EA027753B1 - Фибринолитические композиции, включающие бромелаин и наттокиназу, для предотвращения и лечения флеботромботических состояний - Google Patents

Abstract

Изобретение относится к фибринолитическим композициям для предотвращения и лечения флеботромботических состояний, включающим бромелаин и наттокиназу в качестве единственных активных ингредиентов, где весовое соотношение между бромелаином и наттокиназой составляет 1,6:1. Композиция представлена в форме, подходящей для перорального введения в форме двухслойных таблеток, причем каждый слой содержит один фермент и защищен от желудочного сока. Технический результат заключается в обеспечении полезного синергического эффекта при использовании комбинация только двух ферментов, а именно бромелаина и наттокиназы.

Description

Настоящее изобретение касается фибринолитических композиций для предотвращения и лечения флеботромботических состояний.

Уровень техники, к которому относится изобретение

Флеботромбоз представляет собой заболевание, характеризующееся образованием тромба в просвете одной или более вен, невоспалительной этиологии, то есть исключающее тромбофлебит.

Несколько причин могут вызывать заболевание и могут появляться как отдельно, так и в различных комбинациях: изменения венозной стенки, замедленное течение крови или изменения свертываемости крови. Эти явления чаще встречаются у индивидуумов с плохим общим состоянием здоровья, диабетом, у пациентов с кардиопатией и у выздоравливающих пациентов после операции.

Наиболее часто поражаются нижние конечности, так же, как и тазовые вены, воротная вена и синусы твердой мозговой оболочки. Формирующийся тромб слабо адгезируется к стенке сосуда, таким образом, легко отделяясь и становясь эмболом, который может перекрыть/окклюзировать дистальные сосуды.

Тромб может окклюзировать сосуд, полностью останавливая кровоток. Сосуд далее заполняется соединительной тканью, которая превращает сосуд в фиброзную массу. Могут образовываться небольшие новые сосуды, которые позволяют полностью или частично восстановить кровоток. Связанные с флеботромбозом расстройства и получаемая клиническая симптоматика различаются в зависимости от области и значимости вовлеченного сосуда; чем больше область, тем более выраженными являются эффекты, развивающиеся от нарушенной циркуляции: набухание венозного сосудистого русла, отек окружающей область ткани, посинение и более или менее острая боль. Если сосуд небольшой, флеботромбоз может протекать бессимптомно и разрешиться, в то время как в других случаях могут развиться осложнения, наиболее серьезным из которых является легочная эмболия.

Лечение флеботромбоза вовлекает иммобилизацию конечности. Также показано применение тромболитических лекарственных средств.

Бромелаин представляет собой смесь из цистеина и протеазы, выделенной из фрукта и стебля ананаса (Апапак сошокик). принадлежащего к семейству растений Вготейасеае. Молекулярная масса компонентов варьируется от 8 до 28,5 кДа.

Концентрацию бромелаина выражают в протеолитических единицах (СЭИ единицы или Международные единицы, ΐυ) или весовых единицах. Бромелаин в основном применяют как противовоспалительное и противоотечное средство.

Он является, в частности, эффективным при воспалительных состояниях мягких тканей, развивающихся даже после травматических событий и при послеоперационных реакциях тканей. Показано, что бромелаин обладает противовоспалительной активностью из-за его способности повышать биосинтез противовоспалительных простагландинов (т.е. простагландинов Е2) и ингибировать провоспалительные простагландины.

Для противовоспалительного применения бромелаин вводят в дозе 40 мг, повторяя от двух до шести раз в день, хотя и значительно более высокие дозы тестируют без развития каких-либо значительных побочных эффектов, за одним исключением, развития легких расстройств желудочно-кишечного тракта и редких реакций гиперчувствительности. Другие фармакологические действия бромелаина включают антитромботическое и профибринолитическое действие, гипотензивную активность и способность растворять атеросклеротические бляшки. Также описывают синергическую активность при антибактериальной и противоопухолевой терапии. Бромелаин также применяют при диспепсии в комбинации с соками поджелудочной железы.

