EA000033B1 - Bis(2-haloethyl) aminophenyl substituted distamycin derivatives as antitumor and antiviral agents - Google Patents
Bis(2-haloethyl) aminophenyl substituted distamycin derivatives as antitumor and antiviral agents Download PDFInfo
- Publication number
- EA000033B1 EA000033B1 EA199700046A EA199700046A EA000033B1 EA 000033 B1 EA000033 B1 EA 000033B1 EA 199700046 A EA199700046 A EA 199700046A EA 199700046 A EA199700046 A EA 199700046A EA 000033 B1 EA000033 B1 EA 000033B1
- Authority
- EA
- Eurasian Patent Office
- Prior art keywords
- carboxamido
- methyl
- pyrrole
- bis
- chloroethyl
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
- C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
- C07D207/30—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
- C07D207/34—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
Landscapes
- Organic Chemistry (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Virology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Oncology (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
Abstract
Description
Данное изобретение касается новых противоопухолевых и противовирусных средств (агентов), родственных известному антибиотику дистамицину А,
(distamycin А) (дистамицин А) который принадлежит к семейству пирроламидиновых антибиотиков, и сообщается, что он взаимодействует обратимо и избирательно с последовательностями ДНК-АТ, препятствуя как репликации, так и транскрипции [Nature 203, 1064 (1964); FEBS Letters 7 (1970); Prog. Nucleic Acids Res. Mol. Biol.,15,285 (1975)].
В DE-A-1795539 описано получение производных дистамицина, в которых формильная группа дистамицина заменена водородом или кислотным остатком органической С1-С4 -алифатической кислоты или циклопентилпропионовой кислоты.
В ЕР-В-246868 описаны аналоги дистамицина А, в которых формильная группа дистамицина заменена ароматическими, ациклическими или гетероциклическими фрагментами, несущими алкилирующие группы.
В настоящее время было найдено, что выбранный класс соединений, охватываемых общей химической формулой ЕР-В-246868, имеет более ценные биологические свойства, чем родственные соединения предшествующего уровня техники.
Соответственно, данное изобретение обеспечивает новые сайт-специфические азотсодержащие соединения, способ их получения, фармацевтические композиции, содержащие их, и их применение в терапии.
Данное изобретение представляет новый класс соединений формулы (I)
в которой n обозначает 2, 3 или 4;
один из R и R1 обозначает водород, С1 -С4-алкил, CFq и С1-С4-алкокси, а другой независимо обозначает CFq, С1 -С4-алкил или С1 -С4-алкокси; и X обозначает галоген.
Данное изобретение включает также фармацевтически приемлемые соли соединений формулы (I), так же, как и все возможные изомеры, охватываемые формулой (I), как отдельно, так и в смеси.
Данное изобретение включает также в своем объеме как метаболиты, так и фармацевтически приемлемые биопредшественники (известные также как пролекарства) соединений формулы (I).
Алкильные и алкокси-группы могут иметь разветвленные или прямые цепи. С1 -С4 -алкильной группой является предпочтительно метил или этил.
С1 -С4-алкоксигруппой является предпочтительно метокси или этокси. В фенильном кольце карбамоильная и бис-галоидэтиламино группы находятся по отношению друг к другу предпочтительно в мета- или пара-положениях.
R или R, могут быть у любого из свободных атомов углерода фенильного кольца, но, конечно, не у одного и того же атома углерода. Предпочтительно один из R и R, обозначает водород или С1 -С4 -алкил, а другой обозначает С1 -С4 -алкил, CFq или С1 -С4 -алкокси; или R и Rp являются одинаковыми и обозначают С1 -С4 -алкокси.
Фармацевтически приемлемые соли соединений формулы (I) являются солями с фармацевтически приемлемыми неорганическими или органическими кислотами.
Примерами неорганических кислот являются хлористоводородная, бромистоводородная, серная и азотная кислоты; примерами органических кислот являются уксусная, пропионовая, янтарная, малоновая, лимонная, винная, метансульфоновая кислоты и п-толуолсульфокислота. Особенно предпочтительным значением n является 3. X предпочтительно обозначает хлор или бром, в частности, хлор.
Предпочтительным классом соединений, согласно данному изобретению, являются соединения формулы (I), в которой n обозначает 3; X обозначает хлор; один из R и R, обозначает водород или С1 -С4 -алкил, а другой обозначает С1 -С4 -алкил, CFq или С1 -С4 -алкокси; и их фармацевтически приемлемые соли. Примерами характерных соединений в рамках данного изобретения, особенно в форме солей, предпочтительно с хлористоводородной (соляной) кислотой, являются следующие соединения:
β-[ 1 -метил-4- [ 1 -метил-4- [ 1 -метил-4- [3-метил-4Ν,Ν-бис (2-хлорэтил)-аминобензол-1 -карбоксамидо]пиррол-2-карбоксамидо] пиррол-2-карбоксамидо] пиррол -2 -карбоксамидо]пропионамидин;
β-[1 -метил-4-[1 -метил-4-[1 -метил-4-[3,5-диметил4-N,N-6to (2-хлорэтил) -аминобензол-1-карбоксамидо]пиррол-2-карбоксамидо]пиррол-2-карбоксамидо]пиррол-2-карбоксамидо]пропионамидин;
β- [ 1 -метил-4- [ 1 -метил-4- [ 1 -метил-4- [З-этил-4-Ν,Νбис (2-хлорэтил)-аминобензол-1 -карбоксамидо]пир3 рол-2-карбоксамидо] пиррол-2-карбоксамидо]пиррол-2-карбоксамидо]пропионамидин;
β-[1 -метил-4- [ 1 -метил-4- [ 1 -метил-4- [3,5 -диэтил-4Ν,Ν-бис (2-хлорэтил)-аминобензол-1 -карбоксамидо]пиррол-2-карбоксамидо]пиррол-2-карбоксамидо]пиррол-2-карбоксамидо]пропионамидин;
β-[ 1 -метил-4- [ 1 -метил-4- [ 1 -метил-4- [З-метокси-4Ν,Ν-бис (2-хлорэтил)-аминобензол-1 -карбоксамидо]пиррол-2-карбоксамидо]пиррол-2карбоксамидо]пиррол-2-карбоксамидо]пропионамидин;
β-[1 -метил-4- [ 1 -метил-4- [ 1 -метил-4- [З-этокси-4Ν,Ν-бис (2-хлорэтил)-аминобензол-1 -карбоксамидо]пиррол-2-карбоксамидо]пиррол-2- карбоксамидо]пиррол-2-карбоксамидо]пропионамидин;
β-[ 1 -метил-4- [ 1 -метил-4- [ 1 -метил-4-[ 2-метокси-4Ν,Ν-бис (2-хлорэтил)-аминобензол-1 -карбоксамидо]пиррол-2-карбоксамидо]пиррол-2-карбоксамидо]пиррол-2-карбоксамидо]пропионамидин;
β-[1 -метил-4- [ 1 -метил-4- [ 1 -метил-4- [2-метил-4Ν,Ν-бис (2-хлорэтил)-аминобензол-1 -карбоксамидо]пиррол-2-карбоксамидо] пиррол-2-карбоксамидо]пиррол-2-карбоксамидо]пропионамидин;
β- [ 1 -метил-4- [ 1 -метил-4- [ 1 -метил-4- [З-трифторметил-4-Ν,Ν-бис (2-хлорэтил) аминобензол-1-карбоксамидо]пиррол-2-карбоксамидо]пиррол-2-карбоксамидо]пиррол-2-карбоксамидо]пропионамидин; и β- [ 1 -метил- 4- [ 1 -метил-4- [ 1 -метил-4-[3-трифторметил-5-метил-4-Ν,Ν-бис (2-хлорэтил) аминобензол-1карбоксамидо]пиррол-2-карбоксамидо]-пиррол-2карбоксамидо]пиррол-2-карбоксамидо] пропионамидин.
Соединения данного изобретения и их соли могут быть получены по способу, предусматривающему реакцию соединения формулы (II)
в которой η имеет указанные выше значения, с соединением формулы (III)
в которой R, R1 и X имеют указанные выше значения, а Υ обозначает гидрокси или отщепляемую группу; и, при желании, образование соли соединения формулы (I) или получение свободного соединения из его соли, и/или, при желании, разделение смеси изомеров соединения формулы (I) на отдельные изомеры.
Реакцию соединения формулы (II) с соединением формулы (III) можно проводить в соответствии с известными способами, например, описанными в ЕРВ-246868.
