого клейкого твердого вещества (88%).

g) Синтез соединения 14

Смесь 43 (150 мг, 564 мкмоль), 44 (200 мг, 564 мкмоль) и K₃PO₄ (479 мг, 2,26 ммоль) в 1,4-диоксане (5,60 мл) и Н₂О (1,20 мл) в герметизированной пробирке продували с помощью N₂. Добавляли Pd₂(dba)₃ (30,1 мг, 28,2 мкмоль) и P(tBu)₃-HBF₄ (16,4 мг, 56,4 мкмоль), смесь опять продували с помощью N₂ и нагревали при 60°С в течение 18 ч Смесь разбавляли с помощью ОСМ и воды, органический слой отделяли, высушивали над MgSO₄, отфильтровывали и выпаривали in vacuo с получением 866 мг коричневого остатка. Остаток очищали при помощи препаративной LC (неподвижная фаза: сферические зерна диоксида кремния без покрытия, 5 мкм, 150x30,0 мм, градиент подвижной фазы: от 71% гептана, 1% МеОН (+10% NH₄OH), 28% EtOAc до 0% гептана, 20% МеОН (+10% NH₄OH), 80% EtOAc). Чистые фракции собирали и растворитель выпаривали досуха с получением бесцветного масла, которое растирали в Et2O и высушивали in vacuo с получением 36 мг соединения 14, светло-желтого твердого вещества (16%). Т.пл. = 109°С (dsc).

Пример А15. Получение соединения 15.

Смесь 43 (150 мг, 564 мкмоль), 18 (209 мг, 564 мкмоль) и K₃PO₄ (479 мг, 2,26 ммоль) в 1,4-диоксане (5,60 мл) и Н₂О (1,20 мл) в герметизированной пробирке продували с помощью N₂. Добавляли Pd₂(dba)₃ (30,1 мг, 28,2 мкмоль) и P(tBu)₃-HBF₄ (16,4 мг, 56,4 мкмоль), смесь опять продували с помощью N₂ и нагревали при 60°С в течение 18 ч Смесь разбавляли с помощью ОСМ и воды, органический слой отделяли, высушивали над MgSO₄, отфильтровывали и выпаривали in vacuo с получением 350 мг. Остаток очищали при помощи препаративной LC (неподвижная фаза: сферические зерна диоксида кремния без покрытия, 5 мкм, 150x30,0 мм, градиент подвижной фазы: от 71% гептана, 1% МеОН (+10% NH₄OH), 28% EtOAc до 0% гептана, 20% МеОН (+10% NH4OH), 80% EtOAc). Чистые фракции собирали и растворитель выпаривали досуха с получением бесцветного масла, которое растирали в Et2O и высушивали in vacuo с получением 11 мг соединения 15, желтой пены (5%).

- 47 031639

Пример А16. Получение соединения 16.

а) Синтез промежуточного соединения 45

К суспензии 4 (2,00 г, 5,20 ммоль) в пиридине (838 мкл) добавляли этилакрилат (11,0 мл, 10,3 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 150°C с использованием однорежимного микроволнового устройства (Biotage Initiator EXP 60) с выходной мощностью, варьирующей от 0 до 400 Вт, в течение 1 ч [фиксированное время удерживания]. Реакционную смесь охлаждали до к.т. и осадок отфильтровывали и промывали с помощью Et₂O с получением 1,50 г промежуточного соединения 45, белого твердого вещества (60%). Пром. соединения 45 использовали без очистки на следующей стадии реакции.

b) Синтез соединения 16

К перемешанной смеси 45 (478 мг, 0,986 ммоль) в МеОН (15 мл) добавляли Cs₂CO₃ (1,61 г, 4,93 ммоль). Через 1 ч 30 мин реакционную смесь выпаривали досуха и помещали в DCM (100 мл). Органический слой промывали водой (100 мл), солевым раствором (100 мл) и высушивали над MgSO₄. Растворитель выпаривали in vacuo с получением 771 мг бежевого твердого вещества. Твердое вещество растворяли в ACN (20 мл) и добавляли iPr₂O (100 мл). Осадок отфильтровывали. Фильтрат выпаривали in vacuo с получением 229 мг бежевого твердого вещества, которое очищали при помощи препаративной LC (SiOH с зернами правильной формы, 50 мкм, 24 г, Grace, сухая загрузка, градиент подвижной фазы: от DCM 100% до DCM 60%, ацетона 40%). Чистые фракции собирали и растворитель выпаривали досуха с получением 85 мг соединения 16, белого твердого вещества (20%). Т.пл. = 290°C (dsc).

Пример А17. Получение соединения 17 и соединения А.

Первый способ.

К смеси соединения 16 (175 мг, 0,399 ммоль) в THF (5 мл) добавляли по каплям комплекс борантетрагидрофуран (2,00 мл, 1,99 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 70°C в течение 2 ч и охлаждали до к.т. Затем МеОН (2 мл) осторожно добавляли перед добавлением 6н. HCl (2 мл). Гомогенный раствор перемешивали при к.т. в течение 30 мин и выпаривали in vacuo. Затем повышали основность неочищенной смеси с помощью 30% раствора NaOH до рН 14. Водный слой экстрагировали с помощью

DCM (3x50 мл) и объединенные органические слои промывали насыщенным раствором NaCl, высушивали над MgSO₄ и выпаривали in vacuo с получением 98 мг бледно-желтого твердого вещества. Остаток очищали при помощи препаративной LC (SiOH с зернами правильной формы, 50 мкм, 24 г, Grace, твердый образец, градиент подвижной фазы: от DCM 100% до DCM 60%, ацетона 40%). Чистые фракции собирали и выпаривали растворитель досуха. Остаток растирали в Et2O, фильтровали и высушивали с получением 36 мг соединения 17, белого порошка (21%). Т.пл. = 205°C (dsc).

- 48 031639

Второй способ.

а) Синтез соединения А (соединение формулы (I')

К раствору 4 (5,00 г, 13,0 ммоль) в уксусной кислоте (50 мл) добавляли 1,1,3,3-тетраметоксипропан (2,57 мл, 15,6 ммоль). Смесь нагревали при 110°C в течение 16 ч. Смесь выпаривали досуха и выпаривали совместно с толуолом (3 раза). Остаток помещали в DCM и промывали насыщенным водным раствором NaHCO₃, водой и солевым раствором. Органический слой высушивали над MgSO₄, фильтровали и выпаривали in vacuo с получением 5,43 г соединения А, коричневого твердого вещества (99%). Продукт применяли на следующей стадии без дополнительной очистки.

b) Синтез соединения 17.

К смеси соединения А (600 мг, 1,43 ммоль) в EtOH (6 мл) при к.т. добавляли NaBH₄ (108 мг, 2,85 ммоль). Смесь нагревали при 80°C в течение 1 ч, затем охлаждали до к.т., гасили водой и выпаривали досуха. Остаток помещали в DCM и промывали водой. Органический слой отделяли, высушивали над MgSO₄, отфильтровывали и выпаривали in vacuo с получением 600 мг соединения 17, желтого твердого вещества (99%).

Пример А18. Получение соединения 18 и В.

