EA014840B1

EA014840B1 - Комбинации пиримидинсодержащего nnrti с ингибиторами обратной транскриптазы

Info

Publication number: EA014840B1
Application number: EA200600522A
Authority: EA
Inventors: Пол Стоффелс
Original assignee: Тиботек Фармасьютикалз Лтд.
Priority date: 2003-09-03
Filing date: 2004-09-03
Publication date: 2011-02-28
Also published as: DK1663240T4; KR20130127515A; SI1663240T2; ES2542017T5; DK1663240T3; KR20110132475A; EA200600522A1; CN102319433A; KR101539245B1; HUE025576T2; TWI365744B; PT1663240E; SI1663240T1; KR101638999B1; ES2542017T3; TW200524612A

Abstract

Настоящее изобретение относится к комбинации пиримидинсодержащего ингибитора ненуклеозид-обратной транскриптазы (NNRTI), представляющего собой 4-[[4-[[4-(2-цианоэтенил)-2,6-диметилфенил]амино]-2-пиримидинил]амино]бензонитрил (ТМС278), с ингибитором нуклеозид-обратной транскриптазы, таким как эмтрицитабин, и ингибитором нуклеотид-обратной транскриптазы, таким как тенофовир, которая пригодна для лечения ВИЧ-инфицированных субъектов.

Description

Настоящее изобретение относится к комбинациям пиримидинсодержащего ингибитора ненуклеозидобратной транскриптазы (ΝΝΚΤΙ) с ингибиторами нуклеозидобратной транскриптазы и/или ингибиторами нуклеотидобратной транскриптазы, которые пригодны для лечения ВИЧ-инфицированных субъектов и профилактики передачи или инфицирования ВИЧ.

Уровень техники

Несмотря на значительный прогресс, достигнутый в результате внедрения высокоактивной антиретровирусной терапии (ΗΑΑΚΤ). устойчивость вируса ВИЧ к ингибиторам нуклеозидобратной транскриптазы (ΝΚΤΙ). ингибиторам ненуклеозидобратной транскриптазы (ΝΝΚΤΙ). ингибиторам нуклеотидобратной транскриптазы (ΝΙΚ.ΤΙ). ингибиторам протеазы и даже к недавно полученным гибридным ингибиторам по-прежнему является главной причиной неэффективности лечения. Например. половина субъектов, подвергаемых комбинированной анти-ВИЧ терапии, не реагирует в полной мере на указанное лечение. главным образом из-за устойчивости данного вируса к одному или нескольким применяемым лекарственным средствам. Кроме того. установлено. что устойчивый вирус передается вновь инфицированным субъектам. что в значительной степени ограничивает варианты лечения таких субъектов. ранее не принимавших никаких лекарственных средств. На Международной конференции по СПИДу. состоявшейся в Париже в июле 2003 г.. были представлены результаты самого широкого исследования устойчивости к лекарственным средствам против СПИДа. из которых следует. что примерно у 10% всех вновь инфицированных людей в Европе обнаружены штаммы. устойчивые к лекарственным средствам. Менее обширные исследования по определению распространения устойчивости были проведены в центре СанФранциско. где особенно высок риск заболевания. В результате вышеуказанного исследования был обнаружен самый высокий уровень устойчивости. равный 27%.

Фармакокинетический профиль многих коммерчески доступных антиретровирусных средств не позволяет принимать такие средства в относительно низких лечебных дозах. Неблагоприятные фармакокинетические профили часто в сочетании с плохой растворимостью антиретровирусных средств создают высокую лекарственную нагрузку для больного СПИДом. что особенно нежелательно для субъектов. не принимавших ранее лекарственных средств. или при проведении первичного лечения. Кроме того. поскольку вирус СПИДа оказывается устойчивым даже к комбинированной антиретровирусной терапии. лечащий врач вынужден повышать уровни активных лекарственных средств в плазме для восстановления эффективности антиретровирусных средств в отношении мутированных вирусов ВИЧ. вследствие чего еще больше возрастает лекарственная нагрузка. Повышение уровней лекарственных средств в плазме увеличивает вероятность нарушения режима приема лекарственных средств и возникновения побочных эффектов.

В прошлом было сделано несколько попыток создать эффективную схему комбинированного лечения. Например. была предложена комбинация ламивудина (ингибитора нуклеозидобратной транскриптазы. именуемого также ЗТС) в дозе. равной 150 мг. и зидовудина (ингибитора нуклеотидобратной транскриптазы. именуемого также ΑΖΤ) в дозе. равной 300 мг. в виде таблетки для перорального введения два раза в сутки. или комбинация сульфата абакавира в дозе. эквивалентной 300 мг абакавира (ингибитора нуклеозидобратной транскриптазы). ламивудина в дозе. равной 150 мг. и зидовудина в дозе. равной 300 мг. в виде таблетки для перорально введения два раза в сутки.

В публикации \νθ 93/23021 описаны терапевтические комбинации для лечения ВИЧ-инфекций. содержащие зидовудин и средство. предназначенное для усиления антивирусной активности в отношении популяций ВИЧ. устойчивых к зидовудину.

В публикации ΧνΟ 96/01110 описана тройная комбинация. содержащая зидовудин. ламивудин и ловирид. причем последнее средство является ингибитором ненуклеозидобратной транскриптазы класса αАРА.

Обзор новых антиретровирусных средств приведен в публикации С11шса1 М1сгоЫо1оду аиб Ιπίοοίίοη. 2003. Уо1. 9:3. рр. 186-193.

В публикации XVО 03/016306 описано более 250 производных пиримидина. способных ингибировать репликацию ВИЧ. которые действуют в качестве ингибиторов ненуклеозидобратной транскриптазы (ΝΝΚΤΙ) и обладают способностью ингибировать репликацию как штаммов дикого типа. так и мутантных штаммов. Одним из указанных ΝΝΚΤΙ является 4-[[4-[[4-(2-цианоэтенил)-2.6-диметилфенил]амино]2-пиримидинил]амино]бензонитрил (далее именуемый ТМС278). В публикации νθ 03/016306 описаны также способы синтеза указанных соединений. В данной заявке далее рассмотрены комбинации указанных ΝΝΚΤΙ с другими антиретровирусными средствами. такими так сурамин. пентамидин. тимопентин. кастаноспермин. декстран (сульфат декстрана). фоскарнет-натрий (тринатрийфосфоноформиат). зидовудин (3'-азидо-3'-дезокситимидин. ΑΖΤ). диданозин (2'.3'-дидезоксиинозин; 66Ι). зальцитабин (дидезоксицитидин. ббС). ламивудин (2'.3'-дидезокси-3'-тиацитидин. ЗТС). ставудин (2'.3'-дидегидро-3'дезокситимидин. 64Τ). абакавир. невирапин (11-циклопропил-5.11-дигидро-4-метил-6Н-дипиридо-[3.2Ь:2'.3'-е][1.4]-диазепин-6-он). эфавиренз. делавирдин. ТМС120. ТМС125. тенофовир. (8)-8-хлор-4.5.6.7тетрагидро-5-метил-6-(3-метил-2-бутенил)имидазо-[4.5.1-)к][1.4]бензодиазепин-2(1Н)-тион. а-[(2-нитро

- 1 014840 фенил)амино]-2,6-дихлорбензолацетамид, ΚΌ-5-3335, индинавир, ритонавир, сахинавир, лопинавир (АВТ-378), нелфинавир, ампренавир, ТМС126, ВМ8-232632, νΧ-175, Т-20, Т-1249, ΑΜΌ-3100 и гидроксимочевина.

Несмотря на современное развитие комбинированной терапии все еще существует потребность к усовершенствованной антиретровирусной терапии, в частности, в методах лечения СПИДа. Такая потребность является особенно острой в отношении терапии, которая позволяет эффективно лечить не только вирус ВИЧ дикого типа, но и все чаще встречающиеся более устойчивые вирусы ВИЧ. Таким образом, весьма желательно, особенно во время первичного лечения, создать схему комбинированного лечения с низкой лекарственной нагрузкой, которая ограничивает или даже подавляет появление вируса, устойчивого к лекарственным средствам, и остается эффективной в течение длительного периода времени.

Одним объектом настоящего изобретения являются комбинации нескольких терапевтически эффективных антиретровирусных средств, которые в течение длительного периода времени можно использовать в качестве первичной терапии для лечения субъектов, ранее не принимавших никаких лекарственных средств.

Кроме того, объектом настоящего изобретения являются комбинации нескольких терапевтически эффективных антиретровирусных средств, в которых антиретровирусные средства имеют дополнительный профиль устойчивости, позволяющий создать высокоустойчивый барьер, и в течение длительного времени обеспечивают эффективное воздействие на субъекта, ранее не принимавшего никаких лекарственных средств.

Другим объектом настоящего изобретения являются комбинации нескольких терапевтически активных антиретровирусных средств, в которых каждое активное антиретровирусное средство можно вводить один раз в сутки, уменьшая таким образом лекарственную нагрузку для субъекта.

Другим объектом настоящего изобретения являются комбинации нескольких терапевтически активных антиретровирусных средств, в которых все активные антиретровирусные средства могут находиться в одной лекарственной форме.

Другим объектом настоящего изобретения являются комбинации нескольких терапевтически активных антиретровирусных средств, в которых терапевтически эффективное количество каждого активного антиретровирусного средства в комбинации может находиться в одной лекарственной форме, рассчитанной на один прием.