В частности, Υ в качестве отщепляемой группы может быть группой, выбранной из галогена, в частности хлора, 2,4,5-трихлорфенокси, 2,4-динитрофенокси, сукцинимидо-^окси и имидазолильной группы.
Реакцию между соединением формулы (II) и соединением формулы (III), в которой Υ обозначает -ОН, предпочтительно проводят при молекулярном соотношении от 1:1 до 1:2 в органическом растворителе, таком как, например, диметилсульфоксид, гексаметилфосфотриамид, диметилацетамид, диметилформамид, этиловый спирт, бензол или пиридин, в присутствии органического или неорганического основания, такого, как например, триэтиламин, диизопропилэтиламин, или карбоната или бикарбоната натрия, и конденсирующего агента, такого как, например, Ν -3ΊΉπ-Ν’-(3диметиламинопропил)карбодиимид или предпочтительно Ν,Ν’-дициклогексилкарбодиимид. Температура реакции может варьироваться приблизительно от -10°С до 50°С, а время реакции приблизительно от 1 до 24 ч.
Реакцию между соединением формулы (II) и соединением формулы (III), в которой Υ обозначает иную отщепляемую группу, например, галоген, 2,4,5трихлорфенокси или сукцини\1идо-\-окси или имидазолил, можно проводить в аналогичных условиях, но без конденсирующего агента.
Соединения формулы (II) являются известными соединениями или могут быть получены известными способами из известных соединений (см., например, Arcamone et. al., Gazzetta Chim. ltal. 97, 1097 (1967). Соединения формулы (Ш) являются также известными соединениями или могут быть получены из известных соединений посредством реакций, хорошо описанных в органической химии (см., например, J.Med. Chem. 9, 882 (1966) и 25, 178 (1982).
Образование соли соединения формулы (I), а также получение свободного соединения из соли можно проводить известными стандартными способами.
Хорошо известные процедуры, такие, как фракционная кристаллизация или хроматография, могут затем выполняться для разделения смеси изомеров формулы (I) на отдельные изомеры.
Новые соединения формулы (I), полученные в соответствии с вышеописанными способами, могут также очищаться обычными способами, такими как, например, колоночная хроматография на силикагеле или оксиде алюминия и/или перекристаллизация из органического растворителя, такого как, например, низший алифатический спирт, например, метиловый, этиловый или изопропиловый спирт, или диметилформамид.
ФАРМАКОЛОГИЯ
Соединения данного изобретения могут быть полезны в качестве противоопухолевых и противовирусных средств. Они обнаруживают, в частности, цитостатические свойства в отношении опухолевых клеток, так что они могут быть полезными, например, для ингибирования роста различных опухолей, таких как, например карциномы, например рака молочной железы, рака легких, рака мочевого пузыря, рака толстой кишки, опухолей яичника и эндометрия млекопитающих, включая человека. Другие неоплазии, в случае которых могли бы найти применение соединения изобретения, представляют собой, например, саркомы, например саркомы мягких тканей и костные саркомы, и гематологические злокачественные состояния, такие как, например, лейкемия.
Противоопухолевую активность оценивали in vitro при помощи исследований цитотоксичности, проводимых на клетках мышиной лейкемии L 1210. Клетки получали из опухолей in vivo и адаптировали в клеточной культуре. Клетки использовали до десятого пассажа. Цитотоксичность определяли подсчетом выживших клеток после 48 часов обработки.
Процент роста клеток в обработанных культурах сравнивали с процентом роста клеток в контрольных. Величины IC , концентрации, ингибирующей 50% клеточного роста по сравнению с контролями, рассчитывали на основании кривых зависимости ответа от дозы (кривых дозаответной реакции).
Соединения данного изобретения испытывали также in vivo на мышах, пораженных лейкемией L , и на мышиной ретикулосаркоме М 5076, где они обнаружили очень хорошую противоопухолевую активность, согласно следующей процедуре.
Мышиная лейкемия L поддерживалась in vivo при помощи внутривенной ( i.v.) серийной трансплантации. Для экспериментов 105 клеток инъецировали внутрибрюшинно (Цр.) самкам мышей CD2FI, полученным от Charles River Italy. В начале экспериментов животные имели возраст 8 - 10 недель. Соединения вводили внутривенно в день +1 после инъекций опухолевых клеток.
Ретикулосаркому М5076 поддерживали in vivo при помощи внутримышечной (i.m.) серийной трансплантации. Для экспериментов 5х105 клеток инъецировали внутримышечно самкам мышей С57В16, полученным от Charles River Italy. В начале экспериментов животные имели возраст 8 -10 недель. Соединения вводили внутривенно на 3-й, 7-ой и 11-й дни после инъекций опухолевых клеток.
Вычисляли время выживания мышей и рост опухолей, и активность выражали в Т/С% (обработанная/ контрольная группы)% и T.I.% (ингибирование опухоли)%.
среднее время выживания обработанной группы
Т/С = -с-—- х 100% среднее время выживания необработанной группы
T.I. -% ингибирования опухолевого роста по отношению к контролю,
Тох (Токс.) - число мышей, умерших от токсичности.
Токсичность определяли, когда мыши умирали до того, как наблюдались значительные потери веса тела у контрольной группы и/или в опытном варианте и/или уменьшение размера селезенки и/или печени.
Соединения изобретения обнаружили более высокую противоопухолевую активность в этих моделях опухолей, чем близкородственные соединения, известные из ЕР-В-0246868.
Например, соединения Р-[1-метил-4-[1-метил-4[ 1 -метил-4-[3-метил-4-Х,Н-бис(2-хлорэтил) аминобензол-1 -карбоксамидо]пиррол-2-карбоксамидо] пиррол2-карбоксамидо]пиррол-2-карбоксамидо]пропионамидин (внутренний код FCE 29325) и Р[-1-метил-4-[1метил-4-[1-метил-4-[3,5-диметил-4-Х,Н-бис (2-хлорэтил) аминобензол-1 -карбоксамидо]пиррол-2-карбоксамидо]пиррол-2-карбоксамидо]пиррол-2-карбоксамидо]пропионамидин (внутренний код FCE 29721) и соединение предшествующего уровня, согласно ЕРВ-0246868, β[-1 -метил-4-[ 1 -метил-4-[1 -метил-4-[4-Х,Хбис (2-хлорэтил) аминобензол-1-карбоксамидо]пиррол-2-карбоксамидо]пиррол-2-карбоксамидо] пиррол-2-карбоксамидо] пропионамидин (внутренний код FCE 24517) испытывали против диссеминированной лейкемии мышей L и получили следующие данные по активности.
Представленные в таблице данные показывают, что соединения данного изобретения, несущие заявленные заместители на фенильном кольце бензоильного фрагмента, более активны, чем близкородственное незамещенное соединение предшествующего уровня FCE 24517.
Соединения этого изобретения обнаруживают также эффективность в противодействии репродуктивной активности патогенных вирусов и защищают клетки ткани от вирусных инфекций.
Например, они обнаруживают активность против ДНК-вирусов, таких как, например, вирус герпеса, например вирусы простого герпеса и опоясывающего герпеса, вирус коровьей оспы, РНК-вирусов, таких как, например риновирус и аденовирусы, и против ретровирусов, таких как, например, вирусы саркомы, например вирус саркомы мышей, и вирусов лейкемии, например вируса лейкемии Фриента. Так, например, вирусы герпеса, Коксаки и респираторносинцитиальные вирусы испытывали в жидкой среде следующим образом. Серийные двухкратные разбавления этих соединений в концентрации от 200 до 1,5 мкг/мл распределяли в количестве 0,1 мл на лунку в 96-луночных микротитрационных планшетах для культуры ткани. Сразу же добавляли клеточные суспензии (2х105 клеток на мл), инфицированные приблизительно 5х10'3 TCID50 вируса/клетку в количестве 0,1 мл на лунку.
После инкубирования в течение 3-5 дней при 37°С в 5% С0р клеточные культуры оценивали под микроскопом и определяли минимальную ингибирующую концентрацию (МИК), причем МИК является минимальной концентрацией, которая определяет уменьшение цитопатического действия по сравнению с инфицированными контролями.
Соединения изобретения можно вводить млекопитающим, включая людей, обычными способами, например парентерально (например, внутривенной инъекцией или внутривенным вливанием), внутримышечно, подкожно, местным нанесением или перорально.
Доза зависит от возраста, веса и состояния пациента и от способа введения.
