DK158740B - Analogifremgangsmaade til fremstilling af 1,3-propandioletheren af antibiotikum x-14868a - Google Patents

Description

DK 158740B

Den foreliggende opfindelse angår en analogifremgangsmåde til fremstilling af den hidtil ukendte 1,3-propandiolether af antibiotikumet X-14868A med den almene formel I

OMe Α/Μβ 5 OMe k0>'Me i

f0H HXH Me 1 Me Η Η Η Ο CH2CH2CH2OH

co2h hvor Me er methyl, eller farmaceutisk acceptable salte deraf med baser.

Forbindelsen X-14868A er en kendt forbindelse, der er beskrevet i US 10 patentskrift nr. 4.278.663, der blev offentliggjort 14. juli 1981, og som adskiller sig fra den ifølge opfindelsen fremstillede forbindelse ved i stedet for 3-hydroxypropoxygruppen at have en hydroxygruppe.

Her beskrives også den tilsvarende methylether af X-14868A, nemlig forbindelsen X-14868B. I dette patentskrift beskrives endvidere en 15 fremgangsmåde til fremstilling af X-14868A, nemlig en fermentation under anvendelse af Nocardia sp. X-14868, idet Nocardia sp. X-14868 er deponeret hos American Type Culture Collection, Rockville, Maryland under nummeret ATCC 31585 og er tilgængelig for offentligheden.

Forbindelsen med den almene formel I, nemlig den hidtil ukendte 1,3-20 propandiolether af antibiotikum X-14868A, fremstilles ifølge opfindelsen ved, at X-14868A med formlen QMe

DK 158740 B

2 fr“e OM* QH tV'"^ JL 2 Μβγχν/β

° Me S Me Η Η H 0H

co2h hvor Me er methyl, eller et salt deraf med en base, omsættes med 1,3-propandiol i nærværelse af en sur ionbytterharplks på H+-form såsom 5 en sulfonsyreharpiks på H+-form, fx "DOWEX"® 50W på H+-form. Reaktionen udføres under anvendelse af 1,3-propandiol som opløsningsmiddel eller i et inert opløsningsmiddel ved omkring omgivelsestemperatur, fx stuetemperatur.

Den ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen fremstillede ether udviser 10 aktivitet som anticoccidiostatisk middel.

Til vurdering af den anticoccidiostatiske virkning af 1,3-propandiol-etheren af antibiotikumet X-14868A gennemførtes et studie mod blandede Eimeria-arter i 2 uger gamle batterikyllinger. De i dette studie anvendte Eimeria-s tammer blev vundet fra kommercielt tilgængelige 15 kyllinger, der ikke var blevet anvendt i tidligere studier. Til sammenligningsformål anvendtes antibiotikaene Monensin, Lasolocid og antibiotikumet X-14868A. 2 uger gamle Hubbard Cross-kyllinger, der var kommercielt tilgængelige fra en udrugningsanstalt, og som blev holdt i elektrisk opvarmede batterier med netbund, blev anvendt i 20 alle studier. 10 kyllinger udvalgt efter vægt og køn (50% hunner og 50% hanner) blev anvendt i hver af tre identiske grupper. Kyllingerne blev behandlet med medikamenter 2 dage før infektionen og holdt under antibiotika indtil forsøgets afslutning, dvs. 6 dage efter infektionen. For hvert eksperiment anvendtes uinficerede, ubehandlede 25 kontroller (.UUC) og inficerede ubehandlede kontroller (IUC).

Som kyllingestartblanding anvendtes en basisration med en komplet fodersammensætning, som var fri for medikamenter. Medikamentholdigt

DK 158740 B

3 foder blev fremstillet ved tilsætning af den ønskede koncentration af lægemidlet til basisrationen. Hver lægemiddelkoncentration blev blandet omhyggeligt før anvendelse i fodermiddelblandingen for at opnå en ensartet blanding. I hvert tilfælde blev der fodret med det medika-5 mentholdige foder to dage før infektionen og med en samlet varighed af 8 på hinanden følgende dage.

