EA006397B1 - Связывающие эндотоксин штаммы лактобактерий и бифидобактерий, обладающие гидрофобными свойствами, и способы их применения - Google Patents
Связывающие эндотоксин штаммы лактобактерий и бифидобактерий, обладающие гидрофобными свойствами, и способы их применения Download PDFInfo
- Publication number
- EA006397B1 EA006397B1 EA200300862A EA200300862A EA006397B1 EA 006397 B1 EA006397 B1 EA 006397B1 EA 200300862 A EA200300862 A EA 200300862A EA 200300862 A EA200300862 A EA 200300862A EA 006397 B1 EA006397 B1 EA 006397B1
- Authority
- EA
- Eurasian Patent Office
- Prior art keywords
- strain
- endotoxin
- bifidobacteria
- lactobacilli
- composition
- Prior art date
Links
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 title claims abstract description 95
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 title claims abstract description 34
- 241000186000 Bifidobacterium Species 0.000 title claims abstract description 25
- 230000005661 hydrophobic surface Effects 0.000 title abstract description 4
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 title abstract 4
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 title abstract 2
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 title abstract 2
- 238000000034 method Methods 0.000 title description 17
- 230000027455 binding Effects 0.000 title description 13
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 71
- 235000013305 food Nutrition 0.000 claims abstract description 27
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims abstract description 13
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 claims abstract description 11
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims abstract description 10
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 5
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 claims description 33
- 241000186660 Lactobacillus Species 0.000 claims description 31
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 31
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 13
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 claims description 7
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 5
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 claims description 5
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 claims description 4
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 claims description 3
- 229920006008 lipopolysaccharide Polymers 0.000 description 39
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 32
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 27
- 239000003925 fat Substances 0.000 description 16
- 235000019197 fats Nutrition 0.000 description 16
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 14
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 206010040047 Sepsis Diseases 0.000 description 9
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 9
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 9
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 9
- 239000000047 product Substances 0.000 description 8
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 8
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 8
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 8
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 7
- 229940039696 lactobacillus Drugs 0.000 description 7
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 7
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 7
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 7
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 7
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 7
- CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N O-Xylene Chemical compound CC1=CC=CC=C1C CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 6
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 6
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 6
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 6
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 6
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 6
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 6
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 6
- 239000008096 xylene Substances 0.000 description 6
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 5
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 5
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 5
- 206010040070 Septic Shock Diseases 0.000 description 5
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 5
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 5
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 5
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 5
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 5
- 235000013406 prebiotics Nutrition 0.000 description 5
- 239000006041 probiotic Substances 0.000 description 5
- 230000000529 probiotic effect Effects 0.000 description 5
- 235000018291 probiotics Nutrition 0.000 description 5
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 4
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 4
- 108010010256 Dietary Proteins Proteins 0.000 description 4
- 102000015781 Dietary Proteins Human genes 0.000 description 4
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 4
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 4
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 4
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 4
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 4
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 description 4
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 4
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 description 4
- 235000021245 dietary protein Nutrition 0.000 description 4
- 238000001125 extrusion Methods 0.000 description 4
- 235000020256 human milk Nutrition 0.000 description 4
- 210000004251 human milk Anatomy 0.000 description 4
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 4
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 4
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 4
- 235000013618 yogurt Nutrition 0.000 description 4
- 102100038776 ADP-ribosylation factor-related protein 1 Human genes 0.000 description 3
- 206010070545 Bacterial translocation Diseases 0.000 description 3
- 244000298479 Cichorium intybus Species 0.000 description 3
- 235000007542 Cichorium intybus Nutrition 0.000 description 3
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 101000809413 Homo sapiens ADP-ribosylation factor-related protein 1 Proteins 0.000 description 3
- 208000022559 Inflammatory bowel disease Diseases 0.000 description 3
- 206010022678 Intestinal infections Diseases 0.000 description 3
- 108010011756 Milk Proteins Proteins 0.000 description 3
- 102000014171 Milk Proteins Human genes 0.000 description 3
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 3
- 230000009471 action Effects 0.000 description 3
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 3
- 230000007375 bacterial translocation Effects 0.000 description 3
- 230000001925 catabolic effect Effects 0.000 description 3
- 230000008859 change Effects 0.000 description 3
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 3
- 238000010908 decantation Methods 0.000 description 3
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 3
- 208000010227 enterocolitis Diseases 0.000 description 3
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 3
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 3
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 3
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 3
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- 238000004452 microanalysis Methods 0.000 description 3
- 235000021239 milk protein Nutrition 0.000 description 3
- 230000001338 necrotic effect Effects 0.000 description 3
- 230000000770 proinflammatory effect Effects 0.000 description 3
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 3
- 210000000813 small intestine Anatomy 0.000 description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 3
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 3
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 3
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 3
- IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 1-palmitoyl-2-arachidonoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCC IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 0.000 description 2
- 238000012371 Aseptic Filling Methods 0.000 description 2
- 235000007319 Avena orientalis Nutrition 0.000 description 2
- 244000075850 Avena orientalis Species 0.000 description 2
- 108010082495 Dietary Plant Proteins Proteins 0.000 description 2
- 239000006145 Eagle's minimal essential medium Substances 0.000 description 2
- 206010014824 Endotoxic shock Diseases 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- 108010068370 Glutens Proteins 0.000 description 2
- 102000015779 HDL Lipoproteins Human genes 0.000 description 2
- 108010010234 HDL Lipoproteins Proteins 0.000 description 2
- 102000019223 Interleukin-1 receptor Human genes 0.000 description 2
- 108050006617 Interleukin-1 receptor Proteins 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 2
- OYHQOLUKZRVURQ-HZJYTTRNSA-N Linoleic acid Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/CCCCCCCC(O)=O OYHQOLUKZRVURQ-HZJYTTRNSA-N 0.000 description 2
- 208000002720 Malnutrition Diseases 0.000 description 2
- 229920002774 Maltodextrin Polymers 0.000 description 2
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 description 2
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 description 2
- 235000019485 Safflower oil Nutrition 0.000 description 2
- 108010073771 Soybean Proteins Proteins 0.000 description 2
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 2
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 2
- 235000019486 Sunflower oil Nutrition 0.000 description 2
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 description 2
- 241000209140 Triticum Species 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- MBMBGCFOFBJSGT-KUBAVDMBSA-N all-cis-docosa-4,7,10,13,16,19-hexaenoic acid Chemical compound CC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCC(O)=O MBMBGCFOFBJSGT-KUBAVDMBSA-N 0.000 description 2
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 2
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 2
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 2
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 2
- 235000008504 concentrate Nutrition 0.000 description 2
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 2
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 2
- 235000005687 corn oil Nutrition 0.000 description 2
- 239000002285 corn oil Substances 0.000 description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 2
- 235000015872 dietary supplement Nutrition 0.000 description 2
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 2
- 235000021001 fermented dairy product Nutrition 0.000 description 2
- 235000019688 fish Nutrition 0.000 description 2
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 2
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 2
- 229940098330 gamma linoleic acid Drugs 0.000 description 2
- VZCCETWTMQHEPK-UHFFFAOYSA-N gamma-Linolensaeure Natural products CCCCCC=CCC=CCC=CCCCCC(O)=O VZCCETWTMQHEPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VZCCETWTMQHEPK-QNEBEIHSSA-N gamma-linolenic acid Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCC(O)=O VZCCETWTMQHEPK-QNEBEIHSSA-N 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- 235000021312 gluten Nutrition 0.000 description 2
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 2
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 230000004968 inflammatory condition Effects 0.000 description 2
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 2
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 2
- 239000000787 lecithin Substances 0.000 description 2
- 235000010445 lecithin Nutrition 0.000 description 2
- 229940067606 lecithin Drugs 0.000 description 2
- 229960004232 linoleic acid Drugs 0.000 description 2
- 150000004668 long chain fatty acids Chemical class 0.000 description 2
- 230000001071 malnutrition Effects 0.000 description 2
- 235000000824 malnutrition Nutrition 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 208000015380 nutritional deficiency disease Diseases 0.000 description 2
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 2
- 235000021580 ready-to-drink beverage Nutrition 0.000 description 2
- 235000020122 reconstituted milk Nutrition 0.000 description 2
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 description 2
- 235000005713 safflower oil Nutrition 0.000 description 2
- 239000003813 safflower oil Substances 0.000 description 2
- 229940001941 soy protein Drugs 0.000 description 2
- 239000003549 soybean oil Substances 0.000 description 2
- 235000012424 soybean oil Nutrition 0.000 description 2
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 2
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 2
