EA020756B1

EA020756B1 - Новые формы полициклического соединения

Info

Publication number: EA020756B1
Application number: EA201270315A
Authority: EA
Inventors: Стефен Бирлмэйер; Майкл Кристи; Лоран Курвуазье; Р. Скотт Филд; Р. Кертис Холтиванджер; Линли Хи; Мартин Дж. Джейкобс; Майкл Кресс; Роберт Э. Маккин; Дейл Р. Маури; Джозеф Петрейтис; Мехран Язданиан
Original assignee: Сефалон, Инк.
Priority date: 2009-08-26
Filing date: 2010-08-25
Publication date: 2015-01-30
Also published as: EA201270315A1; AU2010289746A1; US20120214998A1; DK2470540T3; HK1171750A1; JP2013503173A; CN102482282A; MX2012002456A; KR20120092100A; BR112012004053A2; UA110604C2; IL218132B; IL218132A0; CA2772328A1; ES2572652T3; CA2772328C; SG178852A1; NZ598883A; CL2012000478A1; EP2470540A1

Abstract

Изобретение относится к кристаллической форме соединения I, где кристаллическая форма представляет собой: (А) а) форму А, которая характеризуется порошковой рентгеновской дифрактограммой, содержащей один или более из следующих пиков: 4,32, 6,07, 8,55, 12,07 и 15,37 ± 0,2 градуса 2-тэта; или (В) a) форму НС, которая характеризуется порошковой рентгеновской дифрактограммой, содержащей один или более из следующих пиков: 8,36, 8,71, 16,69, 17,39 и 24,59 ± 0,2 градуса 2-тэта; или b) форму HD, которая характеризуется порошковой рентгеновской дифрактограммой, содержащей один или более из следующих пиков: 7,60, 8,99 и 15,16 ± 0,2 градуса 2-тэта; или их смесь. Изобретение также относится к фармацевтической композиции для лечения рака, содержащей кристаллическую форму соединения I.

Description

Изобретение относится к кристаллической форме соединения I, где кристаллическая форма представляет собой: (А) а) форму А_о, которая характеризуется порошковой рентгеновской дифрактограммой, содержащей один или более из следующих пиков: 4,32, 6,07, 8,55, 12,07 и 15,37 ± 0,2 градуса 2-тэта; или (В) а) форму НС₀, которая характеризуется порошковой рентгеновской дифрактограммой, содержащей один или более из следующих пиков: 8,36, 8,71, 16,69, 17,39 и 24,59 ± 0,2 градуса 2-тэта; или Ь) форму Ηϋ₀, которая характеризуется порошковой рентгеновской дифрактограммой, содержащей один или более из следующих пиков: 7,60, 8,99 и 15,16 ± 0,2 градуса 2-тэта; или их смесь. Изобретение также относится к фармацевтической композиции для лечения рака, содержащей кристаллическую форму соединения I.

о

Область техники, к которой относится настоящее изобретение

Настоящее изобретение относится к композициям, которые содержат новые формы полициклического соединения (называемого в настоящем изобретении соединением I), и фармацевтическим композициям, содержащим соединение I.

Уровень техники настоящего изобретения

Активные фармацевтические ингредиенты (ΑΡΙ) можно получить в виде ряда различных форм, например в виде химических производных, сольватов, гидратов, сокристаллов или солей. ΑΡΙ могут также быть аморфными, могут иметь различные кристаллические полиморфные формы или могут существовать в различных сольватированных или гидратированных состояниях. Изменяя форму ΑΡΙ, можно изменять его физические свойства. Например, кристаллические полиморфные формы обычно обладают различной растворимостью, так что более термодинамически стабильная полиморфная форма является менее растворимой, чем менее термодинамически стабильная полиморфная форма. Полиморфные формы могут также отличаться по свойствам, таким как стабильность, биодоступность, структура, давление паров, плотность, цвет и коэффициент сжатия. Соответственно, изменение кристаллического состояния ΑΡΙ представляет собой один из многих путей для изменения его физических и фармакологических свойств.

Поли(АДФ-рибозная) полимераза (ΡΑΚΡ, также называемая поли(АДФ-рибозная) синтетаза, или ΡΑΚδ) представляет собой ядерный фермент, который катализирует синтез поли(АДФ-рибозных) цепей из ΝΑΟ' в ответ на разрывы одноцепочечной ДНК как часть процесса репарирования ДНК (бе Мигс1а, С.; бе Мигс1а, БМ. Ρо1у(Α^Ρ-^^Ъозе) ро1ушегазе: а то1еси1аг шск-зепзог. Тгепбз Вюсйеш. ЗсК 1994, 19, 172-176; Α1νа^еζ-Соηζа1еζ, К.; ΡасΗесо-Κоб^^§иеζ, С.; Мепбоζа-Α1νа^еζ, Н. Нп/уто1оду о£ ΑΌΡ-пЪозе ро1утег зуп1йез1з. Мо1. Се11. Вюсйет. 1994, 138, 33). Была выдвинута гипотеза, что низкомолекулярные ингибиторы ΡΑΚΡ могут играть потенциальную роль в терапевтическом лечении нейродегенеративных заболеваний, рака и других связанных с ΡΑΚΡ и киназой заболеваний.

Специфическое ингибирующее ΡΑΚΡ соединение, имеющее химическое обозначение 4,5,6,7-тетрагидро- 11 -метокси-2-[(4-метил-1 -пиперазинил)метил] -1 Н-циклопента[а] пирроло[3,4-с]карбазол-1,3 (2Н)дион, может быть пригодно для лечения опухолей груди и яичника и в сочетании с химиотерапией или радиотерапией для лечения других устойчивых к лекарственным средствам видов рака. Данное соединение представлено следующей формулой (I):

и называется в настоящем изобретении соединением I. Патент США 7122679 и 2006/0276497 описывает соединение Ι и его применение.

Различные формы соединения I имеют различные температуры плавления, растворимость или скорость растворения; данные физические свойства, или отдельно, или в комбинации, могут влиять, например, на биодоступность. В свете потенциальных преимуществ альтернативных форм ΑΙ4 существует необходимость в обнаружении и получении альтернативных форм соединения I.

Сущность настоящего изобретения

Настоящее изобретение относится к новой кристаллической форме соединения I, имеющего форму^лу

где кристаллическая форма представляет собой (A)

а) форму А₀, которая характеризуется порошковой рентгеновской дифрактограммой, содержащей один или более из следующих пиков: 4,32, 6,07, 8,55, 12,07 и 15,37 ±0,2° 2-тэта; или (B)

a) форму НС0, которая характеризуется порошковой рентгеновской дифрактограммой, содержащей один или более из следующих пиков: 8,36, 8,71, 16,69, 17,39 и 24,59 ± 0,2° 2-тэта; или

b) форму ΗΌ₀, которая характеризуется порошковой рентгеновской дифрактограммой, содержащей один или более из следующих пиков: 7,60, 8,99 и 15,16 ± 0,2° 2-тэта; или их смесь.

Кроме того, настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции для лечения рака, содержащей кристаллическую форму соединения I, представляющую собой форму А₀, форму НС₀, фор- 1 020756 му ΗΌ₀ или их смесь.

В предпочтительном варианте фармацевтическая композиция содержит смесь указанных форм.

В другом предпочтительном варианте фармацевтическая композиция дополнительно включает аморфную форму соединения I.

Краткое описание чертежей

На фиг. 1 представлена рентгеновская порошковая дифрактограмма (ΧΚΡΌ) формы А₀.

На фиг. 2 представлена рентгеновская порошковая дифрактограмма (ΧΚΡΌ) формы В₀.

На фиг. 3 представлена рентгеновская порошковая дифрактограмма (ΧΚΡΌ) формы НА₀.

На фиг. 4 представлена рентгеновская порошковая дифрактограмма (ΧΚΡΌ) формы НС₀.

На фиг. 5 представлена рентгеновская порошковая дифрактограмма (ΧΚΡΌ) формы ΗΌ₀.

На фиг. 6 представлена рентгеновская порошковая дифрактограмма (ΧΚΡΌ) формы §2₀.

На фиг. 7 представлена рентгеновская порошковая дифрактограмма (ΧΚΡΌ) формы §3₀.

На фиг. 8 представлена рентгеновская порошковая дифрактограмма (ΧΚΡΌ) формы §4₀.

На фиг. 9 представлена рентгеновская порошковая дифрактограмма (ΧΚΡΌ) формы §5₀.

На фиг. 10 представлена рентгеновская порошковая дифрактограмма (ΧΚΡΌ) формы §6₀.

На фиг. 11 представлена рентгеновская порошковая дифрактограмма (ΧΚΡΌ) формы §7₀.

На фиг. 12 представлена рентгеновская порошковая дифрактограмма (ΧΚΡΌ) формы §9₀.

На фиг. 13 представлена рентгеновская порошковая дифрактограмма (ΧΚΡΌ) формы §10₀.

На фиг. 14 представлена рентгеновская порошковая дифрактограмма (ΧΚΡΌ) формы 812₀.

На фиг. 15 представлена рентгеновская порошковая дифрактограмма с переменной температурой (νΤ-ΧΚΡΌ) формы А₀.

На фиг. 16 представлено наложение термограммы дифференциальной сканирующей калориметрии (ДСК) и термограммы термогравиметрического анализа (ТГА, ΤΟΆ) формы А₀.

На фиг. 17 представлен регулярный график изотермы при динамической сорбции паров (ДСП, Όνδ) формы А₀.

На фиг. 18 показаны рентгеновские порошковые дифрактограммы (ΧΚΡΌ) формы А₀ перед и после анализа с помощью динамической сорбции паров (ДСП).

На фиг. 19 представлен нерегулярный график изотермы при динамической сорбции паров (ДСП) формы А0.

На фиг. 20 представлен инфракрасный спектр с Фурье-преобразованием (ΡΤΙΚ) формы А₀.

На фиг. 21 представлен рамановский спектр формы А0.

На фиг. 22 представлена рентгеновская порошковая дифрактограмма с переменной температурой (νΤ-ΧΚΡΌ) формы В₀.

На фиг. 23 представлено наложение термограммы дифференциальной сканирующей калориметрии (ДСК, Όδϋ) и термограммы термогравиметрического анализа (ТГА) формы В₀.

На фиг. 24 представлено наложение термограммы дифференциальной сканирующей калориметрии (ДСК) и термограммы термогравиметрического анализа (ТГА) формы НА0.

На фиг. 25 представлен график изотермы при динамической сорбции паров (ДСП) формы НА0.

На фиг. 26 представлен инфракрасный спектр с Фурье-преобразованием (ΡΤΙΚ) формы НА₀.

На фиг. 27 представлен рамановский спектр формы НА0.

На фиг. 28 представлено наложение термограммы дифференциальной сканирующей калориметрии (ДСК) и термограммы термогравиметрического анализа (ТГА) формы НС0.

На фиг. 29 представлен регулярный график изотермы при динамической сорбции паров (ДСП) НС0. На фиг. 30 показаны рентгеновские порошковые дифрактограммы (ΧΚΡΌ) формы НС₀ перед и после анализа с помощью динамической сорбции паров (ДСП).

На фиг. 31 представлен нерегулярный график изотермы при динамической сорбции паров (ДСП) формы НС0.

На фиг. 32 представлен инфракрасный спектр с Фурье-преобразованием (ΡΤΙΚ) формы НС₀.

На фиг. 33 представлен рамановский спектр НС₀.

На фиг. 34 представлено наложение термограммы дифференциальной сканирующей калориметрии (ДСК) и термограммы термогравиметрического анализа (ТГА) формы ΗΌ₀.

На фиг. 35 представлен регулярный график изотермы при динамической сорбции паров (ДСП) формы ΗΌ₀.

На фиг. 36 показаны рентгеновские порошковые дифрактограммы (ΧΚΡΌ) формы ΗΌ₀ перед и после анализа с помощью динамической сорбции паров (ДСП).

На фиг. 37 представлен нерегулярный график изотермы при динамической сорбции паров (ДСП) формы ΗΌ₀.

На фиг. 38 представлен инфракрасный спектр с Фурье-преобразованием (ΡΤΙΚ) формы ΗΌ₀.

На фиг. 39 представлен рамановский спектр ΗΌ₀.

На фиг. 40 представлено наложение термограммы дифференциальной сканирующей калориметрии (ДСК) и термограммы термогравиметрического анализа (ТГА) формы §2₀.

На фиг. 41 представлено наложение термограммы дифференциальной сканирующей калориметрии

- 2 020756 (ДСК) и термограммы термогравиметрического анализа (ТГА) формы 83₀.

На фиг. 42 представлено наложение термограммы дифференциальной сканирующей калориметрии (ДСК) и термограммы термогравиметрического анализа (ТГА) 84₀.

На фиг. 43 представлено наложение термограммы дифференциальной сканирующей калориметрии (ДСК) и термограммы термогравиметрического анализа (ТГА) формы 85₀.

На фиг. 44 представлено наложение термограммы дифференциальной сканирующей калориметрии (ДСК) и термограммы термогравиметрического анализа (ТГА) формы 86₀.

На фиг. 45 представлено наложение термограммы дифференциальной сканирующей калориметрии (ДСК) и термограммы термогравиметрического анализа (ТГА) формы 87₀.

На фиг. 46 представлено наложение термограммы дифференциальной сканирующей калориметрии (ДСК) и термограммы термогравиметрического анализа (ТГА) формы 89₀.

На фиг. 47 представлено наложение термограммы дифференциальной сканирующей калориметрии (ДСК) и термограммы термогравиметрического анализа (ТГА) формы 810₀.

