EA018974B1 - Твердые лекарственные формы - Google Patents

Abstract

В изобретении предложен и рассмотрен твердый 17α-этинил-5α-андростан-3α,17β-диол, в том числе его аморфные и кристаллические формы и конкретные полиморфные формы. Дегидраты и сольваты 17α-этинил-5α-андростан-3α,17β-диола включают дегидрат в форме III и сольват в форме I. Изобретение также относится к твердым и суспензионным составам, содержащим 17α-этинил-5α-андростан-3α,17β-диол в описанной твердой форме, и применению этих составов для лечения у субъектов или пациентов-людей раков или предраковых состояний, таких как рак предстательной железы или рак молочной железы. Изобретение также относится к способам получения жидких составов из твердых форм 17α-этинил-5α-андростан-3α,17β-диола и применению таких составов при лечении описанных состояний.

Description

Область изобретения

Изобретение относится к 17-этинил-10К,13§-диметил-2,3,4,5§,6,7,8К,98,10,11,12,13,14§,15,16,17гексадекагидро-1Н-циклоиента[а]фенантрен-38,17§-диолу и его твердым лекарственным формам, в том числе кристаллическим, полиморфным, исевдоиолиморфным и аморфным формам, и способам получения этих твердых форм. Изобретение также относится к твердым составам, содержащим твердые формы, и к способам применения этих твердых форм, в том числе полиморфных форм и исевдоиолиморфных форм, при получении твердых и жидких составов и применению этих составов для лечения рака, в том числе гормоночувствительных типов рака или раков, вызванных гормональными нарушениями, таких как рак молочной железы, рак предстательной железы, и для лечения предраковых состояний и гиперплазии, таких как доброкачественная гиперплазия простаты. В изобретение также включены стандартные лекарственные формы твердых и жидких составов.

Уровень техники

Способность вещества существовать более чем в одной кристаллической форме в общем называют полиморфизмом, а различные кристаллические формы обычно называют полиморфами, которые могут быть описаны с помощью определенных аналитических свойств, а именно их порошковых рентгенограмм (спектров порошковой рентгеновской дифракции, ΧΚΡΌ). В целом, полиморфизм отражает способность молекулы изменять свою конформацию или образовывать различные межмолекулярные и внутримолекулярные взаимосвязи. Эта способность может привести к различным расположениям атомов, что отражается на кристаллических решетках различных полиморфов. Однако полиморфизм не является универсальной особенностью твердых веществ, поскольку некоторые молекулы могут существовать в одной или более кристаллических формах, тогда как другие молекулы не могут. Поэтому существование или степень полиморфизма для данного соединения является непредсказуемым.

Разные полиморфы вещества обладают различными энергиями кристаллической решетки, и, таким образом, каждый полиморф обычно проявляет одно или более различных физических свойств в твердом состоянии, таких как плотность, температура плавления, цвет, стабильность, скорость растворения, сыпучесть, совместимость с измельчением, гранулированием и уплотнением и/или однородность распределения [см., например, Ρ. ΌίΜαΠίπο. с1 а1., 1. Тйетша1. Апа1. 48:447-458 (1997)]. Способность любого данного соединения находиться в одной или более кристаллических формах (т.е. полиморфах) является непредсказуемой, как и физические свойства любой отдельной кристаллической формы. Физические свойства полиморфной формы могут влиять на ее возможность применения в фармацевтических составах. Эти свойства могут оказывать воздействие на стабильность, растворение и биодоступность твердого состава, что впоследствии влияет на возможность применения или эффективность таких составов при лечении заболевания.

Индивидуальный полиморф, обладающий одним или более требуемыми свойствами, может подходить для создания фармацевтического состава с желательным свойством (свойствами). Существование соединения с полиморфной формой (формами), имеющей нежелательные свойства, может затруднить или помешать применению полиморфной формы в качестве фармацевтического вещества.

В случае химического вещества, которое существует более чем в одной полиморфной форме, менее термодинамически стабильные формы могут иногда превращаться в более термодинамически стабильную форму при данной температуре через достаточный промежуток времени. Если это превращение не является быстрым, такую термодинамически нестабильную форму называют метастабильной формой. В некоторых случаях стабильная форма имеет самую высокую температуру плавления, самую низкую растворимость и максимальную химическую стабильность. В других случаях метастабильная форма может проявлять достаточную химическую и физическую стабильность при нормальных условиях хранения, что позволяет применять ее в коммерческой форме. В этом случае эта метастабильная форма, хотя и менее термодинамически стабильная, может иметь свойства, более предпочтительные по сравнению со свойствами стабильной формы, например повышенную растворимость или лучшую пероральную биодоступность. Подобным образом, аморфная форма активного фармацевтического ингредиента может иметь другую растворимость по сравнению с растворимостью данного кристаллического вещества, обусловленную снижением сил связи в кристаллической решетке в аморфном веществе, которые необходимо преодолеть для осуществления растворения в водных или неводных жидкостях.

Краткое описание изобретения

Согласно основному варианту реализации в изобретении предложены новые твердые формы 17-этинил-10В,13§-диметил-2,3,4,58,6,7,8В,9§,10,11,12,13,14§,15,16,17-гексадекагидро-1Нциклоиента[а]фенантрен-38,178-диола, который представлен формулой 1. Это соединение подходит для лечения гиперпролиферативного состояния, такого как рак, или предракового состояния и, в частности, гормоночувствительного рака и рака, связанного с гормональными нарушениями, предраковой или доброкачественной гиперплазии, таких как рак предстательной железы, рак молочной железы, внутриэпителиальная неоплазия предстательной железы или доброкачественная гипертрофия предстательной железы.

- 1 018974

Соединение формулы 1 (далее также называемое соединением 1 или 17а-этинил-5а-андростанЗа,17в-диолом) получают в аморфных и кристаллических формах, в частности кристаллических формах, обозначаемых в настоящем описании как форма I, форма III, форма IV, форма V, форма VI, форма VII и форма VIII.

В одном варианте реализации изобретения предлагают конкретную кристаллическую форму соединения 1 (например, форму I, форму III, форму IV, форму V, форму VI, форму VII, форму VIII), по существу не содержащую или в значительной степени не содержащую других кристаллических или аморфных форм соединения 1.

Согласно некоторым вариантам реализации изобретения в настоящем изобретении предлагают конкретную полиморфную форму (например, форму III) или псевдополиморфную форму (например, форму I) соединения 1, которая по существу не содержит или в значительной степени не содержит других полиморфных или псевдополиморфных форм соединения 1.

В еще одном варианте реализации изобретения предлагают аморфное соединение 1, при этом, как правило, аморфное вещество по существу не содержит или в значительной степени не содержит кристаллического соединения 1.

Согласно некоторым вариантам реализации в настоящем изобретении предложены способы получения, выделения и/или исследования твердых форм согласно изобретению. Некоторые из этих вариантов реализации изобретения направлены на способы получения соединения 1 в кристаллической форме. Другие указанные варианты реализации изобретения направлены на способы получения соединения 1 в аморфной форме.

Согласно некоторым вариантам реализации изобретения твердые формы соединения 1 характеризуют или идентифицируют способами, включающими порошковую рентгеновскую дифракцию (ΧΚΡΌ), и одним или более термическими способами, в том числе дифференциальным термическим анализом (ДТА), дифференциальной сканирующей калориметрией (ДСК), термогравиметрическим анализом (ТГ А) и измерением температуры плавления.

Согласно некоторым вариантам реализации изобретения твердую форму соединения 1 характеризуют или идентифицируют способами, включающими порошковую рентгеновскую дифракцию и способ колебательной спектроскопии, такой как рамановская спектроскопия.

Согласно некоторым вариантам реализации изобретения твердую форму соединения 1 характеризуют или идентифицируют способами, включающими рентгеновскую дифракцию на монокристаллах.

Согласно некоторым вариантам реализации изобретения твердую форму соединения 1 характеризуют или идентифицируют способами, включающими ¹Н-ЯМР-спектроскопию, элементный анализ, титрование по методу Карла Фишера, термогравиметрический анализ или их комбинацию.

Согласно некоторым вариантам реализации изобретения кристаллическую форму соединения 1 идентифицируют или характеризуют способом, включающим следующие стадии:

(1) получение параметров элементарной ячейки для эталонной кристаллической формы;

(2) получение одной или более порошковых рентгенограмм высокого разрешения для кристаллической формы, которую предполагают идентифицировать или охарактеризовать, и индицирование полученной таким образом порошковой рентгенограммы высокого разрешения;

(3) определение параметров элементарной ячейки для кристаллической формы, которую предполагают идентифицировать или охарактеризовать, из индицированной порошковой рентгенограммы (рентгенограмм) высокого разрешения; и (4) сравнение параметров элементарной ячейки для эталонной кристаллической формы и кристаллической формы, которую предполагают идентифицировать.

Согласно некоторым вариантам реализации этого способа параметры элементарной ячейки для эталонной кристаллической формы получают из данных рентгеновского анализа на монокристаллах. Согласно другим вариантам реализации этого способа параметры элементарной ячейки для эталонной кристаллической формы получают из индицированной порошковой рентгенограммы (рентгенограмм) высокого разрешения. Согласно еще другим вариантам реализации этого способа кристаллическая форма,

- 2 018974 которую предполагают идентифицировать или охарактеризовать, представляет собой полиморф или псевдополиморф, и эталон представляет собой другой полиморф или псевдополиморф, который предполагают идентифицировать или охарактеризовать. В некоторых из указанных способов кристаллическая форма, которую предполагают идентифицировать, представляет собой псевдополиморф, и эталон представляет собой дегидрат, предпочтительно изоструктурный дегидрат. Согласно еще другим вариантам реализации этих способов параметры элементарной ячейки, применяемые для сравнения, представляют собой размеры кристаллов, полученные для изоструктурной эталонной кристаллической формы и кристаллической формы, которую предполагают охарактеризовать.

Другие варианты реализации изобретения направлены на твердые составы, содержащие твердую форму соединения 1, и способы получения такого твердого состава.

Согласно некоторым вариантам реализации изобретения настоящее изобретение включает применение твердых форм согласно изобретению в качестве конечного фармацевтического продукта.

В других вариантах реализации изобретения предлагаются фармацевтически приемлемые составы, содержащие конкретную кристаллическую форму (например, форму I, форму III, форму IV, форму V, форму Уф форму VII] форму VIII) соединения 1, которое по существу не содержит или в значительной степени не содержит другие твердые формы, такие как аморфные или другие кристаллические формы соединения 1, и способы получения этих составов.

В других вариантах реализации изобретения предлагаются жидкие составы, полученные путем приведения в контакт или смешивания по меньшей мере одной твердой формы соединения 1 с жидким наполнителем, в котором соединение 1 имеет достаточную растворимость, возможно, в присутствии еще одного наполнителя, и способы получения такого жидкого состава.

В еще одном варианте реализации изобретения предлагаются способы лечения у субъекта рака или гиперпролиферативного состояния, а именно рака, вызванного гормональными нарушениями, или гормоночувствительного рака, в том числе рака яичников, рака эндометрия, рака предстательной железы или рака молочной железы, с помощью твердого состава, содержащего твердую форму соединения 1, такую как аморфная или кристаллическая форма соединения 1.

В еще одном варианте реализации изобретения предлагаются способы лечения у субъекта рака, вызванного гормональными нарушениями, или гормоночувствительного рака, такого как рак яичников, рак эндометрия, рак предстательной железы или рак молочной железы, с помощью твердого состава, содержащего конкретную кристаллическую форму (например, форму I, форму III, форму IV, форму V, форму VI форму VII, форму VIII) соединения 1, которое, по существу, не содержит другие твердые формы, такие как аморфные и другие кристаллические формы соединения 1.

В еще одном варианте реализации изобретения предлагаются способы лечения у субъекта эндометриоза или доброкачественной гиперплазии простаты с помощью твердого состава, содержащего твердую форму соединения 1, такую как аморфную или кристаллическую форму соединения 1.

Варианты реализации изобретения также включают применение соединения 1 в аморфной или кристаллической форме для получения лекарственного препарата для лечения или профилактики рака, вызванного гормональными нарушениями, или гормоночувствительного рака, предракового состояния или гиперплазии, такой как рак предстательной железы, рак молочной железы, внутриэпителиальной неоплазии предстательной железы или доброкачественной гипертрофии предстательной железы.

В еще одних вариантах реализации изобретения предлагаются способы получения жидких составов с применением твердой формы соединения 1 и применение таких составов для лечения рака, вызванного гормональными нарушениями, или гормоночувствительного рака.

Другие варианты реализации и преимущества настоящего изобретения представлены в настоящем описании, включающем пронумерованные варианты реализации изобретения и формулу изобретения.

Краткое описание фигур

На фиг. 1 представлена порошковая рентгенограмма низкого разрешения для продукта синтеза, полученного при приготовлении массы соединения 1.

На фиг. 2 представлена порошковая рентгенограмма высокого разрешения для пробы, содержащей форму III 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диола.

На фиг. 3 представлены полученные способами дифференциальной сканирующей калориметрии и термогравиметрического анализа термограммы пробы, содержащей форму III 17а-этинил-5а-андростанЗа,17в-диола.

На фиг. 4 представлен спектр протонной ЯМР-спектроскопии пробы, содержащей форму III 17αэтинил-5 α-андростан-З α,17 β -диола.

На фиг. 5 представлен спектр рамановской спектроскопии и участок спектра в увеличенном масштабе для пробы, содержащей форму III 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диола.

На фиг. 6 представлена сделанная под микроскопом фотография кристаллов формы III 17а-этинил5а-андростан-3а,17в-диола при увеличении 10Х.

На фиг. 7 представлена порошковая рентгенограмма высокого разрешения пробы, содержащей форму I 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диола.

- 3 018974

На фиг. 8 представлены полученные способами дифференциальной сканирующей калориметрии и термогравиметрического анализа термограммы пробы, содержащей форму I 17а-этинил-5а-андростан3а,17в-диола.

На фиг. 9 представлен рамановский спектр с увеличением участка, характеризующим пробу, содержащую форму I 17(/.-этинил-5</.-андростан-3 α.17β-диола.

На фиг. 10 представлено сравнение рассчитанных и экспериментально полученных порошковых рентгенограмм для формы I 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диола.

На фиг. 11 приведено изображение элементарной ячейки, полученное с помощью программы ΘΚΤΕΡ, для кристаллической формы I 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диола, полученное с помощью способа рентгеновской кристаллографии на монокристаллах.

На фиг. 12 представлена порошковая рентгенограмма низкого разрешения пробы, содержащей форму IV 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диола.

На фиг. 13 представлены полученные способами дифференциальной сканирующей калориметрии и термогравиметрического анализа термограммы пробы, содержащей форму IV 17а-этинил-5а-андростан3а,17в-диола.

На фиг. 14 представлена сделанная под микроскопом фотография кристаллов формы IV 17аэтинил-5а-андростан-3а,17в-диола при увеличении 2Х и 10Х

На фиг. 15 представлена порошковая рентгенограмма низкого разрешения пробы, содержащей форму V 17 а-этинил-5 а-андростан-3 α,17β -диола.

На фиг. 16 представлена порошковая рентгенограмма низкого разрешения пробы, содержащей форму VI 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диола.

На фиг. 17 представлены полученные способами дифференциальной сканирующей калориметрии и термогравиметрического анализа термограммы пробы, содержащей форму VI 17а-этинил-5а-андростан3а,17в-диола.

На фиг. 18 представлена порошковая рентгенограмма форму VII 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диола.

На фиг. 19 представлена порошковая рентгенограмма форму VIII 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диола.

На фиг. 20 представлена порошковая рентгенограмма аморфный 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диол, по существу не содержащий кристаллический 17аэтинил-5 а-андростан-3 α,17 β -диол.

На фиг. 21 представлены полученные способами термогравиметрического анализа и дифференциального термического анализа термограммы пробы, содержащей аморфный 17а-этинил-5а-андростан3а,17в-диол, по существу не содержащий кристаллический 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диол.

На фиг. 22 показано действие состава, полученного из кристаллического 17а-этинил-5а-андростан3а,17в-диола, на распространение опухолей на модели рака предстательной железы, посредством демонстрации развития объема опухоли при лечении и дней с начала лечения.

На фиг. 23 показано действие состава, полученного из кристаллического 17а-этинил-5а-андростан3а,17в-диола, на сформировавшиеся опухоли на модели рака предстательной железы посредством демонстрации развития объема опухоли при лечении и дней после начала лечения.

На фиг. 24 показано ингибирование клеточного цикла и индукция апоптоза в раковых клетках предстательной железы, претерпевающих пролиферацию после лечения составом, полученным из кристаллического 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диола.

На фиг. 25 показано действие состава, полученного из кристаллического 17а-этинил-5а-андростан3а,17в-диола, с течением времени относительно образования новой опухоли после первого дня введения дозы на модели рака молочной железы.

На фиг. 26 показано действие состава, полученного из кристаллического 17а-этинил-5а-андростан3а,17в-диола, на опухолевую массу, увеличивающуюся в объеме, на модели рака молочной железы.

Подробное описание изобретения низкого низкого низкого разрешения разрешения разрешения пробы, пробы, пробы, содержащей содержащей содержащей

Определения.

Применяемые в настоящем описании, или сформулированные иным образом, или подразумеваемые из контекста термины, которые определены в настоящем документе, имеют точно заданные значения. Описание вариантов реализации изобретения и приведенных примеров иллюстрирует изобретение и не предполагает его ограничение каким-либо способом. Если не указано или не подразумевается иное, например, при применении совместных элементов или заменяющих компонентов, при описании изобретения термины в единственном числе означают один или более и термин или означает и/или.

Если явно или из контекста не подразумевается иное, выраженные в процентах количества изображают как % по массе (мас.%). Так, твердый дозированный состав, содержащий по меньшей мере примерно 2% соединения 1, представляет собой твердый дозированный состав или суспензию, содержащую по меньшей мере примерно 2 мас.% соединения 1. Твердое соединение 1, содержащее 0,1% воды, озна

- 4 018974 чает что 0,1 мас.% воды связан с твердым веществом.

Термины примерно и приблизительно, применяемые по отношению к числовому значению или диапазону значений, который используют для описания конкретной твердой формы, например удельная температура или диапазон температур, такие как, например, температура, характеризующая плавление, дегидратацию, десольватацию или стеклование; изменение массы, такое как, например, изменение массы как функция температуры или влажности; содержание растворителя или воды, в единицах, например, массы или процента; или положение пика, такое как, например, при анализе способом ИК- или рамановской спектроскопии или порошковой рентгеновской дифракции; указывают, что значение или диапазон значений могут отклоняться в такой степени, которую обычный специалист в данной области техники при описании конкретной твердой формы считает все еще приемлемой. Более конкретно, термины примерно и приблизительно, применяемые в этом контексте, указывают, что числовое значение или диапазон значений могут варьировать на 20, 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2, 1, 0,9, 0,8, 0,7, 0,6, 0,5, 0,4, 0,3, 0,2, 0,1 или 0,01% от приведенного значения или диапазона значений при описании конкретной композиции или твердой формы.

Термин твердое состояние, используемый в настоящем описании, относится к физическому состоянию соединения или композиции, содержащей такое соединение, как 17а-этинил-5а-андростан3а,17в-диол (т.е. соединение 1); при этом по меньшей мере примерно 2-10% массы присутствующего соединения существует в виде твердого вещества. Как правило, большая часть массы соединения 1 обязательно находится в твердой форме. Более характерно, по меньшей мере примерно 80-90% массы соединения 1 находится в твердой форме. Твердые формы включают кристаллические, неупорядоченные кристаллические, поликристаллические, микрокристаллические, нанокристаллические, частично кристаллические, аморфные и полутвердые формы или их смеси, возможно, с нетвердым или некристаллическим соединением 1. Твердые формы соединения 1 также включают полиморфы, псевдополиморфы, гидраты, сольваты, дегидратированные гидраты и десольватированные сольваты и их смеси, возможно, с нетвердым или некристаллическим соединением 1. Таким образом, твердые формы соединения 1 будут включать одну полиморфную форму соединения 1, одну псевдополиморфную форму соединения 1, смесь двух или более, обычно двух или трех, полиморфных или псевдополиморфных форм соединения 1 или комбинацию любой из указанных твердых форм, возможно, с нетвердым или некристаллическим соединением 1, при условии, что по меньшей мере примерно 2-10% массы соединения 1 находится в твердой форме.

Термин кристаллический и относящиеся к нему термины, применяемые в настоящем описании для описания вещества, компонента или продукта, означает, что вещество, компонент или продукт является кристаллическим, как определено соответствующим способом, как правило, рентгеновской дифракцией [см., например, Кешшдои'к Рйаттасеибса1 8с1епсек, 18⁴¹¹ еб., Маск РиЬНкйшд, ЕакЮп Ра., р. 173 (1990); Тке Ипйеб 81а1ек Рйаттасоре1а, 23^гб еб., р. 1843-1844 (1995)].

Термин кристаллические формы и относящиеся к нему термины, применяемые в настоящем описании, относится к различным кристаллическим модификациям данного вещества, в том числе, без ограничений, к полиморфам, сольватам, гидратам, смешанным сольватам, совместным кристаллам и другим молекулярным комплексам. Кристаллическая форма также может представлять собой смесь различных кристаллических модификаций данного вещества, таких как комбинация псевдополиморфных или полиморфных форм, комбинация одной или более полиморфных форм с одним или более псевдополиморфом или комбинация указанных форм с аморфными или нетвердыми формами вещества. Типичные комбинации будут представлять собой две или более полиморфные или псевдополиморфные формы, такие как смесь полиморфной формы с псевдополиморфной формой или смесь полиморфной или псевдополиморфной формы с аморфным веществом.

Кристаллические формы вещества можно получить с помощью множества способов, известных в данной области техники. Такие способы включают, без ограничений, перекристаллизацию из расплава, охлаждение из расплава, перекристаллизацию из растворителя, перекристаллизацию в замкнутом объеме, таком как, например, в нанопорах или капиллярах, перекристаллизацию на поверхностях или темплатах, например на полимерах, перекристаллизацию в присутствии добавок, таких как, например, противоположные молекулы, полученные при совместной кристаллизации, десольватацию, дегидратацию, быстрое испарение, быстрое охлаждение, медленное охлаждение, диффузию из паровой фазы, возгонку, измельчение и измельчение в каплях растворителя.

Термин полиморф, используемый в настоящем описании, относится к определенной кристаллической форме вещества, такого как соединение 1. Полиморфы, как правило, различаются по своим физическим свойствам в зависимости от порядка расположения молекул в решетке полиморфа. Кроме того, могут различаться такие физические свойства полиморфа, как, например, стабильность или характеристики сыпучести вследствие присутствия гидратов, сольватов или других молекул, включенных в решетку полиморфа.

В рамках термодинамики существуют два вида полиморфизма. Например, когда полиморфы имеют монотропную взаимосвязь, кривая свободной энергии различных полиморфов в этой связи относительно

- 5 018974 температуры не пересекается до того, как все полиморфы расплавятся, т.е. любой переход из одного полиморфа в другой будет необратим. Полиморфы, которые имеют монотропную взаимосвязь, иногда называют монотропами. Для полиморфов, имеющих энантиотропную взаимосвязь, кривая свободной энергии различных полиморфов в этой взаимосвязи относительно температуры демонстрирует точку пересечения до различных температур плавления, и, таким образом, становится возможным обратимое превращение между двумя полиморфами при нагревании и охлаждении. Полиморфы, которые имеют энантиотропную взаимосвязь, иногда называют энантиотропами.

Полиморфы могут проявлять одно или более различий в физических или фармацевтических свойствах, в том числе гигроскопичности, растворимости, истинной скорости растворения, скорости реакции в твердой фазе (т.е. химической стабильности фармацевтического ингредиента в виде лекарственного вещества или фармацевтического продукта), стабильности кристаллического состояния (т.е. склонности к переходу в более термодинамически стабильную кристаллическую форму), свободной поверхностной энергии, межфазном поверхностном натяжении, механической прочности (например, твердости, хрупкости, пластической деформации, податливости к механической обработке, деформации при сжатии), пределах прочности на разрыв, прессуемости (т.е. таблетировании) и способности к переработке (например, обработке, деформации, смешиванию и т.п.). Различия в физических и механических свойствах полиморфных форм лекарственного вещества могут также влиять на промышленное производство и переход от лабораторных методик к опытной установке и затем к серийному производству. Замена оборудования, варьирование скоростей нагревания и охлаждения и варьирование способов перемешивания также могут воздействовать на кристаллизацию и, таким образом, влиять на получаемую кристаллическую форму.

Полиморфы, существующие в виде гидратов, сольватов или смешанных сольватов, как правило, называются псевдополиморфами и представляют собой различные твердые формы с учетом изоструктурной полиморфной формы, которая является безводной или не является сольватом. Псевдополиморфы, которые различаются по природе или стехиометрии сольвата, также рассматриваются как различные твердые формы, с учетом друг друга. Например, соединение 1, существующее в виде моногидрата, представляет собой другую твердую форму с учетом своего изоструктурного дигидрата. Кроме того, метанолводный сольват (т.е. смешанный сольват) соединения 1 рассматривается как другая твердая форма с учетом его изоструктурного гидрата или дегидрата. Сольваты и гидраты, как правило, проявляют разные растворимости или разные истинные скорости растворения по сравнению с их изоструктурным дегидратом или десольватом. Например, при данной температуре сольват может иметь меньшую истинную скорость растворения в растворителе, который содержит сольват, по сравнению со своим изоструктурным десольватом. Таким образом, гидрат иногда может иметь более низкую истинную скорость растворения в водном растворе по сравнению с его изоструктурным дегидратом. Более того, профили стабильности гидратов и сольватов при различных температурах и/или при различных давлениях паров воды (например, относительной влажности) или органических растворителей иногда будут отличаться от профилей изоструктурного дегидрата или десольвата. Такие различия могут оказывать влияние на состав, обработку или стабильность активного фармацевтического ингредиента (например, соединения 1), а также на лекарственное вещество или фармацевтический продукт при различных условиях хранения.

Таким образом, различные кристаллические или полиморфные формы могут иметь разные физические свойства, такие как, например, температуры плавления, теплоты плавления, растворимости и/или колебательные спектры в результате расположения или конформации молекул в кристаллической решетке (см., например, Вугп, 8.Р.. РГс1ГГсг. Р.Р.. апб 81о^е11, ТС. (1999), 8о11б-81а1е СйсииМгу оГ Отидк, 2'¹ еб., 88С1, 1пс.: ХУеМ ЬаГауебе, 1пб.). Различия в физических свойствах, проявляемое полиморфами и псевдополиморфами, могут влиять на такие фармацевтические параметры, как стабильность при хранении, прессуемость и плотность (важные параметры при промышленном производстве составов и продуктов) и истинная скорость растворения, которая может быть важным фактором с точки зрения биодоступности. Различия в стабильности могут привести к изменениям химической реакционной способности (например, разному окислению, так что лекарственная форма обесцвечивается более быстро, когда состоит из одного полиморфа или псевдополиморфа, чем в случае, когда содержит другую полиморфную форму) или механическим изменениям (например, таблетки крошатся при хранении, так как кинетически предпочтительный полиморф превращается в термодинамически более стабильный полиморф) или и тем и другим (например, таблетки одного полиморфа более подвержены разрушению при высокой влажности). В результате различий в растворимости/растворении, в крайнем случае, некоторые полиморфные переходы могут привести к потере эффективности или, в другом крайнем случае, к токсичности. Кроме того, физические свойства кристалла могут иметь важное значение при обработке, например один полиморф может с большей вероятностью образовывать сольваты или гидраты, которые может быть трудно фильтровать и отмывать от примесей (т.е. форма частиц и их гранулометрический состав могут различаться между полиморфами).

Как правило, кристаллические формы легко отличимы друг от друга по одному или более физических или аналитических свойств, таких как скорость растворения, характеристикам, полученным с помощью инфракрасной и рамановской спектроскопии, способов рентгеновской дифракции, таких как способы дифракции на монокристаллах и способы порошковой дифракции, ЯМР-спектроскопии в твердом

- 6 018974 теле (ЯМР-ТТ), термические способы, такие как измерение температуры плавления, дифференциальный термический анализ (ДТА), дифференциальная сканирующая калориметрия (ДСК), термический гравиметрический анализ (ТГА) и другие методы, приведенные в описании настоящего изобретения. Дополнительные способы для описания или отличия одного псевдополиморфа от другого изоструктурного полиморфа, псевдополиморфа, десольвата или дегидрата включают элементный анализ, титрование по методу Карла Фишера, анализ динамической сорбции паров, совместный анализ методами термогравиметрии и инфракрасной спектроскопии (ТГ-ИК), газовую хроматографию остаточных растворителей, 'НЯМР и другие способы, приведенные в описании настоящего изобретения.

Термин изоструктурная кристаллическая форма, используемый в настоящем описании, относится к кристаллической форме вещества, которая имеет общее структурное сходство с другой кристаллической формой, в том числе приблизительно схожее межплоскостное расстояние в кристаллической решетке. [Более подробный расчет кристаллических решеток можно найти в главах 2 и 3 81ои1 и 1спксп. XВау ЕИгиеШгс Ос1сгтша1юп: А Ргасйса1 Сшбе, МасМШаи Со., Νο\ν Уотк (1968)]. Таким образом, изоструктурные кристаллические формы будут иметь похожие фрагменты упаковки молекул, но отличающиеся параметры элементарной ячейки (смещение симметрии). Вследствие их общего структурного сходства изоструктурные кристаллические формы, как правило, имеют похожие, но не обязательно идентичные, порошковые рентгенограммы. Изоструктурная кристаллическая форма может быть основана на веществе, которое представляет собой нейтральную молекулу или молекулярный комплекс. Изоструктурная кристаллическая форма может представлять собой сольват, в том числе гидрат, или десольватированную сольватную кристаллическую форму вещества. Изоструктурные формы, которые являются сольватами полиморфа, иногда называют псевдополиморфными относительно несольватированного полиморфома. Сольватированная кристаллическая форма, как правило, содержит в кристаллической решетке один или более растворителей, в том числе воду, которые могут представлять собой растворитель или растворители для кристаллизации, применяемые при получении кристаллической формы.

Термин аморфный, используемый в настоящем описании, относится к твердой форме соединения (например, соединения 1), при этом твердая форма не имеет регулярной атомной структуры с дальним порядком, как определено способом порошковой рентгеновской дифракции. Порошковая рентгенограмма аморфного вещества будет выглядеть как широкая линия (гало) без отличительных пиков. Аморфное вещество для некоторых соединений можно получить посредством целого ряда способов, известных в данной области техники. Такие способы включают, без ограничений, нагревание, охлаждение из расплава, быстрое охлаждение из расплава, испарение растворителя, быстрое испарение растворителя, десольватацию, возгонку, измельчение, криоизмельчение и сублимационную сушку.

Термин состав или фармацевтически приемлемый состав, используемый в настоящем описании, относится к композиции, содержащей активный фармацевтический ингредиент, такой как 17а-этинил5а-андростан-3а,17в-диол (т.е. соединение 1), присутствующий в твердой форме наряду с одним или более фармацевтически приемлемыми наполнителями, или относится к композиции, полученной из твердой формы активного фармацевтического ингредиента, при этом композиция пригодна для введения человеку. Состав может состоять или может быть получен из одной, двух или более кристаллических форм активного фармацевтического ингредиента (например, единственной полиморфной или псевдополиморфной формы соединения 1, смеси двух полиморфных форм соединения 1, смеси полиморфной формы соединения 1 и псевдополиморфной формы соединения 1 или смеси полиморфной или псевдополиморфной формы соединения 1 и аморфного соединения 1). Как правило, составы состоят или получены из одной кристаллической формы соединения 1 (например, формы I, формы III, формы IV, формы V, формы VI, формы VII, формы VIII), аморфного соединения 1 или менее предпочтительно смеси одной полиморфной или псевдополиморфной формы и аморфного соединения 1.

Термин состав в твердом состоянии или твердый состав, используемый в настоящем описании, относится к составу, содержащему твердую форму соединения 1 и один или более фармацевтически приемлемых наполнителей, при этом большая часть массы твердой формы сохраняется в такой твердой форме в течение по меньшей мере примерно 6 месяцев при температуре окружающей среды, обычно в течение по меньшей мере примерно 12 или 24 месяцев при температуре окружающей среды, при смешивании с наполнителями в соотношениях, необходимых для приготовления твердого состава. Единицы дозирования, содержащие твердый состав, включают таблетки, капсулы, каплеты, желатиновые капсулы, ампулы, суспензии и другие единицы дозирования, как правило, относящиеся к парентеральному или энтеральному (пероральному) введению активного фармацевтического ингредиента в твердой форме субъекту, нуждающемуся в таком введении.