а) Синтез промежуточного соединения 47

К раствору 6 (500 мг, 2,71 ммоль) в EtOH (5 мл) при 0°C добавляли HCl 37% в воде (0,25 мл) и этилкарбазат (339 мг, 3,26 ммоль). Раствор перемешивали при к.т. в течение 18 ч и затем добавляли K₂CO₃ (225 мг, 1,63 ммоль). Смесь нагревали при 90°C в течение 1 ч и затем выпаривали in vacuo. Остаток разбавляли с помощью EtOAc и промывали водой. Водный слой экстрагировали дважды с помощью EtOAc. Объединенные органические слои высушивали над MgSO₄, отфильтровывали и выпаривали in vacuo с получением 315 мг, которые растирали в Et₂O и отфильтровывали на стеклянной фритте с получением 161 мг промежуточного соединения 47, белого твердого вещества (37%).

b) Синтез промежуточного соединения 48

К раствору 47 (161 мг, 1,00 ммоль) в уксусной кислоте (2,8 мл) добавляли

1,1,3,3-тетраметоксипропан (0,199 мл, 1,21 ммоль). Раствор нагревали при 110°C в течение 16 ч, затем выпаривали in vacuo и выпаривали совместно с толуолом дважды. Остаток растворяли в DCM и нейтрализовали насыщенным водным раствором NaHCO₃. Органический слой отделяли, высушивали над MgSO₄, отфильтровывали и выпаривали in vacuo с получением 189 мг промежуточного соединения 48, бежевого твердого вещества (96%).

c) Синтез промежуточного соединения 49

К раствору 48 (560 мг, 2,85 ммоль) в ACN (10 мл) добавляли по каплям NBS (533 мг, 3,00 ммоль) в ACN (10 мл) при к.т. Раствор перемешивали при к.т. в течение 1 ч и растворитель удаляли in vacuo. DCM и насыщенный водный раствор NaHCO₃ добавляли к остатку, органический слой отделяли, высушивали

- 49 031639 над MgSO₄, отфильтровывали и выпаривали in vacuo с получением 900 мг промежуточного соединения 49 в виде белого твердого вещества (количественный выход).

d) Синтез соединения В (соединение формулы (I'))

В герметизированной пробирке смесь 49 (470 мг, 1,71 ммоль), 18 (949 мг, 2,56 ммоль) и K₃PO₄

ляли PdQ₂(dppf)₂ (140 мг, 171 мкмоль) и реакционную смесь опять продували один раз с помощью N₂. Пробирку затем герметизировали и реакционную смесь нагревали при 80°С в течение 18 ч. Неочищенный материал разбавляли в DCM и промывали водой. Органический слой отделяли, высушивали над MgSO₄ и выпаривали in vacuo с получением 986 мг коричневого масла. Данное масло и другую партию (со 100 мг реагирующего вещества 49 в тех же условиях) объединяли и очищали при помощи препаративной LC (SiOH с зернами неправильной формы, 15-40 мкм, 80 г, Grace, градиент подвижной фазы: от DCM 100% до DGM 90%, ацетона 10%). Чистые фракции собирали и растворитель выпаривали досуха с получением 63 5 мг желтого масла, которое кристаллизовали. Остаток растирали один раз в Et₂O, дважды в пентане, отфильтровывали и высушивали in vacuo с получением 517 мг соединения В, светло-желтого твердого вещества (57%). Т.пл. = 187°С (DSQ.

е) Синтез соединения 18

К смеси соединения В (100 мг, 0,228 ммоль) в EtOH (1 мл) при к.т. добавляли NaBH₄ (17 мг, 0,456 ммоль). Смесь нагревали при 80°С в течение 1 ч и затем охлаждали до к.т. Данную смесь и другую партию в тех же условиях, с теми же количествами, объединяли, гасили водой и выпаривали досуха. Остаток помещали в DCM и промывали водой. Органический слой отделяли, высушивали над MgSO₄, отфильтровывали и выпаривали in vacuo с получением желтого масла, которое кристаллизовали. Продукт растирали в Et₂O и фильтровали на стеклянной фритте с получением 108 мг светло-желтого твердого вещества. Твердое вещество и фильтрат объединяли и очищали при помощи препаративной LC (SiOH с зернами неправильной формы, 15-40 мкм, 24 г, Grace, градиент подвижной фазы: от DGM 100% до DGM 98%, МеОН 2%). Чистые фракции собирали и растворитель выпаривали досуха с получением светложелтого масла, которое растирали в Et2O. Полученное грязно-белое твердое вещество фильтровали и высушивали in vacuo с получением 143 мг соединения 18 (71%). Т.пл. = 188°С (DSQ.

Пример А19. Получение соединения 19

К раствору соединения 17 (300 мг, 0,707 ммоль) в DGM (7,2 мл) добавляли параформальдегид (21 мг, 2 экв. мономера) и NaBH(OAc)₃ (600 мг, 2,83 ммоль) и смесь нагревали при 50°С в течение 18 ч. Затем добавляли параформальдегид (21 мг, 2 экв. мономера) и NaBH(OAc)₃ (300 мг, 1,41 ммоль) и смесь нагревали с обратным холодильником в течение 3 ч. После охлаждения до к.т. добавляли воду и DCM. Органический слой отделяли, промывали с помощью насыщенного водного раствора NaQ, высушивали над MgSO₄, отфильтровывали и выпаривали in vacuo с получением остатка. Данный остаток и другую партию (с 50 мг соединения 17 в тех же условиях) объединяли и очищали при помощи препаративной LC (SiOH с зернами неправильной формы, 15-40 мкм, 10 г, Merck, градиент подвижной фазы: от DGM 70%, EtOAc 30% до DGM 20%, EtOAc 80%). Необходимые фракции собирали и растворитель выпаривали досуха с получением бесцветного масла, которое растирали в Et2O, фильтровали и высушивали с получе

- 50 031639 нием 226 мг грязно-белого твердого вещества. Данное твердое вещество очищали опять при помощи ахиральной SFC (неподвижная фаза: Chiralpak IA, 5 мкм, 250x20 мм, подвижная фаза: 70% СО₂, 30% МеОН). Чистые фракции собирали и растворитель выпаривали досуха с получением бесцветного масла, которое растирали в Et₂O, фильтровали и высушивали с получением 137 мг продукта, который осторожно нагревали в минимальном количестве МеОН до полного растворения. Растворителю затем давали возможность медленно выпариваться в течение ночи при к.т. Твердое вещество высушивали in vacuo (45°C) в течение ночи с получением 134 мг соединения 19, белого твердого вещества (37%). Т.пл. = 120°C (DSC).

Пример А20. Получение соединения 20.

а) Синтез промежуточного соединения 51

К раствору 45 (1,50 г, 3,10 ммоль) в DCE (30 мл) добавляли (трет-бутилдиметилсилилокси)ацетат (1,17 мл, 6,19 ммоль) и NaBH(OAc)₃ (2,62 г, 12,4 ммоль) и смесь перемешивали при к.т. в течение 96 ч. К смеси добавляли воду и DCM, органический слой отделяли, высушивали над MgSO₄, отфильтровывали и выпаривали in vacuo с получением 4,3 г желтого остатка. Остаток растирали в Et₂O, осадок отфильтровывали на стеклянной фритте и промывали с помощью Et₂O (дважды). Фильтрат выпаривали in vacuo с получением 2,68 г промежуточного соединения 51, желтого масла (количественная оценка; чистота 91%).

b) Синтез промежуточного соединения 52

К суспензии 51 (1,30 г; с примесями) в МеОН (10 мл) добавляли Cs₂CO₃ (2,27 г, 6,98 ммоль) и смесь перемешивали при к.т. в течение 18 ч. Растворитель удаляли in vacuo и остаток разбавляли с помощью DCM и воды. Органический слой отделяли, высушивали над MgSO₄, отфильтровывали и выпаривали in vacuo. Полученное твердое вещество растирали в Et₂O и фильтровали на стеклянной фритте с получением белого твердого вещества. Фильтрат выпаривали in vacuo с получением 660 мг светло-желтого масла, которое очищали при помощи препаративной LC (SiOH с зернами неправильной формы, 15-40 мкм, 30 г, Merck, градиент подвижной фазы: от DCM 100% до DCM 90%, МеОН 10%). Чистые фракции собирали и растворитель выпаривали досуха с получением 255 мг промежуточного соединения 52, бесцветного масла и 17 мг соединения 20, белого твердого вещества (3%).

c) Синтез соединения 20

К раствору 52 (255 мг, 0,427 ммоль) в THF (4,30 мл) при 0°C добавляли TBAF (430 мкл, 0,430 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 2 ч и при к.т. в течение 20 ч. Неочищенную смесь разбавляли водой и DCM. Органический слой промывали солевым раствором, высушивали над MgSO₄, отфильтровывали и выпаривали in vacuo с получением 216 мг белого твердого вещества. 216 мг и 17 мг (полученные на предыдущей стадии) объединяли с получением 233 мг, которые повторно кристаллизовали, осторожно нагревали в минимальном количестве EtOH до полного растворения. После охлаждения осадок фильтровали на стеклянной фритте и твердое вещество промывали с помощью Et₂O (дважды), затем высушивали в высоком вакууме при 50°C в течение 18 ч с получением 178 мг соединения 20, белого твердого вещества (81%). Т.пл. = 205°C (DSC).