На фиг. 48 представлено наложение термограммы дифференциальной сканирующей калориметрии (ДСК) и термограммы термогравиметрического анализа (ТГА) формы 812₀.

На фиг. 49 показано наложение рентгеновских порошковых дифрактограмм (ΧΗΡΌ) формы А₀ после измельчения.

На фиг. 50 показано наложение рентгеновских порошковых дифрактограмм (ΧΗΡΌ) формы НС₀ и ΗΌ₀ после измельчения в течение 15 мин.

На фиг. 51 представлена термограмма дифференциальной сканирующей калориметрии (ДСК) формы НС₀ и ΗΌ₀ после измельчения в течение 15 мин.

Подробное описание настоящего изобретения

В ходе данной работы было обнаружено существование ряда форм соединения I. Получение и описание данных форм раскрыто в настоящем изобретении. Спектральные данные, относящиеся к данным формам, показаны на фиг. 1-51.

Более конкретно, было обнаружено существование ряда различных физических форм соединения I. Были обнаружены две полиморфные формы безводных кристаллических форм соединения I (формы А₀ и В₀) и три полиморфные формы кристаллических моногидратных форм (НА₀, НС₀ и ΗΌ₀), из которых объектом настоящего изобретения являются формы А₀, НС₀ и ΗΌ₀. Буквы А и В присваивают данным безводным формам и гидратам, например, с буквой Н впереди для обозначения гидратных форм. Надпись снизу О присваивается дополнительно для обозначения форм свободного основания. Кроме того, в настоящем документе описано девять сольватов соединения I (82₀, 83₀, 84₀, 85₀, 86₀, 87₀, 89₀, 810₀ и 812₀) . Также раскрыты фармацевтические композиции, содержащие одну или более из данных форм, а также фармацевтические композиции, дополнительно содержащие аморфную форму соединения I (Л₈).

Характерные ΧΗΡΌ пики для формы А₀ перечислены в следующей табл. 1. Параметры дифракционной рентгенограммы формы А0 показаны на фиг. 1.

Таблица 1. ΧΗΡΌ пики для формы А₀

Характерные ΧΗΡΌ пики для формы В₀ перечислены в следующей табл. 2. Параметры дифракционной рентгенограммы формы В0 показаны на фиг. 2.

- 3 020756

Таблица 2. ΧΚΡΌ пики для формы В₀

Пик №	Угол [°2-тэта]	Межплоскостное расстояние [ангстрем]	Интенсивность [%]
1	7,16	12,33	36
2	7,89	11,20	100
3	10,55	8,38	6
4	10,77	8,21	22
5	15,81	5,60	7
6	16,54	5,35	28
7	18,53	4,78	6
8	19,27	4,60	9
9	21,20	4,19	18
10	24,04	3,70	6
11	24,61	3,62	17
12	24,65	3,61	16

Характерные ΧΚΡΌ пики для формы НА₀ перечислены в следующей табл. 3. Параметры дифракционной рентгенограммы формы НА₀ показаны на фиг. 3.

Таблица 3. ΧΚΡΌ пики для формы НА₀

Пик №	Угол [°2-тэта]	Межплоскостное расстояние [ангстрем]	Интенсивность [%]
1	7,59	11,64	100
2	15,12	5,85	7,88
3	16,06	5,52	6,36
4	17,94	4,94	5,41
5	23,89	3,72	7,95

Характерные ΧΚΡΌ пики для формы НС₀ перечислены в следующей табл. 4. Параметры дифракционной рентгенограммы формы НС₀ показаны на фиг. 4.

Таблица 4. ΧΚΡΌ пики для формы НС₀

Пик №	Угол [°2-тэта]	Межплоскостное расстояние [ангстрем]	Интенсивность [%]
1	7,49	11,79	10,37
2	8,36	10,56	100
3	8,71	10,15	22,84
4	14,54	6,09	8,62
5	15,00	5,90	12,97
6	15,46	5,73	5,78
7	16,48	5,37	7,79
8	16,69	5,31	14,92
9	17,39	5,10	31,23
10	18,73	4,73	9,00
11	19,79	4,48	8,55
12	20,69	4,29	7,10
13	23,36	3,81	5,86
14	23,53	3,78	5,43
15	24,59	3,62	43,43
16	25,42	3,50	13,96
17	26,04	3,42	5,27

Характерные ΧΚΡΌ пики для формы ΗΌ₀ перечислены в следующей табл. 5. Параметры дифракционной рентгенограммы формы ΗΌ₀ показаны на фиг. 5.

- 4 020756

Таблица 5. ΧΚΡΌ пики для формы ΗΌ₀

Характерные ΧΚΡΌ пики для формы 82₀ перечислены в следующей табл. 6. Параметры дифракционной рентгенограммы формы 82₀ показаны на фиг. 6.

Таблица 6. ΧΚΡΌ пики для формы 82₀

Пик №	Угол [°2-тэта]	Межплоскостное расстояние [ангстрем]	Интенсивность [%]
1	8,56	10,32	58,9
2	9,80	9,02	58,8
3	10,62	8,32	26,8
4	11,04	8,01	54,2
5	12,68	6,98	31,8
6	14,64	6,04	61,0
7	16,07	5,51	81,0
8	17,18	5,16	37,5
9	17,23	5,14	43,7
10	19,75	4,49	50,9
11	22,24	3,99	100,0
12	23,02	3,86	99,5
13	23,31	3,81	22,8
14	27,06	3,29	55,8
15	27,85	3,20	42,6

Характерные ΧΚΡΌ пики для формы 83₀ перечислены в следующей табл. 7. Параметры дифракционной рентгенограммы формы 83₀ показаны на фиг. 7.

Таблица 7. ΧΚΡΌ пики для формы 83₀

Пик №	Угол [°2-тэта]	Межплоскостное расстояние [ангстрем]	Интенсивность [%]
1	6,70	13,19	54,7
2	7,61	11,61	12,5
3	8,67	10,19	100,0
4	10,29	8,59	13,3
5	11,57	7,64	16,7
6	13,36	6,62	23,3
7	15,02	5,89	11,7
8	16,80	5,27	30,8
9	16,85	5,26	22,1
10	17,33	5,11	7,1
11	25,20	3,53	7,1

Характерные ΧΚΡΌ пики для формы 84₀ перечислены в следующей табл. 8. Параметры дифракционной рентгенограммы формы 84₀ показаны на фиг. 8.

- 5 020756

Таблица 8. ΧΚΡΌ пики для формы 84₀

Пик №	Угол [°2-тэта]	Межплоскостное расстояние [ангстрем]	Интенсивность [%]
1	7,95	11,12	9,3
2	8,42	10,49	100,0
3	8,60	10,28	21,9
4	13,92	6,36	17,4
5	17,20	5,15	14,1
6	21,07	4,21	5,9
7	21,30	4,17	6,4
8	24,46	3,64	17,3

Характерные ΧΚΡΌ пики для формы 85₀ перечислены в следующей табл. 9. Параметры дифракционной рентгенограммы формы 85₀ показаны на фиг. 9.

Таблица 9. ΧΚΡΌ пики для формы 85₀

Пик №	Угол [°2-тэта]	Межплоскостное расстояние [ангстрем]	Интенсивность [%]
1	4,46	19,80	28,9
2	7,67	11,51	100,0
3	8,86	9,97	31,3
4	11,71	7,55	14,5

Характерные ΧΚΡΌ пики для формы 86₀ перечислены в следующей табл. 10. Параметры дифракционной рентгенограммы формы 86₀ показаны на фиг. 10.

Таблица 10. ΧΚΡΌ пики для формы 86₀

Пик №	Угол [°2-тэта]	Межплоскостное расстояние [ангстрем]	Интенсивность [%]
1	8,36	10,57	19,7
2	8,68	10,18	100,0
3	11,10	7,97	46,3
4	15,42	5,74	15,7
5	16,21	5,46	21,6
6	16,94	5,23	33,2
7	17,25	5,14	14,7
8	17,39	5,10	29,0
9	23,31	3,81	71,4
10	26,27	3,39	23,7

Характерные ΧΚΡΌ пики для формы 87₀ перечислены в следующей табл. 11. Параметры дифракционной рентгенограммы формы 87₀ показаны на фиг. 11.

Таблица 11. ΧΚΡΌ пики для формы 87₀

Пик №	Угол [°2-тэта]	Межплоскостное расстояние [ангстрем]	Интенсивность [%]
1	4,50	19,62	35,4
2	7,70	11,47	100,0
3	8,90	9,93	42,3
4	11,76	7,52	15,6

Характерные ΧΚΡΌ пики для формы 89₀ перечислены в следующей табл. 12. Параметры дифракционной рентгенограммы формы 89₀ показаны на фиг. 12.

- 6 020756

Таблица 12. ΧΚΡΌ пики для формы 89₀

Пик №	Угол [°2-тэта]	Межплоскостное расстояние [ангстрем]	Интенсивность [%]
1	8,34	10,59	100,0
2	8,67	10,19	23,0
3	16,68	5,31	7/2
4	17,33	5,11	8,5
5	24,57	3,62	39,3

Характерные ΧΚΡΌ пики для формы 810₀ перечислены в следующей табл. 13. Параметры дифракционной рентгенограммы формы 810₀ показаны на фиг. 13.

Таблица 13. ΧΚΡΌ пики для формы 810₀

Пик №	Угол [°2-тэта]	Межплоскостное расстояние [ангстрем]	Интенсивность [%]
1	4,45	19,83	42,6
2	7,62	11,59	100,0
3	8,79	10,06	43,4
4	11,62	7,61	14,7
5	15,84	5,59	11,3
6	17,67	5,02	12,9

Характерные ΧΚΡΌ пики для формы 812₀ перечислены в следующей табл. 14. Параметры дифракционной рентгенограммы формы 812₀ показаны на фиг. 14.

Таблица 14. ΧΚΡΌ пики для формы 812₀

Пик №	Угол [°2-тэта]	Межплоскостное расстояние [ангстрем]	Интенсивность [%]
1	7,63	11,58	100
2	7,67	11,51	92
3	8,63	10,24	12
4	9,00	9,82	55
5	14,78	5,99	10
6	17,13	5,17	12
7	17,39	5,09	11
8	17,99	4,93	33
9	18,15	4,88	10
10	24,46	3,64	60

Соответственно, в одном аспекте настоящее изобретение относится к новой кристаллической форме соединения I, имеющего формулу

а) форму А₀, которая характеризуется порошковой рентгеновской дифрактограммой, содержащей один или более из следующих пиков: 4,32, 6,07, 8,55, 12,07 и 15,37 ± 0,2° 2-тэта; или (B)

a) форму НС₀, которая характеризуется порошковой рентгеновской дифрактограммой, содержащей один или более из следующих пиков: 8,36, 8,71, 16,69, 17,39 и 24,59 ± 0,2° 2-тэта; или

Другим аспектом настоящего изобретения является фармацевтическая композиция для лечения рака, содержащая одну из указанных выше кристаллических форм соединения I или их смесь.

В предпочтительном варианте фармацевтическая композиция содержащит смесь указанных форм.

В другом предпочтительном варианте фармацевтическая композиция дополнительно содержит

- 7 020756 аморфную форму соединения I.

Терминология

Термин аморфный, как применяют в настоящем изобретении, относится к отсутствию характерной формы кристалла или кристаллической структуры.

Термин антирастворитель, как применяют в настоящем изобретении, относится к растворителю, в котором соединение является в основном нерастворимым.

Термин кристаллический, как применяют в настоящем изобретении, относится к имеющему регулярно повторяющуюся структуру молекул или плоскостей наружных поверхностей.

Термин кристаллическая форма, как применяют в настоящем изобретении, относится к твердому химическому соединению или смеси соединений, которая обеспечивает характеристичной диаграммой пиков при анализе порошковой рентгеновской дифракцией; она включает, но не ограничивается этим, полиморфные формы, сольваты, гидраты, сокристаллы и десольватированные сольваты.

Термин полиморфный или полиморфизм определяют как возможность по меньшей мере двух кристаллических структур для одной и той же химической молекулы.

Термин растворенное вещество, как применяют в настоящем изобретении, относится к веществу, растворенному в другом веществе, обычно компоненту раствора, присутствующему в небольшом количестве.

Термин раствор, как применяют в настоящем изобретении, относится к смеси, содержащей по меньшей мере один растворитель и по меньшей мере одно соединение, по меньшей мере, частично растворенное в растворителе.

Термин сольват, как применяют в настоящем изобретении, относится к кристаллическому веществу, которое содержит в кристаллической структуре молекулы растворителя.