Термин жидкий состав, используемый в настоящем описании, относится к составу, в котором одну или более твердых форм соединения 1 смешали или привели в контакт с одним или более наполнителями, при этом по меньшей мере один из наполнителей находится в жидкой или нетвердой форме (т.е. нетвердый наполнитель), в соотношениях, необходимых для приготовления жидкого состава, таких, что большая часть массы соединения 1 растворяется в нетвердом наполнителе. Единицы дозирования, содержащие жидкий состав, включают сиропы, гели, мази и другие единицы дозирования, как правило,

- 7 018974 относящиеся к парентеральному или энтеральному введению активного фармацевтического ингредиента в нетвердой форме субъекту, нуждающемуся в таком введении.

Термин по существу не содержащий, используемый в настоящем описании, относится к соединению, такому как соединение 1, в котором более чем примерно 60 мас.% соединения присутствует в виде указанной твердой формы. Например, термин кристаллическое соединение 1, по существу не содержащее аморфного вещества относится к твердой форме соединения 1, в которой более чем примерно 60% соединения 1 представляет собой кристаллическое соединение 1. Такие композиции, как правило, содержат по меньшей мере примерно 80%, предпочтительно по меньшей мере примерно 90% кристаллического соединения 1, при этом оставшаяся часть присутствует в виде аморфного или некристаллического соединения 1. Составы, описанные в настоящем изобретении, как правило, содержат примерно 94-99% одной кристаллической или аморфной формы соединения 1, предпочтительно примерно 97%, примерно 98% или примерно 99%. В еще одном примере термин аморфное соединение 1, по существу не содержащее кристаллических форм относится к твердой форме соединения 1, в которой более чем примерно 60% соединения 1 является аморфным. Такие композиции, как правило, содержат по меньшей мере примерно 80%, обычно по меньшей мере примерно 90%, предпочтительно по меньшей мере примерно 95% аморфного соединения 1, при этом оставшаяся часть соединения присутствует в виде кристаллического соединения 1. В еще одном примере термин форма III, по существу, не содержащая другие кристаллические формы относится к композиции в твердом состоянии, в которой более чем примерно 60% соединения 1 присутствует в кристаллической форме в виде формы III. Такие композиции, как правило, содержат по меньшей мере примерно 80%, предпочтительно по меньшей мере примерно 90% и более предпочтительно по меньшей мере примерно 97% соединения 1 в виде формы III, при этом оставшаяся часть соединения 1 присутствует в виде других кристаллических или аморфных форм или их комбинации.

Термин по существу чистый, используемый в настоящем описании, относится к твердой форме соединения 1, которая содержит менее чем примерно 3% или менее чем примерно 2 мас.% суммарного количества примесей или более предпочтительно менее чем примерно 1 мас.% воды и/или менее чем примерно 0,5 мас.% таких примесей, как побочные продукты разложения или синтеза или остаточный органический растворитель, который не является частью сольвата твердой формы соединения 1 (например, не является частью псевдополиморфа) или другой формы.

Термин по существу идентичный, используемый в настоящем описании, относится к измеряемым физическим характеристикам, которые сравнимы по величине, или данным измерения прибора, которые сравнимы в отношении положения и амплитуды или интенсивности пиков с учетом отклонений, обычно связанных с расположением или подготовкой проб или с особенностью прибора, применяемого для получения данных измерения или физических характеристик, или обусловленных другими отклонениями или флуктуациями, с которыми обычно сталкиваются при применении одинаковых или разных лабораторных условий или аналитических приборов.

Термин в значительной степени не содержащий, используемый в настоящем описании, относится к компоненту, который определен как не присутствующий в обнаруживаемом количестве при типовых условиях, применяемых для его определения, или который будет неблагоприятно воздействовать на требуемые свойства композиции или состава, в котором этот компонент может быть обнаружен. Например, в значительной степени не содержащий жидкости означает композицию или состав в твердой форме, который не содержит воду или растворитель в жидкой форме, в количестве, которое будет неблагоприятно воздействовать на фармацевтическую приемлемость состава или композиции для применения в твердой лекарственной форме, предназначенной для введения субъекту, нуждающемуся в таком введении. Суспензию рассматривают как твердый состав и для таких составов жидкий наполнитель (наполнители), содержащий суспензионный состав, не включают в рамки этого определения. Термин полиморфная форма III, в значительной степени не содержащая аморфного соединения 1 относится к конкретной кристаллической форме соединения 1, в которой аморфное соединение 1 не обнаруживается посредством анализа рентгеновской порошковой дифракции. Как правило, предел обнаружения для аморфного вещества в кристаллической форме составляет примерно 10%.

Термин гидрат, применяемый в настоящем документе, относится к твердой форме определенного таким образом соединения, которая содержит молекулы воды в качестве неотъемлемой части твердой формы, и не относится к воде, которая связана неспецифически с основной массой соединения. Гидраты соединения 1 в кристаллической форме могут представлять собой изолированные гидраты или канальные гидраты. В кристаллической структуре изолированного гидрата молекулы воды отделены от прямого контакта с другими молекулами воды посредством молекул соединения 1, тогда как в канальных гидратах молекулы воды расположены близко друг к другу вдоль одного направления в решетке. Гидраты могут содержать стехиометрические или нестехиометрические количества молекул воды на молекулу соединения 1. Вытянутый канальный гидрат может абсорбировать воду в каналы под влиянием высокой влажности и высвобождать воду при воздействии относительно низкой влажности. Кристаллическую решетку таких гидратов можно растягивать или сжимать, по мере того как происходит образование гидрата или дегидратация, при этом размеры элементарной ячейки изменяются. Как правило, вода будет присутствовать в стехиометрическом гидрате при соотношении 0,25, 0,5, 1,0, 1,5 или 2,0 относительно

- 8 018974 соединения 1. Гидраты, как правило, более стабильны, чем их безводные аналоги, при температурах ниже температуры их дегидратации. Изолированные гидраты обычно дегидратируются при относительно более высоких температурах, чем канальные гидраты. Процесс дегидратации изолированных гидратов иногда является разрушительным для кристаллической структуры, поскольку этот процесс нередко требует перестройки молекул в элементарной ячейке, чтобы дать возможность молекулам воды покинуть решетку.

Термин сольват, используемый в настоящем описании, относится к твердой форме определенного таким образом соединения, которая содержит молекулы растворителя, связанные в определенном соотношении с молекулами соединения, и представляет собой неотъемлемую часть твердой формы и не относится к растворителю, который неспецифически связан с основной массой соединения. В случае если молекула растворителя представляет собой воду, такие сольваты называют гидратами. Как правило, растворитель присутствует в сольвате при соотношении 0,25, 0,5, 1,0, 1,5 или 2,0 по отношению к соединению 1.

Термин гиперпролиферативное состояние или рак, используемый в настоящем описании, относится к состоянию, характеризующемуся патологически высокой скоростью или устойчивым состоянием клеточного деления, которое является несогласованным с клеточным делением окружающих нормальных тканей, и продолжается, например, после прекращения стимулирования, которое могло первоначально спровоцировать изменение клеточного деления. Такое неконтролируемое и прогрессирующее состояние клеточной пролиферации может привести к образованию опухоли, которая является доброкачественной, потенциально злокачественной (предраковой) или непосредственно злокачественной. Гиперпролиферативные состояния включают состояния, описанные как гиперплазия, дисплазия, аденома, саркома, бластома, карцинома, лимфома, лейкемия или папиллома или другие состояния, описанные в настоящем изобретении.

Термин рак, вызванный гормональными нарушениями, предраковое состояние или доброкачественная гиперплазия или гормоночувствительный рак, предраковое состояние или доброкачественная гиперплазия, используемый в настоящем описании, относится к гиперпролиферативному состоянию, которое отрицательно или положительно в терапевтическом смысле реагирует на воздействие гормонами или представляет собой состояние, возникновение, продолжительность, инвазионность, преломление, серьезность симптомов или восприимчивость к химиотерапии которого свойственны или связаны, частично или полностью, с уровнями гормонов. Раки, вызванные гормональными нарушениями, или гормоночувствительные раки включают рак предстательной железы, рак молочной железы, рак яичников, рак шейки матки, рак матки, карциному эндометрия, аденокарциному, злокачественную меланому или другие состояния, описанные в настоящем изобретении. Некоторые дополнительные, вызванные гормональными нарушениями или родственные раки описаны в МШет, А.В. Сапсег Век. 38: 3985-3990 (1978).

Предраковые состояния, как правило, определяют как нарушения, которые демонстрируют гистологические изменения, связанные с повышенным риском развития ракового заболевания и иногда имеют некоторые, но не все, молекулярные и фенотипические признаки, характеризующие рак. Вызванные гормональными нарушениями или гормоночувствительные предраковые состояния включают внутриэпителиальную неоплазию предстательной железы (ВЭНПЖ), в частности ВЭНПЖ высокой степени злокачественности (ВЭНПЖ ВЗ), атипичную мелкоацинарную пролиферацию (АМП), дисплазию шейки матки и протоковую карциному ίη κίΐιι.

Гиперплазия, как правило, относится к пролиферации клеток в органе или ткани сверх той, что обычно наблюдают, и которая может привести к большому разрастанию органа или к образованию доброкачественной опухоли или новообразованию. Вызванные гормональными нарушениями или гормоночувствительные гиперплазии включают гиперплазию эндометрия (эндометриоз), доброкачественную гиперплазию предстательной железы и протоковую гиперплазию.

Термины наполнитель, носитель, фармацевтически приемлемый носитель или аналогичные термины означают один или более компонент (компонентов) или ингредиент (ингредиентов), который приемлем в смысле совместимости с другими ингредиентами в композициях или составах, содержащих соединение 1 в качестве активного фармацевтического ингредиента, который находится в твердой форме при смешивании с наполнителями. Эти наполнители, как правило, не чрезмерно вредны для субъекта, которому необходимо ввести указанный состав композиции. Используемые в настоящем описании термин наполнители включает жидкости, такие как вода для инъекции, бензилбензоат, хлопковое масло, Ν,Ν-диметилацетамид, спирт, такой как метанол, этанол, глицерин, арахисовое масло, полиэтиленгликоль (ПЭГ), витамин Е, маковое масло, пропиленгликоль, сафлоровое масло, кунжутное масло, соевое масло и растительное масло. Наполнители также включают средства, способствующие растворению, обычно применяемые для активных фармацевтических ингредиентов, которые плохо растворимы или нерастворимы в воде. Средства, способствующие растворению, включают циклодекстрин или производное циклодекстрина, такое как β-циклодекстрин, 2-гидроксипропил-в-циклодекстрин и САРТ18ОЬ™ (сульфобутиловый эфир-в-циклодекстрин) и ПЭГ или производное ПЭГ, такое как СНВЕМОРНОВ™ (полиэтоксилированное касторовое масло). Любой твердый наполнитель может представлять собой мел

- 9 018974 кий порошок или быть гранулированным. Наполнители, используемые в настоящем описании, могут включать один или более наполнителей, например хлороформ, диоксан, растительное масло, ДМСО, другие наполнители или любые их комбинации. Наполнители включают один или более компонентов, обычно применяемых в области техники, связанной с приготовлением фармацевтических составов, например один, два или более наполнителей, связующих веществ, дезинтегрантов, диспергирующих средств, консервантов, скользящих веществ, поверхностно-активных веществ и смазывающих веществ. Типичные наполнители включают повидон, кросповидон, кукурузный крахмал, карбоксиметилцеллюлозу, гидроксипропилметилцеллюлозу, микрокристаллическую целлюлозу, гуммиарабик, полисорбат 80, бутилпарабен, пропилпарабен, метилпарабен, бутилированный гидроксианизол, ЭДТА, лаурилсульфат натрия, хлорид натрия, хлорид калия, диоксид титана, стеарат магния, касторовое масло, оливковое масло, растительное масло, буферные вещества, такие как гидроксид натрия, одноосновный фосфат натрия, двухосновный фосфат натрия, гидроксид калия, одноосновный фосфат калия, двухосновный фосфат калия, трехосновный фосфат калия, карбонат калия, бикарбонат калия, гидроксид аммония, хлорид аммония, сахариды, такие как маннит, глюкоза, фруктоза, сахароза или лактоза, каждый из которых может быть спрессован или каждый из которых может быть высушен способом распылительной сушки.

Термин субъект означает человека или животное. Обычно животное представляет собой млекопитающее или позвоночное, такое как нечеловекообразный примат, собака или грызун. Подгруппы субъектов включают субъектов данного вида или группу субъектов одного вида, но разного возраста, например дети, в частности, примерно в возрасте от 1 недели до примерно 9 лет, подростки, например, в возрасте примерно 10-19 лет, взрослые люди, например, в возрасте примерно 20-100 лет и зрелые люди или пожилые люди, например, по меньшей мере в возрасте примерно 55 лет, по меньшей мере в возрасте примерно 60 лет, по меньшей мере в возрасте примерно 65 лет или в возрастном диапазоне, таком как примерно 60-100 лет. Таким образом, в настоящем описании предотвращение или лечение заболевания, состояния или симптома может включать или исключать любую подгруппу субъектов, которые объединены в группы по возрасту.

Термины эффективное количество, эффективная доза или т.п., как правило, обозначают количество твердой формы соединения 1 или количество соединения 1 в составе, состоящем или приготовленном из твердой формы соединения 1, которое достаточно для того, чтобы вызвать требуемую реакцию, например обнаруживаемое восстановление нормального физиологического состояния у субъекта, которому вводят эту дозу, такое как уменьшение или стабилизация опухолевой массы, обнаруживаемое уменьшение рака или биомаркера гиперпролиферации, который может представлять собой биомаркер клеточной поверхности или циркулирующий биомаркер, снижение скорости увеличения рака или биомаркера гиперпролиферации или обнаруживаемая модуляция или улучшение параметров клеток или клинического состояния или симптома. Эффективное количество может представлять собой однократную дозу или две или более дробных доз соединения 1 в составе, состоящем или приготовленном из твердой формы соединения 1, вводимые в один день, или это количество можно вводить в виде многократных доз на протяжении некоторого периода времени, например в течение от 2 дней до примерно 1, 2, 3, 4 или 5 лет. Эффективное количество можно также вводить при многократных курсах лечения, как это обычно делают при введении цитотоксических веществ для лечения рака. Курсы лечения можно раздвинуть по времени друг от друга посредством одного или более дней или недель, обычно 1-4 неделями или можно разделить более длительным периодом времени, если достигнута ремиссия гиперпролиферативного состояния, при этом лечение возобновляют после рецидива состояния. Курсы лечения включают ежедневное введение соединения 1 в течение 4 или 12 недель.

Термин предотвратить или предотвращение состояния или симптома, используемый в настоящем описании, означает, что возникновение состояния или симптома можно задержать в течение, по меньшей мере, некоторого периода времени, по меньшей мере, у некоторых подвергаемых лечению субъектов. Предотвратить или предотвращение можно также рассматривать как задержку обнаруживаемого распространения гиперпролиферативного состояния, которая измеряется по замедленному появлению новых нарушений или метастазов. Такие эффекты могут быть явными у значительного меньшинства субъектов (например, по меньшей мере примерно у 20% или, как правило, по меньшей мере примерно у 40%) или у большинства субъектов, за которыми проводят наблюдение во многих случаях клинического лечения, например лечения рака, когда лечение может вызвать ремиссию заболевания и ремиссия может быть долговременной или продолжаться в течение некоторого периода времени, в частности примерно 1-3 месяцев, примерно 4-6 месяцев, примерно год или примерно от 2 до 5 лет. Способы лечения, описанные в настоящем изобретении, могут вызвать похожие эффекты, которые называют предотвращением состояния или симптома. Таким образом, термин предотвратить или предотвращение не ограничивается предотвращением возникновения заболевания или исключением возможности появления заболевания у всех или у большинства субъектов, хотя такие результаты могут иметь место.

Термин субъект, склонный к развитию, используемый в настоящем описании, относится к основанной на факторах риска, рассчитанных с учетом ранее существовавшего состояния здоровья, семейного анамнеза, поведения, генетического маркера (маркеров) или биохимического маркера (маркеров), которые были получены из популяции, к которой принадлежит субъект, вероятности того, что субъект бу

- 10 018974 дет страдать от определенного таким образом состояния. Таким образом, термин субъект, такой как человек, склонный к развитию гиперпролиферативного состояния, относится к пациенту-человеку, у которого, в целом, выявленная вероятность развития гиперпролиферативного состояния является статистически более высокой в результате того, что этот субъект обладает одним или более из известных факторов риска в отношении гиперпролиферативного состояния. Считают, что пациенты, у которых диагностируют предраковое состояние, например дисплазию шейки матки или внутриэпителиальную неоплазию предстательной железы, являются субъектами, склонными к развитию рака шейки матки или рака предстательной железы.

Термин поверхностно-активное вещество (ПАВ) обозначает вещество, которое в низких концентрациях взаимодействует с поверхностями твердого вещества и жидкости, в которой твердое вещество нерастворимо или плохо растворимо. Жидкость может представлять собой жидкий наполнитель, присутствующий в суспензионном составе, содержащем твердую форму активного фармацевтического ингредиента, такую как кристаллическая форма I или форма III соединения 1, жидкий наполнитель и поверхностно-активное вещество, которое действует для улучшения суспендируемости. Альтернативно, поверхностно-активное вещество может присутствовать в пероральной твердой лекарственной форме, содержащей полиморф соединения 1 (например, кристаллическую форму I или форму III), аморфную форму соединения 1 или их смесь и поверхностно-активное вещество, которое способствует повышению скорости растворения активного фармацевтического ингредиента в желудочном соке. Поверхностноактивные вещества являются амфифильными по структуре и содержат полярные (гидрофильные) и неполярные (гидрофобные) участки в одной и той же молекуле. Примеры поверхностно-активных веществ, применяемых в данной области техники, приведены в Соггщап. ОТ.; Неа1у, А.М. ЗигГас1ап15 ίη Ркагтасеийса1 Ртобис18 апб ЗуДепъ ίη Епсус1ореб1а оГ Рйаттасеибса1 Тес1то1оду 2'¹ еб. Тау1ог апб Етапсщ, 2006, р. 3583-3596.

Термин суспензия, используемый в настоящем описании, если специально не указано или не подразумевается из контекста, обозначает твердую форму соединения 1, суспендированную обычно в виде тонкодиспергированного (например, тонкоизмельченного) твердого вещества, в жидком носителе (наполнителе) непосредственно перед введением суспензии. Суспензия может быть готова для применения или представлять собой сухой порошок, который ресуспендируют в виде суспензионной лекарственной формы непосредственно перед применением. Суспензии применяют, когда соединение 1 является нерастворимым или плохо растворимым в требуемом разбавителе или наполнителе. Суспензии обычно включают суспендирующее или флокулирующее вещество, смачивающее вещество, если присутствующее суспендирующее или флокулирующее вещество уже не служит для этой цели, буферное вещество и консервант. В коллоидной суспензии размер частиц соединения 1 обычно составляет менее чем примерно 1 мкм. В грубой суспензии частицы больше примерно 1 мкм. В грубых суспензиях фактический верхний предел для индивидуальных суспендируемых частиц соединения 1 составляет примерно от 50 до 75 мкм, хотя в зависимости от возможности введения суспензии через шприц может быть подходящей суспензия, в которой определенная доля частиц имеет размеры до 200 мкм. Описание способов получения суспензии для перорального или парентерального введения приведено в публикации Акега, е! а1. I. Ратеп1ета1 8ск Теск. 1987, 41:88-96; Ыакк, КА. ^шрепыопк ш Епсус1ореб1а оГ Ркаттасеибса1 Тескпо1оду 2^пб еб. Тау1ог апб Етапсщ, 2006, р. 3597-3610 (которая включена в настоящий документ посредством ссылки с описанием в настоящем патенте).

Способы исследования и идентификации твердых форм.

Морфология.

Морфология кристаллов относится к симметрии в кристалле, которую демонстрируют грани кристалла благодаря упорядоченному внутреннему размещению атомов в кристаллической структуре. Морфологию кристаллов конкретной кристаллической формы обычно описывают с помощью кристаллографической системы данной кристаллической формы, а именно триклинной, моноклинной, ромбической, тетрагональной, гексагональной или изометрической. Морфологию кристаллов можно определить путем исследования, например путем определения под микроскопом по меньшей мере при увеличении примерно 2Х, 10Х или 100Х с использованием нормального или поляризованного света. Кристаллы с кристаллографически различимыми осями будут взаимодействовать со светом способом, зависящим от ориентации кристаллической решетки относительно угла падающего света, и называются анизотропными кристаллами. Таким образом, когда свет попадает на неэквивалентную ось, он преломляется на два луча, каждый из которых поляризован в направлении колебаний, ориентированных под прямыми углами друг к другу, и перемещается с различными скоростями. Это явление называется двойным лучепреломлением и проявляется в большей или меньшей степени во всех анизотропных кристаллах. Если поляризованный свет колеблется в плоскости двупреломляющего кристалла, который расположен параллельно к направлению поляризатора, свет, проходящий через анализатор, не будет вносить свой вклад (поскольку одно направление светового колебания параллельно поляризатору), что приведет к тому, что кристалл станет очень темным и почти невидимым (т.е. к затуханию). Таким образом, двупреломляющий кристалл будет демонстрировать затухание при вращении под поляризованным светом. Поскольку многие органические соединения в кристаллической форме являются двупреломляющими, их кристаллы будут проявлять за

- 11 018974 тухание при условии, что они правильно сформированы (т.е. не сильно фрагментированы или иным образом несимметричны по форме или не содержат в кристалле значительное количество дефектов кристаллической решетки). Следовательно, это не обязательно означает, что твердая форма соединения 1, не демонстрирующая затухания при исследовании посредством кросс-поляризованного света, не является кристаллической.

Морфологию кристаллов можно также определить экспериментально из данных рентгеновского анализа на монокристаллах или из расчетных данных порошковой рентгеновской дифракции способами, описанными в настоящем изобретении.

Порошковая рентгеновская дифракция.

Ппорошковую рентгеновскую дифракцию обычно применяют для исследования или идентификации кристаллических соединений (см., например, И.8. Рбаттасорое1а, νοί. 23, 1995, тебюб 941, р. 18431845, И.8.Р. Рбаттасоре1а СотщШоп. 1пс., КоскуШе, Μά.; 8ΐοιιΙ е1 а1., Х-Кау 8бис1иге Пе1етт1иабои; А Ргасбса1 Сшбе, МасМШаи Со., №\ν Уотк, Ν.Υ. 1968). Когда рентгеновский луч воздействует на кристаллическую форму, обычно получают рентгенограмму, характеризующуюся последовательностями максимумов интенсивности в положениях, которые зависят от свойств решетки кристаллической формы. Таким образом, положения и относительная интенсивность линий на порошковой рентгенограмме указывают на конкретную кристаллическую форму и предоставляют отпечаток, который часто является специфическим для данной кристаллической формы, хотя слабые или очень слабые дифракционные пики не всегда могут проявляться на повторных рентгенограммах, полученных с помощью последующих партий кристаллов. Это, в частности, имеет место, если другие кристаллические формы присутствуют в пробе в значительных количествах, например, когда полиморфная или псевдополиморфная форма становится частично гидратированной, дегидратированной, десольватированной или нагревается с получением значительного количества другой полиморфной или псевдополиморфной формы.

Кроме того, относительные интенсивности полос, в частности, при малых значениях угла падения рентгеновских лучей (малое 2Θ) могут варьировать вследствие эффектов предпочтительной ориентации, возникающих из-за разницы, например, формы кристалла, размеров частиц и других условий измерения. Таким образом, с помощью относительных интенсивностей дифракционных пиков не всегда можно четко определить исследуемую кристаллическую форму. Вместо этого, обычно смотрят на относительное расположение пиков, сдвоенных за счет их амплитуды для определения, что кристаллическая форма соединения 1 представляет собой одну из форм, описанных в настоящем изобретении. Широкие пики на порошковой рентгенограмме, которые могут состоять из двух или более индивидуальных пиков, расположенных вплотную друг к другу, могут возникать из-за аморфных компонентов, неупорядоченных кристаллических форм или паразитного рассеяния основного луча. Широкие пики для различных проб одной и той же твердой формы, как правило, располагаются в пределах примерно 0,3-1° 2Θ. Для данных, полученных с нормальным разрешением, на порошковой рентгенограмме обычно находят отдельные острые пики для различных проб одной и той же твердой формы в пределах примерно 0,1° 2θ или иногда в пределах примерно 0,2° 2Θ при последующих анализах с помощью порошковой рентгеновской дифракции, если их проводят в одной и той же лаборатории в воспроизводимых условиях окружающей среды, следуя одинаковому протоколу эксперимента. Таким образом, когда устанавливают, что отдельный острый пик на порошковой рентгенограмме находится в определенном положении, в частности примерно при 13,5 или 13,45, это означает, что пик расположен при 13,5±0,1 или 13,45±0,10. Когда устанавливают, что на порошковой рентгенограмме широкий пик в определенном положении находится примерно при заданном значении градуса 2θ, это означает, что пик расположен при этом значении градуса 2θ±0,3.

При воспроизводимых внутрилабораторных условиях с применением одного и того же прибора и протокола для получения порошковой рентгенограммы различия в местоположениях и интенсивностях пиков на порошковой рентгенограмме, полученных при последующих анализах с помощью порошковой рентгеновской дифракции различных проб одной и той же твердой формы, имеющей одинаковую степень кристалличности, обусловлены, главным образом, различиями в подготовке проб или чистоте пробы.

Как правило, нет необходимости учитывать все полосы, которые наблюдают в пробе очищенного полиморфа или псевдополиморфа, описанного в настоящем изобретении, поскольку даже одна полоса может быть характеристической для данной полиморфной или псевдополиморфной формы соединения 1. Скорее, идентификация, как правило, будет направлена на определение положения полосы и получение общей рентгенограммы, в частности, на выбор полос, специфических для различных полиморфных и псевдополиморфных форм. Как правило, индивидуальную полиморфную или псевдополиморфную форму соединения 1 характеризуют по отношению к 2, 3 или 4 наиболее интенсивным или 2, 3 или 4 наиболее воспроизводимым пикам на порошковой рентгенограмме и возможно по отношению к одному или двум другим физическим или аналитическим свойствам, таким как температура плавления, один или более температурных переходов, наблюдаемых при дифференциальном термическом анализе (ДТА) и/или дифференциальной сканирующей калориметрии (ДСК), один или более пиков поглощения, наблюдаемых в инфракрасных или рамановских спектрах, и/или данные по истинной скорости растворения

- 12 018974 (СР) в водной или другой системе растворителей. Стандартизованные способы получения данных порошковых рентгенограмм, ДТА, ДСК, СР и т.п. были описаны, например, в монографии и. 8. Рйагшасорое1а, уо1ише 23, 1995, Ипйеб 81а1ек Рйатшасоре1а1 СопуепИоп, 1пс., РоскуШс. ΜΌ, р. 2292-2296 и 23592765 (включенной в настоящий документ посредством ссылки).

Один способ идентифицикации известной полиморфной или псевдополиморфной формы в исследуемой твердой пробе, такой как твердый состав, содержащий известную полиморфную или псевдополиморфную форму, включает получение одной или более порошковых рентгенограмм из пробы (проб), содержащей известную полиморфную или псевдополиморфную форму, которые затем сравнивают с порошковыми рентгенограммами исследуемой твердой пробы с применением, например, способа эвристического кластерного анализа, описанного, например, в заявке на патент США № 2004/0103130 (включенной в настоящий документ посредством ссылки, в частности в параграфах 0067-0078 и параграфах 00860115 включительно). Эвристический кластерный анализ можно также применять для количественного анализа проб, содержащих смешанные кристаллические фазы (например, смесь двух или более полиморфных форм) или смешанные кристаллические и неупорядоченные фазы (например, смесь полиморфных и аморфных форм), как описано, например, в заявке на патент США № 2004/0103130 (включенной в настоящий документ посредством ссылки, в частности в параграфах 0116-0130 включительно).

Сравнение атомарных функций парного распределения (ФПР), полученных из порошковых рентгенограмм, также можно применять для идентификации известного полиморфа или псевдополиморфа в исследуемой твердой пробе, такой как твердый состав, содержащий известную полиморфную или псевдополиморфную форму. По определению, ФПР представляет собой синусоидальное преобразование Фурье экспериментально определенного уменьшенного структурного фактора, полученного из измеренной порошковой рентгенограммы, при этом ФПР получают, например, согласно процедуре, приведенной в публикации Ре1егкоп, е1 а1. 'Чтргосеб теакигек оГ циаШу Гог 1йе а1ош1с рай\\з8е бЫпЬиДоп Гипсбоп 1. Лс1а Сгуй. Уо1. 36, р. 53-64 (2003). ФПР представляет собой корреляционную функцию атомной плотности, которая описывает твердую форму на основе межатомных расстояний, которые определяют по положениям ФПР пиков, и количества атомов с определенным межатомным расстоянием, которое определяют по интенсивности пика. Таким образом, если две кристаллические формы содержат одну и ту же молекулу с одинаковой молекулярной упаковкой, их ФПР будут, по существу, одинаковы. Чтобы определить, являются ли две ФПР, полученные, например, для известной полиморфной формы или псевдополиморфной формы и твердого состава, в котором предполагают наличие этих кристаллических форм, по существу, идентичными, проводят сравнение их ФПР, например, способом, описанным в заявке на патент США № 2007/0243620 (включенной в настоящий документ посредством ссылки).

Если возможно получение способом порошковой рентгеновской дифракции высокого разрешения рентгенограммы (рентгенограмм), по существу, чистого полиморфа или псевдополиморфа, то для кристаллической формы можно определить параметры элементарной ячейки (описанные в разделе о рентгеновском анализе на монокристаллах) посредством метода индицирования, например, как в заявке на патент США № 2007/0270397 (включенной в настоящий документ посредством ссылки). Что касается псевдополиморфа, если возможно получение изоструктурной кристаллической формы (т.е. эталонной кристаллической формы), такой как изоструктурный дегидрат, который можно получить при дегидратации и/или десольватации псевдополиморфа, то сравнение объема элементарной ячейки изоструктурной кристаллической формы с объемом элементарной ячейки, рассчитанной на основе порошковой рентгенограммы (рентгенограмм) высокого разрешения, может позволить определить стехиометрию псевдополиморфа (т.е. количество молекул воды или растворителя на молекулу соединения 1). В таких случаях, параметры элементарной ячейки для эталонной изоструктурной кристаллической формы можно получить с помощью рентгеновского анализа на монокристаллах или индицирования данных порошковых рентгенограмм высокого разрешения для этой эталонной формы.

Порошковую рентгенограмму можно описать с помощью характеристических пиков, как обычно делают для проб только с одной порошковой рентгенограммой и ограниченным применением других средств, позволяющих оценить, дает ли проба хорошую аппроксимацию для частиц порошка, усредненных по величине. Характеристические пики выбирают из наблюдаемых пиков, при этом предпочтительно, если выделяют неперекрывающиеся пики при малых углах, с высокой интенсивностью.

Рентгеновский анализ на монокристаллах.

Рентгеновская кристаллография на монокристаллах идентифицирует самый малый элементарный объем, известный как элементарная ячейка, которая путем повторяемости в трех измерениях описывает кристаллическую форму. Размеры элементарной ячейки описывают по трем осям, а, Ь и с, и углам между ними α, β и γ. Отражение рентгеновских лучей от ряда плоскостей определяется ориентацией и межплоскостными расстояниями этих плоскостей, с использованием трех целых чисел й, к и 1, называемых индексами. Данный набор плоскостей с индексами 1т к, 1 разрезает ось а элементарной ячейки на й сегментов, ось Ь - на к сегментов и ось с - на 1 сегментов. Нулевое значение индекса означает, что плоскости параллельны соответствующей оси.

Полученные способом рентгеновской кристаллографии на монокристаллах параметры, которые характеризуют кристаллическую форму, обычно включают указание кристаллической системы, простран

- 13 018974 ственной группы, размеры элементарной ячейки, значение Ζ (количество молекул на элементарную ячейку) и объем элементарной ячейки. Как правило, для описания также применяют рассчитанную плотность и диапазоны индексов 11. к, 1. С помощью атомных координат, пространственной группы и параметров элементарной ячейки, определенных на основе данных анализа на монокристаллах, можно смоделировать порошковую рентгенограмму, которую затем можно сравнить с экспериментально полученной порошковой рентгенограммой для подтверждения правильности вывода о структуре элементарной ячейки.

