DK175372B1

DK175372B1 - 1,3-dioxolanderivater

Info

Publication number: DK175372B1
Application number: DK198901720A
Authority: DK
Inventors: Bernard Belleau; Dilip Dixit; Nghe Nhuyen-Ba
Original assignee: Iaf Biochem Int
Priority date: 1988-04-11
Filing date: 1989-04-10
Publication date: 2004-09-13
Also published as: EP0337713A3; GR3017812T3; DK172089D0; NZ228645A; OA09470A; ATE129247T1; JPH01316375A; JP3085675B2; IE891136L; AU631786B2; HK5996A; KR890016046A; DE68924549D1; IE71225B1; ZA892645B; EP0337713B1; DK172089A; IL89921A0; AU3264489A; CA1339609C

Description

^·- Μ—FagCg»··— DK 175372 B1

Den foreliggende opfindelse angår hidtil ukendte 2-substitueret-4-subsiitueret- 1,3-dioxolaner, som er nyttige som antivirale midler.

Retrovirale infektioner er en alvorlig årsag til sygdom og bl.a. er akvisit immun-5 defektsyndrom (AIDS) en immunundertrykkende sygdom forbundet med livstruende opportunistiske infektioner og har høj tilbøjelighed til usædvanlige neo-plasmer (f.eks. Kaposi's sarcom). Human immundefekt virus (HIV) er blevet erkendt som det ætiologiske agens ved AIDS og man har aktivt forsøgt at finde forbindelser med en inhibitorisk virkning overfor HIV multiplikation.

10 Ét produkt, som er blevet foreslået til behandling af AIDS, er 3'-azido-2\3’-dideoxythymidin, der almindeligvis betegnes AZT. Aktiviteten af denne forbindelse blev beskrevet af MITSUYA et al. i Proc. Natl. Acad. Sci, USA 1985, 82, 7096. Forbindelsen har strukturen 15 o

iT

20 o "

V

, Ns 25

Denne forbindelse er nyttig til beskyttelse af AIDS smittede mod den cytopa-thogene virkning af human immundefekt vims (HIV), som er det ætiologiske agens ved AIDS.

30 Mitsuya et al. har i Proc. Natl. Acad. Sci, USA 1986, 86, 1911 også beskrevet en gruppe af 2’,3'-dideoxynucleosider, som synes at være i besiddelse af kraftig beskyttende virkning mod HIV-induceret cytopatho-genicitet. En sådan typisk forbindelse er 2',3'-dideoxycytidin med formlen

I DK 175372 B1 I

I I

I HHj I

I H^il I

i 5 j i 'i

I «Ο. I

\y

I 10 I

I Balzarini et al. beskriver i Biochem. Biophys. Res. Comm. 1986,140, 735, at I

I den umættede analog af 2\3’-dideoxycytidin også er i besiddelse af antiretrovi- I

I ral virkning. Denne umættede analog har formlen I

I 15 I

I NHj I

A

I ” Å) I H0\ i O1

I 25 I

I Baba et al. har i Biochem. Biophys. Res. Comm. 1987,142.128, beskrevet den I

I 2’,3-umættede analog af 2',3'-dideoxythymidin, som er en kraftig selektiv inhi- I

I bitor af HIV replikation og som svarer til formlen I

I 30 I

3 DK 175372 B1 ir 10

Analoger af 3'-azido-2\3’-^ideoxythymidin er 3'-azido-2,,3'-dide-oxyuridin med formlen JL··

A.I

20 25 hvor y er brom eller iod. T.S. Lin et al., i J. Med. Chem. 1987, 30, 440 har be-J skrevet, at disse er i besiddelse af en inhibitorisk aktivitet overfor Moloney mu- rin leukemi.

Slutteligt er 3-fluoranaloger af 2',3'-dideoxycytidin og 2',3'-dideoxythymidin ble-30 vet beskrevet af Herdewijn et al. i J. Med. Chem. 1987, 30,1270 som værende i besiddelse af kraftig antiretroviral akti-vitet (anti-HIV). Disse analoger svarer til formlerne

I DK 175372 B1 I

I 4 I

I r I .-V* ' Λ .A J A··^

U HOv. I

I H0\ No I

I 10 I I

I De mest kraftige anti-HIV forbindelser, der således hidtil er blevet beskrevet er I

I 2',3’-dideoxynucleosider, nærmere betegnet 2',3’-dide-oxycytidin (ddCyd) og 3’- I

I 15 azido-2’,3,-dideoxythymidin (AzddThd eller AZT). Disse forbindelser er også I

I aktive overfor andre retrovira (såsom Moloney murin leukemi virus). På grund I

I af den stigende hyppighed og de livstruende karakteristika af AIDS, anvendes I

I kræfter på at opdage og udvikle hidtil ukendte ikke-toksiske og kraftige inhibito- I

I rer af HIV og midler til blokering af infektionsevnen deraf. I

I 20 I

I Det er derfor et formål med den foreliggende opfindelse at tilvejebringe vir- I

I somme anti-HIV forbindelser med lav toksicitet. I

I Ifølge den foreliggende opfindelse tilvejebringes hidtil ukendte I

I 25 2-substitueret-4-substitueret-1,3-dioxolaner, som er særligt nyttige som antivi- , I

I rale midler. I

I Mere specielt har de hidtil ukendte 2-substitueret-4-$ubstitueret- I

I 1,3-dioxolanderivater ifølge den foreliggende opfindelse følgende formel (L) I

I 30 0 I

I i«*—/’ I

5 DK 175372 B1 hvor R1 er valgt blandt H, en alifatisk acylgruppe med 2-16 carbonatomer eller benzoyl, som kan være substitueret i en hvilken som helst stilling med halogen (brom, chlor, fluor eller iod), lavere alkyl, lavere alkoxy, nitro og trifluormethyl, 5 og R2 er en heterocyklisk gruppe valgt blandt NH-Rj 0 . ir .ir 10 . 0 | ( N* jj « Γ 6:>ix> Jx> 15 ' hvor R3 og R4 er uafhængigt af hinanden valgt blandt H og lavere alkyl med 1-3 carbonatomer, og R5 er valgt blandt lavere alkyl med 1-3 carbonatomer og halogen.

20

Den foreliggende opfindelse angår også 2,4-disubstitueret-1,3-dioxolaner med formlen (L), hvor R2 er en hvilken som helst nucleosidbaseanalog, idet disse baseanaloger er kendt af fagmanden indenfor nucleosidkemien.

