EA023020B1

EA023020B1 - Спирогетероциклические соединения и их применение в качестве антагонистов mglu5

Info

Publication number: EA023020B1
Application number: EA201270799A
Authority: EA
Inventors: Амедео Леонарди; Джанни Мотта; Карло Рива; Лучано Гварнери; Давид Грацьяни; Карло Де Тома; Катя Димитрова Карамфилова
Original assignee: Рекордати Айерленд Лимитед
Priority date: 2010-07-09
Filing date: 2011-07-08
Publication date: 2016-04-29
Also published as: EP2590985B1; EA201270799A1; KR101862626B1; AU2011275696A1; IL223330A0; CN103097391A; US20120059015A1; SG186107A1; CN103097391B; CA2800930A1; BR112013000529A2; PH12012502348A1; ES2492694T3; CA2800930C; JP2013529673A; US8580962B2; WO2012004400A1; KR20130097153A; MX2013000300A; IL223330A

Abstract

Изобретение предусматривает создание соединений, имеющих общую формулу Iв которой X означает атом кислорода; Rозначает атом углерода, азота, кислорода или серы; Rозначает СН, СН, N или NH; Rозначает валентную связь или группу СН или СН; m равно 1, 2 или 3; n равно 1 или 2; когда n равно 2 или m равно 2 или 3, кольцо, содержащее R, может быть сочленено с необязательно замещенным бензольным кольцом; и каждый ---- означает одинарную или двойную связь при условии, что одна двойная связь отходит от атома углерода, с которым связан R-С≡С-, и что ни один атом углерода кольца не имеет две двойных связи; и R, Rи Rозначают широкий диапазон заместителей. Настоящее изобретение дополнительно предусматривает создание фармацевтической композиции для лечения заболеваний или нарушений нижних мочевыводящих путей, мигрени; гастроэзофагеальной рефлюксной болезни, тревожных расстройств, передозировки, аддиктивных расстройств и абстинентных расстройств, нейропатической боли; синдрома умственной отсталости с ломкой хромосомой X, включающей соединение формулы I или его гидрат, энантиомер, диастереомер или их фармацевтически приемлемые соли в смеси с фармацевтически приемлемым носителем.

Description

Изобретение относится к новым спирогетероциклическим соединениям, обладающим избирательным сродством к метаботропным глутаматным рецепторам 5-го подтипа (т01и5), к фармацевтическим композициям, включающим такие соединения, и к способам лечения с их использованием.

Предпосылки создания изобретения

Заболевания нижних мочевыводящих путей включают ряд синдромов, негативно влияющих на нормальное мочеиспускание. К заболеваниям нижних мочевыводящих путей может привести сочетание патологических и(или) возрастных изменений мочеполовой системы, или иная этиология, например, неврологические расстройства. Лица, имеющие заболевания нижних мочевыводящих путей, страдают от ухудшения качества жизни, в том числе от состояния нарушенного душевного равновесия, низкого самовосприятия и общего снижения эмоционального равновесия, социальной функции и общего состояния здоровья. Более того, заболевания нижних мочевыводящих путей могут быть связаны с другими физическими заболеваниями, в том числе с целлюлитом, пролежневой язвой, инфекциями мочевыводящих путей, падениями с переломами костей, депривацией сна, социальной самоизоляцией, депрессией и половой дисфункцией. Со стороны лиц, оказывающих медицинскую помощь, а именно, как членов семьи, так и медиков, в отношении людей пожилого возраста с заболеваниями нижних мочевыводящих путей, требуется проявление большей заботы, что может послужить фактором при принятии решений о помещении их в медицинские учреждения.

По оценкам Национального института здравоохранения США около 35 миллионов американских граждан страдают заболеваниями нижних мочевыводящих путей. Заболевания нижних мочевыводящих путей наиболее часто встречаются у женщин, чем у мужчин (2:1) в возрасте до 80 лет, а по достижению указанного возраста мужчины и женщины в равной степени подвержены этому заболеванию. Частотность заболеваний нижних мочевыводящих путей увеличивается с возрастом. К 65 годам заболевания нижних мочевыводящих путей поражают от 15 до 30% всех лиц и приблизительно 50% хронических больных.

Для лечения заболеваний нижних мочевыводящих путей применялись лечебные препараты, характеризующиеся различными механизмами действия. Указанные препараты включают препараты, непосредственно воздействующие на нижние мочевыводящие пути, например, антимускариновые средства и альфа-1 антагонисты, а также препараты, действующие через центральную нервную систему, например, ингибиторы обратного захвата серотонина и (или) норадреналина. По информации Института здравоохранения США, несмотря на достигнутый определенный прогресс в области диагностики, управления ходом и лечения заболеваний нижних мочевыводящих путей, указанные заболевания нередко остаются трудноизлечимыми. Таким образом, до сих пор существует необходимость в усовершенствованных лекарственных препаратах, рецептурах и терапевтических методах для лечения заболеваний нижних мочевыводящих путей.

Глутаминовая кислота - возбуждающая аминокислота - присутствует при синапсисе по всей центральной нервной системе, и, как известно, воздействует по меньшей мере на два типа рецепторов: ионотропные и метаботропные глутаматные рецепторы. Основная функция ионотропных глутаматных рецепторов заключается в том, что их активация формирует лигандуправляемые ионные каналы и, тем самым непосредственно опосредует передачу электрических сигналов нервных клеток, вызывая быстрые и относительно значительные сдвиги проводимости в постсинаптических мембранах. Метаботропные глутаматные рецепторы (тС1иКк) косвенно регулируют передачу электрических сигналов, оказывая влияние на межклеточные метаболические процессы с помощью С-протеинов. Сдвиги в постсинаптической клетке, опосредованные метаботропными глутаматными рецепторами, в последующем относительно замедляются со временем и не связаны с быстрыми и значительными сдвигами в проводимости нейрональных мембран.

Было приведено описание трех подтипов ионотропных глутаматных рецепторов, т.е., ΝΜΌΑрецепторов, АМРА-рецепторов и каинатных рецепторов.

Было клонировано восемь подтипов метаботропных глутаматных рецепторов. Подтипы классифицируются на три группы на основе сходств последовательностей и фармакологических и биохимических свойств (8роотеп с( а1., Ттепбк РЬагтасо1. 8с1. 22: 331-337, 2001): рецепторы тС1и группы I (тС1ш и тС1и5), рецепторы тС1и группы II (тС1и2 и тС1и3) и рецепторы тС1и группы III (тС1и4, тС1и6, тС1и7 и тС1и8).

Известно, что метаботропный глутаматный рецептор 5-го подтипа группы I (либо человеческий, либо крысиный) включает по меньшей мере два подтипа - а и Ъ. Подтип Ъ длиннее, чем подтип а из-за альтернативного сплайсинга удлинения 32 аминокислот в С-терминальном (внутриклеточном) домене, 50 аминокислотных остатков в нижней части начала домена. Длина человеческого рецептора тС1и5Ъ составляет 1212 аминокислот, в то время как в форме а отсутствуют аминокислоты с 877 по 908 (№ 828 является первой аминокислотой внутриклеточного домена). Длина крысиного рецептора тС1и5Ъ составляет 1203 аминокислоты, при этом в форме а отсутствуют аминокислоты с 876 по 907 (№ 827 является первой аминокислотой внутриклеточного домена). (Нетшаик апб СЬа1Ьк, ВюсЬет. 1. 359: 465-484, 2001).

- 1 023020

Рецепторы т01и, принадлежащие семейству 3-х рецепторов, сопряжённых с О-белком (ОРСК), характеризуются двумя отличающимися топологическими доменами: большой внеклеточный Νтерминальный домен, содержащий модуль венериной мухоловки, ответственный за связывание агониста, и 7-ТМ домен плюс внутриклеточный С-терминальный домен, участвующий в активации рецептора и в связывании О-белка.

Было продемонстрировано, что 7-ТМ домен рецепторов тО1и группы I образует связывающий карман в соотношении положительных и отрицательных аллостерических модуляторов; отрицательные аллостерические модуляторы были определены благодаря применению технологий скрининга с высокой пропускной способностью, и они действуют в качестве неконкурирующих антагонистов, не оказывая при этом воздействия на связывание агониста. Наиболее интересным свойством указанных молекул, кроме их высокой активности, является исключительная селективность в соотношении подтипа.

Область связывания 7-ТМ расположена в кармане, окаймленном ΤΜ-ΙΙΙ, ТМ-У, ТМ-У! и ТМ-УП; указанный сайт соответствует ретинальному связывающему карману в родопсине.

Аллостерические модуляторы метаботропного глутаматного рецептора 5-го подтипа представляют собой замечательное достижение, позволяющее продемонстрировать возможности разработки новых научно-исследовательских инструментов и терапевтических средств, регулирующих активность специфических подтипов тО1иК.

Соединения настоящего изобретения включают приведенные в настоящем описании соединения, применяемые в качестве антагонистов метаботропного глутаматного рецептора 5-го подтипа, которые во многих случаях фактически являются отрицательными аллостерическими модуляторами, воздействующими на область связывания 7-ТМ.

В заявке на патент \УО 00/63166 раскрываются производные трициклической карбаминовой кислоты, применяемые для лечения различных заболеваний, в том числе недержания мочи. Раскрываемые производные являются агонистами или антагонистами рецепторов тО1и группы I, обладающих специфичностью в соотношении к рецептору тО1ш.

В заявке на патент \УО 01/32632 раскрываются производные пиримидина, применяемые для лечения различных заболеваний, в том числе недержания мочи.

Производные раскрываются как селективные антагонисты рецептора тО1ш, обладающего по меньшей мере 10-кратной селективностью в соотношении рецептора тО1ш по сравнению с рецептором тО1и 5.

В заявке на патент \УО 01/27070 раскрываются новые бис-арилацетамиды, применяемые для лечения недержание мочи, помимо других состояний.

Раскрываются молекулы, являющиеся агонистами или антагонистами, обладающими селективностью в соотношении рецептора тО1и1.

В патенте США 6,369,222 раскрываются производные гетероциклоазепенил пиримидина, применяемые для лечения недержание мочи, помимо других состояний. Производные раскрываются как антагонисты рецептора тО1и1

Таким образом, в вышеуказанных областях применения и в патенте раскрываются антагонисты рецептора тО1и1 для их применения при лечении недержания мочи. Тем не менее, ни в одной из ссылок не дается экспериментального подтверждения лечения недержания мочи либо у человека, либо в животной модели заболевания нижних мочевыводящих путей.

Нами было проведено тестирование активности селективных антагонистов тО1и1 и тО1и5 в крысиных моделях, применяемых для обнаружения воздействия на нижние мочевыводящие пути. Высокая эффективность была обнаружена для антагонистов, селективных в отношении к метаботропному глутаматному рецептору 5-го подтипа, в то время как коммерчески доступные на рынке антагонисты, селективные в отношении метаботропному глутаматному рецептору 1-го подтипа не проявили такого воздействия. Антагонист, селективный в соотношении рецепторов тО1иК группы II также не проявил указанного воздействия в крысиной модели.

Учитывая указанные результаты селективные антагонисты метаботропного глутаматного рецептора 5-го подтипа могут явиться эффективным средством для лечения заболеваний нижних моче выводящих путей.

В данной области техники существует необходимость в разработке новых соединений и композиций для лечения заболеваний нижних мочевыводящих путей и ослабления симптомов, связанных с такими заболеваниями. Изобретатели настоящего изобретения решили эту проблему путем разработки новых гетероциклических соединений, являющихся селективными модуляторами метаботропного глутаматного рецептора 5-го подтипа, в том числе селективными антагонистами метаботропного глутаматного рецептора 5-го подтипа. Соединения в соответствии с настоящим изобретением обеспечивают эффективное ингибирование рефлекса мочеиспускания благодаря новому механизму действия.

Настоящее изобретение предусматривает создание соединения, имеющего общую формулу I

- 2 023020

в которой

X означает атом кислорода;

К! означает атом углерода, азота, кислорода или серы;

К_ь означает СН, СН₂, N или ΝΗ;

К₂ означает валентную связь или группу СН или СН₂;

К₃ означает необязательно замещенную СрС₆ алкильную группу, необязательно замещенную моно-, биили трициклическую С₁-С₁₃ гетероциклильную группу, содержащую от 1 до 5 гетероатомов, выбранных из Ν, О и 8, или необязательно замещенную моно-, би- или трициклическую С₆-С₁₄ арильную группу;

когда К₁ означает атом углерода,

К₄ означает атом водорода, атом галогена, необязательно замещенную моно- или бициклическую С₁-С₉ гетероциклильную группу, содержащую от 1 до 3 гетероатомов, выбранных из Ν, О и 8, или необязательно замещенную моно-, би-или трициклическую С₆-С₁₄ арильную группу;

К₅ означает атом водорода или галогена, цианогруппу, или необязательно замещенные гидрокси, меркапто, амино, карбамоил, С₁-С₆ алкильную или С₁-С₆ алкоксильную группу или группу формулы -С(=О)-К₆, в которой К₆ означает необязательно замещенную С₁-С₆ алкильную или С₁-С₆ алкоксильную группу, необязательно замещенную моно- или бициклическую С₁-С₉ гетероциклильную группу, содержащую от 1 до 3 гетероатомов, выбранных из Ν, О и 8, или необязательно замещенную моно-, би- или трициклическую С₆-С₁₄ арильную группу; или

К₄ и К₅ вместе означают оксогруппу или необязательно замещенную метиленовую или гидроксиимино группу; или

К₄ и К₅ вместе с К! означают необязательно замещенное ненасыщенное 4-6-членное кольцо, содержащее от 0 до 3 гетероатомов, выбранных из Ν, О и 8;

когда К₁ означает атом кислорода,

К₄ и К₅ отсутствуют; когда К₁ означает атом азота, один из К₄ и К₅ отсутствует и другой является таким, как определено в описании выше; когда К₁ означает атом серы, каждый из К₄ и К₅ независимо отсутствует или означает оксогруппу; т равно 1, 2 или 3; η равно 1 или 2;

когда η равно 2 или т равно 2 или 3, кольцо, содержащее К_ь может быть сочленено с необязательно замещенным бензольным кольцом; и каждый ---- означает одинарную или двойную связь, при условии, что одна двойная связь отходит от атома углерода, с которым связан К₃-С=С-, и что ни один атом углерода кольца не имеет две двойных связи;

и сольваты, гидраты, энантиомеры, диастереомеры, Ν-оксиды и фармацевтически приемлемые соли таких соединений.

Необязательные заместители независимо выбраны из атомов галогена и С₁-С₆ алкильной, С₁-С₆ алкоксильной, гидроксильной, меркапто, нитро, циано, оксо, гало(С_гС₆)алкильной, гало(С_гС₆) алкоксильной, С₁-С₆ алкилтио, С₁-С₆ алкилсульфонильной, С₁-С₆ алкилкарбонильной, сульфамоильной, С₁-С₆ алкилсульфамоильной, ди(С_гС₆)алкилсульфамоильной, (С_гС₆)алкоксикарбонильной и (С₁-С₆) алкилкарбонил(С_гС₆)алкильной групп и из групп формул -ΝΚ*Κ*, -С(=О^К*К*, -А, -О-А, -С(=О)А, -(СН₂)ц-А, -ΝΚ**-Α, -С(=О)ИК**-А, -Ν К**С(=О)А и -О-С(=О)А, в которых каждый К* независимо означает атом водорода или С₁-С₆ алкильную, С₁-С₆ алкилкарбонильную, фенильную или бензильную группу, К** означает атом водорода или С₁-С₆ алкильную группу, ς равно целому числу от 1 до 6 и А означает фенильную группу или С₁-С₈ гетероциклильную группу, содержащую от 1 до 3 гетероатомов, выбранных из Ν, О и 8; при этом каждая группа А необязательно замещена 1-3 группами, независимо выбранными из гало, гидрокси, циано, нитро и С₁-С₆ алкильных групп; и гидраты, энантиомеры, диастереомеры и фармацевтически приемлемые соли таких соединений.

Наиболее предпочтительными соединениями в соответствии с настоящим изобретением являются соединения, в которых X означает атом кислорода, К_1а означает атом азота, К₂ означает связь, и двойная связь отходит от К_1а к атому углерода, с которым связан К₃-С=С-. Тем не менее, также являются предпочтительными соединения в соответствии с настоящим изобретением, в которых X означает атом кислорода, К_1а означает СН группу с двойной связью, отходящей от К_1а к атому углерода, с которым связан К₃-С=С- или СН₂ группу с одинарной связью, отходящей от К_1а к атому углерода, с которым связан К₃-С=С-, и К₂ означает СН₂ группу.

К3 предпочтительно означает алкильную группу, необязательно замещенную С3-С5 гетеромоноцик- 3 023020 лическую группу, содержащую от 1 до 3 гетероатомов, выбранных из Ν, О и 8, необязательно замещенную фенильную группу. Более предпочтительно К₃ означает метильную, изопропильную, бутильную, фенильную, 3-(Гбутил)-фенильную, 2-хлорфенильную, 3-хлорфенильную, 3-хлор-5-фторфенильную, 2цианофенильную, 3-цианофенильную, 3-этоксифенильную, 3-этилфенильную, 2-фторфенильную, 3фторфенильную, 4-фторфенильную, 3-гидроксифенильную, 3-изопропилфенильную, 3-метоксифенильную, 2-метилфенильную, 3-метилфенильную, 3-(3-метил-[1,2,4]-оксадиазол-5-ил)-фенильную, 3нитрофенильную, 3-трифторметоксифенильную, 3-трифторметилфенильную, 2-пиридильную, 4-хлор-2пиридильную, 5-хлор-2-пиридильную, 5-фтор-2-пиридильную, 6-фтор-2-пиридильную, 4-метил-2пиридильную, 6-метокси-3-пиридильную, 6-метил-2-пиридильную, 4-трифторметил-2-пиридильную, 3пиридильную, 6-фтор-3-пиридильную, 2-фурильную, 2-тиенильную, 3-тиенильную, 2-пиразинильную, 2метил-1,3-тиазол-4-ильную или 2-фуроильную группы.

Когда К₁ означает атом углерода, Кд предпочтительно означает атом водорода, атом галогена, необязательно замещенную моноциклическую С₃-С₅ гетероциклильную группу, содержащую от 1 до 3 гетероатомов, выбранных из Ν, О и 8, или необязательно замещенную фенильную группу; и К₅ предпочтительно означает атом водорода или галогена, цианогруппу или необязательно замещенные гидроксильную, меркапто, амино, карбамоильную, С₁-С₆ алкильную или С₁-С₆ алкоксильную группу или группу формулы -С(=О)-К₆, в которой Кб означает необязательно замещенную С₁-С₆ алкильную группу, необязательно замещенную моноциклическую С₃-С₅ гетероциклильную группу, содержащую от 1 до 3 гетероатомов, выбранных из Ν, О и 8 или необязательно замещенную фенильную группу.

Когда К| означает атом углерода, Кд более предпочтительно означает атом водорода или фтора или 2-пиридильную группу, и К₅ более предпочтительно означает атом водорода или фтора или циано, гидроксильную или этоксикарбонильную группу.

Кроме того, когда К₁ означает атом углерода, Кд и К₅ вместе предпочтительно означают оксо, метиленовую, дифторметиленовую, 2-пиридилметиленовую, триметиленовую, тетраметиленовую, этилендиокси, пропилендиокси, оксиэтильную, оксипропильную, метиленоксиметиленовую, гидроксиимино, метоксиимино или 1-карбокси-3-гидроксипропоксиимино группу.

Кроме того, когда К! означает атом углерода, К₄ и К₅ вместе предпочтительно означают группу формулы -(Ур)-, в которой р равно целому числу от 3 до 5, и каждый Υ независимо означает атом кислорода или необязательно замещенную метиленовую группу, при условии, что две смежные Υ части не означают атомы кислорода. Например, -(Υ_ρ)- может являться -О-(СН₂)₂-О-, -О-(СН₂)₃-О-, -С-(СН₂)₂-, -О(СН₂)₃-, -СН₂-О-СН₂-, -(СН₂)₃-, -(СН₂)₄-, -(СН₂)₅- или -СН₂СН₂СР₂СН₂СН₂-.

[029] Когда К1 означает атом азота, К₄ предпочтительно означает необязательно замещенную С₃-С₅гетеромоноциклическую группу, содержащую от 1 до 3 гетероатомов, выбранных из Ν, О и 8, при этом К₅ отсутствует. Кроме того, К₅ предпочтительно означает алкоксикарбонильную, необязательно замещенную арилкарбонильную, необязательно замещенную гетероциклилкарбонильную, карбамоильную, диалкилкарбамоильную, ^алкокси-Ы-алкилкарбамоильную или необязательно замещенную гетероциклилкарбамоильную группу, при этом К4 отсутствует.

Когда К₁ означает атом азота, К₄ более предпочтительно означает 3-циано-2-пиразинильную, 3нитро-2-пиридильную или 3-нитро-6-метил-2-пиридильную группу, при этом К₅ отсутствует. Кроме того, К₅ более предпочтительно означает этоксикарбонильную, 3-хлорбензоильную, 2-фуроильную, 2-оксо1 -имидазолидинилкарбонильную, 3 -метилсульфонил-2-оксо-1 -имидазолидинилкарбонильную, 4-метил1-пиперазинилкарбонильную, пиперидинокарбонильную, 1-пирролидинилкарбонильную, карбамоильную, диметилкарбамоильную, диэтилкарбамоильную, Ν-метокси-Ы-метилкарбамоильную, Ν-этил-Ыизопропилкарбамоильную или 4-пиридилкарбамоильную группы, при этом К4 отсутствует.

Определения

Кроме случаев, когда указано иное, следующие определения применимы в соотношении всего описания настоящего изобретения и формулы изобретения. Указанные определения применимы независимо от того, используется ли термин сам по себе или в сочетании с другими терминами. Например, определение алкил относится не только к алкилу как к таковому, но также к алкильным частям алкокси, алкиламино, алкилтио, алкилкарбонил и т.д. Кроме того, все диапазоны, описанные в соотношении химической группы, например, диапазоны от 1 до 20 атомов углерода и С₁-С₆ алкил включают все сочетания и подсочетания диапазонов и конкретное количество содержащихся в них атомов углерода.

Алкил означает алифатическую углеводородную группу с неразветвленной или разветвленной цепью, содержащую от 1 до 20 атомов углерода в цепи. Предпочтительные алкильные группы имеют от 1 до 12 атомов углерода в цепи. Более предпочтительно алкильные группы имеют от 1 до 6 атомов углерода в цепи. Низший алкил означает алкильную группу, имеющую приблизительно от 1 до приблизительно 6 атомов углерода в цепи, которая может быть неразветвленной или разветвленной. Примеры приемлемых алкильных групп включают метил, этил, η-пропил, изопропил, сек-бутил, η-бутил и ΐ-бутил.

Алкенил означает алифатическую углеводородную группу с неразветвленной или разветвленной цепью, имеющую по меньшей мере одну углерод-углерод двойную связь и имеющую от 2 до 15 атомов углерода в цепи. Предпочтительные алкенильные группы имеют от 2 до 12 атомов углерода в цепи.

Более предпочтительные алкенильные группы имеют от 2 до 6 атомов углерода в цепи. Низший

- 4 023020 алкенил означает алкенильную группу, имеющую от 2 до приблизительно 6 атомов углерода в цепи, которая может быть неразветвленной или разветвленной. Примеры приемлемых алкенильных групп включают этенил, пропенил, изопропенил, η-бутенил, 1-гексенил и 3-метилбут-2-энил.

Алкинил означает алифатическую углеводородную группу с неразветвленной или разветвленной цепью имеющую по меньшей мере одну углерод-углерод тройную связь и имеющую от 2 до 15 атомов углерода в цепи. Предпочтительные алкинильные группы имеют от 2 до 12 атомов углерода в цепи. Более предпочтительные алкинильные группы имеют от 2 до 6 атом углерода в цепи. Низший алкинил означает алкинильную группу, имеющую от 2 до приблизительно 6 атом углерода в цепи, которая может быть неразветвленной или разветвленной. Примеры приемлемых алкинильных групп включают этинил, пропинил и 2-бутинил.

Моно-, би- или трициклический арил означает систему ароматического моноциклического, бициклического или трициклического кольца, включающую от 6 до 14 атомов углерода. Би- и трициклические арильные группы спаяны в 2 или 4-х точках или соединены в одной точке с помощью связи или гетероатомного линкера (0,8, ΝΗ, или Ν(Ο₁-Ο₆ алкил) (например, бифенил, 1-фенилнаптил). Арильная группа может быть необязательно замещена на кольце одним или несколькими заместителями, предпочтительно от 1 до 6 заместителей, которые могут одинаковыми или различными. Примеры приемлемых арильных групп включают фенил и нафтил.

Моно-, би-, или трициклический гетероцикл означает систему ароматического или неароматического насыщенного моно-, би или трициклического кольца, имеющую от 2 до 14 атомов углерода кольца и содержащую от 1 до 5 атомов кольца, выбранных из Ν, О и 8, по отдельности или в сочетании. Би- и трициклические гетероциклильные группы спаены в 2 или 4-х точках или соединены в одной точке с помощью связи или гетероатомного линкера (О, 8, ΝΗ или Ν(Ο₁-Ο₆ алкил). Моно-, би или трициклический гетероцикл может быть необязательно замещен на кольце путем замены имеющегося водорода на кольце одним или несколькими заместителями, которые могут быть одинаковыми или различными. В системе кольца отсутствуют смежные атомы кислорода или серы. Атом азота или серы гетероцикла может быть необязательно оксидирован до соответствующего Ν-оксида, 8-оксида или 8-диоксида. Примеры приемлемых гетероциклов включают фуранил, имидазолил, изоксазолил, оксадиазолил, оксазолил, пирролил, пиридил, пиримидил, пиридазинил, тиазолил, триазолил, тетразолил, тиенил, карбазолил, бензимидазолил, бензотиенил, бензофуранил, индолил, хинолинил, бензотриазолил, бензотиазолил, бензооксазолил, бензимидазолил, изохинолинил, изоиндолил, акридинил и бензоизоксазолил, азиридинил, пиперидинил, пирролидинил, пиперазинил, тетрагидропиранил тетрагидрофуранил, тетрагидротиофенил, морфолинил и тиоморфолинил.

Гетероциклы с ароматическими характеристиками могут называться гетероарилы или гетероароматические соединения. Примеры приемлемых гетероароматических соединений включают фуранил, имидазолил, изоксазолил, оксадиазолил, оксазолил, пирролил, пиридил, пиримидил, пиридазинил, тиазолил, триазолил, тетразолил, тиенил, карбазолил, бензимидазолил, бензотиенил, бензофуранил, индолил, хинолинил, бензотриазолил, бензотиазолил, бензооксазолил, бензимидазолил, изохинолинил, изоиндолил, акридинил, бензоизоксазолил, тетрагидрохинолинил, тетрагидроизохинолинил, 3-фенилпиридин, 3циклогексилпиридин, 3-(пиридин-3-ил)морфолин, 3-фенилизоксазол и 2-(пиперидин-1-ил)пиримидин.

Моно или бициклический циклоалкил означает систему моноциклического или бициклического углеродного кольца, имеющую от 3 до 14 атомов углерода, предпочтительно от 3 до 6 атомов углерода. Циклоалкил может быть необязательно замещен на кольце путем замены имеющегося водорода на кольце одним или несколькими заместителями, которые могут быть одинаковыми или различными. Примеры приемлемых моноциклических циклоалкилов включают циклопропил, циклопентил, циклогексил и циклогептил. Примеры приемлемых мультициклических циклоалкилов включают 1-декалинил, норборнил и адамантил.

Циклоалкенил имеет значение, соответствующее значению циклоалкила, но с одной или двумя двойными связями внутри кольца (например, циклогексенил, циклогексадиен).

Галоген, или Тал означает фтор, хлор, бром или иод. Предпочтительными являются фтор, хлор или бром, и более предпочтительными являются фтор и хлор.

Термин ацил, используемый либо по отдельности, либо в таком термине, как ациламино, означает радикал, представленный остатком после удаления гидроксила из органической кислоты. Термин ациламино относится к аминорадикалу, замещенному ацильной группой. Примером радикала ациламино является ΚΗ₃Κ(=0)-ΝΗ-, где амин может быть далее замещен алкилом, арилом или аралкилом.

Стереохимия соединений в соответствии с настоящим изобретением

Соединения формулы I могут иметь один или несколько хиральных центров, и в зависимости от характера отдельных заместителей они также могут иметь геометрические изомеры. Изомеры, отличающиеся по расположению своих атомов в пространстве, называются стереоизомерами. Стереоизомеры, не являющиеся зеркальными изображениями друг друга, называются диастереомерами, а стереоизомеры, являющиеся неналагающимися зеркальными изображениями друг друга, называются энантиомерами. Когда соединение имеет хиральный центр, возможна пара энантиомеров. Энантиомер может быть охарактеризован абсолютной конфигурацией своего несимметричного центра и описан правилами по- 5 023020 следовательности К-и δ-, предложенными Каном и Прелогом, или в зависимости от того, каким образом молекула вращает плоскость поляризованного света, и в зависимости от того, обозначена ли она как право- или левовращающий (т.е. как (+) или (-)-изомер, соответственно). Хиральное соединение может существовать либо в форме отдельного энантиомера, либо в виде смеси энанатиомеров. Смесь, содержащая равные пропорции энантиомеров, называется рацемической смесью. Смесь, содержащая неравные части энантиомеров, описана как смесь, имеющая энантиомерный избыток (ее) либо соединения К, либо δ. Избыток одного энантиомера в смеси зачастую описывается со значением % энантиомерного избытка (% ее), определяемым по нижеприведенной формуле:

% ее = (К) - (δ) / (К) + (δ).

Соотношение энантиомеров также может быть определено на основе оптической чистоты, при этом степень, с которой смесь энантиомеров вращает плоскость поляризованного света, сравнивают с отдельными оптически чистыми К и δ соединениями. Оптическая чистота может быть определена по нижеприведенной формуле:

Оптическая чистота = энант._та|ог/ (энант._та|ог + энант._ттог).

Настоящее изобретение охватывает все отдельные изомеры соединений формулы I. Описание или название конкретного соединения в описании изобретения или формуле изобретения включает как отдельные энантиомеры, так и их рацемические и иные смеси. Способы определения стереохимии и разделения стереоизомеров хорошо известны в данной области техники.

Для многих областей применения предпочтительным является проведение стереоселективного синтеза и (или) проведение соответствующих этапов очистки продукта реакции с целью получения практически оптических чистых материалов. Приемлемые технологии стереоселективного синтеза для получения оптически чистых материалов хорошо известны в данной области техники, а также технологии очистки рацемических смесей для получения оптически чистых фракций. Специалистам в данной области техники должно быть очевидно, что соединения в соответствии с настоящим изобретением могут существовать в полиморфных формах, в которых соединение способно кристаллизоваться в различные формы. Приемлемых способы определения и разделения полиморфизмов хорошо известны в данной области техники.

Диастереомеры отличаются как в плане физических свойств, так и в плане химической реактивности. Смесь диастереомеров может быть разделена на энантиомерные пары исходя из растворимости, фракционной кристаллизации или хроматографических свойств, например, тонкопленочная хроматография, колоночная хроматография или ВЭЖХ.

Для очистки сложных смесей диастереомеров и превращения их в энантиомеры обычно требуется проведение двух этапов. На первом этапе смесь диастереомеров разделяют на энантиомерные пары в соответствии с вышеприведенным описанием. На втором этапе энантиомерные пары дополнительно очищают получают композиции, обогащенные тем или иным энантиомером или, более предпочтительно, разделяют на композиции, включающие чистые энантиомеры. Разделение энантиомеров обычно происходит в процессе реакции или молекулярного взаимодействия с хиральным агентом, например, растворителем или колоночной матрицей, разделение может быть достигнуто, например, путем преобразования смеси энантиомеров, например, рацемической смеси в смесь диастереомеров за счет протекания реакции с чистым энантиомером второго агента, т.е. разделяющего агента. Далее два полученных диастереомерных продукта могут быть разделены. Затем разделенные диастереомеры снова преобразуют в чистые энантиомеры за счёт обратной начальной химической трансформации.

Разделение энантиомеров также может быть достигнуто за счет различий из нековалентного связывания с хиральным веществом, например, методом хроматографии на гомохиральных адсорбантах. Нековалентное связывание между энантиомерами и хроматографическими адсорбантами обеспечивает создание диастереомерных комплексов, ведущих к дифференциальному разделению на мобильное и связанное состояние в хроматографической системе. Таким образом, два энантиомера перемещаются через хроматографическую систему, например, колонку с различными скоростями, в результате чего обеспечивается их разделение.

Хиральные разделительные колонки хорошо известны в данной области техники и являются коммерчески доступными на рынке (например, поставляемые компанией Мс1аСНст ТесЬпо1од1е8 1пс., отделением компании ΑΝδΥδ ТесЬпо1од1е8, 1пс., Ьаке РогеЦ. СА). Энантиомеры можно проанализировать и очистить, например, с использованием хиральных неподвижных фаз (ί','δΡδ) для ВЭЖХ. Хиральные колонки ВЭЖХ обычно содержат одну форму энантиомерного соединения, иммобилизированного на поверхности наполнителя, содержащего силикагель.

Ό-фенилглицин и Ь-лейцин являются примерами хиральных неподвижных фаз I типа, и в них используются сочетания π-π взаимодействий, гидрогенных связей, диполь-дипольных взаимодействий и стерических взаимодействий для достижения хирального распознавания. Для проведения разделения на колонке I типа энантиомеры аналита должны содержать функциональную группу, дополняющую функциональную группу хиральной неподвижной фазы, для обеспечения существенных взаимодействий с хиральной неподвижной фазой. Образец предпочтительно должен содержать одну из следующих функ- 6 023020 циональных групп: π-кислоту или π-основание, донор и (или) акцептор водородной связи или амидный диполь. Дериватизацию используют в некоторых случаях для добавления интерактивных сайтов тем соединениям, у которых они отсутствуют. Наиболее общеизвестные производные предусматривают формирование амидов из аминов и карбоновых кислот.

Ме!аСЫга1 ΘΌΜ™ является примером хиральной неподвижной фазы II типа. Первичные механизмы для формирования комплексов раствор-хиральной неподвижной фазы основаны на аттрактивных взаимодействиях, однако важную роль также играют комплексы включения. Водородное связывание, π π взаимодействия и дипольный стэкинг являются важными факторами для хирального разделения на Ме!аСЫга1™ ΘΌΜ. Дериватизация может быть необходимой в том случае, когда молекула раствора не содержит группы, необходимые для взаимодействий растор-колонка. Дериватизация обычно с бензиламидами может быть необходима для ряда сильно полярных молекул, таких как амины и карбоновые кислоты, которые в противоположном случае активно взаимодействовали бы с неподвижной фазой за счет неспецифических стереовзаимодействий.

Соединения формулы I могут быть разделены на диастереомерные пары например путем разделения методом колоночной хроматографии тонкопленочной хроматографии на силикагеле. Указанные диастереомерные пары называют в настоящем описании диастереомером с коэффициентом удерживания в верхней части колонки ТПХ; и диастереомером с коэффициентом удерживания в нижней части колонки ТПХ. Диастереомеры могут быть далее обогащены для конкретного энантиомера или разделены на единичный энантиомер с использованием способов, хорошо известных в данной области техники, в частности, способов, приведенных в описании настоящего изобретения.

Относительная конфигурация диастереомерных пар может быть выведена на основе применения теоретических моделей или правил (например, правило Крама, модель Фелкин-Ана) или за счет использования более надежных трехмерных моделей, созданных с помощью программ вычислительной химии. Во многих случаях указанные методы позволяют предсказать, какой диастереомер является энергетически предпочитаемым продуктом химического превращения. В качестве альтернативы относительная конфигурация диастереомерных пар может быть косвенно определена путем обнаружения абсолютных конфигураций единичного энантиомера в одной (или обеих) диастереомерной(-ых) паре(-ах).

Абсолютная конфигурация стереоцентров может быть определена с помощью метода, хорошо известного специалистам в данной области техники (например, рентгеновская дифракция и циркулярный дихроизм). Определение абсолютной конфигурации может оказаться эффективным также для подтверждения предсказуемости теоретических моделей и может оказаться полезным для распространения использования указанных моделей на аналогичные молекулы, полученные путем проведения реакций с аналогичными механизмами (например, восстановление кетонов и восстановительное аминирование кетонов гидридами).

Настоящее изобретение также охватывает стереоизомеры типа Ζ-Е и их смеси ввиду того, что К₂-К₃заместители двойной связи не напрямую связаны с кольцом. Дополнительные стереоизомеры Ζ-Е встречаются в том случае, когда т не равно 1, и т и η различаются. Применимы правила приоритета КанаИнгольда-Прелога для определения того, являются ли стереоизомеры Ζ или Е типом ввиду относительного положения в плоскости двойной связи заместителей, соединенных двойной связью. Стереоизомеры обозначены как Ζ (гикаттеп = вместе), 2, если высокоприоритетные группы находятся на одной и той же стороне основной плоскости, проходящей через связь С=С. Другой стереоизомер обозначен как Е (еШдедеп = противоположный).

Смесь стереоизомеров типа Е-Ζ может быть разделена (и (или) охарактеризована) по их компонентам с использованием классических методов очистки, основанных на различных химико-физических свойствах указанных соединений. Указанные методы включают фракционную кристаллизацию, хроматографию низкого, среднего и высокого давления, фракционную очистку и иные методы, хорошо известные специалистам в данной области техники.

Производные соединений в соответствии с настоящим изобретением

Настоящее изобретение также охватывает соли, сольваты, гидраты, Ν-оксиды, пролекарства и активные метаболиты соединений формулы I.

Термин соли может включать кислотно-аддитивные соли или аддитивные соли свободных оснований. В целях выделения или очистки можно использовать фармацевтически неприемлемые соли. Тем не менее, исключительно фармацевтически приемлемые, нетоксичные соли используют в терапевтических целях, и, таким образом, они являются предпочтительными. Примеры кислот, которые могут быть использованы для получения фармацевтически приемлемых кислотно-аддитивных солей включают соли, полученные из нетоксичных неорганических кислот, таких как азотная, фосфорная, серная или бромисто-водородная, йодисто-водородная, фтористо-водородная, фосфористая кислоты, а также соли, полученные из нетоксичных органических кислот, таких как алифатические моно- и дикарбоновые кислоты, фенилзамещенные карбоновые кислоты, гидроксил карбоновые кислоты, алкандикислоты, ароматические кислоты, алифатические и ароматические сульфокислоты, и уксусная, малеиновая, янтарная или лимонная кислоты. Примеры таких солей включают нападизилат, безилат, сульфат, пиросульфат, би- 7 023020 сульфат, сульфит, бисульфит, нитрат, фосфат, моногидрогенфосфат, дигидрогенфосфат, метафосфат, пирофосфат, хлорид, бромид, иодид, ацетат, трифторацетат, пропионат, каприлат, изобутират, оксалат, моланат, сукцинат, суберат, себакат, фумарат, малеат, манделат, бензоат, хлорбензоат, метилбензоат, динитробензоат, фталат, бензолсульфонат, толуолсульфонат, фенилацетат, цитрат, лактат, малеат, тартрат, метансульфонат и аналогичные соли. Также предусматриваются соли аминокислот, такие как аргинати аналогичные соли и глюконат, галактуронат (см., например, Вегде, с1 а1. РЬагтасеийса1 δηίκ 1. РЬагта. δα. 1977;66:1).

Фраза фармацевтически приемлемые, используемая в соотношении композиций в соответствии с настоящим изобретением, относится к молекулярным субстанциям и иным ингредиентам таких композиций, являющимися физиологически переносимыми и обычно не вызывающими нежелательные реакции при введении млекопитающему (например, человеку). Термин фармацевтически приемлемые в соответствии со значением, используемым в настоящем контексте, предпочтительно означает композиции, одобренные контрольным органом федерального правительства или правительства штата или занесенные в перечень Фармакопеи США или в иные общепризнанные фармакопеи, для использования млекопитающими и, в частности, человеком.

Обычно фармацевтически приемлемая соль соединения формулы I может быть быстро получена путем использования требуемой кислоты или основания в зависимости от конкретного случая. Соль может быть осаждена из раствора и собрана путем фильтрования, либо может быть получена путем выпаривания растворителя. Например, водный раствор кислоты, такой как хлористо-водородная кислота, может быть добавлен к водной суспензии соединения формулы I, и полученную смесь выпаривают до сухого состояния (лиофилизируют) для получения кислотно-аддитивной соли в виде твердого вещества. Кроме того, соединение формулы I может быть растворено в приемлемом растворителе, например, в спирте, таком как изопропанол, и кислота может быть добавлена в тот же растворитель или в иной приемлемый растворитель. Далее, полученная кислотно-аддитивная соль может быть непосредственно осаждена, либо путем добавления менее полярного растворителя, такого как диизопропиловый простой эфир или гексан, и отделена путем фильтрования.

Кислотно-аддитивные соли соединений формулы I могут быть получены путем вступления в реакцию свободноосновной формы с достаточным количеством требуемой кислоты для получения соли известным способом. Свободноосновная форма может быть регенерирована путем вступления в реакцию солевой формы с основанием и выделения свободного основания известным способом. Свободноосновные формы несколько отличаются от своих соответствующих солевых форм в плане определенных физических свойств, таких как растворимость в полярных растворителях, однако во всех других случаях соли эквивалентны своему соответствующему свободному основанию в целях настоящего изобретения.

Также включены как полные, так и неполные соли, то есть соли с 1, 2 или 3, предпочтительно 2, эквивалентами основания на моль кислоты формулы I или соли с 1, 2 или 3 эквивалентами, предпочтительно 1 эквивалентом кислоты на моль основания формулы I.

Фармацевтически приемлемые соли присоединения оснований образуются с металлами или аминами, такими как щелочи и земельно-щелочные металлы или органические амины. Примеры металлов, используемых в качестве катионов включают натрия, калий, магния, кальций и аналогичные металлы. Примеры приемлемых аминов включают Ν,Ν'-дибензилэтилендиамин, хлорпрокаин, холин, диэтаноламин, дициклогексиламин, этилендиамин, Ν-метилглюкамин и прокаин.

Соли присоединения оснований указанного кислотного соединения получают путем вступления в реакцию свободнокислотной формы с достаточным количеством требуемого основания для получения соли известным способом. Свободнокислотная форма может быть регенерирована путем вступления в реакцию солевой формы с кислотой и путем выделения свободной кислоты.

Соединения в соответствии с настоящим изобретение могут иметь как щелочной, так и кислотный центр, и, таким образом, могут находится в виде цвиттерионов или внутренних солей.

Специалистам в данной области техники должно быть очевидно, что многие органические соединения могут образовывать комплексы с растворителями, в которых они вступают в реакцию или из которых они осаждаются или кристаллизуются. Указанные комплексы известны как сольваты. Например, комплекс с водой известен как гидрат. Сольваты соединения в соответствии с настоящим изобретением

- 8 023020 не выходят за объем настоящего изобретения. Соли соединения формулы I могут образовывать сольваты (например, гидраты), и изобретение также предусматривает включение всех таких сольватов. Значение слова сольваты хорошо известно специалистам в данной области техники как соединение, образованное путем взаимодействия растворителя и раствора (т.е. путем растворения). Технологии получения сольватов хорошо отработаны в данной области техники (см, например, ВтШат. Ро1утогрЫ8т ίη РНагтасеийса1 δοϊίάδ. Магсе1 Эссксг. №ν Уогк, 1999.).

Настоящее изобретение также охватывает Ν-оксиды соединений формулы I. Термин Ν-оксид означает, что в соотношении гетероциклов, содержащих незамещенный δρ²Ν атом, N атом может иметь ковалентно связанный О атом, т.е., -Ν^Θ. Примеры таких Ν-оксид замещенных гетероциклов включают пиридил Ν-оксиды, пиримидил Ν-оксиды, пиразинил Ν-оксиды и пиразолил Ν-оксиды.

Настоящее изобретение также охватывает пролекарства соединений формулы I, т.е., соединения, высвобождающие активное исходное лекарственное средство в соответствии с формулой I ίη νίνο при введении млекопитающему. Пролекарство является фармакологически активным или в основном неактивным соединением, преобразованным в фармакологически активный агент за счет метаболического превращения. Пролекарства соединения формулы I получают путем модифицирования функциональных групп, присутствующих в соединении формулы I таким образом, чтобы обеспечивалось расщепление модификаций ίη νίνο для высвобождения исходного соединения. Ση νίνο пролекарство легко подвергается химическим изменениям в физиологических условиях (например, на них воздействует (-ют) естественный (-ые) фермент (-ы)), в результате чего происходит высвобождение фармакологически активного агента. Пролекарства включают соединения формулы I, в которых гидрокси, амино или карбоксигруппа соединения формулы I связана с любой группой, которая может быть расщеплена ίη νίνο для регенерирования свободной гидроксильной, амино или карбоксигруппы соответственно. Примеры пролекарств включают сложные эфиры (например, производные ацетата, формиата и бензоата) соединений формулы I или любое иное производное, которое при приведении его к физиологическому рН или за счет воздействия ферментов преобразуется в активное исходное лекарственное средство. Известные технологии для выбора и получения приемлемых производных пролекарства описаны в данной области техники (см., например, Винйдаагй. ^еδ^дη οί Ргойти^. ЕЕеглег, 1985).

