EA009371B1 - Способ управляемой гиперстимуляции яичников и фармацевтический набор для использования в таком способе - Google Patents

Abstract

Один из аспектов настоящего изобретения относится к способу управляемой гиперстимуляции яичников у женских особей млекопитающих, причем указанный способ содержит совместное введение указанной женской особи вещества, имеющего активность фолликулостимулирующего гормона (вещество ФСГ), в количестве, эффективном для стимуляции развития множественных фолликулов; антагониста гонадотропин-высвобождающего гормона (GnRH) в количестве, эквивалентном дневной подкожной дозе по меньшей мере 0,5 мг ганиреликса для предотвращения преждевременного выброса ЛГ; и вещества ЛГ в количестве, эффективном для предотвращения или подавления симптомов недостатка лютеинизирующего гормона (ЛГ), являющимся результатом введения антагониста GnRH; последующее введение вещества, индуцирующего мейоз и лютеинизацию (вещество МЛ), в количестве, эффективном для стимуляции продолжения мейоза и лютеикизации, и причем вещество ЛГ не получают из мочи женских особей человека. Другой аспект настоящего изобретения относится к фармацевтическому набору для применения в способе управляемой гиперстимуляции яичников, причем набор содержит по меньшей мере одну парентеральную или оральную дозу, содержащую одно или несколько веществ ФСГ в количестве, эквивалентном подкожной дозе 50-1500 ME ФСГ; по меньшей мере одну парентеральную дозу, содержащую один или несколько антагонистов GnRH в количестве, эквивалентном подкожной дозе 0,5-25 мг ганереликса; по меньшей мере одну парентеральную дозу, содержащую одно или несколько веществ ЛГ в количестве, эквивалентном подкожной дозе 50-3000 ME ЛГ; причем вещество ЛГ не получают из мочи женских особей человека.

Description

Настоящее изобретение относится к способу управляемой гиперстимуляции яичников женских особей млекопитающих. Более конкретно, настоящее изобретение относится к способу управляемой гиперстимуляции яичников для лечения бесплодия у млекопитающих, причем указанный способ содержит введение женской особи млекопитающих вещества, имеющего активность фолликулостимулирующего гормона (вещество ФСГ), в количестве, эффективном для стимуляции развития множественных фолликуллов, и антагониста гонадотропин-высвобождающего гормона (ОиКН) в количестве, достаточном для предотвращения случая преждевременного выброса ЛГ после введения вещества, индуцирующего мейоз и лютеинизацию (вещество МЛ), в количестве, достаточном для стимуляции продолжения мейоза и лютеинизации.

Другой аспект настоящего изобретения относится к фармацевтическому набору для применения в настоящем способе управляемой гиперстимуляции яичников.

Уровень техники

Функция яичников женских особей млекопитающих регулируется гипофизарными гормонами, называемыми гонадотропинами. Наиболее хорошо известными гонадотропинами являются фолликулостимулирующий гормон (ФСГ), который вызывает созревание фолликулов, и лютеинизирующий гормон (ЛГ), который вызывает овуляцию.

После каждой менструации яичники стимулируются ФСГ, высвобождаемым гипофизом для роста когорты фолликулов. Каждая такая фолликула содержит ооцит (яйцеклетку), который покрыт шаром зернистых клеток. Во время роста фолликулов формируется несколько слоев зернистых клеток. Постепенно один фолликул становится доминантным, а другие превращаются в атретический фолликул и дегенерируют при апоптозе. Созревание фолликула во время обычного менструального цикла происходит за 12-14 дней. При увеличении количества зернистых клеток этими клетками секретируется больше эстрогена.

Как только доминантный фолликул достигает зрелости, фолликул разрывается (овулирует) под воздействием выброса ЛГ, который высвобождается слизистой в ответ на увеличенный уровень эстрогена в сыворотке крови (положительная обратная связь). Ооцит высвобождается из фолликула в ампулу фаллопиевой трубы, где может произойти оплодотворение. Ооцит или эмбрион транспортируется в матку за 57 дней, где может произойти имплантация на фазе лютеинизации.

Фолликул, который освободил ооцит, трансформируется в новый орган, продуцирующий гормон: желтое тело. Желтое тело продуцирует прогестерон вместе с эстрогеном. Желтое тело имеет ограниченный срок жизни примерно 12-14 дней. После указанного периода оно прекращает функционировать, и в результате уровень эстрогенов и прогестеронов в крови падает. Такое уменьшение прогестерона вызывает некроз выстилки матки и, вследствие этого, менструацию.