- 51 031639

Пример А21. Получение соединения 21

К раствору 52 (500 мг, 838 мкмоль) в THF (10 мл) добавляли по каплям BH₃-THF (4,20 мл, 4,20 ммоль). Раствор нагревали при 70°C в течение 2 ч и охлаждали до к.т. Добавляли 3н. водный раствор HCl и раствор перемешивали в течение 15 мин. Затем добавляли 10% водный раствор K₂CO₃ для достижения рН 10 и добавляли EtOAc. Органический слой отделяли, высушивали над MgSO₄, отфильтровывали и выпаривали in vacuo с получением 510 мг желтого масла. Данное масло очищали при помощи препаративной LC (SiOH с зернами неправильной формы, 15-40 мкм, 24 г, Grace, градиент подвижной фазы: от DCM 100% до DCM 95%, МеОН 5%). Необходимые фракции собирали и растворитель выпаривали досуха с получением 58 мг бесцветного масла (с примесями) и 369 мг желтого масла, которое растворяли в DCM и добавляли 3н. водный раствор HCl. Смесь перемешивали в течение 96 ч, затем повышали ее основность с помощью насыщенного водного раствора NaHCO₃ и экстрагировали с помощью DCM. Органический слой отделяли, высушивали над MgSO₄, отфильтровывали и выпаривали in vacuo с получением 234 мг светло-желтого масла, которое растирали в Et2O. Осадок фильтровали на стеклянной фритте и твердое вещество высушивали в высоком вакууме при 50°C в течение 2 ч с получением 175 мг соединения 21, желтого твердого вещества (45%). Т.пл. = 147°C (dsc).

Пример А22. Получение соединения 22

К раствору соединения 16 (300 мг, 0,684 ммоль) в DMF (5 мл) добавляли оксид серебра (I) (160 мг, 0,684 ммоль) и MeI (44,8 мкл, 0,718 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 5 ч при к.т. и разбавляли с помощью DCM. Неочищенное вещество фильтровали на подушке из диоксида кремния и промывали с помощью DCM (25 мл) и 10% МеОН в DCM (25 мл). Фильтрат выпаривали досуха с получением 320 мг остатка, который очищали при помощи препаративной LC (SiOH с зернами правильной формы, 50 мкм, 24 г, Grace, сухая загрузка, градиент подвижной фазы: от DCM 100% до DCM 90%, метанола 10%). Чистые фракции собирали и выпаривали растворитель досуха. Продукт растирали в Et₂O, отфильтровывали и высушивали с получением 92 мг соединения 22, белого порошка (30%). Т.пл. = 160°C (dsc).

Пример А23. Получение соединения 23, С и D. а) Синтез промежуточного соединения 53

Раствор 9 (730 мг, 3,05 ммоль) и ацетилацетальдегиддиметила ацетат (807 мкл, 6,11 ммоль) в EtOH (15 мл) и уксусную кислоту (175 мкл, 3,05 ммоль) перемешивали при 50°C в течение 17 ч Р^) концентрировали и фильтровали на стеклянной фритте. Твердое вещество промывали с помощью Et₂O с получением 650 мг промежуточного соединения 53, белого твердого вещества (74%).

- 52 031639

b) Синтез соединения С (соединение формулы (I'))

Раствор 53 (625 мг, 2,16 ммоль) и 18 (1,20 г, 3,24 ммоль) в 1,4-диоксане (8 мл) и Н₂О (4 мл) обрабатывали с помощью K₃PO₄ (1,15 г, 5,40 ммоль) и продували с помощью N₂. Затем добавляли PdCl₂(dppf)₂ (142 мг, 173 мкмоль) и реакционную смесь осторожно продували при помощи N₂. Смесь нагревали при 120°C с использованием однорежимного микроволнового устройства (Biotage Initiator EXP 60) с выходной мощностью, варьирующей от 0 до 400 Вт, в течение 25 мин [фиксированное время удерживания]. Неочищенную смесь разбавляли в DCM и воде. Органический слой отделяли, высушивали над MgSO₄ и выпаривали in vacuo с получением остатка. Остаток очищали при помощи препаративной LC (SiOH с зернами неправильной формы, 15-40 мкм, 50 г, Merck, градиент подвижной фазы: от DCM 100% до DCM 95%, МеОН 5%). Чистые фракции собирали и растворитель выпаривали досуха с получением 550 мг соединения С, бежевого твердого вещества (56%).

c) Синтез соединения D (соединение формулы (I'))

Раствор соединения С (550 мг, 1,22 ммоль) в 1,4-диоксане (25 мл) обрабатывали диоксидом селена (405 мг, 3,65 ммоль) и перемешивали при 80°C в течение 17 ч. Реакционную смесь затем фильтровали и выпаривали in vacuo с получением 640 мг коричневого твердого вещества. Данное твердое вещество растворяли в МеОН (15 мл) и обрабатывали с помощью H₂SO₄ (26 мкл, 0,486 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 80°C в течение 4 ч. Реакционную смесь разбавляли с помощью DCM, промывали с помощью насыщенного раствора NaHCO₃, высушивали над MgSO₄ и выпаривали in vacuo с получением 580 мг соединения D, желтого твердого вещества (96%).

d) Синтез соединения 23

К раствору соединения D (580 мг, 1,17 ммоль) в THF (10 мл) и МеОН (10 мл) в герметизированной пробирке добавляли хлорид кальция (519 мг, 4,67 ммоль) и NaBH₄ (354 мг, 9,35 ммоль). Смесь нагревали при 80°C в течение 5 мин. После охлаждения до к.т. добавляли воду и DCM. Органический слой отделяли, высушивали над MgSO₄, отфильтровывали и выпаривали in vacuo с получением желтого масла. Данное масло очищали при помощи препаративной LC (SiOH с зернами неправильной формы, 15-40 мкм, 80 г, Grace, градиент подвижной фазы: от DCM 100% до DCM 92%, МеОН 8%). Чистые фракции собирали и растворитель выпаривали досуха с получением 195 мг соединения 23, белого твердого вещества (35%).

Пример А24. Получение соединения 24, Е, F и G.

а) Синтез соединения Е (соединение формулы (I'))

К суспензии 4 (100 мг, 0,26 ммоль) и 1,3-диметилурацил (104 мг, 0,742 ммоль) в 2-метил-2-бутаноле

- 53 031639 (2,5 мл) добавляли этилат натрия (0,253 мл, 0,78 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 110°C в течение ночи и охлаждали до к.т. К смеси добавляли воду и водный слой экстрагировали с помощью DCM. Объединенные органические слои промывали насыщенным NaHCO₃, солевым раствором, высушивали над MgSO₄ и выпаривали in vacuo с получением 120 мг. Остаток очищали при помощи препаративной LC (SiOH с зернами правильной формы, 50 мкм, 30 г, Merck, загрузка жидкости, градиент подвижной фазы: от DCM 100% до DCM 90%, МеОН 10%). Чистые фракции собирали и растворитель выпаривали досуха с получением 80 мг соединения Е, бежевого порошка (70%). Т.пл. = 243°C (dsc).

b) Синтез соединения F (соединение формулы (I'))

1,21 г соединения F,

К суспензии соединения Е (1,31 г, 3,00 ммоль) в DCE (30 мл) добавляли SOCl₂ (2,18 мл, 30,0 ммоль) и DMF (0,232 мл, 3,00 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 100°C в течение ночи, охлаждали до к.т. и выпаривали in vacuo. Остаток выпаривали совместно с толуолом (3 раза) с получением оранжевого твердого вещества, которое растирали в Et2O и отфильтровывали с получением оранжевого твердого вещества (88%).

c) Синтез соединения G (соединение формулы (I'))

