DK170939B1

DK170939B1 - Electrophoresis apparatus with removable buffer tank

Info

Publication number: DK170939B1
Application number: DK204989A
Authority: DK
Inventors: Jr Robert Richard Hellman
Original assignee: Eastman Kodak Co
Priority date: 1988-04-28
Filing date: 1989-04-27
Publication date: 1996-03-18
Also published as: AU612481B2; DK204989A; DK204989D0; EP0339972A3; CA1338056C; AU3375889A; EP0339972A2; US4828669A; DE68919895T2; JPH0249154A; IL90117A0; DE68919895D1; EP0339972B1; IL90117A; JP2651242B2

Description

DK 170939 BlDK 170939 Bl

Opfindelsen angår et elektroforeseapparat samt monteringen af buffertanke og gelpladesamling i apparatet.The invention relates to an electrophoresis apparatus as well as the mounting of buffer tanks and gel plate assembly in the apparatus.

Elektroforesesekvensapparater er blevet tilvejebragt med en gelpladesamling, som sædvanligvis er nøjagtig lodret 5 monteret, og en buffertank foroven og forneden. Et apparat, som benævnes BRL Model S2, som er fremstillet af Bethesda Research Labs, Gaithersburg, MD, er således udformet, at den øverste buffertank er en del af den støtteopbygning, hvortil gelpladesamlingen er fastgjort. Den nederste tank, 10 som kan fjernes, deltager ikke i væsentlig grad til fastholdelse af gelpladesamlingen på stedet. Som følge heraf skal særlige fastholdelseselementer enkeltvis drages frem og/eller drejes, samt frigives til fastholdelse af den vertikalt stillede gelpladesamling således at denne ikke vipper. Så-15 danne fastholdelseselementer er besværlige og tidsrøvende i anvendelse, især hvis der kræves mere end fire stykker pr. pladesamling. Besværlighederne forøges som følge af, at indtil fastholdelsesindretningerne er fastgjort på egnet vis, skal gelpladesamlingen holdes manuelt således, at pladen 20 ikke vipper.Electrophoresis sequence apparatus have been provided with a gel plate assembly, usually mounted exactly vertically, and a buffer tank at the top and bottom. An apparatus known as BRL Model S2, manufactured by Bethesda Research Labs, Gaithersburg, MD, is designed so that the upper buffer tank is part of the support structure to which the gel plate assembly is attached. The removable bottom tank 10 does not significantly participate in retaining the gel plate assembly on site. As a result, special retaining elements must be individually pulled and / or turned, and released to retain the vertically positioned gel plate assembly so that it does not tilt. Such retaining elements are cumbersome and time consuming to use, especially if more than four pieces are required per unit of time. record collection. The difficulties increase as a result, until the retaining devices are appropriately secured, the gel plate assembly must be held manually so that the plate 20 does not tilt.

Et andet problem i tilknytning til de øverste buffertanke, som er udformet i ét stykke med støtteopbygningen, er det, at de er vanskelige at rengøre. Autoklavering er et effektivt dekontamineringsskridt, bortset fra, at når buffer-25 tanken udgør en del af det samlede elektroforeseapparat, og ikke kan fjernes derfra, er det ikke hensigtsmæssigt at autoklavere den øverste buffertank, idet det samlede apparat skulle autoklaveres.Another problem associated with the upper buffer tanks, which are designed in one piece with the support structure, is that they are difficult to clean. Autoclaving is an effective decontamination step, except that when the buffer tank forms part of the total electrophoresis apparatus and cannot be removed therefrom, it is not appropriate to autoclave the upper buffer tank as the entire apparatus should be autoclaved.

Et andet problem med kendte vertikalt placerede elek-30 troforeseapparater er, at den øverste buffertank, som følge af dens faste placering, ikke tillader gelpladesamlinger af forskellig længde at blive anvendt. Sådanne varierende længder anvendes, eftersom visse prøver kræver en længere bane for en egnet adskillelse. Når der således er behov for en 35 anden længde, skal der tilvejebringes et helt afvigende apparat, eller der skal i det mindste tilvejebringes en DK 170939 B1 2 anden pladesamling plus den øverste buffertank, i stedet for at der kunne anvendes en gelpladesamling med en afvigende længde på samme apparat.Another problem with known vertically placed electrophoresis devices is that the upper buffer tank, due to its fixed location, does not allow gel plate assemblies of different length to be used. Such varying lengths are used since some samples require a longer path for a suitable separation. Thus, when a second length is needed, a completely different device must be provided or at least a second plate assembly plus the upper buffer tank should be provided, instead of using a gel plate assembly with a different length of the same apparatus.

Et andet problem i tilknytning til kendte elektrofo-5 reseapparater er det, at fastgørelseselementer, som anvendes til at fastholde gelpladesamlingen på plads, tilvejebringer fastholdelsestryk af forskellig størrelse, i afhængighed af, hvor meget de er skruet ind på stedet. Dette medfører i visse tilfælde et utilstrækkeligt fastholdelsestryk, og for 10 at kompensere herfor i visse tilfælde for stort et tryk, som beskadiger samlingen.Another problem associated with prior art electrophoresis devices is that fasteners used to hold the gel plate assembly in place provide retention pressures of varying size, depending on how much they are screwed into place. This results in insufficient retaining pressure in some cases, and to compensate for this in certain cases too large a pressure which damages the joint.