Пролекарства могут быть введены аналогичным образом, как и активный ингредиент, в который они преобразуются, или могут быть доставлены в резервуарной форме, например, в виде трансдермального пластыря или в виде иного резервуара, который предназначен для обеспечения (за счет подачи фермента или иного соответствующего реагента) медленного преобразования пролекарства в активный ингредиент с течением времени и доставки активного ингредиента в организм пациента.

Настоящее изобретение также охватывает метаболиты. Метаболит соединения, раскрываемого в настоящем описании изобретения, является производным соединения, образующегося при метаболизации соединения. Термин активный метаболит относится к биологически активному производному соединения, образующегося при метаболизации соединения. Термин метаболизированный относится к сумме процессов, с помощью которых конкретное вещество подвергается изменению в живом организме. Короче говоря, все соединения, присутствующие в организме, подвергаются воздействию вырабатываемых организмом ферментов для получения энергии и (или) их удаления из организма. Конкретные ферменты вызывают конкретные структурные изменения соединения. Например, цитохром Р450 катализирует различные окислительные и восстановительные реакции, в то время как уридин дифосфат глюкуронилтрансферазы катализируют перенос активированной молекулы глюкуроновой кислоты в ароматические спирты, алифатические спирты, карбоновые кислоты, амины и свободные сульфидрильные группы. Дополнительная информация о метаболизме содержится в публикации ТНе ΡΗαι™α^1ο§κα1 Βαδίδ οί ТНегареШ^ , 9ΐΗ Εάίίίοη, МсСга\\-НП1 (1996), стр. 11-17.

Метаболиты соединений, раскрытых в описании настоящего изобретения, могут быть определены либо путем введения соединений в организм-хозяин и проведения анализа образцов ткани, взятых из организма-хозяина, либо путем инкубирования соединений с гепатическими клетками ίη νίίτο и проведения анализа полученных соединений. Оба способа хорошо известны в данной области техники. Применение соединений в соответствии с настоящим изобретением для лечения заболеваний нижних мочевыводящих путей фаза наполнения в цикле мочеиспускания

Номенклатура симптомов и патологий нижних мочевыводящих путей, используемых в описании настоящего изобретения, изложена в ЛЬгапъ еί а1., №иго1. апй игойущ 21:167-178 (2002) и Λι^Γδδοη еί а1., РНагтасЫ. Кет. 56:581-631 (2004).

Дисфункции мочеиспускания могут быть приблизительно классифицированы как расстройства фазы наполнения в цикле мочеиспускания или опорожнения мочевого пузыря. Симптомы наполнения в цикле мочеиспускания проявляются во время фазы наполнения мочевого пузыря в цикле мочеиспускания и включают учащенное мочеиспускание в течение дня или ночную полиурию (в течение ночи человек просыпается несколько раз для мочеиспускания), императивные позывы к мочеиспусканию (внезапное, непреодолимое желание помочиться, от которого трудно воздержаться) и недержание мочи (любое непроизвольное истечение мочи). Недержание мочи далее может быть охарактеризовано в соответствии с симптомами. Стрессовое недержание мочи является непроизвольным истечением мочи при усилии или

- 9 023020 напряжении, либо при чихании или кашле. Неотложное недержание мочи представляет собой непроизвольное истечение мочи, сопровождаемое императивными позывами к мочеиспусканию или непосредственно предшествующее позывам. Смешанное недержание мочи представляет собой непроизвольное истечение мочи, связанное с императивными позывами к мочеиспусканию, а также с напряжением, усилием, чиханием или кашлем. Недержание мочи вследствие переполнения мочевого пузыря представляет собой непроизвольное истечение мочи, имеющее место после превышения емкости мочевого пузыря, например, при задержке опорожнения. Энурез также относится к любому непроизвольному истечению мочи. Ночной энурез представляет собой истечение мочи, происходящее во время сна.

Симптомы нарушения мочеиспускания включают медленное мочеиспускание, расщепление или разбрызгивание струи мочи, прерывистую струю (прерывистость, т.е. приостановление и возобновление струи мочи во время мочеиспускания), затруднённое начало мочеиспускания (трудность в начале мочеиспускания в результате задержки наступления опорожнения мочевого пузыря после того как человек готов помочиться), напряжение при мочеиспускании и мочеиспускание после прекращения мочеиспускания (пролонгированная завершающая часть мочеиспускания, когда произошло замедление струи до тонкой струйки/мочеиспускания по каплям).

Заболевания нижних мочевыводящих путей могут быть дополнительно категоризированы по группе симптомов (т.е., синдрому) или по этиологии. Лица, страдающие от синдрома гиперактивного мочевого пузыря (ОАВ), например, обычно страдающие от симптомов императивных позывов к мочеиспусканию, неотложному недержания мочи, учащенному мочеиспусканию в течение дня или ночной полиурии. Гиперактивный мочевой пузырь возникает в результате повышенной активности мышцы детрузора, называемой нестабильностью мышцы детрузора. Нестабильность мышцы детрузора может возникнуть ввиду неневрологических расстройств, таких как камни в мочевом пузыре, мышечная дистрофия, инфекция мочевыводящих путей или побочные эффекты лекарственных препаратов, либо нестабильность мышцы детрузора может носить идиопатический характер.

Нейрогенный гиперактивный мочевой пузырь (или нейрогенный мочевой пузырь) является типом гиперактивного мочевого пузыря, при этом заболевание возникает в результате повышенной активности мышцы детрузора, называемой гиперрефлексией детрузора, возникающей на фоне известных неврологических расстройств. Пациенты с неврологическими расстройствами, такими как нарушение мозгового кровообращения, болезнь Паркинсона, диабет, рассеянный склероз, периферическая нейропатия или поражения спинного мозга, нередко страдают от нейрогенного гиперактивного мочевого пузыря.

Цистит (включая интерстициальный цистит) является заболеванием нижних мочевыводящих путей неизвестной этиологии, который в основном поражает женщин молодого и среднего возраста, хотя этому заболевания также могут быть подвержены мужчины и дети. Симптомы интерстициального цистита могут включать симптомы, связанные с мочеиспусканием, учащенное мочеиспускание в течение дня, императивные позывы к мочеиспусканию, ночная полиурия или боли в области лобка или таза, связанные с мочеиспусканием и ослабевающие при опорожнении мочевого пузыря. Многие пациенты с интерстициальным циститом испытывают головные боли, а также имеют проблемы с желудочно-кишечным трактом и кожным покровом. В некоторых случаях интерстициальный цистит может также быть связан с язвами и рубцами мочевого пузыря.

Простатит и простатодиния являются другими заболеваниями нижних мочевыводящих путей, которые, по некоторым оценкам, поражают приблизительно 2-9% взрослого мужского населения. Простатит является воспалением простаты и включает бактериальный простатит (острый и хронический) и небактериальный простатит. Острый и хронический бактериальный простатиты характеризуются воспалением простаты и бактериальной инфекцией предстательной железы, при этом первый и последний обычно связаны с симптомами боли, учащенного мочеиспускания в течение дня и (или) императивными позывами к мочеиспусканию. Хронический бактериальный простатит отличается от острого бактериального простатита рецидивным характером заболевания. Хронический небактериальный простатит характеризуется воспалением простаты, имеющим неизвестную этиологию и сопровождающимся наличием избыточного количества воспалительных клеток в секретах простаты, в данном случае несвязанных с бактериальной инфекцией предстательной железы, и обычно сопровождающийся симптомами боли, учащенным мочеиспусканием в течение дня и (или) императивными позывами к мочеиспусканию. Простадения является заболеванием с симптомами, схожими с симптомами простатита при отсутствии воспаления простаты, бактериальной инфекции простаты и повышенных уровней воспалительных клеток в секретах простаты. Простадения может сопровождаться симптомами боли, учащенным мочеиспусканием в течение дня и (или) императивными позывами к мочеиспусканию.

Доброкачественная гиперплазия предстательной железы представляет собой незлокачественное увеличение простаты, широко распространенное среди мужчин старше 40 лет. Доброкачественная гиперплазия предстательной железы предположительно обусловлена чрезмерным клеточным ростом как гландулярных элементов, так и стромальных элементов простаты. Симптомы доброкачественной гиперплазии предстательной железы могут включать учащенное мочеиспускание, императивные позывы к мочеиспусканию, неотложное недержание мочи, ночную полиурия и симптомы нарушения мочеиспускания, включая медленное мочеиспускание, расщепление и разбрызгивание струи мочи, прерывистость,

- 10 023020 затруднённое начало мочеиспускания, напряжение при мочеиспускании и мочеиспускание после прекращения мочеиспускания.

Соединения в соответствии с настоящим изобретением быть эффективными для лечения вышеуказанных заболеваний или расстройств нижних мочевыводящих путей, в частности, нейромышечных дисфункций нижних мочевыводящих путей, в том числе императивных позывов к мочеиспусканию, гиперактивного мочевого пузыря, учащенное мочеиспускание, пониженная эластичность стенки мочевого пузыря (пониженная емкость мочевого пузыря), цистит, интерстициальный цистит, недержание мочи, истечение мочи, энурез, затруднение или боль при мочеиспускании, затруднённое начало мочеиспускания и затруднения опорожнения мочевого пузыря. Под лечением понимается лечение любого одного или нескольких выше описанных состояний, симптомов и (или) синдромов.

При лечении нейромышечных дисфункций нижних мочевыводящих путей, соединения в соответствии с настоящим изобретением могут быть введены отдельно или в сочетании с другим лекарственным средством. Такие иные лекарственные препараты могут представлять собой антимускариновые лекарственные средства, такие как оксибутинин, толтеродин, дирифенацин, солифенацин, троспиум, имидафенацин, фезотеродин или темиверин; α,ι-адренэргический антагонист, такой как празозин, доксазозин, теразозин, алфузозин, силодозин или тамсулозин; ингибиторы обратного захвата (повторного поглощения) серотонина и (или) норадреналина, такие как дулоксетин, милнаципран, амоксапин, венлафаксин, десвенлафаксин, сибутрамин, тезофенсин или десметилсибутрамин; или селективные или неселективные ЦОГ ингибиторы, такие как ибупрофен, напроксен, беноксапрофен, флурбипрофен, фенопрофен, кетопрофен, индопрофен, пирпрофен, карпрофен, тиоксапрофен, супрофен, тиапрофеновая кислота, флупрофен, индометацин, сулиндак, тометин, зомепирак, диклофенак, фенклофенак, ибуфенак, ацетилсалициловая кислота, пироксикам, теноксикам, набуметон, кеторолак, азапропазон, мефенамовая кислота, толфенамовая кислота, дифлунизал, ацеметацин, фентиазак, клиданак, меклофенамовая кислота, флуфенамовая кислота, нифлумовая кислота, флуфенизал, судоксикам, этодолак, салициловая кислота, бенорилат, изоксикам, 4-(нитроокси)бутил эфир 2-фтор-а-метил-[1,1'-бифенил]-4-уксусной кислоты, мелоксикам, парекоксиб или нимесулид.

Другие области применения соединений в соответствии с настоящим изобретением

Соединения в соответствии с настоящим изобретением также могут быть эффективными для лечения заболеваний или нарушений нижних мочевыводящих путей, мигрени; для лечения гастроэзофагеальной рефлксной болезни; для лечения тревожных расстройств; для лечения передозировки, аддиктивных расстройств и абстинентных расстройств; для лечения нейропатической боли; и для лечения синдрома умственной отсталости, сцепленный с ломкой хромосомой X.

Фармацевтические композиции, включающие соединение формулы I

В то время как существует возможность введения соединения I в виде готового к употреблению вещества предпочтительно было бы включить активный ингредиент в фармацевтическую рецептуру, например, в которой агент находится в смеси с фармацевтически приемлемым носителем, выбранным в зависимости от пути введения и стандартной фармацевтической практики.

Таким образом, настоящее изобретение дополнительно предусматривает создание фармацевтической композиции, включающей соединение формулы I или его гидрат, энантиомер, диастереомер или их фармацевтически приемлемые соли в смеси с фармацевтически приемлемым носителем. Термин носитель относится к разбавителю, вспомогательному веществу и (или) основе, с которыми обеспечивается введение активного соединения.

Соединение формулы I может быть использовано в сочетании с другими видами терапии и(или) активными агентами. Таким образом, в соответствии с дополнительным аспектом настоящее изобретение предусматривает создание фармацевтической композиции, включающей соединение формулы I или сольват, гидрат, энантиомер, диастереомер, Ν-оксид или их фармацевтически приемлемые соли, второй активный агент и фармацевтически приемлемый носитель.

Кроме носителя, фармацевтические композиции могут включать любое приемлемое связующее вещество, лубрикант, суспендирующее вещество, покровное вещество и(или) солюбилизирующий компонент.

Консерванты, стабилизаторы, красители и ароматизаторы также могут быть включены в фармацевтическую композицию. Кроме того, могут быть использованы антиоксиданты и суспендирующие вещества.

Соединения в соответствии с настоящим изобретением могут быть измельчены с использованием известных технологий измельчения, таких как мокрое измельчение для получения размера частиц, приемлемого для формирования таблеток и для других типов лекарственных форм. Мелкодисперсные (в форме наночастиц) препараты соединений в соответствии с настоящим изобретением могут быть получены с помощью технологий, известных в данной области техники, например, см. заявку на патент νθ 02/00196.

- 11 023020

Пути введения и стандартные лекарственные формы

Пути введения включают пероральный (например, в виде таблеток, капсул или в виде проглатываемого раствора), топический, мукозальный (например, в виде назального спрей или аэрозоли для ингаляции), назальный, парентеральный (например, в виде лекарственной формы для инъекций), гастроинтестинальный, интраспинальный, интраперитонеальный, внутримышечный, внутривенный, внутриматочный, интраокулярный, интрадермальный, интракраниальный, интратрахеальный, интравагинальный, интрацеребровентрикулярный, интрацеребральный, подкожный, офтальмический (включая интравитреальный или интракамералыный), трансдермальный, ректальный, буккальный, эпидуральный и сублингвальный пути. Композиции в соответствии с настоящим изобретением могут быть, в частности, выполнены в виде лекарственной формы для любого из указанных путей введения. В предпочтительных примерах осуществления настоящего изобретения фармацевтические композиции в соответствии с настоящим изобретением выполнены в виде лекарственной формы, приемлемой для пероральной доставки.

К композициям и рецептурам могут предъявляться различные требования в зависимости от различных систем доставки. Очевидно, что нет необходимости введения всех соединений одним и тем же путем. Аналогичным образом, если композиция включает несколько активных компонентов, то указанные компоненты могут быть введены различными путями. Например, фармацевтическая композиция в соответствии с настоящим изобретением может быть выполнена в лекарственной форме, доставка которой обеспечивается с помощью мини насоса или мукозальным путем, например, в виде назального спрея или аэрозоли для ингаляции или проглатываемого раствора, или парентеральным путем, при котором композиция выполнена в виде инъецируемой лекарственной формы для доставки, например, внутривенным, внутримышечным или подкожным путем. Кроме того, могут быть разработаны лекарственные формы для их доставки несколькими путями.

В тех случаях, когда агент доставляется мукозально через гастроинтестинальную слизистую оболочку, агент должен обладать способностью сохранять стабильность при его прохождении через гастроинтестинальный тракт; например, он должен быть резистентным к протеолитическому распаду, стабильным при кислотном рН и стойким к детергентному воздействию желчи. Например, на соединение формулы I может быть нанесено энтеросолюбильное покрытие таблетки. Материал энтеросолюбильного покрытия таблетки может быть диспергирован или растворен либо в воде, либо в приемлемом органическом растворителе. В качестве полимеров энтеросолюбильного покрытия таблетки могут быть использованы один или несколько по отдельности или в сочетании нижеприведенные полимеры: например, растворы или дисперсии сополимера метакриловой кислоты, ацетатфталатцеллюлоза, ацетатбутиратцеллюлоза, гидроксипропил метилцеллюлоза фталат, ацетатсукцинат гидроксипропилметилцеллюлоза, поливинилацетатфталат, ацетаттримеллитатцеллюлоза, карбоксиметилэтилцеллюлоза, шеллак или иной(-ые) приемлемый(-е) полимер(-ы) энтеросолюбильного покрытия таблетки. По экологическим причинам нанесение покрытия в водном растворе может быть предпочтительным. При использовании технологий нанесения покрытий в водном растворе сополимеры метакриловой кислоты являются наиболее предпочтительными.

Когда это целесообразно, фармацевтические композиции могут быть введены путем ингаляции, в виде суппозиториев или пессариев, топически в виде лосьона, раствора, крема, мази или присыпки, с использованием трансдермальных пластырей, перорально в виде таблеток, содержащих вспомогательные вещества, такие как крахмал или лактоза, или в виде капсул или овулей по отдельности или в смеси со вспомогательными веществами, либо в виде эликсиров, растворов или суспензий, содержащих ароматизирующие и красящие вещества, либо они могут быть инъецированы парентерально, например, внутривенно, внутримышечно или подкожно. Для буккального или сублингвального введения композиции могут быть введены в виде таблеток или таблеток для рассасывания, которые могут быть изготовлены известным способом.

При необходимости введения композиции в соответствии с настоящим изобретением парентерально такое введение включает введение лекарственного вещества внутривенно, внутриартериально, интраперитонеально, интратекально, интравентрикулярно, интрауретально, интрастернально, интракраниально, внутримышечно или подкожно и (или) с использованием способов инфузии.

Фармацевтические композиции в соответствии с настоящим изобретением могут быть введены парентерально, например, путем инфузии или инъецирования. Фармацевтические композиции, приемлемые для инъецирования или инфузии, могут быть в виде стерильного водного раствора, дисперсии или стерильного порошка, содержащего активный ингредиент, отрегулированный, при необходимости, такого стерильного раствора или дисперсии, приемлемых для инфузии или инъецирования. Указанный препарат может быть выборочно инкапсулирован в липосомы. Во всех случаях конечный препарат должен быть стерильным, жидким и устойчивым в условиях производства и хранения. В целях повышения стабильности свойств при хранении такие препараты могут содержать консерванты для предотвращения роста микроорганизмов. Предотвращение воздействия микроорганизмов может быть достигнуто путем добавления антибактериальных и противогрибковых веществ, например, парабена, хлорбутанола или аскорбиновой кислоты. Во многих случаях рекомендованы изотонические вещества, например, сахар, буферные растворы и хлорид натрия для обеспечения осмотического давления, аналогичного осмотиче- 12 023020 скому давлению биологических жидкостей, в частности крови. Пролонгированное поглощение таких инъецируемых смесей может быть достигнуто путем введения веществ, замедляющих поглощение, такие как моностеарат алюминия или желатин.

Дисперсии могут быть приготовлены в жидком носителе или промежуточном веществе, таком как глицерин, жидкие полиэтиленгликоли, триацетиновые масла и их смеси. Жидкий носитель или промежуточное вещество могут представлять собой растворитель или жидкую диспергирующую среду, содержащую, например, воду, этанол, полиол (например, глицерин, пропиленгликоль или аналогичные вещества), растительные масла, нетоксичные сложные эфиры глицерина и их приемлемые смеси. Приемлемая текучесть может поддерживаться за счет образования липосом, введения приемлемого размера частиц в случае дисперсий или путем добавления поверхностно-активных веществ.

Для парентерального введения соединение может быть наиболее эффективно использовано в виде стерильного водного раствора, который может содержать другие вещества, например, достаточное количество солей или глюкоза для приготовления раствора, являющегося изотоничным плазме крови. Водные растворы должны быть должным образом буферированы (предпочтительно до значения рН от 3 до 9), при необходимости. Приготовление приемлемых парентеральных рецептур в стерильных условиях легко осуществимо с использованием стандартных фармацевтических способов, хорошо известных специалистам в данной области техники.

Стерильные инъецируемые растворы могут быть приготовлены путем смешивания соединения формулы I с соответствующим растворителем и одним или несколькими вышеуказанными носителями с последующим стерильным фильтрованием. В случае со стерильными порошками, приемлемыми для использования при приготовлении стерильных инъецируемых растворов предпочтительные способы приготовления включают сушку под вакуумом и лиофилизацию, которые обеспечивают получение порошковых смесей антагонистов рецепторов альдостерона и требуемых вспомогательных веществ для последующего приготовления стерильных растворов.

Соединения в соответствии с настоящим изобретением могут быть выполнены в лекарственной форме для использования в медицине человека или в ветеринарии для введения инъекций (например, инъецирование или инфузия внутривенных болюсов, либо введение внутримышечно, подкожно или интратекально) и могут быть представлены в стандартной лекарственной форме в ампулах или в другой упаковке лекарственных средств для однократного приёма, или в упаковке лекарственных средств для многократного приёма с добавлением консервантов при необходимости. Композиции для инъецирования могут быть в виде суспензий, растворов или эмульсий на масляной или водной основе, и могут содержать такие рецептурные вещества, как суспендирующие, стабилизирующие, солюбилизирующие и (или) диспергирующие вещества. Кроме того, активный ингредиент может быть в форме стерильного порошка для перевода сухой лекарственной формы в жидкую с использованием приемлемой основы, например, стерильной, апирогенной воды до применения.

Соединения в соответствии с настоящим изобретением могут быть введены (например, перорально или топически) в виде таблеток, капсул, суппозиториев, эликсиров, растворов или суспензий, которые могут содержать ароматизирующие и красящие вещества, для немедленного, отсроченного, замедленного, длительного, прерывистого или контролируемого высвобождения.

Соединения в соответствии с настоящим изобретением также могут быть представлены для использования в медицине человека или в ветеринарии в форме, приемлемой для перорального или буккального введения, например, в виде растворов, гелей, сиропов, жидкостей для полоскания рта или суспензий или сухих порошков для разведения водой или другой приемлемой основой до применения, выборочно с ароматизирующими или подкрашивающими веществами. Также могут использоваться твердые композиции, такие как таблетки, капсулы, таблетки для рассасывания, пастилки, пилюли, шарики, порошки, пасты, гранулы или готовые смеси. Твердые и жидкие композиции для перорального введения могут быть приготовлены с использованием способов, хорошо известных в данной области техники. Такие композиции также могут содержать один или несколько фармацевтически приемлемых носителей и вспомогательных веществ, которые могут находиться в твердой или жидкой форме.

Таблетки могут содержать вспомогательное вещества, такие как микрокристаллическая целлюлоза, лактоза, цитрат натрия, карбонат кальция, двухосновный фосфат кальция и глицин, разрыхлители, такие как крахмал (предпочтительно кукурузный, картофельный или тапиоковый крахмал), гликолят крахмал натрия, кроскармеллозу натрия и некоторые сложные силикаты и гранулирующие связующее вещества, такие как поливинилпирролидон, гидроксипропилметилцеллюлоза (НРМС), гидроксипропилцеллюлоза (НРС), сахароза, желатин и камедь.

Дополнительно могут быть включены смазывающие вещества, такие как стеарат магния, стеариновая кислота, глицерил бегенат и тальк.

Композиции могут быть введены перорально в виде таблеток, микрочастиц, минитаблеток, капсул, саше и пероральных растворов или суспензий, быстрого или контролируемого высвобождения или порошков для их приготовления. Дополнительно к новым твердым формам пантопразола в соответствии с настоящим изобретением, применяемого в качестве активного вещества, пероральные препараты могут выборочно включать различные стандартные фармацевтические носители и вспомогательные вещества,

- 13 023020 такие как связующие вещества, наполнители, буферы, лубриканты, глиданты, красители, разрыхлители, ароматизаторы, подсластители, поверхностно-активные вещества, разделительные составы при изготовлении таблеток, антиадгезивные вещества и покрытия. Некоторые вспомогательное вещества могут выполнять несколько функций в композициях, например, действовать в качестве связующих веществ и разрыхлителей.

Примеры фармацевтически приемлемых разрыхлителей для пероральных композиций включают крахмал, прежелатинизированный крахмал, гликолят крахмала натрия, карбоксиметилцеллюлозу натрия, кроскармеллозу натрия, микрокристаллическую целлюлозу, алгинаты, смолы, поверхностно-активные вещества, шипучие композиции, водные алюмосиликаты и сшитый поливинилпирролидон.

Примеры фармацевтически приемлемых связующих веществ для пероральных композиций включают камедь; производные целлюлозы, такие как метилцеллюлоза, карбоксиметилцеллюлоза, гидроксипропилметилцеллюлоза, гидроксипропилцеллюлоза или гидроксиэтилцеллюлоза; желатин, глюкозу, декстрозу, ксилитол, полиметакрилаты, поливинилпирролидон, сорбидол, крахмал, прежелатинизированный крахмал, трагакант, ксантановую смолу, алгинаты, алюмосиликат магния, полиэтиленгликоль или бентонит.

Примеры фармацевтически приемлемых наполнителей для пероральных композиций включают лактозу, ангидролактозу, моногидрат лактозы, сахарозу, декстрозу, маннитол, сорбитол, крахмал, целлюлозу (в частности, микрокристаллическую целлюлозу), дигидро- или ангидрофосфат кальция, карбонат кальция и сульфат кальция.

Примеры фармацевтически приемлемых лубрикантов, используемых в композиции в соответствии с настоящим изобретением, включают стеарат магния, тальк, полиэтиленгликоль, полимеры этиленоксида, лаурилсульфат натрия, лаурилсульфат магния, олеат натрия, стеарилфумарат натрия и коллоидальную двуокись кремния.

Примеры применяемых фармацевтически приемлемых ароматизаторов для пероральных композиций включают синтетические ароматизаторы и натуральные ароматические масла, такие как экстракты масел, цветов и фруктов (например, бананов, яблок, вишни обыкновенной и персика) и их сочетаний, а также аналогичные ароматизаторы. Их использование зависит от многих факторов, наиболее важным из которых является органолептическая приемлемость для лиц, которые будут принимать фармацевтические композиции.

Примеры применяемых фармацевтически приемлемых красителей для пероральных композиций включают синтетические и натуральные красители, такие как двуокись титана, бета-каротин и экстракты из кожуры грейпфрута.

Примеры применяемых фармацевтически приемлемых покрытий для пероральных композиций, используемых обычно для облегчения проглатывания, модифицирования свойств высвобождения, улучшения внешнего вида и (или) маскирование вкуса композиций, включают гидроксипропилметилцеллюлозу, гидроксипропилцеллюлозу и сополимеры акрилата/метакрилата.

Примеры применяемых фармацевтически приемлемых подсластителей для пероральных композиций включают аспартам, сахарин, сахарин натрия, цикламат натрия, ксилитол, маннитол, сорбитол, лактозу и сахарозу.

Примеры фармацевтически приемлемых буферов включают лимонную кислоту, цитрат натрия, бикарбонат натрия, двухосновный фосфат натрия, оксид магния, карбонат кальция и гидроксид магния.

Примеры фармацевтически приемлемых поверхностно-активных веществ включают лаурилсульфат натрия и полисорбаты.

Твердые композиции аналогичного типа могут также быть использованы в качестве наполнителей в желатиновых капсулах. В этом отношении предпочтительные вспомогательные вещества включают лактозу, крахмал, целлюлозу, молочный сахар или высокомолекулярные полиэтиленгликоли. В соотношении водных суспензий и (или) эликсиров агент может сочетаться с различными подсластителями или ароматизаторами, подкрашивающими веществами или красителями, с эмульгирующими и (или) суспендирующими веществами и с разбавителями, такими как вода, этанол, пропиленгликоль и глицерин, и с их сочетаниями.

Соединения в соответствии с настоящим изобретением могут также, например, быть приготовлены в форме суппозиториев, например, содержащих известные основы суппозиториев для применения в медицине человека или в ветеринарии, либо в виде пессариев, например, содержащих известные основы пессариев.

Соединения в соответствии с настоящим изобретением могут быть выполнены в лекарственной форме для обеспечения топического введения для использования в медицине человека и ветеринарии в виде мазей, кремов, гелей, гидрогелей, лосьонов, растворов, шампуней, порошков (в том числе спреев или присыпок), пессариев, тампонов, спреев, примочек, аэрозолей, капель (например, глазных, ушных или носовых капель) или пуронов.

Для топического нанесения на кожу вещество в соответствии с настоящим изобретением может быть выполнено в лекарственной форме в виде приемлемой мази, содержащей активное соединение, суспендированное или растворенное, например, в смеси с одним или несколькими из нижеприведенных

- 14 023020 веществ: минеральное масло, жидкий вазелин, белый вазелин, пропиленгликоль, соединение полиоксиэтилен-полиоксипропилен, эмульгирующий воск, моностеарат сорбитана, полиэтиленгликоль, жидкий парафин, полисорбат 60, воск цетиловых эфиров, цетеариловый спирт, 2-октилдодеканол, бензиловый спирт и вода. Такие композиции также могут содержать другие фармацевтически приемлемые вспомогательные вещества, такие как полимеры, масла, жидкие носители, поверхностно-активные вещества, буферы, консерванты, стабилизаторы, антиоксиданты, увлажнители, смягчители, красители и ароматизаторы.

Примеры фармацевтически приемлемых полимеров, пригодных для таких топических композиций, включают акриловые полимеры; производные целлюлозы, такие как карбоксиметилцеллюлоза натрия, метилцеллюлоза или гидроксипропилцеллюлоза; и природные полимеры, такие как алгинаты, трагакант, пектин, ксантан и цитозан .

Примеры фармацевтически приемлемых масел включают минеральные масла, кремнийорганические масла, жирные кислоты, спирты и гликоли.

Примеры фармацевтически приемлемых жидких носителей включают воду, спирты или гликоли, такие как этанол, изопропанол, пропиленгликоль, гексиленгликоль, глицерин и полиэтиленгликоль или их смеси, в которых растворены или диспергированы псевдополиморфы, выборочно с добавлением нетоксичных анионных, катионных или неионных поверхностно-активных веществ и неорганических или органических буферных составов.

Примеры фармацевтически приемлемых консервантов включают бензоат натрия, аскорбиновую кислоту, сложные эфиры р-гидроксибензойной кислоты и различные антибактериальные и противогрибковые вещества, такие как растворители, например этанол, пропиленгликоль, бензиловый спирт, хлорбутанол, четвертичные аммониевые соли и парабены (такие как метилпарабен, этилпарабен и пропилпарабен).

Примеры фармацевтически приемлемых стабилизаторов и антиоксидантов включают этилендиаминтетриуксусную кислоту (ΕΌΤΑ), тиомочевину, токоферол и бутилгидроксианизол.

Примеры фармацевтически приемлемых увлажнителей включают глицерин, сорбитол, мочевину и полиэтиленгликоль.

Примеры фармацевтически приемлемых смягчителей включают минеральные масла, изопропилмиристат и изопропилпалмилат.

Соединения также может быть введено дермально или трансдермально, например, с использованием трансдермальных пластырей.

Для офтальмического применения соединения могут быть выполнены в виде микронизированных суспензий в изотоническом, рН-отрегулированном, стерильном физиологическом растворе, или, предпочтительно, в виде растворов в изотоническом, рН-отрегулированном, стерильном физиологическом растворе, выборочно в сочетании с таким консервантом, как бензилалконий хлорид.

Как указывалось, соединения в соответствии с настоящим изобретением могут быть введены интраназально или путем ингаляции, и они приемлемым образом доставляются с помощью ингалятора сухого порошка или в виде аэрозольного спрея из аэрозольного баллончика, насоса, пульверизатора или небулайзера с использованием приемлемого газа-вытеснителя, например, дихлордифторметана, трихлорфторметана, дихлортетрафторэтана, гидрофторалкана, такого как 1,1,1,2-тетрафторэтан (НРЛ 134АТ) или 1,1,1,2,3,3,3-гептафторпропан (НРЛ 227ΕΑ), двуокиси углерода или иного приемлемого газа. В случае с распыляемыми под давлением аэрозолями единица дозирования может быть определена с помощью клапана, установленного на устройстве, для подачи дозированного количества лекарственного средства. Аэрозольный баллончик, насос, пульверизатор или небулайзер могут содержать раствор или суспензию активного соединения, например, смесь этанола и газа-вытеснителя в качестве растворителя, которая может дополнительно содержать лубрикант, например, сорбитан триолеат.

Капсулы и картриджи (выполненные, например, из желатина) для использования в ингаляторах или инсуффляторах, могут быть выполнены в лекарственной форме, содержащей порошковую смесь соединения и приемлемой порошковой основы, такой как лактоза или крахмал.

Для топического введение путем ингаляции соединения в соответствии с настоящим изобретением могут доставляться для использования в медицине человека или ветеринарии с помощью небулайзера.

Фармацевтические композиции в соответствии с настоящим изобретением могут содержать от 0,01 до 99% весовых долей активного материала. Для топического введения, например, композиция обычно должна содержать 0,01-10%, более предпочтительно 0,01-1% активного материала.

Активные вещества также могут быть введены в виде липосомальных систем доставки, таких как малые моноламеллярные везикулы, большие моноламеллярные везикулы и мультиламеллярные везикулы. Липосомы могут быть образованы из широкого разнообразия фосфолипидов, таких как холестерин, стеариламин или фосфатидилхолины.

Фармацевтическая композиция или стандартная лекарственная форма в соответствии с настоящим изобретением может быть введена в соответствии с режимом введения и дозирования лекарственного средства, определенным путем проведения контрольного тестирования в свете вышеприведенных рекомендаций для достижения оптимальной активности при минимальной токсичности или минимальных

- 15 023020 побочных эффектах для конкретного пациента. Тем не менее, такая точная настройка терапевтического режима является стандартной в свете приведенных в настоящем описании рекомендаций.

Доза активных веществ в соответствии с настоящим изобретением может изменяться в зависимости от разнообразных факторов, таких как условия основного заболевания, состояние пациента, вес, пол и возраст, а также от способа введения. Эффективное количество для лечения может быть легко определено с помощью эмпирических способов, известных специалистам в данной области техники, например, путем создания матрицы доз и частоты введения и путем сравнения групп экспериментальных единиц или субъектов в каждой точке матрицы. Точное количество, вводимое пациенту, изменяется в зависимости от состояния и тяжести заболевания и физического состояния пациента. Измеряемое уменьшение интенсивности любого симптома или параметра заболевания может быть определен специалистами в данной области техники, или врач может получить эту информацию от пациента. Очевидно, что любое клинически или статистически значимое ослабление или уменьшение интенсивности любого симптома или параметра заболевания мочевыводящих путей не выходит за объем настоящего изобретения. Клинически значимое ослабление или уменьшение интенсивности заболевания означает воспринимаемое ослабление или уменьшение интенсивности симптомов заболевания пациентом и (или) врачом.

Например, один пациент может одновременно страдать от ряда симптомов затруднения или боли при мочеиспускании таких, как, например, императивные позывы к мочеиспусканию и учащенное мочеиспускание или оба симптома, и указанные симптомы могут быть ослаблены с использованием способов в соответствии с настоящим изобретением. В случае недержания мочи любое уменьшение частоты или объема нежелательного мочеиспускания рассматривается как благотворное воздействие настоящего способа лечения.

Количество вводимого вещества может находиться в пределах от приблизительно 0,01 до приблизительно 25 мг/кг/сутки, предпочтительно от приблизительно 0,1 до приблизительно 10 мг/кг/сутки и наиболее предпочтительно от 0,2 до приблизительно 5 мг/кг/сутки. Очевидно, что фармацевтические рецептуры в соответствии с настоящим изобретением не должны в обязательном порядке содержать все количество вещества, являющегося эффективным для лечения заболевания, т.к. такое эффективное количество может быть достигнуто путем введения нескольких доз таких фармацевтических рецептур.

В предпочтительном примере осуществления настоящего изобретения соединения формулы I выполнены в виде капсул или таблеток, предпочтительно содержащих 10-200 мг соединений в соответствии с настоящим изобретением, их предпочтительно вводят пациенту при суммарной суточной дозе 10300 мг, предпочтительно 20-150 мг и наиболее предпочтительно приблизительно 50 мг для лечения недержания мочи и других дисфункций.

Фармацевтическая композиция для парентерального введения содержит от приблизительно 0,01% до приблизительно 100% по весу активных веществ в соответствии с настоящим изобретением, исходя из 100 вес.% от общего веса фармацевтической композиции.

В целом, трансдермальные лекарственные формы могут содержать от приблизительно 0,01% до приблизительно 100% по весу активных веществ по сравнению со 100% общего веса лекарственной формы.

Фармацевтическая композиция или стандартная лекарственная форма может быть введена в виде однократной суточной дозы, либо общая суточная доза может быть введена в разделенных дозах. Кроме того, может быть желательным совместное введение или последовательное введение другого соединения для лечения заболевания. С этой целью комбинированные активные компоненты выполняют в виде простой единицы дозирования.

Для проведения комбинированного лечения, при котором соединения представлены в виде отдельных лекарственных форм, соединения могут быть введены одновременно, либо каждое соединение может быть введено с разнесением во времени. Например, соединение в соответствии с настоящим изобретением может быть введено утром, а антимускариновое соединение может быть введено вечером, или наоборот. Дополнительные соединения также могут быть введены через определенные интервалы. Порядок введения будет зависеть от различных факторов, таких как возраст, вес, пол, состояние здоровья пациента, тяжесть и этиология заболеваний, подлежащих лечению, путь введения, функционирование почек и печени пациента, история болезни пациента и чувствительность пациента к препарату. Может быть проведена тщательная настройка определения порядка введения соединения, и такая точная настройка является стандартной в свете данных в настоящем описании рекомендаций.

Синтез соединений в соответствии с настоящим изобретением

Соединения формулы I и их энантиомеры, диастереомеры, Ν-оксиды и фармацевтически приемлемые соли могут быть получены с помощью общепринятых способов, изложенных ниже в настоящем описании, при этом указанные способы образуют дополнительный аспект в соответствии с настоящим изобретением.

Специалистам в данной области техники должно быть очевидно, что желательным может явиться использование защищенных производных промежуточных веществ, используемых при приготовлении соединений формулы I. Создание защиты и снятие защиты функциональных групп может быть осуществлено с помощью способов, известных в данной области техники (см., например, Огееп апй \Уи15 РтоГее- 16 023020

Йус Огоирз ίη Огдашс 8уп1Ье515. ίοΐιη \УПеу и §оп8, №ν Уогк, 1999). Гидрокси или аминогруппы могут быть защищены любой защитной гидрокси или аминогруппой. Защитные аминогруппы могут быть удалены с использованием известных технологий. Например, ацильные группы, такие как алканоильные, алкоксикарбонильные и ароильные группы, могут быть удалены путем сольволиза, например, путем гидролиза в кислых или щелочных условиях.

Арилметоксикарбонильные группы (например, бензилоксикарбонилыные) могут быть расщеплены путем гидрогенолиза в присутствии катализатора, такого как палладий-на-угле.

Процесс синтеза целевых соединений завершается удалением любых защитных групп, которые могут присутствовать в предпоследних промежуточных веществах, с использованием стандартных способов, хорошо известных специалистам в данной области техники. Далее незащищенные конечные продукты очищают, при необходимости, с использованием стандартных методов, таких как хроматография на силикагеле, ВЭЖХ на силикагеле и аналогичных методов, и (или) путем рекристаллизации.

Соединения в соответствии с настоящим изобретением обычно получают в соответствии со следующей схемой.

В схеме 1 Ак означает низшую алкильную группу, а остальные переменные определяются для общей формулы I или внутри самой схемы.

Циклические кетоны 1 коммерчески доступны на рынке, либо их легко получить с помощью стандартных способов, известных специалистам в данной области техники, например, из пиперидона (К.| = Ν) с карбонильной группой, которая может или не может быть заранее защищена (такой как кетальная группа, например 1,3-диоксолан) простым нуклеофильным замещением активированных галоарилов, галоалкилов или галогетероарилов, что может быть проведено в соответствующем растворителе (таком как η-бутанол, ΌΜΡ, Ν-метилпирролидон или Ν,Ν-диметилацетамид) при температуре в диапазоне от комнатной температуры до температуры флегмы выбранных растворителей в присутствии основания, такого как триэтиламин или 4,4-диметиламинопиридин. Реакция может быть также проведена при микроволновом излучении в микроволновом аппарате для сокращения времени реакции. Альтернативным общеизвестным способом получения пиперидонов из инактивированных галоарилов или галогетероарилов (или трифлатов) является способ аминирования Бухвальда-Хартвига с использованием палладия в качестве катализатора или проведение катализированного аминирования с использованием других металлов. Могут быть использованы хорошо известные способы восстановительного аминирования в тех случаях, когда означает алкил. Циклические кетоны 1 вступают в реакцию с илидами, например, полученными путем добавления основания (например, ΜΗΜΌδ или трет-бутоксида калия в апротонном растворителе, таком как ТГФ или диэтиловый эфир), например, к метилтрифенилфосфоний бромиду, для получения производных экзометилена 2. Производные метилена 2, в свою очередь, циклизированы с использованием методологии 1,3-диполярного циклоприсоединения до производных алкинила 3 (Нао-\Уе1 δΐιίΐι ек а1., ТеТраЬейгоп 1ейег8 49 (2008) 1008-1011, \УО 20006/122770). С этой целью оксимы триалкилсилилпропиональдегидов превращают ίη δίΐιι (либо путем выделения промежуточного вещества) в соответствующие хлоро- или бромооксимы (например, путем использования Ν-бромсукцинимида, или Νхлорсукцинимида или гипохлорита или гипобромита натрия, или йбутилгипохлорита в соответствующем растворителе, таком как дихлорметан или ДМФ с добавлением воды или без добавления воды), которые выделяют или непосредственно трансформируют в реакционном сосуде в соответствующие нитрилоксиды, с помощью слабого основания, такого как №₂СО₃,триэтиламин или этилмагнийбромид. Нитрилоксиды достаточно легко вступают в реакцию с соединениями 2 в простейшем растворителе, таком как дихлорметан или ДМФ обычно при температуре от -78°С до 0° вплоть до комнатной температуры или при нагреве до дефлегмирования выбранного растворителя, позволяя получить соединения 3.

Далее силильную защитную группу 3 удаляют путем обработки тетрабутиламмоний фторидом в ТГФ при температуре в диапазоне от температуры внешней среды до дефлегмирования или путем гид- 17 023020 ролиза с основанием (К₂СО₃ или КОН в МеОН) или с помощью иного приемлемого способа, выбранного из способов, о которых сообщалось в Сгеепе-\Уи1к (Сгеепе'к Рго1есИуе Сгоирк ίη Огдатс §уп(Ьек1к, 3гб Εάίίίοη, Ре1ег С. Μ. \Уи1к. ТЬеобоига Сгеепе 1999, \УПеу йИегкаепсе раде 654-659), и которые хорошо известны специалистам в данной области техники. Далее полученные ацетиленовые соединения преобразуют в соединения 4 путем проведения реакции между ними и К₃-ЬС с последующим проведением реакции Соногаширы (8с1епсе о£ 8уйЬек1к, Н. Неапеу апб 8. СИпкИе, ОсЮЬег 2003, Уо1. 3, Раде 402 и далее). В указанной реакции используют иодид меди и палладиевый комплекс, выбранный из (РЬ₃Р)₂РбС1₂, (РЬ₃Р)₂Рб(ОАс)₂, (РЬ₃Р)₄Рб (который также может быть получен ш кйи, например, из трифенилфосфина и Рб(ОАс)₂), и из всех других палладиевых комплексов, приведенных в литературе и используемых в такого рода реакции в присутствии такого основания, как ТЕА, ΌΕΑ, ΌΓΓΕΑ, ТМА, бутиламин и пиперидин. Растворители выбраны из ТНЕ, ΏΜΕ, ΏΜΕ, ΌΜΑ, этилацетата, ЭМЗО, толуола и иных приемлемых растворителей для целей реакции; либо может быть использовано то же самое основание в избыточном количестве в качестве реакционного растворителя. При проведении реакции в ΌΜΕ или ΌΜΕ выделение соединения 4 можно избежать путем добавления тетрабутиламмоний фторида или тетрабутиламмоний хлорида непосредственно в реакционную среду, содержащую соединения 3, до того, как произойдет связывание (8огепкеп, и.8., РотЪо-УШат, Ε. ТеТраЬебгоп 2005, 61, 2697-2703). Вводят К₃ заместители с использованием арильных или гетероарильных галидов (предпочтительно в порядке уменьшения - иодид, бромид, хлорид), арильных или гетероарильных трифлатов, алкильных галогенидов или ацильных хлоридов, ароильных хлоридов и гетероарильных хлоридов. Трифлаты синтезируют с использованием способа, исключительно хорошо известного специалистам в данной области техники, например, из фенолов или гидроксиарилов (гетероарилов) с использованием трифторметансульфонового ангидрида в хлорированном растворителе или с использованием Ν-фенилтрифлимида в толуоле или хлорированного растворителя в присутствии основания (например, ТΕΑ) или без него. Оба процесса могут быть ускорены при воздействии микроволн при проведении реакции в микроволновой печи. Другими приемлемыми замещаемым группами ЬС для К₃-ЬС являются нонафлаты, тозилаты и трифторбораты калия. Когда К₃ означает ΑΗ, альтернативной реакцией связывания по Соногашира является реакция соединения 4 с основанием лития (например, бутил литий или ^0108) в соответствующем растворителе, например, для получения производного литий алкинила, которое, в свою очередь, вступает в реакцию с электрофилом, например, с бутил иодидом или аналогичным электрофилом в том же самом растворителе или в альтернативном апротонном растворителе, таком как толуол, при температуре в диапазоне от -20°С до температуры дефлегмирования выбранного растворителя.

