DK166328B - Fremgangsmaade til fremstilling af et hoejaktivt, myceliefrit avoparcin-alkylsulfat-kompleks - Google Patents

Fremgangsmaade til fremstilling af et hoejaktivt, myceliefrit avoparcin-alkylsulfat-kompleks Download PDF

Info

Publication number
DK166328B
DK166328B DK372683A DK372683A DK166328B DK 166328 B DK166328 B DK 166328B DK 372683 A DK372683 A DK 372683A DK 372683 A DK372683 A DK 372683A DK 166328 B DK166328 B DK 166328B
Authority
DK
Denmark
Prior art keywords
avoparcin
filtrate
free
solids
acidified
Prior art date
Application number
DK372683A
Other languages
English (en)
Other versions
DK166328C (da
DK372683A (da
DK372683D0 (da
Inventor
Jack Peter Waite
Original Assignee
American Cyanamid Co
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by American Cyanamid Co filed Critical American Cyanamid Co
Publication of DK372683D0 publication Critical patent/DK372683D0/da
Publication of DK372683A publication Critical patent/DK372683A/da
Publication of DK166328B publication Critical patent/DK166328B/da
Application granted granted Critical
Publication of DK166328C publication Critical patent/DK166328C/da

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12PFERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P19/00Preparation of compounds containing saccharide radicals
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K9/00Peptides having up to 20 amino acids, containing saccharide radicals and having a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K9/006Peptides having up to 20 amino acids, containing saccharide radicals and having a fully defined sequence; Derivatives thereof the peptide sequence being part of a ring structure
    • C07K9/008Peptides having up to 20 amino acids, containing saccharide radicals and having a fully defined sequence; Derivatives thereof the peptide sequence being part of a ring structure directly attached to a hetero atom of the saccharide radical, e.g. actaplanin, avoparcin, ristomycin, vancomycin
    • YGENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10STECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S930/00Peptide or protein sequence
    • Y10S930/01Peptide or protein sequence
    • Y10S930/19Antibiotic
    • YGENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10STECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S930/00Peptide or protein sequence
    • Y10S930/01Peptide or protein sequence
    • Y10S930/27Cyclic peptide or cyclic protein

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
  • Fodder In General (AREA)
  • Transition And Organic Metals Composition Catalysts For Addition Polymerization (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)
  • Addition Polymer Or Copolymer, Post-Treatments, Or Chemical Modifications (AREA)

