DK159660B

DK159660B - Fremgangsmaade til fremstilling af salte af anionbytterharpiks

Info

Publication number: DK159660B
Application number: DK548279A
Authority: DK
Inventors: Valerio Borzatta; Manlio Christofori; Angelo Brazzi
Original assignee: Alfa Farmaceutici Spa
Priority date: 1978-12-21
Filing date: 1979-12-20
Publication date: 1990-11-12
Also published as: ATE502T1; GR72734B; JPS55115403A; IT1106718B; US4340585A; ES487019A1; NO794225L; JPS6327362B2; IT7803631A0; DE2961714D1; DK548279A; DK159660C; EP0012804A1; EP0012804B2; EP0012804B1; YU313079A

Description

i

DK 159660 B

Den foreliggende opfindelse angår en fremgangsmåde til fremstilling af hidtil ukendte salte mellem anionbytterharpikser og 2-[4-(p-chlorbenzoyl)phenoxy]-2-methylpropionsyre, hvilke forbindelser har værdifuld lægemiddel virkning, især til formindskelse af cholesterol- og 5 triglyceridindholdet i blod.

Der hersker den opfattelse, at opståel sen af mange sygdomme i hjer-te/kredsløb-systemet hænger direkte sammen med højt triglycen'd-og cholesterol indhold i blodet. Der er derfor blevet foreslået talrige lægemidler, som skulle være i stand til at formindske forhøjet cholesterol -10 og triglyceridindhold i blodet under tilbagebringelse af dette til normale værdier.

Blandt disse forbindelser kendes og er kommercielt tilgængelige produkter, hvis struktur baseres på [phenoxy]-[methyl]-propionsyren. I-sær er 2-[p-chlorphenoxy]-2-[methyl]-propionsyreethylesteren (clofibrat) 15 og 2-[4'-(p-chlorbenzoyl)-phenoxy]-2-[methyl]-propionsy-reisopropylesteren (procetophen) vidt udbredt.

I den terapeutiske praksis anvendes også stærke anionbytterharpikser (såsom copolymerisater af styren og ca. 2 vægtprocent divinyl benzen, der som aktive grupper indeholder kvaternære ammoniumgrupper 20 [colestyramin] og colestipol), der ved tilberedelse i form af vandige suspensioner indirekte begunstiger formindskelsen af blodcholesterolindholdet gennem en mekanisme, der omfatter immobilisering af de i fordøjelsessystemets tarmkanal tilstedeværende galdesyrer under dannelse af uopløselige og irrevesible komplekser, der til sidst udskilles med tar-25 mens indhold. I de britiske patentskrifter nr. 929 391 og 1 286 949 er sådanne harpikser og deres terapeutiske anvendelse beskrevet.

Fra tysk offentliggørelsesskrift nr. 2 151 510 kendes også mekaniske blandinger af ikke-toxiske stærke anionbytterharpikser med forbindelser af ovennævnte type [2-(p-chlorphenoxy)-2-(methyl)-pro-30 pionsyreethylester]. Sådanne blandinger har for det meste en højere chlolesterolsænkende virkning end egenvirkningen af de to bestanddele.

I DE-0S nr. 2 427 924 beskrives salte af ikke-tværbundne, nitrogenhol dige, lineære polymerer forbundet via alkylengrupper med 2-(p-chlorphenoxy)-2-methylpropionsyre, hvilke polymerer er nyttige til fik-35 sering af galdesyrer i det gastro-intestinale system og derfor virksomme som anticholesterol lægemidler. Disse salte afviger fra saltene, som fremstilles ifølge den foreliggende opfindelse, både med hensyn til syretype og med hensyn til harpikstyper. De i DE-OS nr. 2 427 924 beskrev- 2

DK 159660 B

ne polymerer er faktisk lavmolekylvægt polymerer med en molekylvægt liggende mellem 1500 og 28000, og endvidere deltager nitrogenatomerne i polymerisationsprocessen, således at de udgør en del af polymerkæden. I modsætning hertil har polymererne, som anvendes ifølge opfindelsen, en 5 meget høj molekylvægt, indtil 1.000.000, en tværbundet struktur og kva-ternære ammoniumgrupper bundet til polymerkæden.

Den foreliggende opfindelse tilvejebringer overlegne farmakologiske, især cholesterol-og triglyceridindholdet i blod sænkende, hidtil u-kendte forbindelser af anionbytterharpikser af den ovennævnte art.

10 Det er således overraskende påvist, at ikke-toxiske anionbytterharpikser, der ved hjælp af 2-[4-(p-chlorbenzoyl)phenoxy]-2-methylpropionsyre omdannes til salte, har særlig god virkning med hensyn til formindskelse af de i blodet foreliggende for høje mængder cholesterol og lipider (fedtstoffer og fedtlignende stoffer) under drastisk for-15 mindskelse af de samme til normale værdier.

Mere specielt tilvejebringer den foreliggende opfindelse en fremgangsmåde til fremstilling af salte mellem harpikser valgt blandt a) i forhold til fordøjelsesenzymerne inerte harpikser med et 20 forgrenet styren-eller acrylpolymerskel et med en molekyl vægt over 1000 og ioniserbare aminogrupper, eller b) ved hjælp af frie eller substituerede aminogrupper modificerede harpikser med et forgrenet cel!uloseskel et, eller c) ved hjælp af frie eller substituerede aminogrupper modifi- 25 cerede forgrenede harpikser med et polysaccharidskelet, og 2-[4-(p-chlorbenzoyl)phenoxy]-2-methylpropionsyre.

