DK172775B1 - Dyrefoderadditiv med et indhold af et flavanoidholdigt mimosa-ekstrakt og dyrefoder indeholdende samme samt fremgangsmåde t - Google Patents

Description

i DK 172775 B1

Den foreliggende opfindelse angår et dyrefoderadditiv, som omfatter en flavanoidholdig ekstrakt, der er udvundet fra en plante tilhørende familien Mimosaceae. samt et dyrefoder indeholdende et sådant additiv. Additivet kan gives direkte til dyr, der har behov herfor, men er navnlig beregnet til iblanding i et foder eller en drik beregnet til det/de 5 pågældende dyr. Additivet og foder eller drik indeholdende dette er i stand til at bekæmpe og/eller forebygge diarré og anden mave-tarmkanalforstyrrelse eller -lidelse hos dyr, fremme væksten af og/eller forøge foderudnyttelsen i dyr, som fodres med additivet eller det/den additivholdige foder eller drik.

10 Additivet og det additivholdige foder er navnlig beregnet til produktionsdyr i landbruget, såsom svin, kvæg, får, geder, heste og høns samt andet fjerkræ og deres afkom, såsom spæd- og smågrise, kalve, lam, kid, føl og kyllinger m.m., men er også anvendeligt til kæledyr, såsom hunde og katte og deres afkom.

1S Opfindelsens baggrund

Igennem de seneste årtier er der i landbrugets husdyrproduktion sket en større og større rationalisering, specialisering og intensivering, således at der på den enkelte landbrugsbedrift i dag normalt kun er beskæftiget ganske få, ja, mange gange kun en enkelt person, at kravet om hep produktivitet og kort produktionstid er ekstremt stort, og at der i de 20 fleste tilfælde kun foregår en produktion af en enkelt dyreart, f.eks. slagtesvin, slagtekyllinger eller kødkvæg, eller denne dyrearts produkter, f.eks. smågrise fra grisesøer, mælk fra malkekøer eller æg fra æglægningshøns. Til gengæld holdes den pågældende dyreart i et meget stort antal på fra flere hundreder til mange tusinder individer på den enkelte landbrugsbedrift 25

Disse forhold bevirker for det første, at stort set al pasning og fodring af dyrene skal være automatiseret og kunne udføres maskinelt, for det andet, at dyrene konstant er udsat for et stort sminetryk på grund af de mange dyr af samme art på en enkelt bedrift, og for det tredje, at dyrenes fysiologiske systemer, bl.a. fordøjelsessystemet, på grund af kravet 30 om høj produktivitet og kort produktionstid til stadighed er udsat for et så stort pres, at selv mindre ekstra belastninger kan få systemerne til at bryde sammen, hvilket for fordøjelsessystemet f.eks. kan give sig udslag i voldsomme diarréer, der enten bevirker, at 2 DK 172775 B1 dyrene vantrives eller eventuelt efter en kortere eller længere tid slet og ret dør, hvad der i begge tilfælde medfører produktionstab for landmanden.

Kravet om høj produktivitet/kortere produktionstid kommer endvidere også til udtryk 5 ved, at dyrenes afkom, f.eks. smågrise og spædkalve, fravænnes, dvs. fjernes fra moderdyret og dermed fra deres hidtidige naturlige ernæring, modermælken, på et tidligere tidspunkt af deres liv, end hvad der førhen var tilfældet, som for dyreungeme var et fysiologisk mere passende tidspunkt i deres udvikling og modning til det selvstændige ungdyrsniveau. Således fravænnes smågrise i dag almindeligvis i en alder af blot 4-5 10 uger efter fødslen mod tidligere 8-9 uger.

Den tidlige fravænning af eksempelvis smågrisene og overgang til udelukkende anden ernæring end soens modermælk fører uvægerligt til en omgående eller efter kort tid indtrædende kronisk diarrétilstand hos næsten alle smågrise, og uden behandling vil disse 15 grise ikke blot vantrives i lang tid derefter men i mange tilfælde simpelthen dø.

Ovennævnte forhold har været kendt som. en uundgåelig følge af den skete produktionsudvikling i husdyrbedrifterne, og når denne alligevel har kunnet finde sted, er det kun i kraft af en samtidig stadig mere udbredt anvendelse af antibiotika af forskellig art til 20 dyrene, enten indgivet som parenterale injektioner i dyrene eller, hvad der er mere almindeligt, iblandet dyrenes foder. I sidstnævnte tilfælde benævnes de pågældende antibiotikatilsætninger almindeligvis "vækstfremmere".

De til dyrene anvendte antibiotika, f.eks. vækstfremmeme, har imidlertid en tendens til 25 at fremkalde resistens hos de i dyrene forekommende bakterier og andre mikroorganismer, og det har derfor været nødvendigt til stadighed at udvikle og benytte nye antibiotika til dyrene. Nogle af de til dyrene således benyttede antibiotika er imidlertid de samme eller kemisk så nært beslægtede med de antibiotika, som benyttes til bekæmpelse af sygdomme fremkaldt af bakterier og andre mikrober hos mennesker, at der i den offentlige 30 mening i navnlig de senere år har været en stigende bekymring for, at den resistens, der forekommer hos mikroorganismerne i dyrene, skulle blive overført til de hos mennesker 3 DK 172775 B1 forekommende sygdomsfremkaldende mikroorganismer, hvorefter disse ikke ville kunne bekæmpes med de til rådighed værende human-antibiotika.

På denne baggrund er der derfor et stadigt stigende krav om at begrænse anvendelsen af 5 antibiotika af enhver art til dyr mest muligt og helt at undgå, ja, direkte forbyde anvendelsen af antibiotika af enhver art som "vækstfremmere" i dyrenes foder fuldstændigt.

Af ovenstående redegørelse om produktionsvilkårene i dagens husdyrbedrifter vil det forstås, at et sådant forbud mod vækstfremmere givetvis vil afstedkomme katastrofale 10 forhold for både dyrene, produktionsresultateme og husdyrbedrifternes økonomi, medmindre der forinden tilvejebringes alternative behandlingsmetoder og -midler, som ikke er baseret på stoffer af antibiotisk karakter, og der pågår derfor en for tiden stor søgning og forskning efter sådanne metoder og midler, såvel efter helt nye som blandt kendte og tidligere benyttede, som af den ene eller anden grund er gået ud af brug i løbet af eller 15 inden de "antibiotiske vækstfremmeres periode".