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 2
- 239000002600 sunflower oil Substances 0.000 description 2
- 235000019871 vegetable fat Nutrition 0.000 description 2
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 2
- OYHQOLUKZRVURQ-NTGFUMLPSA-N (9Z,12Z)-9,10,12,13-tetratritiooctadeca-9,12-dienoic acid Chemical compound C(CCCCCCC\C(=C(/C\C(=C(/CCCCC)\[3H])\[3H])\[3H])\[3H])(=O)O OYHQOLUKZRVURQ-NTGFUMLPSA-N 0.000 description 1
- ABEXEQSGABRUHS-UHFFFAOYSA-N 16-methylheptadecyl 16-methylheptadecanoate Chemical compound CC(C)CCCCCCCCCCCCCCCOC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC(C)C ABEXEQSGABRUHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KYQCXUMVJGMDNG-UHFFFAOYSA-N 4,5,6,7,8-pentahydroxy-2-oxooctanoic acid Chemical group OCC(O)C(O)C(O)C(O)CC(=O)C(O)=O KYQCXUMVJGMDNG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 231100000699 Bacterial toxin Toxicity 0.000 description 1
- 235000014698 Brassica juncea var multisecta Nutrition 0.000 description 1
- 235000006008 Brassica napus var napus Nutrition 0.000 description 1
- 240000000385 Brassica napus var. napus Species 0.000 description 1
- 235000006618 Brassica rapa subsp oleifera Nutrition 0.000 description 1
- 235000004977 Brassica sinapistrum Nutrition 0.000 description 1
- 102000011632 Caseins Human genes 0.000 description 1
- 108010076119 Caseins Proteins 0.000 description 1
- 241000698776 Duma Species 0.000 description 1
- 239000004278 EU approved seasoning Substances 0.000 description 1
- 102000002322 Egg Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010000912 Egg Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 208000037487 Endotoxemia Diseases 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 1
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- 230000005526 G1 to G0 transition Effects 0.000 description 1
- 229930186217 Glycolipid Natural products 0.000 description 1
- 229920002907 Guar gum Polymers 0.000 description 1
- 240000005979 Hordeum vulgare Species 0.000 description 1
- 235000007340 Hordeum vulgare Nutrition 0.000 description 1
- 241000764238 Isis Species 0.000 description 1
- 102000052508 Lipopolysaccharide-binding protein Human genes 0.000 description 1
- 108010053632 Lipopolysaccharide-binding protein Proteins 0.000 description 1
- 102000004895 Lipoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108090001030 Lipoproteins Proteins 0.000 description 1
- 239000005913 Maltodextrin Substances 0.000 description 1
- 108010070551 Meat Proteins Proteins 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 208000012868 Overgrowth Diseases 0.000 description 1
- 235000019482 Palm oil Nutrition 0.000 description 1
- 229930040373 Paraformaldehyde Natural products 0.000 description 1
- 108010084695 Pea Proteins Proteins 0.000 description 1
- 235000010582 Pisum sativum Nutrition 0.000 description 1
- 240000004713 Pisum sativum Species 0.000 description 1
- 102220469221 S-adenosyl-L-methionine-dependent tRNA 4-demethylwyosine synthase TYW1B_E18A_mutation Human genes 0.000 description 1
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 1
- 108060008683 Tumor Necrosis Factor Receptor Proteins 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- 108010046377 Whey Proteins Proteins 0.000 description 1
- 239000006096 absorbing agent Substances 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000021120 animal protein Nutrition 0.000 description 1
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 description 1
- 239000000688 bacterial toxin Substances 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 239000010473 blackcurrant seed oil Substances 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 235000021324 borage oil Nutrition 0.000 description 1
- 235000015496 breakfast cereal Nutrition 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 1
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 1
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 1
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 1
- 235000013351 cheese Nutrition 0.000 description 1
- 230000000973 chemotherapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 235000013330 chicken meat Nutrition 0.000 description 1
- 235000019864 coconut oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000003240 coconut oil Substances 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 1
- 238000010411 cooking Methods 0.000 description 1
- 235000015140 cultured milk Nutrition 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 235000013325 dietary fiber Nutrition 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 230000001804 emulsifying effect Effects 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 235000008524 evening primrose extract Nutrition 0.000 description 1
- 239000010475 evening primrose oil Substances 0.000 description 1
- 229940089020 evening primrose oil Drugs 0.000 description 1
- 235000021107 fermented food Nutrition 0.000 description 1
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 1
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 1
- 230000037406 food intake Effects 0.000 description 1
- 235000011194 food seasoning agent Nutrition 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 239000003349 gelling agent Substances 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 239000000665 guar gum Substances 0.000 description 1
- 235000010417 guar gum Nutrition 0.000 description 1
- 229960002154 guar gum Drugs 0.000 description 1
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 1
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 description 1
- 150000002430 hydrocarbons Chemical class 0.000 description 1
- 238000005417 image-selected in vivo spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 238000012739 integrated shape imaging system Methods 0.000 description 1
- -1 lactose 65% Chemical class 0.000 description 1
- 235000021374 legumes Nutrition 0.000 description 1
- 235000020778 linoleic acid Nutrition 0.000 description 1
- OYHQOLUKZRVURQ-IXWMQOLASA-N linoleic acid Natural products CCCCC\C=C/C\C=C\CCCCCCCC(O)=O OYHQOLUKZRVURQ-IXWMQOLASA-N 0.000 description 1
- 230000004576 lipid-binding Effects 0.000 description 1
- 235000014666 liquid concentrate Nutrition 0.000 description 1
- 239000012669 liquid formulation Substances 0.000 description 1
- 229940035034 maltodextrin Drugs 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 239000002540 palm oil Substances 0.000 description 1
- 229920002866 paraformaldehyde Polymers 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 235000020200 pasteurised milk Nutrition 0.000 description 1
- 235000014594 pastries Nutrition 0.000 description 1
- 235000019702 pea protein Nutrition 0.000 description 1
- 235000010987 pectin Nutrition 0.000 description 1
- 239000001814 pectin Substances 0.000 description 1
- 229920001277 pectin Polymers 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 1
- 231100000614 poison Toxicity 0.000 description 1
- 239000002574 poison Substances 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 235000013594 poultry meat Nutrition 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 1
- 230000007112 pro inflammatory response Effects 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 229940108461 rennet Drugs 0.000 description 1
- 108010058314 rennet Proteins 0.000 description 1
- 238000001223 reverse osmosis Methods 0.000 description 1
- 230000036303 septic shock Effects 0.000 description 1
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 1
- 235000002639 sodium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 235000013599 spices Nutrition 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 235000000891 standard diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 1
- 238000009495 sugar coating Methods 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 1
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 1
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 1
- 102000003390 tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 1
- 102000003298 tumor necrosis factor receptor Human genes 0.000 description 1
- 235000021119 whey protein Nutrition 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
- A61K35/74—Bacteria
- A61K35/741—Probiotics
- A61K35/744—Lactic acid bacteria, e.g. enterococci, pediococci, lactococci, streptococci or leuconostocs
- A61K35/747—Lactobacilli, e.g. L. acidophilus or L. brevis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
- A61K35/74—Bacteria
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
- A61K35/74—Bacteria
- A61K35/741—Probiotics
- A61K35/744—Lactic acid bacteria, e.g. enterococci, pediococci, lactococci, streptococci or leuconostocs
- A61K35/745—Bifidobacteria
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/12—Antidiarrhoeals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P39/00—General protective or antinoxious agents
- A61P39/02—Antidotes
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
- Y10S435/853—Lactobacillus
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
- Y10S435/853—Lactobacillus
- Y10S435/854—Lactobacillus acidophilus
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Mycology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Oncology (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
- Feed For Specific Animals (AREA)
- Fodder In General (AREA)
Abstract
Изобретение относится к применению по меньшей мере одного штамма лактобактерий и/или бифидобактерий, обладающих гидрофобными свойствами клеточной поверхности, для приготовления композиции, предназначенной для профилактики или лечения нарушений, опосредованных эндотоксином и/или ассоциированных с ним, и пищевой композиции для человека или домашних животных, приготовленной из них.
Description
Настоящее изобретение относится к применению гидрофобных лактобактерий и/или бифидобактерий для приготовления пищевой композиции, предназначенной для предупреждения или лечения нарушений, опосредованных и/или ассоциированных с эндотоксином. Данное изобретение также относится к полученной из них композиции.
Предпосылки изобретения
Было обнаружено, что токсины, вызывающие сепсис, ассоциированы с патогенными бактериями, вирусами, растениями и ядом. В числе хорошо описанных бактериальных токсинов находятся эндотоксины или липополисахариды (ЛПС) грамотрицательных бактерий. Эти молекулы представляют собой гликолипиды, которые повсеместно распространены в наружной мембране всех грамотрицательных бактерий, которые, как полагают, ответственны за грамотрицательный сепсис. Этот тип сепсиса является чрезвычайно распространенным состоянием и часто смертельным.
Для лечения сепсиса был предпринят ряд подходов. Эти подходы, в том числе, включают в себя применение антител к ЛПС, применение антител к фактору некроза опухоли, применение растворимого рецептора ФНО, применение растворимого рецептора интерлейкина-1 (ИЛ-1). Хотя каждый подход имеет некоторую эффективность, итоги оказались неутешительными.
Другие предприняли попытку разработать и изучить белки, которые связывают ЛПС/эндотоксин, и иллюстративные сообщения об этих попытках представлены в ВикОсг А. е! а1. 8с1еиее (1993) 259:361364; МайшаИ. К. е! а1. Вюсйетщйу (1993) 32:11704-11710; Ноекк. А. е! а1. ЕМВО 1 (1993) 12:3351-3356; и Е1кЬасй. Р. е! а1. Сиггеп! Ορίηίοη ίη 1штипо1о§у (1993) 5:103-107. Фактически при попадании ЛПС в кровь он может связаться с белком, называемым липополисахаридсвязывающим белком (ЛСБ). Было высказано предположение, что ингибирование ЛСБ, например антителом против ЛСБ, терапевтически приемлемо для лечения сепсиса, опосредованного эндотоксином. (Заявка на международный патент РСТ/И8 90/04250, поданная 30 июля 1990). Кроме того, работа некоторых лабораторий показала, что липопротеины, главным образом липопротеины высокой плотности (ЛПВП), связывают и нейтрализуют ЛпС (8кагпек е! а1.. 1968. 1. Вае!епо1о§у 95:2031; Е1е§е1 е! а1.. 1993. 1пГес!. 1ттипо1. 61(12):51(40)) и что эти частицы могут составлять ЛПС-нейтрализующую активность плазмы.
Прежние способы лечения заболеваний, опосредованных эндотоксином и/или ассоциированных с ним, были ретроспективными (т. е. после развития клинической стадии заболевания) и были ограничены химиотерапевтическим вмешательством.
Профилактические меры не были достигнуты такими способами лечения.
Таким образом, в данной области существует необходимость в эффективном средстве для нейтрализации грамотрицательного эндотоксина (т.е. ЛПС) для предупреждения или облегчения симптомов сепсиса и септического шока.
Гидрофобные лактобактерии и бифидобактерии по настоящему изобретению предоставляют дополнительные соединения, обладающие способностью связывать эндотоксины и ослаблять/предупреждать их действия.
Краткое изложение существа изобретения
Таким образом, настоящее изобретение относится к применению, по меньшей мере, одного штамма лактобактерии и/или бифидобактерии, клеточная поверхность которых обладает гидрофобными свойствами, для приготовления композиции, предназначенной для профилактики или лечения заболеваний, опосредованных и/или ассоциированных с эндотоксином.
