DK2258843T3 - Ekspressionsvektor med masseproduktion af fremmedgen-afledt protein ved hjælp af animalske celler samt anvendelse deraf - Google Patents

Ekspressionsvektor med masseproduktion af fremmedgen-afledt protein ved hjælp af animalske celler samt anvendelse deraf Download PDF

Info

Publication number
DK2258843T3
DK2258843T3 DK09715053.6T DK09715053T DK2258843T3 DK 2258843 T3 DK2258843 T3 DK 2258843T3 DK 09715053 T DK09715053 T DK 09715053T DK 2258843 T3 DK2258843 T3 DK 2258843T3
Authority
DK
Denmark
Prior art keywords
gene
expression vector
hmbl
foreign gene
cells
Prior art date
Application number
DK09715053.6T
Other languages
English (en)
Inventor
Keiichi Yamamoto
Hiroshi Tahara
Yusuke Suzuki
Yasuhiko Suzuki
Original Assignee
Nat Univ Corp Hokkaido Univ
Fuso Pharmaceutical Ind
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Nat Univ Corp Hokkaido Univ, Fuso Pharmaceutical Ind filed Critical Nat Univ Corp Hokkaido Univ
Application granted granted Critical
Publication of DK2258843T3 publication Critical patent/DK2258843T3/da

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/10—Transferases (2.)
    • C12N9/12—Transferases (2.) transferring phosphorus containing groups, e.g. kinases (2.7)
    • C12N9/1205—Phosphotransferases with an alcohol group as acceptor (2.7.1), e.g. protein kinases
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y207/00—Transferases transferring phosphorus-containing groups (2.7)
    • C12Y207/01—Phosphotransferases with an alcohol group as acceptor (2.7.1)
    • C12Y207/01095—Kanamycin kinase (2.7.1.95), i.e. neomycin-kanamycin phosphotransferase
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2830/00—Vector systems having a special element relevant for transcription
    • C12N2830/50—Vector systems having a special element relevant for transcription regulating RNA stability, not being an intron, e.g. poly A signal
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2840/00—Vectors comprising a special translation-regulating system
    • C12N2840/10—Vectors comprising a special translation-regulating system regulates levels of translation
    • C12N2840/102—Vectors comprising a special translation-regulating system regulates levels of translation inhibiting translation

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Claims (10)

1. Ekspressionsvektor, som muliggør højniveauproduktion af et fremmedgen-afledt protein i en pattedyrsværtscelle, som omfatter sekvensen ifølge SEQ ID NO: 1 bortset fra nukleotiderne nr. 1784 til 2578 deri, som er blevet substituerede med sekvensen ifølge SEQ ID NO: 2 eller 5.
2. Fremgangsmåde til fremstilling af en transformant, som har evnen til at producere et højt niveau af et fremmedgen-afledt protein og til at modstå neomycin; som omfatter trinnene med indsætning af et fremmedgen i ekspressionsvektoren ifølge krav 1, og transformering af en værtscelle under anvendelse af ekspressionsvektoren.
3. Fremgangsmåde til fremstilling af et fremmedgen-afledt protein, som omfatter følgende trin: (a) indsætning af et fremmedgen i ekspressionsvektoren ifølge krav 1; (b) transformering af en værtscelle med ekspressionsvektoren; (c) dyrkning af transformanten i et medie, som er suppleret med neomycin; og (d) opsamling af det fremmedgen-afledte protein fra den dyrkede transformant.
4. Fremstillingsfremgangsmåde ifølge krav 3, hvor et kemisk defineret medie (CD medie) eller et medie suppleret med et ikke animalsk baseret additiv til CD mediet anvendes til dyrkningen i trin (c) ifølge krav 3.
5. Fremgangsmåde til screening for en transformant, som har evnen til at producere et højt niveau af fremmedgen-afledt protein, som omfatter følgende trin: (a) indsætning af et fremmedgen i ekspressionsvektoren ifølge krav 1; (b) transformering af en værtscelle med ekspressionsvektoren; og (c) dyrkning af transformanten i et medie, som er suppleret med neomycin.
6. Ekspressiosnsvektor, som muliggør højniveauproduktion af fremmedgen-afledt protein i en pattedyrsværtscelle, som omfatter sekvensen ifølge SEQ ID NO: 1 bortset fra nucleotiderne 1784 til 2578 deri, som er blevet substitueret med sekvensen ifølge SEQ ID NO: 12.
7. Fremgangsmåde til produktion af en transformant, som har evnen til at producere et højt niveau af et fremmedgen-afledt protein og til at modstå blasticidin; som omfatter trinnene med indsætning af et fremmedgen i ekspressionsvektoren ifølge krav 6, og transformering af en værtscelle under anvendelse af ekspressionsvektoren.
8. Fremgangsmåde til produktion af et fremmedgen-afledt protein, som omfatter følgende trin: (a) indsætning af et fremmedgen i ekspressionsvektoren ifølge krav 6; (b) transformering af en værtscelle med ekspressionsvektoren; (c) dyrkning af transformanten i et medie, som er suppleret med blasticidin; og (d) opsamling af det fremmedgen-afledte protein fra den dyrkede transformant.
9. Produktionsfremgangsmåde ifølge krav 8, hvor et kemisk defineret medie (CD medie) eller et medie suppleret med et ikke animalsk baseret additiv til CD mediet, anvendes til dyrkningen i trin (c) ifølge krav 8.
10. Fremgangsmåde til screening for en transformant, som har evnen til at producere et højt niveau af fremmedgen-afledt protein, som omfatter følgende trin: (a) indsætning af et fremmedgen i ekspressionsvektoren ifølge krav 6; (b) transformering af en værtscelle med ekspressionsvektoren; (c) dyrkning af transformanten i et medie, som er suppleret med blasticidin.
DK09715053.6T 2008-02-27 2009-02-27 Ekspressionsvektor med masseproduktion af fremmedgen-afledt protein ved hjælp af animalske celler samt anvendelse deraf DK2258843T3 (da)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2008046782 2008-02-27
PCT/JP2009/053682 WO2009107775A1 (ja) 2008-02-27 2009-02-27 動物細胞を用いて外来遺伝子由来タンパク質を大量に生産するための発現ベクター、およびその利用