I US-A-4.715.942 omtales et elektroforeseapparat, som indbefatter en øvre beholder for en bufferopløsning, en beholder til vand til fastholdelse af temperaturen, og en 15 nedre beholder til en bufferopløsning. Der er tilvejebragt elektroder i hver bufferopløsningsbeholder. Den øvre bufferopløsningsbeholder og vandbeholderen til fastholdelse af temperaturen er udformet i ét stykke og er monteret på det bærende stativ ved indgreb i ét på vertikale plader, som er 20 fastgjort til den øvre flade på det bærende stativ. Den øvre bufferopløsningsbeholder og vandbeholderen for fastholdelse af temperaturen holdes på plads ved hjælp af indgrebs-tappe, som er tilvejebragt på beholderen, og som samvirker med indgrebsfordybninger i de vertikale plader. Dette arran-25 gement muliggør hurtig montering og fjernelse af den øvre bufferopløsningsbeholder og vandbeholderen til fastholdelse af temperaturen på bærestativet. Den nedre bufferopløsnings-beholder fastholdes på udskiftelig vis til det bærende stativ.US-A-4,715,942 discloses an electrophoresis apparatus which includes an upper reservoir for a buffer solution, a reservoir for water for maintaining the temperature, and a lower reservoir for a buffer solution. Electrodes are provided in each buffer solution container. The upper buffer solution reservoir and the temperature retention tank are integrally formed and mounted on the support frame by engaging one on vertical plates secured to the upper surface of the support frame. The upper buffer solution container and the water container for maintaining the temperature are held in place by means of engagement pins provided on the container and which cooperate with engagement depressions in the vertical plates. This arrangement enables rapid mounting and removal of the upper buffer solution container and the water container for maintaining the temperature of the carrier rack. The lower buffer solution container is interchangeably held to the supporting frame.

30 Det er således kendt at der er problemer med fasthol delse af gelpladesamlingen, især eftersom samlingen er tilknyttet den øvre og den nedre buffertank.Thus, it is known that there are problems with holding the gel plate assembly, especially since the joint is associated with the upper and lower buffer tanks.

Ifølge et aspekt af opfindelsen er der tilvejebragt et elektroforeseapparat til adskillelse ved elektroforese af 35 elektrisk ladede stoffer, idet apparatet indbefatter i det mindste én understøtning til montering af i det mindste én DK 170939 B1 3 gelpladesamling, et par buffertanke for hver gelpladesamling, monteringsorganer til fastgørelse af tankparret i hver sin ende af hver gelpladesamling, samt organer til påtrykning af en strøm i modstående ender af hver gelpladesamling, 5 idet apparatet er karakteristisk ved, at i det mindste én af buffertankene indbefatter monteringsorganer således, at den i det mindste ene tank kan monteres således, at den kan frigøres igen, idet den er i væskekontakt med det indre af gelpladesamlingen, og monteringsorganerne, som kan udløses, 10 indbefatter en klemindretning, som presser den i det mindste ene tank mod støtteindretningen med gelpladesamlingen fastholdt mellem den i det mindste ene tank og støtteindretningen .According to one aspect of the invention, there is provided an electrophoresis apparatus for separation by electrophoresis of 35 electrically charged substances, the apparatus including at least one support for mounting at least one gel plate assembly, a pair of buffer tanks for each gel plate assembly, mounting means for attaching the tank pair at each end of each gel plate assembly, and means for applying a current at opposite ends of each gel plate assembly, the apparatus being characterized in that at least one of the buffer tanks includes mounting means such that the at least one tank may be mounted so that it can be released again, being in liquid contact with the interior of the gel plate assembly, and the releasable mounting means 10 includes a clamping device which presses the at least one tank toward the support device with the gel plate assembly held between the at least one tank and the support device.

Det er et fordelagtigt træk ved opfindelsen, at hver 15 buffertank kan fjernes for rensning, som ikke nødvendigvis behøver at omfatte hele apparatet.It is an advantageous feature of the invention that each buffer tank can be removed for purification which does not necessarily have to comprise the entire apparatus.

Det er et dertil knyttet fordelagtigt træk, at den øverste buffertank kan anvendes i tilknytning til gelpladesamlinger med indbyrdes afvigende længder, hvorved man undgår 20 behovet for særlige apparater for hver længde.It is an advantageous feature that the upper buffer tank can be used in connection with gel plate assemblies of differing lengths, thereby avoiding the need for special apparatus for each length.

Det er yderligere et fordelagtigt træk, at monteringen af buffertankene automatisk tilvejebringer den sammenklemmende virkning, som er nødvendig til fastholdelse af gelpladesamlingen i stillingen.It is a further advantageous feature that the mounting of the buffer tanks automatically provides the clamping effect necessary to hold the gel plate assembly in position.

25 Det er et dertil knyttet fordelagtigt træk, at klem virkningen på gelpladesamlingen ikke kræver nogen afgørelse hos brugeren af, hvor stort det egnede klemmetryk skal være.25 An advantageous feature is that squeezing the effect on the gel plate assembly does not require any determination by the user of the appropriate clamping pressure.

En eksempelvis udførelsesform af den foreliggende opfindelse forklares i det følgende nærmere under henvisning 30 til tegningen, på hvilken: fig. 1 er en afbildning af et elektroforeseapparat i oprejst stilling, hvilket apparat er udformet med de ved opfindelsen tilvejebragte træk, fig. 2 er et isometrisk udsnit af det indre af appa-35 ratet, som delvis anskueliggør apparatets drejelighed og aflåselighed, DK 170939 B1 4 fig. 3 er en del af et snit gennem gelpladesamlingen, fig. 4 er en del af en isometrisk afbildning af den nederste buffertank i apparatet, fig. 5 er en del af en afbildning af den i fig. 4 5 viste tank set forfra, fig. 6 er en delvis afbildning af et snit langs linien VI-VI i fig. 5, fig. 7 er en delvis afbildning i stor målestok af den del i fig. 6, som er identificeret som "VII", 10 fig. 8 er en del af en isometrisk afbildning af den ved opfindelsen tilvejebragte øverste buffertank, fig. 9 er en afbildning af den i fig. 8 viste buffertank set forfra, således som den er placeret på en gelpladesamling, og 15 fig- 10 viser en del af et snit taget stort set langs linien X-X i fig. 9.An exemplary embodiment of the present invention is explained in more detail below with reference to the drawings, in which: FIG. 1 is a view of an electrophoresis apparatus in an upright position, which apparatus is formed with the features provided by the invention; FIG. 2 is an isometric section of the interior of the apparatus, partially illustrating the rotatability and lockability of the apparatus; FIG. 3 is a part of a section through the gel plate assembly; FIG. 4 is a part of an isometric view of the lower buffer tank of the apparatus; FIG. 5 is a part of a view of the embodiment of FIG. 4 is a front view of the tank, FIG. 6 is a partial sectional view taken along line VI-VI of FIG. 5, FIG. 7 is a large scale partial view of the portion of FIG. 6, which is identified as "VII"; Figure 8 is a part of an isometric view of the upper buffer tank provided by the invention; 9 is a view of the embodiment of FIG. 8 is a front view of the buffer tank as placed on a gel plate assembly, and FIG. 10 is a portion of a section taken substantially along the line X-X of FIG. 9th