Например, подходящая доза для введения взрослым людям для соединения FCE 29325 может быть в пределах приблизительно от 0,1 до 150-200 мг на дозу 1 - 4 раза в день.
Как уже говорилось, фармацевтические композиции, согласно изобретению, содержат соединение формулы (I) в качестве активного вещества в сочетании с одним или более фармацевтически приемлемыми эксципиентами (среда для лекарства).
Фармацевтические композиции данного изобретения обычно готовят, следуя общепринятым способам, и вводят в фармацевтически подходящей форме.
Например, растворы для внутривенной инъекции или внутривенного вливания могут содержать в качестве носителя, например, стерильную воду или, предпочтительно, они могут быть в форме стерильных изотонических солевых (физиологических) растворов.
Суспензии или растворы для внутримышечных инъекций могут содержать вместе с активным соединением фармацевтически приемлемый носитель, например стерильную воду, оливковое масло, этилолеат, гликоли, например пропиленгликоль, и, при желании, подходящее количество гидрохлорида лидокаина.
В формах для местного применения, например кремах, лосьонах или пастах для использования в дерматологическом лечении, активный ингредиент может быть смешан с обычными маслянистыми или эмульгирующими средами.
Твердые пероральные формы, например таблетки и капсулы, могут содержать вместе с активным соединением разбавители, например лактозу, декстрозу, сахарозу, целлюлозу, кукурузный крахмал и картофельный крахмал; смазывающие вещества, например диоксид кремния, тальк, стеариновую кислоту, стеарат магния или кальция и/или полиэтиленгликоли; связующие агенты, например крахмалы, аравийскую камедь, желатин, метилцеллюлозу, карбоксиметилцеллюлозу, поливинилпирролидон; дезагрегирующие агенты, например крахмал, альгиновую кислоту, альгинаты, натриевую соль гликолата крахмала; вспенивающие смеси; красители; подслащивающие агенты; смачивающие агенты, например, лецитин, полисорбаты, лаурил-сульфаты; и обычные нетоксичные и фармакологически неактивные вещества, используемые в приготовлении фармацевтических готовых форм. Фармацевтический препарат может производиться известным образом, например, с помощью процессов смешивания, гранулирования, таблетирования, покрытия сахаром или покрытия пленкой.
Кроме того, согласно данному изобретению, предоставляется способ лечения опухолей и вирусных инфекций нуждающихся в таком лечении пациентов, предусматривающий введение пациенту композиции изобретения.
Дальнейшей целью данного изобретения является комбинированный способ лечения рака или улучшения состояний млекопитающих, в том числе людей, страдающих от рака, причем указанный способ предусматривает введение: соединения изобретения или его фармацевтически приемлемой соли, и дополнительного противоопухолевого агента, в количествах и по времени почти вместе друг с другом, достаточных для получения терапевтически полезного эффекта.
Данное изобретение предоставляет также продукты, содержащие соединение изобретения или его фармацевтически приемлемую соль и дополнитель9 ный противоопухолевый агент в виде комбинированного препарата для одновременного, раздельного или последовательного использования в противораковой терапии.
Термин «противоопухолевый агент» подразумевает как единственное противоопухолевое лекарство, так и «коктейли», т.е. смеси таких лекарств, в соответствии с клинической практикой.
Примеры противоопухолевых агентов или средств, которые могут быть преобразованы в готовые формы с соединением данного изобретения или, альтернативно, могут вводиться в комбинированном способе лечения, включают доксорубицин, дауномицин, эпирубицин, идарубицин, этопозид, фторурацил, мелфалан, циклофосфамид, 4-деметоксидаунорубицин, блеомицин, винбластин и митомицин или смеси двух или более из них.
Соединения данного изобретения могут, следовательно, применяться при лечении для уменьшения интенсивности симптомов рака. Они могут вводиться пациенту, страдающему от рака, подвергаемому лечению противоопухолевым средством, например, антрациклингликозидом, таким как доксорубицин, дауномицин, эпирубицин, 4-деметоксидаунорубицин или идарубицин, как упоминалось выше, вместе с таким противоопухолевым средством.
Соединение данного изобретения и противоопухолевое средство, такое как антрациклингликозид, можно вводить для улучшения состояния больного, имеющего лейкозную лимфому, саркому, такую как миелобластная лейкемия, нейробластому, опухоль Вильмса или злокачественную опухоль мочевого пузыря, молочной железы, легкого или щитовидной железы.
Следующие примеры иллюстрируют, но не ограничивают изобретение.
Сокращения ДМФ, ДМСО и ПМР даны для диметилформамида, диметилсульфоксида и протонного магнитного резонанса, соответственно.
Пример 1. Соединение гидрохлорид β-11-метил4-[1 -метил-4-[1 -метил-4-[З-метил-4-Х,Х-бис (2-хлорэтил) амино бензо л-1-карбоксамидо]пиррол-2карбоксамидо] пиррол-2-карбоксамидо] пиррол-2карбоксамидо] пропионамидина.
Стадия 1. Промежуточный продукт З-метил-4Ν,Ν-бис (2-хлорэтил)-аминобензойная кислота.
К суспензии 2 г коммерческого этил-З-метил-4аминобензоата в 100 мл 25%-ного раствора уксусной кислоты добавляли 20 мл этиленоксида. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 дней, нейтрализовали бикарбонатом натрия и экстрагировали этилацетатом (2х100 мл).
Объединенные органические фазы сушили (N—2SO4) и концентрировали в вакууме, получая этилЗ-метил-4-Х,Х-бис(2-гидрокси)аминобензоат в виде белого осадка, который фильтровали, суспендировали в 10 мл 2З%-ного раствора соляной кислоты, охлаждали во льду и добавляли 1,8 мл оксихлорида фосфора. Смесь нагревали с обратным холодильником в течение 2 ч, охлаждали, разбавляли водой и экстрагировали этилацетатом (2х50 мл).
Объединенные органические фазы сушили (Na2SO4), и растворитель выпаривали в вакууме, получая 2 г промежуточного продукта.
Т.пл. 108-110°С
FAB-MS: m/z: 276 (20,[М+Н]+)
ПМР (СОС1Д δ 7,9 (м, 2Н); 7,15 (м, 1Н); З,5 (м, 8Н); 2,З5 (с, ЗН).
Стадия 2. Указанное в заголовке соединение.
К раствору 6З0 мг промежуточного продукта в 10 мл бензола добавляли 1,8 мл тионилхлорида. Смесь нагревали с обратным холодильником в течение 2 ч, растворитель выпаривали в вакууме, неочищенный твердый остаток растворяли в 15 мл диоксана и добавляли небольшими порциями к раствору 400 мг N-деформилдистамицина А, 255 мг бикарбоната натрия в 10 мл воды.
Смесь перемешивали в течение 1 ч и затем добавляли 2 н раствор соляной кислоты до рН 1. Растворитель выпаривали в вакууме и твердый остаток очищали флэш-хроматографией на силикагеле со смесью метиленхлорида и метанола в качестве элюента, получая 500 мг указанного в заголовке соединения.
FAB-MS: m/z: 711 (45[М+Н]+), 258 (75)
ПМР (ДМСО) δ: 10,19 (с, 1Н); 9,97 (с, 1Н); 9,91 (с, 1Н); 8,7 (шир. с, 4Н); 8,21 (т, J = 5,7 Гц, 1Н); 7,74 (м, 2Н); 7,29 (д, J =1,8 Гц, 1Н); 7,28 (д, J= 7,5 Гц, 1Н); 7,22 (д, J = 1,8 Гц, 1Н); 7,17 (д, J = 1,8 Гц, 1Н); 7,08 (д, J = 1,8 Гц, 1Н); 7,05 (д, J = 1,8 Гц, 1Н); 6,94 (д, J = 1,8, 1Н); З,85 (с, ЗН); З,8З (с, ЗН); З,80 (с, ЗН); З,З-З,7 (м, 10Н); 2,6 (т, J= 6,6 Гц, 2н); 2,ЗЗ (с, ЗН).
Аналогичным способом и с использованием подходящего промежуточного соединения можно получить следующие соединения:
гидрохлорид β-[1 -метил-4- [ 1 -метил- 4-[1 -метил-4[З,5-диметил-4-Х,Х-бис (2-хлорэтил)-аминобензол-1 карбоксамидо]пиррол-2-карбоксамидо]пиррол-2-карбоксамидо]пиррол-2-карбоксамидо] пропионамидина.