Другим объектом настоящего изобретения являются комбинации нескольких активных антиретровирусных средств, которые можно использовать для профилактики передачи или инфицирования ВИЧ человека.

Все публикации, приведенные в данной заявке, включены в описание изобретения в качестве ссылки.

Сущность изобретения

Таким образом, в соответствии с первым объектом настоящее изобретение относится к комбинации, содержащей (1) ТМС278 или его стереоизомерную форму, фармацевтически приемлемую соль или пролекарство и (ίί) ингибитор нуклеозидобратной транскриптазы и/или ингибитор нуклеотидобратной транскриптазы, в которой ТМС278 и ингибитор нуклеотидобратной транскриптазы и/или ингибитор нуклеозидобратной транскриптазы являются терапевтически эффективными ингибиторами ВИЧ в дозе, которую можно вводить один раз в сутки.

В соответствии со вторым объектом настоящее изобретение относится к комбинации, содержащей (ί) ТМС278 или его стереоизомерную форму, фармацевтически приемлемую соль или пролекарство и (ίί) ингибитор нуклеозидобратной транскриптазы, в которой ТМС278 и ингибитор нуклеозидобратной транскриптазы являются терапевтически эффективными ингибиторами ВИЧ в дозе, которую можно вводить один раз в сутки.

В соответствии с третьим объектом настоящее изобретение относится к комбинации, содержащей (ί) ТМС278 или его стереоизомерную форму, фармацевтически приемлемую соль или пролекарство и (ίί) ингибитор нуклеотидобратной транскриптазы, в которой ТМС278 и ингибитор нуклеотидобратной транскриптазы являются терапевтически эффективными ингибиторами ВИЧ в дозе, которую можно вводить один раз в сутки.

В соответствии с четвертым объектом настоящее изобретение относится к тройной комбинации, содержащей (ί) ТМС278 или его стереоизомерную форму, фармацевтически приемлемую соль или пролекарство, (ίί) ингибитор нуклеозидобратной транскриптазы и (ш) ингибитор нуклеотидобратной транскриптазы, в которой ТМС278, ингибитор нуклеотидобратной транскриптазы и ингибитор нуклеозидобратной транскриптазы являются терапевтически эффективными ингибиторами ВИЧ в дозе, которую можно вводить один раз в сутки.

В соответствии с пятым объектом настоящее изобретение относится к тройной комбинации, содержащей (ί) ТМС278 или его стереоизомерную форму, фармацевтически приемлемую соль или пролекарство, (ίί) ингибитор нуклеозидобратной транскриптазы и (ш) второй ингибитор нуклеозидобратной транскриптазы, отличающийся от первого ингибитора нуклеозидобратной транскриптазы по п.(и), в которой ТМС278, первый и второй ингибиторы нуклеозидобратной транскриптазы являются терапевтически эффективными ингибиторами ВИЧ в дозе, которую можно вводить один раз в сутки.

- 2 014840

В соответствии с другим объектом настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей фармацевтически приемлемый носитель и вышеуказанную комбинацию.

Настоящее изобретение относится также к использованию вышеуказанных комбинаций в качестве ингибиторов ВИЧ и их применению для лечения ВИЧ-инфицированных субъектов или профилактики передачи или инфицирования ВИЧ.

В основе настоящего изобретения лежит открытие того, что ТМС278 является сильнодействующим ингибитором обратной транскриптазы, который характеризуется чрезвычайно высоким генетическим барьером в сочетании с благоприятным фармакокинетическим профилем, позволяющим вводить данное средство один раз в сутки. Весьма удивительным было открытие того, что ТМС278 одновременно обладает всеми указанными свойствами. Подобный результат является весьма необычным, так как нельзя прогнозировать, какие мутации будут выбраны указанным средством в геноме ВИЧ-1, будет ли у мутированного вируса шанс выжить под воздействием данного средства, какое количество средства потребуется для ограничения или подавления появления такого мутированного вируса и как часто необходимо вводить данное средство для подавления возникновения устойчивого вируса, способного преодолеть генетический барьер, созданный данным лекарственным средством.

Подробное описание изобретения

В используемом здесь значении термин терапевтически эффективные ингибиторы ВИЧ в дозе, которую можно вводить один раз в сутки означает, что данные ингибиторы ВИЧ пригодны для дозированного введения каждые 24 ч. Термин пригодный для дозированного введения каждые 24 ч означает, что данные ингибиторы ВИЧ можно вводить каждые 24 ч, при этом они создают эффективные концентрации активных ингредиентов в плазме крови, позволяющие эффективно подавлять ВИЧ-инфекцию в течение суток. Ингибиторы ВИЧ по настоящему изобретению можно дозировано вводить каждые 24 ч.

ТМС278 или 4-[[4-[[4-(2-цианоэтенил)-2,6-диметилфенил]амино]-2-пиримидинил]амино]бензонитрил является известным ΝΝΚ.ΤΙ, который можно получить способом, описанным в публикации АО 03/016306. ТМС278 можно использовать в виде основания или предпочтительно в виде фармацевтически приемлемой соли, такой как кислотно-аддитивная соль. Фармацевтически приемлемыми аддитивными солями являются терапевтически активные нетоксичные соли. Кислотно-аддитивные соли могут быть получены в результате обработки основания соответствующими кислотами, такими как неорганические кислоты, например галогенводородные кислоты, в частности, хлористо-водородная, бромистоводородная и подобные кислоты, серная кислота, азотная кислота, фосфорная кислота и тому подобные, или органические кислоты, например уксусная, пропановая, гидроксиуксусная, 2-гидроксипропановая, 2оксопропановая, щавелевая, малоновая, янтарная, малеиновая, фумаровая, яблочная, винная, 2-гидрокси1,2,3-пропантрикарбоновая, метансульфоновая, этансульфоновая, бензолсульфоновая, 4-метилбензолсульфоновая, циклогексансульфаминовая, 2-гидроксибензойная, 4-амино-2-гидроксибензойная и подобные кислоты. Предпочтительными солями, используемыми в настоящем изобретении, являются соли галогенводородных кислот, в частности соль хлористо-водородной кислоты.

ТМС278 имеет стереоизомерные формы, в частности Е- и Ζ-изомерные формы. В комбинациях по настоящему изобретению могут быть использованы оба изомера. Любое упоминание ТМС278 означает Е- и Ζ-форму, а также любую смесь обеих форм.

Предпочтительной формой ТМС278, используемой в настоящем изобретении, является Е-изомер, то есть (Е)-4-[[4-[[4-(2-цианоэтенил)-2,6-диметилфенил]амино]-2-пиримидинил]амино]бензонитрил (далее именуемый Е-ТМС278). Можно также использовать Ζ-изомер ТМС278, то есть (Ζ)-4-[[4-[[4-(2цианоэтенил)-2,6-диметилфенил]амино]-2-пиримидинил]амино]бензонитрил (далее именуемый ΖТМС278). Данный изомер обладает относительно высоким потенциалом воздействия на ВИЧ-1 дикого типа, но является менее активным против мутантов с одной и двумя мутациями по сравнению с Еизомером. В табл. 1 приведены значения 1С₅₀ в нМ для Е- и Ζ-изомеров ТМС278.

Таблица 1

Мутация обратной транскриптазы ВИЧ	Е-изомер	Ζ-изомер
ВИЧ дикого типа	0,4	0,6
1001	0, 4	6, 3
103Ν	0,3	1,6
131С	1, з	5,0
188Ь	2,0	32
227С	2, 0	4,0
100Ι+103Η	7, 9	790
103Ы+181С	1,0	40
227Ы-106А	1,0	4,0

Любое упоминание Е-формы ТМС278 (то есть Е-ТМС278) означает чистый Е-изомер или любую изомерную смесь Е- и Ζ-форм, в которой Е-форма присутствует в преобладающем количестве, то есть

- 3 014840 изомерная смесь содержит более 50%, в частности более 80% Е-формы или даже более 90% Е-формы. Особый интерес представляет Е-форма, по существу, свободная от Ζ-формы. Термин по существу свободная в данном контексте означает Ε-Ζ-смеси, не содержащие или почти не содержащие Ζ-форму, например изомерные смеси, содержащие 90%, в частности 95% или даже 98 или 99% Е-формы. Точно также любое упоминание Ζ-формы ТМС278 (то есть Ζ-ΤΜΟ278) означает чистый Ζ-изомер или любую изомерную смесь Ζ- и Е-форм, в которой Ζ-форма присутствует в преобладающем количестве, то есть изомерная смесь содержит более 50%, в частности более 80% Ζ-формы или даже более 90% Ζ-формы. Особый интерес представляет Ζ-форма, по существу, свободная от Е-формы. Термин по существу свободная в данном контексте означает Ε-Ζ-смеси, не содержащие или почти не содержащие Е-форму, например изомерные смеси, содержащие 90%, в частности 95% или даже 98% или 99% Ζ-формы.

В объем настоящего изобретения входят также соли изомерных форм ТМС278, в частности вышеуказанные соли. Особый интерес представляет гидрохлорид Ζ-ΤΜΟ278 и особенно гидрохлорид ЕТМС278.

Благоприятным фактором является то, что ингибитор нуклеотидобратной транскриптазы и ингибитор нуклеозидобратной транскриптазы отбирают мутации в обратной транскриптазе, которые не вызывают устойчивости к ТМС278. Поэтому особый интерес представляет комбинация, в которой (1) ТМС278 и ингибитор или ингибиторы нуклеозид/нуклеотидобратной транскриптазы являются терапевтически эффективными ингибиторами ВИЧ в дозе, которую можно вводить один раз в сутки, и (2) ингибитор или ингибиторы нуклеозид/нуклеотидобратной транскриптазы отбирают мутации в обратной транскриптазе, которые не вызывают устойчивости к ТМС278.