Den terapeutiske virkning af de omhandlede salte er overraskende meget højere end de blandinger, som kendes fra tysk offentliggørelsesskrift nr. 2 151 510.

30 Inden for opfindelsens rammer falder tilvejebringelsen af såvel de salte af anionbytterharpikser, hvori den højeste værdi af selve anion-bytterharpiksens udbytningskapacitet er overført i saltet, som de salte af anionbytterharpikser, hvori kun en del af ionbytterkapaciteten er omdannet til saltet. Det er fastslået, at salte af anionbytterharpikser, 35 hvori kun 2% eller endog mindre såsom 0,7% af anionbytterharpiksens ion-bytterkapacitet foreligger som salt giver overlegne resultater. Hensigtsmæssigt foreligger derfor 0,7 til 100%, især 2,3 til 100% af anion-bytterharpiksernes ionkapacitet som salt i de omhandlede salte.

3

DK 159660 B

Polymerskelettet af den under alternativ a) ovenfor nævnte gruppe af anionbytterharpikser kan på kendt måde fremstilles ved polymerisation af styren-henholdsvis acrylmonomerer i nærværelse af forskellige mængder forgreningsmidler alt efter den ønskede forgreningsgrad (fra 1 til 75 5 vægtprocent forgreningsmiddel).

Blandt de ioniserbare aminogrupper skal forstås aminogrupper, der ved omsætning med syrer er i stand til at danne substituerede ammoniumsalte og ved omsætning med kvaterniseringsmidler kvaternære ammoniumsalte, hvorved også selve ammoniumsaltformen og den kvaternære ammonium-10 saltform skal være omfattet.

Derfor kan de til fremstillingen anvendelige polymere foreligge på den basiske form (som primære, sekundære eller tertiære aminer), på ammoniumhydroxidformen eller i form af kvaternære ammoniumsalte på grund af en omsætning med syrer. De kvaternære ammoniumgrupper har den almene 15 formel, -

R

20 R-N+ X"m (IV)

R I

L Jn 25 hvori R der kan være ens eller forskellige, betegner hydrogenatomer eller al kyl eller hydroxyalkyl grupper med 1 til 5, især 1 eller 2, carbonatomer, hvorpå methyl-, ethyl- og 2-hydroxyethylgrupper er eksempler, og 30 X betegner en polymergruppe indeholdende en hydroxygruppe eller en anion af en fysiologisk anvendelig syre, såsom en chloridion, en sulfation, en phosphation (mono-, di- eller tri basisk), en bicarbonation, en carbonation, en formiation, en acetation, en maleination, en ascorbination, en fumara-35 tion, en anion af en aminosyre, eksempelvis af asparaginsyre, eller en saccharinion, m betegner valensen og n betegner samme tal som valensen m.

40 Harpikser til fremstilling af de omhandlede salte er kommercielt tilgængelige på den anioniske form. Eksempler herpå er: Allasion, Amber- 4

DK 159660 B

1 i te, Chempro, De-Acidite, Diaion, Dowex, Duolite, Imac, Ionac, Kastel,

Lewatit, Liquonex, Mykion, Permutit, Wofatit, Zeo-karb og Zero!it. Det bemærkes, at disse og andre i den foreliggende beskrivelse forekommende handelsnavne er indregistrerede varemærker.

5 Fortrinsvis er anionbytterharpiksen med et styrenpolymerskelet, hvoraf de omhandlede salte kan afledes, en med di vinyl benzen forgrenet polystyrenharpiks med aminogrupper på den kvaternære ammoniumsaltform (en harpiks med handelsnavnet Dowex 1). Sådanne anionbytterharpikser er tilgængelige med forskellige forgreningsgrader. I særlig grad foretræk-10 kes som anionbytterharpiks med styrenpolymerskelet en med ca. 2 vægtprocent di vinyl benzen forgrenet polystyrenharpiks med aminogrupper (Dowex 1 X 2) på den kvaternære ammoniumchloridsaltform.

Indføringen af de reaktionsdygtige frie eller substituerede aminogrupper i celluloseskelettet ved den under ovennævnte alternativ b) 15 nævnte gruppe af anionbytterharpikser kan ske på kendt måde.

Fortrinsvis er den under alternativ c) ovenfor nævnte anionbytterharpiks med et polysaccharidskelet, hvoraf de omhandlede salte kan afledes, en sådan med et dextranskelet [poly-(a-l,6-glykan)-skelet]. I særlig grad foretrækkes som anionbytterharpiks med et dextranskelet en så-20 dan, som er etherificeret med diethylaminoethylgrupper eller 2- hydroxypropyldiethylaminoethylgrupper (Sephadex DEAE respektive Sephadex QAE).

Anionbytterharpikserne med et dextranskelet kan opnås ud fra rørsukker (saccharose) ved en mi krobi ologi sk fremgangsmåde og påfølgende 25 forgrening ved behandling med epichlorhydrin (handelsnavne Sephadex og Secholex).

De omhandlede salte afledes altså som allerede nævnt af anionbytterharpikser, som er modificeret med frie eller substituerede aminogrupper.

30 Et eller flere af de omhandlede salte kan anvendes i lægemidler som virksomt stof eller virksomme stoffer, eventuelt sammen med et eller flere farmaceutiske konfektioneringsmidler.

De ud fra saltene fremstillede lægemidler foreligger fortrinsvis som lægemiddelpræparater til peroral indtagelse. Den daglige virksomme 35 mindstedosis af de omhandlede salte er for mennesker ca. 10 g. Det er dog i betragtning af deres lave toxicitet muligt at dosere også højere daglige doser. Den foretrukne dosis udgør 12 til 30 g.