Колебательная спектроскопия.

Диагностические методы, которые можно использовать для описания кристаллических форм соединения 1, таких как полиморфная или псевдополиморфная форма, включают методы колебательной спектроскопии, такие как ИК и рамановская спектроскопия, которые измеряют воздействие от энергии падающего потока на твердую пробу, обусловленное присутствием отдельных химических связей в молекулах пробы, которые колеблются в ответ на энергию падающего потока. Поскольку молекулы в различных полиморфных или псевдополиморфных формах испытывают различные межмолекулярные взаимодействия вследствие варьирования конформационных факторов или факторов влияния окружающей среды, происходит возбуждение указанных колебаний, что приводит к различиям в спектрах вследствие различий в частоте и интенсивности некоторых видов колебаний. Поскольку полиморфная и псевдополиморфная формы могут иметь отличные друг от друга ИК и рамановские характеристики, ИК и рамановский спектры обеспечивают дополнительную информацию и могут также предоставить отпечаток для идентификации конкретного полиморфа [см., Аийейоп, С. Еигореап РЬагшасеийса1 Кеу1ете, 9:6874 (2004)].

Рамановская спектроскопия позволяет установить идентичность и/или количество полиморфа или псевдополиморфа в сложной матрице, распознать аморфные и кристаллические формы или отличить сложные полиморфные формы от псевдополиморфных форм соединения 1 [например, см., РгайМа, Ό., е1 а1. Оиап111а11уе апаЬ+к о! ро1ушогрЫс пихШгек о! гашййше ЬуйгосЫопйе Ьу Кашап кресйоксору апй ргшара1 сотропепй апаЬ+к Еиг. 1. РЬагш. ВюрЬагш. 54(3), 337-341 (2002)]. Для идентификации полиморфной или псевдополиморфной формы в твердом составе, таком как таблетка, порошковые пробы указанных чистых кристаллических форм соединения 1 и наполнителей осторожно уплотняют и сканируют способом рамановской микроскопии для создания библиотеки спектров компонентов, входящих в указанные составы. Затем используют модель частных наименьших квадратов (ЧНК) и многовариантную классификацию для анализа отображенных данных рамановской спектроскопии, полученных при исследовании поделенных на части таблеток с низким содержанием активного фармацевтического ингредиента (примерно 0,5 мас.%). Многовариантная классификация позволяет осуществить соотнесение полиморфов к конкретным микроскопическим элементам соединения 1, идентифицированного согласно этим данным. С помощью результатов исследований отдельных серий таблеток, каждая из которых содержит определенную кристаллическую форму, можно осуществить распознавание отдельных форм при их содержании примерно 0,5 мас.%. Для таблеток, содержащих смесь кристаллических форм, возможно распознавание примерно 10% полиморфной или псевдополиморфной примеси соединения 1 (что представляет абсолютный предел обнаружения в примерно 0,05 мас.%).

Для установления идентичности полиморфа или псевдополиморфа или их количественного определения в кристаллической форме соединения 1 в сложной матрице, такой как твердый состав, с помощью вышеуказанных методов колебательной спектроскопии, иногда применяют метод нарушенного полного внутреннего отражения (НПВО) [для примера см. 8а1аг1, Н., е1 а1. ЛррЬсайоп о! а11епна1ей 1о1а1 геПес1апсе ЕТ1К кресйоксору 1о 1Ье апа1у818 о! пихШгек о! рЬагшасеийса1 ро1ушогрЬк. 1п1егпайопа1 1оигпа1 о! РЬагшасенОск. 163(1): 157-166 (1998)].

Еще один способ идентификации или количественного определения кристаллической формы представляет собой ИК-спектроскопия диффузного отражения с Фурье-преобразованием (ИКСДОФП) [для примера см. Таи118йшуаки1, V., е1 а1. Ике о! ИК1ЕТ8 апй РЬ8 !ог Не ОеЮпшпаОоп о! Ро1ушогрЬк о! Рпохюаш а1опе апй ш сошЬшайоп \νί(1ι рЬагшасеийса1 ехс1р1еп18: А ТесЬшса1 №1е. ЛЛР8 РЬагшЗаТесЬ. 9(1) 95-99 (2008)]. Хорошо известно, что размер частиц является ключевой переменной при измерениях диффузного отражения, поскольку большие частицы вызовут рассеивание энергии, что приведет к сдвигу основной линии спектра и расширению полос в ИК-спектре. Чтобы провести исследование методом ИКСДОФП, подготавливают пробу, содержащую твердое соединение 1, измельчая или пропуская ее через сито, для получения частиц одного размера, при этом пропускание через сито является предпочтительным, поскольку следует избегать возможности перехода метастабильной полиморфной или псевдополиморфной формы в другую кристаллическую форму.

В еще одном методе можно также применять спектроскопию в ближней инфракрасной области (БИК) для идентификации или количественного анализа кристаллической формы, такой как полиморфная или псевдополиморфная формы (например, гидрат) соединения 1, в смеси твердых форм или идентификации полиморфной или псевдополиморфной формы в твердом составе, таком как таблетка, содержащая полиморфную или псевдополиморфную форму соединения 1.

- 14 018974

Пространственное перекрывание полос на ИК или рамановских спектрах, полученных для различных кристаллических форм соединения 1, исследуемого различными способами колебательной спектроскопии, описанными в настоящем изобретении, иногда может происходить таким образом, что количественное определение требует применения методов деконволюции для извлечения информации о каждом индивидуальном компоненте. Такие методы деконволюции включают регрессию методом частных наименьших квадратов, анализ главных компонентов или другие методики [для примеров см. Кеюб, С. №аг-1пГгагеб 5рес1го5сору апб 1шадтд: Вабс рг1пс1р1е8 апб рбагшасеибса1 аррбсабопк. Ά6ν. Эгид Эейу. Неу. 57:1109-43 (2005)].

Ядерно-магнитный резонанс в твердом теле (ЯМР-ТТ).

Диагностические методы, которые можно применять для исследования полиморфов соединения 1, включают методы ЯМР в твердом теле [для примеров, см. ТЫипаск. Р.А., е1 а1. 8ойб-81а1е Мис1еаг Мадпебс Некопапсе 8рес1гоксору: Рбагшасеибса1 Аррбсабопз. 1. Рбагш. 8сг 92(3): 441-474 (2003)]. Эти методы имеют то преимущество, что они являются неразрушающими и неинвазивными. Спектроскопия ЯМР-ТТ в некоторых случаях подходит для исследования лекарственных составов, таких как составы, содержащие соединение 1, поскольку ЯМР сигналы для большинства фармацевтических наполнителей находятся в узком диапазоне ЯМР спектра. Таким образом, обычно легко отличить ЯМР сигналы наполнителей от сигналов соединения 1. Для устранения из спектра мешающего пика от присутствующего наполнителя можно даже применять спектральное вычитание.

Применимость ЯМР-ТТ для характеризации конкретной полиморфной или псевдополиморфной формы соединения 1 обусловлена различными количествами кристаллографически неэквивалентных участков в элементарных ячейках указанных кристаллических форм, и ее чувствительностью к изменениям локального химического окружения, в котором незначительные изменения длин связей, углов связей, взаимодействий с соседними молекулами или, в случае псевдополиморфов, различных уровней гидратации или сольватации, может воздействовать на ЯМР-ТТ сигналы относительно спектра раствора.

Для аморфных веществ ЯМР-ТТ спектроскопию можно применять для исследования степени разупорядочения, поскольку различные способы обработки (например, лиофилизация, распылительная сушка, быстрое охлаждение расплава, криоизмельчение) могут изменять общую степень разупорядочения в пробе или приводить к изменению полиморфной формы. Что касается менее стабильной (т.е. метастабильной) полиморфной или псевдополиморфной формы соединения 1, относительная нестабильность такой кристаллической формы может быть вызвана общей большей молекулярной подвижностью соединения 1 в твердой пробе.

Иногда, одинаковая полиморфная или псевдополиморфная форма соединения, полученная из разных партий, может проявлять различные физико-химические свойства, такие как стабильность и скорость растворения, что может быть связано со степенью кристалличности в пробе. Присутствие в твердой пробе дефектных участков или областей с меньшей степенью кристалличности, вызывающее потерю кристалличности до такой стемени, что ее иногда невозможно наблюдать с помощью порошковой рентгеновской дифракции. Это часто не относится к ЯМР-ТТ спектроскопии, поскольку указанные участки или области обеспечивают еще одну возможность для процесса релаксации спиновых состояний в твердой пробе.

ЯМР-ТТ спектроскопию можно также применять для анализа твердых составов, содержащих соединение 1, и, таким образом, она может быть полезной для обнаружения различных твердых форм соединения 1 в присутствии наполнителей. Что касается обнаружения аморфного соединения 1, предел обнаружения способом ЯМР-ТТ спектроскопии иногда составляет примерно 10-20%, в зависимости от относительного местоположения пиков аморфных и кристаллических форм в спектре, поскольку пики аморфных форм, как правило, очень широкие. Примерно такой же предел обнаружения имеет порошковая рентгеновская дифракция.

ЯМР-ТТ спектроскопия подходит для исследования лекарственных составов, поскольку ЯМР сигналы для большинства фармацевтических наполнителей происходят в узком диапазоне ЯМР спектра. Таким образом, как правило, появляется возможность отличить ЯМР сигналы соединения 1 от сигналов наполнителей в составе, содержащем конкретную полиморфную или псевдополиморфную форму соединения 1. Если в спектре имеются мешающие пики наполнителя, для устранения или уменьшения такой интерференции можно также применять спектральное вычитание.

Для идентификации конкретной кристаллической формы соединения 1 в составе ЯМР-ТТ спектроскопия иногда является более совершенным способом по сравнению с порошковой рентгеновской дифракцией, поскольку можно обнаружить ЯМР пики, относящиеся к соединению 1, которые не перекрываются пиками от наполнителей, содержащихся в составе. Это невозможно в случае применения порошковой рентгеновской дифракции, так как множество дифракционных линий может накладываться друг на друга, соответственно, ограничивая обнаружение небольших количеств полиморфной или псевдополиморфной формы соединения 1. В отсутствие интерференции дифракционных линий, предел обнаружения способом порошковой рентгеновской дифракции для полиморфа или псевдополиморфа соединения 1 может составлять примерно 10% и иногда примерно 5%, тогда как пределы обнаружения при применении ЯМР-ТТ спектроскопии могут достигать примерно 0,5%. Кроме того, поскольку ЯМР спектро

- 15 018974 скопия по своей сути является количественным методом (т.е. интенсивность сигнала связана с количеством местоположений ядер при данной конкретной резонансной частоте), ЯМР-ТТ спектроскопия позволяет определить вклад кристаллических форм соединения 1, или кристаллического и аморфного соединения 1, в смесь указанных форм.

Методы термического анализа.

Диагностические методы, которые можно использовать для описания полиморфов соединения 1, включают дифференциальный термический анализ (ДТА), дифференциальную сканирующую калориметрию (ДСК), термогравиметрический анализ (ТГА) и измерения температуры плавления.

С помощью ДТА и ДСК измеряют температуры термических переходов, при которых кристаллическая форма поглощает или высвобождает тепло, когда ее кристаллическая структура изменяется или она плавится. ТГА применяют для измерения термической стабильности и относительного количества летучих компонентов в пробе путем контроля изменения массы при нагревании пробы. Если применяют инфракрасную спектроскопию для исследования летучих компонентов, выделяющихся в виде газа во время ТГА анализа псевдополиморфа (ТГА-ИК), то можно установить молекулярный состав полиморфа. Соответственно, эти методы являются полезными для исследования твердых форм, существующих в виде сольватов и/или гидратов.

ДТА включает нагревание исследуемой пробы твердой формы соединения 1 и инертного эталона при одинаковых условиях, при этом регистрируется любая разница температур между пробой и эталоном. Эту разность температур наносят на график относительно температуры, и, таким образом, можно определить изменения в исследуемой пробе относительно инертной пробы, которые приводят к поглощению или выделению тепла.

С помощью ДСК измеряют энергию, необходимую для установления почти нулевой разницы температур между пробой и инертным эталоном, когда эти пробы подвергают одинаковым режимам нагревания. Необходимая для этого энергия представляет собой величину изменения энтальпии или теплоёмкости в пробе относительно эталона.

Температуры термического перехода обычно находятся в пределах примерно 2°С при последовательных анализах с применением скорости сканирования температуры 10°С/мин и находятся в пределах примерно 1 ° в зависимости от применяемой скорости сканирования температуры (при более медленных скоростях сканирования, таких как 5 или 1°С/мин, обеспечивается большая точность). Когда заявляют, что соединение имеет переход при данном значении, установленном с помощью метода ДТА, это означает, что этот переход будет находиться в диапазоне установленного значения ±2°С. Различные кристаллические формы, в том числе полиморфные или псевдополиморфные формы, можно идентифицировать, по меньшей мере, частично, основываясь на различных профилях их температур перехода по их ДТА термограммам.

Термический анализ обычно проводят при скорости сканирования температуры 10°С/мин. Если предполагают наложение температурных переходов, можно применять более низкие скорости сканирования, такие как 5 или 1°С/мин. Таким образом, можно распознать предполагаемый переход, обусловленный превращением одной полиморфной формы в другую, более стабильную полиморфную форму, до полного расплавления пробы, применяя более медленные скорости сканирования. Во время термического анализа переход кинетически образованного полиморфа в термодинамически более стабильный полиморф до полного расплавления можно избежать, применяя более высокую скорость сканирования, которая не оставляет времени для осуществления такого перехода.

Сбор данных для способов исследования и идентификации.

Данные, представленные на фигурах, в таблицах и примерах были получены с применением нижеследующих способов и приборов.

Рентгеновская порошковая дифракция.

Порошковые рентгенограммы были получены с применением дифрактометра РА№11уПса1 Х'РсП Рго. Падающий луч излучения СиКа получали с помощью длинного источника с тонкой фокусировкой Θρΐίχ. Эллиптическое градуированное многослойное зеркало применяли для фокусировки рентгеновских лучей СиКа, проходящих из источника через образец в детектор. Данные получали и анализировали, применяя программное обеспечение для системы сбора данных Х'РсП Рго (ν. 2.2Ь). Перед анализом образец кремния (ΝΊ8Τ 8КМ 640с) анализировали для подтверждения положения пика δί 111. Образец помещали между пленками толщиной в 3 мкм, анализировали в геометрии пропускания и вращали для оптимизации статистических данных по ориентации. Для минимизирования фона, возникающего при рассеянии в воздухе, применяли разделительную диафрагму и атмосферу гелия. Чтобы минимизировать отклонения от оси, для падающих и отраженных лучей применяли щели Соллера. Рентгенограммы получали, используя сканирующий позиционно-чувствительный детектор (Х'Сс1сгаЮг). расположенный на расстоянии 240 мм от образца.

Порошковые рентгенограммы получали, используя дифрактометр !пс1 ХКС-3000, оборудованный изогнутым позиционно-чувствительным детектором с диапазоном 2Θ 120°. Для получения данных в реальном времени при разрешении 0,03° 2Θ применяли падающий луч излучения СиКа (40 кВ, 30 мА). Пе

- 16 018974 ред анализом образцов анализировали стандарт кремния (ΝΙδΤ δΚΜ 640с) для подтверждения положения пика 8ί 111. Пробы подготавливали для анализа, помещая их в тонкостенные стеклянные капилляры. Каждый капилляр устанавливали в гониометрическую головку и вращали в процессе сбора данных. Щель монохроматора устанавливали на уровне 5 мм на 160 мкм, и пробы анализировали в течение 5 мин.

Порошковые рентгенограммы также получали на рентгеновском порошковом дифрактометре 81ιίιη;·ιάζι.ι νΚΌ-6000 с излучением СиКа. Твердые пробы подготавливали для анализа, помещая их в алюминиевый держатель с кремниевым вкладышем. Прибор был оборудован длинной рентгеновской трубкой с тонкой фокусировкой. Напряжение и силу тока в трубке устанавливали 40 кВ и 40 мА соответственно. Диафрагму расхождения и рассеивающую диафрагму устанавливали при угле 1° и приемную диафрагму устанавливали на расстоянии 0,15 мм. Перед анализом образца анализировали стандарт кремния (ΝΙ8Τ δΚΜ 640с) для подтверждения положения пиков δί 111. Дифракционное излучение обнаруживали с помощью сцинтилляционного детектора на основе йодида натрия. Применяли θ-θ непрерывное сканирование при 3°/мин (0,4 с/0,02° шаг) от 2.5 до 40° 2θ.

К рентгенограммам, представленным в настоящем документе, приложены обозначения пиков и таблицы с перечнями пиков. В большинстве случаев данные зарегистрированных пиков находятся в диапазоне примерно до 30° 2θ. Как описывалось ранее, данные будут зависеть от типа прибора, и измерения независимо подготовленных проб, выполненные третьими лицами на других приборах, могут привести к вариабельности, которая составляет более чем ±0,1° 2θ. Кроме того, по техническим причинам применяли различные алгоритмы для округления, чтобы округлить каждый пик до ближайшего 0,1 или 0,01° 2θ, в зависимости от прибора, применяемого для получения данных, и/или собственного разрешения пика.

Местоположение зарегистрированных пиков вдоль оси X (градус 2θ) на фигурах и в таблицах определяли автоматически, используя программное обеспечение ΡΑΤΤΕΚΝΜΑΤΟΗ™ 2.4.0 и округляя до одной или двух значащих цифр после запятой, основываясь на вышеуказанных критериях. Вариабельность положений пиков приводили в пределах ±0,1° 2θ, основываясь на рекомендациях, изложенных в комментариях Фармакопеи США по вариабельности результатов порошковой рентгеновской дифракции, приведенных в Фармакопее США, 31 издание, Национальный Формуляр 26, том 1, с. 374. Что касается перечней б-расстояний, длина волны, применяемая для расчета б-расстояний, составляла 1.541874 А, средневзвешенные длины волн Си-Ка! и Си-К02 |Р11у5. Кеу. А56(6) 4554-4568 (1997)]. Вариабельность, связанную с оценками б-расстояний, рассчитывали на основе рекомендаций к Фармакопее США для каждого б-расстояния и привели в соответствующих таблицах данных.

Дифференциальная сканирующая калориметрия (ДСК).

Анализ способом ДСК выполняли с применением дифференциального сканирующего калориметра ТА 1п8битеп18 02000. Температурную калибровку осуществляли с применением пригодного для контроля металла индий, полученного в Национальном институте стандартов и технологий США. Пробу помещали в алюминиевую чашку для ДСК и точно регистрировали массу. Чашку покрывали крышкой с микроотверстиями, сделанными лазером, и закручивали крышку. Взвешенную закрытую алюминиевую чашку помещали на контрольную поверхность ячейки. Ячейку для образца приводили в равновесие при 25°С и нагревали, продувая азотом со скоростью 10°С/мин, до конечной температуры 250°С. При переходе регистрируемые температуры имеют максимальные значения.

Дифференциальный термический анализ (ДТА).

ДТА и ТГА проводили одновременно, применяя прибор 8е1ко 88С 5200 ΤΟ/ΏΤΑ. Температурную калибровку осуществляли с применением пригодного для контроля металла индий, полученного в Национальном институте стандартов и технологий США. Пробу помещали в алюминиевую чашку, неплотно покрывали крышкой и точно регистрировали массу. Ячейку для образца приводили в равновесие при 25°С и затем нагревали, продувая азотом со скоростью 10°С/мин до конечной температуры 250°С. При переходе регистрируемые температуры имеют максимальные значения.

Термогравиметрический анализ (ТГА).

ТГА выполняли с применением ИК-термогравиметрического анализатора ТА 1п51гитеп15 05000. Температурную калибровку выполняли с применением никеля и АЬиМЕЬ™. Каждую пробу помещали в алюминиевую или платиновую чашку. Чашку герметически закупоривали крышкой, которую открывали, применяя механизм перфорации непосредственно перед тем, как поместить в ТГ печь. Печь нагревали в атмосфере азота со скоростью 10°С/мин до конечной температуры 350°С.

Рамановская спектроскопия с Фурье-преобразованием.

Рамановские спектры получали на вспомогательном модуле №хи§ 670 ΕΤ-Катап, присоединенном к спектрофотометру №хи§ 670 ΕΤ-ΙΚ (Τίκηηο ΝίοοΚΐ), оборудованном детектором на основе арсенида индия и галлия ДиОаАк). Проверку длин волн осуществляли, применяя серу и циклогексан. Каждую пробу подготавливали для анализа, помещая ее в стеклянную пробирку и фиксируя пробирку в покрытый золотом штатив для пробирок. Для облучения пробы применяли мощность излучения приблизительно 0,5 Вт лазера Ν6:Υνθ₄ (длина волны возбуждения 1064 нм). Каждый спектр представляет собой 256 объединенных сканограмм, полученных при спектральном разрешении 4 см^-1.

- 17 018974

Анализ Карла Фишера.

Кулонометрический анализ методом Карла Фишера (КФ) для определения содержания воды был выполнен с применения прибора для титрования МсШсг То1ебо ОБ39 КЕ. Контрольное титрование выполняли перед анализом. Пробу подготавливали в атмосфере сухого азота и растворяли приблизительно в 1 мл сухого ΗΥΏΚΑΝΑΣ - СОИЬОМАТ АО™ в предварительно высушенном флаконе. Весь раствор помещали в кулонометр КЕ через мембрану и перемешивали в течение 10 с. Затем пробы титровали с применением рабочего электрода, который продуцирует йод путем электрохимического окисления: 2Е¹ Е+2е^-. Для обеспечения воспроизводимости образцы были проанализированы в двух повторностях.

Составы.

Составы, содержащие соединение 1 в качестве активного фармацевтического ингредиента, будут иметь значительное процентное содержание соединения 1 в одной или более из его твердых форм, как правило, в одной или двух твердых формах. Типичные составы содержат по меньшей мере примерно 60% или, как правило, по меньшей мере примерно 90% соединения 1 в одной твердой форме. Составы, как правило, содержат одну или более определенных твердых форм соединения 1, и, по существу, не содержат другие твердые формы, и содержат один или более, как правило, 1, 2, 3 или 4 наполнителей или носителей. Другие составы могут содержать соединение 1 в одной или более твердых формах, как правило, одной или двух. Другие составы, в целом, представляют собой твердые вещества, осадки, гели, суспензии и коллоидные растворы, которые содержат одну или более твердых форм соединения 1, таких как аморфная форма соединения 1, кристаллическая форма I или кристаллическая форма III соединения 1 или их смесь. Предпочтительные пероральные стандартные дозы для введения человеку будут содержать примерно 2, 5, 10, 15, 20 или 40 мг твердой формы соединения 1 на стандартную дозу.

Хотя возможно введение субъекту соединения 1 в его твердом состоянии в виде чистого соединения, оно обычно присутствует в виде твердого состава, по существу, не содержащего жидкости или, менее часто, в виде твердой суспензии. Составы обычно применяют для приготовления стандартных доз, например, таблеток, капсул или пастилок для перорального, буккального или подъязычного введения, которые обычно содержат примерно 0,1-500 мг, обычно примерно 0,5-100 мг или примерно 1-100 мг (в частности, примерно 0,1, примерно 0,25, примерно 0,5, примерно 1, примерно 5, примерно 10, примерно 20, примерно 100 мг) состава, содержащего твердую форму соединения 1, такую как аморфное соединение 1, кристаллическая форма I или кристаллическая форма III соединения 1. Альтернативно, варианты реализации изобретения включают продукт для парентерального (например, подкожного, субдермального, внутривенного, внутримышечного, внутрибрюшинного или аэрозольного) введения, получаемый путем приведения в контакт твердой формы соединения 1, такой как аморфное соединение 1, кристаллическая форма I или кристаллическая форма III соединения 1, с жидким наполнителем, например, любым одним, двумя, тремя или более наполнителями, выбранными из ПЭГ 100, ПЭГ 200, ПЭГ 300, ПЭГ 400, пропиленгликоля, бензилбензоата, бензилового спирта или этанола, и возможно путем стерилизации раствора и возможно путем дозирования раствора во флаконы или ампулы (как правило, из желтого стекла), которые могут предназначаться для однократного или многократного использования и возможно хранения состава при пониженной температуре (примерно 0-12 или примерно 2-10°С). Такие продукты для парентерального введения обычно содержат соединение 1 с концентрацией примерно 0,1-100 мг/мл, как правило, примерно 1-100 или примерно 10-100 мг/мл, и возможно содержат одну или более соль, буферное вещество или бактериостатическое вещество или консервант (например, №С1, бутилоксианизол, бутилокситолуол или ЭДТА). Иногда поверхностно-активное вещество применяют для воздействия на суспензию или вводят в пероральную твердую лекарственную форму для облегчения растворения твердой формы соединения 1 в желудочном тракте. В целом, составы для перорального введения являются предпочтительными для терапевтического лечения человека.

Поверхностно-активные вещества, применяемые в суспензии или твердой форме соединения 1 в жидком наполнителе (наполнителях), включают неионные, катионные и анионные поверхностноактивные вещества. Примеры предпочтительных поверхностно-активных веществ включают, без ограничении, лаурилсульфат натрия, додецилсульфат натрия, полисорбат 40 и полисорбат 80.

Согласно одному варианту реализации изобретения лаурилсульфат натрия применяют в качестве поверхностно-активного вещества в стандартной лекарственной форме, такой как таблетка или капсула, для перорального введения при лечении состояния, описанного в настоящем изобретении, при этом состав содержит кристаллическую форму I или кристаллическую форму III соединения 1, по существу, не содержащей другие твердые формы соединения 1, и поверхностно-активное вещество, возможно содержащий один или более дополнительных наполнителей, обычно 1, 2 или 3 дополнительных наполнителя.

Примеры других наполнителей, применяемых при получении составов, содержащих твердую форму соединения 1 (например, кристаллическую форму I или кристаллическую форму III), с целью иллюстрации, а не ограничения, приведены в №та, 8., с1 а1. РОА I. РЕагт. 8ск ТесЕ. 1997, 51:166-171; 81пск1е\. К.6. РЕагт. Кек. 2004, 21:201-230; Роте11, М.Е., е1 а1. РОА I. РЕагт. 8с1. ТесЕ. 1998, 52:238-311; Акегк, М.1. ίη Огид ОеЕуегу: Рагеи!ега1 Кои1е Еисус1ореб1а оГ РЕагтасеиЕса1 ТесЕио1оду, ИчГогта НеаЕЕ

- 18 018974 саге, И8Л, 2007, р. 1266-1278.

Тонкое измельчение.

Для повышения скорости растворения кристаллической формы соединения 1 в составе, содержащем по меньшей мере одну кристаллическую форму соединения 1 и один или более фармацевтически приемлемых наполнителей в твердой лекарственной форме, или воздействия на суспендируемость в суспензии для перорального или парентерального введения кристаллической формы соединения 1 и жидкого наполнителя (наполнителей), кристаллическую форму можно измельчить до средневзвешенного объемного размера частиц (Όν, 50) или среднего диаметра примерно 0,01-200 мкм, или примерно 0,1-100 мкм, или примерно 3-50 мкм. Таким образом, средневзвешенный объемный размер частиц (Όν, 50) или средний диаметр для измельченного кристаллического соединения 1 может быть относительно малым, в частности, примерно 0,03-2,0 мкм, или примерно 0,1-1,0 мкм, или немного больше, в частности, примерно 3-100 мкм, примерно 5-75 мкм или примерно 10-30 мкм. Измельченное кристаллическое соединение 1 подходит для получения твердых и суспензионных составов, предназначенных для перорального или парентерального введения субъекту. Средневзвешенный объемный размер частиц или средний диаметр включают диапазон от примерно 0,01 до примерно 500 мкм при 0,05 мкм или при 0,1 мкм, например, средневзвешенный объемный размер частиц или средний диаметр в примерно 0,05, примерно 0,1, примерно 0,5, примерно 1,0, примерно 1,5, примерно 2,0, примерно 2,5, примерно 3,0, примерно 3,5, примерно 4,0, примерно 4,5, примерно 5,0, примерно 5,5, примерно 6, примерно 7, примерно 8, примерно 9, примерно 10, примерно 15, примерно 20, примерно 25, примерно 30, примерно 35, примерно 40, примерно 50, примерно 60, примерно 75, примерно 85, примерно 100, примерно 120 и т.п. Предпочтительно, если средневзвешенный объемный размер частиц (Όν, 50) или средний диаметр составляют примерно 5, примерно 10, примерно 15 или примерно 20 мкм. Как правило, размер частиц (Όν, 90) составляет примерно 5 мкм, примерно 10, примерно 15, примерно 20, примерно 25 или примерно 30 мкм. Предпочтительный размер частиц имеет (Όν, 90) < 10 мкм или примерно (Όν, 90) < 6.8 мкм.

В настоящем описании ссылка на средневзвешенный объемный размер частиц или средний диаметр означает, что вещество, например, кристаллическое соединение 1, наполнитель (наполнители) или композицию, содержащую оба вещества, перемалывают, измельчают, просеивают или иным образом обрабатывают для получения частиц определенного размера. Следует иметь в виду, что некоторые частицы могут быть больше или меньше (т.е. будет существовать распределение частиц по размерам), но композиция или кристаллическая форма соединения 1 (например, кристаллическая форма I или кристаллическая форма III) будут содержать значительную долю вещества с заданным размером частиц или в пределах допустимого диапазона заданного размера частиц. Способы тонкого измельчения включают измельчение с применением шаровых мельниц, штифтовых мельниц, струйных мельниц (например, струйных мельниц на гидроэнергии) и дробление, просеивание и осаждение соединения (соединений) из раствора, см., например, патенты США № 4919341, 5202129, 5271944, 5424077 и 5455049, которые специально включены в настоящий документ посредством ссылки. Размер частиц определяют, например, способами просвечивающей электронной микроскопии, сканирующей электронной микроскопии, световой микроскопии, рентгеновской дифрактометрии и методами рассеивания света или посредством анализа с применением счетчика СоиИег (см., например, С11агас1епха1юп о£ Ви1к 8о11бк. Ό. МсСкпсНеу, Еб., В1аск«е11 РиЬНкЫпд, 2005).

Таким образом, кристаллическое соединение 1 может содержать или, по существу, состоять из порошка, частицы которого имеют один, два или более из указанных средневзвешенных объемных размеров или средних диаметров, при этом порошок можно привести в контакт с твердым наполнителем (наполнителями), который может представлять собой смесь, и возможно спрессовать или придать требуемую форму. Альтернативно, кристаллическое соединение 1, полученное в форме порошка, описанного выше, приводят в контакт с жидким наполнителем (наполнителями) для приготовления жидкого состава или жидкой композиции, которую включают в твердый состав или суспензию. Таким образом, подходящие тонкоизмельченные составы включают водные или масляные суспензии кристаллического соединения 1.

Г иперпролиферативные состояния.

Гиперпролиферативные состояния, которые можно лечить с помощью кристаллического соединения 1, например с помощью кристаллической формы в виде дегидрата, такой как форма III, или аморфного соединения 1, включают раки, предраковые состояния и другие гиперпролиферативные состояния, включающие карциномы, саркомы, аденомы, дисплазии, бластомы, папилломы, невус, предраковые опухоли, доброкачественные опухоли или злокачественные опухоли, в том числе солидные опухоли и распространённые опухоли, такие как опухоли, связанные или возникающие в клетках или тканях предстательной железы, легкого, молочной железы, яичника, кожи, желудка, кишечника, поджелудочной железы, шеи, гортани, пищевода, горла, языка, губы, ротовой полости, слизистой оболочки полости рта, слюнной железы, мужских половых желез, печени, околоушной железы, желчных протоков, толстой кишки, прямой кишки, шейки матки, матки, влагалища, почечной лоханки, эндометрия, почки, мочевого пузыря, центральной нервной системы, глиальной клетки, астроцита, сквамозной клетки, крови, костного мозга, мышцы или щитовидной железы.

- 19 018974

Один класс доброкачественных опухолей включает функциональные опухоли, называемые таким образом, поскольку они оказывают функциональные эффекты на пораженную ткань. Например, функциональные опухоли эндокринной ткани, называемые аденомами, приводят к продуцированию некоторых гормонов сверх нормальных уровней.

Еще один класс доброкачественных опухолей, которые можно лечить с помощью кристаллического соединения 1, например с помощью кристаллической формы в виде дегидрата, такой как форма III, или аморфного соединения 1, включают папилломы, которые относятся к доброкачественным эпителиальным опухолям, развивающимся экзофитно (выступающим снаружи) в пальцевидных наростах, и невус. Папилломы включают папиллому гортани, папиллому хороидального сплетения, кожную папиллому, чешуйчато-клеточную папиллому и переходно-клеточную папиллому (также известную как папиллома мочевого пузыря).