Термин растворитель, как применяют в настоящем изобретении, относится к веществу, обычно жидкости, которая способна полностью или частично растворять другое вещество, обычно твердое вещество. Растворители для осуществления на практике настоящего изобретения включают, но не ограничиваются, воду, уксусную кислоту, ацетон, ацетонитрил (АСЫ), бензиловый спирт, 1-бутанол, 2-бутанол, 2-бутанон, бутиронитрил, трет-бутанол, Ν-бутилацетат, хлорбензол, хлороформ, циклогексан, 1,2-дихлорэтан (ОСЕ), дихлорметан (ЭСМ). дибутиловый эфир диэтиленгликоля (ΌΟΌΕ), диизопропиламин (ΌΙΡΑ), диизопропиловый эфир (ΌΙΡΕ), 1,2-диметоксиэтан (ЭЕ), Ν,Ν-диметилацетамид (ОМА), 4-диметиламинопиридин (ΌΜΑΡ), Ν,Νдиметилформамид (ОМЕ), диметилсульфоксид, 1,4-диоксан, этиленгликольдиметиловый эфир, этанол, этилацетат, этилдиизопропиламин, этиленгликоль, этилформиат, муравьиную кислоту, гептан, изобутиловый спирт, изопропилацетат (1РАС), изопропиловый спирт (ΙΡΑ), изопропиламин, литийдиизопропиламид (ΤΌΑ), метанол, метоксибензол (МТВ), метилацетат, метилэтилкетон (МЕК), метилизобутилкетон (МК), 2метилтетрагидрофуран, метил трет-бутиловый эфир (МТВЕ), 1:1 формамид:вода; 1:1 Ν-метилпирролидинон (NΜΡ):вода; 2-пентанон, 3-пентанон, 1-пентанол, 1,2-пропандиол, 2-пропанол (ΙΡΑ), 1-пропанол, пропанонитрил, пропиленкарбонат, 1,2-пропиленгликоль (ΡΟ), пиридин, тетрагидрофуран (ТИР), тетрагидропиран (ТНР), толуол, триэтиламин, ксилол, их смеси и подобные. Данные растворители разделяют на пять классов в соответствии с их функциональной группой: класс 1: протонные или подающие водородную связь растворители (кислоты Льюиса), включая бензиловый спирт, этанол, ΙΡΑ, метанол и воду; класс 2: акцептирующие водородную связь растворители (основания Льюиса), включая ацетон, 1,4-диоксан, ЭМР, этилацетат, МЕК, МТВЕ, ТНР и воду; класс 3: полярные апротонные растворители, которые имеет более подходящий термин негидроксильные растворители, включая ацетонитрил, ОМЛ, ОМЕ и ЭМ8О; класс 4: хлороуглеводородные растворители, которые включают хлороформ; Класс 5: углеводородные растворители, и насыщенные, и ненасыщенные, включая н-гептан, толуол, п-ксилол и ксилол.

Термин терапевтически эффективное количество, как применяют в настоящем изобретении, относится к количеству, требующемуся, как определено, для оказания предполагаемого физиологического эффекта, связанного с указанным лекарственным средством, как измерено согласно традиционным фармакокинетическим способам и методикам, для указанного пути введения. Подходящие и конкретные терапевтически эффективные количества может легко определить лечащий специалист, устанавливающий диагноз как специалист в данной области техники применением общепринятых способов. Эффективная доза будет изменяться в зависимости от ряда факторов, включая тип и стадию заболевания или расстройства, общее состояние здоровья конкретного пациента, относительную биологическую эффективность выбранного соединения, состав активного агента с подходящими вспомогательными веществами и путь введения. Обычно кристаллические формы будут вводить при более низких дозах с постепенным увеличением до достижения требуемого эффекта.

Если не установлено иначе, проценты, указанные в настоящем описании, представляют собой проценты мас./мас. (^/^).

Термин фармацевтически приемлемые вспомогательные вещества, как применяют в настоящем изобретении, включает любой и все растворители, диспергаторы, покрытия, антибактериальные и противогрибковые агенты, агенты, придающие изотоничность, и агенты, задерживающие всасывание, и подобные. Применение данных сред и агентов для фармацевтически активных веществ является хорошо известным в данной области техники (например, описывается в Кетш§1оп: ТНс §с1епсе апб ΡταοΙίοο οί

- 8 020756

РЬагтасу, 20ΐ1ι ей.; Оеппаго, А. К., Ей.; Ырршсой ХУПЬапъ & ХУПкпъ: РЫ1айе1рЫа, РА, 2000). За исключением случаев, когда любая общепринятая среда или агент является несовместимым с активным ингредиентом, предполагается его применение в терапевтических композициях. Дополнительные активные ингредиенты можно также вводить в композиции.

Для терапевтических целей кристаллические формы настоящего изобретения можно вводить любым способом, который приводит в результате к контакту активного лекарственного вещества с местом его действия в организме субъекта. Кристаллические формы можно вводить любым общепринятым способом, пригодным для применения в сочетании с фармацевтическими средствами, или в виде отдельных терапевтических средств, или в комбинации с другими терапевтическими средствами, такими как, например, анальгетики. Кристаллические формы настоящего изобретения предпочтительно вводить в терапевтически эффективных количествах для лечения заболевании и расстройств, описанных в настоящем изобретении, у нуждающегося в лечении субъекта.

При терапевтическом или профилактическом применении кристаллические формы настоящего изобретения можно вводить любым путем, которым обычно вводят лекарственные средства. Данные пути введения включают внутрибрюшинный, внутривенный, внутримышечный, подкожный, интратекальный, интратрахеальный, интравентрикулярный, пероральный, буккальный, ректальный, парентеральный, интраназальный, трансдермальный или внутрикожный. Введение может быть системным или локализованным.

Кристаллические формы, описанные в настоящем изобретении, можно вводить в чистой форме, смешанной с другими активными ингредиентами или смешанной с фармацевтически приемлемыми нетоксичными вспомогательными веществами или носителями. Оральные композиции будут обычно содержать инертный носитель, являющийся разбавителем, или носитель, пригодный для употребления в пищу. Фармацевтически совместимые связующие агенты и/или вспомогательные вещества можно включать как часть композиции. Таблетки, пилюли, капсулы, пастилки и подобные могут содержать любой из следующих ингредиентов или соединений аналогичной природы: связующий агент, такой как микрокристаллическая целлюлоза, трагакантовая камедь или желатин; вспомогательное вещество, такое как крахмал или лактоза, диспергатор, такой как альгиновая кислота, примогель или кукурузный крахмал; смазывающий агент, такой как стеарат магния; регулятор сыпучести, такой как коллоидный диоксид кремния; подсластитель, такой как сахароза или сахарин; или ароматизатор, такой как перечная мята, метилсалицилат или апельсиновый ароматизатор. Когда стандартной лекарственной формой является капсула, она может содержать в добавление к веществам вышеуказанного типа жидкий носитель, такой как жирное масло. Кроме того, стандартные лекарственные формы могут содержать различные другие вещества, которые изменяют физическую форму лекарственной формы, например, покрытие из сахара, шеллак или кишечнорастворимые агенты. Кроме того, сироп может содержать в добавление к активным соединениям сахарозу в качестве подсластителя и определенные консерванты, красители, красящие вещества и ароматизаторы.

Альтернативные препараты для введения включают стерильные водные или неводные растворы, суспензии и эмульсии. Примерами неводных растворителей являются диметилсульфоксид, спирты, пропиленгликоль, полиэтиленгликоль, растительные масла, такие как оливковое масло, и сложные инъецируемые органические эфиры, такие как этилолеат. Водные носители включают смеси спиртов и воды, буферные среды и соляной раствор. Внутривенные среды включают подкрепители среды и питательных веществ, электролитные подкрепители, такие как подкрепители на основе раствора Рингера с декстрозой, и подобные. Могут также присутствовать консерванты и другие добавки, такие как, например, противомикробные вещества, антиоксиданты, хелатообразующие вещества, инертные газы и подобные.

Предпочтительные способы введения кристаллических форм млекопитающим включают внутрибрюшинную инъекцию, внутримышечную инъекцию и внутривенное вливание. Различные жидкие составы являются возможными для данных способов доставки, включая соляной раствор, спирт, ΌΜ8Ο и растворы на основе воды. Концентрация может изменяться в зависимости от дозы и объема, которые нужно доставить, и может находиться в диапазоне от приблизительно 1 до приблизительно 1000 мг/мл. Другие составляющие жидких составов могут включать консерванты, неорганические соли, кислоты, основания, буферы, питательные вещества, витамины или другие фармацевтические агенты, такие как анальгетики или дополнительные ингибиторы РАКР и киназ.

Измерительное оборудование

Порошковая рентгеновская дифракция (ХКРИ)

ХКРИ рентгенограммы регистрировали на РАЫа1у11са1 X' Рей Рго дифрактометре, применяя Си Κα излучение при 40 кВ и 40 мА. Кремниевый стандарт применяли для проверки настройки рентгеновской трубки. Образец прижимали к кварцевой пластине на нулевом уровне в алюминиевом фиксаторе. Стандартные снимки порошковой рентгенограммы получают от приблизительно 2 до 40° 2Θ с 0,0080° размером шага и 96,06-секундным временем счета, что приводило в результате к скорости развертки 0,5°/мин.

Для данных монокристаллических исследований отобранные кристаллы покрывают паратоновым маслом и быстро замораживают на ОхГогй йГГгасйоп ССЭ дифрактометре (ХсаПЬиг 8, с 8аррЫге детекто- 9 020756 ром). Данные собирают с помощью способов с детектором со стандартной зоной. Структуры разрешают и уточняют с помощью 8НЕЬХТЬ пакета программ. Программное уточнение методом Ритвельда параметров монокристалла на основании полученной ΧΚΡΌ рентгенограммы хорошо согласуется с не необъяснимыми пиками.

Порошковая рентгеновская дифракция с переменной температурой (νΤ-ΧΚΡΌ)

Исследования с переменной температурой проводили в атмосфере азота с Αηΐοη Рааг ТТК450 камерой для температурных испытаний с компьютерным контролем с помощью Άηΐοη Рааг ТСИ100 устройства для контроля температуры. Применяли две схемы измерения, ограниченную и непрерывную. В ограниченном режиме измерения осуществляли только тогда, когда ТК450 камера достигала требуемой температуры. В непрерывном режиме образец нагревали при скорости 10°С/мин и получали быстрые сканы при изменении температуры. После достижения требуемой температуры образец охлаждали при скорости 30 или 35°С/мин и получали более медленные сканы при 25°С. Температуры выбирали на основе ДСК результатов.

Дифференциальная сканирующая калориметрия (ДСК)

Кривые нагрева получали, применяя Реткт-Е1тет 8аррЫте ДСК устройство, снабженное автоматическим пробоотборником, управляемое Руп$ программным обеспечением версии 6.0, калиброванное индием перед анализом. Твердые образцы 1-11 мг взвешивали в 20 мкл открытых алюминиевых кюветах для образцов. Затем ДСК кювету продували азотом и температуру повышали от 0 до 275°С при скорости 10°С/мин.

Термогравиметрический анализ (ТГА)

Кривые нагрева получали, применяя Реткш-Е1тет Руп$ 1 ТОЛ устройство, управляемое Руп$ программным обеспечением версии 6.0, калиброванное моногидратом оксалата кальция. ТГА образцы между 1-15 мг проверяли на процентную потерю веса при нагревании от 25 до 400°С со скоростью 10°С/мин в печи, продуваемой гелием при приблизительно 50 мл/мин.

Динамическая сорбция паров (ДСП)

Эксперименты с гравиметрической сорбцией паров осуществляли, применяя Όνδ-НТ устройство (8шТасе МеахигетеЩ 8у$1ет$. Όοηάοη, ИК). Данное устройство измеряет поглощение и потерю паров гравиметрически, применяя регистрирующие вес ультрамикровесы с весовым разрешением ±0,1 мкг. Парциальное давление паров (±1,0%) вокруг образца контролируют смешением насыщенного и сухого потоков газа-носителя, применяя электронные регуляторы массового расхода. Требуемую температуру поддерживают в диапазоне ±0,1°С.

Образцы (10-25 мг) помещают в Όνδ-НТ устройство при требуемой температуре. Проводят два типа экспериментов с динамической сорбцией паров

1. Образец первоначально сушат в потоке сухого воздуха (<0,1% относительная влажность (КН)) в течение 20 ч для получения сухой массы и подвергают двум 0-90% КН циклам (с 10% КН приращением).

2. Образец подвергают 90% КН в течение 20 ч и подвергают двум 90-0% КН циклам (с 10% КН приращением).

Инфракрасная спектрометрия (РТ1К)

Спектры получали, применяя ТНегию Е1ес1гои-№со1е1 Ауа1аг 370 ЭТО8 прибор с 8тай ОгЬН АТК приставкой, содержащей алмазное окно. ТНегию Е1ес1гои Отшс™ программное обеспечение (версия 3.1) применяли для расчета спектра от 4000 до 400 см^-1 от первоначальной интерферограммы. Получали скан фона перед получением спектра для каждого образца. Для каждого образца получали 32 скана при 4 см^-1спектральном разрешении и усредняли.

Рамановская спектроскопия

Рамановские спектры образца регистрировали с помощью ΡΤ-Катаη модуля на уейех 70 РТ1К спектрометре (Вгикег КАМ II, Вгикег орйс8, Оегтану). Германиевый фотодиод применяли для регистрации ΡΤ-Катаη спектра, возбужденный лазером на иттрий-алюминиевом гранате с неодимом (подавление флуоресценции). Полистирольный стандарт применяли перед анализом образцов. Время исследования для каждого образца составляло 1 мин с разрешением 4 см^-1, и мощность 1064 нм лазера для образца составляла 50 мВт.

Индивидуальность, анализ и чистота

Обычно 10 мкл аликвоты растворов образцов разбавляли до 1 мл ацетонитрилом и концентрации для анализа определяли из среднего для дублирующих инъекций, применяя следующий ВЭЖХ способ. Анализ чистоты и примесей осуществляли, применяя общепринятую ВЭЖХ.

- 10 020756

Колонка :

гогЬах ЕсИрзе ΧΌΒ Οι₈, 4,6x150 мм, 5μ

Температура колонки: Вводимый объем:

УФ детектирование:

Скорость потока:

Время записи хроматограммы: Подвижная фаза А:

Подвижная фаза В:

25°С мкл

238 нм

0,8 мл/мин минут

0,1% ТРА в воде

0,1% ТРА в ацетонитриле

Время (мин)	А%	В%
0	70	30
6,0	55	45
10	55	45
25	10	90
25,1	70	30
30	70	30

Примеры

Способ получения соединения I

Соединение I можно получить согласно схеме I.