Kendt teknik I WO offentliggørelsesskrift nr. 96/03150 er der således beskrevet sammensætninger af hemicellulosefibre og polyphenoler udvundet fra lærketræer fLarix occidentalix NuttallV 20 De eksemplificerede hemicellelosefibre og polyphenoler består således af det vandopløselige arabinogalactan henholdsvis taxifolener. Disse sammensætninger angives at have en vækstfremmende virkning på gavnlige bakterier, såsom Bifidobacterium thermophi-lum. og en hæmmende virkning på skadelige, patogene og forrådnelsesbakterier, såsom Clostridium ssp.. Bacteroidaceae og Candida ssp.. i mave-tarmkanalen hos mennesker 25 og dyr og derved bekæmpe mave-tarmforstyirelser, såsom diarré, hos disse. Det nævnes, at flavanoider og tanniner falder ind under gruppen af polyphenoler, der skulle kunne benyttes i de omhandlede sammensætninger, men dette er hverken eksemplificeret eller på anden måde godtgjort. Forholdet mellem fibre og polyphenoler i sammensætningerne angives at burde ligge mellem 20 og 3, og sådanne sammensætninger angives at kunne 30 tilsættes dyrefoder i et omfang på 0,1-5 vægt%, fortrinsvis 0,1-2 vægt%, baseret på dyrefoderets vægt. Der er i skriftet dog kun beskrevet forsøg med ren arabinogalactan eller rene sammensætninger af arabinogalactan og polyphenoler ekstraheret fra lærketræ i 4 DK 172775 B1 forbindelse med afprøvning af virkningen på forskellige Bifido-bakteristammer dyrket i reagensglas indeholdende en forstærket clostridial agarsuppe, men ingen former for forsøg på fodring af dyr med et foder, der indeholder arabinogalactan-polyphenolsammensætninger, er omtalt. Det vides altså ikke, om sammensætningen 5 eller et foder, der indeholder denne, vil virke i praksis, eller om der f.eks. foreligger problemer med at få dyrene til frivilligt at æde et sådant foder. - Det angives endvidere, at sammensætningerne kan formuleres til tabletter, piller, kapsler, pastiller og sirup, og at disse dispenseringsformer kan indeholde sødemidler, såsom sucrose eller saccharin, og smagsstoffer, såsom pebermynte, methylsalicylat eller appelsinaroma. Disse dis-10 penseringsformer er normale til mennesker, men ikke til dyr, og der anføres da heller intet om, at de skulle være beregnet til iblanding eller på nogen måde påtænkes iblandet et dyrefoder.

Et andet kendt middel, der før antibiotikaemes opdagelse og navnlig før vækstfremmer-15 nes fremkomst er blevet benyttet i landbrugets husdyrbedrifter til bekæmpelse og/eller forebyggelse af diarrétilstande hos dyr, især hos spæd- og smågrise, spædkalve og andre dyreunger, er en flavanoidholdig ekstrakt udvundet fra en plante tilhørende familien Mimosaceae. Denne ekstrakt blev tidligere solgt under handelsnavnet "Kalve- og Grisehjælp" og sidenhen under navnet Diarex® i form af enten en mikstur, der ud over vand 20 og en mindre mængde konserveringsmiddel indeholdt ca. 50 vægt% af den flavanoid-holdige planteekstrakt, eller i form af et pulver, der bortset fra en mindre mængde antiklumpningsmiddel bestod af den rene flavanoidholdige planteekstrakt. Midlerne blev indgivet dyrene direkte som de forelå ved indkøb i de anbefalede doser (2 - 30 ml eller g pr. dyr pr. dag), eller de blev iblandet dyrenes foder eller drikke.

25

Mimosaceae-ekstrakten har imidlertid en for dyrene frastødende lugt og/eller smag, og dyrene vil derfor almindeligvis under ingen omstændigheder indtage ekstrakten frivilligt, og det uanset om den foreligger som mikstur, pulver eller iblandet deres foder eller drikke. Tidligere var det derfor nødvendigt, at hvert enkelt dyr under indgivelsen måtte 30 holdes af en eller flere personer, medens en anden (eller tredje) person med en sprøjte eller foder- eller pulverbøsse sprøjtede miksturen/drikken henholdsvis proppede pulveret eller det mikstur- eller pulvertilsatte foder direkte ned i dyrets spiserør. Ved små dyr, 5 DK 172775 B1 såsom spædgrise og -kalve, var det en overkommelig om end besværlig og tidkrævende opgave at behandle hvert enkelt dyr indtil flere gange dagligt på denne måde, men ved større dyr var det på grund af dyrets fysiske størrelse og styrke nærmest umuligt, medmindre der blev anvendt særlige indretninger til at fastholde og låse dyret i en ubevæge-5 lig position.

Behandlingen eller forebyggelsen af diarrétilstande hos dyrene med Mimosaceae-ekstrakten på den ovenfor angivne måde var i sig selv effektiv og billig, men på grund af den besværlige og tid- og arbejdskraftkrævende indgivelsesmåde gik den alligevel prak-10 tisk taget fuldstændig ud af brug, da antibiotika og vækstfremmere kom på markedet til økonomisk overkommelige priser, idet disse sloffer ikke havde nogen for dyrene frastødende lugt og/eller smag og derfor kunne blandes direkte i dyrenes sædvanlige foder, som dyrene derefter geme ville æde frivilligt.

15 I den nu foreliggende situation, hvor brugen af antibiotika som vækstfremmere og diar-rébekæmpende og -forebyggende midler til produktionsdyr formentlig imidlertid må opgives fuldstændigt inden for en nærmere fremtid i et stadigt større antal lande, er opfinderne til den foreliggende opfindelse kommet på den tanke, at det ville være ønskeligt, om muligt, at ændre Mimosaceae-ekstraktens karakter så meget og/eller udvikle en 20 indgivelsesmetode for denne, som ikke var behæftet med de ovenfor omtalte vanskeligheder, som følge af, at dyrene ikke frivilligt vil hverken drikke eller æde den eks-traktholdig mikstur/drikke henholdsvis pulver/foder, eftersom Mimosaceae-ekstrakten ikke indeholder stoffer af antibiotisk karakter og i det hele taget ikke optages fra mavetarmkanalen i dyrenes organisme.

25 I første omgang blev det således forsøgt at iblande Mimosaceae-ekstrakten i dyrenes sædvanlige foder i en så ringe koncentration, at dyrene ikke blev frastødt af lugt og/eller smag og derfor geme ville æde foderet frivilligt, men som følge af dyrenes meget fine og veludviklede lugte- og smagssans viste det sig, at den hertil krævede lave koncentra-30 tion var så lille, at der ikke kunne opnås en tilstrækkelig terapeutisk og/eller profylaktisk virkning ved den af dyrene frivilligt indtagne fodermængde.

6 DK 172775 B1

Det blev derefter forsøgt at indkapsle Mimosaceae-ekstraktpulveret som belagte (coatede) partikler eller granula, der derpå blev iblandet dyrenes foder, men igen på grund af dyrenes yderst fintfølende lugt- og/eller smagssans gav heller ikke denne metode et tilfredsstillende resultat af de samme grunde som ovenfor anført. Desuden indebæ-5 rer coatningsprocessen, at produktet blev alt for dyrt til at kunne finde anvendelse som et almindeligt benyttet foderadditiv i praktisk dyreopdræt og -produktion.