На самом деле, неожиданно было обнаружено, что некоторые лактобактерии и бифидобактерии, главным образом с гидрофобной поверхностью, обладают способностью связывать эндотоксины. Следовательно, это позволяет использовать их в качестве эффективных средств для предупреждения эндотоксинового шока и сепсиса кишечного происхождения, бактериальной транслокации, некротического энтероколита, воспалительного заболевания кишечника, кишечных инфекций, хронической эндотоксинемии, ассоциированной или вызванной катаболическим и системным воспалением.
Предпочтительно гидрофобные лактобактерии или бифидобактерии имеют процент гидрофобности (%Г) по меньшей мере 80 и более предпочтительно от 85 до 100%Г.
В предпочтительном варианте осуществления изобретения данный штамм выбран из группы, состоящей из Еас!оЬасШик )ойпкошг БасЮЬасШик геи!егп. БасЮЬасШик рагасакег Еас!оЬасШик аштайк. Еас!оЬасШи8 гит1шк. Еас!оЬасШик ашборййик. Еас!оЬасШик гайтпокик. Еас!оЬасШик Гегтеп!ит. Ьас!оЬасШик бе1ЬгиескЛ киЬк. 1асЛк. ВШбоЬас!епит крр.. В1йбоЬас!егшт ЬШбит. ВШбоЬас!епит 1опдит. В1Г1боЬас!егшт ркеибо1оп§ит. В1йбоЬас!егшт шГапОк. В1йбоЬас!епит або1ексепЛк.
В другом аспекте данное изобретение относится к выделенному штамму лактобактерии или бифидобактерии, имеющему гидрофобные свойства клеточной поверхности, выбранному по его способности связывать эндотоксины или коагрегировать с грамотрицательными бактериями.
В следующем аспекте данное изобретение предлагает пищевую композицию для человека или домашнего животного для предупреждения или лечения заболеваний, опосредованных и/или ассоциированных с эндотоксином, содержащую, по меньшей мере, штамм лактобактерии и/или бифидобактерии. обладающих вышеупомянутыми характеристиками, связанных со съедобной основой или фармацевтической основой.
- 1 006397
Данная композиция полезна для снижения чрезмерного роста бактерий в тонкой кишке и уменьшения поступления эндотоксина из кишечника во внутреннюю среду, часто встречающегося нарушения у домашних животных, что может, например, стать причиной случаев диареи, истощения и кишечного и системного воспаления.
В последнем аспекте данное изобретение относится к способу профилактики или лечения заболеваний, опосредованных и/или ассоциированных с эндотоксином, включающему в себя этап употребления с приемом пищи человеком или кормления животного композицией, содержащей, по меньшей мере, штамм лактобактерий и/или бифидобактерий, клеточная поверхность которых обладает гидрофобными свойствами, связанных со съедобной основой или фармацевтической основой.
Подробное описание изобретения
На всем протяжении описания ЫСС означает Коллекцию культур Нестле (Νοδίΐο) (№к11е Кекеагсй Сейте, Уег5-с11ех-1е5-В1апс. Ьаикаппе, 8\\'Ц/ег1апб).
В отношении первого объекта данного изобретения рассматривается применение по меньшей мере одного штамма лактобактерий и/или бифидобактерий, клеточная поверхность которых обладает гидрофобными свойствами, для приготовления композиции, предназначенной для профилактики или лечения заболеваний, опосредованных и/или ассоциированных с эндотоксином.
Фактически неожиданно было обнаружено, что некоторые лактобактерии и бифидобактерии, главным образом с гидрофобной поверхностью, обладают способностью связывать эндотоксины.
В действительности бактериальный штамм по данному изобретению обладает способностью связывать эндотоксины на гидрофобной клеточной стенке и, следовательно, удалять этот провоспалительный продукт грамотрицательных бактерий, который, кроме прочего, может перемещаться из просвета кишки в кровь и тем самым запускать воспалительные реакции и в более серьезных случаях эндотоксический шок.
Лактобактерии или бифидобактерии по данному изобретению были выбраны из числа штаммов, подходящих для потребления животными, с точки зрения процента их гидрофобности (%Г), как описано у А.С. 2ауад11а е! а1., 1оита1 оП Бооб ргсЛесйоп. Уо1. 61, Νο. 7, 1998, р. 865-873.
Предпочтительно бактериальный штамм по данному изобретению имеет %Г по меньшей мере 80 и более предпочтительно от 85 до 100%Г.
Определение гидрофобности клеточной поверхности осуществляли с помощью МАТН метода, как описано ранее (Регех, Р.Б. е! а1., 1998, Арр1. Епупоп. МютоЬю1. 64: 21-26).
Вкратце, 2 мл бактериальной суспензии (приблизительно 108 КОЕ/мл, РВ8) экстрагировали 0,4 мл ксилола путем интенсивного перемешивания их в течение 120 с. Фазам давали возможность разделиться декантацией и измеряли А600 водной фазы. Гидрофобность клеточной поверхности (%Г) подсчитывали по формуле Г%=[(А0-А)/А0] х100 где А0 и А представляют собой поглощение до и после экстракции ксилолом соответственно.
В предпочтительном варианте осуществления изобретения бактериальный штамм может быть выбран из группы, состоящей из ЬайоЬасШик )ойп8опц ЬайоЬасШик тейет, ЬайоЬасШик ратасакеГ Ьас1оЬасШик айтайк, ЬайоЬасШик гиттА ЬайоЬасШик айборййик, ЬайоЬасШик гайтпокик, ЬайоЬасШик Пегтейит, ЬайоЬасШик бе1Ьгиескй киЬк. 1асйк, ВШбоЬайепит крр., ВШбоЬайепит ЬШбит, ВШбоЬайепит 1опдиш, ВШбоЬайепит ркеибο1οидит, ВШбоЬайепит 1пПай1к, ВШбоЬайепит абокксепйк.
В наиболее предпочтительном варианте осуществления изобретения указанный штамм может представлять собой, например, ЬайоЬасШик айборййик Ж.’С 2463 (СЖ.’М 1-2623), ВШбоЬайепит ЬШбит Ж.’С 189 (ранее СП1СА 536, ШСМ 1-2333), ВШбоЬайепит ЬШбит \СС 235 (ранее СП1СА 533, ШСМ 1-2335), ВШбоЬайепит абокксепйк Ж.’С 251 (СЖ.’М 1-2168), ВШбоЬайепит 1асйк (АТСС 27536).
Среди различных штаммов, выбранных в соответствии с настоящим изобретением, в качестве примера следующие штаммы были депонированы по Будапештскому договору в Со11есйоп №Шопа1е бе Си11игек бе Мкгоогдашктек (СУСМ), 1пкй1и1 Рак1еиг, 28 гие би Ьойеиг Коих, 75724 Рапк Себех 15, Бтапсе: ЬайоЬасШик айборййик Ж.’С 2463, 2.02.2001 под ссылочным номером С^М 1-2623 и ВШбоЬайепит ЬШбит Ж.’С 189 и Ж.’С 235, 12.10.99 под ссылочным номером СNСМ 1-2333 и СNСМ 1-2335 соответственно. В1б1ПоЬас1епит абокксепйк Ж.’С 251 был депонирован 15.03.99 под ссылочным номером С^М I2168.
Штамм ВШбоЬайепит 1асйк (ВЬ12) (АТСС 27536) предоставлен Напкеп (Сйг. Напкеп А/8, 10-12 Воеде А11е, Р.О. Вох 407, ΌΚ-2970 Ноегкйо1т, Ьапетагк). Гидрофобность этого штамма составляет 89 %Г.
Бактериальный штамм по настоящему изобретению может быть использован для приготовления композиций, предназначенных для улучшения здоровья человека или животного, в частности для профилактики или лечения нарушений, связанных с эндотоксинами у человека и домашних животных. Бактериальный штамм может быть использован как эффективное средство, например, для профилактики эндотоксинового шока и сепсиса кишечного происхождения, бактериальной транслокации, некротического энтероколита, воспалительного заболевания кишечника, кишечных инфекций и хронической эндотоксинемии, ассоциированной или вызванной катаболическим или системным воспалением.
- 2 006397
Бактериальный штамм по данному изобретению может быть использован в жизнеспособном или инактивированном виде.
В предпочтительном варианте осуществления изобретения штамм лактобактерий используют в присутствии его ферментированной питательной среды. Указанная среда, например, может быть стерилизована как сама, так и с пищей, экструдирована или высушена распылением, подвергнута охлаждению или застабилизирована для хранения.
Бактериальный штамм может быть использован таким образом, чтобы количество, доступное для индивидуума, соответствовало примерно 103-1014 КОЕ в день. Это количество зависит от веса индиви912 710 дуума и предпочтительно составляет примерно 10-10 КОЕ/день для людей и 10 -10 КОЕ/день для домашних животных.
В соответствии с другим аспектом, настоящее изобретение относится к выделенному штамму лактобактерий или бифидобактерий, имеющих гидрофобные свойства клеточной поверхности и обладающих способностью связывать эндотоксины или коагрегировать с грамотрицательными бактериями.
Способность бактериального штамма по настоящему изобретению связывать эндотоксины может быть легко измерена с использованием эндотоксинов, меченных ФИТЦ, измерения связывания радиоактивно меченного эндотоксина с бактериальными клетками, причем в этом случае молекулярная структура эндотоксина не изменяется по сравнению с возможными модификациями, которые может претерпевать молекула после конъюгации с ФИТЦ (см. примеры).
Предпочтительно определяют способность бактериального штамма удалять эндотоксин из раствора, в котором воспроизводят количество эндотоксина, обнаруженного в кишечнике человека. Например, микроанализом уровни эндотоксинов были определены для определения 2-кето-3-дезоксиоктоната группы в липополисахариде грамотрицательных бактерий (Кагкйаищ Υ Ό, с1 а1., Лиа1у11са1 СйетщЦу (1978) 85: 595-601). Предпочтительно отбирали бактерии, удаляющие более 30% эндотоксина, содержащегося в данных растворах. Негидрофобные бактерии, испытанные в данном исследовании, не обладали способностью изменять начальное содержание эндотоксина (см. примеры).