В схеме I синтез начинают с 4-метоксииндола, имеющегося в продаже исходного соединения. После защиты атома азота индола ди-трет-бутилдикарбонатом ((Вос)₂О) индольное производное активируют литийдиизопропиламидом (1Т)А) для получения карбаниона в 2-положении индола, который реагирует т-зйи с триизопропилборатом. Кислая обработка гидролизует боронатный эфир, являющийся промежуточным соединением, до соответствующей индолбороновой кислоты А. Затем соединение А конденсируют с 1-циклопентенилтрифторметансульфонатом (также называемым енолтрифлатом в настоящем изобретении) в присутствии каталитических количеств ацетата палладия и трифенилфосфина в условиях реакции Судзуки для получения ключевого диенового промежуточного соединения В. После удаления Вое защитной группы метоксидом натрия диеновое соединение С конденсируют с малеимидом по реакции Дильса-Альдера в уксусной кислоте для получения пентациклического промежуточного соединения Ό. Ароматизация с помощью окисления хлоранилом превращает соединение Ό в соединение Е, которое конденсируют с 1-метилпиперазином в условиях реакции Манниха для получения целевого соединения I. Подробные особенности получения приводятся ниже.

Получение Ы-Вос-4-метоксииндола

В 100-галлоновый стеклоэмалированный реактор загружали 4-метоксииндол (20,0 кг, 136 моль, Υΐχΐηβ /Колдун МеЛсте ТесЬпо1оду Со., ЫЛ) с последующим добавлением ΌΜΑΡ (0,50 кг, 4,1 моль, АШпсй) и толуола (92 кг, Согсо геадеп! дгаОе). Полученную в результате смесь перемешивали и нагревали до приблизительно 40°С. Тем временем во втором реакторе получали раствор ди-третбутилдикарбоната (31,8 кг, 146 моль, Ьасашаз ЬаЪогаЩпез, Лс.) в толуоле (60 кг, Согсо геадеп! дгаТе).

- 11 020756

Данный раствор добавляли к индольному раствору в течение приблизительно 1³/4 ч. Слегка экзотермическая реакция (максимальная температура приблизительно 41°С) сопровождалась выделением газа. После перемешивания в течение дополнительного часа при 40°С реакционный раствор охлаждали до 20±3°С. Испытание в ходе процесса показало, что 4-метоксииндол был израсходован полностью. Деионизированную воду (15 галлонов) добавляли для разложения избытка (Вос)2О (осторожно: выделение газа). Полученную в результате смесь энергично перемешивали в течение ¹/2 ч, затем выдерживали в течение ночи. После удаления нижнего водного слоя органический слой частично концентрировали при пониженном давлении для удаления приблизительно 145 л отгона (60°С рубашка, вплоть до 60 мм Нд). На данном этапе дополнительное количество толуола (30 кг, Согсо геадеп! дгабе) загружали и продолжали отгонку до суммарного количества отгона 200 л. Затем остаток охлаждали до комнатной температуры и сбрасывали в пластиковую бочку, что давало в результате 62,3 кг темно-желтого раствора, содержащего 33,6 кг Ы-Вос-4-метоксииндола (принимаемый теоретический выход). Его применяли в следующей стадии без дополнительной очистки.

Получение соединения А

1-(1,1-Диметилэтиловый) эфир 2-бороно-4-метокси-1Н-индол-1-кабоновая кислота Приблизительно половину полученного выше раствора помещали в 100-галлоновый стеклоэмалированный реактор с последующим добавлением толуола (3,0 кг для разбавления загружаемого вещества до 50 мас.%), триизопропилбората (19,9 кг, 105,9 моль, Апбегкоп Неуе1ортеп! Со.) и ТНЕ (91 кг, Согсо гсадсШ дгабе). Полученный в результате раствор перемешивали и охлаждали до -2°С. На данном этапе литийдиизопропиламид (37,3 кг, 91,8 моль, 27% раствор в этилбензол/тетрагидрофуран/гептан, ЕМС υΐΐιίιιιη) добавляли в течение 1 ч, сохраняя температуру смеси ниже 3°С (-10°С рубашка). Полученную в результате реакционную смесь перемешивали при 0+3°С после добавления ЬИА до обнаружения завершения реакции ВЭЖХ (0,6 А% Ы-Вос-4-метоксииндола, оставшегося через 30 мин после добавления ЬИА). Тем временем, раствор 3 N НС1 получали и охлаждали до ~5°С во втором реакторе разбавлением 27 кг концентрированной хлористо-водородной кислоты в 16,3 галлонах деионизированной воды. Данную разбавленную НС1 добавляли к смеси в течение 1 ч, поддерживая температуру смеси <15°С (температура смеси достигала 8°С в конце добавления). Затем температуру рубашки устанавливали равной 20°С. Реактор и линии для добавления промывали деионизированной водой (6 галлонов) и промывочные растворы объединяли со смесью. За этим следовало добавление МТВЕ (27 кг, РгШе). Полученную в результате смесь перемешивали в течение '/₂ ч, затем перемешивание останавливали для разделения фаз. Водный слой отделяли и экстрагировали МТВЕ (14 кг, Рпбе) во втором реакторе. Объединенные органические слои промывали последовательно 5% Ν;·ιΟ (34 л), 5% Ν;·ιΗί'.Ό₃, (34 л) и 10% Ν;·ιΟ (19 л). После переноса в бочку и взвешивания (172,2 кг) органическую фазу возвращали в реактор и концентрировали при пониженном давлении (температура рубашки реактора установлена на 30°С), удаляя 116 кг отгона в течение трехчасового периода. Полученную в результате суспензию разбавляли н-гептаном (75 кг, Согсо геадеп! дгабе) и дополнительно упаривали для удаления дополнительных 75 л отгона. После перемешивания при комнатной температуре в течение ночи суспензию охлаждали до ~5°С в течение 1 ч. Продукт собирали на Аигога фильтре и промывали 33 кг н-гептана. Остаток на фильтре сушили в лотках при комнатном давлении в течение ночи с продувкой азотом, но не нагреванием. Это давало в результате 17,8 кг (88,8% выход, уточненный) соединения А в виде грязно-белого твердого остатка. ВЭЖХ чистота: 100 ЬСАР, 95,8 1.С\\Т.

Получение 1-циклопентен-1-илового эфира 1,1,1-трифторметансульфоновой кислоты В 100-галлоновый стеклоэмалированный реактор при комнатной температуре загружали циклопентанон (8,95 кг, 106,5 моль) с последующим добавлением толуола (116,40 кг, Согсо геадеп! дгабе) и этилдиизопропиламина (16,6 кг, 128,7 моль). Полученный в результате раствор перемешивали и нагревали до 45±5°С. На данном этапе трифторметансульфангидрид (36,2 кг, 128,4 моль) добавляли в течение приблизительно 1 ч из 30-литровой капельной воронки. Добавление трифторметансульфоангидрида было очень экзотермичным. Охлаждение с помощью рубашки (установлена на 10°С) применяли для поддержания температуры смеси 45±5°С. Температура смеси падала ниже 40°С в течение 7 мин в процессе 44минутного добавления. Перемешивание продолжали при 39-45°С в течение 20 мин после добавления трифторметансульфоангидрида. Испытание в ходе процесса после данных 20 мин показало полное потребление циклопентанона. После охлаждения до 19,6°С смесь фильтровали через слой целита (18,0 кг) на фильтре. Фильтрат собирали в чистую стальную бочку с полимерным покрытием. Слой целита промывали толуолом (37,0 кг, Согсо геадеп! дгабе). Промывочный раствор смешивали со смесью в той же самой стальной бочке с полимерным покрытием. Фильтрат (159,85 кг) анализировали с образцом для сравнения для того, чтобы показать, что он содержит 19,50 кг (83,3% выход) енолтрифлата. Данный раствор енолтрифлата в толуоле хранили в холодной комнате в течение ночи и применяли в последующей реакции конденсации Сузуки без дополнительной очистки.

Получение соединения В

1,1-Диметилэтиловый эфир 2-(1-циклопентен-1-ил)-4-метокси-1Н-индол-1-карбоновой кислоты В 100-галлоновый стеклоэмалированный реактор при комнатной температуре загружали соединение А (18,00 кг, 61,8 моль), трифенилфосфин (648,8 г, 2,47 моль) и ацетат палладия (277,0 г, 1,23 моль).

- 12 020756

Затем реактор разрежали и заполняли три раза азотом. Толуол (78,3 кг, Согсо геадеп! дгабе) вводили в реактор с помощью струйного насоса с последующим добавлением дициклогексиламина (44,5 кг, 245,4 моль). Это добавление отнимало 4 мин. Полученную в результате суспензию энергично перемешивали (125 об/мин) при комнатной температуре в течение 21 мин с последующим медленным добавлением енолтрифлата в толуоле (131,7 кг, содержащие 16,07 кг енолтрифлата, 74,3 моль) в течение 43 мин. Добавление енолтрифлата было экзотермическим. Охлаждение с помощью рубашки применяли для поддержания температуры смеси равной 18,8-27,5°С. Полученную в результате гетерогенную смесь перемешивали при 18,4-22,3°С до обнаружения завершения реакции ВЭЖХ (обратите внимание: хотя реакция завершилась за менее чем 1 ч, перемешивание все еще продолжали при комнатной температуре в течение ночи перед продолжением обработки. Это было сделано ради удобства. Смесь можно выдерживать при комнатной температуре в течение вплоть до 100 ч с отсутствием побочных эффектов на продукт). Добавляли к смеси целит (9,00 кг). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 мин и затем фильтровали через слой целлита (2,70 кг) на фильтре. Фильтрат собирали в две чистые стальные бочки с полимерным покрытием. Остаток на фильтре промывали толуолом (47,8 кг, Согсо геадеШ дгабе). Промывочный раствор объединяли со смесью в тех же самых стальных бочках с полимерным покрытием. Фильтрат (260,45 кг) анализировали с образцом для сравнения для того, чтобы показать, что он содержит 20,59 кг (106,4% выход) соединения В. Было сделано предположение на основе анализа, что данная реакция прошла со 100% выходом, и загрузки в следующую стадию осуществляли, как если бы реакция прошла на 100%. Раствор соединения В в толуоле хранили в опытной установке при комнатной температуре и применяли в следующей стадии деблокирования без дополнительной очистки.

Получение соединения С

2-(Циклопентен-1-ил)-4-метокси-1Н-индол

В 100-галлоновый стеклоэмалированный реактор при комнатной температуре загружали соединение В в потоке толуола (12,82 кг соединения В, 40,96 моль) с последующим добавлением метоксида натрия (44,0 кг, 25-30 мас.% раствор в МеОН, 203,7 моль). Полученный в результате раствор перемешивали и нагревали до 45±5°С. Перемешивание продолжали при 45±5°С до обнаружения завершения реакции ВЭЖХ (реакция завершалась в течение ~4 ч, ВЭЖХ данные получены через ~8 ч). Затем смесь охлаждали до 23,5°С в течение 26 мин. Смесь перемешивали в течение ночи при 22±2°С. Через ~17 ч при 22°С приблизительно '/₂ смеси (111,15 кг) переносили во второй реактор и обрабатывали отдельно. В первый реактор загружали Э! воду (21 галлон). Полученную в результате смесь перемешивали в течение 16 мин, затем перемешивание останавливали. После разделения слоев при комнатной температуре в течение 46 мин нижний водный слой удаляли. За этим следовала небольшая порция смешанного слоя, который сбрасывали в чистый баллон. Оставшийся органический слой фильтровали через слой целлита (3,84 кг) на фильтре. Фильтрат собирали в чистую стальную бочку с полимерным покрытием. Затем смешанный слой фильтровали через тот же слой целита и фильтрат собирали в новый баллон. Слой целита промывали толуолом (6,20 кг, Согсо геадеШ дгабе) и данный промывочный раствор смешивали с отфильтрованным смешанным слоем. Затем отфильтрованный смешанный слой переносили в стеклянную делительную воронку, в которой нижний водный слой удаляли, и органический слой из смеси смешивали с первоначальным органическим слоем. Данный способ обработки повторяли со второй половиной смеси, получая второй толуольный раствор соединения С. Максимальное возможное количество второго раствора помещали в стальную бочку с полимерным покрытием, содержащую первый органический слой (164,70 кг, содержащие 8,14 кг соединения С). Оставшийся второй органический слой содержали в небольшой полимерной бочке (19,05 кг, содержащий 0,49 кг соединения С). Данные два раствора хранили в опытной установке для дальнейшей обработки в следующей стадии без дополнительной очистки. Был получен суммарный вес 8,63 кг (99,2% выход) соединения С.