Beskrivelse af opfindelsen

Det er derfor særdeles overraskende, at det med den foreliggende opfindelse nu alligevel 10 har vist sig muligt at tilvejebringe Mimosaceae-ekstrakten i en særlig og hidtil ukendt additivform, som gør det muligt at få dyrene, såsom eksempelvis fravænningsgrise og -kalve, til frivilligt at indtage additivformen, enten direkte som den er eller iblandet dyrenes sædvanlige foder eller drikke i tilstrækkelige mængder til, at der opnås såvel terapeutisk som profylaktisk effekt herved, navnlig med hensyn til bekæmpelse og forebyg-15 gelse af diarrétilstande hos dyrene.

Dette opnås med foderadditivet ifølge opfindelsen, som omfatter en flavanoidholdig ekstrakt udvundet fra en plante tilhørende familien Mimosaceae. hvilket foderadditiv er ejendommeligt ved, at det yderligere omfatter et lugt- og/eller smagsmaskerende stof 20 eller en blanding af sådanne stoffer, som maskerer den flavanoidholdige ekstrakts lugt og/eller smag, samt eventuelt et eller flere bærestoffer for det lugt- og/eller smagsmaskerende stof eller blandingen heraf.

Ud over ovennævnte bestanddele kan additivet også indeholde andre ingredienser, så-25 som egentlige fyldstoffer og/eller strækmidler, farvestoffer, konsistensbetingende stoffer, essentielle mineraler, vitaminer, aminosyrer m.v., som ikke virker frastødende på dyrene eller nedsætter deres appetit eller ædelyst.

Foretrukne udførelsesformer for additivet ifølge opfindelsen er angivet i de afhængige 30 krav 1 - 7.

Til opfindelsen og udførelsesformeme for denne skal følgende bemærkninger gøres: 7 DK 172775 B1

Foderadditivet ifølge opfindelsen vil fortrinsvis foreligge i tør pulver- eller minigranulat-form men vil eventuelt også kunne foreligge i fugtig, pastaagtig eller flydende form.

Uanset den fysiske tilstandsform kan additivet generelt fremstilles ved simpel, grundig sammenblanding af bestanddelene. Et pulverformigt additiv kan således fremstilles ved 5 tørblanding af ingredienserne, men det kan også fremstilles ved vådblanding af ingredienserne efterfulgt af tørring, formaling og eventuel sigtning. Et minigranulat kan fremstilles på samme måde, idet der dog indledningsvis eventuelt må tilsættes tilstrækkeligt med væske af passende art (f.eks. vand) for at opnå tilstrækkelig sammenhængskraft mellem ingrediensernes partikler.

10

Med et lugt- og smagsmaskerende stof menes et hvilket som helst ikke-sundhedsskadeligt stof, som i en tilstrækkelig koncentration er i stand til at maskere Mimosaceae-ekstraktens for dyrene ubehagelige og frastødende lugt og/eller smag i en sådan grad, at dyrene frivilligt vil æde tilstrækkeligt meget af additivet eller et foder/en 15 drik, hvori additivet er iblandet, til at dyrene indtager en terapeutisk og/eller profylaktisk mængde af Mimosaceae-ekstrakten. Det lugt- og/eller smagsmaskerende stof kan udøve sin maskerende virkning på forskellige måder. For eksempel kan det: 1) i sig selv have en sådan tiltalende og tiltrækkende lugt og/eller smag, som over- 20 døver eller blander sig med Mimosaceae-ekstraktens lugt og/eller smag, således at sidstnævnte enten ikke opfattes eller også ikke virker frastødende på dyrene, 2) udøve en blokerende virkning på de receptorer i lugt- og/eller smagsceller i dyrenes næse og mund, der registrerer Mimosaceae-ekstrakten som lugtende og/eller smagende ubehageligt, 25 3) binde sig fysisk/kemisk til de stoffer eller molekylgrupper i stoffer i Mimosace- ge-ekstrakten, som forårsager den på dyrene frastødende lugt og/eller smag, og derved blokere deres lugt og smagsvirkning dog forudsat, at Mimosaceae-ekstrakten ikke herved mister sin terapeutiske og profylaktiske virkning, eller 4) have en vilkårlig kombination af ovennævnte egenskaber eller virkninger.

30

Eksempler på lugt- og/eller smagsmaskerende stoffer, der udøver deres maskeringsvirkning på en eller flere af ovennævnte måder er anført i krav 6 og 7. Særligt foretrukket er 8 DK 172775 B1 i den forbindelse et additiv, der indeholder 5-80 vægt% flavanoidholdig Mimosaceae-ekstrakt og 95 - 20 vægt% kiksmel, fortrinsvis 10-50 vægt% ekstrakt og 90 - 50 vægt% kiksmel, mere fortrinsvis 15-30 vægt% ekstrakt og 85 - 70 vægt% kiksmel, især ca. 20 vægt% ekstrakt og ca. 80 vægt% kiksmel, baseret på den totale vægt af additivet.

5

Den eventuelle inkorporering af et eller flere bærestoffer for det lugt- og/eller smagsmaskerende stof i foderadditivet ifølge opfindelsen vil afhænge af hvilket specifikt stof, der benyttes, og formålet med dets inkorporering vil tilsvarende være betinget heraf. For visse meget stærkt lugtende og/eller smagende maskeringsstoffer vil det være nødven-10 digt med et bærestof for simpelthen at opnå en tilstrækkelig fortynding af førstnævnte til at kunne opnå en passende dosering og homogen opblanding med Mimosaceae-ekstrakten. For andre maskeringsstoffer vil det være nødvendigt med et bærestof for at kunne fastholde maskeringsstoffet intakt i additivblandingen, f.eks. til at modvirke stoffets fordampning, udskillelse, nedbrydning eller anden skadelig omdannelse under addi-15 rivets opbevaring i kortere eller navnlig længere tidsrum. I andre tilfælde igen kan b-ærestoffets funktion være at tilvejebringe en tilstrækkelig tæt sammenbinding af maske-ringsstoffet med Mimosaceae-ekstraktens ildelugtende eller -smagende stoffer til, at den ønskede maskeringsvirkning vil blive opnået.

20 Som bærestof kan anvendes et hvilket som helst ikke-sundhedsskadeligt stof, der er i stand til at tilvejebringe ovenstående virkninger, og som ikke har nogen skadelig virkning på Mimosaceae-ekstraktens terapeutiske og profylaktiske effekt samtidig med, at det naturligvis ikke i sig selv må have nogen lugt og/eller smag, som vil virke frastødende på dyrene. Bærestoffet kan være af organisk eller uorganisk, fordøjelig eller ufor-25 døjelig natur. Som eksempler på bærestoffer kan nævnes carbohydrater, såsom stivel-sespartikler, cellulosefibre og mono-, di- og oligosaccharider, proteinstoffer, f.eks. sojaprotein, fedtstoffer og olier, samt salte, såsom calciumphosphat og natriumchlorid, såvel som blandinger af sådanne stoffer. - Som eksempel på stoffer, der almindeligvis ikke kan benyttes som bærestof, kan nævnes jernholdige forbindelser og stoffer af forskellig 30 art, eftersom jernet i disse forbindelser eller stoffer i mange tilfælde vil blokere virkningen af Mimosaceae-ekstraktens terapeutiske og profylaktiske virkninger.

