DK165597B - Fremgangsmaade til at fremme udskillelse af amylolytiske enzymer fra bakterier - Google Patents

Fremgangsmaade til at fremme udskillelse af amylolytiske enzymer fra bakterier Download PDF

Info

Publication number
DK165597B
DK165597B DK600187A DK600187A DK165597B DK 165597 B DK165597 B DK 165597B DK 600187 A DK600187 A DK 600187A DK 600187 A DK600187 A DK 600187A DK 165597 B DK165597 B DK 165597B
Authority
DK
Denmark
Prior art keywords
dsm
clostridium
flow rate
starch
enzymes
Prior art date
Application number
DK600187A
Other languages
English (en)
Other versions
DK165597C (da
DK600187A (da
DK600187D0 (da
Inventor
Garabed Antranikian
Gerhard Gottschalk
Original Assignee
Kali Chemie Ag
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Kali Chemie Ag filed Critical Kali Chemie Ag
Publication of DK600187D0 publication Critical patent/DK600187D0/da
Publication of DK600187A publication Critical patent/DK600187A/da
Publication of DK165597B publication Critical patent/DK165597B/da
Application granted granted Critical
Publication of DK165597C publication Critical patent/DK165597C/da

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y302/00—Hydrolases acting on glycosyl compounds, i.e. glycosylases (3.2)
    • C12Y302/01—Glycosidases, i.e. enzymes hydrolysing O- and S-glycosyl compounds (3.2.1)
    • C12Y302/01003—Glucan 1,4-alpha-glucosidase (3.2.1.3), i.e. glucoamylase
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/14—Hydrolases (3)
    • C12N9/24—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2)
    • C12N9/2402—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2) hydrolysing O- and S- glycosyl compounds (3.2.1)
    • C12N9/2405—Glucanases
    • C12N9/2408—Glucanases acting on alpha -1,4-glucosidic bonds
    • C12N9/2411—Amylases
    • C12N9/2414—Alpha-amylase (3.2.1.1.)
    • C12N9/2417—Alpha-amylase (3.2.1.1.) from microbiological source
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/14—Hydrolases (3)
    • C12N9/24—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2)
    • C12N9/2402—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2) hydrolysing O- and S- glycosyl compounds (3.2.1)
    • C12N9/2405—Glucanases
    • C12N9/2408—Glucanases acting on alpha -1,4-glucosidic bonds
    • C12N9/2411—Amylases
    • C12N9/2428—Glucan 1,4-alpha-glucosidase (3.2.1.3), i.e. glucoamylase
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/14—Hydrolases (3)
    • C12N9/24—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2)
    • C12N9/2402—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2) hydrolysing O- and S- glycosyl compounds (3.2.1)
    • C12N9/2405—Glucanases
    • C12N9/2451—Glucanases acting on alpha-1,6-glucosidic bonds
    • C12N9/2457—Pullulanase (3.2.1.41)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y302/00—Hydrolases acting on glycosyl compounds, i.e. glycosylases (3.2)
    • C12Y302/01—Glycosidases, i.e. enzymes hydrolysing O- and S-glycosyl compounds (3.2.1)
    • C12Y302/01001—Alpha-amylase (3.2.1.1)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y302/00—Hydrolases acting on glycosyl compounds, i.e. glycosylases (3.2)
    • C12Y302/01—Glycosidases, i.e. enzymes hydrolysing O- and S-glycosyl compounds (3.2.1)
    • C12Y302/01041—Pullulanase (3.2.1.41)