10,6 ммоль) (29,6 мг, в МеОН (45 мл) в

0,132 ммоль) и

К смеси соединения F (1,20 г, 2,64 ммоль) и Et₃N (1,47 мл, стальном герметизированном реакторе добавляли Pd(OAc)2 1,2-бис-(дифенилфосфино)этан (105 мг, 0,264 ммоль). Реактор осторожно закрывали и продували с помощью СО (3 раза). Реакционную смесь затем перемешивали при 100°C в течение ночи в атмосфере СО (100 psi). Реакционную смесь охлаждали до к.т., разбавляли с помощью DCM и фильтровали на подушке из диоксида кремния. К фильтрату добавляли диоксид кремния и смесь выпаривали in vacuo с получением остатка. Остаток очищали при помощи препаративной LC (SiOH с зернами неправильной формы, 1540 мкм, 120 г, Grace, осаждение твердого вещества, градиент подвижной фазы: от гептана 50%, EtOAc 50% до гептана 30%, EtOAc 70%). Чистые фракции собирали и растворитель выпаривали досуха с получением 1,00 г соединения G, оранжевого твердого вещества (79%).

d) Синтез соединения 24

К раствору соединения G (300 мг, 0,627 ммоль) в сухом THF (6 мл) и сухом МеОН (6 мл) в герметизированной пробирке добавляли хлорид кальция (278 мг, 2,51 ммоль) и NaBH₄ (190 мг, 5,02 ммоль). Смесь нагревали при 110°C в течение 5 мин. После охлаждения до к.т. добавляли воду и растворитель удаляли in vacuo. DCM добавляли к остатку и органический слой отделяли, высушивали над MgSO₄, отфильтровывали и выпаривали in vacuo с получением 434 мг желтого масла. Данное масло очищали при помощи препаративной LC (SiOH с зернами неправильной формы, 15-40 мкм, 12 г, Grace, градиент подвижной фазы: от DCM 100% до DCM 90%, iPrOH 10%). Необходимые фракции собирали и растворитель выпаривали досуха с получением 316 мг белого твердого вещества. Данное твердое вещество помещали в сосуд и кристаллизовали в минимальном количестве МеОН. После охлаждения полученное твердое вещество высушивали in vacuo (50°C) в течение 2 ч с получением 269 мг белого твердого вещества. Данное твердое вещество кристаллизовали из ACN. Осадок фильтровали на стеклянной фритте и фильтрат выпаривали in vacuo. Повторную кристаллизацию повторяли один раз. Твердое вещество высушивали в

- 54 031639 высоком вакууме при 55°C в течение 3 ч с получением 165 мг соединения 24, белого твердого вещества (58%). Т.пл. = 199°C (DSC).

Пример А25. Получение соединения 25 и Н.

а) Синтез соединения Н (соединение формулы (I'))

Смесь этилпирувата (0,173 мл, 1,56 ммоль) и Ν,Ν-диметилформамиддиметилацетата (0,207 мл, 1,56 ммоль) нагревали при 100°C в течение 30 мин. Затем смесь охлаждали до к.т. и добавляли уксусную кислоту (5 мл) и 4 (500 мг, 1,30 ммоль) и реакционную смесь нагревали при 100°C в течение 1 ч. Растворители выпаривали in vacuo и остаток выпаривали совместно с толуолом (3 раза). Неочищенное вещество помещали в DCM и промывали насыщенным раствором NaHCO₃, солевым раствором, высушивали над MgSO₄ и выпаривали in vacuo с получением 365 мг темно-желтого масла. Остаток очищали при помощи препаративной LC (SiOH с зернами правильной формы, 50 мкм, 24 г, Grace, загрузка жидкости, градиент подвижной фазы: от DCM 100% до DCM 60%, EtOAc 40%). Чистые фракции собирали и растворитель выпаривали досуха с получением 140 мг соединения Н, оранжевого порошка (22%). Т.пл. = 128°C и 140°C, полиморф (DSC).

b) Синтез соединения 25

К суспензии соединения Н (110 мг, 0,223 ммоль) в EtOH (4 мл) добавляли NaBH₄ (16,9 мг, 0,447 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 80°C в течение 1 ч и охлаждали до к.т. Добавляли воду и смесь выпаривали досуха. Затем остаток помещали в DCM, промывали водой, высушивали над MgSO₄ и выпаривали in vacuo с получением 152 мг бежевого твердого вещества. Неочищенный материал объединяли с другой партией (с 30 мг соединения Н в качестве реагирующего вещества в тех же условиях) и очищали при помощи препаративной LC (SiOH с зернами неправильной формы, 15-40 мкм, 24 г, Grace Resolv, градиент подвижной фазы: от DCM 100% до DCM 90%, МеОН 10%). Чистые фракции собирали и растворитель выпаривали досуха с получением 60 мг соединения 25, светло-бежевого твердого вещества (46%). Т.пл. = 155°C (dsc).

Пример А26. Получение соединения 26 и соединения J.

а) Синтез соединения J (соединение формулы (I'))

Смесь соединения Н (386 мг, 0,807 ммоль) в метиламине в 2М THF (8,07 мл, 16,1 ммоль) нагревали при 120°C с использованием однорежимного микроволнового устройства (Biotage Initiator EXP 60) с выходной мощностью, варьирующей от 0 до 400 Вт, в течение 1 ч [фиксированное время удерживания]. После охлаждения до к.т. смесь выпаривали досуха с получением 380 мг темно-оранжевого масла. Неочищенную смесь очищали при помощи препаративной LC (SiOH с зернами правильной формы, 50 мкм, 24 г, Grace, твердый образец, подвижная фаза: от DCM 100% до DCM 90%, МеОН 10%). Чистые фракции собирали и растворитель выпаривали досуха с получением 159 мг желтого твердого вещества (41%). Данное твердое вещество растирали в Et₂O, отфильтровывали и высушивали с получением 101 мг соединения J, желтого твердого вещества (26%). Т.пл. = 207°C (dsc).

- 55 031639

b) Синтез соединения 26

К суспензии соединения J (86 мг, 0,18 ммоль) в EtOH (2 мл) добавляли NaBH₄ (13,6 мг, 0,36 ммоль).

Р.с) перемешивали при 80°C в течение 30 мин и затем охлаждали до к.т. Смесь гасили водой и выпаривали до суха при пониженном давлении. Неочищенную смесь помещали в DCM и промывали водой, насыщенным раствором NaCl, высушивали над MgSO₄ и выпаривали in vacuo. Масло помещали в Et₂O и гептан. Раствор выпаривали in vacuo с получением 86 мг соединения 26, светло-бежевого твердого вещества (99%).

Пример А27. Получение соединения 27

К раствору соединения 26 (343 мг, 0,712 ммоль) в сухом THF (8,5 мл) в атмосфере N₂ добавляли

BH₃-THF (3,56 мл, 3,56 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 70°C в течение 3 ч и охлаждали до к.т. Затем осторожно добавляли МеОН и 3н. HCl и смесь перемешивали в течение ночи. 10% раствор K₂CO₃ добавляли до рН 9. После выпаривания растворителей, остаток помещали в воду и DCM. Водный слой экстрагировали с помощью DCM (3 раза). Объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали над MgSO₄, отфильтровывали и выпаривали in vacuo с получением 336 мг желтого твердого вещества. Остаток очищали при помощи препаративной LC (SiOH с зернами правильной формы, 50 мкм, 12 г, Grace, загрузка твердого вещества, подвижная фаза: от DCM 100% до DCM 80%, МеОН 20%). Необходимые фракции собирали и растворитель выпаривали досуха с получением 67 мг грязно-белого твердого вещества. Твердое вещество очищали обращенно-фазовой хроматографией (не подвижная фаза: X-Bridge-C18, 5 мкм, 30x150 мм, градиент подвижной фазы: от 70% HCOONH₄ 0,5% вес/вес водного раствора (рН 4,5), 30% ACN до 100% ACN). Чистые фракции собирали и растворитель выпаривали досуха с получением 15 мг соединения 27 (0,8 НСООН) в виде бежевого твердого вещества (4%).

Были получены соединения, перечисленные в табл. 1, приведенной ниже. Показатели стехиометри ческого состава соли или содержания кислоты в соединениях, представленных в данном документе, по лучены экспериментальным путем и могут отличаться в зависимости от используемых аналитических способов (для соединения 27, использовали ¹Н ЯМР). В случае, если не указана форма соли, соединение получали в виде свободного основания. Формы солей свободных оснований можно легко получать при помощи обыкновенных процедур, известных специалисту в данной области.

