DK172807B1 - Fremgangsmåde til fremstilling af 2-arylpropionsyrer, et salt eller en ester deraf, samt fremgangsmåde til isolering og udv - Google Patents
Fremgangsmåde til fremstilling af 2-arylpropionsyrer, et salt eller en ester deraf, samt fremgangsmåde til isolering og udv Download PDFInfo
- Publication number
- DK172807B1 DK172807B1 DK198602680A DK268086A DK172807B1 DK 172807 B1 DK172807 B1 DK 172807B1 DK 198602680 A DK198602680 A DK 198602680A DK 268086 A DK268086 A DK 268086A DK 172807 B1 DK172807 B1 DK 172807B1
- Authority
- DK
- Denmark
- Prior art keywords
- compound
- microorganism
- cbs
- yeast
- formula
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C57/00—Unsaturated compounds having carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms
- C07C57/30—Unsaturated compounds having carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms containing six-membered aromatic rings
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C59/00—Compounds having carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms and containing any of the groups OH, O—metal, —CHO, keto, ether, groups, groups, or groups
- C07C59/40—Unsaturated compounds
- C07C59/58—Unsaturated compounds containing ether groups, groups, groups, or groups
- C07C59/64—Unsaturated compounds containing ether groups, groups, groups, or groups containing six-membered aromatic rings
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/14—Fungi; Culture media therefor
- C12N1/145—Fungal isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
- C12P7/40—Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a carboxyl group including Peroxycarboxylic acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/645—Fungi ; Processes using fungi
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Botany (AREA)
- Mycology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Virology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Control Of El Displays (AREA)
- Magnetic Record Carriers (AREA)
- Wire Bonding (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Nitrogen And Oxygen As The Only Ring Hetero Atoms (AREA)
Description
i DK 172807 B1
Den foreliggende opfindelse angår en fremgangsmåde til fremstilling af en farmaceutisk aktiv forbindelse 1 en stereospecifik form med formlen 5 c« 3 /
Ri - cn ' (I)
COOH
10 eller et farmaceutisk acceptabelt salt eller en ester deraf, f.eks. et alkalimetal- eller jordalkalimetalsalt eller en pivaloylester, hvor Rj^ betegner en substitueret arylgruppe såsom en phenyl- eller naphthylgruppe.
Opfindelsen angår også en fremgangsmåde til iso-15 lering og udvælgelse af mikroorganismer fra naturlige kilder.
Det er kendt, at mange biologisk aktive forbindelser findes som en blanding af stereoisomere. Hidtil er disse blandinger ofte benyttet som sådanne ved agri-20 kulturelle og farmaceutiske anvendelser. Den ønskede biologiske aktivitet ligger sædvanligvis i én stereoisomer, således at blandingens styrke reduceres til mindst det halve i tilfælde af en blanding af to eller flere stereoisomere. En betydelig grund til at man stadigvæk 25 anvender blandinger af stereoisomere er den, at de ste-reolsomeres adskillelsesomkostninger overstiger den mulige fordel ved en forøgelse af virkningen. Det er imidlertid klart, at nutidens farmakologer bliver mere og mere opmærksomme på andre implikationer af administre-30 ringen af blandinger, hvor en eller flere stereoisomere må betragtes som urenheder, der kan mangle den ønskede terapeutiske virkning, men som også kan have andre uønskede fysiologiske virkninger herunder toxicitet.
DK 172807 B1 ; 2 j Mere specielt har det vist sig, at naproxens så- ; vel som ibuprofens in vitro anti-inflammatoriske akti- vitet ligger i S-enantiomeren (optisk aktiv stereoisomer), der er op til 150 gange så aktiv som dens antipode 5 som det er kendt f.eks. fra S. Adams et al., J. Pharm.
Pharmac. , 28 (1976) 256 og A.J. Hutt og J. Caldwell,
Clinical Pharmacokinetics 9 (1984) 371.
Den selektive fremstilling af ibuprofens inaktive R-enantiomer ved anvendelse af den mikrobielle_oxidaiian. .
10 af l-isobutyl-4-(l'-methyloctyl)benzen, et aromatisk carbonhydrid som har en passende ikke-funktiQ^l.._alif.a-tisk sidekæde, kendes fra T. Sugai og K. Mori (Agrlc.
Biol. Chem. 4J3 (1984) 2501). Der er derfor stadigvæk et stort behov for en fremgangsmåde i industriel-Skala^, der 15 giver anledning til økonomisk fordelagtige udbytter, til fremstillingen af disse S-enantiomere. Formålet med opfindelsen er at tilvejebringe en sådan fremgangsmåde.
Som et resultat af vidtgående undersøgelser og forsøg har man nu overraskende fundet en forbedret., syn-20 tese til fremstillingen af især S-enantiomerene af forbindelsen (I), og denne fremgangsmåde er ejendommelig ved, at man udsætter en forbindelse med formlen CH3 25 ^
Ri - CH
\ (II) CH 3 hvor har den ovennævnte betydning, for indvirkningen 30 af en mikroorganisme i form af en gær eller en fungus, som tilhører slægten Cordyceps, Graphlum eller Exophia-la, og/eller i form af en gær eller fungus, som isoleres og udvælges fra naturlige kilder ved anvendelse af en '*T* f m
i' iK
3 DK 172807 B1 2-(R^)-alkan som C-kilde i et egnet medium, eventuelt i immobiliseret form i en polymergel, med evne til ste-reoselektiv oxidation af forbindelsen (II) til forbindelsen (I) med mindst 70 vægt% S-konfiguration, og 5 om ønsket omdanner forbindelse (I) til et farmaceutisk acceptabelt salt eller en ester deraf.