Description

DK 166328 B
Den foreliggende opfindelse angår en fremgangsmåde til fremstilling af et højaktivt, myceliefrit avoparcin--alkylsulfat-kompleks.
Avoparcin er et vigtigt antibiotikum på markedet, 5 der anvendes til foder til kødproducerende dyr for at fremskynde deres vækstrate. Dette antibiotikum fremstilles i reglen ved en fermenteringsproces og består i det væsentlige af to vandopløselige glycopeptider, der herefter omtales som a- og β-komponenten i avoparcin. Disse komponenter er 10 omtalt i følgende publicationer: W.J. McGahren m.fl., Structure of Avoparcin Components, Journal of the American Chemical Society, 102, 1671 (1980), og Avoparcin, Journal of the American Chemical Society, 101, 2237 (1979).
Avoparcins struktur (AV290) er vist i fig. I nedenfor.
15 α-Komponenten har den i fig. I viste konfiguration, hvor R* og R begge er hydrogen. I /3-komponenten er R* hydrogen, medens R er chlor.
Fig. I
CM,OH
i w
to/CAl—o... VyT
\^7j * ^U1 - N
V'" p“ c"=
30 YTp m W
1 (0R I
H0 \/0H A o ? 35 α-avoparcin R1 = R = hydrogen 80 08 /3-avoparcin R1 = hydrogen, R = chlor
DK 166328 B
2 Når avoparcin (antibiotikum i fig. I) anvendes som tilskud til et dyrefoder, indgives det i reglen til dyrene, i eller sammen med foderet, i form af et alkylsulfatkompleks associeret med de tørrede faststoffer fra hele den høstede 5 masse, hvori det er produceret. I praksis er dette produkt opnået- ved en fremgangsmåde, der omfatter (1) syrning af hele den høstede masse fra fermenteringsprocessen indeholdende avoparcin, (2) behandling af hele den syrnede høstmasse med filterhjælp og alkalimetalalkylsulfat, (3) filtrering af 10 den således behandlede syrnede masse og (4) tørring af det udvundne faststof, der består af: Avoparcin—alkylsulfatkompleks, filterhjælp, mycelier og andre uopløselige fermenteringsstoffer. Selv om det således fremstillede produkt har været anvendt effektivt til fremskyndelse af vækstraten 15 for dyr i næsten 10 år, uden at der har været rapporteret uønskede bivirkninger eller toksicitetsproblemer, begrænser den forholdsvis lave aktivitet af dette myceliumholdige produkt i en vis udstrækning salget af dette antibiotikum og de fysiske former, hvori det kan indgives. Der er derfor 20 iværksat et ret omfattende forskningsprogram for at udvikle en praktisk og kommercielt lønnende fremgangsmåde til fremstilling af højaktivt, myceliefrit avoparcin.
Selv om teknikken antyder, at avoparcin-alkylsulfat--komplekser kan fås i en færdig form fri for mycelier, er 25 de kendte metoder desværre ikke helt tilfredsstillende, når de anvendes i industriel målestok til fremstilling af den kvantitet avoparcin-alkylsulfat-kompleks, der er nødvendig inden for den kødproducerende industri. De begrænses af lange filtreringsperioder og et betydeligt energi- og/eller 30 brændstofforbrug, som er nødvendigt for at opnå den grad af tørring, der er nødvendig for at få tørt, stabilt produkt. Yderligere lader den fysiske form og udseendet af det avoparcin-alkylsulfat-kompleks, der produceres i stor målestok, noget tilbage at ønske.
35 Det har nu overraskende vist sig, at der under den ' fermenteringsproces, hvorunder antibiotiket avoparcin dannes,
DK 166328 B
3 også produceres mørkfarvede, organiske derivater, der synes at være den primære kilde til de ovennævnte problemer. De hæmmer filtrering, forårsager dannelse af tjærelignende agglomerater i avoparcin-alkylsulfat-bundfaldet og hindrer 5 tørring af det produkt, der skal udvindes.
Det er derfor opfindelsens formål at tilvejebringe en fremgangsmåde til fremstilling af et højaktivt, mycelie-frit avoparcin-alkylsulfat-kompleks, som er praktisk taget frit for mørkfarvede, organiske derivater, som er dannet 10 under avoparcinfermentering.
Disse ønskede resultater opnås ved den her omhandlede fremgangsmåde, som er ejendommelig ved, at den omfatter følgende trin: (a) fremstilling af en fermenteringsvæske ved syrning 15 af hele den høstede mæsk til en pH-værdi på 1,9-2,3 med en pharmakologisk acceptabel syre og filtrering af den syrnede mæsk til opnåelse af et syrefiltrat, som er praktisk taget frit for mycelier og uopløselige fermenteringsstoffer, (b) tilsætning til det myceliefri syrefiltrat af 5- 20 -50 g/liter .adsorberende faststoffer, som er enten et magne- sium-siliciumoxid-materiale med et forhold siC^MgO på mellem 2,2:1 og 6,5:1 eller aktivt kul, (c) omrøring af den således dannede blanding i 15-45 minutter og fraskillelse af de adsorberende faststoffer og 25 mørkfarvede, organiske derivater fra det avoparcinholdige syrefiltrat, (d) tilsætning til det syrnede filtrat, hvorfra de adsorberende faststoffer og de mørkfarvede, organiske derivater er fjernet, af et kompleksdannende middel valgt blandt 30 forbindelser med formlen: CH3-(CH2)n-0-S02-OM, hvor n er et helt tal fra 9 til 17, og M er natrium eller kalium, eller blandinger deraf i en mængde på 0,5-1,5 g kompleksdannende middel pr. 1 g avoparcin, (e) koncentrering af faststofferne i den med alkali-35 metalalkylsulfat behandlede, syrnede væske og fraskillelse af brugt væske fra faststofferne, der indeholder avoparcin-
DK 166328B
4 -alkylsulfat-komplekset, (f) behandling af de avoparcinholdige faststoffer med vandig ammoniak til indstilling af deres pH-værdi på 6,5--9,0 og derefter tørring af den fremkomne blanding til ud-5 vinding af det højaktive, myceliefri avoparcin-alkylsulfat- -kompleks, som er praktisk taget frit for mørkf arvede, organiske derivater, som er dannet under avoparcinfermenterin-gen.
10 Fremgangsmåden indebærer den yderligere fordel, at den lange filtreringsperiode, der normalt er påkrævet for at udvinde avoparcinkomplekset, nedsættes, og den kræver kun et minimalt forbrug af energi og/eller brændstof til tørring af det ønskede produkt.
15 Ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen syrnes hele den høstede fermenteringsmæsk indeholdende det i ovenstående fig. I viste antibiotikum.