- 56 031639

Таблица 1

Соединения

	Jun н 1 CN
Соединение 1; Способ Al	Соединение 6; Способ А6
	N^\
	Ο.Ν
F AJS	Х/ч
mXj
II 1 N·^ H	II \ N·^ н
	X7
Соединение 2; Способ A2	Соединение 7; Способ А7
N^\
£ w
	N
гк	JL/N>
ΧχΌ	ίΎν
Η
\A>	ХА
1	1 F
Соединение 3; Способ АЗ	Соединение 8; Способ А8
N^\	«Л
kJ	1 К
X^>==N
X N> N'^T \ 1 11	ΠιΟ
YY^oXk н
H
	Ι^^ΟΗ
	он
Соединение 4; Способ A4	Соединение 9; Способ А9
О	п
	^1<=NS
	Ι Ζ Ν>
	Жл Ί
J! JL РрЖР H
	\ХХ /
T	АС но
Соединение 5; Способ A5	Соединение 10; Способ А10

- 57 031639

^X^N уг^Х“	yO^oXJ °
Соединение 11; Способ All	Соединение 16; Способ Al6
О	Ό
N	^x^-n
. _ jfrv	χΑ)
пс° <
yU	AU
1 \н2	I
Соединение 12; Способ А12	Соединение 17; Способ А17
Ό	О
^Xr—N
	rcO
н о
	''уУУ
Соединение 13; Способ А13	Соединение 18; Способ Al 8
,n^n	О
SX. 11
^''Xy-N	'—X^N
	Г γ
AY ί	Aa )
JL J A η	A
	yU
Соединение 14; Способ Α14	Соединение 19; Способ Al9
pN	О
ΧΝ Л
^γ==Ν.	^χΝ
ΓτΥ	лА
	A
yU	но'
Соединение 15; Способ Al5	Соединение 20; Способ А20

- 58 031639

О rjO	^ОН РП рО7 й
Соединение 21; Способ A21	Соединение 25; Способ А25
О	/П W °w /
ν	у—N
	|м-_/ Н
ПгО	ПгО
	II \ N—/ н
ПП
Соединение 22; Способ Α22	Соединение 26; Способ А26
ГЧ
1 N—.	Г N—-/ н
ίΓ^τ \ )	ГтЧЗ
II 1 N~ ~/ н \	^γ-οΑ> н
nn но
Соединение 24; Способ А24	Соединение 27; Способ А27
0,8 НСООН
О	О
	^==Χ-== Ν
н~<	Г /п П
ПР но	хАЭ
Соединение 23; Способ А23	Соединение А (Соединение формулы Г); Способ А17
О	О
\ 'ν—, ηρΟ	\ 'N—Л дуЧЛ II J N=/
пи	xJU

- 59 031639

Соединение В (Соединение формулы Г); Способ А18	Соединение С (Соединение формулы Г); Способ А23
Г N---к	Г Ν—V
ме0	уМ
Соединение D (Соединение формулы	Соединение F (Соединение формулы
Г); Способ А23	Г); Способ А24
О	О
	Ν'
I ν—\ паЭ
	с°2ме
Соединение Е (Соединение формулы	Соединение G (Соединение формулы
Г); Способ А24	Г); Способ А24
О	II А /
CQ2Et
ггЧЭ
yU
Соединение Н (Соединение формулы	Соединение J (Соединение формулы Г);
Г); Способ А25	Способ А26
N
X J N—'
и
Соединение 28; способ А9

Аналитическая часть.

LCMS (жидкостная хроматография/масс-спектрометрия).

LCMS, общая процедура.

Измерения в ходе высокоэффективной жидкостной хроматографии (HPLC) проводили с помощью насоса для LC, детектора на диодной матрице (DAD) или UV-детектора и колонки, которая описана в соответствующих способах. При необходимости включали дополнительные детекторы (см. приведенную ниже таблицу способов).

Поток из колонки направляли в масс-спектрометр (MS), который был оснащен источником ионизации при атмосферном давлении. В компетенции специалиста в данной области находится установка настраиваемых параметров (например, диапазона сканирования, минимального времени измерения и т.п.) с целью получения ионов, обеспечивающих определение номинального моноизотопного молекулярного веса (MW) соединения. Сбор данных проводили с помощью соответствующего программного обеспечения.

Соединения описаны по их экспериментальному времени удерживания (R_t) и ионам. Если не указано иное, в таблице данных указанный молекулярный ион представляет собой [М+Н]⁺ (протонированную молекулу) и/или [М-Н]^-(депротонированную молекулу). В случае, если соединение не было непосредственно способно к ионизации, указывают тип аддукта (т.е. [M+NH₄]⁺, [M+HCOO]' и т.д.). Для молекул со сложными изотопными распределениями (например, Br, Cl) описанное значение является таким значением, которое получено для наименьшей массы изотопа. Все результаты получали с экспериментальными

- 60 031639 погрешностями, которые обычно связаны с применяемым способом.

Далее в данном документе SQD означает одиночный квадрупольный детектор, к.т. означает комнатную температуру, ВЕН означает мостиковый гибрид этилсилоксана/диоксида кремния, HSS означает диоксид кремния повышенной прочности, DAD означает детектор на диодной матрице.

Таблица 2

Коды способов LCMS (поток выражен в мл/мин; температура колонки (Т) в °C; время анализа в минутах)

Код способа	Прибор	Колонка	Подвижная фаза	градиент	Поток	Врем я анали за
Колонка Т
Код способа (1) (2) (3)	Прибор Waters: Acquity UPLC® - DAD и Quattro Micro™ Waters: Acquity UPLC® H- Class - DAD и SQD 2 Waters: Acquity UPLC® H- Class - DAD и SQD 2	Колонка Waters: ВЕН C18 (1,7 мкм, 2,1x100 мм) Waters: ВЕН С18 (1,7 мкм, 2,1x100 мм) Macherey Nagel: Nucleoshell® RP18 (2,7 мкм, 3x50 мм)	Подвижная фаза А: 95% 7 мМ CH3COONH4 /5% CH3CN, В: CH3CN А: 95% 7 мМ CH3COONH4 /5% CH3CN, В: CH3CN А: 95% 7 мМ CH3COONH4 /5% CH3CN, В: CH3CN	градиент От 84,2% А в течение 0,49 мин. до 10,5% А за 2,18 мин., удерживание в течение 1,94 мин., обратно до 84,2% А за 0,73 мин., удерживание в течение 0,73 мин. От 84,2% А в течение 0,49 мин. до 10,5% А за 1,81 мин., удерживание в течение 2,31 мин., обратно до 84,2% А за 0,73 мин., удерживание в течение 0,73 мин. От 95% А в течение 0,25 мин. до 5% А за 0,75 мин., удерживание в течение 1,9 мин., обратно до 95% А за 0,3 мин., удерживание в течение 0,3 мин.	Поток Колонка Т 0,343 40 0,343 40 0,6 40	Врем я анали за 6,2 6,1 3,5

Точки плавления.

Для ряда соединений температуры плавления (т.пл.) определяли с помощью системы DSC 1 STAR^e от Mettler Toledo. Температуры плавления измеряли с градиентом температуры 10 C\inn до 350°C. Температуры плавления представлены пиковыми значениями.

Результаты аналитических измерений представлены в табл. 3.

- 61 031639

Таблица 3 Время удерживания (R_t) в мин, пик [М+Н]⁺ (протонированная молекула), способ LCMS и т.пл.

ЯМР.

NMR выполняли с использованием спектрометра Bruker Avance 500, оснащенного измерительной головкой тройного резонанса (¹Н, ¹³С, ¹⁵N TXI) с обратным детектированием и с градиентами вдоль z-оси и работающей при 500 МГц для протона и 125 МГц для углерода, или с использованием спектрометра Bruker 400, оснащенного измерительной головкой резонанса (¹Н, ¹³С, SEI) с обратным детектированием и с градиентами вдоль z-оси и работающей при 400 МГ ц для протона.