Opfindelsen angår også, som nævnt indledningsvis, en fremgangsmåde til isolering og udvælgelse, fra naturlige kilder, af mikroorganismer, som kan anvendes ved 10 fremgangsmåden som beskrevet ovenfor, og den er ejendommelig ved, at mikroorganismer med evne til stereoselek-tiv oxidation af en forbindelse med formlen 15 /CH> R1 " CR (II) ^ CH3 20 hvor Rj betegner en substitueret arylgruppe såsom en phenyl- eller naphthylgruppe, til en forb.indels_e_med formlen ^CH3
25 Rj - CH
^ C00H (I) hvori Rj har den ovenfor anførte betydning, med mindst 30 70 vægt% S-konfiguration, isoleres og udvælges, idet der som C-kilde benyttes en 2-^)-alkan i et egnet medium.
Mere specielt angår den foreliggende opfindelse en fremgangsmåde til overvejende fremstilling af en far- 4 DK 172807 B1 maceutisk aktiv forbindelse i stereospecifik S-konfigu-rat ionsform med formlen (I) eller et farmaceutisk ..acceptabelt salt eller en ester deraf, fortrinsvis et alkali^ metalsalt eller et jordalkalimetalsalt, hvor_R1 er en 5 eventuelt substitueret arylgruppe såsom en phenyl- eller naphthylgruppe, hvor dette ringsystem eventuelt er substitueret, og hvor man udsætter en forbindelse med formlen (ΙΓ) for indvirkningen af en mikroorganisme med evne til stereoselektiv oxidation af forbindelse (il) 10 til forbindelse (I). Forbindelsen (I) er fort'rinsvis”li’a-proxen, ibuprofen, suprofen, fenoprofen, ketoprofen, be-noxaprofen, carprofen, cicloprofen, pirprofen, lisipro-fenum, flurbiprofen, fluprofen, clidanac, tertiprofen, hexaprofen, indoprofen, mexoprofen, pranoprofen, fure-15 profen, protizinsyre, tiaprofensyre eller brofezil.
Fortrinsvis fremstilles ifølge den foreliggende fremgangsmåde naproxen eller ibuprofen hovedsagelig i S-konfigurationen.
Ifølge en foretrukken udførelsesform gennemføres 20 fremgangsmåden ved, at man udvælger en egnet mikroorganisme på en måde så forbindelse (I) dannes deraf med mindst 90 vægt* i S-konfigurationen.
Egnede mikroorganismer er f.eks. fungi, gær-lignende fungi og gærsvampe, især mikroorganismerne til 25 oxidationen af forbindelse (II) til naproxen'"eller ibuprofen omfatter kulturer af fungi, der tilhører' slægten Cordyceps og mere specielt kulturer af arten Cordy-ceps militaris (en stamme af denne art er deponeret som eksempel hos CBS under accessionsnummeret 267.85 den 30 7. juni 1985).
ved en udførelsesform ifølge opfindelsen kan mikroorganismerne med evnen til stereoselektiv_jo.xidation af forbindelsen (II) til forbindelse (I) udvælges ved anvendelse af en 2-(R1)-alkan (R^^ har den ovennævnte be- 5 DK 172807 B1 tydning ) som C-kilden i et egnet medium. 2-(6-Methoxy- 2-naphthyl)alkan anvendes hensigtsmæssigt til udvælgelsen af mikroorganismer med evne til fremstilling af naproxen, idet alkanen hensigtmæssigt er pent'én7 'heptan~ 5 eller nonan. Et egnet medium er f.eks. et PS Ill-salt-, medium beriget med en vitaminopløsning og/eller 0,01% gærekstrakt.
En række mikroorganismer isoleret fra-n¥£urITge" kilder, især fra jordprøver, udvælges ifølg'e "den'"oven- ” 10 stående sorteringsmetode, og når de udsættes for yderligere prøver, som beskrives i det efterfølgende, viser de deres evne til stereoselektiv oxidation af forbindelse (II) til forbindelse (I).
Nylig opdagede mikroorganismer ifølge opfindelsen 15 isoleres fra jordprøver under anvendelse af 2,5"g/1 2-(6-methoxy-2-naphthyl)heptan som en C-kilde i PS III-saltmedium beriget med en vitaminopløsning og/eller 0,01% gærekstrakt.
Sammensætningen af et PS III-saltmedium Inde- 20 holder: KH2P04 (2,1 g/1), (NH4)2HP04 (1,0 g/1), (NH4)2S04 (0,9 g/1), KCl (0,2 g/1), CaS04. 2 H20 (0,005 g/1), MgS04. 7 H20 (0,2 g/1), (NH4)2S04.FeS04. 6 H20 (2,5 mg/1), ZnS04.
7 H20 (0,5 mg/1), MnCl2. 4 H20 (0,3 mg/1), CuS04. 5 H20 25 (0,15 mg/1), CoCl2. 6 H20 (0,15 mg/1), H3BO3 (0,05 mg/1), Na2Mo04. 2 H20 (0,055 mg/1), Kl (0,1 mg/1).
pH justeres til 6,8. Mediet steriliseres i 20 min. ved 120°C.
Sammensætningen af vitaminopløsningen indeholder: 30 biotin (0,002 mg/1), calciumpantothenat (0,4 mg/1), inositol (2,0 mg/1), nicotinsyre (0,4 mg/1), thiamin-HCl (0,4 mg/1), pyridoxin-HCl (0,4 mg/1), p-amlnolfenzo'ésyfe (0,2 mg/1), riboflavin (0,2 mg/1), folsyre (070T nig/lj .
6 DK 172807 B1 pH justeres til 7,0 og mediet steriliseres ved anvendelse af et membranfilter.
De nylig opdagede mikroorganismér “renses med agarstørknet medium.