Infektionen blev induceret oralt, og endvidere ved direkte inoku-lering med en suspension indeholdende E. acervullna/E. mivati -500.000, E. maxima - 100.000, E. tenella - 100.000 og E. brunetta -10 50.000 sporulerede oocyter, der ved grundig omrøring var suspenderet i destilleret vand i en mængde på 1 ml, i kroen på dyrene ved hjælp af en stump nål, der var forbundet med en kalibreret injektionssprøjte.

Efter afslutning af forsøget blev de overlevende kyllinger dræbt og 15 obduceret til undersøgelse af grove skader. Alle kyllinger, der var døde under eksperimenterne, blev også obduceret. Diagnosen blev baseret på skadens sted og morfologi. Resultaterne angives som gennemsnitlig infektionsgrad (ADI) efter følgende karaktersystem: 0 = normal, 1 = let, 2 — moderat, 3 = svær og 4 = død.

20 Endvidere blev vægtforøgelsen (%) noteret.

DK 158740 B

4 TABEL 1

Beskadigelsestal

Antibio- Kone. i Vægtfor-

5 tikum foder, ppm øgelse,% Øvre Midt Cekal ADI

UUC 0 100 0,0 0,0 0,0 0,0 IUC 0 50 2,7 2,4 2,8 2,6 10 __ 1,3-pro- 15 71 0,0 0,0 0,0 0,0 pandiol- 12,5 81 0,0 0,0 0,07 0,02 ether af 10 96 0,1 0,03 0,1 0,1 X-148S8A 7,5 91 0,7 0,3 0,5 0,5 15 5 82 1,0 0,9 1,1 1,0 2,5 59 2,3 2,1 2,2 2,2

Antibioti 10 86 0,1 0,07 0,2 0,1 kum 7,5 100 0,4 0,2 0,6 0,4 20 X-14868A 5 83 1,3 1,1 1,2 1,2

Lasalocid 100 99 0,5 0,5 0,9 0,6

Monensin 100 80 1,1 1,1 2,0 1,4 25 _;_ - ' · ' · ·_ TABEL 2

DK 158740 B

5

Mod laboratoriestammer af Eimeria (blandede arter)

Beskadigelsestal 5 Antibio- Kone. i Vægtfor-

tikum foder, ppm øgelse,% Øvre Midt Cekal· ADI

UUC 0 100 0,0 0,0 0,0 0,0 10 IUC 0 23 3,2 3,1 3,3 3,2 1.3- propan- 10 94 0,0 0,0 0,0 0,0 diolether af X-14868A, 15 Na-salt

Antibiotikum 10 87 0,0 0,0 0,3 0,1 X-14868A,

Na-salt 20 TABEL 3

Mod ionophor-resistente markstammer af Eimeria (blandede arter)

Beskadigelsestal

Antibio- Kone. i Vægtfor-

25 tikum foder, ppm øgelse,% Øvre Midt Cekal ADI

UUC 0 100 0,0 0,0 0,0 0,0 IUC 0 39 3,5 3,5 3,5 3,5 30 _ 1.3- propan- 10 74 0,4 0,3 0,5 0,4 diolether af X-14868A,

Na-salt 35 Antibiotikum 10 73 0,7 0,6 0,8 0,7 X-14868A,

Na-salt

DK 158740 B

6 TABEL 4

Mod markstammer af Eimeria tenella

Beskadigelsestal 5 Antibio- Kone. i Vægtfor-

tikum foder, ppm øgelse,% Øvre Midt Cekal ADI

UUC 0 100 - - 0,0 0,0 10 IUC 0 69 - - 3,1 3,1 1.3- propan- 10 101 - - 0,0 0,0 diolether af X-14868A, 15 Na-salt

Antibiotikum 10 94 - - 0,1 0,1 X-14868A,

Na-salt · 20 TABEL 5

Mod yderligere markstammer af Eimeria (blandede arter)