- 62 031639

Таблица 4

Результаты '11 ЯМР

№ соед.	Результаты '11 ЯМР
1 5 7 10 С D G	(400 МГц, DMSO-d6) δ ppm 8,46 (d, J= 6,1 Гц, 2H), 7,37 (d, J= 8,1 Гц, 2H), 7,33 (d, J = 6,1 Гц, 2H), 7,26 (d, J = 8,1 Гц, 2H), 7,10 (d, J = 8,6 Гц, 2H), 6,96 (d, J = 8,6 Гц, 2H), 6,02 (br. s., 1H), 5,04 (s, 2H), 4,13 - 4,24 (m, 2H), 3,83 - 3,94 (m, 2H), 2,89 (spt, J= 6,9 Гц, 1H), 1,20 (d, J= 6,9 Гц, 6H) (500 МГц, DMSO-d6) δ ppm 8,43 (d, J= 6,0 Гц, 2H), 7,38 (d, J= 8,2 Гц, 2H), 7,25 - 7,30 (m, 4H), 7,17 (t, J= 8,7 Гц, 1H), 6,93 (dd, J= 2,4, 11,8 Гц, 1H), 6,86 (dd, 7 = 2,4, 8,7 Гц, 1H), 5,93 (t, J= 2,5 Гц, 1H), 5,08 (s, 2H), 4,21 (t, J= 8,0 Гц, 2H), 3,85 - 3,92 (m, 2H), 2,90 (spt, 7= 6,9 Гц, 1H), 1,20 (d, J= 6,9 Гц, 6H) (400 МГц, DMSO-d6) δ ppm 8,46 (d, J = 5,6 Гц, 2H), 7,25 - 7,40 (m, 4H), 7,03 7,17 (m, 4H), 6,95 (d, J= 8,6 Гц, 2H), 6,02 (br. s., 1H), 5,03 (s, 2H), 4,13 - 4,25 (m, 2H), 3,84 - 3,95 (m, 2H), 1,85 - 1,98 (m, 1H), 0,88 - 1,00 (m, 2H), 0,61 - 0,72 (m, 2H) (500 МГц, DMSO-d6) δ ppm 8,39 (d, J= 6,3 Гц, 2H), 7,39 (d, J= 8,2 Гц, 2H), 7,28 (d, J = 8,2 Гц, 2H), 7,21 (d, J= 6,3 Гц, 2H), 7,14 (d, J= 8,8 Гц, 2H), 7,02 (d, J = 8,8 Гц, 2H), 5,05 (s, 2H), 4,69 (t, J= 5,4 Гц, 1H), 4,19 (t, J= 8,0 Гц, 2H), 3,87 (t, J = 8,0 Гц, 2H), 3,39 (q, J= 5,4 Гц, 2H), 2,87 - 2,95 (m, 3H), 1,21 (d, J= 6,9 Гц, 6H)
(400 МГц, DMSO-d6) δ ppm 9,09 (d, 7=7,07 Гц, 1H), 8,49-8,63 (m, 2H), 7,51 (d, 7=5,56 Гц, 2H), 7,38-7,44 (m, 3H), 7,29 (d, 7=8,08 Гц, 2H), 7,07 (d, 7=7,07 Гц, 1H), 7,01 (m, 2H), 5,14 (s, 2H), 2,88-2,94 (m, 1H), 2,52 (s, 3H), 1,22 (d, 7=6,57 Гц, 6H) (400 МГц, DMSO-d6) δ ppm 9,41 (d, 7=7,58 Гц, 1H), 8,63 (d, 7=6,06 Гц, 2H), 7,65 (d, 7=7,58 Гц, 1H), 7,55 (d, 7=6,06 Гц, 2H), 7,37-7,46 (m, 3H), 7,30 (d, 7=7,58 Гц, 2H), 6,96-7,11 (m, 2H), 5,06-5,18 (m, 2H), 3,91 (s, 3H), 2,82-2,97 (m, 1H), 1,22 (d, 7=7,07 Гц, 6H) (400 МГц, DMSO-d6) δ ppm 9,36 (d, 7=7,07 Гц, 1H), 8,56-8,65 (m, 2H), 7,62 (d, 7=7,07 Гц, 1H), 7,52-7,58 (m, 2H), 7,35-7,43 (m, 4H), 7,29 (d, 7=8,08 Гц, 2H), 7,12 (d, 7=9,09 Гц, 2H), 5,12 (s, 2H), 3,92 (s, 3H), 2,84-2,96 (m, 1H), 1,22 (d, 7=7,07 Гц, 6H) _

Фармакология.

Ферментативный анализ с Ros1.

Соединения наносили в виде пятен на белые 384-луночные планшеты Proxiplate Plus (Perkin Elmer), к которым добавляли 5 мкл ферментативной смеси (0,5 мкг/мл фермента Ros1, 50 мМ Tris-HCl, pH 7,5, 1 мМ EGTA, 10 мМ MgCl₂, 0,01% Tween-20) и 5 мкл субстратной смеси (6 мкг/мл IRS-Tide [American Peptide Company], 20 мкМ ATP, 13,33 мкКи/мл ATP (аденозин-5'-трифосфат) Р³³ , 50 мМ Tris-HCl, pH 7,5, 1 мМ EGTA (этиленгликоль-бис-(2-аминоэтилэфир)-НН№,№-тетрауксусной кислоты), 10 мМ MgCl₂, 0,01% Tween-20). После инкубирования в течение 120 мин при комнатной температуре добавляли 10 мкл буфера для остановки реакции (5 мМ EDTA, 50 мкМ АТР, 0,1% BSA (бычьего сывороточного альбумина), 0,1% Triton X-100, 50 мМ Tris-HCl, pH 7,5, 1 мМ EGTA, 10 мМ MgCl₂, 0,01% Tween-20), содержащего 2 мг/мл связанных со стрептавидином полистироловых гранул для визуализации (Amersham Biosciences) и инкубировали в течение 15 мин при комнатной температуре. Планшеты центрифугировали в течение 3 мин при 1500 об/мин и сигналы регистрировали на системе визуализации LEADseeker (GE).

В данном анализе определяли ингибирующее действие разных концентраций соединений (варьирующих от 10 мкМ до 0,3 нМ) и данные использовали для вычисления величин IC₅₀ (М) и pIC₅₀ (-logIC50).

Анализ пролиферации клеток Ba/F3-Ros1.

Данный анализ выполняли с клетками Ba/F3, содержащими три разные варианта Ros1: белок дикого типа, белок с мутацией в регуляторном остатке (L2026M) и белок с мутацией, определенной в опухоли от пациента, который стал невосприимчив к лечению кризотинибом (Xalkori®) (G2032R). Соединения солюбилизировали в 100% DMSO (диметилсульфоксиде) и распыляли на полистироловые обработанные культурой тканей 384-луночные планшеты. К каждой лунке добавляли объем в 50 мкл среды для клеточных культур (RPMI-1640 без фенолового красного, 10% FBS (фетальной бычьей сыворотки), 2 мМ

- 63 031639

L-глутамина), содержащей 20000 клеток Ba/F3-Ros1, и планшеты помещали в инкубатор при 37°C и 5% СО₂. Через 24 ч к лункам добавляли 10 мкл раствора Alamar Blue (0,5 мМ K₃Fe(CN)₆, 0,5 мМ K₄Fe(CN)₆, 0,15 мМ резазурина и 100 мМ фосфатного буфера), инкубировали в течение 4 ч при 37°C и 5% CO₂ перед тем, как во флуоресцентном ридере для планшетов измеряли RFU (относительные единицы флуоресценции) (экс. 540 нм, эм. 590 нм).

В данном анализе определяли ингибирующее действие разных концентраций соединений (варьирующих от 10 мкМ до 0,3 нМ) и данные использовали для вычисления величин IC₅₀ (М) и pIC₅₀ (-logICsc).

В качестве обратного анализа данный же эксперимент проводили для белка дикого типа в присутствии 10 нг/мл IL-3 мыши.

Анализ пролиферации клеток НСС78.