Другие доброкачественные опухоли, которые можно лечить с помощью кристаллического соединения 1, например кристаллической формы в виде дегидрата, такой как форма III, или аморфного соединения 1, представляют собой цистаденому (или цистому), которая является разновидностью цистаденомы, образующейся из железистой ткани, в которой секреты удерживаются и аккумулируются в кистах, и включают муцинозную цистаденому (образованную эпителиальными клетками яичников), сосочковую цистаденому (любая опухоль, которая создает структуру, являющуюся одновременно папиллярной и кистозной), серозную цистаденому и текомы, представляющие собой доброкачественные неоплазмы яичников, которые, как правило, вырабатывают эстроген.

Незлокачественные гиперпролиферативные состояния кожи, которые можно лечить с помощью кристаллического соединения 1, например с помощью кристаллической формы в виде дегидрата, такой как форма III, или аморфного соединения 1, включают себорейный кератоз, токсическую экзему, аллергическую экзему, атопический дерматит, ихтиоз и псориаз.

Доброкачественная гиперплазия предстательной железы (ДГПЖ), артериовенозный порок развития, гетеротопический остеогенез, гиперплазия молочной железы, фокальная эпителиальная гиперплазия, гиперплазия сальных желёз и врождённая гиперплазия надпочечников являются примерами гиперпролиферативных повторяющихся состояний, относящихся к гиперплазиям, которые можно лечить с помощью кристаллического соединения 1, например с помощью полиморфной формы в виде дегидрата, такой как форма III, или аморфного соединения 1. Такие способы лечения являются предпочтительными в случае ДГПЖ.

Способы лечения ДГПЖ включают применение кристаллического соединения 1, например кристаллической формы в виде дегидрата, такой как форма III, или аморфного соединения 1, в том числе антагонистов α! -адренергического рецептора, такие как доксазозин, теразозин, альфузозин, тамсулозин, и ингибиторы 5а-редуктазы, такие как финастерид и дутастерид.

Предраковые состояния или опухоли, которые можно лечить с помощью кристаллического соединения 1, например кристаллической формы в виде дегидрата, такой как форма III, или с помощью аморфного соединения 1, включают полипы толстой кишки, старческий кератоз, плоскоклеточную метаплазию, лейкоплакию, эритроплазию, синдром Барретта, гиперплазию эндометрия, дисплазию шейки матки, истинную полицитемию и карциному ίη зйи (КИС). Такие способы лечения являются предпочтительными в случае гиперплазии эндометрия и дисплазии шейки матки.

Интерстициальную неоплазию предстательной железы (ИНПЖ) можно лечить с помощью кристаллического соединения 1, например с помощью кристаллической формы в виде дегидрата, такой как форма III, или с помощью аморфного соединения 1. ИНПЖ можно классифицировать как неоплазию высокой степени злокачественности, неоплазию средней степени злокачественности и неоплазию низкой степени злокачественности.

Дисплазия (или гетероплазия), которую можно лечить с помощью кристаллического соединения 1, например с помощью кристаллической формы в виде дегидрата, такой как форма III, или с помощью аморфного соединения 1, относится к аномальности при созревании клеток в ткани и включает миелодиспластические синдромы или дисплазию кроветворных клеток.

Злокачественные опухоли (раки) обладают свойствами, которые приводят к инвазии и разрушению соседней ткани и распространению (метастазированию) в другие части тела. Раки классифицируют по типу клетки, которая имеет сходство с опухолью и, следовательно, как предполагают, эта ткань является источником опухоли. Одна общая группа рака, который можно лечить с помощью кристаллического соединения 1, например с помощью кристаллической формы в виде дегидрата, такой как форма III, или с помощью аморфного соединения 1, включает карциномы, включающие распространенные формы рака молочной железы, предстательной железы, легкого и толстой кишки, а также базально-клеточную эпителиому, злокачественную меланому, плоскоклеточный рак, которые представляют собой злокачественную опухоль плоского эпителия, и также встречаются на некоторых участках тела, в том числе на губах, полости рта, пищеводе, мочевом пузыре, предстательной железе, легких, влагалище и шейке матки. Такие способы лечения являются предпочтительными в случае карциномы предстательной железы и молочной железы. Такие способы лечения также являются предпочтительными в случае карциномы легкого и шей

- 20 018974 ки матки.

Аденокарциномы, которые можно лечить с помощью кристаллического соединения 1, например с помощью кристаллической формы в виде дегидрата, такой как форма III, или с помощью аморфного соединения 1, представляют собой группу карцином и имеют железистое происхождение (см. выше). Чтобы классифицировать клетки как аденокарциному, клетки необязательно должны быть частью железы при условии, что они имеют секреторные свойства. Иногда аденокарциномы развиваются в клетках, выстилающих внутренние органы, которые имеют свойства подобно железам (способность к секреции), и, таким образом, могут возникать в различных тканях, в том числе в тканях молочной железы, толстой кишки, легкого, предстательной железы, поджелудочной железы, желудка, шейки матки и влагалища.

Карциномы, которые можно лечить с помощью кристаллического соединения 1, например с помощью кристаллической формы в виде дегидрата, такой как форма III, или с помощью аморфного соединения 1, включают почечно-клеточный рак, карциному эндометрия и гепатоцеллюлярный рак (ГЦР), также называемый гепатомой. Такие способы лечения являются предпочтительными в случае ГЦР и карциномы эндометрия.

Еще одна группа злокачественных опухолей, которую также можно лечить с помощью кристаллического соединения 1, например с помощью кристаллической формы в виде дегидрата, такой как форма III, или с помощью аморфного соединения 1, включает нейроэндокринные опухоли, включающие инсулиному и глюкагоному.

Другая группа злокачественных опухолей, которые можно лечить с помощью кристаллического соединения 1, например с помощью кристаллической формы в виде дегидрата, такой как форма III, или с помощью аморфного соединения 1, представляет собой саркомы, в том числе лимфомы, лейкемии, герминогенные опухоли и бластомы, такие как глиобластома и медуллобластома, гепатобластома, аденомиосаркома, нейробластома, остеобластома и ретинобластома. Такие способы лечения являются предпочтительными в случае глиобластомы и остеобластомы. Предпочтительные способы лечения лейкемии и лимфомы относятся к лечению острой лимфобластической лейкемии (ОЛЛ), острой миелогенной лейкемии (ОМЛ) и болезни Ходжкина.

Твердые формы соединения 1, описанные в настоящем изобретении, например, безводная кристаллическая форма, такая как форма III, можно применять для лечения, предотвращения, замедления развития или облегчения одного или более симптомов рака, предракового состояния или других гиперпролиферативных состояний, описанных выше.

При лечении раков или гиперпролиферативных состояний композицию или состав, содержащий твердую форму соединения 1, можно изменять явным образом, например, уменьшать или увеличивать экспрессию или уровни или активность одной или более биомолекул, связанных с предотвращением, образованием, поддержанием или развитием рака или гиперпролиферативного состояния. Такие биомолекулы включают один или более карциноэмбриональный антиген, простат-специфический антиген, йег2/пеи, Вс1-ХЬ, Ьс1-2, р53, Ш-Σα, ΣΒ-1β, Ш-6 или ΤΝΡα, ΟΑΤΑ-3, СОХ-2, ΝΡΚΒ, ΣκΒ, ΣκΒ киназу, например IκΒ киназу-οΐ, IκΒ киназу-β или IκΒ киназу-γ, ΝΡΑΤ, кальциневрин, кальмодулин, гак белок, такой как Н-гак или К-гак, циклин И, циклин Е, ксантиноксидазу или ее изоформы, гомологи или мутантные формы, которые могут иметь пониженную или повышенную биологическую активность (активности), и уровни которых можно уменьшить в заметной степени. Биомолекулы или их активность (активности), которые можно увеличить в заметной степени, включают ΣΕ-2, ΣΡΝγ, ΣΕ-12, Т-Ье1, О⁶-метилгуанин-ДНК-метилтрансферазу, кальциневрин, кальмодулин, супероксиддисмутазу (например, Мп, Ζη или Си), белок-супрессор опухолевого роста, такой как белок ретинобластомы (КЬ) или ί.ΌΚΝ2Α (р16), ВКСА1, ВКСА2, МеСР2, МВИ2, ΡΤΕΝ, ΝΒΚ1, ΝΒΚ2 или их изоформы, гомологи или мутантные формы, которые могут иметь ослабленную или усиленную биологическую активность (активности). Одну или более из этих биомолекул можно модулировать в любом из раков или состояний, описанных в настоящем изобретении.

Согласно одному варианту реализации изобретения уменьшение циркулирующего простатспецифического антигена (ПСА) или уменьшение скорости увеличения уровня ПСА (например, уменьшение времени удвоения при увеличении уровней ПСА в сыворотке крови) представляет собой заметное изменение, соответствующее улучшению гиперпролиферативного состояния у субъекта, при этом указанное состояние представляет собой рак предстательной железы.

Режимы или способы дозирования.

При лечении любого из состояний или симптомов, описанных в настоящем изобретении, можно непрерывно (ежедневно) или дробно (с перерывами) вводить композиции или составы, содержащие кристаллическую форму соединения 1, субъекту, страдающему от указанного состояния или симптома или склонного к ним. При лечении гиперпролиферативного состояния, такого как рак предстательной железы, рак молочной железы или доброкачественная гиперплазия простаты, или других состояний, описанных в настоящем изобретении, с помощью композиции или состава, содержащего твердую форму соединения 1 (например, кристаллическую форму I или кристаллическую форму III), дробное дозирование помогает избежать или облегчить некоторые из нежелательных аспектов, обычно связанных с прерыви

- 21 018974 стым дозированием. Такие нежелательные аспекты включают несоблюдение пациентом или субъектом режима ежедневного дозирования, склонность к приобретению устойчивости к лечению или необходимость уменьшения доз других терапевтических препаратов, принимаемых одновременно, из-за появления связанных с ними нежелательных побочных эффектов или токсичности. Дробное дозирование также применяют, если имеет место тахифилаксия, вследствие чего схему дозирования корректируют таким образом, чтобы избежать или минимизировать нежелательную реакцию.

В любом из режимов непрерывного (ежедневного) или дробного (прерывистого) дозирования, описанных в настоящем изобретении, или при лечении любого из указанных заболеваний, состояний или симптомов, описанных в настоящем изобретении, соответствующую композицию или состав, содержащие твердую форму соединения 1 (например, кристаллическую форму I или кристаллическую форму III), можно вводить посредством одного или более подходящих путей, например пероральным, буккальным, подъязычным, внутримышечным (в.м.), подкожным (п.к.), внутривенным (в.в.), внутрикожным, другим парентеральным путем или с помощью аэрозоля, при этом активный фармацевтический ингредиент представляет собой твердую форму соединения 1 (например, кристаллическую форму I или кристаллическую форму III). Согласно таким способам ежедневная доза может включать примерно от 0,0025 до примерно 5,0 мг/кг/день. Как правило, ежедневная доза согласно указанным способам введения будет составлять примерно от 0,01 мг/кг/день соединения 1 в твердой форме (например, кристаллической форме I или кристаллической форме III), до примерно 3 мг/кг/день, или примерно от 0,1 до примерно 1 мг/кг/день, включая примерно от 0,3 до 0,5 мг/кг/день. В некоторых ветеринарных препаратах можно также применять более высокие дозировки, например до примерно 60 мг/кг/день. Согласно некоторым вариантам реализации суспензионные составы, описанные в настоящем изобретении, содержащие кристаллическую форму соединения 1, вводят в.м. или п.к. Предпочтительные стандартные дозы содержат от 0,5 до 100 мг или более одной или более, как правило одну или две, твердых форм соединения 1, которое обычно вводят один раз в день, два раза в день, три раза в день или четыре раза в день, при этом особенно предпочтительно вводить 5, 15, 10 или 25 мг одной твердой формы соединения 1 два раза в день. Предпочтительные стандартные лекарственные формы включают формы, подходящие для перорального дозирования, такие как таблетки и капсулы.

Согласно некоторым вариантам реализации, таким как лечение гормоночувствительного рака или рака, вызванного гормональными нарушениями, композицию или состав, содержащий твердую форму соединения 1, вводят ежедневно один раз или два раза в день в течение 14-180 дней, как правило, в течение 30-90 дней или до тех пор, пока биомаркер гиперпролиферативного состояния, подвергаемого лечению, не укажет на ослабление, отсутствие развития (т.е. стабилизацию) или ремиссию заболевания. Затем дозирование возобновляют, если биомаркер указывает на возвращение или рецидив заболевания. Согласно одному такому варианту реализации рак представляет собой рак предстательной железы, а биомаркер представляет собой циркулирующий простат-специфический антиген. Согласно еще одному такому варианту реализации рак представляет собой метастатический рак предстательной железы, а биомаркер представляет собой распространение заболевания в костную ткань, которое оценивают при сканировании костей. Согласно другому варианту реализации рак представляет собой рак молочной железы, а биомаркер представляет собой опухолевую массу.

Дозы соединения 1 в твердой форме, вводимые способами, описанными в настоящем изобретении, и применение комбинированных терапий с другими стандартными терапевтическими веществами или способами лечения можно применять по существу, как описано выше для лечения любого из заболеваний или состояний, которые описаны в настоящем изобретении. Таким образом, соединение 1 в твердой форме можно вводить с профилактической или терапевтической целью при хронических состояниях или его можно вводить во время или сразу же после острого приступа, такого как резкая боль, связанная с состоянием, подвергаемым лечению.

Дозы соединения 1 в твердой форме, способы введения и применение комбинированных терапий с другими стандартными терапевтическими веществами или способами лечения можно использовать по существу, как описано выше, для лечения раковых или гиперпролиферативных состояний или других состояний, описанных в настоящем изобретении. Так, согласно некоторым вариантам реализации применение твердой формы соединения 1 можно комбинировать с одной или более вспомогательных терапий для лечения ракового или предракового состояния (состояний), например, одной или более хирургических операций и лечения с применением антиандрогена или антиэстрогена, как описано в настоящем описании или в цитируемых ссылках, антибластомного средства, такого как алкилирующий агент, азотистого иприта, нитрозомочевины, антиметаболита или цитотоксического средства, или анальгетика, такого как пропоксифена напсилат, ацетаминофен или кодеин. Типичные противораковые и вспомогательные вещества включают метотрексат, тиогуанин, меркаптопурин, адриамицин, хлорамбуцил, циклофосфамид, цисплатин, прокарбазин, гидроксимочевину, аллопуринол, эритропоэтин, гранулоцитарный колониестимулирующий фактор (Г-КСФ), бикалутамид, анастрозол, флударабина фосфат и доксорубицин. Такие терапии обычно проводят, по существу, согласно стандартным протоколам, и они обычно предшествуют лечению с применением твердой формы соединения 1, или, по существу, проводятся одновременно с таким лечением и/или после него. Согласно некоторым вариантам реализации указанные вспо

- 22 018974 могательные терапии будут проводиться одновременно с применением твердой формы соединения 1 или в диапазоне примерно от 1 дня до примерно 16 недель перед или после проведения по меньшей мере одного курса лечения с применением твердой формы соединения 1. Другие типичные терапевтические препараты и их применение были подробно описаны, например, в РкукШаик Эекк РеГегепсе 54⁴¹¹ ебШои, 2000, р. 303-3250, ΚΒΝ 1-56363-330-2, МеЛса1 Есопоппск Со., Шс., Моп(уа1е, N1. Один или более их этих типичных препаратов можно применять в комбинации с твердой формой соединения 1 для облегчения, замедления образования или развития, предотвращения или лечения любого из соответствующих раков, предраковых состояний или связанных с ними состояний, описанных в настоящем изобретении, или любого из их симптомов.

Согласно одному варианту реализации подвергаемый лечению рак представляет собой рак предстательной железы, который может быть чувствительным или нечувствительным к удалению андрогена. Если рак является чувствительным к удалению андрогена, твердую форму соединения 1 в соответствующем составе отдельно в комбинации с антагонистом рецептора андрогена, таким как СА8ООЕХ™ (также известным как бикалутамид), возможно в комбинации с гормоном, высвобождающим лютеинизирующий гормон или лейпрорелином (агонистом гонадотропин-высвобождающего гормона), вводят субъекту с раком предстательной железы, который может быть кастрирован или нет. Комбинированные терапии можно применять совместно, сочетая в одной лекарственной форме (например, совместный состав соединения 1 с бикалутамидом), или в отдельных лекарственных формах (например, соединение 1, приготовленное в пероральной лекарственной форме, с бикалутамидом в отдельной пероральной лекарственной форме или с агонистом гормона, вводимым парентеральным путем в суспензионном составе) или одновременно друг с другом (с интервалом 0-15 мин), или с интервалом в пределах 15 мин-24 ч, 30 мин-24 ч, или с интервалом 1-24 ч, или вводят с применением различных схем дозирования (т.е. вводят в разные дни) для достижения оптимальных дополнительных или синергетических взаимодействий с каждым компонентом терапии или для минимизации неблагоприятных эффектов при уменьшении дозировки одного или более компонентов терапии. Если субъект с раком предстательной железы нечувствителен к удалению андрогена, что включает рак предстательной железы, который не зависит от андрогена и кастрации или является гормонорезистентным, твердую форму соединения 1 в соответствующем составе вводят в комбинации с цитотоксическим веществом, таким как антитубулиновый препарат, включая, без ограничений, соединение таксана, такое как доцетаксел или паклитаксел. Комбинированные терапии можно проводить совместно, сочетая в одной лекарственной форме (т.е. приготавливая совместно, при необходимости) или в отдельных лекарственных формах, как описано ранее. Кроме того, величину и схему дозирования можно варьировать для достижения оптимальной терапии. Комбинированные терапии с применением цитотоксических веществ, как правило, начинают использовать после появления у субъекта симптомов метастатического заболевания.

Согласно еще одному варианту реализации рак представляет собой рак молочной железы, подвергаемый лечению путем введения твердой формы соединения 1 в соответствующем составе отдельно в комбинации с одним или более других терапевтических веществ, обычно применяемых при лечении рака молочной железы. Согласно одному варианту реализации твердую лекарственную форму соединения 1 применяют в комбинации с агонистом гонадотропин-высвобождающего гормона, такого как леупролид. Согласно еще одному варианту реализации твердую лекарственную форму соединения 1 можно применять в комбинации с НЕВСЕРТШ™ в зависимости от Нег2/пеи состояния опухоли. Согласно еще одному варианту реализации твердую лекарственную форму соединения 1 применяют в комбинации с необратимым ингибитором ароматазы, таким как эксеместан, который образует ковалентную связь с ферментом, или ингибиторами ароматазы, такими как анастрозол или летрозол, которые ингибируют фермент ароматазы при обратимой конкуренции. Согласно еще одному варианту реализации твердую лекарственную форму соединения 1 применяют в комбинации с селективным модулятором рецептора эстрогенов, таким как тамоксифен или ралоксифен, в зависимости от состояния опухоли с точки зрения рецептора эстрогенов. Комбинированные терапии можно вводить совместно, сочетая в одной лекарственной форме (т.е. приготавливая совместно, при необходимости) или в отдельных лекарственных формах, как описано ранее. Кроме того, величину и схему дозирования можно варьировать для достижения оптимальной терапии. Соединение 1 в твердой форме, как правило, вводят субъекту с раком молочной железы отдельно или одновременно с гормонотерапией. Гормонотерапию обычно сопровождают введением ТАМОКСИФЕН™ и ингибитора ароматазы, такого как АРИМИДЕКС™ (анастрозол), и проводят после начальной первичной терапии, которая может представлять собой хирургическую операцию, химиотерапию, облучение или их комбинацию, для предотвращения рецидива. Соединение 1 в таких условиях может заменять тамоксифен или вводиться совместно с ТАМОКСИФЕН™. При одновременном применении с химиотерапевтическим препаратом, как иногда делают на последней стадии заболевания, соединение 1 вводят в комбинации с соединением таксана, таким как доцетаксел или паклитаксел, для увеличения времени перед следующим курсом химиотерапии или применяют для снижения количества вводимого химиотерапевтического препарата, чтобы уменьшить его побочные эффекты или предотвратить или замедлить возникновение устойчивости к препарату.

- 23 018974

Пронумерованные варианты реализации изобретения.

Несколько аспектов изобретения и связанного с ними предмета изобретения включают следующие пронумерованные варианты реализации изобретения.

1. Твердая форма 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диола.

2. Твердая форма согласно варианту реализации 1, отличающаяся тем, что твердая форма представляет собой одну или более кристаллических форм 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диола, по существу, не содержащих 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диол в аморфной форме.

3. Твердая форма согласно варианту реализации 1, отличающаяся тем, что твердая форма представляет собой полиморф или псевдополиморф 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диола и в значительной степени не содержит аморфного 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диола.

4. Твердая форма согласно варианту реализации 1, отличающаяся тем, что твердая форма представляет собой кристаллическую форму 17а-этинил-5 а-андростан-3 α,17β-диола и в значительной степени не содержит аморфные и другие кристаллические формы 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диола.

5. Твердая форма согласно варианту реализации 4, отличающаяся тем, что твердая форма характеризуется: (а) порошковой рентгенограммой со значениями 2-тета 10,6, 14,7, 16,0±0,1 и возможно одним или более значениями 2-тета 12,3, 14,3, 15,9, 16,4, 17,5, 20,3, 24,0 и 27,2±0,1 и (Ь) возможно термограммой (ДТА), имеющей широкую эндотерму с центром примерно при 81°С и характеристическую эндотерму примерно при 164°С (начало примерно при 162°С), полученной методом дифференциального термического анализа при скорости нагревания 10°С/мин, или указанная твердая форма характеризуется посредством (а) и (Ь).

6. Твердая форма согласно варианту реализации 5, дополнительно характеризующаяся термограммой, полученной методом термогравиметрического анализа (ТГА), с 12% потерей массы в диапазоне температур от примерно 40 до примерно 105°С при нагревании со скоростью 10°С/мин.

7. Твердая форма согласно варианту реализации 5, дополнительно характеризующаяся термограммой, полученной методом ДТА, с экзотермой примерно при 100°С.

8. Твердая форма согласно варианту реализации 4, отличающаяся тем, что твердая форма характеризуется: (а) порошковой рентгенограммой со значениями 2-тета 11,3, 13,5, 16,2 и 16,5±0,1 и возможно одним или более значениями 2-тета 9,3, 9,9, 16,0, 17,4 и 19,0±0,10 и (Ь) возможно термограммой, полученной методом ДТА, имеющей характеристическую эндотерму примерно при 164°С (начало примерно при 162°С) и термограммой, полученной методом ТГА, показывающей незначительную потерю массы (мас.%) в диапазоне температур от примерно 40 до примерно 105°С при нагревании со скоростью 10°С/мин, или указанная твердая форма характеризуется посредством (а) и (Ь).

9. Твердая форма согласно варианту реализации 8, дополнительно характеризующаяся рамановскими спектрами, по существу, идентичными спектрам, показанным на фиг. 5.

10. Твердая форма согласно варианту реализации 4, отличающаяся тем, что твердая форма характеризуется порошковой рентгенограммой и термограммой, полученной методом дифференциальной сканирующей калориметрии (ДСК), по существу, идентичными порошковой рентгенограмме, показанной на фиг. 7, и ДСК-ТГА термограммам, показанным на фиг. 8.

11. Твердая форма согласно варианту реализации 10, дополнительно характеризующаяся рамановскими спектрами, по существу, идентичными спектрам, показанным на фиг. 9.

12. Твердая форма согласно варианту реализации 4, отличающаяся тем, что твердая форма характеризуется порошковой рентгенограммой и ДСК-ТГА термограммами, по существу, идентичными порошковой рентгенограмме, показанной на фиг. 1 или 2, и ДСК-ТГА термограммам, показанным на фиг. 3.

13. Твердая форма согласно варианту реализации 3, отличающаяся тем, что твердая форма характеризуется: (а) порошковой рентгенограммой со значениями 2-тета 9,8, 13,0, 14,7 и 17,0±0,1 и возможно одним или более значениями 2-тета 8,3, 11,3, 13,9, 15,0, 15,4, 16,1, 16,5, 17,8, 18,7, 20,0, 20,8, 22,1 и 25,1±0,1 и (Ь) возможно термограммой, полученной методом ДТА, имеющей широкую эндотерму с центром примерно при 88°С, и характеристическую эндотерму примерно при 164°С (начало примерно при 162°С).

14. Твердая форма согласно варианту реализации 13, дополнительно характеризующаяся ТГА термограммой, показывающей потерю массы примерно 5-6 мас.% в диапазоне температур от примерно 60 до примерно 105°С, или потерю массы примерно 7 мас.% в диапазоне температур от примерно 40 до примерно 160°С при нагревании со скоростью 10°С/мин, или указанная твердая форма характеризуется посредством (а) и (Ь).

15. Твердая форма согласно варианту реализации 13, дополнительно характеризующаяся термограммой, полученной методом ДТА, с экзотермой примерно при 106°С.

16. Твердая форма согласно варианту реализации 3, отличающаяся тем, что твердая форма характеризуется порошковой рентгенограммой и ДТА-ТГА термограммами, по существу, идентичными порошковой рентгенограмме, показанной на фиг. 12, и ДТА-ТГА термограммам, показанным на фиг. 13.

17. Твердая форма согласно варианту реализации 3, отличающаяся тем, что твердая форма характе

- 24 018974 ризуется: (а) порошковой рентгенограммой со значениями 2-тета 5,8, 9,5, 11,5, 15,2 и 18,9±0,1 и возможно одним или более значениями 2-тета 13,5, 16,0, 16,5, 17,3, 19,3, 20,9, 24,5 и 29,3±0,10 и (Ь) возможно термограммой, полученной методом ДТА, имеющей характеристическую эндотерму примерно при 164°С (начало примерно при 162°С), и термограммой, полученной методом ТГА, с незначительной потерей массы в диапазоне температур от примерно 40 до примерно 160 °С при нагревании со скоростью 10°С/мин.

18. Твердая форма согласно варианту реализации 3, отличающаяся тем, что твердая форма характеризуется порошковой рентгенограммой, по существу, идентичной рентгенограмме, показанной на фиг.

15.

19. Твердая форма согласно варианту реализации 3, отличающаяся тем, что твердая форма характеризуется (а) порошковой рентгенограммой со значениями 2-тета 9,8, 13,3, 15,0 и 18,7±0,1 и возможно одним или более значениями 2-тета 6,7, 7,2, 7,5, 14,3, 14,6, 16,0, 17,0, 17,7, 18,3, 20,9 и 21,8±0,1 и (Ь) возможно, ДТА термограммой, имеющей характеристичесскую эндотерму примерно при 164°С (начало примерно при 162°С), и ТГА термограммой с потерей массы примерно 5 мас.% в диапазоне температур от примерно 40 до примерно 85°С или потерей массы примерно 12% в диапазоне температур от примерно 40 до примерно 180°С при нагревании со скоростью 10°С/мин.

20. Твердая форма согласно варианту реализации 3, отличающаяся тем, что твердая форма характеризуется порошковой рентгенограммой, по существу, идентичной рентгенограмме, показанной на фиг.

16, и ДТА-ТГА термограммами, по существу, идентичными ДТА-ТГА термограммам, показанным на фиг. 17.

21. Твердая форма согласно варианту реализации 3, отличающаяся тем, что твердая форма характеризуется (а) порошковой рентгенограммой со значениями 2-тета 9,8, 13,5, 14,2, 15,8, 19,5±0,1 и возможно одним или более значениями 2-тета 5,9, 8,3, 11,4, 11,9, 17,8, 21,4 и 26,9±0,10 и (Ь) возможно ДТА термограммой, имеющей характеристическую эндотерму примерно при 164°С (начало примерно при 162°С), и ТГА термограммой с незначительной потерей массы (мас.%) в диапазоне температур от примерно 40 до примерно 160°С.

22. Твердая форма согласно варианту реализации 3, отличающаяся тем, что твердая форма характеризуется порошковой рентгенограммой, по существу, идентичной рентгенограмме, показанной на фиг.

18.

23. Твердая форма согласно варианту реализации 3, отличающаяся тем, что твердая форма характеризуется (а) порошковой рентгенограммой со значениями 2-тета 11,1, 16,0, 11,6, 17,7 и 18,7±0,1, и возможно одним или более значениями 2-тета 9,4, 10,1, 19,1, 23,7, 24,3 и 28,4±0,10 и (Ь) возможно ДТА термограммой, имеющей характеристическую эндотерму примерно при 164°С (начало примерно при 162°С), и ТГА термограммой с незначительной потерей массы (мас.%) в диапазоне температур от примерно 40 до примерно 160°С.

24. Твердая форма согласно варианту реализации 3, отличающаяся тем, что твердая форма характеризуется порошковой рентгенограммой, по существу, идентичной рентгенограмме, показанной на фиг.

19.

25. Твердая форма согласно варианту реализации 10, дополнительно характеризующаяся рамановскими спектрами, по существу, идентичными спектрам, показанным на фиг. 20.

26. Твердая форма согласно варианту реализации 1, отличающаяся тем, что твердая форма представляет собой аморфный 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диол, по существу не содержащий 17αэтинил-5а-андростан-3а,17в-диол в кристаллической форме.

27. Твердая форма согласно варианту реализации 1, отличающаяся тем, что твердая форма представляет собой аморфный 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диол, в значительной степени не содержащий 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диол в кристаллической форме.

28. Твердый состав, содержащий твердую форму 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диола и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый наполнитель.

29. Состав согласно варианту реализации изобретения 28, отличающийся тем, что твердая форма представляет собой одну или более кристаллических форм 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диола.

30. Состав согласно варианту реализации 29, отличающийся тем, что одна кристаллическая форма представляет собой полиморфную или псевдополиморфную форму 17а-этинил-5а-андростан-3а,17вдиола и, по существу, не содержит 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диол в аморфной форме.

31. Состав согласно варианту реализации 29, отличающийся тем, что одна кристаллическая форма представляет собой полиморфную или псевдополиморфную форму 17а-этинил-5а-андростан-3а,17вдиола и в значительной степени не содержит аморфного 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диола.

32. Состав согласно варианту реализации 28, отличающийся тем, что твердая форма представляет собой кристаллическую форму 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диола и в значительной степени не содержит аморфных и других кристаллических форм 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диола.

33. Состав согласно варианту реализации 32, отличающийся тем, что кристаллическая форма пред

- 25 018974 ставляет собой дегидрат, возможно выбранный из группы, состоящей из кристаллической формы III, формы V, формы VII и формы УШ.

34. Состав согласно варианту реализации 32, отличающийся тем, что кристаллическая форма представляет собой сольват, возможно выбранный из группы, состоящей из кристаллической формы I и формы IV.

35. Состав согласно варианту реализации 32, отличающийся тем, что кристаллическая форма представляет собой форму I.

36. Состав согласно варианту реализации 32, отличающийся тем, что кристаллическая форма представляет собой форму III.

37. Состав согласно варианту реализации 32, отличающийся тем, что кристаллическая форма представляет собой форму IV.

38. Состав согласно варианту реализации 32, отличающийся тем, что кристаллическая форма представляет собой форму V.

39. Состав согласно варианту реализации 32, отличающийся тем, что кристаллическая форма представляет собой форму VII.

40. Состав согласно варианту реализации 32, отличающийся тем, что кристаллическая форма представляет собой форму VIII.

41. Состав согласно варианту реализации 28, отличающийся тем, что твердая форма представляет собой аморфный 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диол.

42. Состав согласно варианту реализации 41, отличающийся тем, что аморфный 17а-этинил-5аандростан-3а,17в-диол, по существу, не содержит кристаллический 17а-этинил-5а-андростан-3а,17вдиол.

43. Состав согласно любому из вариантов реализации 28-42, отличающийся тем, что указанный состав имеет форму капсулы или таблетки для перорального дозирования, и фармацевтически приемлемый наполнитель представляет собой поверхностно-активное вещество в количестве, достаточном для растворения 90% состава в воде при температуре окружающей среды через 30 мин.

44. Состав согласно варианту реализации 43, отличающийся тем, что поверхностно-активное вещество представляет собой лаурилсульфат натрия.

45. Состав согласно любому из вариантов реализации 28-42, отличающийся тем, что фармацевтически приемлемые наполнители включают лаурилсульфат натрия, микрокристаллическую целлюлозу и стеарат магния.