5 Eksempler på sådanne kulturer er deponeret hos CBS. Mikroorganismer til oxidationen af 2-(6-methoxy- 2-naphthyl)propan til naproxen, opnået ved den ovennævnte isolations- og udvælgelsesmetode, omfatter kulturer af arten Fungus 27-2, l-2x (en stamme af denne art er 10 deponeret som eksempel hos CBS under accessionsnummeret 256.86 den 15. maj 1986), arten Yeast 27-1," ϊ2 (en stamme af denne art er deponeret som eksempel hos CBS under accessionsnummeret 257.86 den 15. maj 1986), arten Yeast 27-2, II7 (en stamme af denne art er deponeret i 15 som eksempel hos CBS under accessionsnummeret 259.86 den 15. maj 1986), og arten Yeast 22-2, I5 (en stamme af denne art er deponeret som eksempel hos CBS under accessionsnummeret 258.86 den 15. maj 1986).
Til formålet ifølge opfindelsen anvendes mikro-20 organismerne fordelagtigt i immobiliseret form med en polymergel.
Ifølge en foretrukken udførelsesform for fremgangsmåden ifølge opfindelsen skal en mikroorganisme med evne til at omdanne forbindelse (II) til forbindel-25 se (i), hvor mindst 70 vægt% har S-konfigurationen, dyrkes i ca. V4 til 10 dage, hvorefter cellerne opslæmmes i et flydende næringsmedium, fortrinsvis et miminalt flydende næringsmedium, og forbindelse (II) udsættes for indvirkningen af cellerne. Efter den ovennævnte dyrkning 30 i ca. 1 til 10 dage kan cellerne isoleres fra dyrkningsmediet, før de opslæmmes i det minimale flydende næringsmedium. Til dyrkning af mikroorganismerne, der anvendes til den selektive oxidation af forbindelse (II),
f S
7 DK 172807 B1 kan man anvende sædvanlige dyrkningsmedier indeholdende en asslmilerbar carbonkilde (f.eks. glucose, lactat, saccharose osv.)/ en nitrogenkilde (f.eks. amoniumsul-fat, ammoniumnitrat, ammoniumchlorid osv.), med et mid-5 del til en organisk næringskilde (f.eks. gærekstrakt, maltekstrakt, pepton, kødekstrakt osv.) og en uorganisk næringskilde (f.eks. phosphat, magnesium, kalium, zink, jern og andre metaller i spormængder). Som et foretrukket dyrknings-medium anvendes et Czapek-Dox-, et BHI-10 eller et YEPD medium eventuelt beriget med en eller flere bestanddele.
En temperatur på mellem 0 og 45°C og et pH mellem 3,5 og 8 opretholdes under dyrkningen af mikroorganismerne. Mikroorganismerne dyrkes fortrinsvis ved en 15 temperatur på mellem 20 og 37°C og ved et pH mellem 4 og 7.
De aerobe betingelser der kræves under mikroorganismernes vækst kan tilvejebringes ved en vilkårlig af de almindeligt anerkendte fremgangsmåder, forudsat at 20 oxygentilførslen er tilstrækkelig til opfyldelse af mikroorganismernes metaboliske behov. Dette opnås mest hensigtsmæssigt ved tilførsel af oxygen fortrinsvis i form af luft. Under omdannelsen af forbindelse,.(II) til forbindelse (I) kan mikroorganismerne være i en vækst-25 fase under anvendelse af et af de ovennævnte sædvanlige dyrkningsmedier.
Mikroorganismerne kan under omdannelsen, af forbindelse (II) til forbindelse (I) fortrinsvis holdes 1 en hovedsagelig ikke-vækstfase ved anvendelse af et mi-30 nimalt dyrkningsmedium. Som minimal dyrkningsmedium kan anvendes et almindeligt dyrkningsmedium indeholdende en asslmilerbar carbonkilde, når en sådan kræves (f.eks. glucose, lactat, saccharose osv.), en nitrogenkilde, når 8 DK 172807 B1 en sådan kraves (f.eks. ammonlunsulfat, ammoniumnitrat, ammoniumchlorid osv.)/ med et middel til en organisk næringskilde, når et sådant kræves (f.eks. gæfékstråkty maltekstrakt, pepton, kødekstrakt osv.) og en uorganisk 5 næringskilde, når en sådan kræves (f.eks. phosphat, magnesium, kalium, zink, jern og andre metaller i spormængder). Mikroorganismerne kan holdes i ikke-vækstfasen f.eks. ved udelukkelse af den assimilerbare carbonkilde eller ved udelukkelse af nitrogenkilden. En temperatur 10 på mellem 0 og 45°C og et pH mellem 3,5 og 8 opretholdes under denne fase. Mikroorganismerne holdes fortrinsvis ved en temperatur på mellem 20 og 37"c og et pH mellem 4 og 7. De aerobe betingelser, der kræves under denne fase, kan tilvejebringes ifølge de ovennævnte fremgangsmå-15 der, forudsat at oxygentilførslen er tilstrækkelig til opfyldelse af mikroorganismernes metaboliske behov, men også til at omdanne forbindelse (II) til forbindelse (I). Forbindelsen (I) fremstillet ved hjælp af mikroorganismerne som nævnt ovenfor, kan udvindes og renses 20 ifølge en vilkårlig af de fremgangsmåder, der kendes for sådanne produkter.
Opfindelsen belyses nærmere ved hjælp af de efterfølgende eksempler.
25 Eksempel 1
Omdannelsen af 2-(6-methoxy-2-naphthyl)propan til S-2-(6-methoxy-2-naphthyl)propionsyre under anvendelse af Cordyceps mllitarls (CBS 267.85).
30
Cordyceps militaris holdes på Czapek-Dox agar-skråkulturer. Fra disse podes den i beriget Czapek-Dox medium med følgende sammensætning: natriumnitrat (3 i 9 DK 172807 B1 g/1), dikaliumhydrogenphosphat (1 g/1), magnesiumsul fat. 7 H2O (0,5 g/1), ferrosulfat.7 H2O (0,01 g/1), maltekstrakt (1 g/1), gærekstrakt (1 g/1) og saccharose (20 g/1), pH justeret til 6,5.