Получение соединения Ό

3а,3Ь,4,5,6,6а,7,11с-Октагидро-11-метокси-1Н-циклопента[а]пирроло[3,4-с]карбазол-1,3(2Н)-дион

В 100-галлоновый стеклоэмалированный реактор при комнатной температуре загружали соединение С в потоке толуола (12,58 кг соединения С, 59,1 моль). Данный раствор концентрировали при максимальном вакууме и при внутренней температуре <40°С до того, как остаток весил приблизительно в шесть раз больше соединения С (требуемый объем ~75,5 л), в течение приблизительно 7 ч. Данный остаток выливали в чистую полиэтиленовую бочку и применяли в следующей реакции Дильса-Альдера без дополнительной очистки. Во второй 100-галлоновый стеклоэмалированный реактор загружали малеимид (7,45 кг, 76,8 моль, СагЬокуШЪ ЫшИеб) с последующим добавлением ледяной уксусной кислоты (145,70 кг). Полученную в результате смесь перемешивали для получения раствора. На данном этапе концентрированный раствор соединения С, полученный ранее (84,95 кг), загружали в течение приблизительно 20 мин, контролируя температуру смеси равной 20±10°С (температуру рубашки устанавливали равной 15°С). Полученную в результате смесь перемешивали при 30±3°С до обнаружения завершения реакции ВЭЖХ (реакция завершалась через ~15,5 ч, ВЭЖХ данные получали через ~17,5 ч). Затем смесь охлаждали до 23,2°С в течение приблизительно 20 мин. После анализа маточника на массу на основе ВЭЖХ анализа и подтверждения, что он содержит менее чем 10% соединения Ό (найдено 5,88%), смесь фильтровали через Аигога фильтр (2,5 ч после достижения 23,2°С для времени фильтрования). Остаток на

- 13 020756 фильтре промывали ледяной уксусной кислотой (39,65 кг) и продували для сушки на фильтре в вакууме потоком азота до достижения чистоты соединения Ό, удовлетворяющей требованиям спецификации (>90 мас.%) ВЭЖХ анализом на основе веса (сушку осуществляли в течение 3 ночей, чистота равнялась 99,5 мас.%, после 3 ночей). Затем продукт выгружали в две картонные бочки с полиэтиленовыми мешками для получения 13,43 кг (73,3% выход) требуемого соединения Ό в виде коричневого твердого остатка. Данное соединение применяли в следующей стадии окисления хлоранилом без очистки.

Получение соединения Е

4,5,6,7-Тетрагидро-11-метокси-1Н-циклопента[а]пирроло[3,4-с]карбазол-1,3(2Н)дион

В 100-галлоновый стеклоэмалированный реактор при комнатной температуре загружали соединение Ό (28,66 кг, 92,45 моль) с последующим добавлением тетрахлор-п-бензохинона (45,50 кг, 185,0 моль, 99%, АСКО8) и ТНР (253,1 кг, СОКСО геадеп! дтабе). Полученную в результате гетерогенную смесь нагревали до 65±5°С и перемешивали при данной температуре до обнаружения завершения реакции ВЭЖХ (реакция протекала в течение ~22 ч, ВЭЖХ данные получали через ~23 ч). Затем смесь охлаждали до 22±5°С в течение 35 мин, анализировали на расход соединения Е в растворе (<10% требования; найдено 1,9%) и фильтровали через фильтр. Реактор, линии и остаток на фильтре промывали смесью ТНР-Е!ОНН₂О (полученной во втором реакторе смешением 62,0 кг ТНР с 41,25 кг Е!ОН и 4,64 галлонами деионизированной воды). Влажный остаток на фильтре сушили на фильтре в вакууме в потоке азота, до того как продукт стал удовлетворять требованиям спецификации (>80 мас.% соединения Е; найдено 80,8 мас.% через 5 дней). Затем продукт выгружали в две пластиковые бочки с полиэтиленовыми мешками, получая 23,84 кг (86,7% выход) соединения Е темного зелено-желтого твердого остатка. Данное вещество применяли непосредственно в следующей реакции Манниха без дополнительной очистки.

Получение соединения I

В 100-галлоновый стеклоэмалированный реактор загружали соединение Е (15,20 кг, 40,1 моль) с последующим добавлением параформальдегида (2,51 кг, 80,9 моль, 97%, АСКО8) и денатурированного этанола (223,45 кг, геадеп! дтабе). Полученную в результате смесь перемешивали (121 об/мин), в то время как 1-метилпиперазин (6,65 кг, 65,77 моль, АСКО8, 99%) добавляли в течение приблизительно 10 мин из капельной воронки. Полученную в результате реакционную смесь нагревали и перемешивали при 70°С. Протекание реакции контролировали ВЭЖХ (1,35% соединения Е оставалось через ~5 ч). После перемешивания при 70°С в течение в сумме 9 ч смесь охлаждали до 20±3°С и перемешивали при данной температуре в течение ночи. Продукт фильтровали через фильтр. Остаток на фильтре промывали этанолом (43,9 кг, геадеп! дтабе) и сушили на фильтре продувкой азотом до того, как остаточный этанол составлял менее чем 12 мас.% с помощью 'Н ЯМР (8,4 мас.% относительно соединения I). Затем продукт выгружали в картонную бочку с полиэтиленовым пакетом для получения 18,05 кг (95,8% выход) неочищенного соединения I в виде желтого твердого остатка: 98,6 ЬСАР, 89,2 ЬС^Р. Данное вещество применяли непосредственно в следующем по потоку процессе без дополнительной очистки.

Скрининг полиморфизма

Исследования по кристаллизации осуществляли для изучения полиморфизма в 48 различных растворителях. Растворители выбирали на основе соответствия требованиям (1СН класс 3 и 2) и для того, чтобы получить диапазон диэлектрических постоянных, дипольных моментов и функциональных групп. Выбирали два исходных вещества: форму Аз и лот 7 (смесь формы Аз, формы НС₀ и формы НЭ₀). При наличии возможности получали все характеристики для новых форм, которые были получены в процессе скрининга полиморфизма соединения I. Данные характеристики включали ΧΚΡΌ, термический анализ, ДСП, хранение при 40°С/75% КН и чистоту.

Четыре методики для кристаллизации, включая охлаждение, упаривание и добавление антирастворителя, применяли для получения различных полиморфных форм соединения I. Подробности каждого способа кристаллизации даны ниже. Твердые формы, полученные из каждого растворителя из данных методик, приведены в табл. 15.

Способ кристаллизации

1. Скрининг с быстрой кристаллизацией

Применяли две мелкомасштабные методики скрининга.

A. Приблизительно 1 мг соединения I взвешивали в 0,5-мл полипропиленовой пробирке для центрифуги и 0,5 мл растворителя. Пробирку для центрифуги оставляли в течение 18 ч нетронутой при комнатной температуре и наблюдали изменения. Затем пробирку встряхивали в течение 2,5 ч при 52,5°С и наблюдали изменения в каждой пробирке. Затем нагретую пробирку для центрифуги встряхивали в течение 20 ч при 2-8°С и осуществляли наблюдения за изменением кристаллического состояния (если оно вообще было) по сравнению с первоначальными условиями с комнатной температурой.

B. Пластинки, содержащие 10 объемов соединения I (40 мг лота 7 в 400 мкл), нагревали от 20°С до первоначальной температуры 80°С при скорости нагревания 4,8°С/мин и через 30 мин охлаждали при низкой (0,28°С/мин) или высокой (10°С/мин) скорости охлаждения до конечной температуры 5°С и выдерживали при данной температуре в течение 18 ч. Эксперименты по кристаллизации осуществляли в планшетах с лунками для стеклянных пробирок (4 мл) и твердые вещества выделяли фильтрацией. Твердое вещество сушили при 57°С в течение 10 ч.

- 14 020756

2. Кристаллизация с быстрым охлаждением

Образцы получали добавлением 40 мг (±2) твердого соединения I к объему растворителя, обеспечивая условием насыщения при температуре кипения. Смесь охлаждали и фильтровали через 0,2-мкм найлоновый мембранный фильтр в нагретую стеклянную пробирку или коническую колбу Эрленмейера. Раствор охлаждали до комнатной температуры и помещали в холодильник (приблизительно 4° С) до того, как, по-видимому, образование кристаллов завершалось, как определено визуальным обследованием. Каждый образец из холодильника декантировали, и кристаллы переносили на бумагу для взвешивания и сушили до постоянного веса в естественных лабораторных условиях. Образцы, которые было сложно декантировать, центрифугировали при 12000 об/мин в течение 4 мин. Если способ с быстрым охлаждением не давал в результате твердые вещества, данные образцы концентрировали упариванием приблизительно до половины объема растворителя. Растворы снова помещали в холодильник, и твердое вещество выделяли декантированием или центрифугированием.

3. Кристаллизация при выдерживании лота 7 и формы А₀

Осуществляли два типа исследований с выдерживанием.

Α. Образцы получали добавлением приблизительно 10 мг или лота 7 или формы А₀ к 1,0 мл каждого растворителя в пробирках с завинчивающейся пробкой (объем приблизительно 4,0 мл). Затем их нагревали до 64°С при встряхивании. После выдерживания при 64°С в течение 40 мин образцы охлаждали до 5°С (при скорости охлаждения -0,25°С/мин). Образцы выдерживали при 5°С в течение суммарного времени 18 ч и переносили пипеткой в 1,5-мл полипропиленовые пробирки для центрифуги и центрифугировали при 12000 об/мин в течение 1 мин. Надосадочную жидкость декантировали. Затем остатки в пробирках для центрифуги или стеклянных пробирках сушили в вакуумной печи при 110°С в течение 18 ч и анализировали ΧΚΡΏ.

В. Приблизительно 40 мг формы А₀ суспендировали в различных растворителях (10 объемов (40 мг в 400 мкл)). Суспензии встряхивали в течение 48 ч с чередующимися 4-часовыми периодами при 50°С (0,5°С/мин) и 5°С (-0,5°С/мин). Затем твердое вещество выделяли фильтрацией и анализировали ΧΚΡΏ и термическим анализом.

4. Кристаллизация с применением суспензии формы А₀

Суспензии (20 мг формы А₀ в 500 мкл каждого растворителя) встряхивали при 25°С в течение различного времени. Твердое вещество выделяли фильтрацией и сушили при 57°С в течение 2 ч и анализировали ΧΚΡΏ.

ΧΚΡΏ результаты для выделенных твердых форм для четырех способов кристаллизации показаны в табл. 15 ниже.

Таблица 15. Итоговая таблица для форм соединения I, полученная на основании ΧΚΡΏ результатов для 48 различных растворителей и различных способов кристаллизации

Растворитель	Формы, полученные ΧΕΡΌ
1,2-дихлорэтан	А_о, НА₀, НС₀, НО₀
1,2-диметоксиэтан	НА₀
1,4-диоксан	А_о, НС₀, ΗΌ₀
1-бутанол	Ηϋ₀
1-пентанол	ΗΌ₀
1-пропанол	39о, НС₀, ΗΟ₀
2-бутанол	Ао, НС₀, НО₀
2-бутанон	НС₀, ΗΌ₀
2-метилтетрагидрофуран	А_о, НС₀, ΗΌ₀
2-пентанон	НА₀, НС₀, ΗΌ₀
2-пропанол	33₀, НС₀, ΗΌ₀
3-пентанон	А_о, НА₀, НС₀, НО₀
Ацетон	Ао, НСо, ΗΌο
Ацетонитрил	НС₀, ΗΌ₀
Бутиронитрил	А_о, НА₀, ΗΌ
Хлорбензол	Ао, ΗΌ₀
Хлороформ	НС, ΗΌ₀
Циклогексан	А_о, НСо, ΗΌ₀
Дихлорметан	А_о, НС₀, ΗΌ₀
Дибутиловый эфир диэтиленгликоля	Ао
Диизопропиламин	А_о, ΗΌ₀
Диизопропиловый эфир	А_о, НА₀, НС₀, НО₀
Диметилсуль фоксид	НС₀, ΗΌ₀

- 15 020756

Скрининг полиморфизма соединения I дал четырнадцать форм и новую форму (форма В₀), полученную только при нагревании гидратов выше 120°С. Результаты выделенных форм показаны в табл. 16 ниже.

Таблица 16. Характеристики выделенных форм соединения I

Форма	ΧΚΡΌ	ДСК	ТГА (потеря веса 25°С-150°С)	Физическая стабильность (ΧΚΡΌ через 4 недели при 40775% КН) (площадь, %)	Химическая стабильность (ВЭЖХ через 4 недели при 40775% КН)	ДСП % увеличения массы при 90% КН	ΧΚΡΌ после ДСП анализа	Чистота (%)
Ао	Кристаллическое	Эндотерма плавления при 239,7°С	0,07%	Нет значительных изменений	99,0	0,1	Нет значительных изменений	99,2
Во	Кристаллическое	Эндотерма плавления при 199,8°С	-	-	-	-	-	-
НАо	Кристаллическое	Широкая эндотерма при 99°С в результате потери воды. Превращение в форму Во наблюдается при потере воды	3,9%	Нет значительных изменений	99,0	1,5	Нет значительных изменений	99,6
НС₀	Кристаллическое	Широкая эндотерма при 112°С в результате потери воды. Превращение в форму Во наблюдается при потере воды	3,8%	Нет значительных изменений	99,0	0,44	Нет значительных изменений	99,6
ΗΌο	Кристаллическое	Широкая эндотерма при 110°С в результате потери воды. Превращение в форму В_о наблюдается при потере воды	4,0%	Нет значительных изменений	92,3	Недостаточное количество вещества	Нет значительных изменений	93,5

Описание стабильных твердых форм

Получение безводной формы А₀

Приблизительно 200 мг соединения I суспендировали в 45 объемах гептана при 85°С в течение 45 ч, охлаждали до 65°С и сушили на фильтре при высоком вакууме при комнатной температуре в течение 3 ч. Количество выделенной формы А₀ составляло 97%.

В альтернативном способе превращение соединения I в форму А₀ осуществляли согласно следующему способу:

1) соединение I растворяли в 30 объемах ΤΗΡ (ТГФ). На данном этапе раствор при желании можно обрабатывать секвестрантом металлов или углем.

2) Полученный в результате раствор фильтровали для удаления секвестранта металлов или угля с последующей полировочной фильтрацией через 1-микронный встроенный картриджный фильтр для удаления внешних частиц.