Beskadigelsestal

Antibio- Kone. i Vægtfor-

25 tikum foder, ppm øgelse,% Øvre Midt Cekal ADI

UUC 0 100 0,0 0,0 0,0 0,0 IUC 0 40 2,8 2,7 3,1 2,9 30 _ 1.3- propan- 10 93 0,07 0,07 0,3 0,1 diolether af X-14868A,

Na-salt 35 Antibiotikum 10 90 0,1 0,1 0,4 0,2 X-14868A,

Na-salt

Indgivelse af antibiotikaetheren (1,3-propandioletheren) af X-14868A 40 og salte deraf, herefter betegnet "antibiotika" eller "antibiotiske forbindelser", forebygger og behandler ketose og forbedrer endvidere

DK 158740B

7 fodervirkningen hos drøvtyggere eller svin. Den for ketose ansvarlige mekanisme er en formindsket produktion af propionatforbindelser. En anbefalet modvirkende behandling er indgivelse af propionsyre eller af foder, der fortrinsvis danner propionat. Det er klart, at stimu-5 lering af propionatproduktionen fra det sædvanlige foder reducerer forekomsten af ketose.

Det har endvidere vist sig, at 1,3-propandioletheren af X-14868A på grund af lægemiddelvirkning forhøjer effektiviteten af foderudnyttelsen hos drøvtyggere, når denne ether af X-14868A gives til dyrene 10 oralt. Den enkleste vej til at indgive antibiotikaene består i at blande den i dyrefoderet.

Antibiotikaene kan dog også indgives nyttigt på anden måde. De kan fx inkorpores i tabletter, drikke, boli eller kapsler og på den måde indgives til dyrene. Formuleringer af de antibiotiske forbindelser i 15 sådanne doseringsformer fremstilles ved metoder, der inden for veterinærfarmacien er i og for sig kendte.

Kapsler fremstilles på sædvanlig måde, ved at det ønskede antibiotikum på den ønskede form fyldes i gelatinekapsler. Hvis det ønskes, kan antibiotikaene fortyndes med et inert fast fortyndingsmiddel 20 såsom fx en sukkerart, stivelse eller ren krystallinsk cellulose for hensigtsmæssigt at forøge volumenet.

Tabletter fremstilles ved sædvanlige farmaceutiske metoder. En tablet indeholder i almindelighed, ud over den aktive bestanddel, et fyldstof, et sprængmiddel, en absorbent, et bindemiddel og et glittemid-25 del. Typiske fyldstoffer er fx mælkesukker, fint puddersukker, na-triumchlorid, stivelse og mannit. Stivelse er endvidere et godt sprængmiddel ligesom alginsyre. Overfladeaktive midler såsom natri-umlaurylsulfat og dioctylnatriumsulfosuccinat anvendes endvidere om nødvendigt. Sædvanligt anvendte absorbenter er fx stivelse og mæl-30 kesukker, medens magnesiumcarbonat finder anvendelse ved olieagtige substanser. Ofte anvendte bindemidler er gelatine, gummi arabicum, stivelse, dextrin og forskellige cellulosederivater. Almindeligt anvendte glittemidler er fx magnesiumstearåt, talkum, paraffinvoks, forskellige metalsæber og polyethylenglycol.

DK 158740B

8

Antibiotikaene kan ligeledes indgives i form af boli med retarderet virkning. Sådanne boli fremstilles som tabletter, idet der dog tilsættes et middel til retardering af opløsningen af antibiotikumet.

Der forudses boli til afgivelse over længere perioder. Den langsomme 5 opløsning bibringes gennem valg af en stærkt vanduopløselig form af antibiotikumet. Eksempelvis kan der tilsættes j emf ilspåner for at forøge vægtfylden af bolusen, således at denne forbliver i bunden af vommen.