9 DK 172775 B1

At additivet foreligger i pulverform vil sige, at additivets stolpartiklers største diameter ikke overstiger ca. 0,2 mm. At additivet foreligger i mikrogntnulaform vil sige, at hovedmængden, f.eks. mindst 80 vægt%, fortrinsvis mindst 90 vægt%, mere fortrinsvis mindst 95 vægt% og mest fortrinsvis mindst 98 vægt%, af partiklerne har en største 5 diameter, som ligger i området 0,2 - 2,0 mm.

Hvad angår selve den flavanoidholdige ekstrakt, udvindes denne som nævnt af en plante tilhørende familien Mimosaceae. Disse planter er træ- eller buskagtige vækster, som bl.a. gror i Det Sydlige Afrika, hvor de dyrkes forskellige steder i plantager, der høstes, 10 når planternes bark anses for moden til udvinding af de flavanoidholdige forbindelser heri. Det vil for de træagtige væksters vedkommende sige, når planterne almindeligvis er mindst ca. 9-10 år gamle. Høsten finder almindeligvis sted i planternes vækstperiode, dvs. i september-marts måned, hvor barken har et fugtighedsindhold på ca. 50 %. Planterne afbarkes, og barken transporteres, eventuelt efter en forudgående tørring til bark-15 stave, til udvindingsanlæg i landet eller udlandet, hvor den snittes i spåner, der underkastes en autoklav-ekstraktionsproces med vand ved superatmosfærisk tryk og en temperatur på over 100° C eller en ekstraktion ved perkolation med vand med lavere temperatur efter sprængning af barkens parenkymceller ved autoklavering. Efter koncentrering af ekstraktvæsken sprøjtetøTres denne i en modstrømssprøjtetøTrer til frembringelse af et 20 rødligt-, gulligt- eller grønligt-brunt pulver med et fugtighedsindhold på ca. 6 %.

Pulveret, der består af hule, sfæriske partikler, har en rumvægt på fia 370 til 500 kg/m3, fortrinsvis 370 til 430 kg/m3, er lettere hygroskopisk og er opløseligt i f.eks. vand og alkohol. En 13 % opløsning af pulveret i vand har et pH på 4,6, et mindre pufferområde 25 mellem Ph 2,8 og 5,8 samt et større pufferområde ved Ph 9,5. Vandige og alkoholiske opløsninger er stabile ved længere tids opbevaring i mørke, men udsættelse for sollys vil fremkalde rødfarvning. Pulveret er ved tør og mørk opbevaring ved stuetemperatur stabilt i mindst 3 år. Ved udsættelse for sollys vil der ske en rødfarvning af overfladelaget, og ved opvarmning vil der indtræde begyndende forkulning ved over ca. 230°C. Indhol-30 det af polyhydroxyflavanoider i pulveret vil afhænge af den specielle Mimosaceae-sort. hvoraf ekstraktpulveret er vundet, men vil almindeligvis ligge på 65-75 vægt%, navnlig 10 DK 172775 B1 67-72 vægt%, især ca. 70 vægt%. Der kan ved opblanding af to produktioner ske egalisering i 67-72 % området.

En alkoholisk (99,8 % ethanol) ekstrakt af pulveret vil i en 0,25 % (vægt/volumen) op-5 løsning ved tilsætning af 0,25 ml 1 % FeCI3-opløsning til 10 ml ekstraktopløsning give en klar blå opløsning uden bundfald. Tilstedeværelse af garvesyre vil give et blåt bundfald efter centrifugering og bør ikke forekomme.

Tyndtlagskromatografi på silicagelplader af den alkoholiske (99,8 % ethanol) ekstrakt af 10 pulveret vil udviklet med butanol/eddikesyre/vand (dest.) i blandingsforholdet 4:1:5 give

Rrværdier, der afhænger af den specielle Mimosaceae-sort. hvoraf ekstraktpulveret er vundet, og eventuelt også af ekstraktionsbetingelseme. Ekstraktpulver fra Acacia me-amsii De Willd. der gror som træer i Sydafrika, og som er vundet ved autoklavekstraktion med vand ved ca. 110° C i ca. 6 timer, har således en Rf på ca. 0,70, medens eks-15 traktpulver fra Herba Acacia Catechu Willd. sort Heleati. Am., der gror som buske eller urter i Sydvestafrika (Namibia), og som er vundet ved vandperkolation i 48 timer efter autoklavsprængning af parenkymcelleme, har en Rf på ca. 0,35. Disse værdier skal ses i relation til, at garvesyre under de samme betingelser har en Rf på 0,9.

20 Andre fysiske og kemiske karakteristika for Mimosaceae-ekstraktpulvere kan findes i specialliteraturen.

Som nævnt udgøres 65-75 vægt% af Mimosaceae-ekstraktpulveret af polyhydroxyflava-noider, medens resten udgøres af en kompleks blanding af carbohydrater, gummier, suk-25 kerstoffer, aminosyrer og andre mindre bestanddele, heraf en ringe mængde uopløseligt stof. Den del, der udgøres af polyhydroxyflavanoideme, består af kondenserede flavano-ider og deres monomere forstadier. Polyhydroxyflavanoideme udgøres således af en kompleks blanding af et antal forskellige enkeltkomponenter, hvis grundenhed er det typiske carbon-15-flavanoidskelet, og deres molekylvægt varier fra ca. 300 for de mo-30 nomere forstadier til ca. 3000 for de største polymerer med en gennemsnitlig molekylvægt på ca. 1200-1300. Det gennemsnitlige Mimosaceae-flavanoidmolekvle består følgelig af 4-5 monomere flavanoidmolekyler. De er bundet til hinanden med carbon- DK 172775 B1 π carbonbindinger. Flavanoidforstadieme udgøres typisk af flavan-3,4-dioIer (leucoanthocyanidiner) og flavan-3-oler (catechiner), se omstående skema 1 og 2.

Ved sønderdeling af flavanoidmolekyleme sprænges typisk den heterocycliske C-ring 5 under frembringelse af resorcinol, phloroglucinol og protocatechinsyre, gallussyre henholdsvis i mindre mængder resorcinol, phloroglucinol og catechol, pyrogallol, se omstående skema 3 og 4.

De polymere flavanoidmolekyler udgøres overvejende af flavan-3,4-dioler kondenseret Γ0 med flavan-3-oler. Di- og triflavanoidemes strukturer er vist i omstående skema 5 og 6.