46. Состав согласно любому из вариантов реализации 28-42, отличающийся тем, что фармацевтически приемлемые наполнители состоят в значительной степени из лаурилсульфата натрия, микрокристаллической целлюлозы и стеарата магния в количествах по отношению к твердой форме 17а-этинил-5аандростан-3а,17в-триола, приведенных в табл.13 или 14.

47. Способ лечения гиперпролиферативного состояния, включающий введение субъекту, нуждающемуся в таком лечении, эффективного количества 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-триола в твердой форме или в твердом составе, содержащем твердую форму 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-триола и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый наполнитель.

48. Способ согласно варианту реализации 29, отличающийся тем, что твердая форма представляет собой кристаллическую форму 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-триола, по существу, не содержащую 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-триол в аморфной форме.

49. Способ согласно варианту реализации 48, отличающийся тем, что твердая форма представляет собой полиморфную или псевдополиморфную форму 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-триола, в значительной степени не содержащую или, по существу, не содержащую аморфные и другие кристаллические формы 17а-этинил-5 а-андростан-3 α,17 β -триола.

50. Способ согласно варианту реализации 31, отличающийся тем, что полиморфная или псевдополиморфная форма представляет собой кристаллическую форму III.

51. Способ согласно варианту реализации 29, отличающийся тем, что гиперпролиферативное состояние представляет собой гормоночувствительный рак или рак, вызванный гормональными нарушениями.

52. Способ согласно варианту реализации 29, отличающийся тем, что гиперпролиферативное состояние представляет собой рак предстательной железы, рак молочной железы, доброкачественную гиперплазию предстательной железы или интерстициальную неоплазию предстательной железы.

53. Способ получения твердого состава согласно любому из вариантов реализации 12-24, включающий стадию смешивания твердой формы 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-триола с одним, двумя, тремя или четырьмя фармацевтически приемлемыми наполнителями, отличающийся тем, что по меньшей мере один наполнитель представляет собой поверхностно-активное вещество.

54. Способ по п.53, отличающийся тем, что твердая форма представляет собой кристаллическую форму III.

- 26 018974

55. Способ по п.53, отличающийся тем, что твердая форма представляет собой аморфный 17 а-этинил-5 а-андростан-3 α,17β -триол.

56. Способ согласно варианту реализации 53, отличающийся тем, что по меньшей мере один наполнитель представляет собой лаурилсульфат натрия.

57. Способ получения жидкого состава, содержащего 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-триол и фармацевтически приемлемые наполнители, отличающийся тем, что по меньшей мере один наполнитель представляет собой жидкий наполнитель, при этом указанный способ получения включает стадию приведения в контакт или смешивания твердой формы 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-триола с жидким наполнителем, возможно в присутствии другого наполнителя.

58. Способ согласно варианту реализации 55, отличающийся тем, что твердая форма представляет собой кристаллическую форму III.

59. Способ по п.57, отличающийся тем, что твердая форма представляет собой аморфный 17аэтинил-5 а-андростан-3 α,17 β -триол.

60. Способ лечения гиперпролиферативного состояния, включающий введение субъекту, нуждающемуся в таком лечении, эффективного количества 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-триола в жидком составе, полученном согласно способу по пп.57, 58 или 59.

61. Способ по п.60, отличающийся тем, что гиперпролиферативное состояние представляет собой рак, вызванный гормональными нарушениями, или гормоночувствительный рак.

62. Способ по п.61, отличающийся тем, что гиперпролиферативное состояние представляет собой рак предстательной железы, рак молочной железы, доброкачественную гиперплазию предстательной железы или интерстициальную неоплазию предстательной железы.

63. Продукт, полученный согласно способу, включающему стадии смешивания метанольного раствора соединения 1 с достаточным количеством воды для образования осадка.

64. Продукт, полученный согласно способу, включающему стадию нагревания псевдополиморфного соединения 1 при пониженном давлении для проведения десольватации псевдополиморфа.

65. Продукт согласно варианту реализации 64, отличающийся тем, что псевдополиморф представляет собой форму I.

66. Продукт, полученный согласно способу, включающему стадии смешивания горячего ЕЮАс раствора соединения 1 с достаточным количеством гептана для проведения кристаллизации после охлаждения до температуры окружающей среды.

67. Продукт, полученный согласно способу, включающему стадии (1) удаления растворителя из ТГФ раствора соединения 1 при температуре и давлении окружающей среды с получением геля; (2) удаления из геля остаточного растворителя при пониженном давлении при температуре окружающей среды.

68. Продукт, полученный согласно способу, включающему стадию быстрого выпаривания раствора соединения 1 в смеси ацетонитрил:вода в соотношении 2:3 или смешивания ацетонитрильного раствора соединения 1 с достаточным количеством воды для проведения ускоренного осаждения.

69. Продукт, полученный согласно способу, включающему стадии (1) смешивания ацетонитрильного раствора соединения 1 с водой для получения раствора ацетонитрил:вода в соотношении 2:3 и (2) удаления растворителя из раствора ацетонитрил-вода при температуре и давлении окружающей среды.

70. Продукт, полученный согласно способу, включающему стадии (3) удаления растворителя из ацетонового раствора соединения 1 при температуре и давлении окружающей среды.

71. Продукт, полученный согласно способу, включающему стадии (1) смешивания соединения 1 в форме III с 2,2,2-трифторэтанолом (ТФЭ) с образованием суспензии; (2) перемешивания ТФЭ суспензии примерно при 30°С в течение до примерно 6 дней.

72. Продукт, полученный согласно способу, включающему стадии (1) удаления растворителя из диоксанового раствора соединения 1 при температуре и давлении окружающей среды с получением геля; (2) удаления остаточного растворителя из геля при пониженном давлении в течение до 1 дня при температуре окружающей среды.

73. Продукт, полученный согласно способу, включающему стадии (1) смешивания этанольной суспензии соединения 1 с достаточным количеством изопропилацетата для проведения растворения при обработке ультразвуком; (2) удаления достаточного количества растворителя из раствора этанол - изопропилацетат с образованием твердого вещества, которое снова полностью растворится при нагревании до примерно 47°С; (3) охлаждения раствора повторно растворенного твердого вещества до примерно 5°С.

74. Продукт, полученный согласно способу, включающему стадии удаления растворителя из дихлорметанового раствора соединения 1 при температуре и давлении окружающей среды.

Дополнительные аспекты изобретения, относящиеся к кристаллическому 17а-этиниландростан3а,17в-диолу, включают следующие пронумерованные варианты реализации изобретения.

1А. Кристаллическая форма 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диола.

2А. Кристаллическая форма согласно варианту реализации 1А, отличающаяся тем, что кристаллическая форма представляет собой псевдополиморф, полиморф или их смесь.

- 27 018974

3А. Кристаллическая форма согласно варианту реализации 2А, отличающаяся тем, что псевдополиморф представляет собой сольват.

4А. Кристаллическая форма согласно варианту реализации 2А, отличающаяся тем, что псевдополиморф представляет собой гидрат.

5А. Кристаллическая форма согласно варианту реализации 3А, отличающаяся тем, что сольват представляет собой смешанный сольват воды и спирта.

6А. Кристаллическая форма по п.2А, отличающаяся тем, что кристаллическая форма представляет собой псевдополиморф, при этом псевдополиморф в значительной степени состоит из 17а-этинил-5аандростан-3а,17в-диола, воды и спирта, причем спирт представляет собой метанол.

7А. Кристаллическая форма по п.4А, отличающаяся тем, что псевдополиморф представляет собой смешанный сольват, содержащий воду и метанол в соотношении от примерно 2:1 до 1:1.

8А. Кристаллическая форма согласно варианту реализации 4А, отличающаяся тем, что кристаллическая форма представляет собой псевдополиморф, который описывается молекулярной формулой С₂₁Н₃₂О₂-1СН₃ОН-1Н₂О.

9А. Кристаллическая форма согласно варианту реализации 4А, отличающаяся тем, что псевдополиморф в значительной степени не содержит 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диола в других кристаллических формах и имеет полученную методом термического гравиметрического анализа термограмму с потерей массы примерно 12 мас.% в диапазоне температур от примерно 25-60 до примерно 105°С при линейном изменении температуры 10°С/мин.

10А. Кристаллическая форма согласно варианту реализации 1А, отличающаяся тем, что кристаллическая форма представляет собой продукт, полученный согласно способу, включающему стадию частичной или полной десольватации псевдополиморфа 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диола.

11А. Кристаллическая форма согласно варианту реализации 10А, отличающаяся тем, что псевдополиморф представляет собой гидрат или смешанный сольват воды и метанола.

12А. Кристаллическая форма согласно варианту реализации 10А, отличающаяся тем, что псевдополиморф представляет собой кристаллическую форму I, форму IV или форму VI.

13А. Кристаллическая форма согласно варианту реализации 1А, отличающаяся тем, что кристаллическая форма представляет собой дегидрат.

14А. Кристаллическая форма согласно варианту реализации 13А, отличающаяся тем, что дегидрат представляет собой продукт, полученный согласно способу, включающему стадию полной десольватации кристаллической формы I, формы IV или формы VI.

15А. Кристаллическая форма согласно варианту реализации 13А, отличающаяся тем, что дегидрат представляет собой кристаллическую форму III.

16А. Кристаллическая форма согласно варианту реализации 1А, отличающаяся тем, что кристаллическая форма характеризуется одним или более, как правило 2, 3 или 4, характеристическими пиками на порошковой рентгенограмме, приведенными в табл. 1 или 2, и возможно переходом на термогравиметрической кривой, полученной способом термического анализа, описанным в настоящем изобретении.

17А. Кристаллическая форма согласно варианту реализации 1А, отличающаяся тем, что кристаллическая форма характеризуется одним или более, как правило 2, 3 или 4, характеристическими пиками на порошковой рентгенограмме, приведенными в табл. 5, и возможно переходом на термогравиметрической кривой, полученной способом термического анализа, описанным в настоящем изобретении.

18А. Кристаллическая форма согласно варианту реализации 1А, отличающаяся тем, что кристаллическая форма характеризуется одним или более, как правило 2, 3 или 4, характеристическими пиками на порошковой рентгенограмме, приведенными в табл. 8, и возможно переходом на термогравиметрической кривой, полученной способом термического анализа, описанным в настоящем изобретении.

19А. Кристаллическая форма согласно варианту реализации 1А, отличающаяся тем, что кристаллическая форма характеризуется одним или более, как правило 2, 3 или 4, характеристическими пиками на порошковой рентгенограмме, приведенными в табл. 9, и возможно переходом на термогравиметрической кривой, полученной способом термического анализа, описанным в настоящем изобретении.

20А. Кристаллическая форма согласно варианту реализации 1А, отличающаяся тем, что кристаллическая форма характеризуется одним или более, как правило 2, 3 или 4, характеристическими пиками на порошковой рентгенограмме, приведенными в табл. 10, и возможно переходом на термогравиметрической кривой, полученной способом термического анализа, описанным в настоящем изобретении.

21А. Кристаллическая форма согласно варианту реализации 1А, отличающаяся тем, что кристаллическая форма характеризуется одним или более, как правило 2, 3 или 4, характеристическими пиками на порошковой рентгенограмме, приведенными в табл. 11, и возможно переходом на термогравиметрической кривой, полученной способом термического анализа, описанным в настоящем изобретении.

22А. Кристаллическая форма согласно варианту реализации 1А, отличающаяся тем, что кристаллическая форма характеризуется одним или более, как правило 2, 3 или 4, характеристическими пиками на порошковой рентгенограмме, приведенными в табл. 12, и возможно переходом на термогравиметрической кривой, полученной способом термического анализа, описанным в настоящем изобретении.

- 28 018974

23А. Кристаллическая форма согласно варианту реализации 1А, отличающаяся тем, что кристаллическая форма характеризуется функцией парного распределения, рассчитанной на основе порошковой рентгенограммы, показанной на фиг. 2.

24А. Кристаллическая форма согласно варианту реализации 1А, отличающаяся тем, что кристаллическая форма характеризуется функцией парного распределения, рассчитанной на основе порошковой рентгенограммы, показанной на фиг. 7.

25А. Кристаллическая форма согласно варианту реализации 1А, отличающаяся тем, что кристаллическая форма характеризуется одной или более полосами поглощения, как правило одной или двумя полосами поглощения, идентифицированными в рамановском спектре и показанными на фиг. 5.

26А. Кристаллическая форма согласно варианту реализации 1А, отличающаяся тем, что кристаллическая форма характеризуется одной или более полосами поглощения, как правило одной или двумя полосами поглощения, идентифицированными в рамановском спектре и показанными на фиг. 9.

Дополнительные аспекты изобретения, относящиеся к кристаллическому 17а-этиниландростан3α,17β-диолу, включают следующие пронумерованные варианты реализации изобретения.

1В. Кристаллический 17а-этиниландростан-3а,17в-диол.

2В. Кристаллический 17а-этиниландростан-3а,17в-диол согласно варианту реализации 1В, отличающийся тем, что кристаллический 17а-этиниландростан-3а,17в-диол, по существу, не содержит аморфного 17а-этиниландростан-3а,17в-диола, возможно, как определяют аналитическим методом, описанным в настоящем изобретении, таким как порошковая рентгеновская дифракция, ДСК, ТГА, измерение температуры плавления, рамановская спектроскопия, метод Карла Фишера и/или элементный анализ. Кристаллические формы 17а-этиниландростан-3а,17в-диола включают дегидраты, гидраты и сольваты, которые включают смешанные сольваты вода-растворитель. Согласно этим вариантам реализации изобретения кристаллический 17а-этиниландростан-3а,17в-диол, который в значительной степени не содержит аморфного 17а-этиниландростан-3а,17в-диола, будет, как правило и предпочтительно, содержать менее чем примерно 10 мас.% или менее чем примерно 7 мас.% аморфного вещества.

3В. Кристаллический 17а-этиниландростан-3а,17в-диол согласно варианту реализации 1В или 2В в виде кристаллов формы I. Эта форма 17а-этиниландростан-3а,17в-диола представляет собой смешанное сольватированное вещество с соотношением 17а-этиниландростан-3а,17в-диол:вода:метанол 1:1:1 и, как правило, по существу, не содержит аморфного 17а-этиниландростан-3а,17в-диола.

4В. Кристаллическая форма I 17а-этиниландростан-3а,17в-диола согласно варианту реализации 3В, которая содержит менее чем примерно 10 мас.% или менее чем примерно 7 мас.% других кристаллических форм 17а-этиниландростан-3а,17в-диола, возможно, как определяют аналитическим методом, описанным в настоящем изобретении, таким как порошковая рентгеновская дифракция, ДСК, ТГА, измерение температуры плавления, рамановская спектроскопия, метод Карла Фишера и/или элементный анализ.

5В. Кристаллический 17а-этиниландростан-3а,17в-диол согласно варианту реализации 3А, характеризующийся (1) пространственной группой Р2₁2₁2₁ (№ 19); Ζ=4 или (2) параметрами элементарной ячейки а=7,4893(4) А, Ь=11,0586(8) А, с=25,5095(15) Α, α=90,00°, β=90,00°, γ=90,00°, ν=2112.7(2) А ³.

6В. Кристаллическая форма 17а-этиниландростан-3а,17в-диола согласно варианту реализации 3А, характеризующаяся (1) порошковой рентгенограммой с характеристическими пиками примерно при 10,59, 12,33, 14,29, 14,72, 16,04, 16,41, 17,49, 20,27, 24,04 и 27,21° 2θ, возможно совместно с (2) ДТА или ДСК термограммой, имеющей эндотерму с началом примерно при 160±3°С, и ТГА термограммой с потерей массы (мас.%) по меньшей мере примерно 10% или содержанием воды примерно 5%, как определено методом титрования Карла Фишера.

7В. Кристаллическая форма 17а-этиниландростан-3а,17в-диола согласно варианту реализации изобретения 3А, характеризующаяся (1) порошковой рентгенограммой с пиками примерно при 9,30, 9,85, 11,33, 13,45, 15,96, 16,16, 16,48 и 17,42° 2θ, возможно совместно с (2) ДТА или ДСК термограммой, имеющей эндотерму с началом примерно при 160±3°С и ТГА термограммой с незначительной потерей массы (мас.%), потерей массы 2% или менее, или потерей массы 0,3% в диапазоне температур от примерно 40 до примерно 105°С или от примерно 40 до примерно 160°С при линейном изменении температуры 10°С/мин.

8В. Кристаллическая форма согласно варианту реализации 1В или 2В, отличающаяся тем, что кристаллическая форма представляет собой форму III, характеризующуюся достаточной биодоступностью кристаллического вещества, которое является пригодным для введения один раз в день или два раза в день в стандартных пероральных дозах 5, 10, 15, 20 или 50 мг человеку, такому как человек, имеющий рак или предраковое состояние, возможно доброкачественную гипертрофию предстательной железы, рак предстательной железы или рак молочной железы.

9В. Кристаллическая форма согласно варианту реализации 1В, 2В или 8В, отличающаяся тем, что кристаллическая форма представляет собой форму III, характеризующуюся достаточной стабильностью при хранении при 65°С и 75% относительной влажности в течение по меньшей мере 6 месяцев, при этом

- 29 018974 достаточная стабильность характеризуется изменением массы 17а-этиниландростан-3а,17в-диола менее примерно 5 мас.% при его разрушении с образованием деграданта или превращением менее чем примерно 5 мас.% 17а-этиниландростан-3а,17в-диола в другую твердую форму.

10В. Кристаллический 17а-этиниландростан-3а,17в-диол согласно варианту реализации 1В или 2В, в виде кристаллов формы III. Эта форма 17а-этиниландростан-3а,17в-диола представляет собой дегидрат и не содержит растворитель, как определено аналитическим способом, описанным в настоящем изобретении, таким как титрование Карла Фишера, газохроматографический анализ, протонная ЯМРспектроскопия и/или элементный анализ, и согласно предпочтительным вариантам реализации изобретения эта форма, по существу, не содержит аморфный 17а-этиниландростан-3а,17 β-диол, возможно как определяют аналитическим способом, описанным в настоящем изобретении, таким как порошковая рентгеновская дифракция, ДСК/ДТА, ТГА, рамановская спектроскопия или ЯМР спектроскопия в твердом теле.

11В. Кристаллическая форма III 17а-этиниландростан-3а,17в-диола согласно варианту реализации 10В, который содержит менее чем примерно 10 мас.% или менее чем примерно 7 мас.% других кристаллических форм 17а-этиниландростан-3а,17в-диола, возможно, как определяют аналитическим методом, описанным в настоящем изобретении, таким как порошковая рентгеновская дифракция, ДСК/ДТА, ТГА, рамановская спектроскопия или ЯМР спектроскопия в твердом теле.

12В. Кристаллический форма III 17а-этиниландростан-3а,17в-диола согласно варианту реализации 10В или 11В, имеющая (1) порошковую рентгенограмму с характеристическими пиками примерно при 9,30, 9,85, 11,33, 13,45, 15,96, 16,16, 16,48 и 17,42° 2Θ или (2) кривую рамановского спектра, по существу, идентичную кривой, показанной на фиг. 9, или комбинацию (1) и (2).

11В. Кристаллическая форма III 17а-этиниландростан-3а,17в-диола согласно варианту реализации 10В, которая содержит менее чем примерно 10 мас.% или менее чем примерно 7 мас.% других кристаллических форм 17а-этиниландростан-3а,17в-диола, возможно, как определяют аналитическим методом, описанным в настоящем изобретении, таким как порошковая рентгеновская дифракция, ДСК/ДТА, ТГА, рамановская спектроскопия или ЯМР спектроскопия в твердом теле.

12В. Кристаллическая форма I 17а-этиниландростан-3а,17в-диола согласно варианту реализации изобретения 3В, характеризующаяся (1) порошковой рентгенограммой с характеристическими пиками примерно при 10,59, 12,33, 14,29, 14,72, 16,04, 16,41, 17,49, 20,27, 24,04 и 27,21° 2Θ или (2) кривой рамановского спектра, по существу, идентичной кривой, показанной на фиг. 5, или комбинацией (1) и (2).

13В. Кристаллический 17а-этиниландростан-3а,17в-диол согласно варианту реализации 1В или 2В в виде кристаллов формы IV. Это форма 17а-этиниландростан-3а,17в-диола представляет собой гидрат и содержит воду в соотношении 1:1. Согласно предпочтительным вариантам реализации изобретения указанная форма, по существу, не содержит аморфный 17а-этиниландростан-3а,17в-диол, возможно, как определяют аналитическим способом, описанным в настоящем изобретении, таким как порошковая рентгеновская дифракция, ДСК/ДТА, ТГА, рамановская спектроскопия и/или ЯМР спектроскопия в твердом теле.

14В. Кристаллическая форма IV 17а-этиниландростан-3а,17в-диола согласно варианту реализации 13В, которая содержит менее чем примерно 10 мас.% или менее чем примерно 7 мас.% других кристаллических форм 17а-этиниландростан-3а,17в-диола, возможно, как определяют аналитическим методом, описанным в настоящем изобретении, таким как порошковая рентгеновская дифракция, ДСК, ТГА, рамановская спектроскопия и/или ЯМР спектроскопия в твердом теле.

15В. Кристаллическая форма IV 17а-этиниландростан-3а,17в-диола согласно варианту реализации 13В или 14В, характеризующаяся (1) порошковой рентгенограммой с характеристическими пиками примерно при 8,31, 9,84, 11,28, 13,02, 13,86, 14,73, 15,00, 16,14, 16,53, 17,01, 17,76 и 18,72° 2Θ, (2) ДТА или ДСК термограммой с началом экзотермы примерно при 105±3°С, (3) ТГА термограммой с потерей массы при нагревании до температуры плавления, которая соответствует полной потере воды для моногидрата, или (4) комбинацией вышеуказанных пунктов, таких как (1) и (2), (1) и (3) или (2) и (3).

16В. Кристаллический 17а-этиниландростан-3а,17в-диол согласно варианту реализации 1В или 2В в виде кристаллов формы V. Эта форма 17а-этиниландростан-3а,17в-диола представляет собой дегидрат. Согласно предпочтительным вариантам реализации изобретения указанная форма, по существу, не содержит аморфный 17а-этиниландростан-3а,17в-диол, возможно, как определяют аналитическим способом, описанным в настоящем изобретении, таким как порошковая рентгеновская дифракция, ДСК/ДТА, ТГА, рамановская спектроскопия и/или ЯМР спектроскопия в твердом теле.

17В. Кристаллическая форма V 17а-этиниландростан-3а,17в-диола согласно варианту реализации 13В, которая содержит менее чем примерно 10 мас.% или менее чем примерно 7 мас.% других кристаллических форм 17а-этиниландростан-3а,17в-диола, возможно, как определяют аналитическим методом, описанным в настоящем изобретении, таким как порошковая рентгеновская дифракция, ДСК, ТГА, температура плавления, рамановская спектроскопия и/или ЯМР спектроскопия в твердом теле.

- 30 018974

17В. Кристаллическая форма V 17а-этиниландростан-3а,17в-диола согласно варианту реализации 16В или 17В, характеризующаяся (1) порошковой рентгенограммой с характеристическими пиками примерно при 5,82, 9,48, 11,49, 13,50, 15,21, 17,28 и 18,93° 2θ, (2) ТГА термограммой с незначительной потерей массы, потерей массы 2% или менее, или потерей массы 0,3% или менее при нагревании до температуры плавления, (3) ДТА или ДСК термограммой, имеющей эндотерму примерно при 164°С, или (4) комбинацией (1) и (2) или (1) и (3).

18В. Кристаллический 17а-этиниландростан-3а,17в-диол согласно варианту реализации 1В или 2В в виде кристаллов формы VI. Эта форма 17а-этиниландростан-3а,17в-диола представляет собой диоксановый сольват в соотношении 1:1. Согласно предпочтительным вариантам реализации изобретения эта форма, по существу, не содержит аморфный 17а-этиниландростан-3а,17в-диол, возможно, как определяют аналитическим способом, описанным в настоящем изобретении, таким как порошковая рентгеновская дифракция, ДСК/ДТА, ТГА, рамановская спектроскопия и/или ЯМР спектроскопия в твердом теле.

19В. Кристаллическая форма VI 17а-этиниландростан-3а,17в-диола согласно варианту реализации 18В, которая содержит менее чем примерно 10 мас.% или менее чем примерно 7 мас.% других кристаллических форм 17а-этиниландростан-3а,17в-диола, возможно, как определяют аналитическим способом, описанным в настоящем изобретении, таким как порошковая рентгеновская дифракция, ДСК/ДТА, ТГА, рамановская спектроскопия и/или ЯМР спектроскопия в твердом теле.

20В. Кристаллическая форма VI 17а-этиниландростан-3а,17в-диола согласно варианту реализации 16В или 17В, характеризующаяся (1) порошковой рентгенограммой с характеристическими пиками примерно при 7,17, 9,78, 13,26, 14,25, 14,61, 15,00 и 18,69° 2θ, (2) ТГА термограммой с потерей массы при нагревании до температуры плавления, соответствующей полной потери диоксана из моносольвата, (3) спектром протонного ЯМР, полученным в СЭСТ,, с пиком примерно при δ=3,6 м.д., (4) ДСК или ДТА термограммами с эндотермой примерно при 164°С или (5) комбинацией вышеуказанных пунктов, таких как (1) и (2), (1) и (3), (1) и (4) или (2), (3) и (4).

21В. Кристаллический 17а-этиниландростан-3а,17в-диол согласно варианту реализации 1В или 2В, в виде кристаллов формы VII. Эта форма 17а-этиниландростан-3а,17в-диола представляет собой дегидрат. Согласно предпочтительным вариантам реализации изобретения указанная форма, по существу, не содержит аморфный 17а-этиниландростан-3а,17в-диол, возможно, как определяют аналитическим способом, описанным в настоящем изобретении, таким как порошковая рентгеновская дифракция, ДСК/ДТА, ТГА, рамановская спектроскопия и/или ЯМР спектроскопия в твердом теле.

22В. Кристаллическая форма VII 17а-этиниландростан-3а,17в-диола согласно варианту реализации 19А, которая содержит менее чем примерно 10 мас.% или менее чем примерно 7 мас.% других кристаллических форм 17а-этиниландростан-3а,17в-диола, возможно, как определяют аналитическим способом, описанным в настоящем изобретении, таким как порошковая рентгеновская дифракция, ДСК/ДТА, ТГА, рамановская спектроскопия и/или ЯМР спектроскопия в твердом теле.

23В. Кристаллическая форма VII 17а-этиниландростан-3а,17в-диола согласно варианту реализации изобретения 20В или 21В, характеризующаяся (1) порошковой рентгенограммой с характеристическими пиками примерно при 5,91, 9,78, 13,47, 14,16, 15,78, 17,85, 19,50 и 21,45° 2θ или (2) ТГА термограммой с незначительной потерей массы, потерей массы 2% или менее или потерей массы 0,3% или менее при нагревании до температуры плавления, (3) ДТА или ДСК термограммой, имеющей эндотерму примерно при 164°С, или комбинацией вышеуказанных пунктов, таких как (1) и (2), (1) и (3) или (1) (2) и (3).

24В. Кристаллический 17а-этиниландростан-3а,17в-диол согласно варианту реализации 1В или 2В в виде кристаллов формы VIII. Эта форма 17а-этиниландростан-3а,17в-диола представляет собой дегидрат. Согласно предпочтительным вариантам реализации изобретения указанная форма, по существу, не содержит аморфный 17а-этиниландростан-3а,17в-диол, возможно, как определяют аналитическим способом, описанным в настоящем изобретении, таким как порошковая рентгеновская дифракция, ДСК/ДТА, ТГА, рамановская спектроскопия и/или ЯМР спектроскопия в твердом теле.

24В. Кристаллическая форма VIII 17а-этиниландростан-3а,17в-диола согласно варианту реализации изобретения 24В, которая содержит менее чем примерно 10 мас.% или менее чем примерно 7 мас.% других кристаллических форм 17а-этиниландростан-3а,17в-диола, возможно, как определяют аналитическим способом, описанным в настоящем изобретении, таким как порошковая рентгеновская дифракция, ДСК, ТГА, измерение температуры плавления, рамановская спектроскопия, метод Карла Фишера и/или элементный анализ.

25В. Кристаллическая форма VIII 17а-этиниландростан-3а,17в-диола согласно варианту реализации изобретения 23В или 24В, характеризующаяся (1) порошковой рентгенограммой с характеристическими пиками примерно при 11,13, 15,96, 16,62, 17,76 и 18,75° 2θ, (2) ТГА термограммой с незначительной потерей массы, потерей массы 2% или менее или потерей массы 0,3% или менее при нагревании до температуры плавления, (3) ДТА или ДСК термограммой, имеющей эндотерму примерно при 164°С, или комбинацией вышеуказанных пунктов, таких как (1) и (2), (1) и (3) или (1), (2) и (3).

- 31 018974

26В. Применение кристаллического 17а-этиниландростан-3а,17в-диола, или применение композиции, содержащей один или более наполнителей и кристаллический 17а-этиниландростан-3а,17в-диол, для получения лекарственного препарата для лечения или профилактики рака или предракового состояния, при этом возможно рак или предраковое состояние представляет собой рак предстательной железы, рак молочной железы, рак яичников, рак эндометрия, рак легких, рак поджелудочной железы или доброкачественную гипертрофию предстательной железы. Согласно этим вариантам реализации изобретения применение кристаллических форм I, III, IV, V, VII и VIII 17а-этиниландростан-3а,17в-диола является предпочтительным, при этом наиболее предпочтительной являются формы III. При таком применении могут присутствовать значительные количества двух кристаллических форм, но предпочтительно, если присутствует только одна кристаллическая форма, например монокристаллическая форма содержит по меньшей мере примерно 90 мас.% или по меньшей мере примерно 93 мас.% присутствующего этиниландростан-3 α,17 β -диола.

27В. Применение согласно варианту реализации изобретения 26В, отличающееся тем, что кристаллический 17а-этиниландростан-3а,17в-диол, по существу, не содержит аморфный 17а-этиниландростан3а,17в-диол, возможно, как определяют аналитическим способом, описанным в настоящем изобретении, таким как порошковая рентгеновская дифракция, ДСК/ДТА, ТГА, рамановская спектроскопия и/или ЯМР спектроскопия в твердом теле.

Дополнительные аспекты согласно изобретению, относящиеся к аморфному 17а-этиниландростан3α,17β-диолу, включают следующие пронумерованные варианты реализации изобретения.

1С. Аморфный 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диол.

2С. Аморфный 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диол согласно варианту реализации 1С, отличающийся тем, что аморфный 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диол, по существу, не содержит кристаллического 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диола, как определено способом порошковой рентгеновской дифракции, при этом возможно аморфный 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диол, по существу, не содержит кристаллической формы I и/или формы III 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диола.

3С. Аморфный 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диол согласно варианту реализации 1С или 2С, отличающийся тем, что аморфный 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диол содержит менее чем примерно 8 мас.% кристаллического 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диола.

4С. Аморфный 17а-этиниландростан-3а,17в-диол согласно варианту реализации 1С, 2С или 3С, отличающийся тем, что аморфный 17а-этиниландростан-3а,17в-диол содержит менее чем примерно 5 мас.% кристаллического 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диола.

5С. Фармацевтический состав, содержащий один или более наполнителей и аморфный 17а-этинил5а-андростан-3а,17в-диол, при этом возможно аморфный 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диол представляет собой вещество, описанное в варианте реализации 1С, 2С, 3С или 4С.

6С. Продукт, аморфный 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диол, полученный согласно способу, включающему стадию добавления, при перемешивании, 10% по объему воды к отфильтрованному раствору соединения 1 в метаноле с концентрацией примерно 0,25 мг/мл.

7С. Продукт согласно варианту реализации изобретения 6С, отличающийся тем, что аморфный 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диол (1), по существу, не содержит кристаллический 17а-этиниландростан-3а,17в-диол, как определено способом порошковой рентгеновской дифракции, или (2) содержит менее чем примерно 8 мас.% кристаллического 17а-этинил-5а-андростан-3а,17вдиола, или (3) содержит менее чем примерно 5 мас.% кристаллического 17а-этинил-5а-андростан3α,17β-диола, при этом возможно кристаллический 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диол представляет собой 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диол в форме I и/или форме III.

8С. Применение аморфного 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диола или применение композиции, содержащей один или более наполнителей и аморфный 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диол, для получения лекарственного препарата для лечения или профилактики рака, предракового состояния или гиперплазии, при этом возможно рак или гиперплазия представляет собой рак предстательной железы, рак молочной железы, рак яичников, рак эндометрия или доброкачественную гипертрофию предстательной железы. При таком применении предпочтительно, если аморфное вещество содержит по меньшей мере примерно 90 мас.% или по меньшей мере примерно 95 мас.% присутствующего 17а-этинил-5аандростан-3 α,17β -диола.