Наттокиназа представляет собой протеолитический фермент, выделяемый из натто, традиционной японской еды на основе вареных соевых бобов, ферментируемых, в частности, ВасШик киЫШк: В.киЫШк иайо.

Наттокиназа представляет собой серин-протеазу приблизительно в 30 кДа, принадлежащую к субтилизиновому семейству, с высокой фибринолитической активностью. По этой причине ее применяют как заместитель для других антиагрегантных и антикоагулянтных лекарственных средств, таких, как ацетилсалициловая кислота, тиклопидин и варфарин.

\νϋ 200821987 раскрывает состав, содержащий различные ферменты (грибковую протеазу, папаин, бромелаин, грибковый панкреатин, амилазу, наттокиназу, протеазу-8 и липазу) в комбинации с производными из трав (рутином, имбирем) и микроэлементами (кальцием, магнием, калием и другими элементами), для предотвращения и лечения тромбофлебита.

Целью настоящего изобретения является комбинация только двух ферментов, а именно бромелаина и наттокиназы, в конкретных соотношениях и соответствующим образом сформулированных, которые показывают, в частности, полезный синергический эффект.

Описание изобретения

Настоящее изобретение относится к фибринолитическим композициям для предотвращения и лечения флеботромботических состояний, содержащим бромелаин и наттокиназу в качестве единственных активных ингредиентов, и к совместному применению бромелаина и наттокиназы в свете их фибринолитических свойств.

В соответствии с предпочтительным аспектом композиции в соответствии с изобретением содержат

- 1 027753 активные ингредиенты в пределах следующих диапазонов:

a) бромелаин между 20 и 400 мг, предпочтительно 160 мг/доза/день; и

b) наттокиназа: применяют в дозах между 10 и 100 мг.

В соответствии с более предпочтительным аспектом композиции в соответствии с изобретением содержат активные ингредиенты в следующих дозах:

c) бромелаин 160 мг/доза/день; и ά) наттокиназа 100 мг/доза/день.

В соответствии с предпочтительным аспектом композиции в соответствии с изобретением содержат бромелаин и наттокиназу в весовом соотношении 1,6:1.

В соответствии с предпочтительным аспектом композиции в соответствии с изобретением изготавливают в виде двухслойных таблеток с одним ферментом в каждом слое.

Клиническое исследование

Тестирования тромболитической эффективности препаратов бромелаина и наттокиназы проводят в соответствии с моделью Л81гир1 (Тйе йЬйи р1а!е те!йоб £ог екйтайид йЬгто1у1ю асйуйу. Лтсй. Вюсйет. Вюрйук.; 40:346-351, 1952), производя каждый тест в трех экземплярах на фибрине крупного рогатого скота в присутствии 24 единиц плазминогена, выверяя фибринолитическое действие бромелаина и наттокиназы индивидуально и смешивая две субстанции в различных весовых соотношениях. В описанной выше модели действие бромелаина составляет 11,5±2,5 ФЕ/мл, в то время как для наттокиназы оно составляет 18,9±3,3 ФЕ/мл. При смешивании двух ферментов вместе в соотношении 1:1 фибринолитическая активность составляет 97,8±13,3 ФЕ/мл с очевидным синергическим эффектом, который подтверждают снижением доз обоих ферментов до 1/10 и повторным тестированием фибринолитической активности двух соединений в смеси 1:1 по весу. Действуя таким образом, получают значение фибринолитической активности 12,7±2,9 ФЕ/мл, близкое к получаемой при применении обоих ферментов в дозах в 10 раз выше.

При проведении дополнительных тестов получают лучшие результаты при смешивании бромелаина и наттокиназы в весовом соотношении 1,6:1.