5 Svampen dyrkes ved 25°C i 6 dage i en 500 ml rystekolbe indeholdende 100 ml medium, medens rystning og aerobe betingelser opretholdes.
Til den 6 dage gamle kultur sættes 20 mg 2-(6- methoxy-2-naphthyl)propan opløst i tetradecan__(50 mg 10 substrat/ml tetradecan). Kulturen inkuberes yderligere"i 6 dage ved 25°C, medens rystning og aerobe betingelser opretholdes.
Til analysen gøres kulturerne sure til pH 2,0 med 85% H^PC^, en lille mængde ammoniumsulfat tilsættes, og 15 blandingen ekstraheres dernæst med dichlormethan. .....
Dichlormethanekstrakterne analyseres på TLC (tyndtlagschromatografi) plader (Merck, for-belagte TLC
plader silicagel 60 F-254 med fluorescens indikator y.’......
Pladerne elueres med ethylacetat-hexan (1:5 vol/vol).
20 De ekstrakter, hvori forbindelser findes med den samme'
Rf_værdi som naproxen, derivatiseres til naphthalenme-thylamider og adskilles med HPLC.
Derivatiseringsfremgangsmåde: 25 2 ml dichlormethanekstrakt tørres under éh strøm af N2. Den tørrede prøve omsættes med 200 yl benzen + 10 pi thionylchlorid i 10 minutter ved 60°C.
Reaktionsblandingen tørres under N2.
Naphthalenmethylamin 5% opløst i tørret dichlor-30 methan tilsættes dernæst (200 μΐ) og reaktionen fortsættes i 1 time ved stuetemperatur. Reaktionsblandingen tørres under N2 og ekstraheres dernæst med 2 ml isooc-tan/chloroform (2:1 vol/vol) og 2 ml HCl, IN.
10 DK 172807 B1
Resultaterne af HPLC analysen viser tilstedeværelsen af 8,2 mg S-naproxen og 0,09 mg R-naproxen pr. kultur. Dette svarer til en enantiomerisk fordeling på 98,9% S- og 1,1% R-naproxen.
5
Eksempel 2 I et forseg svarende til eksempel 1 høstes mycelium fra en 6 dage gammel kultur og geninkuberes i 50 ml 10 ASM-medium, medens rystning og aerobe betingelser opretholdes .
Sammensætningen af et ammoniumsaltmedium (ASM) indeholder ammoniumchlorid (0,54 g/1), kaliumdihydrogen-phosphat (0,53 g/1), dinatriumhydrogenphosphat (0,87 15 g/1), kaliumsulfat (0,17 g/1), magnesiumsulfat.7 H20 (0,07 g/1), calciumchlorid. 2 H20 (0,073 g/1), TK3 sporelementopløsning (1,0 ml/1) og ferrosulfat.7 H20 (0,019 g/1) tilsat efter autoklavering, pH indstillet på 7,0.
Substratet, 20 mg 2-(6-methoxy-2-naphthyl)-propan opløst 20 i tetradecan sættes til kulturen og inkuberes yderligere i 6 dage ved 25°C. Ekstraktion, TLC-analyse, derivatise-ring og HPLC-analyse gennemføres som beskrevet i eksempel i.
Man opnår en total mængde på 6,4 mg S-naproxen 25 og 0,003 mg R-naproxen pr. kultur. Dette svarer til en enantiomerisk fordeling på 99,5% S- og 0,5% R-naproxen.
DK 172807 B1 11
Eksempel 3
Omdannelsen af 2-(4-isobutylphenyl)-propan' til S-2-(4-lsobutylphenyl)proplonsyre under anvendelse ar Cordyceps 5 militarls (CBS 267.85).
Flere 500 ml charger af Cordyceps militarls dyrkes i det supplerede Czapek-Dox medium ved-25eC i et rotationsrysteapparat under aerobe betingelser_T~5’"'dagé.
10 En Czapek-Dox blanding som er tilpasset ifølge "The Oxo-id Manual" indeholder: natriumnitrat (2,0 g/lj , k'alium-chlorid (0,5 g/1), magnesiumglycerophosphat (0,5 g/1), ferrosulfat (0,01 g/1), kaliumsulfat (0,35 g/1) og saccharose (30 g/1). Én liter dyrkningsblanding filtreres 15 (Whatman No. 1), genopslæmmes i 500 ml ASM-medium og inkuberes med 2-(4-isobutylphenyl)propan (0,34 g, 0,4 ml) ved 25°C i et rysteapparat under aerobe betingelser' i 5 dage. Inkubationsblandingen filtres, og filtratet gøres surt til pH 2,0 med IN HCl, og ekstraheres med dichlor-20 methan. Produktet identificeres ved anvendelse af GLC som viser tilstedeværelsen af den krævede syreT'Méthy-lenchloridet ekstraheres med natriumhydrogencarHcmat som gøres sur med IN HCl og ekstraheres påny med methylen-chlorid. Opløsningsmidlet afdampes til opnåelse af rå-25 produktet 2-(4-isobutylphenyl)-propionsyre. Det urene produkt renses i 30 mg charger under anvendelse af en silicagelkolonne præpareret i hexan og elueres med 5% diethylether i hexan. S-2-(4-isobutylphenyl)-propionsyre fås og analyseres som en enkelt komponent på GLC og TLC.
30 Totalt fås 43 mg S-2-(4-isobutylphenyl)propion- syre som analyseres som en enkelt komponent på GLC og TLC og hvis PMR-spektrum er i overensstemmelse med den racemiske forbindelse. PMR (CDCl3)fi: 0,9 (d,6H,CH- (CH3)2; 1,5 (d,3H, CH-CH3); 1,05 (m, IH, CH-(CH3)2); 12 DK 172807 B1 2,45 (d,2H, -CH2-); 3,7 (q, IH, -CH-CH3); 7,1-7,25 (m, 4H, aromatisk). Spor af urenheder fjernes ved præparativ HPLC under anvendelse af en Spherisorb~5 5 NH ko-lonne (25 cm x 4,9 mm i.d.) idet der elueres med 20% 5 isopropanol i hexan/dichlormethan (60/40, yol/vol) ved 2 ml/min.