Opløsningen af antibiotikaene forsinkes gennem anvendelse af en ma-10 trix af uopløseligt materiale, i hvilken den aktive bestanddel er indlejret. Eksempelvis kan der anvendes plantevoksarter, rensede mineralvoksarter og i vand uopløselige polymermaterialer.

Drikke af antibiotikaene fremstilles hensigtsmæssigt ved valg af en vandopløselig form af antibiotikaene. Hvis der ønskes en uopløselig 15 form, kan der fremstilles en suspension. Alternativt kan en drik tilberedes som en opløsning i et fysiologisk upåvirkende opløsningsmiddel såsom polyethylenglycol.

Suspensioner af uopløselige former af antibiotikaene kan fremstilles i ikke-opløsningsmidler såsom planteolier, fx jordnødde-, majs- eller 20 sesamolie, i en glycol, fx propylenglycol eller polyethylenglycol, eller i vand, alt efter den valgte form af antibiotikumet.

Egnede fysiologisk tolerable tilsætninger er nødvendige for at holde antibiotikaene i suspension. Tilsætningerne kan være fortykkelsesmidler, fx carboxymethylcellulose, polyvinylpyrrolidon, gelatine eller 25 alginater. Forskellige typer skumdannere tjener til at holde antibiotikumet i suspension. Eksempelvis er lecithin, alkylpheno1/polyethy-lenoxidaddukter, naphthalensulfonater, alkylbenzensulfonater og polyoxyethyiensorbitanestere anvendelige til' fremstilling af suspensioner i flydende ikke-opløsningsmidler. 1

Til fremstilling af suspensioner kan endvidere anvendes forskellige substanser, der påvirker hydrofiliciteten, massefylden og overflade-

DK 158740 B

9 spændingen. Som eksempler kan nævnes siliconeantiskummidler, glyco-ler, sorbit og sukker, der findes anvendelse som suspenderingsmidler.

Antibiotikaene kan tilbydes til opdrætteren som en suspension eller som en tør blanding med et tilsvarende hjælpemiddel til fortynding 5 før anvendelse.

Antibiotikaene kan ligeledes tilføres til drøvtyggernes drikkevand.

Herved tilsættes drikkevandet en vandopløselig eller i vand suspen-derbar form af antibiotikaene i tilsvarende mængde. Tilberedningen af antibiotikaene til blanding med drikkevandet følger de samme prin-10 cipper som for formulering af drikke.

Den mest hensigtsmæssige måde at behandle dyrene med antibiotikaene på baserer sig på indgivelse med dyrefoderet. Der kan anvendes dyre-fodere efter ønske, fx sædvanlige tørfodere, flydende fodere og tabletterede fodere.

- * ϊ »a 15 Metoderne til indarbej dning af lægemidlet i dyrefoderet er velkendte. Sædvanligvis fremstilles der en koncentreret forblanding til et medicineret foder. Således kan fx typiske lægemiddelholdige foderblandinger indeholde fra ca. 0,1 til ca. 25 g af lægemidlet pr. ton forblanding. Dette brede område er betinget af det ønskede brede koncentra-20 tionsområde for det færdige foder. Forblandinger kan foreligge såvel på flydende som på fast form.

Formuleringen af drøvtyggerfoder indeholdende den nøjagtige mængde antibiotika til en sædvanlig behandling er velkendt. Det er kun nødvendigt at beregne den andel af en forbindelse, der ønskes indgivet 25 hvert enkelt dyr og at tage hensyn til den foderandel pr. dag, som dyret æder, og koncentrationen af antibiotikaene i forblandingen og derefter beregne den nøjagtige koncentration af antibiotikaene eller af forblandingen i foderet.

Alle metoder til formulering, blanding og tablettering af foder, som 30 sædvanligvis anvendes til drøvtyggerfoder, er egnede til fremstilling af foder indeholdende de antibiotiske forbindelser.