Polyflavanoideme har stærk affinitet for collagen, hvilket danner grundlag for deres anvendelse i de traditionelle vegetabilske garvningsmetoder. Flavanoidforbindelsemes sande affinitet for proteinholdigt materiale bliver først tydelig fra og med triflavanoidni-15 veauet, som det kan påvises ved, at triflavanoideme udfælder gelatine fra en opløsning under kontrollerede betingelser. YderFigere oplysninger om Mimosaceae-flavanoidemes kemiske sammensætning og stereostrukturer samt om Mimosaceae-ekstraktemes indhold af ikke-flavanoidforbindelser vil kunne findes i specialliteraturen.

20 Mimosaceae-ekstrakteme har i sig selv ingen direkte baktericid eller mikrobiocid virkning, dvs. de har ingen direkte dræbende virkning på bakterier og andre mikroorganismer. Ekstrakternes virkning på mikroorganismefloraen (bakterier og andre mikroorganismer) i mave-tarmkanalen hos dyr og mennesker antages at fremkomme ved en udfældning og sammenbinding af proteiner fra tarmepitelets yderste overflade og i tar-25 mindholdet samt på mikroorganismernes overflader. Herved bindes og indpakkes bakterier og andre mikroorganismer og især deres toksiner så at sige i et protein-flavanoidhylster eller -netværk, hvorved deres skadelige indvirkning på tarmvæggen forhindres eller nedsættes væsentligt, og deres antal i tarmen formindskes kraftigt ved tarmens peristaltiske udstødning af det ufordøjelige protein-fiavanoidhylster eller -30 kompleks. Da mikroorganismerne ikke direkte dræbes, frigøres deres toksiner heller ikke i stort omfang, således som det sker ved anvendelsen af store doser traditionelle antibiotika, der kan føre til toksin-chok og det behandlede individs eventuelle død. Endvidere 12 DK 172775 B1 fremkommer der ved flavanoidbehandlingen ikke resistente bakteriestammer, da bekæmpelsen er baseret på en generel fysisk-kemisk indfangning og binding af mikroorganismerne, som derpå udskilles med fæces, i stedet for på et specifikt kemisk/bi-okemisk indgreb i organismernes livs- og/eller formeringsprocesser, som overlevende 5 organismer vil kunne udvikle modforanstaltninger over for og dermed generation for generation blive mere og mere modstandsdygtige over for det pågældende antibiotikums virkemåde.

Efter enkeltdosisindgift af Mimosaceae-ekstrakten vil der i nogle tilfælde dog stadig 10 kunne være et så stort antal bakterier/mikroorganismer tilbage i mave-tarmkanalen, at de hurtigt vil kunne opformeres og derved fortsætte eller genopstarte en diarrétilstand hos det behandlede individ. Mimosaceae-ekstrakten bør derfor almindeligvis indgives mindst to gange dagligt i 2-4 dage og eventuelt længere for at opnå optimale resultater.

15 De virksomme bestanddele i Mimosaceae-ekstrakten er ikke direkte fordøjelige, og hverken disse eller nedbrydningsprodukter heraf har kunnet påvises i blodet eller mælken hos individer, der oralt er blevet indgivet ekstrakten. Oral indgift af ekstrakten i et individ resulterer derfor alene i en lokal virkning i mave-tarmkanalen, hvorfor systemiske bivirkninger næppe eksisterer og da heller ikke er blevet rapporteret. Der vil endvi-20 dere ikke være behov for "tilbageholdelsestider" for kød eller mælk fra dyr, der er blevet behandlet med Mimosaceae-ekstrakt.

Idet Mimosaceae-ekstrakten alene har virkning i mave-tarmkanalen ved rent fysisk at decimere mængden af mikroorganismer [såsom: A) anaerobe gramnegative stave 25 (bacteroides), kokker (pepto-streptokokker og peptokokker), clostridier og mælkesyre-bakterier; B) aerobe (ca. 1 % af total) enterobakteriacea, streptokok-arter og bacillus-arter; og C) diverse svampe o.l.], modvirkes den tendens til overvækst af én eller få arter, som ofte ses efter brug af antibiotika.

30 Ud over et dyrefoderadditiv, der omfatter den ovenfor beskrevne flavanoidholdige Mimosaceae-ekstrakt angår opfindelsen også et dyrefoder eller drik, som er ejendommelig ved, at det/den omfatter et/en til det pågældende dyr beregnet foder henholdsvis drik og 13 DK 172775 B1 et heri iblandet additiv ifølge opfindelsen, fortrinsvis i sådanne vægtforhold, at det/den færdigblandede foder henholdsvis drik omfatter 0,05 - 10 vægt% af den flavanoid-holdige ekstrakt, mere fortrinsvis 0,1-5 vægt%, mest fortrinsvis 0,5 - 2 vægt%, især ca.

1 vægt%, beregnet på grundlag af vægten af den samlede foder- eller drikkeblanding.

5

Additivet ifølge opfindelsen kan benyttes til behandling og/eller forebyggelse af diarré eller anden mave-tarmkanalforstyrrelse eller -lidelse hos et dyr, fremme af væksten af et dyr og/eller forøgelse af foderudnyttelsen i et dyr, hvilken fremgangsmåde er ejendommelig ved, at dyret gives et foder eller en drik ifølge opfindelsen.

10

Additivet ifølge opfindelsen kan benyttes til bekæmpelse af Salmonella typhimurium DT 104 i mave-tarmkanalen hos dyr, idet dyret gives et additiv, et foder eller en drik ifølge opfindelsen.

15 Endelig angår opfindelsen en fremgangsmåde til fremstilling af et foder eller en drik til bekæmpelse af Salmonella typhimurium DT 104 i mave-tarmkanalen hos dyr, hvilken fremgangsmåde er ejendommelig ved, at et/en til de pågældende dyr beregnet foder eller drik iblandes et additiv ifølge et af kravene 1 - 8, fortrinsvis i de i krav 9 angivne vægtblandingsforhold.

20

Som ved behandling med den rene Mimosaceae-ekstrakt gælder der ved behandling med dyrefoderadditivet eller det/den additivholdige foder/drik, at efter enkeltdosisindgift af foderadditivet eller det additivholdige foder ifølge opfindelsen vil der i en del tilfælde stadig kunne være et så stort antal bakterier/mikroorganismer tilbage i mave-25 tarmkanalen, at de hurtigt vil kunne opformeres og derved fortsætte eller genopstarte en diarrétilstand hos det behandlede individ. Foderadditivet eller det additivholdige foder ifølge opfindelsen bør derfor almindeligvis indgives mindst to gange dagligt i 2-4 dage og eventuelt længere for at opnå optimale resultater. Den store fordel ved anvendelsen af foderadditivet og/eller foderet/drikken ifølge opfindelsen er imidlertid den, at medens 30 den rene Mimosaceae-ekstrakt må indgives dyrene ved tvangsfodring, vil dyrene frivilligt og med stor lyst og iver indtage additivet og/eller foderet/drikken ifølge opfindelsen, 14 DK 172775 B1 og derved opnås den fordelagtige terapeutiske og profylaktiske virkning uden anvendelse af en tidkrævende og kostbar arbejdskraftindsats.