FAB-MS: m/z: 725 (90[М+Н]+)
УФ (ЕЮН 95%) λ З10; ε = 42985
ПМР (ДМСО) δ: 10,22 (с, 1Н); 10,01 (с, 1Н); 9,94 (с, 1Н); 8,99 (с, 2Н); 8,64 (с, 2Н); 8,21 (т, J= 5,7 Гц, 1Н); 7,61 (с, 2Н); 7,29 (д, J = 1,7 Гц, 1Н); 7,21 (д, J = 1,7 Гц, 1Н); 7,18 (д, J = 1,7 Гц, 1Н); 7,08 (д, J= 1,7 Гц, 1Н); 7,05 (д, J = 1,7 Гц, 1Н); 6,91 (д, J =
1,7 Гц, 1Н); 3,86 (с, ЗН); 3,84 (с, ЗН); 3,81 (с, ЗН); 3,62 (м, 2Н); 3,60-3,30 (м, 8Н); 2,62 (м, 2Н); 2,35 (с, 6Н) гидрохлорид β-[1 -метил-4- [ 1 -метил-4- [ 1 -метил-4[3-3thh-4-N,N-6hc (2-хлорэтил) аминобензол-1-карбоксамидо]пиррол-2-карбоксамидо]пиррол-2-карбоксамидо]пиррол-2-карбоксамидо]пропионамидина;
гидрохлорид β-[1-метил-4- [1-метил-4-[1-метил-4[З,5-диэтил-4-МХ-бис (2-хлорэтил) аминобензол-1-карбоксамидо]пиррол-2-карбоксамидо]пиррол-2-карбоксамидо]пиррол-2-карбоксамидо] пропионамидина;
гидрохлорид β- [1 -метил-4- [ 1 -метил-4- [ 1 -метил-4[3-метокси-4-Х,Х-бис (2-хлорэтил)аминобензол-1-карбоксамидо]пиррол-2-карбоксамидо]пиррол-2-карбоксамидо]пиррол-2-карбоксамидо] пропионамидина;
гидрохлорид β-[1 -метил-4- [ 1 -метил-4- [ 1 -метил-4[3-этокси-4-Х,Х-бис (2-хлорэтил)аминобензол-1 -карбоксамидо]пиррол-2-кар-боксамидо]пиррол-2-карбоксамидо пиррол -2-карбоксамидо]пропионамидина;
гидрохлорид β-[1 -метил-4- [ 1 -метил-4- [ 1 -метил-4[2-метокси-4-Х,Х-бис (2-хлорэтил)аминобензол-1-карбоксамидо]пиррол-2-карбоксамидо]пиррол-2-карбоксамидо]пиррол-2-карбоксамидо] пропионамидина;
гидрохлорид β-[1-метил-4-[1-метил-4- [1-метил-4[2-метил-4-Х,Х-бис (2-хлорэтил) аминобензол-1-карбоксамидо]пиррол-2-карбоксамидо] пиррол-2-карбоксамидо]пиррол-2-карбоксамидо] пропионамидина;
β-[1 -метил-4- [ 1 -метил-4- [ 1 -метил-4- [3 -трифторметил-4-Х,Х-бис (2-хлорэтил) аминобензол-1-карбоксамидо]пиррол-2-карбоксамидо]пиррол-2-карбоксамидо]пиррол-2-карбоксамидо]пропионамидин; и β-[1 -метил-4- [ 1 -метил-4 - [ 1 -метил-4- [3 -трифторметил-5 -метил-4-Х,Х-бис- (2-хлорэтил) аминобензол1-карбоксамидо]пиррол-2-карбоксамидо]пиррол-2карбоксамидо]пиррол-2-карбоксамидо] пропионамидин.
Пример 2, Таблетки, каждая весом 0,250 г, содержащие 50 мг активного вещества, могут быть изготовлены следующим образом.
Состав для 10000 таблеток: 500г гидрохлорид β[1-метил-4-[1-метил-4-[1-метил-4-[3-метил-4-Х,Х-бис (2-хлорэтил) аминобензол-1-карбоксамидо]пиррол-2карбоксамидо]пиррол-2-карбоксамидо ]пиррол-2-карбоксамидо] пропионамидина, 1400 г лактозы, 500 г кукурузного крахмала, 80 г порошка талька,20 г стеарата магния.
Г идрохлорид β-[1 -метил-4- [ 1 -метил-4- [ 1 -метил-4[З-метил-4-Х,Х-бис (2-хлорэтил) аминобензол-1-карбоксамидо]пиррол-2-карбоксамидо] пиррол-2-карбоксамидо ]пиррол-2-карбоксамидо] пропионамидина, лактозу и половину кукурузного крахмала смешивали, затем смесь продавливали через сито с размером ячеек 0,5 мм меш.
Кукурузный крахмал (10 г) суспендировали в теплой воде (90 мл) и полученную пасту использовали для гранулирования порошка. Гранулят сушили, измельчали на сите с размером ячеек 1,4 мм, затем добавляли оставшееся количество крахмала, тальк и стеарат магния, осторожно смешивали и таблетировали.
Пример 3. Капсулы с дозой 0,200 г каждая, содержащие 20 мг активного вещества, могут быть изготовлены следующим образом.
Состав для 500 капсул: 10 г гидрохлорид β-[1-метил-4-[1-метил-4- [1-метил-4-[З-метил-4-ХХ-бис (2-хлорэтил) аминобензол-1 -карбоксамидо]пиррол-2карбоксамидо]пиррол-2-карбоксамидо] пиррол-2карбоксамидо] пропионамидина, 80 г лактозы, 5 г кукурузного крахмала, 5 г стеарата магния.
Данная готовая форма может инкапсулироваться в состоящие из двух частей твердые желатиновые капсулы и дозирована по 0,200 г на каждую капсулу.
Пример 4. Внутримышечная инъекция 25 мг/мл.
Фармацевтическая композиция для инъекций может быть приготовлена растворением 25 г гидрохлорида β-[1 -метил-4- [ 1 -метил-4- [ 1 -метил-4- [3 -метил-4Ν,Ν-бис (2-хлорэтил) аминобензол-1-карбоксамидо] пиррол-2-карбоксамидо]пиррол-2-карбоксамидо]пиррол-2-карбоксамидо] пропионамидина в стерильном пропиленгликоле (1000 мл) и запаиванием в ампулы по 1-5 мл.
This invention relates to new antitumor and antiviral agents (agents) related to the known antibiotic distamycin A,
(distamycin A) (distamycin A) which belongs to the family of pyrrolamidine antibiotics, and it is reported that it interacts reversibly and selectively with DNA-AT sequences, preventing both replication and transcription [Nature 203, 1064 (1964); FEBS Letters 7 (1970); Prog. Nucleic Acids Res. Mol. Biol., 15.285 (1975)].
DE-A-1795539 describes the preparation of distamycin derivatives in which the distamycin formyl group is replaced by hydrogen or the acid residue of organic C one -WITH four -aliphatic acid or cyclopentylpropionic acid.
EP-B-246868 describes distamycin A analogs in which the distamycin formyl group is replaced by aromatic, acyclic or heterocyclic moieties carrying alkylating groups.
It has now been found that the selected class of compounds covered by the general chemical formula EP-B-246868 has more valuable biological properties than the related compounds of the prior art.
Accordingly, this invention provides new site-specific nitrogen-containing compounds, a method for their preparation, pharmaceutical compositions containing them, and their use in therapy.
This invention represents a new class of compounds of formula (I)
in which n denotes 2, 3 or 4;
one of R and R one denotes hydrogen, C one -WITH four -alkyl, CF q and C one -WITH four -alkoxy, and the other is independently CF q , WITH one -WITH four -alkyl or C one -WITH four alkoxy; and X is halogen.
The invention also includes pharmaceutically acceptable salts of the compounds of formula (I), as well as all possible isomers encompassed by formula (I), either alone or in mixture.
The invention also includes in its scope both metabolites and pharmaceutically acceptable bioprecursors (also known as prodrugs) of the compounds of formula (I).
Alkyl and alkoxy groups may have branched or straight chains. WITH one -WITH four the alkyl group is preferably methyl or ethyl.
WITH one -WITH four The alkoxy group is preferably methoxy or ethoxy. In the phenyl ring, the carbamoyl and bis-haloethylamino groups are in relation to each other, preferably in the meta or para positions.
R or R may be on any of the free carbon atoms of the phenyl ring, but, of course, not on the same carbon atom. Preferably one of R and R is hydrogen or C one -WITH four -alkyl, and the other is C one -WITH four -alkyl, CF q or with one -WITH four alkoxy; or R and R p are the same and denote C one -WITH four alkoxy.