- 16 020756

3) Растворитель (ТНР) частично отгоняли до приблизительно 60% первоначального объема в вакууме при температуре окружающей среды с последующим медленным добавлением эквивалентного количества антирастворителя (гептана) для осаждения соединения I.

4) Вакуумную отгонку и добавление дополнительного количества гептана продолжали до того, как содержание растворителя составляло менее чем 5% ТНР по объему.

5) Полученную в результате суспензию нагревали до 90-96°С и перемешивали при данной температуре в течение 3-5 ч для достижения полного превращения в форму А₀.

6) Суспензию охлаждали до температуры окружающей среды (25±5°С).

7) Продукт/соединение I собирали с помощью фильтрации в атмосфере сухого инертного газа для того, чтобы избежать поглощения продуктом влаги.

8) Влажный остаток на фильтре сушили при вплоть до 80°С до того, как остаточное количество растворителей удовлетворяло бы спецификации. Сушку можно осуществлять при атмосферном давлении или в вакууме.

Определение характеристик формы А₀ с применением порошковой рентгеновской дифракции с переменной температурой (νΤ-ΧΗΡΌ)

Полиморфного превращения не происходило в диапазоне температур 20-250°С для формы А₀. После воздействия условий окружающей среды не было заметных изменений в ХНРИ дифрактограмме образца, полученного нагреванием до 220°С (см. фиг. 15).

Определение характеристик формы А₀ термическим гравиметрическим анализом (ТГА)

Форма А₀ имеет единственный пик при приблизительно 239°С с энтальпией плавления (ЛН_Ри8) 84,4 Дж/г. Потерю массы не наблюдали с помощью ТГА. Протекание процесса десольватации отбрасывали, потому что с помощью ТГА не была обнаружена потеря массы (см. фиг. 16).

Определение характеристик формы А0 поглощением воды (ДСП)

Регулярная ДСП (0-90% НН)

Количество влаги, поглощенное при 75% НН, было меньшим чем 0,08% и приблизительно 0,1% при 90% НН. Кривые адсорбции и десорбции перекрывались, предполагая, что форма А₀ не является гигроскопичной (см. фиг. 17 и табл. 25). Заметные изменения не наблюдали ΧΗΡΌ повторным анализом после ДСП (фиг. 18).

Таблица 17. ДСП данные для формы А₀ (регулярная)

Форма	Поглощение при 75% КН	Суммарное поглощение при 90% КН
А_о	0,08	0,1

Нерегулярная ДСП (90-0% НН)

Масса образца увеличивалась только на 0,5% при 90% > НН. Зона неоднозначности предполагает, что протекает только поверхностное поглощение воды. Изотерма является обратимой с суммарным увеличением массы <0,6% (фиг. 19 и табл. 26). Заметные изменения не наблюдали ХНРИ повторным анализом после ДСП (фиг. 18).

Таблица 18. ДСП данные для формы А₀ (нерегулярная)

Форма	Поглощение при 75% КН	Суммарное поглощение при 90% КН
А_о	0,15	0,5

Определение характеристик формы А0 инфракрасной спектроскопией с Фурье-преобразованием (РТ1Н) и рамановской спектроскопией

РТ1Н и рамановский спектр кристаллической формы А₀ показаны на фиг. 20 и 21, соответственно.

Получение безводной формы В0

Форму В₀ получали нагреванием 20 мг соединения I до 125°С в потоке азота.

Определение характеристик формы В₀ порошковой рентгеновской дифракцией с переменной температурой ^Т-ХНРИ)

После дегидратации полиморфное превращение не протекало в диапазоне 150-200°С для формы В0 (см. фиг. 22).

Определение характеристик формы В0 термическим анализом

Диаграмма дифференциальной сканирующей калориметрии (ДСК) формы В0 имела температуру плавления, приблизительно равную 197°С, с энтальпией плавления (ЛН_&8) 68,2 Дж/г (фиг. 23). Протекало полиморфное превращение до температуры плавления формы В₀ соединения I. Форму В₀ получали только десольватацией. Относительная термодинамическая стабильность форм отражена в ДСК данных, показанных между 120 и 199°С.

Получение гидратной формы НА0

Кристаллизация из смеси ТНР/гептан

Форму НА₀ получали в виде 200 мг соединения I, осажденного из 70 объемов ТНР с 143 объемами гептана при комнатной температуре. Продукт выделяли фильтрацией. Вещество сушили при 57°С в течение 18 ч.

- 17 020756

Получение твердофазным переходом

Форму НА₀ получали в виде 20 мг соединения I нагреванием до 125°С и охлаждением до комнатной температуры без потока азота.

Определение характеристик формы НА₀ термическим анализом

ДСК термограммы формы НА₀ показали наличие двух различных эндотермических пиков (фиг. 24 и табл. 27). В открытой кювете гидраты обладали широким эндотермическим пиком между приблизительно 60 и 120°С, соответствующим суммарному количеству воды, покидающему кристалл. Эндотермический процесс соответствует процессу дегидратации, включающему выделение воды из кристаллической решетки. Десольватация происходит в твердом состоянии с эндотермическим пиком. Положение и энергия данного эндотермического пика зависят от диаграммы фазового равновесия двух компонентов, лекарственного средства и растворителя, и стабильности образующегося компонента. ДСК термограммы сольватов содержат широкие эндотермические пики при температурах вблизи температуры кипения соответствующих им растворителей, которые можно приписать процессам десольватации, что подтверждается ТГА. Моногидратная форма НА₀ при исследовании ТГА демонстрирует среднюю потерю массы 4,0% между 50 и 120°С. Это согласуется с теоретической величиной для объединения одного моля воды с одним молем соединения I, равной 4,1%.

Таблица 19. ДСК температуры начала и максимальная температура десольватации для формы НА₀

Классификация	Растворитель	Потеря веса сольвата (%)	Основная температура начала десольватации /°с	Максимальная температуры /°С
НА₀	Вода	4,0	61,6	99,1

Определение характеристик формы НА0 сорбцией воды

Фиг. 25 показывает данные по динамической сорбции паров, полученные для формы НА₀. После сушки протекает немедленное поглощение при воздействии влаги. Изотерма формы НА₀ показывает 1,25% снижение веса между 20-30% ΚΗ. Начиная с 30-90% ΚΗ, поглощение начинает достигать равновесия. В течение первой фазы десорбции присутствует небольшой гистерезис, предполагающий только поверхностное поглощение. Десорбция практически отсутствует в течение второй фазы десорбции, но образец подвергается второму изменению ~0,4%. Сорбция доказывает, что данная форма представляет собой канальный гидрат. Нестехиометрическая гидратация является результатом неполной гидратации каналов кристаллической решетки. Значительные изменения не наблюдали при ΧΚΡΌ повторном анализе после ДСП.

Определение характеристик ΡΤΙΚ и рамановской спектроскопией

ΡΤΙΚ и рамановские спектры кристаллической формы НА₀ показаны на фиг. 26 и 27, соответственно.

Получение гидратной формы НС0

Перекристаллизация из смеси этанол/вода

Форму НС0 получали по мере того, как 40 мг лота 7 добавляли в 400 мкл этанола и 100 мкл воды. Образец нагревали до первоначальной температуры 80°С при скорости нагревания 4,8°С/мин и через 30 мин охлаждали при 0,28°С/мин до конечной температуры 5°С и выдерживали при данной температуре в течение 18 ч. Твердое вещество выделяли фильтрацией. Вещество сушили при 57°С в течение 10 ч.

Хранение при 40°С/75% ΚΗ в виде сольвата с этанолом

Форму НС₀, полученную в виде 20 мг сольвата с этанолом соединения I, хранили при 40°С/75% ΚΗ в течение 9 дней.

Получение кристаллической структуры

Монокристаллы получали добавлением 200 мг твердого вещества лота 7 к тетрагидрофурану для обеспечения насыщенных условий при температуре кипения для моногидрата НС0. Смесь охлаждали и фильтровали через 0,22-мкм найлоновый мембранный фильтр в нагретую стеклянную пробирку. Раствор охлаждали до 20°С±0,2°С для того, чтобы увеличить величину перенасыщения, и гомогенный раствор оставляли на несколько дней.

Определение кристаллической структуры дифракцией рентгеновских лучей на монокристаллах

Данные дифракции рентгеновских лучей на монокристаллах получали для НС0. Параметры ячейки, полученные из этих данных, представлены в табл. 28.

Данные получали при температуре 103 К, применяя ω-2θ способ сканирования. Бесцветную пластинку Ο₂₄Η₂₈Ν₄Ο₄, имеющую приблизительные размеры 0,30x0,16x0,11 мм, устанавливали на стекловолокно с произвольной ориентацией. Параметры триклинной элементарной ячейки (Р-1, Ζ=2) и рассчитанные объемы были следующими:

- 18 020756 а=7,6128(10) Ь=11,5697(15) с=13,193(4) А ν=1040,9(3)А³ «=65,839(18)° β=79,137(16)° γ=86,800(10)°

- 19 020756

Таблица 20. Данные рентгеновского анализа кристаллов и параметры уточнения для формы НС₀

Определение характеристик формы НС₀ термическим анализом

ДСК термограмма формы НС₀ показывает наличие двух различных эндотермических пиков (фиг. 28 и табл. 29). Моногидратная НС₀ при анализе ТГА показала среднюю потерю массы 3,9% между 50 и 120°С. Это соответствует теоретической величине для объединения одного моля воды с одним молем соединения Ι 4,1%.

Таблица 21. ДСК начальная и максимальная температуры десольватации для формы НС₀

Классификация	Растворитель	Потеря веса сольвата (%)	Основная температура начала десольватации /°С	Максимальная температуры/ °С
НС₀	Вода	3,9	85,9	112,2

Определение характеристик формы НС0 сорбцией воды

Регулярная ДСП (0-90% КН)

Зона неоднозначности предполагает, что протекает только поверхностное поглощение воды с суммарным поглощением 0,4% (фиг. 29 и табл. 30). Значительные изменения не наблюдали ΧΗΡΟ повторным анализом после ДСП (фиг. 30).

- 20 020756

Таблица 22. ДСП данные для формы НС₀ (регулярная)

Форма	Поглощение при 75% КН	Суммарное поглощение при 90% КН
НС₀	0,3	0,4

Нерегулярная ДСП (90-0% ΚΗ)

Зона неоднозначности предполагает, что протекает только поверхностное поглощение воды от 040% ΚΗ. Начиная с 40-90% ΚΗ, по-видимому, протекает объемное поглощение (фиг. 31 и табл. 31). Значительные изменения не наблюдали ΧΚΡΌ повторным анализом после ДСП (фиг. 30).

Таблица 23. ДСП данные для формы НС₀ (нерегулярная)

ΡΤΙΚ и рамановские спектры кристаллической формы НС₀ показаны на фиг. 32 и 33, соответственно.

Получение гидратной формы ΗΌ₀

Перекристаллизация из смеси ацетон/вода

Форму ΗΌ₀ получали по мере того, как 40 мг лота 7 добавляли к 400 мкл ацетона и 100 мкл воды. Образец нагревали до первоначальной температуры 80°С при скорости нагревания 4,8°С/мин и через 30 мин охлаждали при скорости охлаждения 0,28°С/мин до конечной температуры 5°С и выдерживали при данной температуре в течение 18 ч. Твердое вещество выделяли фильтрацией. Вещество сушили при 57°С в течение 10 ч.

Перекристаллизация из 2-метил-2-пропанола

Форму ΗΌ₀ получали по мере того, как 0,54 г соединения I в 55 мл 2-метил-2-пропанола практически полностью растворяли нагреванием до температуры кипения. Мутный раствор фильтровали через шприц, применяя 5-мкм найлоновый мембранный шприцевой фильтр, для получения прозрачного раствора (приблизительно 15% пролили и потеряли). Раствор концентрировали до 25-30 мл и охлаждали в течение 4,5-5 ч при 2-8°С для получения твердого вещества. Твердое вещество плавили в печи при 50°С и нерастворимое вещество отделяли фильтрацией с отсасыванием на теплой установке для предотвращения замерзания трет-бутилового спирта. Полученное в результате твердое вещество сушили в 50°С печи в течение 2 ч для получения 0,42 г (75% извлечение).

Перекристаллизация из изопропилацетата

Форму ΗΌ₀ получали по мере того, как 0,45 г соединения I в 7,5 мл изопропилацетата перемешивали в течение 20 ч при комнатной температуре с магнитной мешалкой в стеклянном 20-мл сцинтилляционном флаконе со слегка закрепленной крышкой. Суспензию фильтровали с отсасыванием, и твердое вещество сушили в течение 110 ч на воздухе, в вытяжном шкафу. Высушенное вещество весило 380 мг (84% извлечение).

Получение кристаллической структуры

Монокристаллы получали добавлением 200 мг твердого вещества лота 7 к тетрагидрофурану для обеспечения насыщенными условиями моногидратной НС0 при температуре кипения. Смесь охлаждали и фильтровали через 0,22-мкм найлоновый мембранный фильтр в нагретую стеклянную пробирку. Раствор охлаждали до 20°С±0,2°С для того, чтобы увеличить величину пересыщения, и гомогенный раствор оставляли в течение нескольких дней.

Данные дифракции рентгеновских лучей на монокристаллах получали для ΗΌ₀. Параметры ячейки, полученные из этих данных, представлены в табл. 32 ниже. Данные получали при температуре 103 К, применяя ω-2θ способ сканирования. Бесцветную пластинку С₂₄Н₂₈Ы₄О₄, имеющую приблизительные размеры 0,40x0,25x0,08 мм, устанавливали на стекловолокно с произвольной ориентацией. Параметры триклинной элементарной ячейки (Р-1, Ζ=2) и рассчитанные объемы были следующими:

а=8,171(2) 0=111,173(18)°

Ь=11,419(3) β = 92,863 (17)°

С=12,7305 (19)Α γ=102,07(2)°

У=1072,8 (4)А³ .