25 Der er to asymmetriske carbonatomer (asterisker) i det disubstituerede 1,3-dioxolanmolekyle, som giver 2 racemiske former (±) og derfor fire optiske iso-merer. Disse racemater afviger med hensyn til de relative konfigurationer af 2-og 4-substituenterne, som kan antage enten cis- eller transkonfigurationer. Anvendelsen af en grafisk afbildning af de 2,4-disubstitueret-1,3-dioxolaner med 30 formlen (L) har til hensigt at omfatte den dl racemiske blanding samt de separate d og I isomerer deraf.

I DK 175372 B1

I 6 I

I Ifølge den foreliggende opfindelse tilvejebringes ligeledes et farmaceutisk præ- I

parat til behandling af virale infektioner omfattende et 1,3-dioxolanderivat ifølge I

I opfindelsen. Den mængde aktiv bestanddel, som er indeholdt i en enkelt do- I

sisform kan variere afhængigt af den vært, der behandles samt af administre- I

I 5 ringshyppigheden og -måden. ' I

Forbindelserne ifølge den foreliggende opfindelse fremstilles ud fra glycerol og I

I 2-halogenacetaldehyd (eller en ækvivalent fraspaltelig gruppe, såsom aryl- eller I

I alkylsulfonyloxy), fortrinsvis i form af et acetalderivat i overensstemmelse med I

I 10 den af E.G. Hallonquist og H. Hibbert, i Can. J. Res. 1933, 7,129, anførte I

I fremgangsmåde. I det fore-liggende omfatter udtrykket acyl en alkanoylgruppe I

I med 2-16 carbon-atomer, f.eks. acetyl, propionyl, isobutyryl, myristoyl, etc. I

I Forbin-delseme ifølge den foreliggende opfindelse er fremstillet ved en total- I

syntese omfattende nogle få trin. Syntesen er praktisk og økonomisk gennem- I

15 førlig. Fremgangsmåden til fremstilling af én specifik forbindelse ifølge den I

I foreliggende opfindelse er vist i følgende skema 1 I

Skema 1 7 DK 175372 B1

0.____CDjH

C'^X *7^ X0^ _

• — IL H

χ °χ"Χ

Eks^X 2 J

» ,-X^N* tn7T^)^ —Cl .

Cl —

IV

TIT —

/ H

H n Eks^< 0.

O YY ' YY

Λο ^\X\ o^X ^ CH3 D y°~-X CH, /* Tf «· \ / HOCHi-(i «—( J ._Eks._» \‘> _ 5 a

X

I DK 175372 B1 I

I I

I De forskellige trin, der indgår i fremgangsmåden vist i skema 1, kan kort be- I

I skrives som følger: I

I Trin 1 Den primære alkoholfunktion i udgangsdioxolan 1 behandles med et oxl- I

I 5 dationsmiddel, såsom chromsyre (som kan være kompteksbundet med pyridin) I

I i et kompatibelt organisk opløsningsmiddel til opnåelse af den tilsvarende diox- I

I olancarboxylsyre II. I

I Trin 2 Syren II omdannes til et blandet anhydrid under anvendelse af et al- I

I 10 kylchlorformiat og underkastes en Bayer-Villiger oxidation med en organisk I

I persyre, såsom m-chlorperbenzoesyre, til opnåelse af den til-svarende aroy- I

I loxydioxolan III. I

I Trin 3 Mellemprodukt III omsættes derefter med thymin, der forud er silyleret I

I 15 med hexamethyldisilazan i et kompatibelt opløsningsmiddel og reaktionen ka- I

I talyseres med en Lewissyre eller fortrinsvis med trimethyl-silyltriflat til opnåelse I

I af thymin-T-yldioxolan IV. I

I Trin 4 Chloratomet i IV fjernes ved omsætning med et benzoesyresalt i et kom- I

I 20 patibelt opløsningsmiddel, såsom dimethylformamid, til opnåelse af mellempro- I

I dukt V. I

Trin 5 Benzoatesterfunktionen hydrolyseres derefter under basiske be-tingelser I

I til opnåelse af det ønskede slutprodukt VI. I

I 25 I

I En alternativ fremgangsmåde til fremstilling af yderligere speci-fikke forbindel- I

I ser ifølge den foreliggende opfindelse er vist i skema 2. I

~· τ_· ijBB^^^M^^^^ifaT^' ~8·ττ.^»ε ^¾^1-¾¾^11'’ j*EWi*r" ·- ~.™v Mrg*C τί—3 ' i^WBM^^^^^MMlBHlI^MBa^EEWMRraM^gpyipip^lipgjjljJjyjyffll^l DK 175372 B1 g

Skema 2 V-W*

Eks. \ / i x -r> wAj

Eks. vn, o 7ir o o

Ve* V«% U

<~cr 'mT'v

No^ _, 0 — ci

νΤΐϊ Ete.^ IL

9

. w v VYY

)-<*. . j >«*. °* ^-CT -?=* '--Cf _ Eks · j- »i L / — 11 • <*

S

/ ,'"T| ·' HOCH,-(»

XII

I DK 175372 B1 I 10 I Skema 2 (fortsat) I 0' X/M1

\ / | \_/ -* hochi—(t * */=V

C* \ /\ 13 \ ·/ H »· yV-NHi I

I V—V γ* -

jun '—* Kiv t·· t- I

i φ~ __* I

I y™

I _ Eks. \ / \__( I

J£ -^ C*fc-( I==\ I

I 14 V/ * /)— « I

Eks. 15 xv / I

I ^ Sy. I

I

I hi'4;-/ " I /=\ HOCHl-^ I

I ~y v>‘‘ ,s _ V

I tvi / XVII ' I

·** I

I „Eta, IB *· /

I /-/> /ύλ!" I

I /,· >o \/ V //—* I

I ^-!r V-^ . I

m / H χνΠΓ ' I

I W* I

DK 175372 B1 11

De forskellige trin, derindgår i fremgangsmåden vist i skema 2 kan kort beskrives som følger:

Trin 1 Chloratomet i udgangsdioxolan I fernes med et benzoe- (eller eddike)-5 syresalt i et opløsningsmiddel, såsom dimethylformamid, til op-nåelse af diol-monoester VII.