Pharmaceutically acceptable salts of the compounds of formula (I) are salts with pharmaceutically acceptable inorganic or organic acids.
Examples of inorganic acids are hydrochloric, hydrobromic, sulfuric and nitric acids; examples of organic acids are acetic acid, propionic acid, succinic acid, malonic acid, citric acid, tartaric acid, methanesulfonic acid and p-toluenesulfonic acid. A particularly preferred value of n is 3. X is preferably chlorine or bromine, in particular chlorine.
A preferred class of compounds according to this invention are compounds of formula (I), in which n represents 3; X is chlorine; one of R and R is hydrogen or C one -WITH four -alkyl, and the other is C one -WITH four -alkyl, CF q or with one -WITH four alkoxy; and their pharmaceutically acceptable salts. Examples of typical compounds in the framework of this invention, especially in the form of salts, preferably with hydrochloric (hydrochloric) acid, are the following compounds:
β- [1-methyl-4- [1-methyl-4- [1-methyl-4- [3-methyl-4 метил, Ν-bis (2-chloroethyl) -aminobenzene-1-carboxamido] pyrrole-2-carboxamido ] pyrrole-2-carboxamido] pyrrole -2-carboxamido] propionamidine;
β- [1-methyl-4- [1-methyl-4- [1-methyl-4- [3,5-dimethyl-4-N, N-6to (2-chloroethyl) -aminobenzene-1-carboxamido] pyrrol-2 -carboxamido] pyrrole-2-carboxamido] pyrrole-2-carboxamido] propionamidine;
β- [1 -methyl-4- [1 -methyl-4- [1 -methyl-4- [3-ethyl-4-Ν, Ν bis (2-chloroethyl) -aminobenzene-1-carboxamido] pyr 3 rol-2- carboxamido] pyrrole-2-carboxamido] pyrrole-2-carboxamido] propionamidine;
β- [1 -methyl-4- [1 -methyl-4- [1 -methyl-4- [3,5-diethyl-4Ν, Ν-bis (2-chloroethyl) -aminobenzene-1-carboxamido] pyrrol-2 -carboxamido] pyrrole-2-carboxamido] pyrrole-2-carboxamido] propionamidine;
β- [1 -methyl-4- [1 -methyl-4- [1 -methyl-4- [3-methoxy-4Ν, Ν-bis (2-chloroethyl) -aminobenzene-1-carboxamido] pyrrole-2-carboxamido ] pyrrole-2carboxamido] pyrrole-2-carboxamido] propionamidine;
β- [1 -methyl-4- [1 -methyl-4- [1 -methyl-4- [3-ethoxy-4Ν, Ν-bis (2-chloroethyl) -aminobenzene-1-carboxamido] pyrrole-2-carboxamido ] pyrrole-2-carboxamido] pyrrole-2-carboxamido] propionamidine;
β- [1 -methyl-4- [1 -methyl-4- [1 -methyl-4- [2-methoxy-4Ν, Ν-bis (2-chloroethyl) -aminobenzene-1-carboxamido] pyrrole-2-carboxamido ] pyrrole-2-carboxamido] pyrrole-2-carboxamido] propionamidine;
β- [1-methyl-4- [1-methyl-4- [1-methyl-4- [2-methyl-4Ν, Ν-bis (2-chloroethyl) -aminobenzene-1-carboxamido] pyrrole-2-carboxamido ] pyrrole-2-carboxamido] pyrrole-2-carboxamido] propionamidine;
β- [1-methyl-4- [1-methyl-4- [1-methyl-4- [3-trifluoromethyl-4-Ν, Ν-bis (2-chloroethyl) aminobenzene-1-carboxamido] pyrrol-2- carboxamido] pyrrole-2-carboxamido] pyrrole-2-carboxamido] propionamidine; and β- [1-methyl-4- [1-methyl-4- [1-methyl-4- [3-trifluoromethyl-5-methyl-4-, Ν-bis (2-chloroethyl) aminobenzene-1 carboxamido] pyrrole -2-carboxamido] -pyrrole-2carboxamido] pyrrole-2-carboxamido] propionamidine.
The compounds of this invention and their salts can be obtained by the method involving the reaction of the compounds of formula (II)
in which η has the above values, with a compound of formula (III)
in which R, R one and X is as defined above, and Υ represents a hydroxy or leaving group; and, if desired, salt formation of the compound of formula (I) or the preparation of the free compound from its salt, and / or, if desired, separation of the mixture of isomers of the compound of formula (I) into individual isomers.
The reaction of the compound of formula (II) with the compound of formula (III) can be carried out in accordance with known methods, for example, described in EPB-246868.
In particular, Υ as a leaving group can be a group selected from halogen, in particular chlorine, 2,4,5-trichlorophenoxy, 2,4-dinitrophenoxy, succinimido- ^ oxy and imidazolyl group.
The reaction between a compound of formula (II) and a compound of formula (III), in which Υ is -OH, is preferably carried out at a molecular ratio of from 1: 1 to 1: 2 in an organic solvent, such as, for example, dimethyl sulfoxide, hexamethylphospho triamide, dimethylacetamide, dimethylformamide , ethyl alcohol, benzene or pyridine, in the presence of an organic or inorganic base, such as, for example, triethylamine, diisopropylethylamine, or sodium carbonate or sodium bicarbonate, and a condensing agent, such as, for example, Ν -3ΊΉπ-Ν '- (3-dimethylamine Opropyl) carbodiimide or preferably Ν, Ν'-dicyclohexylcarbodiimide. The reaction temperature can vary from about -10 ° C to 50 ° C, and the reaction time from about 1 to 24 hours.
The reaction between a compound of formula (II) and a compound of formula (III) in which Υ denotes another leaving group, for example, halogen, 2,4,5-trichlorophenoxy or succini \ 1ido - \ - hydroxy or imidazolyl, can be carried out under similar conditions, but without condensing agent.
The compounds of formula (II) are known compounds or can be obtained by known methods from known compounds (see, for example, Arcamone et. Al., Gazzetta Chim. Ltal. 97, 1097 (1967). Compounds of formula (III) are also known compounds or can be obtained from known compounds through reactions well described in organic chemistry (see, for example, J. Med. Chem. 9, 882 (1966) and 25, 178 (1982).
Salt formation of the compound of formula (I), as well as the preparation of the free compound from the salt, can be carried out by known standard methods.
Well-known procedures, such as fractional crystallization or chromatography, can then be performed to separate the mixture of isomers of formula (I) into individual isomers.
The new compounds of formula (I) obtained in accordance with the methods described above can also be purified by conventional methods such as, for example, silica gel or alumina column chromatography and / or recrystallization from an organic solvent, such as, for example, lower aliphatic alcohol, for example methyl, ethyl or isopropyl alcohol, or dimethylformamide.
PHARMACOLOGY
The compounds of this invention may be useful as antitumor and antiviral agents. They detect, in particular, cytostatic properties against tumor cells, so that they can be useful, for example, to inhibit the growth of various tumors, such as carcinomas, for example breast cancer, lung cancer, bladder cancer, colon cancer, ovarian and endometrial tumors in mammals, including humans. Other neoplasias in which case the compounds of the invention could be used are, for example, sarcomas, for example soft tissue sarcomas and bone sarcomas, and hematological malignant conditions, such as, for example, leukemia.
Antitumor activity was evaluated in vitro using cytotoxicity studies conducted on mouse leukemia L 1210 cells. Cells were obtained from in vivo tumors and adapted in cell culture. Cells were used until the tenth passage. Cytotoxicity was determined by counting the surviving cells after 48 hours of treatment.
The percentage of cell growth in the treated cultures was compared with the percentage of cell growth in the controls. The IC values, the concentration inhibiting 50% of cell growth compared to controls, were calculated based on dose response curves (dose response curves).
The compounds of this invention were also tested in vivo in mice affected by leukemia L, and in the mouse reticulosarcoma M 5076, where they found very good antitumor activity, according to the following procedure.
Mouse leukemia L was maintained in vivo by intravenous (iv) serial transplantation. For experiments 10 five cells were injected intraperitoneally (Cp) to female CD2FI mice, obtained from Charles River Italy. At the beginning of the experiments, the animals were 8 to 10 weeks old. The compounds were administered intravenously on day +1 after the injection of tumor cells.