Последние десятилетия демонстрировали, особенно в области индукции овуляции, развитие и коммерческое внедрение многочисленных лекарственных препаратов, способствующих управлению оплодотворением бесплодных пар. Среди прочих такие препараты включают в себя антиэстрогены (подобные цитрату кломифена и цитрату тамоксифена), пульсирующий ОиКН, очищенные и рекомбинантные гонадотропины и агонисты и антагонисты ОиКН. Отдельные используемые лекарственные препараты и выбираемые режимы применения в основном зависят от цели терапии, т. е. индукция моноовуляции у ановуляторных женских особей или управляемая гиперстимуляция яичников (УГЯ) для индукции развития множественных фолликулов как элемента в технологиях, способствующих репродукции (ТСР). Примеры способов ТСР, которые широко используются для лечения бесплодия женских и/или мужских особей, включают в себя внутриматочную инсеминацию (ВО) и фертилизацию ίη νίίτο (ΙΥΡ). ΙΥΡ может выполняться интрацитоплазматической инъекцией спермы и без нее и включает в себя следующий за этим этап пересадки эмбриона.

УГЯ в настоящее время широко используется в ТСР. Первые результаты УГЯ были неудовлетворительными из-за случаев преждевременного выброса ЛГ примерно в 30% случаев. Такой преждевременный выброс ЛГ мог провоцировать овуляцию ооцитов, которые еще не достигли зрелости и/или это могло препятствовать сбору ооцитов для фертилизации ίη νίίτο (ΙΥΡ). Обнаружено, что введение агонистов ОпКН позволяет предотвратить преждевременные выбросы ЛГ, а также программировать терапевтические циклы. В настоящее время агонисты ОпКН используются в большинстве циклов. Однако агонисты ОпКН являются неудобными (длительный период терапии), могут инициировать кистоз яичников, являются дорогостоящими и не лишенными неблагоприятных эффектов (побочных эффектов, увеличения случаев синдрома гиперстимуляции яичников и т.д.).

В последнее время антагонисты ОпКН вводят для предотвращения преждевременных выбросов ЛГ и для избегания проблем, связанных с использованием агонистов ОпКН. В \УО 98/58657 (ΑΚΖΟ ΝΟΒΕΤ) указано, что дневная доза от 0,125 до 1 мг ганиреликса предотвращает случаи преждевременных выбросов ЛГ и в то же самое время сохраняет достаточный уровень ЛГ для поддержания созревания фолликулов и биосинтеза эстрогена. Также в ΟΝ 1199642 (Α8ΤΑ Меб1са) описано ежедневное подкожное введение цетрореликса в количестве 0,1-0,5 мг для селективного подавления секреции ЛГ.

- 1 009371

Однако существует беспокойство в отношении показателей беременности, наблюдаемых в протоколах с использованием антагонистов ОпЯН. Некоторые исследования указывают на то, что показатели беременности для антагонистов ОпЯН являются более низкими, чем показатели, достигаемые с агонистами ОпЯН. В недавно опубликованном XVО 01/00227 (ΑΚΖΟ ΝΟΒΕΕ) сообщается, что обнаружено отсутствие связи между показателем имплантации и уровнем ЛГ, но существует связь между уровнем антагонистов ОпЯН и показателем имплантации. В указанной заявке на патент обосновывается введение антагонистов ОпЯН в количестве, зависящем от массы тела. Обоснованный уровень находится между 128 и 264 мкг в сутки.

Из вышесказанного очевидно, что успешное применение антагонистов ОпЯН зависит от точной оценки адекватной дозы для эффективного предотвращения выброса ЛГ без слишком сильного понижения уровней эндогенного ЛГ. Поскольку адекватная доза очень сильно зависит от индивидуальных физиологических особенностей, таких как масса тела, применение фиксированной дозы ко всем женским особям связано с сопровождающимися преждевременными выбросами ЛГ у некоторых из них и неудачной имплантацией и показателями беременности у других. Это означает, что для достижения высоких успешных показателей терапии необходимо подбирать дозы индивидуально. Однако индивидуальный подбор дозированных уровней, как предложено в νΟ 01/00227, затруднен тем, что само введение не является длительной операцией, или тем, что требуется выбор единиц дозы, содержащих различное количество ОпЯН антагонистов.

Таким образом, существует необходимость в надежном способе УГЯ с использованием антагонистов ОпЯН, который был бы, по меньшей мере, настолько же эффективен, как и подобные способы, в которых используют агонисты ОпЯН, в том, что касается предотвращения выбросов ЛГ и показателей имплантации и беременности.