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Description

i
DK 165597 B
Opfindelsen angår en fremgangsmåde til at fremme udskillelse af amylolytiske enzymer (amylaser og pullulanaser) fra termofile, de nævnte enzymer dannende anaerobe bakterier.
5
Dannelsen af amylolytiske, dvs stivelsesnedbrydende enzymer er kendt. Således dyrkes, ifølge WO-A-86.01 831, Clostridium thermohydrosulfuricum ATCC 33 223 portionsvis på et dyrkningsmedium med et indhold på 0,5 % opløselig sti-10 velse i batchkultur, hvorved der ganske vist dannes amylase, pullulanase og glucoamylase, men disse enzymer udskilles ikke i dyrkningsmediet, se også Appl. Envir. Microbiol., 49 (1985) 1168-1173. Ifølge WO-A-86.01 832 dyrkes Clostridium termosulfurogenes ATCC 33 743 = DSM 2 229 15 portionsvis i et dyrkningsmedium med 0,5 % opløselig stivelse, hvorved der dannes amylase, pullulanase og glucoamylase som amylolytiske enzymer, men kun det førstnævnte enzym forekommer i dyrkningsmediet.
20 Det tilsigtes med den foreliggende opfindelse at tilvejebringe en fremgangsmåde, ved hvilken amylolytiske enzymer ved dyrkning af termofile, de nævnte enzymer dannende anaerobe bakterier i høj grad udskilles i dyrkningsmediet.
En fremgangsmåde af denne art har den fordel, at cellerne 25 ikke skal sønderdeles, og at enzymerne ikke skal skilles fra cellesønderdelingsrester og forstyrrende komponenter fra dyrkningsmediet.
Opfindelsen angår således en fremgangsmåde til at fremme 30 udskillelse af amylolytiske enzymer fra termofile, de nævnte enzymer dannende anaerobe bakterier, i et dyrkningsmedium indeholdende carbonkilder, nitrogenkilder, mineralsalte og evt vitaminer, hvilken fremgangsmåde er ejendommelig ved det i krav l's kendetegnende del angiv-35 ne.
DK 165597 B
2
Fagmanden er fortrolig med isolering og dyrkning af termofile anaerobe bakterier, der danner amylolytiske enzymer. Brugbare stammer findes i slægten Clostridium, f.eks. arten Cl. thermosulfurogenes, såsom ATCC 33 743 =
5 DSM 2 229, arten Cl. thermohydrosulfuricum, såsom ATCC
33 223, DSM 567, DSM 2 247 og DSM 2 355, arten Cl. Ther-mosaccharolyticum, såsom DSM 571 og DSM 572, og arten Cl. spec. DSM 3 896; i slægten Thermoanaerobacter, f.eks. arten Th. ethanolicus, såsom DSM 2 246, i slægten Thermo-10 bacteroides, f.eks. arten Th. acetoethylicus, såsom DSM
2 359, og i slægten Thermoanaerobicum, f.eks. arten Th. brockii, såsom 1 457.
Mikroorganismen Costridium spec. DSM 3896 udviser følgen-15 de karakteristika: Vækst: - den danner terminale sporer 20
Cellemorfologi: - celler fra eksponentialfasen på et vækstmedium med 0,5% stivelse er aktivt mobile og forbliver gram-negative 25 - cellerne foreligger i form af små stave, og ganske enkelte i korte kæder bestående af 2-3 celler eller i filamentøse kæder 30 - sporulering sker i den senstationære fase med galactose eller lactose som energi- og carbonkilde - sporulerende celler har en størrelse på 4-9 mikrometer x 0,3-0,4 mikrometer, de vegetative celler en størrelse 35 på 1,5-5 mikrometer x 0,5 mikrometer
DK 165597 B
3 - finstrukturen af cellevæggen udviser et hexagonalt møn-- sjter
Nedbrydning af kulhydrater: 5 væksten på forskellige kulhydrater blev undersøgt ved 60 °C i 20 timer. Så snart den optiske tæthed nåede maksimalværdien, blev pH-værdien målt. En pH-værdi på 5,9- 5,2 blev anset som svagt sur, og en pH-værdi under 5,2 10 som stærkt sur. I følgende tabel er angivet resultaterne for enkelte specielle kulhydrater.
TABEL
15 Vækst af Clostridium spec. DSM 3896 på forskellige kulhydrater
Undersøgte kulhydrater 20 Amygdalin a
Arabinose a
Esculin a
Galactose a
Lactose a 25 Mannitol w
Melizitose Melibiose a
Pyruvat +, -
Raffinose a 30 Rhamnose +
Ribose a
Pectin + ,-
Xylan a a: stærk sur; w: svagt sur; -: ingen vækst; +, -: svag vækst; + god vækst men ingen syre.
35
DK 165597 B
4
Mikroorganismen Clostridium spec. DSM 3896 behøver hverken- leverekstrakt eller trypton for at vokse.