Если получены соединения 4, в которых О является защитной группой, необходимо снятие с них защиты и Ν-арилирование/алкилирование или иные виды этапов дериватизации для получения соединения I.

Соединения 4 могут быть получены путем непосредственного вступления в реакцию соединений 2 с соответствующими дериватизированными пропиолальдегидными оксимами, в которых К₃ группа заменяет триалкилсилильную группу.

В схеме 2, Αν означает низшую алкильную группу, и остальные переменные имеют такие значения, которые определены для общей формулы I или внутри самой схемы.

Схема 2 представляет собой альтернативную реакцию для получения соединений I, в которых К₃означает ΑΗ. Как указывалось выше, при проведении реакции с дибромформальдоксимом для получения соединений 3 можно синтезировать соединения 5. Бромоксазолин 5 может быть далее алкинилирован с использованием алкинов, соответствующего основания, такого как карбонат натрия, при проведении сокатализа Си/Си1 в соответствии с детальным описанием, приведенным в экспериментальной части. Если О является защитной группой в полученных соединениях 6, необходимо провести дальнейшее снятие защиты с них и Ν-арилирование/алкилирование или иные виды этапов дериватизации для получения соединения I.

- 18 023020

Соединения 6 могут быть получены путем непосредственного вступления в реакцию соединения 2 с соответствующими алкилпропиональдегидными оксимами.

Другие спирогетероциклические промежуточные вещества, отличающиеся от спирооксазолинов, могут быть синтезированы с помощью способов, приведенных в литературе и описанных в экспериментальной части в качестве ссылок.

Синтез других соединений, не приведенных на данный момент в общем описании выше, в полной мере задокументирован в экспериментальной части нижеприведенного описания настоящего изобретения.

Свободные основания формулы I, их диастереомеры или энантиомеры могут быть преобразованы в соответствующие фармацевтически приемлемые соли при стандартных условиях, хорошо известных в данной области техники. Например, свободное основание растворяют в приемлемом органическом растворителе, таком как метанол, обрабатывают, например, одним эквивалентом малеиновой или оксалиновой кислоты, одним или двумя эквивалентами хлористоводородной кислоты или метансульфокислоты, и далее концентрируют под вакуумом для получения соответствующей фармацевтически приемлемой соли. Далее остаток может бытля или смеси органических растворителей, таких как метанол/диь очищен путем рекристаллизации от приемлемого органического растворитеэтилэфир.

Ν-оксиды соединений формулы I могут быть синтезированы путем простых реакций окисления, хорошо известных специалистам в данной области техники.

Примеры

Нижеприведенные примеры иллюстрируют синтез соединений формулы I в соответствии с вышеприведенным общим описанием. Указанные примеры являются иллюстративными и не ограничивают объема настоящего изобретения. Реагенты и исходные материалы доступны специалистам в данной области техники.

Пример 1. 3-Фенилэтинил-8-(6-метил-3-нитро-2-пиридил)-1-окса-2,8-диазаспиро[4.51дек-2-ен.

3-Фенилпроп-2-иналоксим (соединение 1а).

Смесь фенилпропаргилальдегида (859 мг, 6,6 ммоль), гидроксиламин гидрохлорида (4,59 г, 66 ммоль), этилового спирта (48 мл) и воды (12 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 24 ч. Реакционную смесь разбавляли Н₂О, экстрагировали ЕрО - этилацетатом, промывали рассолом и выпаривали до сухого состояния под вакуумом и получали 0,96 г указанного в заголовке соединения (син:анти 1:1) в виде пастообразного твердого вещества коричневатого цвета. МБ: [М+Н]+= 146.11.

3-Фенилэтинил-8-(Рбутоксикаобонил)-1-окса-2,8-диазаспиоо[4.5]дек-2-ен (соединение 1Ь).

К раствору соединения 1а (0,35 г, 2,41 ммоль) в 3 мл ДМФ, перемешиваемому при комнатной температуре, добавляли Ν-хлорсукцинимид (0,386 г, 2,89 ммоль), и раствор окрашивался в оранжевый цвет. После перемешивания в течение 2 ч раствор приобретал желтый цвет и после дополнительного перемешивания в течение 2 ч его охлаждали до 0°С и добавляли раствор 1-(Ьбутоксикарбонил)-4-метиленпиперидин (143 мг, 0,73 ммоль) в 0,5 мл ДМФ, затем добавляли раствор ТЕА в 0,5 мл ДМФ. Ледяную баню удаляли, и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 дней. Затем реакционную смесь разбавляли холодной водой и экстрагировали этилацетатом. Экстракты промывали рассолом, высушивали над №₂БО₄ и выпаривали до сухого состояния под вакуумом. Неочищенный продукт очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (БР1®ТМ - Вю!аде; элюируя градиентом петролейного эфира - этилацетата в соотношении от 95 : 5 до 7 : 3) и получали 210 мг указанного в заголовке продукта. Выход: 85,5%. МБ: [М+Н]+ = 341.16.

3-Фенилэтинил-1-окса-2,8-диазаспиро[4.5]дек-2-ен (соединение 1с).

К раствору соединения 1Ь (200 мг, 0,59 ммоль) в СН₂С1₂ (12 мл), перемешиваемому при 0°С, добавляли трифторуксусную кислоту (452 мкл, 5,87 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при 25°С в течение 24 ч до тех пор, пока с помощью метода жидкостной хроматографии/масс-спектрометрии не наблюдалась полная конверсия реагента. Добавляли воду, а затем 3Ν водный раствор №ОН для получения щелочного рН. Органический слой отделяли, экстрагировали в водном слое с помощью СН₂С1₂, промывали рассолом, высушивали комбинированные органические слои над №₂БО₄ и получали указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества бежевого цвета, которое использовали на следующем этапе без дальнейшей очистки. МБ: [М+Н]+= 241.29.

3-Фенилэтинил-8-(6-метил-3-нитро-2-пиоидил)-1-окса-2,8-диазаспиро[4.5]дек-2-ен.

Раствор соединения 1с (50 мг, 0,21 ммоль), 2-хлор-6-метил-3-нитропиридин (39,5 мг, 0,23 ммоль) и триэтиламина (31,9 мкл, 0,23 ммоль) в 14,14-диметилацетамиде (1,14 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 24 ч и вливали в воду. Водный слой экстрагировали этилацетатом. Комбинированные экстракты промывали водой, высушивали над №₂БО₄ и выпаривали до сухого состояния под вакуумом. Неочищенный продукт очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (БР1®тм - В|о1аде). элюируя смесью петролейного эфира - Ме₂СО в соотношении 95 : 5. Дальнейшая очистка с использованием СН₂С1₂ в качестве элюента позволяла получить 47,7 мг указанного в заголовке соединения (67,7 %) в виде твердого вещества желтого цвета. МБ: [М+Н]+ = 377.22.

Ή-ΝΜΚ: (СЭС1₃, δ): 1.90-2.11 (т, 4Н), 2.50 (к, 3Н), 3.00 (к, 2Н), 3.50-3.71 (т, 4Н), 6.63 (б, 1=8 Нг,

- 19 023020

1Н), 7.34-7.46 (т, 3Н), 7.51-7.57 (т, 2Н), 8.11 (б, 8 Ηζ, 1Н).

Пример 2. 3-Фенилэтинил-8-(3-нитро-2-пиридил)-1-окса-2,8-диазаспиро[4.5]дек-2-ен.

2- (4-метилен-1-пиперидил)-3-нитропиридин (соединение 2а).

п-Бутиллитий в гексане (2,5 М, 4,93 мл, 12,3 ммоль) добавляли по каплям в течение 10 мин в суспензию 98% метилтрифенилфосфоний бромида (4,65 г, 12,8 ммоль) в 40 мл ТГФ, перемешиваемого при 70°С. Спустя 0,5 ч, добавляли раствор 1-(3-нитро-2-пиридил)-4-оксопиперидина (2 г, 8,5 ммоль) в 16 мл ТГФ и реакционную смесь выдерживали до тех пор, пока она не нагревалась до комнатной температуры. После выдерживания в течение ночи смесь быстро охлаждали водным насыщенным раствором МН₄С1, экстрагировали этилацетатом, высушивали над Ν;·ι₂δϋ₄ и выпаривали до сухого состояния под вакуумом. Неочищенный продукт очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (δΡ1®ΤΜ -Вю1аде), элюируя градиентом петролейного эфира - этилацетата в соотношении от 1:0 до 9:1 и получали 1,23 г указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества желтого цвета. Μδ: [М+Н]+ = 220.18.

3- Фенилэтинил-8-(3-нитро-2-пиридил)-1-окса-2,8-диазаспиро[4.5]дек-2-ен.

Указанный в заголовке продукт был получен в соответствии с описанием для получения соединения 1Ь, но при этом использовали соединение 2а вместо 1-Рбутоксикарбонил)-4-метиленпиперидина. После обычной процедуры выделения продукта реакции смесь очищали смесь очищали методом флэшхроматографии в автоматизированном режиме (δΡ1®ΤΜ - Вю1аде), элюируя градиентом петролейного эфира - этилацетата в соотношении от 95 : 5 до 7 : 3, и получали 25 мг указанного в заголовке соединения. Выход: Μδ: [Μ+Η]+ = 363.54.

'Η-ΝΜ^ (СБС1з, δ): 1.90-2.11 (т, 4Н), 3.00 (5, 2Н), 3.51-3.70 (т, 4Н), 6.76-6.83 (т, 1Н), 7.34-7.46 (т, 3Н), 7.47-7.51 (т, 2Н), 8.14-8.18 (т, 1Н), 8.36-8.38 (т, 1Н).

Пример 3. 3-[(6-Метил-2-пиридил)этинил1-8-(6-метил-3-нитро-2-пиридил-1-окса-2,8-диазаспиро [4.5]дек-2-ен.

6-Метил-2-(4-метилен-1-пиперидил)-3-нитропиридин (соединение 3а).

Указанный в заголовке продукт синтезировали с использованием способа, описанного для получения соединения 2а, но заменив при этом при этом 1-(3-нитро-2-пиридил)-4-оксо-пиперидин 1-(6-метил-3нитро-2-пиридил)-4-оксопиперидином. Выход: 62%. Μδ: [М+Н]+ = 233.12.

Ы-Гидрокси-3-триметилсилил-проп-2-инимидоилхлорид (соединение 3Ь).

К раствору 68 г (11,9 ммоль) 3-триметилсилилпроп-2-иналоксима [Саггеиа, Епск Μ. е1 а1., Огдатс Ьебег8, Уо1ите 7, 155ие 10, 2005, Раде5 2011-2014] в 11,9 мл ДМФ, перемешиваемому при комнатной температуре, добавляли Ν-хлорсукцинимид (1,99 г, 14,8 ммоль). После перемешивания в течение 4 ч раствор вливали в воду и экстрагировали ЕьО. После обычной процедуры выделения продукта реакции остаток (2,09 г) использовали как таковой на следующем этапе.

3-(Триметилсилилэтинил)-8-(6-метил-3-нитро-2-пиридил)-1-окса-2,8-диазаспиро[4.5]дек-2-ен (соединение 3с).

Раствор ТЕА (0,554 мл, 3,85 ммоль) в 9,4 мл дихлорметана добавляли по каплям в раствор соединения 3Ь (1,67 г, 2,57 ммоль) и соединения 3а (600 мг, 2,57 ммоль) в 42 мл дихлорметана, перемешиваемых при 0°С. Затем реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 24 ч и разбавляли холодной водой. Органический слой промывали рассолом, высушивали над Ν3₂δΟ₄ и выпаривали до сухого состояния под вакуумом. Неочищенный продукт очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (δΡ1®ΤΜ - Вю1аде; градиент СН₂С1₂ - петролейный эфир - этилацетат в соотношении от 5 : 5 до 10 : 0) и получали 641 мг указанного в заголовке продукта. Выход: 67%. Μδ: [Μ+Н]® = 273.43.

3-[(6-Метил-2-пиридил)этинил]-8-(6-метил-3-нитро-2-пиридил)-1-окса-2.8-диазаспиро[4.5]дек-2-ен.

Суспензию соединения 3с (58 мг, 0,16 ммоль), ацетаттригидрат натрия (42,5 мг, 0,31 ммоль), 2бром-6-метилпиридина (26,8 мг, 0,16 ммоль), тетрабутиламмоний фторида (40,8 мг, 0,156 ммоль) и тетракис(трифенилфосфин)палладия(0) (15,8 мг, 0,014 ммоль) в 2,05 мл ДМФ, промытую струей водорода, нагревали в микроволновой печи (Вю1аде) при 120°С в течение 10 мин. Разбавляли этилацетатом, промывали Н₂О и высушивали над Ν;·ι₂δΟ₄. затем выпаривали и очищали остаток с использованием автоматизированной системы флэш-жидкостной хроматографии (Ηо^^ζоη®ΤΜ - Вю!аде) (элюируя градиентом петролейного эфира - этилацетата в соотношении от 9 : 1 до 6 : 4) и получали 17,4 мг (28,5%) указанного в заголовке соединения в виде масла желтого цвета. Μδ: [Μ+Н]® = 392.33.

Ή-ΝΜ^ (СНС1₃ δ): 1.90-2.07 (т, 4Н), 2.48 (5, 3Н), 2.66 (5, 3Н), 3.04 (5, 2Н), 3.50-3.68 (т, 4Н), 6.62 (б, 1=8 Нг, 1Н), 7.22-7.26 (т, 1Н), 7.42-7.46 (т, 1Н), 7.65-7.61 (т,1Н), 8.10 (б, 1=8 Нг, 1Н).

Пример 4. 3 -(2-Т иенилэтинил)-8-(6-метил-3 -нитро-2-пиридил)-1 -окса-2,8-диазаспиро [4.5]дек-2-ен.

Указанный в заголовке продукт получали, следуя процедуре, описанной выше для получения соединения примера 3, но при этом использовали 2-бромтиофен вместо 2-бром-6-метилпиридина. Очищали остаток с использованием автоматизированной системы флэш-жидкостной хроматографии (Ηо^^ζоη®ΤΜ - Вю1аде) (элюируя градиентом петролейного эфира - этилацетата в соотношении от 9 : 1 до 6 : 4). Выход: 26,7%. Μδ: [Μ+Н]® = 383.52.

Пример 5. 3 -(2-Пиридилэтинил)-8-(6-метил-3 -нитро-2-пиридил)-1 -окса-2,8-диазаспиро [4.5]дек-2-ен.

- 20 023020

Указанный в заголовке продукт получали, следуя процедуре, описанной выше для получения соединения примера 3, но при этом использовали 2-йодпиридин вместо 2-бром-6-метилпиридина. Остаток очищали с использованием автоматизированной системы флэш-жидкостной хроматографии (Нопζοη®ΤΜ - В|о1адс) (элюируя градиентом петролейного эфира - этилацетата в соотношении от 9 : 1 до 4:6). Выход: 49,6%. Μδ: [М+Н]+ = 378.46.

Ή-ΝΜΚ: (СОС1₃ ,δ): 1.90-2.09 (т, 4Н), 2.49 (5, 3Н), 3.03 (5, 2Н), 3.51-3.67 (т, 4Н), 6.63 (б, 6=8Ηζ,1Η), 7.36-7.41 (т, 1Н), 7.59-7.63 (т, 1Н), 7.76-7.82 (т, 1Н), 8.11 (б, б=8№, 1Н), 8.66-8.69 (т, 1Н).

Пример 6. 3-(2-Фторфенилэтинил)-8-(6-метил-3-нитро-2-пиридил)-1-окса-2,8-диазаспиро[4.5]дек-2ен.

Указанный в заголовке продукт получали, следуя процедуре, описанной выше для получения соединения примера 3, но при этом использовали 2-фторйодбензол вместо 2-бром-6-метилпиридина. Остаток очищали с использованием автоматизированной системы флэш-жидкостной хроматографии (НоГОоп®ТМ - Вю!аде) (элюируя градиентом петролейного эфира - этилацетата в соотношении от 95 : 5 до 7 : 3). Выход: 42,6%. Μδ: [М+Н]+ = 395.27.

Ή-ΝΜΚ: (СПС1₃, δ): 1.90-2.11 (т, 4Н), 2.50 (5, 3Н), 3.02 (5, 2Н), 3.50-3.70 (т, 4Н), 6.63 (б, 1=8 Ш, 1Н), 7.09-7.21 (т, 2Н), 7.36-7.45 (т, 1Н), 7.49-7.57 (т,1Н), 8.11 (б, 1=8 Н, 1Н).

Пример 7. 3-(3 -Фторфенилэтинил)-8-(6-метил-3 -нитро-2-пиридил)-1 -окса-2,8-диазаспиро [4.5]дек-2ен.

Указанный в заголовке продукт получали, следуя процедуре, описанной выше для получения соединения примера 3, но при этом использовали 3-фторйодбензол вместо 2-бром-6-метилпиридина. Выход: 42,4%. Μδ: [Μ+Π|+ = 395.41.

Ή-ΝΜΚ: (СПС1₃, δ): 1.90-2.11 (т, 4Н), 2.50 (5, 3Н), 2.99 (5, 2Н), 3.50-3.70 (т, 4Н), 6.63 (б 1=8 Ш, 1Н), 7.09-7.17 (т, 1Н), 7.20-7.27 (т, 1Н), 7.30-7.39 (т, 2Н), 8.11 (б, 8 Ш, 1Н).

Пример 8. 3-(4-Фторфенилэтинил)-8-(6-метил-3-нитро-2-пиридил)-1-окса-2,8-диазаспиро[4.5]дек-2ен.

Указанный в заголовке продукт получали, следуя процедуре, описанной выше для получения соединения примера 3, но при этом использовали 4-фторйодбензол вместо 2-бром-6-метилпиридин. Выход: 37,7%. Μδ: [Μ+Н^ = 395.27.

Ή-ΝΜΚ: (СПС1₃, δ): 1.90-2.10 (т, 4Н), 2.50 (5, 3Н), 2.99 (5, 2Н), 3.50-3.70 (т, 4Н), 6.63 (б 1=8 Ш, 1Н), 7.04-7.13 (т, 2Н), 7.50-7.57 (т, 2Н), 8.11 (б, 1=8 Ш, 1Н).

Пример 9. 3-(2-Фурилэтинил)-8-(6-метил-3-нитро-2-пиридил)-1-окса-2,8-диазаспиро[4.5]дек-2-ен.

Указанный в заголовке продукт получали, следуя процедуре, описанной выше для получения соединения примера 3, но при этом использовали 2-бромфуран вместо 2-бром-6-метилпиридина. Остаток очищали с использованием автоматизированной системы флэш-жидкостной хроматографии (Нопζοη®ΤΜ - Вю!аде) (элюируя градиентом петролейного эфира - этилацетата в соотношении от 95 : 5 до 6 : 4). Выход: 12,6%. Μδ: [Μ+Н^ = 367.33.

Пример 10. 3-[(2-Метил-1,3-тиазол-4-ил)этинил]-8-(6-метил-3-нитро-2-пиридил)-1-окса-2,8-диазаспиро[4.5]дек-2-ен.

Указанный в заголовке продукт получали, следуя процедуре, описанной выше для получения соединения примера 3, но при этом использовали 4-бром-2-метилтиазол вместо 2-бром-6-метилпиридина. Остаток очищали с использованием автоматизированной системы флэш-жидкостной хроматографии (Ηο^^ζοη®ΤΜ -В1о!аде) (элюируя градиентом петролейного эфира - этилацетата в соотношении от 9 : 1 до 5:5). Выход: 17,6%. Μδ: [Μ+Н^ = 398.35.

Пример 11. 3-(Проп-1-инил)-8-(6-метил-3-нитро-2-пиридил)-1-окса-2,8-диазаспиро[4.5]дек-2-ен.

3-Этинил-8-(6-метил-3-нитро-2-пиоидил)-1-окса-2,8-диазаспиро[4.5]дек-2-ен (соединение 11а).

К раствору соединения 3с (360 мг, 0,96 ммоль) в 9 мл ТГФ добавляли тетрабутиламмоний фторид гидрат (269 мг, 0,963 ммоль), и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч. После выдерживания в течение ночи, быстро охлаждали водой, экстрагировали этилацетатом и выпаривали до сухого состояния, неочищенный продукт очищали с использованием автоматизированной системы флэш-жидкостной хроматографии (Ηο^^ζοη®ΤΜ -В1о!аде) (элюируя градиентом петролейного эфира - этилацетата в соотношении от 95 : 5 до 7 : 3), и получали соединение 11а (0,231 г, 80%). Μδ: [М+Н]+ = 301.36.

-(Проп-1 -инил)-8-(6-метил-3 -нитро-2-пиридил)-1 -окса-2,8-диазаспиро [4.5]дек-2-ен.

В раствор соединения 11а (25 мг, 0,83 ммоль) в ТГФ (1,26 мл) при постоянном перемешивании при -78°С добавляли по каплям бутиллитий в гексане (2,5 М, 0,04 мл, 0,1 ммоль). Спустя 30 мин добавляли метилйодид (6,22 мкл, 0,1 ммоль). Ледяную баню удаляли и раствор оранжевого цвета выдерживали до нагревания до комнатной температуры. После выдерживания в течение ночи раствор быстро охлаждали насыщенным водным раствором ЫН₄С1, экстрагировали этилацетатом, промывали Н₂О, высушивали над Ν;·ι₂δΟ.·ι и выпаривали до сухого состояния под вакуумом. Неочищенный продукт очищали с использованием автоматизированной системы флэш-жидкостной хроматографии (Ηο^^ζοη®ΤΜ - В1о!аде) (элюируя градиентом петролейного эфира - этилацетата в соотношении от 95 : 5 до 6 : 4) и получали 6 мг указан- 21 023020 ного в заголовке соединения. Выход: 22,9%. Μδ: [М+Н]+ = 315.32.

Пример 12. 3-(3-Хлорфенилэтинил)-8-(6-метил-3-нитро-2-пиридил)-1-окса-2,8-диазаспиро[4.5]дек2-ен.

Указанный в заголовке продукт получали, следуя процедуре, описанной выше для получения соединения примера 3, но при этом использовали 3-хлорйодбензол вместо 2-бром-6-метилпиридина. Остаток очищали с использованием автоматизированной системы флэш-жидкостной хроматографии (Ηοήζοη®ΤΜ - В|о1адс) (элюируя градиентом петролейного эфира - этилацетата в соотношении от 9 : 1 до 7 : 3). Выход: 55%. Μδ: [М+Н]+ = 411.16.

Ή-ΝΜΚ: (СБС1з, δ): 1.90-2.11 (т, 4Н), 2.50 (5, 3Н), 2.99 (5, 2Н), 3.50-3.70 (т, 4Н), 6.64 (б, 1=8 Ηζ, 1Н), 7.29-7.35 (т, 1Н), 7.39-7.45 (т, 2Н), 7.53 (т, 1Н), 8.11 (б, 8 Ηζ, 1Η).

Пример 13. 3-(3-Метилфенилэтинил)-8-(6-метил-3-нитро-2-пиридил)-1-окса-2,8-диазаспиро[4.5]дек2-ен.

Указанный в заголовке продукт получали, следуя процедуре, описанной выше для получения соединения примера 3, но при этом использовали 3-йодтолуол вместо 2-бром-6-метилпиридина. Получали твердое вещество желтого цвета. Выход: 59,6%. Μδ: [М+Н]+ = 391.42.

Ή-ΝΜΚ: (СОС1₃, δ): 1.91-2.11 (т, 4Η), 2.37 (5, 3Н), 2.51(5, ЗН), 2.99 (5, 2Η), 3.52-3.70 (т, 4Н), 6.64 (б, 1=8 Ηζ, 1Н), 7.20-7.27 (т, 2Н), 7.29-7.38 (т, 2Н), 8.12 (б, 1=8 Ηζ, 1Η).

Пример 14. 3-(3-Метоксифенилэтинил)-8-(6-метил-3-нитро-2-пиридил)-1-окса-2,8-диазаспиро[4.5] дек-2-ен.

Указанный в заголовке продукт получали, следуя процедуре, описанной выше для получения соединения примера 3, но при этом использовали 3-метоксийодбензол вместо 2-бром-6-метилпиридина. Получали твердое вещество желтого цвета. Выход: 41%. Μδ: [Μ+Η]+ = 407.27.

Ή-ΝΜΚ: (СБС1₃, δ): 1.90-2.09 (т, 4Η), 2.49 ( 5, 3Н), 3.00 (5, 2Η), 3.52-3.70 (т, 4Η), 3.84 (5, 3Н), 6.63 (б, 1=8 Ηζ, 1Η), 6.95-7.00 (т, 1Η), 7.06-7.08 (т, 1Η), 7.12-7.16 (т, 1Η), 7.26-7.32(т, 1Η), 8.11 (б, 1=8 Ηζ, 1Η).

Пример 15. 3-(3 -Цианосренилэтинил)-8-(6-метил-3 -нитро-2-пиридил)-1 -окса-2,8-диазаспиро [4.5] дек-2-ен.

Указанный в заголовке продукт получали, следуя процедуре, описанной выше для получения соединения примера 3, но при этом использовали 3-йодбензонитрил вместо 2-бром-6-метилпиридина. Остаток очищали с использованием автоматизированной системы флэш-жидкостной хроматографии (Ηογιζοη®ΤΜ - В|о1адс) ( элюируя градиентом петролейного эфира - этилацетата в соотношении от 95 : 5 до 5 : 5). Выход: 66,5%. Μδ: [Μ+Η]+ = 402.23.

Ή-ΝΜΚ: (СПС1₃, δ): 1.90-2.09 (т, 4Η), 2.49 (5, 3Н), 3.00(5, 2Η), 3.50-3.70 (т, 4Η), 6.64 (б, 1=8 Ηζ, 1Η), 7.49-7.55 (т, 1Η), 7.67-7.71 (т, 1Η), 7.74-7.78 (т, 1Η), 7.81-7.83 (5, 1Η), 8.11 (б, 1=8 Ηζ, 1Η).

Пример 16. 3-(3-Тиенилэтинил)-8-(6-метил-3-нитро-2-пиридил)-1-окса-2.8-диазаспиро[4.5]дек-2-ен.

Указанный в заголовке продукт получали, следуя процедуре, описанной выше для получения соединения примера 3, но при этом использовали 3-бромтиофен вместо 2-бром-6-метилпиридина. Остаток очищали с использованием автоматизированной системы флэш-жидкостной хроматографии (Ηοήζοη™ Вю1адс) (элюируя градиентом петролейного эфира - этилацетата в соотношении от 7 : 3 до 3 : 7).

Получали твердое вещество желтого цвета. Выход: 66,5%. Μδ: [Μ+Η]+ = 383.22.

Ή-ΝΜΚ: (СПС1₃, δ): 1.90-2.01 (т, 4Η), 2.49 (5, 3Н), 2.98 (5, 2Η), 3.50-3.70 (т, 4Η), 6.62 (б, 1=8 Ηζ, 1Η), 7.19-7.22 (т, 1Η), 7.32-7.35 (т, 1Η), 7.62-7.63 (т, 1Η), 8.11 (б, 1=8 Ηζ, 1Η).

Пример 17. 3-(3-Пиридилэтинил)-8-(6-метил-3-нитро-2-пиридил)-1-окса-2,8-диазаспиро[4.5]дек-2ен.

Указанный в заголовке продукт получали, следуя процедуре, описанной выше для получения соединения примера 3, но при этом использовали 3-йодпиридин вместо 2-бром-6-метилпиридина. После обычной процедуры выделения продукта реакции неочищенный продукт очищали методом флэшхроматографии в автоматизированном режиме (δΡ1®ΤΜ - ΒίοΙα^ο: элюируя градиентом петролейного эфира - этилацетата в соотношении от 7 : 3 до 3 : 7) и получали указанный в заголовке продукт в виде твердого вещества желтого цвета. Выход: 66,7%. Μδ: [Μ+Η]+ = 378.27 Ή-ΝΜΚ: (СЭСЕ. δ): 1.90-2.09 (т, 4Н), 2.49 (5, 3Н), 3.01 (5, 2Н), 3.50-3.70 (т, 4Н), 6.63 (б, 1=8 Ηζ, 1Н), 7.33-7.38 (т, 1Н), 7.83-7.87 (т, 1Н), 8.11 (б, 1=8 Ηζ, 1Η), 8.63-8.65 (т, 1Н), 8.78-7.80 (5, 1Η).

Пример 18. 3-(3-(3-Метил-[1,2,4]оксадиазол-5-ил)фенилэтинил)-8-(6-метил-3-нитро-2-пиридил)-1 окса-2,8-диазаспиро[4.5]дек-2-ен.

Указанный в заголовке продукт получали, следуя процедуре, описанной выше для получения соединения примера 3, но при этом использовали 5-(3-бром-фенил)-3-метил-[1,2,4]оксадиазол вместо 2бром-6-метилпиридина. После обычной процедуры выделения продукта реакции неочищенный продукт очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (δΡ1®ΤΜ - ΒίοΙα^ο: элюируя градиентом петролейного эфира - этилацетата в соотношении от 95 : 5 до 6 : 4) и получали указанный в заголовке продукт в виде твердого вещества желтого цвета. Выход: 33,8%. Μδ: [М+Н]+ = 459.11 Ή-ΝΜΚ: (СПС1₃, δ):1.92-2.11 (т, 4Η), 2.50-2.52 ( т, 6Η), 3.01 (5, 2Η), 3.52-3.70 (т, 4Η), 6.64 (б, 1=8 Ηζ, 1Η), 7.54- 22 023020

7.59 (т, 1Н), 7.72-7.76 (т, 1Н), 8.10-8.17 (т, 2Н), 8.29-8.31 (т, 1Н).

Пример 19. 3-(3-Метилбут-1-инил)-8-(6-метил-3-нитро-2-пиридил)-1-окса-2.8-диаза-спиро[4.5]дек2-ен.

-Боом-8-(6-метил-3 -нитоо-2-пиридил)-1 -окса-2,8-диазаспиоо [4.5]дек-2-ен (соединение 19а).

Суспензию 6-метил-2-(4-метилен-1-пиперидил)-3-нитропиридина (соединение 3а, 350 мг, 1,5 ммоль), карбоната натрия (1,26 г, 15 ммоль) и дибромформальдоксима (608 мг, 3 ммоль) в 25 мл этилацетата перемешивали при комнатной температуре в течение 2 дней. После этого реакционную смесь промывали водой, высушивали над сульфатом натрия и выпаривали до сухого состояния под вакуумом. Неочищенный продукт очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (8Р1®ТМ Вю1адс; элюируя градиентом петролейного эфира - этилацетата в соотношении от 9 : 1 до 6 : 4) и получали 377 мг указанного в заголовке продукта. Выход: 70,8%. М8: [М+Н]+ = 356.41.

-(3 -Метилбут-1 -инил)-8-(6-метил-3 -нитоо-2-пиридил)-1-окса-2,8-диаза-спиро [4.5]дек-2-ен.

Смесь соединения 19а (50 мг, 0,141 ммоль), 3-метил-1-бутина (48 мг, 0,705 ммоль), карбоната натрия (74,6 мг, 0,704 ммоль) и Си (44,8 мг, 0,705 ммоль) нагревали в герметичном сосуде при 120°С в течение 32 ч, добавляя через каждые 8 ч дополнительное равное количество 3-метил-1-бутина, карбоната натрия и Си. После этого смесь охлаждали, добавляли в нее СН₂С1₂, фильтровали на целите и выпаривали до сухого состояния под вакуумом. Остаток очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (8Р1®ТМ - В|о1адс; элюируя градиентом петролейного эфира - этилацетата в соотношении от 95 : 5 до 75 : 25 и далее изократическим элюированием смеси петролейного эфира - этилацетата в соотношении 9 : 1) и получали 16 мг указанного в заголовке продукта. Выход: 33,1%. М8: [М+Н]+ = 343.20.

’Н-ММК: (СБС1₃, δ): 1.26 (б, 6Н, .18 Нг), 1.86-2.05 (т, 4Н), 2.49 (5, 3Н), 2.73-2.81 (т, 1Н), 2.86 (5, 2Н), 3.48-3.65 (т, 4Н), 6.62 (б, .18 Нг, 1Н), 8.10 (б, .18 Нг, 1Н).

Пример 20. 3-(Гекс-1-инил)-8-(6-метил-3-нитро-2-пиридил)-1-окса-2,8-диазаспиро[4.5]дек-2-ен.

Указанный в заголовке продукт синтезировали с использованием способа, описанного для получения соединения примера 19, но заменив при этом 3-метил-1-бутин-гекс-1-ином. Остаток очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (8Р1®ТМ - Вю1адс; элюируя градиентом петролейного эфира - этилацетата в соотношении от 95 : 5 до 85 : 15) и получали 7,8 мг указанного в заголовке продукта. Выход: 27,9 %. М8: [М+Н]+ = 357.27.

’Н-ММК: (СБС1₃, δ): 0.95-0.99 (т, 3Н), 1.26-1.65 (т, 4Н), 1.86-2.03 (т, 4Н), 2.38-2.45 (т, 2Н), 2.48 (5, 3Н), 2.86 (5, 2Н), 3.48-3.65 (т, 4Н), 6.61 (б, .18 Нг, 1Н), 8.10 (б, 8 Нг, 1Н).

Пример 21. 3-(2-Цианофенилэтинил)-8-(6-метил-3-нитро-2-пиридил)-1-окса-2,8-диазаспиро[4.5]дек2-ен.

Указанный в заголовке продукт получали, следуя процедуре, описанной выше для получения соединения примера 3, но при этом использовали 2-бромбензонитрил вместо 2-бром-6-метилпиридина. После обычной процедуры выделения продукта реакции неочищенный продукт очищали методом флэшхроматографии в автоматизированном режиме (8Р1®ТМ - Вю1адс; элюируя градиентом петролейного эфира - этилацетата в соотношении от 9 : 1 до 4 : 6) и получали указанный в заголовке продукт в виде масла желтого цвета. Выход: 74,8%. М8: [М+Н]+ = 402.08.

'ΐΙ-Ν\1Κ: (СБС1₃, δ): 1.90-2.11 (т, 4Н), 2.49 (5, 3Н), 3.06 (5, 2Н), 3.50-3.70 (т, 4Н), 6.63 (б, .18 Нг, 1Н), 7.48-7.54 (т, 1Н), 7.60-7.74 (т, 3Н), 8.11 (б, .18 Нг, 1Н).

Пример 22. 3-(3-Хлорфенилэтинил)-8-(3-ииано-2-пиразинил)1-окса-2,8-диазаспиро[4.5]дек-2-ен.

3-Триметилсилилэтинил-8-(Рбутоксикаобонил)-1-окса-2,8-диазаспиро[4.5]дек-2-ен (соединение 22а).

Указанное в заголовке соединение синтезировали в соответствии со способом, описанном для получения соединения 3с, но при этом использовали 1-(1бутоксикарбонил)-4-метиленпиперидин вместо соединения 3а. После обычной процедуры выделения продукта реакции, неочищенный продукт очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (8Р1®ТМ - Вю1адс; элюируя градиентом петролейного эфира - этилацетата в соотношении от 95 : 5 до 6 : 4) и получали указанный в заголовке продукт в виде твердого вещества белого цвета. Выход: 43,3%. М8: [М+Н]+ = 337.13.

3-(3-Хлорфенилэтинил)-8-(Рбутоксикаобонил)-1-окса-2,8-диазаспиро[4.5]дек-2-ен(соединение 22Ь).

Указанное в заголовке соединение синтезировали в соответствии со способом, описанном для получения соединения примера 3, замещая 2-бром-6-метилпиридин 1-хлор-3-йодбензолом и соединение 3с соединением 22а. После обычной процедуры выделения продукта реакции неочищенный продукт очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (8Р1®ТМ - Вю1адс; элюируя градиентом петролейного эфира - этилацетата в соотношении от 95 : 5 до 6 : 4) и получали указанный в заголовке продукт в виде твердого вещества белого цвета. Выход: 76,9%. М8: [М+Н]+ = 375.14.

-(3 -Хлорфенилэтинил)-1 -окса-2,8-диазаспиро [4.5]дек-2-ен (соединение 22с).

Указанное в заголовке соединение синтезировали в соответствии со способом, описанном для получения соединения 1с, замещая соединение 1Ь соединением 22с. Неочищенный остаток использовали без дальнейшей очистки в следующей реакции. Выход: 90,4%. М8: [М+Н]+ = 275,12.

-(3 -Хлорфенилэтинил)-8-(3 -ииано-2-пиразинил)-1-окса-2,8-диазаспиоо [4.5]дек-2-ен.

- 23 023020

Указанное в заголовке соединение получали с использованием способа, описанного для получения соединения примера 1, но заменив при этом соединение 1с соединением 226 и 2-хлор-6-метил-3нитропиридин 2-хлор-3 -цианопиразином.

Получали густое масло коричневатого цвета. Выход: 83,3%. Μδ: [М+Н]+ = 378.14.

Ή-ΝΜΚ: (ΟΌα₃, δ): 1.90-2.00 (т, 2Н), 2.10-2.15 (т, 2Н), 2.99 (5, 2Н), 3.65-3.78 (т, 2Н), 4.20-4.27 (т, 2Н), 7.29-7.35 (т, 1Н), 7.39-7.45 (т, 2Н), 7.54 (5, 1Н), 8.05 (5, 1Н), 8.28 (5, 1Н).

Пример 23. 3-(2-Метилфенилэтинил)-8-(6-метил-3-нитро-2-пиридил)окса-2,8-диазаспиро[4.5]дек-2ен.

Указанное в заголовке соединение получали, следуя процедуре, описанной для получения соединения примера 3, но заменив при этом 2-бром-6-метилпиридин 2-бромтолуолом. После обычной процедуры выделения продукта реакции неочищенный продукт очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (δΡ1®ΤΜ - В|о1адс; элюируя градиентом петролейного эфира - этилацетата в соотношении от 95 : 5 до 8 : 2) и получали указанный в заголовке продукт в виде твердого вещества желтого цвета. Выход: 29,6%. Μδ: [М+Н]+ = 391,09.

Ή-ΝΜΚ: (СОС1₃, δ): 1.90-2.11 (т, 4Н), 2.46-2.50 (25, 6Н), 3.01 (5, 2Н), 3.50-3.70 (т, 4Н), 6.63 (б 1=8Нг, 1Н), 7.18-7.34 (т, 3Н), 7.48-7.52 (т, 1Н), 8.11 (б, 1=8 Нг, 1Н).

Пример 24. 3-(2-Хлорфенилэтинил)-8-(6-метил-3-нитро-2-пиридил)-1-окса-2,8-диазаспиро[4.5]дек2-ен.

Указанный в заголовке продукт получали, следуя процедуре, описанной выше для получения соединения примера 3, но при этом использовали 1-хлор-2-йодбензол вместо 2-бром-6-метилпиридина. После обычной процедуры выделения продукта реакции неочищенный продукт очищали методом флэшхроматографии в автоматизированном режиме (δΡ1®ΤΜ - В1о1аде; элюируя градиентом петролейного эфира - этилацетата в соотношении от 95 : 5 до 7 : 3) и получали указанный в заголовке продукт в виде масла желтого цвета. Выход: 57,2%. Μδ: [М+Н]+ = 410,97.

Ή-ΝΜΚ: (СБС1з, δ): 1.90-2.11 (т, 4Н), 2.49 (5, 3Н), 3.03 (5, 2Н), 3.50-3.70 (т, 4Н), 6.63 (б 1=8 Нг, 1Н), 7.26-7.38 (т, 2Н), 7.44-7.48 (т, 1Н), 7.56-7.60 (т,1Н), 8.11 (б, 1=8 Нг, 1Н).

Пример 25. 3-(2-Пиразинилэтинил)-8-(6-метил-3-нитро-2-пиридил)-1-окса-2,8-диазаспиро[4.5]дек2-ен.

Указанное в заголовке соединение получали, следуя процедуре, описанной выше для получения соединения примера 3, но заменив при этом 2-бром-6-метилпиридин 2-йодпиразином. После обычной процедуры выделения продукта реакции неочищенный продукт очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (δΡ1®ΤΜ - В1о1аде; элюируя градиентом петролейного эфира - этилацетата в соотношении от 8 : 2 до 3 : 7) и получали указанный в заголовке продукт в виде твердого вещества желтого цвета. Выход: 28,1%. Μδ: [Μ+НЦ = 379,22.

Ή-ΝΜΚ: (СБС1з, δ): 1.93-2.11 (т, 4Н), 2.51 (5, 3Н), 3.03 (5, 2Н), 3.51-3.71 (т, 4Н), 6.64 (б 1=8 Нг, 1Н), 8.12 (б, 1=8 Нг, 1Н), 8.60 (бб, 1=16 Нг, 4 Нг, 2Н), 8.80 (5, 1Н).

Пример 26. 3-Фенилэтинил-8-(6-метил-3-нитро-2-пиридил)-1-окса-8-азаспиро[4.5]дек-3-ен.

-Г идрокси-3 -фенилэтинил-8-этоксикаобонил-1 -окса-8 -азаспиро [4.51декане (соединение 26а).

К раствору 82 мг (0,362 ммоль) этил 3-оксо-1-окса-8-азаспиро[4.5]декане-8-карбоксилата |Ε6\υηι δ. С. XV и е! а1., 1. Μеб.СЬет., 1995, 38 (9), рр 1558-1570] в ТГФ (4 мл) добавляли по каплям 1М раствор фенилэтинилмагний бромида в ТГФ (0,724 мл, 0,724 ммоль), перемешивания при комнатной температуре в атмосфере обезвоженного азота. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч, далее при 60°С в течение 6 ч, затем реакционную смесь быстро охлаждали насыщенным водным раствором аммоний хлорида и экстрагировали этилацетатом. Комбинированные органические слои промывали рассолом, высушивали над сульфатом натрия и выпаривали до сухого состояния под вакуумом. Неочищенный продукт очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (δΡ1®ΤΜ - В1о1аде; элюируя градиентом петролейного эфира - этилацетата в соотношении от 75 : 25 до 4 : 6) и получали указанный в заголовке продукт в виде твердого вещества желтого цвета. Выход: 87,2%. Μδ: [Μ+НЦ = 330,33.

-Фенилэтинил-8 -этоксикаобонил-1 -окса-8-азаспиро [4.5]дек-3 -ен (соединение 26Ь).

К раствору соединения 26а (93 мг, 0,282 ммоль), перемешиваемому в пиридине (4 мл) при 0°С, добавляли тионилхлорид (0,103 мл, 1,141 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при 0°С до комнатной температуры в течение 2 ч. После этого смесь вливали в воду, подкисляли 1М НС1 и экстрагировали хлороформом. Органические слои комбинировали, промывали рассолом, высушивали над сульфатом натрия, выпаривали до сухого состояния и получали неочищенный продукт, который очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (δΡ1®ΤΜ - В1о1аде; элюируя градиентом петролейного эфира - этилацетата в соотношении от 92 : 8 до 75 : 25) и получали 18 мг указанного в заголовке соединения. Μδ: [М+Н]+ = 312,34.

3-Фенилэтинил-1-окса-8-азаспиро[4.5]дек-3-ен (соединение 26с).

Смесь соединения 26Ь (25 мг, 0,803 ммоль), КОН (80 мг, 1,43 ммоль), воды (2 мл) и МеОН (4 мл) перемешивали при дефлегмировании в течение 2 ч. Затем смесь экстрагировали этилацетатом. Органи- 24 023020 ческий слой промывали рассолом, высушивали над сульфатом натрия и выпаривали до сухого состояния под вакуумом. Неочищенный остаток (19,2 мг) использовали без какой-либо очистки на следующем этапе. М8: [М+Н]+ = 240,10.