Hele den høstede fermenteringsmæsk behandles med en passende mineralsyre, fortrinsvis svovlsyre, til en pH-værdi 20 i intervallet 1,9-2,3, fortrinsvis 2,1-2,3. Andre egnede mineralsyrer er phosphorsyre og saltsyre. Den syrnede mæsk filtreres derefter på en egnet måde, f.eks. med et roterende vakuumfilter. Der kan tilsættes en smule gængs filterhjælp, såsom diatomé jord, til den syrnede mæsk for at lette filtre-25 ring, men dette er hverken vigtigt eller særlig ønskeligt ved den foretrukne fremgangsmåde ifølge opfindelsen som beskrevet heri. Filtratet fra denne behandling indeholder største delen af avoparcinet fra den syrnede mæsk og ledes til en opbevaringsbeholder til yderligere oparbejdning og 30 udvinding.
Faststofferne fra denne filtrering kaldes den primære kage. Faststofferne indeholder faktisk alle de uopløselige stoffer i ferment er ingsmæsken og mindre mængder tilbageholdt avoparcin. For at udvinde dette residualavoparcin opslæmmes 35 den primære kage i vand og behandles med mineralsyre, fortrinsvis svovlsyre, til indstilling af opslæmningens pH-
DK 166328 B
5 -værdi på mellem 2,1 og 2,3. Derefter filtreres opslæmningen på passende måde, såsom med et roterende vakuumfilter. Filtratet fra denne behandling kombineres med syrefiltratet fra den indledende filtrering, og faststofferne derfra, der 5 indeholder de mycelier, der er dannet under avoparcinfer-menteringen, kasseres som opbrugt kage.
Til det kombinerede syrefiltrat, der indeholder avo-parcin og opløselige, mørkfarvede, organiske derivater, der er dannet under fermenteringen, sættes et stærkt selektivt 10 adsorberende, uorganisk faststof. Dette kan være attapulgit, magnesiumtrisilicat eller et syntetisk, hydratiseret magne-sium-siliciumoxid-materiale, der forhandles som "Celkate 1-21" af Johns Manville. Disse adsorptionsmidler har et forhold mellem Si02 og MgO på mellem 2,2:1 og 6,5:1 og en 15 gennemsnitlig partikelstørrelse i intervallet fra 2 til 15 μτα, fortrinsvis 2,9-10 μπι.
Alternativt kan der anvendes en passende kvalitet aktivt kul som adsorptionsmiddel. De foretrukne adsorptionsmidler er dog attapulgitler, magnesiumtrisilicat og et synte-20 tisk, hydratiseret magnesium-siliciumoxid-materiale. Den mængde, der tilsættes, ligger i intervallet 5-50 g, fortrinsvis 7,5-40 g, adsorptionsmiddel pr. liter syrefiltrat fra mæsken.
Blandingen af syrefiltrat og adsorptionsmiddel omrøres 25 i 15-45 minutter, fortrinsvis ca. 30 minutter, således at der kan foregå en selektiv adsorption af de mørkfarvede, organiske derivater (dvs. de organiske, mørkfarvede legemer, der forårsager, at der dannes tjærelignende agglomerater i avoparcin-alkylsulfat-bundfaldet) ved hjælp af adsorptions-30 midlet. Om nødvendigt kan der sættes mineralsyre, fortrinsvis svovlsyre, til den behandlede syrefiltratblanding for at holde dennes pH-værdi mellem 1,9 og 2,3, fortrinsvis ca. 2,0.
Efter ældning filtreres blandingen, vaskes med syrnet vand (pH 2,0), og faststofferne, der indeholder det brugte 35 adsorptionsmiddel og organiske, tjærelignende komponenter kasseres fra systemet. I praksis kan de brugte faststoffer
DK 166328 B
6 kasseres som spild, eller de kan behandles med vandig ammoniak for at opløse de mørkf arvede, organiske derivater og genvinde adsorptionsmidlet til recirkulation.
Syrefiltratet, der er frit for mycelier og mørkfar-5 vede, organiske derivater, afkøles derefter til en temperatur mellem 5 og 15eC, fortrinsvis til 10-12°C. En vandig opløsning indeholdende 10-20, fortrinsvis 14-15, vægt% alkali-metalalkylsulfat af kommerciel renhed sættes langsomt til filtratet, og den således dannede blanding får lov at ældes 10 under omrøring i 0,5-1,5 time. Under ældningsprocessen får alkalimetalalkylsulfat-syrefiltrat-blandingen lov at Varme op til ca. 20°C. Derefter får faststofferne lov at bundfældes i blandingen, og spildvæsken fjernes ved dekantering eller på anden gængs måde.
15 Den mængde alkalimetalalkylsulfat, der sættes til det avoparcinholdige syrefiltrat, ligger i intervallet fra 0,50 til 1,5 g, fortrinsvis fra 0,7 til 0,9 g, alkalimetalalkylsulfat pr. g avoparcin.
De alkalimetalalkylsulfater, der kan anvendes ved 20 fremgangsmåden ifølge opfindelsen, kan gengives ved følgende formel
CH3-(CH2)n-0-S02-OM
25 hvor n er et helt tal fra 9 til 17, og M er natrium eller kalium. Typisk er sådanne alkalimetalalkylsulfater, der kan anvendes, f.eks. natriumdecylsulfat, kaliumhendecylsulfat, natriumlaurylsulfat, kaliumtridecylsulfat, natriummyristyl-sulfat, kaliumpentadecylsulfat, natriumcetylsulfat, kalium-30 heptadecylsulfat og natriumoctadecylsulfat. Blandinger af alkalimetalalkylsulfater kan også anvendes, f.eks. en blanding af natriumhendecylsulfat og kaliumoctadecylsulfat, en blanding af kaliumdecylsulfat og natriumtridecylsulfat eller af kaliummyristylsulfat og natriumpentadecylsulfat. Når der 35 anvendes blandinger af alkalimetalalkylsulfater, fås en tilsvarende blanding af avoparcin-alkylsulfat-komplekser.
DK 166328 B
7
Det bundfældede salt fra ovennævnte behandling indeholdende avoparcin-alkylsulfat-komplekset neutraliseres med vandig ammoniak, og det neutraliserede slam tørres på gængs måde, f.eks. ved sprøjte- eller frysetørring, hvorved man 5 får produktet. Produktet har en antibiotisk aktivitet mellem 31 og 45% og er 300-400% kraftigere end biomasse indeholdende avoparcinprodukter og har en 100-200% større aktivitet end avoparcin-alkylsulfat-komplekser, der er fremstillet ved fremgangsmåder, der ikke sørger for fjernelse af de mørk-10 farvede, organiske derivater fra avoparcinmæskens syrefiltrater før behandling med et alkalimetalalkylsulfat.
Fremgangsmåden ifølge opfindelsen er belyst grafisk ved det nedenfor i fig. II viste arbejdsdiagram.
15
DK 166328 B
8
FicT. XI
(Arbejdsdiagram)
Tjærefrit og.mycéliefrit avoparcin 98? HaSO,, * '
Filterhjælp -E_i-L.- (evt.)
Primærkage vand 4* 4·
