DK1824961T3 - System til ekspression af melibioseoperon - Google Patents

System til ekspression af melibioseoperon Download PDF

Info

Publication number
DK1824961T3
DK1824961T3 DK05817790.8T DK05817790T DK1824961T3 DK 1824961 T3 DK1824961 T3 DK 1824961T3 DK 05817790 T DK05817790 T DK 05817790T DK 1824961 T3 DK1824961 T3 DK 1824961T3
Authority
DK
Denmark
Prior art keywords
nucleic acid
acid sequence
sequence
vector
promoter
Prior art date
Application number
DK05817790.8T
Other languages
English (en)
Inventor
Johann Brass
Joachim Klein
Ralf Ostendorp
Armin Weidmann
Original Assignee
Lonza Ag
Morphosys Ag
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Lonza Ag, Morphosys Ag filed Critical Lonza Ag
Application granted granted Critical
Publication of DK1824961T3 publication Critical patent/DK1824961T3/da

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K14/00Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/665Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans derived from pro-opiomelanocortin, pro-enkephalin or pro-dynorphin
    • C07K14/70Enkephalins
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K16/00Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09Recombinant DNA-technology
    • C12N15/11DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
    • C12N15/52Genes encoding for enzymes or proenzymes
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K2317/00Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/55Fab or Fab'
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K2317/00Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/60Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments
    • C07K2317/62Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments comprising only variable region components
    • C07K2317/622Single chain antibody (scFv)
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K2319/00Fusion polypeptide

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Claims (23)