Один вариант осуществления изобретения относится к комбинации, содержащей (1) ТМС278 или его стереоизомерную форму, фармацевтически приемлемую соль или пролекарство и (ίί) ингибитор нуклеозидобратной транскриптазы, в которой (1) ТМС278 и ингибитор нуклеозидобратной транскриптазы являются терапевтически эффективными ингибиторами ВИЧ в дозе, которую можно вводить один раз в сутки, и (2) ингибитор нуклеозидобратной транскриптазы отбирает мутации в обратной транскриптазе, которые не вызывают устойчивости к ТМС278. Другой вариант осуществления изобретения относится к комбинации, содержащей (1) ТМС278 или его стереоизомерную форму, фармацевтически приемлемую соль или пролекарство и (ίί) ингибитор нуклеотидобратной транскриптазы, в которой (1) ТМС278 и ингибитор нуклеотидобратной транскриптазы являются терапевтически эффективными ингибиторами ВИЧ в дозе, которую можно вводить один раз в сутки, и (2) ингибитор нуклеотидобратной транскриптазы отбирает мутации в обратной транскриптазе, которые не вызывают устойчивости к ТМС278.

Предпочтительный вариант осуществления изобретения относится к тройной комбинации, содержащей (ί) ТМС278 или его стереоизомерную форму, фармацевтически приемлемую соль или пролекарство, (ίί) ингибитор нуклеозидобратной транскриптазы и (ίίί) ингибитор нуклеотидобратной транскриптазы, в которой (1) ТМС278, ингибитор нуклеотидобратной транскриптазы и ингибитор нуклеозидобратной транскриптазы являются терапевтически эффективными ингибиторами ВИЧ в дозе, которую можно вводить один раз в сутки, и (2) ингибитор нуклеотидобратной транскриптазы и ингибитор нуклекозидобратной транскриптазы отбирают мутации в обратной транскриптазе, которые не вызывают устойчивости к ТМС278. Другой предпочтительный вариант осуществления изобретения относится к тройной комбинации, содержащей (ί) ТМС278 или его стереоизомерную форму, фармацевтически приемлемую соль или пролекарство, (ίί) ингибитор нуклеозидобратной транскриптазы и (ίίί) второй ингибитор нуклеозидобратной транскриптазы, отличающийся от первого ингибитора нуклеозидобратной транскриптазы по п.(п), в которой (1) ТМС278 и ингибиторы нуклеозидобратной транскриптазы являются терапевтически эффективными ингибиторами ВИЧ в дозе, которую можно вводить один раз в сутки, и (2) ингибиторы нуклеозидобратной транскриптазы отбирают мутации в обратной транскриптазе, которые не вызывают устойчивости к ТМС278.

Предпочтительные ингибиторы нуклеотидобратной транскриптазы, которые могут быть использованы в комбинациях по настоящему изобретению, включают тенофовир и его пролекарство дизопроксилфумарат тенофовира.

Тенофовир является аналогом аденозиннуклеотида, который в настоящее время представлен на рынке сбыта как лекарственное средство, обладающее активностью против ретровирусов.

Дизопроксилфумарат тенофовира (тенофовир ΌΕ) является пролекарством тенофовира, предназначенным для перорального введения один раз в сутки. Для приобретения антивирусной активности тенофовир ΌΕ должен быть гидролизован с образованием аналога ΑΝΡ и затем фосфорилирован с образованием активной дифосфатной части |Απιηί11ί с1 а1., ΑηΙίνίΓηΙ Сйетщбу апб СйетоШетару, 1997, 8:6 (557564); Епб1апб е1 а1., ΑπΙίνίπι1 Яекеагсй, 1997, 34]. После проникновения в лимфоциты или макрофаги указанное пролекарство подвергается количественному превращению в исходный аналог, тенофовир, и фосфорилированные моно- и дифосфатные метаболиты. Клеточными ферментами, ответственными за фосфорилирование данного лекарственного средства, являются аденилаткиназа и нуклеозид-дифосфаткиназа [ЯоЬЬшк е1 а1., Ап1пшсгоЫа1 Адепй апб СйетоШетару, 1995, 39:10 (2304-2308); РоЬЬпъ е1 а1., Апбт1стоЫа1 Адейк апб СйетоШегару, 1998, 42:3 (612-617)]. В отличие от других аналогов нуклеозида, таких как зидовудин или ставудин, фосфорилирование которых зависит от клеточного цикла, тенофовир

- 4 014840 эффективно фосфорилируется в лимфоцитах периферической крови, находящихся как в состоянии покоя, так и в процессе пролиферации [ВоЬЬшз с! а1., 1998]. Тенофовир может ингибировать репликацию ВИЧ-1 в клетках разного типа, которые способны направленно воздействовать на ВИЧ, включая первичные лимфоциты крови человека и макрофаги [Рето с! а1., ΑηΙίνίΓαΙ Всзсагсй, 1992 (289-304); Рето с! а1., Мо1еси1аг Рйагтасо1оду, 1996, 50:2 (359-366)]. Главной мишенью для дифосфата тенофовира является обратная транскриптаза (ВТ). Дифосфат тенофовира является конкурентным ингибитором включения дезоксиаденозинтрифосфата в образующиеся цепи ДНК провируса. Ингибирование обратной транскриптазы ВИЧ-1 дифосфатом тенофовира имеет константу ингибирования, равную примерно 0,9 мкМ, и введение указанного аналога в растущую цепь вирусной ДНК может прекратить дальнейшее удлинение цепи. Тенофовир ингибирует обратную транскриптазу вируса гораздо эффективнее, чем ДНК-полимеразы клетки [8ио с! а1., 1оита1 оГ Вю1одюа1 Сйстщру, 1998, 273:42 (2750-2758)]. Концентрация, необходимая для ингибирования репликации разных штаммов ВИЧ-1 на 50% (ЕС50) в лимфоцитах и макрофагах (МТ2, СЕМ, АСН8), составляет от 0,2 до 10 мкМ. Антивирусное действие достигается при введении нетоксичных доз тенофовира (индекс избирательности находится в пределах от 100 до 2000). Тенофовир ΌΓ в настоящее время выпускается в виде 300 мг таблеток, предназначенных для приема внутрь один раз в сутки.

Устойчивость вируса к тенофовиру ίη νίΙΐΌ возникает медленно. Рекомбинантный вирус с мутацией К65В характеризовался в 3 раза меньшей чувствительностью к тенофовиру ίη νίΙΐΌ [Сйстпд!оп с! а1., 1п1сг5С1спсс СопГсгспсс оп Ап1пшсгоЫа1 Адсп!з апб Сйсто!йсгару, 1997, 37^!Ь]. Следует отметить, что клинические штаммы ВИЧ, экспрессирующие мутацию ламивудин-ассоциированной устойчивости М184У в обратной транскриптазе, характеризуются присущей вирусу дикого типа или повышенной чувствительностью к тенофовиру ίη νίΙΐΌ независимо от изменений Κί для мутантного фермента [МШсг с! а1., !п(сг8с1спсс СопГсгспсс оп Апбт1сгоЬ1а1 Адсп!з апб СйстоШсгару, 1998]. Длительное введение (5-15 недель) тенофовира (дозы 30 мг/кг) новорожденным детенышам макак-резусов, которое начинали через 3 недели после инокуляции вирусом иммунодецифита обезьян, вызывало появление 81У, который был примерно в 5 раз менее чувствителен к тенофовиру [Уап Вотрау с! а1., АпбтюгоЬ1а1 Адсп!з апб СйстоШсгару, 1996, 40:11 (2586-2591)]. Такой низкий уровень устойчивости был ассоциирован с появлением мутации К65В.

Предпочтительный вариант осуществления изобретения относится к комбинации, содержащей (ί) ТМС278 или его стереоизомерную форму, фармацевтически приемлемую соль или пролекарство и (ίί) тенофовир или его пролекарство дизопроксилфумарат тенофовира, в которой ТМС278 и тенофовир или его пролекарство дизопроксилфумарат тенофовира являются терапевтически эффективными ингибиторами ВИЧ в дозе, которую можно вводить один раз в сутки.

Предпочтительный вариант осуществления изобретения относится к тройной комбинации, содержащей (ί) ТМС278 или его стереоизомерную форму, фармацевтически приемлемую соль или пролекарства, (ίί) ингибитор нуклеозидобратной транскриптазы и (ш) дизопроксилфумарат тенофовира, в которой ТМС278, ингибитор нуклеозидобратной транскриптазы и дизопроксилфумарат тенофовира являются терапевтически эффективными ингибиторами ВИЧ в дозе, которую можно вводить один раз в сутки.

Предпочтительные ингибиторы нуклеозидобратной транскриптазы, которые могут быть использованы в комбинациях по настоящему изобретению, включают абакавир или его фармацевтически приемлемую соль, эмтрицитабин, рацемический ГТС и ламивудин (именуемый также ЗТС).