Краткое описание изобретения

Авторы установили, что вышеуказанная цель может быть реализована при помощи протокола УГЯ, который содержит совместное введение вещества ФСГ для стимуляции развития множественных фолликуллов, и относительно высокой дозы антагонистов ОпЯН (эквивалентную подкожной дозе по меньшей мере 0,5 мг ганиреликса) для гарантии предотвращения преждевременного выброса ЛГ и вещества ЛГ. Обнаружено, что совместное введение вещества ЛГ предоставляет возможность для введения антагониста ОпЯН при повышенных уровнях дозировки без каких-либо неблагоприятных эффектов, например на показатели имплантации или беременности. Дополнительно обнаружено, что введение более высоких доз антагониста ОпЯН обеспечивает более надежное предотвращение преждевременных выбросов ЛГ.

Другим важным преимуществом комбинированного введения относительно высоких доз антагониста ОпЯН и вещества ЛГ является то, что существует возможность для разработки рецептуры лекарственного средства, которое будет давать хорошие результаты у женских особей с очень разной физиологией. Таким образом, существует возможность разработки единого фармацевтического набора, который, соответственно, может быть применен для эффективной терапии бесплодия, независимо от физиологических особенностей женской особи. Поскольку известные УГЯ протоколы, в которых используют антагонисты ОпЯН, связаны с преждевременными выбросами ЛГ у некоторых женских особей (например, с большой массой тела) или слишком сильным подавлением эндогенного ЛГ у других женских особей, настоящий способ является гораздо более надежным. Следовательно, настоящий способ с большей вероятностью приводит к успеху в показателях действующих признаков беременности, чем существующие УГЯ протоколы, в которых используют антагонисты ОпЯН.

Осуществление изобретения

Таким образом, один из аспектов настоящего изобретения относится к способу управляемой гиперстимуляции яичников у женских особей млекопитающих, причем указанный способ содержит совместное введение указанной женской особи:

вещества, имеющего активность фолликулостимулирующего гормона (вещество ФСГ), в количестве, эффективном для стимуляции развития множественных фолликулов;

антагониста гонадотропин-высвобождающего гормона (ОпЯН) в количестве, эквивалентном дневной подкожной дозе по меньшей мере 0,5 мг ганиреликса для предотвращения преждевременного выброса ЛГ; и вещества ЛГ в количестве, эффективном для предотвращения или подавления симптомов недостатка лютеинизирующего гормона (ЛГ), являющегося результатом введения антагониста ОпЯН;

с последующим введением вещества, индуцирующего мейоз и лютеинизацию (вещество МЛ), в количестве, эффективном для стимуляции продолжения мейоза и лютеинизации, и причем вещество ЛГ не получают из мочи человеческих женских особей.

Моча женских особей, более конкретно, постклимактерических женских особей, содержит повышенные уровни ФСГ и ЛГ. ФСГ выделяют из мочи женских особей для использования в способах УГЯ. В принципе, ЛГ также может быть выделен из мочи женских особей. Однако ЛГ мочи не подходит для использования в настоящем способе, поскольку он очень быстро метаболизируется. Поэтому вещество ЛГ, используемое в настоящем способе, не получают из мочи человеческих женских особей.

- 2 009371

Термин вещество ФСГ, как он используется в настоящем описании, относится к веществу, которое проявляет функциональность, подобную ФСГ, а также веществам, которые способны инициировать выброс ФСГ из гипофиза. Аналогично, термин вещество МЛ относится к веществу, которое проявляет функциональность, подобную ЛГ, а также к веществам, которые способны инициировать выброс ЛГ из гипофиза. Термин вещество ЛГ относится к веществу, которое проявляет функциональность, подобную ЛГ. Следовательно, группа веществ ЛГ не относится к веществам, которые не имеют функциональности, подобной ЛГ, но которые могут инициировать преждевременный выброс ЛГ.

Термин женская особь, при любом упоминании в настоящем описании, относится к женским особям млекопитающих.

Предпочтительно женская особь млекопитающих является Ното χιρίοηδ. Для Ното 5ар1СП5 женские особи обычно биологически способны к деторождению в возрасте от 12 до 55.

Настоящий способ УГЯ преимущественно используется как часть ΙΥΕ протокола. Следовательно, в предпочтительном варианте осуществления, настоящий способ дополнительно содержит последовательные этапы:

сбора одной или нескольких яйцеклеток из зрелых овариальных фолликулов; оплодотворения одной или нескольких яйцеклеток ίη уйго;

переноса полученного в результате эмбриона в матку женской особи млекопитающего.