DK 158740 B

10

Som omtalt ovenfor bevirker den orale indgivelse af antibiotikaene en fordelagtig ændring af udnyttelsen af propionat i forhold til acetat i vommen. Det kan derfor hævdes, at den samme lægemiddelbehandling også vil påvirke monogastriske dyr, der forgærer fiberrigt plantema-5 teriale i blindtarmen, gunstigt, eftersom det kan forventes, at der vil optræde en fordelagtig ændring i propionat/acetatforholdet efter oral indgivelse af antibiotikaene. Heste, svin og kaniner er eksem· pier på dyr, hos hvilke en del af deres foder forbliver i blindtarmen til fermentering.

10 Saltene af syreformen af den ifølge opfindelsen fremstillede ether fremstilles ved metoder, der er velkendte ved polyetherforbindelser, fx ved vaskning af de frie syrer i en opløsning med en egnet base eller et salt. Eksempler på sådanne farmaceutisk acceptable baser, som er brugbare til at danne salte, omfatter alkalimetalbaser såsom 15 natriumhydroxid, kaliumhydroxid, lithiumhydroxid og lignende; jord-alkalimetalbaser såsom calciumhydroxid, bariumhydroxid og lignende og ammoniumhydroxid. Alkalimetal- eller jordalkalimetalsalte, der er egnede til dannelse af egnede farmaceutisk acceptable salte, omfatter anioner såsom carbonater, hydrogencarbonater og sulfater.

20 Eksempler på organisker baser, med hvilke polyetherforbindelsen med formlen I danner farmaceutisk acceptable salte, er lavere alkylaminer og primære, sekundære og tertiære hydroxy-lavere alkylaminer såsom fx ethylamin, isopropylamin, diethylamin, methyl-n-butylamin, ethanola-min og diethanolamin.

25 En særlig foretrukken amin er N-methylglucamin. Salte af N-methyl-glucamin er af særlig værdi på grund af deres vandopløselighed, hvilket gør dem egnede til parenteral anvendelse.

Forbindelserne fremstillet ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen er på grund af deres lægemiddelvirkning typisk aktive til forøgelse af 30 effektiviteten af foderudnyttelsen, når de indgives til drøvtyggere oralt i doser på fra ca. 0,003 mg/kg/dag til ca. 0,75 mg/kg/dag. De mest tilfredsstillende resultater fås ved doser på fra ca. 0,03 mg/kg/dag til ca. 0,075 mg/kg/dag.

11

DK 1S8740B

De akutte toxiciteter (oral LD50) i kyllinger af 1,3-propandiolet-heren af antibiotikum X-14868A og af antibiotikum X-14868A selv blev undersøgt i to undersøgelser (test i og 2). Begge antibiotika var i form af deres natriumsalte.

5 EKSPERIMENTELT

I test 1 blev 1 dag gamle Hubbard x Hubbard slagtekyllinger opdrættet i 8 dage inden fordeling efter legemsvægt i 19 ensartede behandlings-grupper. Hver behandling indeholdt 10 fugle (5 hanner og 5 hunner), der oralt blev doseret med en enkelt gelatinekapsel af manchet-typen 10 indeholdende enten 1,3-propandioletheren af X-14868A eller X-14868A selv i doser på 0, 6, 9, 12, 15, 18, 21, 24, 27 og 30 mg/kg legemsvægt .

I test 2 blev 1 dag gamle Hubbard x Hubbard slagtekyllinger også opdrættet i 8 dage inden tilfældig fordeling efter legemsvægt i 11 15 ensartede behandlingsgrupper. Hver behandlingsgruppe indeholdt 3 replikater af 8 fugle (4 hanner og 4 hunner), der blev oralt doseret med en kapsel indeholdende enten 1,3-propandioletheren af X-14868A eller X-14868A selv i doser på 0, 6, 12, 18, 24 og 30 mg/kg legemsvægt .

20 Ved begge undersøgelser blev der under justerings- og testperioden fodret med en højenergiholdig slagtekylling-startfoderkomposition.