Opfindelsen forklares i tilknytning til et foretrukket elektroforeseapparat, hvori begge buffertanke kan fjernes og kan fastgøres under anvendelse af en forud fastsat klem-20 virkning. Apparatet forklares endvidere, som et apparat, hvori buffertankene fortrinsvis fastklemmes ved fastklemning af gelpladesamlingen mellem dem og støtteorganet. Herudover er visse aspekter af opfindelsen nyttige, selv om kun én buffertank kan fjernes, og/eller hvad enten gelpladesamlingen 25 fastholdes mellem tanken og støtteorganet, eller ikke.The invention is explained in conjunction with a preferred electrophoresis apparatus in which both buffer tanks can be removed and secured using a predetermined clamping action. The apparatus is further explained as an apparatus in which the buffer tanks are preferably clamped by clamping the gel plate assembly between them and the support member. In addition, certain aspects of the invention are useful, although only one buffer tank can be removed and / or whether the gel plate assembly 25 is retained between the tank and the support member or not.

Træk ved elektroforeseapparatet som også beskrives heri, bortset fra buffertankene som kan udtages, indbefatter emner, hvorom der er stillet særskilte krav i sideløbende europæiske patentansøgninger nr. 89 304 106.4, nr.Features of the electrophoresis apparatus also disclosed herein, other than the removable buffer tanks, include items subject to separate claims in parallel European patent applications No. 89,304,106.4, no.

30 89 304 164.0 og nr. 89 304 165.7, som nu er offentliggjort henholdsvis som EP-A-0 339 971, EP-A-0 339 974 og EP-A- 0 339 975.30 89 304 164.0 and No. 89 304 165.7, which are now published respectively as EP-A-0 339 971, EP-A-0 339 974 and EP-A-0 339 975.

De dele, som i nærværende beskrivelse omtales som "vertikale", "horisontale", "op", "nedad", eller med tilsva-35 rende retningsangivelser, henviser til delenes orientering ved normal brug.The parts herein referred to as "vertical", "horizontal", "up", "downward", or with corresponding directions indicate the orientation of the parts in normal use.

DK 170939 B1 5DK 170939 B1 5

Et elektroforeseapparat 20, som er opbygget i overensstemmelse med den foreliggende opfindelse, indbefatter, se fig. 1, et støtteorgan, som stort set indbefatter en bundplade 22, en vertikal støtte 24, to klemindretninger 5 26, 28, som er monteret på hver sin side af støtten 24, og støtteskinner 29, 30, hvorved tilvejebringes en bærende flade for en gelpladesamling 40, som vist mere fuldstændigt i fig. 3. Klemindretningerne 26 og 28 er fastgjort således, at de kan drejes, se fig. 2, på støtten 24 på grund af bøs-10 ningen 60, som hviler på enden af støtten 24. Der er tilvejebragt en låsemekanisme 170, som virker ved at fastholde klemorganerne 26, 28 mod yderligere rotation således, at de kan frigives igen. Et par buffertanke 70 og 100 er monterede henholdsvis i bunden af apparatet 20, fig. 1, og opadtil, 15 på kendt vis. (Der er kun vist én buffertank 70 nedadtil i fig. 1 for overskuelighedens skyld, således at renden 32 kan anskueliggøres).An electrophoresis apparatus 20 constructed in accordance with the present invention includes, see FIG. 1, a support member which includes substantially a base plate 22, a vertical support 24, two clamping devices 5 26, 28 mounted on each side of the support 24, and support rails 29, 30, thereby providing a support surface for a gel plate assembly 40, as shown more fully in FIG. 3. The clamping devices 26 and 28 are fixed so that they can be rotated, see FIG. 2, on the support 24 due to the bushing 60 which rests on the end of the support 24. A locking mechanism 170 is provided which acts by holding the clamping means 26, 28 against further rotation so that they can be released again. A pair of buffer tanks 70 and 100 are mounted at the bottom of the apparatus 20, respectively. 1, and upwards, 15 in known manner. (Only one buffer tank 70 is shown downward in Fig. 1 for the sake of clarity so that the gutter 32 can be seen).