Der anvendes gentagne injektioner til opsamling af 4 mg S-2-(4-lsobutylphenyl)propionsyre, som elueres ved 3,2 min.
10 Den enantiomeriske renhed af S-2-(4-isobutylphe- nyl)propionsyre bestemmes ved at analysere sammensætningen af de diastereoisomere amider dannet med S-(-)-a-methylbenzylamin. Resultaterne af HPCL-analyseTi viser tilstedeværelsen af 90% diastereoisomer_£¥ar_ende__±il_ 15 S-2-(4-isobutylphenyl)propionsyre med retentionstid 2,89 min. og 10% diastereoisomer svarende til R-2-(4-isobu-tylphenyl)propionsyre med retentionstid 2,4S"mTn7
Eksempel 4 20
Omdannelse 1 præparativ skala under anvendelse af Cordyceps milltarls (CBS 267.85).
Den almindelige fremgangsmåde til fremstillingen 25 af 2-(6-methoxy-2-naphthyl)propionsyre medfører dyrkning af adskillige charger af organismen i Czapek-Dox, der er suppleret med 0,1% maltekstrakt og 0,1% gærekstrakt, i 5 dage ved 25°C. Myceliet fra 2 x 500 ml kulturer filtreres (Whatman No. 1 papir), genopslæmmes i 500 ml am-30 moniumsaltmedium og behandles med 200 mg 2-(6-methoxy- 2-naphthyl)propan i 2 ml dlmethylformamld. I nogle til-fælde filtreres myceliet fra en 500 ml kultur og genopslæmmes i 500 ml medium med 100 mg 2-(6-methoxy-2-naph- 13 DK 172807 B1 thyl)propan i 1 ml dimethylformamid. Inkubationerne holdes ved 25°C i 6 dage i en inkubator med rotationsrysteapparat.
Filtratet fra inkubationerne gøres sur til pH 2,0 5 med 2N HCl og ekstraheres med methylenchlorid som ek-straheres med 1% NaHCOj for at fjerne syrerne. Hydrogen-carbonatekstrakten gøres sur til pH 2,0 med 2N HCl, og de udfældede syrer udvindes ved filtrering. De rå syrer renses i portioner, hvor ca. 30-50 mg uren 2-(6-methoxy-10 2-naphthyl)propionsyre renses på en kolonne (1 cm x 7 cm) af silicagel (mesh 60-120) præpareret i hexan. Den rene 2-(6-methoxy-2-naphthyl)propionsyre elueres under anvendelse af diethylether i hexan (3/7, vol/vol), og renheden kontrolleres ved anvendelse af det førnævnte 15 tyndtlagschromatografisystem. Rene prøver af syren omkrystalliseres af acetone/hexan.
S-2-(6-methoxy-2-naphthyl)propionsyre under anvendelse af Cordyceps mllltaris (CBS 267.65).
20 Omdannelsen af 800 mg 2-(6-methoxy-2-naphthyl)- propan giver 50 mg hydrogencarbonatekstrakt som efter chromatografi giver 40 mg ren S-2-(6-methoxy-2-naph-thyl)propionsyre, der analyseres som én komponent på GLC og TLC, med [a]D25 - +58,1°, (C 1,24, CHCl 3) . Om-25 krystallisation giver materiale med smp. 152-I53ec (litt. smp. 152-154eC), [a]D25 = + 62,2° (C = 1,08, CHCl3), (litt. [d]D25 - +66°); PMR (CHCl 3) : δ 1,6 (d,3H, CH-CH3) 3,92 (S, 3H, OCH3) 3,88 (q, IH, CH) og 7-8 (m, 6H, aromatisk) iden- 30 tisk med kommercielt S-naproxen,
Massespektrometri med hurtigt atombombardement giver signaler ved m/z 23l[M+H] + , 185 [M - HC02H + H] + ,323 [M+6+H]+, 115 [G + Na]+ og 229 [Μ - Η]-, 321 [M+G-H]“ 14 DK 172807 B1 (G « glycerol).
M&llng af optisk renhed af R- og S-2-(6-methoxy-2-naph-thyljproplonsyrer ved omdannelse til de dlastereolsomere 5 amider med s-(-)-a-methylbenzylamin og adskillelse på HPLC
2-(6-Methoxy-2-naphthylJpropionsyren isoleret fra Cordyceps militaris omdannes til amidet under anvendelse af S-(-)-a-methylbenzylamin under betingelser som er 10 beskrevet. Produktet analyseres ved anvendelse af HPLC, som forklaret i det efterfølgende, hvilket giver følgende resultater, den chromatografiske sammensætning af de dannede diaste-reoisomere er 3,4% R-2-(6-methoxy-2-naphthyl)propion- 15 amid (5,73 min) og 96,6% S-2-(6-methoxy-2-naphthyl)pro-pionamid (6,78 min), kommerciel naproxen giver 5% R-2-(6-methoxy-2-naphthyljpropionamid (4,08 min) og 95% S-2-(6-methoxy-2-naphthyl)propionamid (4,83 min).
2 0 Høj tryksvæskechromatografisystem til adskillelse af de dlastereolsomere amider dannet under anvendelse af RS-R- eller S-2-(6-methoxy-2-naphthvl)proplonsyre med R-eller S-a-methylbenzylamln.
Et Gilson Isocratic HPCL-system anvendes med ul-25 traviolet detektering ved 250 nm. En Spherisorb S5NH kolonne (25 cm x 4,9 mm i.d.) benyttes under omgivelsesbetingelser. Den mobile fase, 25% (dichlormethan-iso-propanol, 9:1) i hexan benyttes med en strømhastighed på 2 ml/min. Typiske retentionstider er 4,0 min for S,R- og 30 R,S-diastereoisomerene og 4,8 min for S,S- og R,R-dia-stereoisomere.