Эмбрион может быть перенесен в матку женской особи во время того же цикла, в котором применяют УГЯ протокол и собирают одну или несколько яйцеклеток, но также возможен перенос эмбриона в следующем цикле. Однако вследствие введения вещества ЛГ настоящий способ обеспечивает высокие показатели имплантации, если протокол УГЯ и перенос эмбриона происходят в одном цикле. Поэтому в особенно предпочтительном варианте осуществления управляемая гиперстимуляция яичников и перенос эмбриона осуществляются в одном цикле.

Совместное введение вещества ЛГ согласно настоящему изобретению служит цели предотвращения недостатка ЛГ (меньше чем 1 МЕ на литр сыворотки крови) у женской особи во время терапии. Поэтому преимущества настоящего изобретения следует особенно принимать во внимание, если введение вещества ФСГ и антагониста ОиКН, без вещества ЛГ, может привести к снижению уровня ЛГ в сыворотке крови ниже 1 МЕ/л, предпочтительно ниже 0,5 МЕ/л.

В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения вещество ЛГ вводят в количестве, эффективном для сохранения концентрации веществ ЛГ (эндогенных и экзогенных) в сыворотке крови женской особи на уровне, равном или выше чем 1 МЕ/л, предпочтительно выше чем 1,2 МЕ ЛГ/л. Вещества ЛГ, которые соответственно могут быть использованы в настоящем способе, включают в себя рекомбинантный ЛГ (рек-ЛГ), химерные или модифицированные каким-либо образом гонадотропины с активностью ЛГ, низкомолекулярные соединения с активностью ЛГ и их смеси.

Для предотвращения симптомов нехватки ЛГ вещество ЛГ соответственно вводят в суточной дозе, которая эквивалентна подкожной дозе по меньшей мере 1 МЕ, предпочтительно по меньшей мере 1,4 МЕ, более предпочтительно по меньшей мере 1,7 МЕ и наиболее предпочтительно по меньшей мере 2 МЕ рекомбинантного ЛГ на 1 кг массы тела. Обычно максимальное суточное количество, в котором вводят вещество ЛГ, не превышает эквивалента подкожной дозы 40 МЕ на 1 кг массы тела. Предпочтительно указанное максимальное количество суточной дозы не превышает эквивалента подкожной дозы 25 МЕ на 1 кг массы тела, более предпочтительно оно не превышает эквивалента подкожной дозы 15 МЕ на 1 кг массы тела.

Вещество ФСГ предпочтительно вводят в количестве, эквивалентном суточной подкожной дозе от 1 до 15 МЕ ФСГ на 1 кг массы тела.

Наилучшие результаты получают настоящим способом, если антагонист ОиКН вводят в достаточно высокой дозе для обеспечения предотвращения преждевременных выбросов ЛГ практически всем женским особям, получающим терапию. Таким образом, в предпочтительном варианте осуществления, антагонист ОиКН вводят в количестве, эквивалентном суточной подкожной дозе по меньшей мере 0,6 мг ганиреликса, более предпочтительно по меньшей мере 0,8 мг ганиреликса и наиболее предпочтительно по меньшей мере 1,0 мг ганиреликса. В общем случае антагонист ОиКН вводят в количестве, которое не превышает эквивалента суточной подкожной дозы 4,0 мг. Предпочтительно, указанное количество не превышает эквивалента суточной подкожной дозы 3,0 мг, более предпочтительно оно не превышает эквивалента суточной подкожной дозы 2,5 мг.

Является принципиальным то, что введение антагониста ОиКН начинают значительно раньше для минимизации возможности преждевременного выброса ЛГ. Надежным индикатором возможности преждевременного выброса ЛГ является размер развивающегося овариального фолликула, и более конкретно, размер самого большого из этих развивающихся фолликулов. Предпочтительно антагонист ОиКН вводят, по меньшей мере, во время периода начала движения, когда самый большой развивающийся овариальный фолликул достигает среднего диаметра 14 мм, предпочтительно 12 мм, наиболее предпочтительно 10 мм, и заканчивают за день до введения вещества МЛ в количестве, эффективном для стимуляции продолжения мейоза и лютенизации.

- 3 009371

Для достижения требуемого эффекта гистологии эндометрия антагонист СпКН вводят, по меньшей мере, во время периода, начинающегося либо на 6 день после начала введения вещества ФСГ, либо по меньшей мере за 4 дня до введения вещества МЛ, в количестве, эффективном для стимуляции продолжения мейоза и лютенизации, в зависимости от того, что является более ранним, и заканчивают за 1 день до указанного введения вещества МЛ.