Такие бактериальные штаммы могут быть использованы как описано выше, и, в частности, в качестве эффективного средства для профилактики, например, эндотоксического шока и сепсиса кишечного происхождения, бактериальной транслокации, некротического энтероколита, воспалительного заболевания кишечника, кишечных инфекций, хронической эндотоксемии, ассоциированной или вызванной катаболическим и системным воспалением.
В следующем аспекте настоящее изобретение относится к пищевой композиции для человека или домашних животных, содержащей, по меньшей мере, выделенный штамм лактобактерий и/или бифидобактерий, где указанный штамм, имеющий вышеуказанные характеристики, ассоциирован со съедобной подложкой или фармацевтической основой.
Указанный штамм может быть выбран как описано выше.
Предпочтительно лактобактерии или бифидобактерии можно применять в качестве дополнения к стандартной диете или как компонент питательно полноценной пищи для человека или домашнего животного.
Пищевые композиции для человека или домашнего животного могут содержать, по меньшей мере, штамм лактобактерий и/или бифидобактерий, как описано выше, так, чтобы количество, доступное для индивидуума, могло соответствовать примерно 103-1014 КОЕ в день. Это количество зависит от веса ин912 710 дивидуума и предпочтительно составляет примерно 10-10 КОЕ/день для людей и 10 -10 КОЕ/день для домашних животных.
Пищевой продукт для человека может быть, например, в форме питательного состава, состава для младенцев, продуктов на основе молока, молочных продуктов, продуктов на основе злаков. Для приготовления такого пищевого продукта или композиции описанный выше бактериальный штамм может быть включен в пищевые продукты, такие как пищевые продукты на основе зерна, в сухое молоко, йогурт, в частности, в процессе их производства.
В одном варианте осуществления изобретения может быть приготовлен питательный состав, содержащий источник белка и по меньшей мере один бактериальный штамм по данному изобретению. В качестве источника белка предпочтительно использовать диетические белки. Диетическими белками могут быть любые подходящие диетические белки, например, животные белки (такие как молочные белки, белки мяса и яичные белки), растительные белки (такие как белки сои, пшеницы, риса или гороха), смеси свободных аминокислот или их комбинация. Главным образом предпочтительны молочные белки, такие как казеин, сывороточные белки и соевые белки. Данная композиция также может содержать источник углеводов и источник жиров.
В том случае, когда питательный состав включает в себя источник жира, данный источник жира предпочтительно обеспечивает примерно от 5 до 55% энергии данного питательного состава, например приблизительно от 20 до 50% энергии. Липидами, составляющими источник жира, могут быть любые подходящие жиры или смеси жиров. В частности, подходят растительные жиры, например соевое масло, пальмовое масло, кокосовое масло, сафлоровое масло, подсолнечное масло, кукурузное масло, канола,
- 3 006397 лецитин и подобное. Также, если требуется, могут быть добавлены животные жиры, такие как молочные жиры.
В том случае, когда питательный состав включает в себя источник углеводов, данный источник углеводов предпочтительно обеспечивает примерно от 40 до 80% энергии данного питательного состава. Могут быть использованы любые подходящие углеводы, например сахароза, лактоза, глюкоза, фруктоза, сухой кукурузный сироп и мальтодекстрины и их смеси.
Также, если требуется, могут быть добавлены пищевые волокна. Имеется большое количество видов волокон. Подходящие источники волокна, среди прочих, могут включать в себя сою, горох, овес, пектин, гуаровую смолу и аравийскую камедь. При использовании волокна предпочтительно составляют примерно до 5% энергии данного питательного состава. В питательный состав могут быть включены подходящие витамины и минералы обычным способом, в соответствии с подходящими руководствами. Если требуется, в питательный состав могут быть включены один или более эмульгаторов пищевых сортов; диацетилвиннокислые эфиры моно-диглицеридов, лецитин и моно- и диглицериды. Аналогично этому могут быть включены подходящие соли и стабилизаторы.
Предпочтительно питательный состав предназначен для применения энтерального, например в виде порошка, жидкого концентрата или напитка, готового к употреблению.
Данный питательный состав может быть приготовлен любым подходящим образом. Например, питательный состав может быть приготовлен путем смешивания вместе источника диетического белка, источника углеводов и источника жира в соответствующих количественных соотношениях. При использовании в смесь могут быть включены эмульгаторы. В этот момент могут быть добавлены витамины и минералы, но их обычно добавляют позже, чтобы избежать разрушения нагреванием. Любые жирорастворимые витамины, эмульгаторы и подобное могут быть растворены в источнике жира до смешивания. Затем можно смешать воду, предпочтительно воду, которую подвергли обратному осмосу, с получением жидкой смеси. Подходящая температура воды составляет примерно от 50 до 80°С для улучшения распределения ингредиентов. Для образования жидкой смеси могут быть использованы коммерчески доступные разжижители. Жидкую смесь затем гомогенизируют, например, в два этапа.
Затем жидкая смесь может быть термически обработана для уменьшения бактериальной нагрузки. Например, жидкая смесь может быть быстро нагрета до температуры в интервале примерно от 80 до 150°С примерно в течение от 5 с до 5 мин. Это может быть выполнено посредством острого пара, автоклавирования или с помощью теплообменника, например пластинчатого теплообменника. Жидкую смесь затем можно охладить примерно до температуры от 60 до 85°С, например, быстрым охлаждением. Затем жидкую смесь можно снова гомогенизировать; например в два этапа примерно при 7-40 МПа на первом этапе и примерно при 2-14 МПа на втором этапе. Гомогенизированная смесь затем может быть дополнительно охлаждена для добавления каких-либо компонентов, чувствительных к нагреванию, таких как витамины и минералы. В этот момент удобно стандартизировать рН и содержание сухих веществ гомогенизированной смеси.
Если требуется получение порошкообразного питательного состава, гомогенизированную смесь переносят в подходящий сушильный аппарат, такой как распылительная сушилка или сублимационная сушилка, и превращают в порошок. Содержание влаги в данном порошке должно составлять менее чем примерно 5 вес.%.
Если необходимо получить жидкий состав, гомогенизированную смесь предпочтительно поместить в подходящие емкости в асептических условиях. Асептическое заполнение емкостей может быть проведено предварительным нагреванием гомогенизированной смеси (например, приблизительно до 75-85°С) и затем введением пара в гомогенизированную смесь для повышения температуры примерно до 1 40160°С, например приблизительно до 150°С. Затем гомогенизированная смесь может быть охлаждена, например, быстрым охлаждением, до температуры примерно 75-85°С. Гомогенизированная смесь затем может быть гомогенизирована, дополнительно охлаждена, примерно до комнатной температуры, и помещена в емкости. Подходящая аппаратура для проведения асептического заполнения подобного рода коммерчески доступна. Жидкий состав может быть в виде готового для кормления состава, имеющего содержание сухих веществ примерно от 10 до 14 вес.%, или может быть в форме концентрата; в большинстве случаев содержание сухих веществ составляет примерно от 20 до 26 вес.%. К жидким составам могут быть добавлены ароматизаторы так, чтобы данные составы доставлялись в виде удобных, ароматизированных, готовых к употреблению напитков.
В другом варианте осуществления изобретения обычный пищевой продукт может быть обогащен бактериальным штаммом в соответствии с настоящим изобретением. Например, ферментированное молоко, йогурт, свежий сыр, сычужное молоко, кондитерские плитки, хлопья или плитки из злаков для завтрака, напитки, молочные порошки, продукты, основанные на сое, немолочные ферментированные продукты или пищевые добавки для клинического питания.
В следующем варианте осуществления изобретения, может быть приготовлена питательно полноценная пищевая композиция для домашнего животного. Композиция может быть в форме порошкообразного, в форме сухого, полусырого или сырого, охлажденного или застабилизированного для хранения пищевого продукта для домашних животных. Композиция также может быть диетическим дополнением
- 4 006397 для домашнего животного или фармацевтической композицией. Эти пищевые продукты для животных могут быть получены обычным способом. Помимо бактериального штамма, эти корма для домашних животных могут включать в себя любой один или более источников крахмала, источник белка и источник липида.
Подходящими источниками крахмала, например являются злаки и бобовые, такие как кукуруза, рис, пшеница, ячмень, овес, соя и их смеси. Подходящие источники белка могут быть выбраны из любого подходящего источника животного или растительного белка, например, мясо и мука, мясо домашней птицы, мясо рыбы, концентраты соевого белка, молочные белки, глутен и подобное. Для более старых животных предпочтительно, чтобы источник белка содержал белок высокого качества. Подходящие источники липидов включают в себя различные сорта мяса, животные жиры и растительные жиры. Более того, если требуется, в корм для домашнего животного также могут быть включены различные другие ингредиенты, например, сахар, соль, специи, приправы, витамины, минералы, вкусовые вещества, жиры и подобное.
Для сухих кормов для животных подходящим процессом является экструзионная термообработка, хотя могут быть использованы выпекание и другие подходящие способы. При экструзионной обработке сухой корм для животных обычно поставляется в виде гранул. При использовании пребиотиков пребиотики могут быть дополнительно смешаны с другими ингредиентами сухого корма для животных до обработки. Подходящий способ описан в европейской патентной заявке № 0850569; раскрытие которого включено в качестве ссылки. При использовании пробиотического микроорганизма данный организм лучше всего наносить на сухой корм для животных или включать в него. Подходящий способ описан в европейской патентной заявке № 0862863; раскрытие которого включено в качестве ссылки.
Для сырых кормов, для производства продуктов, имитирующих мясо, может быть использован способ, описанный в патентах США 4781939 и 5132137. Раскрытие этих патентов приведено в качестве ссылки. Также могут быть использованы другие способы для производства порционных продуктов, например, приготовление в паровой печи. Альтернативно, формованные продукты могут быть получены путем эмульгации подходящего мясного сырья с получением мясной эмульсии, добавления подходящего желатинирующего агента и нагревания мясной эмульсии перед наполнением консервных банок или других емкостей.