Ved fodring af dyr med additivet, foderet eller drikken ifølge opfindelsen vil det således 5 være muligt at forebygge eller bekæmpe en hvilken som helst diarrétilstand eller anden mave-tarmforstyrrelse hos dyrene samt bekæmpe eller forebygge tilstedeværelsen af hvilken som helst uønsket bakterie eller anden mikroorganisme i dyrenes mave-tarmkanal, herunder f.eks. bakterier tilhørende familierne E.Coli. Salmonella (f.eks.

S.choleraesuis og S.tvphimuriumk Clostridium (f.eks. Cl.perfrangensl Camphvlobacter.

10 Sernulina (f.eks. S.hvodvsenteria og S.pilosicoli) og Lawsonia (f.eks. L.intracellularis'l.

Opfindelsen skal yderligere belyses nærmere i form af efterfølgende udførelseseksempel og afprøvningsresultater.

15 Eksempel

Der blev fremstillet et dyrefoderadditiv ifølge opfindelsen med følgende sammensætning: 20 Bestanddel mængde vægt% kg

Biscuitsmeal (kiksmel) 400,00 80,00 25 Diarex®-pulver, kone. 100,00 20,00 1 alt 500,00 100,00 30

Diarex®-pulver, kone. er et Mimosaceae-ekstraktpulver indeholdende ca. 1 %o anti-klumpningsmiddel.

15 DK 172775 B1

Biscuitsmeal, der fremstilles og sælges af Internationale Handelmaatschappij Robi bv,

Holland, er specielt beregnet til unge dyr og består af en blanding af 70 vægt% formalede biscuit- og konditorivare-biprodukter og 30 vægt% brodmel. Produktet, der er frit-strømmende, er letfordøjeligt, velsmagende og har en behagelig vaniljesukkeragtig lugt.

5

Biscuitsmeal angives at have følgende sammensætning og foderegenskaber:

Bestanddel Analyseret Garanteret indhold, % indhold, % 10 ____

Fugtighed 10,6 max 11 Råprotein 9,3 min 9 Råfibre 0,8 max 1,5

Aske 2,2 max 3 15 Sukker + glucose min 18

Stivelse (forkogt) 38

Stivelse, total 40 Råfedt min 7

Carbohydrater 70,0 67,5 20 Calcium 0,5

Chlor (som NaCl) 1,2

Foderværdi

Foderenheder pr. 100 kg: 132,8 25 EFOS grise: 96,9

Aminosyrer

Lysin: 2,2 g/kg

Methionin + cystin: 3,7 g/kg 30

Granulometri 98 % max 2 mm

Tungmetaller: fraværende I6 DK 172775 B1

Mikrobiologisk kvalitet

Entero-bakterier pr. gram < 1000

Salmonella pr. 25 gram fraværende 5

Biscuitsmeal og Diarex®-pulver, der begge forelå i pulverform, blev tørblandet ved grundig omblanding i en Nautablander (kegle-tvangsblander) i 15 minutter og forelå derefter som et støvfrit (svagt fugtigt/sammenhængende, men ellers i det væsentlige fritstrømmende) pulver/minigranulat, som var klar til iblanding i et dyrefoder eller en 10 dyredrik.

Ud fra det fremstillede foderadditiv blev der fremstillet et tørfoder til fravænnings-smågrise (alder 4-5 uger) med følgende sammensætning: 15 Bestanddele tørstof vægt% mængde % kg

Hvede (formalet) 86,0 51,50 257,50 20 Biscuitsmeal (kiksmel) 89,4 10,00 50,00

Fiskemel, askefattigt 94,0 10,00 50,00

Sojaprotein, kone. HP 300 92,0 5,00 25,00

Flex Combimilk STD. 97,0 10,00 50,00

Fedt, an. svin, 92/10 99,5 3,50 17,50 25 Foderadditiv iflg. opf. 90,5 5,00 25,00

Flex Norm-Mix 2201 96,7 5,00 25,00 I alt 100,00 500,00 30 I tabellen betegner:

Flex Combimælk STD: Skummetmækspulver tilsat vegetabilsk fedt Fedt, an. svin, 92/10: Svinefedt fra slagteriaffald 17 DK 172775 B1

Foderadditiv iflg. opf.: Ovenanførte foderadditivblanding

Flex Norm-Mix 2201: Forblanding af Carbadox (vækstfremmer), mineraler, vitami ner og essentielle aminosyrer, der fremstilles og sælges af FLEX-FODER, Randersvej 14, Fausing, DK-8961 Allingåbro.

5

Ingredienserne, der alle (bortset fra svinefedtet, som opvarmet til 50-60° C blev tilsat flydende) forelå i pulverform, blev tørblandet ved grundig omblanding i en snegletvangsblander i 20 minutter. Det færdigblandede foder forelå som et fritstrømmende, i det væsentlige støvfrit pulver eller mikrogranulat, som var klar til brug i et automatiseret 10 fodringsanlæg.

Afprøvning og afprøvningsresultater

Til et afprøvningsforsøg med fravænnede smågrise blev der fremstillet et basistørfoder 15 med følgende sammensætning:

Bestanddele tørstof vægt% mængde % kg 20 _

Hvede (formalet) 87,0 72,00 720,00

Sojaskrå (oast(Bra)44 %) 87,0 10,00 100,00

Fiskemel, askefattigt 94,0 10,00 100,00

Fedt, an. svin, 92/10 99,5 4,00 40,00 25 Flex Premix 2292 96,3 4,00 40,00

Ialt 100,00 1000,00 30 og et tørfoder ifølge opfindelsen med følgende sammensætning: 18 DK 172775 B1

Bestanddele tørstof vægt% mængde % kg 5 _

Hvede (formalet) 87,0 69,50 695,00

Sojaskrå (oast(Bra)44%) 87,0 10,00 100,00

Fiskemel, askefattigt 94,0 10,00 100,00

Fedt, an. svin, 92/10 99,5 4,00 40,00 10 Foderadditiv iflg. opf. 90,5 2,50 25,00

Flex Premix 2292 96,3 4,00 40,00

Ialt 100,00 1000,00 15

Flex Premix 2292 er en forblanding af Carbadox (vækstfremmer), mineraler, vitaminer og essentielle aminosyrer, der fremstilles og sælges af FLEX-FODER (supra).

Tørfoderet, der indeholdt 2,50 vsgt% af foderadditivet ifølge opfindelsen, indeholdt 0,50 vægt% ren 20 Mimosacea-ekstrakt.

Begge foderblandinger blev fremstillet ved tørblanding af ingredienserne, der alle (bortset fra svinefedtet, som opvarmet til 50-60° C blev tilsat flydende) forelå i pulverform, ved grundig omblanding i en snegle-tvangsblander i 20 minutter. De færtfigblan-25 dede fodersammensætninger forelå som fritstrømmende, i det væsentlige støvfrie pulvere eller mikrogranulater, som var klar til brug i et automatiseret fodringsanlæg.