I Trin 2 Hydroxymethylgruppen i VII oxideres med et passende reagens, så-som I chromsyre (som kan være kompleksbundet med pyridin) i et kompati-belt orga- I 10 nisk opløsningsmiddel til opnåelse af dioxolancarboxylsyre VIII.

I Trin 3 Syren VIII underkastes derefter Bayer-Villiger oxidation ved fremgangs- I måden opridset i trin 2 (skema 1) ovenfor til opnåelse af den tilsvarende aroy- I loxydioxolan IX.

I 15 I Trin 4 Nøgle-mellemproduktet IX omsættes med cytosin, der forud er silyleret I under reaktionsbetingelseme beskrevet i trin 3 (skema 1) til opnåelse af cyto- I sin-T-yl-dioxolan X.

I 20 Trin 5 Aminfunktionen i X acyleres med eddikesyreanhydrid i pyridin til opnåel- I se af XI, hvilket giver lettere adskillelse af isomerer.

I Trin 6 Ester- og acetylfunktionen i XI hydrolyseres under basiske betin-gelser til I opnåelse af det ønskede slutprodukt XII.

I 25 I Trin 7 (IX til XIII) Nøgle-mellemproduktet IX omsættes med adenin ved frem- I gangsmåden beskrevet ovenfor i trin 3 (skema 1) til opnåelse af XIII.

I Trin 8 (XIII til XIV) Esterfunktionen i XIII hydrolyseres under basiske betingelser I 30 til opnåelse af det ønskede slutprodukt XIV.

I Trin 9 (IX til XV) Mellemprodukt IX omsættes med 2-amino-6-chlorpurin under I betingelserne opridset i trin 3 (skema 1) til opnåelse af forbin-delse XV.

I DK 175372 B1 I 12

Trin 10 (XV til XVI) Ovennævnte mellemprodukt hydrolyseres under basiske H betingelser til opnåelse af det ønskede slutprodukt XVI.

5 Trin 11 (XVI til XVII) Chloratomet i XVI fjernes ved katalytisk hydro-genering H over Pd/C til opnåelse af 2'-amino-purin-9’-yl-dioxolan XVII.

H Trin 12 Ovennævnte mellemprodukt XV omsættes med et overskud af ammo- H niak under tryk, hvorefter 2,,6,-diamino-purin-9'-yl-dioxolan XVIII dannes.

I 10

Trin 13 Forbindelse XVI underkastes kogende natriumhydroxid til opnåelse af det ønskede slutprodukt guanin-9’-yl-dioxolan XIX.

Antiviral aktivitet I 15 I Alle forbindelserne ifølge de foretrukne udførelsesformer er hidtil ukendte og nogle er værdifulde på grund af deres egenskaber som ikke-toksiske inhibitorer I af den primære replication af HIV-1 i tid-ligere uinficerede T-lymphocytter i et I langvarigt tidsrum.

20 I Især forbindelserne med formel XII besidder ønskværdige egenska-ber, dvs.

antagonisme af HIV infektionsevne overfor T-lymphocytter i fravær af cytotoksi- citet.

I 25 In vitro afprøvning blev udført på forbindelserne til bestemmelse af deres inhi- bitoriske egenskaber. Tabel 1 viser resultaterne af et typisk forsøg. De anførte I tal er de mikromolære koncentrationer i inku-bationsmediet, der påvirker ΤΙ lymphocyt H-9 cellers evne til at infi-ceres med HIV-1 i overenstemmelse med I forskriften i.h.t. H. Mitsuya og S. Broder i Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1986, 83, I 30 1911-1915, idet niveauet af infektion måles ved niveauet af reverstranskriptase I akti-vitet (RTA) afprøvet på sædvanlig måde med tritieret thymidintriphosphat I (TTP). Som kontrollægemiddel anvendtes 2\3'-dideoxy-3’-azido-thymidin (AZT) I og RTA måltes i inkubationsmediet efter eksponering for inhibi-toren i 8,12 og - . -·. -'-~ ·ι^1^^Βμ^Ε¥^*^ΒΒΜ

DK 175372 B1 I

26 dage. Værdierne i tabel 1 afspejler det samlede antal viruspartikler i inkuba- I

tionsmediet. I

I DK 175372 B1 I Tabel 1

Eksempel på virkninger af prototype forbindelser trans-XII. cis-XIV οα AZT på H-9 cellers evne til at inficeres med HIV-1 I 5

RTA aktivitet (cpm) efter: I

Fors, nr. Inhibitor Koncentration 8 dage 12 dage 26 daae I

I 10 1 Ingen 198.612 327.570 239.019 I

I trans-XII 10μΜ 4.608 83.462 312.478 I

I trans-XII 50μΜ 1.319 758 1.732 I

I AZT 20μΜ 633 419 821 I

I 15 2 Ingen 64.769 119.580 227.471 I

I Cis-XIV 20μΜ 2.618 130.563 210.583 I

I cis-XIV 50μΜ 1.132 39.752 231.609 I

I AZT 20μΜ 587 1.316 679 I

I 20 I

I Det er åbenbart ud fra tabellen, at prototype forbindelse trans-XII udviser kraftig I

I inhibitorisk aktivitet. Andre analoger udviste forskel-lig grad af antiviral aktivitet. I

Følgelig, som det er reglen for visse analoger af nucleosider, forventes det at, I

I trans-XII og udvalgte analo-ger viser in vivo aktivitet som inhibitorer af retrovira. I

I 25 Sådanne for-bindelser også kan anvendes i kombination med andre antivirale I

midler i reducerede doser, idet deres toksicitetspotentiel derved formindskes. I

I Toksicitet I

I 30 I modsætning til resultaterne opnået med AZT eller andre dideoxy-nucleosid- I

I analoger viste toksicitetsforsøg in vitro, at forbindelsen trans-XII er ikke-toksisk I

I selv ved en så høj koncentration som 200 μΜ. Til trods for AZT aktiviteten be- I

I grænser dens alvorlige knoglemarvs-toksicitet dens terapeutiske anvendelig- I

^ - . .. ... * '

15 I

DK 175372 B1 I

hed. Det er derfor meget ønske-ligt at tilvejebringe hidtil ukendte, aktive antivi- I

rale midler, som er fri for toksiske bivirkninger. I

Eksempler I

5 I

Eksempel 1 I

Fremstilling af 2-chlormethvl-1 3-dioxolan-4-carboxvlsvre ΠΙ> I

Udgangsmateriale I (40 g, fremstillet I overensstemmelse med E.G. Hallonquist I

I 10 og H. Hibbert, Can. Res. J. 1933, 7,129) blev behandlet med pyridinium- I

I dichromat (PDC, 345g) i dimethylformamid (DMF, 690ml) ved 00C i overens- I

I stemmelse med fremgangsmåden ifølge E.J. Corey og G. Schmidt, Tetrahe- I

I dron Lett., 1979, 399, og produkt II opnået som en rå blanding af cis- og trans- I