Lægemidlerne kan tilberedes i form af sædvanlige læge- 5

DK 159660 B

middel præparater såsom sirupper og suspensioner, eventuelt med et indhold af hjælpestoffer såsom excipi enter respektive bærere, konserveringsmidler, glittemidler, stabilisatorer, forgreningsmidler, emulgeringsmidler, salte til ændring af det osmotiske tryk, puffere, farve- 5 stoffer, aromastoffer og/eller sødestoffer.

De omhandlede salte kan fremstilles på følgende måde.

I) Aktivering af harpiksen.

10 Anionbytterharpiksen vaskes i rækkefølge med vandig 0,1 n saltsyre, destilleret vand og 0,1 n natriumhydroxidopløsning. Udvaskningen foretages ved suspension af harpiksen i vaskevæsken, dekantering af harpiksen og fjernelse af den ovenstående væske. Udvaskningen gentages 3 gange i den nævnte rækkefølge. Harpiksen vaskes yderligere med 0,1 n saltsyre og 15 derefter med destilleret vand til opnåelse af neutral reaktion.

Den udvaskede harpiks opbevares i fugtig tilstand indtil tidspunktet for dens anvendelse.

Aktiveringen kan også gennemføres med andre syrer end saltsyre.

20 II) Omdannelse af harpiks til saltet.

En chromatograferingskolonne med en diameter på 1 cm fyldes til en højde på 2 cm med en, som under det foregående afsnit I) beskrevet, udvasket anionbytterharpiks.

25 Af harpiksvolumenet og selve harpiksens specifikke udbytningskapacitet kan den maksimale udbytningskapacitet udregnes.

Den syre, der med harpiksen skal omdannes til et salt, opløses i den ækvivalente mængde n natriumhydroxidopløsning, og opløsningen ældes i kolonnen. Der elueres med destilleret vand, indtil anionerne er for- 30 svundet.

Den således til et salt omdannede anionbytterharpiks kan enten anvendes i den våde form, hvori den er opnået ved saltdannelsesreaktionen, eller den kan fortyndes til opnåelse af en suspension eller tørres og opbevares i tørret tilstand.

35 Graden af omdannelse til saltformen kan bestemmes på følgende måde: III) Bestemmelse af graden af saltdannelse for anionbytterharpiksens basiske grupper.

6

DK 159660 B

En suspension af en, som under foregående afsnit I) beskrevet, aktiveret anionbytterharpiks i vand tilsættes en chromatograferingskolonne og behandles med en opløsning af den syre, hvormed harpiksen skal omdan-5 nes til et salt, i den ækvivalente mængde af en natriumhydroxidopløsning.

Derefter elueres med vand, og hele eluatet forenes. Den i eluatet foreliggende anion titreres, og af forholdet mellem den således fundne værdi og det i harpiksen oprindeligt foreliggende anionindhold kan den 10 procentuelle saltdannelse beregnes.

Undersøgelsen af de omhandlede saltes farmakologiske virkning kan foregå på følgende måde: A) Bestemmelse af evnen til formindskelse af triglycerid- 15 indholdet i serum hos rotter med for højt triglycerid- indhold fremkaldt ved hjælp af frugtsukker (fructose) (Hypertriglyceridæmi)

Normalt fodrede Wistar-rotter af hankøn med vægte på 250 ± 20 g op-20 deltes i grupper på hver 6 dyr. De i propylenglykol opløste eller i vand suspenderede stoffer administreredes peroralt ved hjælp af en mavesonde i en dosis på 0,05 millimol syre/kg legemsvægt i 5 cm opløsningsmiddel eller suspenderingsmiddel/kg legemsvægt.

Dyrene behandledes i 3 dage med den forbindelse, der skulle under-25 søges. På førstedagen var de uden drikkevand, mens de i de to efterfølgende dage havde en 20% frugtsukkeropløsning til rådighed til drikning.

Dyrene aflivedes under etheranæstesi, og deres blod blev udtaget ved hjælp af intrakardial punktion. I serummet måltes triglyceriderne ved enzymatisk dosering ifølge M. Eggstein, F.H. Kreutz og F.H. Schmidt (M.

30 Eggstein og F.H. Kreutz, Klin. Wschr. 44 [1966], 262, F.H. Schmidt og K.Von Dahl, Z. Klin. Chem.6 [1968], 156).

B) Bestemmelse af ændringen af cholesterol indholdet i rotters blod og lever.

Normalt fodrede Wistar-rotter af hankøn med vægte på 280 ± 20 g opdeltes i grupper på hver 6 dyr. De forbindelser, som skulle undersøges, administreredes peroralt i opløsning i propylenglykol eller i suspension 35 7

DK i 59660 B

i vand ved hjælp af en mavesonde i en dosis på 0,6 millimolsyre/kg le- q gemsvægt i 5 cm opløsningsmiddel eller suspensionsmiddel/kg legemsvægt.

Dyrene aflivedes til forudbestemte tidspunkter under etheranæstesi, og deres blod blev udtaget ved hjælp af intrakardial punktion. I serum-5 met bestemtes cholesterol indholdet. Samtidig bestemtes også lever-cholesterolet. Doseringen til bestemmelse af cholesterol et gennemførtes ifølge D. Watson (Clin.Chim. Acta 5 [1960], 637).

C) Bestemmelse af ændringen af totallipid, totalcholesterol 10 og triglycerider hos rotter fodret med en hypercholeste roli sk diæt ifølge Greenberg med modifikation ifølge Tensho og medarbejdere.