Selvom den bærende flade kan være en hvilken som helst egnet overflade, må det foretrækkes, at hver af skin-20 nerne 29, 3 0 er udformet som et skinnepar, f.eks. parret 30, fig. 6, således at der tilvejebringes en støttende flade for gelpladesamlingen 40. Som det ses tydeligst i fig. 5 og 7 er bunden af hver skinne tilvejebragt med en bærende rende 32 med en forreste læbe 34, som sikrer gelpladesamlingen 40 25 mod at falde ud af skinnerne, se tillige fig. 1. Renden 32 indbefatter et lodret skulderstykke 36 og et fremspring 38 i bunden. Yderligere indbefatter hvert spor en flange 39, som forløber i sporets hele længde, som vist i tilknytning til sporet 30 i fig. 8 og 10, til samvirke med klemorganerne 30 for buffertankene, som senere forklaret.While the supporting surface may be any suitable surface, it is preferred that each of the rails 29, 30 is formed as a rail pair, e.g. the pair 30, FIG. 6, so as to provide a supporting surface for the gel plate assembly 40. As can be seen most clearly in FIG. 5 and 7, the bottom of each rail is provided with a supporting gutter 32 having a front lip 34 which secures the gel plate assembly 40 25 from falling out of the rails, see also FIG. 1. Gutter 32 includes a vertical shoulder piece 36 and a projection 38 at the bottom. Further, each groove includes a flange 39 extending throughout the length of the groove, as shown adjacent to the groove 30 of FIG. 8 and 10, to cooperate with the buffer tanks 30 for the buffer tanks, as explained later.

Hvert sporpar 29 eller 30 er knyttet til et særligt klemorgan. Med den foreliggende opbygning er der mulighed for, at apparatet kan drives med to elektroforesegelplade-samlinger samtidigt. Alternativt kan yderligere par (ikke 35 vist) monteres ud fra samme støtte, idet støtteindretningen roteres omkring den vertikale støtte 24, indtil den udpegede DK 170939 B1 6 gelpladesamling vender mod operatøren.Each track pair 29 or 30 is associated with a particular clamping member. With the present structure, it is possible for the apparatus to be operated with two electrophoresis plate assemblies simultaneously. Alternatively, additional pairs (not shown 35) may be mounted from the same support as the support device is rotated about the vertical support 24 until the designated gel 170 assembly faces the operator.

De flader, som bærer gelpladesamlingerne med sporparret er monteret således at der dannes en vinkel a, se fig. 1, i forhold til det vertikale plan, hvilken vinkel 5 andrager mellem 5 og 10°. Den nederste del af gelpladesamlingen og buffertanken 70 er tættere ved operatøren, når gelpladesamlingen vender mod operatøren, end den øverste del af gelpladesamlingen og buffertanken 100. Fordelen herved er, at i modsætning til fuldkommen lodrette pladeunderstøt-10 ninger på kendte apparater skal der ikke tages hensyn til fastholdelse af pladen på understøtningen under klemorganernes montering. I stedet for indsættes pladen simpelthen i renden 32 og hviler op imod sporene 29 eller 30. Renden 32 forhindrer på effektiv vis pladen i at falde ned, og med 15 vinklen α hindres pladesamlingen 40 effektivt i at vippe forover, før buffertankene 70 og 100 er indsat.The surfaces supporting the gel plate joints with the groove pair are mounted such that an angle α is formed, see FIG. 1, relative to the vertical plane, which angle 5 is between 5 and 10 °. The lower portion of the gel plate assembly and buffer tank 70 are closer to the operator when the gel plate assembly faces the operator than the upper portion of the gel plate assembly and buffer tank 100. The advantage is that, unlike perfectly vertical plate supports on known apparatus, consideration of retaining the plate on the support during mounting of the clamping means. Instead, the plate is simply inserted into the gutter 32 and rests against the grooves 29 or 30. The gutter 32 effectively prevents the plate from falling, and with the angle α, the plate assembly 40 is effectively prevented from tilting forward before the buffer tanks 70 and 100 are inserted.

Det må foretrækkes, at vinklen α ikke er mindre end 5°, eftersom vinklen ellers vil afvige utilstrækkeligt fra den lodrette retning, hvorfor en vipning kunne være mere 20 sandsynlig. Det må foretrækkes, at vinklen ikke er større end 10°, eftersom dette ville medføre, at apparatet fylder for meget nedad til.It is preferred that the angle α is not less than 5 °, since otherwise the angle will deviate insufficiently from the vertical direction, so a tilt could be more likely. It is preferred that the angle is not greater than 10 ° as this would cause the apparatus to fill too much downwards.

Gelpladesamlingen 40 i fig. 3 viser den samlede samling, som indbefatter en forplade 42, en bagplade 44, af-25 standsorganer 46 og 48, som holder de to plader adskilte, således at gelen (ikke vist) på kendt vis kan dannes imellem pladerne. Det foretrækkes at bagpladen 44 forbedres for at sikre en bedre dannelse og iagttagelse af farvelinier i prøver, som underkastes elektroforese. Pladen 44 indbefatter 30 en forreste flade 50 og en bageste flade 52. Den bageste flade 52 er fortrinsvis dækket med et spejlende materiale 54, såsom sølv eller aluminium, og et lag 56 er fastgjort over belægningen 54, stort set over hele området bag strømningsoverfladeområdet på pladesamlingen 40. Det fastgjorte 3 5 lag 56 over området "bag strømningsoverfladearealet" på gelpladesamlingen betyder, at laget 56 ligger ud over et DK 170939 B1 7 område med en udstrækning, som falder sammen med og bagved strømningsoverfladeområdet af gelen, hvori elektroforeseka-nalerne ligger. Dette areal er defineret med længden "1", fig. 1 og med bredden "w", fig. 3. Laget 56 er udpeget i et 5 materiale, som på effektiv vis fordeler eller overfører varme, f.eks. aluminium. Dette lag er tæt fastgjort til belægningen 54 på hele dennes overflade, ved anvendelse af egnede midler, f.eks. et klæbemateriale, såsom et acrylklæbe-middel. Hele laminatet er herefter overtrukket med et ikke 10 ledende lag.The gel plate assembly 40 in FIG. 3 shows the assembled assembly including a front plate 42, a back plate 44, spacers 46 and 48 which keep the two plates separate so that the gel (not shown) can be formed between the plates in a known manner. It is preferred that the backing plate 44 be improved to ensure better formation and observation of color lines in samples subjected to electrophoresis. The plate 44 includes a front face 50 and a rear face 52. The rear face 52 is preferably covered with a mirror material 54, such as silver or aluminum, and a layer 56 is secured over the coating 54, substantially throughout the area behind the flow surface area of plate assembly 40. The attached layer 56 over the area "behind the flow surface area" of the gel plate assembly means that layer 56 extends beyond a region of an extent coinciding with and behind the flow surface area of the gel in which the electrophoresis signals lie. . This area is defined by the length "1", fig. 1 and with the width "w", fig. 3. The layer 56 is designated in a material which efficiently distributes or transmits heat, e.g. aluminum. This layer is tightly adhered to the coating 54 on its entire surface, using suitable means, e.g. an adhesive material such as an acrylic adhesive. The entire laminate is then coated with a non-conductive layer.