9С. Применение согласно варианту реализации изобретения 8С, отличающееся тем, что аморфный 17α-этиниландростан-3α,17β-диол, по существу, не содержит кристаллический 17а-этинил-5аандростан-3α,17β-диол, как определено способом порошковой рентгеновской дифракции, или отличающееся тем, что аморфный 17α-этинил-5α-андростан-3α,17β-диол содержит менее чем примерно 8 мас.% или менее чем примерно 5 мас.% кристаллического 17α-этинил-5α-андростан-3α,17β-диола.

- 32 018974

Примеры

Пример 1. Синтез 17-этинил-5а-андростан-3а,17в-диола.

Стадия А. Синтез 3а-триметилсилиокси-андрост-5-ен-17-она (ТМС-3а-ДГЭА).

3а-ДГЭА смешивали с 1,1,1,3,3,3-гексаметилдисилазаном (ГМДС) и сахарином (в качестве катализатора) в ацетонитриле. Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение нескольких часов при перемешивании в атмосфере азота. Выделившийся аммиак удаляли при небольшом вакууме. Затем объем уменьшали при помощи дистилляции, с последующим охлаждением смеси и получением осажденного продукта посредством фильтрации. Фильтрованный осадок продукта ТМС-3а-ДГЭА промывали холодным ацетонитрилом и высушивали теплым азотом с получением титульного соединения.

Стадия В. н-Бутиллитий медленно добавляли к Ме₃,8|-С^СН в ТГФ в атмосфере азота приблизительно при 0°С для получения ацетилида лития Ме₃81-С^С-Ь1. Температуру поднимали до примерно 20°С и добавляли ТМС-3а-ДГЭА в виде раствора в ТГФ и перемешивали в течение примерно 3 ч. Реакцию гасили повышением температуры до примерно 40°С с последующим медленным добавлением метанола. Выделившийся ацетилен удаляли при небольшом вакууме. Затем медленно добавляли концентрированный КОН до тех пор, пока не снизилось газовыделение, и уменьшали объем на примерно 50% вакуумной дистилляцией примерно при 45°С. Медленно добавляли избыток 6н. НС1, поддерживая температуру примерно при 40°С. Реакционную смесь разбавляли водой и охлаждали до примерно 5°С перед получением продукта посредством фильтрации и промывания отфильтрованного осадка холодной смесью 50/50 метанол:вода. Продукт высушивали теплым азотом и получали 17в-этиниландрост-5-ен3а,17а-диол.

Стадия С. К 9,0 кг титульного соединения в реакторе объемом 250 л добавляли 71,2 кг метанола. Смесь при перемешивании нагревали с обратным холодильником до тех пор, пока не растворилось твердое вещество. После охлаждения до 55-60°С содержимое реактора отфильтровывали через фильтр с размером пор 25 мкм, и затем реактор промывали 2,4 кг МеОН, нагретого до 55-60°С, и фильтровали, как указано выше, с объединением фильтратов. К объединенным фильтратам, перемешивающимся в реакторе объемом 250 л, добавляли в течение 30-60 мин 81,0 кг деионизированной воды с образованием суспензии, поддерживая температуру 35-60°С. Затем суспензию охлаждали до 0-5°С в течение по меньшей мере 2 ч и поддерживали эту температуру в течение по меньшей мере 1 ч, после чего твердое вещество собирали фильтрацией. Отфильтрованный осадок промывали, суспендируя с 10 кг деионизированной воды (повторяли 2 раза). Отфильтрованный осадок оставляли высушиваться в вакууме примерно при 28,5 мм рт.ст. примерно при 45°С до потери массы при высушивании 0,5% или менее. Полученный продукт представлял собой 8,4 кг титульного вещества в кристаллической форме.

Кристаллическая форма соединения 1, полученная с применением указанной методики синтеза, имеет порошковую рентгенограмму низкого разрешения, представленную на фиг. 1. Перечень пиков в полученной методом порошковой рентгеновской дифракции рентгенограмме, изображенной на фиг. 1, приведен в табл. 1.

Таблица 1

Перечень пиков на рентгенограмме низкого разрешения, полученной для продукта синтеза

2Θ	Интенсивность(%)
9.38 + 0.10	9
9.66 ±0.10	21
11.32 ±0.10	30
13.44 + 0.10	100
15.94 ±0.10	57
16.46 + 0.10	37
17.38 + 0.10	21
18.66±0.10	17
19.40 ±0.10	40
19.44 ±0.10	40
20.74 + 0.10	10
21.44 ±0.10	11
21.56 ±0.10	13
24.76 ±0.10	10
25.42 + 0.10	8
26.64 ±0.10	12
27.04 ±0.10	8
27.68 ±0.10	13
27.92 ±0.10	10
28.94 ±0.10	6
29.68 ±0.10	7
33.26 + 0.10	6
34.00 + 0.10	10
35.40 ±0.10	ю
36.44 + 0.10	8
37.84 ±0.10	10
38.64 + 0.10	7

- 33 018974

Термический анализ продукта синтеза представляет полученную методом термогравиметрического анализа (ТГ А) термограмму, демонстрирующую незначительную потерю массы в диапазоне от примерно 35 до примерно 105°С при линейном изменении температуры 10°С/мин, и полученную методом дифференциального термического анализа (ДТА) термограмму, содержащую характеристическую эндотерму примерно при 164°С и не имеющую других характерных особенностей. Таким образом, термический анализ показывает, что, с наибольшей вероятностью, основной или единственной полиморфной формой в продукте является дегидрат. Так, данные порошковой рентгеновской дифракции, ДТА и ТГА соответствуют кристаллической форме ΙΙΙ, рассматриваемой в последующих примерах, в качестве преобладающей или единственной кристаллической формы в продукте синтеза.

Пример 2. Получение и анализ кристаллической формы III 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диола (соединения 1 в форме ΙΙΙ).

Соединение 1 (65,8 г), продукт синтеза, полученный в предыдущем примере, высушивали в вакууме при 80°С до постоянной массы, что, как правило, требовало нагревания всю ночь, и получали 57,9 г. Это высушенное вещество растворяли в 230 мл ЕЮАс со степенью чистоты для ВЭЖХ при 80°С, при перемешивании посредством вихревого движения. Горячий раствор фильтровали через воронку с крупнозернистым пористым стеклянным фильтром для удаления остатков твердого вещества, затем переносили в колбу на 2 л и возобновляли нагревание при 80°С. Добавляли гептан со степенью чистоты для ВЭЖХ (1,158 л) в примерно 100 мл аликвоты при вихревом движении. После завершения добавления смесь оставляли охлаждаться до температуры окружающей среды и оставляли отстаиваться на ночь. Кристаллическое вещество собирали посредством фильтрации, высушивали на воздухе в течение 20 мин и в вакууме в течение ночи с получением 48,8 г формы III 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диола. Форму III также получали при растворении соединения 1 (44,0 мг) в тетрагидрофуране (600 мкл). Раствор фильтровали через нейлоновый фильтр с размером пор 0,2 мкм в чистую ампулу. Растворитель медленно испаряли в условиях окружающей среды, получая гель, который высушивали в вакууме при температуре окружающей среды в течение 4 дней и получали соединение 1 в кристаллической форме III.

Кроме того, форму III можно получить путем воздействия паром на полученную методом плавления-закалки пробу соединения 1, как описано в следующем примере для аморфного вещества.

Результаты исследования методом порошковой рентгеновской дифракции высокого разрешения формы III, полученной согласно предыдущей процедуре, приведены на фиг. 2. Перечень пиков этой порошковой рентгенограммы приведен в табл. 2. Характеристические пики расположены при 9,30, 9,85, 11,33, 13,45, 15,96, 16,16, 16,48 и 17,42±0,10° 2θ.

Таблица 2

Перечень пиков на порошковой рентгенограмме высокого разрешения, полученной для формы III

2©	с/участок (А)	Интенсивность (%)
9.30 + 0.10	9.506 1 0.103	18
9.70 + 0.10	9.122 + 0.095	8
9.8510.10	8.976 1 0.092	15
11.33 + 0.10	7.807 + 0.069	53
13.4510.10	6.584 + 0.049	100
15.9610.10	5.552 + 0.035	29
16.16 + 0.10	5.484 + 0.034	39
16.48 + 0.10	5.379 + 0.033	91
17.42 + 0.10	5.092 + 0.029	24
18.7010.10	4.744 1 0.025	5
18.95 + 0.10	4.682 + 0.025	11
19.46 + 0.10	4.563 ± 0.023	8
19.78 + 0.10	4.488 1 0.023	1
20.75 + 0.10	4.281 10.021	7
21.08 + 0.10	4.214 + 0.020	2
21.60 + 0.10	4.114+0.019	2
22.7910.10	3.902+0.017	2
24.62 + 0.10	3.616+0.015	1
24.80 + 0.10	3.590 + 0.014	6
25.01 +0.10	3.560 + 0.014	8
25.39 + 0.10	3.50810.014	3
25.65 + 0.10	3.474 + 0.013	5
26.6710.10	3.342 + 0.012	7
27.09 + 0.10	3.291 10.012	3
27.69 + 0.10	3.221 + 0.011	2
28.04 + 0.10	3.183 + 0.011	3
28.93 + 0.10	3.086 + 0.010	5
29.84 + 0.10	2.994 + 0.010	2

Кристаллическую форму III и все остальные кристаллические формы 17а-этинил-5а-андростан3а,17в-диола, такие как форма I, форма IV, форма V, форма VI, форма VII и форма VIII, можно охарактеризовать, по меньшей мере частично, 1 или более, как правило 2, 3, 4, 5 или 6, явными, репрезентатив

- 34 018974 ными или характеристическими пиками на порошковой рентгенограмме со ссылкой на положения пиков (в градусах 2 тета) и возможно на интенсивности пиков.

Полученные методами дифференциальной сканирующей калориметрии (ДСК) и ТГА термограммы для формы III представлены на фиг. 3. ТГА показывает незначительную потерю массы в диапазоне температур от примерно 35 до примерно 105°С, указывающую на то, что, с наибольшей вероятностью, полиморфные формы в твердой смеси представляют собой дегидраты. ДСК демонстрирует характеристическую эндотерму примерно при 164°С и не имеет других характерных особенностей, что также указывает на безводное вещество.

Фиг. 4 представляет собой полученный методом протонной ФП-ЯМР спектроскопии (СЭС1₃) спектр формы III 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диола, который не имеет дополнительных резонансных сигналов из-за растворителя, что также подтверждает, что форма III не является сольватом.

Фиг. 5 представляет собой полученный методом рамановской спектроскопии спектр формы III 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диола. Положение пиков на этом рамановском спектре приведено в табл. 2В.

Таблица 2В

Положение (см4)	Интенсивность	Положение (см4)	Интенсивность
131.4	0.983	1093.1	0.362
206.2	1.448	1110.6	0.655
236.0	2.170	1150.0	1.014
272.3	0.808	1166.4	1.105
324.1	0.736	1189.8	0.775
373.9	0.806	1235.8	0.972
384.0	0.858	1254.5	1.603
395.4	1.003	1293.4	0.592
432.1	1.040	1317.3	0.559
454.7	0.879	1335.1	0.863
466.7	0.672	1352.8	0.751
489.7	1.598	1376.3	0.686
510.4	0.517	1386.0	0.691
526.1	1.600	1434.8	1.856
549.1	1.194	1457.4	1.468
602.5	1.328	1469.5	0.969
619.2	1.152	2103.9	2.626
648.3	1.225	2648.4	0.150
657.5	0.978	2857.1	1.486
702.9	1.360	2864.7	1.509
733.2	2.078	2942.9	2.821
797.6	0.392	2964.2	1.509
825.1	0.598	2982.8	0.774
833.0	0.670	3303.4	0.581
874.3	0.327
890.8	0.631
907.5	0.584
928.8	0.459
963.3	0.825
986.2	0.430
1006.9	0.754
1038.0	0.615
1051.5	0.554

Рассчитанные теоретически процентные содержания соединения 1 в виде безводных, полугидратных и моногидратных форм по сравнению со значениями, измеренными методом элементного анализа, даны в табл. 3. В случае безводного соединения 1 измеренные процентные значения для твердого состояния, полученного согласно методике, описанной выше, находятся в пределах рекомендованных Американским химическим обществом значений 0,4% для теоретически рассчитанного процентного содержания углерода и водорода. Соответственно, элементный анализ подтверждает, что кристаллическая форма III, полученная согласно действующей процедуре, представляет собой безводную твердую форму соединения 1, как показано с помощью ДСК/ТГА термограмм и дополнительно подтверждено низким содержанием остаточной воды 0,20%, определенным с применением анализа Карла Фишера.

Таблица 3 Рассчитанное и фактическое процентное содержание (%) С и Н для формы III

Мол. форма	СлНзсОз	С^НэАЧ/гНгО	СиНзА^о	Измеренное
Углерод %	79.70	77.49	75.40	79.3
Водород %	10.11	10.22	10.25	10.3

- 35 018974

Поскольку кристаллическая форма III 17а-этиниландростан-3а,17в-диола представляет собой дегидрат, она не содержит органического растворителя, такого как метанол или диоксан, и таким образом имеет преимущество, которое заключается в том, что она не содержит дополнительного органического вещества, которое может воздействовать на биологическую активность соединения 1 или которое может увеличить собственную токсичность соединения. Так, при исследованиях на животных, когда можно применять относительно высокие уровни 17а-этиниландростан-3а,17в-диола для исследования противоопухолевой активности или токсичности, в частности, примерно 60 или примерно 100 мг/кг при введении мышам или крысам, такие высокие уровни могут вносить в сольват значительные количества растворителя, такого как метанол или диоксан. Указанные органические молекулы могут воздействовать на сам 17а-этиниландростан-3а,17в-диол ίη νίνο, если указанные растворители, например, индуцируют или иным образом модулируют ферменты печени, которые неблагоприятно воздействуют на метаболизм или фармакокинетику 17а-этиниландростан-3а,17в-диола. Однако дегидраты могут иметь сниженную термодинамическую стабильность относительно соответствующего гидрата, которая проявляется в гигроскопичности, особенно, при высокой относительной влажности. Гигроскопичные вещества могут вызывать ряд проблем, обусловленных уменьшением эффективности лекарственного вещества вследствие уменьшения его массы при поглощении воды или нестабильности фармацевтического продукта или стандартной лекарственной формы фармацевтического продукта (например, растрескивания таблеток).

Пример 3. Определение параметров элементарной ячейки формы III 17а-этинил-5а-андростан3α,17β-диола с помощью индицирования порошковых рентгенограмм.

При индицировании порошковой рентгенограммы высокого разрешения с помощью метода индицирования, рассмотренного в описании настоящего изобретения, получают следующие результаты индицирования, представленные в табл. 4.

Таблица 4

Результаты индицирования порошковой рентгенограммы, полученной для формы III соединения 1

Родственная и пространственная группа	Тригональная РЗ, (#144)/РЗг (#145)	Т ригональная/гексагональная Р3112(#151)/Р3г12(#153) Р3,21 (#152)/РЗЕ21 (#154)
ΖΊΖ	2/6	1/6
а (А)	10.962
Ь<А)	10.962
с(А)	27.356
а(градус)	90
р(градус)	90
Υ( гр аду с)	120
Объем (А3/ячейка)	2846.8
ν/Ζ (А3/предпол. ед.)	474.5
Предполагаемая композиция	С^Нз^г
Плотность (г/см3)	1.11

Кристаллическую форму 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диола в форме III можно дополнительно показать с помощью фотографии на фиг. 6, полученной при микроскопическом исследовании пробы формы III.

Пример 4. Получение и анализ кристаллической формы I 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диола (соединение 1 в форме I).

Форму I 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диола получали путем растворения соединения 1 (32 мг) в метаноле (200 мкл) при 65°С с применением масляной бани. Теплый раствор фильтровали через нейлоновый фильтр с размером пор 0,2 мкм в чистую ампулу, которую затем помещали в масляную баню. К раствору добавляли воду (200 мкл), что вызывало осаждение твердого вещества. Для увеличения выхода пробу охлаждали в холодильнике до 5°С. Образовавшееся твердое вещество собирали путем вакуумной фильтрации. Форму I также можно получить из формы III согласно методике, приведенной в последующем примере.

Порошковая рентгенограмма высокого разрешения для формы I, полученной из формы III, приведена на фиг. 7. Перечень пиков, наблюдаемых на порошковой рентгенограмме формы I, представлен в табл. 5. Характеристические пики расположены при 10,59, 12,33, 14,29, 14,72, 16,04, 16,41, 17,49, 20,27, 24,04 и 27,21±0,10° 2θ.

- 36 018974

Таблица 5

Перечень пиков на порошковой рентгенограмме высокого разрешения, полученной для формы I

2Θ	ά участок (А)	Интенсивность
6.92 ±0.10	12.770 + 0.187	1
8.73 ±0.10	10.133 ±0.117	1
9.69 ±0.10	9.130 + 0.095	1
10.59 ±0.10	8.354 ±0.079	21
11.34 ±0.10	7.802 ±0.069	1
12.33 ±0.10	7.180 ±0.058	11
13.46 + 0.10	6.576 + 0.049	2
13.73 + 0.10	6.449 ±0.047	4
14.29 + 0.10	6.197 ±0.043	30
14.72 + 0.10	6.019 ±0.041	100
15.79 + 0.10	5.614 ±0.036	5
15.91 ±0.10	5.570 ±0.035	11
16.04 ±0.10	5.526 + 0.034	48
16.41 +0.10	5.401 ±0.033	13
17.49 ±0.10	5.070 ±0.029	24
17.73 ±0.10	5.004 ± 0.028	1
18.29 ±0.10	4.852 + 0.026	5
19.15 ± 0.10	4.634 ±0.024	6
19.46±0.10	4.563 ±0.023	1
19.98 ±0.10	4.444 ± 0.022	4
20.27 + 0.10	4.380 ±0.021	13
21.15 ± 0.10	4.200 ±0.020	1
22.42 ±0.10	3.965 ±0.018	3
22.58 + 0.10	3.938 + 0.017	3
23.78 ±0.10	3.743 + 0.016	3
24.04 ±0.10	3.702 + 0.015	16
24.41 ±0.10	3.647 + 0.015	1
24.79 + 0.10	3.591 ±0.014	1
25.15 + 0.10	3.540 ± 0.014	8
25.41 ±0.10	3.505 ±0.014	6
25.77 ±0.10	3.457 ±0.013	1
26.10 + 0.10	3.414 + 0.013	4
26.62 ±0.10	3.349 ±0.012	1
27.21 ±0.10	3.277 + 0.012	15
27.64 + 0.10	3.227 ±0.011	1
27.96 ±0.10	3.191 +0.011	1
28.43 + 0.10	3.140 ±0.011	1
28.81 +0.10	3.099 ±0.011	2
29.04 ±0.10	3.075 ±0.010	4
29.37 ±0.10	3.042 ±0.010	1

ДСК и ТГА термограммы 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диола в форме 1 при линейном изменении температуры 10°С/мин изображены на фиг. 8. ТГА термограмма демонстрирует потерю массы примерно 12% в диапазоне температур между примерно 60 и примерно 105°С, которая сопровождается эндотермой при 88°С на ДСК термограмме с образованием формы, которая может представлять собой десольват или частичный десольват формы I. ДСК также имеет эндотерму при 115°С, которая не связана с ТГ А потерей массы и может представлять перестройку (перестройки) кристаллической решётки десольватированной формы с участием дальнейшей основной десольватации или без нее. ДСК также демонстрирует характеристическую эндотерму примерно при 164°С.

Полученный методом протонной ФП-ЯМР спектроскопии (СИС1₃) спектр формы I 17а-этинил-5аандростан-3а,17в-диола имеет дополнительный резонансный сигнал (δ=3,49 м.д.) по сравнению с протонным ЯМР спектром дегидратной формы III, который обусловлен метанольным растворителем. Таким образом, ЯМР спектроскопия показывает, что форма I представляет собой, по меньшей мере, метанольный сольват, что подтверждается данными ДСК/ТГА для формы I. Фиг. 9 представляет собой полученный методом рамановской спектроскопии спектр формы I 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диола. Положение пиков в этом рамановском спектре приведено в табл. 5В.

- 37 018974

Таблица 5В

Положен	Интенс	Положен	Интенсивн
147.8	1.523	1090.8	0.459
231.3	2.136	1107.0	0.663
324.5	0.628	1112.6	0.647
342.3	0.696	1148.2	1.3Ю
387.4	0.830	1169.8	1.170
399.5	0.912	1188.3	0.631
429.7	1.063	1230.5	0.940
457.3	0.989	1253.8	1.500
466.7	0.837	1281.1	0.678
493.6	0.761	1297.7	0.564
528.5	1.191	1314.1	0.451
548.5	0.745	1332.3	0.749
600.6	1.100	1342.5	0.791
613.9	1.081	1362.4	0.754
647.8	1.070	1383.7	0.567
657.6	1.053	1438.1	1.658
702.9	1.378	1455.5	1.799
730.1	1.912	2104.2	4.072
796.3	0.430	2856.5	2.259
809.2	0.406	2932.2	3.378
831.2	1.151	2957.5	3.178
890.3	0.628	2975.8	1.537
904.7	0.382	3306.9	0.266
916.2	0.442
929.5	0.581
965.5	0.711
1000.0	0.906
1024.7	1.275
1076.1	0.422

Индицирование порошковой рентгенограммы высокого разрешения с применением метода индицирования, рассмотренного в описании настоящего изобретения, и сравнения с результатом индицирования формы III, показывает, что форма I представляет собой метанольный сольват, в котором дополнительно присутствует вода, что согласуется с данными ДСК/ТГА, полученными для формы I. Таким образом, форма I представляет собой смешанный сольват метанол:вода соединения 1. Анализ по методу Карла Фишера (КФ) показывает присутствие примерно 5% воды. Рентгеновская кристаллография на монокристаллах, описанная в последующем примере, при исследовании формы I 17а-этинил-5а-андростан3α,17β-диола подтверждает, что форма I представляет собой метанол-водный сольват, который имеет стехиометрическое соотношение соединение 1:метанол:вода 1:1:1.

Кристаллическая форма I 17а-этиниландростан-3а,17в-диола имеет то преимущество, что в присутствии воды она является относительно термодинамически стабильным псевдополиморфом. Как правило, наиболее стабильную полиморфную форму выбирают для промышленной разработки, чтобы избежать проблем, связанных с изменениями в кристаллической форме, которые могут возникать в процессе производства лекарственного вещества или фармацевтического продукта или при хранении фармацевтического продукта, чтобы обеспечить достаточный срок хранения. Однако менее термодинамически стабильные полиморфные формы могут быть предпочтительными вследствие их предполагаемых больших истинных скоростей растворения, что может положительно воздействовать на пероральную биодоступность. Кроме того, если наиболее стабильная полиморфная форма представляет собой сольват (т.е. представляет собой псевдополиморф), необходимо учитывать токсикологические факторы, если сольват неводный. Если сольват представляет собой воду (т.е. псевдополиморф является гидратом), то рассматриваются и другие факторы, например, ожидаемое уменьшение истинной скорости растворения гидратов в водном растворе по сравнению с соответствующим дегидратом, что может отрицательно сказаться на пероральной биодоступности.

Пример 5. Превращение кристаллической формы III 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диола в форму I.

Форму III соединения 1 (77,1 мг) помещали в стеклянную ампулу с последующим добавлением МеОН (0,8 мл) и магнитной мешалки. Пробу помещали в масляную баню при 65°С и твердое вещество полностью растворялось. Добавляли дополнительное количество формы III так, чтобы сохранялся избыток твердого вещества, и смесь перемешивали в течение примерно 20 мин. Добавляли дополнительное количество МеОН (0,2 мл) и горячую смесь отфильтровывали в чистую ампулу, применяя нейлоновый фильтр с размерами пор 0,2 мкм, и затем фильтрат помещали в масляную баню при 65°С. Добавляли воду (1 мл) и смесь охлаждали до 20°С в течение 2 ч. Анализ порошковой рентгеновской дифракцией подтвердил, что форма III превратилась в форму I, как описано в предыдущем примере. Форму I также по- 38 018974 лучали из суспензии формы III в смеси метанол:вода 1:1 или 3:1, в которую вносили затравку проб, имеющих порошковые рентгенограммы формы IV, формы V, формы VI, формы VII и формы VIII, и перемешивали в течение 5 дней примерно при 65°С или 7 дней примерно при 5°С. Это взаимное превращение формы III в форму I, в присутствии различных других кристаллических форм, в отсутствие формы I, показывает, что форма I является наиболее стабильной полиморфной формой в смеси метанол-вода по сравнению с формами Ш-УЛГ

Пример 6. Рентгеновская кристаллография на монокристаллах кристаллической формы I 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диола (соединения 1 в форме I).

Получение монокристаллов.

Монокристалл формы I, подходящий для исследования способом рентгеновской кристаллографии на монокристаллах, получали путем медленного охлаждения раствора соединения 1 в смеси МеОН-вода (1:1) до температуры холодильного шкафа.

Сбор данных.

Бесцветную иголку С₂₂Н₃₈О₄ (С₂1Н₃₂О₂-1СН₃ОН-1Н₂О) с приблизительными размерами 0,25x0,08x0,06 мм, устанавливали на стекловолокно в произвольной ориентации. Предварительное исследование и сбор данных выполняли с применением излучения СиКа (λ=1,54184 А) на дифрактометре Кздаки Вар1й II™, оборудованном графитовым кристаллическим монохроматором с падающим излучением. Настройки выполняли на ΠΝυΧ™ РС с применением 8НЕБХ97™ (§Пе1Пг1ск, С.М. Ас1а Сгук!, 2008, А64, 112). Постоянные ячейки и матрицу ориентации для сбора данных получали с помощью настройки по методу наименьших квадратов, применяя установочные углы 2719 отражений в диапазоне 5°<θ<72°. Блочность тонкой настройки от СВУ8ТАЬСЬЕАВ™ (сгук!а1с1еаг: Ап [п1едга1е0 Ргодгат Гог 1Не Со11ес!юп апб Ргосеккшд оГ Агеа Эе1ес1ог Эа1а, В1даки СогрогаДоп©, 1997-2002) составляла 0,35°, что указывает на хорошее качество кристалла. Пространственную группу определяли с помощью программы ХРВЕР ™ (Вгикег, ХРВЕР ш 8НЕЬХТЬ ν. 6.12., Вгикег АХ8 Шс., Майкоп, №.!, И8А, 2002). Вследствие систематического присутствия следующих условий: 1100 11=2п; 0к0 к=2п; 0011=2п, и из последующей настройки по методу наименьших квадратов пространственную группу определяли как Р2₁2₁2₁ (№ 19). Данные получали до максимального значения 2θ 143,69°, при температуре 298±1 К.

Предварительная обработка данных.

Группу данных интегрировали с применением СВУ8ТАЬ-СЬЕАВ™. Получали совокупность 9981 отражений, из которых 3879 были уникальны. Данные обрабатывали путем внесения поправок на факторы Лоренца и поляризации. Коэффициент линейного поглощения составляет 0,577 мм^-1 для излучения Мо К_а. Коррекцию эмпирического поглощения выполняли с применением СВУ8ТАЬ-СЬЕАВ™. Коэффициенты пропускания составляли 0,856-0,966. Интенсивности эквивалентных отражений усредняли. Фактор совпадения при усреднении составлял 9,1% исходя из интенсивности.

Структурное решение и настройка.

Структуру определяли прямыми способами с применением 8Ш.2004 (Виг1а, М.С., е! а1. I. Арр1. Сгук!. 2005, 38, 381).

Стандартное отклонение измерения удельной массы (критерий согласия) составляло 0,735. Самый высокий пик при конечном расхождении Фурье имел высоту 0,16 е/А³. Минимальный отрицательный пик имел высоту -0,17е/А³.

Рассчитанную порошковую рентгенограмму получали для Си излучения с применением РО^ЭЕВСЕЬЬ™ 2.3 (Кгаик, ^.; №1хе, С. Ро\\'<1егСе11 Гог \УпЛо\\'к Уегкюп 2.3. Рейега1 Гог

Ма!епа1к Векеагсй апй ТекДпд, Вег1ш Сегтапу, ЕЙ, 1999) и сравнивали с экспериментально полученной порошковой рентгенограммой для подтверждения структуры. На фиг. 10 показано сравнение рассчитанной порошковой рентгенограммы формы I соединения 1, созданной на основе данных, полученных при исследовании на монокристаллах, с экспериментальной рентгенограммой для формы I. Все пики в экспериментальной рентгенограмме представлены в рассчитанной порошковой рентгенограмме, что указывает на то, что, вероятно, вещество в массе представляет собой одну фазу. В целом, различия в интенсивностях между рассчитанной и экспериментальной порошковыми рентгенограммами, как правило, обусловлены предпочтительной ориентацией. Предпочтительная ориентация представляет собой склонность кристаллов, обычно пластинок или игл, выстраиваться в одну линию с определенной степенью упорядоченности. В экспериментальной порошковой рентгенограмме такая предпочтительная ориентация пробы может существенно изменить интенсивности пиков, но не их положения.

Данные, полученные при исследовании монокристалла, и параметры, полученные в результате сбора данных, приведены в табл. 6, а атомные координаты - в табл. 7. Ромбические параметры ячейки и рассчитанные объемы составляют: а=7,4893(4) А, Ь=11,0586(8) А, с=25,5095(15) А, α=90,00°, β=90,00°, γ=90,00°, V=2112,7(2) А ³. Молекулярная масса по формуле асимметричного элемента в кристаллической структуре формы I соединения 1 составляет 366,55 а.е.м.-(элемент формулы)^-1 при Ζ=4, что позволяет получить рассчитанную плотность 1,152 г/см³.

Пространственная группа была определена как Р212121. Качество полученной структуры является высоким, что подтверждается В-значением 0,049 (4,9%). Как правило, В-значения в диапазоне от 0,02 до

- 39 018974

0,06 приводятся для наиболее надежно установленных структур С1и8кег, ТР., е1 а1. Сгуба1 81гис1иге Аиа1у818: А Рбтег, 2^иб еб.; ОхГогб Ипщегайу рге§8: №\ν Υο^к. 1985; р. 87.

Таблица 6

Данные кристаллической структуры и параметры, полученные при сборе данных, для формы I соединения 1 формула СШЛ

молекулярная масса по формуле соединения	366.55
пространственная группа а,А	Ρ2,Ρ2Τ Р2, (Νο. 19) 7.4893(4)

Ь,А

11.0586(8)

С,А

25.5095(15) ν,Α³

Ζ бри, ГСМ·³ размеры кристалла, мм температура, К излучение (длина волны, А) монохроматор линейный коэффициент поглощения, мм*'

2112.7(2)

1.152

0.25x0.08x0.06 298.