Количество пребиотиков в корме для животных предпочтительно составляет примерно 20 вес.%, главным образом примерно 10 вес.%. Например, пребиотик может содержать примерно от 0,1 до примерно 5 вес.% корма для животных. Для животных кормов, в которых в качестве пребиотика используют цикорий, содержание цикория может составлять примерно от 0,5 до примерно 10 вес.% пищевой смеси; более предпочтительно примерно от 1 до примерно 5 вес.%.
При использовании пробиотического микроорганизма предпочтительно корм для животных содержит примерно от 104 до примерно 1010 клеток пробиотического микроорганизма на грамм корма для животного; более предпочтительно примерно от 106 до примерно 108 клеток пробиотического микроорганизма на грамм. Корм для животного может содержать примерно от 0,5% до примерно 20 вес.% смеси пробиотического микроорганизма; предпочтительно примерно от 1 до примерно 6 вес.%, например примерно от 3 до примерно 6 вес.%.
Корма для животных могут содержать другие активные вещества, такие как жирные кислоты с длинной цепью. Подходящие жирные кислоты с длинной цепью включают в себя альфа-линолевую кислоту, гамма-линолевую кислоту, линолевую кислоту, эйкозопентановую кислоту и докозогексановую кислоту. Жиры рыб являются подходящим источником эйкозопентановых кислот и докозагексановой кислоты. Масло огуречника аптечного, масло семян черной смородины и масло примулы вечерней - подходящие источники гамма-линолевой кислоты. Сафлоровые масла, подсолнечные масла, кукурузные масла и масла соевых бобов являются подходящими источниками линолевой кислоты. При необходимости корма для домашних животных дополняют минералами и витаминами так, чтобы они были питательно полноценными.
Дополнительно, если требуется, бактериальный штамм может быть инкапсулирован, например, в сахарную оболочку, жировую оболочку или полисахаридную оболочку.
Количество корма, потребляемого животным для получения благоприятного воздействия, будет зависеть от размера животного, вида животного и возраста животного. Однако в большинстве случаев количество корма для комнатного животного, обеспечивающего дневное количество примерно 103-1014 КОЕ по меньшей мере одного штамма лактобактерий или бифидобактерий, было бы достаточно. Например, предпочтительно дают примерно 109-1010 КОЕ/день собакам или 107-1010 КОЕ/день кошкам.
Композиция по данному изобретению главным образом предназначена для профилактики или лечения инфекций, связанных с грамотрицательными бактериями, с бактериями, выделяющими эндотоксин, такими как НейсоЬае1ег §рр, 8атоие11а §рр, а также избыточного бактериального роста в тонкой кишке (8ΙΒΟ), которые все клинически могут проявляться в виде диареи, при кишечных или системных воспалительных состояниях, или катаболизме и нарушении питания.
В соответствии с последним аспектом, данное изобретение предлагает способ профилактики или лечения нарушений, опосредованных эндотоксином и/или связанных с ним, включающий в себя этап
- 5 006397 приема пищи человеком или кормления животного композицией, содержащей, по меньшей мере, штамм лактобактерий и/или бифидобактерий, которые обладают гидрофобными свойствами клеточной поверхности, связанный с проглатываемой подложкой или фармацевтической основой.
В частности, этот способ может быть предназначен для профилактики или лечения инфекций, связанных с грамотрицательными бактериями, бактериями, продуцирующими эндотоксин, такими как НейсоЬас!ег крр, 8атопе11а крр, а также избыточного бактериального роста в тонкой кишке (8ΌΒΘ), клинически все они могут проявляться в виде диареи, кишечных или системных воспалительных состояний или катаболизма и нарушения питания.
Следующие примеры даны только с целью иллюстрации объекта изобретения настоящей заявки, а не для ограничения. Все проценты даны по массе, если не указано другое. Данным примерам предшествует краткое описание фигур.
Описание чертежей
Фиг. 1 - гистограммы для штамма В1ййоЬас1епцт Ыййит ЫСС 189 (ранее С1ЭСЛ 536, СЫСМ 12333) показывают связывание ФИТЦ-ЛПС. А: контроль без ФИТЦ-ЛПС. В: инкубирование с 50 мкл/мл ФИТЦ-ЛПС. Было исследовано по меньшей мере 16000 случаев.
Фиг. 2 - влияние альбумина на связывание ФИТЦ-ЛПС лактобактериями и бифидобактериями. А: штамм В1ййоЬас1епит Ыййит ЫСС 200 (ранее С1ЭСА 538, СЫСМ 1-2334). В: штамм ЬасЮЬасШик ас1йорЫ1и8 ЫСС 2463 (СЫСМ 1-2623). С: штамм В1ййоЬас1епцт Ыййит ЫСС 189 (ранее С1ЭСА 536, СЫСМ 1-2333).
Фиг. 3 - кинетика роста и связывания ФИТЦ-ЛПС для штамма В1ййоЬас1епцт Ыййит ЫСС 189 (ранее СГОСА 536, СЫСМ 1-2333). Средние значения из двух независимых экспериментов.
Фиг. 4 - связывание ЛПС штаммом бифидобактерий, определенное с помощью микроанализа для выявления 2-кето-3-дезоксиоктонато (КДО) в липополисахариде. Начальная концентрация раствора составляла 1 00 мкг/мл. Прямоугольники показывают конечную концентрацию после инкубирования раствора с гидрофобными бактериальными штаммами ЫСС 189 и ЫСС 251 (СЫСМ 1-2168) по сравнению с негидрофобным штаммом бактерий (ЫСС 200 (СЫСМ 1-2334)).
Фиг. 5 - провоспалительная активность (1Ь-8 (нг/мл)) раствора ЛПС, предварительно инкубированного с гидрофобными бактериями, на эпителиальных клетках человека НТ-29. Контрольные образцы ЭМЕМ. молоко человека (НМ) 2%, ЛПС (2,5 мкг/мл) в отдельности, отдельно штамм В1ййоЬас1епцт Ыййит ЫСС 189 (1.5е8 КОЕ/мл) были протестированы на фоновую стимулирующую активность. Тестируемые растворы ЛПС + молоко человека (источник 8СЭ14) сравнивали с раствором, содержащим ЛПС 2,5 мкг/мл + НМ 2% предварительно инкубированным со штаммом В1ййоЬас1епцт Ыййит ЫСС 189 (1.5е8 КОЕ/мл).
Примеры
Пример 1. Отбор штамма лактобактерий по данному изобретению.
Отбор гидрофобных бактерий изначально был основан на % распределения бактериальных клеток между органической (гидрофобной) и водной фазой. Определение гидрофобности клеточной поверхности проводили с использованием МАТН способа, как описано ранее (Регех. Р.Б. е! а1., 1998, Арр1. Епуйоп. МютоЬю1. 64: 21-26). Вкратце, 2 мл бактериальной суспензии (около 108 КОЕ/мл, РВ8) экстрагировали 0,4 мл ксилола путем их интенсивного перемешивания в течение 120 с. Фазы оставляли для разделения декантацией и измеряли А600 водной фазы. Гидрофобность клеточной поверхности (%Г) рассчитывали по формуле Г% = [(Ао-А)/Ао]х100, где Аз и А представляют собой оптические плотности до и после экстракции ксилолом соответственно.
Впоследствии лактобактерии и бифидобактерии отбирали по их способности удалять эндотоксин из раствора, в котором воспроизведено количество эндотоксина, обнаруженное в кишечнике человека. Уровни эндотоксина исследовали с помощью микроанализа для выявления 2-кето-3-дезоксиоктоновых групп в липополисахариде грамотрицательных бактерий (КаткйапЦ Υ.Ό, е! а1., Апа1уйса1 СЬешШту (1978) 85:595-601).
Отбирали бактерии, удаляющие более 30% содержания эндотоксина из этих растворов. Негидрофобные бактерии, тестируемые в этом исследовании, не обладали способностью изменять первоначальное содержание эндотоксина.
Пример 2. Действие лактобактерий в качестве поглотителя эндотоксина ш νίϋΌ.
Взаимодействие между ЛПС из ЕксЬепсЫа сой и лактобактериями, несущими различные свойства клеточной поверхности, изучали с применением отобранных бактерий с гидрофобностью более 80% и несколькими негидрофобными «негативными» контролями, взаимодействие с флуоресцентно меченным эндотоксином, проводили методом проточной цитометрии.
Материалы и методы
Бактериальные штаммы и условия культивирования
Штамм ЬасЮЬасШик ас1йорЫ1и§ ЫСС 2463 (СЫСМ 1-2623) был получен из №Чес сойесйоп (Ьаикаппе, 8\\йхег1апй). Штаммы В1ййоЬас1епцт Ыййит ЫСС 189 (ранее С1ЭСА 536, 1-2333) и В1ййоЬас1епит Ыййит ЫСС 200 (ранее С1ЭСА 538, (СЫСМ 1-2334)) были получены из коллекции Сеп!го йе 1п\'е51щасюп у Эекатгойо еп Спо1еспо1оща йе АйтепЮк (Ьа р1а!а, Ащепйпа). Замороженные суспензии
- 6 006397 (-80°С), стабилизированные 10% (об./об.) глицерина, реактивировали однократно в МК8 бульоне перед экспериментами. Все выращивания бактерий проводили при 37°С в анаэробных условиях (ВВЬ Са&Рак Р1И8).
ФИТЦ-ЛПС связывание
Липополисахарид и липополисахарид, меченный ФИТЦ, были получены из серотипа 0111 :В4 ΕδсЕспеЫа со11 (8ке11у, К.К с! а1., 1979, 1пГсс1. 1ттип. 23: 287-293) и приобретены фирмой 8щта. Исходные растворы, содержащие 1000 мкл/мл, готовили в дистиллированной воде и соответственно разводили.