Sprøjtevask RVF (roterende med vand vakuumfilter) — ' I-——^ •» PRIMSRKAGE - GENOP-98? H2SO4 ** SLÆMNING PH 2,1-2,3 < *
Sprøjtevask -> RVF S
med vand __ -> brugt kage » *
Adsorptionsmid- - del (syntetisk
magnesium-sili- KOMBINERET
ciumoxid) SYREFILTRAT
'» 98? H2SOH ÆLDNING 30 MIN. pH 2,0
Brugt eller adsorbe- „ . · rende middel (synte-
VasK roea vana _ Filurerpresnmg * tisk magnesium-iili- ved PH 2 ciumoxid) og orga- _._ ftiske tjære- stoffer ' *
DK 166328 B
9
Fig. II (fortsat) (Arbejdsdiagram) l_
3EHANDL: SYREFILTRAT AFKØLET TIL 10-12°C
Y
Alkaiimetalal- + KOMPLEKS-FÆLDNING kylsulfat ''
ÆLDNING I 1 TIME MED OPVARMN. TIL 20°C
T
__, —- ^ Brugt vandig væs- BUNDFÆLDN.- DEKANTERING -> afiøb • f
NEUTRALISERING AF KOM-Vandig -* plf.KSKONCEMTRAT
3111monxak pH 6,5-7_ ’· SPRØJTETØRRING -> Vand afdampes
PRODUKT
DK 166328 B
10
Opfindelsen vil i det følgende blive nærmere forklaret ved hjælp af eksempler.
Eksempel 1 5 Fældning af avonarcin-natriumlaurvlsulfat-kompleks ud fra syrefiltratet fra mæsken
En række produktionsfermenteringsmæske indeholdende antibiotiket avoparcin indstilles på pH 2,0-2,3 med 98%'s svovlsyre og filtreres ved hjælp af et med "Dicalite®" i 10 forvejen dækket Buchner-filter. En vandig 14%'s opløsning af natriumlaurylsulfat sættes langsomt til en prøve på 1 liter af syrefiltratet. På tidlige stadier af tilsætningen dannes et fint, gelatinøst bundfald, der er praktisk taget umuligt at fraskille både ved filtrering og centrifugering.
15 Fraskillelse kan kun ske ved filtrering ved hjælp af et alt for stort niveau filterhjælp. Efterhånden som udfældningen af avoparcin-laurylsulfat-komplekset nærmer sig et niveau på 90%, begynder partiklerne endvidere at agglomerere og få en tjærelignende konsistens. Når udfældningen er på over.
20 ca. 90%, flokkulerer partiklerne ved yderligere tilsætning af natriumlaurylsulfat og agglomererer til store, halvf lydende, tjærelignende klumper. Der findes ingen tilfredsstillende metode til fraskillelse af laurylsulfatkomplekset fra disse tjærelignende klumper.
25
Eksempel 2 Fældning af avoparcin-laurvlsulfat-kompleks ud fra mæskens svrefiltrat i nærvær af calciumcarbonat
Fremgangsmåden i eksempel 1 gentages, bortset fra at 30 der anvendes prøver på 3-5 liter filtrat fra syrnet mæsk, og at der sættes 15-20 g CaC03 til mæskens syrefiltrat med pH 2. Delvis opløsning af CaC03 indtræder, og opløsningens pH forøges til 4,1-4,3. Blandingens pH genindstilles på 2--2,1 med svovlsyre. Der indtræder fuldstændig opløsning, og 35 calciumsulfat begynder at udfældes temmelig langsomt ved ældning. Der sættes en vandig 14%'s natriumlaurylsulfatop-
DK 166328 B
11 løsning til hver prøve, og der iagttages co-udfældning af calciumsulfat og avoparcin-laurylsulfat i hver prøve. Til at begynde med viser bundfaldet sig at være homogent i hver prøve, og alle udviser gode filtreringsegenskaber. Imidlertid 5 viser det sig, at alle opslæmninger, når de ældes i 30 minutter, begynder at adskilles. Antibiotikumkomplekset i hver prøve agglomererer og adskilles i tjærelignende klumper, hvorfra komplekset ikke kan udvindes med lethed.
10 Eksempel 3 Fældning af avoparcin-laurvlsulfat-kompleks ud fra filtrat fra svrnet mæsk i nærvær af calciurohvdroxid
Fremgangsmåden i eksempel 1 gentages igen, bortset fra at der anvendes prøver på 3-5 liter filtrat fra syrnet 15 mæsk, og at der sættes Ca(OH)2 til mæskens filtrat med pH
2. Filtratprøver fra syrnet mæsk behandles med en 20%'s vandig kalkopslæmning og indstilles på pH 7-9 hermed. Derefter tilsættes en 14%'s natriumlaurylsulfatopløsning, og pH indstilles meget langsomt på 2,0 ved tilsætning af 98%'s 20 svovlsyre. Der dannes et bundfald indeholdende avoparcin--laurylsulfat-komplekset, der er homogent og til at begynde med let at filtrere. Som i det foregående eksempel indtræder der imidlertid udskillelse af komplekset i form af en tjære, når blandingen henstår i kort tid, dvs. ca. 30 minutter.
25 Produktet udvindes og analyseres for antibiotikumaktivitet.
Det viser sig, at produktet har en aktivitet i intervallet 17-22%. De opnåede data er anført nedenfor.
DK 166328B
12
Forsøg nr. 1 2 3 4 Gen.sn.
Antibiotikumaktivi -5 tet i syrnet mæsk- filtrat (gram/liter) 13,64 12,00 10,45 10,45 11,64 g SLS-*-/g avoparcin i behandlet syre- 10 filtrat 0,69 0,82 1,0 1,0 0,88 % effektivitet^
Behandl, filtrat/-15 sprøj tetørret produkt 98,8 96,9 102,9 93,8 98,1 I alt 90,0 91,1 98,0 87,6 91,8 20 Antibiotikumaktivitet i sprøjtetørret produkt (% på basis af tørstofindhold) 21,68 20,6 18,7 17,45 19,6 25 1 SLS = natriumlaurylsulfat.
2 Antibiotikumaktivitet overført fra filtrat til tørprodukt.
30 Når disse data sammenlignes med data opnået ved frem gangsmåden ifølge den foreliggende opfindelse, dvs. nedenstående eksempler 7-9, fremgår det, at fremgangsmåden ifølge opfindelsen giver et produkt med en 100-200%'s forbedring med hensyn til aktiviteten af det udvundne avoparcin-lauryl-35 sulfat-kompleks i forhold til den, der opnås ved ovennævnte behandling.
Eksempel 4 Fældning af avoparcin-laurylsulfat-kompleks fra syrnet mæsk-40 filtrat i nærvær af en række forskellige, findelte. faste adsorptionsmidler
Ved disse forsøg filtreres hele den høstede, syrnede fermenteringsmæsk indeholdende antibiotiket avoparcin, mycelier og alle de komponenter, der fremkommer ved fermente-45 ringsprocessen. Syrefiltratet opdeles derefter i prøver med ens volumen, og de enkelte prøver behandles med 50 g/liter
DK 166328 B
13 findelt, fast attapulgit, bentonit, montmorillonit, pulveriseret cellulose, magnesiumtrisilicat eller et syntetisk, hydratiseret magnesium-siliciumoxid-materiale og en sådan mængde vandig opløsning indeholdende 14 vægt% natriumlauryl-5 sulfat, at der fås 1,0 g natriumlaurylsulfat pr. g avoparcin-.antibiotikum målt i filtratet fra den syrnede mæsk. Blandingerne omrøres i 30 minutter, således at avoparcin-lauryl-sulfatet får lov at dannes og derefter at bundfældes. I alle tilfælde iagttages, at der dannes mørkebrune, tjærelig-10 nende agglomerater i hvert af de udfældede faststoffer. Som følge heraf er alle behandlinger utilfredsstillende.