  1. SYSTEM TIL EKSPRESSION AF MELIBIOSEOPERON
    1. Vektor, der kan udtrykkes i en vært, og som omfatter melAB-promotoren af melibioseoperonen, der er operabelt forbundet med en transkriptionsenhed, som omfatter en nukleinsyresekvens, der er heterolog med værten, og en signalsekvens, der er operabelt forbundet med nukleinsyresekvensen, og som koder for et signalpeptid, der er valgt fra gruppen bestående af E. coli-signalpeptiderne LamB, MalE, OmpA og PhoA, hvor udtrykkeisen af nukleinsyresekvensen reguleres af melAB-promotoren, og hvor melAB-promotoren mangler! CRP1-bindingsstedet.
  2. 2. Vektor ifølge krav 1, hvor me/AB-promotoren, der mangler i CRP1 -bindingsstedet, består af sekvensen SEQ ID NO. 1 eller en dermed komplementær sekvens.
  3. 3. Vektor ifølge krav 1 eller 2, hvor transkriptionsenheden yderligere omfatter en translationsstartregion opstrøms for startpunktet for translationen af transkriptionsenheden, idet translationsstartregionen består af sekvensen AGGAGATATACAT (SEQ ID NO. 2), hvor translationsstartregionen er operabelt forbundet med nukleinsyresekvensen.
  4. 4. Vektor ifølge et hvilket som helst af kravene 1-3, hvor transkriptionsenheden yderligere omfatter en transkriptionsstopregion, der er rrnB-transkriptionsstopsekvensen.
  5. 5. Vektor ifølge et hvilket som helst af kravene 1-4, hvor nukleinsyresekvensen koder for et polypeptid.
  6. 6. Vektor ifølge krav 1-4, hvor nukleinsyresekvensen koder for et antistof.
  7. 7. Vektor ifølge krav 1-4, hvor nukleinsyresekvensen koder for et Fab-fragment.
  8. 8. Vektor iføige krav 7, hvor en dicistronisk transkriptionsenhed koder for den tunge og den lette kæde af Fab-fragmentet, mens hver kæde er operabelt forbundet med en signaisekvens og en identisk translationsstartregion opstrøms for startpunktet for translationen af transkriptionsenheden.
  9. 9. Vektor ifølge et hvilket som helst af kravene 1-8, hvor promotoren og den operabelt forbundne transkriptionsenhed omfatter sekvensen SEQ ID NO. 3 eller en dermed komplementær sekvens.
  10. 10. Vektor ifølge et hvilket som helst af kravene 1-8, hvor promotoren og den operabelt forbundne transkriptionsenhed omfatter sekvensen SEQ ID NO. 4 eller en dermed komplementær sekvens.
  11. 11. Vektor ifølge et hvilket som helst af kravene 1-10, hvor vektoren er et autonomt eller selvreplikerende plasmid, et cosmid, en fag, et virus eller et retrovirus.
  12. 12. Anvendelse af vektoren ifølge et hvilket som helst af kravene 1-11 til reguleret heterolog udtrykkelse af en nukieinsyresekvens i en prokaryot vært.
  13. 13. Anvendelse af vektoren ifølge krav 12, hvor nukleinsyresekvensen koder for et polypeptid.
  14. 14. Anvendelse af vektoren ifølge krav 13, hvor polypeptidet er et Fab-fragment, mens de tunge og lette kæder af Fab-fragmentet udtrykkes i ens mængder.
  15. 15. Isoleret og oprenset nukieinsyresekvens, der kan udtrykkes i en vært, og som omfatter me/AS-promotoren af melibioseoperonen, der er operabelt forbundet med en transkriptionsenhed, som omfatter en nukieinsyresekvens, der er heterolog med værten, og en signalsekvens, der er operabelt forbundet med nukleinsyresekvensen, og som koder for et signalpeptid, der er valgt fra gruppen bestående af E. coli-signalpeptiderne LamB, MalE, OmpA og PhoA, hvor udtrykkeisen af nukleinsyresekvensen reguleres af melAB-promotoren, og hvor me/AS-promotoren mangler i CRP1 -bindingsstedet.
  16. 16. Isoleret og oprenset nukieinsyresekvens ifølge krav 15, hvor me/AS-promotoren, der mangler i CRP1 -bindingsstedet, består af sekvensen SEQ ID NO. 1 eller en dermed komplementær sekvens.
  17. 17. Isoleret og oprenset nukieinsyresekvens ifølge krav 15, hvor promotoren og den operabelt forbundne transkriptionsenhed omfatter sekvensen SEQ ID NO. 3 eller en dermed komplementær sekvens.
  18. 18. Isoleret og oprenset nukieinsyresekvens ifølge krav 15, hvor promotoren og den operabelt forbundne transkriptionsenhed omfatter sekvensen SEQ ID NO. 4 eller en dermed komplementær sekvens.
  19. 19. Prokaryot vært, der er transformeret med vektoren ifølge et hvilket som helst af kravene 1-11.
  20. 20. Prokaryot vært, der er transformeret med den isolerede og oprensede nukieinsyresekvens ifølge et hvilket som helst af kravene 15-18.
  21. 21. Fremgangsmåde til fremstilling af et polypeptid i en vært, hvilken fremgangsmåde omfatter følgende trin: a) konstruktion af en vektor ifølge et hvilket som helst af kravene 5-11, b) transformation af en prokaryot vært med vektoren, c) muliggørelse af udtrykkelse af polypeptidet i et celledyrkningssystem under passende betingelser, d) isolering af polypeptidet ud fra celledyrkningssystemet.
  22. 22. Fremgangsmåde ifølge krav 21, hvor det fremstillede polypeptid er et Fab-fragment, mens de tunge og lette kæder af Fab-fragmentet udtrykkes i celledyrkningssystemet i ens mængder.
  23. 23. Fremgangsmåde ifølge krav 21 eller 22, hvor udtrykkeisen af polypeptidet udføres i glycerolholdigt medium.
DK05817790.8T 2004-12-07 2005-12-05 System til ekspression af melibioseoperon DK1824961T3 (da)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP04028920 2004-12-07
PCT/EP2005/013012 WO2006061173A2 (en) 2004-12-07 2005-12-05 Melibiose operon expression system

Publications (1)

Publication Number Publication Date
DK1824961T3 true DK1824961T3 (da) 2017-01-30

Family

ID=36578270

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DK05817790.8T DK1824961T3 (da) 2004-12-07 2005-12-05 System til ekspression af melibioseoperon

Country Status (12)