Для эффективной компенсации эффекта понижения ЛГ антагонистом СиКН, введение вещества ЛГ можно начинать сразу или после небольшой паузы после начала введения СпКН антагониста и следует продолжать в течение всего периода введения антагониста СпКН. Предпочтительно, вещество ЛГ вводят, по меньшей мере, во время периода, начинающегося через 2 дня после начала введения антагониста СпКН и заканчивающегося после прекращения введения антагониста СпКН. Более предпочтительно, вещество ЛГ вводят совместно с антагонистом СпКН во время терапии.

Вещество ФСГ вводят подходящим образом, по меньшей мере, во время периода, начинающегося через 8 дней после самопроизвольной менструации у женской особи за день до введения вещества МЛ. Более предпочтительно, введение вещества ФСГ начинают не позже 6 дней после менструации у женской особи, еще более предпочтительно на второй день после менструации.

В принципе, в настоящем способе может быть использован любой известный в данной области техники антагонист СпКН. Примеры соответствующих антагонистов СпКН включают в себя ганиреликс, цетрореликс, предшественник ганереликса, предшественник цетрореликса, антагонистичные линейные белковые аналоги гормона, высвобождающего ЛГ (например, как описано в патентах США 5140835 и 5171835), цикличные производные гексапептида (как описано в ΙΡ-Α 61191698) и производные бицикличного пептида (как описано в 1. οί Мсбю. С'Нсш. (1993), 36, 3265-73) или их смеси. Предпочтительно антагонист СпКН, используемый в настоящем способе, выбирают из группы, состоящей из ганиреликса, цетрореликса или их смесей.

В настоящем способе УГЯ используют вещество ЛГ для предотвращения симптомов недостатка ЛГ, с последующей высокой (единичной) дозой вещества МЛ для стимуляции мейоза и лютенизации после того, как лидирующий фолликул достиг зрелости и прекращено введение ФСГ и антагониста СпКН. Целью введения вещества МЛ на этой стадии цикла является имитация выброса ЛГ, который происходит во время нормального менструального цикла и который индуцирует продолжение мейоза, лютенизацию и овуляцию. Вместо ЛГ может быть использован широкий спектр других фармацевтических средств для индукции таких ответов. Предпочтительно, вещество МЛ, используемое в настоящем способе, выбирают из группы, состоящей из рекомбинантного ЛГ, хорионичного гонадотропина мочи (иСС), рекомбинантного СС, гонадотропин-высвобождающего гормона (СпКН), агонистов СпКН и других веществ, способных стимулировать высвобождение ЛГ гипофизом, химерных или любых модифицированных гонадотропинов с ЛГ активностью, низкомолекулярных соединений с ЛГ активностью и их смеси. Более предпочтительно, вещество МЛ выбирают из рекомбинантного ЛГ, хорионичного гонадотропина мочи (иСС), рекомбинантного СС, гонадотропин-высвобождающего гормона (СпКН) и их смеси. Более предпочтительно, вещество МЛ, используемое для стимуляции продолжения мейоза и лютенизации, является рек-ЛГ или иСС.

Количество вещества МЛ, вводимое согласно настоящему способу, предпочтительно превышает количество, которое является эквивалентным подкожной дозе по меньшей мере 2,000 МЕ человеческого хорионичного гонадотропина мочи (ийСС), более предпочтительно указанное количество является эквивалентным подкожной дозе 5,000-10,0000 МЕ и11С'С. Предпочтительно вещество МЛ вводят в единичной пероральной или парентеральной дозе. Наиболее предпочтительно вещество МЛ вводят чрескожно или перорально.

В настоящем документе термин парентеральное введение включает в себя все способы введения, требующие инъекции, имплантации или локального введения, за исключением перорального/интестинального путей введения. Соответствующие примеры парентерального введения включают в себя внутримышечное, внутривенное, подкожное, интравагинальное, чрескожное, интраназальное введение.

Как указывалось в настоящем описании выше, хорошо известно, что ФСГ и ЛГ могут быть выделены из мочи женской особи. ЛГ, выделенный из мочи, является менее подходящим для использования в настоящем способе, поскольку он имеет очень короткое время полужизни ш νίΐτο (ΐ_1/2: 10-20 мин) и очень быстро метаболизируется. ЛГ, полученный из рекомбинантной клеточной линии (рек-ЛГ), является более стабильным (ΐ_1/2: 12-13 ч). Следовательно, в особенно предпочтительном варианте осуществления вещество ЛГ, используемое для предотвращения и подавления симптомов дефицита ЛГ, получают из рекомбинантной клеточной линии.