-Фенилэтинил-8-(6-метил-3 -нитро-2-пиридил)-1-окса-8-азаспиро [4.5]дек-3 -ен.

Указанное в заголовке соединение получали с использованием способа, описанного для получения соединения примера 1, но заменив при этом соединение 1с соединением 26с. Неочищенный продукт очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (8Р1®ТМ - Вю1аде; элюируя градиентом петролейного эфира - этилацетата в соотношении от 98 : 2 до 9 : 1) и получали 8 мг указанного в заголовке соединения. Выход: 51%. М8: [М+Н]+ = 376,14.

Ή-КМК: (СБС1з, δ): 1.75-1.87 (т, 2 Н), 1.87-1.98 (т, 2 Н), 2.48 (5, 3 Н), 3.49 (άάά, 1=13.39, 10.70, 3.06 Нг, 2 Н), 3.68 (61, 6=13.45, 4.16 Нг, 2 Н), 4.76 (б, 1=2.20 Нг, 2 Н), 6.13 (ΐ, 1=2.20 Нг, 1 Н), 6.58 (б, 1=8.31 Нг, 1 Н), 7.32-7.40 (т, 3 Н), 7.43-7.50 (т, 2 Н), 8.08 (6, 1=8.07 Нг, 1 Н).

Пример 27. 3-(3-Хлорсренилэтинил)-7-(6-метил-3-нитро-2-пиридил)-1-окса-2,7-диазаспиро[4.4]нон2-ен.

1-(1.бутоксикарбонил)-3-метилен-пирролидин (соединение 27а).

Указанное в заголовке соединение синтезировали с использованием способа, описанного выше, для получения соединения 2а, но при этом использовали 1-(1.бутоксикарбонил)-3-пирролидинон вместо 1-(3нитро-2-пиридил)-4-оксопиперидина. После обычной процедуры выделения продукта реакции неочищенный продукт очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (Ноп/оп®ТМ Вю1аде), элюируя градиентом петролейного эфира - этилацетата в соотношении от 95 : 5 до 7 : 3), и получали указанное в заголовке соединение в виде масла коричневатого цвета. Выход: 75,8%. М8: [М+Н]+ = 184,53.

-Триметилсилилэтинил-7-(1.бутоксикарбонил)-1 -окса-2,7-диазаспиро [4.4]нон-2-ен (соединение

27Ъ).

Указанное в заголовке соединение синтезировали с использованием способа, описанного выше, для получения соединения 3с, но при этом использовали соединение 27а вместо соединения 3а. После обычной процедуры выделения продукта реакции неочищенный продукт очищали методом флэшхроматографии в автоматизированном режиме (Ног12Оп®ТМ - В|о1аде). элюируя градиентом петролейного эфира - этилацетата в соотношении от 95 : 5 до 75 : 25, и получали указанное в заголовке соединение. Выход: 82,9%. М8: [М+Н]+ = 323,45.

3-(3-Хлорфенилэтинил)-7-(1.бутоксикарбонил)-1-окса-2,7-диазаспиро[4.4]нон-2-ен (соединение

27с).

Указанное в заголовке соединение получали, следуя процедуре, описанной для получения соединения примера 3, но при этом использовали 1-хлор-3-йодбензол вместо 2-бром-6-метилпиридина. После обычной процедуры выделения продукта реакции неочищенный продукт очищали методом флэшхроматографии в автоматизированном режиме (8Р1®ТМ - Вю1аде; элюируя градиентом петролейного эфира - этилацетата в соотношении от 95 : 5 до 6 : 4) и получали указанный в заголовке продукт в виде масла желтого цвета. Выход: 14%. М8: [М+Н]+ = 361,13.

3-(3-Хлорфенилэтинил)-1-окса-2,7-диазаспиро[4.4]нон-2-ен (соединение 276).

Указанное в заголовке соединение синтезировали с использованием способа, описанного выше, для получения соединения 1с, но замещая соединение 1Ъ соединением 27с. неочищенный остаток использовали без дальнейшей очистки в следующей реакции. М8: [М+Н]+ = 261,11.

-(3 -Хлорфенилэтинил)-7-(6-метил-3 -нитро-2-пиридил)-1 -окса-2,7-диазаспиро [4.4]нон-2-ен.

Указанное в заголовке соединение получали с использованием способа, описанного для получения соединения примера 1, замещая соединение 1с соединением 276. Неочищенный продукт очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (8Р1®ТМ - Вю1аде; элюируя градиентом петролейного эфира - ацетона в соотношении от 95 : 5 к 9 : 1), и получали указанное в заголовке соединение в виде густого масла желтого цвета. Выход: 68,5%.

¹Н-КМК: (СОС1₃, δ): 2.13-2.25 (т, 1Н), 2.46 (66, 1=12.84, 6.48 Нг, 1Н), 2.52 (5, 3 Н), 3.17-3.34 (т, 2Н), 3.42 (6, 1=12.47 Нг, 1Н), 3.69 (ΐ, 1=9.78 Нг, 1Н,) 3.82 (6, 1=12.47 Нг, 1Н), 3.98 (ΐ6, 1=10.94, 6.97 Нг, 1Н), 6.61 (6, 1=8.07 Нг, 1Н), 7.30-7.36 (т, 1Н,) 7.37-7.45 (т, 2 Н), 7.53 (5, 1Н), 8.07 (6, 1=8.31 Нг, 1Н).

Пример 28. 3-(3-Хлорфенилэтинил)-7-(6-метил-3-нитро-2-пиридил)-1-окса-2,7-диазаспиро[4.3]окт2-ен.

1-(Рбутоксикарбонил)-3-метиленазетидин (соединение 28а).

К суспензии метилтрифенилфосфоний бромида (1,56 г, 4,37 ммоль) в 30 мл Εΐ₂Ο, перемешиваемого при 0°С, добавляли трет-бутилат калия (0,459 г, 4,09 ммоль). Спустя 0,5 ч ледяную ванну удаляли, и смесь перемешивали в течение 1 ч при комнатной температуре. После этого смесь охлаждали в водяной ванне со льдом и добавляли 1-(Гбутоксикарбонил)-3-азетидинон (500 мг, 2,92 ммоль). Ледяную баню удаляли. После выдерживания в течение ночи реакционную смесь быстро охлаждали насыщенным раствором ΝΚ·|0 в воде, экстрагировали Εΐ₂Ο, высушивали над №₂8О₄, выпаривали до сухого состояния под вакуумом. Остаточный неочищенный продукт очищали методом флэш-хроматографии в автомати- 25 023020 зированном режиме (§Р1®ТМ - Вк1аде; элюируя градиентом петролейного эфира - ацетона в соотношении от 10 : 0 до 7 : 3) и получали указанное в заголовке соединение (426 мг) в виде густого бесцветного масла. Выход: 86,2%. М8: [М+Н^]+ = 170,45.

-Триметилсилилэтинил-7-(Цбутоксикарбонил)-1 -окса-2,7-диазаспиро [4.3] окт-2-ен (соединение

28Ь).

Указанное в заголовке соединение синтезировали с использованием способа, описанного выше, для получения соединения 3с, но при этом использовали соединение 28а вместо соединения 3а. После обычной процедуры выделения продукта реакции неочищенный продукт очищали методом флэшхроматографии в автоматизированном режиме (Нο^^ζοη®ТМ - ВюЮде), элюируя градиентом петролейного эфира - этилацетата в соотношении от 95 : 5 до 6 : 4, и получали указанное в заголовке соединение. Выход: 62%. М8: [М+Н]+ = 309,16.

3-(3-Хлорфенилэтинил)-7-(Ебутоксикарбонил)-1-окса-2,7-диазаспиро[4.3]окт-2-ен (соединение 28с).

Указанное в заголовке соединение получали, следуя процедуре, описанной для получения соединения примера 3, но при этом использовали 1-хлор-3-йодбензол вместо 2-бром-6-метилпиридина. После обычной процедуры выделения продукта реакции неочищенный продукт очищали методом флэшхроматографии в автоматизированном режиме (§Р1®ТМ - В^οίаде; элюируя градиентом петролейного эфира - этилацетата в соотношении от 8 : 2 до 65 : 35), и получали указанный в заголовке продукт в виде масла желтого цвета. Выход: 24,3%. М§: [М+Н]+ = 347,09.

3- (3-Хлорфенилэтинил)-1-окса-2,7-диазаспиро[4.3]окт-2-ен (соединение 28й).

Указанное в заголовке соединение синтезировали с использованием способа, описанного выше, для получения соединения 1с, но заменив при этом соединение 1Ь соединением 28с. Неочищенный остаток использовали без дальнейшей очистки на этапе следующей реакции. М§: [М+Н]+ = 247,13.

-(3 -Хлорфенилэтинил)-7-(6-метил-3 -нитро-2-пиридил)-1 -окса-2,7-диазаспиро [4.3]окт-2-ен.

Указанное в заголовке соединение получали с использованием способа, описанного для получения соединения примера 1, но заменив при этом соединение 1с соединением 28й. Неочищенный продукт очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (§Р1®ТМ - В^οίаде; Петролейный эфир - дихлорметан в соотношении 1 : 9) и получали указанное в заголовке соединение в виде густого масла желтого цвета. Выход: 68,5%. М§: [М+Н]+ = 383,08.

^!Н-ММК: (СПС1₃, δ): 2.51 (δ, 3 Н), 3.49 (δ, 2Н), 4.38 (й, 1=10.76 Н, 2Н), 4.49 (й, 1=11.00 Нг, 2Н), 6.65 (й, 1=8.31 Нг, 1Н), 7.33 (ί, 1=8.10 Нг, 1Н), 7.42 (ί, 1=8.07 Нг, 2Н),7.54 (δ, 1Н), 8.17 (й, 1=8.31 Нг, 1Н).

Примеры 29 и 30. 4-Фенилэтинил-9-(6-метил-3-нитро-2-пиридил)-1-окса-9-азаспиро[5.5] ундек-4-ен и 4-фенилэтинил-9-(6-метил-3-нитро-2-пиридил)-1-окса-9-азаспиро[5,5]ундек-3-ен.

4- метилен-9-(Цбутоксикарбонил)-1-окса-9-азаспиро[5.5]ундекан (соединение 29а).

К раствору 1-Вос-пиперидона (2,39 г, 12 ммоль) и этокситриметилсилана (3,75 мл, 24 ммоль) в 80 мл СС1₄ при перемешивании при 0°С добавляли триметилсилил трифторметилсульфонат (217 мкл, 1,2 ммоль) и триметил-(2-метилен-4-триметилсилилоксибутил)силан (Е. I. Майю еί а1., ΣοιΐΓη;·ι1 οί Огдашс СНепкЦу, 1992, 57, 2211-2213), растворенные в 23 мл СС1₄. После перемешивания при 0-5°С в течение 6 ч и выдерживании в течение ночи при 0°С реакционную смесь промывали водой, высушивали над №₂8О₄, фильтровали, и растворитель выпаривали до сухого состояния под вакуумом. Остаток в виде 6,5 г бесцветного масла очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (§Р1®ТМ Вю1аде; элюируя градиентом петролейного эфира - этилацетата в соотношении от 99:1 до 85:15) и получали 3,2 г указанного в заголовке соединения в виде бесцветного масла. Выход: 100%. М§: [М+Н]+ = 268,62.

4-Оксо-9-(Ебутоксикаобонил)-1-окса-9-азаспиро[5.5]ундекан (соединение 29Ь).

К раствору соединения 29а (1,6 г, 5.99 ммоль) в смеси диоксан - вода (32,9 мл и 11 мл соответственно) при перемешивании при комнатной температуре добавляли 4% раствор осмия тетраоксида в воде (0,762 мкл, 0,125 ммоль). Спустя 2 ч, добавляли порциями измельченный метапериодат натрия (2,56 г, 12 ммоль) и получали суспензию, которая меняла свой цвет от коричневатого до светло-серого. Спустя 4 ч добавляли Н₂О, экстрагировали этилацетатом, промывали Н₂О, высушивали над №₂8О₄ и выпаривали растворитель до сухого состояния. Остаток в виде полутвердого вещества коричневато-желтого цвета очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (§Р1®ТМ - Вю1аде; петролейный эфир - этилацетат в соотношении 7 : 3) и получали 0,96 г указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества серого цвета. Выход: 59,5%. М§: [М+Н]+ = 270,33.

4-Гидрокси-4-фенилэтинил-9-(Цбутоксикарбонил)-1-окса-9-азаспиро[5.5]ундекан (соединение 29с).

Указанное в заголовке соединение получали с использованием способа, описанного для получения соединения 26а, замещая этил 3-оксо-1-окса-8-азаспиро[4,5]декан-8-карбоксилат соединением 29Ь. После обычной процедуры выделения продукта реакции маслянистый остаток очищали методом флэшхроматографии в автоматизированном режиме (§Р1®ТМ - Вю1аде; элюируя градиентом петролейного эфира - этилацетата в соотношении от 9 : 1 до 6:4) и получали 0,.96 г указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества серого цвета. Выход: 57,3%. М§: [М+Н]+ = 372,14.

4-Фенилэтинил-1-окса-9-азаспиро [5.5]ундек-3 -ен и 4-фенилэтинил-1-окса-9-азаспиро [5.5]ундек-4- 26 023020 ен (соединения 296).

Указанные в заголовке соединения получали с использованием способа, описанного для получения соединения 26с, замещая соединение 26Ь соединением 29с. После обычной процедуры выделения продукта реакции остаточное масло очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (§Р1®ТМ - Вю1аде; элюируя градиентом петролейного эфира - этилацетата в соотношении от 9: 1 до 8:2), и получали 0,49 г (33.6%) указанных в заголовке соединений в виде масла коричневатого цвета, используемого на следующем этапе без отделения. М§: [М+Н]+ = 254,17.

4-Фенилэтинил-9-(6-метил-3-нитро-2-пиридил)-1-окса-9-азаспиро[5.5]ундек-4-ен и 4-фенилэтинил9-(6-метил-3-нитро-2-пиридил)-1-окса-9-азаспиро[5.5]ундек-3-ен.

Указанные в заголовке соединения получали с использованием способа, описанного для получения соединения примера 1, но заменив при этом соединение 1с соединением 296 Неочищенный продукт очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (§Р1®ТМ - Вю1аде; элюируя градиентом петролейного эфира - СН₂С1₂ в соотношении 4 : 6 к 3 : 7) и получали 5 мг соединения примера 29 и 1 мг соединения примера 30.

Пример 29. М8: [М+Н]+ = 390,29.

Ή-ΝΜΚ: (СЭС1₃, δ): 1.73-1.90 (т, 4Н), 2.32-2.39 (т, 2Н), 2.47 (5, 3Н), 3.38-3.50 (т, 2Н), 3.60-3.72 (т, 2Н), 3.87 (ί, 1=5.38 Нг, 2Н), 6.07 (5, 1Н), 6.57 (6, 1=8.31 Нг, 1Н), 7.30-7.37 (т, 3Н), 7.42-7.50 (т, 2Н), 8.08 (6, 1=8.07 Нг, 1Н).

Пример 30. М8: [М+Н]+ = 390,16.

Ή-Ν^Κ: (СОС1₃, δ): 1.69-1.79 (т, 2Н), 1.95 (6, 1=13.20 Нг, 2Н), 2.26 (6, 1=1.96 Нг, 2Н), 2.48 (5, 3Н), 3.36-3.50 (т, 2Н), 3.58-3.70 (т, 2Н), 4.30 (6, 1=2.69 Нг, 2Н), 6.20 (Ьг. 5., 1Н), 6.58 (6, 1=8.31 Нг, 1Н), 7.317.41 (т, 3Н), 7.45 (66, 1=6.60, 2.93 Нг, 2Н), 8.08 (6, 1=8.31 Нг, 1Н).

Пример 31. 3-(3-Хлорфенилэтинил)-1,9,12-триокса-2-азадиспиро[4.2.4,2]тетрадек-2-ен.

8-Метилен-1,4-диоксаспиро[4.51декан (соединение 31а).

Указанное в заголовке соединение получали с использованием способа, описанного для получения соединения 2а, но при этом использовали литий-бис-триметилсилиламид вместо бутиллития и проводили реакцию при -20°С. В качестве исходного материала 1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-он заменял 1-(3нитро-2-пиридил)-4-оксопиперидин. После обычной процедуры выделения продукта реакции остаток очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (Нопгои®ТМ - Вю1аде; Петролейный эфир - этилацетат в соотношении 95 : 5) и получали указанное в заголовке соединение в виде жидкого бесцветного масла. Выход: 99,3%. М8: [М+Н]+= 155,13.

3-Триметилсилилэтинил-1,9,2-триокса-2-азадиспиро[4.2.4.2]тетоадек-2-ен (соединение 31Ь).

Указанное в заголовке соединение синтезировали, используя способ, описанный для получения соединения 3с, но при этом использовали соединение 31а вместо соединения 3а. После обычной процедуры выделения продукта реакции остаток очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (Нопгои®ТМ - В|о1аде; градиентное элюирование петролейным эфиром-этилацетатом в соотношении от 98 : 2 до 9 : 1) и получали указанное в заголовке соединение.

3-(3-Хлорфенилэтинил)-1,9,2-триокса-2-азадиспиро[4.2.4.2]тетрадек-2-ен.

Указанное в заголовке соединение получали с использованием способа, описанного для получения соединения примера 3, но заменив при этом 2-бром-6-метилпиридин 1-хлор-3-йодбензолом. После обычной процедуры выделения продукта реакции, остаток очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (Нопгои®ТМ - Вю1аде; петролейный эфир - этилацетат в соотношении 85 : 15) и получали указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества серого цвета. Выход: 80,1%.

Альтернативная процедура.

1-Хлор-3-(3,3-диэтоксипроп-1-инил)бензол (соединение 31с).

Смесь 1-хлор-3-йодбензола (4 г, 16,8 ммоль), пропаргилальдегида диэтилацеталя (2,66 мл, 18,5 ммоль), бис(трифенилфосфин)палладий(11)дихлорида (295 мг, 0,42 ммоль), йодида меди (160 мг, 0,84 ммоль) и триэтиламина (60 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Спустя 4 ч, реакционную смесь быстро охлаждали Н₂О и экстрагировали этилацетатом. Экстракты промывали рассолом, высушивали над №₂8О₄ и выпаривали до сухого состояния под вакуумом. Остаток очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (Нопгои®ТМ - Вю1аде; петролейный эфир этилацетат в соотношении 97 : 3) и получали 4 г указанного в заголовке соединения в виде жидкого масла желтоватого цвета. Выход: 100%. М8: [М+Н]+ = 239,32.

3-(3-Хлорфенил)проп-2-инал (соединение 316).

38,8 мл воды и 7,7 мл трифторуксусной кислоты добавляли к раствору соединения 31с (4 г, 16,7 ммоль) в СН₂С1₂. Спустя 4 ч при постоянном перемешивании дополнительно добавляли 4 экв. трифторуксусной кислоты. Спустя 24 ч превращение завершалось, 2 слоя разделяли, органический слой промывали водой, высушивали над №₂8О₄, выпаривали до сухого состояния под вакуумом и получали указанное в заголовке соединение в виде масла желто-коричневатого цвета, используемое на следующем этапе без дальнейшей очистки. М8: [М+Н]+ = 165,35.

3-(3-Хлорфенил)проп-2-иналоксим(соединение 31е).

- 27 023020

Указанное в заголовке соединение получали с использованием способа, описанного для получения соединения 1а, используя при этом соединение 31ά вместо фенилпропаргилальдегида. Остаток слабокоричневого цвета использовали на следующем этапе без дальнейшей очистки. Выход: 96,4%. Μδ: [М+Н]+= 180,16.

3-(3-Хлорфенил)-Ы-гидрокси-проп-2-инимидоил хлорид (соединение 31 ί).

Указанное в заголовке соединение получали с использованием способа, описанного для получения соединения 3Ь, при этом использовали соединение 31 е вместо 3-триметилсилилпроп-2-инал оксима. Остаток слабо-коричневого цвета использовали на следующем этапе без дальнейшей очистки. Выход: 96,4%.

3-(3-Хлорфенилэтинил)-1.9,12-триокса-2-азадиспиро[4.2.4.2]тетрадек-2-ен.

Указанное в заголовке соединение получали в соответствии с процедурой, описанной для получения соединения 3с, используя соединение 31ί вместо соединения 3Ь и соединение 31а вместо соединения 3а. После обычной процедуры выделения продукта реакции остаток очищали методом флэшхроматографии в автоматизированном режиме (Ηοήζοη®ΤΜ - В|о1адс; элюируя градиентом петролейного эфира - ацетона в соотношении от 95 : 5 до 9 : 1) и получали указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества серого цвета. Выход: 64,8%. Μδ: [М+Н]+ = 332.14.

Ή-ΝΜΚ: (СПС1₃, δ): 1.63-1.74 (т, 2Н), 1.88 (άά, 1=13.94, 2.45 Ηζ, 2Н), 1.96-2.10 (т, 4Н), 2.92 (5, 2 Н),

3.92-4.05 (т, 4Н), 7.32 (ά, 1=7.58 Ηζ, 1Н), 7.35-7.44 (т, 2Н), 7.52 (5, 1Н).

Пример 32. 3-(3-Хлорфенилэтинил)-8-оксо-1-окса-2-азаспиро[4.5]дек-2-ен.

Раствор соединения примера 31 (0,76 г, 2,3 ммоль) в 5 мл трифторуксусной кислоты разбавляли водой (0,21 мл) и перемешивали при 0-4°С в течение 4 ч, подщелачивали 3Ν ΝαΟΗ, экстрагировали этилацетатом, промывали водой, высушивали над Ν;·ι₂δΟ.·|. выпаривали до сухого состояния под вакуумом и получали указанное в заголовке соединение в виде масла желто-коричневатого цвета. Остаток очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (Ηοήζοη®ΤΜ - В|о1адс; петролейный эфир - этилацетат в соотношении 8 : 2) и получали указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества серого цвета. Выход: 53,8%. Μδ: [М+Н]+ = 288,14.

Ή-ΝΜΚ: (СПС1₃, δ): 1.99-2.10 (т, 2Н), 2.28-2.44 (т, 4Н), 2.78-2.90 (т, 2Н), 3.03 (5, 2Н), 7.33 (1, 1=7.60 Ηζ, 1Η), 7.38-7.46 (т, 2Η), 7.53 (5, 1Η).

Пример 33. 3-(3 -Хлорфенилэтинил)-8-метилен-1 -окса-2-азаспиро [4.5]дек-2-ен.

Указанное в заголовке соединение синтезировали, используя методологию, аналогичную методологии, описанной для получения соединения 31а, однако начиная с соединения примера 32 вместо 1,4диоксаспиро[4.5]декан-8-она. После обычной процедуры выделения продукта реакции остаток очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (Ηοήζοη®ΤΜ - Вю1адс; элюируя градиентом петролейного эфира - ацетон этилацетата в соотношении от 95 : 5 до 9 : 1) и получали указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества серого цвета. Выход: 67,3%. Μδ: [М+Н]+ = 286.14.

Ή-ΝΜΚ: (СБС1₃, δ): 1.64-1.78 (т, 2 Н) 1.93-2.06 (т, 2 Н), 2.16-2.25 (т, 2 Н), 2.50 (άάά, 1=13.75, 9.60, 4.52 Ηζ, 2 Η), 2.93 (5, 2 Η), 4.74 (5, 2 Η), 7.29-7.34 (т, 1 Η), 7.35-7.43 (т, 2 Η), 7.47-7.57 (т, 1 Η).

Пример 34. 3-(3-Хлорфенилэтинил)-8-метоксиимино-1-окса-2-азаспиро[4,5]дек-2-ен.

Смесь соединения примера 31 (80 мг, 0,28 ммоль), О-метил гидроксиламин гидрохлорида (30,2 г, 0,361 ммоль), МеОН (12 мл) и триэтиламина (58 мкл, 0,42 ммоль) перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч. Реакционную смесь разбавляли Н₂О, экстрагировали этилацетатом, промывали рассолом, высушивали над сульфатом натрия и выпаривали до сухого состояния под вакуумом. Остаток очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (Ηοήζοη®ΤΜ - ΒίοΙα^ο; градиентное элюирование петролейным эфиром-этилацетатом в соотношении от 9 : 1 до 8 : 2) и получали 56 мг указанного в заголовке соединения в виде масла желтого цвета. Выход: 63,6%. Μδ: [М+Н]+ = 317,18.

Ή-ΝΜΚ: (СОС1₃, δ): 1.70-1.89 (т, 2Н), 2.04-2.20 (т, 2Н), 2.34 (άΐ, ,7=14.37, 4.68 Ηζ, 1Η), 2.48 (άάά, 1=14.92, 11.25, 5.38 Ηζ, 1Η), 2.61 (άάά, 1=14.49, 11.31, 5.01 Ηζ, 1Η), 2.88-2.94 (т, 1Η), 2.95 (5, 2Η), 3.86 (5, 3Η), 7.29-7.35 (т, 1Η), 7.36-7.44 (т, 2Η), 7.51-7.54 (т, 1Η).

Пример 3 5. 3-[(6-Метил-2-пиридил)этинил] -7-(6-метил-3 -нитро-2-пиридил)-1 -окса-2,7-диазаспиро [4.4]нон-2-ен.

3-[(6-Метил-2-пиридил)этинил] -7-(1.бутоксикарбонил)-1 -окса-2,7-диазаспиоо [4.4]нон-2-ен (соединение 35а).

Указанное в заголовке соединение получали, следуя процедуре, описанной для получения соединения примера 3, но заменив при этом соединение 3с соединением 27Ь. После обычной процедуры выделения продукта реакции неочищенный продукт очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (δΡ1®ΤΜ - Вю1адс; элюируя градиентом петролейного эфира - этилацетата в соотношении от 75 : 25 до 40 : 60) и получали указанный в заголовке продукт в виде бесцветного масла. Выход: 66,2%. Μδ: [Μ+Η]+ = 342,51.

3-[(6-Метил-2-пиридил)этинил]-1-окса-2,7-диазаспиоо[4.4]нон-2-ен (соединение 35Ь).

Указанное в заголовке соединение синтезировали с использованием способа, описанного выше, для получения соединения 1с, но замещая соединение 1Ь соединением 35а и проводя реакцию в хлороформе.

- 28 023020

Неочищенный продукт в виде масляного остатка коричневатого цвета использовали без дальнейшей очистки на следующем этапе. Выход: 94,5%. Μδ: [М+Н]+ = 242.33.

3-[(6-Метил-2-пиридил)этинил] -7-(6-метил-3 -нитро-2-пиоидил)-1 -окса-2,7-диазаспиоо [4.4]нон-2-ен.

Указанное в заголовке соединение получали с использованием способа, описанного для получения соединения примера 1, но заменив при этом соединение 1с соединением 35Ь. Неочищенный продукт очищали методом хроматографии с обращенной фазой в автоматизированном режиме (δΡ1®ΤΜ - Βίο!аде; градиент ΜеСN - Н₂О в соотношении от 4 : 6 до 7 : 3), и получали указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества желтого цвета. Выход: 41,5%. Μδ: [М+Н]+ = 378,62.

Ή-ΝΜΚ: (СОС1₃,5): 2.17 (б, 1Н), 2.43 (бб, 1Н), 2.49 (5, 3Н), 2.63 (5, 3Н), 3.21-3.35 (т, 2Н), 3.42 (б, 1Н), 3.63 (ΐ, 1Н), 3.79 (б, 1Н), 3.97 (т, 1Н), 6.59 (б, 1Н), 7.22 (б, 1Н), 7.41 (б, 1Н), 7.65 (ΐ, 1Н), 8.05 (б, 1Н).

Пример 36. 3-Фенилэтинил-7-(6-метил-3-нитро-2-пиридил)-1-окса-2.7-диазаспиро[4.4]нон-2-ен.

3-Фенилэтинил-7-(!.бутоксикаобонил)-1-окса-2,7-диазаспиро[4.4]нон-2-ен (соединение 36а).

Указанное в заголовке соединение получали, следуя процедуре, описанной для получения соединения примера 3, но заменив при этом соединение 3с соединением 27Β и 2-бром-6-метилпиридин йодбензолом. После обычной процедуры выделения продукта реакции неочищенный продукт очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (δΡ1®ΤΜ - Вло!аде; элюируя градиентом петролейного эфира - этилацетата в соотношении от 95 : 5 до 60 : 40), и получали указанный в заголовке продукт в виде бесцветного масла. Выход: 40,9%. Μδ: [Μ+НЦ = 327,35.

-Фенилэтинил-1 -окса-2,7-диазаспиро [4.4] нон-2-ен (соединение 36В).

Указанное в заголовке соединение синтезировали с использованием способа, описанного выше, для получения соединения 1с, замещая соединение 1В соединением 36а и проводя реакцию в хлороформе. Неочищенный маслянистый остаток коричневатого цвета использовали без дальнейшей очистки на следующем этапе реакции. Выход: 91,3%. Μδ: [Μ+НЦ = 227,33.

3-Фенилэтинил-7-(6-метил-3-нитро-2-пиридил)-1-окса-2,7-диазаспирр[4.4]нон-2-ен.

Указанное в заголовке соединение получали с использованием способа, описанного для получения соединения примера 1, но заменив при этом соединение 1с соединением 36Ь. Неочищенный продукт очищали методом хроматографии в автоматизированном режиме (δΡ1®ΤΜ - Вло!аде; элюируя градиентом петролейного эфира - этилацетата в соотношении от 95 : 5 до 70 : 30), и получали указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества желтого цвета. Выход: 26,3%. Μδ: [Μ+НЦ = 363,44.

Ή-ΝΜΚ: (СОС1₃, δ): 2.12-2.23 (т, 1Н), 2.39-2.53 (т, 1Н), 2.49 (5, 3Н), 3.18-3.32 (т, 2Н), 3.40 (б, 1Н), 3.65 (бб, 1Н), 3.78 (б, 1Н), 3.96 (т, 1Н), 6.59 (б, 1 Н), 7.34-7.46 (т, 3Н), 7.54 (бб, 2Н), 8.05 (б, 1Н).

Пример 37. 3-(3-Фторфенилэтинил)-7-(6-метил-3-нитро-2-пиридил)-1-окса-2,7-диазаспиро[4.4]нон2-ен.

3-(3-Фторфенилэтинил)-7-(!.бутоксикарбонил)-1-окса-2,7-диазаспиро[4.4]нон-2-ен (соединение 37а).

Указанное в заголовке соединение получали, следуя процедуре, описанной для получения соединения примера 3, но заменив при этом соединение 27Ь соединением 3с и 2-бром-6-метилпиридин 1-фтор-3йодбензолом. После обычной процедуры выделения продукта реакции неочищенный продукт очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (δΡ1®ΤΜ - Вло!аде; элюируя градиентом петролейного эфира - этилацетата в соотношении от 95 : 5 до 60 : 40), и получали указанный в заголовке продукт в виде бесцветного масла. Выход: 46,9%. Μδ: [Μ+НЦ = 345,40.

3-(3-Фторфенилэтинил)-1-окса-2,7-диазаспиро[4.4]нон-2-ен (соединение 37Ь).

Указанное в заголовке соединение синтезировали с использованием способа, описанного выше, для получения соединения 1с, но заменив при этом соединение 1Ь соединением 37а и проводя реакцию в хлороформе. Неочищенный маслянистый остаток коричневатого цвета использовали без дальнейшей очистки на следующем этапе реакции. Выход: 91,8%. Μδ: [Μ+НЦ = 245.36.

-(3 -Фторфенилэтинил)-7-(6-метил-3 -нитро-2-пиридил)-1 -окса-2,7-диазаспиоо [4.4]нон-2-ен.

Указанное в заголовке соединение получали с использованием способа, описанного для получения соединения примера 1, но заменив при этом соединение 1с соединением 37Ь. Неочищенный продукт очищали методом хроматографии с обращенной фазой в автоматизированном режиме (δΡ1®ΤΜ Вло!аде; градиент ΜеСN - буфер карбоната аммония в соотношении от 4: 6 до 7 : 3), и получали указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества желтого цвета. Выход: 74,9%. Μδ: [Μ+НЦ = 381,54.

Ή-ΝΜΚ: (СИС1₃, δ): 2.13-2.25 (т, 1Н), 2.45 (бб, 1 Н), 2.52 (5, 3Н), 3.18-3.33 (т, 2Н), 3.41 (б, 1Н), 3.64-3.73 (т, 1Н), 3.81 (б, 1Н), 3.98 (ΐ, 1Н), 6.61 (б, 1Н), 7.10-7.17 (т, 1Н) 7.21-7.27 (т, 1Н), 7.30-7.40 (т, 2Н), 8.07 (б, 1Н).

Пример 38. 3-Фенилэтинил-7-(6-метил-3-нитро-2-пиридил)-1-окса-2,7-диазаспиро[4.3]окт-2-ен.

3-Фенилэтинил-7-(Ебутоксикаобонил)-1-окса-2,7-диазаспиро[4.3]окт-2-ен (соединение 38а).

Указанное в заголовке соединение получали, следуя процедуре, описанной для получения соединения примера 3, но заменив при этом соединение 3с соединением 28Ь и 2-бром-6-метилпиридин 1йодбензолом. После обычной процедуры выделения продукта реакции неочищенный продукт очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (δΡ1®ΤΜ - В|о1аде; элюируя градиентом

- 29 023020 петролейного эфира - этилацетата в соотношении от 8 : 2 до 65 : 35), и получали указанный в заголовке продукт в виде бесцветного масла. Выход: 28,7%. М8: [М+Н]+ = 313,36.

3-Фенилэтинил-1-окса-2,7-диазаспиоо[4.3]окт-2-ен (соединение 38Ь).

Указанное в заголовке соединение синтезировали с использованием способа, описанного выше, для получения соединения 1с, но замещая соединение 1Ь соединением 38а и проводя реакцию в хлороформе. Неочищенный маслянистый остаток коричневатого цвета использовали без дальнейшей очистки на следующем этапе реакции. Выход: 100%. М8: [М+Н]+ = 213.25.

3-Фенилэтинил-7-(6-метил-3-нитро-2-пиоидил)-1-окса-2,7-диазаспиоо[4.3]окт-2-ен.

Указанное в заголовке соединение получали с использованием способа, описанного для получения соединения примера 1, но заменив при этом соединение 1с соединением 37Ь. Неочищенный продукт очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (8Р1®ТМ - ВюГаде; элюируя градиентом петролейного эфира - этилацетата в соотношении от 1 : 0 до 7 : 3), и получали указанное в заголовке соединение в виде масла желтого цвета. Выход: 20,9%. М8: [М+Н]+ = 349,36.

Ή-ΝΜΚ: (СБС1₃, δ): 2.50 (8, 3Н), 3.49 (8, 2Н), 4.38 (й, 1=10.76 Ηζ, 2Η), 4.49 (й, 1=11.00 Ηζ, 2Η), 6.64 (й, 1=8.31 Ηζ, 1Η), 7.34-7.48 (т, 3Η), 7.55 (й, 1=6.60 Ηζ, 2Η), 8.17 (й, 1=8.31 Ηζ, 1Η).

Пример 39. 3-(3-Гидроксифенилэтинил)-7-(6-метил-3-нитро-2-пиридил)-1-окса-2,7-диазаспиро[4.4] нон-2-ен.

3-(3-Гидроксифенилэтинил)-7-(Г.бутоксикаобонил)-1 -окса-2,7-диазаспиоо[4.4]нон-2-ен (соединение

39а).

Указанное в заголовке соединение получали, следуя процедуре, описанной для получения соединения примера 3, но заменив при этом соединение 27Ь соединением 3с и 2-бром-6-метилпиридин 3йодфенолом. После обычной процедуры выделения продукта реакции неочищенный продукт очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (8Р1®ТМ - В|о1аде; элюируя градиентом петролейного эфира - этилацетата в соотношении от 95 : 5 до 60 : 40), и получали указанный в заголовке продукт в виде бесцветного масла. Выход: 31,4%. М8: [М+Η]® = 343,51.

3-(3-Гидроксифенилэтинил)-1-окса-2,7-диазаспиро[4.4]нон-2-ен (соединение 39Ь).

Указанное в заголовке соединение синтезировали с использованием способа, описанного выше, для получения соединения 1с, но заменив при этом соединение 1Ь соединением 39а и проводя реакцию в хлороформе. Неочищенный маслянистый остаток коричневатого цвета использовали без дальнейшей очистки на следующем этапе реакции. Выход: 84,8%. М8: [М+Η]® = 243,28.

-(3 -Г идроксифенилэтинил)-7-(6-метил-3 -нитро-2-пиридил)-1 -окса-2,7-диазаспиро [4.4]нон-2-ен.

Указанное в заголовке соединение получали с использованием способа, описанного для получения соединения примера 1, но заменив при этом соединение 1с соединением 39Ь. Неочищенный продукт очищали методом хроматографии с обращенной фазой в автоматизированном режиме (8Р1®ТМ ВюГаде; градиент МеСN - буфер карбоната аммония в соотношении от 4 : 6 до 7 : 3), и получали указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества желтого цвета. Выход: 42,6%. М8: [М+П|+=379,40.

Ή-Ν^: (СБС1з, δ): 2.18 (йй, 1Н), 2.45 (йй, 1Н), 2.51 (₈, 3Н), 3.17-3.33 (т, 2Н), 3.40 (й, 1Η), 3.67 (Г, 1Η), 3.80 (й, 1Η), 3.98 (ΐ, 1Η), 6.60 (й, 1Η), 6.87-6.95 (т, 1Η), 6.97-7.03 (т, 1Н), 7.12 (й, 1Н), 7.21-7.31 (т, 1Н), 8.06 (й, 1Η).

Пример 40. 3-(3-Фторфенилэтинил)-7-(6-метил-3-нитро-2-пиридил)-1-окса-2,7-диазаспиро[4.3]окт2-ен.

3-(3-Фторфенилэтинил)-7-(Г.бутоксикарбонил)-1-окса-2,7-диазаспирр[4.3]окт-2-ен (соединение 40а).

Указанное в заголовке соединение получали, следуя процедуре, описанной для получения соединения примера 3, но заменив при этом соединение 3с соединением 28Ь и 2-бром-6-метилпиридин 1-фтор-3йодбензолом. После обычной процедуры выделения продукта реакции неочищенный продукт очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (8Р1®ТМ - В|о1аде; элюируя градиентом петролейного эфира - этилацетата в соотношении от 1 : 0 до 60 : 40), и получали указанный в заголовке продукт в виде бесцветного масла. Выход: 15,5%. М8: [М+Н]+ = 331,35.

3-(3-Фторфенилэтинил)-1-окса-2,7-диазаспиро[4.3]окт-2-ен (соединение 40Ь).

Указанное в заголовке соединение синтезировали с использованием способа, описанного выше, для получения соединения 1с, но заменив при этом соединение 1Ь соединением 40а и проводя реакцию в хлороформе. Неочищенный маслянистый остаток коричневатого цвета использовали без дальнейшей очистки на следующем этапе реакции. Выход: 33,4%. М8: [М+Н]+= 231.24.

3-(3-Фторфенилэтинил)-7-(6-метил-3-нитро-2-пиридил)-1-окса-2,7-диазаспиоо[4.3]окт-2-ен.

Указанное в заголовке соединение получали с использованием способа, описанного для получения соединения примера 1, но заменив при этом соединение 1с соединением 40Ь. Неочищенный продукт очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (8Р1®ТМ - ВюГаде; элюируя градиентом петролейного эфира - этилацетата в соотношении от 9 : 1 до 5 : 5), и получали указанное в заголовке соединение в виде масла желтого цвета. Выход: 36,9%. М8: [М+Η]® = 367,35.

Ή-Μ^Κ: (СОС1₃, δ): 2.54 (8, 3Н) 3.50 (8, 2Н) 4.40-4.57 (т, 5Н) 6.66 (й, 1=8.31 Ηζ, 1Η) 7.11-7.18(т, 1 И)7.25(й, 1=9.54 Ηζ, 1Η) 7.31-7.42 (т, 2Η) 8.19 (й, 1=8.31 Ηζ, 1Η).

- 30 023020

Примеры с 41 до 43. 3-(3-Хлорфенилэтинил)-8-(2-пиридилметилен)-1-окса-2-азаспиро[4.5]дек-2-ен.

К суспензии трифенил(2-пиридилметил)фосфоний хлорида (81,1 мг, 0,19 ммоль), перемешиваемой при -20°С в атмосфере обезвоженного азота, в 2,5 мл добавляли по каплям литий-бистриметилсилиламид (1М раствор в ТГФ, 0,415 мл, 0,415 ммоль). Спустя 30 мин добавляли раствор соединения примера 32 (50 мг, 0,173 ммоль) в 0,92 мл ангидридного ТГФ и реакционную смесь перемешивали при -20°С в течение 1 ч при комнатной температуре. Далее реакционную смесь нагревали при 65°С в течение 2 ч, охлаждали до комнатной температуры и быстро охлаждали насыщенным водным раствором ΝΗ.·|Ο, экстрагировали этилацетатом, высушивали над сульфатом натрия и выпаривали до сухого состояния. Неочищенный продукт очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (δΡ1®ΤΜ - В|о1аде; элюируя градиентом петролейного эфира - этилацетата в соотношении от 7 : 3 до : 7), и получали 24,5 мг соединения примера 41 (24,5%) плюс 6,1 мг соединения примера 42 и 3,3 мг соединения примера 43.

Пример 41. Μδ: [М+Н]+ = 363,27.

Ή-ΝΜΚ: (СПС1₃, δ): 1.72-1.91 (т, 2Н), 1.98-2.08 (т, 1Н), 2.08-2.18 (т, 1Н), 2.31-2.43 (т, 1Н), 2.71 (ΐ, 1=9.78 Ηζ, 1Н), 2.81-3.06 (т, 4Н), 6.42 (Ъг. 5., 1Н), 7.14 (Ъг. 5., 1Н), 7.21 (й, 1=7.58 Ηζ, 1Н), 7.32 (й, 1=7.58 Ηζ, 1Η), 7.35-7.45 (т, 2Η), 7.53 (Ъг. 5., 1Η), 7.68 (Ъг.5., 1Η), 8.61 (Ъг. 5., 1Η).

Пример 42. Μδ: [Μ+Η]+ = 381,18.

Ή-ΝΜΚ: (СПС1₃, δ): 1.56 (й, 1=12.72 Ηζ, 2Η), 1.76-1.90 (т, 4Η), 1.95-2.11 (т, 2Η), 2.90 (5, 2Η), 2.96 (5, 2Η), 7.16 (й, 1=7.82 Ηζ, 1Η), 7.18-7.25 (т, 1Η), 7.31 (й, 1=7.58 Ηζ, 1Η), 7.35-7.44 (т, 2Η), 7.51 (5, 1Η), 7.62-7.74 (т, 1Η), 8.52 (й, 1=4.65 Ηζ, 1Η).

Пример 43. Μδ: [Μ+Η]+ = 381,18.

Ή-ΝΜΚ: (СБС1з, δ): 1.37-1.49 (т, 2Η), 1.62-1.72 (т, 2Η), 1.82 (й, 1=13.45 Ηζ, 2Η), 2.23 (1й, 1=12.35, 3.67 Ηζ, 2Η), 2.93 (5, 2Η), 2.96 (5, 2Η), 7.16 (й, 1=7.82 Ηζ, 1Η), 7.20-7.26 (т, 1Η), 7.32 (й, 1=7.82 Ηζ, 1Η), 7.35-7.43 (т, 2Η), 7.51 (5, 1Η), 7.69 (ΐ, 1=7.58 Ηζ, 1Η), 8.54 (й, 1=4.65 Ηζ, 1Η).

Пример 44. 3-Фенилэтинил-1,9,12-триокса-2-азадиспиро[4.2.4.2]тетрадек-2-ен.

Указанное в заголовке соединение синтезировали с использованием способа, описанного выше, для получения соединения 1Ъ, но при этом использовали соединение 31а вместо 1-(1.бутоксикарбонил)-4метиленпиперидина. После обычной процедуры выделения продукта реакции указанный в заголовке продукт очищали методом хроматографии с обращенной фазой в автоматизированном режиме (15о1е^а®ΤΜ - Вю1аде; градиентный буфер ΝΗ-ЦСОз - ΜеСN в соотношении от 40-60 до 20-80. Выход: 44,9%. Μδ: [Μ+Η]+ = 298,2.

Ή-ΝΜΚ: (СПС1₃, δ): 1.64-1.73 (т, 2Н), 1.82-1.90 (т, 2Н), 1.96-2.10 (т, 4Н), 2.94 (5, 2Н), 3.92-4.04 (т,

Н), 7.33-7.43 (т, 3Н), 7.53 (й, 1=7.8, 2Η).