Wistar-rotter af hankøn med vægte fra 90 til 100 g fodredes i 7 da-15 ge med den hypercholesteroliske diæt ifølge Tensho og medarbejdere (Acutely induced hypercholesterolemic in the rat - Yakugaku Zasshi 1972, 92, 879). I løbet af de sidste 3 dage behandledes de peroralt to gange dagligt med 650 mg/kg af de omhandlede forbindelser eller kontrolmateri-aler.

20 Efter 17 timers fasten bestemtes totallipid-, total cholesterol- og triglyceridspejlet i blodet ved hjælp af fremgangsmåden ifølge D. Watson, Clin.Chim.Acta 5 [1960], 637, M. Eggstein, Klin. Wsrchr. 44 [1966], 267 og N. Zoellner og K. Kirsch Z. gss. exp. Med. 135 [1962], 545.

Ved hjælp af den i afsnit A) ovenfor beskrevne fremgangsmåde be-25 stemtes evnen hos et omhandlet salt samt den som kontrol produkt anvendte tilsvarende anionbytterharpiks og det ligeledes som kontrol produkt anvendte natriumsalt af 2-[4'-(p-chlorbenzoyl)-phenoxy]-2-[methyl]-propionsyre og den ligeledes som sammenligningsprodukt anvendte mekaniske blanding af de to sidstnævnte, stadig med de samme mængder af disse 30 to stoffer., hvori de var indeholdt i det omhandlede salt, til at formindske triglyceridindholdet hos rotter med et ved hjælp af frugtsukker tilvejebragt for højt triglyceridindhold (hypertriglyceridæmi). De procentuelle forandringer i blodets triglyceridindhold i forhold til de ik-ke-behandlede blindforsøgsdyr, som kun var behandlet med frugtsukker, 35 fremgår af efterfølgende tabel I.

DK 159660 B

Di i

® I

OO I

4- 9 S- I

Ό <*- I

i— Ό I

O C

.£ -i- I

T3 i— i £ -O i

•r— I

Ό i— I

£ +4 I

S -o ! s? ^ ^ >5 I— i CJi 00 £ r— O i I·". «-·

Di -£ i i ' 1

•i- S- I

5- O i

4-> I

i 4- ·.- i

(0 I

4-> I

Di © i

C T3 I

O I

5- I— I

"O -Q > c hsf -r- i i i

i I

! ϊ . »r*

V) I

•p- I 1 00 1 _ Έ O i O) o* ^ \ gi g σι i σο σ> & o - : £ : s § ^ .i tu Q 1 OO 0O w oo -§ ! I— * i i £ i «3 © i _NC 00 I 00 i— i Di © i £ Ό 1 1 - £ Τ’ 1 £ ·>— , 5»

i 4->o»- S- X

i >5 O. © o I £ I -O O CD 4-9 £ i ©O. £ Ό «3 ©

i NI 3 ε O © © > -C

I £ £ S- -i— Di £-*<-«. Οι cu Di o -—' r— JD oj i

i η n 04- i— oo®. S- “03 X

i I— £ 4-9 >5-1-04- Di Q- *—I T

I >)·!-— O > -Γ- £ >)

I £ ε CO NI -£ O £ X O

i -r- 03 00 £ +9 Ί- O æ N

i > Ό © « i— 5- 3 C

I -r- Ό -·- -O © © £0.0 ©

i Ό © £ £ £ 00 © =3 O -O

I ε O O >i '—- N£>— £ I 4-9 I— 1—00 £ Di o I £ OO .£ _£ £ ©Οε r—

I © O (J O 00 -O £ £ -C

i o -Γ- ε i ·>— OO — <- υ i o o. d a. a. >> E £- * 4-9 I £ £ -i- w O CM £ «3 4-> Q-©

-X i a « £ I £ T —, T V C

3 i 4-> .£ O - O. r— > TJ © 1 >9 o i σι £ ε i ·- ^- © v. £ o I ftj O) £ »—1 r—1 +J T5 £ ^ ^ ζ £ I > £ Π5 I i— „T ‘Τ' °

Q_ I >, CM >> 4-> S? M £ T

I OJ 4-9 £ .£© CM -X O i—i CMQ.i—1 I 00 ftj Ό 4-> 4-> r"r— "H ,, P ΐί , -D >, c © © +j T3Q-J=^ ^5:-¾ i © r- £ ε E ffi ©£03 <00.3 i εο© —> ε ε « ε ή ,‘12 I Ο. +9—- 1 ε-·3Ρ 4J| ΙΟ I £ 03 CM CM £ ©£·!-£ Η— Τ =: I CD +9 > X ι 0) +9 © £ Ο- © >> Οι CD .X i—i i—ι £ £ O i W = r—

i 4- £ >j 4-> —- > >j ε o ε 4-9 O

i * © ·« x x © cm w 4-9 ε £ 3 g I £ Q. © O 4-9 £ 00 03 4-9 "J- E 4->

I 4-9 Di 3 £ · £ X £ £ *—1 C

i .— £ £ O © O 00 ©i— £ O 4_>iO

i 03 O © O J= 03 -X > O ft) -X o3 CM -X

ι 0O Ί- a *—* Q.O.© O O- £ 1—1 Z i 1—1

DK 159660 B

cn i

'Sk I

v> i +-> S- i a> o i Ό ‘J- i

i— T3 I

O C t

-SC -I- I

-a i— i C JQ <

i— I

o I— I

i— ·Γ- I

S- 4-> I

a) i U "O f-> >,i—i m r— O I ' cn -c

-Γ- S- I

S- O I

4-> <4- I

·«- i (ϋ i 4-> i cn 0) i

C TJ I

•Γ- O I

P" · "O -O i c

Mrf I

t i i i i i i i i i v> i

•p I

00 I

o i o 73 : < +J CD I O»

te ·ι- i E

V) r— 1

+J Dl I SO

S_ ni i «-η

O O i SO

4- 1

l-H I

r— * CD >

XI I

ni · I— i i i

I 4- I

I T3 01 T3 ni o I CD -X ·<- S- I £ -r- S- -P Q.