Бактериальные культуры трижды промывали РВ8 и суспензии стандартизировали до 107 КОЕ/мл. 400 мкл перемешивали с различными количествами ФИТЦ-ЛПС или ЛПС с получением ряда концентраций от 0 до 50 мкг/мл в реакционной смеси. Инкубирования проводили при 4 или 37°С в течение 30 мин, а затем клетки промывали дважды РВ8 и фиксировали 1% параформальдегидом (об./об.) в течение 30 мин при 4°С. Проточную цитометрию проводили с использованием сине-зеленого возбуждающего света (ЕАС8сап™).
Гидрофобность клеточной поверхности
Определение гидрофобности клеточной поверхности проводили с использованием МАТН метода, как описано ранее (Рете/, Р.Е. е! а1., 1998, Арр1. Εηνίτοη. МютоЫоЕ 64: 21-26). Вкратце, 2 мл бактериальной суспензии (около 108 КОЕ/мл, РВ8) экстрагировали 0,4 мл ксилола путем их интенсивного перемешивания в течение 120 с. Данные фазы оставляли для разделения декантацией и измеряли А600 водной фазы. Гидрофобность клеточной поверхности (%Г) рассчитывали по формуле Н% = [(Ао-А)/А0] х100, где А0 и А представляют собой оптические плотности до и после экстракции ксилолом соответственно.
Результаты
Гидрофобности клеточных поверхностей исследуемых штаммов показаны в табл. 1 . Для штаммов Еас1оЬасШи8 ас1йорЫ1и8 ЫСС 2463 (СЫСМ 1-2623) и В1ййоЬас1етшт Ыййит ЫСС 189 (СЫСМ 1-2333) значения составили 93 и 96% соответственно, тогда как штамм ВШйоЬас1епит ίηΓηηΙίδ ЫСС 200 (СЫСМ 1-2334) не являлся гидрофобным и показал значения около 3%.
Таблица 1
Гидрофобности исследуемых штаммов Средние значения по меньшей мере 3 определений
| Штамм | Гидрофобность % |
| ЫСС 2463 (СИСМ 1-2623) | 93 + 3 |
| ЫСС 199 (СЫСМ 1-2333) | 96±3 |
| ЫСС 200 (СЫСМ 1-2334) | 3±2 |
Инкубирование штамма ЫСС 189 с 50 мкг/мл ЛПС, меченным ФИТЦ, отчетливо сдвигает популяцию бактерий в флуоресцентную зону. Случаи, соответствующие расположению с правой стороны диаграммы (маркер М1) представляют 90% сканированной популяции (фиг. 1В). Для суспензий, инкубированных без ФИТЦ-ЛПС, только 2% случаев различаются связывающей способностью.
Табл. 2 (ниже) показывает, что связывание ФИТЦ-ЛПС зависит от дозы. Было обнаружено 5 и 15% ФИТЦ (+) клеток для штаммов ЫСС 200. С другой стороны, штамм ЫСС 189 показывает около 95% ФИТЦ (+) клеток. Насыщение происходит около 10 мкг/мл ФИТЦ-ЛПС. Добавление альбумина, липидсвязывающего вещества отчетливо уменьшает соотношение ФИТЦ (+) во всех исследуемых штаммах (фиг. 2). Однако штамм СГОСА 536 показывает около 30% ФИТЦ (+) клеток в присутствии 0,4% альбумина и 50 мкг/мл ФИТЦ-ЛПС (фиг. 2С). Более того, для этого штамма было обнаружено 10% ФИТЦ (+) клеток с концентрацией альбумина вплоть до 3%. Двухвалентные катионы (Са2+ 0,9 мМ и Мд2+ 0,5 мМ) не изменяли связывание (данные не показаны).
- 7 006397
Таблица 2 Процент ФИТЦ (+) бактерий при различных концентрациях ФИТЦ-ЛПС Проанализировано по меньшей мере 30000 случаев
| ФИТЦ-ЛПС (мкг/мл) | Штамм | |
| ИСС 189 | ИСС 200 | |
| 0 | 0, 1 | 0,2 |
| 1 | 88,1 | 0,7 |
| 10 | 92,1 | 5,2 |
| 20 | 92,8 | 5,9 |
| 30 | 93, 9 | 3,7 |
| 40 | 94, 7 | 4,6 |
| 50 | 94,8 | 4,6 |
Связывание ФИТЦ-ЛПС для штамма В1йбоЬас1епит Ыйбит ЫСС 189 (ранее СЮСА 536, СЫСМ I2333) строго зависело от стадии роста (фиг. 3). Бактерии, собранные на стационарной фазе, показывают высокое соотношение ФИТЦ (+) клеток. Эти значения поразительно снижались во время лаг-фазы и прогрессивно восстанавливались во время роста. Не было обнаружено различий между связыванием при 4 и 37°С.
В итоге, в штаммах с высокой гидрофобностью выявляются ФИТЦ (+) клетки, которые достигают около 95% для штамма ЫСС 189. Негидрофобный штамм ЫСС 200 никогда не достигает значений выше 5%. Эти результаты показывают, что связывание ЛПС коррелирует с гидрофобностью клеточной поверхности.
Данные результаты четко указывают на то, что гидрофобные бактерии связывают эндотоксин, меченный ФИТЦ, и, следовательно, становятся флуоресцирующими. Как определено проточной цитометрией, при концентрации 10 мкг/мл эндотоксина более 90% гидрофобных клеточных культур становятся флуоресцирующими; напротив, менее 10% негидрофобных бактериальных клеток стали прозитивными при сходных концентрациях эндотоксина.
В тех случаях, когда гидрофобные культуры вводили в среду, содержащую эндотоксин в ряду концентраций от 30 до 90 мкг/мл, бактериальные культуры в концентрации от 107 до 108 бактерий на мл удаляли по меньшей мере 20% имеющегося эндотоксина. Эти данные были подтверждены с использованием радиоактивно меченного эндотоксина.
Пример 3. Эксперименты на иммунокомпетентных клетках человека.
Было изучено подавление провоспалительной реакции, вызываемой эндотоксином, в иммунокомпетентных клетках человека при наличии в культуральной системе гидрофобных штаммов в сравнении с негидрофобными бактериями.
Гидрофобные В1йбоЬас1егшт Ыйбит ЫСС 189 (СЫСМ 1-2333) и негидрофобные В1йбоЬас1епит ίηГапОк ЫСС 200 (СЫСМ 1-2334) культивировали в растворе, содержащем определенное количество эндотоксина, как описано для метода с КДО (см. пример 1) (фиг. 4).
Наличие эндотоксина после инкубации с бактериальной суспензией отчетливо уменьшалось под действием гидрофобного штамма, тогда как для негидрофобного штамма изменения не наблюдались.
Пример 4. Функциональные изучения гидрофобных бактерий.
Материалы и методы
Промытые бактерии ресуспендировали в ЭМЕМ с высоким содержанием глюкозы (ΑΜΙΜΕΌ) и предварительно инкубировали с ЛПС из ЕксйепсЫа сой 0111: В4 (81дта) в конечной концентрации 2,5 мкг/мл. После центрифугирования 200 мкл супернатанта или ресуспендированного бактериального осадка использовали для стимуляции эпителиальных клеток НТ-29.
После 20-часового культивирования при 37°С супернатант клеточной культуры НТ-29 исследовали на наличие 1Ь-8 с использованием методики ЕЬ18А.
Результаты
Результаты представлены на фиг. 5. Провоспалительная активность ЛПС значительно снижалась в тех случаях, когда ЛПС предварительно инкубируют с гидрофобными бактериями. После центрифугирования супернатант, добавленный к культуре эпителиальных клеток человека (в присутствии молока человека, поскольку стимуляция ЛПС зависит от наличия кСЭ 14), существенно уменьшился по отношению к супернатанту, который предварительно не инкубировали с гидрофобными бактериями.
Пример 5. Состав для младенцев.
Для получения состава для младенцев готовят следующую смесь, содержащую на 1 00 мл состава: от 0,5 до 5%, предпочтительно 2% пептидов, от 0,2 до 10%, предпочтительно 4% жира, от 1 до 25%,
- 8 006397 предпочтительно 8% нелевановых углеводородов (включая лактозу 65%, мальтодекстрин 20%, крахмал 15%), и по меньшей мере 106 КОЕ/мл следующих штаммов: Еас1оЬасй1ик ас1борЫ1ик ИСС 2463 (СИСМ I2623), В1йбоЬас1етшш Ыйбиш ИСС 189 (СИСМ 1-2333), ВШбоЬас1етшш Ыйбиш СИСМ 1-2335, ΒίάίίοЬас1етшш або1ексепйк СИСМ 1-2168, в сочетании с незначительным количеством витаминов и олигоэлементов до соответствия ежедневным потребностям и от 0,01 до 2%, предпочтительно 0,3% минералов и от 50 до 90%, предпочтительно 75% воды.
Пример 6. Применение гидрофобных лактобактерий по данному изобретению в молочных продуктах.
Один штамм или более В1йбоЬас1етшш ЫП4нш (СИСМ 1-2333), БасЮЬасШик ааборНШик ИСС 2463 (СИСМ 1-2623), В|П4оЬас1ег1иш Ыйбиш ИСС 235 (СИСМ 1-2335) или ВШбоЬас1етшш або1ексепйк ИСС 251 (СИСМ 1-2168) по настоящему изобретению может быть использован для производства ферментированных молочных продуктов, подобных йогурту.
Для этого готовят 1 л молочного продукта, содержащего 2,8% жиров и дополненного 2% порошка снятого молока и 6% сахара, пастеризуют при 96°С в течение 30 мин и температуру снижают до 42°С. Прекультуру незагущенного штамма 81тер1ососсик 1йетшорЫ1ик и невязкого штамма БасЮЬасШик ЬиЦапсик реактивировали в стерильной М8К культуральной среде, содержащей 10% восстановленного молочного порошка и 0,1% промышленного дрожжевого экстракта.
Прекультуру одного штамма или более также реактивировали в среде, содержащей 1 0% восстановленного молочного порошка и 0,1% промышленного дрожжевого экстракта с 1% сахарозы. Пастеризованный молочный продукт затем инкубировали с 1 % каждого из реактивированных культуральных предшественников и этот молочный продукт затем оставляли для брожения при 32°С до достижения значения рН 4,5. Данным способом получают ферментированные молочные продукты, подобные йогурту, и хранят при 4°С.