Imidlertid anvendes laget 56 ikke til at afgive varme fra gelpladesamlingen. Tværtimod er de bærende overflader, som udgøres af flangerne 39, bevist holdt væk fra legemet 28 i en afstand, hvorved effektivt tilvejebringes en død 15 luftspalte 58, fig. 4 og 8. Denne isolerende luftspalte sikrer, at den varme, som frembringes under processen, forbliver på stedet således at den tid, som er nødvendig til at opnå drifttemperaturen, reduceres.However, layer 56 is not used to emit heat from the gel plate assembly. On the contrary, the supporting surfaces constituted by the flanges 39 are proven to be kept away from the body 28 at a distance, thus effectively providing a dead air gap 58, FIG. 4 and 8. This insulating air gap ensures that the heat generated during the process remains in place so that the time needed to reach the operating temperature is reduced.

Laget 56 virker således ved at overføre varme fra 20 varmere midtområder til de ydre områder, hvorved temperaturgradienterne nedsættes. Som et resultat heraf dannes farve-linier, som har det ønskede rette forløb, i gelen, og resultaterne er frie for termisk bevirkede fejl. Den samlede temperatur forbliver imidlertid høj, hvorved farvefronterne 25 fremføres hurtigere, end det er tilfældet med enheder med vand. Det vil sige, at vandet bruger meget længere tid til opvarmning til driftstemperaturen.The layer 56 thus works by transferring heat from 20 warmer central regions to the outer regions, thereby reducing the temperature gradients. As a result, color lines having the desired proper course are formed in the gel, and the results are free of thermally produced errors. However, the overall temperature remains high, advancing color fronts 25 faster than water units. That is, the water takes much longer to heat to the operating temperature.

Farvefronternes evne til at blive behandlet stort set frie for fejl består, også selv om der tilføres en effekt 3 0 så stor som 60 watt for at opnå temperaturer så høje som 70°C, når denne måles på forsiden af pladen 42, hvorved tilvejebringes farvefronthastigheder så store som 0,5 cm/min.The ability of the color fronts to be treated virtually error-free remains, even if a power of as large as 60 watts is applied to achieve temperatures as high as 70 ° C when measured on the face of plate 42, thereby providing color-front velocities as large as 0.5 cm / min.

En anden fordel ved en sådan gelpladeopbygning er de spejlende overflader. Disse overflader sikrer, at brugeren 35 bedre kan registrere tilstanden på fladen 50, fig. 3. Dette skyldes, at de spejlende overflader gør det nemmere på nøj- DK 170939 B1 8 agtig vis at indsætte prøveopløsninger med pipette i hulrummet mellem pladerne 42 og 44. Det hjælper også med opdagelse af partikler af snavs, hvis der forekommer sådanne, på fladen 50, når pladen 44 renses. Farvelinierne registreres også 5 lettere med spejlet på plads.Another advantage of such a gel plate structure is the mirrored surfaces. These surfaces ensure that the user 35 can better detect the condition of the surface 50; 3. This is because the mirrored surfaces make it easier to accurately insert sample solutions with pipette into the cavity between plates 42 and 44. It also helps in detecting particles of dirt, if any, on the surface 50 when the plate 44 is cleaned. The color lines are also detected 5 more easily with the mirror in place.

I overensstemmelse med et aspekt af opfindelsen kan den ene eller begge, fortrinsvis begge, buffertanke fjernes, og således autoklaveres. Det mest foretrukne er, at de er fastgjort ved klemorganer, således at de kan frigives, hvilke 10 klemorganer ikke alene fastholder tankene i stilling, men også presser gelpladesamlingen mod bæreindretningen.In accordance with one aspect of the invention, one or both, preferably both, buffer tanks can be removed and thus autoclaved. The most preferred is that they are secured by clamping means so that they can be released, which not only holds the tanks in position but also presses the gel plate assembly against the carrier.

Den nederste buffertank 70, fig. 4, indbefatter et hulrum 74, fig. 6 og 7, som er åben opadtil 76, fig. 5. Tanken er udformet med håndtag 78 i hver ende, og to klem-15 stykker 80, 80', som er lejret omkring tappe 82 på den øverste flade 76. Hvert klemstykke er udformet med en håndtagsdel 83. En torsionsfjeder 84 er viklet omkring hver tap 82 i den ene ende, fig. 6, og er fastgjort i den anden ende til en skrue 86, som er fastgjort til overfladen 76. Som følge 20 heraf presses klemstykkerne 80 og 80' indad, dvs. at klemstykket 80 påvirkes til rotation mod uret, fig. 6, og klemstykket 80' påvirkes til rotation med uret.The lower buffer tank 70, FIG. 4, includes a cavity 74; FIG. 6 and 7 which are open upwardly 76; FIG. 5. The tank is formed with handle 78 at each end and two clamping pieces 80, 80 'which are mounted around pins 82 on the upper surface 76. Each clamping piece is formed with a handle portion 83. A torsion spring 84 is wound around each pin 82 at one end; FIG. 6, and is secured at the other end to a screw 86 which is attached to the surface 76. As a result, the clamping pieces 80 and 80 'are pressed inwardly, i.e. that the clamping piece 80 is actuated for counterclockwise rotation; 6, and the clamping piece 80 'is rotated clockwise.