Пример 45. 3-Фенилэтинил-8-оксо-1-окса-2-аэаспиро[4.5]дек-2-ен.

Указанное в заголовке соединение синтезировали, используя способ, описанный для получения соединение примера 32, но начиная с соединения примера 44 вместо соединения примера 31. Неочищенный продукт очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (δΡ1®ΤΜ - Вю1аде; петролейный эфир - этилацетат в соотношении 8 : 2), и получали указанный в заголовке продукт в виде твердого вещества белого цвета. Выход: 80%. Μδ: [Μ+Η]+ = 254.2.

Ή-ΝΜΚ: (СБС1₃, δ): 2.00-2.10 (т, 2Η), 2.29-2.44 (т, 4Η), 2.78-2.90 (т, 2Η), 3.05 (5, 2Η), 7.35-7.47 (т, 3Η), 7.55 (й, 1=6.36 Ηζ, 2Η).

Пример 48. 3-[(6-Метил-2-пиридил)этинил]-8-циано-8-(2-пиридил)-1-окса-2-азаспиро[4.5]дек-2-ен.

4-Метилен-1-ииано-1-(2-пиридил)циклогексан (соединение 48а).

Указанное в заголовке соединение получали с использованием способа, описанного для получения соединения примера 2а, но заменив при этом 1-(3-нитро-2-пиридил)-4-оксо-пиперидин 4-оксо-1-циано-1(2-пиридил)циклогексаном. Неочищенный продукт очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (δΡ1®ΤΜ - Вю1аде; градиентное элюирование петролейным эфиром-этилацетатом в соотношении от 95 : 5 до 85 : 15), и получали указанное в заголовке соединение в виде масла желтого цвета. Выход: 92,8%. Μδ: [М+Н]+= 199,25.

3-Триметилсилилэтинил-8-циано-8-(2-пиоидил)-1-окса-2-азаспиоо[4.5]дек-2-ен (соединение 48Ъ).

Указанное в заголовке соединение получали с использованием способа, описанного для получения соединения примера 1Ъ, но при этом использовали соединение 48а вместо 1-(1.бутоксикарбонил)-4метиленпиперидин и заменяли соединение 1а соединением 3Ъ. Неочищенный продукт очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (δΡ1®ΤΜ - Вю1аде; градиентное элюирование петролейным эфиром-этилацетатом в соотношении от 95 : 5 до 85 : 15), и получали указанное в заголовке соединение в виде масла желтого цвета. Выход: 43,7%. Μδ: [М+Н]+= 338,34.

3-[(6-Метил-2-пиридил)этинил]-8-циано-8-(2-пиридил)-1-окса-2-азаспиоо[4.5]дек-2-ен.

Указанное в заголовке соединение получали с использованием способа, описанного для получения соединения примера 3, но заменив при этом соединение 3с соединением 48Ъ. Неочищенный продукт очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (δΡ1®ΤΜ - Вю1аде; градиентное элюирование петролейным эфиром-этилацетатом в соотношении от 65 : 35 до 4 : 6), и получали указан- 31 023020 ное в заголовке соединение в виде масла желтого цвета. Выход: 43,4%. Μ8: [М+Н]+ = 357,17.

’Н-ΝΜΚ: (СОС1₃, δ): 2.06-2.25 (т, 6Н), 2.47-2.58 (т, 2Н), 2.61 (к, 3Н), 3.03 (к, 2Н), 7.20 (б, 1=7.82 Нг, 1Н), 7.25-7.32 (ш, 1Н), 7.40 (б, 1=7.58 Нг, 1Н), 7.57 (б, 1=8.07 Нг, 1Н), 7.62 (ΐ, 1=7.70 Нг, 1Н), 7.72-7.81 (т, 1Н), 8.66 (б, 1=4.65 Нг, 1Н).

Пример 49. 3-[(5-Фтор-2-пиридил)этинил]-1,9,12-триокса-2-азадиспиро[4.2.4.2]тетрадек-2-ен.

Указанное в заголовке соединение получали с использованием способа, описанного для получения соединения примера 3, но при этом использовали соединение 31Ъ вместо соединения 3с и 2-бром-5фторпиридин вместо 2-бром-6-метилпиридина. Неочищенный продукт очищали методом флэшхроматографии в автоматизированном режиме (8Р1®ТΜ - Вю1аде; градиентное элюирование петролейным эфиром-этилацетатом в соотношении от 65 : 35 до 4 : 6), и получали указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества желтого цвета. Выход: 30,2%. Μ8:[Μ+Ή]+= 317,13.

’Н-ΝΜΚ: (СПС1₃, δ): 1.58-1.78 (ш, 2Н), 1.88 (бб, 1=13.82, 2.32 Нг, 2Н), 1.95-2.09 (т, 4Н), 2.95 (к, 2Н),

3.92-4.04 (т, 4Н), 7.45 (!б, 1=8.19, 2.93 Нг, 1Н), 7.58 (бб, 1=8.68, 4.52 Нг, 1Н), 8.51 (б, 1=2.93 Нг, 1Н).

Пример 50. 3-[(6-Метил-2-пиридил)этинил]-1,9,12-триокса-2-азадиспиро[4.2,4.2]тетрадек-2-ен.

Указанное в заголовке соединение получали с использованием способа, описанного для получения соединения примера 3, но при этом использовали соединение 31Ъ вместо соединения 3с. Неочищенный продукт очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (8Р1®ТΜ - Вю1аде; градиентное элюирование петролейным эфиром-этилацетатом в соотношении от 65 : 35 до 4 : 6), и получали указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества желтого цвета. Выход: 47,1%. Μ8: [М+Н]+= 313,08.

’Н-ΝΜΚ: (ΟΌΟ1₃, δ): 1.63-1.72 (ш, 2Н), 1.80-1.91 (т, 2Н), 1.95-2.09 (т, 4Н), 2.61 (к, 3Н), 2.95 (к, 2Н),

3.92-4.04 (т, 4Н), 7.19 (б, 1=7.82 Нг, 1Н), 7.39 (б, 1=7.58 Нг, 1Н), 7.62 (ΐ, 1=7.70 Нг, 1Н).

Пример 51. 3-[(6-Фтор-2-пиридил)этинил]-1,9,12-триокса-2-азадиспиро[4.2.4.2]тетрадек-2-ен.

Указанное в заголовке соединение получали с использованием способа, описанного для получения соединения примера 3, но при этом использовали соединение 31Ъ вместо соединения 3с и 2-бром-6фторпиридин вместо 2-бром-6-метилпиридина. Неочищенный продукт очищали методом флэшхроматографии в автоматизированном режиме (8Р1®ТΜ - Вю1аде; градиентное элюирование петролейным эфиром-этилацетатом в соотношении от 65 : 35 до 4 : 6), и получали указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества желтого цвета. Выход: 51,1%. Μ8:[Μ+Ή]+= 317,00.

Έ-ΝΜΚ: (СОС1₃, δ): 1.62-1.75 (т, 2Н), 1.88 (бб, 1=13.69, 2.45 Нг, 2Н), 1.95-2.13 (т, 4Н), 2.94 (к, 2Н), 3.88-4.06 (т, 4Н), 6.99 (бб, 1=8.31, 2.69 Нг, 1Н), 7.45 (бб, 1=7.46, 2.08 Нг, 1Н), 7.82 (д, 1=7.91 Нг, 1Н).

Пример 52. 3-[(6-Фтор-3-пиридил)этинил]-1,9,12-триокса-2-азадиспиро[4.2.4.2]тетрадек-2-ен.

Указанное в заголовке соединение получали с использованием способа, описанного для получения соединения примера 3, но при этом использовали соединение 31Ъ вместо соединения 3с и 5-бром-2фторпиридин вместо 2-бром-6-метилпиридина. Неочищенный продукт очищали методом флэшхроматографии в автоматизированном режиме (8Р1®ТΜ - Вю1аде; градиентное элюирование петролейным эфиром-этилацетатом в соотношении от 8 : 2 до 5 : 5), и получали указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества желтого цвета. Выход: 37,2%. Μ8: [М+Н]+ = 317,00.

Ή-ΜΜΕ: (СОС1₃, δ): 1.64-1.77 (ш, 2Н), 1.89 (бб, 1=13.94, 2.45 Нг, 2Н), 1.96-2.12 (т, 4Н), 2.94 (к, 2Н), 3.87-4.08 (т, 4Н), 6.98 (бб, 1=8.44, 3.06 Нг, 1Н), 7.83-8.00 (т, 1Н), 8.41 (б, 1=1.96 Нг, 1Н).

Пример 53. 3-(3-Нитрофенилэтинил)-1,9,12-триокса-2-азадиспиро[4.2.4.2]тетрадек-2-ен.

Указанное в заголовке соединение получали с использованием способа, описанного для получения соединения примера 3, но при этом использовали соединение 31Ъ вместо соединения 3 с и 3-бромнитробензол вместо 2-бром-6-метилпиридина. Неочищенный продукт очищали методом флэшхроматографии в автоматизированном режиме (8Р1®ТΜ - Вю1аде; градиентное элюирование петролейным эфиром-этилацетатом в соотношении от 8 : 2 до 5 : 5), и получали указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества желтого цвета. Выход: %. Μ8: [М+Н]+ = 343,08.

Ή-ΝΜΚ: (СВС1₃, δ): 1.67-1.76 (ш, 2Н), 1.82-1.93 (т, 2Н), 1.96-2.11 (т, 4Н), 2.95 (к, 2Н), 3.93-4.05 (т, 4Н), 7.58 (ΐ, 1=8.07 Нг, 1Н), 7.83 (б, 1=7.58 Нг, 1Н), 8.26 (бб, 1=8.31, 1.22 Нг, 1Н), 8.38 (к, 1Н).

Пример 54. 3-[(2-Метил-1,3-тиазол-4-ил)этинил]-1,9,12-триокса-2-азадиспиро[4.2.4.2]тетрадек-2-ен.

Указанное в заголовке соединение получали с использованием способа, описанного для получения соединения примера 3, но при этом использовали соединение 31Ъ вместо соединения 3с и 4-бром-2метил-1,3-тиазол вместо 2-бром-6-метилпиридина. Неочищенный продукт очищали методом флэшхроматографии в автоматизированном режиме (8Р1®ТΜ - Вю1аде; градиентное элюирование петролейным эфиром-этилацетатом в соотношении от 6 : 4 до 5 : 5), и получали указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества желтого цвета. Выход: 60,6%. Μ8: [Μ+НЦ = 319,23.

Ή-ΝΜΚ: (СОС1₃, δ): 1.63-1.77 (ш, 2Н), 1.86 (бб, 1=13.57, 2.32 Нг, 2Н), 1.92-2.11 (т, 4Н), 2.75 (к, 3Н), 2.92 (к, 2Н), 3.91-4.06 (т, 4Н), 7.48 (к, 1Н).

Примеры 55-69. Ниже приведено описание способа для получения соединения примера 3, но при этом использовали соединение 31Ъ вместо соединения 3 с и использовали соответствующее галопроизводное, соединения примеров 55-69 были синтезированы. Очищение проводили методом флэшхроматографии в автоматизированном режиме (8Р1®ТΜ - В1о1аде).

- 32 023020

Ниже в табл. 1 приведено описание структуры и аналитическая характеристика соединений примеров 55-69.

1 (рнмер	Структура	Реагент	м& \|м+нг	1П-ММКСОСВ(8Х
13	СОХ	Ό	СН, о	3-йодо метоксибензол	328.15	1 64- 1 73(14.211), 1 «8 (б, 1-13 20 Пя, 2 ГГ). 1.96 210 (ш, 4 НХ 294(8,2 Н), 3.83 (я, 3 Н),3.94 - 4.04 (ш. 4 Н), 64)3 - 6.99 (го. 1 НХ 7.05 (а, 1 НХ 7.13 (4 7.58 Ηζ, 111), 7 25 - 7 32 (т, 1II)
5*	СОСЦ,	о.	у	З-хлор-5- фторбром бензол	349.89	1.64 -1.74 (га, 2 НХ 1.82 - .92 (т, 2 НХ 1.95 - 2.09 (т. 4 НХ 2.92 (з, 2 НХ 3.94 - 4.04 (л. 4 Н), 710 - 718 (га, 2 II), 7.32 (я, 1II)
57	ооеч	о	сн₃	3- метилйод бензол	3122	1.64- 1.73 (го, 2II), 1.81-191 (га,2И), 1.96-2 И (га. 4 Н),2 37 (я, 3 Н). 2 93 (а,2 Н), 3.93 - 4.04 (та, 4 Н). 719 - 730 Оп. 2 НХ 7.3 - 7.38 (т. 2 Н)
5«	ООСХ	^,Ο^,ΟΗ. т	3- этоксибром бензол	342.14	1.44 (ζ 1~б.97 Ηζ, 3 Н), 1.64 -1.74(т, 2Н). 1.80-1.92 (го, 2 ИХ 1 95 - 2.1П (л, 411), 2 93 (я, 211), 3 93 - 4 02 (га, 4 НХ 4 05 (^ 3-7.09 Ηζ, 2 НХ 6.91 - 6.98 (т, 1 Н), 7 04 (β, 1 Ηχ 7 11 (6,1-7 58 Ня, 1 Н), 7.26 (с, 1-8.30 Ηζ, 1 Н)
	СОХ	θ'	°'ОЪ	3- трифтор метоксиидо бензол	38201	1.64 -1.74 (т, 2 Н), 1.82 - 1.92 (т, 2 И), 1.96 - 2.11 (га, 4 НХ 2 94 (я, 2 Н), 3.93 - 4 05 (га, 4 Н), 7.26 (с1.1-8 07 Пя, 2 НХ 7.36 - 7.49 (т, 3 П)
Ы>	сх_хх	ΩΓ	СН. Ц-СН, *\ΐΗ₅	3-третбугил йодбенэол	354.1	1.34 (а, 9 Н). 1.63 - 1.74 (Я, 2 Н> 1 81 - 1.92 (га, 2 НХ 1.97 - 2 11 (га. 4 Н). 2.94 (я, 2 НХ 3.93 · 4.04 (го. 4 Н). 7 26 - 7.38 (га ,211), 7.44 (б,1-7 58 11я, 1 11), 7 56 (я, 1 Н)
Й1	00¾	о	^,Ν ЯР·	3-йод бензонитрил	323 22	1.64 · 1.74 (т, 2II), 1.82 - 1.93 (т, 2 ГГ), 1.96-211(га, 4 НХ 2.93 (% 2 НХ 3.92 - 4.05 (т, 4 НХ 7.51 (ζ )-7.95 Ηζ. 1Н). 7 68 (б, 1-7.82 Ηζ. 1 Н). 7.74 (б, 1-7 82 На. 1 Н). 7 80(я. 1 Н)
62	сХОО	4¾.	Υ	3-фТОрЙОД бензол	316.19	1.63 - 1.74 (т, 2 П), 1.81 - 1.92 (т, 2ΤΙ), 1.95-2 1! (т, 4 НХ 2.93 (з, 2 Н), 3.93 - 4.05 (я, 4 НХ 7.08 - 7,1 ϋ (ηι, 1 Н), 7.22 (ф1-9.54 Нг, Н). 729 - 7.39 (т, 2 Н)

Пример	Структура	Реагент	М& [М+НГ	1Η-ΝΜΚ СОСЩЗ),
<э	С·®,/-ν°-Ν г/Хч,	'ν*^1-	уе.	ί-бром-З- этипбенэол	326.26	1.26(1,1=7.58 Ηζ,3Η). 1.64-1.74 (Ж, 2 НХ 1.81 -1.91 (га. 2 И). 1.96 210 (го, 411), 2 66(ц, 1-7 58 Их, 2II), 2.93 (я, 2 Н), 3.94 - 4.04(та, 4 Н). 7.21 · 7 31 (го. 2 Н ). 7 35 (6, 1-7.3411 ζ, 1II), 7.3? (я, 111)
	г/χχ		с._ъ уЧн_;	1-бром-З- мюпропил бензол	340.1?	1 27(«1,1-685Нд 611), 1.64- 1.73 (та,2Ιΐχ 1.88(66, 1-13 94,2.69 Иг, 2 И), 1 96 - 2 И (га, 4II). 2.91 (ьрТ, 1-6.8011)-, 1II), 2,94(5,2II), 3.94 - 4.04 (га, 411), 7.24 7.29 (т, 1 Н), 729 - 7.33 (т, 1 НХ 7 33 - 737 (га, 1 Н), 7.41 (я, 1 Н)
	ЛГАЛ»
«9	1 σ'·	4,		2-бром-4хлорлиридии	333.15	1.62 - 1.74(га, 211). 1.80 - 93 (га, 21Ц, 1,94 - 2.10 (га, 4 ИХ 2.95(8.2 ПХ 3.91 - 4 05 (т, 41 Г), 7 35 (ф1-5.13 Ня, 1 Н), 758 (х, 1 Н), 8.54 (б, 1-5 14 Ня, 1Н)
«	α >α		О	2-браы-4- метилпиридин	313.14	1.60 - 1.73 (га, 2НХ 1.79 -1 92 (т, 2 Н\ 1 95 2 09 (га, 4 Н), 2.39 (х, 3 Н). 2 95 (в, 2 Н), 3.99 (бб, Г-7 70,4.03 ΗΖ. 4НХ 7.10-7.18 <14, Н\ 7.40(8.1 НХ 8.50 (ф 1-4 89ΙΙζ, 111)
			СНд
6?	οοχ		2	3-трифтор метилбром бензол	366.13	1.С4 -1.75 (т, 2 НХ 1.82 -1.93 (т, 2 1 ΐχ 1.96 - 2.1! (га, 4 Н). 2.94 (я, 2 НХ 3.94-4.05 (щ. 4 НХ 7.52 (ί, 1-782 Ня, 1 Н). 7.66(6,1-7 82 Ηζ, 1 Ηχ 7 70 (φ 1-7.58 Ня, 1 Η), 7.80(8,1 Н)
га	α-Ν		Ν=/	2-брои-4-три фторметип Пиридин	324.09	2.32 - 2.42 (та, 2 НХ 2.42 - 2 56 (га, 2 П), 2 93 . 3 09 (га, 2 И), 3.03 (я. 2 ИХ 3 44 - 3 57 (т, 2II), 7.31 - 7.36 (га, I Н), 742 (6ζ 1-6.85, 1.59 Ня, 2 И), 7.53 (Т, 1Ί.59 Ня, 1 Н)
ее	οοα		V	3-иод-4-хлор пиридин	333.15	1.63 - 1.74 (т, 2 НХ 1 89 (6,1-12,47 Ηζ, 2 НХ 1.96 212 (т, 4 Н), 2 94 (а, 2 Н), .3.93 - 4 05 (га, 4 Н), 7.82 (я, 1 Н), 8.58 ($, 1 Н), 8,63 (ί, 1Н)

- 33 023020

Пример 71. 3 -Фенилэтинил-8-( 1 -карбокси-3 -гидроксипропоксиимино)-1-окса-2-азаспиро [4.5]дек-2ен.

К раствору соединения примера 47 (14 мг, 0,4 ммоль) в 1,75 мл диоксана добавляли 1М гидроксида натрия (40 мкл, 0,4 ммоль), и реакционную смесь перемешивали при 40°С в течение 2 ч. После выпаривания до сухого состояния неочищенный продукт очищали методом хроматографии с обращенной фазой в автоматизированном режиме (δΡ1®ΤΜ - ΒίοΙα^ο: градиент 20 мМ водного карбоната аммония - ΜеСN в соотношении от 1:0 до 6:4), и получали 10 мг указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества белого цвета. Μδ: [М+Н]+ = 371.06.

Ή-ΝΜΚ: (ΌΜδΘ^,δ): 1.69-1.97 (т, 6Н), 2.17-2.28 (т, 1Н), 2.28-2.39 (т, 1Н), 2.45-2.58 (т, 1Н), 2.58-2.72 (т, 1Н), 3.11 (б, 1=5.14 Ηζ, 2Η), 3.43-3.57 (т, 2Η) 4.38 (ΐ, 1=5.26 Ηζ, 1Η), 7.41-7.54 (т, 3Η), 7.547.61 (т, 2Η).

Пример 72. 3-(3-Хлорфенилэтинил)-1,8-диокса-2-азаспиро[4.5]дек-2-ен.

Указанное в заголовке соединение получали в соответствии с процедурой, описанной для соединение 1Ь, но при этом использовали соединение 31е вместо соединения 1а и 4-метилентетрагидропиран (Тетрагидрон, 46(7), 2411-2424, 1990) вместо 1-(1.бутоксикарбонил)-4-метиленпиперидина. После обычной процедуры выделения продукта реакции остаток очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (δΡ1®ΤΜ - ΒίοΙα^ο: градиентное элюирование петролейным эфиром-этилацетатом в соотношении от 10 : 1 до 8 : 2), и получали указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества желтоватого цвета. Выход: 23,7%. Μδ: [Μ+Η]+ = 276,7.

Ή-ΝΜΚ: (СПС1₃, δ): 1.79-1.89 (т, 2 Н), 1.89-1.99 (т, 2 Н), 2.95 (5, 2 Н), 3.69 - 3.80 (т, 2 Н), 3.92 (ббб, 2 Н), 7.29-7.36 (т, 1 Н), 7.41 (ί, 2Η), 7.52 (5, 1 Н).

Пример 73. 3-[(6-Метил-2-пиридил)этинил]-1,8-диокса-2-азаспиро[4.5]дек-2-ен.

3-(3-Триметилсилилбут-1-инил)-1,8-диокса-2-азаспиро[4.5]дек-2-ен (соединение 73а).

Указанное в заголовке соединение синтезировали с использованием вышеописанного способа для получения соединения 3с, но при этом использовали 4-метилентетрагидропиран вместо соединения 3а. Неочищенный продукт очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (Ι5ο1οπι®ΤΜ - ΒίοΙα^ο: градиентное элюирование петролейным эфиром-этилацетатом в соотношении от 95 : 5 до 75 : 25), и получали указанное в заголовке соединение в виде масла коричневатого цвета. Выход: 30,2%. Μδ: [М+Н]+ = 238.21.

Ή-ΝΜΚ: (СПС1₃, δ): 0.24-0.27 (т, 9Н), 1.79 (ббб, 1=13.45, 9.05, 4.16 Ηζ, 2Н), 1.90 (6ϊ, 1=13.40, 4.40 Ηζ, 2Η), 2.86 (5, 2Η), 3.71 (6ϊ, 1=11.74, 4.65 Ηζ, 2Η), 3.89 (ббб, 1=11.80, 8.86, 3.30 Ηζ, 2Η).

3- [(6-Метил-2-пиридил)этинил]-1,8-диокса-2-азаспиро[4.5]дек-2-ен.

Указанное в заголовке соединение синтезировали, используя способ, описанный выше, для получения соединения примера 3, но заменив при этом соединение 3 с соединением 73 а. Неочищенный продукт очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (15ο1οπι®ΤΜ - ΒίοΙα^ο: градиентное элюирование петролейным эфиром-этилацетатом в соотношении от 8 : 2 до 4 : 6), и получали указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества желтого цвета. Выход: 41,7%. Μδ: [М+Н]+ = 257,19.

Ή-ΝΜΚ: (СБС1з, δ): 1.78-1.89 (т, 2Η), 1.89-2.00 (т, 2Η), 2.61 (5, 3Η), 2.97 (5, 2Η), 3.68-3.80 (т, 2Η), 3.85-3.98 (т, 2Η), 7.20 (б, 1=7.82 Ηζ, 1Η), 7.39 (б, 1=7.58 Ηζ, 1Η), 7.62 (ί, 1=7.70 Ηζ, 1Η).

Пример 74. 3-[(4-Хлор-2-пиридил)этинил]-1,8-диокса-2-азаспиро[4.5]дек-2-ен.

Указанное в заголовке соединение синтезировали, используя способ, описанный выше, для получения соединения примера 3, но заменив при этом соединение 3с соединением 73а и используя 2-бром-4хлорпиридин вместо 2-бром-6-метилпиридина. Неочищенный продукт очищали методом флэшхроматографии в автоматизированном режиме (15ο1οπι®ΤΜ - ΒίοΙα^ο: градиентное элюирование петролейным эфиром-этилацетатом в соотношении от 8 : 2 до 35 : 65) и получали указанное в заголовке соединение. Выход: 67%. Μδ: [М+Н]+ = 277,12.

Ή-ΝΜΚ: (СПС1₃, δ): 1.82-1.90 (т, 2Н), 1.90-1.99 (т, 2Н), 2.97 (5, 2Н), 3.75 (6ϊ, 1=11.68, 4.68 Ηζ, 2Н), 3.91 (ббб, 1=11.86, 8.93, 3.18 Ηζ, 2Η), 7.35 (бб, 1=5.38, 1.96 Ηζ, 1Η), 7.58 (б, 1=1.71 Ηζ, 1Η), 8.55 (б, 1=5.38 Ηζ, 1Η).

Пример 75. 3-(3-Хлорфенилэтинил)-1-окса-8-тиа-2-азаспиро[4.5]дек-2-ен 8,8-диоксид.

4- Метилен-1,1-диоксотиан (соединение 75а).

Указанный в заголовке продукт синтезировали с использованием способа, описанного выше, для получения соединения 2а, но при этом использовали 1,1,4-триоксо-тиан вместо 1-(3-нитро-2-пиридил)-4оксо-пиперидина. После обычной процедуры выделения продукта реакции остаток очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (ΐ5ο1θΓα®ΤΜ - ΒίοΙα^ο: градиентное элюирование петролейным эфиром-этилацетатом в соотношении от 85: 15 до 6 : 4), и получали указанное в заголовке соединение. Выход: 79%. Μδ: [М+Н]+ = 147,21.

Ή-ΝΜΚ: (СОС1₃, δ): 2.58 (ί, 1=6.30 Ηζ, 4Н), 3.11 (ί, 1=6.30, 4Η), 4.92 (5, 2Η).

3-Триметилсилилэтинил-1-окса-8-тиа-2-азаспиро[4.5]дек-2-ен 8,8-диоксид(соединение 75Ь).

Указанное в заголовке соединение синтезировали с использованием вышеописанного способа для

- 34 023020 получения соединения 3с, но заменив при этом соединение 3а соединением 75а. Неочищенный продукт очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (I5ο1е^а®ΤΜ - В1о1аде; градиентное элюирование петролейным эфиром-этилацетатом в соотношении от 95 : 5 до 7 : 3), и получали указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества белого цвета (масла коричневатого цвета). Выход: 40,1%. Μδ: [Μ+Н]® = 286.25.

Ή-ΝΜΚ: (СБС1з, δ): 0.26 (5, 9Н), 2.25-2.37 (т, 2Н), 2.43 (1б, 1=14.00, 2.90 Ш, 2Н), 2.93 (5, 2Н), 2.953.04 (т, 2Н), 3.47 (1б, 1=13.57, 3.91 Н, 2Н).

-(3 -Хлорфенилэтинил)-1 -окса-8-тиа-2-азаспиро [4.5]дек-2-ен 8,8-диоксид.

Указанное в заголовке соединение синтезировали с использованием способа, описанного выше, для получения соединения примера 3, но заменив при этом соединение 3с соединением 75Ь и используя 1 хлор-3-йодбензол вместо 2-бром-6-метилпиридина. Неочищенный продукт очищали методом флэшхроматографии в автоматизированном режиме (I5ο1е^а®ΤΜ - В1о1аде; градиентное элюирование петролейным эфиром-этилацетатом в соотношении от 85 : 15 до 65 : 35), и получали указанное в заголовке соединение. Выход: 54 %. Μδ: [Μ+4]⁺ = 323,87.

Ή-ΝΜΚ: (СПС1₃, δ): 2.32-2.42 (т, 2Н), 2.42-2.56 (т, 2Н), 2.93-3.09 (т, 2Н), 3.03 (5, 2Н), 3.44-3.57 (т, 2Н), 7.31-7.36 (т, 1Н), 7.42 (б1, 1=6.85, 1.59 Н, 2Н), 7.53 (1, 1=1.59 Н, 1Н).

Пример 76. 3-(3-Хлорфенилэтинил)-1,7-диокса-2-азаспиро[4.5]дек-2-ен.

Указанное в заголовке соединение получали в соответствии с процедурой, описанной для соединения Зс, используя соединение 31£ вместо соединения 3Ь и 3-метилен-тетрагидропиран (Китае, V.; Кобе, К. Скет15ске ВепсШе. 120, 1987, 847 - 848) вместо соединения 3а. После обычной процедуры выделения продукта реакции остаток очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (Нопζοη®ΤΜ - В1о1аде; градиентное элюирование петролейным эфиром-этилацетатом в соотношении от 1 : 0 до 8 : 2), и получали указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества серого цвета. Выход: 4%. Μδ: [Μ+Н]® = 276,25.

Ή-ΝΜΚ: (СБС1з, δ): 1.62-1.74 (т, 1Н), 1.86-2.09 (т, 3Н), 2.90 (б,1Н), 3.11 (б, 1Н), 3.52-3.67(т, 3Н), 3.73-3.82 (т, 1Н), 7.29-7.35 (т, 1Н), 7.37-7.44 (т, 2Н), 7.52 (1, 1Н).

Пример 77. 3-(3-Хлорфенилэтинил)-1,9-диокса-2-азадиспиро[4.2.4.2]тетрадек-2-ен - изомер А.

8-Метилен-1-оксаспиоо[4.5]декан (соединение 77а).

Указанное в заголовке соединение получали, следуя процедуре, описанной для получения соединения 2а, но при этом использовали 1-оксаспиро[4.5]декан-8-он вместо 1-(3-нитро-2-пиридил)-4-оксопиперидина. После обычной процедуры выделения продукта реакции остаток очищали методом флэшхроматографии в автоматизированном режиме (δΡ1®ΤΜ - В1о1аде; градиентное элюирование петролейным эфиром-этилацетатом в соотношении от 100: 5 до 75 : 25), и получали указанное в заголовке соединение. Выход: 29%.

Ή-ΝΜΚ: (СПС1₃, δ): 1.50-1.60 (т, 2Н); 1.67-1.75 (т, 4Н); 1.88-2.00 (т, 2Н); 2.08-2.18 (т, 2Н); 2.312.43 (т, 2Н); 3.86 (1, 1=6.7 Ш, 2Н); 4.65 (5, 2Н).

3-Триметисилилэтинил-1,9-диокса-2-азадиспиро[4.2.4.2]тетрадек-2-ен (соединение 77Ь - изомеры Аи В).

Указанные в заголовке соединения были синтезированы с использованием вышеописанного способа для получения соединения 3с, но заменив при этом соединение 3а соединением 77а. Неочищенный продукт очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (I5ο1е^а®ΤΜ - В1о1аде; градиентное элюирование петролейным эфиром-этилацетатом в соотношении от 95 : 5 до 75 : 25) и получали указанное в заголовке соединение в виде масел желтоватого цвета. Выход: 17,6% первого элюированного изомера А и 11,6% изомера В. Μδ: [Μ+Н]® = 292,48.

Ή-ΝΜΚ: изомер А, (СПС1₃, δ): ррт 0.25 (5, 9Н); 1.58-1.70 (т, 4Н); 1.70-1.77 (т, 2Н); 1.79-1.91 (т, 4Н); 1.90-2.00 (т, 2Н); 2.80 (5, 2Н); 3.78-3.93 (т, 2Н).

Ή-ΝΜΚ: изомер В, (СПС1₃, δ): ррт 0.25 (5, 9Н); 1.46 (ббб, 1=13.6, 9.8, 4.0 Ш, 2Н); 1.58-1.67 (т, 2Н); 1.67-1.75 (т, 2Н); 1.82-2.00 (т, 4Н); 2.07 (ббб, 1=13.7, 10.0, 4.2 Н, 2Н); 2.83 (5, 2Н); 3.77-3.93 (т, 2Н).

3-(3-Хлорфенилэтинил)-1,9-диокса-2-азадиспиро[4.2.4.2]тетрадек-2-ен - изомер А.

Указанное в заголовке соединение синтезировали, используя способ, описанный выше, для получения соединения примера 3, но заменив при этом соединение 3с соединением 77Ь - изомер А, и заместив 2-бром-6-метилпиридин 1-хлор-3-йодбензолом. Неочищенный продукт очищали методом флэшхроматографии в автоматизированном режиме (^Κι^ΤΜ - В1о1аде; градиентное элюирование петролейным эфиром-этилацетатом в соотношении от 95 : 5 до 8 : 2), и получали указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества кремового цвета. Выход: 69%. Μδ: [Μ+Н]® = 330,03.

Ή-ΝΜΚ: (СОС1₃, δ): 1.49 (ббб, 1=13.51, 9.72, 3.91 Н, 2Н); 1.62-1.70 (т, 2Н); 1.70-1.77 (т, 2Н); 1.872.00 (т, 4Н); 2.12 (ббб, 1=13.33, 9.66, 4.16 Ш, 2Н); 2.92 (5, 2Н); 3.86 (1, 1=6.72 Н, 2Н); 7.29-7.34 (т, 1Н); 7.36-7.43 (т, 2Н); 7.51 (5, 1Н).

Пример 78. 3-(3-Хлорфенилэтинил)-1,9-диокса-2-азадиспиро[4.2.4.2]тетрадек-2-ен - изомер В.

Указанное в заголовке соединение синтезировали, используя способ, описанный выше, для получения соединения примера 3, но заменив при этом соединение 3с соединением 77Ь - изомер В и заместив 2- 35 023020 бром-6-метилпиридин 1-хлор-3-йодбензолом. Неочищенный продукт очищали методом флэшхроматографии в автоматизированном режиме (^Κι^ΤΜ - В1о1аде; градиентное элюирование петролейным эфиром-этилацетатом в соотношении от 95 : 5 до 8 : 2), и получали указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества слабо-желтого цвета. Выход: 33,5%. Μδ: [М+Н]+ = 330,18.

Ή-ΝΜ^ (СОС1₃, δ): 1.61-1.68 (т, 2Н); 1.71-1.78 (т, 2Н); 1.80-2.01 (т, 8Н); 2.89 (5, 2Н); 3.85 (ί, 1=6.75 Нг, 2Н); 7.27-7.33 (т, 1Н); 7.35-7.43 (т, 2Н); 7.52 (ί, Д=1.66 Нг, 1Н).

Пример 79. 3-(3-метилфенилэтинил)-1,9-диокса-2-азадиспиро[4.2.4.2]тетрадек-2-ен.

Указанное в заголовке соединение синтезировали, используя способ, описанный выше для получения соединения примера 3, но замещая 2-бром-6-метилпиридин соединением 77Ь - изомер В соединения 3с и 3-йодтолуола. Неочищенный продукт очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (I5о1е^а®ΤΜ - Вю!аде; градиентное элюирование петролейным эфиром-этилацетатом в соотношении от 95 : 5 до 8 : 2), и получали указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества кремового цвета. Выход: 67,6%. Μδ: [М+Н]+ = 310,24.

Ή-ΝΜ^ (СБС1_з, δ): 1.49 (ббб, 1=13.39, 9.84, 3.91 Нг, 2Н); 1.67 (бб, >12.47, 4.65 Нг, 2Н); 1.70-1.77 (т, 2Н); 1.85-2.00 (т, 4Н); 2.12 (ббб, 1=13.14, 9.60, 3.91 Нг, 2Н); 2.37 (5, 3Н); 2.92 (5, 2Н); 3.86 (ί, 1=6.72 Нг, 2Н); 7.17-7.30 (т, 2Н); 7.34 (б, 1=11.98 Нг, 2Н).

Пример 80. 3 -(3 -Г идроксисренилэтинил)-7-(6-метил-3 -нитро-2-пиридил)-1 -окса-2,7-диазаспиро [4.3]окт-2-ен.

-Этинил-7-(1 -бутоксикаобонил)-1 -окса-2,7-диазаспиро [4.3] окт-2-ен (соединение 80а).

Раствор соединения 28Ь (557 мг, 1,81 ммоль) и тетрабутиламмоний фторида гидрата (759 мг, 2,72 ммоль) в 10 мл ТГФ перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч. После обычной процедуры выделения продукта реакции с помощью этилацетата - воды неочищенный остаток использовали на следующем этапе без дальнейшей очистки. Μδ: [Μ+Н]® = 238.4.

3-(3-Гидроксифенилэтинил)-7-(ί.бутоксикарбонил)-1 -окса-2,7-диазаспиро [4.3]окт-2-ен (соединение

80Ь).

Указанное в заголовке соединение синтезировали с использованием способа, описанного выше, для получения соединения примера 3, но замещая 2-бром-6-метилпиридин соединением 80а для соединения 3 с и 3-йодфенола. Неочищенный продукт очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (δΡ1®ΤΜ - В1о!аде; градиентное элюирование петролейным эфиром-этилацетатом в соотношении от 8 : 2 до 65 : 35), и получали указанное в заголовке соединение в виде твердого стекловидного вещества желтоватого цвета. Выход: 28,8%. Μδ: [Μ+Н]® = 329,4.

Ή-ΝΜ^ (ϋϋΟ,, δ): 1.48 (5, 9Н), 3.40 (5, 2Н), 4.07 (б, 1=10.3 Нг, 2Н), 4.31 (б, 1=10.0 Нг, 2Н), 4.99 (5, 1Н), 6.91 (ббб, 1Н), 6.98-7.02 (т, 1Н), 7.12 (б, 1=7.8 Нг, 1Н), 7.28 (ί, 1=8.1 Нг, 1Н).

3-(3-Г идроксифенилэтинил)-1 -окса-2,7-диазаспиоо [4.3]окт-2-ен (соединение 80с).

Указанное в заголовке соединение синтезировали с использованием способа, описанного выше, для получения соединения 1с, но заменив при этом соединение 1Ь соединением 80Ь. Неочищенный остаток использовали без дальнейшей очистки при проведении следующей реакции. Выход: 90,4%. Μδ: [Μ+Н]® = 229.3

-(3 -Г идроксифенилэтинил)-7-(6-метил-3 -нитро-2-пиридил)-1 -окса-2.7-диазаспиро [4.3]окт-2-ен.

Указанное в заголовке соединение получали с использованием способа, описанного для получения соединения примера 1, но заменив при этом соединение 1с соединением 80с. После обычной процедуры выделения продукта реакции указанный в заголовке продукт очищали методом хроматографии с обращенной фазой в автоматизированном режиме (δΡ1®ΤΜ - Вю!аде; градиентный буфер ЯН₄НСО₃ - ΜеСN в соотношении от 20-80 до 40-60. Выход: 26%. Μδ: [Μ+Н]® = 365,05.

Ή-ΝΜ^ (СВС1₃, δ): 2.51 (5, 3Н), 3.49 (5, 2Н), 4.38 (б, 2Н), 4.49 (б, 2Н), 4.83 (Ьг. 5, 1Н), 6.65 (б, 1 Н), 6.92 (б, 1Н), 7.01 (5, 1Н), 7.14 (б, 1Н), 7.23-7.32 (т, 5Н), 8.18 (б, 1Н).

Пример 81. 3-(3-Цианофенилэтинил)-7-(6-метил-3-нитро-2-пиридил)-1-окса-2,7-диазаспиро[4.3]окт2-ен.

3-(3 -Цианофенилэтинил) -7-(Ьбутоксикарбонил)-1 -окса-2,7-диазаспиро [4.3] окт-2-ен (соединение

81а).

Указанное в заголовке соединение синтезировали, используя способ, описанный выше, для получения соединения примера 3, но замещая 2-бром-6-метилпиридин соединением 80а для соединения 3с и 3йодбензонитрила. Неочищенный продукт очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (δΡ1®ΤΜ - В1о1аде; градиентное элюирование петролейным эфиром-этилацетатом в соотношении от 9 : 1 до 6 : 4), и получали указанное в заголовке соединение в виде твердого стекловидного вещества желтоватого цвета. Выход: 84,5%. Μδ: [Μ+Н]® = 338,4.

Ή-ΝΜ^ (СВС1₃, δ): 1.47 (5, 9Н), 3.39 (5, 2Н), 4.06 (бб, 1=9.8, 1.2 Нг, 2Н), 4.32 (бб, 1=9.8, 1.2 Нг, 2Н), 7.48-7.55 (т, 1Н), 7.69 (ббб, 1=7.9, 1.4 Нг, 1Н), 7.74 (ббб, 1=7.9, 1.4 Нг, 1Н), 7.78-7.83 (т, 1Н).

3-(3-Цианофенилэтинил)-1-окса-2,7-диазаспиро[4.3]окт-2-ен (соединение 81Ь). Указанное в заголовке соединение синтезировали с использованием способа, описанного выше, для получения соединения 1с, но заменив при этом соединение 1Ь соединением 81а. Неочищенный остаток использовали без

- 36 023020 дальнейшей очистки при проведении следующей реакции. Выход: 90,4%. Μδ: [Μ+Η]+ = 238,3.

3-(3-Цианофенилэтинил)-7-(6-метил-3-нитро-2-пиридил)-1-окса-2,7-диазаспиро[4.3]окт-2-ен.

Указанное в заголовке соединение получали с использованием способа, описанного для получения соединения примера 1, но заменив при этом соединение 1с соединением 81Ь. После обычной процедуры выделения продукта реакции указанный в заголовке продукт очищали методом хроматографии с обращенной фазой в автоматизированном режиме (δΡ1®ΤΜ - ВюЕаде; градиентный буфер ΝΗ₄ΗΟΘ₃ - МеСЫ в соотношении от 20-80 до 40-60. Выход: 72,5%. Твердое вещество желтоватого цвета. Μδ: [М+Н]+ = 374.11 ¹Η-ΝΜΚ: (СПС1₃, δ): 2.52 (5, 3Н), 3.50 (5, 2Н), 4.38 - 4.44 (т, 1Н), 4.49-4.54 (т, 1Н), 6.66 (б, Д=8.31 Ηζ, 1Н), 7.53 (бб, Д=7.90 Ηζ, 1Н), 7.71 (ббб, Д=7.80, 1.50 Ηζ, 1Н), 7.76 (ббб, Д=7.80, 1.30 Ηζ, 1Н), 7.83 (бб, 1=1.30 Ηζ, 1Н), 8.18 (б, 1=8.31 Ηζ, 1Н).

Пример 82. 3-(3-Хлорфенилэтинил)-2,3-дигидро-3-гидрокси-4'Н-спиро[инден-1,5'-изоксазол].

Указанное в заголовке соединение получали в соответствии с процедурой, описанной для соединения 3с, используя соединение 3Π вместо соединения 3Ь и 3-метилениндан-1-ол (Апдете Сйет, 1пЕ Еб, 48(33), 2009, 6148-6151) вместо соединения 3а. После обычной процедуры выделения продукта реакции остаток очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (Ηοήζοη®ΤΜ - ВюЕаде; градиентное элюирование петролейным эфиром-этилацетатом в соотношении от 9 : 1 до 1 : 1), и получали указанное в заголовке соединение в виде масла коричневатого цвета. Выход: 74%. Указанное в заголовке соединение характеризовалось как диастереоизомерная смесь в соотношении 83:17 по спектру 'НΝΜΚ. Μδ: [Μ+Η]+ = 324,01.

Ή-ΝΜΚ: (СОС1₃, δ): 2.25 (бб, 1=13.94, 4.89 Ηζ, 1Н), 2.57 (бб, 1=14.30, 3.79 Ηζ, 0.21Н), 2.74 (бб, 1=14.31, 6.48 Ηζ, 0.21Н), 3.02 (бб, 1=13.94, 6.60 Ηζ, 1Н), 3.39 (бб, 0.42) 3.50 (бб, 2Н) 5.12-5.25 (т, 0.21Н), 5.50 (Е, 1=5.62 Ηζ, 1Н), 7.30-7.38 (т, 1Н), 7.38 -7.52 (т, 6Н), 7.56 (5, 1Н).

Пример 83. 3 '-(3 -Хлорфенилэтинил)-2,3-дигидро-3 -оксо-4'Н-спиро [инден- 1,5'-изоксазол].

Раствор оксалил хлорида (64,6 мкл, 0,74 ммоль) в 5 мл безводного СН₂С1₂ охлаждали до -60°С; ΌΜδϋ (105 мкл, 1,48 ммоль), добавляли по каплям для поддержания реакции при одной и той же температуре. Спустя 15 мин добавляли соединение Примера 82 (174 мг, 0,49 ммоль), растворенное в 1 мл безводного СН₂С1₂ и спустя 30 мин добавляли по каплям ТЕА (0,413 мл, 2,96 мл). Прекратив охлаждение и нагрев реакционную смесь до комнатной температуры, проводили ее перемешивание в течение 3 ч, затем быстро охлаждали Н₂О, экстрагировали СН₂С1₂ и высушивали над Ν;·ι₂δϋ.·|. Остаток после выпаривания очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (δΡ01®ΤΜ - ВюЕаде; градиентное элюирование петролейным эфиром-этилацетатом в соотношении от 95 : 5 до 1 : 1), и получали указанное в заголовке соединение в виде масла коричневатого цвета. Выход: 50%. Μδ: [Μ+Η]+ = 322,2.