Fuglene blev huset i elektrisk opvarmede, termostatisk regulerede enheder med hævede netgulve. Rummet var luftkonditioneret, og der blev ved hjælp af automatiske timere tilført lys i 15 timer daglig.

25 Fuglene blev kontrolleret for dødelighed hver time under arbejdsdagen i de første to dage efter dosering og to gange om dagen derefter.

Endelig kropsvægt blev bestemt 2 uger efter dosering.

Den af Miller og Tantor, Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 57, s. 261 (1944) beskrevne metode blev anvendt til at beregne LD50·

30 RESULTATER

Resultaterae af test 1 og 2 er vist separat i tabellerne 6 og 7: TABEL 6

DK 158740 B

12

Akut oral toxicitet (LD5Q) for 1,3-propandioletheren af X-14868A og X-14868A selv i kyllinger (test 1)

Testforbindelse Initial Beregnet mg Døde- To ugers 5 som en enkelt vægt forbindelse lighed forøgelse oral dosis (mg) (g) pr. kg le gemsvægt

Kontrol 121,5 0 0/10 (221,1)* 10 1,3-propandiolether

af X-14868A

6 121,4 5,93 0/10 425,7 9 120,0 9,00 3/10 428,5 12 120,9 11,91 1/10 411,7 15 15 120,7 14,91 4/10 415,5 18 120,0 18,00 6/10 479,3 21 120,0 21,00 7/10 242,5 24 120,1 23,98 7/10 314,7 27 120,6 26,87 7/10 266,7 20 30 120,7 29,83 10/10

Beregnet LD50 (mg/kg legemsvægt = 16,5 ± 0,63)

X-14868A

6 119,6 6,02 1/10 386,4 9 120,0 9,00 3/10 392,4 25 12 120,4 11,96 3/10 384,1 15 120,5 14,94 1/10 362,9 18 120,3 17,96 6/10 .334,2 21 121,3 20,77 8/10 328,2 24 121,2 23,76 7/10 229,1 30 27 120,7 26,84 5/10 220,3 30 120,8 29,8 8/10 255,2

Beregnet LD50 (mg/kg legemsvægt = 14,2 ± 1,54)

DK 158740 B

13 * Trådnet over foderbakke anbragt i forkert indstilling, fuglene havde begrænset adgang til foder.

TABEL 7

Akut oral toxicitet (LD50) for 1,3-propandioletheren af X-14868A og X-5 14868A selv i kyllinger (test 2)

Testforbindelse Initial Beregnet mg Døde- To ugers som en enkelt vægt forbindelse lighed forøgelse oral dosis (mg) (g) pr. kg le gemsvægt 10 _

Kontrol 121,7 0 0/24 405,7

1,3-propandiolether af X-14868A

6 121,7 5,92 4/24 393,8 15 12 121,8 11,82 11/24 366,0 18 121,9 17,72 17/24 265,2 24 121,6 23,68 20/24 302,0 30 121,9 29,53 22/24 173,5

Beregnet LD50 (mg/kg legemsvægt = 14,2 ± 1,1)

20 X-14868A

6 121,8 5,91 1/24 372,1 12 121,7 11,83 15/24 322,4 18 121,6 17,76 22/24 251,0 24 121,5 23,70 24/24 25 30 121,7 29,58 24/24

Beregnet LD50 (mg/kg legemsvægt = 11,0 ± 0,5) I test 1 var den orale LD50 for 1,3-propandioletheren af antibiotikum X-14868A og for antibiotikum X-14868A selv henholdsvis 16,5 ± 0,63 mg og 14,2 ±1,54 mg/kg legemsvægt. På grund af den betydelige variabilitet mellem 30 doser blev der påbegyndt en bekræftelsesundersøgelse (test 2) med færre

dosisniveauer inden for det samme område men med et større antal observationer. Den orale LD50 for 1,3-propandioletheren af X-14868A og for X-14868A

DK 158740 B

14 selv i bekræftelsesundersøgelsen var henholdsvis 14,2 ± 1,1 mg og 11,0 ± 0,5 mg/kg legemsvægt (tabel 7).