DK 172807 B1 15
Eksempel 5
Stammerne Fungus 27-2, l-2x (CBS 256.86), Yeast 27-1, I2 (CBS 257.86), Yeast 22-2, I5 (CBS 258.86) og Yeast 27-2, II7 (CBS 259.86) afprøves for deres mulige 5 evne til at oxidere 2-(6-methoxy-2-naphthyl)-propan.
Stammerne dyrkes i 100 ml dyrkningsmedium i 48 timer ved 30DC. Dernæst sættes til kulturerne 20 mg 2-(6-methoxy- 2-naphthyl)propan opløst i 0,4 ml tetradecan, og der inkuberes yderligere i 3 eller 4 dage. Ved hvert tidspunkt 10 ekstraheredes to gange 200 ml kultur for hver mikroorganisme med dichlormethan. Den dan nede naproxen deriva-tiseres til naphthalenmethylamider og analyseres med HPLC (se eksempel 1).
DK 172807 Bl 16
Tabel 1
Organisme Anvendt Tidspunkt Dannet %S %R
medium1 (dage) naproxen1 __ 5 Fungus 27-2, l-2x Czapek-Dox 3 3,7 98 2 (CBS 256.86) 4 7,8 95 5
Yeast 27-1, I2 YEPD 3 4,2 81 19 (CBS 257.86) 4 6,9 84 16
Yeast 22-2, I5 BHI 3 2,6 83 17 10 (CBS 258.86) 4 1,9 83 17
Yeast 27-2, II7 YEPD 3 2,9 72 28 (CBS 259.86)_4_3,1 72 28 'Czapek-Dox medium som i eksempel l.
15 Sammensætning af hjerne-hjerteinfusion (BHI): 37 g/1 BHI (Oxoid R ), pH justeres til 7,0, og mediet steriliseres i 20 min. ved 120°C.
Sammensætning af YEPD-medium: 10 g/1 gærekstrakt, 20 g/1 Bactopepton, 20 g/1 glucose, pH justeres til 7,0, og 20 mediet steriliseres i 30 min. ved 110°C.
’Den angivne værdi er den fundne mængde naproxen efter derivatisering. Hver mængde angiver middelværdien af to opnåede værdier.
Claims (5)
17 DK 172807 B1 l. Fremgangsmåde til fremstilling af en farmaceutisk aktiv forbindelse i en stereospecifik form med formlen 5 ^CH3 M - C00H (I) 10 eller et farmaceutisk acceptabelt salt eller en ester deraf, f.eks. et alkalimetalsalt eller et jordalkalime-talsalt eller en pivaloylester, hvor R^ betegner en substitueret arylgruppe såsom en phenyl- eller naphthyl-gruppe, kendetegnet ved, at man udsætter en 15 forbindelse med formlen ^αΐ3 Ri - CH \ (II) ^ CH3 20 hvori Rj^ har den ovenfor anførte betydning, for indvirkningen af en mikroorganisme i form af en gær eller en fungus, som tilhører slægten Cordyceps, Graphium eller 2 5 Exophlala, og/eller I form af en gær eller fungus, som isoleres og udvælges fra naturlige kilder ved anvendelse af en 2-(Rj)-alkan som C-kilde i et egnet medium, eventuelt i immobiliseret form i en polymergel, med evne til stereoselektiv oxidation af forbindelsen (II) til 30 forbindelsen (I) med mindst 70 vægt% S-konfiguration, og om ønsket omdanner forbindelse (I) til et farmaceutisk acceptabelt salt eller en ester deraf. 18 DK 172807 B1
2. Fremgangsmåde ifølge krav I, kendetegnet ved, at der som forbindelse (II) anvendes 2— (6-methoxy-2-naphthyl)propan eller 2-(4-isobutylphenyl)propan.
3. Fremgangsmåde ifølge krav 1 eller 2, ken detegnet ved, at der anvendes Cordyceps mili-taris og Graphlum fructicola, som er i stand til at omdanne en forbindelse (II) til en forbindelse med formlen (I) med mindst 90 vægt% S-konfiguration.
4. Fremgangsmåde ifølge kravene 1-3, kende tegnet ved, at der som mikroorganisme anvendes en fungus, som tilhører slægten Cordyceps.
5. Fremgangsmåde ifølge krav 4, kendetegnet ved, at der som mikroorganisme anvendes en
15 Cordyceps militaris, fortrinsvis Cordyceps militaris, CBS 267.85.
6. Fremgangsmåde ifølge kravene 1-3, kendetegnet ved, at der som mikroorganisme anvendes Graphium fructicola, Fungus 27-2, l-2x; CBS 256.86.
7. Fremgangsmåde ifølge kravene 1-3, kendetegnet ved, at der som mikroorganisme anvendes Exophiala mansonii, Yeast 27-1, l2; CBS 257.86.
8, Fremgangsmåde ifølge kravene 1-3, kendetegnet ved, at der som mikroorganisme anvendes
25 Exophiala mansonii, Yeast, 27-2, II7; CBS 259.86.
9. Fremgangsmåde ifølge kravene 1-3, kendetegnet ved, at der som mikroorganisme anvendes Exophiala jeanselmei, var. jeanselmei. Yeast 22-2, I5; CBS 258.86.