Пример 7. Сухой корм для собак.
Кормовую смесь составляют примерно из 58 мас.% кукурузы, примерно 5,5 мас.% кукурузного глютена, примерно 22 мас.% мяса цыпленка, 2,5% сушеного цикория, молока, ферментированного штаммами Ьас1оЬасШи8 ааборШик ИСС 2463 (СИСМ 1-2623) так, чтобы соответствующее количество для собак составляло около 109-1010 КОЕ/день, и соли, витамины и минералы, составляющие остаток.
Заправляемую смесь заправляли в прекондиционер и увлажняли. Увлажненный корм затем заправляли в устройство для экструзионной обработки и желировали. Желированное вещество, выходящее из устройства для экструзионной обработки, продавливали через матрицу и подвергали экструзии. Экструдат режут на части, подходящие для кормления собак, высушивают примерно при 110°С в течение, приблизительно, 20 мин и охлаждают для формирования гранул.
Этот сухой корм для собак может улучшить здоровье домашнего животного и, в частности, предупредить нарушения, связанные с эндотоксинами у комнатных животных.
Claims (14)
- ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ1. Выделенный штамм лактобактерий, обладающий гидрофобными свойствами клеточной поверхности, где процент гидрофобности (%Г) составляет по меньшей мере 80% и более предпочтительно от 85 до 1 00%, отобранный по его способности связывать эндотоксины или коагрегировать с грамотрицательными бактериями.
- 2. Штамм по п.1, где лактобактерий связывают по меньшей мере 30% эндотоксина из раствора, концентрации в котором сходны с содержанием эндотоксина в кишечнике.
- 3. Штамм по п.1 или 2, выбранный из группы, состоящей из Ьас1оЬасШи8 щйпкопи, Ьас1оЬасШи8 геи1еги, ЬасФЬасШик ратасакец ЬасФЬасШик ашшайк, Ьас1оЬасШик тишЫк, Ьас1оЬасШик ас1борЫ1ик, Ьас1оЬасй1и8 тайшпокик, ЬасФЬасШик ГетшеШиш, Ьас1оЬасШик бе1Ьтиескп киЬк, 1асйк.
- 4. Штамм по любому из пп.1-3, представляющий собой Ьас1оЬасШик ас1борЫ1ик ИСС 2463 (СИСМ 1-2623).
- 5. Выделенный штамм бифидобактерий, обладающий гидрофобными свойствами клеточной поверхности, где процент гидрофобности (%Г) составляет по меньшей мере 80% и более предпочтительно от 85 до 100 %, отобранный по его способности связывать эндотоксины или коагрегировать с грамотрицательными бактериями.
- 6. Штамм по п.5, где бифидобактерий связывают по меньшей мере 30% эндотоксина из раствора, концентрации в котором сходны с содержанием эндотоксина в кишечнике.
- 7. Штамм по п.5 или 6, выбранный из группы, состоящей из В1йбоЬас1егшш крр., В|П4оЬас1ег1иш Ыйбиш, В1йбоЬас1етшш 1опдиш, ВШбоЬас1етшш ркеибо1опдиш, ВШбоЬас1етшш 1п1ап11к, ВШбоЬас1етшш або1ексепйк.
- 8. Штамм по любому из пп.5-7, представляющий собой В|П4оЬас1ег1иш Ыйбиш ИСС 189 (СИСМ I2333), В1йбоЬас1егшш Ыйбиш ИСС 235 (СИСМ 1-2335), В1йбоЬас1етшш або1ексепйк ИСС 251 (СИСМ I2168), ВШбоЬас1етшш 1асйк (АТСС 27536).- 9 006397
- 9. Пищевая композиция для человека или комнатного животного, содержащая по меньшей мере один штамм лактобактерий и/или бифидобактерий по любому из пп. 1-8, связанный со съедобной основой или фармацевтической основой.
- 10. Композиция по п.9, содержащая указанный штамм в его жизнеспособной или инактивированной форме.
- 11. Композиция по любому из пп.9 или 10, где количество лактобактерий, доступное для индивидуума, соответствует примерно 103-1014 КОЕ в день.
- 12. Применение композиции по любому из пп.9-11 для ослабления, предупреждения или лечения нарушений, опосредованных эндотоксином и/или ассоциированных с ним.
- 13. Применение по меньшей мере одного штамма по любому из пп.1-8 для получения композиции, предназначенной для профилактики или лечения нарушений, опосредованных эндотоксином и/или ассоциированных с ним.
- 14. Применение по п. 13, где лактобактерий применяют таким образом, чтобы количество, доступное индивидууму, составляло примерно 103-1014 КОЕ в день.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP01200436 | 2001-02-06 | ||
| PCT/EP2002/001163 WO2002062360A1 (en) | 2001-02-06 | 2002-02-01 | Endotoxin binding by lactic acid bacteria and bifidobacteria |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| EA200300862A1 EA200300862A1 (ru) | 2003-12-25 |
| EA006397B1 true EA006397B1 (ru) | 2005-12-29 |
Family
ID=8179863
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| EA200300862A EA006397B1 (ru) | 2001-02-06 | 2002-02-01 | Связывающие эндотоксин штаммы лактобактерий и бифидобактерий, обладающие гидрофобными свойствами, и способы их применения |
Country Status (20)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US7550285B2 (ru) |
| EP (1) | EP1359924B1 (ru) |
| JP (3) | JP2004531477A (ru) |
| KR (1) | KR100845456B1 (ru) |
| CN (1) | CN1250232C (ru) |
| AT (1) | ATE375164T1 (ru) |
| AU (1) | AU2002250886B2 (ru) |
| BR (1) | BR0207019A (ru) |
| CA (1) | CA2436264C (ru) |
| DE (1) | DE60222856T2 (ru) |
| EA (1) | EA006397B1 (ru) |
| ES (1) | ES2292744T3 (ru) |
| IL (1) | IL157071A0 (ru) |
| MX (1) | MXPA03007024A (ru) |
| NO (1) | NO20033372L (ru) |
| NZ (1) | NZ527493A (ru) |
| PL (1) | PL367083A1 (ru) |
| PT (1) | PT1359924E (ru) |
| WO (1) | WO2002062360A1 (ru) |
| ZA (1) | ZA200306935B (ru) |
Families Citing this family (34)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| ATE375164T1 (de) * | 2001-02-06 | 2007-10-15 | Nestle Sa | Endotoxin-bindung durch milchsäurebakterien und bifidobacteria |
| FR2848115B1 (fr) * | 2002-12-05 | 2005-03-25 | Rhodia Chimie Sa | Composition de bacteries et son utilisation |
| SE526711C2 (sv) * | 2003-01-31 | 2005-10-25 | Probi Ab | Nya stammar av Bifidobacterium med förmåga att överleva i magtarmkanalen och producera glutamin in vivo, samt kompositioner och användningar därav |
| US8877178B2 (en) | 2003-12-19 | 2014-11-04 | The Iams Company | Methods of use of probiotic bifidobacteria for companion animals |
| US20050158294A1 (en) | 2003-12-19 | 2005-07-21 | The Procter & Gamble Company | Canine probiotic Bifidobacteria pseudolongum |
| US7862808B2 (en) * | 2004-07-01 | 2011-01-04 | Mead Johnson Nutrition Company | Method for preventing or treating respiratory infections and acute otitis media in infants using Lactobacillus rhamnosus LGG and Bifidobacterium lactis Bb-12 |
| US7303745B2 (en) | 2005-04-15 | 2007-12-04 | Bristol-Myers Squibb Company | Method for preventing or treating the development of respiratory allergies |
| PL1885383T3 (pl) | 2005-05-31 | 2017-06-30 | Iams Europe B.V. | Kocie probiotyczne bifidobakterie |
| BRPI0611493B1 (pt) | 2005-05-31 | 2022-04-05 | Alimentary Health Ltd. | Lactobacilos probióticos felinos |
| US20090083067A1 (en) * | 2006-03-29 | 2009-03-26 | Mary Elaine Freeland | Methods and kits for selecting a health care product |
| EP2124966B1 (en) | 2007-02-01 | 2015-09-09 | IAMS Europe B.V. | Method for decreasing inflammation and stress in a mammal using glucose antimetabolites, avocado or avocado extracts |
| MX2009008875A (es) * | 2007-02-28 | 2009-08-28 | Mead Johnson Nutrition Co | Producto que contiene probiotico inactivado para niños o infantes. |
| KR100913406B1 (ko) * | 2008-03-25 | 2009-08-21 | 광주과학기술원 | Ｔｈ１－매개 면역 질환의 예방 또는 치료용 조성물 |
| US9771199B2 (en) * | 2008-07-07 | 2017-09-26 | Mars, Incorporated | Probiotic supplement, process for making, and packaging |
| US9232813B2 (en) * | 2008-07-07 | 2016-01-12 | The Iams Company | Probiotic supplement, process for making, and packaging |
| EP2459203B1 (en) * | 2009-07-30 | 2018-10-31 | DuPont Nutrition Biosciences ApS | Lactic acid bacteria and bifidobacteria for treating endotoxemia |
| US10104903B2 (en) | 2009-07-31 | 2018-10-23 | Mars, Incorporated | Animal food and its appearance |
| WO2011069860A1 (en) | 2009-12-08 | 2011-06-16 | Chr. Hansen A/S | Novel use for the treatment of metabolic endotoxemia |
| JP2010280664A (ja) * | 2010-07-02 | 2010-12-16 | Biogaia Ab | ラクトバチルス・リューテリ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓｒｅｕｔｅｒｉ）株を用いる哺乳類における免疫機能の改善方法 |