Eksempel 5
Fremstilling af avoparcin-laurvlsulfat-kompleks ud fra svmet 15 mæskfiltrat forudbehandlet med en række forskellige, findelte. faste adsorptionsmidler
Ved disse forsøg filtreres hele den høstede, syrnede fermenteringsmæsk indeholdende avoparcin-antibiotikum, mycelier og alle de komponenter, der udvikles under fermente-20 ringsprocessen. Syrefiltratet opdeles derefter i prøver af lige stort volumen, og de enkelte prøver behandles med 50 g/liter findelt, fast attapulgit, bentonit, montmorillonit, pulveriseret cellulose, magnesiumtrisilicat eller syntetisk magnesium-siliciumoxid-materiale. Hver af blandingerne om-25 røres i 30 minutter og filtreres derpå. Faststofferne fra hver blanding udvindes, og farven undersøges.
Ved denne bedømmelsé får adsorptionsmidler, der ad-sorberer betydelige mængder af de tjæredannende komponenter fra den syrnede mæsks filtrat, en mørkebrun farve. Når disse 30 midler vaskes med vandig ammoniak, opløses de adsorberede tjæredannende komponenter ligeledes af vaskeopløsningen, hvilket giver denne en mørkebrun farve og får det faste adsorptionsmiddel til at genantage sit naturlige udseende.
Ved disse forsøg observeres det, at der sker en meget 35 betydelig reduktion af farven på de filtrater af syrnet mæsk, der er behandlet med attapulgit, magnesiumtrisilicat
DK 166328 B
14 og syntetisk, hydratiseret magnesium-siliciumoxid-middel.
Der sker imidlertid incren afgørende ændring af farven på de filtratet af syrnet mæsk, der er blevet behandlet med bentonit, montmorillonit eller pulveriseret cellulose.
5 Endvidere er genvundet attapulgit, magnesiumtrisilicat og de syntetiske, hydratiserede magnesium-siliciumoxid-mate-rialer fra ovennævnte behandlinger mørkebrune, medens genvundet bentonit, montmorillonit og pulveriseret cellulose fra disse behandlinger praktisk taget har uændret, naturlig 10 farve. Det viser sig således overraskende, at attapulgit, magnesiumtrisilicat og det anvendte, syntetiske, hydratiserede magnesium-siliciumoxid-materiale er stærkt selektive som adsorptionsmidler til de tjæredannende bestanddele, der findes i den høstede, syrnede antibiotikumfermenteringshel-15 mæsk.
Portioner af hvert af de som ovenfor behandlede filtrater fra syrnet mæsk behandles derpå med en vandig opløsning indeholdende 14 vægt% natriumlaurylsulfat. Der tilsættes nok natriumlaurylsulfatopløsning til hver prøve til at give 20 1,0 g sulfat pr. g avoparcinantibiotikum, målt i filtrater fra den syrnede mæsk.
De udfældede faststoffer i hvert af filtraterne fra den syrnede mæsk forudbehandlet med attapulgit, magnesiumtrisilicat eller syntetisk, hydratiseret magnesium-silicium-25 oxid-materiale er flødefarvede, og der findes intet tegn på agglomerering eller tjæredannelse i de udfældede avoparcin--laurylsulfat-komplekser. Imidlertid giver de filtrater fra syrnet mæsk, der er forudbehandlet med bentonit, pulveriseret cellulose eller montmorillonit, chokoladebrune bundfald 30 indeholdende tjærelignende agglomerater.
Fra ovennævnte data kan det ses, at attapulgit, magnesiumtrisilicat og syntetisk, hydratiseret magnesium-silicium-oxid-materiale er overraskende effektive, selektive adsorptionsmidler for organiske, tjæredannende komponenter i høs-35 tet, syrnet antibiotikumfermenteringshelmæsk, og at bentonit, montmorillonit og pulveriseret cellulose ikke er selektive
DK 166328 B
15 til dette formål.
Ud fra de nedenfor anførte data fremgår det også, at forholdet mellem SiC>2 og MgO i de selektive adsorptionsmidler ligger fra 2,2:1 til 6,5:1, hvorimod de ikke-selektive, 5 ineffektive adsorptionsmidler har et forhold mellem Si02 og MgO på 16,4:1 eller endnu højere.
Kemisk sammensætning af selektive op ikke-selektive adsorptionsmidler 10 % Synt., hydrati- Magnesi- Montmo- sammensætning seret magnesium- Attapul- umtrisi- Bento- r illo - som siliciumoxid-mat. git licat nit nit
Si02 65,5 68,0 68,5 64,17 68,96 15 MgO 14,9 10,5 31,5 3,90 1,53 A1203 4,0 12,0 - 17,14 11,67
CaO 0,4 1,7 - 1,48 1,47
Fe203 1,1 5,0 - 4,81 6,28
Andre 14,1 2,8 20 Forhold Si02:Mg0 4,4:1 6,5:1 2,2:1 16,4:1 45,0:1
Signifikante fysiske egenskaber hos attapulgit og syntetisk, hvdratiseret magnesium-siliciumoxid-materiale, der kan anvendes som selektive adsorp-25 tionsmidler til ti æredannende komponenter i filtrater fra svmede avoparcin-mæske
Syntetiske hydratiseret Fysisk magnesiura-siliciumoxid- 30 egenskaber -materiale Attapulgit
Gennemsnitlig par- 10 2,9 tikelstørrelse, μια (95% finere end 10) 35 Vægtfylde 2,41 2,45
Overfladeareal, m^/g 180,0 125,0
Massedensitet, kg/m3 205 334
DK 166328 B
16
Eksempel 6
Bestemmelse af adsorptionsmidlernes effektivitet med hensyn til selektiv fjernelse af organiske, tigredannende bestanddele fra svrefiltratet fra avoparcinmæsk med ringe eller 5 inaen reduktion af dettes indhold af avoparcin
Ved at følge den fremgangsmåde, der er beskrevet i ' forbindelse med ovenstående arbejdsdiagram, behandles alik-vote mængder syrefiltrat fra avoparcin-mæske (pH 2) ved omrøring med forskellige mængder af hvert adsorptionsmiddel, 10 der bedømmes. De behandlede filtrater omrøres i 30 minutter og filtreres derpå for at fjerne adsorptionsmidlet og bestemme, om adsorptionsmidlerne selektivt fjerner organiske, tjæredannende bestanddele fra syrefiltraterne fra avoparcin--mæsken.
15 Farven på de filtrater, der fremkommer ved ovennævnte metode, måles ved hjælp af en optisk komparator i forhold til Hazen-farvestandarder, og filtraternes avoparcinindhold bestemmes ved højtryksvæskechromatografi (HPLC).
De opnåede resultater er anført nedenfor.
DK 166328 B
17
Tilsat mængde adsorp- 5 tions- Filtratfarve, Avoparcin-HPLC- middel Hazen-enheder analyse af fil-