Эмтрицитабин или (-)-ГТС является левовращающей (-)энантиомерной формой рацемического ГТС или (±)-цис-4-амино-5-фтор-1-[2-(гидроксиметил)-1,3-оксатиолан-5-ил]-2(1Н)-пиримидиноном (ГТС). Данное вещество является коммерчески доступным аналогом нуклеозида и обладает активностью против ВИЧ-1 [Ноопд с! а1., 1оигпа1 оГ Огдашс Сйст18!гу, 1992 (5563-5565); 1сопд с! а1., 1оита1 оГ Мсбю1па1 Сйст18йу, 1993, 36:2 (181-195); Уап Восу с! а1., Ап!Мга1 Сйст18!гу апб СйстоЕсгару, 1993, 4:6 (369375)]. Известно, что активность (-)-бета-энантиомера ГТС против ВИЧ-1 ίη νίΙΐΌ в 20 раз выше, чем (+)бета-энантиомера, при этом (+)-энантиомер является гораздо более токсичным по сравнению с (-)энантиомером для миелоидных клеток-предшественников [8сЫпах1 с! а1., Апбт1сгоЬ1а1 Адсп!з апб СйстоЕсгару, 1992, 36:11 (2423-2431)]. Потенциал устойчивости ВИЧ-1 к ГТС оценивали путем серийного пассажа вируса в клетках РВМС и МТ-2 человека в присутствии возрастающих концентраций лекарственного средства. Лекарственно устойчивые варианты ВИЧ-1 преобладали в реплицирующей популяции вирусов после двух или более циклов инфицирования. Обратная транскриптаза, выделенная из лекарственно устойчивых вирусных частиц, была в 15-50 раз менее чувствительна к 5'-трифосфату ГТС по сравнению с ферментом из исходного вируса, чувствительного к данному лекарственному средству. Анализ последовательности ДНК гена обратной транскриптазы, амплифицированного из устойчивых вирусов, позволил выявить мутации в кодоне 184 от Мс! (АТС) до Уа1 (ОТО или ОТА) [8сЫпа/1 с! а1., АЩпшсгоЬ1а1 Адсп!з апб Сйсто!йсгару, 1993, 37:4 (875-881); Т1зба1с с! а1., АпЕпа1 Всзсагсй, 1993, 20:8ирр1 1; 8ιηί11ι с! а1., 1оита1 оГ Упо1оду, 1997, 71:3 (2357-2362); Наггсг с! а1., 1оита1 оГ ГпГссбоиз Пхзсазсз, 1996, 173:2 (476-479); Т1зба1с с! а1., Ргосссбтдз оГ 1Нс Иабопа1 Асабсту оГ Зсюпссз оГ !йс Ипйсб 8!а!сз оГ Атсг1са, 1993, 90:12 (5653-5656)]. Из-за выявленной одной мутации в УМЭЭ обратной транкриптазы у ВИЧинфицированных субъектов (-)-ГТС оказывается непригодным для монотерапии, поэтому данное средство необходимо вводить в сочетании с другими антиретровирусными средствами для эффективного лече

- 5 014840 ния ВИЧ-инфицированных субъектов. Эмтрицитабин выпускается в виде 200 мг капсул, предназначенных для приема внутрь один раз в сутки.

Ламивудин имеет химическое название (-)-2',3'-дидезокси-3'-тиацитидин и описан, например, в европейском патенте ЕР-382526 в качестве антивирусного аналога нуклеозида. Кроме того, данное средство является хорошо известным и полезным антиретровирусным средством, которое выпускается в виде 150 мг таблеток для перорального введения. Ламивудин выпускается также в комбинации с зидовудином (300 мг зидовудина/150 мг ламивудина) и в комбинации с зидовудином и сульфатом абакавира (300 мг зидовудина/150 мг ламивудина/эквивалент 300 мг абакавира).

Абакавир является хорошо известным и полезным антиретровирусным средством, которое выпускается в виде раствора сульфата абакавира для перорального введения, крепость которого эквивалентна 20 мг основания абакавира/мл, или в виде таблеток сульфата абакавира для перорального введения, содержащих 300 мг основания абакавира. Сульфат абакавира выпускается также в комбинации с ламивудином и зидовудином (300 мг зидовудина/150 мг ламивудина/эквивалент 300 мг абакавира).

Абакавир является карбоциклическим нуклеозидом, обладающим сильной и избирательной антиВИЧ активностью. Абакавир в оптически активной форме описан в европейском патенте ЕР-434450. Цис-изомер абакавира с неспецифической абсолютной стереохимической конфигурацией описан в европейском патенте ЕР-349242. Абакавир является одним из наиболее сильнодействующих ΝΚΤΙ, созданных до настоящего времени. После короткого курса монотерапии абакавиром наблюдается среднее уменьшение вирусной нагрузки более чем на 1,4 1од 10 копий РНК/мл. Селекция устойчивого вируса ίη νίΐτο под влиянием абакавира происходит медленно. Значительное уменьшение чувствительности к абакавиру у штаммов ВИЧ-1 дикого типа или устойчивых к зидовудину наблюдалось только после восьмидесяти пассажей в клетках МТ-4. Во время пассажа абакавиром ίη νίίτο происходит отбор совокупности вызывающих устойчивость мутаций в кодонах обратной транскриптазы (КТ) ВИЧ, 65К, 74У, 115Р и/или 184У, при этом для 10-кратного уменьшения чувствительности к абакавиру в лабораторном штамме ВИЧ была необходима комбинация указанных мутаций. Первой мутацией, обнаруженной при пассаже ВИЧ-1 абакавиром в возрастающей концентрации, является М184У, которая вызывает только 3-кратное уменьшение чувствительности ВИЧ-1. Устойчивость фенотипа к ЗТС и/или наличие мутации 184 V не влияет на чувствительность вирусов к лечению абакавиром. Устойчивость к нескольким нуклеозидам ассоциирована со снижением или отсутствием чувствительности к абакавиру [Китаг е! а1., АпйшюгоЫа1 Адеп!к апб СйетоШегару, 1999, 43:3 (603-608); Ьашег е! а1., 1п1ета1юпа1 СопГегепсе оп Ке1гот1П.15ек апб Орройип1811с 1пГес!юпк, 1998, 5*: СЫсадо; рок1еб оп 16 Арп1 1999].

Предпочтительный вариант осуществления изобретения относится к комбинации, содержащей (1) ТМС278 или его стереоизомерную форму, фармацевтически приемлемую соль или пролекарство и (и) эмтрицитабин, в которой ТМС278 и эмтрицитабин являются терапевтически эффективными ингибиторами ВИЧ в дозе, которую можно вводить один раз в сутки.

Предпочтительный вариант осуществления изобретения относится к комбинации, содержащей (1) ТМС278 или его стереоизомерную форму, фармацевтически приемлемую соль или пролекарство и (и) ламивудин, в которой ТМС278 и ламивудин являются терапевтически эффективными ингибиторами ВИЧ в дозе, которую можно вводить один раз в сутки.

Другой предпочтительный вариант осуществления изобретения относится к композиции, содержащей (ί) ТМС278 или его стереоизомерную форму, фармацевтически приемлемую соль или пролекарство и (ίί) абакавир или его фармацевтически приемлемую соль, которая отличается тем, что ТМС278 и абакавир являются терапевтически эффективными ингибиторами ВИЧ в дозе, которую можно вводить один раз в сутки.

Другой предпочтительный вариант осуществления изобретения относится к комбинации, содержащей (ί) ТМС278 или его стереоизомерную форму, фармацевтически приемлемую соль или пролекарство и (ίί) сульфат абакавира, которая отличается тем, что ТМС278 и сульфат абакавира являются терапевтически эффективными ингибиторами ВИЧ в дозе, которую можно вводить один раз всутки.

Другой предпочтительный вариант осуществления изобретения относится к тройной комбинации, содержащей (1) ТМС278 или его стереоизомерную форму, фармацевтически приемлемую соль или пролекарство, (ίί) эмтрицитабин и (ίίί) ингибитор нуклеотидобратной транскриптазы, в которой ТМС278, ингибитор нуклеотидобратной транскриптазы и эмтрицитабин являются терапевтически эффективными ингибиторами ВИЧ в дозе, которую можно вводить один раз в сутки.

Другой предпочтительный вариант осуществления изобретения относится к тройной комбинации, содержащей (1) ТМС278 или его стереоизомерную форму, фармацевтически приемлемую соль или пролекарство, (ίί) ламивудин и (ίίί) ингибитор нуклеотидобратной транскриптазы, в которой ТМС278, ингибитор нуклеотидобратной транскриптазы и ламивудин являются терапевтически эффективными ингибиторами ВИЧ в дозе, которую можно вводить один раз в сутки.

Другой предпочтительный вариант осуществления изобретения относится к тройной комбинации, содержащей (ί) ТМС278 или его стереоизомерную форму, фармацевтически приемлемую соль или пролекарство, (ίί) абакавир или его фармацевтически приемлемую соль, предпочтительно сульфат абакавира, и (ίίί) ингибитор нуклеотидобратной транскриптазы, в которой ТМС278, ингибитор нуклеотидобрат

- 6 014840 ной транскриптазы и абакавир или его фармацевтически приемлемая соль, предпочтительно сульфат абакавира, являются терапевтически эффективными ингибиторами ВИЧ в дозе, которую можно вводить один раз в сутки.

Другой предпочтительный вариант осуществления изобретения относится к тройной комбинации, содержащей (1) ТМС278 или его стереоизомерную форму, фармацевтически приемлемую соль или пролекарство, (ίί) эмтрицитабин и (ίίί) тенофовир или его пролекарство дизопроксилфумарат тенофовира, в которой ТМС278, эмтрицитабин и тенофовир или его пролекарство дизопроксилфумарат тенофовира являются терапевтически эффективными ингибиторами ВИЧ в дозе, которую можно вводить один раз в сутки.