Country Link
US (2) US20080305526A1 (da)
EP (1) EP1824961B1 (da)
JP (1) JP5080269B2 (da)
CN (1) CN101090963B (da)
AU (1) AU2005313530B2 (da)
CA (1) CA2589823C (da)
DK (1) DK1824961T3 (da)
ES (1) ES2612545T3 (da)
HK (1) HK1115155A1 (da)
IL (1) IL183609A (da)
PL (1) PL1824961T3 (da)
WO (1) WO2006061173A2 (da)

Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104560859B (zh) * 2015-01-26 2018-03-16 鹭滨环保科技(上海)股份有限公司 一种巴氏葡萄球菌及其制备方法和在处理污水中的应用
CN104560857B (zh) * 2015-01-26 2018-03-16 鹭滨环保科技(上海)股份有限公司 一种茹氏短芽孢杆菌及其构建方法和在处理高浓度氨氮污水中的应用
CN104560858B (zh) * 2015-01-26 2018-04-13 鹭滨环保科技(上海)股份有限公司 一种红城红球菌及其构建方法和在污水处理中的应用
IL261411B2 (en) 2016-03-02 2024-03-01 Lonza Ag Improved fermentation process
CN113811598A (zh) 2019-04-02 2021-12-17 丝芭博株式会社 重组蛋白的制备方法

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5843703A (en) * 1993-01-22 1998-12-01 California Institute Of Technology Enhanced production of toxic polypeptides in prokaryotes
DE4417598A1 (de) * 1994-05-19 1995-12-14 Max Planck Gesellschaft Verwendung des Tetracyclinpromotors zur stringent regulierten Produktion von rekombinanten Proteinen in prokaryontischen Zellen
ATE253593T1 (de) 1996-07-16 2003-11-15 Plueckthun Andreas Prof Dr Immunglobulin-superfamilie domainen und fragmente mit erhöhter löslichkeit
US6083715A (en) * 1997-06-09 2000-07-04 Board Of Regents, The University Of Texas System Methods for producing heterologous disulfide bond-containing polypeptides in bacterial cells
US7094579B2 (en) 2002-02-13 2006-08-22 Xoma Technology Ltd. Eukaryotic signal sequences for prokaryotic expression
EP1476551A2 (de) * 2002-02-19 2004-11-17 Max-Planck-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. Verfahren zur identifikation von gewebespezifischen regulatorischen sequenzen

Also Published As

Publication number Publication date
IL183609A (en) 2012-09-24
CA2589823C (en) 2015-03-17
EP1824961A2 (en) 2007-08-29
US20080305526A1 (en) 2008-12-11
AU2005313530A1 (en) 2006-06-15
JP5080269B2 (ja) 2012-11-21
CA2589823A1 (en) 2006-06-15
ES2612545T3 (es) 2017-05-17
US8735099B2 (en) 2014-05-27
JP2008522598A (ja) 2008-07-03
CN101090963A (zh) 2007-12-19
HK1115155A1 (en) 2008-12-24
US20120077225A1 (en) 2012-03-29
WO2006061173A2 (en) 2006-06-15
CN101090963B (zh) 2010-12-29
AU2005313530B2 (en) 2011-03-10
PL1824961T3 (pl) 2017-05-31
WO2006061173A3 (en) 2006-10-05
EP1824961B1 (en) 2016-11-02
IL183609A0 (en) 2007-09-20

Similar Documents

Publication Publication Date Title
AU2005313531B2 (en) Rhamnose promoter expression system
Barth et al. Compatible-solute-supported periplasmic expression of functional recombinant proteins under stress conditions
AU2002350901B2 (en) Expression control using variable intergenic sequences
KR102023786B1 (ko) 재조합 dsbc를 발현하는 세균 숙주 균주
JP5087541B2 (ja) シグナルペプチドを用いない、細菌からの抗体分泌
US8735099B2 (en) Melibiose operon expression system
KR20120115997A (ko) 재조합 dsbc를 발현하고 저하된 tsp 활성을 갖는 박테리아 숙주 균주
US9845475B2 (en) Expression vector
JP6176683B2 (ja) 組換え偏性嫌気性グラム陽性菌
JP2004533264A (ja) バクテリオファージのシグナルペプチドをコードする発現ベクター