I isomerer (20 g) blev identificeret ved dets 1H-NMR spektrum {200 MHz, I

I 15 CDCI3, tetramethylsilan (TMS) som intern reference_. I

I _(PPm): 3,6-3,8 (m,2H,CH2CI), 4,1-4,5 (m,2H,C5H2), 4,72-4,797 (qq,1H, I

I C4-H), 5,29-5,46 (tt,1H.C2-H). I

I Produktet blev anvendt som sådan på næste trin. I

I 20 I

I Eksempel 2 I

I Fremstilling af 2-chlormethvl-4-m-chlorbenzovloxv-1.3-dioxolan (III) I

I Ovennævnte produkt II (5,26 g) blev behandlet i CH2CI2 ved -200C med 3,6 ml I

I 25 ethylchlorformiat i nærvær af 4,5 ml triethylamin. Til opløs-ningen blev sat 8,85 I g m-chlorperbenzoesyre ved stuetemperatur i over-ensstemmelse med frem- I gangsmåden ifølge D.H.R. Barton, I.H. Coates og P.G. Sammes, J. Chem.

I Soc, Perkin 1,1973, 599 til opnåelse af III som en blanding af cis- og trans- I isomerer. Disse blev adskilt og oprenset ved lynkromatografi på silicagel under I 30 eluering med en blanding af hexan og ethylacetat. Isomereme blev identificeret I ved deres 1 H-NMR spektrer (optaget som i eksempel 1): I DK 175372 B1 I 16 I trans-isbmer af III: _(ppm): 3,66 (q,2H,CH2-CI), 4,36 (qq,2H,C5-H2), 5,57 I (t,1H,C2-H), 6,7 (q,1H,C4-H), 7,39-8,0 (m,4H,aromatisk H), cls-isomer af III: _(ppm): 3,66 (q,2H,CH2CI), 4,24 (qq,2H,C5-H2), I 5 5,43 (t, 1 H.C2-H), 6,63 (q,1H,C4-H), 7,42-8,04 (m,4H,aromatisk H).

Eksempel 3 I Fremstilling af 2-chlomiethvl-4-ithvmin-T-vl)-1.3-dioxolan (IV) 10 Omsætning af ovennævnte forbindelse med thymin blev udført i over- ensstemmelse med fremgangsmåden ifølge D.S. Wise og L.B. Townsend be- H skrevet i Nucleic Acid Chemistry, Eds. L.B. Townsend og R.S. Tipson, John I Wiley & Sons, Inc, New York, 1978, Part 1, pp. 413-419. Produktet var en blanding af cis- og trans-isomerer af IV (37,3 mg fra 131 mg III) med følgende I 15 1H-NMR karakteristika (optaget som i eksempel 1): „(ppm): 1,93 (d,3H,5'- I CH3), 3,64 og 3,85 (dd,2H,CH2CI), 4,17-4,46 (m,2H,C5-H2), I 5,26 og 5,72 (tt,1H,C2-H), 6,6 og 6,66 (qq,1H,C4-H), 7,40 og 7,49 (dd,1H,C6·- I H)· I U.V.: (CH30H) _gjriax = 264 nm.

I 20

Eksempel 4 I Fremstilling af 2-acetoxvmethvl-4-(thvmin-1,-vl)-1.3-dioxolan (V) I Ovennævnte forbindelse IV (35 mg) blev omsat med vandfri kalium-acetat (70 25 mg) i kogende DMF (3 ml) i 4 timer til opnåelse - efter konventionel oparbejd- I ning - af en cis- og transblanding af V (25 mg). Disse isomerer blev oprenset og separeret ved lynkromatografi på silica-gel under eluering med en blanding af I hexan og ethylacetat. Deres 1 H-NMR spektrer blev som følger: I 30 trans-isomer af V: _(ppm): 1,94 (d,3H,C5'-CH3), 2,12 (s,3H, I CH3C02-), 4,05-4,43 (m,4H,C2-CH2-02CCH3 og C5-H2), 5,65 (t,1H,C2-H), I 6,31 (q,1H,C4-H), 7,14 (d,1H,C6'-H), 8,18 (m,1H,N3,-H).

DK 175372 B1 17 cis-isomer af V: _(ppm): 1,97 @,3Η,05·0Η3), 2,14 (s,3H,CH3C0-0), 4,13-4,49 (m,4H,2-CH20COCH3 og C5H2), 5,19 (t,1H,C2-H), 6,40 (q,1H,C4H), 7,43 (d,1H,C6'-H), 8,12 (m,1H,N3'-H).

5 U.V.: (CH30H) _g_ max = 264 nm.

Eksempel 5

Fremstilling af 2-hvdroxvmethvl-4-Cthvmin- 1'-vl)-1.3-dioxolan (VP

10 Ovennævnte trans- og cis-isomerer af V (10 mg) blev behandlet med en katalytisk mængde kaliumcarbonat i methanol (5 ml) ved stuetemperatur i 5-6 timer og blandingen blev oparbejdet på sædvanlig måde og de respektive produkter oprenset ved lynkromatografi på silicagel under eluering med en blanding af ethylacetat og methanol. 1H-NMR spektrum af den rene trans-isomer af VI blev 15 som følger (i CD3COCD3 som opløsnings-middel): trans-VI: _(ppm): 1,87 (d,3H,C5'-CH3), 3,61 (q,2H,C2-CH20H), 4,30 (qq,2H,C5-H2), 5,56 (t,1H,C2-H), 6,31 (q,1H,C4-H), 7,41 (d,1H,C6’H).

20 U.V.: (CH30H) _g_ max = 265 nm.

cis-isomer af VI (i CD3COCD3): Jpprn): 1,82 (d,3H,C5'-CH3), 3,82 (q,2H,C2CH20H), 4,24 (qq,2H,C5-H2), 5,02 (t,1H,C2-H), 6,34 (q,1H,C4-H), 7,81 (d,1H,C6’-H).