Publications (1)

Publication Number Publication Date
DK2258843T3 true DK2258843T3 (da) 2017-02-13

Family

ID=41016160

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DK09715053.6T DK2258843T3 (da) 2008-02-27 2009-02-27 Ekspressionsvektor med masseproduktion af fremmedgen-afledt protein ved hjælp af animalske celler samt anvendelse deraf

Country Status (12)

Country Link
US (1) US8653249B2 (da)
EP (1) EP2258843B1 (da)
JP (2) JP5648912B2 (da)
KR (1) KR101604502B1 (da)
CN (1) CN102016025B (da)
AU (1) AU2009218069B2 (da)
CA (1) CA2716766A1 (da)
DK (1) DK2258843T3 (da)
ES (1) ES2616021T3 (da)
HK (1) HK1155772A1 (da)
PT (1) PT2258843T (da)
WO (1) WO2009107775A1 (da)

Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA2748011C (en) 2008-12-22 2019-02-26 National University Corporation Hokkaido University Expression vector for producing protein derived from foreign gene in large quantity using animal cells, and use thereof
DK2380979T3 (da) 2008-12-22 2015-06-22 Univ Hokkaido Nat Univ Corp Proteinstof med trippelhelixstruktur samt fremgangsmåde til dets fremstilling
WO2016130583A1 (en) * 2015-02-13 2016-08-18 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Non-silencing selectable marker genes and methods of use
WO2022196245A1 (ja) * 2021-03-15 2022-09-22 株式会社chromocenter 選択マーカー発現カセット
CN113969284B (zh) * 2021-11-23 2022-07-12 江南大学 一种cho细胞基因nw_003614889.1内稳定表达蛋白质的位点及其应用

Family Cites Families (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU572108B2 (en) 1983-01-19 1988-05-05 Genentech Inc. Human tpa production using vectors coding for dhfr protein
NZ210501A (en) 1983-12-13 1991-08-27 Kirin Amgen Inc Erythropoietin produced by procaryotic or eucaryotic expression of an exogenous dna sequence
JP2648860B2 (ja) 1986-05-08 1997-09-03 イエダ リサーチ アンド デベロップメント コンパニー リミテッド ヒトインターフエロン−β２Ａ及びヒトインターフエロン−β２Ｂ、該インターフエロンをコードする遺伝子を含むベクター、該インターフエロンを産生するセルライン及び該インターフエロンの医薬品としての用途
DE4142077A1 (de) 1991-12-19 1993-06-24 Boehringer Mannheim Gmbh Verfahren zur expression rekombinanter antikoerper
JPH0630788A (ja) 1992-07-16 1994-02-08 Otsuka Pharmaceut Co Ltd ヒトインターロイキン−１に対する組換え抗体
JP3919830B2 (ja) * 1992-11-28 2007-05-30 財団法人化学及血清療法研究所 抗ネコヘルペスウイルス−１組換え抗体および該抗体をコードする遺伝子断片
JP3582965B2 (ja) 1996-08-23 2004-10-27 株式会社イムノ・ジャパン 哺乳動物細胞用発現ベクター
CN1771324A (zh) 2003-02-03 2006-05-10 日本免疫股份有限公司 动物细胞用高表达载体
SI1809750T1 (sl) * 2004-11-08 2012-08-31 Chromagenics Bv Izbira gostiteljskih celic, ki imajo visok nivo izraĹľanja proteina
MX2007004595A (es) * 2004-11-08 2007-08-15 Chromagenics Bv Seleccion de celulas hospederas que expresan proteinas en altas concentraciones.
CN100381573C (zh) * 2005-04-14 2008-04-16 北京天广实生物技术有限公司 快速构建目标基因高表达的哺乳动物细胞株的体系和方法