Си К_а (1.54184) графит

0.577

применяемая поправка на поглощение коэффициенты пропускания: мин., макс, дифрактометр диапазон П, к, I

эмпирическая 0.856, 0.966 ИоШие КарраССО -9-6-8-13-28-31

диапазон 2Θ, градус	10.40-143.69
блочность, градус	0.35
применяемые программы	8ΗΕΙ.ΧΊΊ.
Ет	808.0

взвешивание /[ε²(Γο^)+(0-0151 Р)²+О.ООООР], где Р={ЕО^;+2Е_С ²)/3 собранные данные уникальные данные

Ей

9981

3879

0.091

данные, применяемые при детализации отсечка, применяемая при расчетах Н-фактора данные с Ь2.0з(1)	3879 Ео 2>2.0з(Ео 2) 1501
количество переменных самый большой сдвиг/езб в конечном цикле Н(Ео) АДРог) критерий согласия	258 0.00 0.049 0.077 0.735

- 40 018974

Таблица 7 Позиционные параметры и их расчетные стандартные отклонения

для формы I соединения 1
Атом	X	У	Ζ	и(А2)
οινν	-0.0438(4)	0.8199(3)	0.96234(12)	0.0749(12)
031	-0.3061(4)	1.3642(3)	0.52670(11)	0.0586(9)
0171	0.2218(3)	1.8239(3)	0.86469(9)	0.0557(9)
0911	0.4544(4)	1.7303(3)	0.89214(13)	0.0793(10)
С1	-0.4852(4)	1.5524(3)	0.59621(10)	0.0497(10)
С2	-0.5224(4)	1.5235(3)	0.53815(10)	0.0505(12)
СЗ	-0.3548(5)	1.4846(3)	0.50871(12)	0.0528(12)
С4	-0.2024(4)	1.5732(3)	0.51687(11)	0.0474(9)
С5	-0.1678(4)	1.5973(3)	0.57550(11)	0.0411(9)
С6	-0.0029(4)	1.6772(3)	0.58395(10)	0.0489(10)
С7	0.0429(4)	1.6841 (3)	0.64227(10)	0.0452(10)
СЗ	-0.1187(4)	1.7286(3)	0.67539(10)	0.0387(9)
С9	-0.2860(4)	1.6515(3)	0.66401(10)	0.0372(9)
СЮ	-0.3361(4)	1.6463(3)	0.60464(11)	0.0387(9)
СП	-0.4445(3)	1.6896(3)	0.69980(10)	0.0442(9)
С12	-0.3944(4)	1.6880(3)	0.75845(10)	0.0483(9)
С13	-0.2289(4)	1.7654(3)	0.76893(11)	0.0379(9)
С14	-0.0767(4)	1.7226(3)	0.73391(11)	0.0414(9)
С15	0.0892(4)	1.7883(3)	0.75501(11)	0.0570(12)
С16	0.0511(4)	1.8020(3)	0.81432(11)	0.0577(12)
С17	0.1400(4)	1.7528(3)	0.82396(12)	0.0459(10)
С18	-0.2752(4)	1.8999(3)	0.76101(11)	0.0570(10)
С19	-0.3946(4)	1.7704(3)	0.58417(10)	0.0535(10)
С171	-0.1343(6)	1.6254(4)	0.84154(12)	0.0592(13)
С172	-0.1224(7)	1.5266(4)	0.85662(14)	0.0917(17)
С912	0.4047(6)	1.6084(4)	0.89996(14)	0.0987(18)
Н31	-0.219(7)	1.347(5)	0.521(2)	0.18(3)*
Н171	-0.311(5)	1.785(4)	0.8736(14)	0.105(18)*
Н1Ш1	-0.081 (5)	0.767(3)	0.9783(13)	0.072(15)*
Н1М/2	-0.082(5)	0.835(4)	0.9320(13)	0.119(18)*
Н911	0.441(7)	1.770(4)	0.9170(16)	0.14(2)*
НЗ	-0.382	1.481	0.471	0.064
Н5	-0.140	1.519	0.591	0.049
Н8	-0.144	1.813	0.666	0.046
Н9	-0.255	1.569	0.674	0.045
Н14	-0.059	1.637	0.742	0.050
Н1А	-0.594	1.582	0.612	0.060
Н1В	-0.452	1.478	0.614	0.060
Н2А	-0.610	1.459	0.536	0.061
Н4А	-0.231	1.649	0.499	0.057
Н4В	-0.095	1.541	0.501	0.057
Н6А	0.097	1.644	0.565	0.059
Н6В	-0.026	1.758	0.571	0.059
Н7А	0.142	1.739	0.647	0.054
Н7В	0.079	1.605	0.655	0.054
Н11А	-0.483	1.770	0.690	0.053
нив	-0.544	1.635	0.694	0.053
Н12А	-0.494	1.718	0.779	0.058
Н12В	-0.371	1.605	0.769	0.058
Н15А	0.103	1.867	0.738	0.069
Н15В	0.196	1.741	0.749	0.069
Н16А	0.058	1.886	0.825	0.069
Н16В	0.137	1.756	0.835	0.069
ΗΙ72	-0.113	1.447	0.869	0.110
Н18А	-0.369	1.922	0.785	0.085
Н18В	-0.314	1.913	0.725	0.085
Н18С	-0.171	1.948	0.768	0.085
Н19А	-0.506	1.793	0.600	0.080
Н19В	-0.410	1,767	0.547	0.080
Н19С	-0.305	1.829	0.593	0.080
Н91А	0.507	1.557	0.896	0.148
Н91В	0.315	1.586	0.875	0.148
НЭЮ	0.358	1.599	0.935	0.148

Помеченные звездочкой атомы детализированы изотропно

Атомы водорода включены в расчет структурных факторов, но не детализированы.

Изображение ОКТЕР элементарной ячейки формы I дано на фиг. 11. Диаграмма ОКТЕР была получена с применением программы ОКТЕР III™ ОоНпкоп, С.К. ОКТЕР III, Керой ОКЫЬ-6895, Оак К1бде Иайопа1 ЬаЬога1огу, ТЫ, И.8.Л. 1996; Рапира, ЬЭ. ОРТЕР-3 Гог \¥тбо\тк У1.05, 1. Арр1. Сгук!. 1997, 30, 565) в рамках пакета программ РЬАТОИ (8рек, А.Ь. РЬАТОК Мо1еси1аг СтарЫск Ргодгат. Икеск! Ишуегкйу, ийесЫ, ТНе №!кег1апбк, 2008; 8рек, А.Ь., 1. Арр1. Сгук!. 2003, 36, 7). Атомы изображены в ви

- 41 018974 де анизотропных термических эллипсоидов с вероятностью местоположения 50%. Упаковочные диаграммы были получены с применением программных средств моделирования САМЕКОЫ™ (^Уа(к1п, Ό.Ρ; Ргои!, С.К.; Реагсе, Ь. I. САМЕКОЫ, СЬетка1 Сгу§1а11одгарЬу ЬаЬогаФгу, ишуегЩу оГ ОхГогб, ОхГогб, 1996).

Молекула, наблюдаемая в асимметричном элементе структуры монокристалла, соответствует молекулярной структуре соединения 1, хотя на фиг. 11 показана противоположная стереохимическая конфигурация. Эта конфигурация была выбрана произвольно, поскольку абсолютную конфигурацию невозможно установить, так как кристалл представлял собой рацемический двойник. Асимметричный элемент, показанный на фиг. 11, содержит одну молекулу соединения 1 с одной молекулой воды и одной молекулой метанола.

Пример 7. Получение и анализ кристаллической формы IV 17а-этиниландростан-3а,17в-диола (соединения 1 в форме IV).

Твердое вещество с порошковой рентгенограммой формы IV получали при быстром испарении из раствора соединения 1 в растворе ацетонитрил:вода 2:3 или при ускоренном осаждении ацетонитрилового раствора соединения 1 путем добавления воды. Альтернативным образом, форму IV получали из соединения 1 (34 мг), растворенного в ацетонитриле (6 мл). Этот раствор фильтровали через нейлоновый фильтр с размерами пор 0,2 мкм в чистую ампулу, после чего добавляли воду (9 мл). Образовавшийся раствор оставляли испаряться в условиях окружающей среды, и твердое вещество выделяли путем вакуумной фильтрации. Форму IV также получали растворением соединения 1 (31 мг) в ацетоне (500 мкл), фильтрованием раствора через нейлоновый фильтр с размерами пор 0,2 мкм в чистую ампулу, и последующим добавлением воды (250 мкл). Полученный таким образом раствор оставляли испаряться в условиях окружающей среды. Твердое вещество выделяли путем вакуумной фильтрации.

Для правильно сформированных кристаллов при увеличении 10Х была обнаружена морфология игольчатого кристалла с двойным лучепреломлением и затуханием, наблюдаемыми в поляризованном свете вследствие анизотропной природы этих кристаллов.

Порошковая рентгенограмма низкого разрешения для формы IV, полученной с применением ранее описанной методики, приведена на фиг. 12. Перечень пиков, наблюдаемых на порошковой рентгенограмме формы IV, дан в табл. 8. Характеристические пики находятся при 8,31, 9,84, 11,28, 13,02, 13,86, 14,73, 15,00, 16,14, 16,53, 17,01, 17,76 и 18,72±0,10° 2θ,

- 42 018974

Таблица 8 Перечень пиков порошковой рентгенограммы низкого разрешения, полученной для формы IV

2Θ	д участок (А)	Интенсивность(%)
8.31 ±0.10	10.640 ±0.129	35
8.91 ±0.10	9.925 + 0.112	5
9.84 ±0.10	8.989 ±0.092	82
11.28±0.10	7.844 ±0.070	39
12.36 ±0.10	7.161 ±0.058	10
13.02 ±0.10	6.800 ± 0.052	57
13.86 ±0.10	6.390 ±0.046	28
14.25 + 0.10	6.216 ±0.044	11
14.73 + 0.10	6.014 + 0.041	93
15.00 ±0.10	5.906 ± 0.039	66
15.36 ±0.10	5.769 ± 0.038	22
16.14 + 0.10	5.492 + 0.034	70
16.53 ±0.10	5.363 ±0.032	75
17.01 + 0.10	5.213 ± 0.031	100
17.76 ±0.10	4.994 ± 0.028	35
18.12 ±0.10	4.896 ± 0.027	11
18.72 ±0.10	4.740 ± 0.025	34
19.35 ±0.10	4.587 ± 0.024	4
20.04 ±0.10	4.431 ±0.022	21
20.31 ±0.10	4.373 ± 0.021	6
20.76+0.10	4.279 ± 0.020	15
21.36 ±0.10	4.160 ±0.019	, 2
22.14 ±0.10	4.015 ±0.018	20
22.95 ± 0.10	3.875 ±0.017	3
23.67 ±0.10	3.759 ±0.016	3
23.79 ± 0.10	3.740 ±0.016	7
24.27 ±0.10	3.667 ±0.015	3
24.63 ±0.10	3.615 ±0.015	6
25.14+0.10	3.542 ±0.014	18
26.10 ±0.10	3.414 ±0.013	6
26.73 ±0.10	3.335 + 0.012	7
27.24 + 0.10	3.2740.012	7
27.66 ± 0.10	3.225 ±0.011	12
28.41 ±0.10	3.142 ±0.011	8
28.92 ± 0.10	3.087 ±0.010	7
14.04 ±0.10	6.308 ±0.045	7
14.34 + 0.10	6.177 + 0.043	5
15.21 +0.10	5.825 ±0.038	78
15.99 ±0.10	5.543+0.035	23
16.47 ±0.10	5.382 ± 0.033	23
17.28 ±0.10	5.132 ±0.030	65
18.93 ±0.10	4.688 ± 0.025	100
19.32 ±0.10	4.594 ± 0.024	18
20.85 ± 0.10	4.261 ± 0.020	27
21.66 ±0.10	4.103 ±0.019	6
22.41 ±0.10	3.967 ±0.018	5
23.01 ± 0.10	3.865 ±0.017	13
23.22 + 0.10	3.831 ±0.016	5
23.61 ±0.10	3.768 + 0.016	3
24.12 ±0.10	3.690 ±0.015	6
24.51 ±0.10	3.632 ±0.015	27
25.32 ±0.10	3.518 + 0.014	7
25.65 ±0.10	3.473 ±0.013	4
26.13 ±0.10	3.410 ±0.013	4
26.61 ±0.10	3.350 ±0.012	2
27.33 ±0.10	3.263 ±0.012	16
27.75 ±0.10	3.215 ±0.011	5
28.05 ±0.10	3.181 ±0.011	5
29.25 ±0.10	3.053 ±0.010	21

ДТА и ТГА термограммы для формы IV 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диола при линейном изменении температуры 10°С/мин, представлены на фиг. 13. ТГА термограмма формы IV демонстрирует примерно потерю массы 5-6% при изменении температуры от примерно 60 до примерно 105°С или примерно потерю массы 7% при изменении температуры от примерно 40 до примерно 160°С, сопровождающуюся широкой эндотермой на ДТА термограмме с центром примерно при 88°С, за которой следует эндотерма примерно при 106°С. Эти переходы соответствуют моногидратному псевдополиморфу, который переходит в более термодинамически стабильную полиморфную форму после дегидратации. Кроме того, характеристическую эндотерму наблюдают примерно при 164°С.

Поскольку кристаллическая форма IV 17а-этиниландростан-3а,17в-диола представляет собой моногидрат, она не содержит органического растворителя, такого как метанол или диоксан, и, таким образом, имеет то преимущество, что она не содержит органическое вещество, которое может влиять на биологическую активность соединения 1 или которое может увеличивать его собственную токсичность. Как предполагают, присутствие воды в кристаллической решетке вносит свой вклад в стабильность этой кристаллической формы в отношении поглощения воды при длительном хранении, поскольку вода уже при

- 43 018974 сутствует в кристаллической решетке и, таким образом, эта форма не должна быть такой гигроскопичной, как соответствующий дегидрат или более низший гидрат. Основываясь на этом ожидаемом физическом свойстве твердого вещества с морфологией, показанной на фиг. 14, предполагают, что кристаллическая форма IV также имеет предпочтительную истинную скорость растворения вследствие высокого соотношения площади ее поверхности к объему по сравнению с морфологией других кристаллов. Однако, характеристики текучести для механической обработки (например, смешивания) могут быть не такими благоприятными по сравнению с морфологией других кристаллов вследствие направленной асимметрии формы кристаллов.

Пример 8. Получение кристаллической формы V 17а-этиниландростан-3а,17в-диола (соединение 1 в форме V).

Твердое вещество, имеющее порошковую рентгенограмму формы V, получали путем добавления формы III соединения 1 (41 мг) к 2,2,2-трифторэтанолу (1600 мкл). Добавляли дополнительное количество формы III соединения 1 с образованием суспензии, которую перемешивали при 30°С в течение 6 дней. Твердое вещество выделяли путем вакуумной фильтрации, высушивали на воздухе и анализировали методом порошковой рентгеновской дифракции. Не было обнаружено четко выраженной морфологии кристаллов для твердого вещества, полученного таким образом, при 10Х увеличении и не наблюдали двойное лучепреломление и затухание под поляризованным светом, что указывает на высоко неупорядоченное состояние кристаллов в этой твердой форме.

Порошковая рентгенограмма низкого разрешения для формы V, полученной с применением ранее описанной методики, приведена на фиг. 15. Перечень пиков, наблюдаемых на порошковой рентгенограмме для формы V, дан в табл. 9. Характеристические пики расположены при 5,82, 9,48, 11,49, 13,50, 15,21, 17,28 и 18,93±0,10° 2θ.

Таблица 9

Перечень пиков порошковой рентгенограммы низкого разрешения, полученной для формы V

2Θ	б участок (А)	Интенсивность(%)
5.82 ±0.10	15.186 + 0.265	81
8.04 ±0.10	10.997 + 0.138	9
9.48 + 0.10	9.330 ± 0.099	90
11.49 + 0.10	7.702 ±0.067	80
12.24 ±0.10	7.231 ± 0.059	2
13.50 ±0.10	6.559 + 0.049	38
14.04 ±0.10	6.308 + 0.045	7
14.34 ±0.10	6.177 ±0.043	5
15.21 +0.10	5.825 + 0.038	78
15.99 + 0.10	5.543 ± 0.035	23
16.47 ±0.10	5.382 ± 0.033	23
17.28 ±0.10	5.132 ±0.030	65
18.93 ±0.10	4.688 + 0.025	100
19.32 ±0.10	4.594 ± 0.024	18
20.85 ±0.10	4.261 + 0.020	27
21.66 ±0.10	4.103 ±0.019	6
22.41 ±0.10	3.967 ±0.018	5
23.01 ±0.10	3.865 ±0.017	13
23.22 ±0.10	3.831 +0.016	5
23.61 ±0.10	3.768 ±0.016	3
24.12 ±0.10	3.690 ±0.015	6
24.51 ±0.10	3.632 ±0.015	27
25.32 + 0.10	3.518 ±0.014	7
25.65 ±0.10	3.473 ±0.013	4
26.13 ±0.10	3.410 ±0.013	4
26.61 ±0.10	3.350 ±0.012	2
27.33 + 0.10	3.263 ± 0.012	16
27.75 ±0.10	3.215 ±0.011	5
28.05 ±0.10	3.181 ±0.011	5
29.25 ±0.10	3.053 ±0.010	21

ТГА термограмма для формы V 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диола при линейном изменении температуры 10°С/мин демонстрирует незначительную потерю массы при нагревании от примерно 40 до примерно 160°С, тогда как ДТА термограмма показывает характеристическую эндотерму примерно при 164°С и не имеет других характерных особенностей. Таким образом, кристаллическая форма V 17а-этиниландростан-3а,17в-диола представляет собой дегидрат (т.е. не содержит растворителя в своей кристаллической структуре). Как было обнаружено, при длительном стоянии проба формы V претерпевала полиморфный переход в форму III, как подтверждено повторным анализом методом порошковой рентгеновской дифракции.

Как предполагают, по сравнению с сольватом, содержащим органический растворитель, это вещество имеет то преимущество, что оно не содержит органический растворитель, такой как диоксан или метанол. При исследованиях на животных, когда можно применять относительно высокие уровни 17а-этиниландростан-3а,17в-диола, чтобы исследовать противоопухолевую или другую биологическую

- 44 018974 активность или токсичность вещества, такие высокие уровни могут вносить в сольват значительные количества растворителя, такого как метанол или диоксан. Такие органические молекулы могут воздействовать на сам 17а-этиниландростан-3а,17в-диол ίη νί\Ό. если указанные растворители, например, индуцируют или иным образом модулируют ферменты печени, которые неблагоприятно воздействуют на 17а-этиниландростан-3а,17в-диол или фармакокинетику. Однако дегидраты могут иметь сниженную термодинамическую стабильность относительно соответствующего гидрата, которая проявляется в гигроскопичности, особенно, при высокой относительной влажности. Гигроскопичные вещества могут также вызывать ряд проблем, обусловленных уменьшением эффективности лекарственного вещества вследствие уменьшения его массы при поглощении воды или нестабильностью фармацевтического продукта или стандартной лекарственной формы фармацевтического продукта (например, растрескивание таблеток). Компенсацией указанных недостатков является неупорядоченное состояние кристаллов формы V, которое может оказаться предпочтительным вследствие предполагаемой более высокой истинной скорости растворения, поскольку силы кристаллической решетки, которые необходимо преодолеть, будут меньше по сравнению с кристаллической формой с высокоупорядоченным состоянием кристаллов.

Пример 9. Получение и анализ кристаллической формы VI 17а-этиниландростан-3а,17в-диола (соединения 1 в форме VI).

Форму VI получали путем растворения соединения 1 (66 мг) в диоксане (2800 мкл) при обработке ультразвуком. Раствор фильтровали через нейлоновый фильтр с размерами пор 0,2 мкм в чистую ампулу и оставляли испаряться в условиях окружающей среды, получая гель, который затем высушивали в вакууме в течение 1 дня при температуре окружающей среды.

Наблюдали фрагменты кристаллов неправильной формы, но было невозможно разглядеть четко выраженной морфологии кристаллов при 10Х увеличении; однако наблюдали двойное лучепреломление и затухание под поляризованным светом, что указывает на анизотропную форму кристаллов, которая может казаться высоконеупорядоченной в массе из-за присутствия значительных количеств дефектов кристаллической решетки.

Порошковая рентгенограмма низкого разрешения для формы VI, полученной с применением ранее описанной методики, приведена на фиг. 16. Перечень пиков, наблюдаемых на порошковой рентгенограмме для формы VI, дан в табл. 10. Характеристические пики расположены при 7,17, 9,78, 13,26, 14,25, 14,61, 15,000 и 18,69±0,10° 2θ.

- 45 018974

Таблица 10 Перечень пиков порошковой рентгенограммы низкого разрешения, полученной для формы VI © с! участок (А) Интенсивность (%)

3.60	±	0.10	24.544	+	0.701	6
6.69	+	0.10	13.213	+	0.200	16
7.17	ί	0.10	12.329	+	0.174	36
7.50	+	0.10	11.787	+	0.159	19
9.15	+	0.10	9.665	+	0.107	4
9.78	+	0.10	9.044	+	0.093	43
13.26	+	0.10	6.677	+	0.051	100
13.95	+	0.10	6.348	+	0.046	21
14.25	±	0.10	6.216	+	0.044	57
14.61	+	0.10	6.063	±	0.042	69
15.00	+	0.10	5.906	+	0.039	44
15.39	+	0.10	5.758	+	0.037	9
15.99	±	0.10	5.543	±	0.035	14
16.44	±	0.10	5.392	+	0.033	9
16.83	±	0.10	5.268	+	0.031	8
17.04	+	0.10	5.204	+	0.030	17
17.28	+	0.10	5.132	+	0.030	11
17.67	+	0.10	5.019	+	0.028	16
18.27	+	0.10	4.856	+	0.026	25
18.69	+	0.10	4.748	+	0.025	84
19.53	+	0.10	4.545	+	0.023	14
19.92	+	0.10	4.457	+	0.022	6
20.31	±	0.10	4.373	+	0.021	7
20.52	±	0.10	4.328	+	0.021	9
20.91	±	0.10	4.248	+	0.020	18
21.39	+	0.10	4.154	+	0.019	12
21.57	+	0.10	4.120	+	0.019	12
21.78	±	0.10	4.081	+	0.019	20
22.65	+	0.10	3.926	+	0.017	11
23.55	+	0.10	3.778	±	0.016	8
23.91	±	0.10	3.722	+	0.015	11
24.66	+	0.10	3.610		0.014	7
25.50	±	0.10	3.493	+	0.014	7
26.01	+	0.10	3.426	+	0.013	3
26.28	+	0.10	3.391	+	0.013	3
26.61	+	0.10	3.350		0.012	3
27.12		0.10	3.288	+	0.012	5
27.39		0.10	3.256	+	0.012	6
28.17	±	0.10	3.168		0.011	7
29.10	+	0.10	3.069	+	0.010	4
29.64	+	0.10	3.014	+	0.010	8

При термическом анализе формы VI 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диола, показанном на фиг. 17, были получены ТГА термограмма с потерей массы примерно 5% в диапазоне температур от примерно 40 до примерно 85 °С и потерей массы примерно 12% в диапазоне температур от примерно 40 до примерно 180°С и ДТА термограмма (после коррекции калибровки) с широкой эндотермой с центром примерно при 70°С, сразу за которой следует слабовыраженная широкая экзотерма. Эти термические данные соответствуют сольвату, который десольватируется с перестройкой кристаллической решетки и образованием термодинамически более стабильного десольвата или частичного десольвата. ДТА термограмма также имеет последующую характеристическую эндотерму при 164°С.

'Н-ЯМР (СЭС1_з) спектр формы VI 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диола демонстрирует дополнительный резонансный сигнал (δ=3,64 м.д.) по сравнению со спектром протонного ЯМР дегидратной формы III из-за присутствия диоксанового растворителя. Перед растворением формы VI для проведения ЯМР анализа, пробу формы VI промывали СС1₄ для удаления растворителя, неспецифически абсорбированного на поверхности. Таким образом, протонная ЯМР спектроскопия показывает, что форма VI представляет собой диоксановый сольват, что подтверждено данными ДТА/ТГА, и, наиболее вероятно, представляет собой монодиоксановый сольват, основываясь на сочетании резонансного сигнала δ=3,64 м.д. резонанса и потери массы согласно ТГА. После длительного стояния при температуре и давлении окружающей среды пробу формы VI повторно анализировали способами ДТА/ТГА и протонной ЯМР спектроскопии. На этот раз повторный термический анализ не показал потерю массы при проведении ТГА и явления десольватации при проведении ДТА. Более того, в этот раз протонный ЯМР спектр имел значительное уменьшение резонансного сигнала δ=3,64 м.д. Таким образом, может происходить десольватация формы VI, если условия хранения являются неподходящими, при этом десольватация может сопровождаться полиморфным переходом в более термодинамически стабильную форму, такую как форма III.

- 46 018974

Как предполагают, форму VI в виде диоксанового сольвата можно применять в качестве внутреннего стандарта для определения количеств соединения 1 методом протонной ЯМР или ¹³С-ЯМР спектроскопии в пробах с неизвестным содержанием соединения 1. Применимость формы VI в качестве внутреннего стандарта при анализе протонной ЯМР спектроскопией будет обусловлена присутствием в протонном ЯМР спектре синглета с относительно высокой интенсивностью за счет восьми магнитно эквивалентных протонов, которые вносит растворитель диоксан, присутствующий в соединении 1 в точном соотношении 1:1 относительно формы VI, которую добавляют к пробе для количественного анализа. Применимость формы VI в качестве внутреннего стандарта в ¹³С ЯМР спектроскопии будет обусловлена присутствием синглета с относительно высокой интенсивностью в протон-несвязанных спектрах ¹³С-ЯМР за счет четырех магнитно эквивалентных углеродов, которые вносит растворитель диоксан, присутствующий в соединении 1 в точном соотношении 1: 1 относительно формы VI, которую добавляют к пробе для количественного анализа.

Пример 10. Получение и анализ кристаллической формы VII 17а-этиниландростан-3а,17в-диола (соединения 1 в форме VII).

Форму VII соединения 1 получали путем растворения соединения 1 в этаноле (1,2 мл) при 47°С. Раствор испаряли до половины объема в атмосфере азота, что приводило к образованию твердой массы, затем добавляли изопропилацетат (1 мл) и твердое вещество повторно растворяли при обработке ультразвуком. Раствор испаряли до половины объема с образованием твердого вещества. Смесь нагревали до 47°С, что приводило к полному растворению твердого вещества, и охлаждали до температуры окружающей среды с образованием небольшого количеств твердого вещества. Полученную таким образом смесь охлаждали в холодильном шкафу в течение нескольких часов, и образовавшееся твердое вещество выделяли посредством вакуумной фильтрации.

Неправильной формы агломерированные кристаллы наблюдали при 10Х увеличении, которое не позволяло описать морфологию кристаллов. Исследование под поляризованным светом не выявило областей, имеющих двойное лучепреломление и затухание, что указывает на анизотропную форму кристаллов, которая может казаться высоконеупорядоченной в массе из-за присутствия значительных количеств дефектов кристаллической решетки.

Порошковая рентгенограмма низкого разрешения для формы VII, полученной с применением ранее описанной методики, приведена на фиг. 18. Перечень пиков, наблюдаемых на порошковой рентгенограмме для формы VII, приведен в табл. 11. Характеристические пики расположены при 5,91, 9,78, 13,47, 14,16, 15,78, 17,85, 19,50 и 21,45±0,10° 2θ.

- 47 018974

Таблица 11 Перечень пиков порошковой рентгенограммы низкого разрешения, выполненной для формы VII

2-тета	с/участок (А)	Интенсивность (%)
5.91 ±0.10	14.955 1 0.257	26
8.31 ±0.10	10.640 1 0.129	19
9.78 ±0.10	9.044 1 0.093	100
10.41 ±0.10	8.49810.082	4
11.37 ±0.10	7.78310.069	17
11.88 ±0.10	7.450 1 0.063	19
12.24 ±0.10	7.231 1 0.059	4
13.47 ±0.10	6.574 + 0.049	44
14.16 ±0.10	6.25510.044	49
14.46 ±0.10	6.12610.042	18
15.54 ±0.10	5.702 1 0.037	26
15.78 ±0.10	5.61610.036	51
16.50 ±0.10	5.373 1 0.033	22
16.71 ±0.10	5.306 1 0.032	16
16.98 ±0.10	5.222 + 0.031	5
17.43 ±0.10	5.088 1 0.029	7
17.8510.10	4.969 1 0.028	31
18.6910.10	4.748 + 0.025	6
18.99 + 0.10	4.67310.025	9
19.5010.10	4.552 1 0.023	67
19.71 ±0.10	4.504 1 0.023	21
20.52 + 0.10	4.328 1 0.021	13
21.45 ±0.10	4.14310.019	31
22.8610.10	3.89010.017	12
23.4910.10	3.787 ±0.016	10
24.03 ±0.10	3.703 1 0.015	12
24.63 ±0.10	3.61510.015	7
25.02 + 0.10	3.55910.014	8
25.2610.10	3.52610.014	7
25.6810.10	3.46910.013	2
26.43 1 0.10	3.37210.013	13
26.64 1 0.10	3.346 + 0.012	11
26.91 ±0.10	3.31310.012	23
27.75 ±0.10	3.21510.011	8
28.08 1 0.10	3.178 + 0.011	3
28.71 ±0.10	3.11010.011	7

ТГА термограмма для формы VII 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диола при линейном изменении температуры 10°С/мин демонстрирует потерю массы от примерно 2% до пренебрежимо малой величины в диапазоне температур от примерно 40 до примерно 160°С, тогда как ДТА термограмма имеет характеристическую эндотерму примерно при 164°С и не имеет других характерных особенностей. Таким образом, вероятней всего, кристаллическая форма VII 17а-этиниландростан-3а,17в-диола представляет собой дегидрат (т.е. не содержит растворителя в своей кристаллической структуре). Как было обнаружено, при продолжительном хранении, проба формы VII претерпевала полиморфный переход в форму III, что подтверждается повторным анализом порошковой рентгеновской дифракцией.

Как предполагают, по сравнению с сольватом, содержащим органический растворитель, это вещество имеет то преимущество, что оно не содержит органического растворителя, такого как диоксан или метанол. При исследованиях на животных, когда можно применять относительно высокие уровни 17 αэтиниландростан-3а,17в-диола, чтобы исследовать противоопухолевую или другую биологическую активность или токсичность вещества, такие высокие уровни могут вносить в сольват значительные количества растворителя, такого как метанол или диоксан. Такие органические молекулы могут воздействовать на сам 17а-этиниландростан-3а,17в-диол ίπ у1уо, если указанные растворители, например, индуцируют или иным образом модулируют ферменты печени, которые неблагоприятно воздействуют на 17αэтиниландростан-3а,17в-диол или фармакокинетику. Однако дегидраты могут иметь сниженную термодинамическую стабильность относительно соответствующего гидрата, которая проявляется в гигроскопичности, особенно, при высокой относительной влажности. Гигроскопичные вещества могут также вызывать ряд проблем, обусловленных уменьшением эффективности лекарственного вещества вследствие уменьшения его массы при поглощении воды или нестабильностью фармацевтического продукта или стандартной лекарственной формы фармацевтического продукта (например, растрескивание таблеток).

- 48 018974

Пример 11. Получение и анализ кристаллической формы VIII 17а-этиниландростан-3а,17в-диола (соединения 1 в форме VIII).

Форму VIII получали при медленном испарении дихлорметана из раствора соединения 1. При визуальном исследовании при увеличении 10Х видны кристаллические фрагменты неправильной формы. Порошковая рентгенограмма низкого разрешения для формы VIII, полученной с применением ранее описанной методики, приведена на фиг. 19. Перечень наблюдаемых пиков на порошковой рентгенограмме для формы VIII приведен в табл. 12. Характеристические пики расположены при 11,13, 15,96, 16,62, 17,76 и 18,75±0,10° 2θ.

Таблица 12

Перечень пиков порошковой рентгенограммы низкого разрешения, полученной для формы VIII

29	б участок (А)	Интенсивность (%)
9.39 ±0.10	9.419±0.101	10
10.11 ±0.10	8.750 + 0.087	11
11.13 ±0.10	7.950 ±0.072	35
13.50 + 0.10	6.559 + 0.049	6
14.76 ±0.10	6.002 ± 0.041	9
15.96+0.10	5.553 ± 0.035	100
16.62 ±0.10	5.334 + 0.032	26
17.76 ±0.10	4.994 ±0.028	31
18.75 ±0.10	4.733 ±0.025	28
19.08 ±0.10	4.652 + 0.024	14
20.16 ±0.10	4.405 ±0.022	5
22.29 + 0.10	3.988 ±0.018	10
22.86 ±0.10	3.890 ±0.017	11
23.73 ±0.10	3.750 ±0.016	22
24.00 ±0.10	3.708 ±0.015	10
24.30 + 0.10	3.663 + 0.015	22
25.17 ±0.10	3.538 ± 0.014	7
25.38 + 0.10	3.509 ±0.014	9
25.74 ±0.10	3.461 ±0.013	8
26.16 ±0.10	3.407 ±0.013	12
27.96 ±0.10	3.191 +0.011	10
28.41 ±0.10	3.142 ±0.011	22
29.85 ±0.10	2.993 ±0.010	6

ТГА термограмма для формы VIII 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диола при линейном изменении температуры 10°С/мин демонстрирует незначительную потерю массы в диапазоне температур от примерно 40 до примерно 160°С, тогда как ДТА термограмма содержит характеристическую эндотерму примерно при 164°С и не имеет других характерных особенностей. Таким образом, вероятней всего, кристаллическая форма VIII 17а-этиниландростан-3а,17в-диола представляет собой дегидрат (т.е. не имеет растворителя в своей кристаллической структуре).