25 U.V.: (CH30H) _g_max = 264nm.

Eksempel 6

Fremstilling af 2-benzovloxvmethvl-4-hvdroxvmethvl-1.3-dioxolan (VIIO 30

Udgangsmateriale 1 (41,6 g) blev behandlet med kaliumbenzoat (65,56 g) i kogende dimethylformamid indeholdende 100 mg 18-crown-6-ether i 24 timer, I DK 175372 B1 I 18 hvorefter blandingen blev oparbejdet på sædvanlig måde og produk-tet (51,02 g) karakteriseret ved dets 1H-NMR spektrum (CDCI3, TMS): I Jppm): 3,5-4,8 (m7H,C5-H2, C2-CH20COC6H5, C4-CH20H og C2-H), 5,05 I 5 og 5,16 (tt,1H.C4-H), 7,27-8,10 (m,5H, aromatisk H).

Lignende resultater blev opnået under anvendelse af kaliumacetat i stedet for kaliumbenzoat.

10 Eksempel 7

Fremstilling af 2-benzovloxvmethvl-1.3-dioxolan-4-carboxvlsvre (VllO

Ovennævnte forbindelse VII (51,02 g) blev behandlet ved 00C med pyridinium- dichromat (282,5 g) i dimethylformamid (565 ml) og blandingen oparbejdet på 15 sædvanlig måde til opnåelse af 35 g rå VIII, som blev anvendt som sådan i næste eksempel.

Eksempel 8 I 20 En portion på 10 g rå VIII blev behandlet med 6,03 ml ethylchlor-formiat i nær- vær af 8,6 ml triethylamin efterfulgt af tilsætning af 16,81 g m-chlorperbenzoe-

syre nøjagtig som beskrevet i eksempel 2 ved fremstilling af mellemprodukt III. I

Isomereme af det således opnåede produkt IX blev oprenset ved lynkromato- I graft på silicagel under elue-ring med en blanding af hexan og ethylacetat. De

I 25 blev karakteriseret ved deres 1 H-NMR spektrer (CDCI3): I

I trans-isomer af IX: Jppm): 4,29 (qq,2H,C5-H2), 4,49 (d,2H, I C2-CH20COC6H5), 5,66 (t,1H,C2-H), 6,70 (q,1H,C2-H), 7,27-8,10 (m,9H, I aromatisk).

I 30 I

cis-isomer af IX: Jppm): 4,27 (qq,2H,C5-H2), 4,51 (d,2H, I C2-CHOCOC6H5), 5,51 (t,1H,C2-H), 6,59 (d,1H,C4-H), 7,26-8,09 (m,9H, aro- I matisk).

DK 175372 B1 I

19 I

Eksempel 9 I

I Fremstilling af 2-benzovloxvmethvl-4-(cytosin-1’-v0-1.3-dioxolan (X) I

I Ved at følge fremgangsmåden beskrevet af T. Ueda og S.I. Watanabe, Chem. I

I 5 Pharrn. Bull. (Japan), 1985, 33, 3689- 3695 og af G. Gosselin, M.C. Bergogne, I

I J. DeRudder, E. DeClercq og J.L. Imbach, J. Med, Chem, 1987, 30, 982-991, I

I gav cytosin (139 mg) og hver isomer af ovennævnte forbin-delse IX (363 mg) I

I en blanding af cis- og trans-isomerer (390 mg) X, som blev anvendt som sådan I

I på følgende trin. I

I 10 I

I Eksempel 10 I

I Behandling af cis- og trans-X med et overskud af eddikesyre-anhydrid i pyridin I

I ved stuetemperatur gav efter oparbejdning på konven-tionel måde en blanding I

I 15 af cis- og trans-isomerer af XI, som blev sepa-reret og oprenset ved lynkroma- I

I tografi på silicagel under eluering med en blanding af hexan og ethylacetat. De I

I blev karakteriseret ved deres 1H-NMR spectrer (CDCI3): I

I trans-isomer af XI: _(ppm): 2,15 (s,3H,C4'-NH-COCH3), 4,16 og 4,46 I

I 20 (m,4H,C5-H2 og C2-CH20COC6-H5), 5,96 (t,1 H.C2-H), 6,24 (q,1 H.C4-H), I 7,55-8,09 (m,5H,aromatisk), 8,15 (d,1H,C6'-H).

I cis-isomer af XI: _(ppm): 2,15 (s,3H,C4,-NH-COCH3), 4,26 og 4,56 (m,4H,C5- I H2 og C2-CH20COC6-H5), 5,35 (t,1H,C4-H), 6,25 (q,1H,C4-H), 7,18 I 25 (d,1H,C5'-H), 7,58-8,04 (m,5H, aromatisk), 8,17 (d,1H,C6’-H).

I Eksempel 11 I Fremstilling af cis- oa trans-2-hvdroxvmethvl-4-(cvtosin-1 '-viV1.3-dioxolan ΓΧΙΠ I 30 Hver af ovennævnte isomerer af XI (25 mg) blev behandlet med kaliumcarbo- I nat (20 mg) i methanol ved stuetemperatur i flere timer og blandingerne blev I oparbejdet på sædvanlig måde til opnåelse af hver isomer af XII, som blev op- I renset ved kromatografi på silicagel under eluering med en blanding af DK 175372 B1 ethylacetat og methanol. De blev udkrystal-liseret fra methanol og karakterise- ret ved deres respektive 1H-NMR spektrer (DC3COCD3): I trans-isomer af XII: smp. 179-1800C, _{ppm): 3,62 (q,2H,C2-CH20H), I 5 4,21 (qq,2H,C5-H2), 5,50 (t,1H,C2-H), 5,93 ^,1Η,05·-Η,ϋ=7,5Ηζ), 6,18 (q,1H,C4-H),7,66(d,1H,C6'-H,J=7,5Hz).

I U.V.: (CH30H) _g_max = 271 nm.

I 10 cis-isomer af XII: _(ppm): 3,82 og 4,15 (m,4H,C5-H2 og C2-CH20H), I smp. 173-1740C, 5,04 (t,1H,C2-H), 5,83 (df1H,C5'-H), 6,23 (q,1H,C4-H), I 8,05 (d,1H,C6'H).

I U.V.: (CH30H) _g_ max = 270nm.