- 21 020756

Таблица 24. Данные рентгеновского анализа кристаллов и параметры уточнения для формы ΗΌ₀

Идентификатор	Форма НС₀
Эмпирическая формула	024Η2δΝ4θ₄
Молекулярный вес	436,50
Температура	103(2) К
Длина волны, А	0,71073
Кристаллическая система, группа симметрии	Триклинная, Р-1
Постоянные решетки а, А	8,171(2)
Ь, А	11,419 (3)
с, А	12,7305(19)
Οί, °	111,173(18)
β,°	92,863(17)
Υ/ °	102,07 (2)
Объем	1072,8 (4)
Ζ	2

Р(000)	464
Плотность (рассчитанная), мг/м³	1,351
Коэффициент поглощения, мм'¹	0,094
Размер кристалла, мм³	0,40x0,25x0,08
Тэта диапазон для сбора данных	3,95-26,56°
Указатель интервала ·	-10<=Ь<=10 -14<=к<=14 -15<=1<=15
Число собранных отраженных сигналов	9366
Число независимых отраженных сигналов	4373 0,040
Полнота тэта = 28,75°	97,7%
Поправка на поглощение	Нет
Максимальное и минимальное пропускание	0,9926 и 0,9635
Способ уточнения	Полноматричный метод наименьших квадратов Р2
Данные/ограничения/параметры	4373/0/302
Точность приближения с Р2	1,166
Конечные К индексы [I>2сигма(I)]	0,051 0,099
К индексы (все данные)	0,087 0,113
Самый большой дифракционный пик и яма, е.А'³	0,24 и -0,25

Определение характеристик формы ΗΌ₀ термическим анализом

ДСК термограмма формы ΗΌ₀ показывает наличие двух различных эндотермических пиков (фиг. 34 и табл. 33). Моногидратная ΗΌ₀ при анализе ТГА показала среднюю потерю веса 4,0% между 50 и 120°С. Это соответствует теоретической величине для объединения одного моля воды с одним молем соединения I 4,1%.

Таблица 25. ДСП начальный и максимальная температуры десольватации для формы Ηϋ₀

Классификация	Растворитель	Потеря веса сольвата (%)	Основная температура начала десольватации /°С	Максимальная температуры /°С
Ηϋ₀	Вода	4,0	86,3	110,7

Определение характеристик формы Ηϋ₀ сорбцией воды

Регулярная ДСП (0-90% ΚΗ)

Масса образца увеличивалась только на 0,6% при 90% КП. Зона неоднозначности предполагает, что

- 22 020756 протекает поверхностная адсорбция воды и объемная абсорбция (фиг. 35 и табл. 34). Значительные изменения не наблюдали ХКРБ повторным анализом после ДСП (фиг. 36).

Таблица 26. ДСП данные для формы НБ₀ (регулярная)

Форма	Поглощение при 75% КН	Суммарное поглощение при 90% КН
ΗΌ₀	0,4	0,6

Нерегулярная ДСП (90-0% КН)

Масса образца увеличивалась только на 0,8% при 90% КН. Зона неоднозначности предполагает, что протекает поверхностная адсорбция воды и ограниченная объемная абсорбция (фиг. 37 и табл. 26). Значительные изменения не наблюдали ХКР1) повторным анализом после ДСП (фиг. 27).

Таблица 27. ДСП данные для формы ПР,_:, (нерегулярная)

Форма	Поглощение при 75% КН	Суммарное поглощение при 90% КН
ΗΌο	0,4	0,8

Определение характеристик формы НО₀ РТ1К и рамановской спектроскопией

РТ1К и рамановские спектры кристаллической формы НО₀ показаны на фиг. 38 и 39, соответственно.

Сольватные формы соединения I

Перекристаллизация из метанола

Форму δ2₀ получали по мере того, как 40 мг лота 7 добавляли к 400 мкл метанола. Образец суспендировали при 20°С±0,2 в течение 3 дней. Твердое вещество выделяли фильтрацией. Вещество сушили при 57°С в течение 10 ч.

Перекристаллизация из 2-пропанола

Форму δ3₀ получали по мере того, как 40 мг лота 7 добавляли к 400 мкл 2-пропанола. Образец суспендировали при 20°С±0,2 в течение 3 дней. Твердое вещество выделяли фильтрацией. Вещество сушили при 57°С в течение 10 ч.

Перекристаллизация из этанола

Форму δ4₀ получали по мере того, как 40 мг лота 7 добавляли к 400 мкл этанола. Образец суспендировали при 20°С±0,2 в течение 3 дней. Твердое вещество выделяли фильтрацией. Вещество сушили при 57°С в течение 10 ч.

Получение кристаллической структуры

Монокристаллы получали добавлением 200 мг твердого вещества лота 7 к этанолу для обеспечения насыщенных условий при температуре кипения для сольвата с этанолом. Смесь охлаждали и фильтровали через 0,22-мкм найлоновый мембранный фильтр в нагретую стеклянную пробирку. Раствор охлаждали до 20^оС±0,2°С для того, чтобы увеличить величину пересыщения, и гомогенный раствор оставляли на несколько дней.

Перекристаллизация из Ν,Ν-диметилформамида

Форму δ5₀ получали по мере того, как 40 мг лота 7 добавляли к 400 мкл Ν,Ν-диметилформамида (ΌΜΡ). Образец суспендировали при 20°С±0,2 в течение 3 дней. Твердое вещество выделяли фильтрацией. Вещество сушили при 57°С в течение 10 ч.

Перекристаллизация из этиленгликоля

Форму δ60 получали по мере того, как 40 мг лота 7 добавляли к 400 мкл этиленгликоля. Образец нагревали до первоначальной температуры 80°С при скорости нагревания 4,8°С/мин и через 30 мин охлаждали при скорости 0,28°С/мин до конечной температуры 5°С и выдерживали при данной температуре в течение 18 ч. Твердое вещество выделяли фильтрацией. Вещество сушили при 57°С в течение 10 ч.

Перекристаллизация из пиридина

Форму δ70 получали по мере того, как 40 мг лота 7 добавляли к 400 мкл пиридина. Образец нагревали до первоначальной температуры 80°С при скорости нагревания 4,8°С/мин и через 30 мин охлаждали при скорости 0,28°С/мин до конечной температуры 5°С и выдерживали при данной температуре в течение 18 ч. Твердое вещество выделяли фильтрацией. Вещество сушили при 57°С в течение 10 ч.

Перекристаллизация из 1-пропанола

Форму δ9₀ получали в виде 40 мг соединения I в 1-пропаноле, обеспечивая насыщенными условиями при температуре кипения. Смесь охлаждали и фильтровали через 5-мкм найлоновый мембранный фильтр в нагретую стеклянную пробирку. Раствор охлаждали до комнатной температуры и помещали в холодильник (приблизительно 4°С) до того, как образование кристаллов, по-видимому, достигало завершения, как определено визуальным осмотром. Образцы, которые было трудно декантировать, центрифугировали при 12000 об/мин в течение 4 мин.

Перекристаллизация из Ν,Ν-диметилацетамида

Форму δ10₀ получали по мере того, как 40 мг лота 7 добавляли к 400 мкл Ν,Ν-диметилацетамида (ΌΜΑ). Образец суспендировали при 20°С±0,2 в течение 3 дней. Твердое вещество выделяли фильтраци- 23 020756 ей. Вещество сушили при 57°С в течение 10 ч.

Перекристаллизация из изобутанола

Форму 812₀ получали в виде 40 мг соединения I в изобутаноле, обеспечивая насыщенными условиями при температуре кипения. Смесь охлаждали и фильтровали через 5-мкм найлоновый мембранный фильтр в нагретую стеклянную пробирку. Раствор охлаждали до комнатной температуры и помещали в холодильник (приблизительно 4°С) до того, как образование кристаллов, по-видимому, достигало завершения, как определено визуальным осмотром. Образцы, которые было трудно декантировать, центрифугировали при 12000 об/мин в течение 4 мин.

Данные дифракции рентгеновских лучей на монокристаллах получали для формы 84₀. Параметры ячейки, полученные из этих данных, представлены в табл. 28.

Таблица 28. Данные рентгеновского анализа кристаллов и параметры уточнения для сольвата с этанолом 84₀

	Из монокристалла	После анализа по Ритвельду 34₀
Постоянные решетки а, А	8,828 (3)	8,996(7)
Ь, А	11,652(3)	11,813(2)
с, А	13,234 (6)	13,191(9)
Οί, °	115,01 (3)	114,28(1)
β,°	108,09 (3)	108,52 (8)
Υζ °	93,00 (2)	92,56 (0)

Термический анализ сольватированных форм соединения I

ДСК кривые нагрева показывают наличие большой и широкой эндотермы перед температурой плавления соединения I для всех сольватов. ТГА исследования показали, что данные эндотермы можно объяснить процессом десольватации для форм 82₀ (фиг. 40), 83₀ (фиг. 41), 84₀ (фиг. 42), 85₀ (фиг. 43), 86₀(фиг. 44), 87₀ (фиг. 45), 89₀ (фиг. 46), 810₀ (фиг. 47) и 812₀ (фиг. 48). Расчеты потери веса растворителя, приведенные для данных растворителей, представлены в табл. 29.

Таблица 29. ДСК начальная и максимальная температуры десольватации для сольватных форм

Определение кристаллической структуры моногидратов соединения I

Г идратные формы НС₀ и ИБ₀ являются изоструктурными, что значит то, что отдельные изоморфные сольваты кристаллизуются в одной группе симметрии только с небольшими искажениями постоянных решетки и с таким же типом молекулярной сетки основных молекул (КеЛгеЕЕйепз 8. М., Жтутап А А., Ро1утогрЛзт ΐη Ле Рйагтасеийса1 Лйизйу, ЕйДей Ъу Ко1£ Нййкег, 2006, Айеу-УСН Уег1ад ОтЪИ & Со. КОаА Σ8ΒΝ: 9783527311460). Форма НС₀ и форма НБ₀ отличаются конформацией тетрагидропиразинового кольца. Порошковую рентгеновскую дифрактограмму двух гидратных форм можно результативно уточнить, применяя способ Ритвельда (К1е1уе1й И. М. А ргой1е гейпетеп! теЛой £ог пис1еаг апй тадпейс зйисЛгез, 1оита1 о£ Аррйей Сгуз!а11одгарйу 2: 65-71 (1969)) с параметрами монокристаллов в качестве исходных данных. Подробные данные о постоянных решетки, накопленные данные и данные по уточнению резюмированы в табл. 28 и 32.

ΡΤΣΚ и РТ-рамановский способ для идентификации

Сравнение ΡΤΣΚ и рамановских спектров на фиг. 20 и 21 для формы А₀ и для гидратов (фиг. 26, 32, 38) и (фиг. 27, 33, 39) показывает небольшое различие, за исключением области колебаний карбонильной группы для ΡΤΣΚ.

В А₀ пик средней интенсивности возникает при 1765 см^-1 для РТТК и 1770 см^-1 для рамановской

- 24 020756 спектроскопии. В гидратных формах пик средней интенсивности появлялся в области 1742 см^-1 для ΡΤΙΚ и 1754-1695 см^-1 для рамановской спектроскопии. Данный пик поглощения приписывают карбонильной группе имида, содержащейся в пятичленном кольце структуры соединения I. Данное различие является достаточно большим и может применяться для идентификации практически чистых твердых форм. Икспектры гидратных форм и А₀ обладают некоторыми различиями, но наиболее значительно затрагивают широкую полосу (3800-2800), присутствующую у гидратных форм в результате колебаний -ОН связи в гидроксильной группе.

Таблица 30. Частоты (см^-1) и отнесение собственных колебаний для соединения I для ΡΤΙΚ

Форма	-Гидроксил (см Ч	-Карбонил (см ¹)
Ао	3349,9	1765,3
НА₀	3498,2	1742,0
НС₀	3498,2	1742,0
Ηϋ₀	3498,2	1742,0

Таблица 31. Частоты (см^-1) и отнесение собственных колебаний для соединения I для рамановской спектроскопии

Форма	-Карбонил (см’¹)	-Карбонил (см'¹)
Ао	1770	1638
НА₀	1754	1699
НС₀	1752	1696
Ηϋ₀	1748	1695

Переходы между твердыми состояниями

Относительная стабильность суспензий соединения I в воде

Когда гидрат НА₀ и А₀ кристаллизуют из водной среды, получают смесь форм ΗΟ₀+ΗΌ₀ (табл. 32). Таблица 32. Кристаллические формы, полученные в планшете с лунками, соединения I

Два мл воды добавляли к нескольким миллиграммам форм соединения I. Образцы суспендировали в течение ночи. Небольшой образец твердого вещества отбирали и анализировали ΧΚΡΌ. После суспендирования было обнаружено, что формы НА₀ и А₀ превратились в гидратные формы (смесь форм НС₀ и ΗΌ₀) при всех исследуемых условиях (табл. 33-37). По-видимому, гидратная форма является более термодинамически стабильной, чем форма А₀ между 5 и 45°С.