Вещество ФСГ, используемое в настоящем способе, соответственно может быть выбрано из группы, состоящей из рекомбинантного ФСГ (рек-ФСГ), ФСГ мочи (мФСГ), агонистических ФСГ мутеинов и/или гетероцикличных низкомолекулярных соединений (менее 600 дальтон), проявляющих ФСГ агонистическую активность. Предпочтительно вещество ФСГ является рек-ФСГ или мФСГ. Хотя ФСГ мочи действует практически также хорошо, как и рек-ФСГ, отмечено, что выделение активных составных частей из тканевой жидкости связано с более низкой чистотой, меньшей устойчивостью продуктов и риском

- 4 009371 передачи заболеваний. Следовательно, в более предпочтительном варианте осуществления вещество ФСГ является ФСГ, полученном из рекомбинантной клеточной линии.

Основной целью совместного введения вещества ЛГ в настоящем способе является предотвращение дефицита ЛГ, более конкретно, с целью достижения высоких показателей имплантации, т.е. показателей имплантации, которые являются, по меньшей мере, настолько же хорошими, что и показатели, которые получены с агонистами СпКН. Следовательно, в предпочтительном варианте осуществления настоящий способ используют для терапии женских особей, у которых дефицит ЛГ является таким, что он неблагоприятно воздействует на имплантацию эмбриона.

Настоящим УГЯ способом получают наилучшие результаты, если вещество ФСГ и вещество ЛГ вводят по меньшей мере один раз в сутки. Предпочтительно, антагонисты СпКН также вводят по меньшей мере один раз в сутки. Предпочтительным способом введения является парентеральный, более предпочтительным - подкожный.

Другой аспект настоящего изобретения относится к фармацевтическому набору для использования в способе управляемой гиперстимуляции яичников, причем набор содержит по меньшей мере одну парентеральную или пероральную дозу, содержащую одно или несколько веществ ФСГ в количестве, эквивалентном подкожной дозе 50-1500 МЕ ФСГ;

по меньшей мере одну парентеральную дозу, содержащую один или несколько антагонистов СпКН в количестве, эквивалентном подкожной дозе 0,5-25 мг ганереликса;

по меньшей мере одну парентеральную дозу, содержащую одно или несколько веществ ЛГ в количестве, эквивалентном подкожной дозе 50-3000 МЕ рекомбинантного ЛГ;

причем вещество ЛГ не получают из мочи женских особей человека.

Вышеуказанные дозы, содержащие вещество ФСГ, антагонист СпКН или вещество ЛГ, могут быть скомпонованы как отдельные дозы или они могут быть объединены в две или даже в одну дозу.

В предпочтительном варианте осуществления дозы в настоящем наборе предназначены, по меньшей мере, для ежедневного разового введения, содержащего одно или несколько веществ ФСГ в количестве, эквивалентном подкожной дозе 100-1200 МЕ ФСГ, один или несколько антагонистов СпКН в количестве, эквивалентном подкожной дозе 0,5-4 мг ганереликса, и одно или несколько веществ ЛГ в количестве, эквивалентном подкожной дозе 100-1000 МЕ. Более предпочтительно набор содержит дозу, содержащую один или несколько антагонистов СпКН в количестве, эквивалентном подкожной дозе по меньшей мере 0,6 мг ганереликса, более предпочтительно по меньшей мере 0,8 мг ганереликса, еще более предпочтительно по меньшей мере 1,0 мг ганереликса и наиболее предпочтительно по меньшей мере 1,1 мг ганереликса. Последние дозы содержат один или несколько антагонистов СпКН в количестве, которое не превышает эквивалентную подкожную дозу 3 мг ганереликса, более предпочтительно в количестве, которое не превышает эквивалентную подкожную дозу 2,5 мг ганереликса.

Настоящий набор дополнительно может содержать единичную парентеральную или пероральную дозу, содержащую одно или несколько веществ ЛГ в количестве, эквивалентном подкожной дозе по меньшей мере 2,000 МЕ иНСС, предпочтительно эквивалентном подкожной дозе 5,000-10,000 МЕ иНСС. В более предпочтительном варианте настоящего набора доза, содержащая одно или несколько веществ ФСГ, доза, содержащая один или несколько антагонистов СпКН, и доза, содержащая одно или несколько веществ ЛГ, объединены в картридж для ежедневного разового подкожного самовведения.

Предпочтительно все дозы в настоящем наборе являются парентеральными дозами. Помимо этого, парентеральные дозы в наборе предпочтительно соответствуют внутримышечному или подкожному введению.

Настоящее изобретение дополнительно проиллюстрировано следующими ниже примерами, которые, однако, не следует толковать как ограничение. Отличительные особенности, изложенные в приведенном выше описании, в следующих ниже примерах и формуле изобретения как отдельно, так и в любом их сочетании, являются материалом для осуществления настоящего изобретения в различных его видах.

Примеры

Пример 1.