Andre biokemiske egenskaber: 5 - Clostridium spec. DSM 3896 er katalase-negativ og producerer hverken indol, acetylmethylcarbinol eller ammoniak ud fra arginin 10 - ingen vækst i nærværelse af Tween 80.
Clostridium spec. DSM 3896 adskiller sig især fra beslægtede mikroorganismer ved, at gærekstrakt og/eller trypton ikke må forefindes i vækstmediet.
15
Mikroorganismen er deponeret i German Collection of Microorganisms and Cell Cultures (DSM) hvorfra den er offentlig tilgængelig.
20 Udtrykket "højere saccharid" i den foreliggende sammenhæng står for andre saccharider end monosaccharider. Ved højere saccharider menes f.eks. polysaccharid, såsom stivelse, dextrin, dextran eller pullulan, og oligosacchari-der, såsom trisaccharid, f.eks. maltotriose, eller disac-25 charider, f.eks. maltose, og blandinger deraf.
Fagmanden kan selv vælge egnede koncentrationer af det højere saccharid, en egnet pH-værdi og en egnet gennemstrømningshastighed (fortyndingsgrad). Fremgangsmåden 30 ifølge opfindelsen udføres ved en pH-værdi på 4-8 og med en gennemstrømningshastighed på 0,01 til 0,4 time-1.
Fremgangsmåden udføres ved en koncentration af det højere saccharid på 0,1 til 3 %, fortrinsvis 0,2 til 1,5 % og 35 især 0,5 til 1,2 % (vægt/volumen).
DK 165597B
5
Ved valget af en egnet temperatur vil fagmanden rette sig efter, at temperaturminimum kan give en for langsom cellevækst, og at temperaturmaximum kan føre til proteindenaturering og celledrab.
5 I det følgende forklares opfindelsen ved hjælp af tegningen, som viser følgende:
Fig. 1-3: Indvirkningen af stivelseskoncentrationer på «-10 amylase- og pullulanasedannelse og udskillelse i kontinuerlig kultur. Eksperimenterne blev udført med Clostridium spec. DSM 3 896 ved en pH-værdi på 5,9 og en temperatur på -1 60 C. Gennemstrømningshastigheden androg 0,075 time 15 De anvendte symboler har følgende betydning: Δ ekstracellulær enzymkoncentration (enhed/liter) A cellebunden enzymkoncentration (E/liter) o intracellulær enzymkoncentration (E/liter) 20 · samlet enzymkoncentration (E/liter) • optisk tæthed ved 580 nm □—o reststivelse (%) d—□ reducerende sukker (%) Q acetat (mM) 25 ethanol (mM) + lactat (mM)
Fig. 4-6: Indflydelsen af pH-værdien på α-amylase-, pul-lulanase- og α-glucosidasedannelse og udskillelse i kon-30 tinuerlig kultur. Eksperimenterne blev udført med Clostridium spec. DSM 3 896 i nærværelse af 1 % stivelse ved 60 °C. Gennemstrømningshastigheden androg 0,075 time- . Symbolerne var som angivet for fig. 1-3.
35 Fig. 7-9: Gennemstrømningshastighedens indflydelse på e-amylase-, pullulanase- og o-glucosidasedannelse og udskillelse i kontinuerlig kultur. Eksperimenterne blev ud- ført med Clostridium spec. DSM 3 896 i nærværelse af 1% stivelse ved en pH-værdi på 5,9 og en temperatur på 60 °C. Symbolerne er som angivet for fig. 1-3.
6
DK 165597 B
5 Fig. 10-11: Stivelseskoncentrationens påvirkning af glu-coamylase- og pullulanasedannelse og udskillelse i kontinuerlig kultur. Eksperimenterne blev udført med Clostridium thermohydrosulfuricum DSM 567 ved en pH-værdi på 6,5 og en temperatur på 60 °C. Gennemstrømningshastigheden 10 androg 0,05 time-1. Symbolerne er som angivet for fig. 1- 3.
Fig. 12-13: Indvirkningen af pH-værdien på glucoamylase- og pullulanasedannelse og udskillelse i kontinuerlig kul-15 tur. Eksperimenterne blev udført med Clostridium thermohydrosulfuricum DSM 567 i nærværelse af 0,5 % stivelse ved 60 °C. Gennemstrømningshastigheden androg 0,05 time \
Symbolerne er som angivet for fig. 1-3.
20 Fig. 14-15: Gennemstrømningshastighedens indflydelse på glucoamylase- og pullulanasedannelse og udskillelse i kontinuerlig kultur. Eksperimenterne blev udført med Clostridium thermohydrosulfuricum DSM 567 i nærværelse af 0,5 % stivelse ved en pH-værdi på 6,5 og en temperatur på 25 60 °C. Symbolerne er som angivet for fig. 1-3.