Как предполагают, по сравнению с сольватом, содержащим органический растворитель, это вещество имеет то преимущество, что оно не содержит органического растворителя, такого как диоксан или метанол. При исследованиях на животных, когда можно применять относительно высокие уровни 17 αэтиниландростан-3а,17в-диола, чтобы исследовать противоопухолевую или другую биологическую активность или токсичность вещества, такие высокие уровни могут вносить в сольват существенные количества растворителя, такого как метанол или диоксан. Такие органические молекулы могут воздействовать на сам 17а-этиниландростан-3а,17в-диол ш у1уо, если указанные растворители, например, индуцируют или иным образом модулируют ферменты печени, которые неблагоприятно воздействуют на 17αэтиниландростан-3а,17в-диол или фармакокинетику. Однако дегидраты могут иметь сниженную термодинамическую стабильность относительно соответствующего гидрата, которая проявляется в гигроскопичности, особенно, при высокой относительной влажности. Гигроскопичные вещества могут также вызывать ряд проблем, обусловленных уменьшением эффективности лекарственного вещества вследствие уменьшения его массы при поглощении воды или нестабильностью фармацевтического продукта или стандартной лекарственной формы фармацевтического продукта (например, растрескивание таблеток). Как можно предполагать, вследствие неупорядоченного состояния кристаллов формы VII, она имеет большую истинную скорость растворения по сравнению с более упорядоченными кристаллическими формами.

Пример 12. Получение и анализ аморфного 17-этинил-5а-андростан-3а,17в-диола (аморфного соединения 1).

Соединение 1 (52,0 мг) растворяли в 200 мкл метанола путем нагревания в 80°С водяной бане. Раствор оставляли охлаждаться до комнатной температуры, после чего добавляли 20 мкл воды при вихревом движении. Полученное таким образом твердое вещество фильтровали, промывали холодным метанолом и высушивали в вакууме с получением 24,3 мг титульного вещества.

- 49 018974

Порошковая рентгенограмма, приведенная на фиг. 20, представляет собой гало без характерных пиков, что указывает на аморфное вещество. ДТА/ТГА термограммы, представленные на фиг. 21, демонстрируют эндотермический переход примерно при 81°С на ДТА кривой с примерно 7% уменьшением массы на ТГА термограмме в диапазоне от примерно 35 до примерно 60°С, при линейном изменении температуры 10°С/мин. Эти термические переходы указывают на десольватацию. Далее наблюдают экзотермический переход на ДТА кривой примерно при 120°С, что указывает на произошедший переход из аморфного в термодинамически стабильное полиморфное состояние. Этот полиморф, который, как предполагают, представляет собой форму III, затем показывает характеристическую эндотерму примерно при 163°С.

Аморфное соединение 1, с различной степенью кристалличности, также получали из формы III, полученной методом плавления-закалки, согласно следующей методике. Форму III слегка измельчали шпателем в ампуле, которую затем помещали в масляную баню при 175°С. Через ампулу пропускали струю азота и ампулу выдерживали в масляной бане до тех пор, пока проба не расплавлялась. Затем ампулу вынимали и быстро помещали в баню, содержащую сухой лед с ацетоном. Пробу помещали в морозильную камеру под влагопоглотитель и анализировали способом порошковой рентгеновской дифракции на кристалличность.

Склонность аморфного вещества превращаться в различные кристаллические формы изучали путем воздействия паром на полученное методом плавления-закалки соединение 1, полученное из формы III с применением ранее описанной методики. Исследования при высокой влажности показывают, что аморфное соединение 1 превращается обратно в форму III, что дополнительно указывает на то, что форма III является наиболее термодинамически стабильной полиморфной формой, при условии, что форма III не подвергается воздействию метанола-воды.

Пример 13. Получение составов, содержащих 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диол в твердой форме.

Следующая таблица представляет собой перечень ингредиентов, применяемых при получении составов в капсулах, содержащих соединение 1 в твердой форме.

Таблица 13

Состав, содержащий 25 мг твердого соединения 1

Лекарственное вещество	% по массе	мг/капсула
Тонкоизмельченное Соединение 1	13.9	25.0
Наполнители
Лаурилсульфат натрия, ΝΕ	10.0	18.0
Микрокристаллическая целлюлоза, ΝΕ (ΑνίθθΙΡΗ102>	65.6	118
Кросповцдон, ΝΡ (полипасдон ХЦ	10.0	18.0
Стеарат магния, ΝΕ	0.5	1.0
Всего	100	180
Твердая желатиновая капсула # 2

Таблица 14 Состав, содержащий 5 мг соединения 1 в твердой форме

Пекарственное вещество	% по массе	мг/капсула
Гонкоизмельченное Соединение 1	2.8	5.0
Наполнители
Чаурилсульфат натрия, ΝΡ	10.0	18.0
Микрокристаллическая целлюлоза, ΝΕ /йи1Ай1Ри1по\	76.7	138
(росповидон, ΝΕ (полипасдон XI)	10.0	18.0
Стеарат магния, ΝΕ	0.5	1.0
Зсего	100	180
Твердая желатиновая капсула # 2

Ниже приведен перечень ингредиентов, применяемых при приготовлении суспензионного состава соединения 1 в твердой форме.

- 50 018974

Таблица 15

Суспензионный состав, содержащий соединение 1 в твердой форме

Лекарственное вещество	% по массе
Тонкоизмельченное Соединение 1	2-10
Наполнители
Полисорбат 80	2.0
Карбоксиметилцеллюлоза (КМЦ)	0.1
Хлорид натрия	0.9
Фенол	0.05
Деионизированная вода	остаток

Предпочтительно, если в приведенных выше составах и в следующих примерах твердые формы соединения 1 (например, аморфная или кристаллическая форма III) перед смешиванием с наполнителями тонко измельчают до средневзвешенного объемного размера частиц (Όν, 50) от примерно 3 до примерно 100 мкм. Согласно одному варианту реализации изобретения полиморфную форму III измельчают с получением частиц с размером (Όν, 90) = 10 мкм (размер частиц, который имеют 90% (средневзвешенный по объему) всех частиц). Выбор подходящего размера частиц представляет собой компромисс между повышением биодоступности твердой формы соединения 1 в данном составе из-за увеличения скорости растворения твердого соединения 1 и увеличением стоимости производства состава по мере того, как размер частиц уменьшается. Например, для получения частиц со средневзвешенным объемным размером или средним диаметром менее чем примерно 3 мкм обычно требуется тонкое измельчение в псевдоожиженном слое (например, см., Шба Ζ.Η., е! а1. Р1шб Ьеб дгапи1а1юп оГ а роог1у \га1ег 8о1иЬ1е, 1о\г бепкбу, писгош/еб бгид: сотрагщоп \νί11ι ЫдЬ Шеаг дгапи1а1юп. ШР 1. Рбагш. 237 (1-2):1-14 (2002), которое является более дорогостоящим, чем помол на струйной мельнице до большего размера частиц, и представляет собой процесс более сложный для промышленного производства.

При концентрации дозы менее чем 5 мг (например, 1 мг) предварительное смешивание тонкоизмельченного соединения 1 с поверхностно-активным веществом, таким как лаурилсульфат натрия, иногда осуществляют перед смешиванием с оставшимися наполнителями для получения равномерного распределения соединения 1 в составе.

Пример 14. Рак предстательной железы.

Лечение рака предстательной железы, стимулированного андростендионом (ΑΕΌ), на модели опухоли с применением состава, полученного из кристаллической формы III.

Кастрированным 8СШ мышам (в возрасте шести недель) имплантировали 5 мг ΑΕΌ, гранулу с 60дневным периодом высвобождения Цпиоуабуе ЬаЬк, 8агако1а РЬ). Через три дня всем мышам вводили подкожной инъекцией в правый бок 100 мкл 7,5х10⁶ опухолевых клеток ЬЫСаР в КРМЬрастворе, не содержащем феноловый красный, смешанном 1:1 с Матригелем. Объемы опухоли измеряли еженедельно и рассчитывали как а2хЬ/2, где а представляет собой ширину и Ь представляет собой длину опухоли в миллиметрах (определяли в мм³).

Для исследования воздействия дозы на частоту опухолей, 48 кастрированным самцам 8СШ мышей имплантировали опухолевые клетки линии ЬЫСаР, как описано, и мышей произвольно разделяли на 4 группы из 12 животных в каждой, с обеспечением контрольной группы, получающей только наполнитель (30% циклодекстрин-сульфобутиловый эфир в воде) и лечебных групп, получающих 4, 1 и 0,4 мг/мышь/день. Лечебным группам вводили жидкий состав, полученный путем растворения твердой формы 17а-этиниландрост-5-ен-3а,17в-диола (соединения 1) в наполнителе, что давало 20 мг соединения 1 на мл в 30% смеси циклодекстрин-сульфобутиловый эфир в воде. Полученный таким образом жидкий состав вводили через 24 ч после введения опухоли в виде 200 мкл внутрибрюшинной (в.б.) инъекции. Всем животным вводили ежедневную дозу в течение 28 календарных дней, при этом объемы опухоли измеряли еженедельно.

Результаты этого исследования (фиг. 22) показали значительное снижение частоты опухолей (по сравнению с наполнителем) в двух группах, получавших самые высокие дозы (1 мг, р=0,006, п=11; 4 мг, р<0,001, п=12), при уменьшении объема опухоли, наблюдаемого во всех трех группах, получавших дозы (фиг. 9). В трех группах, подвергаемых лечению, наблюдалось статистически значимое замедление во времени до того момента, когда объем опухоли становился поддающимся измерению (р<0,01). Также поддавались лечению средние объемы опухоли у животных, у которых они развивались, 157 мм³ относительно 0, 4, 34 мм³ (наполнитель, затем доза по убыванию).

Чтобы исследовать воздействие соединения 1 на сформировавшиеся опухоли ЬЫСаР, 36 кастрированных 8СШ мышей получали гранулы с ΑΕΌ и прививали опухолями ЬЫСаР и контролировали, как описано выше. Как только опухоли достигали 15-25 мм³, мышей разбивали на пары по объему опухоли, и каждую мышь в паре распределяли в группу, получающую наполнитель, или в группу, получающую 4 мг/мышь/день соединения 1. Животным вводили дозу один раз в день в течение трех недель.

- 51 018974

Результаты этого эксперимента показаны на фиг. 23. Животные, которым вводили наполнитель, демонстрировали прогрессирующий рост объема опухоли в течение исследования. Напротив, введение соединения 1 значительно тормозило рост опухолей (р<0,001). Значительные различия в объемах опухоли между контрольной группой и группами, подвергнутыми лечению, наблюдались в первую неделю и сохранялись в течение всего исследования (р<0,001). У существенно большего процента мышей в группе, подвергавшейся лечению, уменьшались объемы опухоли на 20% или более (р<0,0294). Уменьшение опухоли не было замечено в группе, получавшей наполнитель. Кроме того, у двух мышей в группе, получавшей соединение 1, опухоль перестала поддаваться измерению на 15 день.

Статистический анализ.

Время до того момента, когда впервые объем опухоли становится поддающимся измерению, анализировали посредством оценок лимита конечного результата по Каплану-Мейеру, применяя к исследованию строгий логарифмический ранговый критерий для оценки значимости расхождений. Снижение объема опухоли определяли как уменьшение объема по меньшей мере на 20% от исходного объема, сохраняющееся до конца исследования. Чтобы обнаружить различие между активной и контрольной группой, применяли точный критерий Фишера и точный 95% доверительный интервал для конкретного расхождения. Опухоли с объемом, не поддающимся измерению, представляют собой опухоли, размеры которых, при имеющейся методологии, измеряют как 0 до конца исследования. Скорость роста опухоли также анализировали с применением смешанной модели.

Пример 15. Индукция апоптоза в клетках, испытывающих гиперпролиферацию.

В результате следующего исследования было выявлено действие состава, приготовленного с полиморфом 17а-этиниландрост-5-ен-3а,17в-диола (соединения 1 в кристаллической форме III) на клеточную линию опухоли предстательной железы.

В 6-луночные планшеты вносили клетки линии ^NСаР (5х10⁵) в не содержащем феноловый красный КРМНрастворе с 5% сывороткой, очищенной на активированном угле (С88) и лишенной гормонов, и оставляли для адгезии на всю ночь, а затем культивировали в фетальной бычьей сыворотке (ФБС) или С88 с 50 нМ соединения 1 или без него в течение четырех дней. К концу инкубационного периода плавающие и адгезированные клетки собирали для анализа клеточного цикла. Клетки линии Б-Ж'.'аР повторно суспендировали в растворе 4,6-диамидино-2-фенилиндола (ДАФИ) с концентрацией 10 мг/мл и 0,1% ΝΈ-40 в трис-буферном соляном растворе (рН 7.0) и анализировали, применяя цитометр Iηί1иx (Су1ор1еа, 8еай1е, \УА). Анализ выполняли с применением программного обеспечения Ми1йСус1е (Рйоешх Б1о\у Зубепъ, 8аи П1едо, СА). Набор для выявления апоптоза Аииехт У-ПТС (Са1Ыосйет, Ьа 1о11а, СА) применяли согласно инструкциям производителя.

На фиг. 24 показан рост количества клеток в фазе 01 после инкубации клеток линии й-Ж'.'аР с соединением 1. Такое накопление клеток в фазе 01 сопровождалось увеличением процента апоптотических клеток линии й-Ж'.'аР после воздействия соединением 1. Эти данные означают, что соединение не просто блокирует рост клеток линии ^NСаР, но действует на клетки линии ^NСаР как цитотоксическое вещество.

Пример 16. Рак молочной железы.

Модель опухоли, стимулированной Ν-метилнитрозомочевиной (МНМ).

В результате следующего исследования было выявлено действие состава, полученного с применением полиморфа 17а-этиниландрост-5-ен-3а,17в-диола (соединения 1 в кристаллической форме III), на скорость роста и частоту возникновения опухолей молочной железы, вызванных введением канцерогена Ν-метилнитрозомочевины (МНМ). Кроме того, активность соединения 1 сравнивали с ТАМОКСИФЕН™ ((2)-2-[4-(1,2-дифенилбут-1-енил)фенокси]-Ы^-диметилэтанамином), АРИМИДЕКС™ (анастрозолом) и ТАКСОТЕР ™ (доцетакселом), которые являются лекарственными препаратами, применяемыми в настоящее время для лечения рака молочной железы.

Самок крыс линии Йе\\т5 в возрасте семи недель (150 животных, 104 потребовалось для исследования) обезболивали изофлураном для введения МНМ. МНМ вводили в.б. в дозе 50 мг/кг. Развивающиеся опухоли молочной железы измеряли, применяя штангенциркуль, в направлении двух осей опухоли, измеряемых в см. Лечение начинали, применяя жидкий состав соединения 1, полученного путем растворения кристаллической формы I в наполнителе, когда объем опухоли у крысы достигал размера 0,5х0,5 см (примерно в 12-20-недельном возрасте). Лечение продолжали в течение 28 календарных дней, с последующим наблюдением в течение еще 28 дней. Опухоли молочной железы удаляли, когда их размер достигал 2х 2 см в соответствии с внутриведомственными рекомендациями.

Экспериментальные группы включали группу негативного контроля (без лечения), контрольную группу, получающую наполнитель (30% циклодекстрин-сульфобутиловый эфир в воде), две лечебные группы (8 мг/на крысу и 4 мг/на крысу), три группы, получающие стандартную терапию с применением блокатора эстрогена (ТАМОКСИФЕН™), ингибитора ароматазы (АРИМИДЕКС), цитотоксического вещества (ТАКСОТЕР™) и группу комбинированного лечения, получающую соединение 1 (8 мг/кг) и ТАКСОТЕР™.

На фиг. 25 показан процент животных с новыми опухолями, нанесенный на график относительно фактической продолжительности исследования, начиная с первого дня дозирования. Этот график демон

- 52 018974 стрирует более длинный период времени до образования новой опухоли по сравнению с наполнителем (р<0,001). Среднее время образования новой опухоли при введении наполнителя составляет 10 дней по сравнению по меньшей мере с 56 днями при введении соединения 1, что свидетельствует по меньшей мере о пятикратной задержке возникновения второй опухоли, которую приписывают действию соединения 1. График также показывает, что соединение 1 в дозе 4 мг превосходило ТАКСОТЕР™ (р=0,042) и соединение 1 в дозе 8 мг в комбинации с ТАКСОТЕР™ действует эффективнее, чем только ТАКСОТЕР™ (р=0,0385).

На фиг. 26 показано изменение опухолевой массы (по объему) для экспериментальных групп в течение исследования. Опухоли росли неконтролируемо в группе, подвергаемой лечению наполнителем. Лечение соединением 1 неизменно демонстрировало меньшую опухолевую массу, чем в случае группы, подвергаемой лечению наполнителем (на 7 день: р<0,001). Комбинированное лечение соединением 1 и ТАКСОТЕР™ показывало меньшие профили массы, чем только ТАКСОТЕР ™ (на 7 день: р<0,05).

Claims (36)

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
1. (1) порошковую рентгенограмму с широким пиком примерно при 16° 2Θ или порошковую рентгенограмму по существу, как показано на фиг. 20;

   (1) порошковую рентгенограмму с пиками при 13,26, 14,25 и 18,69±0,10° 2θ или с пиками при 13,26, 14,25 и 18,69±0,10° 2θ и одним, двумя или тремя пиками, выбранными из группы, включающей положения пиков при 9,78, 14,61, 15,00, 15,99, 17,04, 17,67, 18,27, 20,91 и 21,78±0,10° 2θ;

   (1) порошковую рентгенограмму с пиками при 13,02, 13,86, 17,01±0,10° 2θ или с пиками при 13,02, 13,86, 17,01±0,10° 2θ и одним, двумя или тремя пиками, выбранными из группы, включающей положения пиков при 8,31, 9,84, 11,28, 14,73, 15,00, 16,14, 16,63, 17,76, 18,72, 20,04, 20,76, 22,14 и 25,14±0,01° 2θ;

   1. Кристаллический 17 а-этинил-5 а-андростан-3 а,17 β -диол.
2. (2) определенную методом термогравиметрического анализа потерю массы примерно 7% при нагревании от примерно 40 до примерно 105°С, полученную при линейном изменении температуры 10°С/мин; и термограмму с эндотермическим пиком примерно при 163°С, полученную методом дифференциального термического анализа при линейном изменении температуры 10°С/мин; или (3) термограмму дифференциального термического анализа с характеристической эндотермой примерно при 163°С, широкий эндотермический пик с центром примерно при 81°С и широкий эндотермический пик с центром примерно при 120°С, полученные методом дифференциального термического анализа при линейном изменении температуры 10°С/мин, или термограмму дифференциального термического анализа, по существу, идентичную показанной на фиг. 20, или (4) комбинацию характеристик, описанных в (1) и (2) или (1) и (3).

   (2) термограмму, демонстрирующую потерю массы примерно 5% при нагревании от примерно 40 до примерно 85°С или потерю массы примерно 7% при нагревании от примерно 85 до примерно температуры плавления, полученную методом термогравиметрического анализа при линейном изменении температуры 10°С/мин, и термограмму с характеристической эндотермой примерно при 164°С, полученную методом дифференциального термического анализа при линейном изменении температуры 10°С/мин;

   (2) полученную методом термогравиметрического анализа термограмму, демонстрирующую потерю массы примерно 5% при нагревании от примерно 60 до примерно 105°С или примерно 7% потерю массы при нагревании от примерно 40°С до примерно температуры плавления при линейном изменении температуры 10°С/мин; или (3) комбинацию характеристик, описанных в (1) и (2).

   2. Кристаллический 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диол по п.1, отличающийся тем, что указанный кристаллический 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диол, по существу, не содержит аморфный 17аэтинил-5 а-андростан-3 а,17 β -диол.
3. (3) термограмму дифференциального термического анализа с характеристической эндотермой при

   - 54 018974 мерно при 164°С и эндотермой примерно при 70°С, полученную при линейном изменении температуры 10°С/мин;

   3. Кристаллический 17а-этинил-5 а-андростан-3 α,17β-диол по п.2, отличающийся тем, что кристаллическая форма 17α-этинил-5α-андростан-3α,17β-диола представляет собой дегидрат и характеризуется потерей массы примерно 0,5% или менее при нагревании от примерно 40 до примерно 105°С.
4. (4) полученный способом протонной ЯМР-спектроскопии спектр с характеристическим пиком примерно при δ=3,6 м.д. (СЭС1₃) или (5) комбинацию характеристик, описанных в (1) и (2), или (1) и (3), или (1) и (4).

   4. Кристаллический 17α-этинил-5α-андростан-3α,17β-диол по п.3, отличающийся тем, что указанный дегидрат представляет собой форму III, форму V, форму VII или форму VIII 17а-этинил-5аандростан-3α,17β -диола или их смесь, при этом форма III имеет рентгенограмму порошка с характеристическими пиками при 9,30, 9,85, 11,33, 13,45, 15,96, 16,16, 16,48 и 17,42±0,10° 2θ или, по существу, идентичную представленной на фиг. 1 или 2;

   форма V имеет рентгенограмму порошка с характеристическими пиками при 5,82, 9,48, 11,49, 13,50, 15,21, 17,28 и 18,93±0,10° 2θ или, по существу, идентичную представленной на фиг. 15;

   форма VII имеет рентгенограмму порошка с характеристическими пиками при 5,91, 9,78, 13,47, 14,16, 15,78, 17,85, 19,50 и 21,45±0,10° 2θ или, по существу, идентичную представленной на фиг. 18; и форма VIII имеет рентгенограмму порошка с характеристическими пиками при 11,13, 15,96, 16,62, 17,76 и 18,75±0,10° 2θ или, по существу, идентичную представленной на фиг. 19.
5. 5. Кристаллический 17α-этинил-5α-андростан-3α,17β-диол по п.3, отличающийся тем, что указанный кристаллический дегидрат представляет собой форму III, по существу, не содержащую других дегидратов, и имеет рентгенограмму порошка с пиками в положениях 9,85, 11,33, 15,96, 16,48 и 18,95±0,10° 2θ или пики в положениях 9,85, 11,33, 15,96, 16,48 и 18,95±0,10° 2θ с одним, двумя или тремя пиками в положениях, выбранных из группы, включающей положения пиков при 9,30, 11,33, 13,45, 16,16 и 17,42±0,10° 2θ.
6. 6. Кристаллический 17а-этинил-5 а-андростан-3 α,17β-диол по пп.3, 4 или 5, отличающийся тем, что указанный кристаллический дегидрат представляет собой форму III, по существу, не содержащую других дегидратов, имеет полученную методом термогравиметрического анализа термограмму с незначительной потерей массы или потерей при нагревании примерно 0,5 мас.% или менее при нагревании от примерно 40 до примерно температуры плавления, при линейном изменении температуры 10°С/мин и имеет полученную методом дифференциальной сканирующей калориметрии термограмму с характеристической эндотермой примерно при 164°С, полученной при линейном изменении температуры 10°С/мин.
7. 7. Кристаллический 17а-этинил-5 а-андростан-3 α,17β-диол по пп.3, 4 или 5, отличающийся тем, что указанный кристаллический дегидрат представляет собой форму III, по существу, не содержащую других дегидратов, и имеет полученный методом рамановской спектроскопии спектр с пиками в положениях примерно при 1236, 1190 и 490 см^-1 или пики в положениях примерно при 1236, 1190 и 490 см^-1 с одним, двумя или тремя пиками в положениях, выбранных из группы, включающей положения пиков примерно при 1458, 1435, 619, 604, 526, 237 и 206 см^-1, или спектр, по существу, идентичный спектру, показанному на фиг. 5А, или его отдельному участку, изображенному на фиг. 5В.
8. 8. Кристаллический 17а-этинил-5 а-андростан-3 α,17β-диол по пп.3, 4 или 5, отличающийся тем, что указанный кристаллический дегидрат представляет собой форму III, по существу, не содержащую форму V, форму VII или форму VIII 17α-этинил-5α-андростан-3α,17β-диола, которая характеризуется тем, что кристаллическая форма III составляет по меньшей мере примерно 90 мас.% от всего присутствующего кристаллического 17 а-этинил-5 а-андростан-3 α,17β -диола.
9. 9. Кристаллический 17α-этинил-5α-андростан-3α,17β-диол по п.2, отличающийся тем, что указанный кристаллический 17а-этинил-5 а-андростан-3 α,17β -диол представляет собой сольват.

   - 53 018974
10. 10. Кристаллический 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диол по п.9, отличающийся тем, что кристаллический сольват 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диола представляет собой форму I, форму IV или форму VI, при этом форма I, форма IV или форма VI 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диола, по существу, не содержат других кристаллических форм 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диола, при этом форма I имеет рентгенограмму порошка с характеристическими пиками при 10,59, 12,33, 14,29, 14,72, 16,04, 16,41, 17,49, 20,27, 24,04 и 27,21±0,10° 2θ или, по существу, идентичную представленной на фиг. 7;

    форма IV имеет рентгенограмму порошка с характеристическими пиками при 8,31, 9,84, 11,28, 13,02, 13,86, 14,73, 15,00, 16,14, 16,53, 17,01, 17,76 и 18,72±0,10° 2θ или, по существу, идентичную представленной на фиг. 12; и форма VI имеет рентгенограмму порошка с характеристическими пиками при 7,17, 9,78, 13,26, 14,25, 14,61, 15,00 и 18,69±0,10° 2θ или, по существу, идентичную представленной на фиг. 16.
11. 11. Кристаллический 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диол по п.9, отличающийся тем, что указанный кристаллический сольват представляет собой форму I, которая имеет порошковую рентгенограмму с пиками в положениях при 10,59, 12,33, 14,72 и 16,04±0,10° 2θ или пиками в положениях 10,59, 12,33, 14,72 и 16,04±0,10° 2θ и одним, двумя или тремя пиками, выбранными из группы, включающей пики при 14,29, 15,91, 16,41, 17,49, 20,27, 24,04 и 27,21±0,10° 2θ.
12. 12. Кристаллический 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диол по пп.9, 10 или 11, отличающийся тем, что указанный кристаллический сольват представляет собой форму I, которая имеет определенную способом рентгеновской кристаллографии на монокристаллах пространственную группу Ρ2₁2₁2₁ (№ 19), значение Ζ 4, параметры элементарной ячейки а=7,4893(4) А, Ь=11,0586(8) А, с=25,5095(15) А, а=90,00°, β=90,00°, γ=90,00°, плотность 1,15 г/см³.
13. 13. Кристаллический 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диол по пп.9, 10 или 11, отличающийся тем, что указанный кристаллический сольват представляет собой форму I, которая имеет полученную методом дифференциальной сканирующей калориметрии термограмму с эндотермическим пиком примерно при 164°С, полученную при линейном изменении температуры 10°С/мин, или определенную способом термогравиметрического анализа потерю массы примерно 10-14% при нагревании от примерно 60 до примерно 105°С с эндотермическим пиком примерно при 88°С и эндотермическим пиком примерно при 116°С, полученными при линейном изменении температуры 10°С/мин.
14. 14. Кристаллический 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диол по пп.9, 10 или 11, отличающийся тем, что указанный кристаллический сольват представляет собой форму I, которая имеет полученный методом рамановской спектроскопии спектр с пиками в положениях примерно при 1026, 1170 и 831 см^-1 или пиками в положениях примерно при 1026, 1170 и 831 см^-1 и одним, двумя или тремя пиками в положениях, выбранных из группы, включающей положения пиков примерно при 1456, 1439, 1253, 1230, 1026, 615, 602, 528, 231 и 148 см^-1, который, по существу, идентичен спектру, представленному на фиг. 9А, или, по существу, идентичен его отдельному участку, изображенному на фиг. 9В.
15. 15. Кристаллический 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диол по п.9, отличающийся тем, что указанный кристаллический сольват представляет собой форму IV, которая имеет:
16. 16. Кристаллический 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диол по п.9, отличающийся тем, что указанный кристаллический сольват представляет собой форму VI, которая имеет:
17. 17. Аморфный 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диол.
18. 18. Аморфный 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диол по п.17, отличающийся тем, что аморфный 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диол, по существу, не содержит кристаллического 17а-этинил-5аандростан-3а,17в-диола или содержит менее чем примерно 10 мас.% кристаллического 17а-этинил-5аандростан-3 а,17 β-диола.
19. 19. Аморфный 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диол по п.17 или 18, отличающийся тем, что аморфный 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диол имеет:
20. 20. Способ получения кристаллической безводной формы III 17а-этинил-5а-андростан-3а,17вдиола, включающий высушивание формы I 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диола при температуре окружающей среды (примерно 22-27°С) в вакууме, или высушивание формы I 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диола путем нагревания от температуры окружающей среды до максимальной температуры примерно 75°С до достижения потери массы при нагревании менее чем примерно 0,5 мас.%, или нагревание формы I примерно при 50±5°С в вакууме до достижения потери массы менее чем примерно 0,5 мас.%, при этом форма I представляет собой форму, охарактеризованную в п.11, и форма III представляет собой форму, охарактеризованную в п.5.
21. 21. Способ по п.20, отличающийся тем, что исходное вещество, которое представляет собой форму I 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диола, по существу, не содержит других твердых форм 17а-этинил5а-андростан-3а,17в-диола, и при этом исходное вещество, представляющее собой форму I 17а-этинил5а-андростан-3а,17в-диола, имеет химическую чистоту по меньшей мере примерно 95%, а форма III 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диола имеет химическую чистоту по меньшей мере примерно 95%.
22. 22. Фармацевтический состав, содержащий один или более наполнителей и кристаллический 17аэтинил-5 а-андростан-3 α,17 β -диол.
23. 23. Состав по п.22, отличающийся тем, что состав представляет собой твердое вещество в виде таблетки, капсулы или другой стандартной лекарственной формы, при этом указанный состав фармацевтически приемлем для перорального введения.
24. 24. Способ получения фармацевтического состава, включающий стадию приведения в контакт, смешивания и/или перемешивания аморфного или кристаллического 17а-этинил-5а-андростан-3а,17втриола с одним, двумя, тремя, четырьмя или более наполнителями с получением смеси и обработки смеси с получением состава, при этом состав содержит стандартные дозы, которые являются фармацевтически приемлемыми для перорального введения людям.
25. 25. Способ по п.24, отличающийся тем, что указанный кристаллический 17а-этинил-5а-андростан3а,17в-диол представляет собой гидрат.
26. 26. Способ по п.24, отличающийся тем, что указанный кристаллический 17а-этинил-5а-андростан3а,17в-диол представляет собой дегидрат или представляет собой форму III 17а-этинил-5а-андростан3а,17в-диола, при этом форма III представляет собой форму, охарактеризованную в п.5.
27. 27. Способ по п.24, отличающийся тем, что по меньшей мере один из наполнителей представляет собой поверхностно-активное вещество, лаурилсульфат натрия или полисорбат-80.
28. 28. Способ по п.26 или 27, отличающийся тем, что указанный состав содержится в стандартных дозированных формах, представляющих собой таблетки, каплеты или капсулы.

    - 55 018974
29. 29. Способ лечения рака или предракового состояния у субъекта, нуждающегося в таком лечении, включающий введение субъекту или доставку в ткани субъекта эффективного количества 1) кристаллического 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диола, 2) состава, содержащего кристаллический 17а-этинил5а-андростан-3а,17в-диол и по меньшей мере один или более наполнителей, или 3) кристаллического 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диола и одного, двух, трех или четырех наполнителей.
30. 30. Способ по п.29, отличающийся тем, что рак представляет собой рак предстательной железы, рак молочной железы, рак яичников, рак шейки матки, рак эндометрия или доброкачественную гипертрофию предстательной железы.
31. 31. Способ по п.29, отличающийся тем, что кристаллический 17а-этинил-5а-андростан-3а,17вдиол представляет собой дегидрат или форму III, при этом указанная форма III представляет собой форму, охарактеризованную в п.5.
32. 32. Способ по п.29, отличающийся тем, что предраковое состояние представляет собой интерстициальную неоплазию предстательной железы, дисплазию шейки матки или протоковую карциному ίη κίΐιι.
33. 33. Применение кристаллического или аморфного 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диола для получения лекарственного препарата для лечения или профилактики рака или предракового состояния.
34. 34. Применение кристаллического 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диола для получения лекарственного препарата для лечения или профилактики рака предстательной железы, рака молочной железы, рака яичников, рака эндометрия, рака легких, рака поджелудочной железы или доброкачественной гипертрофии предстательной железы.
35. 35. Композиция для лечения или профилактического лечения рака или предракового состояния, содержащая кристаллический 17а-этинил-5а-андростан-3а,17в-диол и дополнительно содержащая один или более наполнителей.
36. 36. Композиция по п.35, отличающаяся тем, что рак или предраковое состояние представляет собой рак предстательной железы, рак молочной железы, рак яичников, рак эндометрия, рак легких, рак поджелудочной железы или доброкачественную гипертрофию предстательной железы.