H 15 H Eksempel 12

Fremstilling af 2-benzovloxvnnethvl-4-tedenin-9,-vl)-1.3-d?oxolan (XIII)

Ved at følge fremgangsmåden i eksempel 9 blev adenosin (135 mg) koblet 20 med hver isomer af mellemprodukt IX (545 mg) i dimethylformamid ved 1200C i nærvær af trimethylsilyltriflat (0,45 ml) og blandingen blev oparbejdet på sæd- vanlig måde til opnåelse af en blanding af cis- og trans-isomerer af XIII (540 mg), som blev oprenset og separeret ved kro-matografi på silicagel under elue- I ring med en blanding af hexan og ethyl-acetat. De blev karakteriseret ved de- I 25 res respective 1 H-NMR spektrer (CDCI3): I trans-isomer af XIII: _(ppm): 4,5 og 4,59 (m,4H,C5-H2 og I C2-CH20COC6H5), 6,00 (t,1H,C2-H), 6,65 (q,1H,C4-H), 6,75 (m,2H,C6’H2), I 7,68-8,21 (m,5H,aromatisk), 8,36 (s,1H,C2’-H), 8,37 (s,1H,C8’-H).

I 30 I cis-isomer af XIII: _ (ppm): 4,62 (d,2H,C2-CH20COC6H5), 4,65 (qq,2H,C5-H2), I 5,52 (t,1 H.C2-H), 6,59 (q,1 H,C4-H), 6,85 (m,2H,C6'-NH2), I 6,96-7,71 (m,5H,aromatisk), 7,66 (d,2H,C2'-H og C8'-H).

DK 175372 B1 I

21 I

Eksempel 13 I

Fremstilling af 2-hvdroxvmethvl~4-fadenin-9,-vlV1 .3 dioxolan (X1V1 I

5 Hver isomer af ovennævnte forbindelse XIII blev behandlet med kaliumcarbo- I

nat i methanol ved stuetemperatur ved fremgangsmåden beskre-vet i eksempel I

5 og hvert produkt blev oprenset ved søjlekromatografi på silicagel under elue- I

ring med en blanding af ethylacetat og methanol. Isomereme blev yderligere I

oprenset ved udkrystallisation fra methanol og karakteriseret ved deres 1N- I

10 NMR spektrer (CD3SOCD3): I

trans-isomer af XIV: _(ppm): 3,50 (d,2H,C2-CH20H), 4,70 (m, I

2HC5-H2), 5,52 (t,1H,C2-H), 6,44 (q,1H,C4-H), 8,18 (s.lH^'-H), 8,31 I

(s,1H,C8’-H). I

15 I

U.V.: (CH30H) _g_ max = 269 nm. I

cis-isomer af XIV: Jpprn): 4,63 (d,2H,C2-CH20H), 4,29 (qq,2H,C5-H2), 5,08 I

(t,1H,C2-H), 6,43 (q,1H,C4-H), 8,18 (s.lH^-H), 8,36 (s,1H,C8’-H). I

20 I

U.V.: (CH30H) _g_ max = 269 nm. I

Eksempel 14

Fremstilling af 2-benzovloxvmethvl-4-(2'-amino-6l-chlor-purin-9'-vn-1.3-dixolan 25 (XV) I En opløsning af 2-amino*6-chlorpurin (600 mg, 3,54 mmol) i 20 ml I hexamethyldisilazan (HMDS) indeholdende 0,5 ml trimethylsilylchlorid (TMS-CI) I blev opvarmet under tilbagesvaling i 3 timer, hvorefter blan-dingen blev ind- I 30 dampet til tørhed i vakuum. Remanensen blev opløst i 75 ml dichlorethan inde- I holdende 910 mg af forbindelse IX, og 0,6 ml trimethylsilyltriflat (TMS-Tf) blev I tilsat. Efter tilbagesvaling under argon i 4 timer blev blandingen opsamlet, 2 g I fast NaHC03 tilsat efter-fulgt af 50 ml mættet vandig NaHC03. Den organiske I DK 175372 B1 H fase blev opsamlet og efter oparbejdning på sædvanlig måde blev rå XV opnå- et som en olie, som blev oprenset og separeret i sin isomer ved kromatografi H på silicagel under eluering med hexan-ethylacetat (3:7) til opnåelse af 230 mg ren trans- og 250 mg ren cis-isomer som farveløst skum. De blev karak- 5 teriseret ved deres 1H-NMR spektrer (CDC13): trans-isomer af XV (R:0,40, hexan-EtOAc 3:7): _(ppm): 4,45-4,52 (m,4H,C5- H2'C2- CH20COC6H5), 5,16 (b,2H,C2'-NH2), 5,83 (t,1H,C2-H,J=3,8 Hz), 6,39 I (dd,1 H.C4-H), 7,41-7,58 (m,3H,aromatisk), 7,92 s,1H,C8'-H), I 10 8,06 (d,2H,aromatisk, J=7Hz).

I U.V.: (CH30H) _g_ max = 312 nm.

cis-isomer af XV (R:0,26, hexan-EtOAc 3:7): _(ppm): 4,25-4,33 (dd,1 H.C5- 15 H,J=5,43 Hz), 4,59-4,64 (m,3H,C5-H og C2-CH2-OCOC6H5), 5,17 (b,2H,C2*- I NH2), 5,42 (t,1H,C2-H,J=3,50 Hz), 6,33-6,53 (dd,1H,C4-H),7,38-7,57 I (m,3H,aromatisk), 7,93-7,98 (d,2H,aromatisk), 8,00 (s,1H,C8'-H).

U.V.: (CH30H) _g_ max = 312 nm.

I Eksempel 15

Fremstilling af trans- oq cis-2-hvdroxvmethvl-4-(2,-amino-6,-chlor-purin-9,-v0- I 1.3-dioxolan (XVI) 25 Ovennævnte trans-isomer af XV (180 mg) blev opløst i 30 ml methanol, opløs- I ningen blev afkølet til 00C og tør ammoniak blev boblet gennem i 15 minutter.

I Efter omrøring ved stuetemperatur i 15 timer blev opløsningsmidlet fjernet i va- I kuum og remanensen blev udkrystalliseret fra ether. Efter omkrystallisation fra ethanol-ether blev opnået 98 mg ren trans-XVI, smp. 155-1560C (Rf: 0,23, I 30 EtOAc). Den blev karakteri-seret ved 1 H-NMR (DMSO-d6): I trans-XVI: Jpprn): 3,44-3,49 (m,2H,C2-CH20H), 4,37-4,45 (m,2H,

DK 175372 B1 I

23 I

C5-H2), 5,01 (t,1 H,C5-CH20H,J=6,2Hz), 5,46 (t.1H,C2-H,J=3,6 Hz), 6,27-6,32 I

(dd,1H,C4-HlJ=4,1 Hz), 7,00 φ,2Η,02·-ΝΗ2), 8,26 (s,1 H,C8’-H). I

U.V.: (CH30H) _g_max = 247 og 308 nm.