Эффективность комбинации бромелаина и наттокиназы также оценивают путем сравнения с комбинацией протеолитических ферментов и других ингредиентов, описанных в \УО 2008/02198, также применяя модель ΛδΙπιρΙ. Таким образом, оценивают фибринолитическое действие индивидуальных соединений, всей смеси и только смеси индивидуальных ферментов, т.е. без производных трав. Наблюдают, что в отдельности большая часть соединений (грибковых протеаз, папаина, панкреатина, амилазы и протеазы-δ) намного менее активны, чем бромелаин и наттокиназа. Последние два, которые активны при величинах 125±13,2 и 139,5±34,7 ФЕ/мл соответственно, оказываются не менее чем в 100 раз более активными, чем другие отдельные ферменты. Тем не менее, производные трав и микроэлементы оказываются полностью неактивными. Смесь всех ингредиентов (ферментов, производных трав и микроэлементов) приводит к фибринолитической активности, но меньшей, чем та, которую получают путем смешивания только бромелаина и наттокиназы. Фибринолитическое действие всей смеси составляет 47,9±11,8 ФЕ/мл, смеси всех ферментов 52,7±8,4 ФЕ/мл и комбинации бромелаина и наттокиназы 1127,67±119,6 ФЕ/мл. Эти тесты ясно демонстрируют, что комбинация бромелаина и наттокиназы является более эффективной, чем комбинация, заявленная в \УО 200821987, и комбинация отдельных ферментов, описанная здесь. Этот феномен может быть связан с возможным антагонизмом, создаваемым путем смешивания различных протеиновых структур, и протеиновых структур с молекулами производных трав, которые конкурируют за те же самые молекулярные эпитопы на фибрине, делая процесс фибринолиза неэффективным или недостаточно эффективным.

Составы.

Композиции в соответствии с изобретением можно составить путем, подходящим для перорального введения, и изготовить при помощи стандартных методов, хорошо известных в фармакологии, таких, как описанные в РепипдЮп'х Рйаттасеийса1 НаибЬоок, Маск РиЬИкЫид Со., Ν.Υ., И8Л, применяя эксципиенты, растворители, филлеры, антикомкователи, ароматизаторы и подсластители, приемлемые для их конечного применения.

Как упомянуто, в соответствии с предпочтительным аспектом композиции в соответствии с изобретением составляют в виде двухслойных таблеток с одним ферментом на слой; оба слоя покрывают оболочкой, защищающей от желудочного сока, с зависимым от времени контролируемым интестинальным высвобождением, длящимся приблизительно 4-8 ч. Этот тип высвобождения возможен при использовании в центральном ядре каждого слоя метоцеля или метолозы различных степеней полимеризации, смешанных в соотношении 1:1 с авицелем или микроцелем, которые, в свою очередь, предварительно смешивают в соотношении 1:1 со смесью маннитола и дикальция фосфата, предварительно составленных в соотношении 1:0,5. Покрытие для защиты от среды в желудке пленкой получают применяя шеллак прямо в промышленной машине для нанесения оболочки с емкостью между 10 и 300 кг, предпочтительно в 50 кг. Наконец, покрытие пленкой можно усилить при помощи дополнительной стадии в промышленной машине для нанесения оболочки, одновременно применяя 1:0,5:0,5 смеси карбоната аммония, триэтил- 2 027753 цитрата и шеллака.

Примеры составов в соответствии с изобретением представлены ниже.

Пример 1. Желудочнозащищенные таблетки контролируемого высвобождения, содержащие бромелаин 80 мг, наттокиназа 50 мг.

Пример 2. Двухслойные желудочнозащищенные таблетки контролируемого высвобождения, содержащие в каждом слое бромелаин 160 мг, наттокиназа 100 мг.

Пример 3. Желудочнозащищенный гранулят, полученный на псевдоожиженном слое, содержащий бромелаин 320 мг, наттокиназа 200 мг.

Claims (4)

1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

   1. Фибринолитическая композиция, включающая бромелаин и наттокиназу в качестве единственных активных ингредиентов, где весовое соотношение между бромелаином и наттокиназой составляет 1,6:1.
2. 2. Композиция по п.1 в форме, подходящей для перорального введения.
3. 3. Композиция по п.2 в форме двухслойных таблеток, в которых каждый слой содержит один фермент и защищен от желудочного сока.
4. 4. Комбинация бромелаина и наттокиназы с весовым соотношением 1,6:1 для применения в лечении тромбофлебита.