Другой предпочтительный вариант осуществления изобретения относится к тройной комбинации, содержащей (1) ТМС278 или его стереоизомерную форму, фармацевтически приемлемую соль или пролекарство, (ίί) ламивудин и (ίίί) тенофовир или его пролекарство дизопроксилфумарат тенофовира, в которой ТМС278, ламивудин и тенофовир или его пролекарство дизопроксилфумарат тенофовира являются терапевтически эффективными ингибиторами ВИЧ в дозе, которую можно вводить один раз в сутки.

Другой предпочтительный вариант осуществления изобретения относится к тройной комбинации, содержащей (ί) ТМС278 или его стереоизомерную форму, фармацевтически приемлемую соль или пролекарство, (ίί) абакавир или его фармацевтически приемлемую соль, предпочтительно сульфат абакавира, и (ίίί) тенофовир или его пролекарство дизопроксилфумарат тенофовира, в которой ТМС278, абакавир или его фармацевтически приемлемая соль, предпочтительно сульфат абакавира, и тенофовир или его пролекарство дизопроксилфумарат тенофовира являются терапевтически эффективными ингибиторами ВИЧ в дозе, которую можно вводить один раз в сутки.

В объем настоящего изобретения входят также нижеследующие предпочтительные тройные комбинации:

(a) ТМС278 или его стереоизомерная форма, фармацевтически приемлемая соль или пролекарство в сочетании с эмтрицитабином и дизопроксилфумаратом тенофовира;

(b) ТМС278 или его стереоизомерная форма, фармацевтически приемлемая соль или пролекарство в сочетании с ламивудином и дизопроксилфумаратом тенофовира;

(c) ТМС278 или его стереоизомерная форма, фармацевтически приемлемая соль или пролекарство в сочетании с сульфатом абакавира и дизопроксилфумаратом тенофовира;

(б) ТМС278 или его стереоизомерная форма, фармацевтически приемлемая соль или пролекарство в сочетании с эмтрицитабином и ламивудином;

(е) ТМС278 или его стереоизомерная форма, фармацевтически приемлемая соль или пролекарство в сочетании с эмтрицитабином и абакавиром или его фармацевтически приемлемой солью, предпочтительно сульфатом абакавира;

(1) ТМС278 или его стереоизомерная форма, фармацевтически приемлемая соль или пролекарство в сочетании с абакавиром или его фармацевтически приемлемой солью, предпочтительно сульфатом абакавира, и ламивудином.

Во всех комбинациях (а)-(1) активные ингредиенты, в частности ТМС278, эмтрицитабин, ламивудин, абакавир или его фармацевтически приемлемая соль, предпочтительно сульфат абакавира, и тенофовир или его пролекарство дизопроксилфумарат тенофовира, являются терапевтически эффективными ингибиторами ВИЧ в дозе, которую можно вводить один раз в сутки.

Двойные комбинации по настоящему изобретению могут содержать один или несколько дополнительных активных ингредиентов, которые могут быть средствами, пригодными для лечения ВИЧинфицированных субъектов, или другими активными агентами. Тройные комбинации по настоящему изобретению могут также содержать один или несколько дополнительных активных ингредиентов, которые могут быть средствами, пригодными для лечения ВИЧ-инфицированных субъектов, или другими активными агентами. Любые вышеуказанные дополнительные средства предпочтительно являются терапевтически эффективными в дозе, которую можно вводить один раз в сутки.

Активные ингредиенты в комбинациях по настоящему изобретению можно вводить одновременно, вместе или последовательно. Одновременное введение можно производить, используя единый фармацевтический препарат или раздельные фармацевтические препараты. Указанные комбинации можно вводить местно, перорально, ректально, внутривенно, подкожно или внутримышечно. Для первичной терапии ВИЧ-инфекции предпочтительным является одновременное введение с использованием единого фармацевтического препарата.

Таким образом, еще одним объектом настоящего изобретения является продукт, содержащий вышеуказанную комбинацию в виде комбинированного препарата, предназначенного для одновременного, раздельного или последовательного применения против ВИЧ-инфекции.

Настоящее изобретение относится также к продукту, содержащему (ί) ТМС278 или его стереоизомерную форму, фармацевтически приемлемую соль или пролекарство и (ίί) ингибитор нуклеозидобратной транскриптазы и/или ингибитор нуклеотидобратной транскриптазы, в котором ТМС278, ингибитор нуклеотидобратной транскриптазы и/или ингибитор нуклеозидобратной транскриптазы являются терапевтически эффективными ингибиторами ВИЧ в дозе, которую можно вводить один раз в сутки, в виде

- 7 014840 комбинированного препарата, предназначенного для одновременного, раздельного или последовательного применения против ВИЧ-инфекции.

Другим объектом настоящего изобретения является продукт, содержащий (1) ТМС278 или его стереоизомерную форму, фармацевтически приемлемую соль или пролекарство и (ίί) ингибитор нуклеозидобратной транскриптазы, в котором ТМС278 и ингибитор нуклеозидобратной транскриптазы являются терапевтически эффективными ингибиторами ВИЧ в дозе, которую можно вводить один раз в сутки, в виде комбинированного препарата, предназначенного для одновременного, раздельного или последовательного применения против ВИЧ-инфекции.

Другим объектом настоящего изобретения является продукт, содержащий (1) ТМС278 или его стереоизомерную форму, фармацевтически приемлемую соль или пролекарство и (и) ингибитор нуклеотидобратной транскриптазы, в котором ТМС278 и ингибитор нуклеотидобратной транскриптазы являются терапевтически эффективными ингибиторами ВИЧ в дозе, которую можно вводить один раз в сутки, в виде комбинированного препарата, предназначенного для одновременного, раздельного или последовательного применения против ВИЧ-инфекции.

Другим объектом настоящего изобретения является продукт, содержащий (1) ТМС278 или его стереоизомерную форму, фармацевтически приемлемую соль или пролекарство, (ίί) ингибитор нуклеозидобратной транскриптазы и (ίίί) ингибитор нуклеотидобратной транскриптазы, в котором ТМС278, ингибитор нуклеотидобратной транскриптазы и ингибитор нуклеозидобратной транскриптазы являются терапевтически эффективными ингибиторами ВИЧ в дозе, которую можно вводить один раз в сутки, в виде комбинированного препарата, предназначенного для одновременного, раздельного или последовательного применения против ВИЧ-инфекции.

Другим объектом настоящего изобретения является продукт, содержащий (1) ТМС278 или его стереоизомерную форму, фармацевтически приемлемую соль или пролекарство, (и) ингибитор нуклеозидобратной транскриптазы и (ίίί) второй ингибитор нуклеозидобратной транскриптазы, отличающийся от первого ингибитора нуклеозидобратной транскриптазы по п.(п), в котором ТМС278 и ингибиторы нуклеозидобратной транскриптазы являются терапевтически эффективными ингибиторами ВИЧ в дозе, которую можно вводить один раз в сутки, в виде комбинированного препарата, предназначенного для одновременного, раздельного или последовательного применения против ВИЧ-инфекции.

Активные ингредиенты в продуктах по настоящему изобретению присутствуют в терапевтически эффективных количествах, означающих такое количество, которое является достаточным для оказания необходимого ВИЧ-ингибирующего действия в течение определенного периода времени, то есть между каждым приемом препаратов, предпочтительно в течение примерно 24 ч.

Конкретные варианты осуществления изобретения относятся к вышеуказанным продуктам, содержащим один или несколько определенных активных ингредиентов по данному изобретению, таких как эмтрицитабин, рацемический РТС, ламивудин, тенофовир и его пролекарство дизопроксилфумарат тенофовира.

Вышеуказанные продукты могут включать отдельные композиции, содержащие активные ингредиенты, или композиции, в которых могут быть объединены два или более активных ингредиентов.

Еще одним объектом настоящего изобретения являются фармацевтические композиции, содержащие вышеуказанную комбинацию и приемлемый носитель.

Другим объектом настоящего изобретения является фармацевтическая композиция, содержащая фармацевтически приемлемый носитель и в качестве активных ингредиентов (ί) ТМС278 или его стереоизомерную форму, фармацевтически приемлемую соль или пролекарство и (ίί) ингибитор нуклеозидобратной транскриптазы и/или ингибитор нуклеотидобратной транскриптазы, в которой ТМС278, ингибитор нуклеозидобратной транскриптазы и/или ингибитор нуклеотидобратной транскриптазы являются терапевтически эффективными ингибиторами ВИЧ в дозе, которую можно вводить один раз в сутки.

Настоящее изобретение далее относится к фармацевтической композиции, содержащей фармацевтически приемлемый носитель и в качестве активных ингредиентов (ί) ТМС278 или его стереоизомерную форму, фармацевтически приемлемую соль или пролекарство и (ίί) ингибитор нуклеозидобратной транскриптазы, в которой ТМС278 и ингибитор нуклеозидобратной транскриптазы являются терапевтически эффективными ингибиторами ВИЧ в дозе, которую можно вводить один раз в сутки.

Другим объектом настоящего изобретения является фармацевтическая композиция, содержащая фармацевтически приемлемый носитель и в качестве активных ингредиентов (ί) ТМС278 или его стереоизомерную форму, фармацевтически приемлемую соль или пролекарство и (ίί) ингибитор нуклеотидобратной транскриптазы, в которой ТМС278 и ингибитор нуклеотидобратной транскриптазы являются терапевтически эффективными ингибиторами ВИЧ в дозе, которую можно вводить один раз в сутки.