Cis-isomer af XVI blev opnået i lignende udbytte fra cis-isomeren af XV ved I

ovennævnte fremgangsmåde. Efter omkrystallisation fra ethanol-ether havde I

det rene produkt smp. 145-1470C (Rf:0,24, EtOAc). Det blev karakteriseret ved I

1H-NMR (DMSO-d6): I

10 I

I cis-XVI: _(ppm): 3,54-3,59 (m,2H,C2-CH20H), 4,12-4,19 (dd,1H, I C5-H,J=5,3 Hz og 9,8 Hz), 4,48-4,53 (d,1H,C5-H,J=9,8 Hz), 5,01 (t,1H,C2- I H,J=2,8 Hz), 5,09 (t,1H,C2-CH2-0H,J=6,0 Hz), 6,24 (d,1 H,C4-H,J=5,1 Hz), I 6,96 (b,2H,C2'-NH2), 8,23 (s,1 H,C8’-H).

I 15 I U.V.: (CH30H) _g_ max = 247 og 308 nm.

I Eksempel 16 I Fremstilling af trans- oq cis-2-hvdroxv-methvl-4-(2,-amino-Durin-9,-vO-1.3- I 20 dioxolan (XVII) I Ovennævnte trans-isomer af XVI (50 mg) blev underkastet hydrogene- I ringsbetingelser under 50 psi af hydrogen over 10% Pd/C (30 mg) i 30 ml etha- I nol indeholdende 0,5 ml triethylamin. Efter omrystning i 3 timer blev blandingen I 25 oparbejdet på sædvanlig måde til opnåelse af et fast-stof, som blev omkrystalli- I * seret fra ethanol-ether til opnåelse af 36 mg ren trans-XVII, smp. 153-1550C, I Rf:0,25 (EtOAc:MeOH 85:15). Den blev karakteriseret ved 1 H-NMR (DMSO- I d6): I 30 trans-XVII: Jpprn): 3,44-3,49 (m,2H,C2-CH20H), 4,38-4,44 (m,2H, I C5-H2), 4,99 (t,1 H,C2-CH2-0H,J=6,1 Hz), 5,45 (t,1 H,C2-H,J=3,6 Hz), I 6,29-6,34 (dd.1H.C4-H), 6,59 (b,2H,C2*-NH2), 8,19 (s,1H,C8’-H), 8,59 I (s,1H,C6’-H).

---·ιιι —^— I DK 175372 B1

Cis-isomeren af XVII blev opnået i lignende udbytte fra cis-isomeren af XVI ved H ovennævnte fremgangsmåde. Efter omkrystallisation fra ethanol-ether havde I det rene produkt smp. 145-1480C, Rf: 0,25 (EtOAc:MeOH 85:15). Det blev ka- I 5 rakteriseret ved 1H-NMR (DMSO-d6): I cis-XVII: Jppm): 3,55-3,60 (dd,2HfC2-CH2H,J=2,10 og 6,1 Hz). 4,14-4,22 I (dd,1H,C5-H,J=5,4 og 9,7 Hz), 4,47-4,53 (dd,1H,C5-H,J=1,38 og 9,7 Hz), I 5,02 (t, 1 H.C2-H,J=3 Hz), 5,11 (t, 1 H.C2-CH20H,J=7,2 Hz), 6,58 (b,2H, 10 C2-NH2), 8,19 (s,1H,C8'-H), 8,57 (s,1H,C6’-H).

I U.V.: (CH30H) _g_ max = 255,308 nm.

Eksempel 17 15 Fremstilling af trans- oa cis^-hvdroxvmethvI^-té'.e’-diarnino-purin-Q'-vlM.S- I dioxolan fXVIIIt I Ovennævnte forbindelse trans-XV (200 mg) blev opløst i 30 ml methanol mæt- I tet ved 00C med tør ammoniak og opløsningen blev opvarmet i en stålbeholder 20 til 105-1100C i 16 timer. Opløsningen blev inddampet til tørhed og remanensen oprenset ved kromatografi på silicagel under elue-ring med chloroform- methanol 4:1 til opnåelse af 101 mg produkt, som blev omkrystalliseret fra I methanol-ether til opnåelse af ren trans-XVIII, smp. 165-1680C, Rf:0,30 I (CHCI3.CH30H 4:1). Den blev karakteri-seret ved 1H-NMR (DMSO-d6): I 25 I trans-XVIII: Jppm): 3,43-3,48 (m,2H,C2-CH20H), 4,34-4,49 (m,2H, I C5-H2), 4,97 (t, 1 H.C2-CH20H), 5,42 (t, 1 H.C2-H), 5,82 (b,2H,C2’- eller C6'- I NH2), 6,18-6,23 (dd,1H,C4-H), 6,72 (b,2H,C2'- eller C6’-NH2), 7,84 (s,1H,C8’- I H).

I 30 I U.V.: (CH30H) _g_max = 255,280 nm.

- ' ·· ~τ^^^Β^^Βΐ^^^^^ΒΕΙ5Ιί^ΒΒ8^Μ

DK 175372 B1 I

25 I

Cis-isomeren af XVIII blev opnået ved samme fremgangsmåde ud fra forbin- I

delse cis-XV. Efter omkrystallisation fra methanol-ether blev ren cis-XVIII, smp. I

180-1820C, Rf:0,32 (CHCI3-CH30H 4:1) opnået i lignende udbytte. Den blev I

karakteriseret ved 1H-NMR (DMSO-d6): I

5 I

cis-XVIII:_(ppm):3,56-3,58(d,2H,C2-CH20H,J=4,2Hz),4,11-4,19(dd,1H,C5- I

H,J=4,5 og 9,7Hz), 4,38-4,44 (dd,1H,C5-H,J=1,6 og 11,2Hz),5,00 (t,1H,C2- I

H,J=3,1 Hz), 5,91 (b,2H,C2- eller C6-NH2), 6,15-6,19 (dd,1H,C4-H), 6,84 I

(b,2H,C2’- eller C6’-NH2), 7,86 (s,1 H,C8’-H). I

10 I

U.V.: (CH30H) _g_ max = 254,279 nm. I

Eksempel 18 I

Fremstilling af cis- oa trans^-hvdroxvmethvM-fauanosin-g'-vh-l .3-dioxolan I

15 (XIX)