Примерно 1000 клеток НСС78 немелкоклеточного рака легкого в 180 мкл среды для клеточных культур (RPMI-1640, 10% FBS, 2 мМ L-глутамина, 10 мМ Hepes, 1 мМ пирувата натрия, 4,5 г/л глюкозы, 1,5 г/л бикарбоната натрия, 25 мкг/мл гентамицина) высевали в каждую лунку 96-луночного полистиролового обработанного культурой тканей планшета и инкубировали при 37°C и 5% CO₂. Через 24 ч соединения разбавляли в среде для клеточных культур, из которой 20 мкл добавляли к лункам, содержащим клетки, и инкубировали в течение 4 дней при 37°C и 5% CO₂. В PBS (фосфатно-солевом буферном растворе) получали 5 мг/мл раствора тетразолиевого красителя МТТ и 25 мкл добавляли к каждой лунке. Через 2 ч среду удаляли и замещали 125 мкл 4/1 DMSO/глицинового буфера (0,1 М глицина, 0,1 М NaCl, pH 10,5) перед определением показателя поглощения при 538 нм.

В данном анализе определяли ингибирующее действие разных концентраций соединений (варьирующих от 10 мкМ до 30 нМ) и данные использовали для вычисления величин ЕС₅₀ (M) и pEC₅₀ (-logECsc).

Иммунофлуоресцентный анализ pROS1 в клетках НСС78.

Примерно 20000 клеток НСС78 немелкоклеточного рака легкого в 180 мкл среды для клеточных культур (RPMI-1640, 10% FBS, 2 мМ L-глутамина, 10 мМ Hepes, 1 мМ пирувата натрия, 4,5 г/л глюкозы, 1,5 г/л бикарбоната натрия, 25 мкг/мл гентамицина) высевали в каждую лунку 96-луночного полистиролового покрытого поли-Э-лизином планшета и инкубировали при 37°C и 5% СО₂. Через 24 ч соединения разбавляли в среде для клеточных культур, из которой 20 мкл добавляли к лункам, содержащим клетки, и инкубировали в течение 4 ч при 37°C и 5% CO₂. Среду удаляли и клетки фиксировали путем добавления 100 мкл 5% формальдегида в TBS (трис-забуференном растворе) (50 мМ Tris.HCl, pH 7,4, 150 мМ NaCl) и инкубировали в течение 15 мин при комнатной температуре. Формальдегид удаляли и замещали метанолом в течение 10 мин при комнатной температуре, после чего клетки промывали 3 раза TBS, содержащим 1% Triton Х-100, и инкубировали в блокирующем буфере Odyssee (Li-Cor) в течение 1 ч при комнатной температуре. Клетки затем инкубировали с первичным антителом кролика, направленным против Ros pY2274 (cst-3078), разбавленным 1/200 в блокирующем буфере, в течение 24 ч при комнатной температуре. Клетки промывали три раза с помощью TBS, содержащего 0,1% Triton Х-100, и инкубировали со вторичным антителом к антителу кролика, конъюгированным с флуоресцентным красителем Alexafluor 680, в блокирующем буфере в течение 1 ч при комнатной температуре. Клетки промывали три раза с помощью TBS, содержащего 0,1% Triton X-100, и оставляли высыхать перед измерением RFU (относительных единиц флуоресценции) при 700 нм с использованием устройства флуоресцентной визуализации.

Такой же эксперимент проводили с использованием антитела к общему Ros1 (sc-6347), разбавленного 1/1000, вместо антитела к Ros1 pY2274 и антителом к антителу козы, конъюгированным с IRDye800cw, в качестве вторичного антитела. RFU измеряли при 800 нм. Сигналы, полученные в результате, определения общего Ros1, использовали для нормализации величин Ros1pY2274.

В данном анализе определяли ингибирующее действие разных концентраций соединений (варьирующих от 10 мкМ до 3 нМ) и данные использовали для вычисления величин IC50 (М) и pIC50 (-logIC50).

Результаты описанных выше тестов in vitro показаны в табл. 5.

- 64 031639

Таблица 5

Соед.	ROS1 р1С50	BaF3- ROS1-IL3 р1С50	BaF3- ROS1+IL3 р1С50	Ba/F3 Rosl L2026M (-IL-3) pIC50	Ва/3 Rosl G2032R (-IL-3) pIC50	НСС-78 PROL рЕС50	НСС78 pRos pIC50
Соед. 16	6,9	7,0	<5	7,3		7,0	~5,4
Соед. 13	6,8	6,8	<5	6,7		6,3	6,8
Соед. 17	7,4	7,1	<5	6,9		7,0	7,6
Соед. 22	6,3	6,4	<5
Соед. В	7,6	7,2	<5
Соед. А	7,1	6,8	<5
Соед. 18	7,7	7,6	<5	7,8		6,4
Соед. Н	6,3	5,8	<5
Соед. 25	6,9	7,0	<5	6,8		6,1
Соед. 1	6,9	7,0	5,3	~6,7	6,4	6,1
Соед. Е	7,2	7,1	<5	6,9		6,3
Соед. G	6,0	<5	<5
Соед. 19	7,0	6,7	<5	6,4		6,1
Соед. 24	7,2	7,5	5,1	7,6		7,1
Соед. 26	7,5	7,1	<5	6,7		6,8
Соед. J	6,3	6,8	<5	6,8		5,7
Соед. 20	6,5	6,8	<5
Соед. 10	6,9	7,1	<5	6,8	6,4	5,6
Соед. 21	7,2	7,4	<5	6,9
Соед. 3	7,2	7,2	<5	6,6
Соед. 6	6,7	6,7	<5	6,4
Соед. 4	7,0	7,1	5,9	7,1		6,2

- 65 031639

Соед. 5	-6,9	7,1	<5	<5	6,7	6,1
Соед. 7	6,6	6,8	<5	7,5	6,2	6,2
Соед. 8	5,8	6,3	5,4	7,5		5,7
Соед. 14	6,4	6,5	-5,13	6,6		6,0
Соед. 15	6,6	6,8	<5	<5		6,2
Соед. 2	7,6	-8,03	<5	7,7		7,9
Соед. 9	7,2	7,3	<5	5,5		6,3
Соед. 27	6,3	6,3	-5,2	5,5
Соед. 12	6,3	6,3	-5,35	6		5,8
Соед. С	7,5	7,5	<5	7,5		6,7
Соед. 23	7,5	7,9	<5	7,8		7,0
Соед. И	6,6	7,0	5,6	6,8		6,1

Исследования эффективности на мышах, несущих опухоли Ba/F3-Ros1.

Примерно 2х10⁶ клеток Ba/F3, содержащих Ros1 либо дикого типа, либо с мутацией L2026M, инокулировали в паховую область бестимусных мышей NMRI. Как только полученные опухоли достигали размера 250-350 мм³, мышей произвольно распределяли в различные группы лечения (8-12 мышей в группе). Соединения, составленные в 20% циклодекстрина, вводили мышам посредством перорального зондового кормления в различных дозах в течение 10 дней один раз (QD) или два раза (BID) в сутки. Размеры опухолей определяли при помощи измерений штангель-циркулем на 1 день перед лечением и затем два раза в неделю на протяжении исследования с использованием обычной описанной далее формулы: объем опухоли (мм³) = (axb²/2); где а представляет собой длину, а b представляет собой ширину опухоли. Соотношения лечение/контроль (Т/С) вычисляли в конце исследования, основываясь на изменении в конечных относительных объемах опухолей.

Примерно 2х10⁶ клеток Ba/F3, содержащих Ros1 с мутацией G2032R, инокулировали в паховую область бестимусных мышей NMRI. Как только полученные опухоли достигали размера 250-350 мм³, мышей произвольно распределяли в различные группы лечения (8-12 мышей в группе). Соединения, составленные в 20% циклодекстрина, вводили мышам посредством перорального зондового кормления в различных дозах в течение 10 дней один раз (QD) или два раза (BID) в сутки (см. таблицу ниже в отношении частоты введения, использованной в исследовании). Размеры опухолей определяли при помощи измерений штангель-циркулем на 1 день перед лечением и затем два раза в неделю на протяжении исследования с использованием обычной описанной далее формулы: объем опухоли (мм³) = (axb²/2); где а представляет собой длину, а b представляет собой ширину опухоли. Соотношения лечение/контроль (Т/С) вычисляли в конце исследования, основываясь на изменении в конечных относительных объемах опухолей.