Ή-ΝΜΚ: (СОС1₃, δ): 3.01 (б, 6=18.83 Ηζ, 1Н), 3.30 (б, 1=18.83 Ηζ, 1Н), 3.48 (б, 1=17.36 Ηζ, 1Н), 3.63 (б, 1=17.36 Ηζ, 1Н), 7.31-7.38 (т, 1Н), 7.40-7.49 (т, 2Н), 7.55-7.57 (т, 1Н), 7.60 (Еб, 1=7.40, 1.10 Ηζ, 1Н), 7.69-7.73 (т, 1Н), 7.75-7.83 (т, 2Н).

Пример 84. 3'-(3 -Хлорфенилэтинил)-2.3 -дигидро-3 -метоксиимино-4 'Н-спиро [инден-1,5 '-изоксазол].

К раствору соединения примера 83 (0,14 г, 0,44 ммоль) в 1,5 мл пиридина добавляли метоксиламин (0,04 г, 0,48 ммоль). После перемешивания в течение 4 ч при комнатной температуре реакционную смесь проверяли методом тонкопленочной хроматографии, и реакцию завершали. Реакционную смесь разбавляли водой, подкисливали 1Ν НС1 и экстрагировали этилацетатом. После высушивания над Να₂δϋ.₄ и выпаривания до сухого состояния остаток очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (δΡ01®ΤΜ - ВюЕаде; градиентное элюирование петролейным эфиром-этилацетатом в соотношении от 95 : 5 до 1 : 1), и получали указанное в заголовке соединение в виде бесцветного масла. Выход: 75,4%. Μδ: [М+Н]+ = 351,44.

Ή-ΝΜΚ: (СОС1₃, δ): 3.19 (б, 1Н), 3.34-3.41 (т, 1Н), 3.43 (б, 1Н), 3.51-3.57 (т, 1Н), 4.02 (5, 3 Н), 7.307.37 (т, 1Н), 7.39-7.51 (т, 5Н), 7.56 (Е, 1Н), 7.71-7.77 (т, 1Н).

Примеры 85-86. 3-(3-Хлорфенилэтинил)-1.9-диокса-2-азадиспиро[4.2.3.2]тридек-2-ен (изомер 1) и 3 -(3 -хлорфенилэтинил)-1,9-диокса-2-азадиспиро [4.2.3.2]тридек-2-ен (изомер 2).

7-Метилен-1-оксаспиро[3.5]нонан (соединение 85а).

N-(р.толуолсульфонил)диметилсульфохимин (1,49 г, 6,01 ммоль) и безводный ΌΜδϋ (5 мл) добавляли к 60% масляной дисперсии ΝαΗ (0,22 г, 5,46 ммоль) при постоянном перемешивании в атмосфере обезвоженного инертного газа в нагреваемой над пламенем 3-горловой колбе. Смесь приобретала зеленоватый цвет, а затем ее цвет изменялся до желтого. После перемешивания при 35°С в течение 10 ч добавляли раствор 4-метиленциклогексанона (0,2 г, 1,82 ммоль) в 5 мл ΌΜδΘ и реакционную смесь перемешивали при 50°С в течение 20 ч. Затем реакционную смесь разбавляли насыщенным раствором №С1 и экстрагировали ЕЕ₂О (трижды). После высушивания над Ν;·ι₂δϋ₂ и выпаривания до сухого состояния остаток очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (Ι5οΚπι®ΤΜ - ВюЕаде; изократический петролейный эфир - этилацетат в соотношении 9:1), и получали 0,252 г указанного в заголовке соединения в виде бесцветного масла. Выход: 27,8%. Μδ: [М+Н]+ = 138,21.

Ή-ΝΜΚ: (СОС1₃, δ): 1.80-1.99 (т, 4Н) 2.05-2.15 (т, 2Н) 2.27-2.37 (т, 2Н) 2.41 (Е, 1=7.7 Ηζ, 2Н) 4.55 (Е, 1=7.8 Ηζ, 2Н) 4.66 (5, 2Н).

- 37 023020

3-(3-Хлорфенилэтинил)-1,9-диокса-2-азадиспиро[4.2.3.2]тридек-2-ен (изомер 1) и 3-(3хлорфенилэтинил)-1,9-диокса-2-азадиспиро[4.2.3.2]тридек-2-ен (изомер 2).

Указанные в заголовке соединения получали в соответствии с процедурой, описанной для соединения 3с, используя соединение 31Г вместо соединения 3Ъ и соединение 85а вместо соединения 3а. После обычной процедуры выделения продукта реакции остаток очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (8Р01®ТМ - Вю1аде; градиентное элюирование петролейным эфиромэтилацетатом в соотношении от 1 : 0 до 6 : 4), и получали первую группу фракций, содержащих менее полярный диастереомер (пример 86; 43,9), а затем третью группу фракций, содержащую более полярный диастереомер (пример 85; 25,4%).

Пример 85. М8: [М+Н]+ = 315,80.

Ή-КМК: (СОС1₃, δ): 1.63 (666, 1=13.4, 9.4, 4.2 Нг, 2Н) 1.78-1.90 (т, 2Н) 2.00-2.10 (т, 2Н) 2.16 (666, 1=13.2, 9.3, 4.2 Нг, 2Н) 2.42 (ΐ, 1=7.8 Нг, 2Н) 2.89 (5, 2Н) 4.55 (ΐ, 1=7.8 Нг, 2Н) 7.31 (66, 1=7.9 Нг, 1Н) 7.367.43 (т, 2Н) 7.51 (ΐ, 1=1.8 Нг, 1Н).

Пример 86. М8: [М+Н]+ = 315,80.

Ή-КМК: (СОС1₃, δ): 1.79-1.88 (т, 4Н) 1.97-2.06 (т, 4Н) 2.43 (ΐ, 1=7.8 Нг, 2Н) 2.89 (5, 2Н) 4.54 (ΐ, 1=7.8 Нг, 2Н) 7.27-7.34 (т, 1Н) 7.36-7.43 (т, 2Н) 7.49-7.53 (т, 1Н).

Пример 87. 3-(3-Хлорфенилэтинил)-1,9,13-триокса-2-азадиспиро[4.2.5.2]пентадек-2-ен.

Раствор соединения из примера 32 (0,41 г, 1,42 ммоль), 1,3-пропандиола (0,15г, 1,95 ммоль) и ртолуолсульфоновой кислоты, Н₂О (7,5 мг, 0,04 ммоль) в 30 мл бензола перемешивали при дефлегмировании в течение 10,5 ч, удаляя при этом воду с помощью аппарата Эеап-8(агк. Разбавляли водой, промывали водным раствором 5% NаНСΟз, высушивали органические слой над Να₂8Ο.₄ и получали указанное в заголовке соединение в виде густого масла желтого цвета. Соединение далее очищали методом флэшхроматографии в автоматизированном режиме (8Р01®ТМ - ВЮаде; градиентное элюирование петролейным эфиром-этилацетатом в соотношении от 9 : 1 до 7 : 3), получая твердое вещество белого цвета. Выход: 75,3%. М8: [М+Н]+ = 346.27.

Ή-КМК: (СОС1₃, δ): 1.77 (6, 1=5.4 Нг, 4Н); 2.00 (6, 1=7.6 Нг, 6Н); 2.91 (5, 2Н); 3.92 (5, 2Н); 3.96 (5, 2Н); 7.31 (5, 1Н); 7.36-7.44 (т, 2Н); 7.52 (5, 1Н).

Пример 88. 3'-[(6-Метил-2-пиридил)этинил]-2.3-дигидро-3-гидрокси-4'Н-спиро[инден-1,5'-изоксазол].

'-Триметилсилилэтинил-2,3-дигидоо-3 -гидоокси-4'Н-спиро [инден- 1,5'-изоксазол] (соединение 88а).

Указанное в заголовке соединение получали в соответствии с процедурой, описанной для соединения 3с, используя 3-метилениндан-1-ол (Лпдете. СЬет., Ιηΐ. Ε6., 48(33), 2009, 6148-6151) вместо соединения 3а. После обычной процедуры выделения продукта реакции остаток очищали методом флэшхроматографии в автоматизированном режиме (8Р01®ТМ - ВЮаде; градиентное элюирование петролейным эфиром-этилацетатом в соотношении от 9 : 1 до 1 : 1), и получали указанное в заголовке соединение в виде масла коричневатого цвета. Выход: 79,9%. М8: [М+Н]+ = 286,38.

'-[(6-Метил-2-пиридил)этинил] -2,3-дигидро-3 -гидрокси-4'Н-спиро [инден- 1,5'-изоксазол].

Указанное в заголовке соединение синтезировали, используя способ, описанный выше для получения соединения примера 3, но заменив при этом соединение 88а соединением 3с и заменяя 2-бром-6метилпиридин 3-йодфенолом. Неочищенный продукт очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (8Р1®ТМ - Вю1аде; градиентное элюирование петролейным эфиром-этилацетатом в соотношении от 9 : 1 до 4 : 6), и получали указанное в заголовке соединение в виде масла коричневатого цвета. Выход: 67,6%. М8: [М+Н]+ = 305.31.

Ή-КМК: (СВС1₃, δ): 2.64 (5, 3Н), 3.02 (6, 1Н) 3.35 (6, 1Н), 3.55 (6, 1Н), 3.65 (6, 1Н), 5,41-5.45(т, 1Н), 7.23 (6, 1Н), 7.44 (6, 1Н), 7.55-7.62 (т, 1Н), 7.63-7.72 (т, 2Н), 7.76 (6, 1Н), 7.80 (6, 1Н).

Пример 89. 3-(3-Хлорфенилэтинил)-1-окса-2-азадиспиро[4.2.4.2]тетрадек-2-ен.

8-Метиленспиро[4.5]декан (соединение 89а).

Указанное в заголовке соединение получали в соответствии со способом, описанном выше для получения соединения 31а. В качестве исходного материала спиро[4.5]декан-8-он замещал 1,4диоксаспиро[4.5]декан-8-он. После обычной процедуры выделения продукта реакции остаток очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (8Р01®ТМ - ВЮаде; СН₂С1₂), и получали указанное в заголовке соединение в виде бесцветного масла. Выход: 98,5%.

Ή-КМК: (СОС1₃, δ): 1.37-1.49 (т, 8Н); 1.63 (6ΐ, 1=7.2, 3.6 Нг, 4Н); 2.16 (ΐ, 1=6.4 Нг, 4Н); 4.61 (5, 2Н).

3-(3-Хлорфенилэтинил)-1-окса-2-азадиспиро[4.2.4.2]тетрадек-2-ен.

Указанное в заголовке соединение получали в соответствии с процедурой, описанной для соединения 3с, используя соединение 31Г вместо соединения 3Ъ и соединение 89а вместо соединения 3а. После обычной процедуры выделения продукта реакции остаток очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (18ОЬЕКА®ТМ - ВЮаде; градиентное элюирование петролейным эфиромэтилацетатом в соотношении от 97 : 3 до 9 : 1), и получали указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества желтовато-белого цвета. Выход: 58,5%. М8: [М+Н]+ = 328.29 ^-ЯМК: (СЭСк δ): 1.31-1.41 (т, 2Н); 1.46 (6ΐ, 1=19.7, 6.9 Нг, 4Н); 1.59-1.76 (т, 8Н); 1.84-1.94 (т, 2Н); 2.89 (5, 2Н); 7.26-7.34 (т, 1Н); 7.35-7.45 (т, 2Н); 7.51 (5, 1Н).

- 38 023020

Пример 90. 3 -(3 -Хлорфенилэтинил)-8,8-дифтор-1 -окса-2-азаспиро [4.5]дек-2-ен.

1,1-Дифтор-4-метиленииклогексан (соединение 90а).

Смесь метил трифенил фосфоний бромида/амида натрия (быстрорастворимый илид метилтрифенилфософния (МТР), 0,49 г, 1,24 ммоль) суспендировали в безводном ЕьО (3 мл), перемешивая в течение 1 ч при комнатной температуре. Затем реакционную смесь охлаждали при 0°С и добавляли по каплям раствор 4,4-дифторциклогексанона (0,145 г, 1,08 ммоль) в 3 мл ЕьО. Перемешивание при комнатной температуре поддерживалось в течение 16 ч, затем реакционную смесь фильтровали и фильтрат использовали при проведении следующего этапа без дальнейшей очистки.

3-(3-Хлорфенилэтинил)-8.8-дифтор-1-окса-2-азаспиро[4.5]дек-2-ен.

Указанное в заголовке соединение получали в соответствии с процедурой, описанной для соединения 3с, используя соединение 31Е вместо соединения 3а и соединение 90а вместо соединения 3Ь. После обычной процедуры выделения продукта реакции остаток очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (18ОЬЕКА®ТМ - Вю1адс; градиентное элюирование петролейным эфиромэтилацетатом в соотношении от 99 : 1 до 95 : 5), и получали указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества желтоватого цвета. Выход: 41,9%. М8: [М+Н]+ = 310,35.

'НА'МК: (СБС1₃, δ): 1.82-1.92 (т, 2Н), 1.97-2.14 (т, 4Н), 2.14-2.34 (т, 2Н), 2.95 (5, 2Н), 7.33 (б, 1=7.6 Нг, 1Н), 7.41 (ΐ, 1=7.1 Нг, 2Н), 7.52 (5, 1Н).

Пример 91. 3-(3-метилфенилэтинил)-1-окса-2-азадиспиро[4.2.4.2]тетрадек-2-ен.

1-(3,3 -Диэтоксипроп-1 -ин-1 -ил)-3 -метилбензол(соединение 91а).

Указанное в заголовке соединение синтезировали с использованием способа, описанного выше, для получения соединения 31с, но при этом использовали 3-йодтолуол вместо 3-хлорйодбензола. После обычной процедуры выделения продукта реакции остаток очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (18ОЬЕКА®ТМ - Вю1адс; градиентное элюирование петролейным эфиромэтилацетатом в соотношении от 100 : 3 до 100 : 7), и получали указанное в заголовке соединение в виде масла желтоватого цвета. Выход: 94%.

'ΐ 1-ΝΧ1Κ: (СБС1₃, δ): 1.30 (ΐ, 1=6.8 Нг, 6Н); 2.34 (5, 3Н); 3.69 (ςυΐη, 1=7.8 Нг, 2Н); 3.85 (ςυΐη, 1=7.7 Нг, 2Н); 5.51 (5, 1Н); 7.16 (б, 1=7.6 Нг, 1Н); 7.22 (ΐ, 1=7.6 Нг, 1Н); 7.27-7.36 (т, 2Н).

3-(3-Метилфенил)проп-2-инал (соединение 91Ь).

Указанное в заголовке соединение синтезировали с использованием способа, описанного выше, для получения соединения 31б, но начиная с соединения 91а вместо соединения 31с. Неочищенный продукт указанного в заголовке соединения использовали при проведении следующего этапа без дальнейшей очистки. М8: [М+Н]+ = 145,12.

'ΐ 1-ΝΧ1Κ: (СБС1₃, δ): 2.39 (5, 3Н); 7.30-7.35 (т, 2Н); 7.40-7.49 (т, 2Н); 9.44 (5, 1Н).

^Гидрокси-3-(3-метилфенил)проп-2-ин-1-имин (соединение 91с).

Указанное в заголовке соединение синтезировали с использованием способа, описанного выше, для получения соединения 31е, но начиная с соединения 91Ь вместо соединения 31б. Неочищенный продукт указанного в заголовке соединения (масло коричневатого цвета) использовали при проведении следующего этапа без дальнейшей очистки.

М8: [М+Н]+ =160.19.

'НА'МК: (СБС1₃, δ): Ш1х Ε/Ζ 1/2: 2.37 (5, 1.5Н); 2.37 (5, 3Н); 7.04 (5, 1Н); 7.18-7.31 (т, 3 Н); 7.31-7.42 (т, 3Н); 7.62 (5, 0.5Н).

^гидрокси-3-(т-толил)-проп-2-инимидоил хлорид(соединение 91б).

Указанное в заголовке соединение получали в соответствии с описанным способом для получения соединения 3Ь, используя соединение 91с вместо 3-триметилсилилпроп-2-инал оксима. Остаток использовали при проведении следующего этапа без дальнейшей очистки. Выход: 96,4%.

3-(3-Метилфенилэтинил)-1-окса-2-азадиспиро[4.2.4.2]тетоадек-2-ен.

Указанное в заголовке соединение получали в соответствии с процедурой, описанной для соединения 3с, используя соединение 91б вместо соединения 3Ь и соединение 89а вместо соединения 3а. После обычной процедуры выделения продукта реакции остаток очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (18ОЬЕКА®ТМ - Вю1адс; градиентное элюирование петролейным эфиромэтилацетатом в соотношении от 97 : 3 до 9 : 1), и получали указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества желтовато-белого цвета. Выход: 58,5%. М8: [М+Н]+ = 308,28.

'НА'МК: (СБС1₃, δ): 1.31-1.52 (т, 6Н); 1.53-1.76 (ш, 9 Н); 1.87 (бб, 1=12.0, 3.2 Нг, 2Н); 2.37 (5, 3 Н); 2.90 (5, 2Н); 7.17-7.23 (ш, 1Н); 7.26 (бб, 1=7.6 Нг, 1Н); 7.31-7.38 (т, 2Н).

Пример 92. 3-[(6-Метокси-3-пиридил)этинил]-1.9,12-триокса-2-азадиспиро[4.2.4.2]тетрадек-2-ен.

Указанный в заголовке продукт получали в соответствии с процедурой, описанной для соединения примера 3, но начиная с соединения 70а вместо соединения 3с и замещая 2-бром-6-метилпиридин 5-йод2-метоксипиридином. После обычной процедуры выделения продукта реакции остаток очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (8Р01®ТМ - Вю1адс; градиентное элюирование петролейным эфиром-этилацетатом в соотношении от 9 : 1 до 4 : 6), и получали указанное в заголовке соединение в виде масла коричневатого цвета. Выход: 45%. М8: [М+Н]+ = 329,23.

- 39 023020

Ή-ΝΜΚ: (СВС1₃, δ): 1.63-1.74 (т, 2Н), 1.77-1.92 (т, 2Н), 1.98-2.11 (т, 4Н), 2.93 (5, 2Н), 3.92-4.05 (т, 4Н), 4.00 (5, 3Н), 6.77 (б, 1Н), 7.70 (б, 1Н), 8.36 (5, 1Н).

Пример 93. 3 '-[(6-Метил-2-пиридил)этинил] -2,3-дигидро-3 -оксо-4'Н-спиро [инден-1,5'-изоксазол].

Указанный в заголовке продукт получали методом окисления по Сверну, как описано в примере 83, начиная с соединения примера 88 вместо соединения примера 82. После обычной процедуры выделения продукта реакции остаток очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (δΡ01®ΤΜ - Вю1аде; градиентное элюирование петролейным эфиром-этилацетатом в соотношении от 95 : 5 до 1 : 1), и получали указанное в заголовке соединение в виде масла коричневатого цвета. Выход: 50,3%. Μδ: [Μ+НЦ = 303,21.

Ή-ΝΜΚ: (СОС1₃, δ): 2.63 (5, 3Н), 2.99 (б, 1Н) 3.29 (б, 1Н), 3.51 (б, 1Н), 3.65 (б, 1Н), 7.23 (б, 1Н), 7.44 (б, 1Н), 7.55-7.62 (т, 1Н), 7.63-7.72 (т, 2Н), 7.76 (б, 1Н), 7.80 (б, 1Н).

Пример 94. 3 '-[(6-Метил-2-пиридил)этинил] -2,3-дигидро-3 -метоксиимино-4'Н-спиро [инден-1,5'изоксазол].

Указанный в заголовке продукт получали с помощью способа, описанного для получения соединения примера 84, но начиная с соединения примера 93 вместо соединения примера 83. После обычной процедуры выделения продукта реакции остаток очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (δΡ01®ΤΜ - В1о1аде; градиентное элюирование петролейным эфиром-этилацетатом в соотношении от 95 : 5 до 1 : 1), и получали указанное в заголовке соединение. Выход: 82%. Μδ: [М+Н]+ = 332,15.

Ή-ΝΜΚ: (СПС1з, δ): 2.59 (5, 3Н), 3.15 (б, 1Н), 3.34-3.45 (т, 2Н), 3.49-3.58 (т, 1Н), 4.00 (5, 3Н), 7.19 (б, 1Н), 7.37-7.49 (т, 4Н), 7.61 (!, 1Н), 7.69-7.74 (т, 1Н).

Пример 95. 3-(3 -Хлорфенилэтинил)-7 -диметилкарбамоил-1 -окса-2,7-диазаспиро [4.4]нон-2-ен.

К раствору соединения 27б (0,12 г, 0,46 ммоль) в 10 мл дихлорметана добавляли ΤΕΑ (0,02 мл, 1,38 ммоль), затем Ν,Ν-диметилхлорформамид (0,051 мл, 0,59 ммоль).

Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч. Затем смесь выпаривали до сухого состояния и очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (δΡ01®ΤΜ - Вю1аде; градиентное элюирование петролейным эфиром-этилацетатом в соотношении от 3 : 7 до 0:1), и получали указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества слабо желтого цвета. Выход: 68,8%. Μδ: [Μ+Н]® = 332.3.

Ή-ΝΜΚ: (ϋΜδΟ-ύό, δ): ррт 1.95-2.18 (т, 2Н) 2.75 (5, 6Н) 3.22-3.41 (т, 3Н) 3.41-3.46 (т, 1Н) 3.51 (!б, 1=10.2, 7.0 Нг, 1Н) 3.58 (б, 1=11.7 Нг, 1Н) 7.46-7.53 (т, 1Н) 7.54-7.61 (т, 2Н) 7.68 (!, 1=1.7 Нг, 1Н).

Пример 96. 3-(3-Хлорфенилэтинил)-7-карбамоил-1-окса-2,7-диазаспиро[4.4]нон-2-ен.

К раствору соединения 27б (0,125 г, 0,48 ммоль) в 10 мл метанола добавляли триметилсилилизоцианат (0,097 мл, 0,72 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 20 ч. Затем смесь выпаривали до сухого состояния и очищали методом хроматографии с обращенной фазой в автоматизированном режиме (δΡ01®ΤΜ - В1о1аде; ΜеСN - буфер карбоната аммония в соотношении 38:62) и получали указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества белого цвета. Выход: 55%. Μδ: [Μ+Н]® = 304.3.

Ή-ΝΜΚ: (СОС1₃, δ): ррт 2.13 (б!, 1=13.1, 9.2 Нг, 1Н) 2.33-2.45 (т, 1Н) 3.12-3.20 (т, 1Н) 3.20-3.28 (т, 1Н) 3.55 (б, 1=11.5 Нг, 1Н) 3.58-3.68 (т, 2Н) 3.84 (б, 1=11.5 Нг, 1Н) 4.44 (Ьг. 5., 2Н) 7.32 (!, 1=7.8Нг, 1Н) 7.38-7.45 (т, 2Н) 7.53 (!, 1=1.6 Нг, 1Н).

Пример 97. 3-(3-Хлорфенилэтинил)-1-окса-2-аза-диспиро[4.1.3.1]ундек-2-ен.

6-Метилен-спиоо[3.3]зептан (соединение 97а).

Указанное в заголовке соединение получали в соответствии с методологией, описанной для получения соединения 28а, но заменив при этом 1-(1бутоксикарбонил)-3-азетидинон спиро[3.3]гептан-6оном. Неочищенный продукт реакции использовали при проведении следующего этапа без дальнейшей очистки. Μδ: [Μ+Н]® =108.18.

3-(3 -Хлорфенилэтинил)-1 -окса-2 -аза-диспиро [4.1.3.1 ]ундек-2-ен.

Указанное в заголовке соединение получали в соответствии с процедурой, описанной для соединения 3с, используя соединение 31е вместо соединения 3Ь и соединение 97а вместо соединения 3а. После обычной процедуры выделения продукта реакции остаток очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (δΡ01®ΤΜ - В1о1аде; петролейный эфир - этилацетат в соотношении 97 : 3; затем ЭСМ 100%) и получали указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества желтоватобелого цвета. Выход: 20,7%. Μδ: [Μ+Н]® = 285,77.

Ή-ΝΜΚ: (СВС1₃, δ): 1.82-1.94 (т, 2Н), 2.02-2.11 (т, 4Н), 2.23-2.32 (т, 2Н), 2.49-2.57 (т, 2Н), 3.15 (5, 2Н), 7.31 (!, 1=7.8 Нг, 1Н), 7.34-7.43 (т, 2Н), 7.50-7.54 (т, 1Н).

Пример 98. 3-(3-Метилфенилэтинил)-1,9,13-триокса-2-азадиспиро[4.2,5.2]пентадек-2-ен.

9-Метилен-1,5-диоксаспиро[5.5]ундекан (соединение 98а).

Указанное в заголовке соединение получали в соответствии с методологией, описанной для получения соединение 28а, но заменив при этом 1-(1-бутоксикарбонил)-3-азетидинон 1,5-диоксаспиро [5.5]ундекан-9-оном. После обычной процедуры выделения продукта реакции остаток очищали методом

- 40 023020 флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (§Р01®ТМ - Вю1аде; Εί₂Ο), и получали указанное в заголовке соединение в виде масла слабо-желтого цвета. Выход: 96,3%. ¹Н-NМК: (СЭС1₃, δ): 1.76 (ςπίη. .1 5.4 Н, 2Н); 1.89 (ί, Σ=6.4 Н, 4Н); 2.23 (ί, Σ=6.2 Ш, 4Н); 3.95 (ί, 1=5.5 Ш, 4Н); 4.67 (δ, 2Н).

3-(3-Метилфенилэтинил)-1,9,13-триокса-2-азадиспиоо[4.2.5.2]пентадек-2-ен.

Указанное в заголовке соединение получали в соответствии с процедурой, описанной для соединения 3с, используя соединение 91й вместо соединения 3Ь и соединение 97а вместо соединения 3а. После обычной процедуры выделения продукта реакции остаток очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (§Р01®ТМ - Вю1аде; градиентное элюирование петролейным эфиромэтилацетатом в соотношении от 9 : 1 до 7 : 3), и получали указанное в заголовке соединение в виде пастообразного твердого вещества. Выход: 20,7%. М§: [М+Н]+ = 325,97.

'Н-\\1Н: (СЭС1₃, δ): 1.71-1.82 (т, 4Н); 1.89-2.08 (т, 6Н); 2.37 (δ, 3Н); 2.91 (δ, 2Н); 3.94 (й, 1=18.5, 5.5 Нг, 4Н); 7.17-7.30 (т, 2Н); 7.30-7.39 (т, 2Н).

Пример 99. 3-(3-Хлорфенилэтинил)-1-окса-2-азаспиро[4.3]окт-2-ен.

Указанное в заголовке соединение получали в соответствии с процедурой, описанной для соединения 3с, используя соединение 31ί вместо соединения 3Ь и метиленциклобутан вместо соединения 3а. После обычной процедуры выделения продукта реакции остаток очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (§Р01®ТМ - Вюйще; градиентное элюирование петролейным эфиромэтилацетатом в соотношении от 1 : 0 до 9 : 1), и получали указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества слабо-желтого цвета. Выход: 80,4%. М§: [М+Н]+ = 245,71.

'Н-\\1Н: (СЭС1₃, δ): 1.58-1.71 (т, 1Н), 1.89 (йН, 1=11.3, 9.9, 9.9, 3.5, 3.5 Н, 1Н), 2.18-2.28 (т, 2Н), 2.52-2.64 (т, 2Н), 3.22 (δ, 2Н), 7.32 (ί, Σ=7.6 Нг, 1Н), 7.36-7.44 (т, 2Н), 7.52 (ί, Σ=1.6 Н, 1Н).

Пример 100. 3-(3 -Хлорфенилэтинил) -1,10-диокса-2 -азадиспиро [4.2.3.2]тридек-2-ен.

Лиэтил 4-метиленциклогексан-1,1-дикарбоксилата (соединение 100а) Указанное в заголовке соединение получали в соответствии со способом, описанным для получения соединения 31а, но при этом использовали диэтил 4-оксоциклогексан-1,1-дикарбоксилат вместо 1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-она. После обычной процедуры выделения продукта реакции остаток очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (§Р01®ТМ - Вю1аде; градиентное элюирование петролейным эфиромэтилацетатом в соотношении от 1 : 0 до 8 : 2), и получали указанное в заголовке соединение в виде бесцветного масла. Выход: 88,1%. М§: [М+Н]+ = 240,30.

'Н-\\1Н: (СЭС1₃, δ): 1.28 (ί, Σ=7.2 Ш, 6Н) 2.05-2.15 (т, 4Н) 2.19-2.27 (т, 4Н) 4.22 (ц, >7.1 Н, 4Н) 4.68 (δ, 2Н).

1,1-бис(Гидооксиметил)-4-метиленциклогексан (соединение 100Ь) К суспензии ЫЛ1Н₄ (0,166 г, 4,4 ммоль) в безводном Εί₂Ο (10 мл), перемешиваемой при 0°С, добавляли раствор соединения 100а (100 мг, 2,08 ммоль) в Εί₂Ο (10 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Добавляли дополнительно 0,5 эквиваленты ЫЛ1Н₄, и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Затем смесь быстро охлаждали, добавляя ТНР/Н₂О (2 мл : 1,3 мл), затем 2Ν НС1 (30 мл). Экстрагировали этилацетатом, высушивали над №₂8О₄, выпаривали до сухого состояния и получали неочищенный продукт, который очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (§Р01®ТМ - Вюйще; градиентный дихлорметан -градиантный метанол в соотношении от 1 : 0 до 95 : 5), и получали указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества белого цвета. Выход: 92,1%. М8: [М+Н]+ = 156,22.

'Н-\\1Н: (СОС1₃,5): 1.51 (ί, 1=6.6 Ш, 4Н) 2.02 (Ьг. δ, 2Н) 2.19 (ί, 1=6.1 Н, 4Н) 3.70 (δ, 4Н) 4.67 (δ,

2Н).

[1-(Гидооксиметил)-4-метилиденииклогексил]метил 4-метилбензолсульфонат (соединение 100с).

К суспензии соединения 100Ь (0,25 г, 1,6 ммоль) и пиридина (0,40 мл) в дихлорметане добавляли при 0°С раствор р-толуолсульфонил хлорида (0,336 г, 1,76 ммоль) в 1 мл дихлорметана. Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин, затем при комнатной температуре в течение 3,5 ч. Разбавляли дихлорметаном, промывали 1М водного NаН§Ο₄ и рассолом и высушивали над №₂8О₄ и после выпаривания получали неочищенный продукт. Продукт очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (§Р01®ТМ - Вюйще; градиентный дихлорметан - метанол с соотношением от 1 : 0 до 95 : 5), и получали указанное в заголовке соединение. М§: [М+Н]+ = 310.41.

'ΐΙ-\\1Η: (СЭС1₃, δ): 1.39-1.53 (т, 4Н) 1.98-2.24 (т, 4Н) 2.48 (δ, 3Н) 3.57 (δ, 2Н) 4.01 (δ, 2Н) 4.65 (δ, 2Н) 7.38 (т, 1=8.1 Н, 2Н) 7.83 (й, 1=8.3 Н, 2Н).

7-Метилиден-2-оксаспиро[3.5]нонан (соединение 100й).

К раствору соединения 100с (0,320 г, 1,03 ммоль) в ТГФ (2 мл), перемешиваемого при 0°С, добавляли гидрид натрия (0,082 г, 2,06 ммоль). После 30-минутного перемешивания смесь нагревали при 60°С в течение 5 ч. После разведения водой экстрагировали БьО и выпаривали до сухого состояния, неочищенный продукт использовали на следующем этапе без дополнительной очистки. Выход: 77,3%.

3-(3-Хлорфенилэтинил)-1,10-диокса-2-азадиспиоо[4.2.3.2]тоидек-2-ен.

Указанное в заголовке соединение получали в соответствии с процедурой, описанной для соединения 3с, используя соединение 31ί вместо соединения 3Ь и соединение 100й вместо соединения 3а. После

- 41 023020 обычной процедуры выделения продукта реакции остаток очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (15о1ега®ТМ - Вю1аде; градиентное элюирование петролейным эфиромэтилацетатом в соотношении от 8 : 2 до 1 : 1), и получали указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества слабо-желтого цвета. Выход: 67,6%. М§: [М+Н]+ = 315.80.

Ή-Ν^Κ: (СБС1₃, δ): 1.52-1.69 (т, 2Н) 1.82-1.95 (т, 4Н) 2.01 -2.14 (т, 2Н), 2.87 (5, 2Н) 4.45 (6, 1=3.4 Нг, 4Н) 7.29-7.35 (т, 1Н), 7.36-7.44 (т, 2Н), 7.51 (ΐ, 1=1.6 Нг, 1Н).

Пример 101. 3 [(4-Хлор-2-пиридил)этинил] -8,8-дифтор-1 -окса-2-азаспиро [4.5]дек-2-ен.

3-[(4-Хлор-2-пиридил)этинил1-8-оксо-1-окса-2-азаспиро[4.5]дек-2-ен (соединение 101а).

Указанное в заголовке соединение синтезировали, используя способ, описанный для получения соединения примера 32, но начиная с соединения примера 65 вместо соединения примера 31. Неочищенный продукт использовали на следующем этапе без дополнительной очистки. М§: [М+Н]+ = 289,7.

Ή-Ν^Κ: (СПС1₃, δ): ррт 1.97-2.10 (т, 2Н) 2.24-2.45 (т, 4Н) 2.74-2.90 (т, 2Н) 3.05 (5, 2Н) 7.36 (66, 1=5.4, 2.0 Нг, 1Н) 7.59 (6, 1=1.5 Нг, 1Н) 8.55 (6, 1=5.4 Нг, 1Н).

3-[(4-Хлор-2-пиридил)этинил] -8.8-дисфтор-1 -окса-2-азаспиро [4.5]дек-2-ен.

К раствору соединения 101а (0,085 г, 0,29 ммоль) в 5 мл дихлорметана, перемешиваемого при комнатной температуре в атмосфере потока азота, добавляли по каплям диэтиламиносульфуртрифторид (0,163 мл, 1,23 ммоль). Перемешивание продолжалось в течение ночи. Затем добавляли насыщенный водный раствор NаΗСО₃ (5 мл), экстрагировали ЭСМ (3x5 мл), высушивали органический слой над №₂8О₄ и выпаривали до сухого состояния. Остаток очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (15о1ега®ТМ - Вю1аде; градиентное элюирование петролейным эфиромэтилацетатом в соотношении от 95 : 5 до 6 : 4), и получали указанное в заголовке соединение в виде масла желтого цвета, содержащего основную примесь. Указанное масло очищали вновь методом хроматографии с обращенной фазой (15о1ега®ТМ - Вю1аде; жидк. NΗ₄ΗСО₃/ΑсСN 55:45), и получали указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества желтовато-белого цвета. Выход: 14,2%. М8:[М+Н]+ = 311.4.

Ή-Ν^Κ: (СОС1₃, δ): ррт 1.82-1.96 (т, 2Н) 2.02-2.14 (т, 4Н) 2.14-2.35 (т, 2Н) 2.98(5, 2Н) 7.37 (66, 1=5.4, 2.0 Нг, 1Н) 7.59 (6, 1=1.5 Нг, 1Н) 8.55 (6, 1=5.4 Нг, 1Н).

Пример 102. 3-[(4-Хлор-2-пиридил)этинил] -8-этоксикарбонил-1 -окса-2-азаспиро [4,5]дек-2-ен.

Этил 4-метилиденциклогексанкарбоксилат (соединение 102 а).

Указанное промежуточное соединение было получено в соответствии с процедурой, описанной для получения соединения 31а. В качестве исходного материала этил 4-оксоциклогексан-1-карбоксилата заменил 1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-он. После обычной процедуры выделения продукта реакции остаток очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (8Р01®ТМ - Вю1аде; градиентное элюирование петролейным эфиром-этилацетатом в соотношении от 95 : 5 до 4 : 6), и получали указанное в заголовке соединение в виде бесцветного масла. Выход: 68,7%. М§: [М+Н]+ = 169,50.

3-Триметилсилилэтинил-8-этоксикарбонил-1-окса-2-азаспиро[4.51дек-2-ен (соединение 102Ь).

Указанное в заголовке соединение синтезировали с использованием вышеописанного способа для получения соединения 3 с, но заменив при этом соединение 3 а соединением 102а. Неочищенный продукт очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (15о1ега®ТМ - Вю1аде; градиентное элюирование петролейным эфиром-этилацетатом в соотношении от 98 : 2 до 40 : 60), и получали указанное в заголовке соединение в виде бесцветного масла. Выход: 49,3%. М§: [М+Н]+ = 308,55.

3- [(4-Хлор-2-пиридил)этинил] -8-этоксикарбонил-1-окса-2-азаспиро [4.5]дек-2-ен.

Указанное в заголовке соединение синтезировали в соответствии с процедурой, описанной для соединения примера 3, но заменив при этом соединение 102Ь соединением 3с. Остаток очищали методом хроматографии с обращенной фазой в автоматизированном режиме (15о1ега®ТМ - Вю1аде; жидк. NΗ₄ΗСО₃/ΑсСN 55:45), и получали указанное в заголовке соединение. Выход: 29%. М§: [М+Н^]+ = 327,16.

Ή-Ν^Κ: (СПС1₃, δ): 1.29 (ΐ, 3Н), 1.60-1.72 (т, 2Н) 1.74-1.84 (т, 2Н), 1.84-1.92 (т, 2Н), 2.09 (6ΐ, 2Н), 2.42-2.51 (т, 1Н), 2.62 (5, 3Н), 2.96 (5, 2Н), 4.17 (ц, 2Н), 7.20 (6, 1Н), 7.39 (6, 1Н), 7.63 (ί, 1Н).

Пример 103. 3 '-(3 -Хлорфенилэтинил)-1Н,4'Н-спиро [изохроман-4,5'-изоксазол].

4- Метиленизохроман (соединение 103а).

Указанное промежуточное соединение было получено в соответствии с процедурой, описанной для получения соединения 31а. В качестве исходного материала изохроман-4-он заменил 1,4-диоксаспиро [4.5]декан-8-он. После обычной процедуры выделения продукта реакции остаток очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (8Р01®ТМ - Вю1аде; градиентное элюирование петролейным эфиром-этилацетатом в соотношении от 1 : 0 до 0 : 1), и получали указанное в заголовке соединение в виде бесцветного масла. Выход: 69,8%. М§: [М+Н]+ = 146.19.

Ή-Ν^Κ: (СОС1₃, δ): 4.48 (5, 2Н) 4.84 (5, 2Н) 5.04 (5, 1Н) 5.63 (5, 1Н) 7.02 - 7.09 (т, 1Н) 7.22-7.28 (т, 2Н) 7.67-7.75 (т, 1Н).

3'-(3-Хлорфенилэтинил)-1Н,4'Н-спиро[изохроман-4,5'-изоксазол].

Указанное в заголовке соединение получали в соответствии с процедурой, описанной для соединения 3с, используя соединение 31£ вместо соединения 3Ь и соединение 103а вместо соединения 3а. После

- 42 023020 обычной процедуры выделения продукта реакции остаток очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (δΡ01®ΤΜ - Вю1аде; петролейный эфир - этилацетат в соотношении 97 : 3), а затем методом хроматографии с обращенной фазой в автоматизированном режиме (δΡ01®ΤΜ - Вю1аде; градиант водного NН₄НСОз/ΑсСN в соотношении от 40 : 60 до 20 : 80), и получали указанное в заголовке соединение. Выход: 15,8%. Μδ: [Μ+Н]⁴ = 323,78.

Ή-ΝΜΚ: (ϋΜδΟ-бб, δ): 3.36-3.43 (т, 1Н) 3.46-3.54 (т, 1Н) 3.86 (б, 1=12.0 Нг, 1Н) 3.96 (б, 1=12.0Нг, 1 Н) 4.69-4.77 (т, 1Н) 4.77-4.85 (т, 1Н) 7.11-7.18(т, 1Н) 7.31-7.38 (т, 2Н) 7.43-7.54 (т, 2Н) 7.56-7.62 (т, 2Н) 7.71 (ΐ, 1=1.7 Нг, 1Н).

Пример 104. 3-(3 -Хлорсренилэтинил) -7-(4-метил-1 -пиперазинилкарбонил) -1 -окса-2,7-диазаспиро [4.4]нон-2-ен.

К раствору соединения 27б (150 мг, 0,58 ммоль) в дихлорметане (10 мл) добавляли ΤΕΑ (0,248 мл, 1,73 ммоль), а затем 4-метил-1-пиперазинкарбонил хлорид (122 мг, 0,748 ммоль). Реакционную смесь постоянно перемешивали в течение 20 ч.

После выпаривания остаток очищали методом изократической хроматографии с обращенной фазой в автоматизированном режиме (δΡ01®ΤΜ - Вю1аде; NН₄НСОз/ΑсСN в соотношении 55: 45), и получали 91 мг указанного в заголовке соединения в виде масла с большим содержанием смолистых веществ. Выход: 49%. Μδ: [Μ+Н]⁴ = 357.44.

Ή-ΝΜΚ: (ϋΜδΟ-66, δ):ррт 1.98-2.15 (т, 2Н) 2.18 (5, 3Н) 2.22-2.37 (т, 4 Н) 3.08-3.17 (т, 2Н) 3.173.23 (т, 2Н) 3.23-3.41 (т, 3Н) 3.45 (б, 1=11.7 Нг, 1Н) 3.53 (ϊ6, 1=10.2, 7.0 Нг, 1Н) 3.60 (б, 1=12.0 Нг, 1Н) 7.46-7.53 (т, 1Н) 7.54-7.61 (т, 2Н) 7.66-7.71 (т, 1Н).

Пример 105. 3-(3 -Хлорфенилэтинил)-7-(2-оксо-1-имидазолидинилкарбонил)-1 -окса-2,7-диазаспиро [4.4]нон-2-ен.

Указанное в заголовке соединение синтезировали, используя способ, описанный для получения соединение примера 104, но заменив при этом 4-метил-1-пиперазинкарбонил хлорид 2-оксо-1имидазолиденкарбонил хлоридом. После выпаривания неочищенный продукт очищали методом флэшхроматографии в автоматизированном режиме (δΡ01®ΤΜ - В1о1аде; градиентный этилацетат-МеОН в соотношении от 95 : 5 до 8:2), и получали соединение в виде твердого вещества желтоватого цвета. Выход: 51,3%. Μδ: [Μ+Н]⁴ =373,3.

Ή-ΝΜΚ: (ΌΜδΟ-бь δ): ррт 2.04-2.23 (т, 2Н) 3.21-3.42 (т, 4Н) 3.49-3.79 (т, 6Н) 7.22 (5, 1Н) 7.467.53 (т, 1Н) 7.54-7.61 (т, 2Н) 7.66-7.71 (т, 1Н).

Пример 106. 3-(3 -Хлорфенилэтинил)-7-(1 -пирролидинилкарбонил)-1 -окса-2,7-диазаспиро [4.4]нон2-ен.

Указанное в заголовке соединение синтезировали, используя способ, описанный для получения соединения примера 104, но заменив при этом 4-метил-1-пиперазинкарбонил хлорид 1пирролидинилкарбонил хлоридом (97%). После обычной процедуры выделения продукта реакции неочищенный продукт очищали дважды методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме ^ΡΟ^ΤΜ^^Ε-ι^;; СНС1₃-МеОН/МН₃ в соотношении 100:0,5, затем 100:0,3,), и получали твердое вещество кремового цвета. Выход: 72,8%. Μδ: [Μ+Н]⁴ = 358,35.

Ή-ΝΜΚ: (СБС1_з, δ): 1.77-1.96 (т, 4 Н); 2.01 (6ϊ, 1=13.0, 9.2 Нг, 1Н); 2.32 (ббб, 1=12.9, 6.7, 3.2 Нг, 1Н); 3.13 (б, 1=17.1 Нг,1Н); 3.23 (б, 1=17.4 Нг, 1Н); 3.34-3.49 (т, 4Н); 3.58-3.65 (т, 1Н); 3.71 (5, 2Н); 3.663.76 (т, 1Н); 7.32 (ΐ, 1=8.1 Нг, 1Н); 7.37-7.45 (т, 2Н); 7.53 (ΐ, 1=1.7 Нг, 1Н).