i CL O i— i I <u S- I— nJ i—i i +j ns -c c/s r— i c x α ε >> i > C ε 3 -= i sy cd cs ·>- +j

i se S- -I- S- CU

i c >, c +4 E

I 0) +-> O ns I—I

i > 01 £ C I

I O >, E OJ

i r— ns σ> · i 4- o ε i—i i ns a s- >>

I W σι X

i O) φ c - o

i £ -O S- LO C

i cu cu i—i ω i o c -*-> -c +j i o cu ns ds a M i SO S- > O —s 3 1 OS -X >— O i 4- i- —. >, o i o) o *m n o

s- i 4- a X N

Q. I D> i—< C

i ccs- as i—i i ·!- CD 0) X -Q Η-»

i -o NI a CD S- -X

I c c a s o 3 i ns CU 3 O I— Ό i r— a S- o .c o i .α i— os υ s- I >, O I Q.

i -X C C ε a CD r-

1 C/S ·γ- ·Γ- S- "—* S— O

I -Γ- > ε O I >, s-

I C ·ι- ni 4- - 01 +-S

i ns tj +4 c c

i -X Ό I— 1—' O O

i cd 5¾ cd ns i ·>- -X

I s: CM ε (Λ CM a I—I

DK 15966QB

ίο

Endvidere bestemtes evnen hos de i de foregående forsøg anvendte salte fremstillet ifølge opfindelsen og de i de foregående forsøg anvendte sammenligningsprodukter til påvirkning af cholesterol indholdet i blod og i lever hos rotter ved hjælp af den ovenfor under afsnit B) be-5 skrevne fremgangsmåde. De procentuelle ændringer af cholesterol indholdet til forskellige tidspunkter i forhold til ikke-behandlede blindforsøgsdyr fremgår af efterfølgende tabel II.

DK 159660 B

+-> CD

Φ E

Bi Φ ·Ρ 35 g? $5

</> 4^ Cn vD

S- 00 CO OJ ^ o φ o- i + 1 4- X3 c •r- S- r— 0)

-O E

-t-> S- -r- 0 I— φ φ -p 35 - •i- -σ -p oo S5 P O Cj_ O" fo i— φ evi i + 1

Ό JQ

O ·—I

-2Z 5- s- φ

O s- E

<4- Φ -r- -P +-> 35 S« q <+- oo cr> g O) O'. + + °

-P

CD

Ό S- I— Φ

0 E

C S- -I- * •O CD P 35 -o c +-> 1—1 35 35 •r- <4-00 i—i I'-'· ^ 1 - Φ Ίί- I 1 1 0 s- Φ PC S- co φ cu

Φ S- E

1 - Φ S- !- O > Φ -P 35 q ^ .c φ -p lo 35 co

U I- 4- li —c oo CNJ

Φ CsJ I 1 +

<4- HH

co J""f >-H C 0) , -i- S- E _ i—I i— S- φ -i— 3¾ Η Φ Ό -P P 40 S5 ^ JO C <4- *—* »O i-c ιβ (DS i + 1 I—

CO

«Λ CO _ _

O < SS

OJ \ \ .? ε W i r—O _

o» o 2 S

»e oo O o Q CO ovl c CO I S- <D Q. CD φ Φ i _Q Φ CO DJ S- O- ·—' E -X i— DJQ-E i— >, Ό i i—i V) Ό. S-3i- >> coÉ'Djcc- o S- o o q> •r- E rs CMC·!- <4- DJ 4- N J*: > -I- I -1- O -P C Φ ^ •r-COCTJi—IC-P C C i— φ p 1—'

"O -X O Φ >> -P i— φ -h; CCS -P >i O

•r- E E X >i <β N E CO S-ME

4- >ClE O -Q CO C CO "O OC-r- ES-cO^-hCC·'-' 2-™T r— Or- CD CO CM Φ O J3T3S- -C -i- r- O -C S- X -C ·ι- 35 i— Φ O 00.·£

O C {ti ·—< Q- 00 >) H i— lOE

5- Φ C I 00 00 C -C Q.S- Q. S- S- X N -I— -i- CO O "-^0-40 +J +J >, φ Φ i— > CM · > -X E 1 1 ~

-X OJ -P -P S -C '—· -1-T-3 1—'O

3 fy CO cO O O I— CM T3 Q. -I- Ό· ΙΌ > >> > Q N r T- ^ p c '—' >> O i— -X ·—' C Φ -P 35 CO O IJ= 1_ CM O Φ S- 00 CM -C E '—' CM 4-1 i—'

Q_ q. »<0 E -Q >, 4J 4C CE -p φ -P

T3 O. li S- CO CD CD Ό 0) Ό -X CpE^ <D+J OOC-P Φ S- C (O i—i 3 E CD S— *4— i— OP E >1 S- ~0 i ~0

C CD 4-J -C -i— ftj C -P fti ·—--O ·Ρ CM O

C Φ Q. i— CJ Q. E Φ Φ CO C OJ S- i— - I S- CD S- Q. CO I O CO -P >j S- X Ω. <βι—'Cl.

