ES2637847T3 - Composiciones fibrinolíticas que comprenden bromelina y nattoquinasa para la prevención y el tratamiento de estados flebotrombóticos - Google Patents

Abstract

Composiciones que comprenden bromelina y nattoquinasa como los únicos principios activos, en las que la relación en peso entre la bromelina y la nattoquinasa es de 1,6:1.

Description

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DESCRIPCION

Composiciones fibrinoltticas que comprenden bromelina y nattoquinasa para la prevencion y el tratamiento de estados flebotromboticos

La presente invencion se refiere a composiciones fibrinolfticas para la prevencion y el tratamiento de estados flebotromboticos.

Antecedentes de la invencion

La flebotrombosis es una enfermedad caracterizada por la formacion de trombos en la luz de una o mas venas, con causas no inflamatorias, a diferencia de la flebitis.

Varias causas pueden provocar la enfermedad, y pueden producirse individualmente o combinadas de diversas maneras: modificaciones de la pared venosa, flujo sangumeo lento, o cambios en la coagulabilidad sangumea. Estos fenomenos son mas frecuentes en personas con un estado de salud general precario, en pacientes diabeticos, pacientes cardiopaticos y pacientes convalecientes posquirurgicos.

Con mayor frecuencia, las extremidades inferiores estan afectadas, asf como las venas pelvicas, la vena porta y los senos de la duramadre. Los trombos que se forman se adhieren debilmente a la pared del vaso, desprendiendose facilmente de este modo y convirtiendose en embolos, que son capaces de ocluir otros vasos distales.

El trombo puede ocluir el vaso, deteniendo completamente el flujo sangumeo. El vaso es posteriormente invadido por tejido conectivo, transformando el vaso en una masa fibrosa. Pueden formarse vasos sangumeos pequenos nuevos, permitiendo el restablecimiento total o parcial del flujo sangumeo. Los trastornos relacionados con la flebotrombosis, y el cuadro clmico derivado, difieren segun la localizacion y la importancia del vaso implicado; cuanto mayor sea el area, mas evidentes son los efectos que derivan de la circulacion alterada: turgencia del lecho de corriente venoso vascular, edema del tejido circundante, color azulado y dolor mas o menos agudo. Si el vaso es pequeno, la flebotrombosis puede ser asintomatica y puede curarse, mientras que en otros casos pueden presentarse complicaciones, siendo la mas grave la embolia pulmonar.

El tratamiento de la flebotrombosis implica la inmovilizacion de la extremidad. Tambien esta indicado el uso de farmacos tromboltticos.

La bromelina es una mezcla de cistema y proteasa extrafda del fruto y el tallo de la pina (Ananas comosus), que pertenece a la familia de plantas Bromeliaceae. La masa molecular de los componentes vana de 8 a 28,5 kDa.

La concentracion de bromelina se expresa en unidades proteolfticas (unidades GDU o unidades internacionales, IU) o unidades de peso. La bromelina se usa principalmente como agente antiinflamatorio y antiedematoso.

Es particularmente eficaz en estados inflamatorios de los tejidos blandos, incluso tras episodios traumaticos y reacciones tisulares posquirurgicas. Se ha demostrado que la actividad antiinflamatoria de la bromelina se debe a su capacidad de aumentar la biosmtesis de prostaglandinas antiinflamatorias (es decir, prostaglandinas E2) e inhibir las prostaglandinas proinflamatorias.

En su uso antiinflamatorio, la bromelina se administra en dosis repetidas de 40 mg de dos a seis veces al dfa, aunque se han probado dosis mucho mas altas sin ningun efecto secundario importante, con la unica excepcion de trastornos gastrointestinales leves y reacciones de hipersensibilidad raras. Otras actividades farmacologicas de bromelina incluyen acciones antitromboticas y profibrinolfticas, una actividad hipotensora y la capacidad de solubilizar las placas ateroscleroticas. Tambien se han descrito las actividades sinergicas en terapias antibioticas y antitumorales. La bromelina tambien se usa en la dispepsia, combinada con los jugos pancreaticos.

La nattoquinasa es una enzima proteolftica extrafda de natto, un alimento japones tradicional basado en habas de soja herbidas fermentadas por una Bacillus subtilis particular: B. subtilis natto.