Пример 107. 3-(3 -Хлорфенилэтинил) -7-пиперидинокарбонил-1 -окса-2,7-диазаспиро [4.4] нон-2-ен.

Указанное в заголовке соединение синтезировали, используя способ, описанный для получения соединения примера 104, но заменив при этом 4-метил-1-пиперазинкарбонил хлорид пиперидинокарбонил хлоридом. После обычной процедуры выделения продукта реакции неочищенный продукт очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (δΡ01®ΤΜ - Вю1аде; градиентное элюирование петролейным эфиром-этилацетатом в соотношении от 7 : 3 до 3 : 7), и получали масло желтоватого цвета. Выход: 37,4%. Μδ: [Μ+Н]⁴ = 372,3.

Ή-ΝΜΚ: (СВС1_з, δ): ррт 1.50-1.69 (т, 6Н) 1.99 (6ϊ, 1=13.0, 9.0 Нг, 1Н) 2.24-2.34 (т,1Н) 3.07-3.17 (т, 1Н) 3.17-3.33 (т, 5Н) 3.56 (ббб, 1=10.6, 8.2, 2.9 Нг, 1Н) 3.60-3.65 (т, 1Н) 3.65-3.72 (т, 1Н) 3.72-3.77 (т, 1Н) 7.32 (ΐ, 1=7.8 Нг, 1Н) 7.38-7.44 (т, 2Н)7.53Ц 1=1.7 Нг,1Н).

Пример 108. 3-(3 -Хлорфенилэтинил)-7-(3 -метилсульфонил-2-оксо-1 -имидазолидинилкарбонил)-1 окса-2,7-диазаспиро [4.4] нон-2-ен.

Указанное в заголовке соединение синтезировали, используя способ, описанный для получения соединения примера 104, но заменив при этом 4-метил-1-пиперазинкарбонил хлорид 3-мэтансульфонил-2оксо-1-имидазолидинилкарбонил хлоридом. После выпаривания неочищенный продукт очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (δΡ01®ΤΜ - Вю1аде; градиентное элюирование петролейным эфиром-этилацетатом в соотношении от 1 : 1 до 1 : 9), и получали твердое вещество серого цвета. Выход: 67,3%. Μδ: [Μ+Н]⁴ = 451,3.

Ή-ΝΜΚ: (СВС1_з, δ): ррт 2.08-2.23 (т, 1Н) 2.40 (бб, 1=13.0, 6.8 Нг, 1Н) 3.12-3.27 (т,2 Н) 3.34 (5, 3Н) 3.62 - 4.10 (т, 8Н) 7.33 (ΐ, 1=8.3 Нг, 1Н) 7.42 (ΐ, 1=6.6 Нг, 2Н) 7.53 (5, 1Н).

- 43 023020

Пример 109. 3-(3-Хлорфенилэтинил)-7-(Ы-этил-Н-изопропилкарбамоил)-1-окса-2,7-диазаспиро [4.4]нон-2-ен.

Раствор соединения 27ά (100 мг, 0,38 ммоль) и ΌΙΡΕΆ (0,074 мл, 0,07 ммоль)) в 4 мл ί'Ή₂Ο₂ добавляли по каплям в течение 45 мин при комнатной температуре в раствор трифозгена (39,9 мг, 0,13 ммоль) в СИ₂С1₂ (1 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 10 мин, затем его добавляли по каплям к раствору этилизопропиламина (0,070 мл, 0,576 ммоль) и ΌΙΡΕΆ (0,074 мл, 0,07 ммоль) в СИ₂С1₂ (1 мл). После выдерживания в течение ночи, реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении, и неочищенный продукт очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (δΡ01®ΤΜ - ΒίοΙα^ο; градиентное элюирование петролейным эфиром-этилацетатом в соотношении от 8 : 21 до 4 : 6), получая 25 мг в виде густого масла желтого цвета. Выход: 17,4%. Μδ: [Μ+Η]+ = 373,88.

Ή-ΝΜΚ: (СОС1₃, δ): 1.15 (ΐ, 1=7.1 Ηζ, 3Η) 1.19 (ά, ί=6.6 Ηζ, 3Η) 1.24 (ά, ί=6.6 Ηζ, 3Η) 2.02 (άΐ, 1=13.1, 9.1 Ηζ, 1Η) 2.26-2.36 (т, 1Η) 3.06 (άφ 1=14.2, 7.1 Ηζ, 1Η) 3.11-3.34 (т, 3Η) 3.54-3.62 (т, 1Η) 3.623.78 (т, 3Η) 3.96 (ρη, ί=6.7 Ηζ, 1Η) 7.29 -7.36 (т, 1Η) 7.41 (ΐ, ί=7.6 Ηζ, 2Η) 7.50-7.55 (т, 1Η).

Пример 110. 3-(3-Хлорфенилэтинил)-7-(Ы-метокси-М-метилкарбамоил)-1-окса-2,7-диазаспиро [4.4]нон-2-ен.

Указанное в заголовке соединение синтезировали, используя способ, описанный для получения соединения примера 104, но заменив при этом 4-метил-1-пиперазинкарбонил хлорид Ν-метокси-Ыметилкарбамоил хлоридом. После выпаривания неочищенный продукт очищали методом флэшхроматографии в автоматизированном режиме (δΡ01®ΤΜ - ΒίοΙα^ο; градиентное элюирование петролейным эфиром-этилацетатом в соотношении от 8 : 2 до 4 : 6), и получали твердое вещество слабо-желтого цвета. Выход: 54,1%. Μδ: [Μ+Η]+ = 348.3.

Ή-ΝΜΚ: (СОС1₃, δ): ррт 1.98-2.09 (т, 1Н) 2.34 (άάάά, 1=12.9, 6.6, 3.2, 1.5 Ηζ, 1Н) 3.06 (5, 3Н) 3.15 (ά, 1=17.4 Ηζ, 1Η) 3.23 (ά, 1=16.9 Ηζ, 1Η) 3.63 (5, 3Η) 3.67 (ά, 1=12.2 Ηζ, 1Η) 3.69-3.82 (т, 2Η) 3.85 (άά, 1=12.2, 1.5 Ηζ, 1Η) 7.30-7.35 (т, 1Η) 7.38-7.45 (т, 2Η)7.53(ΐ, ί=1.7Ηζ, 1Η).

Пример 111. 3-(3-Хлорфенилэтинил)-7-(4-пиридилкарбамоил)-1-окса-2,7-диазаспиро[4.4]нон-2-ен Указанное в заголовке соединение синтезировали, используя способ, описанный для получения соединения примера 109, но замещая этилизопропиламин 4-аминопиридином. После обычной процедуры выделения продукта реакции и выпаривания неочищенный продукт очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (δΡ01®ΤΜ - ΒίοΙα^ο; градиентный этилацетат -ΜβΟΗ/ΝΗ₃ с соотношением от 98:2 до 85:15), и получали твердое вещество слабо желтого цвета. Выход: 16,4%. Μδ: [М+Н]+ = 381,3.

Ή-ΝΜΚ: (СОС1₃, δ): ррт 2.20 (άΐ, 1=13.1, 9.4 Ηζ, 1Η) 2.43-2.54 (т, 1 Η) 3.16-3.25 (т, 1Η) 3.25-3.34 (т, 1Η) 3.70 (ά, 1=11.7 Ηζ, 1Η)3.77-3.86 (т, 2Η) 4.02 (ά, 1=10.5 Ηζ, 1Η) 7.30-7.37 (т, 1Η) 7.39-7.46 (т, 2Η) 7.50-7.57 (т, 1Η) 7.66 (ά, ί=5.6 Ηζ, 2Η) 8.40 (ά, 1=5.9 Ηζ, 2Η).

Пример 112. 3-(3-Хлорфенилэтинил)-7-этоксикарбонил-1-окса-2,7-диазаспиро[4.4]нон-2-ен.

Указанное в заголовке соединение синтезировали, используя способ, описанный для получения соединения пимера 104, но заменив при этом 4-метил-1-пиперазинкарбонил хлорид этил хлорформатом. После выпаривания неочищенный продукт очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (δΡ01®ΤΜ - ΒίοΙα^ο; градиентное элюирование петролейным эфиром-этилацетатом в соотношении от 9 : 1 до 1 : 1), и получали масло слабо-желтого цвета. Выход: 67,3%. Μδ: [Μ+Η]+ = 332,79.

Ή-ΝΜΚ: (ΌΜδΟ-ά₆, δ): 1.19 (ΐ, ί=6.7 Ηζ, 3Η) 2.15 (Ьг. 5., 2Η) 3.17-3.28 (т, 1 Η) 3.32-3.44 (т, 2Η) 3.44-3.63 (т, 3Η) 4.05 (φ ί=6.6 Ηζ, 2Η) 7.46-7.53 (т, 1Η) 7.54-7.60 (т, 2 Η) 7.68 (5, 1Η).

Пример 113. 3-[(6-метил-2-пиридил)этинил]-8,8-дифтор-1-окса-2-азаспиро[4.5]дек-2-ен.

3-Триметилсилилэтинил-8,8-дисфтор-1-окса-2-азаспиро[4.5]дек-2-ен (соединение 113а).

Указанное в заголовке соединение синтезировали с использованием способа, описанного выше, для получения соединения 3с, но при этом использовали соединение 90а вместо соединения 3а. После обычной процедуры выделения продукта реакции, неочищенный продукт очищали с использование автоматизированной системы флэш-хроматографии (Ηοήζοη®ΤΜ - ΒίοΙαβο). элюируя градиентом петролейного эфира - этилацетата в соотношении от 99 : 1 до 95 : 5.

Выход: 34,1%. 3-[(6-метил-2-пиридил)этинил]-8,8-дисфтор-1-окса-2-азаспиро[4.5]дек-2-ен.

Указанное в заголовке соединение получали, следуя процедуре, описанной для соединения примера 3, но заменив при этом соединение 3 с соединением 113а. После обычной процедуры выделения продукта реакции, неочищенный продукт очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (δΡ1®ΤΜ - ΒίοΙαβο; элюируя градиентом петролейного эфира - этилацетата в соотношении от 9 : 1 до 7 : 3), и получали указанный в заголовке продукт в виде твердого вещества желтого цвета. Выход: 36,5%. Μδ: [М+Н]+ = 291,39.

Ή-ΝΜΚ: (СОС1₃, δ): 1.78-1.94 (т, 2Н), 2.01-2.12 (т, 4Н), 2.12-2.35 (т, 2Н), 2.62 (5, 3Н), 2.98 (5, 2Н), 7.21 (ά, ί=7.8 Ηζ,1Η), 7.40 (ά, ί=7.6 Ηζ, 1Η), 7.64 (ΐ, ί=7.8 Ηζ, 1Η).

Пример 114. 3-(3-Хлорфенилэтинил)-1,7-диокса-2-азаспиро[4.3]окт-2-ен.

3-Метиленоксетан (соединение 114а).

Указанное в заголовке соединение получали в соответствии с методологией, описанной для получения соединения 28а, но заменив при этом 1-(Тбутоксикарбонил)-3-ацетидинон 3-оксетаноном. Неочи- 44 023020 щенный продукт реакции использовали при проведении следующего этапа без дальнейшей очистки.

3-(3 -Хлорфенилэтинил)-1,7-диокса-2-азаспиоо [4.3] окт-2-ен.

Указанное в заголовке соединение получали в соответствии с процедурой, описанной для соединения 3с, но при этом использовали соединение 31Г вместо соединения 3Ь и соединение 114а вместо соединения 3 а. После обычной процедуры выделения продукта реакции остаток очищали методом флэшхроматографии в автоматизированном режиме (8Р01®ТМ - В|о1аде; градиентное элюирование петролейным эфиром-этилацетатом в соотношении от 90:10 до 75:25), а затем методом хроматографии с обращенной фазой в автоматизированном режиме (8Р01®ТМ - Вю!аде; элюент водн. (ЯЩЦСОз 1,6 г/л - ЛсСИ 1:1), и получали указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества желтого цвета. Выход: 3,7% из 3-оксетанона. М8: [М+Η]® = 248,38.

Ή-Μ^Κ: (СПС1₃, δ): 3.49 (8, 2Н), 4.73 (й, 1=7.8 Ηζ, 2Η), 5.05 (й, 1=8.1 Ηζ, 2Η), 7.32 (ΐ, 1=7.8 Ηζ, 1Η), 7.38-7.44 (т, 2Η),7.50-7.55 (т, 1Η).

Пример 115. 3-(3-Хлорфенилэтинил)-1-окса-3-азаспиро[4.5]дек-2-ен.

Указанное в заголовке соединение получали в соответствии с процедурой, описанной для соединения 3с, используя соединение 31Г вместо соединения 3Ь и 1-метиленциклогексан вместо соединения 3а. После обычной процедуры выделения продукта реакции остаток очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (8Р01®ТМ - Вю!аде; градиентное элюирование петролейным эфиромэтилацетатом в соотношении от 1 : 0 до 9 : 1). Потребовалась дополнительная очистка для получения чистого указанного в заготовке соединения, которая была проведена градиентым петролейным эфиром ЕГ₂О в соотношении от 1 : 0 до 9 : 1. Выход: 90,5%. М8: [М+Η]® = 273,76.

Ή-Μ^Κ: (ГОМ8О-й₆, δ): 1.33-1.54 (т, 4Н) 1.54-1.73 (т, 6Н) 2.98 (8, 2Н) 7.48 (ΐ, 1=7.8 Ηζ, 1Η) 7.517.59 (т, 2Η) 7.66 (Г, 1=1.6 Ηζ, 1Η).

Пример 116. 3-(3-Хлорфенилэтинил)-8-дифторметилен-1-окса-2-азаспиро[4.5]дек-2-ен.

Раствор трис-диметиламинофосфина в 2,6 мл ангидридного ТГФ добавляли в атмосфере азота к раствору дибромдифторметана в 3,9 мл ангидридного ТГФ при 0°С в течение 15 мин. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин, и далее в нее по каплям добавляли раствор соединения примера 32 (0,275 г, 0,956 ммоль). После выдерживания в течение ночи раствор выпаривали, и остаток экстрагировали этилацетатом. Промывали водой, высушивали органический слой над Ыа₂8О₄, выпаривали в вакууме до сухого состояния и получали неочищенный продукт, который очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (ко1ега®ТМ - Вю!аде; градиентное элюирование петролейным эфиром-этилацетатом в соотношении от 95 : 5 до 8 : 2), и получали 52 мг указанного в заголовке соединения. Выход: 13,7%. М8: [М+Η]® = 322.20.

Ή-Μ^Κ: (ГОМ8О-й6, δ): 1.65-1.86 (т, 4Η), 2.11-2.30 (т, 4Η), 3.05 (8, 2Η), 7.49 (ΐ,Ι=7.3 Ηζ, 1Η), 7.527.60 (т, 2Η), 7.65-7.69 (т, 1Η).

Пример 117. 3-(3-Хлорфенилэтинил)-8-карбамоил-1-окса-2-азаспиро[4.5]дек-2-ен.

Указанное в заголовке соединение синтезировали с использованием способа, описанного для получения соединения примера 96, но заменив при этом соединение 27й соединением 22с. После обычной процедуры выделения продукта реакции неочищенный продукт очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (ко1ега®ТМ - Вю!аде; градиентное элюирование петролейным эфиромэтилацетатом в соотношении от 1 : 0 до 93 : 7), и получали указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества белого цвета. Выход: 76,9%. М8: [М+Н]+ = 318.25.

Ή-Μ^Κ: (ГОМ8О-й6, δ): 1.64-1.72 (т, 4Н) 3.06 (8, 2Н) 3.31-3.46 (т, 4Н) 5.98 (8, 2Н) 7.49 (Г, 1=8.1 Ηζ, 1Η) 7.53-7.59 (т, 2Η) 7.65-7.74 (т, 1Η).

Пример 118. 3-(3-Хлорфенилэтинил)-8-(2-фуроил)-1-окса-2,8-диазаспиро[4.5]дек-2-ен.

Указанное в заголовке соединение синтезировали с использованием способа, описанного для получения соединения примера 96, но заменив при этом соединение 27й соединением 22с и используя 2фуроил хлорид вместо метилизоцианата. После обычной процедуры выделения продукта реакции неочищенный продукт очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (ко1ега®ТМ

- ВюГаде; градиентное элюирование петролейным эфиром-этилацетатом в соотношении от 95 : 5 до 8 : 2), и получали 105 мг указанного в заголовке соединения. Выход: 60,2%. М8: [М+Η]® = 369,30.

Ή-Μ^Κ: (ГОМ8О-й6, δ): 1.84 (Г, 1=5.6 Ηζ, 4Η), 3.12 (8, 2Η), 3.66 (Ьг. 8., 2Η), 3.75-3.90 (т, 2Η), 6.63 (йй, 1=3.4, 1.7 Ηζ, 1Η), 7.00 (й, 1=3.4 Ηζ, 1Η), 7.49 (Г, 1=8.3 Ηζ, 1Η), 7.53-7.62 (т, 2Η), 7.68 (Г, 1=1.6 Ηζ, 1Η), 7.84 (й, 1=1.0 Ηζ, 1Η).

Пример 119. 3-(3-Хлорфенилэтинил)-8-(Ы-метокси-М-метилкарбамоил)-1-окса-2,8-диазаспиро[4.5] дек-2-ен.

Указанное в заголовке соединение синтезировали, используя способ, описанный для получения соединения примера 110, но заменив при этом соединение 27й соединением 22с. После выпаривания неочищенный продукт очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (ко1ега®ТМ

- ВюГаде; градиентное элюирование петролейным эфиром-этилацетатом в соотношении от 8 : 2 до 5 : 5), и получали масло слабо-желтого цвета. Выход: 74%. М8: [М+Η]® = 362.30.

Ή-Μ^Κ: (ОМ8О-й6, δ): 1.76 (Г, 1=5.6 Ηζ, 4Η), 2.84 (8, 3Η), 3.08 (8, 2 Η), 3.36-3.49 (т, 4Η), 3.54 (8,

- 45 023020

3Η), 7.49 (ΐ, 1=7.8 Ηζ, 1Η), 7.53 - 7.59 (т, 2Η), 7.67 (ΐ, .7=1.7 Ηζ, 1Η).

Пример 120. 3-(3-Хлорфенилэтинил)-8-диэтилкарбамоил-1-окса-2,8-диазаспиро[4.5]дек-2-ен.

Указанное в заголовке соединение синтезировали с использованием способа, описанного для получения соединения примера 96, но заменив при этом соединение 27й соединением 22с и метилизоцианат Ν,Ν-диэтилхлорформамидом. После обычной процедуры выделения продукта реакции неочищенный продукт очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (I5ο1е^а®ΤΜ - Вю1аде; градиентное элюирование петролейным эфиром-этилацетатом в соотношении от 8 : 2 до 6 : 4), и получали указанное в заголовке соединение. Выход: 47,1%. Μδ: [Μ+Η]+ =374,34.

Ή-ΝΜΚ: (ΙΑΙδΟί®. δ): 1.05 (ΐ, 1=7.0 Ηζ, 6Η), 1.75 (ΐ, 1=5.6 Ηζ, 4Η), 3.06 (5, 2Η), 3.08-3.17 (т, 6Η), 3.17-3.25 (т, 2Η), 7.49 (ΐ, 1=7.8 Ηζ, 1Η), 7.52-7.60 (т, 2Η), 7.65-7.69 (т, 1Η).

Пример 121. 3-(3-Хлорфенилэтинил)-8-(3-хлорбензоил)-1-окса-2,8-диазаспиро[4.5]дек-2-ен.

Указанное в заголовке соединение синтезировали с использованием способа, описанного для получения соединения примера 96, но заменив при этом соединение 27й соединением 22с и метилизоцианат 3-хлорбензоил хлоридом. После обычной процедуры выделения продукта реакции неочищенный продукт очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (I5ο1е^а®ΤΜ - Вю1аде; градиентное элюирование петролейным эфиром-этилацетатом в соотношении от 8 : 2 до 6 : 4), и получали 52 мг указанного в заголовке соединения в виде масла слабо-желтого цвета. Выход: 67,5%. Μδ: [М+Н]+ = 413,25.

Ή-ΝΜΚ: (ΙΑΙδΟί®. δ): 1.82 (Ъг. 5., 4Н), 3.10 (Ъг. 5., 2Η), 3.33-3.66 (т, 3Η), 3.83 (Ъг.5., 1Η), 7.36-7.41 (т, 1Η), 7.45-7.61 (т, 6Η), 7.67 (ΐ, 1=1.6 Ηζ, 1Η).

Пример 122. 3-(3-Хлорфенилэтинил)-8-этоксикарбонил-1-окса-2,8-диазаспиро[4.5]дек-2-ен.

Указанное в заголовке соединение синтезировали с использованием способа, описанного для получения соединения примера 112 , но замещая соединение 27й соединением 22с. После обычной процедуры выделения продукта реакции неочищенный продукт очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (I5ο1е^а®ΤΜ - В|о1аде; градиентное элюирование петролейным эфиромэтилацетатом в соотношении от 9 : 1 до 8 : 2), и получали указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества белого цвета. Выход: 62%. Μδ: [Μ+Η]+ = 347,27.

Ή-ΝΜΚ: (ΙΑΙδΟί®. δ): 1.19 (ΐ, 1=7.1 Ηζ, 3Η), 1.73 (ΐ, 1=5.7 Ηζ, 4Η), 3.07 (5, 2Η), 3.37-3.55 (т, 4 Η), 4.05 (ц, 1=7.1 Ηζ, 2Η), 7.49 (ΐ, 1=8.6 Ηζ, 1Η), 7.53-7.61 (т, 2Η), 7.67 (ΐ, 1=1.7 Ηζ, 1Η).

Пример 123. 3-(3-Хлорфенилэтинил)-8-(1-пирролидинилкарбонил)-1-окса-2,8-диазаспиро[4.5]дек-2ен.

Указанное в заголовке соединение синтезировали с использованием способа, описанного выше, для получения соединения примера 106, но замещая соединение 27с соединением 22й. После обычной процедуры выделения продукта реакции неочищенный продукт очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (I5ο1е^а®ΤΜ - В|о1аде; градиентное элюирование петролейным эфиромэтилацетатом в соотношении от 7 : 3 до 3 : 7), и получали 52 мг указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества слабо-желтого цвета. Выход: 72,6%. Μδ: [Μ+Η]+ = 372,42.

Ή-ΝΜΚ: (ΙΑΙδΟί®. δ): 1.67-1.83 (т, 8Η), 3.07 (5, 2Η), 3.15-3.29 (т, 8Η), 7.49 (ΐ, 1=7.8 Ηζ, 1Η), 7.527.61 (т, 2Η), 7.67 (ΐ, 1=1.7 Ηζ,1Η).

Пример 124. 3-(3-Хлорфенилэтинил)-8-диметилкарбамоил-1-окса-2,8-диазаспиро[4.5]дек-2-ен.

Указанное в заголовке соединение синтезировали с использованием способа, описанного для получения соединения примера 95, но замещая соединение 27с соединением 22й. После обычной процедуры выделения продукта реакции неочищенный продукт очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме 05о1ега®ΤΜ - В|о1аде; градиентное элюирование петролейным эфиром-этилацетатом в соотношении от 3 : 7 до 0 : 1), и получали указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества слабо-желтого цвета. Выход: 66,2%. Μδ: [Μ+Η]+ = 346,29.

Ή-ΝΜΚ: (ΙΑΙδΟί®. δ): 1.75 (ΐ, 1=5.5 Ηζ, 4 Η), 2.75 (5, 6 Η), 3.07 (5, 2 Η), 3.10 - 3.27 (т, 4 Η), 7.49 (ΐ, 1=7.6 Ηζ, 1 Η), 7.53 - 7.60 (т, 2 Η), 7.67 (ΐ, 1=1.6 Ηζ, 1 Η).

Пример 125. 3-(3-Хлорфенилэтинил)-8-(кбутоксикарбонил)-6-метокси-1-окса-2,8-диазаспиро[4.4] нон-2-ен.

1-(йБутоксикаобонил)-3-метокси-4-метиленпиоролидин (соединение 125а).

№ιΗ добавляли к раствору 1-(йбутоксикарбонил)-3-гидрокси-4-метиленпирролидина (0,257 г, 1,29 ммоль) (полученного в соответствии с описанием, приведенным в Ь А1сага/ ей а1., Огдатс Ьейег5, 2001, уо1. 3, по. 25, р. 4051 - 4054) в 8 мл ТГФ, перемешиваемого при комнатной температуре в атмосфере азота. Спустя 0,5 ч после перемешивания при комнатной температуре добавляли метил йодид (0,057 г, 1,42 ммоль) и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. После выдерживания в течение ночи реакционную смесь быстро охлаждали водой. Реакционную смесь экстрагировали этилацетатом и экстракты промывали рассолом, высушивали над Ыа^О₄, выпаривали до сухого состояния и получали неочищенный продукт, который очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (δΡ01®ΤΜ - В|о1аде; градиентное элюирование петролейным эфиром-этилацетатом в соотношении от 9 : 1 до 7 : 3), и получали 165 мг указанного в заголовке соединения. Выход: 60%. Μδ:

- 46 023020 [Μ+НЦ = 391,42.

3-(3-Хлорфенилэтинил)-8-(Ьбутоксикарбонил)-6-метокси-1-окса-2,8-диазаспиро[4.4]нон-2-ен.

Указанное в заголовке соединение получали в соответствии с процедурой, описанной для соединения 3с, используя соединение 31Г вместо соединения 3Ъ и соединение 125а вместо соединения 3а. После обычной процедуры выделения продукта реакции остаток очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (Iкο1е^а®ТΜ - Вю1аде; градиентное элюирование петролейным эфиромэтилацетатом в соотношении от 8 : 2 до 1 : 1), и получалиуказанное в заголовке соединение в виде твердого вещества слабо-желтого цвета. Выход: 67,6%. Μ8: [М+Н]+ = 391,42.

Ή-ΝΜΚ: (1)\18О-с1... δ): 1.42 (к, 9Н), 3.22-3.28 (ш, 1Н), 3.33 (к, 3Н), 3.35-3.57 (т, 5Н), 3.75 (Ъг. к., 1Н), 7.50 (ΐ, 1=7.6 Нг, 1Н), 7.54-7.61 (ш, 2Н), 7.70 (ΐ, 1=1.6 Нг, 1Н).

Пример 126. 3-(3-Хлорфенилэтинил)-8-этоксикарбонил-6-метокси-1-окса-2,8-диазаспиро[4.4]нон-2ен.

3-(3-Хлорфенилэтинил)-6-метокси-1-окса-2,8-диазаспиоо[4.4]нон-2-ен (соединение 126а).

Указанное в заголовке соединение синтезировали с использованием способа, описанного выше, для получения соединения 1с, но заменив при этом соединение 1Ъ соединением примера 125 и используя хлорформ в качестве растворителя. Неочищенный остаток использовали без дальнейшей очистки при проведении следующей реакции. Μ8:[Μ+Н]⁺ = 291,24.

-(3 -Хлорфенилэтинил)-8-этоксикарбонил-6-метокси-1 -окса-2,8-диазаспиро [4.4]нон-2-ен.

Указанное в заголовке соединение синтезировали с использованием способа, описанного выше, для получения соединения примера 104, но заменив при этом соединение 27б соединением 126а и 4-метил-1пиперазинкарбонил хлорид этил хлорформатом. После обычной процедуры выделения продукта реакции неочищенный продукт очищали методом флэш-хроматографии в автоматизированном режиме (8Р01®ТΜ - Вю!аде; градиентное элюирование петролейным эфиром-этилацетатом в соотношении от 8 : 2 до 1 : 1), и получали указанное в заголовке соединение. Выход: 52,6%. Μ8: [Μ+Н]⁴ = 363,43.

Ή-ΝΜΚ: (ΟΌΟ1₃,δ): 1.29 (д, 1=6.6 Нг, 3Н), 3.00 (бб, 1=17.9, 12.5 Нг, 1Н), 3.42 (к, 3Н), 3.50-3.84 (т, 6 Н), 4.12-4.23 (ш, 2Н), 7.33 (ΐ, 1=7.6 Нг, 1Н), 7.38-7.45 (т, 2Н), 7.54 (ΐ, 1=1.5 Нг, 1Н).

Пример 127. Сродство выбранных антагонистов к метаботропным глутаматным рецепторам 5-го подтипа

Радиолигандный анализ в метаботропных глутаматных рецепторах 5-го подтипа в мозгу крыс.

Способы.

a) Получение мембран: самцов крыс линии Спраг Доули (200-300 г, СЬаг1ек Ркег. Италия) умерщвляли смещением шейных позвонков и передний мозг (кора головного мозга, стриатум и гиппокамп) гомогенизировали (2x20 с) в 50 объемах холодного 50 мМ трис-буфера при значении рН 7,4, используя гомогенизатор РоЫтоп (Кшетайса). Гомогенаты центрифугировали при 48000хд в течение 15 мин, ресуспендировали в 50 объемах того же самого буфера, инкубировали при 37°С в течение 15 мин, центрифугировали и ресуспендировали еще два раза. Полученные сгустки клеток замораживали и хранили при -80°С до их применения.

b) Анализ связывания: сгустки клеток, полученные из переднего мозга крыс, ресуспендировали в 100 объемах 20 мМ НΕРΕ8, 2 мМ ΜдС1₂, 2 мМ СаС1₂ при значении рН 7,4. Мембраны инкубировали в конечном объеме 1 мл в течение 60 мин при 25°С с 4 нМ [³Н] МРЕР при отсутствии или наличии конкурирующих лекарственных средств. Неспецифическое связывание определяли в присутствии 10 мкМ МРЕР (8роогеп еΐ а/., Тгепбк РЬагтасо1 8сг 22, 331-337, 2001). Инкубирование прекращали добавлением холодного трис-буфера при значении рН 7,4 и быстрым фильтрованием через РШегта! 1204-401 (^а11ас) фильтры, предварительно обработанные 0,5% полиэтиленимином. Затем фильтры промывали холодным буфером, и методом жидкостно-сцинтилляционной спектрометрии проводили расчет радиоактивности на фильтрах.

c) Анализ данных: было проанализировано ингибирование специфического связывания радиолигандов протестированными соединениями для оценки значения 50% ингибирующей концентрации (Κ\₀). используя программное обеспечение нелинейной аппроксимации кривой по точкам Рпкт 4.0 (СгарЬраб, 8ап 01едо. ΟΑ). Значение Κ\₀ было преобразовано в аффинную константу (Κι) с помощью уравнения СЬепд & РтикоГГ (СЬепг, У.С.& РтикоГГ, Н. ВюсЬет. РЬагшасо1. 22, 3099-3108, 1973).

Результаты.

Сродство (Κι) соединений настоящего изобретения к метаботропным глутаматным рецепторам 5-го подтипа находится в интервале от 0,1 до 1000 нМ. Например, соединение примера 12 имеет Κι, составляющую 3,88 нМ, и соединение примера 110 имеет Κι, составляющую 1,49 нМ.

Пример 128. Сродство выбранных антагонистов к метаботропным глутаматным рецепторам 1-го подтипа.

Радиолигандный анализ в метаботропных глутаматных рецепторах 1-го подтипа в мозгу крыс.

Способы.

а) Получение мембран: самцов крыс линии Спраг Доули (200-300 г, СЬаг1ек Ркег. Италия) умерщвляли смещением шейных позвонков и мозжечок гомогенизировали (2x20 с) в 50 объемах холодного 50

- 47 023020 мМ трис-буфера при значении рН 7,4, используя гомогенизатор Ρο1ίίΓοη (Κ^ηетаί^са). Гомогенаты центрифугировали при 48000/д в течение 15 мин, ресуспендировали в 50 объемах того же самого буфера, инкубировали при 37°С в течение 15 мин, центрифугировали и ресуспендировали еще два раза. Полученные сгустки клеток замораживали и хранили при -80°С до их применения.

b) Анализ связывания: сгустки клеток, полученные из мозжечка крыс ресуспендировали в 50 мМ Τγι5, 1,2 мМ Μ§Ο₂. 2 мМ СаС1₂ при значении рН 7,4: мембраны инкубировали в конечном объеме 1 мл в течение 30 мин при 0°С с 1,5 нМ [³Н] Κ214127 при отсутствии или наличии конкурирующих лекарственных средств. Неспецифическое связывание определяли в присутствии 1 мкМ Κ214127 (ΕανΓον5οη Η с( α1. Μο1. Ρ1ιαπηααο1. 63:1082-1093, 2003). Инкубирование прекращали добавлением холодного Τή5 буфера при значении рН 7,4 и быстрым фильтрованием через НЬеткЦ 1204-401 (\να11;κ) фильтры, предварительно обработанные 0,5% полиэтиленимином. Затем фильтры промывали холодным буфером, и методом жидкостно-сцинтилляционной спектрометрии проводили расчет радиоактивности на фильтрах.

c) Анализ данных: было проанализировано ингибирование специфического связывания радиолигандов протестированными соединениями для оценки значения 50% ингибирующей концентрации (1С₅₀). используя программное обеспечение нелинейной аппроксимации кривой по точкам Ρπ5ΐη 4.0 (ΌπιρΙψίΛ δαη Ωίοβο, СА). Значение 1С₅₀ было преобразовано в аффинную константу (Κι) с помощью уравнения СТеид & Ργιι5οΓΓ (СЬет, У.С.& Ρπ.ΐ5οΓΓ, ν.Η. БюсЬет. ΡΜ^αεοΕ 22, 3099-3108, 1973).

Результаты.

Сродство соединений настоящего изобретения к рецептору тС1и1 по меньшей мере в 10 раз ниже по сравнению с их сродством к метаботропным глутаматным рецепторам 5-го подтипа.

Пример 129. Сродство выбранных антагонистов к подтипам рецепторов группы II (тС1и2+ тС1и3).

Радиолигандный анализ в метаботропных глутаматных рецепторах группы II в мозгу крыс.

Способы.

a) Получение мембран: самцов крыс линии Спраг Доули (200-300 г, СМг1е5 РАег, Италия) умерщвляли смещением шейных позвонков и передний мозг (кора головного мозга, стриатум и гиппокамп) гомогенизировали (2/20 с) в 50 объемах холодного 50 мМ Τή5 буфера при значении рН 7,4, используя гомогенизатор Ρο1ίίτοη (Κ^ηетаί^са). Гомогенаты центрифугировали при 48000/д в течение 15 мин, ресуспендировали в 50 объемах того же самого буфера, инкубировали при 37°С в течение 15 мин, центрифугировали и ресуспендировали еще два раза. Полученные сгустки клеток замораживали и хранили при 80°С до их применения.

b) Анализ связывания: сгустки клеток переднего мозга промывали три раза охлажденным до нуля градусов аналитическим буферным раствором (10 мМ фосфата калия + 100 нМ бромида калия, значение рН 7,6). Конечные сгустки клеток ресуспендировали в 200 объемах аналитического буферного раствора, и мембраны инкубировали в конечном объеме 1 мл в течение 30 мин при 0°С с 1 нМ [³Η]ΕΥ341495 при отсутствии или наличии конкурирующих лекарственных средств. Неспецифическое связывание определяли в присутствии 1 мМ 1-глутамата (\νπ§1ιΙ Κ.Α. еί α1. I. Ρ1ιαπη;κο1. Εχρ. ΤΜη 298:453-460, 2001: Μиίе1 V еί α1. ЕИеигосЬет. 75, 2590-2601, 2000). Инкубирование прекращали добавлением холодного трисбуфера при значении рН 7,4 и быстрым фильтрованием через РШегтгЦ 1204-401 (^Шс) фильтры, предварительно обработанные 0,5% полиэтиленимином. Затем фильтры промывали холодным буфером, и методом жидкостно-сцинтилляционной спектрометрии проводили расчет радиоактивности на фильтрах.

с) Анализ данных: было проанализировано ингибирование специфического связывания радиолигандов протестированными соединениями для оценки значения 50% ингибирующей концентрации ДС^о), используя программное обеспечение нелинейной аппроксимации кривой по точкам Ρπ5ΐη 4.0 (ΌπιρΙιρίΛ δαη ^^едο. СА). Значение Ю50 было преобразовано в аффинную константу (Κι) с помощью уравнения СТеид & Ργιι5οΓΓ (СЬемд, ΥΌ.& Ρπ.ΐ5οΓΓ, ν.Η. ΒίοΗκιη. ΡΜ^α^1. 22, 3099-3108, 1973).

Результаты.

Соединения настоящего изобретения не оказывали негативного влияния на связывание [³Η]ΕΥ341495 с метаботропными глутаматными рецепторами группы II (тС1и2+ тС1и3) до 1000 нМ.

Пример 130. Определение функциональной активности в метаботропных глутаматных рецепторах 5-го подтипа в виде накопления инозитолфосфата квискваловая кислота.

Для определения механизма действия (агониста, антагониста или обратного агониста) исследуемого соединения в метаботропных глутаматных рецепторах 5-го подтипа проводили сравнение концентрационной зависимости стимулирования выработки инозитолфосфата в ответ на агонист (глутаматная или квискваловая кислота) при отсутствии и наличии различных концентраций исследуемых соединений как таковых, определенных в клетках, экспрессирующих метаботропный глутаматный рецептор 5-го подтипа.

Клетки были предварительно инкубированы с ферментом, разрушающим глутамат (1И/мл глютамат-пируват трансминаза), и 2 мМ пирувата с целью предотвращения возможного действия глутамата, высвобождаемого из клеток.

Далее стимулирование было проведено в среде, содержащей 10 мМ ЫС1, и приводилось исследование на агонистическую активность агониста (глутаматная или квискваловая кислота) или соединений

- 48 023020 при различных концентрациях.

При исследовании агонистической активности исследуемые соединения добавляли к клеточным культурам за 20 мин до добавления агониста и далее проводили инкубирование в присутствии агониста.

Инкубирование прекращали путем добавления охлажденной до нуля градусов перхлорной кислоты, далее образца нейтрализовали, центрифугировали и надосадочную жидкость использовали для определения накопления инозитолфосфата, применив метод анализа Вюкак для определения И-мио-инозитол 1,4,5-трифосфата (Атег5кат Вю5аепсе5). Ό-мио-инозитол 1,4,5-трисфосфат (ΓΡ₃) может быть измерен в диапазоне 0,19-25 ммоль (0,08-10,5 нг) на пробирку. При проведении анализа немеченый ГР₃ конкурирует с постоянным количеством [³Н]-меченного ГР₃ за ограниченное количество бычьих адреналовых ГР₃связующих белков. Далее связанный ГР₃ отделяют от свободного ГР₃ центрифугированием, в результате чего связывающий белок перемещается на дно пробирки. Далее свободный ГР₃ в надосадочной жидкости может быть удален путем простого декантирования, в результате чего связанная фракция прилипает к стенке пробирки.

Измерение радиоактивности в пробирке позволяет определить количество немеченого ГР₃ в образце путем интерполяции стандартной кривой.

ЕС50ЛС50 определяли путем проведения анализа нелинейной регрессии с использованием программного обеспечения Рп5т 4.0 (Огаркраб, δаη И1едо, СА).

Результаты.

Соединения настоящего изобретения продемонстрировали антагонистическую активность.

Пример 131. Воздействие на цистометрию бодрствующих крыс.

Способы.

Были использованы самцы крыс линии Спраг Доули [Сг1: СИ®(δΌ) №δ В^ с весом тела 300-400 г, поставляемые компанией Скаг1е5 Ргуег кака. Животные содержались при свободном доступе к пище и воде и при принудительном 12-чом цикле света-темноты при температуре 22-24°С за исключением периода времени, в течение которого проводился эксперимент. С целью проведения количественной оценки уродинамических параметров у бодрствующих крыс были проведены цистометрографические исследования в соответствии с ранее опубликованной методологией (Оиагпеп е1 а1., Ркагтасо1. Ве5. 24: 175, 1991).

Схематически крыс анестезировали путем интраперитонеального введения 3 мл/кг раствора Ес|иккеп5ш (пентобарбитал - 30 мг/кг и хлоралгидрат 125 мг/кг) и укладывали в положении лежа на спине. В обритой и очищенной абдоминальной стенке делали срединный разрез длиной приблизительно 10 мм. Мочевой пузырь осторожно освобождали от прилегающих тканей, опорожняли, а затем канюлировали через разрез в теле мочевого пузыря, используя полиэтиленовую канюлю (внутренний диаметр - 0,58 мм, внешний диаметр - 0,96 мм), который прочно зашивали шелковой ниткой. Канюлю выводили на поверхность тела через подкожный канал в ретрокапсулярной области, где она была соединена с пластиковым адаптером во избежание риска ее удаления животным. Для исследования лекарственного средства крыс использовали день спустя после имплантации.

В день проведения эксперимента крыс помещали в модифицированные клетки Во11тап, т.е., в клетки для иммобилизации, которые были достаточно большими, чтобы позволить крысам принять нормальную скорченную позу, но достаточно узкими, чтобы позволить животным перевернуться. После стабилизационного периода, составлявшего приблизительно 20 мин, свободный конец канюли мочевого пузыря был соединен через Т-образную трубку с датчиком давления (δΙ;·ι11ι;·ιιη Р23ХБ) и с перистальтическим насосом (ОЙ5оп Μ^η^ри15 2) для непрерывной инфузии теплого (37°С) физиологического раствора в мочевой пузырь при постоянном расходе 0,1 мл/мин. Во время инфузии физиологического раствора в мочевой пузырь сигнал интралюминального давления (цистометрограмма) постоянно регистрировали на полиграфе (Рес118гарк-8К δаη-е^ с усилителем ВМ614/2 компании Вюшбюа Μаη§οη^) или сохраняли в памяти ПК с помощью системы сбора данных (программное обеспечение Ро^егБаЬ.СкаП 4, АО кМгитеп15). По данным цистограммы определяли емкость мочевого пузыря. Емкость мочевого пузыря (в мл) определяется как объем физиологического раствора, введенного в мочевой пузырь, необходимого для вызывания сокращения детрузора после мочеиспускания. Исходное значение емкости мочевого пузыря определяли как среднее значений, наблюдаемых на цистометрограммах, записанных в течение начального периода, составляющего 30-60 мин. На этой стадии проведения анализа прекращали инфузию физиологического раствора и перорально вводили через желудочный зонд исследуемые соединения. Возобновляли введение физиологического раствора в мочевой пузырь и определяли изменения емкости мочевого пузыря, исходя из средних значений, полученных на цистометрограммах и регистрируемых в течение 1, 2, и 3 ч после лечения. Соединения вводили в объеме 2 мл/кг. Группы контрольных животных получали то же самое количество плацебо, соответствующего раствору 0,5% метоцела в воде.

При данных условиях проведения исследования определение емкости мочевого пузыря эквивалентно определению интервала времени между мочеиспусканиями.

Статистический анализ.

В каждой экспериментальной группе насчитывалось 4-11 животных. Все данные были выражены

- 49 023020 как стандартная ошибка среднего ±. В отношении каждого значения крыса/время проводили оценку процентного изменения емкости мочевого пузыря по отношению к исходному значению, а также значения Δ (разница в мл) емкости мочевого пузыря (емкость мочевого пузыря в момент времени х минус исходное значение). В цифровом выражении данные приведены как процент изменения по отношению к исходному значению.

Статистический анализ значений емкости мочевого пузыря, а также значений Δ был проведен с использованием программного обеспечения δ.Α.δ./δΤΑΤ, версия 6.12. Разница между эффектом плацебо и эффектом активного лечения была определена по значениям Δ емкости мочевого пузыря, в то время как разница между значениями в различные интервалы времени по отношению к исходным значениям была определена по данным первоначальной емкости мочевого пузыря.

Результаты.

Соединение в соответствии с настоящим изобретением, вводимое перорально при объеме от 0,1 до 10 мг/кг, подтвердило свою эффективность в увеличении емкости мочевого пузыря.

Вводимое перорально эталонное соединение МТЕР 3-[(2-метил-1,3-тиазол-4-ил)этинил]пиридин при дозе 1 мг/кг продемонстрировало лишь незначительное увеличение емкости мочевого пузыря, в то время как доза 3 мг/кг вызвала устойчивое увеличение указанного параметра, что привело к статистически значимому отличию от группы животных, получавших плацебо спустя 3 ч после проведения лечения.

Активность соединений в соответствии с настоящим изобретением и эталонного стандарта была выражена в виде минимальной эффективной дозы (т.е. минимальной эффективной дозы, вызывающей статистически значимое увеличение емкости мочевого пузыря). Для МТЕР минимальная эффективная доза составила 3. Для ряда соединений в соответствии с настоящим изобретением минимальная эффективная доза была равной или более высокой. Например, для соединения в примере 78 минимальная эффективная доза составила 3.

Пример 132. Экстравазаиия плазмы в твёрдой мозговой оболочке крыс, вызванная электрической стимуляцией тригеминальных ганглий.