Ovenstående cis-XVI (40 mg) blev opløst i en blanding af 15 ml methanol, 2 ml vand og 2 g natriumhydroxid og opløsningen blev opvarmet under tilbagesvaling i 5 timer, hvorefter den blev fortyndet med 100 ml vand, og et overskud af 20 pyridiniumsulfonatharpiks blev tilsat. Opslæm-ningen blev filtreret, harpiksen vasket med vand og de kombinerede van-dige filtrater inddampet til tørhed i vakuum til dannelse af en rema-nens, som blev optaget i 50% vandig metha- nol. Opløsningen blev behandlet med aktivt kul, filtreret og filtratet blev ind- I dampet til tørhed i vakuum til opnåelse af en fast remanens, som blev omkry-

25 stalliseret fra ethanol-vand til opnåelse af ren cis-XIX (27 mg) smp. >2500C

I ’ dek. Rf:0,23 (CHCI3:CH30H 7:3). Den blev karakteriseret ved 1 H-NMR

I (DMSO-d6): I cis-XIX: Jppm): 3,55 (m,2H,C2CH20H), 4,10-4,17 (dd,1H,C5-H,J=5,6 og 9,8 I 30 Hz), 4,37-4,42 (dd,1H,C5-H,J=1,4 og 9,6 Hz), 4,98 (t,1H,C2-H,J=3,2 Hz), 5,15 I (b,1H,C2-CH20H), 6,10-6,13 (dd,1H,C4-HlJ=2,4 og 5,3 Hz), 6,66 (b,2H,C2- I NH2), 7,78 (s,1H,C8'-H), 11,02 (b,1H,N1'-H).

I DK 175372 B1 I U.V.: (CH30H) _g__ max = 252, 270 (skulder).

Isomeren trans-ΧΙΧ blev opnået i lignende udbytte fra ovenstående trans-XVI

H ved ovennævnte fremgangsmåde. Efter omkrystallisation fra ethanol-vand blev 5 ren trans-ΧΙΧ, smp. >2600C (dek.), Rf:0,23 (CHCI3:CH30H 7:3) opnået og ka- rakteriseret ved 1H-NMR (DMSO-d6): I trans-XIX: I 10 _(ppm): 3,42-3,47 (m,2H,C2-CH20H), 4,34 (d,2H,C5-H2,J=4,8Hz), 4,99 (t,1H,C2-CH20H), 5,40 (t,1H,C2-H,J=3,5 Hz), 6,15-6,20 (t,lH,C4-H,J=4,8 Hz), v 6,49 φ,2Η,02’-ΝΗ2), 7,83 (s,1H,C8’-H), 10,64 (b,1H,N1'-H).

U.V.: (CH30H) _g_ max = 252,270 (skulder)

Claims

0 Ra _/ RjOCHj--ζ* · ° (L) 10 hvor R1 er valgt fra gruppen bestående af hydrogen, en alkanoylradikalgruppe med 2-16 carbon-atomer, benzoyl og benzoyl substitueret i vilkårlig stilling med mindst én substituent udvalgt blandt halogen, lavere alkyl, lavere alkoxy, nitro 15 og trifluormethyl, R2 er en heterocyklisk gruppe valgt blandt o HH-. R3 11 20 ΐ ιΓ^5 fjO .sy .<v -’ : “ &> Jjo A 30 hvor R3 og R4 uafhængigt af hinanden er valgt fra gruppen bestående af hydrogen og lavere alkyl med 1-3 carbonatomer, og I DK 175372 B1 I 28 R5 er valgt fra gruppen bestående af lavere alkyl med 1-3 carbonatomer og I halogen, og I I geometriske og optiske isomerer deraf og blandinger af disse isomerer. I I 5
2. Forbindelsen ifølge krav 1, KENDETEGNET ved, at den er 2-acet- I oxymethyl-4-(thymin-1 '-yl)-1,3-dioxolan. I
3. Forbindelse ifølge krav 1, KENDETEGNET ved, at den er 2-hydroxy-methyl- I 4-(thymin-T-yl)-T,3-dioxolan. I I 10 I
4. Forbindelse ifølge krav 1, KENDETEGNET ved, at den er 2-benzoyl- I I oxymethyl-4-(cytosin-1 '-yl)-1,3-dioxolan. I
5. Forbindelse ifølge krav 1, KENDETEGNET ved, at den er trans-2- I 15 hydroxymethyl~4-{cytosin-1'-yl)-1,3-dioxolan. I
6. Forbindelse ifølge krav 1, KENDETEGNET ved, at den er 2-benzoyl- I I oxymethyl-4-(adenin-9’-yl)-1,3-dioxolan. I I 20
7. Forbindelse ifølge krav 1, KENDETEGNET ved, at den er 2-hydroxy-methyl- I I 4-(adenin-9'-yl)-1,3-dioxolan. I
8. Forbindelse ifølge krav 1, KENDETEGNET ved, at den er 2-benzoyl- I oxylmethyl-4-(2'-amino-6'-chlor-(purin-9,-yl)-1,3-dioxolan. I I 25 I
9. Forbindelse ifølge krav 1, KENDETEGNET ved, at den er 2-hydroxy-methyl- I 4-(2'-amino-6,-chlor-(purin-9'-yl)-1,3- dioxolan. I
10. Forbindelse ifølge krav 1, KENDETEGNET ved, at den er 2-hydroxymethyl- I 30 4-(2'-amino-purin-9'-yl)-1,3-dioxolan. I
11. Forbindelse ifølge krav 1, KENDETEGNET ved, at den er 2-hydroxymethyl- I 4-(2',6'-diamino-purin-9'-yl)-1,3-dioxolan. I i DK 175372 B1 29
12. Forbindelse ifølge krav 1, KENDETEGNET ved, at den er 2-hydroxymethyl-4-(guanin-9'-yi)-1,3-dioxolan.
13. Farmaceutisk præparat til behandling af virale infektioner omfattende et 1,3-dioxolanderivat ifølge et hvilket som helst af kravene 1 til 12 og en farma-ceutisk acceptabel bærer. i i i i