Virkningen heraf er ikke alene at fastklemme tanken 70 til støtteorganet ved skinnerne 29, men fortrinsvis også 25 at klemme gelpladesamlingen 40 fast mellem buffertanken og skinnerne 29. Med denne opbygning er det ikke nødvendigt at anvende særskilte klemorganer eller fastgørelsesorganer til at holde tanken 70 på plads, bortset fra de organer, som anvendes til at klemme gelpladesamlingen på plads.The effect of this is not only to clamp the tank 70 to the support member at the rails 29, but also preferably 25 to clamp the gel plate assembly 40 between the buffer tank and the rails 29. With this construction, it is not necessary to use separate clamping means or fastening means to hold the tank 70 in place. , except for the means used to clamp the gel plate assembly in place.

30 Klemstykkerne 80 og 80' betjenes ved, at man simpelt hen fatter klemstykket med tommelfingeren og det ene af håndtagene 78 med fingrene og presser mod torsionsfjederen til frigørelse af klemstykket fra berøringen med gelpladesamlingen. Denne frigør igen buffertanken fra indgrebet med 35 sporene 29 eller 30, således at buffertanken kan fjernes og renses.The clamps 80 and 80 'are operated by simply gripping the clamp with the thumb and one of the handles 78 with the fingers and pressing against the torsion spring to release the clamp from the contact with the gel plate assembly. This in turn releases the buffer tank from the engagement with the grooves 29 or 30, so that the buffer tank can be removed and cleaned.

DK 170939 B1 9 På kendt vis er et bananstik 90 fastgjort på siden af tanken 70 for tilvejebringelse af forbindelser med elektriske ledninger. Indvendig i tanken er stikket 90 forbundet med en trådelektrode 92, fig. 5, som understøttes af en 5 pind eller et rør 94, som forløber langs bunden i tanken 70. Røret 94 og elektroden 92 er fortrinsvis således udformet, at de kan fjernes som en enhed.DK 170939 B1 9 In a known manner, a banana plug 90 is attached to the side of the tank 70 for providing connections with electrical wires. Inside the tank, the plug 90 is connected to a wire electrode 92, fig. 5, which is supported by a 5 pin or tube 94 extending along the bottom of the tank 70. The tube 94 and the electrode 92 are preferably designed to be removable as a unit.

Det må foretrækkes, at den forreste flade 96 på tanken 70 er gennemsigtig, således at iagttagelse af indholdet kan 10 foretages.It is preferred that the front face 96 of the tank 70 be transparent so that observation of the contents can be made.

På tilsvarende vis kan tanken 100 fastklemmes således, at den kan frigives igen, til den anden ende af gelpladesamlingen 40, fig. 8-10. Tanken 100 indbefatter også et hulrum 104, som er afgrænset af en bund 106, fig. 10, en forreste 15 gennemsigtig plade 108, fig. 8-10, sidevægge 110, 112 og en meget kort vertikal bagvæg 114. Bagvæggen 114 er kortere, end højden af forpladen 108, således at væsken i hulrummet 104, fig. 9, vil være i berøring med gelpladesamlingen 4 0 (vist punkteret, fig. 10) , som er i berøring med tanken 20 100. For at sikre, at væsken ikke hældes ud af hulrummet 104, er indsat en pakning 116 (vist punkteret i fig. 9), som er ført i U-form i et spor langs bagsiden af sidevæggene 110, 112 og bagvæggen 114, fig. 9 og 10.Similarly, the tank 100 can be clamped so that it can be released again, to the other end of the gel plate assembly 40; 8-10. The tank 100 also includes a cavity 104 bounded by a bottom 106, FIG. 10, a front 15 transparent plate 108; FIG. 8-10, side walls 110, 112 and a very short vertical rear wall 114. The rear wall 114 is shorter than the height of the front plate 108, so that the liquid in the cavity 104; 9 will be in contact with the gel plate assembly 40 (shown punctured, Fig. 10) which is in contact with the tank 20 100. To ensure that the liquid is not poured out of the cavity 104, a gasket 116 (shown punctured in Fig. 9) which is guided in a U-shape in a groove along the back side of the side walls 110, 112 and the back wall 114; 9 and 10.

Klemindretningerne til tanken 100 indbefatter et 25 stempel 120, fig. 8 og 10, med en pind 122, som er ført igennem sidevæggen 110 til en plade 124, som er dimensioneret til at komme i berøring med flangen 39. Inden for væggen 110 er pinden 122's diameter formindsket, fig. 10, således at der kan optages en trykfjeder 126, som er indsat i en 30 udboring 128 for klemindretningen. Knappen 130 anvendes til at trykke klemindretningen mod virkningen af fjederen 126, hvorved klemindretningen, buffertanken og gelpladesamlingen 40 frigøres fra berøring med skinnen 29 eller 30. Greb 132, 134, fig. 8-10, er tilvejebragt til hjælp for den manuelle 35 nedtrykning af stemplet 120, således at trykket fra fjederen 126 kan overvindes.The clamping devices for the tank 100 include a plunger 120, FIG. 8 and 10, with a pin 122 which is passed through the side wall 110 to a plate 124 which is dimensioned to contact the flange 39. Within the wall 110, the diameter of the pin 122 is reduced; 10 so that a compression spring 126 can be accommodated which is inserted into a bore 128 of the clamping device. The button 130 is used to press the clamping device against the action of the spring 126, thereby releasing the clamping device, buffer tank and gel plate assembly 40 from contact with rail 29 or 30. Handle 132, 134, fig. 8-10, is provided to aid in manual depression of the plunger 120 so that the pressure from the spring 126 can be overcome.