Reticulosarcoma M5076 was maintained in vivo using intramuscular (im) serial transplantation. For experiments 5x10 five cells were injected intramuscularly in female C57B16 mice obtained from Charles River Italy. At the beginning of the experiments, the animals were 8-10 weeks old. The compounds were administered intravenously on the 3rd, 7th and 11th days after the injection of tumor cells.
The survival time of the mice and the growth of the tumors were calculated, and the activity was expressed in T / C% (treated / control group)% and TI% (tumor inhibition)%.
average survival time of the treated group
T / C = - with -—- x 100% average survival time of the untreated group
TI -% inhibition of tumor growth in relation to the control,
Toch (Tox.) - the number of mice that died from toxicity.
Toxicity was determined when the mice died before significant body weight loss was observed in the control group and / or in the experimental version and / or reduction in the size of the spleen and / or liver.
The compounds of the invention found a higher antitumor activity in these tumor models than closely related compounds known from EP-B-0246868.
For example, compounds P- [1-methyl-4- [1-methyl-4 [1-methyl-4- [3-methyl-4-X, H-bis (2-chloroethyl) aminobenzene-1-carboxamido] pyrrole) 2-carboxamido] pyrrole-2-carboxamido] pyrrole-2-carboxamido] propionamidine (internal code FCE 29325) and P [-1-methyl-4- [1methyl-4- [1-methyl-4- [3,5-dimethyl- 4-H, H-bis (2-chloroethyl) aminobenzene-1-carboxamido] pyrrole-2-carboxamido] pyrrole-2-carboxamido] pyrrole-2-carboxamido] propionamidine (internal code FCE 29721) and a compound of the preceding level, according to EPB -0246868, β [-1 -methyl-4- [1 -methyl-4- [1 -methyl-4- [4-X, Hbis (2-chloroethyl) aminobenzene-1-carboxamido] pyrrole-2-carbox) ido] pyrrole-2-carboxamido] pyrrole-2-carboxamido] propionamidine (internal code FCE 24517) was tested against disseminated leukemia and L mice received the following activity data.
The data presented in the table show that the compounds of this invention that carry the stated substituents on the phenyl ring of the benzoyl moiety are more active than the closely related unsubstituted compound of the previous level FCE 24517.
The compounds of this invention also show efficacy in countering the reproductive activity of pathogenic viruses and protect tissue cells from viral infections.
For example, they detect activity against DNA viruses, such as, for example, the herpes virus, for example, herpes simplex viruses and herpes zoster viruses, vaccinia virus, RNA viruses, such as for example rhinovirus and adenoviruses, and against retroviruses, such as, for example , sarcoma viruses, eg, mouse sarcoma virus, and leukemia viruses, eg, freent leukemia virus. For example, herpes viruses, Coxsackie and respiratory-syncytial viruses were tested in a liquid medium as follows. Serial twofold dilutions of these compounds at a concentration of 200 to 1.5 μg / ml were distributed in an amount of 0.1 ml per well in 96-well microtiter tissue culture plates. Immediately added cell suspensions (2x10 five cells per ml) infected approximately 5x10 ' 3 TCID 50 virus / cell in the amount of 0.1 ml per well.
After incubation for 3-5 days at 37 ° C in 5% C0 R cell cultures were evaluated under a microscope and the minimum inhibitory concentration (MIC) was determined, with the MIC being the minimum concentration that determines the decrease in the cytopathic effect as compared with infected controls.
The compounds of the invention may be administered to mammals, including humans, by conventional means, for example, parenterally (for example, by intravenous injection or intravenous infusion), intramuscularly, subcutaneously, by topical application or oral administration.
The dose depends on the age, weight and condition of the patient and on the method of administration.
For example, a suitable dose for administration to adults for the compound FCE 29325 may be in the range of approximately 0.1 to 150-200 mg per dose 1-4 times per day.
As already mentioned, the pharmaceutical compositions according to the invention contain a compound of formula (I) as an active substance in combination with one or more pharmaceutically acceptable excipients (drug medium).
The pharmaceutical compositions of this invention are usually prepared following conventional methods, and are administered in a pharmaceutically suitable form.
For example, solutions for intravenous injection or intravenous infusion may contain as carrier, for example, sterile water or, preferably, they may be in the form of sterile isotonic saline (physiological) solutions.
Suspensions or solutions for intramuscular injections may contain, together with the active compound, a pharmaceutically acceptable carrier, for example sterile water, olive oil, ethyl oleate, glycols, for example propylene glycol, and, if desired, a suitable amount of lidocaine hydrochloride.
In topical forms, for example creams, lotions or pastes for use in dermatological treatment, the active ingredient may be mixed with conventional oily or emulsifying media.
Solid oral forms, for example tablets and capsules, may contain diluents together with the active compound, for example lactose, dextrose, sucrose, cellulose, corn starch and potato starch; lubricants, for example silica, talc, stearic acid, magnesium or calcium stearate and / or polyethylene glycols; binding agents, for example starches, arabic gum, gelatin, methylcellulose, carboxymethylcellulose, polyvinylpyrrolidone; disaggregating agents, for example starch, alginic acid, alginates, sodium starch glycolate; foaming mixtures; colorants; sweetening agents; wetting agents, for example, lecithin, polysorbates, lauryl sulfates; and the usual non-toxic and pharmacologically inactive substances used in the preparation of pharmaceutical formulations. The pharmaceutical preparation can be produced in a known manner, for example, using the processes of mixing, granulating, tableting, sugar coating or film coating.
In addition, according to the present invention, there is provided a method for treating tumors and viral infections of patients requiring such treatment, comprising administering to the patient a composition of the invention.
The further purpose of this invention is a combined method of treating cancer or improving the conditions of mammals, including people suffering from cancer, moreover, this method provides for the introduction of: the compounds of the invention or its pharmaceutically acceptable salt, and an additional antitumor agent, in quantities and in time almost together with a friend sufficient to obtain a therapeutically beneficial effect.
The invention also provides products containing a compound of the invention or a pharmaceutically acceptable salt thereof and an additional antitumor agent as a combined preparation for simultaneous, separate or sequential use in anticancer therapy.
The term "antitumor agent" means both the only antitumor medication and "cocktails", i.e. mixtures of such drugs, in accordance with clinical practice.
Examples of antitumor agents or agents that can be converted into formulations with a compound of the invention or alternatively, can be administered in a combined method of treatment, include doxorubicin, daunomycin, epirubicin, idarubicin, etoposide, fluorouracil, melphalan, cyclophosphamide, 4-demethoxydaunorubicin, bleomycin , vinblastine and mitomycin or mixtures of two or more of them.
The compounds of this invention may therefore be used in the treatment to reduce the intensity of the symptoms of cancer. They may be administered to a patient suffering from a cancer being treated with an antitumor agent, for example, an anthracycline glycoside such as doxorubicin, daunomycin, epirubicin, 4-demetoksidaunorubitsin or idarubitsin, as mentioned above, together with such antitumor agent.
The compound of the present invention and an antitumor agent such as anthracycline glycoside can be administered to improve the condition of a patient with leukemic lymphoma, sarcoma such as myeloblastic leukemia, neuroblastoma, Wilms tumor or a malignant tumor of the bladder, breast, lung or thyroid.
The following examples illustrate, but do not limit the invention.
The abbreviations DMF, DMSO and PMR are given for dimethylformamide, dimethyl sulfoxide and proton magnetic resonance, respectively.
Example 1. Compound of hydrochloride β-11-methyl 4- [1-methyl-4- [1-methyl-4- [3-methyl-4-X, X-bis (2-chloroethyl) amino-benzo-1-carboxamido] pyrrole-2carboxamido] pyrrol-2-carboxamido] pyrrole-2carboxamido] propionamidine.
Stage 1. Intermediate product Z-methyl-4Ν, Ν-bis (2-chloroethyl) -aminobenzoic acid.
To a suspension of 2 g of commercial ethyl-3-methyl-4-aminobenzoate in 100 ml of a 25% acetic acid solution was added 20 ml of ethylene oxide. The mixture was stirred at room temperature for 2 days, neutralized with sodium bicarbonate and extracted with ethyl acetate (2 x 100 ml).
The combined organic phases were dried (N— 2 SO four ) and concentrated in vacuo to give ethylZ-methyl-4-X, X-bis (2-hydroxy) aminobenzoate as a white precipitate, which was filtered, suspended in 10 ml of a 2Z% hydrochloric acid solution, cooled in ice and added 1 , 8 ml of phosphorus oxychloride. The mixture was heated under reflux for 2 hours, cooled, diluted with water and extracted with ethyl acetate (2 x 50 ml).