Другим объектом настоящего изобретения является фармацевтическая композиция, содержащая фармацевтически приемлемый носитель и в качестве активных ингредиентов (ί) ТМС278 или его стереоизомерную форму, фармацевтически приемлемую соль или пролекарство, (ίί) ингибитор нуклеозидобратной транскриптазы и (ίίί) ингибитор нуклеотидобратной транскриптазы, в которой ТМС278, ингибитор нуклеозидобратной транскриптазы и ингибитор нуклеотидобратной транскриптазы являются терапевтически эффективными ингибиторами ВИЧ в дозе, которую можно вводить один раз в сутки.

- 8 014840

Другим объектом настоящего изобретения является фармацевтическая композиция, содержащая фармацевтически приемлемый носитель и в качестве активных ингредиентов (1) ТМС278 или его стереоизомерную форму, фармацевтически приемлемую соль или пролекарство, (п) ингибитор нуклеозидобратной транскриптазы и (ш) второй ингибитор нуклеозидобратной транскриптазы, отличающийся от первого ингибитора нуклеозидобратной транскриптазы по п.(п), в которой ТМС278 и ингибиторы нуклеозидобратной транскриптазы являются терапевтически эффективными ингибиторами ВИЧ в дозе, которую можно вводить один раз в сутки.

Активные ингредиенты в фармацевтических композициях по настоящему изобретению присутствуют в терапевтически эффективных количествах, означающих такое количество, которое является достаточным для оказания необходимого ВИЧ-ингибирующего действия в течение определенного периода времени, то есть между каждым приемом препаратов, предпочтительно в течение примерно 24 ч.

Конкретные варианты осуществления изобретения относятся к вышеуказанным фармацевтическим композициям, содержащим один или несколько определенных активных ингредиентов по данному изобретению, таких как эмтрицитабин, рацемический ЕТС, ламивудин, тенофовир и его пролекарство дизопроксилфумарат тенофовира.

Фармацевтические композиции по настоящему изобретению могут быть получены в разных формах, предназначенных для разных способов введения. Для получения фармацевтических композиций по данному изобретению эффективные количества активных ингредиентов, необязательно в виде аддитивной соли, объединяют с образованием однородной смеси с фармацевтически приемлемым носителем, в качестве которого могут быть использованы разные вещества в зависимости от желаемой формы препарата, соответствующей определенному способу введения.

Фармацевтические композиции по настоящему изобретению предпочтительно получают в виде единичной дозированной формы, пригодной для перорального, ректального, подкожного или парентерального введения. Например, для получения препаратов в виде дозированной формы для перорального введения можно использовать любые обычно применяемые фармацевтические среды, такие как, например, вода, гликоли, масла, спирты и тому подобные, в случае жидких препаратов для перорального введения, таких как суспензии, сиропы, эликсиры, эмульсии и растворы; или твердые носители, такие как крахмалы, сахара, каолин, разбавители, лубриканты, связующие, дезинтегранты и тому подобные, в случае порошков, пилюль, капсул и таблеток. Благодаря простоте введения таблетки и капсулы являются наиболее приемлемыми дозированными единичными формами для перорального введения, и в данном случае обычно применяются твердые фармацевтические носители. В композициях для парентерального введения носителем обычно является стерильная вода, по крайней мере большей частью носителя, хотя могут быть использованы другие ингредиенты, например, улучшающие растворимость. Например, могут быть получены инъекционные растворы, в которых носителем является физиологический раствор, раствор глюкозы или смесь физиологического раствора и раствора глюкозы. Могут быть также получены инъекционные суспензии, в которых могут быть использованы соответствующие жидкие носители, суспендирующие агенты и тому подобные.

В соответствии с одним объектом настоящего изобретения указанные комбинации могут быть использованы для получения таблеток для перорального введения, включающих фармацевтически приемлемые эксципиенты, имеющие массу от 150 до 600 мг, предпочтительно от 200 до 400 мг. Обычные таблетки для перорального введения, содержащие активные ингредиенты по настоящему изобретению, имеют общую номинальную массу от 200 до 1500 мг, предпочтительно от 500 до 1250 мг, более предпочтительно от 600 до 1100 мг.

Преимуществом фармацевтических композиций по настоящему изобретению является то, что все ингредиенты указанных комбинаций могут быть объединены в одной фармацевтической композиции и не требуют отдельного введения. Суточное терапевтически эффективное антиретровирусное количество ингредиентов, образующих комбинацию по настоящему изобретению, в одной объединенной фармацевтической форме предпочтительно вводят в виде единичной дозированной формы, но при желании можно вводить в виде нескольких единичных дозированных форм, в частности двух, трех, четырех, пяти и даже большего числа единичных дозированных форм. Лечащий врач может определить точную дозу с учетом тяжести заболевания субъекта, а также массы тела, пола и, возможно, других показателей, таких как индивидуальные различия скоростей всасывания, распространения в организме, обмена вещества и экскреции для каждого лекарственного средства, и других факторов, известных специалистам в данной области.

Настоящее изобретение относится также к способу лечения ВИЧ-инфицированных субъектов, который включает введение комбинации по данному изобретению.

Кроме того, настоящее изобретение относится к способу лечения ВИЧ-инфицированных субъектов, включающему введение ТМС278 или его стереоизомерной формы, фармацевтически приемлемой соли или пролекарства в комбинации с ингибитором нуклеозидобратной транскриптазы и/или ингибитором нуклеотидобратной транскриптазы, в котором терапевтически эффективное количество ТМС278, ингибитора нуклеозидобратной транскриптазы и/или ингибитора нуклеотидобратной транскриптазы можно вводить один раз в сутки.

- 9 014840

Настоящее изобретение относится также к способу лечения ВИЧ-инфицированных субъектов, включающему введения ТМС278 или его стереоизомерной формы, фармацевтически приемлемой соли или пролекарства в комбинации с ингибитором нуклеозидобратной транскриптазы, в котором терапевтически эффективное количество ТМС278 и ингибитора нуклеозидобратной транскриптазы можно вводить один раз в сутки.

Другим объектом настоящего изобретения является способ лечения ВИЧ-инфицированных субъектов, включающий введение ТМС278 или его стереоизомерной формы, фармацевтически приемлемой соли или пролекарства и ингибитора нуклеотидобратной транскриптазы, в котором терапевтически эффективное количество ТМС278 и ингибитора нуклеотидобратной транскриптазы можно вводить один раз в сутки.

Другим объектом настоящего изобретения является способ лечения ВИЧ-инфицированных субъектов, включающий введение ТМС278 или его стереоизомерной формы, фармацевтически приемлемой соли или пролекарства в комбинации с ингибитором нуклеозидобратной транскриптазы и ингибитором нуклеотидобратной транскриптазы, в котором терапевтически эффективное количество ТМС278, ингибитора нуклеотидобратной транскриптазы и ингибитора нуклеозидобратной транскриптазы можно вводить один раз в сутки.

Другим объектом настоящего изобретения является способ лечения ВИЧ-инфицированных субъектов, включающий введение ТМС278 или его стереоизомерной формы, фармацевтически приемлемой соли или пролекарства в комбинации с первым ингибитором нуклеозидобратной транскриптазы и вторым ингибитором нуклеозидобратной транскриптазы, отличающимся от первого ингибитора нуклеозидобратной транскриптазы, в котором терапевтически эффективное количество ТМС278 и ингибиторов нуклеозидобратной транскриптазы можно вводить один раз в сутки.

Активные ингредиенты, используемые при осуществлении способов по настоящему изобретению, вводят в терапевтически эффективных количествах, что означает такое количество, которое является достаточным для оказания необходимого ВИЧ-ингибирующего действия в течение определенного периода времени, то есть между каждым приемом препаратов, предпочтительно в течение примерно 24 ч.

Конкретные варианты осуществления изобретения относятся к вышеуказанным способам, в соответствии с которыми вводят один или несколько определенных активных ингредиентов по данному изобретению, таких как эмтрицитабин, рацемический РТС, ламивудин, тенофовир и его пролекарство дизопроксилфумарат тенофовира.

Один вариант осуществления настоящего изобретения относится к комбинациям по данному изобретению, предназначенным для использования в качестве лекарственного средства. Другой вариант осуществления изобретения относится к комбинациям по настоящему изобретению, предназначенным для приготовления лекарственного средства для лечения ВИЧ-инфицированных субъектов.

Особый интерес представляют любые комбинации по настоящему изобретению или любые продукты, фармацевтические композиции, единичные дозированные формы, способы и применения на основе указанных комбинаций, в которых ТМС278 представляет собой Е-ТМС278, или предпочтительно хлористо-водородную соль ТМС278, или более предпочтительно хлористо-водородную соль Е-ТМС278.

Комбинации по настоящему изобретению особенно пригодны для лечения СПИДа и ассоциированных клинических заболеваний, таких как СПИД-ассоциированный комплекс (АВС), прогрессирующая генерализованная лимфаденопатия (РСЬ) или СПИД-ассоциированные неврологические заболевания, такие как рассеянный склероз. Тройная комбинация по настоящему изобретению может быть особенно пригодна для лечения ВИЧ-инфицированных субъектов, не принимавших ранее лекарственных средств.