Электрическая стимуляция тригеминальный ганглий вызывает воспаление в твердой мозговой оболочке, приводящее к экстравазации плазмы. Указанная животная модель является широко используемой для тестирования лекарственных средств, применимых при лечении мигрени.

Самцов крыс линии \У151аг с весом тела 175-190 г анестезировали интраперитонеально пентобарбиталом 50 мг/кг и канюлизировали яремную вену для инъецирования лекарственных средств. Животных помещали в стереотаксическую раму. Просверливали симметричные отверстия сбоку на расстоянии 3,0 мм и сзади 3,2 мм от брегмы и вводили электроды на расстоянии 9,5 мм от твердой мозговой оболочки. Исследуемое соединение или раствор контрольного носителя вводили внутривенно за 10 мин до электрической стимуляции правого тригеминального ганглия (5 мин; 2,0 мА, 5 Гц; длительность 5 мс) и вводили голубой эванс (30 мг/кг внутривенно) за 5 мин до электрической стимуляции в качестве маркера экстравазации белка плазмы. Спустя 15 мин после завершения периода стимуляции животных перфузировали 50 мл физиологического раствора через левый желудочек сердца для удаления интраваскулярного голубого эванса. Твердую мозговую оболочку удаляли, промокали насухо и взвешивали. Голубой эванс экстрагировали из тканей в 0,3 мл формамида при 50°С в течение 24 ч. Концентрации красителя измеряли спектрофотометром при длине волны 620 нм, интерполировали на стандартной кривой и выражали в виде содержания голубого аванса в нг/мг веса тканей.

Экстравазация выражена в виде показателя, рассчитанного путем деления содержания голубого аванса в стимулированной стороне на содержание голубого аванса в нестимулированной стороне.

Пример 133. Модель гастроэзофагеальнорефлюксной болезни у собак.

Собакам породы Веад1е проводилась постоянная эзофагостомия для введения манометрического катетера и рН зонда и их пропускания через пищевод и желудок.

После регистрации исходного давления нижнего эзофагиального сфинктера и желудка внутривенно вводили исследуемые соединения и контрольный растворитель.

Транзиторные релаксации нижнего эзофагиального сфинктера и кислотный рефлюкс вызываются введением подкисленной еды, после чего проводили раздувание желудка с использованием перистальтического насоса, подающего воздух при расходе 40 мл/мин в соответствии с δΡιΙ^^Γβ I апб ЬеЬтапп А., (№игода51гоеп1его1. Μоί. (1999) 11: 125-132). Активные соединения дозозависимо снижают транзиторные релаксации нижнего эзофагиального сфинктера и транзиторные релаксации нижнего эзофагиального сфинктера, связанные с кислотным рефлюксом. Активность определяют в виде процентного ингибирования обоих параметров по сравнению с контрольным носителем.

Пример 134. Конфликтный тест Фогеля на крысах.

Способ, позволяющий обнаруживать анксиолитическую активность, осуществляют в соответствии со способом, описанным Уоде1 еί а1. Аихю1уЬс5 шсгеа5е риш5Йеб бппктд (Уоде1 ЬК., Веег В., С1обу Ό.Ε. Α δίιηρΚ апб КейаЬ1е СопПЫ Ριγ^6ιιιό Гог Τе5ί^пд АпИ-Лп\1е1у АдепК Ρ5ускорка^тасо1од^а. 21, 1-7, 1971).

- 50 023020

Крыс лишали воды в течение приблизительно 48 ч и затем их помещали по отдельности в прозрачные плексигласовые контейнеры (15x32x34 см), при этом пол контейнеров выполнен из прутков из нержавеющей стали (0,4 см), расположенных на расстоянии 1 см друг от друга. Задняя стенка контейнера была выполнена из непрозрачного плексигласа, который скрывал наблюдателя от экспериментального животного. В центре противоположной стенки в 5 см над полом в клетку был проведен металлический носик для подачи воды, который был соединен с одним полюсом электрошокового генератора. Другой полюс электрошокового генератора был соединен с металлическим решетчатым полом.

Крысе позволяли исследовать клетку до тех пор, пока она не находила носик для подачи воды. Далее каждый раз, когда крыса пила воду, она получала слабый электрический удар (1,7 мА, 1 с) спустя 2 с после того, как она начинала лакать воду. Количество наказуемых утолений жажды подсчитывали при проведении 3-минутного теста. Тест проводили как слепой тест.

Исследуемые соединения вводили перорально за 60 мин до проведения теста и сравнивали с результатами контрольной группы, получавшей носитель.

Пример 135. Оперантное обучение по самовведению алкоголя.

Способ использовали для оценки модели наркотической зависимости и обнаружения активности соединений в соответствии с настоящим изобретением в целях предотвращения такого поведения.

Крыс обучали пероральному самовведению этанола, используя модификацию обучающего протокола, ранее описанного δат5оη (1986). Крыс лишали воды в течение 12 ч до сеансов обучения на протяжении трех дней, и обучали их реагировать на каплю объемом 0,1-мл 0,2% (мас./об.) раствора сахарина, нажимая на оба рычага при схеме подкреплений в режиме ΡΚ1. После проведения указанного начального обучения отменяли ограничение приема жидкости, и животные имели свободный доступ к еде и воде в своих клетках в течение всего последующего периода обучения и тестирования. С крысами, которые не имели ограничений приема жидкости, проводили два дополнительных сеанса обучения с приемом раствора сахарина для подтверждения того, что они усвоили реакцию на сахарин до начала проведения обучения по самовведению этанола. Далее, в течение следующих трех сеансов обучения при ответной реакции путем нажатия на правый рычаг в клетку подавали 0,1 мл 5% (вес./об.) этанола + 0,2% раствор сахарина. Ответные реакции нажатием на левый рычаг регистрировались, однако они не имели запрограммированных последствий. Впоследствии, сначала увеличивали концентрацию этанола до 8%, а затем до 10% (отношение массы к объему), а концентрацию сахарина снижали до тех пор, пока сахарин не был полностью исключен из раствора для питья.

Конечная схема подкреплений в отношении 10% концентрации (отношении массы к объему) была аналогичной схеме обучения, за исключением того, что был добавлен световой сигнал возбуждения. Таким образом, при проведении 30-минутного сеанса обучения ответные реакции на активный рычаг приводили к подаче 0,1 мл этанола и, кроме того, к включению светового сигнала возбуждения в течение 3-х с. Левый рычаг оставался незадействованным. После того, как крысы достигали стабильного самовведения этанола при указанных условиях, было проведено изучение воздействия исследуемых соединений после интраперитонеального введения на самовведение этанола. Агонисты вводили за 30 мин до начала сеанса самовведения.

Пример 136. Эксперимент с использованием модели нейропатической боли Беннета на крысах Способ, обеспечивающий обнаружение аналгетической активности у крыс с нейропатической болью, соответствует способу, описанному Веппе!! и Х1е (Вейлей С.Р. Х1е Υ.Κ., Α репрйега1 Μоηоηеи^ораίЬу ίη га! 1йа1 ргобисе5 б15огбег5 о£ Ρηίη δеη5а!^оη Пке !йо5е 5ееп ίη тап, Ρηίη, 33, 87 -107, 1988).

Хроническая компрессия общего седалищного нерва у крыс связана с повышенной болевой чувствительностью, аллодинией и спонтанной болью и, таким образом, образует модель периферийной нейропатической боли у человека. Антигипералгезики уменьшают указанные хронические симптомы гиперчувствительность к боли.

Крыс (150-200 г) анестезировали (пентобарбитал натрия - 40 мг/кг интраперитонеально) и выполняли разрез на уровне середины бедра для обнажения общего левого седалищного нерва. Четыре лигатуры, расположенные на расстоянии 1 мм друг от друга, были неплотно наложены вокруг седалищного нерва. Затем рану зашивали. В течение определенного периода мыши выздоравливали. Спустя одну неделю после проведения операции, когда полностью развивалось состояние хронической боли, задние лапы крыс поочередно подвергали тактильному и тепловому раздражению.

Для создания тактильного раздражения животное помещали под перевернутую коробку из акрилового пластика (17x11x14 см), установленную на решетчатом полу. Наконечником электронного зонда Уоп Ргеу воздействовали с увеличением давления на невоспаленную и воспаленную задние лапы, и автоматически регистрировали давление, вызывающее отдёргивание лапы. Указанную процедуру проводили 3 раза и рассчитывали среднее давление на лапу.

Для создания теплового раздражения использовали аппарат, включающий отдельные коробки из акрилового пластика (17x11x14 см), установленные на приподнятом стеклянном полу. Крысу помещали в коробку для привыкания к условиям в течение 10 мин. Затем, сначала фокусировали мобильный источник инфракрасного излучения (96±10 мВт/см²) под непораженной, а затем под пораженной задней лапой,

- 51 023020 и автоматически проводилась регистрация латентности отдергивания лапы. С целью предотвращения повреждения ткани тепловой источник автоматически отключался после 45 с работы.

До проведения медикаментозного лечения задние лапы всех животных подвергали тактильному раздражению, и все животные распределялись по лечебным группам в зависимости от реакции на боль пораженной задней лапы.

Исследования проводили на группах, включающих 8 крыс. Эксперимент проводился вслепую.

Исследуемые соединения вводили перорально за 60 мин до проведения эксперимента, и результаты сравнивали с результатами контрольной группы крыс, получавших носитель (0,5% карбоксиметилцеллюлозу (СМС) в дистиллированной воде).

Пример 137. Лимбический эпилептогенез в мышиной модели белок синдрома ломкой Xхромосомы.

Белок синдрома ломкой Х-хромосомы (РМКР) играет важную роль в суппрессии лимбического эпилептогенеза и позволяет спрогнозировать, что повышенная чувствительность пациентов с синдромом ломкой Х-хромосомы к эпилепсии является прямым следствием исчезновения важного гомеостатического фактора, ослабляющего восприимчивость к избыточному нервному возбуждению.

Эксперименты по провоцированию припадков были проведены на мутантных мышах РМК1 (мыши с выключенным геном, характеризующиеся пониженной экспрессией тО1иК5) в течение световой фазы цикла, воздействующего на взрослых 12-недельных мышей.

Скрученный биполярный электрод имплантировали в правую миндалину (координаты: 2,9 мм сбоку и 1,2 мм сзади от брегмы, 4,6 мм ниже твердой мозговой оболочки) животных, находящихся под анестезией пентобарбиталом (60 мг/кг). Животные выздоравливали в течение 10 дней. Определяли электрографический судорожный порог (Е8Т) для каждой отдельной мыши, подавая 1-секундную серию 1-мс двухфазных прямоугольных импульсов частотой 60 Гц, начиная с 50 ΙΑ. Создавали дополнительное раздражение, увеличивающееся на 10 ΙΑ с 2-минутным интервалом до тех пор, пока не вызывали электрографический судорожный порог, длящийся, по меньшей мере, 5 с. В последующем раздражения при интенсивности электрографического судорожного порога создавали один раз в день. Проводились наблюдение и регистрация электроэнцефалограмм и поведенческих проявлений припадков. Была проведена классификация тяжести поведенческих проявлений припадков в соответствии с критериями Касте (1972). Полностью спровоцированный припадок определяется на основе возникновения 3 последовательных припадков 4-го или более высокого класса. Все процедуры по хирургическим операциям и провоцированию припадков были проведены вслепую в отношении генотипа.

Нестимулированным контрольным животным каждого генотипа хирургически вживляли в миндалину электрод и обращались с ними как с мышами, над которыми проводился эксперимент, за тем исключением, что контрольных животных не стимулировали. Размещение электрода подтверждали путем окрашивания метиловым зеленым и пиронин Υ. Был проведён анализ данных, полученных в ходе эксперимента на животных с правильным размещением электродов.

Исследуемые лекарственные средства вводили путем интраперитонеальной инъекции за 30 минут до стимулирования, вызывающего припадок 5-го класса.

Пример 138. Крысы, пораженные 6-гидроксидопамином.

Указанная модель является надежной и устойчивой моделью для воспроизведения симптомов болезни Паркинсона в мозге и для исследования защитных эффектов лекарственных средств.

На самках крыс линии Спраг Доули (180-220 г) проводили стереотаксическую операцию для создания поражений нигростриатальной системы. В каждой экспериментальной группе половине животных интрастриатально инъецировали 6-гидроксидопамин (6-ОНИА) с 0,01% аскорбиновой кислоты в физиологическом растворе (пораженные животные), в то время как остальным животным интрастриаталы-ю инъецировали 0,01% аскорбиновую кислоту в физиологическом растворе (контрольные животные). Хирургическая процедура для односторонней интрастриатальной инъекции 6-гидроксидопамина: крыс анестезировали пентобарбитоном натрия (60 мг/ кг, интраперитонеально) и помещали в стереотаксический аппарат Копфа, в котором голову животного закрепляли в наклонном положении черепа (-3,0 мм). Делали разрез по срединной линии кожи черепа и просверливали в черепе трепанационное отверстие при соответствующих координатах. Через указанное отверстие делали интрацеребральную инъекцию в левый стриатум, используя канюлю с тупым наконечником 30-го калибра. Стереотаксические координаты для проведения инъекции: 0,3мм перед брегмой, 3,0 мм в сторону от брегмы и 5,2 мм вентрально от корковой поверхности мозга; в соответствии с атласом Рах1по5 & \Уа(5оп пораженные крысы получали 4 мкл 2,5 мкг/мкл 6-гидроксидопамина/0,01% (отношение вес./об.) аскорбиновой кислоты, в то время как контрольные крысы получали 4 мкл физиологического раствора/0,01% (отношение вес./об.) аскорбиновой кислоты. Инъекции проводили при расходе 0,6 мкл/мин и иголку оставляли на месте в течение 10 мин после проведения инъекции до ее медленного удаления. После герметизации трепанационного отверстия в черепе разрез закрывали, и крысам давали возможность восстановиться.

Исследуемые соединения вводили в течение 14 дней до того, как вызывали поражение. С помощью [³Н]-мазиндол авторадиографии проводили оценку защиты исследуемого соединения от потери стриатальных дофаминэргических нервных окончаний.

- 52 023020

Спустя семь дней после стереотаксической операции крыс слегка анестезировали (СО₂/О₂: 80/20) и декапитировали. Мозг быстро удаляли и замораживали над жидким азотом, затем хранили при -40°С до изготовления срезов.

Криостат Райхерта Юнга использовали для нарезания последовательных корональных 14 мкм срезов стриатума на уровне +0,30 мм от брегмы в соответствии с атласом Рахто5 & ^а15оп. Срезы оттаивали, разместив их на предметных стеклах, покрытых поли-Ь-лизином, затем их хранили при -20°С до использования. [³Н]-мазиндол автографию использовали для визуализации дофаминэргических нервных окончаний в срезах стриатума, взятых из мозга крыс. Все автографические этапы выполнялись при 4°С для уменьшения неспецифического связывания.

Размещенные на предметном стекле срезы стриатума предварительно инкубировали в течение 15 мин в 50 мм ТГ15-НС1 растворе (значение рН 7,9), содержащем 120 мм №С1 и 5 мм КС1. Затем срезы были инкубированы в течение 60 мин 4 нМ [³Н]-мазиндолом в 50 мм растворе ТП5-НС1 (значение рН 7,9) содержащем 300 мм №С1 и 5 мм КС1. Дезипрамин (ИМ1; 300 нМ) был включен во все инкубационные растворы для предотвращения неселективного связывания [³Н]-мазиндола на норадренергических сайтах захвата. Номифенсин (100 мкМ), селективный ингибитор сайтов захвата дофамина, использовали для определения неспецифического связывания. Срезы промывали дважды (2x3 мин) в охлажденном до нуля градусов инкубационном буферном растворе для удаления избыточного [³Н]-мазиндола и высушивали под потоком холодного сухого воздуха.

После высушивания радиомеченные срезы прикладывали к Нурегй1ш-³Н и экспонировали в течение 21 дня для проявления изображения на пленке плотности стриатальных дофаминэргических нервных окончаний. После периода экспонирования пленки проявляли в течение 5 мин в проявитель рентгеновской плёнки РЬеш5о1, быстро промывали в слабом растворе в фото-фиксажной ванне и закрепляли в рентгеновском закрепителе Нураш в течение 10 мин. Использовали компьютеризованную денситометрию для проведения количественной оценки оптической плотности пленочных изображений. Система была откалибрована с использованием [³Н]-стандартов таким образом, чтобы обеспечивалось проведение измерений оптической плотности в пСЗ мм^-2. Специфическое связывание определяли путем вычитания изображения неспецифического связывания из изображения полного связывания, и измеряли во всем стриатуме.

Анализ данных.

Среднюю оптическую плотность и стандартную ошибку среднего определяли на основе независимых измерений, проведенных по меньшей мере в трех последовательных корональных срезах стриатума по каждому животному.

Claims

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. Соединение, имеющее общую формулу I в которой X означает атом кислорода;

Κι означает атом углерода, азота, кислорода или серы;

К_1а означает СН, СН₂, Ν или ΝΙI;

К₂ означает валентную связь или группу СН или СН₂;

К₃ означает необязательно замещенную С₁-С₆ алкильную группу, необязательно замещенную моно-, би- или трициклическую С₁-С₁₃ гетероциклильную группу, содержащую от 1 до 5 гетероатомов, выбранных из Ν, О и 8, или необязательно замещенную моно-, би- или трициклическую С₆-С1₄ арильную группу;

когда Κι означает атом углерода

Кд означает атом водорода, атом галогена, необязательно замещенную моно- или бициклическую С₁-С₉ гетероциклильную группу, содержащую от 1 до 3 гетероатомов, выбранных из Ν, О и 8, или необязательно замещенную моно-, би-или трициклическую С₆-С1₄ арильную группу;

К₅ означает атом водорода или галогена, цианогруппу или необязательно замещенные гидрокси, меркапто, амино, карбамоил, С₁-С₆ алкильную или С₁-С₆ алкоксильную группу или группу формулы -С(=О)-Кб, в которой Кб означает необязательно замещенную С₁-С₆ алкильную или С₁-С₆ алкоксильную группу, необязательно замещенную моно- или бициклическую С₁-С₉ гетероциклильную группу, содержащую от 1 до 3 гетероатомов, выбранных из Ν, О и 8, или необязательно замещенную моно- би- или трициклическую С₆-С1₄ арильную группу; или

Кд и К₅ вместе означают оксогруппу или необязательно замещенную метиленовую или гидроксиимино группу; или

К и К₅ вместе с К! означают необязательно замещенное ненасыщенное 4-6-членное кольцо, содер- 53 023020 жащее от 0 до 3 гетероатомов, выбранных из Ν, О и δ; когда Κι означает атом кислорода К₄ и К₅ отсутствуют;

когда означает атом азота один из К₄ и К₅ отсутствует и другой является таким, как определено в описании выше; когда означает атом серы каждый из К₄ и К₅ независимо отсутствует или означает оксогруппу; т равно 1, 2 или 3; η равно 1 или 2;

когда η равно 2 или т равно 2 или 3, кольцо, содержащее Κι, может быть сочленено с необязательно замещенным бензольным кольцом; и каждый -— означает одинарную или двойную связь при условии, что одна двойная связь отходит от атома углерода, с которым связан К₃-С.®С-. и что ни один атом углерода кольца не имеет две двойные связи;

где заместители независимо выбраны из атомов галогена и С₁-Сб алкильной, С₁-Сб алкоксильной, гидроксильной, меркапто, нитро, циано, оксо, гало(С1-С₆)алкильной, гало(С1-С₆)алкоксильной, С₁-С₆ алкилтио, С₁-С₆ алкилсульфонильной, С₁-С₆ алкилкарбонильной, сульфамоильной, С₁-С₆ алкилсульфамоильной, ди(С1-С₆)алкилсульфамоильной, (С1-С₆)алкоксикарбонильной и (С1-С₆)алкилкарбонил(С1-С₆) алкильной групп и из групп формул -ΝΚ*Κ*, -С(=О)ХК*К*, -А, -О-А, -С(=О)А, -(СН₂)ц-А, -ΝΚ**-Α, -С(=О)ХК**-А, -ХК**С(=О)А и -О-С(=О)А, в которых каждый К* независимо означает атом водорода или С₁-С₆ алкильную, С₁-С₆ алкилкарбонильную, фенильную или бензильную группу, К** означает атом водорода или С₁-С₆ алкильную группу, с.] равно целому числу от 1 до 6, и А означает фенильную группу или С₁-С₈ гетероциклильную группу, содержащую от 1 до 3 гетероатомов, выбранных из Ν, О и δ; при этом каждая группа А необязательно замещена 1-3 группами, независимо выбранными из гало, гидрокси, циано, нитро и С₁-Сб алкильных групп; и его гидраты, энантиомеры, диастереомеры и фармацевтически приемлемые соли.
2. Соединение по п.1, в котором X означает атом кислорода, К_1а означает атом азота, К₂ означает связь, и двойная связь отходит от К_1а к атому углерода, с которым связан К₃-С^С-.
3. Соединение по п.1, в котором X означает атом кислорода, К1_а означает СН группу с двойной связью, отходящей от К1_а к атому углерода, с которым связан К₃-С^С-, или СН₂ группу с одинарной связью, отходящей от К_1а к атому углерода, с которым связан К₃-С=С-, и К₂ означает СН₂ группу.
4. Соединение по любому из пп.1-3, в котором К₃ означает алкильную группу, необязательно замещенную С₃-С₅ гетеромоноциклическую группу, содержащую от 1 до 3 гетероатомов, выбранных из Ν, О и δ, или необязательно замещенную фенильную группу.
5. Соединение по любому из пп.1-3, в котором К₃ означает метильную, изопропильную, бутильную, фенильную, 3-(Е.бутил)фенильную, 2-хлорфенильную, 3-хлорфенильную, 3-хлор-5-фторфенильную, 2цианофенильную, 3-цианофенильную, 3-этоксифенильную, 3-этилфенильную, 2-фторфенильную, 3фторфенильную, 4-фторфенильную, 3-гидроксифенильную, 3-изопропилфенильную, 3-метоксифенильную, 2-метилфенильную, 3-метилфенильную, 3-(3-метил-[1,2,4]-оксадиазол-5-ил)фенильную, 3нитрофенильную, 3-трифторметоксифенильную, 3-трифторметилфенильную, 2-пиридильную, 4-хлор-2пиридильную, 5-хлор-2-пиридильную, 5-фтор-2-пиридильную, 6-фтор-2-пиридильную, 4-метил-2пиридильную, 6-метокси-3-пиридильную, 6-метил-2-пиридильную, 4-трифторметил-2-пиридильную, 3пиридильную, 6-фтор-3-пиридильную, 2-фурильную, 2-тиенильную, 3-тиенильную, 2-пиразинильную, 2метил-1,3-тиазол-4-ильную или 2-фуроильную группы.
6. Соединение по любому из пп.1-5, в котором К₁ означает атом углерода, К₄ означает атом водорода, атом галогена, необязательно замещенную моноциклическую С₃-С₅ гетероциклильную группу, содержащую от 1 до 3 гетероатомов, выбранных из Ν, О и δ, или необязательно замещенную фенильную группу; и К₅ означает атом водорода или галогена, цианогруппу, или необязательно замещенные гидрокси, меркапто, амино, карбамоил, С₁-С₆ алкил или С₁-С₆ алкоксигруппы, или группу формулы -С(=О)-К₆, в которой К₆ означает необязательно замещенную С₁-С₆ алкильную группу, необязательно замещенную моноциклическую С3-С5 гетероциклильную группу, содержащую от 1 до 3 гетероатомов, выбранных из Ν, О и δ, или необязательно замещенную фенильную группу.
7. Соединение по любому из пп.1-5, в котором К1 означает атом углерода, К4 означает атом водорода или фтора или 2-пиридильную группу и К5 означает атом водорода, или фтора, или циано, гидроксильную или этоксикарбонильную группу.
8. Соединение по любому из пп.1-5, в котором К! означает атом углерода и К₄ и К₅ вместе означают оксо, метиленовую, дифторметиленовую, 2-пиридилметиленовую, триметиленовую, тетраметиленовую, этилендиокси, пропилендиокси, оксиэтильную, оксипропильную, метиленоксиметиленовую, гидроксиимино, метоксиимино или 1-карбокси-3-гидроксипропоксиимино группы.
9. Соединение по любому из пп.1-5, в котором К! означает атом углерода, и К₄ и К₅ вместе с К! означают группу формулы -(Υ_ρ)-, в которой р равно целому числу от 3 до 5, и каждый Υ независимо означает атом кислорода или необязательно замещенную метиленовую группу при условии, что две смежные

- 54 023020

Υ части не означают атомы кислорода.
10. Соединение по п.9, в котором К₄ и К₅ вместе означают группу формулы -О-СН₂СН₂-О-, -ОСН2СН2СН2-О-, -О-СН2СН2-, -О-СН2СН2СН2-, -СН2-О-СН2-, -СН2СН2СН2-, -СН2СН2СН2СН2-, -СН₂СН₂СН₂СН₂СН₂- или -СН₂СН₂СР₂СН₂СН₂-.
11. Соединение по любому из пп.1-5, в котором К₁ означает атом азота; К₄ означает необязательно замещенную С₃-С₅ гетеромоноциклическую группу, содержащую от 1 до 3 гетероатомов, выбранных из Ν, О и 8; и К₅ отсутствует.
12. Соединение по любому из пп.1-5, в котором К| означает атом азота; К₄ означает 3-циано-2пиразинильную, 3-нитро-2-пиридильную или 3-нитро-6-метил-2-пиридильную группу и К₅ отсутствует.
13. Соединение по любому из пп.1-5, в котором Κι означает атом азота; Κ4 отсутствует и К₅ означает алкоксикарбонильную, необязательно замещенную арилкарбонильную, необязательно замещенную гетероциклилкарбонильную, карбамоильную, диалкилкарбамоильную, ^алкокси^-алкилкарбамоильную или необязательно замещенную гетероциклилкарбамоильную группу.
14. Соединение по любому из пп.1-5, в котором Κι означает атом азота; Κ4 отсутствует и К₅ означает этоксикарбонильную, 3-хлорбензоильную, 2-фуроильную, 2-оксо-1-имидазолидинилкарбонильную, 3метилсульфонил-2-оксо-1-имидазолидинилкарбонильную, 4-метил-1-пиперазинилкарбонильную, пиперидинокарбонильную, 1-пирролидинилкарбонильную, карбамоильную, диметилкарбамоильную, диэтилкарбамоильную, ^метокси^-метилкарбамоильную, ^этил^-изопропилкарбамоильную или 4-пиридилкарбамоильную группы.
15. Соединение по п.1, выбранное из группы, включающей

3-фенилэтинил-8-(6-метил-3-нитро-2-пиридил)-1-окса-2,8-диазаспиро[4.5]дек-2-ен,

3 -фенилэтинил-8-(3 -нитро-2-пиридил)-1 -окса-2,8-диазаспиро [4.5]дек-2-ен,

3-[(6-метил-2-пиридил)этинил]-8-(6-метил-3-нитро-2-пиридил)-1-окса-2,8-диазаспиро[4.5]дек-2-ен,

3-(2-тиенилэтинил)-8-(6-метил-3-нитро-2-пиридил)-1-окса-2,8-диазаспиро[4.5]дек-2-ен,

3-(2 -пиридилэтинил) -8-(6 -метил-3 -нитро -2 -пиридил) -1-окса-2,8 -диазаспиро [4.5]дек-2-ен,

3-(2-фторфенилэтинил)-8-(6-метил-3-нитро-2-пиридил)-1-окса-2,8-диазаспиро[4.5]дек-2-ен,

3 -(3 -фторфенилэтинил)-8-(6-метил-3 -нитро-2-пиридил)-1 -окса-2,8-диазаспиро [4.5]дек-2-ен,

3-(4-фторфенилэтинил)-8-(6-метил-3-нитро-2-пиридил)-1-окса-2,8-диазаспиро[4.5]дек-2-ен,

3-(2-фурилэтинил)-8-(6-метил-3-нитро-2-пиридил)-1-окса-2,8-диазаспиро[4.5]дек-2-ен,

3-[(2-метил- 1,3-тиазол-4-ил)этинил] -8-(6-метил-3 -нитро-2-пиридил)-1 -окса-2,8-диазаспиро [4.5]дек2-ен,

3-(проп-1-инил)-8-(6-метил-3-нитро-2-пиридил)-1-окса-2,8-диазаспиро[4.5]дек-2-ен,

3 -(3 -хлорфенилэтинил)-8-(6-метил-3 -нитро-2-пиридил)-1 -окса-2,8-диазаспиро [4.5]дек-2-ен,

3-(3-метилфенилэтинил)-8-(6-метил-3-нитро-2-пиридил)-1-окса-2,8-диазаспиро[4.5]дек-2-ен,

3 -(3 -метоксифенилэтинил)-8-(6-метил-3 -нитро-2-пиридил)-1 -окса-2,8-диазаспиро [4.5]дек-2-ен,

3-(3-цианофенилэтинил)-8-(6-метил-3-нитро-2-пиридил)-1-окса-2,8-диазаспиро[4.5]дек-2-ен,

3-(3-тиенилэтинил)-8-(6-метил-3-нитро-2-пиридил)-1-окса-2,8-диазаспиро[4.5]дек-2-ен,

3-(3-пиридилэтинил)-8-(6-метил-3-нитро-2-пиридил)-1-окса-2,8-диазаспиро[4.5]дек-2-ен,

3-{3-(3-метил-[1,2,4]оксадиазол-5-ил)фенилэтинил}-8-(6-метил-3-нитро-2-пиридил)-1-окса-2,8диазаспиро [4.5]дек-2-ен,

3-(3-метилбут-1-инил)-8-(6-метил-3-нитро-2-пиридил)-1-окса-2,8-диазаспиро[4.5]дек-2-ен,

3 -(гекс-1 -инил)-8-(6-метил-3 -нитро-2-пиридил)-1 -окса-2,8-диазаспиро [4.5]дек-2-ен,

3-(2-цианофенилэтинил)-8-(6-метил-3-нитро-2-пиридил)-1-окса-2,8-диазаспиро[4.5]дек-2-ен,

3 -(3 -хлорфенилэтинил)-8-(3 -циано-2-пиразинил)-1-окса-2,8-диазаспиро [4.5]дек-2-ен,

3-(2-метилфенилэтинил)-8-(6-метил-3-нитро-2-пиридил)-1-окса-2,8-диазаспиро[4.5]дек-2-ен,

3 -(2-хлорфенилэтинил)-8-(6-метил-3 -нитро-2-пиридил)-1 -окса-2,8-диазаспиро [4.5]дек-2-ен,

3-(2-пиразинилэтинил)-8-(6-метил-3-нитро-2-пиридил)-1-окса-2,8-диазаспиро[4.5]дек-2-ен,

3- фенилэтинил-8-(6-метил-3-нитро-2-пиридил)-1-окса-8-азаспиро[4.5]дек-3-ен,

3 -(3 -хлорфенилэтинил)-7-(6-метил-3 -нитро-2-пиридил)-1 -окса-2,7-диазаспиро [4.4]нон-2-ен,

3 -(3 -хлорфенилэтинил)-7-(6-метил-3 -нитро-2-пиридил)-1 -окса-2,7-диазаспиро [4.3]окт-2-ен,

4- фенилэтинил-9-(6-метил-3-нитро-2-пиридил)-1-окса-9-азаспиро[5.5]ундек-4-ен,

4-фенилэтинил-9-(6-метил-3 -нитро-2-пиридил)-1-окса-9-азаспиро [5.5]ундек-3 -ен,

3-(3-хлорфенилэтинил)-1,9,12-триокса-2-азадиспиро[4.2.4.2]тетрадек-2-ен,

3 -(3 -хлорфенилэтинил)-8-оксо-1 -окса-2-азаспиро [4.5]дек-2-ен,

3 -(3 -хлорфенилэтинил)-8-метилен-1 -окса-2-азаспиро [4.5]дек-2-ен,

3 -(3 -хлорфенилэтинил)-8-метоксиимино-1 -окса-2-азаспиро [4.5]дек-2-ен,

3-[(6-метил-2-пиридил)этинил]-7-(6-метил-3-нитро-2-пиридил)-1-окса-2,7-диазаспиро[4.4]нон-2-ен,

3 -фенилэтинил-7-(6-метил-3 -нитро-2-пиридил)-1-окса-2,7-диазаспиро [4.4]нон-2-ен,

3 -(3 -фторфенилэтинил)-7-(6-метил-3 -нитро-2-пиридил)-1 -окса-2,7-диазаспиро [4.4]нон-2-ен,

3-фенилэтинил-7-(6-метил-3-нитро-2-пиридил)-1-окса-2,7-диазаспиро[4.3]окт-2-ен,

3 -(3 -гидроксифенилэтинил)-7-(6-метил-3 -нитро-2-пиридил)-1 -окса-2,7-диазаспиро [4.4]нон-2-ен,

3 -(3 -фторфенилэтинил)-7-(6-метил-3 -нитро-2-пиридил)-1 -окса-2,7-диазаспиро [4.3]окт-2-ен,

- 55 023020

3-(3-хлорфенилэтинил)-8-(2-пиридилметилен)-1-окса-2-азаспиро[4.5]дек-2-ен,

3-фенилэтинил-1,9,12-триокса-2-азадиспиро[4.2.4.2]тетрадек-2-ен,

3-фенилэтинил-8-оксо-1-окса-2-азаспиро[4.5]дек-2-ен,

3-[(6-метил-2-пиридил)этинил]-8-циано-8-(2-пиридил)-1-окса-2-азаспиро[4.5]дек-2-ен,

3-[(5-фтор-2-пиридил)этинил]-1,9,12-триокса-2-азадиспиро[4.2.4.2]тетрадек-2-ен,

3-[(6-метил-2-пиридил)этинил]-1,9,12-триокса-2-азадиспиро[4.2.4.2]тетрадек-2-ен,

3-[(6-фтор-2-пиридил)этинил]-1,9,12-триокса-2-азадиспиро[4.2.4.2]тетрадек-2-ен,

3-[(6-фтор-3-пиридил)этинил]-1,9,12-триокса-2-азадиспиро[4.2.4.2]тетрадек-2-ен,

3-(3-нитрофенилэтинил)-1,9,12-триокса-2-азадиспиро[4.2.4.2]тетрадек-2-ен,

3-[(2-метил-1,3-тиазол-4-ил)этинил]-1,9,12-триокса-2-азадиспиро[4.2.4.2]тетрадек-2-ен,

3-(3-метоксифенилэтинил)-1,9,12-триокса-2-азадиспиро[4.2.4.2]тетрадек-2-ен,

3-(3-хлор-5-фторфенилэтинил)-1,9,12-триокса-2-азадиспиро[4.2.4.2]тетрадек-2-ен,

3-(3-метилфенилэтинил)-1,9,12-триокса-2-азадиспиро[4.2.4.2]тетрадек-2-ен,

3-(3-этоксифенилэтинил)-1,9,12-триокса-2-азадиспиро[4.2.4.2]тетрадек-2-ен,

3-(3-трифторметоксифенилэтинил)-1,9,12-триокса-2-азадиспиро[4.2.4.2]тетрадек-2-ен,

3-(3-Ебутилфенилэтинил)-1,9,12-триокса-2-азадиспиро[4.2.4.2]тетрадек-2-ен,

3-(3-цианофенилэтинил)-1,9,12-триокса-2-азадиспиро[4.2.4.2]тетрадек-2-ен,

3-(3-фторфенилэтинил)-1,9,12-триокса-2-азадиспиро[4.2.4.2]тетрадек-2-ен,

3-(3-этилфенилэтинил)-1,9,12-триокса-2-азадиспиро[4.2.4.2]тетрадек-2-ен,

3-(3-изопропилфенилэтинил)-1,9,12-триокса-2-азадиспиро[4.2.4.2]тетрадек-2-ен,

3-[(4-хлор-2-пиридил)этинил]-1,9,12-триокса-2-азадиспиро[4.2.4.2]тетрадек-2-ен,

3-[(4-метил-2-пиридил)этинил]-1,9,12-триокса-2-азадиспиро[4.2.4.2]тетрадек-2-ен,

3-(3 -трифторметилфенилэтинил) -1,9,12 -триокса-2 -азадиспиро [4.2.4.2]тетрадек-2-ен,

3-[(4-трифторметил-2-пиридил)этинил]-1,9,12-триокса-2-азадиспиро[4.2.4.2]тетрадек-2-ен,

3-[(5-хлор-3-пиридил)этинил]-1,9,12-триокса-2-азадиспиро[4.2.4.2]тетрадек-2-ен,

3 -фенилэтинил-8-( 1 -карбокси-3 -гидроксипропоксиимино)-1 -окса-2-азаспиро [4.5]дек-2-ен, 3-(3-хлорфенилэтинил)-1,8-диокса-2-азаспиро[4.5]дек-2-ен,

3-[(6-метил-2-пиридил)этинил] - 1,8-диокса-2-азаспиро [4.5]дек-2-ен,

3-[(4-хлор-2-пиридил)этинил] - 1,8-диокса-2-азаспиро [4.5]дек-2-ен,

3-(3-хлорфенилэтинил)-1-окса-8-тиа-2-азаспиро[4.5]дек-2-ен 8,8-диоксид,

3 -(3 -хлорфенилэтинил)-1,7-диокса-2-азаспиро [4.5]дек-2-ен,

3-(3-хлорфенилэтинил)-1,9-диокса-2-азадиспиро[4.2.4.2]тетрадек-2-ен,

3-(3-метилфенилэтинил)-1,9-диокса-2-азадиспиро[4.2.4.2]тетрадек-2-ен,

3-(3-гидроксифенилэтинил)-7-(6-метил-3-нитро-2-пиридил)-1-окса-2,7-диазаспиро[4.3]окт-2-ен,

3-(3-цианофенилэтинил)-7-(6-метил-3-нитро-2-пиридил)-1-окса-2,7-диазаспиро[4.3]окт-2-ен,

3 '-(3 -хлорфенилэтинил)-2,3-дигидро-3 -гидрокси-4'Н-спиро [инден- 1,5'-изоксазол],

3 '-(3 -хлорфенилэтинил)-2,3-дигидро-3 -оксо-4'Н-спиро [инден- 1,5'-изоксазол],

3'-(3-хлорфенилэтинил)-2,3-дигидро-3-метоксиимино-4'Н-спиро[инден-1,5'-изоксазол],

3-(3 -хлорфенилэтинил)-1,9-диокса-2-азадиспиро [4.2.3.2]тридек-2 -ен, 3-(3-хлорфенилэтинил)-1,9,13-триокса-2-азадиспиро[4.2.5.2]пентадек-2-ен,

3 '-[(6-метил-2-пиридил)этинил] -2,3-дигидро-3 -гидрокси-4'Н-спиро [инден-1,5'-изоксазол], 3-(3-хлорфенилэтинил)-1-окса-2-азадиспиро[4.2.4.2]тетрадек-2-ен,

3 -(3 -хлорфенилэтинил)-8,8-дифтор-1 -окса-2-азаспиро [4.5]дек-2-ен,

3-(3 -метилфенилэтинил) -1 -окса-2-азадиспиро [4.2.4.2]тетрадек-2 -ен, 3-[(6-метокси-3-пиридил)этинил]-1,9,12-триокса-2-азадиспиро[4.2.4.2]тетрадек-2-ен,

3 '-[(6-метил-2-пиридил)этинил] -2,3-дигидро-3 -оксо-4'Н-спиро [инден-1,5'-изоксазол],

3 '-[(6-метил-2-пиридил)этинил] -2,3-дигидро-3 -метоксиимино-4'Н-спиро [инден- 1,5'-изоксазол],

3 -(3 -хлорфенилэтинил)-7-диметилкарбамоил-1 -окса-2,7-диазаспиро [4.4]нон-2-ен,

3-(3 -хлорфенилэтинил)-7-карбамоил-1 -окса-2,7-диазаспиро [4.4] нон-2-ен,

3 -(3 -хлорфенилэтинил)-1-окса-2-аза-диспиро [4.1.3.1 ]ундек-2-ен,

3-(3 -метилфенилэтинил) -1,9,13 -триокса-2-азадиспиро [4.2.5.2] пентадек-2-ен,

3-(3 -хлорфенилэтинил)-1 -окса-2-азаспиро [4.3] окт-2-ен,

3-(3-хлорфенилэтинил)-1,10-диокса-2-азадиспиро[4.2.3.2]тридек-2-ен,

3-[(4-хлор-2-пиридил)этинил]-8,8-дифтор-1-окса-2-азаспиро[4.5]дек-2-ен,

3-[(4-хлор-2-пиридил)этинил] -8-этоксикарбонил-1-окса-2-азаспиро [4.5]дек-2-ен,

3 '-(3 -хлорфенилэтинил)-1Н,4'Н-спиро [изохроман-4,5'-изоксазол],

3 -(3 -хлорфенилэтинил)-7-(4-метил-1 -пиперазинилкарбонил)-1 -окса-2,7-диазаспиро [4.4]нон-2-ен, 3 -(3 -хлорфенилэтинил)-7-(2-оксо-1 -имидазолидинилкарбонил)-1-окса-2,7 диазаспиро[4.4]нон-2-ен,

3 -(3 -хлорфенилэтинил)-7-(1 -пирролидинилкарбонил)-1-окса-2,7-диазаспиро [4.4]нон-2-ен,

3 -(3 -хлорфенилэтинил)-7-пиперидинокарбонил-1-окса-2,7-диазаспиро [4.4]нон-2-ен,

3 -(3 -хлорфенилэтинил)-7-(3 -метилсульфонил-2-оксо-1-имидазолидинилкарбонил)-1 -окса-2,7- 56 023020 диазаспиро [4.4] нон-2-ен,

3 -(3 -хлорфенилэтинил)-7-^-этил-^изопропилкарбамоил)-1 -окса-2,7-диазаспиро [4.4]нон-2-ен,

3 -(3 -хлорфенилэтинил)-7-^-метокси-^метилкарбамоил)-1 -окса-2,7-диазаспиро [4.4]нон-2-ен,

3 -(3 -хлорфенилэтинил)-7-(4-пиридилкарбамоил)-1 -окса-2,7-диазаспиро [4.4]нон-2-ен,

3 -(3 -хлорфенилэтинил)-7-этоксикарбонил-1-окса-2,7-диазаспиро [4.4]нон-2-ен,

3-[(6-метил-2-пиридил)этинил] -8,8-дифтор-1 -окса-2-азаспиро [4.5]дек-2-ен,

3-(3 -хлорфенилэтинил)-1,7-диокса-2-азаспиро [4.3] окт-2-ен,

3 -(3 -хлорфенилэтинил)-1-окса-3 -азаспиро [4.5]дек-2-ен,

3 -(3 -хлорфенилэтинил)-8-дифторметилен-1 -окса-2-азаспиро [4.5]дек-2-ен,

3-(3-хлорфенилэтинил)-8-карбамоил-1-окса-2-азаспиро[4.5]дек-2-ен,

3-(3-хлорфенилэтинил)-8-(2-фуроил)-1-окса-2,8-диазаспиро[4.5]дек-2-ен,

3-(3-хлорфенилэтинил)-8-^-метокси-^метилкарбамоил)-1-окса-2,8-диазаспиро[4.5]дек-2-ен,

3 -(3 -хлорфенилэтинил)-8-диэтилкарбамоил-1 -окса-2,8-диазаспиро [4.5]дек-2-ен,

3 -(3 -хлорфенилэтинил)-8-(3 -хлорбензоил)-1-окса-2,8-диазаспиро [4.5]дек-2-ен,

3-(3-хлорфенилэтинил)-8-этоксикарбонил-1-окса-2,8-диазаспиро[4.5]дек-2-ен,

3 -(3 -хлорфенилэтинил)-8-( 1 -пирролидинилкарбонил)-1-окса-2,8-диазаспиро [4.5]дек-2-ен,

3 -(3 -хлорфенилэтинил)-8-диметилкарбамоил-1 -окса-2,8-диазаспиро [4.5]дек-2-ен,

3-(3-хлорфенилэтинил)-8-(Ебутоксикарбонил)-6-метокси-1-окса-2,8-диазаспиро[4.4]нон-2-ен или

3 -(3 -хлорфенилэтинил)-8-этоксикарбонил-6-метокси-1 -окса-2,8-диазаспиро [4.4]нон-2-ен, или их фармацевтически приемлемые соли.
16. Фармацевтическая композиция для лечения заболеваний или нарушений нижних мочевыводящих путей, мигрени; гастроэзофагеальной рефлюксной болезни, тревожных расстройств, передозировки, аддиктивных расстройств и абстинентных расстройств, нейропатической боли и синдрома умственной отсталости с ломкой хромосомой X, включающая соединение по любому из пп.1-14 или его гидрат, энантиомер, диастереомер или фармацевтически приемлемые соли в смеси с фармацевтически приемлемым носителем.