Eksempel 1 (fig. 1-9) 30 Den kontinuerlige fremgangsmåde blev udført med Clostridium spec. DSM 3 896 (EM 1) og med et defineret medium, som havde følgende sammensætning (% vægt/volumen): 0,68 KH2P04, 0,1(NH4)2S04, 0,016 MgCl2-6H20, 0,0012 CoC12.6H20 og 0,05 cystein.HCl. Per liter medium blev der endvidere 35 tilsat 1 ml af en vitaminopløsning og en sporstofopløsning. pH androg 6-,5. Det definerede medium blev suppleret med de i tabel 1 angivne saccharider.
DK 165597 B
7
Forsøgene blev udført i 2 liters eller 5 liters fermentorer. med et dyrkningsmedium på 1-2 liter ved 60 °C. Kulturerne blev holdt anaerobe med en kontinuerlig nitrogenstrøm. Nitrogenet blev steriliseret, idet man lod det 5 strømme gennem et sterilt bomuldsfilter. Kulturerne blev omrørt med 150 omdr/min. pH-værdien blev målt med en glaselektrode og holdt ved den fastsatte værdi, idet man automatisk tilsatte 2 N KOH. Efter opnåelse af den stabile fase (ved mindst 6 volumenskift) blev der med 24 ti-10 mers mellemrum udtaget 10 ml prøver, og aktiviteten af det amylolytiske enzym samt dets lokalisering blev undersøgt. Endvidere blev fermenteringsprodukterne, substratkoncentrationen, pH-værdien og OD ved 580 nm målt.
15 Saccharidkoncentrationens indflydelse, pH-værdiens indflydelse og gennemstrømningshastighedens indflydelse på udskillelsen af det amylolytiske enzym i dyrkningsmediet fremgår af fig. 1-9 i tilfælde af stivelse som substrat.
20 Forskellige sacchariders indflydelse på udskillelsen af amylolytiske enzymer fremgår af tabel 1.
Eksempel 2 (fig. 10-15) 25
Eksempel 1 blev gentaget med Clostridium thermohydrosul-furicum DSM 567 med stivelse som substrat. Mediet indeholder følgende bestanddele (% vægt/volumen): 0,25 tryp-ton, 0,1 gærekstrakt, 0,33 KH^PO^, 0,016 MgC^, 0,0012 30 CoC^.eH^O, 0,05 cystein.HCl. Per liter medium blev der endvidere tilsat 1 ml af en vitaminopløsning og en sporstofopløsning.
Saccharidkoncentrationens indflydelse, pH-værdiens ind-35 flydelse og gennemstrømningshastighedens indflydelse på udskillelsen af amylolytiske enzymer (glucoamylase og pullulanase) i dyrkningsmediet fremgår af fig. 10-15.
DK 165597 B
8
Eksempel 3
Eksempel 2 blev gentaget med følgende mikroorganismer og med stivelse som substrat: 5
Clostridium thermosulfurogenes DSM 2 229 Clostridium thermohydrosulfuricum DSM 2 247 Clostridium thermohydrosulfuricum DSM 2 355 Clostridium thermosaccharolyticum DSM 571 10 Clostridium thermosaccharolyticum DSM 572 Thermoanaerobacter ethanolicum DSM 2 246 Thermobacteroides acetoethylicus DSM 2 359 Thermoanaerobium brockii DSM 1 457 15 Ved forsøgene med de nævnte stammer blev det bekræftet, at udskillelsen af amylolytiske enzymer kan fremmes ved begrænsning af det højere saccharid som carbonkilde ved de i eksempel 1 angivne værdier for pH og gennemstrømningshastigheden .
20 25 30 35
9 DK 165597 B
8 o, co fl) co g cd Ξ S in in oo N rji vo
S H H 00 CO CO O' H
S 3 CN H CN H
μ ^ H
p P 03 H
a - · * øs 3 o -P -H cu
Η Η P
0 >
ι-l t-ι CD
frt- J-) m CO
£ ,¾ P to cn in in O- in o iH 3 Η h o in o cn in h Ό Η >i ri
m O ”N S
n £ 5 < d)
H
'"j (D -—^ „ t! cq dp o co o in co in -* (Owt^in in in co o-
Vi f*4 a ε λ p 3 s. —j ni
1 m 3 p CO O H CN Ν' O
C η ·η in i-ι co σ) co in
S5 Cd Η H O CO H cO CO H
O 3 N.
.. p fe ω cn HH
0 u ® 3 Η h «—s fl) h cfpinoo co co cs m C h w m cn in ^ in 5 03
<2 ϋ Φ P
Έ id co 03 E P (fl p 6 p hhno n< in o co n m >, h m in oo oo H o
fl H £ ^ 00 CO CN CO CO H
0 < ω •<d
A
0) fl) co “cp C ISO in o o; in
03 H 0) (0 coin CO O CN H
Ό 3 P H OO H CN H CJl CN
>1 CO H - 3 „ „
H C >1-1 η <N H CN CO H
JJj f8 *H fl) H
•g p p p 3 fl di ji *rl (¾
Ή φ <0H
jq \ co p η ω o) qJEp^S cn o in in o o ΌΡΟ h in "tf O oc co ^
rlCQE-i >1 Ν’ N· O CN N- H
P jQ 6 , ,
(0 3 < H HH
ja co o o u (d a) i <-» Μ Ό fl
c o C H
0) 3 Jtf O O
O) P H > ^
H co (0 P "N , CN
hS pSdi hcnhcohhh
0) CO P IB
X CO JQ C > 0) 3 03 U S CQ O c#> o ω — .-Η fe Q + ·* p CD 0) 0) P _ H (0 CO CO CO P fl Φ 0
Cj HHHCOiHCOCQ
_1 p Q) 0) 0) .* P O O
η Ώ -H P P P ^ ^ 3
(0 3 P P P « 0) 0 H
eh ω cococfltJiQSO