DK 170939 B1 10DK 170939 B1 10

Som fjeder 126 kan en hvilken som helst trykfjeder anvendes. Det må dog foretrækkes at fjederen har en fjederkonstant på omkring 0,735 N/mm, således som dette er opnået ved to op mod hinanden liggende fjedre P/N CO 480-045-2000 S, 5 som fremstilles af Associated Spring, Bristol, CT.As spring 126, any compression spring can be used. However, it is preferred that the spring has a spring constant of about 0.735 N / mm as obtained by two adjacent springs P / N CO 480-045-2000 S, manufactured by Associated Spring, Bristol, CT.

Der kan anvendes andre klemindretninger i stedet for stemplet 120. For eksempel kunne der monteres drejelige klemindretninger, som de i fig. 4 viste klemindretninger i tilslutning til den nederste buffertank 70, idet de kunne 10 påvirkes til drejning omkring en vertikal akse mod bagsiden af flangen 39. På tilsvarende vis kunne klemindretningerne ved den nederste buffer 70 erstattes med stempler 120, således som udformede til den øverste buffertank, hvilke stenpier kunne være påvirkede til presning mod gelpladesamlingen 40.Other clamping devices may be used instead of piston 120. For example, rotatable clamping devices such as those in FIG. 4 in connection with the lower buffer tank 70, which could be actuated to rotate about a vertical axis towards the back of the flange 39. Similarly, the clamping devices at the lower buffer 70 could be replaced with pistons 120 as designed for the upper buffer tank. which stone piers could be impacted for pressing against the gel plate assembly 40.

15 I begge tilfælde indtræder en frigivelse ved at trække i klemmekanismen. Eftersom tryk anses for at være lettere at udøve, foretrækkes det aktuelt viste klemarrangement.15 In both cases, a release occurs by pulling the clamping mechanism. Since pressure is considered to be easier to apply, the currently shown clamping arrangement is preferred.

Sådanne klemindretninger, som ovenfor forklaret, har den fordel, at de overfører stort set det samme forud fast-20 satte tryk til gelpladesamlingen, således at behovet for at vurdere størrelsen af klemtrykket hver gang pladen monteres undgås.Such clamping devices, as explained above, have the advantage of transferring substantially the same predetermined pressure to the gel plate assembly, so that the need to assess the size of the clamping pressure each time the plate is mounted is avoided.

En yderligere forbedring i tanken 100 er anvendelsen af organer, som automatisk passerer tanken på toppen af 25 gelpladesamlingen 40. Disse organer indbefatter anvisningsindretninger 140, som forløber stort set i samme plan som den øverste flade 146 af hulrummet 104, bagtil udover pakningen 116. Anvisningsindretningerne 140 er fundamentalt set fremspring, som er udformet til at være placerede på 30 den øverste del 144 af gelpladesamlingen 40, fig. 8 (hvilken øverste del samtidig passer sammen med den øverste flade 146 på forpladen 108, fig. 9) . Eftersom anvisningsindretningerne 140 passer mellem skinneparrene, fig. 8, virker de også ved at placere tanken 100 i siden på samlingen 40.A further improvement in the tank 100 is the use of means which automatically pass the tank on the top of the gel plate assembly 40. These means include indicating devices 140 which extend substantially in the same plane as the upper surface 146 of the cavity 104, in addition to the gasket 116. The indicating devices 140 are basically projections which are designed to be located on the upper portion 144 of the gel plate assembly 40; 8 (which upper portion simultaneously matches the upper surface 146 of the front plate 108, Fig. 9). Since the indicating devices 140 fit between the rail pairs, FIG. 8, they also act by placing the tank 100 in the side of the assembly 40.

35 Som følge af denne opbygning kan der anvendes en hvil ken som helst længde på gelpladesamlingen i apparatet, uden DK 170939 B1 11 at det forhindres, at tanken 100 er placeret oven på samlingen, forudsat at længden ikke er større, end længden af skinnerne 29 eller 30. Det vil sige, at tanken 100 altid vil være placeret på toppen af gelpladesamlingen 40, eftersom 5 dette sikres ved anvisningsindretningerne 140.As a result of this construction, any length of the gel plate assembly in the apparatus can be used without preventing the tank 100 from being placed on top of the joint, provided that the length is not greater than the length of the rails 29 or 30. That is, the tank 100 will always be located on the top of the gel plate assembly 40 since this is secured by the indicating devices 140.

Et bananstik 150, en tråd 152 og en støttepind 154 er monteret i tanken 100, fig. 9 og 10, på samme måde, som dette er sket i den nederste tank 70.A banana plug 150, a thread 152 and a support pin 154 are mounted in the tank 100; 9 and 10, in the same way as in the lower tank 70.

En udtømningsventil 160 er på kendt vis monteret i 10 bunden 106, fig. 8 og 9, til tømning af tanken.A discharge valve 160 is in a known manner mounted in the bottom 106, fig. 8 and 9, for emptying the tank.

I en anden udformning, som ikke er vist, kan pladen 108 være udformet som en forstørrende plade.In another embodiment not shown, plate 108 may be formed as an enlarging plate.

Det stel, hvorved apparatet 20 roterer, indbefatter (se fig. 2) , trapezformede organer 172 som er monterede 15 vertikalt på to horisontale plader 174 og 176. Pladen 174 er tilvejebragt med et hul ved 178 således, at den vertikale støtte 24 frit kan føres herigennem. Pladen 176 er tilvejebragt med en bøsning 60, som herefter forklaret. De udadtil vendende kanter 180, 182 på hvert trapezformet organ 172 er 20 tilvejebragt som understøtning for sporparrene, som monteres på klemindretningerne, som er vist med stiplede linier. Bøsningen 60, fig. 2, hviler på en spids (ikke vist) . På denne måde drejer det samlede stel, indbefattende pladerne 174, 176, bøsningen 60, de trapezformede organer 172 og de 25 fastgjorte klemindretninger og skinner på den vertikale støtte 24.The frame through which the apparatus 20 rotates includes (see Fig. 2) trapezoidal members 172 mounted vertically on two horizontal plates 174 and 176. The plate 174 is provided with a hole at 178 so that the vertical support 24 can freely is passed through here. The plate 176 is provided with a sleeve 60, as explained below. The outwardly facing edges 180, 182 of each trapezoidal member 172 are provided as a support for the groove pairs mounted on the clamping devices shown in broken lines. Bush 60, FIG. 2, rests on a tip (not shown). In this way, the overall frame, including the plates 174, 176, the sleeve 60, the trapezoidal members 172 and the 25 clamped fasteners rotates and rails on the vertical support 24.