Комбинации по настоящему изобретению пригодны также для профилактики передачи или инфицирования ВИЧ человека, в частности передачи половым путем. Таким образом, настоящее изобретение относится к применению комбинаций по данному изобретению для приготовления лекарственного средства, предназначенного для профилактики инфицирования или передачи ВИЧ в результате полового акта или подобных интимных контактов между партнерами. Данное изобретение относится также к способу профилактики инфицирования или передачи ВИЧ в результате полового акта или подобных интимных контактов между партнерами, который включает введение нуждающемуся субъекту эффективного количества любой комбинации по настоящему изобретению.

Соответствующая суточная доза для каждого активного ингредиента в комбинации по настоящему изобретению находится в пределах от 10 до 800 мг, предпочтительно от 50 до 400 мг, более предпочтительно от 50 до 300 мг или от 100 до 300 мг. В частности, суточная доза ТМС278 может составлять от 10 до 500 мг, предпочтительно от 10 до 300 мг, более предпочтительно от 50 до 250 мг, еще предпочтительнее от 50 до 200 мг, например около 100 мг.

Массовое соотношение каждых двух компонентов в тройной комбинации, принимаемой внутрь один раз в сутки, может изменяться в пределах от 1:10 до 10:1. Массовое соотношение каждых двух компонентов изменяется от 1:6 до 6:1, в частности от 1:4 до 4:1, предпочтительно от 1:3 до 3:1 и более предпочтительно от 1:2 до 2:1.

В табл. 2 приведены некоторые примеры суточной дозы для каждого активного ингредиента в комбинациях соединения Е-ТМС278, эмтрицитабина и тенофовира.

- 10 014840

Таблица 2

№ комбинации	Е-ТМС278	Эмтрици т а бин	Тенофовир
1 .	50 мг	200 мг	-
2	50 мг	-	300 мг
3	100 мг	200 мг	-
4	100 мг	-	300 мг
5	200 мг	200 мг	-
6	200 мг	-	300 мг
7	50 мг	200 мг	300 мг
8	100 мг	200 мг	30 0 мг
9	2 00 мг	200 мг	30 0 мг

В табл. 3 приведены некоторые примеры суточной дозы для каждого активного ингредиента в комбинациях ТМС278, абакавира и ламивудина, причем доза, указанная в таблице для сульфата абакавира, эквивалентна дозе основания абакавира.

Таблица 3

№ комбинации	Е-ТМС278	Ламивудин	Сульфат абакавира
1	50 мг	150 мг	300 мг
2	100 мг	150 мг	300 мг
3	200 мг	150 мг	300 мг

Таким образом, интересная комбинация по настоящему изобретению содержит суточную дозу соединения Е-(А) в пределах от 10 до 500 мг, суточную дозу ламивудина, равную 150 мг, и суточную дозу сульфата абакавира, эквивалентную 300 мг основания абакавира. Такую комбинацию обычно готовят в виде единичной лекарственной формы.

Другая интересная комбинация по настоящему изоретению содержит суточную дозу соединения Е(А) в пределах от 50 до 250 мг, суточную дозу ламивудина, равную 150 мг, и суточную дозу сульфата абакавира, эквивалентную 300 мг основания абакавира. Такую комбинацию обычно готовят в виде единичной лекарственной формы.

Настоящее изобретение относится также к фармацевтической композиции в форме, пригодной для применения в месте совершения полового акта или подобных интимных контактов, таких как половые органы, прямая кишка, рот, руки, нижняя часть живота, верхняя часть бедер, особенно влагалище и рот, которая содержит фармацевтически приемлемый носитель и в качестве активных ингредиентов эффективное количество комбинации по настоящему изобретению. В качестве приемлемых композиций специального назначения можно привести все композиции, обычно предназначенные для применения во влагалище, прямой кишке, во рту и на коже, такие как, например, гели, желе, кремы, мази, пленки, тампоны, пены, интравагинальные кольца, колпачки для шейки матки, суппозитории для ректального или вагинального введения, таблетки для вагинального, ректального или трансбуккального введения, жидкости для полоскания рта. Для получения таких фармацевтических композиций эффективное количество всех соединений, входящих в состав тройной комбинации в качестве активных ингредиентов, объединяют с образованием однородной смеси с фармацевтически приемлемым носителем, который может быть использован в разных формах в зависимости от способа введения. Чтобы увеличить время пребывания такой фармацевтической композиции в месте введения, в композицию может быть добавлено биоадгезивное вещество, в частности биоадгезивный полимер. Биоадгезивным веществом является такое вещество, которое связывается с живой биологической поверхностью, такой как, например, слизистая оболочка или ткань кожи.

Таким образом, настоящее изобретение относится также к фармацевтической композиции, содержащей фармацевтически приемлемый носитель и в качестве активных ингредиентов эффективное количество компонентов, входящих в состав тройной комбинации по данному изобретению, которая отличается тем, что биологически связывается с местом введения. Местом введения предпочтительно является влагалище, прямая кишка, рот или кожа, наиболее предпочтительно влагалище.

В публикациях ОНеп К.А. с1 а1. ίη 1оигла1 о£ У1го1оду (2000), 74(20), 9771-9775 и \νίΙνΐΌΐι\ν М. с1 а1. ίη Ληΐίνίπιΐ Кекеагсй (2000), 46(3), 215-221 описана способность тенофовира замедлять проникновение ВИЧ после полового акта с повышенным риском.

- 11 014840

В публикации Рат А. с1 а1. ίη ΑηΙίνίΓαΙ Сйеш18!гу & СйетоФегару (2001), 12 (8ирр1. 1), 51-59 описана способность ламивудина замедлять проникновение вирусной инфекции.

Способность ТМС278 предотвращать инфицирование ВИЧ в результате полового акта или подобных интимных контактов между партнерами можно продемонстрировать в нижеследующем испытании. Дендритные клетки, выделенные из незрелых моноцитов (1ттМО-ЭС), являются хорошей моделью интерстициальных дендритных клеток, которые являются первичными мишенями во время передачи ВИЧ половым путем и важными инициаторами иммунной реакции. Клетки 1ттМО-ЭС были использованы в моделях ίη νίίτο для исследования возможности предотвращения ВИЧ-инфицирования в результате полового акта или подобных интимных контактов между партнерами. Одна такая модель, описанная в экспериментальной части, показывает, что ТМС278 в значительной степени ингибирует репликацию ВИЧ в сокультурах МО-ОС/СИ4(+) Т-клеток.

Примеры

Пример 1. Фармакокинетика Е-ТМС278.

Для оценки безопасности, толерантности и фармакокинетики ех νίνο разовых доз соединения ЕТМС278 было проведено рандомизированное, контролируемое при помощи плацебо исследование на стадии I, выполненное двойным слепым методом, с участием здоровых добровольцев мужского пола. Дозы для перорального введения, равные 12,5, 25 и 50 мг, которые были получены с использованием РЕО 400, добровольцы принимали внутрь вместе с обычной пищей. Результаты исследования фармакокинетики приведены в табл. 4.

В табл. 4 приведены также данные фармакокинетических параметров, полученные при проведении другого рандомизированного, контролируемого при помощи плацебо исследования на стадии I, выполненного двойным слепым методом, на протяжении 4 циклов введения доз с целью оценки безопасности, толерантности, фармакокинетики и фармакодинамики ех νίνο разовых 100 и 200 мг доз соединения ЕТМС278, предназначенных для перорального введения, у здоровых добровольцев мужского пола. В соответствии с заданной рандомизацией на протяжении одного цикла 6 субъектов принимали одинаковую дозу соединения Е-ТМС278 и 3 субъекта принимали плацебо. Циклы приема доз осуществляли через промежуток времени, равный примерно 14 дням.

Из табл. 4 видно, что указанные средства оказывали высокие и пропорциональные дозе воздействия. Коэффициент корреляции для 5 точек данных С_тах равен 0,9897, и значения для площади под кривой в период времени от 0 до 48 ч (АИС_{0-48 ч}) равны 0,9952. Период полувыведения соединения из плазмы составил от 37 до 39 ч. Указанное соединение хорошо переносилось добровольцами. Не были отмечены вредные эффекты, вызываемые данным лекарственным средством.

Таблица 4

Параметр	12,5 мг	25 мг	50 мг	100 мг	200 мг
Стак (НГ/МЛ)	73±14	149±32	267±27	482±121	807±207
Т_тах (часы)	4,0±0	4,0±1,3	4,0±1,3	4,3±0,8	4,3±0,8
АиСо.48 _таеов (нгчас/мл)	1337±310	2805±496	5094±509	8162±2251	15592±274б
АиСо.® (нгчас/мл)	2210±473	4637±1164	8872±1342	15844±4592
Тщ (часы)	37,1	38,7	45±9	55±18

Пример 2. Вирусологический профиль соединения Е-ТМС278.

Соединение Е-ТМС278 испытывали методом клеточного анализа, используя естественные клеткихозяева ВИЧ. Клетки МТ-4 (линия Т-клеток человека) инфицировали ВИЧ-1 (дикого типа или мутантами) и подвергали воздействию антивирусного соединения, используемого в разных концентрациях, в присутствии 10% фетальной телячьей сыворотки. Цитотоксичность определяли параллельно с антивирусной активностью для оценки избирательности антивирусного действия. Активные соединения должны проникать через клеточную мембрану, чтобы воздействовать на стадии репликации внутри клетки.