I alt 69 pattegrise med en gennemsnitlig vægt på 6,3 kg blev på samme dag fjernet fra deres mødrene ophav og blev fordelt i 6 stier med 35 grise i 3 kontrolhold og 34 grise i 3 30 forsøgshold.

Alle 69 grise blev de første 13 dage efter fravænningen fodret med "Cranstart 150" (startfoder, der som vækstfremmer indeholder "Olaquindox" og anvendes i 10-14 dage til smågrise med en vægt på 5,5-6,0 kg, og som leveres af Aller Mølle, Christiansfeld, 19 DK 172775 B1 DK), idet der de sidste to dage af denne periode skete en langsom overgang til det ovenfor angivne basistørfoder uden indhold af foderadditivet ifølge opfindelsen.

Herefter blev grisene i forsøgsholdene i 15 dage fodret med tørfoderblandingen, der in-5 deholdt foderadditivet ifølge opfindelsen, medens grisene i kontrolholdene fortsatte med basistørfoderet uden indhold af dette additiv.

Forsøget afsluttedes med fodring af begge hold i 5 dage med basistørfoderet uden indhold af additivet ifølge opfindelsen.

10 I hele forsøgsperioden fra fravænning til observationsperiodens afslutning havde alle grisene fri adgang til rent drikkevand i drikkekopper døgnet rundt, og i samme periode blev de (på nær de sidste 5 dage, i hvilke både kontroldhold og forsøgshold blev fodret med basistørfoderet) tilbudt drikkevand iblandet 4 96o mælkesyre. - Såfremt en gris ud-15 viklede diarré, blev den behandlet med 1 ml Potrox® pr. dag i to dage i træk, uanset om den tilhørte kontrolholdet eller forsøgsholdet. Behandlede grise forblev i forsøget.

(Potrox® er et sulfo-trimethoprim-kombinationspræparat). - Alle grisene blev vejet inden forsøgets start og igen efter forsøgets afslutning.

20 Forsøgsresultater

De opnåede forsøgsresultater fremgår af omstående tabelopstilling, hvoraf det ses, at der fra forsøgsholdet udgik én gris i løbet af observationsperioden. Den døde i den afsluttende 5-dages periode, i hvilken både kontrolholdets og forsøgsholdets grise fik basistørfoder uden indhold af foderadditivet ifølge opfindelsen. Dødsårsagen menes at have været 25 toksin-chok som følge af diarré.

Herudover ses det: 1) at forsøgsholdels grise krævede langt færre diarrébehandlinger end kontrolhol-30 dets grise -12 versus 42 (De fleste af diarrétilfældene hos forsøgsholdet forekom i øvrigt hos grise i de to stier, der lå tættest ved kontrolholdenes stier), 20 DK 172775 B1 2) at forsøgsholdets grise gennemsnitligt havde en bedre appetit end kontrolholdets grise og i gennemsnit åd 0,77 Fes (foderenheder) pr. dag pr. gris versus 0,59 Fes pr. dag pr. gris, 5 3) at forsøgsholdets grise gennemsnitligt havde en bedre daglig tilvækst end kon trolholdets grise - 379 gram pr. gris pr. dag versus 267 gram pr. gris pr. dag, og 4) at forsøgsholdets grise gennemsnitligt havde en bedre foderudnyttelse end kontrolholdets grise - 2,08 Fes pr. kg tilvækst versus 2,28 Fes pr. kg tilvækst.

10

Alt i alt viser forsøget således, at ved fodring med et foder indeholdende et additiv ifølge opfindelsen opnås der meget betydelige fordele, både med hensyn til forebyggelse af diarréer hos fravænnede smågrise og med hensyn til fremme af appetit, vækst og foderudnyttelse. Ganske vist forekom der diarrétilfælde blandt de grise, der blev fodret med 15 foder indeholdende additivet ifølge opfindelsen, men antallet af diarrétilfælde var langt færre end hos kontrolgrisene, og det antages, at antallet af diarrétilfælde ville kunne yderligere reduceres eller helt elimineres ved dels at undgå, at grise fodret med foder indeholdende additivet ifølge opfindelsen går i stier, der ligger i nærheden af stier med grise, som fodres med ikke-additivholdigt foder, og som derfor udvikler smitsomme 20 diarréer, og dels ved at øge indholdet af additiv ifølge opfindelsen, således at foderet i alt indeholder f.eks. ca. 1 vægt% ren Mimosaceae-ekstraktpulver.

Afslutningsvis skal det bemærkes, at grunden til at forsøget blev igangsat med grise 13 dage efter deres ftavænning er, at i den pågældende svinebedrift indtræder fravænnings-25 krisen med farlige diarréer erfaringsmæssigt ca. 13 dage efter ffavænningsdagen. I andre bedrifter vil fravænningskrisen kunne optræde tidligere, f.eks. 4-7 dage efter ftavænning, men også herimellem eller endog senere.

DK 172775 B1

2I

Opnåede forsøgsresultater ved fodring af smågrise med basistørfoder uden (kontrol) henholdsvis med indhold af foderadditiv iflg. opf. (forsøg) gennemsnitlig vagt pr gris vad fravsnning: 6,3 kg gennemsnitlig mangde foder pr gris pr dag Inden foraegssiert 0,1 »kg gennemsnitlig mangde energi pr gris pr deg Inden forsøgsalart: 0,23 FEs kontrol kontrol kontrol kontrol torsag forsøg forsøg forteo hold m ___________ 1 2 3 alle 4 $ β elle

Fravannine__7-i an I | ' P~~T 1 f

Antal grlaa pr hold ved foreeaaatart ___H_t2 (2__35 ' Tf ~ fg " Tf J« gannaminltltg vagt pr qrts ved ?or»eqiatart o.o e.f 7.1 a.o fc]o eTf gj 5^ FEaprdagprprie --r~--—

Forsøfrgatart;___124ϊ2__0.1» " ’ "θ,1β ____ _____*14*2___ 0ΛΪ 0.38 _______22-ian_____0,56 “ 0.77 __ Sj'Jan____0,56 o,58 -:---—-154*2 -------0*36 0.66 —------- . 25-Jen ______0,33 ------Qjj -m«---lir---sis# ___ 27-Jan_____0,36 077 -_§*i*2------0^:--—-—tn - ------ &--------077 _______3yJ*f>__._____ 0.56 ' ' ‘ ~ λ 77 _114*2-___ 0.56 ~- Oj7 _________Wjtob__ 0*36 ~~—----Ktv ~ . 02-fat>____ ~~ό!64------r?6 ______Mbife__5&-----si?

Forsøg slut _____04-feb__0.0e----— —--ifef ___- ' . —. ghteo____ "— ---ΐ"ο5 -------& _ ...Mg* ______ j!g·----få • — -- . —°9~ ----3R___0,60 gennemsnitlig antal Fas pr grla pr dag “ " ---------- I oertoda med Were* HtdoUna (20/1 · 4/2) α &a ...