DJ 3 CO Q. S- S- r— Cr— Φ r-H i— >l r"

C+_ S- S- Ό '—’ Ο.ΦΦ > O -P O EXO

(O O DJ ·ι- i i "O fB Q. C0 X S- 30i-

«Ρ O S- h i—i -P C C >CD4J -r-C-P

+j COsti— Φ·|- C CD 3 C S- Φ c e-r-r— i—i>,+jct_ φ-σ o o -p -C o

COOE-Cij=*r-Q. > φ ofO Q Jxi (0Q.-X

CONCOOOJ+JCJO O C O. ' i— z: I '—1

DK 159660 B

s- +-> O) ω ε σ s- -i- is ® 5¾ oo +> m

S- 4- CO i~H

o ω *3- I

It'D c •I- S- i— ω .q ε i— cd ω +j a§

I- Ό +» CO

4- 3 O 4- *J- CO

i— O) CM 1 o Ja 'o 1-4 jC S- 5- Φ o s- ε „ .

tt- Cl) -I— SS

4-3 +4 I—t

•I- <4- I—I

O) Γ— I

4-3

CD

Ό S- i— O) o ε _E S- -Γ- •D (U 4-> 5¾

C 4-> CO

•1-4-00 CM

i— Q) *a- i o ί α) +-» c s-

OO CU CU

ω s- ε i— Q) S- -ΙΟ > ω 4-3 -C a) 4-> a5 CJ i— 4- *3" h- 4J 0) CM + cø 4— ·—i 00 <0 4- 3 5- οι ίο C ω 4- ·<- s- ε ί- Φ ·—

CM I—I Ό +4 4-3 SS

I_I — C 4- *+ I4< ΟΙ N i

O

ja e/j CO -i— Η— (Λ O O) "O Jx£ cn en -i- ε

DJ O

cø O

O 00 0) 4-3 •o ίο cu i

i CU O. +-> CM

EC i— I

Φ CD S- trS i—i > S- ω ε oo >> o dj o. s- ε x

S- Q. O 3 O

4- O 3 4- -i- C

Λ 4- S- 4-3 S- ω

DJ i— 4-3 -C

DJ C O tø <0 Q.

ε Φ C 00 C I

ID -Ω O O

4-3 i— Ό r— DJ N <D

-x. 4- >-> ω .c ε c s- 3 CØ Ε ε U CD >> Ό -i- ε o ja oo O DJ > oo 3 O S- c

i- E ·!- -X T- CM O O !—I

CL. -I- "O ··— c I— -r- 4-3

Ό O. O DJ J= □- -X

Εδ5ί-εο αο3 (0 CM CØ ε I S- Ό

i— _E CØ Q- CL O

ja ό c cm i s- CD 0) S- X I i—i O.

-X £ i- M ^ i— Ρ-

00 >j C O

•i- <D4-> S. X ·—< -E S- E +4 00 CD CD 14-3 4-3

cØE>j4->3CMCDE

.x > i— cø o ε o

ω ε O > Ω 4- o—> -X

s: Ε Q. -X —' CØ 11—1

DK 159660 B

13

Af de foregående tabeller I og II fremgår, at det omhandlede salt udmærker sig i forhold til den nævnte, anvendte anionbytterharpiks og natriumsaltet af 2-[4'-(p-chlorbenzoyl)phenoxy]-2-[methyl]-propionsyre, hvoraf det afledes, samt i forhold til disse mekaniske blanding ved en 5 tydelig overlegenhed såvel med hensyn til formindskelse af triglycerid-indholdet i blod ved frugtsukkerforsøget som med hensyn til formindskelse af cholesterol indholdet i blodet. Især ledsages formindskelsen af cholesterol indholdet i blodet ikke af nogen forhøjelse af værdien af cholesterol indholdet i leveren. Ved en betragtning af den foregående ta-10 bel II fremgår det nemlig, at cholesterolindholdet i leveren allerede er formindsket i syvende time og uden yderligere væsentlige ændringer forbliver på dette niveau.

Især skal fremhæves den synergistiske virkning af det omhandlede salt på formindskelsen af cholesterolindholdet i blod og lever i forhold 15 til summen af virkningen af anionbytterharpiksen og natriumsaltet af 2-[4'-(p-chlorbenzoyl)-phenoxy]-2-[methyl]-propionsyren, hvoraf det afle des.

En sammenlignelig virkning med hensyn til formindskelsen af indholdet af cholesterol og triglycerider i blodet opnåedes med saltet af en 20 med 2 vægtprocent divinylbenzen forgrenet polysterenharpiks med amino-grupper på den kvaternære ammoniumchloridsaltform med en specifik ionbytningskapacitet på 3,5 milliækvivalenter/g med 2-[4'-(p-chlorbenzoyl)-phenoxy]-2-[methyl]-propionsyre, hvor 1,99% af anionbytterharpiksens ionbytterkapacitet var mættet (omdannet til saltet) (salt fremstillet i-25 følge opfindelsen, eksempel 4), og saltet af en med diethylaminoethyl-grupper etherificeret, forgrenet dextranharpiks med en specifik ionbytningskapacitet på 3,5 ± 0,5 milliækvivalenter/g med 2-[4'-(p-chlorbenzoyl)phenoxy]-2-[methyl]-propionsyre, hvori 15% af anionbytterharpiksens ionbytningskapacitet var omdannet på saltform (salt ifølge 30 opfindelsen, eksempel 5).