Also Published As

Publication number Publication date
PT2258843T (pt) 2017-02-07
EP2258843A4 (en) 2012-03-14
JPWO2009107775A1 (ja) 2011-07-07
EP2258843A1 (en) 2010-12-08
CA2716766A1 (en) 2009-09-03
JP2015037412A (ja) 2015-02-26
AU2009218069A2 (en) 2010-11-04
ES2616021T3 (es) 2017-06-09
WO2009107775A1 (ja) 2009-09-03
US20110123993A1 (en) 2011-05-26
CN102016025B (zh) 2015-09-16
HK1155772A1 (en) 2012-05-25
CN102016025A (zh) 2011-04-13
KR20100135755A (ko) 2010-12-27
EP2258843B1 (en) 2016-11-16
KR101604502B1 (ko) 2016-03-17
US8653249B2 (en) 2014-02-18
JP6022518B2 (ja) 2016-11-09
AU2009218069A1 (en) 2009-09-03
JP5648912B2 (ja) 2015-01-07
AU2009218069B2 (en) 2014-05-01

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US5972596A (en) Nucleic acid constructs containing HIV genes with mutated inhibitory/instability regions and methods of using same
DK2258843T3 (da) Ekspressionsvektor med masseproduktion af fremmedgen-afledt protein ved hjælp af animalske celler samt anvendelse deraf
CN108384784A (zh) 一种利用CRISPR/Cas9技术敲除Endoglin基因的方法
EP1815001B1 (en) Gene trap cassettes for random and targeted conditional gene inactivation
US20170002378A1 (en) Synthetic Promoters
DK2385115T3 (da) Ekspressionsvektor til fremstilling af et protein afledt af et fremmed gen i stor mængde under anvendelse af dyreceller samt dens anvendelse
KR101686688B1 (ko) ３중 나선구조를 갖는 단백질 및 그의 제조방법
TW202237845A (zh) 用於涉及去胺作用之基因體編輯之多核苷酸、組合物及方法
CN113584083A (zh) 用于逆转录病毒载体的生产细胞和包装细胞及其制备方法
CN102094037A (zh) 一种内参内置型双荧光素酶报告载体及其应用
CN112522321B (zh) 一种基因治疗载体及其用途
CN113699147B (zh) 基于四环素和Cumate的共调控序列
CN112961832A (zh) 一种细胞株及其制备方法和用途
CN113699146B (zh) 启动元件及包含其的逆转录病毒基因组转录盒和载体
CN106566832B (zh) 针对nfat3基因靶点的短发卡rna、重组载体及应用
CN109161545B (zh) 抑制鸡Sirt1基因表达的microRNA及其重组过表质粒以及LMH细胞系
CN101238214A (zh) 使用改进的调节表达系统治疗疾病
CN111718932A (zh) 一种新型的基因编辑动物生物反应器制备方法及应用
CN111534578A (zh) 一种高通量筛选真核生物细胞与农药互作的靶点基因的方法
CN113025641B (zh) 一种将dna片段随机插入枯草芽孢杆菌染色体的方法及其应用
CN111298129B (zh) 二甲双胍介导核酸纳米材料自组装方法及采用该方法制备的纳米制剂和应用
CN111534544A (zh) 一种高通量筛选真核生物细胞与病毒互作靶点基因的方法
CN109336982B (zh) 基因改造的干细胞及其应用
US20220017921A1 (en) Improved vector systems for cas protein and sgrna delivery, and uses therefor
CN111534577A (zh) 一种高通量筛选真核生物必需基因和生长抑制基因的方法