Adsorptionsmiddel (g/liter) (fort. 2:1 m. vand) trat (g/liter) 10 Ubehandlet syre- f iltrat - 500 10,20
Attapulgitpulver 10,0 350 9,76 15 20,0 300 9,56 30.0 200 9,22 40.0 150/200 9,13 20
Attapulgit- granulat 10,0 400 9,89 30/60 20,0 350 9,59 25 30.0 300 9,50 40.0 200 9,35 30 Syntetisk, hydra- 10,0 450 10,17 tiseret magnesium- 20,0 400 10,24 -siliciumoxid- 30,0 350 10,22 -materiale 40,0 300 10,27 35 Aktivt kul 2,5 400 10,18 5,0 350 10,09 7,5 200 9,90 40 10.0 150/200 9,78
Eksempel 7 45 Fremstilling af avoparcin-laurvlsulfat-kompleks ud fra syrnet mæskfiltrat 2 prøver å 2,5 liter filtrat fra syrnet avoparcinmæsk (pH 2,0), hvorfra mycelier er blevet fjernet ved filtrering, omrøres med syntetisk, hydratiseret magnesium-siliciumoxid-50 materiale i 15 minutter. De behandlede blandingers pH genindstilles på 2,0, og ældning af blandingerne fortsættes i
DK 166328 B
18
yderligere 15 minutter. Derefter filtreres det syntetiske, hydratiserede magnesium-siliciumoxid-(SHMSC) -materiale fra, og der fortrængningsvaskes med 500 ml vand indstillet på pH
2,0 med H2SO4.
5 Filtraterne kombineres og behandles med en 14%'s vandig opløsning af natriumlaurylsulfat, der bevirker udfældning af det flødefarvede avoparcin-laurylsulfat. Der iagttages ingen adskillelse eller tjæredannende agglomerater i bundfaldet.
10 Avoparcin-laurylsulfat-komplekset koncentreres ved dekantering, og produktet fås ved sprøjtetørring af slammet, der er neutraliseret til en pH-værdi mellem 6,5 og 7,0 med vandig ammoniak. Resultaterne af disse prøver er vist nedenfor.
15
Forsøg nr. 12 SHMSC, gram/liter 40,0 50,0 20
Ant ib i ot ikum-aktivitet i syrnet mæskfiltrat (gram/- liter) 16,68 16,68 25 g SLS/g avoparcin i behandlet syrefiltrat 0,82 0,85 30 % effektivitet
Syrnet mæskfiltrat/- behandlet filtrat 100,0 99,6 35 Behandlet filtrat/- sprøjtetørret produkt 92,35 92.3 I alt 92,35 91,9 40 Antibiotikum-aktivitet i sprøjtetørret produkt (% på tørstofbasis) 38,0 36,4 SLS = natriumlaurylsulfat 45 SHMSC = syntetisk, hydratiseret magnesium-siliciumoxid-mate-riale
DK 166328B
19
Eksempel 8
Fremgangsmåde til fremstilling af myceliefrit oa tiærefrit avoparcin-laurvlsulfat-kompleks. komplet fra fermenterinas-mæsk til sprøitetørret produkt 5 Der fremstilles en række præparater for at få effek tivitetsdata for hele fremgangsmåden fra fermenteringsmæsk til det sprøjtetørrede, myceliefri, tjærefri produkt. Den fremgangsmåde, der anvendes ved denne bedømmelse, er belyst i arbejdsdiagram II ovenfor.
10 I alle tilfældene udføres der mæskekstraktion ved pH
2,0 (98%·s svovlsyre) med en sekundær ekstraktion af den primære, brugte kage ved hjælp af 600 ml vand pr. kg udgangs-mæsk.
Det fremkomne, kombinerede syrefiltrat (CAF) behandles 15 med syntetisk, hydratiseret magnesium-siliciumoxid-materiale (SHMSC) ved pH 2,0, filtreres, og filterremanensen fortrængningsvaskes med vand ved pH 2,0 (H2SO4).
Avoparcin-laurylsulfat-komplekset udfældes fra det behandlede syrefiltrat (TAF) ved hjælp af samme metode som 20 beskrevet i fig. II ovenfor. Kompleksopslæmningen koncentreres ved bundfældning og dekantering, koncentratet neutraliseres (pH 6,5-7) med vandig ammoniak og sprøjtetørres derefter, hvilket giver produktet.
Resultaterne for en serie på 3 fremstillinger er 25 anført nedenfor.
DK 166328 B
20
Fermenteringsmæsk charge nr. 345 Gen.sn.
Mængde ekstraheret 5 mæsk, kg 111-
Antibiotikumaktivitet i mæsk (g/kg) 14,08 17,34 14,77 10 % effektivitet: mæsk/CAF 90,0 92,8 91,0 91,2 CAF/TAF 96,5 100,0 98,0 98,2 15 TAF/sprøjtetørret produkt 96,3 94,4 95,9 95,5
Samlet mæsk/sprøjte- tørret produkt 83,6 87,6 85,5 85,6 20 g SLS/g avoparcin i TAF 1,19 0,91 0,94 1,01
Antibiotikumaktivitet i sprøjtetørret pro- 25 dukt (% på tørstofbasis) 34,6 41,2 34,8 36,9
Eksempel 9
Fremgangsmåde til fremstilling af mvceliefrit og tiærefrit 30 avoparcin-laurvlsulfat-kompleks komplet fra fermenteringsmæsk til sprøitetørret produkt
Ved denne bedømmelse benyttes den fremgangsmåde, der er beskrevet i forbindelse med fig. II ovenfor.
Hele den høstede avoparcinfermenteringsmæsk syrnes 35 til pH 2,0 med 98%'s H2SO4 og filtreres, idet der anvendes et roterende vakuumfilter til at skille mycelierne fra det avoparcinholdige filtrat.
Derefter behandles en portion på 6 liter af filtratet fra den syrnede mæsk (pH 2) med 50 g/liter syntetisk, hydra-40 tiseret magnesium-siliciumoxid-materiale med genindstilling af pH på 2,0.
Det brugte adsorptionsmiddel filtreres fra og fortrængningsvaskes med 1 liter vand ved pH 2,0 (H2SO4) . Det samlede volumen af filtrat plus udvundet stof fra vask er 45 6,6 liter.
DK 166328 B
21
Komplekset fældes ved langsom tilsætning af 650 ml 15%' s natriumlaurylsulfat ved 8-10°C. Den fremkomne opslæmning opvarmes langsomt til 22°c under omrøring.
Efter bundfældning i 30 minutter dekanteres 5,26 5 liter så godt som klar, ovenstående væske fra.
Det tiloversblevne slamkoncentrat neutraliseres med vandig ammoniak og sprøjtetørres til udvinding af produk tet.
10 Analyse g/liter
Avoparcin i:
Udgangsfiltrat fra syrnet mæsk 12,70
Behandlet filtrat fra syrnet mæsk 11,49 15 % effektivitet %
Syrnet mæskfiltrat/behandlet filtrat 99,5
Behandlet filtrat/dekanteret væske 3,1
Behandlet filtrat/sprøjtetørret produkt 97,85 20 Total 97,36
Avoparcinbalance 101,45 g SLS/g avoparcin i behandlet filtrat 1,285
Antibiotikumaktivitet i sprøjtetørret produkt (% på tørstofbasis) 30,6 25 -
Ved disse bestemmelser viser det sig, at syntetisk, hydratiseret magnesium-siliciumoxid-materiale er yderst effektivt til fjernelse af organiske, tjæredannende kom-30 ponenter fra filtratet fra syrnet avoparcinmæsk. Det viser sig også, at fjernelse af de organiske, tjæredannende bestanddele i filtratet før behandling med et alkalimetal-alkylsulfat eliminerer agglomerering af tjære i det udfældede avoparcin-laurylsulfat-kompleks, og at der kan fås en næsten 35 kvantitativ udvinding af avoparcin ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen.