| HK1200062A1 (en) | 2011-07-13 | 2015-07-31 | 弗里斯兰品牌有限公司 | Dairy based compositions with low lps |
| US20130022586A1 (en) * | 2011-07-21 | 2013-01-24 | James Versalovic | Production and use of bacterial histamine |
| WO2013130773A2 (en) | 2012-02-29 | 2013-09-06 | Ethicon Endo-Surgery, Inc. | Compositions of microbiota and methods related thereto |
| EP3052076B1 (en) * | 2013-09-30 | 2021-03-03 | ELC Management LLC | Watery lotion skin care compositions and methods |
| CA2964480A1 (en) | 2014-10-31 | 2016-05-06 | Whole Biome Inc. | Methods and compositions relating to microbial treatment and diagnosis of disorders |
| CN104498375B (zh) * | 2014-12-02 | 2017-05-10 | 江南大学 | 一株具有内毒素吸附特性的耶氏酵母及其吸附特性研究方法 |
| JP6710075B2 (ja) * | 2016-03-29 | 2020-06-17 | カゴメ株式会社 | Ｌｐｓ産生抑制剤、及びｌｐｓ産生抑制用の食品組成物 |
| TWI640319B (zh) * | 2017-05-12 | 2018-11-11 | 健茂生物科技股份有限公司 | 具有抗發炎活性之醱酵液的製備方法 |
| WO2019046646A1 (en) | 2017-08-30 | 2019-03-07 | Whole Biome Inc. | METHODS AND COMPOSITIONS FOR THE TREATMENT OF MICROBIOMA ASSOCIATED DISORDERS |
| JP7811843B2 (ja) | 2018-07-19 | 2026-02-06 | ペンデュラム セラピューティクス， インコーポレイテッド | 微生物生着のための方法および組成物 |
| JP6888145B2 (ja) * | 2020-03-23 | 2021-06-16 | カゴメ株式会社 | Ｌｐｓ産生抑制剤、及びｌｐｓ産生抑制用の食品組成物 |
| US20230210964A1 (en) * | 2020-06-07 | 2023-07-06 | Sundaram Ramasamy | Compositions and methods for detoxifying bacterial endotoxins and hydrogen sulfide by recombinant fusion enzymes |
| EP4204539A1 (en) | 2020-08-28 | 2023-07-05 | Chr. Hansen A/S | Microencapsulation of microbial culture using octenyl succinic anhydride starch-chitosan complex coacervate |
| CA3208064A1 (en) | 2021-02-10 | 2022-08-18 | Zhongke Wisbiom（Beijing）Biotechnology Co., Ltd. | Bifidobacterium animalis subsp. lactis and use thereof |
| WO2025202427A1 (en) | 2024-03-28 | 2025-10-02 | Chr. Hansen A/S | Microencapsulated microbial culture using protein-carbohydrate and chitosan complex coacervate polymer |
Family Cites Families (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US555618A (en) * | 1896-03-03 | Hay-loader | ||
| IT1254210B (it) * | 1992-02-10 | 1995-09-14 | Simone Claudio De | Composizioni dietetiche e/o farmaceutiche a base di batteri lattici liofilizzati, loro preparazione e impiego |
| US5413785A (en) * | 1993-01-27 | 1995-05-09 | New England Deaconess Hospital Corp. | Methodology employing lactobacillus GG for reduction of plasma endotoxin levels circulating in-vivo |
| JP2506314B2 (ja) * | 1993-10-27 | 1996-06-12 | 全国農業協同組合連合会 | 家禽・豚の敗血症の予防・治療剤及び飼料 |
| US6506389B2 (en) * | 1995-10-20 | 2003-01-14 | Nederlandse Organisatie Voor Toegepast-Natuurwetenschappelijk Onderzoek (Tno) | Adherence factors of non pathogenic microorganisms and applications thereof for screening microorganisms for specific probiotic properties; novel pharmaceutical compositions and food additives comprising such microorganisms and adherence factors |
| PT862863E (pt) * | 1997-01-09 | 2002-04-29 | Nestle Sa | Produto cerealifero contendo probioticos |
| JP4163276B2 (ja) * | 1998-02-05 | 2008-10-08 | 独立行政法人理化学研究所 | 機能性組成物 |
| US6368591B2 (en) * | 1998-05-15 | 2002-04-09 | Shanghai Sine Pharmaceutical Corporation Ltd. | Beneficial microbe composition, new protective materials for the microbes, method to prepare the same and uses thereof |
| US6479051B1 (en) * | 1998-12-11 | 2002-11-12 | Urex Biotex, Inc. | Oral administration of lactobacillus for the treatment and prevention of urogenital infection |
| MXPA02009342A (es) * | 2000-03-24 | 2003-09-22 | Nestle Sa | Uso de bacterias de acido lactico para el tratamiento de la peritonitis. |
| ATE375164T1 (de) * | 2001-02-06 | 2007-10-15 | Nestle Sa | Endotoxin-bindung durch milchsäurebakterien und bifidobacteria |
-
2002
- 2002-02-01 AT AT02719762T patent/ATE375164T1/de not_active IP Right Cessation
- 2002-02-01 KR KR1020037010275A patent/KR100845456B1/ko not_active Expired - Fee Related
- 2002-02-01 BR BR0207019-7A patent/BR0207019A/pt not_active IP Right Cessation
- 2002-02-01 IL IL15707102A patent/IL157071A0/xx unknown
- 2002-02-01 EP EP02719762A patent/EP1359924B1/en not_active Revoked
- 2002-02-01 JP JP2002562367A patent/JP2004531477A/ja active Pending
- 2002-02-01 CA CA2436264A patent/CA2436264C/en not_active Expired - Fee Related
- 2002-02-01 PL PL02367083A patent/PL367083A1/xx not_active Application Discontinuation
- 2002-02-01 MX MXPA03007024A patent/MXPA03007024A/es active IP Right Grant
- 2002-02-01 PT PT02719762T patent/PT1359924E/pt unknown
- 2002-02-01 AU AU2002250886A patent/AU2002250886B2/en not_active Ceased
- 2002-02-01 WO PCT/EP2002/001163 patent/WO2002062360A1/en not_active Ceased
- 2002-02-01 US US10/470,807 patent/US7550285B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2002-02-01 EA EA200300862A patent/EA006397B1/ru not_active IP Right Cessation
- 2002-02-01 DE DE60222856T patent/DE60222856T2/de not_active Expired - Lifetime
- 2002-02-01 NZ NZ527493A patent/NZ527493A/en unknown
- 2002-02-01 CN CNB028078845A patent/CN1250232C/zh not_active Expired - Fee Related
- 2002-02-01 ES ES02719762T patent/ES2292744T3/es not_active Expired - Lifetime
-
2003
- 2003-07-28 NO NO20033372A patent/NO20033372L/no not_active Application Discontinuation
- 2003-09-04 ZA ZA200306935A patent/ZA200306935B/en unknown
-
2009
- 2009-06-19 US US12/488,293 patent/US7964384B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2011
- 2011-07-20 JP JP2011158962A patent/JP5973701B2/ja not_active Expired - Fee Related
-
2013
- 2013-11-07 JP JP2013231191A patent/JP2014062104A/ja active Pending
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| US7550285B2 (en) | 2009-06-23 |
| EA200300862A1 (ru) | 2003-12-25 |
| NO20033372D0 (no) | 2003-07-28 |
| EP1359924B1 (en) | 2007-10-10 |
| ZA200306935B (en) | 2004-12-06 |
| JP2004531477A (ja) | 2004-10-14 |
| JP2011246483A (ja) | 2011-12-08 |
| JP5973701B2 (ja) | 2016-08-23 |
| DE60222856D1 (de) | 2007-11-22 |
| PT1359924E (pt) | 2007-12-07 |
| KR100845456B1 (ko) | 2008-07-10 |
| US7964384B2 (en) | 2011-06-21 |
| NZ527493A (en) | 2005-06-24 |
| CA2436264A1 (en) | 2002-08-15 |
| AU2002250886B2 (en) | 2007-08-02 |
| US20040115178A1 (en) | 2004-06-17 |
| ATE375164T1 (de) | 2007-10-15 |
| PL367083A1 (en) | 2005-02-21 |
| CA2436264C (en) | 2014-01-28 |
| MXPA03007024A (es) | 2003-11-18 |
| EP1359924A1 (en) | 2003-11-12 |
| KR20030076652A (ko) | 2003-09-26 |
| BR0207019A (pt) | 2004-02-25 |
| HK1066174A1 (en) | 2005-03-18 |
| ES2292744T3 (es) | 2008-03-16 |
| IL157071A0 (en) | 2004-02-08 |
| NO20033372L (no) | 2003-07-28 |
| US20100136662A1 (en) | 2010-06-03 |
| CN1501805A (zh) | 2004-06-02 |
| DE60222856T2 (de) | 2008-07-24 |
| WO2002062360A1 (en) | 2002-08-15 |
| JP2014062104A (ja) | 2014-04-10 |
| CN1250232C (zh) | 2006-04-12 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP5973701B2 (ja) | 乳酸菌及びビフィズス菌による内毒素結合 | |
| EP1986669B1 (en) | Use of bifidobacterium longum for the prevention and treatment of inflammation | |
| JP4738717B2 (ja) | 乳酸菌からのリポテイコ酸、およびグラム陰性菌、潜在的病原性グラム陽性菌によって媒介される免疫応答を調節するためのその使用 | |
| CN1738595B (zh) | 用于减弱炎症过程和非特异性免疫参数的异常激活的含有益生素的组合物 | |
| AU2002250886A1 (en) | Endotoxin binding by lactic acid bacteria and bifidobacteria | |
| MX2011006701A (es) | Prevencion y tratamiento de diarrea por rotavirus. | |
| CN103917106A (zh) | 用于减少过敏的发作的部分水解的酪蛋白-乳清蛋白营养组合物 | |
| US20210330719A1 (en) | Probiotic combination for treatment of inflammatory-related gastrointestinal disorders | |
| CN107668721A (zh) | 包含乳铁蛋白的营养组合物在支持抵抗疾病和状况中的用途 | |
| KR20180129944A (ko) | 식품, 에너지 및/또는 지방 섭취 감소를 위한 비피더스균 | |
| HK1066174B (en) | Lactic acid bacteria and/or bifidobacteria, a composition containing the same and the use thereof |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s) |
Designated state(s): AM AZ BY KZ KG MD TJ TM |
|
| MM4A | Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s) |
Designated state(s): RU |