La nattoquinasa es una serina-proteasa de aproximadamente 30 kDa, que pertenece a la familia de la subtilisina, con una potente actividad fibrinolftica. Por este motivo se emplea como un sustituto para otros farmacos antiagregantes y anticoagulantes tales como acido acetilsalidlico, ticlopidina y warfarina.

El documento WO 200821987 desvela una preparacion que contiene diversas enzimas (una proteasa fungica, papama, bromelina, pancreatina fungica, amilasa, nattoquinasa, proteasa-S y lipasa) combinadas con derivados herbarios (rutina y jengibre) y oligolementos (calcio, magnesio, potasio y otros elementos) para la prevencion y el tratamiento de la tromboflebitis.

El objeto de la presente invencion es una combinacion de dos enzimas solo, a saber, bromelina y nattoquinasa, en relaciones espedficas y formuladas adecuadamente, que presentan un efecto sinergico particularmente ventajoso.

Descripcion de la invencion

La presente invencion se refiere a composiciones fibrinolfticas para la prevencion y el tratamiento de estados flebotromboticos, que contienen bromelina y nattoquinasa como los unicos principios activos en la relacion de peso de 1,6:1, y el uso combinado de bromelina y nattoquinasa en la misma relacion en peso en vista de sus propiedades 5 fibrinolfticas.

Segun un aspecto preferido, las composiciones segun la invencion contendran los principios activos dentro de los siguientes intervalos:

a) bromelina: entre 20 y 400 mg, preferentemente 160 mg/dosisMa; y

b) nattoquinasa: usada en dosis de entre 10 y 100 mg.

10 Segun un aspecto mas preferido, las composiciones segun la invencion contendran los principios activos en las

siguientes dosis:

c) bromelina: 160 mg/dosisMa; y

d) nattoquinasa: 100 mg/dosisMa.

Segun un aspecto preferido, las composiciones segun la invencion se formularan como comprimidos bicapa, con una 15 enzima por capa.

Ensayo clinico

Las pruebas de la eficacia trombolftica de preparaciones de bromelina y nattoquinasa se llevaron a cabo segun el modelo de Astrupt (“The fibrin plate method for estimating fibrinolytic activity”. Arch. Biochem. Biophys.; 40:346-351, 1952), realizando cada prueba por triplicado sobre fibrina bovina en presencia de 24 unidades de plasminogeno, 20 verificando la accion fibrinolftica de la bromelina y la nattoquinasa individualmente, y mezclando las dos sustancias en diversas relaciones en peso. En el modelo descrito anteriormente, la accion de bromelina fue de 11,5±2,5 FU/ml, mientras que la de la nattoquinasa fue de 18,9±3,3 FU/ml. Cuando las dos enzimas se mezclaron entre sf en la relacion de 1:1, la accion fibrinolftica fue de 97,8 ± 13,3 FU/ml, con un efecto sinergico claro, que se confirmo reduciendo las dosis de ambas enzimas en 1/10 y probando de nuevo la accion fibrinolftica de los dos compuestos 25 en una mezcla 1:1 en peso. Operando de esta manera, la accion fibrinolftica fue de 12,7 ± 2,9 FU/ml, un valor similar al que puede obtenerse usando ambas enzimas en dosis 10 veces mas altas.

Cuando se realizaron pruebas adicionales, se observo que los mejores resultados se obtuvieron mezclando bromelina y nattoquinasa en la relacion en peso de 1,6:1.

La eficacia de la combinacion de bromelina y nattoquinasa tambien se evaluo mediante comparacion con la 30 combinacion de enzimas proteolfticas y otros ingredientes descritos en el documento WO 2008/02198, usando de nuevo el modelo de Astrupt. Por lo tanto, se evaluo la accion fibrinolftica de los compuestos individuales, la mezcla total y la mezcla de solo enzimas individuales, es decir, sin los derivados herbarios. Se observo que, individualmente, la mayona de los compuestos (proteasa fungica, papama, pancreatina, amilasa y proteasa-S) fueron mucho menos activos que la bromelina y la nattoquinasa. Los dos ultimos, que fueron activos en valores de 35 125±13,2 FU/ml and 139,5±34,7 FU/ml respectivamente, resultaron no menos de 100 veces mas activo que las otras