Endvidere bestemtes ved hjælp af den under afsnit C) ovenfor beskrevne fremgangsmåde virkningen af et yderligere salt fremstillet ifølge opfindelsen samt en som kontrol produkt anvendte tilsvarende anionbytterharpiks og det ligeledes som kontrol produkt anvendte natriumsalt af 35 2-[4/-(p-chlorbenzoyl)-phenoxy]-2-[methyl]-propionsyre i de samme mængder som de, hvori det omhandlede salt var opnået. Resultaterne er sammenfattet i efterfølgende tabel III.

DK 159660 B

T3 •j— S.

Φ _ u T3 S ”σ> -c 5? g w ·“ to m 2 S- i. c m cm 'f O |_ t * 1 «S >- o c r— S Ι Ο i— S- •r- (1) +J +-> -o i «Λ r— "O i— O o Q vs i— OS t— JZ S5 Si ,¾

O +J O "O CM 2 iS

-C O -£= C Ti· C? C? S- i— CJ -r- ' 1 '

O

*t- •r— Φ to O) to

-X

ΙΛ Q- "O ·ι— Ό C ,— ιέ 'ίβ .c 55 55 55 S- JJ -O CO —1 o o C "** 1x1 ϋ_ I— -r- i 1 1 HH HH I—l ^ r— 05 05 _ 1 i 05 in -X 5* n -r S \ rf to w 05 05 \ l—O B B g? ~o o O _ 05 m o o ·¥ vo in m *05 X x x

Q CM CM CM

55 00 '

+J «i- O

qj ·πΐ m c c o. -—. -i— ·ΐ“ Ό o i— > Et S- S- >ϊ _C= I— e s- _

05 03 ε O T- S O C

S- O. S- N - +J CO Ό >— O

O O. O C Φ C Q3 -C -r- ((- 3 (μ Φ S- +5 · Q) ε o 'S-

s- +j .o >> Φ m n S bP

+J 05 1— S- 10 +J .X C 00 3 O ΙΟ O «3 O C +5 Φ Φ -X ·“ I— Q.

0) C 10 r— O Si -O -r- C -O i O ·— Ό -C -i- fc i— 0.0 U i—i οε·>-υα. c >i s- E ' «— s-co s-Q-os-o) orne >> o. o -— s_ o) to ·ι- £ m — jz +4 "O i— I Q- r- > C 1 +? 77 O) (1) Γ " i +5 CL) ·ι- Φ S- ·—. Φ +Τ h a ε o «d- i—i φ T3 T3S-WCM ^ ε -x X > ε —II— H C Sjpx ^ 3 10 3 CM >» *r- -i- 55 +J S- i-ι i i, Ή

TJ CM -X -i- .COM- CM to Q) i—i N N O

0 *r- C Ό H «* O. >1 +J x t; ,, >> J- s_ -00.00)030.0 Ό i— CO Q) -X Ij-XQ.

01 φ s- ε ε ε «« o o >53 λο>— ε «β ε ·— -χ φ ε o- ^ o -σ ^ = ° .3 «« *-» i «/) 05 Q O +-> O) S- SO CM CM 05 i— Φ Φ *«tf S- 0) Q) S- X I C Ol +J Ό Q. Q. «00.0

S- W ,-· r—· ··- «I- CO) ε r- M^O

<4->iC >j C -i- >05-5-0 g r- -X

ίβ+JS-XX+J a 0) 0) O S- =)>,>—

10 Φ Φ O >> 4-> CS-Q.14-+J -r- O

-P >, 4-> Ϊ C -O i— C 05 O. -P C S-ΝΦ i— i— «ο o φ c «ο Φ S- o i— o h c b· «β O > O -C O </5 > O S- π) -X Λ 3! >1

CO Q. .X w» Q. ·Ρ- w o H 05 10 1—' Z H M

DK 159660 B

“O

•r— S- S -o οίΐ έι σ> -c (Λ 1- "Ό S- s- c O I- ·!— 1

4-T3 C

•i— S r—

O

r- S- •r- a> +> +j -σ I «Λ Ό .— Φ O -o i— rc5 l— r- es.

O 5 o =§ £ J= O -C c m 5- η U .r 1

O

tt* •r* 0) <0 p— i <D -ή -r- (/) r-i O -r- Ό C n- i— +J i— O „ «ο ε te -c j^· co s- 4J ό Dr 4- > O o c <7 5- Du j- ·“ 1

O

tf- LD 1—1 r-i ^ σ> CD oo cp _Q O ε * 73 o =? s

D> X

Q CM

L i O O ζ7) rs 4- C i- •i— O >i

10 g LO O

es N Φ C*- -r- I cncS- as Q. T3 Ε O O) >> 5- O) 3 -O <Λ

D> <0 £ ·γ- '""s S- C

g .C C CM O O

I— </> O X I— o >> .x E 1-1 -c o.

O C -r- B Op lO -i- Q. (O X CL i- > s- οι s/ α (μ -r ιβ S- s ' 1 +J (TJ T3 JC M O s I—1 C C Q «S- i— 3 CT> S? O) S- '— '—' >) -rj C CM S- 0) CM -£Z i—i o -Γ- >» 4-5 ε -f-3 +j

c -σ-σ+J <o s- 4- φ -X

n. c<uw>>o<eE3

(O E ^ ‘f- ·—I TJ

i— i— +J +J I O

ja 0) o “ίβ I— I— cm S- μΐ α c ^ 4 1 cl S/ C </>(/)!-II- (/)>0)S-T3E>>O r- Μ Ό Φ -Γ- 3 X S- CCtUCLi-T-O-t-»

(WCCO-OS-CC .X φ 0J 3 i— +J(DO

QJ>S-5--C:tCl-C-iC

s o σ> oj o c o. i—i

DK 159660 B

16

Også af tabel III fremgår de omhandlede saltes overlegenhed i forhold til den anvendte anionbytterharpiks og natriumsaltet af 2-[4'-(p-chlorbenzoyl)-phenoxy]-2-[methyl]-propionsyre, hvoraf det afledes, samt disses mekaniske blanding.