The combined organic phases were dried (Na 2 SO four ), and the solvent is evaporated in vacuum, obtaining 2 g of intermediate product.
M.p. 108-110 ° С
FAB-MS: m / z: 276 (20, [M + H] + )
PMR (CO1D δ 7.9 (m, 2H); 7.15 (m, 1H); 3, 5 (m, 8H); 2, Z5 (s, 3N).
Stage 2. The title compound.
1.8 ml of thionyl chloride was added to a solution of 630 mg of the intermediate product in 10 ml of benzene. The mixture was heated under reflux for 2 hours, the solvent was evaporated in vacuo, the crude solid residue was dissolved in 15 ml of dioxane and added in small portions to a solution of 400 mg of N-deformyl distamycin A, 255 mg of sodium bicarbonate in 10 ml of water.
The mixture was stirred for 1 hour and then 2N hydrochloric acid was added to pH 1. The solvent was evaporated in vacuo and the solid residue was purified by flash chromatography on silica gel with a mixture of methylene chloride and methanol as eluent, to give 500 mg of the title compound.
FAB-MS: m / z: 711 (45 [M + H] + ), 258 (75)
PMR (DMSO) δ: 10.19 (s, 1H); 9.97 (s, 1H); 9.91 (s, 1H); 8.7 (broad s, 4H); 8.21 (t, J = 5.7 Hz, 1H); 7.74 (m, 2H); 7.29 (d, J = 1.8 Hz, 1H); 7.28 (d, J = 7.5 Hz, 1H); 7.22 (d, J = 1.8 Hz, 1H); 7.17 (d, J = 1.8 Hz, 1H); 7.08 (d, J = 1.8 Hz, 1H); 7.05 (d, J = 1.8 Hz, 1H); 6.94 (d, J = 1.8, 1H); H, 85 (s, NN); З, 8З (s, ЗН); H, 80 (s, 3N); З, З-З, 7 (m, 10Н); 2.6 (t, J = 6.6 Hz, 2n); 2, ЗЗ (с, ЗН).
In a similar way and using a suitable intermediate, the following compounds can be obtained:
β- [1-methyl-4- [1-methyl-4- [1-methyl-4 [3, 5-dimethyl-4-X, X-bis (2-chloroethyl) -aminobenzene-1 carboxamido] pyrrole- hydrochloride 2-carboxamido] pyrrole-2-carboxamido] pyrrole-2-carboxamido] propionamidine.
FAB-MS: m / z: 725 (90 [M + H] + )
UV (EUN 95%) λ З10; ε = 42985
PMR (DMSO) δ: 10.22 (s, 1H); 10.01 (s, 1H); 9.94 (s, 1H); 8.99 (s, 2H); 8.64 (s, 2H); 8.21 (t, J = 5.7 Hz, 1H); 7.61 (s, 2H); 7.29 (d, J = 1.7 Hz, 1H); 7.21 (d, J = 1.7 Hz, 1H); 7.18 (d, J = 1.7 Hz, 1H); 7.08 (d, J = 1.7 Hz, 1H); 7.05 (d, J = 1.7 Hz, 1H); 6.91 (d, J =
1.7 Hz, 1H); 3.86 (s, ZN); 3.84 (s, 3N); 3.81 (s, AH); 3.62 (m, 2H); 3.60-3.30 (m, 8H); 2.62 (m, 2H); 2.35 (s, 6H) β- [1-methyl-4- [1-methyl-4- [1-methyl-4 [3-3thh-4-N, N-6hc) (2-chloroethyl) aminobenzene hydrochloride 1-carboxamido] pyrrole-2-carboxamido] pyrrole-2-carboxamido] pyrrole-2-carboxamido] propionamidine;
β- [1-methyl-4- [1-methyl-4- [1-methyl-4 [3, 5-diethyl-4-MX-bis (2-chloroethyl) aminobenzene-1-carboxamido] pyrrol-2- carboxamido] pyrrole-2-carboxamido] pyrrole-2-carboxamido] propionamidine;
β- [1-methyl-4- [1-methyl-4- [1-methyl-4 [3-methoxy-4-X, X-bis (2-chloroethyl) aminobenzene-1-carboxamido] pyrrol-2- carboxamido] pyrrole-2-carboxamido] pyrrole-2-carboxamido] propionamidine;
β- [1-methyl-4- [1-methyl-4- [1-methyl-4 [3-ethoxy-4-X, X-bis (2-chloroethyl) aminobenzene-1-carboxamido] pyrrol-2- carboxamido] pyrrole-2-carboxamido pyrrole -2-carboxamido] propionamidine;
β- [1-methyl-4- [1-methyl-4- [1-methyl-4 [2-methoxy-4-X, X-bis (2-chloroethyl) aminobenzene-1-carboxamido] pyrrol-2- carboxamido] pyrrole-2-carboxamido] pyrrole-2-carboxamido] propionamidine;
β- [1-methyl-4- [1-methyl-4- [1-methyl-4 [2-methyl-4-X, X-bis (2-chloroethyl) aminobenzene-1-carboxamido] pyrrol-2- carboxamido] pyrrole-2-carboxamido] pyrrole-2-carboxamido] propionamidine;
β- [1-methyl-4- [1-methyl-4- [1-methyl-4- [3-trifluoromethyl-4-X, X-bis (2-chloroethyl) aminobenzene-1-carboxamido] pyrrol-2- carboxamido] pyrrole-2-carboxamido] pyrrole-2-carboxamido] propionamidine; and β- [1 -methyl-4- [1 -methyl-4 - [1 -methyl-4- [3-trifluoromethyl-5 -methyl-4-X, X-bis- (2-chloroethyl) aminobenzene 1-carboxamido] pyrrole-2-carboxamido] pyrrole-2 carboxamido] pyrrole-2-carboxamido] propionamidine.
Example 2 Tablets, each weighing 0.250 g, containing 50 mg of active substance, can be made as follows.
Composition for 10,000 tablets: 500g of β [1-methyl-4- [1-methyl-4- [1-methyl-4- [3-methyl-4-X, X-bis (2-chloroethyl) aminobenzene-1- hydrochloride) hydrochloride carboxamido] pyrrol-2carboxamido] pyrrol-2-carboxamido] pyrrole-2-carboxamido] propionamidine, 1400 g of lactose, 500 g of corn starch, 80 g of talcum powder, 20 g of magnesium stearate.
G hydrochloride β- [1 -methyl-4- [1 -methyl-4- [1 -methyl-4 [3-methyl-4-X, X-bis (2-chloroethyl) aminobenzene-1-carboxamido] pyrrol-2 -carboxamido] pyrrole-2-carboxamido] pyrrole-2-carboxamido] propionamidine, lactose and half of the corn starch were mixed, then the mixture was squeezed through a sieve with a mesh size of 0.5 mm mesh.
Corn starch (10 g) was suspended in warm water (90 ml) and the resulting paste was used to granulate the powder. The granulate was dried, crushed on a sieve with a mesh size of 1.4 mm, then the remaining amount of starch, talc and magnesium stearate were added, mixed gently and tableted.
Example 3. Capsules with a dose of 0.200 g each, containing 20 mg of the active substance, can be made as follows.
Composition for 500 capsules: 10 g of β- [1-methyl-4- [1-methyl-4- [1-methyl-4- [3-methyl-4-XX-bis (2-chloroethyl) aminobenzene-1 - hydrochloride carboxamido] pyrrol-2carboxamido] pyrrol-2-carboxamido] pyrrol-2carboxamido] propionamidine, 80 g lactose, 5 g corn starch, 5 g magnesium stearate.
This formulation can be encapsulated in two-piece hard gelatin capsules and dosed at 0.200 grams per capsule.
Example 4. Intramuscular injection of 25 mg / ml.
A pharmaceutical composition for injection can be prepared by dissolving 25 g of β- [1-methyl-4- [1-methyl-4- [1-methyl-4- [3-methyl-4Ν, Ν-bis (2-chloroethyl) aminobenzene hydrochloride] -1-carboxamido] pyrrole-2-carboxamido] pyrrole-2-carboxamido] pyrrole-2-carboxamido] propionamidine in sterile propylene glycol (1000 ml) and sealed in 1-5 ml ampoules.