Claims (5)

1. Fremgangsmåde til at fremme udskillelse af amylolytis-5 ke enzymer fra termofile, de nævnte enzymer dannende anaerobe bakterier i et dyrkningsmedium indeholdende car-bonkilder, nitrogenkilder, mineralsalte og eventuelt vitaminer, kendetegnet ved, at man udfører fremgangsmåden kontinuerligt ved en pH-værdi på 4-8 og med en 10 gennemstrømningshastighed på 0,01-0,4 time”*, og at man som carbonkilde anvender et højere saccharid i en koncentration på 0,1-3% (vægt/volumen).
2. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet 15 ved, at man som højere saccharid anvender et polysaccha- rid, såsom stivelse, dextrin, dextran eller pullulan, eller et oligosaccharid, såsom et trisaccharid, f.eks. mal-totriose, eller et disaccharid, f.eks. maltose, eller blandinger deraf. 20
3. Fremgangsmåde ifølge krav 1 eller 2, kendetegnet ved, at man udfører fremgangsmåden ved en koncentration af højere saccharid på 0,2 til 1,5 og især 0,5 til 1,2 % (vægt/volumen). 25
4. Fremgangsmåde ifølge et vilkårligt af de foregående krav, kendetegnet ved, at man udfører fremgangsmåden ved en pH-værdi på 5,0 til 7,5 og især 5,5 til 7,0. 30
5. Fremgangsmåde ifølge et vilkårligt af de foregående krav, kendetegnet ved, at man udfører fremgangsmåden ved en gennemstrømningshastighed på 0,02 til 0,3, fortrinsvis 0,02 til 0,2 og særligt foretrukkent 35 0,03 til 0,15 time”*.
DK600187A 1986-11-17 1987-11-16 Fremgangsmaade til at fremme udskillelse af amylolytiske enzymer fra bakterier DK165597C (da)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE19863639267 DE3639267A1 (de) 1986-11-17 1986-11-17 Verfahren zur foerderung der exkretion von amylolytischen enzymen aus bakterien sowie nach dem verfahren erhaltene enzyme
DE3639267 1986-11-17

Publications (4)

Publication Number Publication Date
DK600187D0 DK600187D0 (da) 1987-11-16
DK600187A DK600187A (da) 1988-08-21
DK165597B true DK165597B (da) 1992-12-21
DK165597C DK165597C (da) 1993-05-03

Family

ID=6314147

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DK600187A DK165597C (da) 1986-11-17 1987-11-16 Fremgangsmaade til at fremme udskillelse af amylolytiske enzymer fra bakterier
DK80892A DK80892A (da) 1986-11-17 1992-06-18 Pullulanase og alfa-amylase

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DK80892A DK80892A (da) 1986-11-17 1992-06-18 Pullulanase og alfa-amylase

Country Status (4)

Country Link
EP (1) EP0268193A3 (da)
JP (1) JPS63137676A (da)
DE (1) DE3639267A1 (da)
DK (2) DK165597C (da)

Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE3702626A1 (de) * 1987-01-29 1989-01-05 Antranikian Gerabed Thermostabile amylasen und pullulanasen aus 2 anaeroben mikroorganismen
DE3712051A1 (de) * 1987-04-09 1988-10-27 Antranikian Garabed Thermostabile amylasen und pullulanasen aus 2 anaeroben mikroorganismen
DE3909096A1 (de) * 1989-03-20 1990-09-27 Garabed Antranikian Alpha-amylase

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE1517752C3 (de) * 1966-02-05 1974-10-24 Farbwerke Hoechst Ag, Vormals Meister Lucius & Bruening, 6000 Frankfurt Verfahren zur Herstellung von Pullulanase
IT1033034B (it) * 1968-11-13 1979-07-10 Cpc International Inc Metodo per preparare enzima di pullulanasi
US3963575A (en) * 1974-02-25 1976-06-15 A. E. Staley Manufacturing Company Producing pullulanase with organisms having a superior capacity to elaborate pullulanase
US4578352A (en) * 1983-07-13 1986-03-25 Cpc International Inc. Novel thermostable, aciduric alpha-amylase and method for its production
US4628031A (en) * 1984-09-18 1986-12-09 Michigan Biotechnology Institute Thermostable starch converting enzymes
EP0184019B1 (en) * 1984-11-09 1991-03-06 Hitachi, Ltd. Thermostable alpha-amylase-producing, thermophilic anaerobic bacteria, thermostable alpha-amylase and process for producing the same
US4613570A (en) * 1985-02-08 1986-09-23 Cpc International Inc. Novel thermostable, aciduric alpha-amylase and method for its production
US4628028A (en) * 1985-05-23 1986-12-09 Cpc International Inc. Novel thermostable pullulanase enzyme and method for its production

Also Published As

Publication number Publication date
DK165597C (da) 1993-05-03
DK80892D0 (da) 1992-06-18
DK80892A (da) 1992-06-18
DK600187A (da) 1988-08-21
DE3639267A1 (de) 1988-09-22
EP0268193A2 (de) 1988-05-25
DK600187D0 (da) 1987-11-16
EP0268193A3 (de) 1988-08-24
JPS63137676A (ja) 1988-06-09

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Kozianowski et al. Purification and characterization of thermostable pectate-lyases from a newly isolated thermophilic bacterium, Thermoanaerobacter italicus sp. nov.
Madi et al. Thermostable amylolytic enzymes from a new Clostridium isolate
EP0464095A1 (en) NEW -g (a) -AMYLASE HYPERTHERMOSTABLE.
CA1142464A (en) Anaerobic thermophilic culture system
EP0327099A2 (en) Cyclomaltodextrin glucanotransferase, process for its preparation and novel microorganism useful for the process
Ramesh et al. Solid state fermentation for production of higher titres of thermostable alpha-amylase with two peaks for pH optima by Bacillus licheniformis M27
KR890001827B1 (ko) α-아밀라제의제법
EP0195802B1 (en) Thermostable g(b)-amylase -
US4970158A (en) Beta amylase enzyme product, preparation and use thereof
JPH0330672A (ja) 新規耐熱性および耐酸性プルラナーゼ酵素およびその製造方法
DK165597B (da) Fremgangsmaade til at fremme udskillelse af amylolytiske enzymer fra bakterier
US4929557A (en) Thermostable amylases and pullulanases from two anaerobic microorganisms
EP0418835B1 (en) Novel alkaline pullulanase y having alpha-amylase activity, microorganism producing the same, and process for producing the same
Klingeberg et al. Production of novel pullulanases at high concentrations by two newly isolated thermophilic clostridia
CA1081633A (en) Heat and acid-stable alpha-amylase enzymes and processes for producing the same
JPH05236959A (ja) プルラナーゼ、その製造法及び該酵素を用いる澱粉の 糖化法
US4925795A (en) Method of using G-4 amylase to produce high maltotetraose and high maltose content starch hydrolysates
JP2866460B2 (ja) 多糖類の糖化方法
Elkhalil et al. Biochemical characterization of thermophilic amylase enzyme isolated from Bacillus strains
US6355467B1 (en) Saccharification enzymes from hyperthermophilic bacteria and processes for their production
WO1995023850A1 (en) Fervidobacterium amylase and pullulanase
JP3729910B2 (ja) アルカリα−アミラーゼ、これを生産する微生物及び当該アルカリα−アミラーゼの製造法
EP0242075A1 (en) Debranching enzyme
JPS6331194B2 (da)
CN104388357A (zh) 一株蜡状芽孢杆菌及其应用

Legal Events

Date Code Title Description
PBP Patent lapsed