Модель опухоли	Соед.	Цоза (мг/кг)	частота введения	Т/С (%)	количество мышей в группе
Ba/F3-Rosl G2032R	Соед. 1	12,5	BID	64	8
Ba/F3-Rosl G2032R	Соед. 1	25	BID	16	8
Ba/F3-Rosl G2032R	Соед. 1	50	BID	-18	8

Примеры композиций.

Активный ингредиент (а. I.), используемый по всему описанию данных примеров, относится к соединению формулы (I) или (I'), в том числе любому его таутомеру или стереизомерной форме, или его N-оксиду, фармацевтически приемлемой соли присоединения или сольвату; в частности, к любому из приведенных в примерах соединений.

- 66 031639

Типичные примеры рецептур состава согласно настоящему изобретению являются такими, как при веденные ниже.

1. Таблетки.

Активный ингредиент	от 5 до 50 мг
Фосфат дикальция	20 мг
Лактоза	30 мг
Тальк	10 мг

Стеарат магния

Картофельный крахмал мг добавляют до массы 200 мг.

2. Суспензия.

Водную суспензию получают для перорального введения таким образом, чтобы каждый миллилитр содержал от 1 до 5 мг активного ингредиента, 50 мг карбоксиметилцеллюлозы натрия, 1 мг бензоата натрия, 500 мг сорбита и воды, добавленной до объема 1 мл.

3. Форма для инъекций.

Парентеральную композицию получают путем перемешивания 1,5% (вес./об.) активного ингредиента в 0,9% растворе NaCl или в 10 об.% растворе пропиленгликоля в воде.

4. Мазь.

Активный ингредиент от 5 до 1000 мг

Стеариловый спирт 3 г

Ланолин 5 г

Белый вазелин 15 г

Вода доводят до массы 100 г.

В данном примере активный ингредиент можно заменить таким же количеством любого из соединений согласно настоящему изобретению, в частности таким же количеством любого из приведенных в качестве примера соединений.

Claims (8)

1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

   1. Соединение формулы (I)

   К- к .

   / у

   X ··. его таутомер или стереоизомерная форма, где y₁ представляет собой CR_7a или N;

   y₂ представляет собой СН;

   R7a представляет собой водород;

   R7 представляет собой водород;

   X представляет собой -CR₁R_1a- или ковалентную связь;

   R1 представляет собой водород;

   R_1a представляет собой водород; О^алкил, замещенный одной гидроксильной группой; О^алкил, замещенный одним -NR_9aR_9b; или -C(=O)-NR_9aR_9b;

   R2a представляет собой водород;

   R_2b представляет собой водород или

   R₃ представляет собой водород; Г^^алкил, замещенный одной гидроксильной группой;

   R4_a представляет собой водород; ^^алкил; ^^алкил, замещенный одной гидроксильной группой; или ^^алкил, замещенный одним R₁₁;

   R4_b представляет собой водород или

   R4_a и R4_b взяты вместе с образованием =O;

   Y представляет собой -O-;

   Z представляет собой -CHR₆-;

   R₆ представляет собой водород;

   кольцо А представляет собой фенил или 6-членный ароматический гетероциклил, причем указан

   - 67 031639 ный гетероциклил содержит один или два атома азота; где фенил или гетероциклил необязательно замещен одним или двумя заместителями R₈;

   причем каждый R₈ независимо представляет собой водород; циано или галоген;

   каждый из R_9a и R_9b независимо представляет собой водород; С_1-4алкил;

   каждый из R_10a и R_10b независимо представляет собой водород;

   R₁₁ представляет собой -NR_10aR_10b;

   x₁ представляет собой CR_5a;

   х₂ представляет собой CR_5b;

   х₃ представляет собой CR_5c;

   каждый R₁₅ независимо выбран из группы, состоящей из водорода и галогена;

   каждый из R_5a и R_5c независимо выбран из группы, состоящей из водорода; циано; галогена и C₁₆алкила, замещенного одной или двумя гидроксильными группами;

   R_5b представляет собой C_1-6алкил или C_3-6циклоалкил, или его фармацевтически приемлемая соль присоединения.
2. 2. Соединение по п.1, где y₁ представляет собой СН;

   у₂ представляет собой СН;

   R₇ представляет собой водород;

   X представляет собой ковалентную связь;

   R2a представляет собой водород;

   R2b представляет собой водород;

   R₃ представляет собой водород или C_1-6алкил, замещенный одной гидроксильной группой;

   R4a представляет собой водород;

   R4b представляет собой водород;

   Y представляет собой -О-;

   Z представляет собой -CHR₆-;

   R₆ представляет собой водород;

   кольцо А представляет собой фенил, необязательно замещенный одним заместителем R₈; причем каждый R₈ независимо представляет собой водород или галоген;

   x1 представляет собой СН;

   х₂ представляет собой CR_5b;

   x₃ представляет собой СН;

   каждый R₁₅ представляет собой водород;

   R_5b представляет собой ^^алкил или С_3-6циклоалкил.
3. 3. Соединение по п.1, где R₈ представляет собой водород.
4. 4. Соединение по п.1, где x₁ и х₃ представляют собой СН;

   х₂ представляет собой CR_5b;

   R_5b представляет собой изопропил.
5. 5. Соединение по п.1, где y₁ и у₂ представляют собой СН.

   его таутомер или стереоизомерная форма, где y₁ представляет собой CR_7a;

   y2 представляет собой СН;

   R_7a представляет собой водород;

   R₇ представляет собой водород;

   X представляет собой -CR_1a-;

   R_1a представляет собой водород; -C(=O)-NR_9aR_9b или C_1-6алкил-О-карбонил-;

   R_2a представляет собой водород;

   R_4a представляет собой водород; галоген; C_1-6алкил; C_1-6алкил, замещенный одной или двумя гидроксильными группами; C_1-6алкил-О-карбонил-; C_1-6алкилкарбонилокси-;

   R_4b и R₃ взяты вместе с образованием связи или

   - 68 031639

   R4a и R4b вместе образуют =O, причем в таком случае R3 представляет собой водород;

   Y представляет собой -O-;

   Z представляет собой -CHR
6. 6-;

   R6 представляет собой водород;

   кольцо А представляет собой фенил; где фенил необязательно замещен одним или двумя заместителями R₈;

   причем каждый R₈ независимо представляет собой галоген;

   каждый из R_9a и R_9b независимо представляет собой водород или С_1-4алкил;

   x1 представляет собой CR5a;

   х2 представляет собой CR5b;

   х3 представляет собой CR5c;

   каждый R₁₅ представляет собой водород;

   каждый из R5a и R5c представляет собой водород;

   R_5b представляет собой Ц^алкил, или его фармацевтически приемлемая соль присоединения.
7. 7. Соединение по п.6, где y₁ представляет собой СН;

   у2 представляет собой СН;

   R₇ представляет собой водород;

   X представляет собой -CR_1a-;

   R_1a представляет собой водород; -C(=O)-NR_9aR_9b или Ц^алкил-О-карбонил-;

   R2a представляет собой водород;

   R_4a представляет собой водород; галоген; Ц^алкил или C_1-6алкил-О-карбонил-;

   R4b и R3 взяты вместе с образованием связи или

   R4a и R4b вместе образуют =O, причем в таком случае R3 представляет собой водород;

   Y представляет собой -O-;

   Z представляет собой -CHR6-;

   R6 представляет собой водород;

   кольцо А представляет собой фенил, необязательно замещенный одним или двумя заместителями R8;

   причем каждый R8 независимо представляет собой галоген;

   каждый из R_9a и R_9b независимо представляет собой водород или С_1-4алкил;

   x1 представляет собой CR5a;

   x2 представляет собой CR5b;

   x3 представляет собой CR5c ;

   каждый R₁₅ представляет собой водород;

   R5a и R5c представляют собой водород;

   R_5b представляет собой Ц^алкил.
8. 8. Фармацевтическая композиция, содержащая фармацевтически приемлемый носитель и терапевтически эффективное количество соединения по любому из пп.1-7 в качестве активного ингредиента.