Ved hver undersøgelse forekom 80% af dødeligheden i løbet af de første 24 timer. Toxiske symptomers indtræden var hurtig. Fødeindtagelse ophørte, 5 fuglene blev sløve og faldt derefter ubevægelige om på gulvet. Kort før døden blev der observeret ataxi i halsregionen.

I begge eksperimenter var vægtforøgelser hos overlevende fugle ved hver dosis af X-14868A mindre end forøgelserne ved ækvivalente doser af 1,3-propandioletheren.

10 KONKLUSIONER

Ved første afprøvning (test 1, tabel 6) var den orale LD5Q i 9 dage gamle kyllinger for 1,3-propandioletheren af X-14868A og for X-14868A selv henholdsvis 16,5 + 0,63 og 14,2 ± 1,54 mg/kg legemsvægt. Ved den anden afprøvning (test 2, tabel 7) var den orale LD50 14,2 ± 1,1 mg/kg for 1,3-propan-15 dioletheren og 11,0 ± 0,5 mg/kg legemsvægt for X-14868A selv. Forskelle i vægtforøgelse hos overlevende fugle antydede også højere toxicitet hos antibiotikum X-14868A end hos dens 1,3-propandiolether.

Fremgangsmåden ifølge opfindelsen illustreres nærmere ved følgende eksempel. EKSEMPEL

20 Fremstilling af l,3-propandiol(trimethylenglycol)etheren af antibiotikumet X-14868A som natriumsalt 5 g natriumsalt af antibiotikumet X-14868A opløses ved stuetemperatur under omrøring i 100 ml 1,3-propandiol (trimethylenglycol). Til denne opløsning sættes 20 g AG 502-X8 (200-400 mesh, 0,074-0,037 mm) harpiks på H+~form, 25 idet harpiksen på forhånd natten over var blevet opblødt i trimethylenglycol, filtreret og vasket med trimethylenglycol. Reaktionsblandingen omrøres i 3 timer ved stuetemperatur. Efter tilsætning af vand til reaktionsblandingen filtreres harpiksen fra, og filtratet ekstraheres to gange med diethy-lether. De forenede etherfaser vaskes med vand, natriumcarbonat og igen med

DK 158740 B

15 vand og tørres over natriumsulfat. Opløsningsmiddelfasen inddampes til en olie og chromatograferes på en med methylenchlorid præpareret silicagelsøjle (200 g), idet der elueres med 1 liter diethylether/hexan (7:3), 2 liter diethylether/hexan/acetone (7:3:1) og 1 liter ethylacetat/acetone (8:2) 5 efterfulgt af 1 liter ethylacetat/acetone (6:4). Fraktionerne, der indeholder reaktionsproduktet, forenes. Ved fjernelse af opløsningsmidlet i vakuum fås et hvidt skum.

Analyse:

Beregnet for C^0H85Na0^g.I/2H2O (1006,23): 10 C 59,68 H 8,62 Na 2,29 H20 0,90

Fundet: C 59,91 H 8,76 Na 2,08 H20 1,02.

= 24,3° i chloroform, c = 1%.

• * t

Claims (1)

1. Analogifremgangsmåde til fremstilling af 1,3-propandioletheren af antibiotikum X-14868A med formlen I OMe Λ* OMe h I I Me Me H Me Η Η Η Ο CH2CH2CH2OH co2h 5 hvor Me er methyl, eller farmaceutisk acceptable salte deraf med baser, kendetegnet ved, at en forbindelse med formlen OMe ty* Js. ymiMe Μ£γ%β„Λ UmrYe “lie” 0 Me H Me Η Η H OH co2h 10 hvor Me er methyl, eller et salt deraf med en base, omsættes med 1,3-pro-pandiol i nærværelse af en sur ionbytterharpiks på H+- form.