В открытом контролируемом клиническом испытании провели исследование на эффективность, безопасность и переносимость предотвращения преждевременного эндогенного выброса ЛГ у 90 испытуемых женских особей, подвергшихся УГЯ и последующему ГУТ и пересадке эмбриона (ПЭ) с использованием ежедневного подкожного введения, начиная с 6 дня терапии рекомбинатным ФСГ до и включая день терапии НСС мочи, 0,25 мг цетрореликса (30 испытуемых), 2,0 мг цетрореликса (30 испытуемых) или 2,0 мг цетрореликса, совместно с 400 МЕ рек-ЛГ (30 испытуемых).

Хотя такая терапия подходит для всех типов ГУТ пациентов (например, в возрастном диапазоне от 18 до 45 лет, с проявленным поликистозным синдромом яичников или без него и с регулярными циклами или без), при исследовании были установлены следующие критерии: здоровые партнеры женских особей в бесплодных парах; возраст во время испытания между 20 и 39 годами; регулярные менструальные циклы и готовность дать письменно оформленное согласие. Однако не предпринимались специальные меры относительно массы тела или индекса массы тела.

- 5 009371

Перед первым введением рекомбинантного ФСГ взяли образцы крови для гормонального анализа (эстрадиола и ЛГ) и провели стандартный анализ мочи для исключения случаев беременности. Терапию рекомбинантным ФСГ начали со 2 или 3 дня менструации путем ежедневной подкожной инъекции до дня введения 11СС. Во время первых 5 дней терапии рекомбинантной ФСГ была установлена ежедневная доза в 150 МЕ. Начиная с 6 дня, для гормонального анализа брали образцы крови раз в два дня до введения лекарственного вещества и проводили ультразвуковой контроль роста фолликулов для корректировки, при необходимости, дневной инъецируемой дозы рекомбинантной ФСГ.

Вводили подкожную инъекцию 11СС мочи (10,000 МЕ), когда по меньшей мере три фолликула превышали диаметр 17 мм, как было измерено при помощи ультразвукового сканирования, и затем проводили извлечение ооцита, обычно спустя 30-36 ч.

Ежедневная подкожная доза 2,0 мг цетрореликса (с 400 МЕ рек-ЛГ или без него) была определена, как более эффективная в предотвращении преждевременного повышения ЛГ, чем подкожная доза 0,25 мг. Такая эффективность особенно очевидна у ΙΥΕ пациентов, подвергшихся УГЯ, которые имели вес тела более 75 кг. Дополнительно, ежедневное подкожное введение цетрореликса при ежедневной дозе 2,0 мг (с 400 МЕ рек-ЛГ или без него) является хорошо переносимым и не обнаруживает очевидных неблагоприятных эффектов у женских особей, подвергшихся УГЯ и последующему ΙΥΕ и ПЭ.

Пример 2.

Ооциты извлекли из женских особей человека, которые подверглись УГЯ, как изложено в примере 1. Ооциты затем оплодотворили ίη νίΐΓΟ и два дня спустя не более чем два эмбриона перенесли в матку пациентки. По порядку величины, наиболее высокие показатели имплантации и беременности получили у ΙΥΕ пациенток, у которых преждевременные выбросы ЛГ предотвращали при помощи ежедневной дозы комбинации 2,0 мг цетрореликса и 400 МЕ рек-ЛГ. Более низкие показатели имплантации и беременности получили у ΙΥΕ пациенток, у которых преждевременные выбросы ЛГ предотвращали при помощи ежедневной дозы 0,25 мг цетрореликса. Наконец, наиболее низкие показатели имплантации и беременности получили у ΙΥΕ пациенток, у которых преждевременные выбросы ЛГ предотвращали при помощи ежедневной дозы 0,2 мг цетрореликса (без совместного введения рек-ЛГ).

Пример 3.

Повторяли примеры 1 и 2, используя 2,0 мг ганиреликса вместо 2,0 цетрореликса. Получили результаты, очень сходные с результатами, описанными в примерах 1 и 2.

Claims (15)

1. Способ управляемой гиперстимуляции яичников у женской особи млекопитающих, включающий совместное введение указанной женской особи вещества, имеющего активность фолликулостимулирующего гормона (вещество ФСГ), в количестве, эффективном для стимуляции развития множественных фолликулов;

антагониста гонадотропин-высвобождающего гормона (ОпКН) в количестве, эквивалентном дневной подкожной дозе по меньшей мере 0,5 мг ганиреликса для предотвращения преждевременного выброса ЛГ;

вещества, имеющего активность лютеинизирующего гормона (вещество ЛГ), в количестве, эффективном для предотвращения или подавления симптомов недостатка лютеинизирующего гормона (ЛГ), являющегося результатом введения антагониста ОпКН;

с последующим введением вещества, индуцирующего мейоз и лютеинизацию (вещество МЛ), в количестве, эффективном для стимуляции продолжения мейоза и лютеинизации, причем вещество ЛГ не получают из мочи женских особей человека.