10. Fremgangsmåde til isolering og udvælgelse, fra naturlige kilder, af mikroorganismer, som kan anvendes ved fremgangsmåden ifølge kravene 1-9, kendetegnet ved, at mikroorganismer med evne til ste- -Λ 19 DK 172807 B1 reoselektiv oxidation af en forbindelsé med formlen ^CH3 R j - CH
5. CH3 (II) hvor betegner en substitueret arylgruppe såsom en phenyl- eller naphthylgruppe, til en forbindelse med 10 formlen ^CH3 R, - CH ^ \ 'COOH (I) 15 hvori Rj^ har den ovenfor anførte betydning, med mindst 70 vægt% S-konfiguration, isoleres og udvælges, idet der som C-kilde benyttes en 2-(R1)-alkan i et egnet me-20 dium. il. Fremgangsmåde ifølge krav 10, kendetegnet ved, at der som C-kilde benyttes forbindelser, hvor Rjl er en 6-methoxy-2-naphthylgruppe, og at alkanen er pentan, heptan eller nonan.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| GB858514489A GB8514489D0 (en) | 1985-06-07 | 1985-06-07 | Producing 2-arylpropionic acids |
| GB8514489 | 1985-06-07 |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| DK268086D0 DK268086D0 (da) | 1986-06-06 |
| DK268086A DK268086A (da) | 1986-12-08 |
| DK172807B1 true DK172807B1 (da) | 1999-07-26 |
Family
ID=10580376
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| DK198602680A DK172807B1 (da) | 1985-06-07 | 1986-06-06 | Fremgangsmåde til fremstilling af 2-arylpropionsyrer, et salt eller en ester deraf, samt fremgangsmåde til isolering og udv |
Country Status (18)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0205215B1 (da) |
| JP (1) | JPS6263592A (da) |
| CN (1) | CN86103879A (da) |
| AT (1) | ATE55415T1 (da) |
| AU (1) | AU585987B2 (da) |
| CA (1) | CA1314012C (da) |
| DE (1) | DE3673248D1 (da) |
| DK (1) | DK172807B1 (da) |
| ES (1) | ES8707298A1 (da) |
| FI (1) | FI862435A (da) |
| GB (1) | GB8514489D0 (da) |
| GR (1) | GR861483B (da) |
| HU (1) | HU211052B (da) |
| IE (1) | IE60284B1 (da) |
| IL (1) | IL79036A (da) |
| NO (1) | NO167303C (da) |
| PT (1) | PT82725B (da) |
| ZA (1) | ZA864254B (da) |
Families Citing this family (13)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| HU197942B (en) * | 1985-12-20 | 1989-06-28 | Wisconsin Alumni Res Found | Process for producing (s)-alpha-methyl-aryl-acetic acids |
| GB8600245D0 (en) * | 1986-01-07 | 1986-02-12 | Shell Int Research | Preparation of 2-arylpropionic acids |
| AU599438B2 (en) * | 1986-12-01 | 1990-07-19 | Gist-Brocades N.V. | Process for the preparation of 2-arylpropionic acids |
| US4883818A (en) * | 1987-11-17 | 1989-11-28 | Analgesic Associates | Onset-hastened/enhanced analgesia |
| GB8728064D0 (en) * | 1987-12-01 | 1988-01-06 | Shell Int Research | Process for preparation of substituted phenoxy propanoic acids |
| US5286751A (en) * | 1987-12-24 | 1994-02-15 | Analgesic Associates | Sustained/enhanced antipyretic response |
| US4927854A (en) * | 1987-12-24 | 1990-05-22 | Analgesic Associates | Sustained/enhanced analgesia |
| HUT54610A (en) * | 1989-05-16 | 1991-03-28 | Puetter Medice Chem Pharm | Process for producing optically active 2-aryl-alkanoil acids, first of all 2-aryl-propionic acids |
| US5266723A (en) * | 1989-05-16 | 1993-11-30 | Medice, Ltd., Chem.-Pharm. Fabrik Putter Gmbh & Co. Kg | Process for the preparation of optically active 2-aryl-alkanoic acids, especially 2-aryl-propionic acids |
| US5286902A (en) * | 1991-04-15 | 1994-02-15 | Koch Industries, Inc. | Process for preparation of 2-(6-methoxy-2-naphthyl)propionic acid and intermediates therefor utilizing 2,6-diisopropylnaphthalene |
| US5434302A (en) * | 1994-02-18 | 1995-07-18 | Paradies; H. Henrich | Method for the preparation of optically active 2-aryl alkyl aldehydes and formation of 2-aryl-alkanoic acids therefrom |
| US5750764A (en) * | 1995-11-17 | 1998-05-12 | Aeci Limited | Synthesis and resolution of propionic acid derivatives |
| CN101416961B (zh) * | 2008-11-21 | 2012-02-15 | 合肥金科生物医药科技有限公司 | 一种苯丙酸类药物光学异构体及其制药用途 |
Family Cites Families (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3419469A (en) * | 1965-12-08 | 1968-12-31 | Sun Oil Co | Production of carboxylic acids by microbiological oxidation of hydrocarbons |
| JPS5439043A (en) * | 1977-09-01 | 1979-03-24 | Ajinomoto Co Inc | Preparation of phenylalkane carboxylic acids |
| DE3116474A1 (de) * | 1981-04-25 | 1982-11-11 | Basf Ag, 6700 Ludwigshafen | Verfahren zur herstellung von optisch aktiven carbonsaeuren |
| JPS5829719A (ja) * | 1981-08-14 | 1983-02-22 | Hiroyuki Nohira | 光学活性フエニルグリシノ−ルを用いるキラルカルボン酸の光学分割法 |
| EP0130752B1 (en) * | 1983-07-04 | 1991-02-27 | Mitsubishi Rayon Co., Ltd. | Process for preparing optically active carboxylic acids and antipode esters thereof |
| DE3345660A1 (de) * | 1983-12-16 | 1985-06-27 | Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim | Verfahren zur gewinnung von d(+)naproxen |