Det må foretrækkes, at apparatets drejning midlertidigt kan afbrydes ved låsemekanismen 170, fig. 2. Mekanismen 170 indbefatter et med to stillinger tilvejebragt låsende 30 trykorgan af kendt opbygning, som ikke er vist, og som bevirker at et organ kommer i indgreb med eller frigøres fra tænderne i en låseplade 186.It is preferred that the rotation of the apparatus may be temporarily interrupted by the locking mechanism 170, fig. 2. The mechanism 170 includes a two-position locking 30 pressure member of known construction which is not shown, which causes a member to engage or be released from the teeth of a lock plate 186.

Claims

An electrophoresis apparatus (20) for electrophoresis separation of electrically charged substances, the apparatus (20) including at least one support (22, 24, 5 26, 28, 29, 30) for mounting at least one gel plate assembly ( 40, 42, 44, 46, 48, 50, 52, 54, 56), a pair of buffer tanks (70, 100) for each gel plate assembly (40, 42, 44, 46, 48, 50, 52, 54, 56), mounting means (80, 80 ', 82, 83, 84, 86, 120, 122, 124, 126, 128, 130, 132, 134) for securing the tank pair (70, 100) at each end of the gel plate assembly ( 40, 42, 44, 46, 48, 50, 52, 54, 56), and means (90, 92, 94, 150, 152, 154) for applying a current at opposite ends of each gel plate assembly (40, 42, 44, 46, 48, 50, 52, 54, 56), characterized in that at least one of the buffer tanks (70, 100) includes mounting means (80, 80 ', 82, 83, 84, 86, 120, 124 , 126, 128, 130, 132, 134) such that the at least one tank (70, 100) can be mounted so that it can be released again as it is in the fluid contact with the interior of the gel plate assembly (40, 42, 20 44, 46, 48, 50, 52, 54, 56), and the mounting means (80, 80 ', 82, 83, 84, 86, 120, 124, 126, 128 , 130, 132, 134) which can be released include a clamping device (80, 80 ', 84, 120, 126) which presses the at least one tank (70, 100) against the support device (22, 24, 26). 28, 29, 30) with the gel plate assembly (40, 42, 44, 46, 48, 50, 52, 54, 56) held between the at least one tank (70, 100) and the supporting device (22, 24, 26). 28, 29, 30).

Apparatus according to claim 1, characterized in that both tanks (70, 100) are provided with mounting means (80, 80 ', 82, 83, 84, 86, 120, 124, 126, 128, 130, 132 , 134) such that the gel plate assembly (40, 42, 44, 46, 48, 50, 52, 54, 56) is held in position on the support (22, 24, 26, 28, 29, 30) by a clamping means (80, 80 ', 84, 120, 126) in the two buffer tanks.

Apparatus according to claim 1 or 2, characterized in that the buffer tank (100) at the upper end of the gel plate assembly (40, 42, 44, 46, 48, 50, 52, 54, 56) includes display devices and mounting means (140) for both automatic placement of the upper buffer tank (100) relative to the upper part of the gel plate assembly 5 (40, 42, 44, 46, 48, 50, 52, 54, 56), and for mounting the upper buffer tank (100) on the support (22, 24, 26, 28, 29, 30) at the upper portion of the gel plate assembly (40, 42, 44, 46, 48, 50, 52, 54, 56).

Apparatus according to claims 1-3, characterized in that the support (22, 24, 26, 28, 29, 30) for the gel plate assembly (40, 42, 44, 46, 48, 50, 52, 54, 56) includes a pair of rails (29, 30) on each side of the gel plate assembly (40, 42, 44, 46, 48, 50, 52, 54, 56) and a clamping device (120) provided on each side of the top 15 buffer tank (100) and positioned to exert pressure against the rails (29, 30) and include means (126) for actuating the clamping member (120) against the rails (29, 30) with the gel plate assembly (40, 42, 44, 46, 48 , 50, 52, 54, 56) between the rails (29, 30) and the upper buffer tank (100), 20 and means (130) for manual overcoming of the means (126) for actuating the clamping means (120).

Apparatus according to claims 1-4, characterized in that the buffer tank (70) at the lower end of the gel plate assembly (40, 42, 44, 46, 48, 50, 52, 54, 56) includes an upwardly open cavity (74). ) designed to receive the gel plate assembly (40, 42, 44, 46, 48, 50, 52, 54, 56) and appropriate fluid, and to clamp means (80, 80 ', 82, 83, 84, 86. include a lever member for exerting pressure on the gel plate assembly (40, 42, 44, 46, 48, 50, 52, 54, 56), the cavity (74) and the weight s tang portion being designed to press the gel plate assembly (40, 42, 44) , 46, 48, 50, 52, 54, 56. against the support (22, 24, 26, 28, 29, 30), and means (84) for actuating the lever portion against the gel plate assembly (40, 42, 44, 46, 48 , 50, 52, 54, 56).

Apparatus according to claim 5, characterized in that the clamping means (80, 80 ', 82, 83, 84, 86) further include a handle (83) for manual overcoming of the actuating means (84), so that the lower buffer tank (70) can be removed. 5 10 20 25 30 35