2. Способ по п.1, который дополнительно включает последовательность стадий сбора одной или нескольких яйцеклеток из зрелых овариальных фолликулов; оплодотворения одной или нескольких яйцеклеток ίη νίίτο;

переноса полученного в результате эмбриона в матку женской особи млекопитающего.

3. Способ по п.1 или 2, в котором вещество ЛГ вводят в количестве, эффективном для сохранения концентрации вещества ЛГ в сыворотке крови женской особи на уровне, эквивалентном более 1 МЕ ЛГ/л, предпочтительно более 1,2 МЕ ЛГ/л.

4. Способ по любому из пп.1-3, в котором вещество ЛГ вводят в суточной дозе, которая эквивалентна подкожной дозе от 1 до 40 МЕ, предпочтительно от 2 до 15 МЕ рекомбинантного ЛГ на 1 кг массы тела.

5. Способ по любому из пп.1-4, в котором антагонист ОпКН вводят, по меньшей мере, во время периода, начинающегося с момента, когда самый большой развивающийся овариальный фолликул достигнет среднего диаметра 14 мм, предпочтительно 12 мм, наиболее предпочтительно 10 мм, и заканчивающегося за день до введения вещества МЛ в количестве, эффективном для стимуляции продолжения мейоза и лютенизации.

6. Способ по любому из пп.1-5, в котором антагонист ОпКН вводят, по меньшей мере, во время периода, начинающегося либо на 6 день после начала введения вещества ФСГ, либо по меньшей мере за

- 6 009371

4 дня до введения вещества МЛ, в количестве, эффективном для стимуляции продолжения мейоза и лютенизации, в зависимости от того, что является более ранним сроком, и заканчивающегося за день до указанного введения вещества МЛ.

7. Способ по любому из пп.1-6, в котором вещество ЛГ вводят, по меньшей мере, во время периода, начинающегося через 2 дня после начала введения антагониста СпКН и заканчивающегося вместе с прекращением введения антагониста СпКН.

8. Способ по любому из пп.1-7, в котором вещество ФСГ вводят, по меньшей мере, во время периода, начинающегося на 8 день, предпочтительно на 6 день после самопроизвольной менструации у женской особи до момента за день до введения вещества МЛ, в количестве, эффективном для стимуляции продолжения мейоза и лютенизации.

9. Способ по любому из пп.1-8, в котором антагонист СпКН выбирают из группы, состоящей из ганиреликса, цетрореликса, предшественника ганереликса, предшественника цетрореликса или их смесей.

10. Способ по любому из пп.1-9, в котором антагонист СпКН вводят в количестве, эквивалентном суточной подкожной дозе 0,8-4,0 мг ганереликса.

11. Способ по любому из пп.1-10, в котором вещество ЛГ выбирают из группы, состоящей из рекомбинантного ЛГ, химерных или любых модифицированных гонадотропинов с ЛГ активностью, низкомолекулярных соединений с ЛГ активностью и их смесей.

12. Способ по любому из пп.1-11, в котором вещество ЛГ, используемое для предотвращения или подавления симптомов недостатка ЛГ, получают из рекомбинантной клеточной линии.

13. Способ по любому из пп.1-12, в котором вещество ФСГ, антагонист СпКН и вещество ЛГ вводят по меньшей мере один раз в сутки, предпочтительно парентерально.

14. Фармацевтический набор для осуществления способа по любому из пп.1-13, содержащий по меньшей мере одну парентеральную или пероральную дозу, содержащую одно или несколько веществ ФСГ в количестве, эквивалентном подкожной дозе 50-1500 МЕ ФСГ;

по меньшей мере одну парентеральную дозу, содержащую один или несколько антагонистов СпКН, в количестве, эквивалентном подкожной дозе 0,5-25 мг ганереликса;

по меньшей мере одну парентеральную дозу, содержащую одно или несколько веществ ЛГ, в количестве, эквивалентном подкожной дозе 50-3000 МЕ ЛГ;

причем вещество ЛГ не получают из мочи женских особей человека.

15. Фармацевтический набор по п.14, в котором доза, содержащая одно или несколько веществ ФСГ, доза, содержащая один или несколько антагонистов СпКН, и доза, содержащая одно или несколько веществ ЛГ, объединены в картридж для ежедневного разового подкожного самовведения.