Claims (7)
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| GBGB9514993.6A GB9514993D0 (en) | 1995-07-21 | 1995-07-21 | Site specific phenyl nitrogen mustards |
| PCT/EP1996/002659 WO1997003957A1 (en) | 1995-07-21 | 1996-06-19 | Bis-(2-haloethyl)aminophenyl substituted distamycin derivatives as antitumor and antiviral agents |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| EA199700046A1 EA199700046A1 (en) | 1997-12-30 |
| EA000033B1 true EA000033B1 (en) | 1998-02-26 |
Family
ID=10778062
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| EA199700046A EA000033B1 (en) | 1995-07-21 | 1996-06-19 | Bis(2-haloethyl) aminophenyl substituted distamycin derivatives as antitumor and antiviral agents |
Country Status (18)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0787126A1 (en) |
| JP (1) | JPH10506410A (en) |
| KR (1) | KR970706251A (en) |
| CN (1) | CN1159183A (en) |
| AR (1) | AR003456A1 (en) |
| AU (1) | AU6357996A (en) |
| BR (1) | BR9606528A (en) |
| CA (1) | CA2199635A1 (en) |
| EA (1) | EA000033B1 (en) |
| GB (1) | GB9514993D0 (en) |
| HU (1) | HUP9702393A3 (en) |
| IL (1) | IL120342A0 (en) |
| MX (1) | MX9701949A (en) |
| NO (1) | NO971142D0 (en) |
| PL (1) | PL319352A1 (en) |
| TW (1) | TW367325B (en) |
| WO (1) | WO1997003957A1 (en) |
| ZA (1) | ZA965028B (en) |
Families Citing this family (13)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6635417B1 (en) | 1996-07-31 | 2003-10-21 | California Institute Of Technology | Complex formation between DSDNA and oligomer of cyclic heterocycles |
| JP2001513759A (en) | 1996-02-26 | 2001-09-04 | カリフォルニア・インスティチュート・オブ・テクノロジー | Improved polyamide binding in the minor groove of double-stranded DNA |
| US5998140A (en) | 1996-07-31 | 1999-12-07 | The Scripps Research Institute | Complex formation between dsDNA and oligomer of cyclic heterocycles |
| GB9623522D0 (en) * | 1996-11-11 | 1997-01-08 | Pharmacia & Upjohn Spa | Benzoheterocycle distamycin derivatives process for preparing them and their use as antitumour and antiviral agents |
| GB9816652D0 (en) * | 1998-07-30 | 1998-09-30 | Pharmacia & Upjohn Spa | Sulfurated distamycin derivatives process for preparing them and their use as antitumor agents |
| GB9907414D0 (en) * | 1999-03-31 | 1999-05-26 | Cancer Res Campaign Tech | Improvements relating to prodrugs |
| US6559125B1 (en) | 2000-01-28 | 2003-05-06 | California Institute Of Technology | Polyamide-alkylator conjugates and related products and method |
| WO2002101007A2 (en) | 2001-06-13 | 2002-12-19 | Genesoft Pharmaceuticals, Inc | Antipathogenic benzamide compounds |
| ATE425753T1 (en) | 2002-08-02 | 2009-04-15 | Genesoft Pharmaceuticals Inc | BIARYL COMPOUNDS WITH ANTI-INFECTIVE ACTION |
| EP1562931A2 (en) | 2002-10-25 | 2005-08-17 | Genesoft Pharmaceuticals, Inc. | Anti-infective biaryl compounds |
| AU2003297822A1 (en) | 2002-12-10 | 2004-06-30 | Oscient Pharmaceuticals Corporation | Antibacterial compounds having a (pyrrole carboxamide)-(benzamide)-(imidazole carboxamide) motif |
| EP2792355A1 (en) | 2013-04-17 | 2014-10-22 | Albert-Ludwigs-Universität Freiburg | Compounds for use as bromodomain inhibitors |
| CN115414356A (en) * | 2022-09-27 | 2022-12-02 | 广西科技大学 | Application of indenopyrrole derivatives in preparation of antitumor pharmaceutical composition |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0246868A1 (en) * | 1986-05-20 | 1987-11-25 | FARMITALIA CARLO ERBA S.r.l. | Site specific alkylating agents |
-
1995
- 1995-07-21 GB GBGB9514993.6A patent/GB9514993D0/en active Pending
-
1996
- 1996-06-13 ZA ZA965028A patent/ZA965028B/en unknown
- 1996-06-18 TW TW085107334A patent/TW367325B/en active
- 1996-06-19 PL PL96319352A patent/PL319352A1/en unknown
- 1996-06-19 AU AU63579/96A patent/AU6357996A/en not_active Abandoned
- 1996-06-19 EA EA199700046A patent/EA000033B1/en not_active IP Right Cessation
- 1996-06-19 JP JP9506209A patent/JPH10506410A/en active Pending
- 1996-06-19 MX MX9701949A patent/MX9701949A/en unknown
- 1996-06-19 BR BR9606528A patent/BR9606528A/en not_active Application Discontinuation
- 1996-06-19 IL IL12034296A patent/IL120342A0/en unknown
- 1996-06-19 CA CA002199635A patent/CA2199635A1/en not_active Abandoned
- 1996-06-19 CN CN96190784A patent/CN1159183A/en active Pending
- 1996-06-19 EP EP96922849A patent/EP0787126A1/en not_active Withdrawn
- 1996-06-19 WO PCT/EP1996/002659 patent/WO1997003957A1/en not_active Application Discontinuation
- 1996-06-19 HU HU9702393A patent/HUP9702393A3/en unknown
- 1996-07-15 AR ARP960103583A patent/AR003456A1/en unknown
- 1996-09-19 KR KR1019970701796A patent/KR970706251A/en not_active Application Discontinuation
-
1997
- 1997-03-12 NO NO971142A patent/NO971142D0/en unknown
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0246868A1 (en) * | 1986-05-20 | 1987-11-25 | FARMITALIA CARLO ERBA S.r.l. | Site specific alkylating agents |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| J. Med. Chem. (1989), 32(4), 774-778; * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EA199700046A1 (en) | 1997-12-30 |
| JPH10506410A (en) | 1998-06-23 |
| CA2199635A1 (en) | 1997-02-06 |
| HUP9702393A3 (en) | 1998-05-28 |
| GB9514993D0 (en) | 1995-09-20 |
| HUP9702393A2 (en) | 1998-04-28 |
| AR003456A1 (en) | 1998-08-05 |
| KR970706251A (en) | 1997-11-03 |
| CN1159183A (en) | 1997-09-10 |
| ZA965028B (en) | 1997-01-23 |
| TW367325B (en) | 1999-08-21 |
| NO971142L (en) | 1997-03-12 |
| NO971142D0 (en) | 1997-03-12 |
| WO1997003957A1 (en) | 1997-02-06 |
| EP0787126A1 (en) | 1997-08-06 |
| AU6357996A (en) | 1997-02-18 |
| BR9606528A (en) | 1997-12-23 |
| IL120342A0 (en) | 1997-06-10 |
| MX9701949A (en) | 1997-06-28 |
| PL319352A1 (en) | 1997-08-04 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP0937070B1 (en) | Benzoheterocyclic distamycin derivatives, process for preparing them, and their use as antitumor and antiviral agents | |
| AU597659B2 (en) | Pyrrole-amidine antitumorals | |
| EP0915845B1 (en) | Acryloyl substituted distamycin derivatives, process for preparing them, and their use as antitumor and antiviral agents | |
| EP1064281B1 (en) | Benzoheterocyclic distamycin derivatives, process for preparing them, and their use as antitumor agents | |
| US6177408B1 (en) | Distamycin derivatives, process for preparing them, and their use as antitumor and antiviral agents | |
| EA000033B1 (en) | Bis(2-haloethyl) aminophenyl substituted distamycin derivatives as antitumor and antiviral agents | |
| MXPA97001949A (en) | Derivatives of distamycine substituted with bis- (2-haloethyl) aminophenylene as anatomy agents yantivira | |
| EP1100777B1 (en) | Sulfurated distamycin derivatives, process for preparing them, and their use as antitumor agents | |
| EP1100778B1 (en) | Oxidised sulfurated distamycin derivatives, process for preparing them, and their use as antitumor agents | |
| US5049579A (en) | Site specific alkylating agents | |
| EP1084120B1 (en) | Cinnamoyl distamycin analogous derivatives, process for their preparation, and their use as antitumor agents | |
| HUT71400A (en) | Biologically active ureido derivatives useful as antimetastatic agents | |
| US5310752A (en) | Site specific alkylating agents | |
| KR100469778B1 (en) | Distamycin derivatives, process for preparing them, and their use as antitumor and antiviral agents |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s) |
Designated state(s): AM AZ BY KZ KG MD TJ TM RU |