Таблица 33. ΧΚΡΌ анализ оставшегося твердого вещества после экспериментов на термодинамическую стабильность формы А₀ в воде при 5°С

Форма А₀/мг	Время (дни)	Найденные формы
15,9	1	НС₀, Ηϋ₀
14,1	4	НС₀, Ηϋ₀

Таблица 34. ΧΚΡΌ анализ оставшегося твердого вещества после экспериментов на термодинамическую стабильность формы НА₀ и формы НВ₀ (смесь НС₀ и ΗΌ₀) в воде при комнатной температуре

НВо/мг	НАо/мг	Время (дни)	Найденные формы
5,05	6,08	1	НА₀, НС₀, Ηϋ₀
4,91	4,98	9	НС₀, Ηϋ₀
4,94	5,02	10	НС₀, Ηϋ₀, небольшое количество НА₀
5,34	5,57	14	НС₀, ΗΌ₀, небольшое количество НА₀

Таблица 35. ΧΚΡΌ анализ оставшегося твердого вещества после экспериментов на термодинамическую

- 25 020756 стабильность формы НА₀ и формы НС₀ в воде при комнатной температуре

Таблица 36. ХКР1) анализ оставшегося твердого вещества после экспериментов на термодинамическую стабильность формы НА₀ и формы ΗΌ₀ в воде при комнатной температуре

НЦ₀/мг	НАо/мг	Время (дни)	Найденные формы
5,48	5,83	1	НА₀, НО₀
5,43	5,06	2	НА₀, НС₀
5,10	5,18	5	ΗΌ₀, НС₀
5,41	6,01	14	Ηϋ₀, НС₀

Таблица 37. ХКР1) анализ оставшегося твердого вещества после экспериментов на термодинамическую стабильность формы А₀ при 45°С в воде

Форма А₀/мг	Время (дни)	Найденные формы
14,3	1	НА₀, НС₀

Относительная стабильность моногидратов

Измеряя термодинамическую стабильность двух полиморфных форм (форма НС₀ и форма ΗΌ₀) при используемом на практике диапазоне температур, можно определить, какая из форм является более стабильной и является ли переход между ними монотропным или энантиотропным. Эксперименты ставили так, чтобы измерить термодинамическую стабильность данных моногидратных форм при комнатной температуре и 55°С в этилацетате, МТВЕ и 1-пентаноле. Данные растворители выбирали, поскольку соединение I не образует сольватов в данных растворителях в процессе скрининга полиморфизма.

Таблица 38. ХКР1) анализ оставшегося твердого вещества после экспериментов

на термодинамическую стабильность моногидратных форм
Растворитель	Температура	ΧΚΡϋ анализ через 1 день	ΧΚΡϋ анализ через 3 дня	Растворимость (мг/мл)
Этилацетат	Комнатная	НЦ₀>НС₀	ΗΌ₀	1,7
Этилацетат	55°С	Ηϋ₀	НЦ₀>НС₀	2,6
МТВЕ	Комнатная	НБ₀, НС₀	ΗΌο, НСо	1,8
МТВЕ	55°С	НЦ₀ и форма НСо	НЦ₀,НС₀	1,9
1-пентанол	Комнатная	ΗΌ₀>ΗΟ₀	НО₀>НС₀	6,8
1-пентанол	55°С	НЦ₀>НС₀	НЦ₀>НС₀	28,7

Результаты, приведенные в табл. 38, показывают, что для применяемых растворителей и диапазонов температур величины растворимости двух гидратированных полиморфных форм являются очень близкими, но всегда больше для формы ΗΌ₀. Это действительно показывает, что между комнатной температурой и 55°С в растворе форма ΗΌ₀ является более термодинамически стабильной, чем форма НС₀ и форма НА₀.

Стабильность твердых форм при внешнем воздействии

Исследования стабильности при внешнем воздействии осуществляли для получения заблаговременного представления о влиянии температуры и влажности на стабильность форм. Был разработан ВЭЖХ анализ, определяющий стабильность, для количественного определения количеств соединения I и его основного продукта разложения, 7-метокси-1,2,3,11-тетрагидро-5,11-диаза-бензо[а]тринден-4,6диона, ранее называемого соединением Е. Разработанный способ является специфичным, достоверным, точным и надежным. Способ позволяет точно и количественно определять соединение I и соединение Е. Все продукты разложения, образовавшиеся в процессе исследований по принудительному разложению, хорошо отделяются от основных пиков, демонстрируя то, что разработанный способ является специфичным и позволяющим определять стабильность.

Форма А₀

В твердом состоянии безводная форма А₀ имеет склонность поглощать воду из окружающей среды и давать при стандартных Ι6ΊΙ стрессовых условиях, 40°С и 75% ΚΗ, гидратные формы НС₀ и ΙΙΙΕ через

- 26 020756 месяца. Химическое разложение не наблюдается в образцах соединения I при данных стрессовых условиях. Химическое разложение наблюдается только тогда, когда на соединение I воздействуют температурой 110°С (табл. 39, 40 и 41).

Таблица 39. Стабильность (	юрмы А₀ при 40°С/75% НН
Номер образца	Прошедший промежуток времени (дни)	ХЕРБ	бзс	ВЭЖХ
1	5	А_о	239,7	99,2% Соединение I, 0,8% Соединение Е
2	16	Ао	239,4	99,2% Соединение I, 0,8% Соединение Е
3	29	Ао	239,5	99,2% Соединение I, 0,8% Соединение Е
4	141	А_о, НС₀, НБ₀	240,0	99,0% Соединение I, 0,9% Соединение Е

Таблица 40. Стабильность формы А₀ при 60°С/0% НН

Таблица 41. Стабильность формы А₀ при 110° С

Номер образца	Прошедший промежуток времени (дни)	ХЕРБ	БЗС	ВЭЖХ
1	7	А_о	236,2	98,7% Соединение I, 1,1% Соединение Е
2	14	А_о	235,6	95,6% Соединение I, 4,4% Соединение Е
3	28	Ао	238,0	93,4% Соединение I, 6,2% Соединение Е

Моногидратные формы

Табл. 42, 43 и 44 показывают, что в твердом состоянии все кристаллические моногидраты были стабильны в течение 28 дней при хранении при 40°С и 75% относительной влажности.

Таблица 42. Стабильность формы НА₀ при 40°С/75% НН

Номер образца	Прошедший промежуток времени (дни)	ХЕРБ	ВЭЖХ
1	0	НА₀	99,6% Соединение ΝΒ Соединение Е	I,
2	7	НА₀	99,5% Соединение 0,1% Соединение Е	I,
3	26	НА₀	99,0% Соединение 0,4% Соединение Е	I,

ΝΏ - необнаруживаемое

- 27 020756

Таблица 43. Данные о стабильности формы НС₀ при 40°С/75% ΗΗ

Номер образца	Прошедший промежуток времени (дни)	ΧΕΡΌ	ВЭЖХ
1	0	НС₀	92,6% Соединение I, 0,3% Соединение Е
2	28	НС₀	93,3% Соединение I, 0,5% Соединение Е, 0,2% другие

Таблица 44. Данные о стабильности формы ΗΌ₀ при 40°С/75% ΗΗ

Номер образца	Прошедший промежуток времени (дни)	ΧΕΡϋ	ВЭЖХ
1	0	Ηϋ₀	93,5% Соединение 0,3% Соединение Е	I,
2	7	Ηϋ₀	92,2% Соединение 0,9% Соединение Е	I,
3	13	Ηϋ₀	92,3% Соединение 0,7% Соединение Е	I,
4	28	Ηϋ₀	92,3% Соединение 0,7% Соединение Е	I,

Форма 84₀

Форма 84₀, сольват с этанолом, превращается в моногидратную форму НС₀ через 9 дней при 40°С/75% ΗΗ и остается в данном состоянии в течение 62 дней (табл. 45).

Таблица 45. Данные о стабильности 84₀ . при 40°С/75% ΗΗ

Номер образца	Прошедший промежуток времени (дни)	ΧΕΡΌ	ВЭЖХ
1	9	НС₀	99,4% Соединение I, 0,35% Соединение Е
2	17	НС₀	99,4% Соединение I, 0,36% Соединение Е
3	31	НС₀	99,4% Соединение I, 0,47% Соединение Е
4	62	НС₀	99,2% Соединение I, 0,47% Соединение Е

Превращение форм при механическом воздействии

Измельчение в ступке с пестиком

Приблизительно 100 мг соединения I измельчали в течение различных периодов времени в диапазоне от 5 до 27 мин в агатовой ступке. Образцы отбирали для ΧΗΡΌ и термического анализа. Процесс измельчения прекращали каждые 5 мин для соскабливания и повторного смешения порошка с изгибающегося конца ступок для обеспечения гомогенного измельчения.

Размол Жд-Ь-Вид®

Жд-1-Вид® ^к^есй, И8А) применяли для измельчения формы А₀, НА₀ и НВ₀ (смесь форм НС₀ и ΗΌ₀) соединения I. Каждый образец (50 мг) измельчали в течение периодов 5 и 10 мин или до того момента, когда не наблюдали изменений. Каждый размол осуществляли в 2,82 см³ емкости, применяя 0,9 г шарик из нержавеющей стали (0,6 мм в диаметре). Емкость вращали по 6,5° дуге при 3200 об/мин, вызывая тем самым удар шариком по днищу емкости при частоте выше 100 Гц.

Стабильность формы А0

После 20 мин (ступка с пестиком) и 5 мин (Жд-1-Вид®) ΧΗΡΌ рентгенограммы показали, что степень кристалличности заметно снизилась. Поскольку оставшиеся пики были в том же положении как для исходного вещества, образцы не стали полностью аморфными (фиг. 49).

Стабильность форм НА₀, НС₀ и ΗΌ₀

После трех пятиминутных интервалов измельчения ΧΗΡΌ рентгенограмма для измельченной формы НВ₀ (смесь форм НС₀ и ΗΌ₀) (фиг. 50) была аналогичной рентгенограмме для измельченной НА₀.

ΧΗΡΌ пик при 7,6°(2θ) уменьшался по интенсивности приблизительно в 30 раз.

ДСК кривые имеют широкую эндотерму в диапазоне от 50 до 100°С, которую можно приписать

- 28 020756 выделению воды. Термограмма показывают первый фазовый переход второго порядка Тд, расположенный приблизительно при 113°С (фиг. 51). ДСК показывает, что одна наблюдаемая экзотерма соответствует одностадийной перекристаллизации при 136°С в метастабильную форму В₀. Широкий эндотермический процесс соответствует плавлению формы В₀ и завершается при 231°С (форма А₀). Объяснение данных процессов можно получить, если рассматривать данные формы А₀ и В₀ как монотропные, когда форма А0 является более стабильной формой.

Подразумевается, что должно быть ясно, что высоты пиков, полученных как результат ΧΚΡΌ, УТΧΚΡΌ экспериментов и дифрактограмм монокристаллов, могут изменяться и будут зависеть от переменных, таких как температура, размер кристалла или структуры, способа получения образца или высоты образца в анализируемой лунке ΡΆΝαΙγίΐοαΙ Χ Ρ0Γί Ργο дифрактометра или ΘχίοΓά ШйгасЛоп ССИ дифрактометра.

Кроме того, подразумевается, что должно быть ясно, что положения пиков могут меняться при измерении различными источниками излучения. Например, Си-Και, Μο-Κα, Со-Κα и Ее-Κα излучение, имеющие длины волн 1,54060А, 0,7107 А, 1,7902А и 1,9373А, соответственно, могут давать положения пиков, которые отличаются от измеренных с помощью Си-Κα излучения.

Кроме того, подразумевается, что должно быть ясно, что термин ±0,2° 2-тэта после ряда положений пиков относится к тому, что все пики группы, за которыми этот термин следует, приводятся в единицах угловых координат с дисперсией 0,2° 2-тэта. Например, 6,81, 8,52, 9,73, 12,04 и/или 13,25 ± 0,2° 2тэта относится к 6,81±0,2° 2-тэта, 8,52±0,2° 2-тэта, 9,73±0,2° 2-тэта, 12,04±0,2° 2-тэта и/или 13,25±0,2° 2-тэта.

Специалистам в данной области техники ясно, что многочисленные модификации и варианты настоящего изобретения являются возможными в свете вышеуказанных идей. Следовательно, должно быть ясно, что в пределах объема прилагаемой формулы изобретения настоящее изобретение можно осуществлять на практике, например, отличным от описанного в настоящем изобретении способа, и предполагается, что объем настоящего изобретения включает все данные варианты.

Claims

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. Кристаллическая форма соединения I, имеющего формулу где кристаллическая форма представляет собой (A)

а) форму А0, которая характеризуется порошковой рентгеновской дифрактограммой, содержащей один или более из следующих пиков: 4,32, 6,07, 8,55, 12,07 и 15,37 ±0,2° 2-тэта; или (B)

a) форму НС0, которая характеризуется порошковой рентгеновской дифрактограммой, содержащей один или более из следующих пиков: 8,36, 8,71, 16,69, 17,39 и 24,59 ± 0,2° 2-тэта; или

b) форму ΗΌ₀, которая характеризуется порошковой рентгеновской дифрактограммой, содержащей один или более из следующих пиков: 7,60, 8,99 и 15,16 ± 0,2° 2-тэта;

или их смесь.
2. Кристаллическая форма соединения I по п.1, которая представляет собой форму А₀.
3. Кристаллическая форма соединения I по п.1, которая представляет собой форму НС₀.
4. Кристаллическая форма соединения I по п.1, которая представляет собой форму ΗΌ₀.
5. Фармацевтическая композиция для лечения рака, содержащая кристаллическую форму соединения I по любому из пп.2-4 или их смесь.
6. Фармацевтическая композиция по п.5, содержащая смесь указанных форм.
7. Фармацевтическая композиция по п.5 или 6, дополнительно содержащая аморфную форму соединения I.