_ ____________' —— J-. -----_--, —Sil? gennamanKHg anUki?ee pr gris pr dag ~ “—-—---,------- i hal« periodtn (20/t · e/g) ______ . ______ 0 ^

Antal grise wdjorsjgesM _ if 12 12 "as---rv -rr-κ gennemenhllg vagt pr gris veg forsegssl* . 14,s nj ~Ίϊβ ~ g^^glejiiytøk^g) UP? Zjg Zjll H|g ^ —TST —379

Fee pr ko tiivakat ^ ~ ' 7« "----— - -------——>£*=2,_____ 2.06

Antal dlemabahéndllnaar ~ ------------- gvrloe behanrfllnaer J · T1 ^ -__- _ 22 DK 172775 B1

Skema 1

Typiske monomere Mimosaceae-ekstraktflavanoider er vist nedenfor, hvor der er benyttet standard-stereokemisk afbildning. Pilehoveder angiver grupper, der befinder sig over papirets plan, og stiplede linier angiver grupper, der befinder sig under papirets plan.

Flavan-3, 4 dioler

Oh ' ifV" (fbr . -½ IS 4> ' . ! 4h 0h (+l-Leucofisetinidin W-Leucorobinetinidin ’

Flavanolglycosider

OH

T Π HO O

ftO O ·

Quercetrin Myricitrin

Flavanoner o (i)-Butin

Chalconer o« jQf o- jdr o ’ °

Butein flobtein

Skema 2 23 DK 172775 B1

Flavan-3-oler "OCX0" -txjfc (-)-Fisetinidol (-)-Robinetinidol

'9Cx0·' "ooA

Oh Oh * (♦l-Catechin (♦l-Gatlocatechin

Dihydroflavanoler

Ow W01' ~οχχα: ' o (+)-Fu$tin {♦J-Dihydrorobinetin

Flavonoler fV" A,-

"OCX0" -ffA

0 Oh

O

Fl**l!n Robineiin

Skema 3 24 DK 172775 B1

Hovedfragmentationsprodukter 5 spaltning'

/,' _ o« _.oM

-* HOOC—— °h iomi Protocatechinsyre

(OHt / IOM) \_/OH

~-Q-~ -0- w

OM

Resorcinol Phloroglucinol 15

Skema 4 20

Mindre fragmentationsprodukter spaltning

A .Oh _/®H

H ^ C^°" V, ΊΟΗ) N— Catechol

(OHI iomi \__/°H

"N. sprængning af /(7))-oh S molekyle Ί0Γ ΊφΓ ^

OM

Resorcinol Phloroglucinol 25 DK 172775 B1

Skema 5

Biflavanoider og triflavanoider fra friske barkprøver fra Mimosaceae er påvist at have nedenstående strukturopbygning.

Biflavonoider

Å- . , ji,C

.mi.

OH 0H

A. Rene trans-stereoforiner r, ,r2 H: (—)-fiselinidol-(+)-catechin R, ;.-OH, Rj *H: (—)-robinetinidol-( +)-caiechin R,-R3-OH: (—) -robinetinidol - (+) -gallocatechin B. 2,3-trans-3,4-cis:2',3'-trans-stereoformer

Rr Ra H: (—)-fiseiinidol*(+)-catechin

Skema 6 20

Triflavonoider c· Γ |-^-5>γΌΗ om i j; h ·i HOv^S. N^A‘0h B r Jøuj.

\.·· N/'oh i- k

QH

« C. Rene trans-stereoformer R OH: |4.8" :4\6” )·( )-robinetinidol-{ )-robinetinidol-( i )-gallocatechin R H |4.8” :4 .é")·( )-robinetinidol-( -)-roninetinidol-( ! )-catechin

Fem isomere triflavonoider blev isoleret

Claims (9)

1. Dyrefoderadditiv, som omfatter en flavanoidholdig ekstrakt udvundet fra en plante tilhørende familien Mimosaceae. kendetegnet ved, at det yderligere omfatter et 5 lugt- og/eller smagsmaskerende stof eller en blanding af sådanne stoffer, som maskerer flavanoidekstraktens lugt og/eller smag, samt eventuelt et eller flere bærestoffer for det lugt- og/eller smagsmaskerende stof eller blandingen heraf.

2. Additiv ifølge krav 1,kendetegnet ved, at det foreligger i pulver- eller mikro-10 granulaform eller en blanding af disse former.

3. Additiv ifølge krav 1 eller 2, kendetegnet ved, at den flavanoidholdige ekstrakt er udvundet fra planten Herba Acacia Catechu Willd. fortrinsvis sorten Heleatii. Am. eller Acacia meamsii De Willd (Black Wattle). 15

4. Additiv ifølge et hvilket som helst af kravene 1-3, kendetegnet ved, at indholdet af polyhydroxy-flavaner i den knastøne flavanoidholdige Mimosaceae-ekstrakt udgør 65-75 vægt% af den totale ekstraktmasse, fortrinsvis 67-72 vægt%, især ca. 70 vægt%. 20

5. Additiv ifølge et hvilket som helst af kravene 1 -4, kendetegnet ved, at det indeholder 1 - 99 vægt% flavanoidholdig Mimosaceae-ekstrakt. fortrinsvis 5 - 80 vægt%, mere fortrinsvis 10-50 vægt%, mest fortrinsvis 15-30 vægt%, især ca. 20 vægt%, baseret på den totale vægt af additivet, medens resten udgøres af lugt- og/eller smagsma- 25 skerende stof, bærestof herfor samt eventuel fyldstof og andre tilsætninger.

6. Additiv ifølge et hvilket som helst af kravene I -5, kendetegnet ved, at det lugt-og/eller smagsmaskerende stof er udvalgt blandt vanilje, vaniljesukker, vallepulver, æbleciderpulver og æbleeddikepulver eller blandinger heraf. 30 DK 172775 B1

7. Additiv ifølge et hvilket som helst af kravene 1 -5, kendetegnet ved, at det lugt-og/eller smagsmaskerende stof er tilvejebragt i additivet i form af vaniljeholdigt kiksmel (biscuitsmeal).

8. Dyrefoder eller -drik, kendetegnet ved, at det/den omfatter et/en til det pågæl dende dyr beregnet foder henholdsvis drik og et heri iblandet additiv ifølge et hvilket som helst af kravene 1 - 7, fortrinsvis i sådanne vægtforhold, at det/den færdigblandede foder henholdsvis drik omfatter 0,05 -10 vægt% af den flavanoidholdige ekstrakt, mere fortrinsvis 0,1-5 vægt%, mest fortrinsvis 0,5 - 2 vægt%, især ca. 1 vægt%, beregnet på 10 grundlag af vægten af den samlede foder- eller drikkeblanding.

9. Fremgangsmåde til fremstilling af et foder eller en drik til bekæmpelse af Salmonella typhimurium DT 104 i et dyr, kendetegnet ved, at et/en til det pågældende dyr beregnet foder eller drik iblandes et additiv ifølge et af kravene 1-7, fortrinsvis i de i 15 krav 8 angivne vægtblandingsforhold.