5 I særlig grad skal igen fremhæves den synergistiske virkning af det omhandlede salt, frem for alt med hensyn til formindskelsen af tri-glyceridindholdet i forholdet til summen af virkningerne af anionbytter-harpiksen og 2-[4'-(p-chlorbenzoyl)-phenoxy]-2-[methyl]-propionsyren, hvoraf det afledes.

10 Fremgangsmåden ifølge opfindelsen belyses nærmere i de følgende eksempler.

Eksempel 1

Ved hjælp af den under afsnit I og II ovenfor beskrevne fremgangs-15 måde vaskedes 6 g af en med 2 vægtprocent di vinyl benzen forgrenet polystyrenharpiks med aminogrupper på den kvaternære ammoniumchloridsaltform (Dowex 1X2 [produkt fra firma Dow Chemical Co.]) med partikelstørrelser på 0,07 til 0,15 mm [100-200 mesh] og med en specifik ionbytningskapacitet på 3,5 mil liækvivalenter/g og omdannedes med 1 g (3,14 milliækviva-20 lenter) 2-[4,-(-chlorbenzoyl)-phenoxy]-2-[methyl]-propionsyre (den til procetophen svarende frie syre) opløst i 3,14 cm af en n natrium-hydroxidopiøsning til et salt. Syremængden var en sådan, at 15% af anionbytterharpiksens ionbytterkapacitet blev mættet (overført i saltet).

25

Eksempel 2

Analogt med den i eksempel 1 angivne fremgangsmåde opnåedes ud fra passende mængder af de samme reaktanter et salt, hvori 2,38% af anionbytterharpiksens ionbytterkapacitet var mættet (overført i saltet).

30

Eksempel 3

Ved hjælp af den i afsnit I og II ovenfor beskrevne fremgangsmåde omdannedes en finformal et [90% partikler under 0,074 mm {under 200 mesh}] med 2 vægtprocent divinyl benzen forgrenet polystyrenharpiks med 35 aminogrupper på den kvaternære ammoniumchloridsaltform (Dowex 1X2) med en specific ionbytningskapacitet på 3,5 milliækvivalenter/g med 2-[4'-(p-chlorbenzoyl)-phenoxy]-2-[methyl]propionsyre i et salt under anvendelse af sådanne mængder, at 1,99% af anionbytterharpiksens ionbytterka- 17

DK 15966CB

pacitet blev mættet (overført i saltet).

Eksempel 4

Ved hjælp af den i afsnit I og II ovenfor beskrevne fremgangsmåde 5 omdannedes 6 g af en med 2 vægtprocent di vi nyl benzen forgrenet polystyrenharpiks med aminogrupper på den kvaternære ammoniumchloridsaltform (Dowex 1X2) med partikelstørrelser fra 0,07 til 0,15 mm (100-200 mesh) og med en specifik ionbytningskapacitet på 3,5 milliækvivalenter/g med 0,5g 2-[4'-(p-chlorbenzoyl)-phenoxy]-2-[methyl]-propionsyre under mæt-10 ning (overførsel i saltet) af 7,48% af anionbytterharpiksens ionbytningskapacitet.

Eksempel 5 6 g af en med diethylaminoethylgrupper etherificeret, forgrenet 15 dextranharpiks (Sephadex DEAE A-25 [bogstav A betyder, at det drejer sig om en anionbytterharpiks, og tallet 25 angiver værdien af porøsiteten) i form af partikler med diametre på 40 til 120 μ og med en specifik ionbytningskapacitet på 3,5 ± 0,5 milliækvivalenter/g i tørret tilstand omdannedes med 1 g 2-[4'-(p-chlorbenzoyl)phenoxy]2-[methylJ-propionsyre 20 opløst i en n natriumhydroxidopløsning som i eksempel 1 til et salt. Der opnåedes herved et salt, hvori 15% af ionbytningskapaciteten var omdannet til saltet.

Claims

DK 159660 B Fremgangsmåde til fremstilling af salte mellem harpikser udvalgt blandt: 5 a) over for fordøjelsesenzymerne inerte harpikser med et forgrenet styren- eller acrylpolymerskelet med en molekylvægt over 1000 og ionerserbare aminogrupper, b) med frie eller substituerede aminogrupper modificerede harpikser med forgrenet celluloseskelet, 10 c) med frie eller substituerede aminogrupper modificerede forgrenede harpikser med et polysaccharidskelet, og 2-[4-(p-chlorbenzoyl)phenoxy]-2-methylpropionsyre, hvilke salte er i stand til at sænke højt cholesterol- og triglyceridindhold i blodet, og hvori saltdannelsesgraden varierer fra 0,7 til 100¾ af harpiksernes ion-15 bytningskapacitet, KENDETEGNET ved, at man aktiverer den udvalgte harpiks ved, at man vasker den tre gange med 0,1 N saltsyre, destilleret vand og 0,1 N natriumhydroxid, vasker harpiksen igen med 0,1 N saltsyre, i en chromatograferingskolonne bringer den således aktiverede harpiks i kontakt med en molær mængde af 2-[4-(p-chlorbenzoyl)phenoxy]-2-20 methyl propionsyre, i en ækvivalent mængde 1 N natriumhydroxid og eluerer med destilleret vand til forsvinding af anioner i eluaterne. 25 30 35