Claims (3)

1. Fremgangsmåde til fremstilling af et højaktivt, myceliefrit avoparcin-alkylsulfat-kompleks, som er praktisk taget frit for mørkf arvede, organiske derivater, som er 5 dannet under avoparcinfermentering, kendetegnet ved, at den omfatter følgende trin: (a) fremstilling af en fermenteringsvæske ved syrning af hele den høstede mæsk til en pH-værdi på 1,9-2,3 med en pharmakologisk acceptabel syre og filtrering af den syrnede 10 mæsk til opnåelse af et syrefiltrat, som er praktisk taget frit for mycelier og uopløselige fermenteringsstoffer, (b) tilsætning til det myceliefri syrefiltrat af 5--50 g/liter adsorberende faststoffer, som er enten et magne-sium-siliciumoxid-materiale med et forhold Si02:MgO på mellem 15 2,2:1 og 6,5:1 eller aktivt kul, (c) omrøring af den således dannede blanding i 15-45 minutter og fraskillelse af de adsorberende faststoffer og mørkfarvede, organiske derivater fra det avoparcinholdige syrefiltrat, 20 (d) tilsætning til det syrnede filtrat, hvorfra de adsorberende faststoffer og de mørkfarvede, organiske derivater er fjernet, af et kompleksdannende middel valgt blandt forbindelser med formlen: CH3-(CH2)n-0-S02-0M, hvor n er et helt tal fra 9 til 17, og M er natrium eller kalium, eller 25 blandinger deraf i en mængde på 0,5-1,5 g kompleksdannende middel pr. 1 g avoparcin, (e) koncentrering af faststofferne i den med alkali-metalalkylsulfat behandlede, syrnede væske og fraskillelse af brugt væske fra faststofferne, der indeholder avoparcin- 30 -alkylsulfat-komplekset, (f) behandling af de avoparcinholdige faststoffer med vandig ammoniak til indstilling af deres pH-værdi på 6,5--9,0 og derefter tørring af den fremkomne blanding til udvinding af det højaktive, myceliefri avoparcin-ålkylsulfat- 35 -kompleks, som er praktisk taget frit for mørkf arvede, organiske derivater, som er dannet under avoparcinfermenterin- gen. DK 166328 B 23
2. Fremgangsmåde ifølge krav 1, til fremstilling af et højaktivt, myceliefrit avoparcin-alkylsulfat-kompleks, ifølge krav 1, kendetegnet ved, at den høstede 5 helmæsk indstilles på en pH-værdi på 1,9-2,3 med svovlsyre.
3. Fremgangsmåde ifølge krav 2, kendetegnet ved, at adsorptionsmidlet er attapulgit, magnesium-trisilicat eller et syntetisk, hydratiseret magnesium-sili-ciumoxid-materiale med en gennemsnitlig partikelstørrelse 10 på 2-15 μιη, og at alkalimetalalkylsulfatet er natriumlauryl-sulfat. 15
DK372683A 1982-08-16 1983-08-15 Fremgangsmaade til fremstilling af et hoejaktivt, myceliefrit avoparcin-alkylsulfat-kompleks DK166328C (da)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US40836982 1982-08-16
US06/408,369 US4485102A (en) 1982-08-16 1982-08-16 High potency, mycelial-free avoparcin alkyl sulfate complex, and method for the preparation thereof