Клетки инкубировали в течение четырех дней при 37°С, после чего оценивали жизнеспособность ВИЧ-инфицированных и псевдоинфицированных клеток при помощи автоматического колориметрического анализа на основе тетразолия. Данный метод позволяет вычислить 50% ингибирующую концентрацию, необходимую для ингибирования цитопатических свойств вируса (1С50), 1С90, и 50% цитотоксическую концентрацию (СС50). Отношение СС50/1С50, именуемое также индексом избирательности, является показателем специфичности антивирусного действия. Были испытаны нижеследующие штаммы: ВИЧ-1 дикого типа (\\1): панель мутантов с одной и двумя мутациями, полученными в результате сайт-направленного мутагенеза (8ΌΜ), и панель клинических изолятов, отобранных с учетом устойчивости к ΝΝΚ.ΊΊ.

Активность в отношении вируса дикого типа и мутантов 8ΌΜ.

Ограниченная панель мутантов ВИЧ-1 была создана методом сайт-направленного мутагенеза

- 12 014840 (δΌΜ) и методами гомологичной рекомбинации. Соединение Е-ТМС278 испытывали в отношении воздействия на расширенную панель мутантов с одной и двумя мутациями, которые, как было известно, являются устойчивыми к коммерчески доступным ингибиторам ΝΝΚΤΙ. В качестве контрольных образцов использовали невирапин (ΝΥΡ) и эфавиренз (ΕΡΥ).

Результаты приведены в табл. 5 (приведенные величины являются значениями 1С50, выраженными в нМ). Для вируса дикого типа полученное значение 1С50 было равно 0,4 нМ (0,15 нг/мл) и 1С90 было равно 1,3 нМ (0,48 нг/мл). Штаммом ВИЧ с наименьшей чувствительностью к соединению Е-ТМС278 в данной выборке был мутант с двумя мутациями 100Ι+103Ν, который имел значение 1050, равное примерно 8 нМ, и значение 1С90, равное примерно 16 нМ.

Таблица 5

	ЫУР
вирус дикого типа	81
1001	597
101Е	547
ЮЗЫ	2879
106А	2983
1081	-
138К	64
179ϋ	161
179Е	158
181С	10000
188С	3764
188Н	241
188Ь	10000
190А	4101
1903	10000
225Н	171
227С	1816
227Ъ	78
2341	45
236Ь	41
100Ι+103Ν	10000
101Е+103Ы	7033
103Ν+181Ι	10000
227Ε+106Ά	10000

ЕРУ	Соединение Е-ТМС278
1,4	0,4
35	0,4
5	1,6
28	0,3
23	0,2 ’
2	0,3
1,3	0,4
6	0, 6
5	0,4
2	1,3
5	0,1
9	0,2
78	2,0
8	0,3
275	0,1
2	0, 3
36	2,0
0,3	0,3
Не испытан	0,3
1	0, 3

10000	7,9
84	0, 5
37	1,0
8	1,0

Возникновение устойчивости ίπ νίίτο.

Ингибиторы ΝΝΚΤΙ являются в высшей степени избирательно действующими ингибиторами ВИЧ1, но их современное клиническое применение ограничено из-за быстрого возникновения (перекрестной) устойчивости к ΝΝΚΤΙ. Было проведено сравнение ίπ νίίτο скорости возникновения устойчивости к соединению Е-ТМС278 и ингибиторам ΝΝΚΤΙ первого поколения невирапину и эфавирензу.

Клетки МТ4 инфицировали ВИЧ-1 дикого типа с высокой множественностью заражения (>1 инфекционного вируса на одну клетку для максимального увеличения генетического разнообразия популяции вирусов) в присутствии соединения Е-ТМС278, используемого в разных концентрациях (40, 200, 1000 и 5000 х 1С50), и контролировали репликацию вирусов два раза в неделю. Появляющиеся вирусы собирали для фено- и генотипирования. Культуры без признаков репликации вируса продолжали субкультивировать в присутствии ингибитора в такой же концентрации на протяжении в общей сложности 30 дней (10 пассажей).

Устойчивость к невирапину возникала в течение 3-6 дней при всех испытанных концентрациях.

Образовавшийся вирус приобретал типичную мутацию У181С. В результате таких же экспериментов с

- 13 014840 использованием эфавиренза была обнаружена мутация С190Е при всех концентрациях (вплоть до 5 мкМ) в течение 3-7 дней. Устойчивость к соединению Е-ТМС278 не возникала в течение 30 дней при использовании вируса дикого типа. При использовании мутанта с двумя мутациями Κ103Ν+Υ181Ε (1С50 0,8 нМ) вместо вируса дикого типа устойчивость возникала при всех испытанных концентрациях. При использовании мутантов с одной мутацией У181С (1С50 1,3 нМ) или 103Ν (1С50 0,3 нМ) устойчивость не возникала при концентрациях 40 и 200 нМ и возникала при концентрации 10 нМ.

В данном эксперименте с высоким генетическим разнообразием очень быстро появлялся ВИЧ-1, устойчивый к ингибитору ΝΝΚΤΙ первого поколения. Устойчивые вирусы имели только одну мутацию. В отличие от этого появление ВИЧ-1, устойчивого к соединению Е-ТМС278, происходило медленно или вообще не происходило.

Безопасность соединения Е-ТМС278 для сердечно-сосудистой системы и легких.

Соединение Е-ТМС278 незначительно влияло или вообще не влияло на показатели сердечнососудистой системы и легких ίη νίνο при концентрациях в плазме, достаточных и превышающих необходимые уровни у человека, и при концентрациях ίη νίίτο, достаточных или превышающих уровень, необходимый для достижения антивирусной активности ίη νίίτο.

Пример 3. Модели для испытания ίη νίίτο способности соединения Е-ТМС278 предотвращать ВИЧинфицирование в результате полового акта или подобных интимных контактов между партнерами.

Например, в одной модели выделенные из моноцитов дендритные клетки (МО-ОС) в течение 2 ч инфицировали монотропным штаммом ВИЧ Ва-Ь с множественностью заражения (МО1), равной 10^-3. После инфицирования клетки 6 раз промывали и вторично суспендировали в 10% ВС8 в количестве 400000 клеток/мл. Аутологичные СО4(+) Т-клетки очищали от фракции лимфоцитов в результате такого же промывания, что и МО-ОС, и использовали в концентрации 2х10⁶ клеток/мл (соотношение МООС/СО4(+) Т-клеток : 1/5).

Последовательно разведенное соединение формулы (I) (испытуемое соединение) добавляли к сокультурам МО-ОС/С04(+) Т-клеток. Все эксперименты выполняли на 96-луночных планшетах, где каждая лунка содержала 50 мкл МО-ОС, 50 мкл СО4(+) Т-клеток и 100 мкл испытуемого соединения. Половину культуральной среды вместе с испытуемым соединением заменяли два раза в неделю. Супернатанты анализировали методом ЕЫ8А после культивирования в течение 14 дней. Для определения антивирусной активности измеряли концентрацию испытуемого соединения, способного подавлять 50% репликацию вируса в конце первичного культивирования (ЕС50). Для соединения Е-ТМС278 значение ЕС50 было равно 0,55 нМ.

Пример 4. Препараты.

Лекарственный препарат в виде таблетки имеет нижеследующий состав:

Эмтрицитабин	300 мг
Дизопроксилфумарат тенофовира	300 мг
Хлористоводородная соль Е-ТМС273	110 мг
НЕМС 2910 15 мПа·с	24 мг
Полисорбат 20	6 мг
Кроссполивидон	18 мг
Моногидрат лактозы	4 3 мг
Стеарат магния	3 мг
Тальк	6 мг

Активные ингредиенты и лактозу ожижают и опрыскивают раствором НРМС и полисорбата в воде (в эквивалентном количестве, равном 120 мл/таблетку). Затем добавляют кроссполивидон, пока система находится в ожиженном состоянии, а затем стеарат магния и тальк. Из полученного таким образом гранулята прессуют 13 мм цилиндрические таблетки в стандартной машине для прессования.

Claims

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. Комбинация для лечения пациентов, инфицированных вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ), вводимая один раз в сутки, содержащая (ί) от 10 до 300 мг ингибитора ненуклеозид-обратной транскриптазы, представляющего собой 4-[[4[[4-(2-цианоэтенил)-2,6-диметилфенил]амино]-2-пиримидинил]амино]бензонитрил (ТМС278) или его стереоизомерную форму или его фармацевтически приемлемую соль, и (ίί) от 50 до 400 мг дизопроксилфумарат тенофовира и (ΐϊϊ) от 50 до 400 мг эмтрицитабина.
2. Комбинация по п.1, где ТМС278 представлен в его Е-изомерной форме (Е-ТМС278).
3. Комбинация по п.1, где ТМС278 представлен в форме гидрохлоридной соли Е-ТМС278.

- 14 014840
4. Комбинация по п.1, где массовое соотношение каждых двух компонентов в тройной комбинации, принимаемой один раз в сутки, находится в пределах от 1:10 до 10:1.
5. Продукт, содержащий комбинацию, определенную в п.1, в качестве комбинированного препарата, предназначенного для одновременного, раздельного или последовательного применения против ВИЧинфекции.
6. Фармацевтическая композиция, содержащая фармацевтически приемлемый носитель и комбинацию, определенную в п.1.
7. Применение комбинации, определенной в п.1, для производства лекарственного средства для лечения ВИЧ-инфекции, где комбинация вводится пациенту один раз в сутки.
8. Применение по п.7, где ТМС278 представлен в его Е-изомерной форме (Е-ТМС278).
9. Применение по п.7, где ТМС278 представлен в форме гидрохлоридной соли Е-ТМС278.

Евразийская патентная организация, ЕАПВ

Россия, 109012, Москва, Малый Черкасский пер., 2