| IT1201408B (it) * | 1985-03-22 | 1989-02-02 | Montedison Spa | Processo per la preparazione biotecnologica di acidi alfa-arilalcanoici otticamente attivi |
-
1985
- 1985-06-07 GB GB858514489A patent/GB8514489D0/en active Pending
-
1986
- 1986-06-04 DE DE8686200987T patent/DE3673248D1/de not_active Expired - Fee Related
- 1986-06-04 AU AU58326/86A patent/AU585987B2/en not_active Ceased
- 1986-06-04 AT AT86200987T patent/ATE55415T1/de not_active IP Right Cessation
- 1986-06-04 EP EP86200987A patent/EP0205215B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1986-06-04 IL IL79036A patent/IL79036A/xx not_active IP Right Cessation
- 1986-06-05 NO NO862244A patent/NO167303C/no not_active IP Right Cessation
- 1986-06-06 GR GR861483A patent/GR861483B/el unknown
- 1986-06-06 ES ES555838A patent/ES8707298A1/es not_active Expired
- 1986-06-06 PT PT82725A patent/PT82725B/pt unknown
- 1986-06-06 DK DK198602680A patent/DK172807B1/da not_active IP Right Cessation
- 1986-06-06 JP JP61131689A patent/JPS6263592A/ja active Pending
- 1986-06-06 ZA ZA864254A patent/ZA864254B/xx unknown
- 1986-06-06 FI FI862435A patent/FI862435A/fi not_active Application Discontinuation
- 1986-06-06 IE IE150986A patent/IE60284B1/en unknown
- 1986-06-06 CA CA000511059A patent/CA1314012C/en not_active Expired - Fee Related
- 1986-06-06 HU HU862401A patent/HU211052B/hu not_active IP Right Cessation
- 1986-06-07 CN CN198686103879A patent/CN86103879A/zh active Pending
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| NO167303C (no) | 1991-10-23 |
| FI862435A0 (fi) | 1986-06-06 |
| EP0205215B1 (en) | 1990-08-08 |
| ES8707298A1 (es) | 1987-07-16 |
| IL79036A (en) | 1991-09-16 |
| AU585987B2 (en) | 1989-06-29 |
| IE60284B1 (en) | 1994-06-29 |
| CN86103879A (zh) | 1987-04-08 |
| EP0205215A3 (en) | 1987-04-08 |
| JPS6263592A (ja) | 1987-03-20 |
| HUT41840A (en) | 1987-05-28 |
| DK268086D0 (da) | 1986-06-06 |
| AU5832686A (en) | 1986-12-11 |
| DE3673248D1 (de) | 1990-09-13 |
| ES555838A0 (es) | 1987-07-16 |
| DK268086A (da) | 1986-12-08 |
| IL79036A0 (en) | 1986-09-30 |
| FI862435A (fi) | 1986-12-08 |
| ZA864254B (en) | 1987-08-26 |
| HU211052B (en) | 1995-10-30 |
| ATE55415T1 (de) | 1990-08-15 |
| IE861509L (en) | 1986-12-07 |
| NO167303B (no) | 1991-07-15 |
| GB8514489D0 (en) | 1985-07-10 |
| PT82725B (pt) | 1988-04-21 |
| NO862244L (no) | 1986-12-08 |
| GR861483B (en) | 1986-10-07 |
| CA1314012C (en) | 1993-03-02 |
| EP0205215A2 (en) | 1986-12-17 |
| PT82725A (en) | 1986-07-01 |
| NO862244D0 (no) | 1986-06-05 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| DK172807B1 (da) | Fremgangsmåde til fremstilling af 2-arylpropionsyrer, et salt eller en ester deraf, samt fremgangsmåde til isolering og udv | |
| US4762793A (en) | Process for the biotechnological preparation of optically active alpha-arylalkanoic acids | |
| Martin et al. | Production of trans-L-epoxysuccinic acid by fungi and its microbiological conversion to meso-tartartic acid | |
| EP0274146B1 (en) | Process for the preparation of 2-arylpropionic acids | |
| US5043274A (en) | Process for producing an optically active 2-arylpropionic acid | |
| NO168714B (no) | Fremgangsmaate for fremstilling av r-2,2-r1,r2-1,3-dioksolan-4-metano | |
| US5037759A (en) | Process for the preparation of substituted phenoxy propanoic acids | |
| Hanlon et al. | Microbial metabolism of 2‐arylpropionic acids: effect of environment on the metabolism of ibuprofen by Verticillium lecanii | |
| US5811294A (en) | Production of optically active 1,2-dihydroxyindance derivatives by asymetric assimilation | |
| FI86891B (fi) | Foerfarande foer framstaellning av 4-(2-metoxietyl)-fenylglycidyleter och/eller metoprolol. | |
| JPH01104195A (ja) | ２−アリールオキシプロピオン酸の製造方法 | |
| EP1576194B1 (de) | Bakterienstämme delftia acidovorans mc1-r, ihre herstellung sowie ihre verwendung zur produktion der r-enantiomeren von 2-phenoxypropionsäure-derivaten | |
| US4956285A (en) | Process for the preparation of S-2,2-R1,R2 -1,3 -dioxolane-4-methanols | |
| US4956284A (en) | Process for producing 4-(2-methoxyethyl)-phenyl-glycidyl ether and/or metoprolol | |
| US4673646A (en) | Production of 2-hydroxymuconic semialdehyde | |
| JPH0473999B2 (da) | ||
| GB2160866A (en) | Preparing 2-arylpropionic acids | |
| JPS63126492A (ja) | 立体特異型の４−（２，３−エポキシプロポキシ）フェニル酢酸エステル、４−（２−ヒドロキシ−３−イソプロピルアミノプロポキシ）フェニル酢酸エステル及び（又は）アテノロ−ルの製造方法 | |
| HU197944B (en) | Process for producing chanoclavine | |
| WO1990012798A2 (en) | Cyclohexadienediols and their use | |
| JPS6225997A (ja) | 光学活性シアノヒドリン誘導体の製造方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| B1 | Patent granted (law 1993) | ||
| PBP | Patent lapsed |