Publications (4)

Publication Number Publication Date
DK372683D0 DK372683D0 (da) 1983-08-15
DK372683A DK372683A (da) 1984-02-17
DK166328B true DK166328B (da) 1993-04-05
DK166328C DK166328C (da) 1993-08-23

Family

ID=23616011

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DK372683A DK166328C (da) 1982-08-16 1983-08-15 Fremgangsmaade til fremstilling af et hoejaktivt, myceliefrit avoparcin-alkylsulfat-kompleks

Country Status (16)

Country Link
US (1) US4485102A (da)
EP (1) EP0102499B1 (da)
JP (1) JPS5963195A (da)
KR (1) KR900009053B1 (da)
AT (1) ATE26656T1 (da)
AU (1) AU554985B2 (da)
CA (1) CA1201116A (da)
DE (1) DE3371042D1 (da)
DK (1) DK166328C (da)
EG (1) EG17792A (da)
ES (1) ES8503028A1 (da)
FI (1) FI77265C (da)
IE (1) IE55584B1 (da)
IL (1) IL69361A (da)
NZ (1) NZ205180A (da)
ZA (1) ZA836001B (da)

Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB8307847D0 (en) * 1983-03-22 1983-04-27 Lepetit Spa Antibiotics l 17054 and l 17046
US4831015A (en) * 1987-08-13 1989-05-16 American Cyanamid Company High potency biomass-free avoparcin and a method for its preparation
CN104292644B (zh) * 2014-10-27 2016-09-14 江苏中恒宠物用品股份有限公司 塑料宠物房用抗菌除臭塑料复合材料的生产工艺

Family Cites Families (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2698821A (en) * 1950-05-24 1955-01-04 Commercial Solvents Corp Method for the recovery of neomycin
US2786831A (en) * 1954-06-01 1957-03-26 Olin Mathieson Process of recovering basic antibiotics
US2793978A (en) * 1955-06-27 1957-05-28 Olin Mathieson Ion exchange purification of neomycin
US3338786A (en) * 1966-07-29 1967-08-29 American Cyanamid Co Antibiotic av290 and production thereof
US3832462A (en) * 1970-11-03 1974-08-27 American Cyanamid Co Antibiotic av290-syntan complexes and animal feed supplements
BE763156A (en) * 1971-02-18 1971-07-16 Greene Martin Neomycin undecylenate improved prepn
DD114342A5 (da) * 1973-04-27 1975-08-05
US3950515A (en) * 1973-04-27 1976-04-13 American Cyanamid Company Animal feeds containing antibiotic AV290
US4007167A (en) * 1974-10-09 1977-02-08 American Cyanamid Company Antibiotic BM123 and production thereof
JPS6017237B2 (ja) * 1977-07-19 1985-05-01 株式会社クラレ 動物の硬質組織用接着剤
DE2751902C2 (de) * 1977-11-21 1986-09-11 Henkel KGaA, 4000 Düsseldorf Futtermittelmischung enthaltend Avoparcin und proteolytische Enzyme
IL56424A0 (en) * 1978-02-02 1979-03-12 American Cyanamid Co Complexes of antibiotic bm123 gamma
US4259320A (en) * 1979-03-02 1981-03-31 American Cyanamid Company Concurrent use of avoparcin with growth-promoting implants in cattle

Also Published As

Publication number Publication date
DK166328C (da) 1993-08-23
ES524868A0 (es) 1985-02-01
IL69361A0 (en) 1983-11-30
FI832931A7 (fi) 1984-02-17
KR840005744A (ko) 1984-11-15
EG17792A (en) 1991-12-30
DK372683A (da) 1984-02-17
EP0102499B1 (en) 1987-04-22
DK372683D0 (da) 1983-08-15
JPS5963195A (ja) 1984-04-10
ATE26656T1 (de) 1987-05-15
NZ205180A (en) 1987-03-06
AU554985B2 (en) 1986-09-11
EP0102499A1 (en) 1984-03-14
KR900009053B1 (ko) 1990-12-17
DE3371042D1 (en) 1987-05-27
AU1798083A (en) 1984-02-23
IL69361A (en) 1986-12-31
ZA836001B (en) 1984-04-25
FI832931A0 (fi) 1983-08-15
FI77265C (fi) 1989-02-10
FI77265B (fi) 1988-10-31
ES8503028A1 (es) 1985-02-01
IE831769L (en) 1984-02-16
IE55584B1 (en) 1990-11-07
CA1201116A (en) 1986-02-25
US4485102A (en) 1984-11-27

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN114246261A (zh) 改性蒙脱石饲料添加剂及其制备方法和应用
GB2200355A (en) Potassium clavulanate
JPS60139623A (ja) バンコマイシン改良精製法およびその生産物
DK166328B (da) Fremgangsmaade til fremstilling af et hoejaktivt, myceliefrit avoparcin-alkylsulfat-kompleks
RU2178708C2 (ru) Способ получения инулина
CN108484630A (zh) 一种盐霉素提纯方法
EP0150574B1 (en) Treating marine alga to provide desalinating activity
US4804536A (en) Dietary fibres of seaweed having ion-exchange ability
WO2004089106A2 (en) Tannin mixture used as additives
RU2132689C1 (ru) Иммунотропный препарат
JPH02188415A (ja) 天然素材を原料とするヒドロキシアパタイト等の製造方法
JPH05244979A (ja) アンギオテンシン変換酵素阻害剤含有組成物の製造方法
EP0839459A1 (en) Composition containing readily absorbable calcium and process for producing the same
US4831015A (en) High potency biomass-free avoparcin and a method for its preparation
KR100227609B1 (ko) 어성초와 해조류를 주성분으로 한 건강식품 제조방법
DK142672B (da) Fremgangsmåde til fremstilling af et dyrefodersupplement indeholdende et antibiotikum AV290-alkylsulfatkompleks.
RU2038095C1 (ru) Способ получения глюкозамина гидрохлорида, обладающего противоартрозной активностью
KR100520007B1 (ko) 혈압 강하 기능을 가지는 키토산 함유 소금의 제조방법
AU712904B2 (en) Improved process for preparing potassium clavulanate
KR20010085034A (ko) 불가사리를 이용한 칼슘보충제의 제조방법
JP2006056793A (ja) ポリフェノール含有生成物の製造方法、ポリフェノール含有生成物、α−アミラーゼ阻害剤、抗酸化剤および食用組成物
JP2000239164A (ja) グリコシダーゼ阻害剤
TW460285B (en) A process for preparing calcium containing composition with high oral bioavailability
US2763681A (en) Chlortetracycline, purification and alkaline earth salts
US2918410A (en) Concentration of vitamin b and products obtained

Legal Events

Date Code Title Description
PUP Patent expired