enzimas unicas. Sin embargo, los derivados herbarios y los oligolementos resultaron totalmente inactivos. La mezcla de todos los ingredientes (enzimas, derivados herbarios y oligolementos) condujo a actividad fibrinolftica, pero menos que la obtenida mediante la mezcla de bromelina y nattoquinasa sola. La accion fibrinolftica de la mezcla total fue de 47,9 ± 11,8 FU/ml, la de la mezcla de todas las enzimas de 52,7 ± 8,4 FU/ml, y la de la combinacion de la 40 bromelina y la nattoquinasa de 1.127,67 ± 119,6 FU/ml. Estas pruebas demuestran claramente que la combinacion de bromelina y nattoquinasa es mas eficaz que la combinacion reivindicada en el documento WO200821987 y la combinacion de las enzimas unicas descritas en el presente documento. Este fenomeno puede asociarse con posibles antagonismos creados mezclando diferentes estructuras de protema, y estructuras de protema con moleculas de derivacion herbaria, que compiten por los mismos epftopos moleculares en fibrina, haciendo que el 45 procedimiento fibrinolftico sea ineficaz o no muy eficaz.

Formulaciones

Las composiciones segun la invencion pueden formularse de una manera adecuada para la administracion oral, y se prepararan mediante procedimientos convencionales bien conocidos en la tecnologfa farmaceutica, tales como los descritos en "Remington's Pharmaceutical Handbook", Mack Publishing Co., N.Y., EE.UU., usando excipientes, 50 diluyentes, cargas, agentes antiapelmazantes, aromatizantes y edulcorantes aceptables para su uso final.

Tal como se menciona, segun un aspecto preferido, las composiciones segun la invencion se formularan como comprimidos bicapa, con una enzima por capa; ambas capas se gastroprotejeran, con una liberacion intestinal controlada dependiente del tiempo que dura aproximadamente 4-8 horas. Este tipo de liberacion se hace posible mediante el uso, en el nucleo central de cada capa, de methocel o metolosa con diferentes grados de polimerizacion, 55 mezclados en la relacion de 1:1 con avicel o microcel que, a su vez, se premezclan en la relacion de 1:1 con una mezcla de manitol y fosfato dicalcico, preconstituidos en la relacion de 1:0,5. El recubrimiento de peftcula gastroprotegido se puede obtener despues usando goma laca directamente en un recipiente de recubrimiento

industrial con una capacidad de entre 10 y 300 kg, preferentemente 50 kg. Finalmente, el recubrimiento de pelfcula puede fabricarse mas fuerte mediante una etapa adicional en el recipiente de recubrimiento industrial y el uso concomitante de mezclas de 1:0,5:0,5 de carbonato de amonio, citrato de trietilo y goma laca.

Los ejemplos de formulacion segun la invencion se exponen a continuacion.

5 Ejemplo 1) Comprimidos de liberacion controlada gastroprotegidos que contienen:

- 80 mg de bromelina

- 50 mg de nattoquinasa

Ejemplo 2) Comprimidos de liberacion controlada gastroprotegidos bicapa que contienen, por capa:

- 160 mg de bromelina

10 - 100 mg de nattoquinasa

Ejemplo 3) Granulado gastroprotegido, obtenido en lecho fluido, que contiene:

- 320 mg de bromelina

- 200 mg de nattoquinasa

Claims (3)

1. REIVINDICACIONES

   1. Composiciones que comprenden bromelina y nattoquinasa como los unicos principios activos, en las que la relacion en peso entre la bromelina y la nattoquinasa es de 1,6:1.
2. 2. Composiciones segun la reivindicacion 1 en una forma adecuada para administracion oral.

   5 3. Composiciones segun la reivindicacion 2 en forma de comprimidos bicapa, en los que cada capa contiene una

   unica enzima, y que estan gastroprotegidos, con una liberacion intestinal controlada dependiente del tiempo que dura aproximadamente 4-8 horas.
3. 4. Combinacion de bromelina y nattoquinasa en la relacion en peso de 1,6:1 para su uso en el tratamiento de la tromboflebitis.